SE437025B - 1-(2-sulfaminoetyl)-tetrazol-5-tiol till anvendning for framstellning av cefalosporinforeningar med antibakteriell aktivitet - Google Patents

Description

8006414- 0 2 karboxylsyra, 78-D-mandelamido-7a-metoxi-3- [ l-(Z-sulfaminoetyßtetrazol-5- yltiometyl]-B-cefem-li-karboxylsyra och 7a-metoxi-7ß-(l-tetrazolylacetamido)- 3- [ I-(Z-sulfaminoetyßtetrazol-5-yltiometyl]-B-cefem-lß-karboxylsyra.

Föreningarna med formeln II framställs genom att man acylerar 7- 5 aminocefalosporansyra med ett pâ lämpligt sätt skyddat acyleringsmedel och därefter undantränger B-acetoxigruppen med sulfaminoetyltetrazoltiolen med formeln l eller ett salt därav följt av avlägnande av den eller de skyddande grupperna, när sådana finns. Karboxylsyragruppen i acyleringsmedlet aktiveras med någon standardmetod, såsom omvandling till blandad anhydrid, syraklorid, 10 syraimidazolid eller aktiverad ester. Dessutom kan ett reagens, såsom dicyklo- hexylkarbodiimid, användas förutsatt att karboxylsyragruppen på cefemkärnan är skyddad med en lätt borttagbar skyddsgrupp, såsom en benshydryl-, t.butyl-, trikloretyl-, bensyl-, bensyloximetyl-, p-metoxibensyl- eller p-nitrobensylester.

När A är NHZ, skyddas u-aminogruppen i acyleringsmedlet lämpligen före 15 acyleringen med en lätt borttagbar skyddsgrupp känd inom tekniken, såsom t- butoxikarbonyl, trikloretoxikarbonyl, bensyloxikarbonyl, metylacetoacetataddukten eller liknande grupper som vanligtvis används vid syntes av peptider. i Alternativt framställs föreningarna med formeln II genom acylering av en lämplig 7-amino-3-sulfaminoetyltetrazolyltiometylcefalosporinkärna med for- 20 meln lll: Nuzš' S N / :l- N 111 f- CH2S< || cooR" ï- N (cnzyz -Nnso3a där W har den ovan angivna definitionen, och Rlß med ett lämpligt acyleringsmedel följt av avlägsning av eventuella skydds- 25 grupper.

Skyddsgrupperna kan avlägsnas med välkända metoder inom tekniken, såsom med trifluorättiksyra, när t-butyl- eller t-butoxiskyddsgrupper används. är väte eller en skyddande estergrupp, Det resulterande saltet omvandlas till den amfojoniska produkten elleratill den fria syran med h'älp av ett jonbytarharts, såsom polystyrenamin-jonbytarharts 30 (Amberlite lR-l; eller också genom att man bildar en vattenlösning av saltet. 10 15 20 25 30 35 contain-io 3 De acyleringsmedel som används som utgângsmaterial är antingen kända eller kan framställas med kända metoder.

Utgângsmaterialen med formeln III (7-amino-B-sulfaminoetyltetrazolyl- tiometylcefalosporiner) framställs genom reaktion mellan 7-formamidocefalo- sporansyra, framställd genom reaktion av 7-aminocefalosporansyra med myrsyra och ättiksyraanhydrid, och sulfaminoetyltetrazoltiolen med formeln I följt av behandling med syra, såsom saltsyra, för att avlägsna formylgruppen.

Sulfaminoetyltetrazoltiolen med formeln I framställs genom reaktion mellan l-aminoetyl-5-(2,4-dinitrofenyltiofietrazol, framställd av Zß-dinitro- fluorbensen och 1-acetamidoetyltetrazol-5-tiol följt av sur hydrolys av acet- amidogruppen, och svaveltrioxid-trimetylamin-komplex med efterföljande klyv- ning av 2,4-dinitrofenyl-skyddsgruppen. l-Acetamidoetyltetrazol-S-tiol fram- ställs genom reaktion mellan ett acetamidoetylditiokarbamat, såsom metyl-2- acetamidoetylditiokarbamat, och en azid, såsom natriumazid. Acetamidoetyldi- tiokarbamaterna framställs genom behandling av N-(Z-aminoetyllacetamid med koldisulfid och en alkylhalogenid, såsom metyljodid, i närvaro av en bas, såsom trietylamin.

Vissa av föreningarna med formlerna I, II och IlI kan bilda salter med t.ex. alkalimetaller, såsom natrium eller kalium, jordalkalimetaller, såsom kalcium eller med ammoniumkatjonen. När A i formel Il är NHZ, kan föreningen existera som amfojon eller som antingen ett syra- eller bassalt. Dessa salter framställs genom standardförfaranden med användning av ett stort antal icke- toxiska farmaceutiskt godtagbara syror och baser kända inom tekniken. Salter av föreningen med formeln l betraktas som föremål för uppfinningen.

Man inser att det på grund av den asymmetriska oi-kolatomen i 7- acetamidogruppen med formeln I när RI är O x-cH-å, Å kommer att existera optiska isomerer. Racemiska eller uppdelade produkter erhålls beroende på om en racemisk eller uppdelad sidokedjesyra används som acyleringsmedel. De uppdelade sidokedjesyrorna erhålls enkelt av de racemiska föreningarna genom uppdelning enligt välkända metoder, inbegripande fraktione- rad kristallisation av ett salt bildat med en optiskt aktiv syra eller bas.

Föreningarna med formeln II har antibakteriell aktivitet mot både grampositiva och gramnegativa organismer. Minimihämningskoncentrationerna (MIC) varierar från 0,2 till >200 pg/ml vid tester in vitro. Testresultat för representativa föreningar anges i tabell l nedan. Skyddsvärden in vivo för mus (5550) anges i tabell 2. De föreningar som svarar mot föreningsnumren anges i 0006414-0 4 tabell 3.

Tabell 1 MIC (pg/ml) in vitro Föreningsnummer Bakterie 1 2 3 4 s. aureus HH 127 3,1, 3,1 1,6 3,1 1,6 S. aureus SK 23390 0,8, 0,8 0,4 3,1 1,6 S. villaluz SK 70390 50, 200 25 200 200 Strep. faecalis HH 34358 100, 50 12,5 50 100 E. C011 sK 12100 0,8, 0,8 3,1 0,8 0,: E. coli HH 33779 3,1, 1,6 12,5 0,8 1,6 Kleb. pneumo SK 4200 1,6, 0,8 3,1 0,8 0,8 Kieb. pfieumo s1<12o0 0,4, 0,2 0,8 0,0 0,2 Salmonella ATCC 12176 0,2, 1,6 12,5 0,4 0,4 Shigella HH 117 0,4, 0,2 - 0,4 0,8 Pseudo. aerug. HH 63 >200, >200 > 200 >200 i >200 Serratia, marc. ATCC 13880 100, 100 >200 200 '100 Proteus morgani 179 1,6, 3,1 >200 200 7200 Entero. aerog. ATCC 13048 50, 6,3 25 3,1 6,3 Entero. clocae HH 31254 1,6, 1,6 6,3 0,8 1,6 Tabell 2 ED50 (mg/kg) in vivo , E. coli SK 12140 Kleb. Pneumo SK 4200 Föreningsnumrnei s.c. p.o. s.c. p.o. 1 0,46 50 0,46 - 2 1,02 >50 - - 3 1,56 - - - 4 1,82 50 - - 10 l5 20 25 0006414-0 s ïêbeu z Föreningsnummer F öreningsnamn l 7-D-mandelamido-3- [ l-(2-sulfaminoetyDtetrazol-S- yltiometyl]-3-cefem-l+-karboxylsyra 2 7-(2-tienylacetamido)-3- [1-(2-sulfaminoetyl)-tetra- zol-S-yltiometyl ) -B-Cefem-Ii-karboxylsyra 3 7-(1-tetrazolylacetamido)-3- l l-(Z-sulfaminoetyh- tetrazol-5-yltiometyl ) -J-cefem-li-karboxyls yra 4 7-trifluormetyltioacetamido-3- ( l-(2-sulfaminoetyl)- tetrazol-i-yltiometyl ) -B-cefem-li-karboxylsyra Farmaceutiska kompositioner med antibakteriell aktivitet innefattar en farmaceutisk bärare som innehåller en aktiv men icke-toxisk mängd av en förening med formeln l. Administrering kan ske genom parenteral injektion, såsom subkutant, intramuskulärt eller intravenöst. injektion av på lämpligt sätt beredda sterila lösningar eller suspensioner innehållande en effektiv, icke-toxisk mängd av den nya cefalosporinföreningen är det föredragna administrerings- sättet.

Föreningarna med formeln II bereds och administreras på samma sätt som andra cefalosporiner. Doseringen innefattar administrering, lämpligen genom injektion, av en aktiv men icke-toxisk mängd av en förening med formeln l vald ur dosenhetsområdet från 100 till 1.000 mg med den totala dagsdosen varierande från #00 mg till 6 g. De exakta doseringarna beror på patientens ålder och vikt och den infektion som behandlas och kan bestämmas av fackmannen på basis av de här angivna värdena jämförde med de tillgängliga värden som uppnåtts med kända cefalosporiner.

De följande exemplen belyser uppfinningen men får inte uppfattas som begränsande för dess omfattning. Temperaturerna är i grader Celsius såvida inte annat anges. Éngmæl 1 7-D-Mandelamido-3- f I-(2-sulfaminoetyl)tetrazoi-fi-yltiometyl ) -B-cefem- ll-karboxylsvra Till en lösning av 20,4 g (0,2O mol) N-(Z-aminoetyßacetamid i 200 ml 9596 etanol sattes 27,9 ml (0,20 mol) trietylamin och 12,0 ml (0,2O mol) koldisulfid.

Den exoterma reaktionen nådde återflöde och kyldes sedan till omgivningstempe- ratur under l 1/2 h. Metyljodid (28,ll- g, 0,20 mol) tillsattes, vilket åter åstadkom en exoterm reaktion. Efter 1,75 h indunstades reaktionsblandningen till torrhet och den fasta återstoden löstes i 200 ml vatten. Vattenlösningen extraherades två 10 15 20 25 30 35 8006M44 6 gånger med 250 ml-portioner etylacetat. Extrakten slogs ihop, skakades med natriumtiosulfat, torkades (MgSOq) och indunstades till torr-het, vilket gav metyl- 2-acetamidoetylditiokarbamat.

Till en lösning av 38,4 g (0,198 mol) metyl-2-acetamidoetylditiokarbamat i 100 ml 95% etanol sattes en lösning av 13,5 g (0,208 mol) natriumazid i 100 ml vatten. Reaktionsblandningen âterloppskokades under 24 h, kyldes sedan och koncentrerades under minskat tryck till ca halva volymen. Lösningen kyldes till ISO, och 50 ml 6N svavelsyra tillsattes. Den sura lösningen filtrerades och koncentrerades till ca 100 ml och kyldes vid 5° för att initiera kristallisation av l-(Z-acetamidoetyl)tetrazol-5-tiol, som uppsamlades genom filtrering, smp. 139- l39,5°. Ytterligare mängder av produkten erhölls genom kontinuerlig extraktion av filtratet med etylacetat.

I En lösning av 9,3 g (0,050 mol) Zjl-dinitrofluorbensen i 50 ml aceton sattes till en lösning 9,35 g (0,050 mol) 1-(2-acetamidoetyDtetrazol-5-tiol och 6,85 ml (0,050 mol) trietylamin i 100 ml aceton och reaktionsblandningen rördes under 1 h. Det fasta materialet uppsamlades genom filtrering och omkristallise- rades ur acetonitril för att ge 1-(2-acetamidoetyl)-5-(2,l+-dinitrofenyltiofietrazol, smp. 197-199”.

En blandning av 6,5 g (0,02 mol) l-(2-acetamidoetyD-5-(Zß-dinitro- fenyltio)tetrazol, 100 ml 12N saltsyra och 100 ml 9596 etanol âterloppskokades under 4,5 h. Blandningen indunstades till torrhet, vilket gav en gummiliknande återstod, som kristalliserades efter tillsats av etanol och gav 1-(2-aminoetyl)-5- (2,l+-dinitrofenyltiohetrazolhydroklorid, smp. 217-2l9° (söndJ.

Till en blandning av 3,5 g (0,01 mol) l-(2-aminoetyl)-5-(2,læ-dinitrofenyl- tiofietrazol-hydroklorid i 30 ml torr dimetylformamid sattes 1,1: g (0,01 mol) svaveltrioxicl-trimetylamin-komplex följt av 1,1; ml (0,01 mol) trietylamin.

Blandningen omrördes under 1/2 h och filtrerades sedan. Filtratet indunstades i vakuum, aceton tillsattes till återstoden, fällningen avlägsnades genom filtrering och filtratet indunstades till torrhet. Metanol tillsattes till återstoden och den fasta substans som bildades vid rivning avlägsnades genom filtrering. Det metanoliska filtratet bringades till pH 11,3 genom tillsats av 5% natriummetoxid i metanol, omrördes under 1,25 h, filtrerades och späddes med 300 ml eter. Den erhållna fasta substansen avlägsnades genom filtrering och filtratet indunstades till torrhet, vilket gav en återstod som revs med 9596 etanol för att framkalla kristallisation. Den fasta produkten uppsamlades genom filtrering och löStes i metanol, och metanollösningen koncentrerades till 10 ml, späddes med 75 ml 95% etanol och koncentrerades åter till 5 ml, vilket gav 1-(2-sulfaminoetyßtetrazol- S-tiol-dinatriumsalt, smp. 122-1270. 10 l5 20 25 30 35 eoo6414-o C3H5N5O3S2.2 Na.1,5 H20 Beräknat: l2,l696 C; 2,72% h; 216496 N l2,2596 C; 2,98% H; 217796 N En lösning av l-(2-sulfaminoetyDtetrazoI-S-tiol-dinatriumsalt i vatten Funnet: fick passera genom en Amberlite IR-120 jonbytarhartskolonn, vilket efter lyofilisering gav 1-(2-sulfaminoetyßtetrazol-5-tiol.

Till en blandning av 2,71 g (0,006 mol) 7-D-mandelamidocefalosporan- syra-natriumsalt och 1,18 g (0,00ll- mol) 1-(2-sulfaminoetyl)tetrazol-S-tiol- dinatriumsalt i 30 ml vatten sattes l096-ig natriumhydroxid-vattenlösning och därefter 596-ig natriumvätekarbonat-vattenlösning till pH 7,3. Reaktionsbland- ningen upphettades vid 700 i 2,66 h, varefter den kyldes, täcktes med etylacetat, surgjordes till pH 2,5 med 3N saltsyra och extraherades 2 gånger med etylacetat.

Vattenfasen neutraliserades till pH 7,0 genom tillsats av lO96-ig natriumhydro- xid-vattenlösníng och sedan 596-ig natriumvätekarbonat-vattenlösning samt kromatograferades på XAD-7-harts med vatten och metanol som elueríngsmedel.

Efter avlägsning av metanolen i vakuum lyofiliserades kromatografifraktionerna, vilket gav 7-D-mandelamido-3-[l-(Z-sulfaminoetyl)tetrazol-5-yltiometyl]-3-ce- fem-ß-karboxylsyra-dinatriumsalt Cl 9H 19N7O8S3.2 Na.2 H20 Beräknat: 3150896 C; 3,76% H; 1156496 N 3155696 C; 3,25% H; 139696 N En vattenlösníng av 7-D-mandelamido-3-(l-(2-sulfaminoetyßtetrazol-5- Funnet: yltiometyl)-3-cefem-li-karboxylsyra-dinatriumsalt fick passera genom en kolonn av Amberlite IR-IZO jonbytarharts, vilket gav titelföreningen.

Exempel 2 7-(2-Tienylacetamido)-3- [ l-(Z-sulfaminoetyl)tetrazol-B-yltiometyl ] -B-cefem- lø-karboxxlsxra En blandning av 1,89 g (0,06l+ mol) l-(2-sulfaminoetyl)tetrazol-S-tiol dinatriumsalt och 2,67 g (0,06l+ mol) 7-(Z-tienylacetamidokefalosporansyra- natriumsalt i 40 ml vatten upphettades vid 69° under 5,5 h under upprätthållande av pH 7,4 genom tillsats av utspädd natriumvätekarbonat-vattenlösning. Efter avkylning extraherades blandningen med etylacetat. Vattenfasen neutraliserades, indunstades till torrhet och återstoden fick passera genom en XAD-li-kolonn, varvid man eluerade med vatten och metanol. Metanolen avlägsnades genom indunstníng, och den vattenhaltiga återstoden lyofiliserades för att ge en fast substans. Den fasta substansen suspenderades i metanol, olösligt material avlägsnades genom filtrering och filtratet indunstades till torrhet, vilket gav 7- (2-tienylacetamido)-3- [ l-(Z-sulfaminoetyl)tetrazol-5-yltiometyl]-3-cefem-lß-kar- boxylsyra-dínatriumsalt. 10 15 20 25 30 35 80061114-0 C17H17N7O7Sw2 Na.1 CH4O Beräknat: 33,90% C; 3,31% H; 15,37% N 31501196 C; 3,57% H; 11571196 N 7-(2-Tienylacetamido)-3- ( l-(2-sulfaminoetyl)tetrazol-5-yltiometyl ] ~3- F unnet: cefem-li-karboxylsyra-dinatriumsalt omvandlades till titelföreningen, såsom be- skrivitsi Exempel 1.

Exempel 3 7-(1-Tetrazolylacetamido)-3- f 1-(2-sulíaminoetyDtetrazol-5-yltiometyl ) -3- ceíem-lß-karboxxlsvra En blandning av 3,5 g (8,5 mmol) 7-(1-tetrazolylacetamidokefalosporan- syra-natriumsalt och 2,96 g (10 mmol) 1-(2-sulfaminoetyDtetrazol-5-tíol-dinat- riumsalt i 50 ml vatten omrördes vid 650 under 6,5 h under upprätthållande av reaktionsblandningens pH vid 7,0 genom tillsats av 5%-ig natriumvätekarbonat- vattenlösning. Blandningen kyldes till omgivningstemperatur, surgjordes till pH 1,5 med 3N saltsyra, flltrerades och extraherades tre gånger med etylacetat. pH- värdet för vattenfasen justerades sedan till 7,0 genom tillsats av natriumväte- karbonat, lösningen kromatograferades på en XAD-Z-kolonn och den resulterande produkten frystorkades, vilket gav 7-(1-tetrazolylacetamido)-3-[l-(Z-sulfamino- etyßtetrazol-S-yltiometyl ] -3-ceíem-li-karboxylsyra-dinatriumsalt.

Cwl-ll5NUO7S32 Na.2 H20 Beräknat: 263096 C; 3,37% H; 2155596 N 27,1 1% C; 3,40% H; 2151896 N, 7-(1-Tetrazolylacetamido)-3- ( l-(2-sulfaminoetyl)tetrazo1-5-yltiometyl ]~ 3-ceíem-li-karboxylsyra-dinatriumsalt omvandlades till titelföreningen såsom F unnet: beskrivits i Exempel 1.

Exempel 4 7-Trífluormetyltioacetamido-B- f 1-(2-sulfaminoetyDtetrazol-5-yltiometyQ-3- cefem-ü-karboxxlsvra En lösning av 3,05 g (0,0l mol) 1-(Z-sulfaminoetyl)tetrazol-S-tiol- dinatriumsalt och 14,36 g (0,0l mol) 7-triíluormetyltioacetamidocefalosporansyra- natriumsalt i 50 ml vatten upphettades vid 700 under 5,5 h, under det att pH hölls vid 7,5 med 5%-ig natriumvätekarbonat-vattenlösning. Reaktionsblandningen späddes med 50 ml vatten och extraherades, tvâ gånger med etylacetat.

Vattenfasen surgjordes till pH 2 och extraherades tre gånger med etylacetat.

Vattenskiktet bringades till pH 7,1; genom tillsats av 5%-ig natriumvätekarbonat- vattenlösning och lösningen fick passera genom XAD-li-hartskolonn under eluering med vatten följt av metanol. Metanol-lösningen indunstades till torrhet och återstoden löstes i 75 ml vatten. Vattenlösningen extraherades två gånger med eter och petroleumeter, varefter den lyofiliserades. Det lyofiliserade 10 15 20 25 30 35 aooe414-o 9 materialet löstes i metanol, och lösningsmedlet indunstades till torrhet och revs med eter, vilket gav 7-trifluormetyltioacetamido-3- [ l-(2-sulfaminoetyDtetrazol- S-yltiometyl)-3-ceíem-lø-karboxylsyra-dinatriumsalt.

C laHl4F3N7O7Sw2 Na.2 H20 Beräknat: 25,l49% C; 2,75% H; ll#,8696 N Funnet: 25,85% C; 2,78% H; 1151396 N 7-Triíluormetyltioacetamido-B- ( l-(Z-sulfaminoetyßtetrazol-S-yltiometyl]- -3-ceiem-li-karboxylsyra-dinatriumsalt omvandlades till titelföreningen såsom beskrivits i Exempel l.

Exemoel 5 7-(D-a-Aminofenylacetamidw-B- ( l-(2-sulfaminoetyDtetrazol-S-yltiometyl ]-3- ceiem-lß-karboxvlsvra - En lösning av 7,58 g (0,0l5 mol) 7-(D-a-Lbutoxikarbonylaminoíenyl- acetamidokefalosporansyra, 2,96 g (0,0l mol) l-(2-sulfaminoetyDtetx-azol-5-tiol- dinatriumsalt och l,26g (0,0l5 mol) natriumvätekarbonat i 125 ml vatten omrördes vid 60° under 5 h, medan man höll pH vid 7,0-7,2 genom tillsats av natriumvätekarbonat. Blandningen kyldes och extraherades med etylacetat.

Vattenfasen surgjordes till pH 2,5 med BN saltsyra, och den sura lösningen extraherades äter med etylacetat. Vattenfasen bringades till pH 7,1 genom tillsats av 596-ig natriumkarbonatlösning, fick sedan passera genom en XAD-ll- jonbytarkolonn och eluerades med vatten och metanol för att ge 7-(D-a- t.butoxikarbonylaminofenylacetamido)-3- ( l-(2-sultaminoetyl)tetrazol-5-yltiome- tyl ] -B-cefem-lß-karboxylsyra-dinatriumsalt. 7-(D-u-Lbutoxikarbonylaminoíenylacetamido)-3- ( l-(Z-sulfaminoetyßtet- razol-S-yltiometyl]-3-ceíem-ll-karboxylsyra-dinatriumsalt omrörs vid 25° med 25 ml ttifluorättiksyra och 25 ml lJ-dimetoxibensen under 2,25 h. Blandningen indunstas till torrhet, eter tillsätts till återstoden och fällningen uppsamlas, tvättas med eter, omrörs i acetonitril under 2 h och torkas i vakuum för att ge titelföreningen som trifluorättiksyrasalt.

En vattenlösning av trifluorättiksyrasaltet bringas till pH 5,0 genom tillsats av en utspädd vattenlösning av natriumhydroxid. Efter lyofilisering löses det lyoflliserade materialet i metanol, och eter tillsätts till lösningen för att utíälla 7-(D-a-aminofenylacetamidd-B- [ 1-(2-sulfaminoetyDtetrazol-5-yltiome- tyl)-B-cefem-lt-karboxylsyra-natriumsalt. Natriumsaltet löses i vatten, och vattenlösningen får passera genom en Amberlite lR-l2OH-jonbytarkolonn.

Lyofiliseringen av det eluerade materialet ger titeliöreningen.

Exemæl 6 Reaktion mellan N-t-butoxikarbonylderivatet av följande cefalosporan- syror: lO 15 20 25 30 35 8006414-0 10 7-(a-amino-læ-hydroxifenylacetamidokefalosporansyra 7-(u-amino-lß-formamidofenylacetamidokefalosporansyra 7-(a-amino-B-formamidofenylacetamidokefalosporansyra 7-(or-amino-lL-ureidofenylacetamidokefalosporansyra 7-(a-amino-B-ureidofenylacetamidokefalosporansyra 7-(a-amino-ll-hydroximetylíenylacetamido)cefalosporansyra 7-(or-amino-I,ll--cyklohexadienylacetamído)cefalosporansyra 7-(a-amíno-ll-karboximetylaminofenylacetamidokefalosporansyra och l-(Z-sulfaminoetyßtetrazol-i-tiol-dinatriumsalt såsom beskrivits för förfarandet i Exempel 5 följt av borttagning av skyddsgruppen och omvandling av trifluorättiksyrasalterna till fria syror såsom beskrivits där ger följande föreningar: 7-(or-amino-lß-hydroxifenylacetamido)-3- [ l-(2-sulfaminoetyDtetrazol-fi- yltiometyl ] -B-cefem-lß-karboxylsyra 7-(oL-amino-ll-formamidofenylacetamido)-3- ( l-(Z-sulfaminoetylhetrazol- 5-yltiometyl]-B-cefem-ll-karboxylsyra 7-(a-amino-3-formamidofenylacetamido)-3- [I-(Z-sulfaminoetyl)tetrazol- fi-yltiometyl)-3-cefem-4-l 7-(oz-amino-lß-ureidofenylacetamido)-3- [ 1-Q-sulfaminoetyl)tetrazol~5- yltiometyl)-3-cefem-lß-karboxylsyra 7-(or-amino-3-ureidofenylacetamido)-3- fl-Q-sulfaminoetyl)tetrazol-5- yltiometyl ) -B-cefem-ll-karboxylsyra 7-(u-amíno-ll-hydroximetylíenylacetamldo)-3- [ I-(Z-sulfaminoetyl)tetra- zol-S-yltioln etyl ] -B-cefelm-ll-karboxylsyra 7-(a-amino-l ,ll-cyklohexadienylacetamido)-3- [ l-Q-sulfaminoetyßtetra- zol-S-yltiometyl ) -B-cefem-ll-karboxylsyra 7-(oL-amino-4-karboximetylaminofenylacetamido)-3- [ l-(Z-sulfamíno- etylketrazol-S-yltiometyl]-B-cefem-ll-karboxylsyra.

Exempel 7 7-(4-Hydroximandelamido)-3- ( l-(2-sulfamlnoetyDtetrazol-fi-yltiometyl ] - 3-cefem-ll-karboxylsyra framställs genom reaktion mellan 7-(4-hydroxímandel- amidokefalosporansyra-natriumsalt och l-(2-sulfaminoetyl)tetrazol~S-tiol-dinat- riumsalt, följt av behandling av produkten med Amberlite IR-IZOI-l-jonbytar- harts, såsom beskrivits för förfarandet i Exempel l.

Exempel 8 När natriumsaltet av 7-(3-sydnonacetamidokefalosporansyra eller 7-(2- aminometylfenylacetamidokefalosporansyra får reagera med l-(Z-sulfamino- etyl)tetrazol-i-tiol-dinatriumsalt genom det i Exempel l beskrivna förfarandet och produkten omvandlas till fri syra såsom beskrivits där, får man 7-(3-sydnon- 10 l5 20 25 30 35 600641l|~0 ll acetamido)-3- [ i-(2-suifaminoetyDtetrazol-5-yltiometyl ]-3-cefem-li-karboxyl- syra resp. 7-(2-aminometyifenyiacetamido)-3- fl-(2-suifaminoetyD-tetrazoI-5-yi- tiometyl )-3-cefem-4-karboxyisyra. Éšemgei 9 Reaktion mellan natriumsaitet av 7-(2,2,2-trifluoretyitioacetamido)- cefalosporansyra eller 7-metyltioacetamidocefaiosporansyra och l-(Z-sulfamino- etyhtetrazol-S-tiol såsom beskrivits för förfarandet i Exempel 4 ger efter om- vandling av de bildade salterna till fria syror 7-(2,2,2-trifluoretyltioacetamidw- 3- [ i-(Z-sulfaminoetyDtetrazoI-S-yitiometyl ) -J-cefem-li-karboxylsyra resp. 7- metyltioacetamido-B- ( l-(Z-sulfaminoetyßtetrazol-j-yltiometyl]-3-cefem-li-kar- boxylsyra.

ExemEei 10 Reaktion mellan en nedan angiven cefalosporansyra eller motsvarande salt: 7-(u-hydroxi-2-tienyiacetamidokefaiosporansyra 7-(a-karboxi-Z-tienylacetamidokefaiosporansyra 7-(u-sulfofenylacetamidokefalosporansyra och 1-(2-sulfaminoetyßtetrazol-ß-tioi-dinatriumsait genom de ovan an- givna förfarandena ger, efter omvandling av produkten till fri syra följande föreningar: 7-(o-hydroxi-2-tienyiacetamido)-3- ( i-(Z-sulfaminoetyDtetrazol-S-yltio- _ metyi] -í-cefem-li-karboxyisyra _7-(a-karboxi-2-tienylacetamido)-3- ( i-(2-sulfaminoetyD-tetrazoi-S- yltiometyl)-3-cefem-ll-karboxylsyra 7-(oL-sulfofenylacetamido)-3- [i-(Z-sulfaminoetyl)tetrazol-S-yltioinetyl ] - B-cefem-li-karboxylsyra.

Exemæl li 7-Amino-3- ( i-(Z-sulfaminoetyDtetrazoi-â-yltiometyl ] -B-cefem-li-karboxylsyra Till en blandning av 97 g (200 mi, 2,i moi) myrsyra, destiilerad ur vattenfritt kopparsuifat, och 37,5 ml (0,1:- moi) ättiksyraanhydrid sattes 25,0 g (0,1 moi) 7-aminocefaiosporansyra. Blandningen omrördes vid omgivningstempe- ratur under 0,5 h och indunstades sedan till torrhet. Återstoden löstes i etylacetat, och etylacetatlösningen filtrerades och indunstades till torrhet, vilket gav en återstod, som omkristaliiserades ur eter-petroleumeter för att ge 7- formamidocefaiosporansyra.

En blandning av 1,0 g (3,3 mmol) 7-formamidocefalosporansyra och 0,7 g (2,6 mmol) l-(2-suifaminoetylketrazol-S-tioi-dinatriumsalt i 15 ml vatten omrör- des vid 65-70° under 3h, medan man höll pH vid 7,0. Blandningen kyldes, surgjordes till pH 1,0 med saitsyra och extraherades med etylacetat. Extraktet 10 15 20 25 30 35 8006414-0 12 filtrerades, och filtratet indunstades till torrhet för att ge en återstod, som löstes i metanol. Metanollösningen íiltrerades, och eter tillsattes för utíällning av titelföreningen, som uppsamlades genom filtrering.

Exempel 12 7a-Metoxi-7B-(2-tienylacetamido)-3- [ l-(2-sulfaminoetyDtetrazol-S-yltionietyl ]-- 3-cefem-4-karboxyls1ra En lösning av 1,28 g (3 mmol) 7a-metoxi-7ß-(2-tienylacetamido)cefalo- sporansyra-natriumsalt löses i 50 ml vatten, 1,33 g (A55 mmol) l-(Z-sulíamino- etyl)tetrazol-5-tiol-dinatriumsalt tillsätts till lösningen, och den upphettas till 700, tills tunnskiktskromatografi indikerar att utgângsmaterialet förbrukats (ca 5 h). Reaktionsblandningen kromatograferas på XAD-Ll-jonbytarhartg efter tvättning med vatten, med metanol som elueringsmedel. Indunstning av metanol- lösningen ger titelíöreningen som dinatriumsaltet. 7o-Metoxi-7B-(2-tienylacetamido)-3- [l-(2-sulíaminoetyl)tetrazol-5-yltio- metyl)-B-cetem-li-karboxylsyra-dinatriumsalt omvandlas till titeliöreningen så- som beskrivits ovan.

Exempel 13 7a-Metoxi-7ß-trifluo rmetyltioacetamido-B- [ 1-(2-sultaminoetyl)tetrazol-S-yltio- met yl ] -B-cefem- ll-karboxylsyra Till en kall lösning av 5,25 g (0,0l2 mol) 7B-amino-7u-metoxiceíalospo- ransyra-benshydrylester i 200 ml metylenklorid innehållande 1,79 g (0,0l2 mol) N,N-dietylanilin sätts droppvis under 20 min en lösning av 1,82 g (0,0l2 mol) trifluormetyltioacetylklorid i 50 ml metylenklorid. Efter omrörning under 30 min extraherar man i tur och ordning med 5%-ig vattenlösning av natriumvätekarbo- nat, 596-ig vattenlösning av klorvätesyra och slutligen med saltlösning. Den organiska fasen torkas (MgSOa), och lösningsmedlet avdunstas, vilket ger 7oL- metoxi-7B-trifluormetyltioacetamidocefalosporansyra-benshydrylester. 7oz-Metoxi-7B-triíluormetyltioacetamidocefalosporansyra-benshydryles- ter löses i en kall blandning av tritluorättiksyra-anisol (2:l), och blandningen omrörs under 1,5 h utan yttre kylning. Lösningsmedlet avdunstas i vakuum, och den kvarvarande produkten upptas i etylacetat, tvättas med vatten, torkas (MgSOq) och koncentreras i vakuum till en liten volym. Lösningen sätts droppvis till omrörd petroleumeter för utfällning av 7oi-metoxi-7B-trifluormetyltioacet- amidocefalosporansyra. 7a-Metoxi-7ß-trifluormetyltioacetamidocefalosporansyra (2,2 g, 5 mmol) suspenderas i 75 ml vatten, och 0,4 g fast natriumvätekarbonat tillsätts till fullständig upplösning. Till denna lösning sätts 2,21 g (7,5 mmol) l-(Z-sulfamino- etyl)tetrazol-5-tiol-dinatriumsalt, och blandningen upphettas vid 700 under 7 h.

Reaktionsblandningens pH hålls vid 7,5 genom droppvis tillsats av BN saltsyra l0 15 20 25 30 35 8006414-0 13 efter behov. Reaktionsförloppet övervakas med tunnskiktskromatografl och bedöms vara fullbordat, när tunnskiktskromatografin indikerar att utgångs- materialet försvunnit. Reaktionsblandningen kromatograferas på en kolonn av XAD-lø-harts, och produkten elueras från kolonnen med metanol. lndunstning av metanollösningen ger 7a-metoxi-7ß-trifluormetyltioacetamido-3-[I-(Z-sulf- aminoetylltetrazol-S-yltiometyl)-B-cefem-lß-karboxylsyra-dinatriumsalt.

Dinatriumsaltet omvandlas till titelföreningen genom ovan beskrivna förfaranden.

Exempel 14 78-D-Mandelamido-7a-metoxi-3- f l-(Z-sulfaminoetyfitetrazol-S-yltiometyl ]- B-cefem-ls-karboxvlsxra Till en kall lösning av 2,6 g (6 mmol) 76-amino-7a-metoxicefalo- sporansyra-benshydrylester i 100 ml metylenklorid innehållande 0,9 g (6 mmol) N,N-dietylanilin dikloracetylmandeloylklorid i 25 ml metylenklorid. Reaktionsblandningen tillåts sätts droppvis under 15 min en lösning av 1,7 g (6 mmol) D-O- anta rumstemperatur med omrörning, varefter den i tur och ordning extraheras med 596~ig vattenlösning av natriumvätekarbonat, 596-ig saltsyra och saltlösning.

Den organiska fasen torkas och indunstas i vakuum. Återstoden löses i kall trifluorättiksyraanisol (2:l), och blandningen omrörs vid omgivningstemperatur under l h. Blandningen indunstas i vakuum, och återstoden löses i 596~ig vattenlösning av natriumvätekarbonat. pH höjs till 9-9,3 genom tillsats av 596-ig vattenlösning av natriumkarbonat och hålls där under 30 min så att klyvningen av dikloracetylgruppen blir fullständig. Lösningen kyls i is, skiktas med etylacetat och surgörs till pH 2,0 med utspädd saltsyra. Skikten separeras, och efter en andra extraktion av vattenskiktet med etylacetat slås de organiska faserna ihop, torkas och indunstas i vakuum, vilket ger 7B-D-mandelamido-7a-metoxicetalo- sporansyra. 7ß-D-MandelamidoJa-metoxicefalosporansyra (2,2 g, 5 mmol) suspen- deras i 75 ml vatten, och natriumvätekarbonat tillsätts tills all syra har lösts.

Till detta sätts 2,21 g (7,5 mmol) I-(Z-sulfaminoetyfitetrazol-fi-tiol-dinatriumsalt och blandningen upphettas vid 700 under 7 h. Reaktionsblandningens pH hålls vid 7,5 genom tillsats av 3N saltsyra. Kromatografi av denna lösning på XAD-lf-harts under utspädning med metanol ger, efter avdunstning av metanolen, titelföre- ningen som dess dinatriumsalt. 7B-D-Mandelamido-Ja-metoxi-B- fl-(Z-sulfaminoetyDtetrazoI-S-yltiome- tyl]-B-cefem-lß-karboxylsyfra-dinatriumsalt omvandlas till titelföreningen genom ovan beskrivna förfaranden. lO 15 20 25 30 35 GOOGMIi-Û lit ExemEel 15 7u-Metoxi-7B-(D- a-aminofenylacetamido)-3- [ l-(Z-sulfaminoetyßtetrazol-S- yltiometyl ) -B-cefem-ll-karboxylsyra Till en lösning av 5,3 g (0,0l2 mol) 7ß-amino-7oi-metoxicefalosporansyra- p-nitrobensylester i 200 ml metylenklorid sätts 3,0 g (0,0l2 mol) D-a- Lbutoxikarbonylaminofenylättiksyra och 2,5 g (0,0l2 mol) dicyklohexylkarbodi- -imid. Blandningen omrörs under 18 h vid omgivningstemperatur och filtreras sedan. Filtratet indunstas i vakuum, och återstoden löses i metanol-tetrahydro- furan och hydreras över 5% palladium på kol, vilket ger 7B-(D-a-t.butoxikarbo- nylaminofenylacetamido)-7a-metoxicefalosporansyra. 76-(D-a-t.butoxikarbonylaminofenylacetamido)-7a-metoxi-cefalosporan- syra (2,68 g, 5 mmol) löses i 75 ml vatten genom tillsats av 0,4 g fast natriumvätekarbonat. 1-(2-Sulfaminoetyl)tetrazol~S-tiol-dinatriumsalt (2,2l g, 7,5 mmol) tillsätts, och reaktionsblandningen upphettas vid 700 tills tunnskikts- kromatografi indikerar att utgângsmaterialet har försvunnit. Reaktionsbland- ningen kromatograferas på XAD-ll-harts och elueras med metanol. Indunstning av metanollösningen ger 7a-metoxi-7B-(D-oL-tbutoxikarbonylaminofenylacetamido)- 3- [ 1-(Z-sulfaminoetyDtetrazol-S-yltiometyl ] -B-cefem-li-karboxylsyra-dinatrium- salt.

Dinatriumsaltet suspenderas i 1:1 trifluorättiksyra-anisol och omrörs vid omgivningstemperatur under 2 h. Överskott av trifluorättiksyra avlägsnas genom indunstning. Återstoden rivs med eter, och den resulterande fällningen uppsamlas genom filtrering och omrörs med acetonitril för att ge titelföreningen som dess trifluorättiksyrasalt.

En vattenlösning av trifluorättiksyrasaltet bringas till pH 7 genom tillsats av 596-ig vattenlösníng av natriumvätekarbonat och kromatograferas sedan pâ XAD-li-harts med metanol som elueringsmedel. Det fasta material som erhålls efter avdunstning av metanolen löses i vatten, och vattenlösningen får passera genom en katjonbytarkolonn (IR-IZOH). Lyofilisering av det eluerade materialet ger titelföreningen.

ExemEel 16 7u-Metoxi-7B-(l-tetrazolylacetamidd-B- [ l-(2-sulfamidoetyDtetrazol-S-yltio- metyl ) -B-cefem-lß-karboxylsyra Utbyte mot en ekvivalent mängd l-tetrazolylacetylklorid vid förfarandet i Exempel 13 ger 7a-metoxi-7B-(l-tetrazolylacetamido)-cefalosporansyra-bens- hydrylester, som omvandlas till 7a-metoxi-7ß-(l-tetrazolylacetamidolcefalospo- ransyra såsom beskrivs där.

Reaktion mellan 7u-metoxi-7ß-(l-tetrazolylacetamidohzefalosporansyra, l-(2-sulfaminoetyl)tetrazol-S-tiol-dinatriumsalt och natriumvätekarbonat såsom

Claims (1)

1. w06414-0 15 beskrivs i Exempel 13 ger, efter omvandling av dinatriumsaltprodukten till fri syra såsom beskrivits ovan, titelföreningen. PATEN TKRAV Mellanprodlkt till användning íör framställning av terapeutiskt värde- 5 fulla föreningar med formeln u 1 I ä' s of-N / C323 / coon N-N (cnzlz -nnso3a där W är väte eller metoxi, RI är: S? 9 l? x-çn-c- , Y-cHZ-c- eller z-flmm-cne-g. _ A Vâfl 10 X är tienyl, dihydrofenyl, íenyl eller fenyl monosubgtituerad med hydroxi, hydroximetyl, formamido, ureido eller karboximetylamlno, A är NHZ, OH, COOH, eller SO3H, eller formyloxí när X är íenyl, Y är tienyl, tetrazolyl, sydnon, cyano eller aminometylfenyl, Z är metyl, triíluormetyl, trifluoretyl, cyanometyl eller pyrldyl, och 15 m är noll till tvâ, eller ett lcke-toxiskt farmaceutiskt godtagbart salt därav, kännetecknad avformeln u-n ns- If-_N (C325 -Nnsoau