SE431400B - Lactobacterium acidophilum-heterovaccin for terapeutisk behandling av trikomonasinfektion - Google Patents

Description

20 25 50 35 H0 7813201-6 som medför risk för en tubargraviditet eller en förslutning av äggledaren (sterilitet). Både en kronisk infektion och upprepat återkommande återfall medför en avsevärd inflammation i portio vaginalis uteri och cervix; detta medför lokala vävnadsalteratio- ner, som omfattar från tillbakabildningsbenägen dysplasi till försteg till livmoderhalskarcínom. Den mångfaldiga kliniska bilden betecknas som helhet som Trikomonas-syndrom. Även om preparatet metronidazol {l-(2-hydroxietyl)-2- metyl-5-nitroimidazol} är lämpat för avdödning av Trichmmxms vaginalis och användes inom terapin för denna indikation, visar antalet insjuknade ändå ingen minskning, utan har snarare en stigande tendens; allt efter land skall mellan 3,5 och 88 % av befolkningen wna angripen av infektionen, varför man nu redan kan tala om en folksjukdom.

Utbredningen av infektionen och den gång på gång iakttag- na reinfektionen gynnas kraftigt av den höjda promiskuiteten.

Dessutom gynnas infektionens envishet och en viss terapiresistens av det allt mer utbredda långvariga bruket av ovulationshämmande steroider, då som bekant alla hypoovariala tillstånd, dvs en re- lativ brist av kroppsegna ovarialhormoner, hämmar epitelprolife- rationen i slidan.

Det har nu visat sig att bland ett flertal naturligt fö- rekommande stammar (för närvarande är ungefär H 000 olika stam- mar kända) av Lactobacterium acidophilum - även Lactobacillus acidophilus, mjölksyrabakterier, laktobakterier, långa mjölksyre- stavar, Döderlein's stavar eller Döderlein's bakterier - finns sådana varav ett för behandling av Trikomonas-syndromet värde- fullt heterovaccin kan framställas.

De enskilda stammarna har erhållits 1976 från vagina hos kvinnor som haft detta syndrom och legat på sjukhus. Stammarna har deponerats den 17 oktober l977 i lyofiliserat tillstånd vid "Centralbureau voor Schimmel-cultures" i Baarn, Holland under be- teckningen CBS H65.77'til1 CBS U72.77 (åtta enskilda stammar).

I morfologiskt avseende skiljer sig de olika stammarna bland annat genom storleken av bildade kolonier: många kolonier är mycket små, genomsynliga och cirkulära, andra kolonier är större och har formen av en rosett, vars yta är fårad. Mikro- skopisk undersökning visar att samtliga åtta bakteriestammar tillhör grampositiva polymorfa baciller, som förekommer i form av kedjor eller palissader. 10 15 20 .H5 30 55 'l k) 7813201-6 Det biokemiska förhållandet av dessa stammar kan på grund- val av deras växt på olika kolkällor karakteriseras enligt föl- jande: Tabell 1 K°11<älla= Leeëeèeeëeriufluasiêeebilefß, .Stam CBS-mw 465-77 466.77 457-77 458-77 459-77 470-77 471-77 472-77 Arabinos - + + + + - - 3 Cellobios + - - - - - - - Laktos + + + + + - - + Maltos + + + + + 3 + + Mannitol - + + + + + - - Melibios + + + - + - + - Raffinos + + + - + - + - Ramnos + + + + + + - + Salicin + + + + + + - + Sackaros + + + + + + + + Trehalos + + + + + + - - Xylos 3 - - - - 1 - - Ribos 3 + + + + + - + Stärkelse 1 - - ~ - 3 - - Stammarna CBS 466.77, 467.77 och 469.77 uppvisar samma biokemiska respektive fermentativa egenskaper.

Heterovaccinet enligt uppfinningen består alltså av inak- tiverade mikroorganismer av stammar av Lactobacterium acidophilum, som angivits ovan, i en fysiologiskt fördragsam lösning, varvid mikroorganismerna härrör från en del av dessa stammar eller från samtliga dessa stammar och varje stam föreligger i ungefär samma antal. I vaccinet bör det finnas mikroorganismer från minst tre stammar.

Förfarandet för framställning av heterovaccinet _ består i att en del till alla av de ovan angivna stam- marna av Lactobacterium acídophilum odlas var:för=sig på ett lämpligt flytande näringsmedium under aeroba betingelser, det bil- dade biologiska materialet avskiljes då odlingen avslutatsoch inakti- veras enligt kända metoder och de av de enskilda stammarna erhåll- na och inaktiverade mikroorganismerna blandas med varandra i en fysiologiskt fördragsam lösning i mängder som är omvänt propor- tionella mot den i varje fall efter avslutande av odlingen eller efter inaktiveringen fastställda tätheten av kulturen (antal mikroorganismer per ml odlingsvätska). 10 20 25 50 UU De angivna stammarna är så utvalda att vid utförande av förfarandet under användning av samtliga åtta man erhåller ett allmänt verksamt vaccin. Därmed avses ett vaccin, som på det he- la taget är aktivt mot varje patient respektive varmed, oberoende av infektíonens ursprung, Trikomonas-syndromet kan behandlas med gott resultat. Därför utgör vaccin, vari inaktiverade mikroor- ganismer från de åtta angivna stammarna föreligger, en föredragen form av uppfinningen och en framställning av vaccin under använd- ning av de åtta angivna stammarna är den föredragna utföríngsfor- men av förfarandet.

För odling av stammarna kan olika, inom mikrobiologin bruk- liga flytande näringsmedia användas. Ett näringsmedium av följan- de sammansättning har visat sig vara speciellt lämpligt: Tryptos-pepton 5 g Kasein-hydrolysat 8 g Köttextrakt ' 10 g Jäst-dialysat 100 ml KQHPOÄ 2 g Triammoniumcitrat 2 g Natriumacetat 5 g Saltblandning 5 ml Polyoxietvlenderivat av sorbitanoleat 1 ml (Tz-:een 80:13- ) Glukos 10 g Laktos 10 g destillerat vatten till 1000 ml Den ovan angivna saltblandningen består av: MgSOu~Y H20 11,5 g MnS0u-2 H20 2,H g Fesoufi H20' 0,68 g destillerat vatten till 100 ml Det flytande mediet ställes på ett pH-värde av 6,1 till 6,3, lämpligen 6,5 och steriliseras i 20 minuter i autoklav vid en temperatur av ll5°C.

Näringssubstratet fördelas i steriliserade kärl, t ex Erlenmeyerkolvar, och innehållet i varje kärl ympas med ett prov. av en enda stam. Odlinqcn utföres lämpligen vid en temperatur av 53 till U5°C, företrädesvis vid cirka 5Y°C, under t ex H8 tim- mar. Efter denna tidsrymd eller då en för den avsedda vaccinpro- duktionen tillräcklig mängd biologiskt material bildats, uppsam- 10 '20 BO 55 RO 7813201-6 las detta under sterila betingelser och befrias från vidhäftande näringssubstrat genom centrifugering; exempelvis kan man centrifu- gera i l timme vid 3000 varv/min.

Bottensatsen av biologiskt material suspenderas därefter ånyo, lämpligen i fysiologisk koksaltlösning, och inaktiveras här- efter på känt sätt. För inaktivering lämpar sig speciellt en be- handling med formaldehyd och fenol; en koncentration av suspen- sionen av 0,3 % med avseende på formaldehyd och av 0,5 % med av- seende på fenol och en behandlingstid av 3 till 5 dagar har visat sig vara fördelaktig. Efter inaktiveringen centrifugeras suspen- sionen ånyo, t ex i l timme vid 3000 varv/min, för att befria det inaktiverade materialet från det medel som användes för inaktive- ringen, respektive från överskottet av formaldehyd och fenol.

Det från varje enskild stam erhållna materialet suspende- ras ånyo, lämpligen i fysiologisk koksaltlösning, och underkastas en sterilitetsprövning samt en prövning av förekomsten av fortfa- rande livskraftiga laktobakterier enligt de metoder som anges ne- dan. Om båda prövningarna ger ett negativt resultat, dvs om ma- terialet lämpar sig för framställning av vaccin, bestämmes den för varje stam uppnådda tätheten i kulturen respektive antalet mikroorganismer per ml odlingsvätska.

Om det av något skäl ej skulle vara möjligt att utföra blandningen av enskilda biologiska material omedelbart efter in- aktiveringen, skall motsvarande suspensioner under tiden bevaras vid en temperatur av H00. De inaktiverade mikroorganismerna från någon av dessa stammar kan även lyofiliseras och bevaras i detta tillstånd vid ungefär H00. De lyofiliserade stammarna kan lagras oförändrade vid denna temperatur under en tidsrymd av minst tre år. Som skyddskolloid för lyofiliseringen lämpar sig speciellt ett medium av 5,6 % gelatin, 37,5 % sackarosoch 0,5 % kalciumlaktobionat; lyofiliseringen sker lämpligen i Zü timmar.

Slutligen blandas det av de enskilda stammarna erhållna och inaktiverade materialet i en sådan mängd att därav bildas ett med avseende på antalet mikroorganismer av varje stam per ml i det närmaste likvärdigt vaccin. Det erhållna vaccinet spädes lämpligen med fysiologisk koksaltlösning så att det per ml inne- håller cirka lä x 109 mikroorganismer.

Vaccinet har en total kvävehalt av 3,68 mg% av torrsubstan- sen (bestämning enligt Kjeldahl). Det har visat sig vara lämp- ligt att tillsätta ett konserveringsmedel, exempelvis formalde- 10 15 20 25 BO H0 hyd eller fenol (koncentration av formaldehyd respektive fenol t ex 0,25 %) eller natriumetylmerkuritiosalicylat (Thiomersal), och låta vaccinet mogna cirka 30 dagar vid en temperatur av Ä°C En ampull innehåller lämpligen Naturligtvis skall också de sist innan det fylles i ampuller. 0,5 ml av det angivna vaccinet. angivna åtgärderna utföras under sterila betingelser och i pyro- genfritt glasmaterial.

Ampullinnehållet kan också lyofiliseras och fram till an- vändningen lagras i form av en torrampull, företrädesvis vid cir- ka ü°C. Vaccinets hållbarhet, i_form av vanliga ampuller eller som torrampuller, uppgår till minst tre àrírån framställningen, om det förvaras vid en temperatur av 2 till 8°C (normal kylskåpstem- peratur); vid förvaring vid cirka 20°C har vaccinet en hållbarhet av cirka 6 månader. Det bör också nämnas att en tidsrymd av tre år är den av världshälsoorganisationen maximalt tillåtna använd- ningstiden för ett inaktiverat vaccin (avdödat).

Vaccinet skall, innan det frisläppes för terapeutisk an- vändning underkastas följande prov: 1. Kontroll av sterilitet (sterilitetskontroll 1); 2. Kontroll av toxicitet; 3. Kontroll av antigenverkan; 4. Kontroll av förekomst av fortfarande livskraftiga laktobak- terier (sterilitetskontroll 2) _ I Därvid förfar man lämpligen enligt världshälsocrganisationens fö- reskrifter (krav på biologiska substanser, Technische Berichte från WHO, nr 323, l966) och den europeiska farmakopén II, l97l.

För kontroll av steriliteten sattes vardera 1 ml vaccin till reagensglas med tioglykolat-näringsmedium och till sådana med Sabouraud-buljong, reagensglasen inkuberades härefter i 10 dagar vid en temperatur av 37°C och en motsvarande serie av på samma sätt behandlade reagensglas inkuberades under samma tid vid en temperatur av 25°C. Det visade sig att samtliga reagens- -glas i de båda serierna blivit sterila.

Toxiciteten kontrollerades på marsvin och vita möss. Fem marsvin med en genomsnittlig kroppsvikt av 300 g erhöll intramus- kulärt, vardera 5 ml vaccin (dvs l0 gånger mer än den för män- niskor avsedda enkeldosen) - 2,5 ml i varje bakben; efter en ob- servationstid av lä dagar var de fem djuren oförändrat friska, ej heller i de behandlade benen kunde någon reaktion fastställas. Å andra sidan injicerades tio vita möss med en genomsnittlig 10 15 20 25 j0 78ï5201-6 7 kroppsvikt av 20 g med vardera 0,5 ml vaccin intramuskulärt i det ena bakbenet; efter en observationstid av lü dagar var de tio mössen oförändrat friska.

Antigenverkan kontrollerades först in vivo på marsvin.

Av de i ovanstående stycke angivna djuren behandlades tre efter lü dagar med vardera l ml vaccin intrakardialt; trots den förhål- landevis höga dosen kunde någon anafylaktisk reaktion ej iakttas.

Sedan testades vaccinet också in vitro, enligt immunodiffusions- metoden enligt Ouchterlony mot prov av normalt serum från människa; någon positiv reaktion kunde ej fastställas.

För kontroll av förekomsten av fortfarande levande lakto- bakteríer odlades prov av vaccin på ett för isolering och identi- fiering av dessa mikroorganismer lämpligt fast näringssubstrat.

Ett näringsmedium med följande sammansättning är lämpligt: vatten 800 ml tripkasein 16 g lösning l 50 ml lösning 2 ' 10 ml lösning 3 l0 ml lösning H 10 ml färsk jäst l00 g Witte-pepton 10 g löslig stärkelse, 0,5 % 5 g (1 löst tillstånd) ° vatten till 1000 ml Ovan angivna, i samtliga fall vattenhaltiga lösningar består av: Lösning l: 10 %-ig NaCl-lösning Lösning 2: 2 %-ig KCl- och 5 %-ig Na2C03-lösning Lösning 5: 2 %-ig CaCl2- och l %-ig MgCl2-lösning Lösning U: 2,5 %-ig KQHPOÄ-lösning _ Den erhållna slutlösningen försättes med 25 g agar-agar, pH-värdet ställes på 5,5 till 6,7, företrädesvis på cirka 6,0 och mediet steriliseras i 20 minuter i autoklav vid en tempera- tur av ll5°C. Härefter tillsättes en lösning av 3 g maltos, 10 3 glukos och 10 g laktos i 100 ml vatten och härefter 30 ml av en l %-ig cysteinvätekloridlösning; var och en av dessa lös- ningar har dessförinnan sterilíserats genom sterilfiltrering, t ex genom ett glasfiltcr G5. Slutligen försättes dessa medium med ytterligare 10 % av defibrinerat humanblod. Det så framställ- da blodagar-näringssubstratet ympas med prov av vaccinet och in- 10 15 20 bl UI H0 78í3201-6 s kuberas vid en temperatur av 3700. För kontroll ympas och odlas prov av Lactobacterium acidophilum under samma betingelser.

Några levande mikroorganismer kunde därvid ej påvisas i vaccinet, vilket visar att en fullständig inaktivering skett med hjälp av den föredragna metoden under utnyttjande av formaldehyd Vaccinet enligt uppfinningen är.således ett så kallat Då det å andra sidan utvecklar aktivitet mot och fenol. avdödat smittämne. en infektion och dess följdsymptom, som orsakas av en artfrämman- de mikroorganism, Trichomonas vaginalis, tillhör det klassen he- terovacciner.

Vaccinet åstadkommer bland annat bildandet av specifika antikroppar mot Lactobacterium acidophilum, speciellt mot dess abnorma och polymorfa former, som är medansvariga för den patolo- giska förändringen av pH-värdet i slidan vid Trikomonas-syndromet.

Denna immunicerande effekt kan påvisas både vid djurförsök och vid klinisk kontroll enligt följande.

Vid djurförsöket användes två kaniner med en kroppsvikt av 2950 respektive 3200 g och ympades med ett uppehåll av två veckor två gånger med vardera 0,5 ml vaccin intravenöst. En må- nad efter den andra behandlingen tappades blod från djuren och därav framställes serum. Om antikroppar bildats skall serumet i en spädning av minst 1250 specifikt agglutinera laktobakterier av varje stam varav vaccinet framställts; serumet uppvisar sedan i den undersökta spädningen en positiv titer av agglutininer.

Den första respektive den andra kaninen hade en titer av aggluti- niner före ympningen som var negativ vid en serumspädning av l:l0; en månad efter den andra behandlingen var den positiv vid en spädning av l:l60 respektive 1:80.

Det nya vaccinet möjliggör en kurativ och profylaktisk behandling av Trikomonas-syndromet och akut, kronisk och asympto- matisk Trikomoniasis. Vare sig den är kurativ eller profylak- tisk rekommenderas följande posologi: administration av en dos på 0,5 ml (dvs cirka 7 x 109 mikroorganismer) íntramuskulärt, tre gånger med ett intervall av i varje fall 2 veckor, följt av en injektion med samma dos (0,5 ml) ett år efter behandlingens början.

I överensstämmelse med angiven posologi har kliniska prov utförts och därvid serologiska undersökningar av 97 patienter ut- förts. Blod tappades från patienterna enligt en fastställd tids- plan och det erhållna blodserat testades pâ förekomsten av lakto- 10 15 7813201-6 bakterie-antikroppar. Därför behandlades serumet i en geometriskt ökande spädning (från 1:10 till 1:l280) med ett antigen eller agglutinogen motsvarande vaccinet och den eventuella agglutína- tionen iakttogs. Som agglutinogen användes en nyframställd, dvs mindre än tre månader gammal, suspension av inaktiverade mik- roorganismer av Lactobakterium acidophilum av samma stammar, i samma mängdförhållanden och i samma koncentration (lü x 109 mik- roorganismer per ml) som vaccinet självt; för inaktivering använ- des fenol i en koncentration av 0,25 % av suspensionen. Förekoms- ten av och utvecklandet i tiden av agglutininer i serum till följd av ympningen framgår tydligt av titervärdena i följande tabell.

Tabell 2 Fördelning av agglutinintitern före och efter ympning g Titer Före Q2 veckor 3 månader 6 månader* 12 månader ymp- efter ymp- ning I efter 3:e injektionen Q ningens början 1210 0 Q 0 OO O 1 1:20 8 E 2 3 3 , 3 1=14o 13 E o i 3 ä 8 1=so 29 § 3 ¿ 5 ; 6 , 17 1=16o 18 : 13 , 11 16 16 ¿ izszo 15 ¿ 1:9 t 1:8 1:0 f 15 i i=e1so o E 25 j 21: zo 3 ; 1=12so o 1 14 i 5 3 o Totalt* 97 97 i 96 92 61: ;Geomet- 2 I i É ¿ riskt , I 3 É 156,14; 1056 g 1:29; g 1:25? 1 1=12o ; av ti- f g § Å ; tern ¿ , 5 ; X Minskningen av totalt efter 3, 6 och 12 månader beror på patienter som ej längre kommer på kontroll.

Av ovan angivna geometriska medelvärde för titern kan t ex 2 veckor efter det att ympningen avslutats en höjning av titern med en faktor 6,3 (i genomsnitt) beräknas. Ett år efter ympningens början, dvs vid tiden för återupplivningsinjektionen (Rappelinjektion), är agglutinintitern fortfarande 2,1 gånger 10 15 20 S0 l0 högre än tidigare, vilket delvis kan förklara ympningens långva- riganresultat.

Om man betraktar höjningen av titern under den tid som följer omedelbart efter ympningen, dvs tiden mellan den första och den andra blodtappningen, fördelas den bland patienterna en- ligt följande; l Tabell 3 Höjning av agglutinintitern Höjnings- faktor 2x Rx 8x l6x 32x 6Hx och mer Antal patienter 13 13 21 10 6 7 Del av to- tala anta-j let patien- ter '13,uz 13,u% 21,6z 1o,3% e,2z 7,2z Följande sammanfattande kliniska rapport kan ge en bild av behandlingens resultat. 200 kvinnor i åldern från 15 till 59 år, som led av Trikomonas-syndrom, behandlas med vaccin (fram- ställt av de åtta angivna stammarna) av läkare; kontrollen sträckte sig över en tidsrymd av till en del mer än 2 år (2 pa- tienter kom ej längre på kontroll). 138 patienter, dvs 69 % av det totala antalet, hade tidigare upprepade gånger behandlats med orala eller vaginala preparat, speciellt Metronidazol, dock utan långvarigt resultatp g a förnyad infektion. Före behand- lingens början utfördes förutom blod- och urinundersökning en gynekologisk undersökning inklusive kolposkopi och Pap-Smear; parallellt därmed framställdes utstrykningar från vulva, slidan, cervix och uretra och därav framställdes ett nativpreparat lik- som också ett enligt Gram och ett enligt Giemsa färgat preparat och en kultur av'Tñßhomonas vaginalis lades upp. Samtliga dessa undersökningar upprepades 6 veckor, 4 månader och 12 månader ef- ter behandlingens början.

Före sjukdomsbehandlingen kunde hos lH5 av 200 patienter (72,5 %) fastställas en utpräglad symptom på Trikomonas-syndrom, med stark kolpit¿ pruritus, riklig.gröngul, illaluktande fluor, dyspareuni, dysuri osv.; kolposkopi visade ödem och rodnad i va- ginal- och portioepitelet. Dessutom påträffades hos 61 patienter en erytroplaci i portio, och hos 13 andra en kronisk cervicit. 10 20 25 7813201-6 ll Hos resterande 55 patienter (27,5 %) var symptomen mer diskret - latt kolpit.

Behandling skedde enligt ovan angiven posologi. För de lindriga kolpit-fallen användes ingen ytterligare behandling; för att dämpa akuta symptomer anbríngades lokalt antibiotika och i svåra fall dessutom lokalt ett preparat av mikroorganismer av stammar av Lactobacterium acidophilum aktiva mot Moniliasis.

Metronidazol eller liknande nitroimidazolderivat gavs dock ej i något fall.

Om vaginalsekretet enligt Jirovec {W. Ritzerfeld, Der Gynäkologe 2(l), sid 2-6 (1969)) indelas i följande klasser, kan behandlingens resultat tydligt avläsas ur tabell 4: Klass I Klass II : icke varig, bakteríell flytning Klass III: varig, bakteriell flytning (Klass IV : gonorré - inget fall därav har ínbegripits i under- : bild av en frisk kvinna sökningen) Klass V :: Trikomoniasis (positivt nativpreparat) Klass VI : Vaginalimykos (Candida albicans) Tabell N Tidpunkt för under- Antal Klass Klass Klass Klass sökningen II III V VI Före ymp- 200 - - l9H 6 ningen 97 % 3 % 2 veckor 200 159 H7 lü - efter 5:e 69,5 % 23,5 % 7 3 ínjektionen 3 månader 198 l6ü 27 9 - efter 3:e 82 % l3,5 % 4,5 % injektionen ia månader ' 198 157 52 9 - efter ymp- 79,3 % 16,2 % H,5 Ä ningen De 9 patienter hos vilka vid den andra kontrollen, tre må- nader efter det att ympningen avslutats, Trichomonas vaginalis fortfarande kunde påvisas mikroskopiskt, förblev också i fort- sättningen terapirefraktära; även en peroral behandling med en Trikomonazid ändrade intet därvidlag. Dessutom bestod också ef- ter 12 månader förändrinqar i cervix i form av kronisk cervicit eller massiv erytroplaki. Dessa misslyckanden kan kanske återfö- 10 20 25 78ï520É-'6 12 ras på att dessa kvinnor trots korrekt ympning ej var i stånd till en tillräcklig antikroppsbildning.

Av 198 behandlade patienter uppvisade efter 12 månader 189 (95,5 %) ett vaginalsekret av klass II och III, dvs deras var läkt.

Trikomoniasis Denna läkningsgrad uppnåddes hos 55 patienter med lätt kolpit utan någon ytterligare terapi. Patien- terna har nu till en del observerats i över 2 år; under denna tid har några återfall eller reinfektioner ej uppträtt, vilket utgör något nytt inom detta område av medicinen och tyder på en åter- ställning av en stabil Trikomonadfientlig vaginalmiljö. Slutli- gen synes vaccinet också ha en positiv inverkan på cervixföränd- ringar och skador på portio. Totalresultatet synes vara ändå mer iögonfallande om man betänker att den större delen av fallen redan behandlats med olika kemiska föreningar lokalt och syste- miskt, dock endast med övergående resultat.

Bortsett från en tillfällig rodnad eller en lätt svullnad i ínjektionsområdet uppträdde inga biverkningar hos patienterna under behandlingen eller omedelbart därefter. Några allergiska eller toxiska reaktioner fastställdes heller ej.

I Man bör avstå från ympningen då akuta feberinfektioner, sjukdomar i det hematopoetiska systemet eller en allvarlig njur- insufficiens föreligger.

En samtidig behandling av partnern till de med vaccin be-, handlade kvinnorna är visserligen önskvärd, men från patientens synpunkt ej obetíngat nödvändig, då var och en blir immun genom ympningen.

Claims (1)

1. 7813201-6 13 7¶ âatgntkrav l. Heterovaccin för terapeutisk behandling av Trüammnas- syndrom, k ä n n e t e c k n a t av att det består av inaktive- rade mikroorganismer av stammar av Lactobacteríum acidophilum, som är deponerade i "Centraalbureau voor Schimmelcultures" i Baarn, Holland, under beteckningarna CBS U65.77, CBS H66.77, CBS U67.77, CBS U68.77, CBS U69.77, CBS 470-77, CBS U7l.77 och CBS M72.77, i en fysiologiskt fördragsam lösning, varvid mikroor- ganismerna härrör från en del av de angivna stammarna eller av alla angivna stammar och varje stam föreligger i ett i det närmas- te lika stort antal. ¿. Heterovaccin enligt krav l, k ä n n e t e c k n a t av att detbestår av ínaktiverade mikroorganismer av samtliga åtta an- qivna stammar. 5. Heterovaccin enligt krav l eller 2, k ä n n e t e c k - n a t av att det innehåller cirka lü x 109 inaktiverade mikroor- ganismer per ml. H. Heterovaccin enligt något av kraven l-5, k ä n n e - t e c k n a t av att det dessutom innehåller ett konserveríngs- medel. 7813201-6 Sammandrag Heterovaccin mot Trikomonas-syndrom samt framställning och användning därav. Vaccinet består av inaktiverade mikro- organismer av bestämda Lactobacterium-acidophilum-stammar som finns deponerade i en depositionsinstitution under beteck- ningen CBS Ä65.77, CBS 7466.77, CBS H67.77, CBS U68.77, CBS H69.77, CBS ¿l70.77, CBS ll71.77 och CBS 472.77, i en fysiologiskt fördragmar lösning. Mikroorganismerna, före- trädesvis från alla åtta stammar, föreligger i ungefär samma antal per stam; de erhålles genom aerob odling. Vacoinet ger en immunitet och lämpar sig för terapeutisk behandling av Trikomonas-syndrom.