RU2757014C1 - Композиции для предупреждения или лечения волчанки - Google Patents
Композиции для предупреждения или лечения волчанки Download PDFInfo
- Publication number
- RU2757014C1 RU2757014C1 RU2020120706A RU2020120706A RU2757014C1 RU 2757014 C1 RU2757014 C1 RU 2757014C1 RU 2020120706 A RU2020120706 A RU 2020120706A RU 2020120706 A RU2020120706 A RU 2020120706A RU 2757014 C1 RU2757014 C1 RU 2757014C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- halogen
- hydrogen
- lupus
- independently
- mmol
- Prior art date
Links
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 title claims abstract description 44
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 41
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 96
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 32
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims abstract description 27
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 26
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 26
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 23
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 19
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract description 18
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 16
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims abstract 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 30
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 25
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 24
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 17
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 17
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 12
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 claims description 11
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 claims description 11
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 7
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 claims description 5
- 208000005777 Lupus Nephritis Diseases 0.000 claims description 4
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 206010018367 Glomerulonephritis chronic Diseases 0.000 claims description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 claims description 3
- 201000004997 drug-induced lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 2
- ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N furosemide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC(C(O)=O)=C1NCC1=CC=CO1 ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 48
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 abstract 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 abstract 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 114
- -1 inorganic acid salt Chemical class 0.000 description 67
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 60
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 55
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 51
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 50
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 40
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 37
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 37
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 33
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 32
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 31
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 27
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 25
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 24
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 21
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 20
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 19
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 19
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 17
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 17
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 17
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 17
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 16
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 16
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 15
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 15
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 15
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 14
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 14
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 14
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 13
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 13
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 13
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 101000713602 Homo sapiens T-box transcription factor TBX21 Proteins 0.000 description 12
- 102100036840 T-box transcription factor TBX21 Human genes 0.000 description 12
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 11
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 11
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 11
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 11
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 10
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical class [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 8
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 8
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 8
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 8
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 8
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 7
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 7
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 7
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 7
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 description 7
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 description 7
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 7
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 7
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 7
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 7
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 7
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 7
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 7
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 6
- 102100025248 C-X-C motif chemokine 10 Human genes 0.000 description 6
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 6
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 6
- 102100030703 Interleukin-22 Human genes 0.000 description 6
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 6
- 108010074109 interleukin-22 Proteins 0.000 description 6
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 6
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 6
- 210000001948 pro-b lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 6
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 5
- 101001066288 Gallus gallus GATA-binding factor 3 Proteins 0.000 description 5
- 101000858088 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 description 5
- 101000819111 Homo sapiens Trans-acting T-cell-specific transcription factor GATA-3 Proteins 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 108091008778 RORγ2 Proteins 0.000 description 5
- 102100021386 Trans-acting T-cell-specific transcription factor GATA-3 Human genes 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 5
- NXLNNXIXOYSCMB-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) carbonochloridate Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(OC(Cl)=O)C=C1 NXLNNXIXOYSCMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 4
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 4
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 4
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- CSJLBAMHHLJAAS-UHFFFAOYSA-N diethylaminosulfur trifluoride Chemical compound CCN(CC)S(F)(F)F CSJLBAMHHLJAAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N Furan Chemical compound C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000608935 Homo sapiens Leukosialin Proteins 0.000 description 3
- WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine hydrochloride Chemical compound Cl.ON WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 102000013264 Interleukin-23 Human genes 0.000 description 3
- 108010065637 Interleukin-23 Proteins 0.000 description 3
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 3
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 3
- 102100039564 Leukosialin Human genes 0.000 description 3
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 210000003515 double negative t cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 3
- ZKWFSTHEYLJLEL-UHFFFAOYSA-N morpholine-4-carboxamide Chemical compound NC(=O)N1CCOCC1 ZKWFSTHEYLJLEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 125000000229 (C1-C4)alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- VIUDTWATMPPKEL-UHFFFAOYSA-N 3-(trifluoromethyl)aniline Chemical compound NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 VIUDTWATMPPKEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000006275 3-bromophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(Br)=C([H])C(*)=C1[H] 0.000 description 2
- OMRDEMUDLHCPQE-UHFFFAOYSA-N 3-fluoro-4-[[3-(trifluoromethyl)anilino]methyl]benzoic acid Chemical compound FC=1C=C(C(=O)O)C=CC1CNC1=CC(=CC=C1)C(F)(F)F OMRDEMUDLHCPQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OONPPYRKJKEUIF-UHFFFAOYSA-N 3-fluoro-4-[[3-(trifluoromethyl)anilino]methyl]benzonitrile Chemical compound FC1=CC(C#N)=CC=C1CNC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 OONPPYRKJKEUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004180 3-fluorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C(F)=C1[H] 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 2
- PHEDXBVPIONUQT-UHFFFAOYSA-N Cocarcinogen A1 Natural products CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC1C(C)C2(O)C3C=C(C)C(=O)C3(O)CC(CO)=CC2C2C1(OC(C)=O)C2(C)C PHEDXBVPIONUQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 2
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 2
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- 238000012313 Kruskal-Wallis test Methods 0.000 description 2
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N Quinoline Chemical compound N1=CC=CC2=CC=CC=C21 SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010058556 Serositis Diseases 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 2
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000008050 Total Bilirubin Reagent Methods 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 125000004183 alkoxy alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000005055 alkyl alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 230000003460 anti-nuclear Effects 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 2
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical compound NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- QFWPJPIVLCBXFJ-UHFFFAOYSA-N glymidine Chemical compound N1=CC(OCCOC)=CN=C1NS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 QFWPJPIVLCBXFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 2
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000036732 histological change Effects 0.000 description 2
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 2
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 2
- 210000002602 induced regulatory T cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 2
- VEDOEEQGVQXXCI-UHFFFAOYSA-N methyl 4-[(pyridin-2-ylamino)methyl]benzoate Chemical compound C1=CC(C(=O)OC)=CC=C1CNC1=CC=CC=N1 VEDOEEQGVQXXCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FEIOASZZURHTHB-UHFFFAOYSA-N methyl 4-formylbenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(C=O)C=C1 FEIOASZZURHTHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- SEVSMVUOKAMPDO-UHFFFAOYSA-N para-Acetoxybenzaldehyde Natural products CC(=O)OC1=CC=C(C=O)C=C1 SEVSMVUOKAMPDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008823 permeabilization Effects 0.000 description 2
- PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N phorbol 13-acetate 12-myristate Chemical compound C([C@]1(O)C(=O)C(C)=C[C@H]1[C@@]1(O)[C@H](C)[C@H]2OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)C(CO)=C[C@H]1[C@H]1[C@]2(OC(C)=O)C1(C)C PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 2
- QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N (2R)-2-hydroxy-2-phenylacetic acid Chemical compound O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1.O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1 QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N 0.000 description 1
- 125000006273 (C1-C3) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006376 (C3-C10) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- PVOAHINGSUIXLS-UHFFFAOYSA-N 1-Methylpiperazine Chemical compound CN1CCNCC1 PVOAHINGSUIXLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WGCYRFWNGRMRJA-UHFFFAOYSA-N 1-ethylpiperazine Chemical compound CCN1CCNCC1 WGCYRFWNGRMRJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 1-methylsulfonylpiperidin-4-one Chemical compound CS(=O)(=O)N1CCC(=O)CC1 RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BAXOFTOLAUCFNW-UHFFFAOYSA-N 1H-indazole Chemical compound C1=CC=C2C=NNC2=C1 BAXOFTOLAUCFNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004215 2,4-difluorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C(F)C([H])=C1F 0.000 description 1
- ICSNLGPSRYBMBD-UHFFFAOYSA-N 2-aminopyridine Chemical compound NC1=CC=CC=N1 ICSNLGPSRYBMBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC=N1 BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSWICNJIUPRZIK-UHFFFAOYSA-N 2-piperideine Chemical compound C1CNC=CC1 VSWICNJIUPRZIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CDBAEFXTCRKJPZ-UHFFFAOYSA-N 3,3-difluoroazetidine;hydron;chloride Chemical compound Cl.FC1(F)CNC1 CDBAEFXTCRKJPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QZVQQUVWFIZUBQ-UHFFFAOYSA-N 3-fluoroaniline Chemical compound NC1=CC=CC(F)=C1 QZVQQUVWFIZUBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZESZAIOGACKOMB-UHFFFAOYSA-N 4-(bromomethyl)-3-fluorobenzonitrile Chemical compound FC1=CC(C#N)=CC=C1CBr ZESZAIOGACKOMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VQVLUVJNDZLDPZ-UHFFFAOYSA-N 4-[[3-(hydroxymethyl)-N-(morpholine-4-carbonyl)anilino]methyl]benzoic acid Chemical compound OCC1=CC=CC(=C1)N(CC1=CC=C(C=C1)C(O)=O)C(=O)N1CCOCC1 VQVLUVJNDZLDPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 239000012103 Alexa Fluor 488 Substances 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 229920000945 Amylopectin Polymers 0.000 description 1
- 235000019737 Animal fat Nutrition 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 1
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 206010003671 Atrioventricular Block Diseases 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710098275 C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-YMDCURPLSA-N D-galactopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-YMDCURPLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N D-glucopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 235000019739 Dicalciumphosphate Nutrition 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 208000010271 Heart Block Diseases 0.000 description 1
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 244000017020 Ipomoea batatas Species 0.000 description 1
- 235000002678 Ipomoea batatas Nutrition 0.000 description 1
- 206010023232 Joint swelling Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M Methylprednisolone sodium succinate Chemical compound [Na+].C([C@@]12C)=CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@](O)(C(=O)COC(=O)CCC([O-])=O)CC[C@H]21 FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M 0.000 description 1
- 101100013967 Mus musculus Gata3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100206411 Mus musculus Tgfb2 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010029719 Nonspecific reaction Diseases 0.000 description 1
- 208000007117 Oral Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 241000609499 Palicourea Species 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N R-2-phenyl-2-hydroxyacetic acid Natural products OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008680 RAR-related orphan receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N Thiazole Chemical compound C1=CSC=N1 FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 235000010724 Wisteria floribunda Nutrition 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000009692 acute damage Effects 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N anhydrous glutaric acid Natural products OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 1
- 239000000022 bacteriostatic agent Substances 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-N bromic acid Chemical compound OBr(=O)=O SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004970 cd4 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000002458 cell surface marker Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 238000001218 confocal laser scanning microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 description 1
- 239000006046 creatine Substances 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K dicalcium phosphate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038472 dicalcium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 229910000390 dicalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine Chemical group C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- MVPICKVDHDWCJQ-UHFFFAOYSA-N ethyl 3-pyrrolidin-1-ylpropanoate Chemical compound CCOC(=O)CCN1CCCC1 MVPICKVDHDWCJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 239000010685 fatty oil Substances 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 1
- 102000057041 human TNF Human genes 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940071870 hydroiodic acid Drugs 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 229940124589 immunosuppressive drug Drugs 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229910001410 inorganic ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 229960002510 mandelic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- NLWBJPPMPLPZIE-UHFFFAOYSA-N methyl 4-(bromomethyl)benzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(CBr)C=C1 NLWBJPPMPLPZIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004584 methylprednisolone Drugs 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- QPDOQKLHOCJFRM-UHFFFAOYSA-N n-(2,4-difluorophenyl)-n-[[4-(hydroxycarbamoyl)phenyl]methyl]-4-methylpiperazine-1-carboxamide Chemical compound C1CN(C)CCN1C(=O)N(C=1C(=CC(F)=CC=1)F)CC1=CC=C(C(=O)NO)C=C1 QPDOQKLHOCJFRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- YQUVCSBJEUQKSH-UHFFFAOYSA-N protochatechuic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 YQUVCSBJEUQKSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 229940045902 sodium stearyl fumarate Drugs 0.000 description 1
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- WKOLLVMJNQIZCI-UHFFFAOYSA-N vanillic acid Chemical compound COC1=CC(C(O)=O)=CC=C1O WKOLLVMJNQIZCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TUUBOHWZSQXCSW-UHFFFAOYSA-N vanillic acid Natural products COC1=CC(O)=CC(C(O)=O)=C1 TUUBOHWZSQXCSW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/397—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having four-membered rings, e.g. azetidine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
- A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
- A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
- A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Представленная группа изобретений относится к области медицины и фармацевтики, а именно, к применению соединения, представленного формулой I или его фармацевтически приемлемой соли в эффективном количестве для предупреждения или лечения волчанки: где A представляет собой , каждый из Xa и Xb независимо представляет собой CH, каждый из L1 и L2 независимо представляет собой водород или галоген, Q представляет собой C(=O), Y выбран из следующей группы: , M представляет собой C, N или O, где в этом случае, когда M представляет собой C, l и m равны 1; когда M представляет собой N, l равен 1 и m равен 0; и когда M представляет собой O, l и m равны 0, каждый из Ra1 и Ra2 независимо представляет собой водород; -C1-4 алкил с прямой или разветвленной цепью; или галоген; n представляет собой целое число, равное 0, 1 или 2, Rb представляет собой водород; Z выбран из следующей группы: , каждый из Pa и Pb независимо представляет собой водород; -C1-4 алкил с прямой или разветвленной цепью, где он является незамещенным или по меньшей мере один атом водорода замещен галогеном; галоген; или -CF3. Кроме того, описан способ лечения волчанки, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения, представленного следующей формулой I, или его фармацевтически приемлемой соли, а также применение соединения, представленного следующей формулой I, или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения волчанки. Технический результат: обеспечено применение соединений, демонстрирующих превосходный эффект в предупреждении или лечении волчанки. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 21 ил., 4 табл., 15 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для предупреждения или лечения волчанки, содержащей соединение, представленное формулой I, его оптический изомер или его фармацевтически приемлемую соль в качестве эффективного компонента, а также к способу лечения с использованием соединения, и к применению соединения дли изготовления лекарственного средства для лечения волчанки.
Уровень техники
Волчанка представляет собой аутоиммунное заболевание, обусловленное антителами, атакующими соединительные ткани, а также ассоциированное с продуцированием антинуклеарных антител, т.е. циркулирующего иммунного комплекса, а также с активацией системы комплемента. Это заболевание является системным, так что оно может возникнуть во всех системах органов и также может вызывать тяжелое повреждение тканей. У пациентов с волчанкой также могут продуцироваться аутоантитела, имеющие специфичность против ДНК, против Ro и против тромбоцитов, и они могут вызывать возникновение заболеваний, таких как гломерулонефрит, артрит, серозит, полная блокада сердца новорожденных или гематологическая аномалия.
В отсутствии лечения волчанка может стать смертельной, поскольку она начинает атаковать кожу и суставы и переходит в атаку даже внутренних органов, например легких, сердца и почек, из которых заболевание почек является наиболее опасным. Повреждение почек, которое определяют по величине протеинурии в моче, является одной из частей заболевания в виде острого повреждения, ассоциированных с патогенностью волчанки, и оно составляет 50% или более смертности и частоты случаев заболевания волчанкой.
В настоящее время отсутствует надежное лечение для пациентов с волчанкой. С практической точки зрения врачи обычно применяют ряд иммунодепрессантов, например, высокую дозу кортикостероида, преднизона, азатиоприна или циклофосфамида, где существует проблема, состоящая в том, что значительное количество таких лекарственных средств имеют потенциально вредоносные побочные эффекты для пациентов, проходящих лечение.
Ссылки уровня техники
Патентный документ
Публикация патентной заявки Кореи № 2014-0128886
Описание
Техническая проблема
Задачей настоящего изобретения является предоставление фармацевтической композиции для предупреждения или лечения волчанки, содержащей соединение, представленное следующей формулой I, его оптический изомер или его фармацевтически приемлемую соль в качестве эффективного компонента.
Другой задачей настоящего изобретения является предоставление способа лечения волчанки, где способ включает введение терапевтически эффективного количества указанного соединения.
Другой задачей настоящего изобретения является обеспечение применения соединения для изготовления лекарственного средства для лечения волчанки.
Техническое решение
Оно подробно описано ниже. Между тем, каждое описание и форма вариантов осуществления, описанных в настоящем описании, может быть использована для других описаний и форм вариантов осуществления, соответственно. Иными словами, все комбинации различных элементов, описанных в настоящем описании, входят в настоящего изобретения. Также не предусматривается, что объем настоящего изобретения ограничивается конкретным описанием, описанным ниже.
Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для предупреждения или лечения волчанки, содержащей соединение, представленное следующей формулой I, его оптический изомер или его фармацевтически приемлемую соль в качестве эффективного компонента:
[Формула I]
где
каждый из Xa и Xb независимо представляет собой CH или N,
каждый L1 и L2 независимо представляет собой водород, галоген, -CF3 или -C1-3 алкил с прямой или разветвленной цепью,
Q представляет собой C(=O), S(=O)2, S(=O) или C(=NH),
Y выбран из следующей группы:
M представляет собой C, N, O, S или S(=O)2, где в этом случае, когда M представляет собой C, l и m равны 1; когда M представляет собой N, l равен 1 и m равен 0; и когда M представляет собой O, S или S(=O)2, l и m равны 0,
каждый из Ra1 и Ra2 независимо представляет собой водород; гидрокси; -C1-4 алкил с прямой или разветвленной цепью, который является незамещенным или замещен по меньшей мере одним галогеном; -C1-4 спирт с прямой или разветвленной цепью; бензгидрил; -C1-4 алкил с прямой или разветвленной цепью, который замещен насыщенным или ненасыщенным 5-7-членным гетероциклическим соединением, содержащим 1-3 гетероатома из N, O или S в качестве членов кольца, где в этом случае гетероциклическое соединение может быть незамещенным или по меньшей мере один атом водорода может быть необязательно замещен OH, OCH3, CH3, CH2CH3 или галогеном; насыщенное или ненасыщенное 5-7-членное гетероциклическое соединение, содержащее 1-3 гетероатома из N, O или S в качестве представителей кольца, где в этом случае гетероциклическое соединение может быть незамещенным или по меньшей мере один атом водорода может быть необязательно замещен OH, OCH3, CH3, CH2CH3 или галогеном; фенил, где он является незамещенным или по меньшей мере один атом водорода замещен галогеном, C1-4 алкокси, C1-2 алкилом или гидрокси; бензил, где он является незамещенным или по меньшей мере один атом водорода замещен галогеном, C1-4 алкокси, C1-2 алкилом или гидрокси; -S(=O)2CH3; галоген; -C1-6 алкокси с прямой или разветвленной цепью; -C2-6 алкоксиалкил; -C(=O)Rx, где Rx представляет собой C1-3 алкил с прямой или разветвленной цепью или C3-10 циклоалкил; , где каждый из Rc и Rd независимо представляет собой водород, C1-3 алкил с прямой или разветвленной цепью; и или
n представляет собой целое число, равное 0, 1 или 2,
Rb представляет собой водород; гидрокси; -C1-6 алкил с прямой или разветвленной цепью, где он является незамещенным или по меньшей мере один атом водорода замещен галогеном; -C(=O)CH3; -C1-4 гидроксиалкил с прямой или разветвленной цепью; -C1-6 алкокси с прямой или разветвленной цепью; -C2-6 алкоксиалкил с прямой или разветвленной цепью; -CF3; галоген или ,
каждый из Re и Rf независимо представляет собой водород или -C1-3 алкил с прямой или разветвленной цепью,
Z выбран из следующей группы:
каждый из Pa и Pb независимо представляет собой ; водород; гидрокси; -C1-4 алкил с прямой или разветвленной цепью, где он является незамещенным или по меньшей мере один атом водорода замещен галогеном; галоген; -CF3; -OCF3; -CN; -C1-6 алкокси с прямой или разветвленной цепью; -C2-6 алкилалкокси с прямой или разветвленной цепью; -CH2F или -C1-3 спирт,
где представляет собой фенил, пиридин, пиримидин, тиазол, индол, индазол, пиперазин, хинолин, фуран, тетрагидропиридин, пиперидин или кольцо, выбранное из следующей группы:
каждый из x, y и z независимо представляет собой целое число, равное 0 или 1,
каждый из Rg1, Rg2 и Rg3 независимо представляет собой водород; гидрокси; -C1-3 алкил; -CF3; -C1-6 алкокси с прямой или разветвленной цепью; -C2-6 алкилалкокси с прямой или разветвленной цепью; -C(=O)CH3; -C1-4 гидроксиалкил с прямой или разветвленной цепью; -N(CH3)2; галоген; фенил; -S((=O)2)CH3; или выбран из следующей группы:
Соединение, представленное формулой I, в соответствии с настоящим изобретением может представлять собой соединение, представленное следующей формулой Ia:
[Формула Ia]
где
каждый из L1 и L2 независимо представляет собой водород или галоген,
Z представляет собой фенил или пиридинил, где по меньшей мере один атом водорода фенила или пиридинила может быть замещен галогеном, CF3 или CF2H.
В соответствии с конкретным вариантом осуществления настоящего изобретения соединение, представленное следующей формулой Ia, представляет собой соединение, описанное в таблице ниже:
Таблица 1
В рамках настоящего изобретения, соединение, представленное следующей формулой I, можно получать способом, описанным в публикации нерассмотренной патентной заявки Кореи № 2014-0128886, но он не ограничивается этим.
В рамках настоящего изобретения фармацевтически приемлемая соль означает соль, обычно используемую в медицинской промышленности, например, соль неорганического иона, полученную из кальция, калия, натрия, магния и т.п.; соль неорганической кислоты, полученную из хлористоводородной кислоты, азотной кислоты, фосфорной кислоты, бромной кислоты, йодной кислоты, перхлорной кислоты, серной кислоты и т.п.; соль органической кислоты, полученную из уксусной кислоты, трифторуксусной кислоты, лимонной кислоты, малеиновой кислоты, янтарной кислоты, щавелевой кислоты, бензойной кислоты, виннокаменной кислоты, фумаровой кислоты, миндальной кислоты, пропионовой кислоты, лимонной кислоты, молочной кислоты, гликолевой кислоты, глюконовой кислоты, галактуроновой кислоты, глутаминовой кислоты, глутаровой кислоты, глюкуроновой кислоты, аспарагиновой кислоты, аскорбиновой кислоты, угольной кислоты, ванилиновой кислоты, йодистоводородной кислоты и т.д.; соль сульфоновой кислоты, полученную из метансульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты, бензолсульфоновой кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, нафталинсульфоновой кислоты и т.п.; соль аминокислоты, полученную из глицина, аргинина, лизина и т.д.; соль амина, полученную из триметиламина, триэтиламина, аммиака, пиридина, пиколина и т.д., и т.п., однако типы солей в рамках настоящего изобретения не ограничиваются этими перечисленными солями.
Как используют в рамках изобретения, термин "волчанка" относится к аутоиммунному заболеванию, связанному с антителами, атакующими соединительные ткани, где оно включает хроническое воспалительное аутоиммунное заболевание, характеризующееся присутствием аутоантител, сыпью, язвами полости рта, серозитом, неврологическим нарушением, низким количество клеток крови, болью в суставах и опуханием. Если нет иных указаний, термин "волчанка" в рамках настоящего изобретения имеет общепринятое значение, используемое в области техники, к которой относится настоящее изобретение. В рамках настоящего изобретения волчанка включает системную красную волчанку (SLE), системную волчанку, дискоидную волчанку, индуцированную лекарственными средствами волчанку, волчанку новорожденных и т.п., однако, кроме того, она может включать различные дополнительные типы волчанки неограничивающим образом. Также волчанка может вызывать хронический нефрит, такой как волчаночный нефрит или гломерулонефрит.
В рамках настоящего изобретения термин "системная красная волчанка (SLE)" имеет общепринятое значение, используемое в области техники, к которой относится настоящее изобретение. SLE представляет собой полифилетическое аутоиммунное заболевание, при котором появляются антинуклеарные антитела, включающие антитела против дцДНК, и продуцируется комплекс антиген-антитело и оседает с мелких сосудах, таким образом, возможно вызывая воспаление и повреждение различных органов, включая базальную мембрану кожи или почек.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения было идентифицировано, что соединения 255, 280, 374, 416, 461, 476, 500, 530 или 532, соответствующие формуле Ia, имели превосходный эффект подавления продуцирования in vitro молекул воспаления, таких как TNFα и т.д. (фиг.1), подавления пролиферации реактивных T-клеток (фиг.2) и улучшения функции регуляторных T-клеток (фиг.3).
Также было идентифицировано, что соединение 374 в соответствии с настоящим изобретением улучшало выживаемость мышей с заболеванием SLE (фиг.5), снижало встречаемость протеинурии (фиг.6), концентрацию антител против дцДНК (фиг.8) и уровень инфильтрации IgG и C3 в почках (фиг.12), снижало уровень сывороточных цитокинов IL-10, IL-12, IL-15, IL-17A, TNFα и IL-22 (фиг.13), снижало уровень CXCL10 и CCL2 (фиг.14), увеличивало уровень TGF-β (фиг.13) и снижало долю CD4-CD8- двойных негативных T-клеток, соотношение уровня CD4+CD8- клеток и уровня CD4-CD8+ клеток (фиг.15), соотношение CD4+T-bet+/CD4+GATA3+ (фиг.16), соотношение уровня CD4+CD25+ клеток и уровня CD4+ клеток (фиг.17) и уровня CD138+ клеток (фиг.19).
Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением, кроме того, может содержать по меньшей мере один тип фармацевтически приемлемого носителя, в дополнение к соединению, соответствующему формуле I выше, его оптическому изомеру или его фармацевтически приемлемой соли для цели введения. В качестве фармацевтически приемлемого носителя можно использовать физиологический раствор, стерилизованную воду, раствор Рингера, буферный солевой раствор, раствор декстрозы, раствор мальтодекстрина, глицерин, этанол и комбинацию по меньшей мере из одного их компонента, где также при необходимости могут быть добавлены другие общепринятые добавки, такие как антиоксидант, буферный раствор, бактериостатическое средство и т.д. Также фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть составлена в виде инъекционной дозированной формы, такой как водный раствор, суспензия, эмульсия и т.д., пилюля, капсула, гранула или таблетка, таким образом, чтобы к ним дополнительно добавлять разбавитель, диспергирующее средство, поверхностно-активное вещество, связующее вещество и смазывающее вещество. Таким образом, композиция в соответствии с настоящим изобретением может представлять собой пластырь, жидкое лекарственное средство, пилюлю, капсулу, гранулу, таблетку, суппозиторий и т.д. Эти препараты могут быть составлены посредством общепринятого способа, используемого для составления в области техники, к которой относится настоящее изобретение, в зависимости от каждого заболевания и/или компонента, или способа, описанного в Remington's Pharmaceutical Science (последняя версия), Mack Publishing Company, Easton PA.
Неограничивающим примером препарата для перорального введения с использованием фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением может быть таблетка, троше, пастилка, растворимая в воде суспензия, масляная суспензия, готовый порошок, гранула, эмульсия, твердая капсула, мягкая капсула, сироп, эликсир и т.п. Для составления фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением в препарат для перорального введения также можно использовать связующее вещество, такое как лактоза, сахароза, сорбит, маннит, крахмал, амилопектин, целлюлоза, желатин и т.п.; эксципиент, такой как дикальцийфосфат и т.д.; дезинтегрирующее средство, такое как кукурузный крахмал, сладкий картофельный крахмал и т.п.; смазывающее вещество, такое как стеарат магния, стеарат кальция, стеарилфумарат натрия, полиэтиленгликоль, воск и т.п., и т.д., и также можно использовать подсластитель, вкусовую добавку, сироп и т.д. Более того, в случае капсулы, кроме того, можно использовать жидкий носитель, такой как жирное масло и т.д., в дополнение к вышеупомянутым материалам.
Неограничивающим примером парентерального препарата с использованием фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением может быть инъекционный раствор, суппозиторий, порошок для ингаляции, препарат аэрозоля для распыления, мазь, порошок для нанесения, масло, крем и т.д. Для составления фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением в препарат для парентерального введения можно использовать стерилизованный водный раствор, неводный растворитель, суспензию, эмульсию, лиофилизированный препарат, наружный препарат и т.д. В качестве указанного неводного растворителя и суспензии можно использовать растительное масло, такое как пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и оливковое масло; инъекционный сложный эфир, такой как этилолеат; и т.д.
В случае составления фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением в виде инъекционного раствора, фармацевтическую композицию в соответствии с настоящим изобретением можно получать в виде раствора или суспензии таким образом, чтобы смешивать композицию по изобретению со стабилизатором или буфером, а затем раствор или суспензию можно составлять в виде единичной дозированной формы в ампуле или флаконе.
В случае составления фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением в виде препарата аэрозоля, композицию по изобретению можно смешивать с добавками, включая пропеллент и т.д., так чтобы диспергированный в воде концентрат или влажный порошок мог диспергироваться.
В случае составления фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением в виде мази, крема, порошка для нанесения, масла, наружного препарата для кожи и т.д. композицию по изобретению можно составлять в виде препарата так, чтобы в качестве носителя использовался животный жир, растительное масло, воск, парафин, крахмал, трагакант, производное целлюлозы, полиэтиленгликоль, силикон, бентонит, диоксид кремния, тальк, оксид цинка, и т.д.
Суточная дозировка соединения, соответствующего формуле I, в соответствии с настоящим изобретением, его оптического изомера или его фармацевтически приемлемой соли может находиться в диапазоне, например, приблизительно от 0,1 до 10000 мг/кг, в диапазоне приблизительно от 1 до 8000 мг/кг, в диапазоне приблизительно от 5 до 6000 мг/кг, или в диапазоне приблизительно от 10 до 4000 мг/кг, предпочтительно в диапазоне приблизительно от 50 до 2000 мг/кг, но не ограничиваясь ими, где такую дозировку также можно вводить один раз в сутки или разделять для введения несколько раз в сутки.
Фармацевтически эффективное количество и эффективная дозировка фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением могут быть диверсифицированы посредством способа составления фармацевтической композиции в виде препарата, пути введения, времени введения и/или способа введения и т.д., и также они могут быть диверсифицированы в зависимости от различных факторов, включая тип и степень реакций, которые намереваются достигнуть посредством введения фармацевтической композиции, тип индивидуума, которому намереваются проводить введение, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, симптом или тяжесть заболевания, пол, рацион, экскрецию компонент других лекарственных композиций, используемых вместе в то же время или в другое время для соответствующего индивидуума, и т.д., а также других известных факторов, хорошо известных в области медицины, где специалисты в данной области могут без труда определить и назначить дозировку, эффективную для данного лечения.
В случае введения фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением, ее можно вводить один раз в сутки или разделять для введения несколько раз в сутки. Фармацевтическую композицию в соответствии с настоящим изобретением можно вводить в качестве отдельного терапевтического средства или в комбинации с другими терапевтическими средствами, а также ее можно вводить последовательно или одновременно с общепринятым терапевтическим средством. Учитывая все факторы, описанные выше, фармацевтическую композицию в соответствии с настоящим изобретением можно вводить в количестве, которое может демонстрировать максимальный эффект при минимальном количестве без какого-либо побочного эффекта, где такое количество может быть без труда определено специалистами в области, к которой относится настоящее изобретение.
Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением может демонстрировать превосходный эффект, когда ее используют отдельно, однако, кроме того, ее можно использовать в комбинации с различными способами, такими как гормональная терапия, медикаментозное лечение и т.д. для повышения терапевтической эффективности.
Настоящее изобретение также относится к способу лечения волчанки, где способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения, соответствующего формуле I выше, его изомера или его фармацевтически приемлемой соли индивидууму, нуждающемуся в этом.
Как используют в рамках изобретения, термин "терапевтически эффективное количество" относится к количеству соединения, соответствующего формуле I выше, которое является эффективным для лечения волчанки.
В способе лечения в соответствии с настоящим изобретением подходящую общую суточную дозировку соединения, соответствующего формуле I выше, его изомера или его фармацевтически приемлемой соли может определять лечащий врач в рамках корректного медицинского решения, и она может находиться в диапазоне, например, приблизительно от 0,1 до 10000 мг/кг, в диапазоне приблизительно от 1 до 8000 мг/кг, в диапазоне приблизительно от 5 до 6000 мг/кг, или в диапазоне приблизительно от 10 до 4000 мг/кг, и предпочтительно такую дозу в диапазоне приблизительно 50-2000 мг/кг можно вводить один раз в сутки или разделять для введения несколько раз в сутки. Однако для цели настоящего изобретения предпочтительно, чтобы определенное терапевтически эффективное количество для определенного пациента применялось по-разному в зависимости от различных факторов, включающих тип и степень реакций, которые намереваются достигнуть, конкретную композицию, включая в некоторых случаях наличие или отсутствие применения других препаратов, возраст пациента, массу тела, общее состояние здоровья, пол и рацион, время введения, путь введения и скорость секреции композиции, период лечения и лекарственное средство, используемое вместе или одновременно с конкретной композицией, а также другие сходные факторы, хорошо известные в области медицины.
Способ лечения волчанки в соответствии с настоящим изобретением включает не только борьбу с самим заболеванием перед проявлением его симптомов, но также ингибирование или предотвращение таких симптомов путем введения соединения, соответствующего формуле I выше. При управлении течением заболевания профилактическая или терапевтическая доза определенного активного компонента может варьироваться в зависимости от характеристик и тяжести заболевания или состояния, и пути, посредством которого активный компонент вводят. Дозы и их частота могут варьироваться в зависимости от возраста, массы тела и реакций конкретного пациента. Подходящая доза и способ применения могут быть без труда выбраны специалистами в данной области, естественно, с учетом таких факторов. Также способ лечения волчанки в соответствии с настоящим изобретением, кроме того, может включать введение терапевтически эффективной дозы дополнительного активного вещества, которое может быть полезным при лечении заболевания, вместе с соединением, соответствующим формуле I выше, где дополнительное активное вещество может демонстрировать синергический эффект или аддитивный эффект вместе с соединением формулы I выше.
Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы I выше, его изомера или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения волчанки.
Соединение, соответствующее формуле I, выше, для изготовления лекарственного средства можно комбинировать с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем, носителем и т.д., или можно получать в виде составного средства с другими активными веществами, таким образом, обеспечивая синергическое действие.
Положения, упомянутые в отношении фармацевтической композиции по изобретению, способа лечения и применения, применимы в равной степени, если они не противоречат друг другу.
Преимущественные эффекты
Фармацевтическая композиция, содержащая соединение, соответствующая формуле I в соответствии с настоящим изобретением, его оптический изомер или его фармацевтически приемлемую соль, может демонстрировать превосходный эффект лечения волчанки, так что фармацевтическую композицию можно широко использовать для предупреждения или лечения волчанки.
Описание чертежей
На фиг.1 представлены результаты определения эффекта фармацевтической композиции по изобретению на подавление секреции TNFα.
На фиг.2 представлены результаты определения эффекта фармацевтической композиции по изобретению на подавление пролиферации реактивных T-клеток.
На фиг.3 представлены результаты определения эффекта фармацевтической композиции по изобретению на изменение функции регуляторных T-клеток.
На фиг.4 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на восстановление после снижения массы тела в модели заболевания на животных.
На фиг.5 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на повышение выживаемости в модели заболевания на животных.
На фиг.6 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на снижение встречаемости протеинурии в модели заболевания на животных.
На фиг.7 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на снижение величины UP/C в модели заболевания на животных.
На фиг.8 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на снижение сывороточной концентрации антител против дцДНК в модели заболевания на животных.
На фиг.9 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на снижение сывороточной концентрации BUN и креатинина в модели заболевания на животных.
На фиг.10 представлено изображение окрашенных тканей почки в модели заболевания на животных.
На фиг.11 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на гистологические изменения в почках в модели заболевания на животных.
На фиг.12 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на снижение отложений IgG и C3 в почках в модели заболевания на животных.
На фиг.13 представлено изменение профилей цитокинов в сыворотке посредством фармацевтической композиции по изобретению в модели заболевания на животных.
На фиг.14 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на снижение сывороточной концентрации CXCL10 и CCL2 в модели заболевания на животных.
На фиг.15 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на соотношения CD4 и CD8 T-клеток в модели заболевания на животных.
На фиг.16 и 17 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на CD4+ CD25+ T-клетки в модели заболевания на животных.
На фиг.18 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на экспрессию основных регуляторов Treg, Th17, Th1, Th2 клеток в модели заболевания на животных.
На фиг.19 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на CD138+ клетки в модели заболевания на животных.
На фиг.20 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на пре-B и про-B клетки в костном мозге в модели заболевания на животных.
На фиг.21 представлен эффект фармацевтической композиции по изобретению на уровень изотипов иммуноглобулинов в модели заболевания на животных.
Способ осуществления изобретения
Далее настоящее изобретение будет описано подробнее в соответствии с примерами получения и вариантами осуществления. Однако эти примеры получения и варианты осуществления предоставлены только для иллюстрации настоящего изобретения и, таким образом, настоящее изобретение не ограничивается ими.
Соединения 255, 280, 374, 416, 461, 476, 500, 530 или 532 в соответствии с настоящим изобретением получали способом, описанным в публикации нерассмотренной патентной заявки Кореи № 2014-0128886, и конкретные примеры получения описаны ниже. Вновь названная формула в каждом примере получения упоминается в рамках только соответствующего примера получения, и формулы, упоминаемые по меньшей мере в двух примерах получения, используются независимо в каждом примере получения.
Пример получения 1. Синтез соединения 255 {N-(3-бромфенил)-N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)морфолин-4-карбоксамид}
[Стадия 1] Синтез метил 4-((N-(3-бромфенил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензоата
Метил 4-(((3-бромфенил)((4-нитрофенокси)карбонил)амино)метил)бензоат (1,5 г, 3,09 ммоль) растворяли в ацетонитриле (50 мл), а затем к нему медленно добавляли карбонат калия (1,28 г, 9,3 ммоль) и морфолин (0,40 мл, 4,64 ммоль). После этого температуру полученной смеси медленно повышали до 80°С, а затем полученную смесь перемешивали в течение трех часов при этой температуре. Температуру снижали до комнатной температуры, затем дополнительно добавляли диметилформамид (50 мл), затем температуру вновь повышали до 80°С, а затем полученную смесь перемешивали в течение пяти часов при этой температуре. После завершения реакции органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония три раза, затем сушили с использованием сульфата натрия и фильтровали, а затем фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Концентрат очищали посредством колоночной хроматографии (диоксид кремния; этилацетат/гексан=0-50%), с получением указанного в заголовке соединения (0,45 г, 33,6%) в виде прозрачного масла.
[Стадия 2] Синтез N-(3-бромфенил)-N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)морфолин-4-карбоксамида
Метил 4-((N-(3-бромфенил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензоат (0,05 г, 0,12 ммоль) растворяли в метаноле (2 мл), а затем медленно добавляли хлористоводородную соль гидроксиламина (0,040 г, 0,58 ммоль). После этого к полученной смеси добавляли гидроксид калия (0,065 г, 1,15 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение десяти минут, а затем добавляли гидроксиламин (50,0 масс.% водный раствор, 0,14 мл, 2,31 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение суток, затем органический растворитель концентрировали при пониженном давлении и нейтрализовывали добавлением 2 н хлористоводородной кислоты. Затем органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия три раза, а затем сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали. После этого фильтрат концентрировали при пониженном давлении, а затем концентрат очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=0-80%) с получением указанного в заголовке соединения (0,036 г, 72%) в белой твердой форме.
1H-ЯМР (400 МГц, CDCl3-d6) δ 7,63 (д, 2 H, J=7,8 Гц), 7,27-7,20 (м, 4 H), 7,13 (т, 1 H, J=7,8 Гц), 6,96 (д, 1 H, J=7,1 Гц), 4,83 (с, 2 H), 3,49 (уш. с, 4 H), 3,23 (уш. с, 4 H); MS (ESI) m/z 436 (M+ + H).
Пример получения 2. Синтез соединения 280 {N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)-N-(пиридин-2-ил)морфолин-4-карбоксамид}
[Стадия 1] Синтез метил 4-((пиридин-2-иламино)метил)бензоата
Пиридин-2-амин (0,2 г, 2,13 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), а затем к нему добавляли метил 4-формилбензоат (0,35 г, 2,13 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 минут, а затем к ней медленно добавляли цианоборгидрид натрия (0,13 г, 2,13 ммоль) и уксусную кислоту (0,12 мл. 2,13 ммоль), а затем перемешивали при комнатной температуре в течение пяти часов. Полученную смесь промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия три раза, затем органический слой сушили сульфатом натрия и фильтровали, а затем фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Концентрат очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=0-30%) с получением указанного в заголовке соединения (0,10 г, 19%) в виде прозрачного масла.
1H-ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,17 (д, 1 H, J=5,8 Гц), 8,06 (д, 2 H, J=8,4 Гц), 7,66 (т, 1 H, J=7,8 Гц), 7,44 (д, 2 H, J=8,0 Гц), 6,76 (т, 1 H, J=6,7 Гц), 6,58 (д, 1 H, J=8,6 Гц), 4,67 (д, 2 H, J=6,0 Гц), 3,92 (с, 3 H).
[Стадия 2] Синтез метил 4-((((4-нитрофенокси)карбонил)(пиридин-2-ил)амино)метил)бензоата
Метил 4-((пиридин-2-иламино)метил)бензоат (0,040 г, 0,16 ммоль) растворяли в диметилформамиде (3 мл), а затем медленно добавляли карбонат калия (0,046 г, 0,33 ммоль). После этого к полученной смеси добавляли 4-нитрофенилхлорформиат (0,037 г, 0,18 ммоль), а затем температуру полученной смеси медленно повышали до 50°C, а затем полученную смесь перемешивали в течение двух суток при этой температуре. После завершения реакции слой этилацетата промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония три раза, а затем органический слой сушили сульфатом натрия и фильтровали, а затем фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Концентрат очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=0-50%) с получением указанного в заголовке соединения (0,048 г, 71%) в виде желтого масла.
1H-ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,49-8,48 (м, 1 H), 8,24 (дд, 2 H, J=7,0, 2,2 Гц), 8,17 (дд, 2 H, J=7,2, 2,0 Гц), 8,00 (д, 2 H, J=8,4 Гц), 7,78 (т, 1 H, J=3,8 Гц), 7,44 (д, 2 H, J=8,0 Гц), 6,91 (дд, 2 H, J=7,3, 2,1 Гц), 5,39 (уш. с, 2 H), 3,92 (с, 3 H); MS (ESI) m/z 408 (M+ + H).
[Стадия 3] Синтез метил 4-((N-(пиридин-2-ил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензоата
Метил 4-((((4-нитрофенокси)карбонил)(пиридин-2-ил)амино)метил)бензоат (0,040 г, 0,098 ммоль) растворяли в диметилформамиде (5 мл), а затем медленно добавляли карбонат калия (0,040 г, 0,30 ммоль) и морфолин (0,013 мл, 0,15 ммоль). После этого температуру полученной смеси медленно повышали до 80°С, а затем полученную смесь перемешивали в течение трех часов при этой температуре. После завершения реакции полученную смесь промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония три раза, затем органический слой сушили сульфатом натрия и фильтровали, а затем фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Концентрат очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=0-50%) с получением указанного в заголовке соединения (0,022 г, 63%) в форме светло-желтого твердого вещества.
1H-ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,37-8,35 (м, 1 H), 7,95 (д, 2 H, J=8,4 Гц), 7,60-7,58 (м, 1 H), 7,47 (д, 2 H, J=8,4 Гц), 6,94-6,89 (м, 2 H), 5,13 (с, 2 H), 3,89 (с, 3 H), 3,53-3,51 (м, 4 H), 3,31-3,29 (м, 4 H).
[Стадия 4] Синтез N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)-N-(пиридин-2-ил)морфолин-4-карбоксамида
Метил 4-((N-(пиридин-2-ил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензоат (0,022 г, 0,062 ммоль) растворяли в MeOH (2 мл), а затем медленно добавляли хлористоводородную соль гидроксиламина (0,022 г, 0,31 ммоль). После этого к полученной смеси добавляли гидроксид калия (0,035 г, 0,62 ммоль), затем перемешивали при комнатной температуре в течение десяти минут, а затем добавляли гидроксиламин (50,0 масс.% водный раствор, 0,082 мл, 1,24 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение суток, а затем органический растворитель концентрировали при пониженном давлении и нейтрализовывали добавлением 2 Н HCl, а затем промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия три раза, а затем органический слой сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (0,007 г, 32%) в форме белого твердого вещества.
1H-ЯМР (400 МГц, MeOD-d3) δ 8,32 (д, 1 H, J=3,6 Гц), 7,72 (т, 1 H, J=6,6 Гц), 7,67 (д, 2 H, J=8,2 Гц), 7,48 (д, 2 H, J=8,2 Гц), 7,08-7,01 (м, 2 H), 5,08 (с, 2 H), 3,52 (т, 4 H, J=4,8 Гц), 3,29 (т, 4 H, J=4,8 Гц); MS (ESI) m/z 357 (M+ + H).
Пример получения 3. Синтез соединения 374 {N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)-N-(3-(трифторметил)фенил)морфолин-4-карбоксамид}
[Стадия 1] Синтез метил 4-((3-(трифторметил)фениламино)метил)бензоата
3-(трифторметил)бензоламин (0,30 г, 1,84 ммоль) и карбонат калия (0,76 г, 5,53 ммоль) растворяли в диметилформамиде (DMF) (5 мл), а затем добавляли метил 4-(бромметил)бензоат (0,42 г, 1,84 ммоль). Полученную смесь подвергали реакции при комнатной температуре в течение суток и разбавляли этилацетатом. Реагирующие вещества промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили безводным сульфатом магния и фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=20%) с получением указанного в заголовке соединения (0,37 г, 65%).
1H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7,93 (д, 2 H, J=8,3 Гц), 7,49 (д, 2 H, J=8,3 Гц), 7,24 (т, 1 H, J=7,9 Гц), 6,88-6,78 (м, 4 H), 4,42 (д, 2 H, J=6,1 Гц), 3,83 (с, 3H), MS (ESI) m/z 310 (M+ + H).
[Стадия 2] Синтез метил 4-((((4-нитрофенокси)карбонил)(3-(трифторметил)фенил)амино)метил)бензоата
Метил 4-((3-(трифторметил)фениламино)метил)бензоат (0,26 г, 0,82 ммоль) и 4-нитрофенилкарбонохлоридат (0,33 г, 1,65 ммоль) растворяли в ацетонитриле (10 мл), а затем добавляли карбонат калия (0,34 г, 2,47 ммоль). Полученную смесь подвергали реакции при комнатной температуре в течение суток и разбавляли этилацетатом. Реагирующие вещества промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=20%) с получением указанного в заголовке соединения (0,35 г, 89%) в виде бесцветного масла.
1H-ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8,20 (д, 2 H, J=10,2 Гц), 8,01 (д, 2 H, J=7,8 Гц), 7,56-7,46 (м, 3H), 7,35 (д, 3 H, J=8,0 Гц), 7,26 (д, 2 H, J=8,1 Гц), 5,01 (уш. с, 2H), 3,90 (с, 3H).
[Стадия 3] Синтез метил 4-((N-(3-(трифторметил)фенил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензоата
Метил 4-((((4-нитрофенокси)карбонил)(3-(трифторметил)фенил)амино)метил)бензоат (0,29 г, 0,60 ммоль) растворяли в диметилформамиде (10 мл), а затем добавляли карбонат калия (0,25 г, 1,81 ммоль) и морфолин (0,05 мл, 0,60 ммоль). Полученную смесь подвергали реакции при 60°C в течение двух суток, а затем разбавляли насыщенным раствором хлорида аммония. Проводили экстракцию этилацетатом, а затем экстракт сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=50%) с получением указанного в заголовке соединения (0,15 г, 60%).
1H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7,97 (д, 2 H, J=8,2 Гц), 7,43-7,32 (м, 5H), 7,20 (д, 1 H, J=8,0 Гц), 4,94 (с, 2H), 3,90 (с, 3H), 3,50 (т, 4 H, J=4,8 Гц), 3,25 (т, 4 H, J=4,8 Гц); MS (ESI) m/z 423 (M+ + H).
[Стадия 4] Синтез N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)-N-(3-(трифторметил)фенил)морфолин-4-карбоксамида
Метил 4-((N-(3-(трифторметил)фенил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензоат (0,15 г, 0,36 ммоль) растворяли в метаноле (5 мл), затем добавляли водный раствор гидроксиламина (50 масс.%, 1 мл) и гидроксид калия (0,10 г, 1,81 ммоль), а затем перемешивали в течение ночи. После завершения реакции метанол отгоняли при пониженном давлении и удаляли, а затем проводили экстракцию этилацетатом и водой, а затем собирали. Полученный экстракт сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток перемешивали в диэтиловом эфире, а затем получали твердый продукт, фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (0,082 г, 54%) в виде белого твердого вещества.
1H-ЯМР (400 МГц, MeOD-d3) δ 11,14 (уш. с, 1 H), 8,99 (уш. с, 1 H), 7,85 (д, 2 H, J=8,0 Гц), 7,66-7,27 (м, 6 H), 4,94 (с, 2 H), 3,41 (с, 2 H), 3,15 (с, 2 H). MS (ESI) m/z 424 (M+ + H).
Пример получения 4. Синтез соединения 416 {N-(2,4-дифторфенил)-N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)-4-метилпиперазин-1-карбоксамид}
[Стадия 1] Синтез метил 4-((N-(2,4-дифторфенил)-4-метилпиперазин-1-карбоксамидо)метил)бензоата
Метил 4-(((2,4-дифторфенил)((4-нитрофенокси)карбонил)амино)метил)бензоат (0,50 г, 1,13 ммоль) и 1-метилпиперазин (0,126 мл, 1,13 ммоль) растворяли в диметилформамиде (10 мл), а затем нагревали и перемешивали при 60°C в течение двух суток. Диметилформамид удаляли при пониженном давлении, затем в полученную реакционную смесь наливали воду, а затем проводили экстракцию этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили посредством безводного сульфата магния, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; метанол/дихлорметан=5%) и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (0,46 г, 101%) в виде желтого масла.
[Стадия 2] Синтез N-(2,4-дифторфенил)-N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)-4-метилпиперазин-1-карбоксамида
Метил 4-((N-(2,4-дифторфенил)-4-метилпиперазин-1-карбоксамидо)метил)бензоат (0,22 г, 0,545 ммоль) растворяли в метаноле (20 мл), затем добавляли хлористоводородную соль гидроксиламина (0,189 г, 2,73 ммоль) и гидроксид калия (0,306 г, 5,45 ммоль) и перемешивали, затем по каплям добавляли гидроксиламин (50 масс.% водный раствор; 0,701 мл, 10,9 ммоль), а затем перемешивали при комнатной температуре в течение трех часов. После завершения реакции метанол удаляли при пониженном давлении, затем в полученную смесь наливали воду и проводили экстракцию этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили безводным сульфатом магния, а затем концентрировали при пониженном давлении. После этого полученный концентрат растворяли в дихлорметане, затем добавляли гексан, затем твердое вещество выпадало в осадок, а затем его фильтровали и сушили с получение указанного в заголовке соединения (0,154 г, 70%) в форме желтого твердого вещества.
1H-ЯМР (400 МГц, MeOD-d3) δ 7,65 (д, 2 H, J=8,2 Гц), 7,40 (д, 2 H, J=8,2 Гц), 7,26-7,25 (м, 1 H), 7,04-6,96 (м, 2 H), 4,79 (с, 2 H), 3,25-3,23 (м, 4 H), 2,24-2,21 (м, 7 H); MS (ESI) m/z 405,1 (M+ + H).
Пример получения 5. Синтез соединения 461 {4-этил-N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)-N-(3-(трифторметил)фенил)пиперазин-1-карбоксамид}
[Стадия 1] Синтез метил 4-((4-этил-N-(3-(трифторметил)фенил)пиперазин-1-карбоксамидо)метил)бензоата
Метил 4-((((4-нитрофенокси)карбонил)(3-(трифторметил)фенил)амино)метил)бензоат (0,346 г, 0,73 ммоль) растворяли в диметилформамиде (10 мл), а затем добавляли карбонат калия (0,30 г, 2,19 ммоль) и 1-этилпиперазин (0,09 мл, 0,73 ммоль). Полученную смесь подвергали реакции при 60°С в течение суток, затем разбавляли этилацетатом, а затем промывали насыщенным раствором хлорида аммония. Полученную смесь сушили безводным сульфатом магния и фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=50%) с получением указанного в заголовке соединения (0,15 г, 46%).
[Стадия 2] Синтез 4-этил-N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)-N-(3-(трифторметил)фенил)пиперазин-1-карбоксамида
Метил 4-((4-этил-N-(3-(трифторметил)фенил)пиперазин-1-карбоксамидо)метил)бензоат (0,15 г, 0,33 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), затем добавляли гидроксиламин (50 масс.% водный раствор, 0,20 мл) и гидроксид калия (0,09 г, 1,67 ммоль), а затем перемешивали в течение ночи. После завершения реакции метанол отгоняли при пониженном давлении и удаляли, затем проводили экстракцию этилацетатом и водой, а затем собирали. Полученный экстракт сушили безводным сульфатом магния и фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток перемешивали в диэтиловом эфире, а затем образовывалось твердое вещество, и его фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (0,09 г, 61%) в виде желтого твердого вещества.
1H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 11,1 (уш. с, 1 H), 7,65 (д, 2 H, J=8,2 Гц), 7,51 (т, 1 H, J=7,9 Гц), 7,41-7,36 (м, 5 H), 4,92 (с, 2 H), 3,17-3,14 (м, 4 H), 2,25, 2,22 (ABq, 2 H, J=12,4, 7,2 Гц), 2,18-2,15 (м, 4 H), 0,92 (т, 3 H, J=7,2 Гц); MS (ESI) m/z 451,1 (M+ + H).
Пример получения 6. Синтез соединения 476 {3,3-дифтор-N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)-N-(3-(трифторметил)фенил)азетидин-1-карбоксамид}
[Стадия 1] Синтез метил 4-((3,3-дифтор-N-(3-(трифторметил)фенил)азетидин-1-карбоксамидо)метил)бензоата
Метил 4-((((4-нитрофенокси)карбонил)(3-(трифторметил)фенил)амино)метил)бензоат (0,24 г, 0,51 ммоль) растворяли в диметилформамиде (5 мл), а затем добавляли карбонат калия (0,21 г, 1,52 ммоль) и гидрохлорид 3,3-дифторазетидина (0,13 г, 1,10 ммоль). Полученную смесь подвергали реакции при 60°С в течение двух суток, а затем разбавляли насыщенным раствором хлорида аммония. Проводили экстракцию этилацетатом, а затем полученный экстракт сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=30%) с получением указанного в заголовке соединения (0,14 г, 63%).
[Стадия 2] Синтез 3,3-дифтор-N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)-N-(3-(трифторметил)фенил)азетидин-1-карбоксамида
Метил 4-((3,3-дифтор-N-(3-(трифторметил)фенил)азетидин-1-карбоксамидо)метил)бензоат (0,14 г, 0,32 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), затем добавляли водный раствор гидроксиламина (50 масс.%, 0,2 мл) и гидроксид калия (0,09 г, 1,60 ммоль), а затем перемешивали в течение ночи. После завершения реакции метанол отгоняли при пониженном давлении и удаляли, а затем проводили экстракцию этилацетатом и водой, и собирали. Полученный экстракт сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток перемешивали в диэтилового эфире, а затем образовывался твердый продукт, и его фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (0,072 г, 52%) в форме белого твердого вещества.
Пример получения 7. Синтез соединения 500 {N-(3-(фторметил)фенил)-N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)морфолин-4-карбоксамид}
[Стадия 1] Синтез метил 4-((N-(3-(фторметил)фенил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензоата
4-((N-(3-(гидроксиметил)фенил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензойную кислоту (1,25 г, 3,25 ммоль) растворяли в дихлорметане (20 мл), затем добавляли трифторид диэтиламиносеры (DAST, 0,424 мл, 3,58 ммоль) при 0°C, затем перемешивали при той же температуре в течение одного часа, затем в реакционную смесь наливали водный раствор гидрокарбоната натрия, а затем проводили экстракцию дихлорметаном. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили безводным сульфатом магния, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=30-50%) и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (0,617 г, 49%) в виде бесцветной жидкости.
[Стадия 2] Синтез N-(3-(фторметил)фенил)-N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)морфолин-4-карбоксамида
Метил 4-((N-(3-(фторметил)фенил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензоат (0,100 г, 0,259 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), а затем добавляли гидроксиламин (50,0 масс.% водный раствор, 1,11 мл, 18,1 ммоль) при комнатной температуре. Затем к полученной смеси добавляли гидроксид калия (0,145 г, 2,59 ммоль) и перемешивали при этой же температуре в течение 30 минут. После этого из полученной реакционной смеси удаляли растворитель при пониженном давлении, затем к полученному концентрату добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, а затем проводили экстракцию этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили посредством безводного сульфата магния, а затем концентрировали при пониженном давлении. К полученному концентрату добавляли дихлорметан (5 мл) и гексан (30 мл) и перемешивали, а затем осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (0,089 г, 89%) в виде белого твердого вещества.
1H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 11,12 (уш. с, 1 H), 8,98 (уш. с, 1 H), 7,64 (д, 2 H, J=8,3 Гц), 7,36-7,32 (м, 3 H), 7,20 (с, 1 H), 7,15 (д, 1 H, J=7,5 Гц), 7,09 (д, 1 H, J=7,4 Гц), 5,36 (д, 2 H, J=47,5 Гц), 4,87 (с, 2 H), 3,39 (т, 4 H, J=4,6 Гц), 3,13 (т, 4 H, J=4,6 Гц). MS (ESI) m/z 388 (M+ + H).
Пример получения 8. Синтез соединения 530 {N-(3-фторфенил)-N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)морфолин-4-карбоксамид}
[Стадия 1] Синтез метил 4-((3-фторфениламино)метил)бензоата
Метил 4-формилбензоат (1,47 г, 8,99 ммоль) растворяли в метаноле (50 мл), а затем добавляли 3-фторбензоламин (1,0 г, 8,99 ммоль). Полученную смесь подвергали реакции при комнатной температуре в течение трех часов, а затем добавляли цианоборгидрид натрия (NaCNBH3) (0,56 г, 8,99 ммоль) и уксусную кислоту (1,03 мл, 17,99 ммоль). После того, как компоненты реакции реагировали при комнатной температуре в течение суток растворитель с реагирующими компонентами помещали под пониженное давление и удаляли, затем в него наливали насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, а затем проводили экстракцию этилацетатом. Органический слой сушили безводным сульфатом магния, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=20%) с получением указанного в заголовке соединения (1,84 г, 79%).
[Стадия 2] Синтез метил 4-(((3-фторфенил)((4-нитрофенокси)карбонил)амино)метил)бензоата
Метил 4-((3-фторфениламино)метил)бензоат (2,7 г, 10,4 ммоль) и 4-нитрофенилхлорформиат (4,20 г, 20,8 ммоль) растворяли в ацетонитриле (100 мл), а затем добавляли карбонат калия (4,32 г, 31,2 ммоль). Полученную смесь подвергали реакции при комнатной температуре в течение суток и разбавляли этилацетатом. Реакционную смесь промывали насыщенным водном раствором хлорида натрия, затем сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=20%) с получением указанного в заголовке соединения (2,65 г, 60%) в виде бесцветного масла.
[Стадия 3] Синтез метил 4-((N-(3-фторфенил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензоата
Метил 4-(((3-фторфенил)((4-нитрофенокси)карбонил)амино)метил)бензоат (0,32 г, 0,75 ммоль) растворяли в диметилформамиде (5 мл), а затем добавляли карбонат калия (0,31 г, 2,24 ммоль) и морфолин (0,13 мл, 1,49 ммоль). Полученную смесь подвергали реакции при 60°C в течение суток, а затем разбавляли насыщенным раствором хлорида аммония. Проводили экстракцию этилацетатом, а затем полученный экстракт сушили безводным сульфатом натрия и фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=30%) с получением указанного в заголовке соединения (0,13 г, 45%).
[Стадия 4] Синтез N-(3-фторфенил)-N-(4-(гидроксикарбамоил)бензил)морфолин-4-карбоксамид
Метил 4-((N-(3-фторфенил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензоат (0,108 г, 0,290 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), а затем добавляли гидроксиламин (50,0 масс.% водный раствор, 1,19 мл, 19,4 ммоль) при комнатной температуре. Затем к полученной смеси добавляли гидроксид калия (0,156 г, 2,78 ммоль) и перемешивали при той же температуре в течение 16 часов. После этого из полученной реакционной смеси удаляли растворитель при пониженном давлении, затем в полученный концентрат наливали насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, а затем проводили экстракцию этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили безводным сульфатом магния, а затем концентрировали при пониженном давлении. Осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (0,062 г, 57%) в виде белого твердого вещества.
1H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 11,14 (уш. с, 1 H), 8,99 (уш. с, 1 H), 7,65 (д, 2 H, J=7,0 Гц), 7,38-7,30 (м, 3H), 7,05-6,85 (м, 3H), 4,89 (с, 1H), 3,44-3,42 (м, 4H), 3,18-3,15 (м, 4H), 2,08 (с, 3H). MS (ESI) m/z 374 (M+ + H).
Пример получения 9. Синтез соединения 532 {N-(2-фтор-4-(гидроксикарбамоил)бензил)-N-(3-(трифторметил)фенил)морфолин-4-карбоксамид}
[Стадия 1] Синтез 3-фтор-4-(((3-(трифторметил)фенил)амино)метил)бензонитрила
3-(трифторметил)анилин (0,998 мл, 8,068 ммоль) растворяли в ацетонитриле (60 мл), а затем добавляли 4-(бромметил)-3-фторбензонитрил (2,072 г, 9,682 ммоль) и DIPEA (2,143 мл, 12,102 ммоль) при комнатной температуре, а затем перемешивали при той же температуре в течение суток. После этого к полученной реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, а затем проводили экстракцию этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили безводным сульфатом магния, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный концентрат очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=5-20%) и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (2,380 г, 64,4%) в виде желтой жидкости.
[Стадия 2] Синтез 3-фтор-4-(((3-(трифторметил)фенил)амино)метил)бензойной кислоты
3-фтор-4-(((3-(трифторметил)фенил)амино)метил)бензонитрил (2,310 г, 7,850 ммоль) и гидроксид лития (3,294 г, 78,505 ммоль) перемешивали в метаноле (40 мл)/H2O (20 мл), затем полученную реакционную смесь нагревали при кипячении с обратным холодильником в течение 16 часов, затем охлаждали до комнатной температуры, а затем концентрировали при пониженном давлении. К полученной смеси добавляли 2 M водный раствор хлористоводородной кислоты для достижения pH=1, а затем осажденное твердое вещество отфильтровывали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (1,700 г, 69,1%) в виде белого твердого вещества.
[Стадия 3] Синтез метил 3-фтор-4-(((3-(трифторметил)фенил)амино)метил)бензоата
3-фтор-4-(((3-(трифторметил)фенил)амино)метил)бензойную кислоту (1,700 г, 5,427 ммоль), метанол (4,402 мл, 108,540 ммоль), EDC (2,081 г, 10,854 ммоль), HOBt (1,467 г, 10,854 ммоль) и DIPEA (2,883 мл, 16,281 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (50 мл) при комнатной температуре, затем полученный реакционный раствор перемешивали при той же температуре в течение 16 часов, затем в полученную реакционную смесь наливали насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, а затем проводили экстракцию этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили безводным сульфатом магния, а затем концентрировали при пониженном давлении. Концентрат очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=10-40%) и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (1,500 г, 84,5%) в виде бесцветной жидкости.
[Стадия 4] Синтез метил 3-фтор-4-((((4-нитрофенокси)карбонил)(3-(трифторметил)фенил)амино)метил)бензоата
Метил 3-фтор-4-(((3-(трифторметил)фенил)амино)метил)бензоат (1,500 г, 4,583 ммоль), 4-нитрофенилкарбонохлоридат (1,848 г, 9,167 ммоль) и карбонат калия (1,900 г, 13,750 ммоль) растворяли в ацетонитриле (80 мл) при комнатной температуре, затем полученный реакционный раствор перемешивали при той же температуре в течение 16 часов, затем в полученную реакционную смесь наливали насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, а затем проводили экстракцию этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили безводным сульфатом магния, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный концентрат очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=10-40%) и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (0,927 г, 41,1%) в виде бесцветной жидкости.
[Стадия 5] Синтез метил 3-фтор-4-((N-(3-(трифторметил)фенил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензоата
Метил 3-фтор-4-((((4-нитрофенокси)карбонил)(3-(трифторметил)фенил)амино)метил)бензоат (0,129 г, 0,262 ммоль), морфолин (0,046 мл, 0,524 ммоль) и карбонат калия (0,109 г, 0,786 ммоль) растворяли в N, N-диметилформамиде (5 мл) при 60°С, затем полученный реакционный раствор перемешивали при той же температуре в течение двух суток, затем в полученную реакционную смесь наливали насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, а затем проводили экстракцию этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили безводным сульфатом магния, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный концентрат очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния; этилацетат/гексан=30-60%) и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (0,094 г, 81,5%) в виде бесцветной жидкости.
[Стадия 6] Синтез N-(2-фтор-4-(гидроксикарбамоил)бензил)-N-(3-(трифторметил)фенил)морфолин-4-карбоксамида
Метил 3-фтор-4-((N-(3-(трифторметил)фенил)морфолин-4-карбоксамидо)метил)бензоат (0,094 г, 0,213 ммоль) и гидроксиламин (50,0 масс.% водный раствор, 0,071 г, 2,134 ммоль) растворяли в метаноле (5 мл), затем добавляли гидроксид калия (0,060 г, 1,067 ммоль) при комнатной температуре, а затем перемешивали при той же температуре в течение двух часов, а затем полученную реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. В полученный концентрат добавляли диэтиловый эфир (10 мл) и перемешивали, а затем осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением соединения 532 (0,068 г, 72,2%) в виде светло-желтого твердого вещества.
1H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 11,2 (уш. с, 1 H), 9,13 (уш. с, 1 H), 7,57-7,42 (м, 7 H), 4,94 (с, 2 H), 3,44-3,34 (м, 4 H), 3,18-3,12 (м, 4 H); MS (ESI) m/z 442,1 (M+ + H).
Пример получения 10. Получение модели SLE на мышах
Самок мышей 80 NZB/W F1 (в возрасте четырех недель) приобретали в Jackson Laboratory и содержали в помещении для разведения SPF количестве пяти мышей на клетку. Измерение их массы и уровня белка в моче проводили через 24 недели после рождения (непосредственно перед введением), а затем всех животных, за исключением животных, которые имели слишком много белка в моче, разделяли на группы, как показано в таблице 2 ниже, так чтобы уровень белка в моче и масса могли быть равномерно распределены между группами.
Таблица 2
№ | Группа мышей | Вводимое вещество | Путь введения | Выборка (n) |
1 | С (отрицательный контроль) | Носитель | Внутрибрюшинное введение | 15 |
2 | P (положительный контроль) | Метилпреднизолон 5 мг/кг/сутки | Внутрибрюшинное введение | 15 |
3 | D (экспериментальная группа 1) | Соединение 374 10 мг/кг/сутки | Внутрибрюшинное введение | 15 |
4 | E (экспериментальная группа 2) | Соединение 374 30 мг/кг/сутки | Внутрибрюшинное введение | 15 |
5 | F (экспериментальная группа 3) | Соединение 374 50 мг/кг/сутки | Внутрибрюшинное введение | 15 |
Затем мышам проводили введение, как описано в таблице 2, один раз в сутки в течение приблизительно 19 недель с 24 недели после рождения по 42 неделю после рождения.
Свежую мочу мышей получали до и после введения каждые две недели, взятие лейкоцитов проводили до и после введения каждые четыре недели. Сыворотку получали центрифугированием взятой крови, а затем держали при -70°С.
Пример 1. Идентификация супрессивного эффекта на секрецию TNFα в иммунных клеточных линиях (in vitro)
Для идентификации эффективности соединения по изобретению в отношении подавления секреции TNFα при иммунном ответе, подавление продукции TNFα, которое достигали путем обработки соединениями 374, 461, 500, 530 и 532 в соответствии с настоящим изобретением стимулированных LPS клеточных линий моноцитов человека (THP-1), количественно определяли посредством иммуноферментного анализа (ELISA).
В частности, клеточные линии THP-1 (ATCC) культивировали в среде RPMI-1640, содержавшей 10% FBS. Клеточные линии распределяли в 24-луночный планшет в количестве 1×105 клеток на лунку, затем обрабатывали 100 нг/мл PMA (форбол 12-миристат 13-ацетат) в течение 24 часов, а затем подвергали дифференцировке в макрофаги. Затем культуральную среду заменяли новой средой, затем обрабатывали исследуемым лекарственным средством в течение 24 часов, а затем вновь обрабатывали 10 нг/мл LPS (E.Coli, O55:B5) в течение четырех часов для стимуляции. После этого супернатант отбирали и использовали для определения количества TNFα, секретированного из клеток, с использованием набора Human TNFα Instant ELISA kit (eBioscience, BMS223INST) в соответствии с протоколом, предоставленным изготовителем.
В результате, было показано, что уровень секреции TNFα снижался во всех экспериментальных группах по сравнению с контрольной группой, в которой воспалительный ответ индуцировали посредством LPS. На фиг.1 соединения, обозначаемые как SM374, SM461, SM500, SM530 и SM532, представляют собой соединения 374, 461, 500, 530 и 532, соответственно. В частности, в случае соединений 374, 461 и 500, уровень секреции TNFα был значительно снижен до уровня, при котором воспалительный ответ не индуцировался посредством LPS в концентрациях как 100 нМ, так и 300 нМ. Также в случае увеличения концентрации соединения при обработке от 100 нМ до 300 нМ для соединений 530 и 532, уровень секреции TNFα значительно снижался (фиг.1).
Результаты эксперимента показывают, что соединение в соответствии с настоящим изобретением очень эффективно подавляет секрецию TNFα, т.е. фактора воспалительного ответа, уровень которого репрезентативно возрастает при волчанке, таким образом, таким образом, эффективно подавляя воспалительные ответы, вызываемые волчанкой.
Пример 2. Идентификация супрессивного эффекта на пролиферацию реактивных T-клеток (in vitro)
Для идентификации эффективности соединений по изобретению в отношении подавления пролиферации реактивных T-клеток при иммунном ответе, соединения 255, 280, 374, 416 и 476 в соответствии с настоящим изобретением культивировали вместе с реактивными T-клетками и регуляторными T-клетками в стимулированных LPS клеточных линиях моноцитов человека (THP-1), а затем определяли эффективность супрессии регуляторных T-клеток.
В частности, самцов мышей C57BL6 в возрасте шести недель приобретали в Central Lab Animal Inc., затем позволяли им акклиматизироваться в течение одной недели, а затем использовали в эксперименте. Селезенку извлекали из мышей, а затем обрабатывали коллагеназой D (Roche, 11088866001), чтобы выделить из нее спленоциты. Treg (CD4+CD25-) и Teff (CD4+CD25+) выделяли с использованием набора для выделения CD4+CD25+ регуляторных T-клеток (Miltenyi Biotec, 130-091-041) в соответствии с протоколом, предоставляемым изготовителем. Клетки Teff культивировали при 37°С в течение десяти минут посредством eFluor®670 (Cell Proliferation Dye eFluor®670, eBioscience), чтобы окрасились клеточные мембраны. Teff и Treg распределяли в 96-луночный планшет в соотношении 2:1, а затем T-клетки активировали в течение трех суток посредством магнитных гранул с mAb против CD3ε и против CD28 (набор для активации/экспансии T-клеток, Miltenyi Biotec, 130-093627), и проводили анализ подавления Treg. Одновременно проводили обработку тестируемым лекарственным средством в течение трех суток, в ходе которых проводили анализ. Величину разведения eFluor®670, которым были мечены клеточные мембраны Teff, определяли, таким образом, оценивая степень пролиферации T-клеток. График разведения eFluor®670 строили с использованием проточного цитометра (FACS LSR Fortessa, BD bioscience). Способность к подавлению пролиферации T-клеток вычисляли с использованием следующего уравнения.
В результате было показано, что пролиферация реактивных T-клеток подавлялась во всех экспериментальных группах. На фиг.2 соединения, обозначаемые как SM255, SM280, SM374, SM416, SM476, представляют собой соединения 255, 280, 374, 416, 476, соответственно. Соединения в соответствии с настоящим изобретением, использованные в эксперименте, продемонстрировали уровень подавления пролиферации реактивных T-клеток, который был более высоким максимум в два раза, когда проводили обработку в концентрации 200 нМ, а также продемонстрировал выраженный эффект подавления пролиферации T-клеток, который максимально достигал четырех раз, при обработке в концентрации 500 нМ (фиг.2).
Результаты эксперимента, приведенные выше, демонстрируют, что соединения в соответствии с настоящим изобретением эффективно подавляют дифференцировку реактивных T-клеток, которые чрезмерно активировались при волчанке.
Пример 3. Идентификация регуляторного эффекта функции регуляторных T-клеток (in vitro)
Для идентификации того, регулируют ли соединения в соответствии с настоящим изобретением функцию регуляторных T-клеток при иммунном ответе, проводили обработку соединениями 255, 280, 374, 416 и 476, а затем определяли уровень экспрессии рецептора иммунной точки контроля CTLA4 (ассоциированный с цитотоксическими T-лимфоцитами белок 4) в регуляторных T-клетках посредством проточной цитометрии.
В частности, самцов мышей C57BL6 в возрасте шести недель получали в Central Lab Animal Inc., затем позволяли им акклиматизироваться в течение одной недели, а затем использовали в эксперименте. Селезенку извлекали из мыши, а затем обрабатывали коллагеназой D (Roche, 11088866001), выделяя из нее спленоциты. CD4+CD25- T-клетки выделяли с использованием набора для выделения CD4+CD25+ регуляторных T-клеток (Miltenyi Biotec, 130-091-041), а затем CD4+CD25- T-клетки (в количестве 5×105 клеток/лунка) обрабатывали гранулами с mAb против CD3ε/против CD28 (набор для активации/экспансии T-клеток, Miltenyi Biotec, 130-093627) и рекомбинантного TGF-β2 мыши в течение шести суток, так что они дифференцировались в iTreg. Одновременно проводили обработку тестируемым лекарственным средством в течение шести суток, в ходе которой клетки дифференцировались в iTreg. После этого клетки инкубировали с means mAb против CD4/против CD25 (eBioscience, 25-0042-82, 17-0251-82) при 4°С в течение 20 минут, а затем проводили мечение. Для внутрицитоплазматического окрашивания пермеабилизацию обеспечивали с использованием Fix/буфера для пермеабилизации (eBioscience, 00-5523-00), затем проводили мечение посредством антитела против FOXP3-Alexafluor488 (eBioscience, 53-5773-82) и антитела против CTLA4-PE (eBioscience, 12-1522-82), а затем проводили проточную цитометрию посредством FACS LSR Fortessa (BD bioscience).
В результате, было идентифицировано, что уровень экспрессии CTLA4 в T-клетках возрастал после обработки соединениями в соответствии с настоящим изобретением. На фиг.3., соединения, обозначаемые как SM255, SM280, SM374, SM416, SM476, представляют собой соединения 255, 280, 374, 416, 476, соответственно. В частности, в случае соединений 255, 374 и 476, было показано, что экспрессия CTLA4 в 40% или более T-клеток возрастала при концентрации 500 нМ или более. Соединение 255 продемонстрировало высокую цитотоксичность при обработке в концентрации 1000 нМ, так что анализ данных не проводили (фиг.3).
Результаты эксперимента, приведенные выше, демонстрируют, что соединения в соответствии с настоящим изобретением улучшают функцию регуляторных T-клеток, так что можно эффективно регулировать чрезмерную активность реактивных T-клеток при волчанке.
Пример 4. Эффект восстановления массы в модели на животных
В результате идентификации изменения массы, масса продемонстрировала общий паттерн снижения после введения в течение первых четырех недель (предположительно, что это действие было вызвано растворителем, состоящим из этанола+Kolliphor+солевой раствор), однако более выраженный эффект восстановления массы происходил в группе положительного контроля, чем в группе отрицательного контроля в возрасте после 36 недель. В случае экспериментальных групп, масса в группе, в которой дозировали 10 мг/кг, восстанавливалась до того же уровня, что и в группе положительного контроля в возрасте приблизительно 40 недель, в то время как еще лучший эффект восстановления массы был показан для групп, в которых проводили дозирование 30 и 50 мг/кг, чем в группе положительного контроля (фиг.4).
Пример 5. Эффект повышения выживаемости в модели на животных
В качестве модели заболевания SLE человека используют самок мышей NZB/W F1. Известно, что без лечения мыши в этой модели погибают в возрасте после 12 месяцев или около того (возраст приблизительно 52 недели) вследствие иммунокомплексного гломерулонефрита.
Для идентификации, того, демонстрирует ли фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением эффект повышения выживаемости в модели SLE на животных, проводили определение выживаемости самок мышей NZB/W F1 каждые сутки в течение всего экспериментального периода от 24 недель после рождения до 42 недель после рождения.
В результате отсутствовали изменения выживаемости во всех группах до 32 недель или около того после рождения. В случае группы отрицательного контроля без какой-либо обработки лекарственным средством, выживаемость мышей значительно снижалась после 35 недель после рождения, так что 7 из 15 мышей погибли в возрасте 42 недель после рождения (выживаемость приблизительно 53,3%). Напротив, как группа положительного контроля, так и экспериментальная группа, продемонстрировала тенденцию к лучшему профилю выживаемости, чем группа отрицательного контроля. В частности, 4 из 15 мышей (выживаемость приблизительно 73,3%) погибли через 42 недели после рождения в группе дозирования 10 мг/кг, и неожиданно только одна мышь (выживаемость приблизительно 93,3%) погибла в группах дозирования 30 мг/кг и 50 мг/кг, таким образом, было идентифицировано, что фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением продемонстрировала превосходный эффект повышения выживаемости в модели на животных с SLE (фиг.5).
Пример 6. Эффект снижения протеинурии в модели на животных
Для идентификации того, демонстрирует ли фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением терапевтический эффект в отношении протеинурии, т.е. репрезентативного симптома заболевания SLE, проводили взятие мочи мышей каждые две недели, а затем определяли соотношение UP/C (соотношение белок в моче:креатин) способом окрашивания кумасси бриллиантовым синим (CBB). Концентрацию креатинина в моче получали путем разбавления мочи в 100 раз, затем определения его концентрации с использованием анализатора для биохимического анализа крови (колориметрический анализатор Dri-CHEM 3000, Fujifilm), а затем калибровки измеренной величины с использованием коэффициента разведения.
В результате, было идентифицировано, что встречаемость тяжелой протеинурии 300 мг/дл или более значительно возрастала при старении от 24 до 42 недель после рождения в группе отрицательного контроля, в то время как проблема с такой встречаемостью тяжелой протеинурии значительно улучшалось в экспериментальных группах. В частности, встречаемость тяжелой протеинурии 300 мг/дл или более в возрасте 42 недель составляла 80% в группе отрицательного контроля, в то время как такая встречаемость составляла 20% в группе положительного контроля. Кроме того, она также составляла 60%, 6,7% и 0% в группах дозирования 10, 30 и 50 мг/кг, соответственно, что говорило о превосходном эффекте снижения протеинурии (фиг.6).
Между тем, UP/C мышей в возрасте 36 недель значительно снижалось во всех экспериментальных группах. Даже в случае мышей в возрасте 42 недель, было выявлено, что величина UP/C была более сниженной во всех экспериментальных группах за исключением группы дозирования 10 мг/кг, чем в группе отрицательного контроля (фиг.7).
Пример 7. Эффект снижения сывороточной концентрации антител против дцДНК в модели на животных
Для идентификации того, может ли фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением снижать увеличенную концентрацию антител против дцДНК, показанную в модели на животных с SLE, проводили измерение концентрации антител против дцДНК в сыворотке мышей посредством набора для ELISA (твердофазный иммуноферментный анализ) для антител против дцДНК (Shibayagi).
В результате, сывороточная концентрация антител против дцДНК после 28 недели после рождения имела тенденцию к большему снижению во всех экспериментальных группах, чем в группе отрицательного контроля. В частности, в случае дозирования 50 мг/кг, было выявлено, что сывороточная концентрация антител против дцДНК в большей степени снижалась максимум до двукратного уровня, чем в группе отрицательного контроля (фиг.8).
Пример 8. Эффект снижения BUN и концентраций сывороточного креатинина в модели на животных
Для оценки функции почек в модели SLE на мышах проводили определение BUN и концентраций креатинина в сыворотке мыши, которую собирали каждый месяц (в возрасте 24, 28, 32, 36 и 40 недель и в ходе аутопсии) посредством колориметрического анализатора Dri-CHEM 3000 (Fuji film).
В результате, было идентифицировано, что BUN и сывороточные концентрации креатинина были сниженными в экспериментальных группах по сравнению с контрольными группами, в частности, также было идентифицировано, что существовал превосходный эффект снижения BUN и концентраций креатинина в сыворотке в возрасте 40 недель (фиг.9).
Пример 9. Гистологическое изменение почек в модели на животных
Для идентификации эффекта фармацевтической композиции по изобретению на почки в модели заболевания SLE проводили гистопатологическую оценку.
Сначала половину левой почки мыши, извлеченную в ходе аутопсии, фиксировали 10% нейтральным забуференным формалином и приготавливали в виде парафинового блока. Затем проводили гистопатологическую оценку путем окрашивания гематоксилином и эозином (H&E, BBC Biochemicals, Mount Vernon, WA, США), окрашивание Шифф-йодной кислотой (PAS, BBC Biochemicals) и окрашиванием трихромом по Массону (BBC Biochemicals).
В результате, наблюдали данные, касающиеся инфильтрации ряда воспалительных клеток и пролиферации мезангия, в группе отрицательного контроля. В ходе окрашивания PAS наблюдали множество расширенных канальцев и цилиндров в канальцах. В ходе окрашивания трихромом по Массону паттерн фиброза был более выраженным (фиг.10).
Затем, после присвоения обозначений 0-4 (0: отсутствие инфильтрации, 4: тяжелая инфильтрация) в зависимости от степени инфильтрации воспалительных клеток, степень инфильтрации воспалительных клеток была снижена в почках мышей экспериментальной группы, в частности, было выявлено, что существовал превосходный эффект снижения инфильтрации воспалительных клеток в группах дозирования 30 и 50 мг/кг (фиг.11).
Пример 10. Идентификация эффекта снижения отложений IgG и C3 в почках в модели на животных
Для идентификации терапевтического эффекта фармацевтической композиции по изобретению на почки в модели заболевания SLE проводили определение степени отложений IgG и C3 в гломерулах.
Что касается другой половины левой почки, полученной в ходе аутопсии, проводимой согласно примеру 9, получали замороженный блок ткани для получения срезов замороженной ткани посредством реагента OCT, а затем проводили флуоресцентное иммунное окрашивание на IgG и C3 с использованием способа, известного из уровня техники, к которой относится настоящее изобретение.
В частности, получали срез замороженной ткани толщиной 4 мкм, затем ее фиксировали в холодном ацетоне в течение пяти минут, а затем промывали фосфатно-солевым буфером (PBS) два раза в течение пяти минут. Чтобы предотвратить неспецифическую реакцию, полученную смесь блокировали раствором PBS с добавлением 1% бычьего сывороточного альбумина и 0,05% tween-20 в течение 30 минут, а затем подвергали реакции при комнатной температуре в течение одного часа с использованием конъюгированных с FITC антител против IgG мыши (1:200, AP308F, Merck Millipore) или конъюгированных с FITC антител козы против C3 мыши (1:100, Cappel 55500, MP Bio). После этого полученную ткань промывали PBS в течение пяти минут три раза, затем накрывали покровным стеклом путем заливки средой, включавшей DAPI, а затем наблюдали посредством конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (LSM 700, ZEISS).
В результате уровень отложений IgG и C3 был сниженным в экспериментальных группах, в частности, было выявлено, что уровень таких отложений был значительно снижен в группе, в которой дозировали 50 мг/кг (фиг.12).
Пример 11. Сывороточная концентрация цитокинов в модели на животных
Для анализа эффекта фармацевтической композиции по изобретению на изменение сывороточного уровня цитокинов у мышей с заболеванием SLE, определяли уровень GM-CSF, IFN-γ, IL-1α, IL-1β, IL-10, IL-12(p70), IL-15, IL-17a, IL-2, IL-4, IL-6, TNF-α, TGF-β, IL-22 и IL-23 в сыворотке с использованием набора Mouse Cytokine Milliplex MAP kit (Merck Millipore), и его результаты представлены в таблице 3.
Таблица 3
пг/мл | C (n=8) | P (n=13) | D (n=10) | E (n=14) | F (n=14) |
GM-CSF | 8,61±5,84 | ND | 2,65±2,65 | 5,32±4,06 | 1,89±1,89 |
IFN-γ | 5,86±4,42 | 0,07±0,07 | 1,06±1,06 | 6,60±4,07 | 2,07±1,44 |
IL-10† | 1876,37±1805,81 | 18,41±3,60* | 25,00±8,01 | 56,55 ±39,16 | 8,31±3,78* |
IL-12(70)† | 2514,76±2439,05 | 1,04±1,04* | 194 ±1,17 | 74,50±63 63 | 15,62±12,09 |
IL-15† | 255,59±119,34 | 45,25±4,14* | 184,36±88,58 | 162,41 ±53,62 | 26,24±7,68* |
IL-17† | 581,77±558,60 | 3,59±0,48* | 10,40±3,86 | 21,14 ±14,59 | 4,82±1,91* |
IL-1α | 289,98±119,34 | 666,21±146,22 | 371,96±82,72 | 458,40±90,79 | 629,16±128,47 |
IL-1β | 1,58±1,11 | 0,65±0,65 | 1,27±0,65 | 74,66±70,56 | 3,86±2,09 |
IL-2 | 6,96±5,27 | 0,09±0,09 | 1,91±1,77 | 9,32±4,75 | 4,09±2,63 |
IL-4 | 51,52±45,05 | 1,49±0,06 | 1,74±0,19 | 8,60±6,80 | 3,70±1,73 |
IL-6 | 1275,32±1253,30 | 3,36±0,92 | 7,21±2,34 | 21,23±13,62 | 5,69±2,39 |
TNF-α† | 7,33±1,42 | 1,57±0,57* | 7,91±2,67 | 16,25±13,46 | 1,24±0,69* |
TGF-β | 51494,48± 8345,48 | 66067,78± 5207,83 | 73356,45± 7258,05 | 58807,36± 6685,72 | 73110,92± 4630,32* |
IL-22 | 31,00±16 42 | 17,68±4,49 | 27,05±9,95 | 13,00±4,40 | 6,37±1,49* |
IL-23 | 126,59±68,41 | 22,31±17,13 | 1,96±1,96 | 100,56±100,56 | 41,34±41,34 |
Данные, полученные для групп, сравнивали с использованием критерия Крускала-Уоллиса (†p < 0,05) *p < 0,05 против группы C (U-критерий Манна-Уитни).
Как представлено в таблице 3 выше, было выявлено, что IL-10, IL-12, IL-15, IL-17 и TNF-α имели тенденцию к снижению в группе положительного контроля по сравнению с группой отрицательного контроля, и сывороточная концентрация IL-10, IL-12, IL-15, IL-17, TNF-α и IL-22 была снижена у мышей в экспериментальных группах, в то время как уровень TGF-β возрастал. В частности, было выявлено, что уровни IL-10, IL-15, IL-17A, TNF-α и IL-22 были на значимом уровне более низкими и уровень TGF-β был на значимом уровне более высоким в экспериментальной группе, в которой вводили 50 мг/кг, по сравнению с контрольной группой (фиг.13).
В связи с этим, было описано, что сывороточная концентрация IL-6, IL-10, IL-17, IL-23 и IFN-γ была значительно более высокой, и сывороточная концентрация TGF-β была значительно более низкой у пациентов с SLE, чем у здоровых людей (Document [Zickert A et al., 2015]).
Между тем, когда измеряли уровень CXCL10 (IFN-индуцибельный белок 10, IP-10) и CCL2 (MCP-1) в сыворотке определяли в возрасте 36 недель, было идентифицировано, что уровень CXCL10 в сыворотке был снижен во всех экспериментальных группах, и уровень CCL2 в сыворотке был снижен в группе, в которой вводили 50 мг/кг (фиг.14).
Пример 12. Популяции T-клеток в селезенке в модели на животных
Для оценки паттерна популяций иммунных T-клеток в селезенке у мышей с заболеванием SLE, определяли соотношение экспрессии CD3, CD4, CD8a и CTLA4, а также соотношение Treg/Th1, Th2, Th17 и профили экспрессии основных регуляторов Treg (T-bet, GATA-3, ROR-γt, Foxp3).
Для этого сначала получали спленоциты из селезенки в ходе аутопсии мышей посредством клеточного сита с размером ячеек 70 мкм (BD), а затем эритроциты подвергали гемолизу посредством буфера EL и промывали буферным раствором для FACS (5% BSA/PBS). После этого проводили окрашивание в концентрации, рекомендованной изготовителем, посредством конъюгированного с PerCP-cy5.5 антитела против CD3 мыши (ebioscience, Sandiego, CA, США), конъюгированного с PE-Cyanine7 антитела против CD8a мыши (ebioscience), конъюгированного с FITC антитела против CD4 (BD), конъюгированного с APC антитела против CD25 мыши (BD), конъюгированного с PE антитела против FoxP3 мыши (BD), конъюгированного с PE антитела против RORγt мыши (ebioscience), конъюгированного с PE антитела против T-bet мыши (ebioscience), конъюгированного с PE антитела против GATA-3 мыши (ebioscience) и конъюгированного с PE антитела против CTLA4 мыши (ebioscience).
Спленоциты и маркерные антитела клеточной поверхности сразу подвергали реакции. Перед реакцией с антителами против FoxP3, RORγt, T-bet и GATA3, спленоциты фиксировали посредством набора буферов для окрашивания на FoxP3/факторы транскрипции, затем подвергали пермеабилизации, а затем подвергали реакции с антителами. Соответственно определяли соотношение CD4:CD8 в CD3-клетках, а также долю CD4+CD8-клеток, CD4-CD8+клеток, CD4+CD8+клеток и двойных негативных T-клеток и сравнивали между группами. Для определения доли FoxP3, ROR γt, T-bet и GATA3, которые были основными регуляторами Treg, Th17, Th1 и Th2, соответственно определяли долю CD4+CD25+FoxP3+ клеток, CD4+CD25+RORγt+ клеток, CD4+CD25+ T-bet+ клеток и CD4+CD25+ GATA3+ клеток.
Анализ профилей экспрессии CD4, CD8
Было описано, что доля двойных отрицательных CD4-CD8- T-клеток возрастала в моноцитах периферической крови пациентов с SLE, и что такие клетки продуцировали воспалительные цитокины IL-17 и IFN-γ, таким образом внося вклад в патогенез повреждений почек у пациентов с SLE (документ [Shivakumar S et al., 1989]; документ [Crispin JC et al., 2008]).
В результате гейтирования CD3+ клеток и определения экспрессии CD4 и CD8, доля CD4-CD8+ T-клеток возрастала в экспериментальных группах, однако доля CD4-CD8- T-клеток, напротив, снижалась. Было показано, что соотношение CD4+CD8- : CD4-CD8+ T-клеток имело тенденцию к снижению по мере возрастания дозы в экспериментальных группах (фиг.15).
Анализ паттернов экспрессии основных регуляторов Treg, Th17, Th1 и Th2
Когда долю CD4+CD25+Foxp3+, CD4+CD25+RORγt+, CD4+CD25+T-bet+ и CD4+CD25+GATA-3+ клеток в селезенке сравнивали и анализировали для определения степени экспрессии Foxp3, ROR-γt, T-bet и GATA-3, которые были основными регуляторами Treg, Th17, Th1 и Th2, еще не наблюдали значимых отличий между группами (фиг.16).
Между тем, доля CD25+ клеток была значимо более низкой и соотношение CD4+CD25+ клетки/CD4+ клетки также было значимо более низким в экспериментальной группе, в которой дозировали 50 мг/кг, по сравнению с контрольной группой (фиг.17).
В результате гейтирования в CD4+ клетках и исследования экспрессии T-bet, GATA-3, Foxp3 и RORγt, экспрессия T-bet была значимо более низкой в экспериментальной группе, в которой вводили 50 мг/кг, чем в контрольной группе. Более того, было выявлено, что соотношение CD4+T-bet+/CD4+GATA-3+ (соотношение экспрессии основных регуляторов Th1/Th2 в CD4-клетках) на более значимом уровне снижалось в экспериментальных группах, в которых вводили 30 мг/кг и 50 мг/кг, чем в контрольной группе (фиг.18).
Анализ паттерна экспрессии CD138
Было идентифицировано, что доля CD138+ клеток снижалась на 16,3% в группе положительного контроля по сравнению с группой отрицательного контроля, а также снижалась на 21,2% в группе, в которой вводили 10 мг/кг, на 25,2% в группе, в которой вводили 30 мг/кг, и на 31,6% в группе, в которой вводили 50 мг/кг, соответственно (фиг.19).
Пример 13. Доля пре-B-клеток и про-B-клеток в костном мозге в модели на животных
Долю про-B (B220+, CD43+) и пре-B (B220+, CD43-) в клетках костного мозга мыши определяли посредством FACS. Для этого клетки костного мозга получали путем промывания бедренной кости PBS, содержавшим 5% BSA. После этого проводили гемолиз эритроцитов посредством буфера EL, затем промывали буфером FACS (5% BSA/PBS), а затем окрашивали конъюгированными с FITC антителами против CD43 мыши (ebioscience) и конъюгированными с PE антителами против CD220 мыши (ebioscience), для определения доли пре-B (B220+CD43-) и про-B (B220+CD43+) клеток.
В результате, еще не наблюдали значимого изменения доли пре-B и про-B-клеток в экспериментальных группах по сравнению с контрольной группой (фиг.20).
Пример 14. Изменение изотипов иммуноглобулинов в сыворотке в модели на животных
Концентрацию изотипов иммуноглобулинов (IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3 и IgM) в сыворотке, полученной посредством аутопсии мышей, определяли с использованием набора для анализа Luminex изотипов антител мыши (R&D systems, Minneapolis, MN).
В результате, концентрация IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3 и IgM снижалась в группе, в которой проводили дозирование 50 мг/кг, по сравнению с группой отрицательного контроля, в частности, было выявлено, что концентрация IgM была значительно снижена (фиг.21).
Пример 15. Изменение биохимического анализа сыворотки в модели на животных
Для идентификации того, происходит ли какое-либо изменение биохимического анализа сыворотки при длительном введении лекарственного введения в модели SLE на животных, проводили определение концентрации ALT, AST, ALP, общего белка, альбумина, общего холестерина, TG, CPK, общего билирубина и Ca в сыворотке, полученной в ходе аутопсии, с использованием колориметрического анализатора Dri-CHEM 3000 (Fujifilm), где его результаты представлены в таблице 4.
Таблица 4
Данные, полученные для групп, сравнивали с использованием критерия Крускала-Уоллиса († p < 0,05), *p < 0,05 против группы C (U-критерий Манна-Уитни), ALT: аланинаминотрансфераза, AST: аспартатаминотрансфераза, ALP: щелочная фосфатаза, TBIL: общий билирубин, TCHOL: общий холестерин, TG: триглицерид, TP: общий белок, CPK: креатинфосфокиназа)
Как показано в описанных выше вариантах осуществления, было выявлено, что фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением повышала выживаемость при заболевании SLE у мышей (фиг.5), снижала встречаемость протеинурии (фиг.6), концентрацию антител против дцДНК (фиг.8) и уровень инфильтрации IgG и C3 в почках (фиг.12), снижала уровень сывороточных цитокинов IL-10, IL-12, IL-15, IL-17a, TNFα и IL-22 (фиг.13) и уровень CXCL10 и CCL2 (фиг.14), увеличивала уровень TGF-β (фиг.13), и снижала долю CD4-CD8- двойных негативных T-клеток, соотношение уровня CD4+CD8- клеток и уровня CD4-CD8+ клеток (фиг.15), соотношение CD4+T-bet+/CD4+GATA3+ (фиг.16), соотношение уровня CD4+CD25+ клеток и уровня CD4+ клеток (фиг.17) и уровня CD138+ клеток (фиг.19). Исходя из приведенных выше результатов, можно видеть, что фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением имеет превосходный эффект в отношении лечения волчанки, включая SLE.
В то время как конкретные части настоящего изобретения подробно описаны выше, специалистам в данной области понятно, что такое подробное описание приведено только для иллюстрации предпочтительных иллюстративных вариантов осуществления, и его не следует истолковывать как ограничивающее объем настоящего изобретения. Таким образом, следует понимать, что основной объем настоящего изобретения определяется прилагаемой формулой изобретения и ее эквивалентами.
Claims (67)
1. Применение соединения, представленного следующей формулой I, или его фармацевтически приемлемой соли в эффективном количестве для предупреждения или лечения волчанки:
[Формула I]
где
каждый из Xa и Xb независимо представляет собой CH,
каждый из L1 и L2 независимо представляет собой водород или галоген,
Q представляет собой C(=O),
Y выбран из следующей группы:
M представляет собой C, N или O, где в этом случае, когда M представляет собой C, l и m равны 1; когда M представляет собой N, l равен 1 и m равен 0; и когда M представляет собой O, l и m равны 0,
каждый из Ra1 и Ra2 независимо представляет собой водород; -C1-4 алкил с прямой или разветвленной цепью; или галоген;
n представляет собой целое число, равное 0, 1 или 2,
Rb представляет собой водород;
Z выбран из следующей группы:
каждый из Pa и Pb независимо представляет собой водород; -C1-4 алкил с прямой или разветвленной цепью, где он является незамещенным или по меньшей мере один атом водорода замещен галогеном; галоген; или -CF3.
2. Применение по п.1, где соединение, представленное следующей формулой I, представляет собой соединение, представленное следующей формулой Ia:
[Формула Ia]
где
каждый L1 и L2 независимо представляет собой водород или галоген,
где Ra1 и Rb такие как определено в п.1,
Z представляет собой фенил или пиридинил,
где по меньшей мере один водород фенила или пиридинила может быть замещен галогеном, CF3 или CH2F.
3. Применение по п.2, где соединение, представленное следующей формулой Ia, представляет собой соединение, приведенное в следующей таблице:
4. Применение по п.1, где указанная волчанка выбрана из группы, состоящей из системной красной волчанки (SLE), системной волчанки, дискоидной волчанки, индуцированной лекарственным средством волчанки, волчанки новорожденных и хронического нефрита.
5. Применение по п.4, где указанный хронический нефрит представляет собой волчаночный нефрит или гломерулонефрит.
6. Применение по п.1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль снижает сывороточную концентрацию антител против дцДНК.
7. Применение по п.1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль подавляет протеинурию.
8. Применение по п.1, где соединение или его фармацевтически приемлемая соль подавляет продуцирование TNFα в воспалительной реакции.
9. Способ лечения волчанки, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения, представленного следующей формулой I, или его фармацевтически приемлемой соли:
[Формула I]
где
каждый из Xa и Xb независимо представляет собой CH,
каждый из L1 и L2 независимо представляет собой водород или галоген,
Q представляет собой C(=O),
Y выбран из следующей группы:
M представляет собой C, N или O, где в этом случае, когда M представляет собой C, l и m равны 1; когда M представляет собой N, l равен 1 и m равен 0; и когда M представляет собой O, l и m равны 0,
каждый из Ra1 и Ra2 независимо представляет собой водород; -C1-4 алкил с прямой или разветвленной цепью; или галоген;
n представляет собой целое число, равное 0, 1 или 2,
Rb представляет собой водород;
Z выбран из следующей группы:
каждый из Pa и Pb независимо представляет собой водород; -C1-4 алкил с прямой или разветвленной цепью, где он является незамещенным или по меньшей мере один атом водорода замещен галогеном; галоген; или -CF3.
10. Применение соединения, представленного следующей формулой I, или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения волчанки:
[Формула I]
где
каждый из Xa и Xb независимо представляет собой CH,
каждый из L1 и L2 независимо представляет собой водород или галоген,
Q представляет собой C(=O),
Y выбран из следующей группы:
M представляет собой C, N или O, где в этом случае, когда M представляет собой C, l и m равны 1; когда M представляет собой N, l равен 1 и m равен 0; и когда M представляет собой O, l и m равны 0,
каждый из Ra1 и Ra2 независимо представляет собой водород; -C1-4 алкил с прямой или разветвленной цепью; или галоген;
n представляет собой целое число, равное 0, 1 или 2,
Rb представляет собой водород;
Z выбран из следующей группы:
каждый из Pa и Pb независимо представляет собой водород; -C1-4 алкил с прямой или разветвленной цепью, где он является незамещенным или по меньшей мере один атом водорода замещен галогеном; галоген; или -CF3.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR10-2017-0158867 | 2017-11-24 | ||
KR1020170158867A KR102236356B1 (ko) | 2017-11-24 | 2017-11-24 | 루푸스의 예방 또는 치료를 위한 조성물 |
PCT/KR2018/014524 WO2019103524A1 (en) | 2017-11-24 | 2018-11-23 | Compositions for preventing or treating lupus |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2757014C1 true RU2757014C1 (ru) | 2021-10-08 |
Family
ID=66631657
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2020120706A RU2757014C1 (ru) | 2017-11-24 | 2018-11-23 | Композиции для предупреждения или лечения волчанки |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11571426B2 (ru) |
EP (1) | EP3713578A4 (ru) |
JP (1) | JP7100128B2 (ru) |
KR (1) | KR102236356B1 (ru) |
CN (1) | CN111372589A (ru) |
AU (1) | AU2018372397B2 (ru) |
BR (1) | BR112020010139A2 (ru) |
CA (1) | CA3080111A1 (ru) |
MX (1) | MX2020005222A (ru) |
PH (1) | PH12020550549A1 (ru) |
RU (1) | RU2757014C1 (ru) |
WO (1) | WO2019103524A1 (ru) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2024049227A1 (ko) | 2022-08-31 | 2024-03-07 | (주)지바이오로직스 | 재조합 안정화 갈렉틴 9 단백질을 포함하는 루푸스 예방 또는 치료용 조성물 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20030114525A1 (en) * | 2000-11-21 | 2003-06-19 | Kammer Gary M. | Method of treating autoimmune diseases |
WO2004009536A1 (en) * | 2002-07-23 | 2004-01-29 | 4Sc Ag | Novel compounds as histone deacetylase inhibitors |
US20080153877A1 (en) * | 2006-12-26 | 2008-06-26 | Pharmacyclics, Inc. | Method of using histone deacetylase inhibitors and monitoring biomarkers in combination therapy |
US20120028963A1 (en) * | 2009-03-27 | 2012-02-02 | Chong Kun Dang Pharmaceutical Corp. | Novel hydroxamate derivative, a production method for the same, and a pharmaceutical composition comprising the same |
RU2448965C2 (ru) * | 2005-10-19 | 2012-04-27 | Астразенека Аб | Бензамидные соединения, полезные в качестве ингибиторов деацетилазы гистонов |
US20160083354A1 (en) * | 2013-04-29 | 2016-03-24 | Chong Kun Dang Pharmaceutical Corp. | Novel compounds for selective histone deacetylase inhibitors, and pharmaceutical composition comprising the same |
Family Cites Families (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SK6432002A3 (en) | 1999-11-10 | 2003-02-04 | Takeda Chemical Industries Ltd | 5-Membered N-heterocyclic compounds with hypoglycemic and hypolipidemic activity |
ES2334990T3 (es) | 2002-02-14 | 2010-03-18 | Pharmacia Corporation | Piridinonas sustituidas como moduladores de p38 map quinasa. |
DE60320957D1 (en) | 2002-03-13 | 2008-06-26 | Janssen Pharmaceutica Nv | Sulfonylderivate als histone-deacetylase-inhibitoren |
RU2352337C2 (ru) | 2002-11-12 | 2009-04-20 | Алькон, Инк. | Ингибиторы гистондеацетилазы для лечения офтальмологических неоваскулярных нарушений и заболеваний |
WO2005065681A1 (en) | 2003-12-19 | 2005-07-21 | Takeda San Diego, Inc. | N- hydroxy-3-(3-(1h-imidazol-2-yl)-phenyl)-acrylamide derivatives and related compounds as histone deacetylase (hdac) inhibitors for the treatment of cancer |
US7923471B2 (en) | 2004-05-14 | 2011-04-12 | Alcon, Inc. | Method of treating dry eye disorders and uveitis |
EA010652B1 (ru) | 2004-07-28 | 2008-10-30 | Янссен Фармацевтика Н.В. | Замещенные индолильные алкиламинопроизводные в качестве новых ингибиторов гистондеацетилазы |
CA2587888A1 (en) | 2004-11-25 | 2006-06-01 | Actelion Pharmaceuticals Ltd | Novel 4-aminopiperidine derivatives as plasmepsin ii inhibitors |
WO2007039322A1 (en) | 2005-09-19 | 2007-04-12 | Bioxell Spa | Use of vitamin d3 compounds for the treatment of uveitis |
AR058296A1 (es) | 2005-12-09 | 2008-01-30 | Kalypsys Inc | Inhibidores de histona desacetilasa y composicion farmaceutica |
US20120282167A1 (en) | 2009-08-10 | 2012-11-08 | Institut Curie | Method for predicting the sensitivity of a tumor to an epigenetic treatment |
EP3091004B1 (en) | 2010-01-22 | 2017-12-13 | Acetylon Pharmaceuticals, Inc. | Reverse amide compounds as protein deacetylase inhibitors and methods of use thereof |
SG190211A1 (en) | 2010-11-16 | 2013-06-28 | Acetylon Pharmaceuticals Inc | Pyrimidine hydroxy amide compounds as protein deacetylase inhibitors and methods of use thereof |
US20130317040A1 (en) * | 2010-12-22 | 2013-11-28 | The Feinstein Institute Of Medical Research | Methods for treating systemic lupus erythematosus using hiv protease inhibitors |
TW201245115A (en) | 2011-01-24 | 2012-11-16 | Chdi Foundation Inc | Histone deacetylase inhibitors and compositions and methods of use thereof |
US9249087B2 (en) | 2011-02-01 | 2016-02-02 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | HDAC inhibitors and therapeutic methods using the same |
CA2880117C (en) | 2012-07-27 | 2021-04-06 | The Broad Institute, Inc. | Inhibitors of histone deacetylase |
WO2015042418A1 (en) | 2013-09-20 | 2015-03-26 | Acetylon Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of diseases caused by abnormal lymphocyte function with an hdac6 inhibitor |
CN105940001B (zh) | 2013-12-12 | 2018-02-06 | 株式会社钟根堂 | 作为选择性组蛋白脱乙酰酶(hdac)抑制剂的新型氮杂吲哚衍生物及包含其的药物组合物 |
TW201643139A (zh) | 2015-04-17 | 2016-12-16 | 佛瑪治療公司 | 作為組蛋白脫乙醯基酶抑制劑之3-螺環-6-異羥肟酸萘滿 |
WO2017040564A1 (en) | 2015-09-03 | 2017-03-09 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Hdac inhibitors and therapeutic methods using the same |
GB201609786D0 (en) | 2016-06-03 | 2016-07-20 | Karus Therapeutics Ltd | Compounds and method of use |
AU2018258338B2 (en) | 2017-04-26 | 2022-07-14 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Nrf and HIF activators/HDAC inhibitors and therapeutic methods using the same |
KR20190099952A (ko) | 2018-02-20 | 2019-08-28 | 주식회사 종근당 | 포도막염의 예방 또는 치료를 위한 조성물 |
KR20190118251A (ko) | 2018-04-10 | 2019-10-18 | 주식회사 종근당 | 건성안의 예방 또는 치료를 위한 조성물 |
-
2017
- 2017-11-24 KR KR1020170158867A patent/KR102236356B1/ko active IP Right Grant
-
2018
- 2018-11-23 MX MX2020005222A patent/MX2020005222A/es unknown
- 2018-11-23 CN CN201880075639.2A patent/CN111372589A/zh active Pending
- 2018-11-23 AU AU2018372397A patent/AU2018372397B2/en not_active Ceased
- 2018-11-23 EP EP18881572.4A patent/EP3713578A4/en not_active Withdrawn
- 2018-11-23 CA CA3080111A patent/CA3080111A1/en active Pending
- 2018-11-23 US US16/766,578 patent/US11571426B2/en active Active
- 2018-11-23 WO PCT/KR2018/014524 patent/WO2019103524A1/en unknown
- 2018-11-23 JP JP2020528455A patent/JP7100128B2/ja active Active
- 2018-11-23 BR BR112020010139-7A patent/BR112020010139A2/pt active Search and Examination
- 2018-11-23 RU RU2020120706A patent/RU2757014C1/ru active
-
2020
- 2020-04-30 PH PH12020550549A patent/PH12020550549A1/en unknown
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20030114525A1 (en) * | 2000-11-21 | 2003-06-19 | Kammer Gary M. | Method of treating autoimmune diseases |
WO2004009536A1 (en) * | 2002-07-23 | 2004-01-29 | 4Sc Ag | Novel compounds as histone deacetylase inhibitors |
RU2448965C2 (ru) * | 2005-10-19 | 2012-04-27 | Астразенека Аб | Бензамидные соединения, полезные в качестве ингибиторов деацетилазы гистонов |
US20080153877A1 (en) * | 2006-12-26 | 2008-06-26 | Pharmacyclics, Inc. | Method of using histone deacetylase inhibitors and monitoring biomarkers in combination therapy |
US20120028963A1 (en) * | 2009-03-27 | 2012-02-02 | Chong Kun Dang Pharmaceutical Corp. | Novel hydroxamate derivative, a production method for the same, and a pharmaceutical composition comprising the same |
US20160083354A1 (en) * | 2013-04-29 | 2016-03-24 | Chong Kun Dang Pharmaceutical Corp. | Novel compounds for selective histone deacetylase inhibitors, and pharmaceutical composition comprising the same |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3713578A4 (en) | 2021-08-04 |
KR102236356B1 (ko) | 2021-04-05 |
CA3080111A1 (en) | 2019-05-31 |
AU2018372397B2 (en) | 2021-10-14 |
PH12020550549A1 (en) | 2021-03-22 |
EP3713578A1 (en) | 2020-09-30 |
JP7100128B2 (ja) | 2022-07-12 |
BR112020010139A2 (pt) | 2020-11-10 |
US11571426B2 (en) | 2023-02-07 |
CN111372589A (zh) | 2020-07-03 |
AU2018372397A1 (en) | 2020-05-28 |
JP2021504368A (ja) | 2021-02-15 |
WO2019103524A1 (en) | 2019-05-31 |
MX2020005222A (es) | 2020-08-24 |
US20200368245A1 (en) | 2020-11-26 |
KR20190060550A (ko) | 2019-06-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2017272505B2 (en) | Substituted indazoles useful for treatment and prevention of allergic and/or inflammatory diseases in animals | |
AU2015326543B2 (en) | 4-(4-(4-phenylureido-naphthalen-1-yl)oxy-pyridin-2-yl)amino-benzoic acid derivative as p38 kinase inhibitor | |
KR102283876B1 (ko) | 키나제 저해제로서 유용한 우레아 유도체 | |
JP2021501145A (ja) | 血液学的障害を治療するための化合物および組成物 | |
RU2757014C1 (ru) | Композиции для предупреждения или лечения волчанки | |
RU2757273C1 (ru) | Композиции для предупреждения или лечения увеита | |
KR20170020262A (ko) | 티오우레아 유도체를 포함하는 자가면역질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
RU2798874C1 (ru) | Композиции для предупреждения или лечения хронических обструктивных заболеваний легких (copd) | |
AU2020370210A1 (en) | Compositions for preventing or treating chronic obstructive pulmonary diseases (COPD) | |
JP6936496B2 (ja) | 移植片対宿主病の治療剤又は予防剤、ファイブロサイト浸潤抑制剤、及び涙液減少と杯細胞の減少の抑制剤 | |
JP2020075893A (ja) | IgG4関連疾患治療予防剤 |