RU2754850C1 - Способ определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro - Google Patents
Способ определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro Download PDFInfo
- Publication number
- RU2754850C1 RU2754850C1 RU2020125053A RU2020125053A RU2754850C1 RU 2754850 C1 RU2754850 C1 RU 2754850C1 RU 2020125053 A RU2020125053 A RU 2020125053A RU 2020125053 A RU2020125053 A RU 2020125053A RU 2754850 C1 RU2754850 C1 RU 2754850C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cefotaxime
- solution
- niosomes
- encapsulated
- determining
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/425—Thiazoles
- A61K31/429—Thiazoles condensed with heterocyclic ring systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro. Способ определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro, включающий инкапсулирование цефотаксима в ниосомальной дисперсии, далее ниосомы цефотаксима помещают в диализный мешок, который переносят в химический стакан, содержащий фосфатно-солевой буфер, раствор с погруженным диализным мешком постоянно перемешивают на магнитной мешалке, образцы раствора отбирают через 1, 2, 4, 6, 24 часа, анализируемый раствор перед анализом разбавляют и фильтруют, концентрацию цефотаксима в образце определяют методом обращенно-фазной высокоэффективной хроматографии в изократическом режиме элюирования не менее 5 раз для каждого анализируемого раствора, при определенных условиях. Вышеописанный способ позволяет сократить длительность и трудоемкость процесса определения скорости высвобождения и повысить его производительность. 1 ил., 3 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы антибитика in vitro и может быть использовано для исследования везикул и в терапевтических целях.
Уровень техники
Известен способ эпидурального введения терапевтического соединения позвоночному, включающий инкапсулирование терапевтического соединения в системе доставки лекарственного средства, имеющей замедленную скорость высвобождения соединения от, примерно, 2 до, примерно, 7 дней, и введение указанной системы доставки лекарственного средства в разовой эпидуральной дозе позвоночному, причем система доставки лекарственного средства включает мультивезикулярные липосомы, полученные из группы, состоящей из фосфатидилхолинов яйца, дипальмитоилфосфатидилхолинов, диолеоилфосфатидилхолинов, дистеароилфосфатидилхолинов, дипальмитоилфосфатидилглицеринов, диолеоилфосфатидилглицеринов и их приемлемых комбинаций (см. патент RU 2215522).
Недостатком данного способа является - отсутствие информации по способу определения скорости высвобождения терапевтического соединения.
Известна лекарственная форма с постоянной скоростью высвобождения лекарственного вещества, включающая стенку, образующую полость, расширяющийся слой и слой, содержащий лекарственное вещество, расположенные внутри полости, причем стенка выполнена с выходным отверстием или возможностью образования выходного отверстия в ней, и по меньшей мере часть стенки является полупроницаемой, отличающаяся тем, что расширяющийся слой расположен в полости на удалении от выходного отверстия и связан посредством текучей среды с полупроницаемой частью стенки, при этом содержание лекарственного вещества составляет по меньшей мере 20% от общей массы слоя, содержащего лекарственное вещество, который расположен в полости прилегающим к выходному отверстию и непосредственно или опосредованно контактирующим с расширяющимся слоем, а между внутренней поверхностью стенки и по крайней мере наружной поверхностью слоя, содержащего лекарственное вещество, размещен способствующий продвижению слой (см. пат. RU №2246295).
Рассмотренный способ характеризуется следующими недостатками: длительность, сложность и многостадийность процесса, а также отсутствие информации по способу определения скорости высвобождения лекарственного вещества.
Известен способ сравнительной оценки высвобождения in vitro/in vivo препаратов пролонгированного действия индапамида, триметазидина, ципрофлоксацина. Выполняется при следующих условиях: лопастная мешалка, число оборотов - 50 об/мин, временные точки - 1, 2, 3, 4, 6 часов, температура - 37±0,5°С, среда растворения - буферные растворы с рН: 1,2; 4,3; 6,8, объем среды растворения: 500 мл (индапамид и триметазидин), 900 мл (ципрофлоксацин). Количественное определение - СФМ при длине волны: 240 нм (индапамид), 270 нм (триметазидин), 327 нм (ципрофлоксацин) (см. Сравнительная оценка высвобождения in vitro / in vivo препаратов пролонгированного действия индапамида, триметазидина, ципрофлоксацина / Шлыков, Вадим Сергеевич // автореферат на соиск. канд. фарм. наук. - Москва, 2011. - с. 24).
Недостатками данного способа является малая производительность процесса; отсутствие возможности применения способа у инкапсулированных лекарственных форм препаратов.
Наиболее близким изобретением к описываемому способу по технической сущности является способ разработки состава, характеристики, стабильности и in vitro оценки нимесулида, включенного в ниосомы. Он заключается в определении скорости высвобождения нимесулида методом мембранной диффузии. Для этого 1 мл ниосомальной суспензии помещают в диффузионную камеру (стеклянную трубку) диаметром 2,5 см, нижний открытый конец стеклянной трубки покрыт пропитанной целлюлозной мембраной. Эту ячейку затем суспендируют в химическом стакане, содержащем PBS рН 7,4 (100 мл). Постоянно перемешивают со скоростью 50 об/мин при 37±10°С на магнитной мешалке с термостатом. Аликвоты отбирали с почасовой периодичностью и заменяли одновременно равным объемом свежего PBS. Концентрацию нимесулида в образцах анализировали спектрофотометрически. (Formulation, characterization, stability and in vitro evaluation of nimesulide niosomes / H.S. Chawda, CP. Jain, N.K. Bairwa // Pharmacophore. - 2011. - Vol. 2 (3). - P. 131-148).
Рассмотренный способ имеет ряд недостатков, основными из которых является: трудоемкость, длительность и малая производительность процесса, а также отсутствие данных по определению скорости высвобождения антибактериальных препаратов, инкапсулированных в ниосомы.
Раскрытие изобретения
Задачей изобретения являлась разработка такого способа определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro, который прост в исполнении, позволяет получить информацию, которая влияет на фармакокинетику и фармакодинамику инкапсулированного вещества, а соответственно, на профиль безопасности и эффективности лекарственного препарата.
Технический результат, который может быть получен с помощью предлагаемого изобретения, сводится к сокращению длительности и трудоемкости процесса, повышению его производительности.
Технический результат достигается с помощью способа определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro, в котором производят взятие 1 мл ниосомальной дисперсии, постоянное перемешивание в химическом стакане на магнитной мешалке, содержащем 100 мл фосфатно-солевого буфера, при этом в ниосомальную дисперсию инкапсулируют цефотаксим, помещают в диализный мешок (10-14 кДа, ширина 10 мм), который переносят в химический стакан, содержащий 0,01 М фосфатно-солевого буфера (рН=7,2-7,4), причем раствор с погруженным диализным мешком перемешивают на магнитной мешалке при (37±1)°С, причем образцы раствора отбирают через 1, 2, 3.5, 5, 24 часа, анализируемый раствор перед анализом разбавляют в 10 раз раствором 0,02 М раствора ацетата аммония (рН=4,7) и фильтруют через PVDF фильтр с размером пор 0,2 мкм.
Сущность способа определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro, включающий взятие 1 мл ниосомальной дисперсии, постоянное перемешивание в химическом стакане на магнитной мешалке, содержащем 100 мл фосфатно-солевого буфера, при этом в ниосомальную дисперсию инкапсулируют цефотаксим, помещают в диализный мешок (10-14 кДа, ширина 10 мм), который переносят в химический стакан, содержащий 0,01 М фосфатно-солевого буфера (рН=7,2-7,4), причем раствор с погруженным диализным мешком перемешивают на магнитной мешалке при (37±1)°С, причем образцы раствора отбирают через 1, 2, 3.5, 5, 24 часа, анализируемый раствор перед анализом разбавляют в 10 раз раствором 0,02 М раствора ацетата аммония (рН=4,7) и фильтруют через PVDF фильтр с размером пор 0,2 мкм.
Краткое описание чертежей и их материалов
На фиг. 1 дан способ определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro, переход в раствор цефотаксима, инкапсулированного в ниосомы, в ходе диализа против 0,01 М фосфатно-солевого буфера при (37±1)°С.
Осуществление изобретения
Примеры конкретного выполнения способа определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro.
Пример №1
Для этого 1 мл очищенной ниосомальной дисперсии препаратов 3 различных составов:
- S60-60%: молярное соотношение сорбитана моностеарата, холестерина, ПЭГ-4000 и дицетилфосфата 60:34:5:1;
- S60-50%: молярное соотношение сорбитана моностеарата, холестерина, ПЭГ-4000 и дицетилфосфата 50:44:5:1;
- S60-40%: молярное соотношение сорбитана моностеарата, холестерина, ПЭГ-4000 и дицетилфосфата 40:54:5:1;
с инкапсулированным цефотаксимом, помещают в диализный мешок (3,5 кДа, ширина 19 мм), который переносят в химический стакан, содержащий 100 мл 0,001 М фосфатно-солевого буфера (рН=7,0-7,2). Раствор с погруженным диализным мешком перемешивают на магнитной мешалке при (32±1)°С, образцы раствора отбирают через 0.5, 6, 24 часа. Анализируемый раствор перед анализом разбавляют в 5 раз раствором 0,002 М раствора ацетата аммония (рН=4,2) и фильтруют через PVDF фильтр с размером пор 0,1 мкм.
Концентрацию цефотаксима определяют методом обращенно-фазной высокоэффективной хроматографии в изократическом режиме элюирования. В ходе анализа используется хроматографическая колонка С18 250×3 мм, размер частиц 5 мкм. Подвижная фаза - смесь 0,02 М раствора ацетата аммония (рН=4,7) с ацетонитрилом в соотношении 90:10. Детекция осуществляется ультрафиолетовым детектором при длине волны 252 нм.
Объем вводимой пробы 10 мкл. Проводится не менее пяти измерений для каждого раствора (патент 2687493).
При заданных параметрах переход в раствор цефотаксима, инкапсулированного в ниосомы, в ходе диализа отследить не удалось.
Пример №2
Выполняется аналогично примеру 1, но ниосомальные дисперсии с инкапсулированным цефотаксимом, помещают в диализный мешок (10-14 кДа, ширина 10 мм), который переносят в химический стакан, содержащий 0,01 М фосфатно-солевого буфера (рН=7,2-7,4). Раствор с погруженным диализным мешком перемешивают на магнитной мешалке при (37±1)°С, образцы раствора отбирают через 1,2, 3.5, 5, 24 часа. Анализируемый раствор перед анализом разбавляют в 10 раз раствором 0,02 М раствора ацетата аммония (рН=4,7) и фильтруют через PVDF фильтр с размером пор 0,2 мкм.
Согласно полученным данным, высвобождение цефотаксима из ниосомальных микрочастиц наиболее интенсивно происходит в первые 4 часа (фиг. ). В этот период происходит высвобождение 70-80% от исходного количества инкапсулированного антибиотика. Спустя 24 часа диализа ниосомы сохраняют 15-19% от исходного количества инкапсулята. Кроме того, скорость высвобождения цефотаксима в раствор уменьшается с увеличением доли холестерина относительно Span 60 в составе ниосом.
Пример №3
Выполняется аналогично примеру 1, но ниосомальные дисперсии с инкапсулированным цефотаксимом, помещают в диализный мешок (12-14 кДа, ширина 45 мм), который переносят в химический стакан, содержащий 100 мл 0,1 М фосфатно-солевого буфера (рН=7,4-7,6). Раствор с погруженным диализным мешком перемешивают на магнитной мешалке при (40±1)°С, образцы раствора отбирают через 4, 6, 12, 24 часа. Анализируемый раствор перед анализом разбавляют в 12 раз раствором 0,2 М раствора ацетата аммония (рН=5,0) и фильтруют через PVDF фильтр с размером пор 0,45 мкм.
При заданных параметрах переход в раствор цефотаксима, инкапсулированного в ниосомы, в ходе диализа отследить не удалось.
Таким образом, оптимальным является пример 2. Рассмотренный способ по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями имеет следующие преимущества: сокращение длительности и трудоемкости процесса, повышение его производительности.
Claims (1)
- Способ определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro, включающий инкапсулирование цефотаксима в 1 мл ниосомальной дисперсии, далее ниосомы цефотаксима помещают в диализный мешок 10-14 кДа, ширина 10 мм, который переносят в химический стакан, содержащий 100 мл 0,01 М фосфатно-солевого буфера рН=7,2-7,4, раствор с погруженным диализным мешком постоянно перемешивают на магнитной мешалке при 37±1°С, образцы раствора отбирают через 1, 2, 4, 6, 24 часа, анализируемый раствор перед анализом разбавляют в 10 раз раствором 0,02 М раствора ацетата аммония рН=4,7 и фильтруют через PVDF фильтр с размером пор 0,2 мкм, концентрацию цефотаксима в образце определяют методом обращенно-фазной высокоэффективной хроматографии в изократическом режиме элюирования не менее 5 раз для каждого анализируемого раствора.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020125053A RU2754850C1 (ru) | 2020-07-20 | 2020-07-20 | Способ определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020125053A RU2754850C1 (ru) | 2020-07-20 | 2020-07-20 | Способ определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2754850C1 true RU2754850C1 (ru) | 2021-09-08 |
Family
ID=77669930
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2020125053A RU2754850C1 (ru) | 2020-07-20 | 2020-07-20 | Способ определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2754850C1 (ru) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5190765A (en) * | 1991-06-27 | 1993-03-02 | Alza Corporation | Therapy delayed |
| RU2246295C2 (ru) * | 1998-11-02 | 2005-02-20 | Элзэ Копэрейшн | Лекарственная форма c постоянной скоростью высвобождения лекарственного вещества, ядро лекарственной формы и способ обеспечения облегченного высвобождения лекарственного вещества из лекарственной формы |
-
2020
- 2020-07-20 RU RU2020125053A patent/RU2754850C1/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5190765A (en) * | 1991-06-27 | 1993-03-02 | Alza Corporation | Therapy delayed |
| RU2246295C2 (ru) * | 1998-11-02 | 2005-02-20 | Элзэ Копэрейшн | Лекарственная форма c постоянной скоростью высвобождения лекарственного вещества, ядро лекарственной формы и способ обеспечения облегченного высвобождения лекарственного вещества из лекарственной формы |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ABDELSABOOR A. HASSAN et al. Formulation, characterization, stability, invitro evaluation and optimization of diacerein niosomes// Az. J. Pharm Sci. Vol. 45, March, 2012, р.475-488, весь документ. * |
| СЫСУЕВ Б.Б. и др. Современные аспекты применения нанотехнологий при разработке лекарственных форм нового поколения// Разработка и регистрация лекарственных средств. N 2 (11), 2015, стр. 88-96. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6106858A (en) | Modulation of drug loading in multivescular liposomes | |
| JP2847065B2 (ja) | リポソーム中に被包されたイオン化可能な生物学的活性剤を含有する医薬製剤 | |
| JP3026271B2 (ja) | 活性薬剤の制御放出に用いる多小胞リポソームの調製 | |
| CN102188377B (zh) | 包载药物脂质体的制备方法 | |
| JP2843566B2 (ja) | 塩酸塩の存在下で生理活性物質を包みこんだ多胞性リポソーム | |
| CN101365424A (zh) | 通过超声辐射改变脂质体组成的方法 | |
| Siewert | Validation of a levofloxacin HPLC assay in plasma and dialysate for pharmacokinetic studies | |
| AU2023266253A1 (en) | Sustained-Release Anesthetic Compositions And Methods Of Preparation Thereof | |
| RU2754850C1 (ru) | Способ определения скорости высвобождения инкапсулированного в ниосомы цефотаксима in vitro | |
| RU2606858C2 (ru) | Способ растворения нифедипина в водной среде с использованием нанотехнологии. фармацевтическая композиция, содержащая раствор нифедипина в водной среде. способ количественного определения нифедипина в растворе | |
| Giansanti et al. | Influence of lipid composition on the ability of liposome loaded voacamine to improve the reversion of doxorubicin resistant osteosarcoma cells | |
| CN114796133A (zh) | 一种注射用药物制剂及其制备方法 | |
| CN103181897B (zh) | 吉非替尼脂质体制剂及其制备方法 | |
| CN116440081A (zh) | 一种槲皮素脂质体的制备方法 | |
| CN111999157A (zh) | 一种用于检测缓释制剂中主药含量及有关物质的前处理方法 | |
| CN106924715A (zh) | 特利加压素脂质体及其制备方法 | |
| CN102138899B (zh) | 阿齐沙坦酯脂质体固体制剂 | |
| CN102188379A (zh) | 载药脂质体的制备方法 | |
| CN111067867A (zh) | 一种绿原酸长循环脂质体及其制备方法和用途 | |
| Dluska et al. | Drug-core double emulsions for co-release of active ingredients | |
| CN115040482B (zh) | 用于治疗高血压的厄贝沙坦脂质体、制剂及其制备方法 | |
| CN102302453B (zh) | 盐酸帕罗西汀脂质体固体制剂 | |
| TWI250877B (en) | Process for producing liposome suspensions and products containing liposome suspensions produced thereby | |
| RU2791481C2 (ru) | Анестетические композиции с замедленным высвобождением и способы их получения | |
| CN114557964A (zh) | 一种可载rna的阳离子梭型柔性脂质体及其制备方法和应用 |