CN111999157A

CN111999157A - 一种用于检测缓释制剂中主药含量及有关物质的前处理方法

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Publication number: CN111999157A
Application number: CN201910391005.4A
Authority: CN
Inventors: 王羽; 周大涛; 徐佳佳
Original assignee: Beijing Tide Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Beijing Tide Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2019-05-11
Filing date: 2019-05-11
Publication date: 2020-11-27
Anticipated expiration: 2039-05-11
Also published as: CN111999157B

Abstract

本发明公开了一种检测含有亲水性凝胶骨架和高粘度辅料的缓释制剂中主药含量及有关物质的前处理方法，其特征在于采用有机溶剂作为分散溶媒，无机盐作为沉淀剂，经反复振摇，且一定时间的超声作用下，结合研磨、离心及过滤等辅助处理步骤，对缓释制剂中的主成分含量及有关物质进行分离测定。本发明可使样品溶液粘度有效降低、流动性增加，易于分散及后续的离心过滤操作，且在检测过程中未见对含量及有关物质的检测产生显著干扰，方法专属性强，灵敏度高，准确度好，可以有效用于含有亲水性凝胶骨架和高粘度辅料缓释制剂中含量及有关物质的质量控制中。

Description

一种用于检测缓释制剂中主药含量及有关物质的前处理方法

技术领域

本发明涉及分析化学技术领域，具体涉及一种检测缓释制剂中主药含量及有关物质的前处理方法，尤其涉及一种含有亲水性凝胶骨架和高粘度辅料的缓释制剂中主药含量及有关物质的前处理方法。

背景技术

药物一般以制剂形式用于预防、治疗和诊断疾病，其有效性、安全性、合理性及精密性反映出医药水平，并决定药物效果。第一代剂型只药物进过简单加工的供口服和外用的膏丹丸片剂、注射剂、胶囊剂和气雾剂，第二代剂型的药物活性大大提高，现已在临床上广泛应用。第三代剂型利用新型药物辅料，通过膜控技术、骨架阻滞技术及包衣技术等来控制片剂、胶囊剂的释药速度，从而定时、定速释放，能延缓有效血药浓度的持续时间，提供用药的安全度和减少不良反应。

缓释制剂在用药后能在较长时间内持续释放药物进而到达持续作用的作用效果，其优点包括给药次数少、峰谷血药浓度波动小、降低胃肠不良反应、释放缓慢、降低吸收速率和安全经济等，但由于缓释制剂中应用了新型缓释材料、例如缓释骨架材料、具有高粘度的辅料等，给后期缓释制剂中主药含量及有关物质的测定带来了一定的难度，例如普瑞巴林缓释片，商品名Lyrica CR，其在临床上主要用于治疗抗癫痫、止痛及抗焦虑等适应症，普瑞巴林缓释片是一种同时含有亲水凝胶骨架及高粘度辅料的缓释制剂，其特点是服用后胃肠液进入骨架中，使其膨胀并形成凝胶屏障，活性药物再慢慢溶解，透过屏障释放出来，达到长效缓释的作用。然而由于亲水凝胶骨架材料遇水溶胀，及高粘度辅料的存在，与普通仅含有亲水凝胶骨架的缓释片相比，因其基质体系的粘度更大，导致其流动性不佳，在药物检测的前处理过程中难以分散或离心，无法对活性药物进行含量及有关物质等相关的检测。

中国专利申请201511033198.4中公开了一种亲水凝胶骨架型缓控释固体制剂检测前处理方法，描述了以有机相/水作为分散溶媒，再通过淀粉酶或纤维素酶的作用，改善了溶液体系的流动性，然而该方法通过酶处理的时间较长，且残留在样品中的大分子蛋白质，容易污染色谱体系，对色谱柱的损耗较为严重，且酶类具有一定的催化性，也容易将外援物质引入，因此，需要开发一个对该类缓释固体制剂具有同样沉淀效果，且快速、准确的方法。

发明内容

为了解决上述问题，本发明公开了一种检测含有亲水凝胶骨架及高粘度辅料的缓释制剂中主药含量及有关物质的前处理方法，该处理过程可使样品溶液粘度降低、流动性提高，以达到便于分散和离心的目的，且所制得的溶液中不存在干扰其含量及有关物质检测的成分，专属性好，准确度高，从而实现有效的分离和检测。

为了达到上述目的，本发明通过如下技术方案实现：

一种检测含有亲水凝胶骨架及高粘度辅料的缓释制剂中主药含量及有关物质的前处理方法，该方法采用有机溶剂作为分散溶媒，以无机盐作为沉淀剂，在振摇作用下，结合超声、研磨、离心及过滤等辅助处理步骤，对含有亲水凝胶骨架及高粘度辅料缓释制剂中的主成分含量及有关物质进行分离测定。

本发明所针对的前处理对象是含有亲水凝胶骨架及高粘度辅料的缓释制剂，其中亲水凝胶骨架材料包括但不限于果胶、微晶纤维素、甲基纤维素、羟丙甲纤维素、乙烯基聚合物、聚乙烯醇等，其中所述的高粘度辅料包括但不限于聚氧乙烯、卡波姆、聚醋酸乙烯酯、聚维酮、聚乙烯吡咯烷酮等。

根据本发明，由于亲水凝胶骨架材料遇水膨胀并形成凝胶屏障，故为了确保在整个处理过程中不至于形成流动性差的凝胶状固体，本发明在研发中意外发现当分散溶媒为非水溶剂时，能够有效破坏骨架材料的网状结构，同时使样品溶液呈现出分散性良好的颗粒溶液状态，因此，本发明所采用了单一有机溶剂作为分散溶媒，例如甲醇、乙醇、乙腈中的一种或者几种，在某些实施例中选择甲醇或者乙腈，进一步的在某些实施例中分散溶媒为甲醇。

根据本发明，由于在本发明所述的缓释制剂的处方中，除含有亲水凝胶骨架材料外，还有一定量的高粘度辅料的存在，遇水后，使样品溶液体系的处理难度更大，故在水相中增加一定浓度的无机盐，可使体系的粘度极大程度的降低，流动性也可得到显著提高，其中本发明所述的无机盐为钠盐、钾盐或者钙盐，例如氯化钾、氯化钠、硫酸钾、硫酸钠、氯化钙等，其中在某些实施例中优选钙盐，进一步的在某些实施例中所述的无机盐是一价钙盐,例如氯化亚钙或者硝酸亚钙。

本发明所述的前处理方法中，在处理过程加入无机盐水溶液，其中无机盐的溶度小于40%，在某些实施例中无机盐的浓度小于30%，进一步的在某些实施例中无机盐的浓度小于20%，优选的无机盐的浓度为1%-10%，本发明中进一步无机盐的浓度可选自1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%、5%、5.5%、6%、6.5%、7%、7.5%、8%、8.5%、9%、9.5%或者10%。

本发明所述的前处理方法中,在处理过程中加入的是含有一价阴离子的钙盐溶液.

本发明所述的检测缓释制剂中主药含量及有关物质的前处理方法，本发明所述的缓释制剂包括缓释片或者缓释胶囊，除适用于普瑞巴林缓释片外，还可以适用于普瑞巴林缓释胶囊、曲马多缓释片、对乙酰氨基酚缓释片或者双氯酚酸钠缓释片等同时含有亲水凝胶骨架材料及高粘度辅料的缓释制剂。

本发明所述的前处理方法包括分散和沉淀步骤，在上述步骤中通过振摇的方式将样品有效分散，维持样品溶液的分散性和均匀性。

根据本发明的实施方式，所述的前处理过程中，先加入分散剂，通过振摇，将样品溶液反复振摇直至颗粒均匀分散的程度，再加入沉淀剂，对样品溶液进行超声。

根据本发明的实施方式，所述的前处理过程中，在加入分散剂后，通过振摇，将样品溶液反复振摇直至颗粒均匀分散的程度，此时样品溶液呈现凝胶状的均匀溶液，其中振摇时间不少于15min，进一步振摇的时间不少于10min，本发明所述的振摇的时间为9min、8min、7min、6min、5min，再次本发明中振摇的时间不能少于5min。

根据本发明的实施方式，所述的前处理过程中，在加入沉淀剂后，对样品容溶液进行超声，其超声的时间为10-30min，在某些实施例中超声时间为10-20min。

本发明所述的前处理方法，其包含如下步骤：

（1）在待测样品中加入适量的分散剂，将上述样品经振摇至颗粒均匀分散后，将样品进行超声；

（2）在上述样品中加入沉淀剂，超声处理10-20min，冷却至室温，稀释、摇匀、离心，取上层清液过滤，取续滤液即得。

本发明采用自制的普瑞巴林缓释片为试验对象，考察了含一定浓度的有机溶剂水溶液稀释后的对比情况，以及不同的处理方式对其含量和有关物质的检测情况，结果显示，对照组所获得的待测溶液难以流动，无法分散和离心，导致检测困难，而本发明获得的待测溶液具有良好的流动性，分散性好，且便于离心过滤等后续处理步骤，从而达到准确检测的目的。

由以上技术方案可知，本发明以有机溶剂为分散剂，无机盐为沉淀剂，再结合研磨、振摇、超声及过滤等适宜的操作步骤，对含亲水骨架材料及高粘度辅料的缓释片进行前处理，所获得的溶液粘度降低，流动性提高，分散均匀，便于离心和过滤，且在检测过程中未见对含量及有关物质的检测产生显著干扰，并能达到专属、灵敏和准确的检测结果，显示出了该处理方法在检测含有亲水骨架材料及高粘度辅料室温缓释片主药含量及有关物质的明显优势。

附图说明

图1为实施例2中普瑞巴林缓释片处理方式3的含量检测HPLC谱图；

图2为实施例2中普瑞巴林缓释片处理方式3的有关物质检测HPLC谱图；

图3为实施例4中普瑞巴林缓释片处理方式1的样品溶液图；

图4为实施例4中普瑞巴林缓释片处理方式2的样品溶液图。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的发明并不限于下面的实施例，这些实施例不以任何方式限制本发明的范围。本领域的技术人员在权利要求的范围内所作出的某些改变和调整也应认为属于本发明的范围。

仪器设备

普瑞巴林缓释片（自制）

实施例1

普瑞巴林缓释片样品前处理中不同稀释剂及稀释步骤的对比

1.稀释步骤

1）稀释步骤1：先加甲醇，振摇10min分散，超声，再加水（20:80）

2）稀释步骤2：先加乙腈，振摇10min分散，超声，再加水（20:80）

3）稀释步骤3：先加甲醇，振摇10min分散，超声，再加氯化钙溶液（20:80）

4）稀释步骤4：先加乙腈，振摇10min分散，超声，再加氯化钙溶液（20:80）

2.处理方式

1）处理方式1：称取研磨后细粉适量（约含普瑞巴林1000 mg），置500 mL量瓶中，按稀释步骤1稀释后，样品成凝胶状，无流动性，无法完成后续处理步骤。

2）处理方式2：称取研磨后细粉适量（约含普瑞巴林1000 mg），置500 mL量瓶中，按稀释步骤2稀释后，样品成凝胶状，无流动性，无法完成后续处理步骤。

3）处理方式3：称取研磨后细粉适量（约含普瑞巴林1000 mg），置500 mL量瓶中，按稀释步骤3稀释后，摇匀，超声处理15 min，放冷至室温，再加氯化钙溶液稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液过滤，取续滤液，即得。

4）处理方式4：称取研磨后细粉适量（约含普瑞巴林1000 mg），置500 mL量瓶中，按稀释步骤4稀释后，摇匀，超声处理15 min，放冷至室温，再加氯化钙溶液稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液过滤，取续滤液，即得。

3.结果

处理方式1和2：样品溶液几乎无流动性，无法开展后续处理及检测工作。

处理方式4：样品溶液分散性差，容易粘底，且不易混合均匀。

处理方式3：样品溶液具有良好的流动性，离心后，上清液澄清，易于过滤，使后续检测能顺利进行。

实施例2

普瑞巴林缓释片样品前处理中不同沉淀剂的对比

1.沉淀剂

1）沉淀剂1：10%氯化钾

2）沉淀剂2：10%硫酸钠

3）沉淀剂3：10%氯化钙

2.处理方式

1）处理方式1：称取研磨后细粉适量（约含普瑞巴林1000 mg），置500 mL量瓶中，先加甲醇，振摇15min分散，超声，再加入沉淀剂1，摇匀，超声处理15 min，放冷至室温，再加沉淀剂1稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液过滤，取续滤液，即得。

2）处理方式2：称取研磨后细粉适量（约含普瑞巴林1000 mg），置500 mL量瓶中，先加甲醇，振摇15min分散，超声，再加入沉淀剂2，摇匀，超声处理15 min，放冷至室温，再加沉淀剂2稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液过滤，取续滤液，即得。

3）处理方式3：称取研磨后细粉适量（约含普瑞巴林1000 mg），置500 mL量瓶中，先加甲醇，振摇15min分散，超声，再加入沉淀剂3，摇匀，超声处理15 min，放冷至室温，再加沉淀剂3稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液过滤，取续滤液，即得。

3.结果

处理方式1：加入10%氯化钾溶液后，溶液流动性较好，但有颗粒悬浮，放置后，有部分漂浮于液面，影响准确定容；

处理方式2：加入10%硫酸钠溶液后，溶液流动性较好，但溶液显浑浊，不易判断主成分是否完全溶解，且影响准确定容；

处理方式3：加入10%氯化钙溶液后，溶液流动性良好，呈均匀的凝胶分散状态，离心后，上清液澄清，易于后续样品检测。

实施例3

普瑞巴林缓释片样品前处理中沉淀剂不同浓度的对比

1.沉淀剂浓度

1）沉淀剂浓度1：1%氯化钙溶液

2）沉淀剂浓度2：40%氯化钙溶液

2.处理方式

1）处理方式1：称取研磨后细粉适量（约含普瑞巴林1000 mg），置500 mL量瓶中，先加甲醇，振摇15min分散，超声，再加入沉淀剂浓度1，摇匀，超声处理15 min，放冷至室温，再加沉淀剂浓度1稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液过滤，取续滤液，即得。

2）处理方式2：称取研磨后细粉适量（约含普瑞巴林1000 mg），置500 mL量瓶中，先加甲醇，振摇5min分散，超声，再加入沉淀剂浓度2，摇匀，超声处理15 min，放冷至室温，再加沉淀剂浓度3稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液过滤，取续滤液，即得。

3.结果

处理方式1和2：加入1%和40%的氯化钙溶液后，溶液流动性较好，但加入40%氯化钙溶液后，产生较多的固体漂浮颗粒浮于液面，影响准确定容，说明无机盐的浓度过高，与溶媒混合后易析出，也更容易污染液相色谱系统。

实施例4

普瑞巴林缓释片不同振摇程度的对比

1.处理方式

1）处理方式1：称取研磨后细粉适量（约含普瑞巴林400 mg），置200 mL量瓶中，先加甲醇，轻微振摇2min后，再加入氯化钙溶液，摇匀，超声处理15 min，放冷至室温，再加氯化钙溶液稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液过滤，取续滤液，即得。

2）处理方式2：称取研磨后细粉适量（约含普瑞巴林1000 mg），置500 mL量瓶中，先加甲醇，振摇5min分散（即反复振摇直至颗粒均匀分散后），超声，再加入氯化钙溶液，摇匀，超声处理15 min，放冷至室温，再加氯化钙溶液稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液过滤，取续滤液，即得。

2.结果

处理方式1和2：加完甲醇后，振摇程度的不同，对后续的溶液分散性影响较大，如图2所示，随着氯化钙的不断加入，未分散均匀的辅料会不断的蓄积直至液面，影响定容的准确性和重现性；而如图3所示，加入氯化钙前，样品颗粒已被充分振摇均匀，随着氯化钙的加入，再不断的振摇，最终呈现出均匀的凝胶状溶液，结合回收率的考察结果，在亲水骨架材料及高黏度辅料量存在的条件下，API的加样回收率能达到98.0~102.0%之间，表明API在高比例辅料中，通过繁琐的前处理过程，准确性是比较可靠的。

实施例5

盐酸曲马多缓释片样品前处理

盐酸曲马多缓释片（商品名 RYZOLT™ ，100mg）配方：

处理方式：称取研磨后细粉适量（约含盐酸曲马多1000 mg），置500 mL量瓶中，先加甲醇，振摇10min分散，超声，再加入10%氯化亚钙，摇匀，超声处理15 min，放冷至室温，再加加入10%氯化亚钙稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液过滤，取续滤液，即得。

结果：处理后的样品溶液流动性良好，呈均匀的凝胶分散状态，离心后，上清液澄清，可用于后续样品检测。

Claims

1.一种检测含有亲水凝胶骨架及高粘度辅料的缓释制剂中主药含量及有关物质的前处理方法，其特征在于采用有机溶剂作为分散溶媒，以无机盐作为沉淀剂，在振摇作用下，结合其他辅助处理步骤，获得待测样品用于检测。

2.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于所述的有机溶剂是甲醇、乙醇、乙腈中的一种或者几种。

3.根据权利要求1-2中任选所述的前处理方法，其特征在于所述的有机溶剂是甲醇或者乙腈。

4.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于所述的无机盐是钙盐。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的前处理方法,其特征在于所述的无机盐是一价钙盐。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的前处理方法，其特征在于所述的无机盐是氯化亚钙或者硝酸亚钙。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的前处理方法，其特征在于所述无机盐的浓度小于40%。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的前处理方法，其特征在于所述无机盐的浓度小于20%。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的前处理方法，其特征在于本发明所述的缓释制剂是缓释片或者缓释胶囊。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的前处理方法，其特征在于本发明所述的缓释制剂是普瑞巴林缓释片、普瑞巴林缓释胶囊、曲马多缓释片、对乙酰氨基酚缓释片或者双氯酚酸钠缓释片。

11.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于该前处理方法包括分散和沉淀步骤。

12.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于该方法先加入分散剂，通过振摇，将样品溶液反复振摇直至颗粒均匀分散的程度，再加入沉淀剂，对样品溶液进行超声。

13.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于该方法振摇的时间不少于15min。