RU2657801C1 - Комбинированная вакцина для иммунопрофилактики кори, эпидемического паротита и краснухи - Google Patents
Комбинированная вакцина для иммунопрофилактики кори, эпидемического паротита и краснухи Download PDFInfo
- Publication number
- RU2657801C1 RU2657801C1 RU2016150519A RU2016150519A RU2657801C1 RU 2657801 C1 RU2657801 C1 RU 2657801C1 RU 2016150519 A RU2016150519 A RU 2016150519A RU 2016150519 A RU2016150519 A RU 2016150519A RU 2657801 C1 RU2657801 C1 RU 2657801C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- rubella
- measles
- virus
- strain
- vaccine
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 49
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 title claims abstract description 47
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 title claims abstract description 36
- 206010034038 Parotitis Diseases 0.000 title abstract 6
- 241000710799 Rubella virus Species 0.000 claims abstract description 28
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 claims abstract description 23
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 10
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims abstract description 9
- 210000001840 diploid cell Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 241000334119 Coturnix japonica Species 0.000 claims abstract description 6
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 208000005647 Mumps Diseases 0.000 claims description 40
- 208000010805 mumps infectious disease Diseases 0.000 claims description 40
- 241000711386 Mumps virus Species 0.000 claims description 20
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 19
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 7
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract 1
- 229940031418 trivalent vaccine Drugs 0.000 abstract 1
- 229960003131 rubella vaccine Drugs 0.000 description 12
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 12
- 229940001442 combination vaccine Drugs 0.000 description 11
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 229940041323 measles vaccine Drugs 0.000 description 8
- 229940095293 mumps vaccine Drugs 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 239000011265 semifinished product Substances 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 4
- 210000004201 immune sera Anatomy 0.000 description 4
- 229940042743 immune sera Drugs 0.000 description 4
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 3
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 2
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 2
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 2
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241001219584 Measles virus strain Leningrad-16 Species 0.000 description 1
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 1
- 235000014676 Phragmites communis Nutrition 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 206010062106 Respiratory tract infection viral Diseases 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 230000000601 reactogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000004861 thermometry Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000605 viral structure Anatomy 0.000 description 1
- 229960004854 viral vaccine Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
- A61K39/165—Mumps or measles virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/20—Rubella virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и касается комбинированной вакцины для иммунопрофилактики кори, эпидемического паротита и краснухи. Вакцина содержит штамм вируса кори, штамм вируса эпидемического паротита, штамм вируса краснухи и стабилизирующий агент. При этом в качестве штамма вируса кори используется штамм Ленинград-16, в качестве штамма вируса паротита - штамм Ленинград-3, культивируемые на трипсинизированных первичных клетках эмбрионов японских перепелов, в качестве штамма вируса краснухи - штамм RA27/3, культивируемый на культуре диплоидных клеток человека MRC-5. Состав действующих веществ вакцины в расчете на одну прививочную дозу содержит: вирус кори - не менее 1000 (3,0 lg) тканевых цитопатогенных доз (ТЦД50); вирус краснухи - не менее 1000 (3,0 lg) ТЦД50; вирус паротита - не менее 10000 (4,0 lg) ТЦД50. Изобретение обеспечивает возможность создания стабильной комбинированной трехвалентной вакцины для иммунопрофилактики кори, эпидемического паротита и краснухи. 3 ил., 3 табл., 1 пр.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии и касается комбинированной вакцины для иммунопрофилактики кори, эпидемического паротита и краснухи.
Значительные успехи в создании комбинированных вакцин достигнуты рядом зарубежных фирм. На рынке РФ имеются зарубежные аналоги комбинированной вакцины: производства компании Мерк Шарп и Доум Б.В., Нидерланды «М-М-Р II», производства компании «ГлаксоСмитКляйн Байолоджикалз а.с», Бельгия «Приорикс», производства компании Серум Инститьют оф Индия, Лтд «Вакцина против кори, паротита и краснухи живая аттенуированная», известна комбинированная вакцина производства компании Санофи Пастер, Франция «Trimovax».
Состав некоторых комбинированных вакцин, зарегистрированных в России и применяемых для иммунизации, указан в Таблице 1.
Ближайшим аналогом является композиция вакцины против кори, эпидимического паротита и краснухи, описанная в WO 9220375, опубл. 1992, содержащая, в расчете на прививочную дозу:
Вирус кори - по меньшей мере 1000 TCID50
Вирус краснухи - по меньшей мере 1000 TCID50
Вирус паротита - по меньшей мере 20000 TCID50, и стабилизатор.
Отечественные комбинированные трехкомпонентные вакцины для профилактики кори, краснухи и паротита в Российской Федерации не зарегистрированы.
Основная сложность разработки комбинированных вакцинных препаратов состоит в обеспечении полноценного иммунного ответа на все компоненты вакцины.
Трудности создания комбинированной вакцины связаны, прежде всего, с решением проблем совместимости ее компонентов, стабильности и сохранения достаточной иммуногенности препарата. Иммуногенная активность компонентов сложных вакцин может варьировать в зависимости от многих факторов: биологических свойств используемых в производстве штаммов; качества питательных сред, методов изготовления компонентов; качественных характеристик вспомогательных веществ, входящих в состав стабилизаторов.
Различные фирмы используют для производства как моно, так и комбинированных вакцин разные штаммы вирусов и клеточные субстраты для их культивирования.
В СССР с 1970 г. было начато производство коревой вакцины из штамма Ленинград-16 с использованием в качестве субстрата культуры клеток фибробластов эмбрионов японских перепелов (ФЭП).
Живая паротитная вакцина из штамма Ленинград-3 на культуре клеток ФЭП была рекомендована в практику здравоохранения Приказом МЗ СССР №109 от 01.02.1980 г.
С 2002 года в практику здравоохранения Российской Федерации введена дивакцина против кори и паротита (Патент РФ №2158134, 27.10.2000 г.).
В 70-ые годы XX века в г. Ленинграде под руководством академика А.А. Смородинцева был получен изолированный на территории Российской Федерации вакцинный штамм вируса краснухи «Орлов». (Мешалова В.Н. Опыт получения и аттенуации краснушного штамма «Орлов», «Респираторные вирусные инфекции», Труды ЛНИИЭМ им. Пастера, Л.: 1973, 137-143). В 1995 г. вакцинный штамм «Орлов» был восстановлен до исходных показателей биологической активности, сертифицирован в ГИСК им. Л.А. Тарасевича как вакцинный и получил наименование «Орлов-В» [Патент РФ №2081912, 1997 г.]. Штамм «Орлов-В» получен из штамма «Орлов» путем многократного пассирования в первичной культуре клеток почки кролика. Однако использование в качестве тканевого субстрата в производстве вакцины первичной культуры клеток почки кролика усложняет технологию получения вакцины, затрудняет стандартизацию качественных характеристик конечного продукта, повышает себестоимость препарата
В качестве продуцента краснушной вакцины также был предложен штамм вируса краснухи «Орлов-Д», полученный в результате адаптирования штамма «Орлов-В» к диплоидной клеточной культуре путем пассирования в клетках кожно-мышечных фрагментов эмбриона человека М-22 (Патент РФ №2173344, 2001 г.).
В Российской Федерации иммунизация против краснухи детей первого - второго года жизни введена в календарь профилактических прививок приказом МЗ РФ от 27.12.97 г. №375. В отсутствие на тот момент отечественного препарата вакцины против краснухи иммунизация проводилась зарубежными вакцинами, созданными на основе штамма RA-27/3.
Вакцинный штамм вируса краснухи RA27/3 получен в 1967 г. С. Плоткиным (Stanley Plotkin) на 26-м пассаже в культуре диплоидных клеток WI-38 (Plotkin S.A., Farquhar J.D., Katz M., Buser F. (1969) Attenuation of RA27/3 rubella virus in WI-38 human diploid cells. Am. J. Dis Child. 11: 178-185). Ему впервые удалось выделить вакцинный вирус, не вызывающий побочных реакций, которыми отличались ранее используемые при производстве вакцины против краснухи штаммы HPV-77 и Cendehill.
В 2011 г. в России была зарегистрирована отечественная «Вакцина против краснухи культуральная живая» (Регистрационное удостоверение № ЛП-000463 от 01.03.2011), разработанная на основе штамма RA-27/3, культивируемого на диплоидных клетках человека MRC-5. Клинические исследования показали, что препарат низко реактогенен, хорошо переносится детьми и безопасен, обладает выраженными иммуногенными свойствами. С 2013 г. начато применение коммерческих серий данной вакцины в практике здравоохранения. Российский опыт применения вакцины против краснухи из штамма RA27/3 доказал его безвредность и высокую иммунологическую эффективность.
Задачей изобретения является разработка комбинированной вакцины для иммунопрофилактики кори, эпидемического паротита и краснухи, обладающей высокой иммуногенностью и стабильностью.
Поставленная задача решается заявленной композицией комбинированной вакцины для иммунопрофилактики кори, эпидемического паротита и краснухи, содержащей в качестве штамма вируса кори - штамм Ленинград-16 (Л-16), в качестве штамма вируса эпидемического паротита - штамм Ленинград-3 (Л-3), культивируемые на трипсинизированных первичных клетках эмбрионов японских перепелов, и в качестве штамма вируса краснухи - штамм RA27/3, культивируемый на культуре диплоидных клеток человека MRC-5, со стабилизирующим агентом, представляющим собой фосфатно-солевой раствор, содержащий ионы кальция и магния, и дополнительно - моно и дисахариды и одну или несколько аминокислот, выбранных из группы, содержащей аргинин, пролин, глицин, натриевую или калиевую соль глутаминовой кислоты, гистидин, аланин, и частично гидролизованный желатин.
При этом содержание вирусов кори, паротита и краснухи в одной прививочной дозе комбинированной вакцины составляет:
- вирус кори - не менее 1000 тканевых цитопатогенных доз (ТЦД50);
- вирус краснухи - не менее 1000 ТЦД50;
- вирус паротита - не менее 10000 ТЦД50,
Отличие заявленной вакцины состоит в том, что она содержит в одной прививочной дозе, в качестве вируса кори - штамм Л-16, культивируемый на трипсинизированных первичных клетках эмбрионов японских перепелов, не менее 1000 (3,0 lg) ТЦД50, в качестве вируса паротита - штамм Л-3, культивируемый на трипсинизированных первичных клетках эмбрионов японских перепелов, не менее 10000 (4,0 lg) ТЦД50, в качестве вируса краснухи - штамм RA27/3, культивируемый на культуре диплоидных клеток человека MRC-5, не менее 1000 (3,0 lg) ТЦД50. Композиция содержит стабилизирующий агент - фосфатно-солевой раствор, содержащий ионы кальция и магния, и дополнительно - моно и дисахариды и одну или несколько аминокислот, выбранных из группы, содержащей аргинин, пролин, глицин, натриевую или калиевую соль глутаминовой кислоты, гистидин, аланин, и частично гидролизованный желатин.
Опыт многолетнего применения в СССР, а затем в России живых культуральных моновакцин против кори и паротита, паротитно-коревой вакцины из штаммов Ленинград-16 и Ленинград-3, а также многолетний международный и российский опыт применения вакцины против краснухи из штамма RA27/3 определил выбор этих штаммов для создания комбинированной вакцины.
Активные и вспомогательные вещества, входящие в состав комбинированной вакцины, хорошо изучены с точки зрения безопасности и применяются в производстве других живых культуральных вакцин.
Зависимость специфической активности вирусов кори и паротита от соотношения при их комбинировании хорошо известна на примере паротитно-коревой вакцины. Для изучения зависимости специфической активности коревого и краснушного, а также паротитного и краснушного компонентов при комбинировании их жидких полуфабрикатов были приготовлены экспериментальные серии соответствующих дивакцин в сравнении с тривакциной. Сохранение специфической активности отдельных вирусов при приготовлении комбинированной тривакцины было показано методом определения цитопатогенного действия вируса на чувствительные клетки Vero (для вируса кори и паротита) и клетки RK-13 (для вируса краснухи) с предварительной нейтрализацией двух из трех компонентов соответствующими иммунными сыворотками.
Результаты приведены в Таблице 2.
Как видно из Таблицы 2, специфическая активность монокомпонентов вирусов в составе дивакцин и тривакцины были практически одинаковыми, при этом полученные значения хорошо коррелировали с расчетными значениями специфической активности.
Это доказывает, что в процессе приготовления тривакцины отдельные вирусные компоненты хорошо сочетаются друг с другом и не происходит подавления вирусной активности ни одного из компонентов.
Композиция обеспечивает сохранение вирусов кори, паротита и краснухи в комбинированной вакцине на протяжении не менее 2-х лет.
Данные представлены в Таблице 3.
Комбинированную вакцину получают путем объединения в определенном соотношении стабилизированных жидких полуфабрикатов коревой, паротитной вакцин и вакцины против краснухи, приготовленных с использованием производственных штаммов и посевных вирусов, применяемых при производстве соответствующих моновакцин:
- вируса кори - Ленинград-16;
- вируса паротита - Ленинград-3;
- вируса краснухи - RA 2 7/3.
Безопасность и иммуногенность комбинированной вакцины для профилактики кори, краснухи и паротита была подтверждена в исследовании на лабораторных приматах - на макаках резусах (macaca mulatta).
В испытании использовали 12 обезьян в возрасте 1,5-2,0 года, с массой тела от 2,300 до 3,550 кг. В качестве препаратов сравнения использовали вакцину паротитно-коревую культуральную живую и вакцину против краснухи культуральную живую производства ФГУП «НПО «Микроген». Животным контрольной группы вводили физиологический раствор. Животных опытной группы и групп сравнения прививали одной дозой соответствующей вакцины (0,5 мл) однократно подкожно. Животным контрольной группы однократно подкожно вводили эквивалентный объем физиологического раствора (0,5 мл).
Результаты клинического наблюдения в течение 2-х месяцев, динамика показателей массы тела и данных термометрии обезьян показали безопасность исследуемой вакцины для профилактики кори, краснухи и паротита. Симптомов, характерных для инфекций вирусами кори, эпидемического паротита и краснухи, зарегистрировано не было.
Для изучения иммуногенности вакцины определяли уровень антител к вирусам кори, краснухи и паротита у обезьян до вакцинации, на 14, 30, 42 и 58 сутки после вакцинации при помощи коммерческих иммуноферментных тест-систем.
Полученные результаты доказывают, что иммунологическая активность коревого и паротитного компонентов в составе комбинированного препарата не ниже, чем в паротитно-коревой дивакцине, а краснушного компонента - не ниже, чем в монопрепарате вакцины против краснухи.
У животных контрольной группы, которым вводили физиологический раствор, образования антител к вирусам кори, краснухи и паротита не наблюдается, что свидетельствует об отсутствии распространения вакцинных штаммов вирусов серонегативным животным, т.е. об отсутствии их контагиозности.
Полученные результаты по иммуногенности представлены на Фиг. 1-3.
Фиг. 1 - Динамика уровня IgG антител к вирусу краснухи в сыворотках крови обезьян после вакцинации комбинированной вакциной против кори, паротита и краснухи и препаратами сравнения.
Фиг. 2 - Динамика уровня IgG антител к вирусу кори в сыворотках крови обезьян после вакцинации комбинированной вакциной против кори, паротита и краснухи и препаратами сравнения.
Фиг. 3 - Динамика уровня IgG антител к вирусу паротита в сыворотках крови обезьян после вакцинации комбинированной вакциной против кори, паротита и краснухи и препаратами сравнения.
Метод контроля специфической активности в комбинированной вакцине разработан на основании рекомендаций ВОЗ по контролю комбинированных вакцин против кори, эпидемического паротита и краснухи (1. Серия технических докладов ВОЗ, №840, 1994 г., 2. Manual of laboratory methods, Part II: Potency control of live viral vaccines. WHO/VSQ/97.04).
Специфическую активность в комбинированной вакцине определяют по цитопатогенному действию (ЦПД) каждого из вирусов на чувствительные клетки Vero (для вируса кори и паротита) и клетки RK-13 (для вируса краснухи), предварительно нейтрализовав два из трех компонентов соответствующими иммунными сыворотками.
Готовят суспензии клеток Vero и RK-13 на культуральной ростовой среде.
Клетки разливают в лунки планшетов для культур клеток и инкубируют до образования монослоя в термостате при температуре (36±1)°C в атмосфере с 5% углекислого газа.
Готовят образцы иммунных сывороток к кори, паротиту и краснухе в разведениях, позволяющих полностью нейтрализовать соответствующий компонент и не являющихся токсичными для клеток Vero и RK-13, и образцы вакцины в питательной среде в объеме, соответствующем прививочной дозе.
Готовят нейтрализованные смеси образцов вакцины и соответствующих образцов иммунных сывороток. Смеси выдерживают от 1,0 до 1,5 ч при комнатной температуре. По окончании контакта готовят последовательные десятикратные разведения образцов и вносят в лунки планшета с культурами клеток Vero и RK-13, соответственно.
Несколько лунок на каждом планшете оставляют для контроля культуры клеток, внося подходящую поддерживающую среду. Для контроля отсутствия цитотоксического действия сывороток на культуры клеток в несколько лунок с клеточным монослоем вносят исходные разведения иммунных сывороток.
При каждом проведении контроля специфической активности вакцины проводят титрование стандартных образцов активности живой коревой вакцины, живой паротитной вакцины и активности вируса краснухи (положительный контроль).
Инфицированные и контрольные культуры клеток инкубируют в атмосфере с 5% углекислого газа: культуры клеток Vero - 8-10 суток при температуре (36±1)°C, культуры клеток RK-13 - 10-12 суток при температуре (32±1)°С.
Учет результатов проводят с использованием инвертированного микроскопа по ЦПД.
Морфология клеток в контроле культур должна соответствовать морфологии популяции клеток исходных линий и состоять из фибробластоподобных клеток без признаков зернистости и дегенерации (клетки Vero) и эпителиоподобных клеток без признаков зернистости и дегенерации (клетки RK-13).
Морфология клеток в лунках с контролем культур клеток и контролем цитотоксического действия иммунных сывороток не должна отличаться.
В лунках планшетов с положительным контролем стандартными образцами активности вирусов должно быть выражено специфическое (корь/паротит/краснуха) цитопатогенное действие соответствующего вируса, при этом активность стандартного образца не должна выходить за пределы доверительных границ средней геометрической титра, установленного при его аттестации.
В лунках планшета с нейтрализованными паротитным и краснушным компонентами должны присутствовать специфические для вируса кори поражения культуры клеток.
В лунках планшета с нейтрализованными коревым и краснушным компонентами должны присутствовать специфические для вируса паротита поражения культуры клеток.
В лунках планшета с нейтрализованными коревым и паротитным компонентами должны присутствовать специфические для вируса краснухи поражения культуры клеток.
Учитывают наличие ЦПД вирусов в зараженных лунках, рассчитывают титр вируса в прививочной дозе по методу Рида и Менча или Спирмена-Кербера и выражают в lg ТНД50/0,5 мл.
На фоне выраженных коревых/паротитных/краснушных цитопатогенных изменений в лунках планшета с соответствующим положительным контролем в культуре, где этот компонент нейтрализован, специфические для данного вируса поражения клеток должны отсутствовать. Успешная нейтрализация отдельных компонентов вакцины при определении специфической активности служит подтверждением подлинности.
Прививочная доза (0,5 мл) должна содержать не менее 1000 ТЦД50 вируса кори (не менее 3,0 lg ТЦД50/0,5 мл), не менее 1000 ТЦД50 (не менее 3,0 lg ТЦД50/0,5 мл) вируса краснухи и не менее 10000 ТЦД50 вируса паротита (не менее 4,0 lg ТЦД50/0,5 мл).
Изобретение иллюстрируется следующим примером.
Пример.
Приготовление жидких полуфабрикатов кори, паротита и краснухи
Свежеприготовленную суспензию первичной культуры клеток эмбрионов перепелов в среде 199 разливают в одноразовые роллерные бутыли не менее 200 тыс. клеток на 1 см2 поверхности и заражают расчетным количеством вируса эпидемического паротита (штамм Л-3) или кори (штамм Л-16) во взвесь.
В каждую роллерную бутыль с клеточным монослоем диплоидной культуры клеток MRC-5 вносят расчетную заражающую дозу вируса краснухи (штамма RA 27/3) в среде F-12/MEM.
Культуры инкубируют в ростовой среде, содержащей до 10% сыворотки крупного рогатого скота или телячьей, или эмбриональной сыворотки, при температуре (35±1)°C для эпидемического паротита и кори, при температуре (30±1)°C - для краснухи.
По истечении 2-4 суток производят отмывание клеточного монослоя для каждого компонента. Затем зараженные клетки инкубируют в поддерживающей среде без сыворотки, контролируя состояние монослоя и развитие цитопатогенного действия вируса. Сбор вируссодержащей жидкости производят, начиная с 4-х суток от момента заражения для эпидемического паротита и краснухи, с 8-х суток для кори. Всего делают от 2-х до 3-х полезных сборов для вируса эпидемического паротита, от 3-х до 5 - для вируса кори и от 6 до 9 - для вируса краснухи до 50%-й деградации клеточного монослоя. Индивидуальные вирусные сборы каждого отдельного монокомпонента со специфической активностью не менее 4,7-5,0 lg ТЦД50/0,5 мл для вирусов кори и краснухи и не менее 5,7-6,0 lg ТЦД50/0,5 мл для вируса паротита объединяют и подвергают осветляющей фильтрации, затем добавляют стабилизирующий агент. Объединенные жидкие полуфабрикаты монокомпонентов замораживают при температуре не ниже 55±5°C.
Для приготовления комбинированной вакцины с заданными концентрациями компонентов кори, эпидемического паротита и краснухи полуфабрикаты каждого из монокомпонентов размораживают и перемешивают до однородного состояния, затем объединяют в пропорциях, соответствующих конечным прививочным дозам паротитного компонента - не ниже 10000 ТЦД50/0,5 мл, коревого и краснушного компонентов - не ниже 1000 ТЦД50/0,5 мл. При высоких титрах вируса кори, краснухи или паротита в жидких полуфабрикатах вакцины его содержание нивелируют добавлением в общую емкость расчетного количества подготовленного разбавителя - питательной среды, использовавшейся при культивировании одного из вирусов или сбалансированного фосфатно-солевого раствора со стабилизирующим агентом в тех же соотношениях, что и в исходном жидком полуфабрикате.
Исходные объемы компонентов определяют расчетным методом в соответствии с Методическими указаниями (В.М. Бойко, Т.В. Калашникова, «Основные принципы построения расчетов для конструирования ассоциированных препаратов», Москва, 1980 г.) по формуле:
Q=T2/T1N
где Q - объем каждого исходного компонента, в литрах;
T1 - исходная активность компонента, в ТЦД 50/0,5 мл;
Т2 - заданная активность компонента в ассоциированной вакцине, в ТЦД 50/0,5 мл;
N - заданный объем ассоциированного препарата, в литрах.
Для получения комбинированной тривакцины в объеме 10 л (N - здесь и далее -обозначение параметра согласно вышеприведенной формуле) с конечной активностью паротитного компонента (Т2п) - 100000 ТЦД 50/0,5 мл, коревого компонента (Т2к) и краснушного компонента (Т2кр) - 10000 ТЦД5 0/0,5 мл, рассчитывают объемы каждого компонента по формуле Q=T2/T1N, исходя из известной активности монопрепаратов.
Исходная активность паротитного компонента (T1п) - 235000 ТЦД 50/0,5 мл.
Исходная активность коревого компонента (Т1к) - 74000 ТЦД 50/0,5 мл.
Исходная активность краснушного компонента (Т1кр) - 110000 ТЦД 50/0,5 мл.
Подставляя в формулу известные значения, получаем необходимые для объединения объемы монопрепаратов:
Qп=(100000/235000)10=4.25 л;
Qк=(10000/74000)10=1,35 л;
Qкр=(10000/110000)10=0,9 л.
Таким образом, паротитного компонента необходимо 4,25 л, коревого - 1,35 л, краснушного - 0,9 л. Общий объем вируссодержащих компонентов - 6,5 л. В этом случае для получения конечного объема тривакцины 10 л необходимый объем разбавителя, содержащего стабилизирующий агент, составит 3,5 л.
Claims (4)
- Комбинированная вакцина для иммунопрофилактики кори, эпидемического паротита и краснухи, содержащая штамм вируса кори, штамм вируса эпидемического паротита, штамм вируса краснухи и стабилизирующий агент, отличающаяся тем, что вакцина содержит в качестве штамма вируса кори штамм Ленинград-16, в качестве штамма вируса паротита штамм Ленинград-3, культивируемые на трипсинизированных первичных клетках эмбрионов японских перепелов, в качестве штамма вируса краснухи штамм RA27/3, культивируемый на культуре диплоидных клеток человека MRC-5, и имеет следующий состав действующих веществ, в расчете на одну прививочную дозу:
- вирус кори - не менее 1000 (3,0 lg) тканевых цитопатогенных доз (ТЦД50);
- вирус краснухи - не менее 1000 (3,0 lg) ТЦД50;
- вирус паротита - не менее 10000 (4,0 lg) ТЦД50.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016150519A RU2657801C1 (ru) | 2016-12-22 | 2016-12-22 | Комбинированная вакцина для иммунопрофилактики кори, эпидемического паротита и краснухи |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016150519A RU2657801C1 (ru) | 2016-12-22 | 2016-12-22 | Комбинированная вакцина для иммунопрофилактики кори, эпидемического паротита и краснухи |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2657801C1 true RU2657801C1 (ru) | 2018-06-15 |
Family
ID=62620203
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016150519A RU2657801C1 (ru) | 2016-12-22 | 2016-12-22 | Комбинированная вакцина для иммунопрофилактики кори, эпидемического паротита и краснухи |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2657801C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2022075955A1 (en) * | 2020-10-09 | 2022-04-14 | Miracle Labs İlaç Sanayi̇ Ve Ti̇caret Anoni̇m Şi̇rketi̇ | Covid-19 virus vaccine |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992020375A1 (en) * | 1991-05-17 | 1992-11-26 | Merck & Co., Inc. | Non-stinging measles-mumps-rubella vaccine composition |
| RU2129876C1 (ru) * | 1996-07-30 | 1999-05-10 | Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.Пастера | Живая вакцина для профилактики кори |
| RU2133625C1 (ru) * | 1997-07-16 | 1999-07-27 | Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" | Способ получения живой коревой вакцины для перорального применения и способ иммунизации против кори |
| RU2158134C1 (ru) * | 2000-03-10 | 2000-10-27 | Унитарное Государственное "Московское Предприятие По Производству Бактерийных Препаратов" | Способ получения ассоциированной паротитно-коревой вакцины |
| RU2014146423A (ru) * | 2014-11-19 | 2016-06-10 | Открытое акционерное общество "Биомед" им. И.И. Мечникова | Вакцина ассоциированная живая культурная аттенуированная против кори, эпидемического паротита, краснухи и ветряной оспы |
-
2016
- 2016-12-22 RU RU2016150519A patent/RU2657801C1/ru active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992020375A1 (en) * | 1991-05-17 | 1992-11-26 | Merck & Co., Inc. | Non-stinging measles-mumps-rubella vaccine composition |
| RU2129876C1 (ru) * | 1996-07-30 | 1999-05-10 | Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.Пастера | Живая вакцина для профилактики кори |
| RU2133625C1 (ru) * | 1997-07-16 | 1999-07-27 | Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" | Способ получения живой коревой вакцины для перорального применения и способ иммунизации против кори |
| RU2158134C1 (ru) * | 2000-03-10 | 2000-10-27 | Унитарное Государственное "Московское Предприятие По Производству Бактерийных Препаратов" | Способ получения ассоциированной паротитно-коревой вакцины |
| RU2014146423A (ru) * | 2014-11-19 | 2016-06-10 | Открытое акционерное общество "Биомед" им. И.И. Мечникова | Вакцина ассоциированная живая культурная аттенуированная против кори, эпидемического паротита, краснухи и ветряной оспы |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| BORISOVA TK et al. M-29 human diploid cells line--a substrate for the production of antiviral vaccines// Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol. 2011 May-Jun;(3):43-8, . * |
| BORISOVA TK et al. M-29 human diploid cells line--a substrate for the production of antiviral vaccines// Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol. 2011 May-Jun;(3):43-8, реферат. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2022075955A1 (en) * | 2020-10-09 | 2022-04-14 | Miracle Labs İlaç Sanayi̇ Ve Ti̇caret Anoni̇m Şi̇rketi̇ | Covid-19 virus vaccine |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sanders et al. | Inactivated viral vaccines | |
| Kumru et al. | Vaccine instability in the cold chain: mechanisms, analysis and formulation strategies | |
| DK2552478T3 (en) | EXCIPIENTS FOR STABILIZING VIRUS PARTICLES | |
| ES2737852T3 (es) | Un citomegalovirus de replicación condicional como vacuna para el CMV | |
| JP5960120B2 (ja) | ウイルス粒子の安定化 | |
| UA78738C2 (en) | Composition containing cowpox virus and method for its preparation | |
| PT1427817E (pt) | Multiplicação de vírus numa cultura celular | |
| CN108697786B (zh) | 含有固定化病毒粒子的疫苗 | |
| WO2007007344A1 (en) | Inactivated poliomyelitis vaccine derived from sabin strain of polio virus | |
| JP6985384B2 (ja) | 弱毒変異型ジカウイルスを含むワクチン組成物 | |
| RU2657801C1 (ru) | Комбинированная вакцина для иммунопрофилактики кори, эпидемического паротита и краснухи | |
| JPH06234659A (ja) | 安定化生ワクチン | |
| Mazboudi et al. | A recombinant virus-like particle vaccine against adenovirus-7 induces a potent humoral response | |
| RU2665849C1 (ru) | Вакцина инактивированная эмульсионная против ящура типа О | |
| US11306292B2 (en) | Stable virus-containing composition | |
| CN110743007A (zh) | 一种联合疫苗及其制备方法、应用 | |
| Mak et al. | Humoral and cellular responses of mice to infection with a cold-adapted influenza A virus variant | |
| RU2682876C1 (ru) | Вакцина инактивированная эмульсионная против ящура типа О | |
| ES2557315T3 (es) | Nuevo virus de la gripe | |
| RU2693440C1 (ru) | Штамм "vFiraVax" для получения аттенуированной живой культуральной вакцины для профилактики ветряной оспы | |
| RU2637093C1 (ru) | Способ получения живой культуральной аттенуированной вакцины для профилактики ветряной оспы | |
| TWI736563B (zh) | 庫存之登革熱病毒減毒株的活病毒及以此等做為抗原之登革熱疫苗 | |
| RU2563345C1 (ru) | Вакцина инактивированная сорбированная против ящура типа а | |
| RU2681815C1 (ru) | Вакцина инактивированная сорбированная против ящура типа А | |
| JPS6035327B2 (ja) | ウイルス性発疹用ワクチン |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20181126 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner |