JPS6035327B2 - ウイルス性発疹用ワクチン - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はワクチン製造用として価値のある単純ヘルペス
２型（ＥｅｒｐｅｓＳｉｍｐｌｅｘＴｙｐｅ ２）ウイ
ルスの温度感受性（以下、ｔｓと称する）、かつ本質的
に非病原性の変異株の調整、該ｔｓ変異株を含有するワ
クチン及びウイルス性発疹に対する新しいワクチン接種
方法に関する。

ｉｎｖｉｔｒｏに於ては、本質的にｔｓ変異株の反応が
非許容温度、すなわち、その臨界温度（すなわち、感染
力が著しく減少する温度）に於て阻害される。

ｉｎｖｍｏで得られた結果を必ずしもｉｎｖｉｖｏで生
ずる結果にあてはめる事はできないが、ｉｎｖｉｖｏに
於てはＧ変異株が野生ウイルスと異なった行動をすると
いう事をいくつかの文献が示唆している〔ビー・アール
・ムルフイー、イー・ジー・チャルフブ、ェス・アール
・ヌシノフ及びアール・エム・チヤノツク、ジェー・イ
ンフ・デイス（Ｂ．Ｒ．Ｍｕｒｐｈｙ、Ｅ．Ｇ．Ｃｈａ
ｌｈ肋、Ｓ．Ｒ．ＮｕｓｉｎｏＨ、及びＫ．Ｍ．Ｃｈａ
ｎＭｋ、Ｊ．ｌｎｆＤｉｓ．）、第１２虎萱、２号、１
７０〜７８頁、１９７２王〕。この現像は呼吸器系の病
気に対するいくつかの生ウイルスワクチンの開発に応用
されている。すなわち、最良のｔｓ状態で、正常な体温
の範囲に臨界温度を有するｔｓ変異株は上気道の粘膜中
で増殖できる（上気道の温度は下気道及び体温より数℃
低い）が、下気道及び身体中では一部又は全く増殖が阻
害されるからである。実験動物及び人間に於ける研究で
、少なくとも数種の呼吸器ウイルスについては実験的な
発見により、この論理の裏付がなされている（例えば、
ェヌ・ジグライヒ、ェム・ロプマン及びシー・ユーゼレ
ン、ジェー・ハイジ・キャム（Ｎ．Ｚｙ餌ａ言ｃｈ、Ｍ
．Ｌｏｂｍａｎｎ、及びＣ．Ｈｕｙｇｅｌｅｎ、Ｊ．Ｈ
ｙｇ．Ｃａｍｂ．）、第７の塗、２２９〜２３４頁、１
９７２王〕。それにもかかわらず、更に、この分野に於
る非常な特異性のため、同じ原理を他のウイルス、とり
わけ、ヘルペスウイルス、例えば単純ヘルペス２型ウイ
ルスに応用できるかどうかは不明である。更に、体温と
皮層の温度の差を用いる量によりヘルペスウイルスのＰ
株を皮内に投与してワクチン接種を行なえるかどうかは
不明である。ある種のヘルペスウイルス（例えば、単純
ヘルペス２型ウイルス）が晩発性の病気も起し、患者の
最初の病気が回復した後も不定期間生体中に残存する事
は公知であり、又、ヘルペスウイルスにより誘導される
免疫が弱く、短期間である事も公知である。

そのため、ヘルペスウイルスワクチンの開発には２つの
大きな障害、すなわち、自然発病では生体を再感染から
守る力が弱いという効力の点及び該ウイルスが潜在し、
それが病気の再発をひき起すという無害性の点に大きな
障害がある。本発明はこの障害を避け、ヘルペスウイル
スｔＳ変異株の調製及び分離を行ない、最少１種の該ｔ
ｓ変異株を粘膜又は皮膚の様な生体の冷たい場所に、特
に皮内経路（例えば、乱切法）で接種する事を特徴とす
る。

本発明のワクチン接種法は単純ヘルペス２型ウイルスの
場合に例をとっているが、該方法はどの様なウイルス性
発疹のワクチン接種法にも関連し、感染しやすい生体の
冷所に、好ましくは、皮内経路、例えば乱切法により、
該発疹を起すウイルスの本質的に非病原性は変異株の効
果的な量を接種する事からなる。

ウイルス性発疹の例としては天然痘、ヒトの天然痘関連
ウイルス感染症、牛痘、水痘、帯状泡疹、癖疹、風疹、
単純庖疹及びヘルペスＢ群ウイルス感染症がある。本発
明者等は前記の様な接種経路を用いると、ワクチンのウ
イルス増殖が体の冷所に限定され、何らの検出できる液
性血清中和抗体形成なしに保護が付与される事を見出し
た。

更に、該方法でワクチン接種をした全生体は疑いなく、
広範に保護される。

事実、本発明者等は該皮内ワクチン接種がワクチン接種
生体の末梢神経系又は該生体の全く異なった暖所（例え
ば、脳）に於る再感染を防ぐという驚くべき発見をした
。本発明に従い、ワクチン製造に有用な単純ヘルペス２
型ウイルスのは変異株を調製するには、臨床例より分離
した単純ヘルペス２型ウイルス株または、たとえば一次
ウサギ啓蔵細胞の様な組織塔養で継代培養して得られる
単純ヘルペス２型ウイルス株を出発物質として用いる。

本発明に従い、単純ヘルペス２型ウイルスの本質的に非
病原性、＄変異株を誘導するには、単純ヘルペス２型ウ
イルスの病原性株をｐＨ４〜５にて亜硝酸の緩衝水溶液
と接触させ、得られたは変異株を分離して行なう。

亜硝酸の緩衝水溶液は、好ましくは、亜硝酸の酢酸緩衝
液であり、反応液中の亜硝酸及び酢酸イオンの濃度は各
々Ｎ及びＮ／４であり、接種は１〜１５分間維持する。
好ましくは接触は室温でｐＨ４．６（±０．１）にて３
±１分間、次いで室温でｐＨ４．２（±０．１）にて８
±１分間維持して行なう。次いで、得られたり変異株を
最少１回、ニワト卵率総織芽細砲、ヒト月率総織芽細砲
又は一次ウサギ腎臓細胞（以下、ＰＲＫと称する）の様
な当該分野公知の単純ヘルペス２型ウイルス増殖に許容
され、ワクチン製造の基質として許容される組織培養中
でクローン（ｃｌｏｎｅ）して分離する〔例えば、特定
病原体不含（ｓｐｅｃｍｃｐａｔｈｏ鉾ｎ ｆｒｅｅ、
以下、ＳＰＦと称する）群から由来するＰＲＫ細胞培養
中で２回クローンし、温度３０〜３７ｑ０（±１℃）、
例えば３５００で６日間培養した後分離する。

〕本発明に従い、ワクチンを製造するには前記で得られ
た単純ヘルペス２型ウイルスのｔｓ変異株を３７±１℃
以下、好ましくは３５±１℃の温度でＰＲＫ培養中に接
種し、該ウイルスが大量に増殖するのに充分な時間培養
し、次いでそのウイルスを収集する。得られた単純ヘル
ペス２型ウイルスワクチンを冷所の接種経路、好ましく
は皮内経路で、適当な量、例えば最少１びＴＣＩＤ５。

（組織培養感染投与量５０％）を接種する。ワクチンと
して用いるには、該ウイルスを好ましくは凍結乾燥の形
で保存し、水又はその他の非経口的製剤調製用として公
知の医薬用希釈剤または組成物を添加して直ちに復元す
る。

次の実施例は本発明を説明するもので、本出願人が採取
した「ヘルペス２親株」と命名している単純ヘルペス２
型ウイルス株を出発物質として用いている。

「ヘルペス２親株」から得られる２つの単純ヘルペス２
型ウイルスの広変異株は本出願人が保有し、各々、「ヘ
ルペス沙１」及び「ヘルペス２４２０８２」と命名して
いるが本発明はこれらに限定されるものではない。Ｇ変
異株を議導する方法及びこれから得られるワクチンは他
のどの様な単純ヘルペス２型ウイルス株にも適用できる
事は明らかである。実施例 １ ＳＰＦ群より由来する３〜６週令のウサギの腎臓より、
０．５％のラクトアルブミソ水解物及び１０％の子牛血
清で補足したハンクス（Ｈａｎｋｓ）の溶液からなる増
殖培地を用いＰＲＫ細胞培養を調製する。

野生単純ヘルペス２型ウイルス株「ヘルペス２親株」を
前記ＰＲＫ細胞培養中で、２％のガンマ子牛血清〔ハィ
ランド・トラベノール・ラボラトリース（ＨＹＬＡＮＤ
ＴＲＡＶＥＮＯＬいｂｓ．、米国カリフオルニア州、ロ
スアンゼルス）で製造販売されている製品〕で補足した
イーグル（Ｅａｇｌｅ）の培地を維持培地として用い、
２回継代し、最終総代の上燈液を収集し、１び．５ＴＣ
ＩＤ５ｏ／の上のウイルス懸濁液を得る。

この懸濁液１の乙を０．５の（のＭ酢酸／酢酸ナトリウ
ム緩衝液（６９の氷酢酸を蒸留水で１００の‘とした溶
液と、この３倍客の１００の‘の蒸留水に１３．６夕の
酢酸ナトリウムを溶解した溶液を混合して調製する。

両溶液とも１２ｒ０、３０分間殺菌する）中に４Ｍ亜硝
酸ナトリウム水溶液０．５机‘を加えた溶液（最終ｐＨ
‘ま４．６）に混合する。この混合液を室温で３分間反
応させ、次いで、燈拝しながらＮ水酸化ナトリウムを滴
下してｐＨ７．５（土０．５）に上げ反応を停止させる
。

ｐＨの調節はウイルス懸濁液に添加したフェノールレッ
ド指示薬の変色に従う。これを直ちにリン酸緩衝食塩水
（ＮａＣ１ ８タ：ＫＣＩ Ｏ．２夕；Ｎａ２ＨＰ０４
１．１５夕；ＫＨ２Ｐ０４０．２夕を蒸留水に溶解し８
００の上とし１００の‘の蒸留水中にＭｇＣ１２・母日
２０を溶解した溶液と混合、次いで、１００の【の蒸留
水中に０．１夕のＣａＣ１２を熔解した溶液と混合し、
これを滅菌炉遇し、最終ｐＨを７．２〜７．４としたも
の）に対し、十４±１℃で５時間透析し、この食塩水を
数回かえて亜硝酸アニオンを除去する。一部の試料で力
価を測定し、残りを−７０℃に保存する。力価測定は試
験管終点稀釈法により、１稀釈につき２試験管を用い、
ＰＲＫ組織培養中、非許容温度（３８．５ｏｏ／±１℃
）、７日間培養後行なう。−７０ｑｏに保存した試料を
ＩＴＣＩＤ５ｏ／０．２奴に稀釈し、これを２４本のＰ
ＲＫ組織培養試験管に１試験管当り０．１の【ずつ接種
する。

この試験管を許容温度（３５ｑｏ／±１００）で培養す
る。４〜１０日間の種々の培養期間の後、１６本の試験
管は典型的なヘルペス細胞変性効果を示し、これらの試
験管に１〜１６のラベルを付して−７０Ｃ０に保存する
。

これ等の１６本の陽性試料について許容温度（３５ｑｏ
）及び非許容温度（３９００）にて比較力価測定を行な
う。許容及び非許容温度間に於る力価が著しく異なる試
料は最終稀釈を継代して更にクローンする。この様に、
陽性試験管を試料Ｎｏ．４の１０‐４稀釈（すなわち、
５日間培養）に貯め、「ヘルペス２６１」のラベルを付
した株の懸濁液を得る。実施例 ２前記実施例１で得た
「ヘルペス幻ＳＩ」ウイルス株をＰＲＫ組織培養中で１
回継代し、上燈液を収集して１び．３ＴＣＩＤ５ｏ／地
のウイルス懸濁液を得る。

このウイルス懸濁液１私を、０．５の‘のＭ酢酸／酢酸
ナトリウム緩衝液（６夕の氷酢酸を蒸留水で１００の‘
とした溶液と、この３倍客の１００の‘の蒸留水に１３
．６９の酢酸ナトリウムを溶解した溶液を混合して調製
する。

両溶液とも１２１００、３び分間殺菌する）中に４Ｍ亜
硝酸ナトリウム水溶液０．５机を加えた溶液（最終ｐＨ
は４．２）に混合する。この混合液を室温で８分間反応
させ、次いで、燈拝しながらＮ水酸化ナトリウムを滴下
してｐＨ７．５（±０．５）に上げ反応を停止させる。

ｐＨの調節はウイルス懸濁液に添加したフェノールレッ
ド指示薬の変色に従う。これを直ちにリン酸緩衝食塩水
（ＮａＣ１ ８夕；ＫＣＩ Ｏ．２夕；Ｎａ２ＨＰ０４
１．１５夕；ＫＨ２Ｐ０４０．２夕を蒸留水に溶解し８
００の‘とし１００のとの蒸留水中にＭｇＣ１２・母日
２０を溶解した溶液と混合、次いで、ｌｏｏ机上の蒸留
水中に０．１夕のＣａＣ１２を溶解した溶液と混合し、
これを滅菌淀過して、最終ｐＨを７．２〜７．４とした
もの）に対し、十４±１℃で５時間透析し、この食塩水
を数回かえて亜硝酸アニオンを除去する。一部の試料で
力価測定を行ない、残りを−７０００に保存する。力価
測定は試験管終点稀釈法により、１稀釈につき２試験管
を用い、ＰＲＫ組織培養中、非許容温度（３８．５ｑ０
／±１００）、７日間培養後行なう。−７０ｑ０に保存
した試料をＩＴＣＩＤ５ｏ／０．２叫に稀釈し、この稀
釈した試料を１７本のＰＲＫ組織培養試験管に１試験管
当り０．１の‘ずつ接種する。

この試験管を許容温度（３５ｑｏ／士１℃）で培養する
。４〜１０日間の種々の培養期間の後、１２本の試験管
が典型的なヘルペス細胞変性効果を示した。

この試験管に１〜１２のラベルを付して−７０ｑＣに保
存した。これ等の１２本の陽性試料について許容温度（
３５００）及び非許容温度（３９００）で比較的力価測
定を行なう。許容及び非許容温度間の力価に著しい差を
示す試料は最終稀釈を更に継代してクローンする。この
様に、陽・性試験管を試料Ｎｏ．７の１０‐４稀釈に貯
め、「ヘルペス２４２０８２」のラベルを付した株の懸
濁液を得る。

実施例 ３ 「ヘルペス公ｓｌ」株及び「ヘルペス２ ４２０８２」
株のり性異なる温度に於て増殖したウイルスの力価を測
定した。

結果を第１表に総括する。第１表では３８．５ｏｏ±０
．５ｑｏの臨界温度（感染力が最少２１ｏｇ，。に減少
する温度）を示している。「ヘルペス２ｓｌ」及び「ヘ
ルペス２ ４２０８２」及び「ヘルペス２親株」間の収
率の差を第１表に示す。第１表 異なる温度に於るｔｓ変異株「ヘルペス２ｔｓＵ及び「
ヘルペス２４２０８２」及び「ヘルペス２親株ｄの間の
増殖の差実施例 ４ 「ヘルペス２親株」及び「ヘルペス幻ｓＩＪの神経病発
生、抗原性及び免疫原性の比較（試験動物ウサギ）‘ａ
ー 皮内及び筋肉内経略による「ヘルペス波１」の接種
３０羽のウサギを用いて実験を行なった。

ウサギは各々５羽の群に分けた。第１群には腹部以外の
皮内に１泌（１『．５ＴＣＩＤ５ｏ）の「ヘルペス２Ｓ
Ｉ」を接種した。第２群には同じ接種物を右後足の筋肉
内に接種した。第３及び第４群には「ヘルペス２親株」
を皮内及び筋肉内経路で接種した。第５及び第６群は非
接種の対照群とした。症状を接種後３５日間毎日記録し
、神経症状の程度に従い０〜３の得点を与えた。

結果を第２表に示すが、広変異株を接種したウサギには
何の症状もみられなかった。第３群では２羽のウサギに
は症状がみられなかったが、他の３羽は種々の程度の神
経症を示し、うち、１羽（Ｎｏ．２４）は接種後１２日
で死亡した。第４群の筋肉内に「ヘルペス２親株」を接
種したウサギ全ては接種後７〜８日に箸るしい神経症を
示し、うち２羽（Ｎｏ．２６及び２８）は死亡した。１
羽は接種後９日、接種が原因で死亡、他の１羽は１時的
に症状を示したが、接種後３３日目に事故による心臓破
裂の出血で死亡した。

第２表 異をる経路に於る「ヘルペス２ｔｓ］及び「ヘルペス２
親株」の接種によるウサギのネ彰蓬症状 〔注〕 力価：ＴＣＩＤ５。

、ＩＤ：皮内経路、ＩＭ：筋肉内経路、得点：０・・・
・・・正常、１・・・・・・わずかに不全マヒ、２・・
・・・・馨るしい不全マヒ、３””・・マヒ【ｂ｝ 「
ヘルペス２親株」による感染接種生存している全試験動
物の左後足に３５日目に、１の【（１ぴ．５ＴＣＩＤ５
ｏ）の感染接種をした。

接種後１９日間、毎日症状を記録した。結果を第３表に
総括する。第３表 異種接種物により免疫付与したウサギに ３５日後「ヘルペス２親株」を筋肉内感 染接種した場合の神経症状 〔注〕 ＩＤ：皮内、ＩＭ：筋肉内 第１群では何の症状もみられなかった（１羽は１１日目
で心臓破裂のため死亡）。

第２群では、５羽中４羽にかなりの程度の神経性併発が
みられた。第３群では残存している４羽中３羽には症状
がみられなかった。

１羽は後足に１時的な不全マヒがみられた。

第４群はただ１羽のみ残存していたが（Ｎｏ．２４）、
１回目の接種後５週間で右後足に不全マヒがみられ、感
染接種後９日後に再び同じ症状を示し、１０日割こ死亡
した。対照群の１０羽のウサギのうち１羽のみが症状が
なく、他は全て種々の程度の不全マヒ又はマヒを示し、
うち４羽は接種後１０〜１５日で死亡した。｛Ｃ｝ ウ
イルスの再分離 感染後死亡又は犠牲にした数羽のウサギからウイルスを
回収した。

結果を第４表に示す。第４表予め「ヘルペス２６１」を
接種した動物の脳物質からは何のウイルスも回収されな
かった。

これに反し、ウイルス存在確認のため試験した全４羽の
対照群の脳では脳物質１夕当り１び．７〜１ぴ．５ＴＣ
ＩＤ５ｏの力価ウイルスが検出された。‘ｄ）血清学的
発見感染接種の当日、１１日後、１９日後及び３２日後
に血清を採取した。

血清中和（以下ＳＮと称する）試験の結果を第５表に総
括する。第５表 「ヘルペス２親株ｄ感染接種後のウサギに於るＳＮ力価
注〕 比：試験動物に対する陽怪力価を示す動物中Ｇ．
Ｍ．：幾何平均感染後０日：第１回接種後３５日 「ヘルペス被１」接種動物では穣種後３５印こ何の抗体
も検出されなかった。

第３群の「ヘルペス２親株」を皮内経路で接種された全
４羽のウサギは全て血清転換していた。感染接種後全動
物はＳＮ抗体を生じた。予めは変異株で免疫された第１
及び第２群の動物の幾何平均ＳＮ力価と対照群の動物の
幾何平均ＳＮ力価は類似していた。実施例 ５ 筋肉内及び皮内経路による「ヘルペス２ ４２０８２」の無害性及び免疫原性 予めは変異株を接種した各群２０尾の５群のマウスを用
いてマウスの免疫状態を調べた。

第１群のマウスは「ヘルペス２ ４２０８２」の１び．
５ＴＣＩＤ５。を筋肉内（ＩＭ）に接種した。第２群に
は１ぴ．５ＴＣＩＤ５ｏの同じ株を接種した。

次の２つの群には各々１び．５及び１ぴ．５ＴＣＩＤ５
ｏを皮内（ＩＤ）に投与した。第５群は対照群とした。
第１群では１尾のマウスが死亡し、第３及び第４群では
各々３及び４尾が死亡した。各群の２尾ずつのマウスか
ら接種後１４日目に採血したが、これらのＳＮ力価は感
度以下（く４）であった。

接種後１４日目‘こ各群の残存しているマウスの半数の
脳内（ＩＣ）に１ぴ．５ＴＣＩＤ５ｏの、又他の半数の
皮内に１び．５ＴＣＩＤ５ｏの「ヘルペス２親株」を感
染接種した。

結果を第６表に総括する。第６表 対照群のマウスは感染接種後全て死亡した。

皮内に名疫されたマウスは全て保護された。筋肉内にｔ
ｓ変異株を接種したマウスは一部保護された。脳内に感
染接種した第１及び第２群のマウスは各々９尾中５尾及
び９尾中１尾生存した。同じ群の皮内に感染接種された
マウスは各々８尾中６尾及び７尾中７尾の高い抵抗性を
示した。実施例 ６ 前記実施例２で得られた「ヘルペス２ ４２０８２」株の懸濁液を１び〜１ぴＴＣＩＤ５ｏ／瓶
の量でガラス薬瓶に分注する。

この薬瓶を凍結乾燥し、密封して１ワクチン接種量とす
る。水を加えて復元後、該ワクチンを皮内経路、例えば
乱切法により接種する。

すぎに本発明の実施の態様を列挙する。

川 ウイルス性発疹が感染しやすい生体の冷所に該ウイ
ルス性発疹に反応するりでかつ本質的に非病原性のウイ
ルス変異株を接種する事からなる該ウイルス性発疹に対
するワクチン接種法。

‘２） 前記第｛１｝項に於て該ウイルス性発疹が天然
痘、ヒトの天然痘関連ウイルス感染症、牛痘、水痘、帯
状海疹、癖疹、風疹、単純庖疹及びヘルペスＢ群ウイル
ス感染症であるワクチン接種法。‘３’前記第１１項及
び第２｝項のいずれかに於て、皮内経路でワクチンを接
種するワクチン接種法。■ 前記第ｍ項〜第３項のいず
れかに於て、該ウイルス性発疹が単純ヘルペス２型ウイ
ルスで生ずる発疹であるワクチン接種法。｛５）前記第
【４｝項に於て、＄性でかつ本質的に非病原性のウイル
ス変異株が単純ヘルペス２型ウイルス「ヘルペス兆１」
であるワクチン接種法。

‘６｝ 前記第側項に於て、＄性でかつ本質的に非病原
性のウイルス変異株が単純ヘルペス２型ウイルス「ヘル
ペス２ ４２０８２」であるワクチン接種法。｛７ー
単純ヘルペス２型ウイルスの病原性株をＰＨ４〜５にて
亜硝酸の緩衝水溶液と接触させ、得られた＄性変異株を
最小１回、当該分野公知の単純ヘルペス２型ウイルス増
殖に許容され、ワクチン製造の基質として許容される組
織培養中でクローンして分離する事からなるｔｓ‘性で
かつ本質的に非病原性の単純ヘルペス２型ウイルス株の
調製法。

（８｝ 前記第｛７｝項に於て、亜硝酸の緩衝水溶液が
酢酸緩衝液中の亜硝酸であり、反応液中の亜硝酸及び酢
酸イオンの濃度が各々Ｎ及びＮ／４であり、接触を１〜
１５分間維持するｔｓ性でかつ本質的に非病原性の単純
ヘルペス２型ウイルス株の調製法。

‘９｝ 前記第脇項に於て、接触をｐＨ４．６±０．１
、室温で、３土１分間維持し、次いでｐＨ４．２±０．
１、室温で、８土１分間維持する＄性でかつ本質的に非
病原性の単純ヘルペス２型ウイルス株の調製法。

‘ＩＱ 前記第｛７）項〜第■項のいずれかに於て、最
少１回、ＰＲＫ細胞培養中でクローンしては性の変異株
を分離することからなる単純ヘルペス２型ウイルス株の
調整法。

（１１）前記第｛１の項に於て、出発病原性単純ヘルペ
ス２型ウイルス株が「ヘルペス２親株」である＄性の変
異株の調製法。

（１２）前記第７｝項〜第（１１）項のいずれかの方法
により得た単純ヘルペス２型Ｇ性及び本質的に非病原性
変異株をＰＲＫ細胞培養中で３５℃土１℃以下、該ウイ
ルスが大量に増殖する期間培養し、該ウイルスを収集し
てなる単純ヘルペス２型ウイルスワクチンの製造法。

（１３）前記第（１２）項に於て、温度が３５００土１
℃であるワクチン製造法。

（１４）前記第の項〜第（１３）項のいずれかの方法で
得られた単純ヘルペス２型ウイルスの変異株を活性成分
として含有する単純ヘルペス２型ウイルスワクチン。

（１５）前記第（１４）項に於て、該単純ヘルペス２型
ウイルス変異株が「ヘルペス公ｓｌ」である単純ヘルペ
ス２型ウイルスワクチン。

（１６）前記第（１４）項に於て、該単純ヘルペス２型
ウイルス変異株が「ヘルペス２ ４２０８２」である単
純ヘルペス２型ウイルスワクチン。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 単純ヘルペス２型ウイルスの病原性株をｐＨ４〜５
   にて亜硝酸の緩衝水溶液と接触させ、得られた温度感受
   性変異株を組織培養中でクローンして得られる該ウイル
   スの温度感受性でかつ本質的に非病原性の変異株を更に
   組織培養中で大量に増殖させ、これを収集して得る事を
   特徴とするウイルス性発疹用ワクチン。