RU2641970C2 - Жидкие стабильные вирусные вакцины - Google Patents

Жидкие стабильные вирусные вакцины Download PDF

Info

Publication number
RU2641970C2
RU2641970C2 RU2015109724A RU2015109724A RU2641970C2 RU 2641970 C2 RU2641970 C2 RU 2641970C2 RU 2015109724 A RU2015109724 A RU 2015109724A RU 2015109724 A RU2015109724 A RU 2015109724A RU 2641970 C2 RU2641970 C2 RU 2641970C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
virus
vaccine
dog
liquid
stable
Prior art date
Application number
RU2015109724A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2015109724A (ru
Inventor
Кевин О'КОННЕЛЛ
Чжисун ЦЯО
Original Assignee
Интервет Интернэшнл Б.В.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Интервет Интернэшнл Б.В. filed Critical Интервет Интернэшнл Б.В.
Publication of RU2015109724A publication Critical patent/RU2015109724A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2641970C2 publication Critical patent/RU2641970C2/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/235—Adenoviridae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/295—Polyvalent viral antigens; Mixtures of viral and bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/0225—Spirochetes, e.g. Treponema, Leptospira, Borrelia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/23—Parvoviridae, e.g. feline panleukopenia virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
    • A61K2039/521—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
    • A61K39/175—Canine distemper virus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/10011—Adenoviridae
    • C12N2710/10034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
    • C12N2750/14322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18411—Morbillivirus, e.g. Measles virus, canine distemper
    • C12N2760/18434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18611—Respirovirus, e.g. Bovine, human parainfluenza 1,3
    • C12N2760/18634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к ветеринарии и иммунологии, и может быть использовано для получения жидкой стабильной вакцины для собак. Жидкая стабильная вакцина содержит живой аттенуированный вирус собак, 10-30% (мас./об.) сахарного вспомогательного вещества и аминокислоту, где жидкая стабильная вакцина имеет значение рН от 6,0 до 8,0. Аминокислота выбрана из группы, состоящей из аргинина и метионина; если аминокислота представляет собой аргинин, то ее конечная концентрация в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,15 до 0,6 М. Если аминокислота представляет собой метионин, то ее конечная концентрация в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,025 до 0,3 М. Живой аттенуированный вирус собак выбран из группы, состоящей из вируса чумы собак, аденовируса собак 2 типа, парвовируса собак и вируса парагриппа собак или любой их комбинации. Использование вышеуказанного принципа стабилизации позволяет получить жидкий стабильный состав для живого аттенуированного вируса чумы собак, аденовируса собак 2 типа, парвовируса собак и вируса парагриппа собак. 11 з.п. ф-лы, 2 пр., 5 табл.

Description

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
По этой заявке испрашивается приоритет в соответствии с 35 U.S.C. § 119(e) временной заявки США с серийным номером 61/691507, поданной 21 августа 2012; и временной заявки США с серийным номером 61/777164, поданной 12 марта 2013, содержание которых полностью включено в описание в виде ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к жидким стабильным вакцинам, которые содержат живой ослабленный вирус. Изобретение также относится к получению таких вакцин и к способам вакцинации животных-субъектов.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Существует значительное число вирусов, которые могут инфицировать собак и/или кошек. В то время как симптомы, вызванные соответствующими вирусными инфекциями, могут включать, например, легкие простудные симптомы, другие вирусные инфекции могут быстро приводить к гибели, как в случае инфекций, вызванных вирусом чумы собак (CDV) [см., например, US 2010/0196420]. Действительно, CDV вызывает мультисистемную инфекцию, которая может вовлекать зрительную, дыхательную, пищеварительную, кожную и нервную системы. Смертность от парвовируса собак (CPV) также является относительно высокой [см., например, US 2009/0010955]. CPV является, главным образом, кишечным патогеном, который инфицирует собак, особенно молодых собак, и характеризуется острой диареей, лихорадкой и лейкопенией у собак и щенков старше 4-5 недель. Даже более молодые щенки могут страдать миокардиальным заболеванием. Вирус чумы собак и парвовирус собак представляют собой два наиболее важных вируса с точки зрения защиты щенков/взрослых собак.
Другие вирусы собак включают: вирус парагриппа собак (CPI), который является высоко контагиозным вирусом, который вызывает респираторные расстройства, участвующие в процессе заболеваний верхних дыхательных путей и инфекционного трахеобронхита; аденовирус собак 1 типа (CAV1), который вызывает инфекционный гепатит; и вирус гриппа собак (CIV), который является высококонтагиозным и может вызывать тяжелый тип респираторного заболевания. Сообщалось, что CIV способен вызывать 100% инфекцию с 80% летальности и до 5-8% летальности при тяжелых инфекциях [Crawford et al, Science 310(5747):482-485 (2005); U.S. 7959929 B2].
Также существует ряд кошачьих вирусов, которые поражают кошек, включая кошачий калицивирус (FCV), вирус лейкоза кошачьих (FeLV), вирус лейкемии кошек (FPLV), коронавирус кошек (FCoV) и вирус ринотрахеита кошек (FVR).
В настоящее время общепризнанно, что лучшим способом профилактики заболевания, вызываемого вирусными инфекциями собак или кошек, является их вакцинация против вирусов. Действительно, вакцины против вируса чумы собак значительно снизили распространенность соответствующего заболевания. Аналогично инфекционный гепатит собак был чрезвычайно ограничен с помощью вакцин против аденовируса-2 собак (CAV2). Использование живого аттенуированного CAV2 в вакцинах вместо близкородственного CAV1 устраняет проблемы, связанные с интерстициальным нефритом и помутнением роговицы, наблюдаемыми у собак, которых прививали живым аттенуированным CAV1 [Taguchi et al., Can Vet J. 52(9):983-986 (2011)].
Кроме того, поливалентные живые ослабленные вирусные вакцины можно безопасно вводить, что ограничивает число необходимых инъекций вакцины. Соответственно, существует несколько коммерчески доступных поливалентных живых ослабленных вирусных вакцин, которые защищают от собачьей чумы, инфекционного гепатита собак, парвовируса собак и вируса парагриппа собак. Кроме того, новые поливалентные вакцины дополнительно защищают от вируса гриппа собак.
До настоящего времени аттенуированные вирусы собак и кошек были нестабильны при хранении в жидких растворах. Поэтому большинство живых аттенуированных вирусных вакцин собак или кошек лиофилизируют, т.е. подвергают сублимационной сушке перед их длительным хранением. Живой аттенуированный вирус собак или кошек обычно смешивают в виде суспензии в воде с защитным веществом, замораживают и затем дегидратируют с помощью сублимации и повторно высушивают во время процесса лиофилизации. Низкие температуры замораживания и высушивания сублимацией в сочетании с использованными низкими значениями отношения поверхности к объему могут потребовать продолжительных периодов высушивания и тем самым значительно увеличить время производства и затраты.
Кроме того, существуют внутренние противоречия в крупномасштабных промышленных процессах высушивания вследствие: невозможности регулирования стеллажной температуры во всей загрузке продукта, различных значений скорости замораживания в разных частях сушильной камеры, краевых эффектов и эффектов лучистой энергии. Повышение температуры сушки для уменьшения времени сушки часто не является решением, поскольку температура сушки должна оставаться существенно ниже температуры стеклования матрицы защитного белка. Кроме того, продолжительное несоответствующее время сушки и/или высокие температуры сушки часто приводят к повреждению структуры живых ослабленных вирусов наряду со значительным уменьшением их биологической активности.
Поэтому, чтобы учесть собственные потери эффективности, лиофилизованные вакцины собак и/или кошек, которые содержат живые ослабленные вирусы, хранят с повышенными титрами. Однако такие повышенные титры могут привести к существенным нежелательным явлениям в случае, если процесс лиофилизации приведет фактически к меньшему снижению активности, чем ожидалось. Таким образом, необходимо особое внимание для создания вакцины, которая не только содержит вирусный титр, который безопасно ниже количества, которое вызывает нежелательные явления, но которая также сохраняет достаточную эффективность с учетом уменьшения вирусного титра в результате лиофилизации и последующего хранения. Таким образом, существует потребность в новых живых аттенуированных вакцинах для собак и/или кошек, которые могут гарантированно сохранять вирусные титры на безопасном и эффективном уровне.
Цитирование любой ссылки в описании не следует истолковывать как признание того, что такая ссылка предлагается как "предшествующий уровень техники" для заявки, рассматриваемой в данный момент.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Для преодоления недостатков существующих вакцин настоящее изобретение относится к новым жидким стабильным живым аттенуированным вирусным вакцинам, а также их соответствующим иммуногенным композициям. В некоторых вариантах осуществления живой ослабленный вирус представляет собой живой аттенуированный вирус собак. В других вариантах осуществления живой ослабленный вирус представляет собой живой аттенуированный вирус кошек. Настоящее изобретение также относится к способам введения таких вакцин животному. Настоящее изобретение дополнительно относится к способам профилактики заболевания у животного путем введения вакцины по настоящему изобретению. В конкретных вариантах осуществления животное является собакой. В других вариантах осуществления животное является кошкой.
Таким образом, настоящее изобретение относится к жидким стабильным вакцинам, которые содержат живой ослабленный вирус. В некоторых вариантах осуществления живой ослабленный вирус представляет собой рекомбинантный вирус. В частных вариантах осуществления этого типа рекомбинантный вирус используют как рекомбинантный вектор, который кодирует гетерогенный белок. В более предпочтительных вариантах осуществления этого типа гетерогенный белок является вирусным или бактериальным антигеном.
В частных вариантах осуществления вакцина содержит сахарное вспомогательное вещество и аминокислоту. В некоторых вариантах осуществления этого типа вакцина содержит от 10 до 30% сахарного вспомогательного вещества. В частных вариантах осуществления вакцина содержит от 12 до 27% сахарного вспомогательного вещества. В некоторых вариантах осуществления вакцина содержит от 15 до 25% сахарного вспомогательного вещества. В родственных вариантах осуществления вакцина содержит от 15 до 20% сахарного вспомогательного вещества. В других вариантах осуществления вакцина содержит от 20 до 25% сахарного вспомогательного вещества. В более предпочтительных вариантах осуществления вакцина содержит от 16 до 18% сахарного вспомогательного вещества. В еще более предпочтительных вариантах осуществления вакцина содержит 17% сахарного вспомогательного вещества.
В частных вариантах осуществления жидких стабильных вирусных вакцин по настоящему изобретению сахарное вспомогательное вещество представляет собой сахарозу. В других вариантах осуществления сахарное вспомогательное вещество представляет собой сорбит. В других вариантах осуществления сахарное вспомогательное вещество представляет собой маннит. В других вариантах осуществления сахарное вспомогательное вещество представляет собой трегалозу. В других вариантах осуществления сахарное вспомогательное вещество представляет собой декстрозу. В частных вариантах осуществления сахарное вспомогательное вещество по существу представляет собой комбинацию двух или более сахарных вспомогательных веществ. В частном варианте осуществления этого типа сахарное вспомогательное вещество представляет собой комбинацию сахарозы и сорбита. В более предпочтительном варианте осуществления этого типа сахарное вспомогательное вещество представляет собой комбинацию 15% сахарозы и 10% сорбита.
Жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению имеют диапазон значений pH от 6,0 до 8,0. В некоторых вариантах осуществления диапазон значений pH составляет от 6,5 до 7,8. В конкретных вариантах осуществления диапазон значений pH составляет от 6,8 до 7,5. В более предпочтительных вариантах осуществления диапазон значений pH составляет от 7,0 до 7,4. В еще более предпочтительном варианте осуществления pH составляет 7,2.
Жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению могут содержать буфер. В конкретном варианте осуществления этого типа буфер содержит от 2,5 до 50 мМ Трис. В родственном варианте осуществления буфер содержит от 5 до 25 мМ Трис. В конкретных вариантах осуществления буфер содержит от 10 до 20 мМ Трис. В других вариантах осуществления буфер может содержать от 2,5 до 50 мМ гистидина. В частных вариантах осуществления буфер содержит от 2,5 до 50 мМ Трис и от 2,5 до 50 мМ гистидина. В более предпочтительных вариантах осуществления буфер содержит от 5 до 25 мМ Трис и от 5 до 25 мМ гистидина. В еще более предпочтительных вариантах осуществления буфер содержит от 10 до 20 мМ Трис и от 10 до 20 мМ гистидина. В других вариантах осуществления буфер содержит от 2,5 до 50 мМ фосфата. В родственном варианте осуществления буфер содержит от 5 до 25 мМ фосфата. В частных вариантах осуществления буфер содержит от 10 до 20 мМ фосфата.
Жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению содержат аминокислоту. В некоторых вариантах осуществления аминокислота представляет собой аргинин. В других вариантах осуществления аминокислота представляет собой метионин. В других вариантах осуществления аминокислота представляет собой глицин. В других вариантах осуществления аминокислота является глутаминовой кислотой. В родственных вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины содержат как аргинин, так и метионин. В других вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины содержат как аргинин, так и глицин. В других вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины содержат как глицин, так и метионин. В родственных вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины содержат как глутаминовую кислоту, так и метионин. В других вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины содержат как глутаминовую кислоту, так и глицин. В других вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины содержат как глутаминовую кислоту, так и аргинин. В родственных вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины содержат аргинин, глутаминовую кислоту и метионин. В других вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины содержат аргинин, глутаминовую кислоту и глицин. В других вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины содержат аргинин, глутаминовую кислоту и метионин. В других вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины содержат аргинин, глицин и метионин. В других вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины содержат аргинин, глицин и метионин. В конкретных вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины содержат аргинин, глицин, метионин и глутаминовую кислоту.
В частных вариантах осуществления конечная концентрация аргинина или глутаминовой кислоты или глицина в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,15 до 0,6 M. В родственных вариантах осуществления конечная концентрация аргинина или глутаминовой кислоты или глицина в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,2 до 0,5 M. В более предпочтительных вариантах осуществления конечная концентрация аргинина или глутаминовой кислоты или глицина в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,25 до 0,35 M. В еще более предпочтительных вариантах осуществления конечная концентрация аргинина или глутаминовой кислоты или глицина в жидкой стабильной вакцине составляет 0,3 M.
В частных вариантах осуществления конечная общая концентрация аргинина, и/или глутаминовой кислоты, и/или глицина в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,15 до 0,6 M. В родственных вариантах осуществления конечная общая концентрация аргинина, и/или глутаминовой кислоты, и/или глицина в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,2 до 0,5 M. В более предпочтительных вариантах осуществления конечная общая концентрация аргинина, и/или глутаминовой кислоты, и/или глицина в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,25 до 0,35 M. В еще более предпочтительных вариантах осуществления конечная общая концентрация аргинина, и/или глутаминовой кислоты, и/или глицина в жидкой стабильной вакцине составляет 0,3 M.
В частных вариантах осуществления конечная концентрация метионина в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,025 до 0,3 M. В родственных вариантах осуществления конечная концентрация метионина в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,04 до 0,15 M. В более предпочтительных вариантах осуществления конечная концентрация метионина в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,06 до 0,09 M. В еще более предпочтительных вариантах осуществления конечная концентрация метионина в жидкой стабильной вакцине составляет 0,07 M.
Жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению также могут содержать белковый стабилизатор. Белковый стабилизатор может представлять собой интактный белок и/или белковый гидролизат. В частных вариантах осуществления белковый стабилизатор представляет собой желатин. В более предпочтительных вариантах осуществления белковый стабилизатор, содержащийся в жидкой стабильной вакцине по настоящему изобретению, представляет собой от 0,4 до 1,6% желатина. В альтернативных вариантах осуществления белковый стабилизатор представляет собой гидролизат цельного казеина. В частных вариантах осуществления этого типа белковый стабилизатор, содержащийся в жидкой стабильной вакцине по настоящему изобретению, представляет собой 0,5-2,0% гидролизата цельного казеина. В некоторых вариантах осуществления гидролизат цельного казеина представляет собой протеолитический гидролизат цельного казеина.
Кроме того, жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению также могут дополнительно содержать спирт. В частных вариантах осуществления этого типа спирт представляет собой этанол. В более предпочтительных вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина содержит от 0,25 до 1,0% этанола. В родственных вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению также могут содержать сульфат декстрана. В конкретных вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина содержит от 1 до 20 мМ сульфата декстрана. В более предпочтительных вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина содержит от 2,5 до 10 мМ сульфата декстрана. В еще более предпочтительных вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина содержит 5 мМ сульфата декстрана.
Кроме того, жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению могут также дополнительно содержать хелатирующее вещество. Такие хелатирующие вещества могут включать, но без ограничения: этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТА), l,2-бис(o-аминофенокси)этан-N,N,N',N'-тетрауксусную кислоту (BAPTA), этиленгликольтетрауксусную кислоту (EGTA), димеркаптосукциновую кислоту (DMSA), диэтилентриаминпентауксусную кислоту (DTPA) и 2,3-димеркапто-1-пропансульфоновую кислоту (DMPS). Концентрация таких хелатирующих веществ в жидких вакцинах по настоящему изобретению может изменяться приблизительно от 50 мкМ до 10 мМ.
В некоторых вариантах осуществления хелатирующее вещество представляет собой ЭДТА. В частных вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина содержит от 50 мкМ до 10 мМ ЭДТА. В некоторых вариантах осуществления этого типа жидкая стабильная вакцина содержит от 50 до 200 мкМ ЭДТА. В других вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина содержит от 250 мкМ до 7,5 мМ ЭДТА. В других вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина содержит от 0,5 мМ до 5,0 мМ ЭДТА. В других вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина содержит от 1,0 мМ до 3,0 мМ ЭДТА. В более предпочтительных вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина содержит приблизительно 2 мМ ЭДТА.
Жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению могут дополнительно содержать адъювант. В частных вариантах осуществления этого типа адъювант представляет собой фосфат алюминия. В других подобных вариантах осуществления адъювант представляет собой гидроксид алюминия. В других вариантах осуществления адъювант представляет собой адъювант на основе низкомолекулярного сополимера, который может образовывать поперечные связи в растворе и превращаться в высокомолекулярный гель. В других вариантах осуществления адъювант состоит из частиц геля акрилата натрия в воде. В других вариантах осуществления адъювант представляет собой комбинацию двух или более таких адъювантов.
В некоторых вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению могут дополнительно содержать поглотитель свободных радикалов и/или антиоксидант. В родственных вариантах осуществления жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению хранят в герметичных контейнерах, которые содержат инертный газ, такой как аргон, азот или гелий, над жидкостью (например, были заполнены инертным газом).
Жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению могут содержать живой аттенуированный вирус собак. В некоторых вариантах осуществления живой аттенуированный вирус собак представляет собой вирус чумы собак. В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус собак представляет собой аденовирус собак 2 типа. В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус собак представляет собой парвовирус собак (CPV). В одном предпочтительном варианте осуществления этого типа парвовирус собак представляет собой парвовирус собак 2 (CPV-2). В другом предпочтительном варианте осуществления этого типа парвовирус собак представляет собой парвовирус собак 2a (CPV-2a). В другом предпочтительном варианте осуществления этого типа парвовирус собак представляет собой парвовирус собак 2b (CPV-2b). В другом предпочтительном варианте осуществления этого типа парвовирус собак представляет собой парвовирус собак 2c (CPV-2c). В частном варианте осуществления этого типа CPV-2c имеет учетный номер в ATCC PTA-13492. В другом варианте осуществления парвовирус собак представляет собой рекомбинантный парвовирус собак, который сконструирован таким образом, что он содержит гетерогенный геном CPV-2c/CPV-2, т.е. участок, кодирующий капсидные белки, получен из изолята CPV-2c, и участок, кодирующий неструктурные белки, получен из изолята CPV-2. В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус собак представляет собой вирус парагриппа собак. В частных вариантах осуществления вирус парагриппа собак представляет собой рекомбинантный вектор. В более предпочтительных вариантах осуществления рекомбинантный вирус парагриппа собак кодирует и экспрессирует гетерогенный белок. В некоторых вариантах осуществления этого типа гетерогенный белок представляет собой антиген, не являющийся антигеном собаки. В более предпочтительных вариантах осуществления антиген представляет собой антиген вируса птиц или бактериальный антиген. В некоторых вариантах осуществления рекомбинантный вирус парагриппа собак представляет собой рекомбинантный вирус парагриппа 5.
В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус собак представляет собой коронавирус собак. В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус собак представляет собой пневмовирус собак. В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус собак представляет собой вирус инфекционного гепатита собак. В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус собак представляет собой вирус герпеса собак. В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус собак представляет собой вирус бешенства. В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус собак представляет собой мелкий вирус собак. В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус собак представляет собой вирус гриппа собак. В альтернативных вариантах осуществления живой ослабленный вирус представляет собой вирус псевдобешенства.
Жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению могут содержать живой аттенуированный вирус кошек. В некоторых вариантах осуществления живой аттенуированный вирус кошек представляет собой вирус герпеса кошек (FHV). В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус кошек представляет собой калицивирус кошек (FCV). В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус кошек представляет собой пневмовирус кошек (FPN). В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус кошек представляет собой парвовирус кошек (FPV). В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус кошек представляет собой вирус лейкоза кошек (FeLV). В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус кошек представляет собой вирус инфекционного перитонита кошек (FIPV). В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус кошек представляет собой вирус иммунодефицита кошек (FIV). В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус кошек представляет собой вирус болезни Борна (BDV). В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус кошек представляет собой вирус гриппа кошек. В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус кошек представляет собой вирус панлейкопении кошек (FPLV). В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус кошек представляет собой коронавирус кошек (FCoV). В других вариантах осуществления живой аттенуированный вирус кошек представляет собой вирус ринотрахеита кошек (FVR).
Кроме того, настоящее изобретение относится к жидким стабильным вакцинам, которые являются поливалентными вакцинами. В частных вариантах осуществления поливалентные вакцины по настоящему изобретению содержат только живые ослабленные вирусные вакцины. Такие поливалентные вакцины могут содержать любую комбинацию живых ослабленных вирусов. В частных вариантах осуществления этого типа поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак и живой аттенуированный парвовирус собак. В родственных вариантах осуществления поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак и живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа. В других вариантах осуществления поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак и живой аттенуированный вирус парагриппа собак. В других вариантах осуществления поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак, живой аттенуированный парвовирус собак и живой аттенуированный вирус парагриппа собак. В других вариантах осуществления поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак, живой аттенуированный парвовирус собак и живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа.
В других вариантах осуществления поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак, живой аттенуированный вирус парагриппа собак и живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа. В других вариантах осуществления поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак, живой аттенуированный парвовирус собак, живой аттенуированный вирус парагриппа собак и живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа. В частных вариантах осуществления поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак, живой аттенуированный парвовирус собак, живой аттенуированный вирус парагриппа собак, живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа и живой аттенуированный коронавирус собак. В родственных вариантах осуществления поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак, живой аттенуированный парвовирус собак, живой аттенуированный вирус парагриппа собак, живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа и живой аттенуированный коронавирус кошек. В частных вариантах осуществления этого типа поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак, живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа, живой аттенуированный парвовирус собак, живой аттенуированный вирус парагриппа собак и живой аттенуированный вирус гриппа собак.
В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к жидким стабильным вакцинам, которые представляют собой поливалентную вакцину, которая содержит живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа и живой аттенуированный вирус парагриппа собак. В других вариантах осуществления поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа и живой аттенуированный парвовирус собак. В других вариантах осуществления поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный парвовирус собак и живой аттенуированный вирус парагриппа собак. В других вариантах осуществления поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа, живой аттенуированный парвовирус собак и живой аттенуированный вирус парагриппа собак. В частных вариантах осуществления этого типа поливалентная вакцина содержит живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа, живой аттенуированный парвовирус собак, живой аттенуированный вирус парагриппа собак и живой аттенуированный вирус гриппа собак.
Альтернативно жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению могут дополнительно содержать убитый вирус, и/или убитую бактерию (например, бактерин), и/или субфракцию бактерина. Соответственно любая из жидких стабильных вакцин по настоящему изобретению, которая содержит одну или более живых ослабленных вирусных вакцин, может дополнительно содержать убитый вирус, и/или убитую бактерию, и/или субфракцию бактерина. В конкретных вариантах осуществления убитый вирус представляет собой вирус гриппа собак. В других вариантах осуществления убитый вирус представляет собой пневмовирус собак. В других вариантах осуществления убитый вирус представляет собой коронавирус собак. В других вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина по настоящему изобретению может содержать два или более из указанных убитых вирусов собак.
В некоторых вариантах осуществления убитая бактерия представляет собой Bordetella bronchiseptica. В других вариантах осуществления убитая бактерия относится к виду Mycoplasma. В других вариантах осуществления убитая бактерия представляет собой Ehrlichia canis. В других вариантах осуществления убитая бактерия относится к виду Anaplasma. В других вариантах осуществления убитая бактерия представляет собой Leptospira. В одном таком варианте осуществления Leptospira является Leptospira canicola. В другом варианте осуществления Leptospira является Leptospira grippotyphosa. В другом варианте осуществления Leptospira является Leptospira hardjo. В другом варианте осуществления Leptospira является Leptospira icterohaemorrhagiae. В другом варианте осуществления Leptospira является Leptospira Pomona. В другом варианте осуществления Leptospira является Leptospira interrogans. В другом варианте осуществления Leptospira является Leptospira autmnalis. В другом варианте осуществления Leptospira является Leptospira Bratislava. В других вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина по настоящему изобретению может содержать две или более указанных убитых бактерий. В конкретном варианте осуществления жидкая стабильная вакцина содержит Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira Pomona и Leptospira icterohaemorrhagia.
Настоящее изобретение дополнительно относится к способам, способствующим защите кошки или собаки от клинического заболевания, которое обусловлено вирусной инфекцией кошек или собак, включающим введение вакцины по настоящему изобретению животному. В некоторых вариантах осуществления введение осуществляют через слизистые оболочки. В других вариантах осуществления введение осуществляют парентерально. В других вариантах осуществления введение осуществляют внутрикожно. В других вариантах осуществления введение осуществляют чрескожно. В более предпочтительных вариантах осуществления вакцину по настоящему изобретению вводят животному подкожно. В других предпочтительных вариантах осуществления вакцину по настоящему изобретению вводят животному внутримышечно. Настоящее изобретение также относится к применению первичных и/или бустерных вакцин.
В конкретных вариантах осуществления животное-субъект представляет собой собаку, и способ включает введение собаке жидкой стабильной вакцины по настоящему изобретению, которая содержит живой ослабленный вирус. В частных вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак, живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа, живой аттенуированный парвовирус собак и живой аттенуированный вирус парагриппа собак. В некоторых вариантах осуществления этого типа жидкая стабильная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак, живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа, живой аттенуированный парвовирус собак, живой аттенуированный вирус парагриппа собак и живой аттенуированный вирус гриппа собак. В других вариантах осуществления этого типа жидкая стабильная вакцина содержит живой аттенуированный вирус чумы собак, живой аттенуированный аденовирус собак 2 типа, живой аттенуированный парвовирус собак, живой аттенуированный вирус парагриппа собак и убитый аттенуированный вирус гриппа собак.
Также изобретение относится к способам получения любой и всех жидких стабильных вакцин по настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления способ включает объединение терапевтически эффективного количества живого ослабленного вируса с 10-30% сахарного вспомогательного вещества, аминокислотой и с буферным раствором, имеющим значение pH от 6,0 до pH 8,0, для получения жидкой стабильной вакцины. Аминокислота может представлять собой аргинин, глицин, глутаминовую кислоту, метионин или комбинации аргинина, глицина, глутаминовой кислоты и/или метионина. В конкретных вариантах осуществления аргинин, и/или глицин, и/или глутаминовая кислота имеют конечную концентрацию от 0,15 до 0,6 M в жидкой стабильной вакцине. В некоторых вариантах осуществления метионин имеет конечную концентрацию от 0,025 до 0,3 M в жидкой стабильной вакцине. В частных вариантах осуществления терапевтически эффективное количество живого ослабленного вируса представляет собой терапевтически эффективное количество живого аттенуированного вируса собак. В частных вариантах осуществления этого типа терапевтически эффективное количество живого аттенуированного вируса собак включает терапевтически эффективные количества живого аттенуированного вируса чумы собак, живого аттенуированного аденовируса собак 2 типа, живого аттенуированного парвовируса собак и живого аттенуированного вируса парагриппа собак. Указанные и другие аспекты настоящего изобретения будут более понятны с помощью ссылки на приведенное ниже подробное описание.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В отличие от убитых вирусных вакцин жидкие стабильные живые вирусные вакцины по настоящему изобретению являются аттенуированными. До настоящего времени особое внимание необходимо было обращать при разработке такой аттенуированной живой вирусной вакцины на поддержание титра аттенуированных вирусов на уровне, который является безопасно ниже уровня, который может привести к серьезному нежелательному явлению. В действительности большинство живых аттенуированных вирусных вакцин кошек или собак являются лиофизированными, и лиофилизация может привести к существенному снижению эффективности аттенуированных живых вирусных вакцин как в результате самого процесса лиофилизации, так и с течением времени при длительном хранении.
Настоящее изобретение позволяет преодолеть указанную проблему путем предоставления жидких стабильных вакцин, которые остаются эффективными даже при хранении, без необходимости увеличения начального титра живого аттенуированного вирусного антигена выше достоверно безопасного уровня. В виде дополнительного преимущества настоящее изобретение обеспечивает средство для снижения стоимости производства предоставленных вакцин с помощью существенного уменьшения количества живых ослабленных вирусов, необходимых для создания такой безопасной и эффективной вакцины. Кроме того, живые ослабленные вирусные вакцины по настоящему изобретению более удобны в использовании, чем их лиофилизированные аналоги. Соответственно, настоящее изобретение предоставляет безопасные и эффективные живые ослабленные вирусные вакцины, которые можно хранить в виде жидкостей при температурах холодильного хранения и которые остаются стабильными в течение 12-18 месяцев или даже больше.
Кроме того, удивительно, что жидкие стабильные живые вирусные вакцины по настоящему изобретению могут включать в себя вирусы собак и/или кошек любого типа. Таким образом, жидкие стабильные живые вирусные вакцины по настоящему изобретению могут содержать как оболочечные, так и безоболочечные вирусы. Кроме того, жидкие стабильные живые вирусные вакцины по настоящему изобретению могут содержать живые ослабленные вирусы, имеющие одноцепочечные РНК-геномы, одноцепочечные ДНК-геномы или двухцепочечные ДНК-геномы.
Кроме того, жидкие стабильные живые вирусные вакцины по настоящему изобретению также могут содержать рекомбинантные векторы кошек или собак, которые присутствуют или отдельно, и/или с другими такими рекомбинантными векторами, и/или с живыми аттенуированными вирусами кошек или собак, и/или в комбинации с убитыми бактериями, и/или убитыми вирусами кошек или собак. Такие рекомбинантные векторы кошек или собак могут дополнительно кодировать один или несколько гетерологичных вирусных или бактериальных антигенов. Конкретным примером такого рекомбинантного вектора является рекомбинантный вирус парагриппа собак 5, которой недавно был описан Li et al. (J. of Virology 87(10) 5985-5993 (2013); включено в описание посредством ссылки во всей полноте).
Рекомбинантные векторы для жидких стабильных живых вирусных вакцин по настоящему изобретению, такие как рекомбинантный вирус парагриппа 5, могут кодировать гетерологичный антиген вируса собак, и/или вируса кошек, и/или вируса человека, и/или вируса обезьян, и/или вируса крупного рогатого скота, и/или вируса овец, и/или вируса свиней, и/или вируса птиц (например, вирус цыплят). В конкретных вариантах осуществления жидкие стабильные живые вирусные вакцины по настоящему изобретению содержат рекомбинантный вирус парагриппа 5, который кодирует один или несколько антигенов одного или нескольких вирусов цыплят.
Удивительно, но в присутствии хелатирующего агента (например, 2 мМ ЭДТА) и/или адъюванта (например, фосфата алюминия) жидкие стабильные живые вирусные вакцины по настоящему изобретению остаются стабильными даже в том случае, когда в состав включают убитые бактерии (см. пример 2 ниже). Соответственно, жидкие стабильные живые вирусные вакцины по настоящему изобретению могут дополнительно содержать один или несколько убитых вирусов и/или бактерий собак или кошек (например, бактерины), и/или субфракций бактерина.
Использование терминов единственного числа для удобства в описании ни в коей мере не предназначено для ограничения. Таким образом, например, ссылка на "сахарное вспомогательное вещество" включает ссылку на одно или несколько таких сахарных вспомогательных веществ, если не указано иное. Использование терминов множественного числа также не является ограничивающим, если не указано иное. Аналогичным образом химическое соединение, которое может упоминаться как кислота или соответствующее ей основание, если не указано иное, предназначено для обозначения любой формы соединения. Таким образом, подразумевается, что использование термина "глутаминовая кислота" включает глутамат, и наоборот.
В настоящем контексте "вакцина" представляет собой композицию, которая подходит для применения у животного (включая, в некоторых вариантах осуществления, человека), которая после введения животному вызывает иммунный ответ, достаточно сильный для минимального содействия в защите от клинического заболевания, возникающего в результате инфекции, вызванной микроорганизмом дикого типа, т.е. достаточно сильный для содействия в профилактике клинического заболевания и/или в профилактике, облегчении или лечении клинического заболевания. Если иное не указано в явной форме, использование термина "вакцина" включает поливалентные вакцины.
В настоящем контексте "поливалентная вакцина" представляет собой вакцину, которая содержит два или более различных антигенов. В конкретном варианте осуществления этого типа поливалентная вакцина стимулирует иммунную систему реципиента против двух или более различных патогенов.
В настоящем контексте "жидкая стабильная" вакцина представляет собой вакцину, сохраняемую в виде жидкости (включая жидкую поливалентную вакцину), которая остается эффективной в течение по меньшей мере одного года при хранении при 7°C или ниже (например, в обычном холодильнике и/или при 0°C-7°C). В конкретных вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина остается эффективной при хранении при 7°C или ниже в течение по меньшей мере 1,5 лет. В более предпочтительных вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина остается эффективной при хранении при 7°C или ниже в течение по меньшей мере 2 лет. В еще более предпочтительных вариантах осуществления жидкая стабильная вакцина остается эффективной при хранении при 7°C или ниже в течение по меньшей мере от 2,5 до 3 лет.
В настоящем контексте термины "защитить", "защита", "обеспечить защиту", "обеспечение защиты" и "помогает в защите" не требуют полной защиты от какого-либо признака инфекции. Например, "помогает в защите" может означать, что защита является достаточной, такой, что после заражения симптомы соответствующей инфекции по меньшей мере снижаются и/или что одна или несколько исходных клеточных, физиологических или биохимических причин или механизмов, вызывающих симптомы, уменьшаются и/или устраняются. Следует понимать, что термин "сниженный", который используется в данном контексте, означает относительное состояния инфекции, включая молекулярное состояние инфекции, а не только физиологическое состояние инфекции.
В настоящем контексте термин "терапевтически эффективное количество" представляет собой количество данного антигена, например живого ослабленного вируса, которое является достаточным для обеспечения защиты и/или помощи в защите от патогена, антиген которого вводят для защиты, когда его предоставляют с помощью однократного введения и/или, если предполагается, предоставляют в виде начального введения с одним или более последующим вторичным введением(ями).
В настоящем контексте "эффективная" вакцина содержит терапевтически эффективное количество данного антигена. В настоящем контексте термин "фармацевтически приемлемый" используется в качестве прилагательного для обозначения того, что модифицированное существительное подходит для использования в фармацевтическом продукте. Когда он используется, например, для описания вспомогательного вещества в фармацевтической вакцине, он характеризует вспомогательное вещество как совместимое с другими ингредиентами композиции и не оказывающее неблагоприятного действия на предполагаемого реципиента.
Термин "носитель" относится к разбавителю, адъюванту, вспомогательному веществу или наполнителю, с которым вводят соединение. Фармацевтически приемлемые носители могут представлять собой стерильные жидкости, такие как вода и/или масла, в том числе масла, получаемые из нефти, масла животного, растительного или синтетического происхождения, такие как арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло и т.п. Воду или водные солевые растворы и водные растворы декстрозы и глицерина можно использовать в качестве носителей, в частности, для инъекционных растворов.
В настоящем контексте "адъювант" является веществом, которое может поддерживать или усиливать каскад иммунологических событий, приводящих, в конечном счете, к улучшению иммунологического ответа, т.е. интегрированного ответа организма на антиген. Адъювант, в целом, не является необходимым для возникновения иммунного ответа, но поддерживает или усиливает этот ответ.
В настоящем контексте "системное введение" представляет собой введение в систему кровообращения организма (включая сердечно-сосудистую и лимфатическую систему), оказывая влияние, таким образом, на организм в целом, а не на конкретное место, такое как желудочно-кишечный тракт (например, путем перорального или ректального введения) и дыхательная система (например, путем интраназального введения). Системное введение можно осуществить, например, путем введения в мышечную ткань (внутримышечно), в кожу (внутрикожно, трансдермально или супрадермально), под кожу (подкожно), под слизистую оболочку (субмукозно), в вены (внутривенно) и т.д.
"Парентеральное введение" включает подкожные инъекции, субмукозные инъекции, внутривенные инъекции, внутримышечные инъекции, внутрикожные инъекции и вливание.
В настоящем контексте термин "собака" включает всех домашних собак, Canis lupus familiaris или Canis familiaris, если не указано иное.
Парвовирус собак "CPV" впервые был выделен в 1978 г. и назван CPV-2, чтобы отличить его от парвовируса, мелкого вируса собак (CMV или CPV-1). Приблизительно через год после первого выделения CPV-2 был идентифицирован генетический вариант CPV-2a. В середине 1980-х был идентифицирован второй генетический вариант CPV-2b. CPV-2a и CPV-2b вскоре полностью вытеснили CPV-2. В настоящее время CPV-2a больше не обнаруживается в Соединенных Штатах [Parrish and Kawaoka, Annu Rev. Microbiol., 59:553-586 (2005)]. Четвертый вариант CPV в данном семействе, CPV-2c, впервые был описан в 2000 г. [см. US 8227593; US 8258274; Hong et al., J. Vet. Diagn. Invest. (5):535-9 (2007)]. В предварительной заявке на патент США 61/739067, зарегистрированной 19 декабря 2013 г., содержание которой включено в описание посредством ссылки во всей полноте, описан специфический аттенуированный изолят CPV-2c (учетный номер в ATCC PTA-13492), который был впоследствии зарегистрирован 24 января 2013 г. в Американской коллекции типовых культур (ATCC) 10801 University Boulevard, Manassas, Va. 20110-2209, USA, при условиях, удовлетворяющих требованиям Будапештского договора о международном признании депонирования микроорганизмов для целей патентной процедуры. Кроме того, сконструирован рекомбинантный парвовирус собак, который содержит гетерогенный геном CPV-2c/CPV-2, т.е. участок, кодирующий капсидные белки, происходит из изолята CPV-2c, и участок, кодирующий неструктурные белки, происходит из изолята CPV-2 [WO 2011107534 (A1); US 20120328652; WO 2012007589 (A1), содержание которых включено в данное описание посредством ссылки во всей их полноте]. В настоящем контексте вакцина по настоящему изобретению, которая содержит "парвовирус собак", может содержать один или несколько указанных типов/вариантов/изолятов CPV, включая недавно сконструированный рекомбинантный парвовирус собак, который содержит гетерогенный геном CPV-2c/CPV-2.
В настоящем контексте термин "кошка" относится к любому члену семейства кошачьих. Члены этого семейства включают диких, содержащихся в зоопарках, и домашних членов, таких как любой член подсемейства Felidae, например, кошки, львы, тигры, пумы, ягуары, леопарды, снежные барсы, пантеры, североамериканские горные львы, гепарды, рыси, каракалы или любые их гибриды. Кошки также включают в себя домашних кошек, чистокровных и/или беспородных кошек-компаньонов, кошек, участвующих в представлениях, лабораторных кошек, клонированных кошек и диких или одичавших кошек.
В данном контексте "сахарное вспомогательное вещество" представляет собой сахар, содержащий от 5 до 12 атомов углерода (например, сахароза, мальтоза, трегалоза, декстроза, лактоза, глюкоза, фруктоза, галактоза), или сахарный спирт/полиол (например, сорбит, маннит, арабит, инозит, мальтитол). Если не указано особо, процент (%) сахарного вспомогательного вещества предоставляется в виде веса (мас) сахарного вспомогательного вещества в объеме (об.) вакцины, (мас./об.) в вакцине.
В настоящем контексте, если не указано особо, процент (%) твердого вспомогательного вещества, например сахарного вспомогательного вещества или желатина, в вакцине основан на 1% растворе, представляющем собой 1 г твердого вспомогательного вещества/100 мл объема вакцины (мас./об.).
В настоящем контексте, если не указано особо, процент (%) жидкого вспомогательного вещества, например этанола, в вакцине основан на 1% растворе, представляющем собой 1 мл жидкого вспомогательного вещества/100 мл объема вакцины (об./об.).
В настоящем контексте, если не указано особо, предусмотренное значение pH является значением pH, установленным/измеренным при 25°C.
В настоящем контексте термин "приблизительно" используется взаимозаменяемо с термином "примерно" и означает, что значение находится в пределах двадцати пяти процентов от указанной величины, т.е. концентрация "приблизительно" 2 мМ ЭДТА может составлять от 1,5 мМ до 2,5 мМ ЭДТА.
Гидролизат цельного казеина, который можно использовать в жидких стабильных вакцинах по настоящему изобретению, можно получить с помощью ряда процедур, включая, например, кислотный гидролизат или ферментативный гидролизат. Такие гидролизаты содержат в форме смешанных аминокислот и пептидов всех аминокислот, исходно присутствующих в казеине. Один панкреатический гидролизат цельного казеина, который можно использовать в жидких стабильных вакцинах по настоящему изобретению, продается как CASEIN HYDROLYSATE ENZYMATIC® MP Biomedicals. Сопоставимые продукты продаются под названием NZ-AMINE®, NZ-AMINE®A, NZ-AMINE®AS, и NZ-AMINE®B и триптон от Sigma-Aldrich.
Поскольку жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению предпочтительно имеют значение pH, которое изменяется в диапазоне от pH 6,0 до pH 8,0, жидкие стабильные вакцины по настоящему изобретению могут содержать буфер. Буферы, подходящие для использования в жидких стабильных вакцинах по настоящему изобретению, включают, но без ограничения: Трис-буфер, Трис-гистидиновый буфер, Бис-Трис буфер, BIS-Трис-пропановый буфер, калий- и/или натрий-фосфатный буфер, калий- и/или натрий-пирофосфатный буфер, имидазоловый буфер, PIPES, ACES, MOPS, MOPSO, BES, TES, трициновый буфер, глицил-глициновый буфер и HEPES. Буферы могут быть приведены к желаемому значению pH с помощью любого подходящего противоиона.
Вакцины по настоящему изобретению могут либо содержать адъювант, либо, наоборот, не содержать адъювант, часто в зависимости от антигена(ов), который содержит вакцина. Примеры адъювантов, подходящих для использования в вакцинах по настоящему изобретению, включают фосфат алюминия, например, REHYDROPHOS® (General Chemical, Parsippany, New Jersey) и/или гидроксид алюминия, например, REHYDROGEL®, REHYDROGEL® HPA или REHYDROGEL® LV (General Chemical, Parsippany, New Jersey), и/или адъювант на основе низкомолекулярного сополимера, который может образовывать поперечные связи в растворе с превращением в высокомолекулярный гель, например, POLYGEN™ (MVP Laboratories, Omaha), и/или адъювант, состоящий из частиц геля акрилата натрия в воде, например, MONTANIDE™ PET GEL A™ (Seppic, Paris France). Если добавляют адъювант, его количество в вакцине обычно составляет приблизительно от 1% до 20% (об./об.). В конкретных вариантах осуществления количество адъюванта составляет приблизительно от 2% до 10% (об./об.). В примере 2, представленном ниже, адъювант составляет приблизительно 5% (об./об.).
Вакцины по настоящему изобретению также могут содержать хелатор. Примеры подходящих хелаторов включают этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТА), 1,2-бис(o-аминофенокси)этан-Ν,Ν,Ν',Ν'-тетрауксусную кислоту (BAPTA), этиленгликольтетрауксусную кислоту (EGTA), димеркаптосукциновую кислоту (DMSA) и диэтилентриаминпентауксусную кислоту (DTPA), 2,3-димеркапто-1-пропансульфоновую кислоту (DMPS).
Поливалентные вакцины. Настоящее изобретение относится к жидким стабильным поливалентным вакцинам. Жидкая стабильная поливалентная вакцина для собак по настоящему изобретению, например, может содержать два или несколько из перечисленных вирусов: вирус чумы собак, аденовирус собак 2 типа, парвовирус собак, вирус парагриппа собак, вирус гриппа собак, пневмовирус собак, коронавирус собак, вирус герпеса собак, вирус инфекционного гепатита собак, мелкий вирус собак, вирус бешенства и вирус псевдобешенства. Такие жидкие стабильные вакцины также можно объединить с одним или несколькими аттенуированными или убитыми антигенами, такими как вирус гриппа собак, коронавирус собак, Bordetella bronchiseptica, Mycoplasma species, Ehrlichia canis, Anaplasma species, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo, Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira pomona, Leptospira interrogans, Leptospira autmnalis и Leptospira Bratislava, и хранить или, альтернативно, можно объединить перед введением.
Кроме того, жидкая стабильная поливалентная вакцина для кошек по настоящему изобретению может содержать один или несколько из следующих кошачьих патогенов: вирус герпеса кошек, калицивирус кошек, пневмовирус кошек, парвовирус кошек, вирус лейкоза кошек, вирус инфекционного перитонита кошек, вирус иммунодефицита кошек, вирус болезни Борна, вирус кошачьего гриппа и вирус птичьего гриппа. Такие жидкие стабильные вакцины можно затем объединить с аттенуированными или убитыми Chlamydophila felis и/или Bartonella spp. (например, B. henselae) и хранить или, альтернативно, можно объединить перед введением.
Вакцины по настоящему изобретению также могут содержать антибактериальное средство, такое как антибиотик. Примеры таких антибиотиков могут включать: 10-100 мкг/мл гентамицина, 0,5-5,0 мкг/мл амфотерицина B, 10-100 мкг/мл тетрациклина, 10-100 ед/мл нистатина (микостатина), 10-100 ед/мл пенициллина, 10-100 мкг стрептомицина, 10-100 мкг полимиксина B и 10-100 мкг неомицина.
Введение вакцины. Жидкие стабильные вирусные вакцины по настоящему изобретению можно вводить любым обычным способом, например, путем системного введения, в том числе путем парентерального введения, таким как, без ограничения, подкожное или внутримышечное введение. Жидкие стабильные вирусные вакцины по настоящему изобретению также можно вводить путем введения через слизистую оболочку, например, путем интраназального, перорального, ректального и/или глазного введения. Альтернативно, вакцины можно вводить с помощью кожного пластыря, скарификации или местного введения. Предполагается, что жидкую стабильную вирусную вакцину по настоящему изобретению также можно вводить с питьевой водой и/или пищей животных-субъектов, принимающих препарат. Кроме того, предполагается, что такие вакцины можно вводить в виде лакомства или с помощью игрушки.
Вакцины (включая поливалентные вакцины) по настоящему изобретению также можно вводить как часть комбинированной терапии, т.е. терапии, которая включает, в дополнение к самой вакцине, введение одного или более дополнительных активных агентов, лекарственных средств и т.д. В таком случае следует понимать, что количество вакцины, которое составляет "терапевтически эффективное" количество, может быть больше или меньше, чем количество вакцины, которое составляло бы "терапевтически эффективное" количество, если бы вводили только одну вакцину. Другие лекарственные средства могут включать средства, известные в данной области, такие как, например, анальгетики, жаропонижающие препараты, отхаркивающие средства, противовоспалительные препараты, антигистаминные препараты и/или введение жидкостей.
Уровень иммуногенности можно определить экспериментально с помощью методов исследования с титрованием разрешающей дозы, общеизвестных в данной области. Такие методы обычно включают вакцинацию нескольких животных-субъектов вакциной в разных дозах и затем заражение животных вирулентным вирусом для определения минимальной защитной дозы.
Факторы, влияющие на предпочтительный режим дозирования, могут включать, например, вид или породу (например, собаки или кошки), возраст, вес, пол, диету, активность, объем легких и состояние субъекта; способ введения; эффективность, безопасность и профили продолжительности иммунитета конкретной используемой вакцины; используется ли система доставки; и вводят ли вакцину как часть лекарства и/или как комбинацию вакцин. Таким образом, фактически используемая дозировка может различаться в зависимости от животных и поэтому может отличаться от типичных доз, указанных выше. Определение таких изменений доз обычно входит в компетенцию специалистов в области создания вакцин, использующих общепринятые способы.
Аналогичным образом, объем, в котором можно ввести такую дозу, как правило, составляет от 0,1 мл (обычно при интрадермальном или трансдермальном применении) до 5,0 мл. Типичный диапазон вводимого объема составляет от 0,2 до 2,0 мл и приблизительно от 1,0 до 2,0 мл при внутримышечном или подкожном введении.
Предполагается, что вакцину можно ввести реципиенту вакцины один раз или, альтернативно, два или несколько раз в течение нескольких дней, недель, месяцев или лет. В некоторых вариантах осуществления вакцину вводят по меньшей мере два раза. В определенных таких вариантах осуществления, например, вакцину вводят два раза, при этом вторую дозу (например, ревакцинирующую дозу) вводят по меньшей мере через 2 недели после введения первой дозы. В конкретных вариантах осуществления вакцину вводят два раза, при этом вторую дозу вводят не позднее чем через 8 недель после введения первой дозы. В других вариантах осуществления вторую дозу вводят спустя от 1 недели до 2 лет после введения первой дозы, от 1,5 недель до 8 недель после введения первой дозы или от 2 до 4 недель после введения первой дозы. В других вариантах осуществления вторую дозу вводят приблизительно через 3 недели после введения первой дозы.
В приведенных выше вариантах осуществления первая и последующие дозы могут варьировать как по количеству, так и/или по форме. Однако часто дозы являются одинаковыми по количеству и форме. Если вводят только одну дозу, количество вакцины в указанной дозе в чистом виде обычно составляет терапевтически эффективное количество вакцины. Однако, если вводят больше чем одну дозу, количества вакцины в указанных дозах в совокупности могут составлять терапевтически эффективное количество. Кроме того, вначале можно ввести вакцину и затем можно ввести ревакцинирующую дозу, например, от 2 до 12 недель позднее. Однако последующие введения вакцины могут быть проведены на годовой (1 год) или двухгодовой (2 года) основе, независимо от того, вводилась ли ревакцинирующая доза или нет.
Настоящее изобретение можно лучше понять со ссылкой на следующие неограничивающие примеры, которые приведены в качестве иллюстрации настоящего изобретения. Следующие примеры представлены для того, чтобы более полно проиллюстрировать варианты осуществления изобретения. Однако их не следует истолковывать как ограничивающие широкий объем изобретения.
ПРИМЕРЫ
ПРИМЕР 1. Устойчивость жидких вирусных вакцин для собак
Материалы и методы
Материалы. Сахарозу и сорбит со степенью чистоты, подходящей для культивирования клеток, приобретают в Fisher Scientific. Высокой степени чистоты L-аргинин гидрохлорид, L-метионин, L-гистидин и хлорид натрия со степенью чистоты более 98% приобретают в Sigma. Декстран сульфат со средней молекулярной массой 10000 и степенью чистоты >95% приобретают в Sigma. Этанол высокой степени чистоты (>99%), растворы TWEEN 80, TWEEN 20, 1,0 M Трис (pH 8,0) и ЭДТА (pH 8,0) приобретают в Sigma. 20% раствор желатина марки 250 bloom и 7,61% раствор NZ Amine AS готовят из лучших представленных на рынке реагентов.
Получение основных растворов антигенов. Следующие растворы получают и стерилизуют с помощью 0,2 мкм фильтра: 80% сахароза, 70% сорбит, 1,0 M L-аргинин (pH 7,2), 5% L-метионин, 5 мМ декстран сульфат. Растворы антигенов CDV, CAV2, CPV и CPI с титрами от 6,5 до 9,5 замораживают при -80°C, чтобы разморозить непосредственно перед смешиванием.
Смешивание и розлив жидких вакцин. Процедура получения смеси для жидких вакцин CDV, CAV2, CPV и CPI (1,0 мл на дозу) заключается в следующем: антигены в количестве одной дозы смешивают в различных составах, как показано в таблице 1 ниже, с заданными титрами от 5,0 до 7,5 (Log10 TCID50) для вирусных антигенов. Подготавливают и подписывают 200 мл стерилизованный контейнер и затем добавляют каждый компонент стабилизатора и вспомогательного вещества в контейнер в соответствии с рассчитанным количеством, исходя из конечной концентрации каждого компонента, как показано в таблице 1 ниже.
Доводят объем дважды дистиллированной водой (ddH2О) до заданного объема стабилизаторов и вспомогательных веществ. Смешивают на платформе для перемешивания в течение по меньшей мере 10 мин до полного растворения всех компонентов. Охлаждают и хранят раствор стабилизаторов при 4°C до того, как будут подготовлены антигены.
Нагревают замороженный антиген на водяной бане при 37°C с периодическим встряхиванием до полного растаивания льда. Некоторые антигены имеют в растворе видимый клеточный дебрис, поэтому антигены необходимо тщательно перемешать перед пипетированием. Размороженный антиген следует хранить при 2-8°C в течение не более 8 часов перед использованием. Добавляют соответствующее количество CDV, CAV2, CPV и CPI в подписанный контейнер с растворами стабилизаторов. Перемешивают на платформе для перемешивания до образования гомогенной смеси антигенов и стабилизаторов. Стараются избегать образования пузырьков и пены во время указанной стадии перемешивания. Измеряют значение pH при 25°C и доводят значение pH с помощью 1 M HCl или 1 M NaOH до заданного показателя pH, если значение pH не находится в диапазоне 7,2±0,1. Хранят смесь вакцины при 2-8°C до дозированного разливания в тот же день или аликвотируют в небольшом объеме и замораживают при <-70°C для последующего использования. Вносят смесь вакцины в 2 мл стеклянные ампульные флаконы по 1 мл на флакон. Добавляют аргон в ампульный флакон после заполнения для предотвращения окисления во время хранения и затем термически запечатывают ампульный флакон. Наносят на ампулу этикетку, где указано название образца, номер лота, температура хранения, дата, и затем переносят в ящики и хранят при различной температуре в соответствии с протоколом исследования.
Испытания на стабильность, ускоренные под воздействием температуры и в режиме реального времени. Жидкие образцы хранят при 25°C±1°C и 4°C±1°C соответственно в подходящих инкубаторах. Образцы, хранившиеся при 25°C, используют для проведения ускоренного испытания на стабильность в целях скрининга, тогда как образцы, хранившиеся при 4°C, являются образцами для испытания на стабильность в режиме реального времени. В заданный момент времени извлекают 3 флакона каждой композиции, измеряют титр каждого антигена методом титрования в культуре клеток и описывают результат в виде средней инфекционной дозы в тканевой культуре (TCID50) и/или в виде инфекционной дозы 50%, установленной с помощью флуоресцентно-меченных антител (FAID50).
Аналитические методы
Активность CPI. Разведения образцов вируса засевают на клетки почки собаки (DK). Через 4-6 дней монослои фиксируют и окрашивают антисывороткой CPI, конъюгированной с флуоресцеином, и рассчитывают титр вируса по методу Спирмена-Кербера [Cunningham, C.H. A Laboratory Guide in Virology, 7th edition, Burgess Publishing Co., Minneapolis, MN. (1973); Kaplan, M.M. and Koprowski, H., Laboratory Techniques in Rabies, World Health Organization, Switzerland (1973)].
Активность CDV. Разведения образцов вируса засевают на клетки Vero. Через 5-7 дней монослои проверяют на наличие цитопатического эффекта и рассчитывают титр вируса по методу Спирмена-Кербера, как приведено выше.
Активность CAV2. Разведения образцов вируса засевают на клетки DK. Через 7 дней монослои проверяют на наличие цитопатического эффекта и рассчитывают титр вируса по методу Спирмена-Кербера, как приведено выше.
Активность CPV. Разведения образцов вируса засевают на клетки DK. Через 3 дня монослои окрашивают антисывороткой CPV, конъюгированной с флуоресцеином, и рассчитывают титр вируса по методу Спирмена-Кербера, как приведено выше.
Результаты
Ускоренные испытания на стабильность при 25°C. Проводят два исследования для скрининга жидких композиций. Первое исследование включает композиции с L-001 по L-008, и второе исследование включает композиции с L-009 по L-026 (подробное описание композиций см. в таблице 1). Жидкие образцы, хранившиеся в герметично закрытых стеклянных ампульных флаконах в составе 1 мл на флакон на дозу, тестируют в различные моменты времени после хранения при 25°C или 4°C. Для образцов, хранившихся при 25°C, результаты испытания на стабильность для CDV, CAV2 и CPI представлены в таблице 2. CPV не проверяют на устойчивость при хранении при 25°C, поскольку жидкий препарат CPV считается наиболее стабильной фракцией среди четырех вирусов. Что касается образцов исследования 1, которые инкубировали при 25°C (с L-001 по L-008), результаты, полученные в день 0, неделю 6 и неделю 8, используют для сравнения различных композиций. Что касается образцов исследования 2, которые инкубировали при 25°C (с L-009 по L-026), образцы, взятые в день 0, неделю 6 и неделю 12, используют для проведения скрининга композиций. Тестирование проводили в дополнительные моменты времени в промежутках между указанными моментами времени, и характер изменений являлся таким же.
На основании хода деградации вручную дают оценку относительной стабильности каждой композиции, как показано в таблице 2, при этом пять "+" обозначает наиболее стабильный препарат, и один "+" обозначает наименее стабильный препарат. Каждой вирусной фракции дают оценку индивидуально и затем в обобщенной оценке учитывают все 3 вируса. На основании оценки и сравнения установили несколько закономерностей. Соответственно, среди трех тестированных сахаридов (сахароза, сорбит и глицерин) стабилизирующее действие сахарозы и сорбита было значительно выше, чем действие глицерина. Также существует явное преимущество при использовании более высокой концентрации сахара, при этом композиции с общим содержанием сахара 17%-25% действуют лучше, чем композиции с содержанием сахара менее 10%. Среди стабилизаторов, состоящих из белков или аминокислот, наибольший вклад в стабильность вносит 0,3 M L-аргинин, за которым следуют 1% метионин, 0,8% желатин и 1% NZ Amine. Из других стабилизаторов декстран сульфат и поглотители свободных радикалов (FRS), по-видимому, способствуют стабильности жидких композиций CPV, CDV, CAV2 и CPI, и хотя их присутствие существенно не изменяет профиль стабильности, они также не оказывают отрицательных эффектов на стабильность. Таким образом, в некоторых случаях предпочтительно было бы включить декстран сульфат и/или FRS в конечный препарат жидкой живой вирусной вакцины для собак или кошек для стабильности при продолжительном хранении при 25°C. С другой стороны, обнаружили, что TWEEN 80 и TWEEN 20 оказывали неблагоприятное действие на стабильность вирусных композиций.
Испытание на стабильность в режиме реального времени при 4°C. Также осуществляли контроль стабильности при продолжительном хранении жидких живых вакцин CPV, CDV, CAV2 и CPI при 4°C, и результаты представлены в таблице 3. Прогнозируемый вирусный титр в 24 месяца при 4°C экстраполируют на основании данных, полученных в моменты времени 12 месяцев и 18 месяцев для композиций с L-001 по L-008, и 6 месяцев и 12 месяцев для композиций с L-009 по L-026 (см. таблицу 3 ниже). Требование к минимальному титру дозы для каждого вируса при истечении срока годности представлено в конце таблицы 3 ниже и используется для определения, какой препарат может обеспечить стабильный продукт при хранении при 4°C. Имеется десять композиций (L-009, L-011, L-012, L-014, L-15, L-016, L-018, L-019, L-025 и L-026), которые с высокой вероятностью позволяют получить стабильный продукт, тогда как композиции L-003 и L-007 имеют большой потенциал для получения стабильного продукта со сроком хранения 2 года при 4°C. Из четырех рассмотренных вирусов CDV представляется самым неустойчивым. Все десять композиций представляются способными обеспечить стабильность в течение более чем 3-х лет при хранении при 0-8°C в случае CAV2, CPV и CPI и по меньшей мере в течение 2 лет при хранении при 0-8°C в случае CDV.
Таблица 1
Композиции жидких живых вирусных вакцин для собак
Наименование композиции Детали композиции
L-001 25% сорбит, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-002 15% сорбит, 10% сахароза, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-003 10% сорбит, 15% сахароза, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-004 15% сорбит, 10% сахароза, 0,01% Tween 20, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-005 75 мМ NaCl, 5% сахароза, 0,1 мМ ЭДТА, 0,5% этанол, 0,02% Tween 80, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-006 75 мМ NaCl, 5% сахароза, 0,1 мМ ЭДТА, 0,5% этанол, 0,02% Tween 80, 0,3 M L-аргинин, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-007 17% сахароза, 0,8% желатин, 1,0% NZ Amine, 0,3 М L-аргинин, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-008 3,8% сахароза, 0,8% желатин, 1,0% NZ Amine, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-009 25% сахароза, 1,6% желатин, 2,0% NZ Amine, 0,1 мМ ЭДТА, 0,5% этанол, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-010 25% сахароза,0,8% желатин, 1,0% NZ Amine, 0,01% Tween 80, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-011 25% сахароза,0,3 M аргинин, 50 мкМ декстран сульфат, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-012 25% сахароза, 1% метионин, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-013 15% сахароза, 10% сорбит, 1,6% желатин, 2,0% NZ Amine, 0,01% Tween 80, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-014 15% сахароза, 10% сорбит, 0,8% желатин, 1,0% NZ Amine, 0,1 мМ ЭДТА, 0,5% этанол, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-015 15% сахароза, 10% сорбит, 0,3 M аргинин, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-016 15% сахароза, 10% сорбит, 1% метионин, 50 мкМ декстран сульфат, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-017 17% сахароза, 0,3M L-аргинин, 1,6% желатин, 2,0% NZ Amine, 50 мкМ декстран сульфат, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-018 17% сахароза, 0,3 M L-аргинин, 0,8% желатин, 1,0% NZ Amine, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-019 17% сахароза, 0,3 М L-аргинин, 0,1 мМ ЭДТА, 0,5% этанол, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-020 17% сахароза, 0,3 М L-аргинин, 1% метионин, 0,01% Tween 80, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-021 40% глицерин, 1,6% желатин, 2,0% NZ Amine, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-022 40% глицерин, 0,8% желатин, 1,0% NZ Amine, 50 мкМ декстран сульфат, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-023 40% глицерин, 0,3 М аргинин, 0,01% Tween 80, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
L-024 40% глицерин, 1% метионин, 0,1 мМ ЭДТА, 0,5% этанол, 10 мМ Трис, 10 мМ гистидин, pH 7,2
Единицы измерения концентрации: сахароза (мас./об.), сорбит (мас./об.), глицерин (об./об.), желатин (мас./об.), NZ Amine (мас./об.), L-аргинин (M), метионин (мас/об.), TWEEN (об./об.), декстран сульфат (мкM), этанол (об./об.), ЭДТА (мМ), гистидин (мМ), Трис (мМ), NaCl (M).
Таблица 2
Ускоренное испытание на стабильность композиций жидких вирусных вакцин для собак
Титр (Log10 TCID50) каждой вирусной фракции во время хранения при 25°C (недели)
CDV CAV CPI 25°C
итоговая оценка
0 6 8 Оценка 0 2 8 Оценка 0 6 8 Оценка
L-001 5,47 3,94 3,67 +++++ 5,33 5,95 6,50 +++++ 7,09 6,00 6,11 ++++ ++++
L-002 5,47 3,56 3,83 +++++ 5,33 6,06 6,33 +++++ 7,09 6,67 6,61 +++++ ++++
L-003 5,47 3,89 3,78 +++++ 5,33 5,83 6,39 +++++ 7,09 6,50 6,72 +++++ ++++
L-004 5,47 3,06 3,40 ++++ 5,33 6,28 6,28 +++++ 7,09 6,33 6,06 ++++ ++++
L-005 5,47 1,50 + 5,33 6,17 + 7,09 1,50 +
L-006 5,47 1,56 + 5,33 5,33 + 7,09 1,72 +
L-007 5,47 3,67 3,89 +++++ 5,33 5,78 5,94 +++++ 7,09 5,72 6,72 +++++ +++++
L-008 5,47 1,56 1,50 + 5,33 6,78 7,11 +++++ 7,09 6,17 6,33 ++++ +
0 4 9 Оценка 0 6 12 Оценка 0 6 12 Оценка
L-009 5,56 4,50 3,00 ++ 5,72 5,78 5,92 +++++ 7,44 5,83 5,84 +++ ++
L-010 5,63 2,00 1,50 + 5,75 1,50 1,50 + 7,27 1,50 1,50 + +
L-011 5,83 5,11 3,92 ++++ 5,95 5,11 5,25 ++++ 7,17 6,67 7,17 +++++ ++++
L-012 5,63 4,39 4,09 ++++ 5,75 5,33 5,75 +++++ 7,27 6,50 6,00 +++ ++++
L-013 5,63 2,00 1,50 + 5,75 1,50 1,50 + 7,27 1,50 1,50 + +
L-014 5,63 4,72 3,34 ++ 5,75 5,39 5,92 +++++ 7,27 6,00 5,84 +++ ++
L-015 5,61 4,72 4,25 +++++ 5,39 5,39 5,42 +++++ 7,34 6,61 6,75 ++++ +++++
L-016 5,63 4,89 4,09 ++++ 5,75 5,72 5,67 +++++ 7,27 6,06 6,42 ++++ ++++
L-017 5,63 4,83 3,59 +++ 5,75 5,61 5,67 +++++ 7,27 6,17 5,92 +++ +++
L-018 5,72 4,78 4,00 ++++ 5,67 5,33 5,50 +++++ 7,61 6,11 6,75 ++++ ++++
L-019 5,63 4,67 4,09 ++++ 5,75 5,00 5,67 +++++ 7,27 6,39 7,00 +++++ ++++
L-020 5,22 1,78 1,50 + 5,78 1,50 1,50 + 7,39 1,50 1,50 + +
L-021 5,63 4,50 3,09 ++ 5,75 5,28 5,67 +++++ 7,27 5,33 4,83 ++ ++
L-022 5,63 4,00 1,92 + 5,75 5,17 5,34 ++++ 7,27 5,44 5,17 +++ +
L-023 5,63 1,95 1,50 + 5,75 1,50 1,50 + 7,27 1,50 1,50 + +
L-024 5,67 4,17 1,83 + 5,94 5,17 5,75 +++++ 6,94 5,17 4,67 ++ +
L-025 5,78 4,72 3,92 ++++ 5,83 5,39 5,84 +++++ 7,00 6,39 7,00 +++++ ++++
L-026 5,63 4,45 3,92 ++++ 5,75 5,28 5,59 +++++ 7,27 6,50 6,59 ++++ ++++
1) Исследование 1: композиции с L001 по L008; исследование 2: композиции с L-009 по L-026. Указанные исследования осуществляли в различные моменты времени.
2) Вирус CPV не включен в ускоренное испытание на стабильность при 25°C, поскольку показано, что он является относительно стабильным.
3) Оценку определяют с помощью кривой относительной деградации, экстраполированной на основании данных, полученных для указанных трех моментов времени, при этом пять "+" обозначают лучший результат и один "+" обозначает худший результат. В общей оценке учитывают оценку для отдельного вируса и определяют ее по наименее устойчивой фракции.
Таблица 3
Стабильность в режиме реального времени композиций жидкой вирусной вакцины собак при 4°C
Титр (Log10 TCID50) каждой вирусной фракции во время хранения при 4°C (месяцы)
CDV CAV CPI CPV Общая оценка
0 12 18 24* 0 12 18 24* 0 12 18 24* 0 12 18 24*
L-001 5,47 3,72 2,67 1,61 5,33 5,67 5,39 5,11 7,09 6,11 5,22 4,33 6,00 6,28 6,39 6,19 +
L-002 5,47 3,56 3,00 2,44 5,33 5,67 5,66 5,66 7,09 6,67 5,83 5,00 6,00 6,55 6,51 6,46 +
L-003 5,47 3,78 3,39 2,99 5,33 5,78 5,78 5,78 7,09 6,72 6,45 6,17 6,00 6,33 6,33 6,33 +++
L-004 5,47 2,83 3,00 2,80 5,33 5,83 5,89 5,69 7,09 6,67 5,99 5,31 6,00 6,39 6,39 6,39 +++
L-007 5,47 3,83 3,17 2,50 5,33 5,78 5,83 5,63 7,09 6,78 6,83 6,63 6,00 5,11 4,78 4,45 +++
L-008 5,47 2,56 1,72 0,88 5,33 6,22 5,94 5,66 7,09 6,22 6,11 6,00 6,00 5,95 6,28 6,08 +
0 6 12 24* 0 6 12 24* 0 6 12 24* 0 6 12 24*
L-009 5,56 3,72 4,06 3,86 5,72 6,28 6,22 6,16 7,44 6,50 6,22 5,94 6,00 4,72 4,89 4,69 +++++
L-011 5,83 4,33 4,39 4,19 5,95 5,61 5,83 5,63 7,17 7,28 7,16 7,05 6,00 6,06 5,61 5,17 +++++
L-012 5,63 4,33 4,50 4,30 5,75 6,22 5,78 5,34 7,27 7,28 6,89 6,50 6,00 6,50 6,67 6,47 +++++
L-014 5,63 3,94 3,94 3,94 5,75 6,17 6,00 5,83 7,27 7,00 6,67 6,34 6,00 6,06 5,94 5,83 +++++
L-015 5,61 4,06 4,39 4,19 5,39 6,11 5,89 5,67 7,34 7,33 7,33 7,13 6,00 6,22 6,05 5,88 +++++
L-016 5,63 3,95 4,00 3,80 5,75 5,89 5,83 5,77 7,27 7,00 6,94 6,88 6,00 6,61 5,83 5,05 +++++
L-017 5,63 4,22 4,06 3,89 5,75 6,22 6,17 6,11 7,27 7,39 7,00 6,62 6,00 5,06 4,56 4,06 +++
L-018 5,72 4,17 4,33 4,13 5,67 6,22 5,89 5,55 7,61 7,00 7,11 6,91 6,00 5,33 5,17 5,00 +++++
L-019 5,63 4,33 4,11 3,89 5,75 5,89 6,06 5,86 7,27 7,17 7,22 7,02 6,00 6,16 6,39 6,19 +++++
L-021 5,63 1,50 1,50 1,50 5,75 1,50 1,50 1,50 7,27 n/d n/d n/d n/d n/d n/d n/d +
L-022 5,63 1,50 1,50 1,50 5,75 1,50 1,50 1,50 7,27 n/d n/d n/d n/d n/d n/d n/d +
L-025 5,78 4,17 4,72 4,52 5,83 6,33 6,00 5,67 7,00 7,22 6,83 6,44 6,00 5,33 5,17 5,00 +++++
L-026 5,63 4,00 4,95 4,75 5,75 6,22 6,39 6,19 7,27 7,17 7,05 6,94 6,00 5,44 5,11 4,78 +++++
Минимальный титр при истечении срока годности 3,70 4,80 5,10 4,30
1) n/d, не определяли;
2) Минимальный титр при истечении срока годности представляет собой спецификацию препарата для препарата вакцины в конце 2-летнего срока хранения при 4°C.
3) Обозначенный выше как 24* титр в 24 месяца при 4°C экстраполирован на основании данных, полученных для трех предыдущих моментов времени, т.е. расчетный титр вируса в 24 месяца при хранении при 4°C, экстраполированный на основании данных, полученных в моменты времени "0", 12 месяцев и 18 месяцев для композиций с L-001 по L-008; и в моменты времени "0", 6 месяцев и 12 месяцев для композиций с L-009 по L-026.
4) Титр в момент времени "0" получают для смеси непосредственно после смешивания и создания смеси вакцины.
ПРИМЕР 2
Устойчивость жидких вакцин, состоящих из живых вирусов собак и убитых бактерий
Материалы и методы
Материалы
Сахарозу и сорбит со степенью чистоты, подходящей для культивирования клеток, приобретают в Fisher Scientific. Высокой степени чистоты L-аргинин гидрохлорид, L-метионин, L-гистидин, хлорид натрия со степенью чистоты более 98% приобретают в Sigma. Декстран сульфат со средней молекулярной массой 10000 и степенью чистоты >95% приобретают в Sigma. Этанол высокой степени чистоты (>99%), растворы TWEEN 80, TWEEN 20, 1,0 M Трис (pH 8,0) и ЭДТА (pH 8,0), гентамицин (50 мг/мл), амфотерицин B (25 мг/мл) приобретают в Sigma. Раствор 20% желатина марки bloom 250 и раствор 7,61% NZ Amine AS готовят самостоятельно.
Получение основных растворов антигенов. Следующие растворы получают и стерилизуют с помощью 0,2 мкм фильтра: 80% сахароза, 70% сорбит, 1,0 M L-аргинин (pH 7,2), 5% L-метионин, 5 мМ декстран сульфат.
Антигены DA2PPv в объеме CDV, CAV2, CPV и CPI получают в титрах 6,7, 7,8, 8,0 и 9,2 соответственно. Антигены в объеме замораживают при -80°C и размораживают непосредственно перед смешиванием.
Антигены Leptospira в объеме получают с концентрацией приблизительно 2×1010 бактерий в миллилитре. Антигены Leptospira в объеме хранят при 4°C.
Смешивание и розлив жидких вакцин. Процедура получения смеси для жидкой вакцины DA2PPv (1,0 мл на дозу) заключается в следующем: антигены в количестве одной дозы смешивают в различных составах, как показано в таблице 4, с заданными титрами 5,5, 6,1, 6,0 и 7,0 для вирусов CDV, CAV2, CPV и CPI соответственно в соответствии со стандартными процедурами для поливалентного продукта CDV, CAV2, CPI и CPV (DA2PPv). Для композиций с четырьмя антигенами Leptospira заданная концентрация каждой фракции Leptospira составляет приблизительно 1×109 клеток на миллилитр. Готовят и подписывают 200 мл стерилизованный контейнер и затем компонент каждого стабилизатора и вспомогательного вещества добавляют в контейнер в соответствии с рассчитанным количеством, исходя из конечной концентрации каждого компонента, как указано в таблице 4 ниже.
Доводят объем дважды дистиллированной водой (ddH2О) до заданного объема стабилизаторов и вспомогательных веществ. Смешивают на платформе для перемешивания в течение по меньшей мере 10 мин до полного растворения всех компонентов. Охлаждают и хранят раствор стабилизаторов при 4°C до того, как будут подготовлены антигены. Нагревают замороженный антиген DA2PPv на водяной бане при 37°C с периодическим встряхиванием до полного растаивания льда. Некоторые антигены имеют в растворе видимый клеточный дебрис, поэтому антигены необходимо тщательно перемешать перед пипетированием. Размороженный антиген следует хранить при 2-8°C в течение не более 8 часов перед использованием. Добавляют соответствующее количество CDV, CAV2, CPV и CPI в подписанный контейнер с растворами стабилизаторов. Добавляют аликвоту, содержащую соответствующее количество общего раствора 4 антигенов Leptospira (Lepto) к смеси вакцины. Перемешивают на платформе для перемешивания до образования гомогенной смеси антигенов и стабилизаторов. Стараются избегать образования пузырьков и пены во время указанной стадии перемешивания. Измеряют значение pH при 25°C и доводят значение pH с помощью 1 M HCl или 1 M NaOH до заданного показателя pH, если значение pH не находится в диапазоне 7,2±0,1. Хранят смесь вакцины при 2-8°C до дозированного разливания в тот же день или аликвотируют в небольшой объем и замораживают при <-70°C для последующего использования. Вносят смесь вакцины в 2 мл стеклянные ампульные флаконы по 1 мл на флакон. Добавляют аргон в ампульный флакон после заполнения для предотвращения окисления во время хранения и затем термически запечатывают ампульный флакон. Наносят на ампулу этикетку, где указано название образца, номер лота, температура хранения, дата, и затем переносят в ящики и хранят при различной температуре в соответствии с протоколом исследования.
Испытания на стабильность, ускоренные под воздействием температуры, и в режиме реального времени.
Образцы жидких вакцин DA2PPv или DA2PPv-Lepto 4 хранят в инкубаторе при температуре 25±1°C. Хранение при 25°C используют для проведения ускоренного испытания на стабильность в целях скрининга. В запланированные моменты времени извлекают по 3 флакона каждой композиции и измеряют титр каждого антигена с помощью культуры клеток на основе TCID50 или FAID50.
Аналитические методы
Активность CPI
Определяют титр вируса CPI в вакцине DA2PPv. Вкратце, разведения вируса засевают на клетки почки собаки (клетки DK). Через 4-6 дней монослои фиксируют и окрашивают антисывороткой CPI, конъюгированной с флуоресцеином, и рассчитывают титр вируса по методу Спирмена-Кербера (см. пример 1 выше).
Активность CDV. Определяют титр вируса CDV в вакцине DA2PPv. Вкратце, разведения вируса засевают на клетки Vero. Через 5-7 дней монослои проверяют на наличие цитопатического эффекта и рассчитывают титр вируса по методу Спирмена-Кербера.
Активность CAV2. Определяют титр вируса CAV-2 в вакцине DA2PPv. Вкратце, разведения вируса засевают на клетки DK. Через 7 дней монослои проверяют на наличие цитопатического эффекта и рассчитывают титр вируса по методу Спирмена-Кербера.
Активность CPV. Определяют титр вируса CPV в вакцине DA2PPv. Вкратце, разведения вируса засевают на клетки DK. Через 3 дня монослои окрашивают антисывороткой CPV, конъюгированной с флуоресцеином, и рассчитывают титр вируса по методу Спирмена-Кербера.
Результаты и заключения
Ускоренные испытания на стабильность при 25°C
Вакцины, указанные в описании таблицы 4, смешивают, как описано в разделе Методы выше. Композиция L-037 является такой же, как ранее идентифицированная композиция L-015 выше (см. таблицу 1), за исключением того, что она содержит гентамицин и амфотерицин B. Композиции L-040, L-043 и L-045 содержат как четыре фракции живых вирусов собак, т.е. DA2PPv, так и четыре убитых антигена Leptospira (Canicola, Grippo, Pomona и Ictero). Образцы жидких вакцин хранят в запечатанных стеклянных ампульных флаконах с использованием 1 мл на флакон на дозу. Их тестируют в различные моменты времени после хранения при 25°C. Результаты испытания на стабильность для CDV, CAV2 и CPI представлены в таблице 5. CPV не тестируют на устойчивость при хранении при 25°C, поскольку жидкая композиция CPV считается наиболее устойчивой фракцией среди четырех живых вирусов. На основании результатов испытания на стабильность, представленных в таблице 5, установили следующее.
1) Антибиотики в качестве консервантов не оказывают отрицательного действия на стабильность вирусов DA2PPv в композиции L-015.
2) Наличие четырех убитых антигенов Leptospira снижает стабильность живых аттенуированных вирусов CDV и CPI в жидкой композиции.
3) Добавление 2 мМ ЭДТА к композиции L-040 обеспечивает стабильную композицию DA2PPv даже в присутствии четырех убитых антигенов Leptospira.
4) Указанную жидкую стабильную композицию также можно использовать для DA2PPv combo вместе с четырьмя убитыми антигенами Leptospira в присутствии адъювантов REHYDROPHOS.
Таблица 4
Таблица композиций жидкой стабильной комбинированной вакцины DA2PPv и Lepto 4
Название композиции Антигены Вспомогательные вещества и стабилизаторы
Вирусы DA2PPv Бактерии Lepto 4 Сахароза (мас./об.) Сорбит (мас./об.) L-Arg ЭДТА Стабилизаторы вакцины
L-037 DA2PPv - 15% 10% 0,3 M Гентамицин, Амфотерицин
L-040 DA2PPv Lepto 4 15% 10% 0,3 M Гентамицин, Амфотерицин
L-043 DA2PPv Lepto 4 15% 10% 0,3 M 2 мM Гентамицин, Амфотерицин
L-045 DA2PPV Lepto 4 + адъювант 15% 10% 0,3 M Гентамицин, Амфотерицин
Замечания
Конечный объем составляет 1 мл на дозу для каждой композиции.
Концентрация сахарозы и сорбита является массообъемной концентрацией (мас./об.). Концентрация аргинина (L-Arg) представляет собой молярную концентрацию. Концентрация ЭДТА представлена в миллимолях.
Все смеси содержат 10 мМ гистидина и 10 мМ Трис в качестве буфера. Конечное значение pH смеси доводят до заданного значения pH 7,2.
Все композиции содержат антибиотики в качестве консервантов 24 мкг/мл гентамицина и 0,4 мкг/мл амфотерицина B.
Все композиции содержат вирусные антигены DA2PPv, в том числе вирусы CDV, CAV2, CPV-2c и CPI.
Lepto 4 содержит четыре штамма Leptospira (Canicola, Grippo, Pomona и Ictero) с 10 миллионами убитых бактерий каждого штамма в одной дозе.
В случае L-045 вначале Lepto 4 смешивали с адъювантом REHYDROPHOS, инкубировали в течение >20 мин при комнатной температуре и затем смешивали с другими вирусными фракциями.
Таблица 5
Стабильность вакцины DAPPv при 25°C в жидких композициях
Композиции Вирусный титр (log10 TCID50) при 25°C
CDV CAV2 CPI
Время 0 Неделя 1 Неделя 2 Неделя 3 Время 0 Неделя 1 Неделя 2 Неделя 3 Время 0 Неделя 1 Неделя 2 Неделя 3
L-037 5,19 5,38 5,19 5,04 5,13 5,50 5,53 5,00 6,26 6,14 6,39 6,14
L-040 5,57 5,57 4,47 4,07 5,38 5,66 5,78 5,32 6,57 6,17 5,70 5,48
L-043 5,82 5,82 5,16 4,91 5,32 5,57 5,35 5,60 6,51 6,10 5,82 5,89
L-045 5,57 5,50 5,13 4,82 5,50 5,66 5,60 5,63 6,51 5,98 5,73 5,60
Замечания
Вводимое количество антигена для всех 4 композиций является одинаковым. Титр в момент времени 0 теоретически должен быть одинаковым. Варьирование вирусного титра в момент времени 0 может быть результатом погрешности метода измерения в сочетании с различием композиций.
Титр CPV не представлен, поскольку показано, что CPV является относительно стабильным в большинстве указанных композиций. Измеряют только титры CDV, CAV2 и CPI во время указанного ускоренного исследования на стабильность при 25°C.

Claims (12)

1. Жидкая стабильная вакцина, которая содержит живой аттенуированный вирус собак, 10-30% (мас./об.) сахарного вспомогательного вещества и аминокислоту; где жидкая стабильная вакцина имеет значение рН от 6,0 до 8,0; и где аминокислота выбрана из группы, состоящей из аргинина и метионина; причем, если аминокислота представляет собой аргинин, ее конечная концентрация в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,15 до 0,6 М; и причем, если аминокислота представляет собой метионин, ее конечная концентрация в жидкой стабильной вакцине составляет от 0,025 до 0,3 М; и где живой аттенуированный вирус собак выбран из группы, состоящей из вируса чумы собак, аденовируса собак 2 типа, парвовируса собак и вируса парагриппа собак или любой их комбинации.
2. Жидкая стабильная вакцина по п. 1, где парвовирус собак (CPV) выбран из группы, состоящей из CPV-2, CPV-2a, CPV-2b, CPV-2c и рекомбинантного CPV, содержащего гетерогенный геном CPV-2C/CPV-2.
3. Жидкая стабильная вакцина по п. 2, в которой CPV-2C имеет учетный номер АТСС РТА-13492.
4. Жидкая стабильная вакцина по п. 1, в которой вирус парагриппа собак представляет собой рекомбинантный вектор, который кодирует и экспрессирует гетерогенный антиген.
5. Жидкая стабильная вакцина по п. 1, которая дополнительно содержит компонент, выбранный из группы, состоящей из 0,4-1,6% (мас./об.) желатина, 0,5-2,0% (мас./об.) протеолитического гидролизата цельного казеина, 0,25-1,0% (об./об.) этанола, хелатора, буфера, антибиотика, адъюванта или любой их комбинации.
6. Жидкая стабильная вакцина по п. 5, в которой буфер выбран из группы, состоящей из 2,5-50 мМ Трис и 2,5-50 мМ Трис с 2,5-50 мМ гистидина.
7. Жидкая стабильная вакцина по п. 1, в которой сахарное вспомогательное вещество выбрано из группы, состоящей из сахарозы, сорбита и комбинации сахара и сорбита.
8. Жидкая стабильная вакцина по п. 1, в которой вакцина дополнительно содержит антиген, выбранный из группы, состоящей из убитого вируса, убитой бактерии и убитого вируса вместе с убитой бактерией.
9. Жидкая стабильная вакцина по п. 8, где убитый вирус выбран из группы, состоящей из вируса гриппа собак, пневмовируса собак, коронавируса собак или любой их комбинации.
10. Жидкая стабильная вакцина по п. 8, где убитая бактерия выбрана из группы, состоящей из Bordetella bronchiseptica, Mycoplasma species, Ehrlichia canis, Anaplasma species, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira hardjo, Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira pomona, Leptospira interrogans, Leptospira autmnalis, Leptospira Bratislava или любой их комбинации.
11. Жидкая стабильная вакцина по п. 2, в которой сахарное вспомогательное вещество выбрано из группы, состоящей из сахарозы, сорбита и комбинации сахара и сорбита.
12. Жидкая стабильная вакцина по п. 11, в которой вакцина дополнительно содержит антиген, выбранный из группы, состоящей из убитого вируса, убитой бактерии и убитого вируса вместе с убитой бактерией.
RU2015109724A 2012-08-21 2013-08-16 Жидкие стабильные вирусные вакцины RU2641970C2 (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261691507P 2012-08-21 2012-08-21
US61/691,507 2012-08-21
US201361777164P 2013-03-12 2013-03-12
US61/777,164 2013-03-12
PCT/EP2013/067169 WO2014029702A1 (en) 2012-08-21 2013-08-16 Liquid stable virus vaccines

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2015109724A RU2015109724A (ru) 2016-10-10
RU2641970C2 true RU2641970C2 (ru) 2018-01-23

Family

ID=48986148

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015109724A RU2641970C2 (ru) 2012-08-21 2013-08-16 Жидкие стабильные вирусные вакцины

Country Status (11)

Country Link
US (2) US9314519B2 (ru)
EP (1) EP2887957B1 (ru)
JP (1) JP6259457B2 (ru)
CN (1) CN104640566B (ru)
AU (1) AU2013305082B2 (ru)
BR (1) BR112015002981B1 (ru)
CA (2) CA3178388A1 (ru)
MX (1) MX360431B (ru)
NZ (1) NZ704584A (ru)
RU (1) RU2641970C2 (ru)
WO (1) WO2014029702A1 (ru)

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9314519B2 (en) 2012-08-21 2016-04-19 Intervet Inc. Liquid stable virus vaccines
US9393298B2 (en) * 2013-03-15 2016-07-19 Intervet Inc. Liquid stable bovine virus vaccines
US9480739B2 (en) 2013-03-15 2016-11-01 Intervet Inc. Bovine virus vaccines that are liquid stable
AR097762A1 (es) 2013-09-27 2016-04-13 Intervet Int Bv Formulaciones secas de vacunas que son estables a temperatura ambiente
LT3021859T (lt) 2013-10-25 2018-06-11 Psioxus Therapeutics Limited Onkolitiniai adenovirusai su heterologiniais genais
AR099470A1 (es) 2014-02-17 2016-07-27 Intervet Int Bv Vacunas de virus de aves de corral líquidas
TWI670085B (zh) 2014-02-19 2019-09-01 荷蘭商英特威國際公司 液體穩定之豬病毒疫苗
AU2015357225B2 (en) 2014-12-01 2020-04-09 Transgene Sa Stable liquid vaccinia virus formulations
CN104984357B (zh) * 2015-06-02 2018-01-30 长春百克生物科技股份公司 不含明胶的疫苗保护剂组合物及流感减毒活疫苗
EA032485B1 (ru) * 2015-06-26 2019-06-28 Республиканское Государственное Предприятие На Праве Хозяйственного Ведения "Казахский Научный Центр Карантинных И Зоонозных Инфекций Имени Масгута Айкимбаева" Вакцина живая сухая против чумы верблюдов
US20170007694A1 (en) * 2015-07-07 2017-01-12 Nanobio Corporation Methods and compositions for the stabilization of proteins
JP7064437B2 (ja) 2015-12-17 2022-05-10 サイオクサス セラピューティクス リミテッド 抗ｔｃｒ複合体抗体又は断片をコードするｂ群アデノウイルス
CA3019529A1 (en) * 2016-03-31 2017-10-05 Takeda Vaccines, Inc. Compositions and methods for stabilizing alphaviruses with improved formulations
US20190134190A1 (en) 2016-05-04 2019-05-09 Transgene Sa Combination therapy with cpg tlr9 ligand
CN109803640B (zh) * 2016-08-10 2022-01-04 赛特瑞恩股份有限公司 稳定的液体抗流感病毒抗体医药调配物
US20190328869A1 (en) 2016-10-10 2019-10-31 Transgene Sa Immunotherapeutic product and mdsc modulator combination therapy
CN108018261B (zh) * 2016-11-02 2021-04-27 普莱柯生物工程股份有限公司 犬副流感病毒毒株及其应用
JP7406377B2 (ja) * 2017-05-15 2023-12-27 ヤンセン ファッシンズ アンド プリベンション ベーフェー 安定なウイルス含有組成物
WO2018210804A1 (en) * 2017-05-15 2018-11-22 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Stable virus-containing composition
CN107115525B (zh) * 2017-05-16 2019-11-26 中国农业科学院特产研究所 貉犬瘟热活疫苗及其制备方法和应用
CA3080425A1 (en) 2017-11-06 2019-05-09 Intervet International B.V. Rabies virus vaccine
CN117752780A (zh) 2017-12-07 2024-03-26 默沙东有限责任公司 登革病毒疫苗组合物的制剂
AR113996A1 (es) 2017-12-22 2020-07-08 Intervet Int Bv Vacunas líquidas de virus envueltos vivos
GB201801614D0 (en) 2018-01-31 2018-03-14 Psioxus Therapeutics Ltd Formulation
CN112601545A (zh) * 2018-08-07 2021-04-02 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 工艺和疫苗
CN109735504B (zh) * 2018-12-20 2021-04-16 兆丰华生物科技(南京)有限公司 犬瘟热病毒弱毒疫苗株及其应用
CN109735505A (zh) * 2018-12-26 2019-05-10 河南农业大学 一株犬细小病毒毒株及其基因序列的扩增和应用
MX2021011848A (es) 2019-03-29 2021-10-22 Intervet Int Bv Estabilizacion de bacterias mollicutes vivas en una composicion liquida.
CN111000992A (zh) * 2019-12-19 2020-04-14 广州渔跃生物技术有限公司 一种鸭呼肠孤病毒、鸭坦布苏病毒和鸭腺病毒三联灭活疫苗及其制备方法
BR112022017438A2 (pt) 2020-03-12 2022-10-18 Bavarian Nordic As Composições que melhoram a estabilidade do poxvírus
CN112316128B (zh) * 2020-10-20 2021-08-24 辽宁益康生物股份有限公司 一种犬瘟热病毒犬细小病毒犬传染性肝炎病毒三联活疫苗
US20220193229A1 (en) * 2020-12-23 2022-06-23 Daykin Molecular Systems, LLC Nucleic acid stabilizing solution for vaccines, therapy, diagnostics, storage, and transport
AR127944A1 (es) 2021-12-23 2024-03-13 Intervet Int Bv Vacunas líquidas estabilizadas de virus vivos
WO2024121203A1 (en) * 2022-12-07 2024-06-13 Intervet International B.V. Vaccine for vaccinating a canine
CN116376981A (zh) * 2023-04-21 2023-07-04 西北农林科技大学 一种重组犬细小病毒假病毒

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4337242A (en) * 1980-02-05 1982-06-29 Merck & Co., Inc. Vaccine stabilizer containing L-glutamic acid and L-arginine
WO2006038115A1 (en) * 2004-10-06 2006-04-13 Pfizer Products Inc. Multivalent canine vaccines against leptospira bratislava and other pathogens
US20070161085A1 (en) * 2003-02-25 2007-07-12 Medlmmune Vaccines, Inc. Methods of Producing Influenza Vaccine Compositions
US20100015180A1 (en) * 2008-07-09 2010-01-21 Sanofi Pasteur Stabilizer and Vaccine Composition Comprising One or More Live Attenuated Flaviviruses

Family Cites Families (54)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3155589A (en) * 1958-04-14 1964-11-03 Upjohn Co Parenteral extravascular injectable vaccines for simultaneous immunization of canidae against rabies, canine distemper, and infectious canine hepatitis
US3526696A (en) * 1968-02-14 1970-09-01 Lilly Co Eli Shipping fever vaccine
GB1575155A (en) 1978-04-11 1980-09-17 Merck & Co Inc Vaccine stabilizer
PT71926B (en) 1979-10-29 1982-03-31 Merck & Co Inc Process for preparing a liquid vaccine comprising a stabilizer
JPS589688A (ja) 1981-07-06 1983-01-20 Toyobo Co Ltd 安定な酵素組成物
JPS6153227A (ja) * 1984-08-23 1986-03-17 Biseibutsu Kagaku Kenkyusho:Kk 日本脳炎・豚パルボウイルス感染症混合生ワクチン
US4867975A (en) 1988-01-27 1989-09-19 University Of Delaware Live attenuated temperature-sensitive avian infectious bronchitis virus vaccines and preparation and use thereof
CA2075521C (en) 1992-05-05 1995-11-28 Kuniaki Koyama Stabilized live vaccine
US5443959A (en) 1992-09-09 1995-08-22 Tokuyama Corporation Method of assaying fibrinogen, dry reagent therefor, and process for the preparation thereof
EP0650734B1 (en) * 1993-10-28 1999-03-10 Division Of Microbiology, Kyoto Biken Laboratories, Inc. Pentavalent live viral vaccine
FR2719479B1 (fr) 1994-05-04 1996-07-26 Sanofi Elf Formulation stable lyophilisée comprenant une protéine: kit de dosage.
US5565318A (en) 1994-09-02 1996-10-15 Pharmacia Biotech, Inc. Room temperature stable reagent semi-spheres
US5593824A (en) 1994-09-02 1997-01-14 Pharmacia Biotech, Inc. Biological reagent spheres
FR2742756B1 (fr) 1995-12-22 1998-04-03 Pasteur Merieux Serums Vacc Stabilisants pour vaccins vivants, vaccins les contenant et procedes pour leur preparation
US5932223A (en) 1996-09-26 1999-08-03 Merck & Co., Inc. Rotavirus vaccine formulations
WO1999015670A1 (en) 1997-09-25 1999-04-01 Biotechnology Research And Development Corporation LKTA DELETION MUTANT OF $i(P. HAEMOLYTICA)
CN1053590C (zh) 1998-10-19 2000-06-21 卫生部长春生物制品研究所 冻干甲型肝炎减毒活疫苗及其保护剂
JP5490972B2 (ja) 2000-08-04 2014-05-14 中外製薬株式会社 タンパク質注射製剤
CN1168503C (zh) * 2001-12-21 2004-09-29 卫广森 鸡新城疫弱毒冻干疫苗耐热冻干保护剂及制备工艺
EP1494651A4 (en) 2002-04-11 2010-10-13 Medimmune Vaccines Inc PRESERVATION OF BIO-ACTIVE MATERIALS WITH LYOPHILIZED FOAM
CA2496750C (en) 2002-08-26 2014-10-21 Pfizer Products Inc. Vaccine for respiratory and reproductive system infections in cattle
EP1549767A4 (en) 2002-09-26 2006-06-07 Amgen Inc MODULATION OF FORKHEAD BOX O1A GENE EXPRESSION
US6931888B2 (en) 2003-02-07 2005-08-23 Ferro Corporation Lyophilization method and apparatus for producing particles
ZA200509533B (en) 2003-07-02 2007-03-28 Us Biotechnology Res And Dev Corp Acapsular P. multocida hyaE deletion mutants
WO2005052116A2 (en) * 2003-11-19 2005-06-09 Merck & Co., Inc. Preservative-containing virus formulations
EP2769735B1 (en) * 2004-10-06 2017-04-19 MedImmune, LLC Refrigerator-temperature stable influenza vaccine compositions
GB0503337D0 (en) 2005-02-17 2005-03-23 Glaxosmithkline Biolog Sa Compositions
US7959929B2 (en) 2005-04-21 2011-06-14 University Of Florida Research Foundation, Inc. Materials and methods for respiratory disease control in canines
WO2006119280A2 (en) 2005-05-03 2006-11-09 Handylab, Inc. Lyophilized pellets
SI1954308T1 (sl) * 2005-09-16 2011-12-30 Merial Ltd Stabilizatorji za liofilizirana cepiva
EP2004144A1 (en) 2005-12-02 2008-12-24 Stichting Katholieke Universiteit Method for obtaining hollow particles
EP1981483A1 (en) 2006-01-24 2008-10-22 Nexbio, Inc. Technology for preparation of macromolecular microspheres
ES2621511T3 (es) * 2007-04-06 2017-07-04 Takeda Vaccines, Inc. Métodos y composiciones para virus vivos atenuados
ES2393160T3 (es) 2007-05-18 2012-12-19 Medimmune, Llc Conservación de materiales bioactivos con espuma liofilizada
NZ599585A (en) * 2007-06-14 2013-12-20 Univ Oklahoma State Vaccines containing canine parvovirus genetic variants
TWI436789B (zh) 2008-01-21 2014-05-11 Intervet Int Bv 含有藥學化合物的顆粒之冷凍乾燥方法及含有此顆粒的藥學包
US7998488B2 (en) 2008-11-14 2011-08-16 Baxter International Inc. Vaccine formulations and uses thereof
EP2350271B1 (en) 2008-11-20 2016-01-27 Biogen MA Inc. Arginine inactivation of enveloped viruses
CN101450208B (zh) * 2008-12-31 2011-08-31 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 喷鼻免疫流感多价疫苗的制备及其方法
US8647637B2 (en) 2009-01-30 2014-02-11 The Board Of Regents For Oklahoma State University Immunogenic compositions, vaccines and diagnostics based on canine distemper viruses circulating in north american dogs
TWI468157B (zh) 2009-04-29 2015-01-11 Intervet Int Bv 形成錠劑的方法，進行該方法的系統及包含該錠劑的包裝物
TWI471127B (zh) 2009-04-29 2015-02-01 Intervet Int Bv 供人類使用之口服崩解錠劑的製備方法、所製得之口服崩解錠劑、以及含有該口服崩解錠劑的包裝物
US8557253B2 (en) 2009-10-07 2013-10-15 Sanofi Pasteur Sa Stabilizing excipient for inactivated whole virus vaccine
EP2509634B1 (en) 2009-12-11 2019-03-06 Pfizer Inc Stable formulations for lyophilizing therapeutic particles
JP6200155B2 (ja) 2010-03-05 2017-09-20 インターベット インターナショナル ベー． フェー． 組換え弱毒化パルボウイルス
CN103025351B (zh) * 2010-05-28 2016-08-24 佐蒂斯比利时股份有限公司 包含胆固醇和作为唯一的佐剂-载剂分子的cpg的疫苗
CN102985108A (zh) 2010-07-16 2013-03-20 英特维特国际股份有限公司 活的减毒的细小病毒
WO2012110489A2 (en) 2011-02-17 2012-08-23 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Novel european prrsv strain
US20140017318A1 (en) 2012-07-10 2014-01-16 Kevin O'Connell Method to produce a medicinal product comprising a biologically active protein and the resulting product
US9314519B2 (en) 2012-08-21 2016-04-19 Intervet Inc. Liquid stable virus vaccines
US9480739B2 (en) 2013-03-15 2016-11-01 Intervet Inc. Bovine virus vaccines that are liquid stable
AR097762A1 (es) 2013-09-27 2016-04-13 Intervet Int Bv Formulaciones secas de vacunas que son estables a temperatura ambiente
AR099470A1 (es) 2014-02-17 2016-07-27 Intervet Int Bv Vacunas de virus de aves de corral líquidas
TWI670085B (zh) 2014-02-19 2019-09-01 荷蘭商英特威國際公司 液體穩定之豬病毒疫苗

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4337242A (en) * 1980-02-05 1982-06-29 Merck & Co., Inc. Vaccine stabilizer containing L-glutamic acid and L-arginine
US20070161085A1 (en) * 2003-02-25 2007-07-12 Medlmmune Vaccines, Inc. Methods of Producing Influenza Vaccine Compositions
WO2006038115A1 (en) * 2004-10-06 2006-04-13 Pfizer Products Inc. Multivalent canine vaccines against leptospira bratislava and other pathogens
US20100015180A1 (en) * 2008-07-09 2010-01-21 Sanofi Pasteur Stabilizer and Vaccine Composition Comprising One or More Live Attenuated Flaviviruses

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
AUSAR S.F. et al. High-throughput screening of stabilizers for respiratory syncytial virus: identification of stabilizers and their effects on the conformational thermostability of viral particles // Hum Vaccin., 2007, May-Jun; 3:94-103. *
HU L. et al. Biophysical characterization and conformational stability of Ebola and Marburg virus-like particles // J Pharm Sci., 2011, Dec; 100(12), abstract. *
HU L. et al. Biophysical characterization and conformational stability of Ebola and Marburg virus-like particles // J Pharm Sci., 2011, Dec; 100(12), abstract. AUSAR S.F. et al. High-throughput screening of stabilizers for respiratory syncytial virus: identification of stabilizers and their effects on the conformational thermostability of viral particles // Hum Vaccin., 2007, May-Jun; 3:94-103. *

Also Published As

Publication number Publication date
RU2015109724A (ru) 2016-10-10
MX2015002316A (es) 2015-06-23
JP6259457B2 (ja) 2018-01-10
BR112015002981A2 (pt) 2017-07-04
CA3178388A1 (en) 2014-02-27
EP2887957B1 (en) 2019-03-06
NZ704584A (en) 2018-02-23
CN104640566B (zh) 2021-08-06
AU2013305082A1 (en) 2015-02-19
MX360431B (es) 2018-10-31
EP2887957A1 (en) 2015-07-01
CN104640566A (zh) 2015-05-20
US20150246114A1 (en) 2015-09-03
US9526780B2 (en) 2016-12-27
US20140056942A1 (en) 2014-02-27
JP2015526450A (ja) 2015-09-10
CA2879733C (en) 2023-01-03
BR112015002981B1 (pt) 2023-03-14
CA2879733A1 (en) 2014-02-27
US9314519B2 (en) 2016-04-19
WO2014029702A1 (en) 2014-02-27
AU2013305082B2 (en) 2017-07-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2641970C2 (ru) Жидкие стабильные вирусные вакцины
JP6896802B2 (ja) 室温安定であるワクチンの乾燥製剤
JP6596008B2 (ja) 液体安定なブタウイルスワクチン
US9827305B2 (en) Poultry virus vaccines that are liquid stable
US7674469B2 (en) Feline influenza vaccine and method of use