RU2637642C1 - Иммунодепрессант - Google Patents
Иммунодепрессант Download PDFInfo
- Publication number
- RU2637642C1 RU2637642C1 RU2016135814A RU2016135814A RU2637642C1 RU 2637642 C1 RU2637642 C1 RU 2637642C1 RU 2016135814 A RU2016135814 A RU 2016135814A RU 2016135814 A RU2016135814 A RU 2016135814A RU 2637642 C1 RU2637642 C1 RU 2637642C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- oxazolidinium
- effect
- isopropylthiomethylene
- hydroxyethyl
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/42—Oxazoles
- A61K31/421—1,3-Oxazoles, e.g. pemoline, trimethadione
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение может быть использовано в медицине в качестве основы для создания лекарственных препаратов. Предложено применение хлорида 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния в качестве иммунодепрессанта. Технический результат: соединение в дозах, далеких от токсических (LD50 при внутрибрюшинном введении мышам – 2000 мг/кг), оказывает in vitro избирательный антипролиферативный эффект на активно делящиеся лимфоидные клетки, но не опухолевые клетки. Изобретение позволит создать на основе хлорида 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния лекарственные средства для лечения аутоиммунных и аллергических заболеваний. 2 табл., 1 пр.
Description
Изобретение относится к новым синтетическим иммунодепрессантам и конкретнее к иммунодепрессантам, содержащим гетероциклические соединения из класса арил-, индолилалканкарбоновых кислот, и может быть использовано в медицине в качестве основы для создания лекарственных препаратов для лечения аутоиммунных и аллергических заболеваний.
Аутоиммунные нарушения в организме обусловлены прежде всего повышением функциональной активности Т-лимфоцитов и других иммунокомпетентных клеток. К веществам, обладающим способностью активно влиять на течение аутоиммунного процесса, подавлять патологические пролиферативные процессы в лимфоидных (иммунокомпетентных) тканях, относятся иммунодепрессанты.
Известен синтетический иммунодепрессант - азатиоприн, обладающий цитостатической активностью и оказывающий иммунодепрессивный эффект (М.Д. Машковский. Лекарственные средства. 4.2, М., «Медицина», 1987, стр. 175-177). Недостатком этого иммунодепрессанта является угнетающее влияние на кроветворение, а также повреждающее действие на желудочно-кишечный тракт и вероятность развития токсического гепатита при длительном применении.
К разряду иммуносупрессоров относят также циклоспорин (циклический полипептид, состоящий из 11 аминокислот), применяемый для снижения функциональной активности Т-лимфоцитов с целью терапии аутоиммунных заболеваний и профилактики отторжения трансплантатов (Регистр лекарственных средств России. - Выпуск 9. - 2002 г. - Стр. 969). Однако данный препарат вызывает ряд серьезных побочных эффектов (действие на желудочно-кишечный тракт, нарушение функции почек и печени, анемия, повышение АД), что существенно затрудняет его широкое применение.
Задачей данного изобретения является поиск иммунодепрессанта, обладающего меньшим количеством побочных эффектов, в частности, уменьшение угнетающего влияния на кроветворение.
Известны оксазолидинины и их применение в терапии (RU98100257, С07С413/04, 2000), а также для лечения и профилактики расстройств сердечной деятельности (RU2404740, A61K 31/5377, 2012).
С целью расширения арсенала синтетических средств, обладающих иммуносупрессивными свойствами, предлагается использовать производное оксазолидиния: хлорид 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния (авт.свид. СССР №139729, C07D 263/10, 1985) - в качестве иммунодепрессанта.
Производные оксазолидиния отличаются самыми разнообразными биологическими свойствами. Хлориды 2-(алкилтиометилен)-3,3-диалкил-1,3 оксазолидиния (в т.ч. хлорид 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния обладают широким спектром антибактериального и противоопухолевого действия (Материалы 7-й отчетной конференции ГУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН, Новосибирск, 2006, стр. 103).
Сущность изобретения заключается в том, что при изучении влияния нового синтезированного производного оксазолидиния: хлорида 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния - на пролиферативную активность клеток иммунной системы и опухолевых линий в опытах in vitro был показан его избирательный иммунодепрессивный эффект.
В работе использовали здоровых половозрелых животных мышей линии СВА, DBA/2 и гибридов (CBAxC57BL/6)F1 (CBF1) и (C57BI/6xDBA/2)F1 обоего пола, 8-10-недельного возраста, массой тела 18-20 г. Разброс в группах по исходной массе тела не превышал ±10%. Животные были одного возраста и получены одновременно из одного питомника ("Рассвет", г. Томск). До и в период эксперимента животные содержались в виварии в одинаковых условиях в стандартных пластиковых клетках 40×20×20 не более 10 особей в клетке с подстилкой из мелкой древесной стружки на стандартном рационе. Все исследования проводились в одно и то же время суток (утром).
LD50 соединения хлорид 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния при внутрибрюшинном способе введения мышам составляет 2000 мг/кг.
Пример 1. Определение влияния хлорида 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния на функциональную активность лимфоидных клеток in vitro.
Изучение влияния хлорида 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния на функциональную активность лимфоидных клеток in vitro проводили добавлением соединения в культуральную среду при тестировании спонтанной и Т- и В-митоген-индуцированной пролиферации клеток селезенки.
Селезенки мышей забирали в стерильных условиях и готовили клеточную суспензию: селезенки помещали во флакончики со средой, расстригали ножницами, многократно пропускали через шприц с иглами уменьшающего диаметра, фильтровали через металлическую сеточку и 3 раза отмывали центрифугированием при 1000 об/мин в течение 10 мин со сменой среды. Осадок клеток селезенки ресуспендировали в полной среде RPMI-164, содержащей 10% эмбриональной сыворотки телят, 10 мМ Hepes, 4×10-5 М 2-меркаптоэтанола, 2 Мм L-глутамина, 50 мкг/мл гентамицина, и подсчитывали их общее количество. Полученную клеточную суспензию доводили до концентрации 0,7×106 клеток/мл полной среды и помещали в 96-луночные круглодонные планшеты для культивирования по 100×103 клеток/лунку в объеме 150 мкл/лунку. Добавляли оптимальные дозы митогенов LPS E. coli 055:В5, Con A, PWM, определенные в предварительных опытах: 30 мкг/мл, 2 мкг/мл и 1 мкг/мл, соответственно, в объеме 10 мкл. Для оценки спонтанной пролиферации в лунки добавляли 10 мкл среды RPMI-1640. Все пробы проводились в триплетах. Соединения в трех дозах (2, 20 и 200 мкг/мл) вносили в лунки одновременно с митогенами. Инкубацию клеточной культуры проводили при +37°С в атмосфере, содержащей 5% СО2, в течение 72 часов. Пролиферативную активность клеток оценивали по включению Н3-тимидина в ДНК делящихся клеток. Метку вносили за 16 час до конца культивирования по 1 мкКи в каждую лунку планшета. Для этого основной раствор Н3-тимидина сначала растворяли в среде RPMI-1640 до концентрации 100 мкКи/мл, а затем по 10 мкл раствора добавляли в каждую лунку планшета. По окончании инкубации клетки собирали на стеклянно-волокнистые фильтры (Flow Lab) с помощью аппарата «Harvester» (TITERTEK). Фильтры помещали во флаконы для сцинтилляционного счета, и радиоактивность подсчитывали в сцинтилляторе (4 г дифенилоксазола и 0,1 г дифенил-оксазолилбензола на 1 л толуола) в жидкостном сцинтилляционном счетчике «Delta» (США). Результаты оценивали в имп/мин на 100×103 клеток, подсчитывали средние значения по триплету. Оценка данных проводилась как в абсолютных значениях (имп/мин), так и относительных (%). Результаты, представлены в таблице 1.
Результаты, представленные в таблице 1, указывают на дозозависимую супрессию спонтанной и Т- и В-митогениндуцированной пролиферации клеток селезенки интактных животных под влиянием хлорида 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния.
Пример 2. Определение влияния хлорида 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния на пролиферацию других тканей.
Для изучения способности соединения хлорида 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния подавлять пролиферацию других тканей оценивали его влияние на процессы деления клеток опухолевых линий.
Изучали действие препарата на пролиферацию клеток нескольких разных линий: L1210, клетки лейкоза; Г27, клетки гепатомы; В16, клетки меланомы.
Культивирование клеток и оценка их пролиферативной активности проводилась согласно протоколу для культивирования лимфоидных клеток (описано выше); количество клеток линии составляло 104/лунку, время культивирования 24 часа, 3Н-тимидин добавляли за 4 часа до конца культивирования. Препарат в разных дозах вносили в культуральную среду в начальный момент культивирования в объеме 10 мкл. В качестве растворителя препарата использовали воду (в) или спирт (с). Эффект препарата определялся в процентах как разность между пролиферацией в присутствии препарата минус пролиферация без препарата, деленная на пролиферацию без препарата и умноженную на 100% по следующей формуле:
Э=(Пп-П)/П×100%, где
Пп - пролиферация в присутствии препарата,
П - пролиферация без препарата.
Как видно из таблицы 2, хлорид 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния не оказывает заметного влияния на пролиферативную активность клеток опухолевых линий в условиях in vitro; не обнаружено какой-либо дозозависимости эффекта.
Оценивая в целом результаты, можно утверждать, что синтетическое соединение хлорид 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния в дозах, далеких от токсических, оказывает избирательный антипролиферативный эффект на активно делящиеся лимфоидные клетки, но не опухолевые клетки. Обнаруженные свойства хлорида 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния позволяют отнести его к разряду иммунодепрессантов и в будущем создавать на их основе лекарственные средства для лечения аутоиммунных и аллергических заболеваний.
Claims (1)
- Применение соединения хлорид 2-(изопропилтиометилен)-3-метил-3-(2-гидроксиэтил)-1,3-оксазолидиния в качестве иммунодепрессанта.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016135814A RU2637642C1 (ru) | 2016-09-05 | 2016-09-05 | Иммунодепрессант |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016135814A RU2637642C1 (ru) | 2016-09-05 | 2016-09-05 | Иммунодепрессант |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2637642C1 true RU2637642C1 (ru) | 2017-12-05 |
Family
ID=60581466
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016135814A RU2637642C1 (ru) | 2016-09-05 | 2016-09-05 | Иммунодепрессант |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2637642C1 (ru) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU1139729A1 (ru) * | 1983-09-22 | 1985-02-15 | Иркутский институт органической химии СО АН СССР | Способ получени 2-алкилтиометилен-3,3-диалкил-1,3-оксазолидиний хлоридов |
DE4122940A1 (de) * | 1991-04-24 | 1992-10-29 | Basf Ag | Verfahren zur herstellung von aminosaeurederivaten |
JP2000086639A (ja) * | 1998-09-14 | 2000-03-28 | Inst Of Physical & Chemical Res | サイトキサゾンの合成方法 |
EP2266530A1 (fr) * | 2002-11-25 | 2010-12-29 | Laboratoires Expanscience | Oxazolidinones pour une utilisation cosmétique cutanée |
-
2016
- 2016-09-05 RU RU2016135814A patent/RU2637642C1/ru active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU1139729A1 (ru) * | 1983-09-22 | 1985-02-15 | Иркутский институт органической химии СО АН СССР | Способ получени 2-алкилтиометилен-3,3-диалкил-1,3-оксазолидиний хлоридов |
DE4122940A1 (de) * | 1991-04-24 | 1992-10-29 | Basf Ag | Verfahren zur herstellung von aminosaeurederivaten |
JP2000086639A (ja) * | 1998-09-14 | 2000-03-28 | Inst Of Physical & Chemical Res | サイトキサゾンの合成方法 |
EP2266530A1 (fr) * | 2002-11-25 | 2010-12-29 | Laboratoires Expanscience | Oxazolidinones pour une utilisation cosmétique cutanée |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
LE GALL T. et al. Synthesis and biological evaluation of new 5-HPETE analogs. Bioorganic and medicinal chemistry letters 1994 4(2): 253-256. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US5801193A (en) | Compositions and methods for immunosuppressing | |
EP0196415B1 (en) | Trichostatins a and c as antitumour drugs | |
CN102827187B (zh) | 氟喹诺酮醛缩异烟腙及其制备方法和应用 | |
US20160022720A1 (en) | Compositions and methods for treating disease states associated with activated t cells and/or b cells | |
EP2133693B1 (en) | Screening method for substance having action of activating/suppressing innate immunity. | |
EP1812114A2 (en) | Ecteinascidin compounds as anti-inflammatory agents | |
CN102827146B (zh) | 一种氟喹诺酮醛缩异烟腙及其制备方法和应用 | |
RU2637642C1 (ru) | Иммунодепрессант | |
RU2637643C1 (ru) | Иммунодепрессант | |
US8436027B2 (en) | Azole compounds used as tuberculostatic and leishmanicide agents | |
JP2012229251A (ja) | リソフィリン類縁体とその使用方法 | |
KR20050078743A (ko) | 로즈마린산의 하이드록실페닐 유도체를 유효성분으로 하는항암용 약학 조성물 | |
CN108853113A (zh) | 氧杂吴茱萸碱衍生物的用途 | |
RU2027434C1 (ru) | Иммуномодулирующее средство | |
RU2191015C2 (ru) | Динатриевая соль n-(6-метил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидро-5h-пиримидинсульфон)-n'- изоникотиноилгидразида, проявляющая антимикробную и иммунотропную активность, и лекарственное средство на ее основе | |
CN110981888A (zh) | N-芳基二硫吡咯酮脲类和氨基酯类衍生物及其制备和应用 | |
EP2829536A1 (en) | 4-Nitro-5-dichloromethylpyrazol derivatives for the treatment of infectious diseases | |
JP3817273B2 (ja) | 免疫抑制治療、抗ガン治療および抗ウイルス治療用の薬学的組成物 | |
RU2768896C1 (ru) | 2-(2-Бромаллил)сульфанилникотиновая кислота и 2-металлилсульфанилникотиновая кислота, обладающие антибактериальной и противогрибковой активностью | |
CN110041368B (zh) | 有机膦克林沙星衍生物及其制备方法和应用 | |
US11952378B1 (en) | Pyrrolo[2,3-c]isoquinoline-1,2-dione compounds as CK2 inhibitors | |
RU2554753C2 (ru) | Способ лечения туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью | |
JP6478378B2 (ja) | 抗菌剤 | |
US11891396B1 (en) | 5-substituted pyrido[3″,4″:4′,5′]pyrrolo[3′,2′:4,5]imidazo[1,2-a]pyrazine compounds as CK2 inhibitors | |
CN109303777B (zh) | 咪唑[4,5-b]吡啶巯乙酰胺类衍生物在制备抗人实体瘤药物中的应用 |