RU2563822C2 - Пептоидные лиганды для выделения и обработки аутоиммунных т-клеток - Google Patents
Пептоидные лиганды для выделения и обработки аутоиммунных т-клеток Download PDFInfo
- Publication number
- RU2563822C2 RU2563822C2 RU2011154024/15A RU2011154024A RU2563822C2 RU 2563822 C2 RU2563822 C2 RU 2563822C2 RU 2011154024/15 A RU2011154024/15 A RU 2011154024/15A RU 2011154024 A RU2011154024 A RU 2011154024A RU 2563822 C2 RU2563822 C2 RU 2563822C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- peptoid
- alkyl
- autoimmune
- mer
- Prior art date
Links
- 108010043958 Peptoids Proteins 0.000 title claims abstract description 194
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 title claims abstract description 48
- 239000003446 ligand Substances 0.000 title claims description 33
- 238000012545 processing Methods 0.000 title description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 title 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 223
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 131
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims abstract description 41
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 68
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 39
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 39
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 39
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 38
- 238000009739 binding Methods 0.000 claims description 38
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 37
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims description 34
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 31
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 29
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 20
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 20
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 17
- HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N butan-1-amine Chemical group CCCCN HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- -1 isoxazoyl Chemical group 0.000 claims description 11
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 claims description 10
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 8
- 125000000882 C2-C6 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000003601 C2-C6 alkynyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 claims description 7
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 7
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 claims description 6
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 claims description 6
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 230000034994 death Effects 0.000 claims description 5
- SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N Quinoline Chemical compound N1=CC=CC2=CC=CC=C21 SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 claims description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 4
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 claims description 3
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 claims description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 claims description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 claims description 3
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 claims description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 3
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 claims description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 3
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 claims description 2
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 claims description 2
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000499 benzofuranyl group Chemical group O1C(=CC2=C1C=CC=C2)* 0.000 claims description 2
- 125000004196 benzothienyl group Chemical group S1C(=CC2=C1C=CC=C2)* 0.000 claims description 2
- 125000003354 benzotriazolyl group Chemical group N1N=NC2=C1C=CC=C2* 0.000 claims description 2
- 125000004541 benzoxazolyl group Chemical group O1C(=NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 claims description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 claims description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 2
- 125000000259 cinnolinyl group Chemical group N1=NC(=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 claims description 2
- 125000000392 cycloalkenyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 230000004941 influx Effects 0.000 claims description 2
- AWJUIBRHMBBTKR-UHFFFAOYSA-N iso-quinoline Natural products C1=NC=CC2=CC=CC=C21 AWJUIBRHMBBTKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000001972 isopentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000000842 isoxazolyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 claims description 2
- 229960005235 piperonyl butoxide Drugs 0.000 claims description 2
- 125000004591 piperonyl group Chemical group C(C1=CC=2OCOC2C=C1)* 0.000 claims description 2
- 125000000561 purinyl group Chemical group N1=C(N=C2N=CNC2=C1)* 0.000 claims description 2
- 125000003373 pyrazinyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000168 pyrrolyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000000335 thiazolyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- BZSVVCFHMVMYCR-UHFFFAOYSA-N 2-pyridin-2-ylpyridine;ruthenium Chemical compound [Ru].N1=CC=CC=C1C1=CC=CC=N1.N1=CC=CC=C1C1=CC=CC=N1.N1=CC=CC=C1C1=CC=CC=N1 BZSVVCFHMVMYCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000006178 methyl benzyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 52
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 44
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 16
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 14
- 238000005070 sampling Methods 0.000 abstract 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 158
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 144
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 108
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 75
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 62
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 56
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 54
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 47
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 46
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 45
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 42
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 36
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 36
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 32
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 30
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 30
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 29
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 29
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 27
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 description 27
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 27
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 27
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 26
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 25
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 25
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 25
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 25
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 24
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 24
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 24
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 23
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 23
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 23
- 241000219061 Rheum Species 0.000 description 22
- 238000011161 development Methods 0.000 description 22
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 22
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 22
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 21
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 20
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 20
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 20
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 20
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 18
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 18
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 18
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 17
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 16
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 16
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 16
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 16
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 15
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 15
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 15
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 15
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 15
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 15
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 15
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 15
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 14
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 14
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 14
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 13
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 13
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 13
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 13
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 13
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 description 13
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 13
- 229910052707 ruthenium Inorganic materials 0.000 description 13
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 12
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 12
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 12
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 12
- 230000006870 function Effects 0.000 description 12
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 12
- KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N mesalamine Chemical compound NC1=CC=C(O)C(C(O)=O)=C1 KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 12
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 12
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 12
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 11
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 11
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 11
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 11
- 229960004963 mesalazine Drugs 0.000 description 11
- 230000004044 response Effects 0.000 description 11
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 10
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 10
- 208000006045 Spondylarthropathies Diseases 0.000 description 10
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 10
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 10
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 10
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 10
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 description 10
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 10
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 10
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 10
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 10
- 206010003267 Arthritis reactive Diseases 0.000 description 9
- 230000009471 action Effects 0.000 description 9
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 9
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 9
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 9
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 9
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 8
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 8
- 208000036487 Arthropathies Diseases 0.000 description 8
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 8
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 8
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 8
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 8
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 8
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 8
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 description 7
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 7
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 7
- 102000002233 Myelin-Oligodendrocyte Glycoprotein Human genes 0.000 description 7
- 108010000123 Myelin-Oligodendrocyte Glycoprotein Proteins 0.000 description 7
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 7
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 7
- 208000019069 chronic childhood arthritis Diseases 0.000 description 7
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 7
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 7
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 7
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 239000002159 nanocrystal Substances 0.000 description 7
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 7
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 description 7
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 7
- BZTDTCNHAFUJOG-UHFFFAOYSA-N 6-carboxyfluorescein Chemical compound C12=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C2C11OC(=O)C2=CC=C(C(=O)O)C=C21 BZTDTCNHAFUJOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 206010003253 Arthritis enteropathic Diseases 0.000 description 6
- 206010071068 Clinically isolated syndrome Diseases 0.000 description 6
- 206010012305 Demyelination Diseases 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010072051 Glatiramer Acetate Proteins 0.000 description 6
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 6
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 6
- KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N Ruthenium Chemical compound [Ru] KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 6
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 6
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 6
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 6
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 6
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 6
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 6
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 6
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 6
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 6
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 6
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 6
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 6
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 6
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 6
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000012153 HLA-B27 Antigen Human genes 0.000 description 5
- 108010061486 HLA-B27 Antigen Proteins 0.000 description 5
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 5
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 5
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 208000007400 Relapsing-Remitting Multiple Sclerosis Diseases 0.000 description 5
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 210000000436 anus Anatomy 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 5
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 5
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 5
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 5
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 5
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 5
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 5
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 5
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 4
- 208000008035 Back Pain Diseases 0.000 description 4
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 4
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- 208000007465 Giant cell arteritis Diseases 0.000 description 4
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 4
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 4
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 4
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 208000007101 Muscle Cramp Diseases 0.000 description 4
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 4
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010060860 Neurological symptom Diseases 0.000 description 4
- 206010034277 Pemphigoid Diseases 0.000 description 4
- 206010043255 Tendonitis Diseases 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- FHEAIOHRHQGZPC-KIWGSFCNSA-N acetic acid;(2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid;(2s)-2-aminopentanedioic acid;(2s)-2-aminopropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound CC(O)=O.C[C@H](N)C(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 FHEAIOHRHQGZPC-KIWGSFCNSA-N 0.000 description 4
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 4
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 4
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 4
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 4
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 4
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 4
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 4
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 4
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 4
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 4
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 4
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 4
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 208000020947 enthesitis Diseases 0.000 description 4
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 4
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 4
- 229960003776 glatiramer acetate Drugs 0.000 description 4
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 4
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 4
- 201000004614 iritis Diseases 0.000 description 4
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 4
- 229960005027 natalizumab Drugs 0.000 description 4
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 4
- 230000007658 neurological function Effects 0.000 description 4
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 4
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 4
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 4
- 208000037821 progressive disease Diseases 0.000 description 4
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 4
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 4
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 4
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 201000005671 spondyloarthropathy Diseases 0.000 description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 4
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 206010043207 temporal arteritis Diseases 0.000 description 4
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- GKSPIZSKQWTXQG-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[1-(pyridin-2-yldisulfanyl)ethyl]benzoate Chemical compound C=1C=C(C(=O)ON2C(CCC2=O)=O)C=CC=1C(C)SSC1=CC=CC=N1 GKSPIZSKQWTXQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000031212 Autoimmune polyendocrinopathy Diseases 0.000 description 3
- 208000000094 Chronic Pain Diseases 0.000 description 3
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 3
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 3
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 3
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 3
- 241000792859 Enema Species 0.000 description 3
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 3
- 102100028971 HLA class I histocompatibility antigen, C alpha chain Human genes 0.000 description 3
- 101000986084 Homo sapiens HLA class I histocompatibility antigen, C alpha chain Proteins 0.000 description 3
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- 108010005716 Interferon beta-1a Proteins 0.000 description 3
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 3
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 3
- 206010022941 Iridocyclitis Diseases 0.000 description 3
- UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N Jacareubin Natural products CC1(C)OC2=CC3Oc4c(O)c(O)ccc4C(=O)C3C(=C2C=C1)O UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 3
- 206010036030 Polyarthritis Diseases 0.000 description 3
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 3
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 3
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 3
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 3
- 201000002661 Spondylitis Diseases 0.000 description 3
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 3
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 3
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 3
- 201000004612 anterior uveitis Diseases 0.000 description 3
- 108010051489 calin Proteins 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 3
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 3
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 3
- 230000009266 disease activity Effects 0.000 description 3
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 3
- 230000008482 dysregulation Effects 0.000 description 3
- 239000007920 enema Substances 0.000 description 3
- 229940095399 enema Drugs 0.000 description 3
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 3
- 210000001280 germinal center Anatomy 0.000 description 3
- 208000035474 group of disease Diseases 0.000 description 3
- 210000001624 hip Anatomy 0.000 description 3
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 3
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 3
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 3
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 3
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 3
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 3
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 3
- 208000036971 interstitial lung disease 2 Diseases 0.000 description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 3
- 208000018937 joint inflammation Diseases 0.000 description 3
- 201000002215 juvenile rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 3
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 3
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 3
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 3
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 3
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 3
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 3
- 230000007659 motor function Effects 0.000 description 3
- 210000003007 myelin sheath Anatomy 0.000 description 3
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 3
- 208000030428 polyarticular arthritis Diseases 0.000 description 3
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 3
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 3
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 3
- 239000001044 red dye Substances 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000012552 review Methods 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 201000008628 secondary progressive multiple sclerosis Diseases 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 3
- GECHUMIMRBOMGK-UHFFFAOYSA-N sulfapyridine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC=N1 GECHUMIMRBOMGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960002211 sulfapyridine Drugs 0.000 description 3
- 229960001940 sulfasalazine Drugs 0.000 description 3
- NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N sulfasalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N 0.000 description 3
- NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N sulfasalazine Natural products C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 3
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 3
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 3
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 3
- JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-OFKYTIFKSA-N 1-[(2r,4s,5r)-4-hydroxy-5-(tritiooxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO[3H])O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C)=C1 IQFYYKKMVGJFEH-OFKYTIFKSA-N 0.000 description 2
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000008822 Ankylosis Diseases 0.000 description 2
- 208000003343 Antiphospholipid Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 241000239290 Araneae Species 0.000 description 2
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 2
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 2
- 208000004429 Bacillary Dysentery Diseases 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 2
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 description 2
- 241001598984 Bromius obscurus Species 0.000 description 2
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 206010008609 Cholangitis sclerosing Diseases 0.000 description 2
- 208000030939 Chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy Diseases 0.000 description 2
- 201000000724 Chronic recurrent multifocal osteomyelitis Diseases 0.000 description 2
- 241000271532 Crotalus Species 0.000 description 2
- 206010012741 Diarrhoea haemorrhagic Diseases 0.000 description 2
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 2
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 2
- 206010015943 Eye inflammation Diseases 0.000 description 2
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 108010059045 HLA-C*06 antigen Proteins 0.000 description 2
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- 201000009794 Idiopathic Pulmonary Fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 2
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 2
- 108010005714 Interferon beta-1b Proteins 0.000 description 2
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 2
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 2
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 2
- 206010023198 Joint ankylosis Diseases 0.000 description 2
- 108010014603 Leukocidins Proteins 0.000 description 2
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 2
- 208000016604 Lyme disease Diseases 0.000 description 2
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 2
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 2
- 208000003250 Mixed connective tissue disease Diseases 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 2
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 2
- 208000003435 Optic Neuritis Diseases 0.000 description 2
- 208000000733 Paroxysmal Hemoglobinuria Diseases 0.000 description 2
- 201000011152 Pemphigus Diseases 0.000 description 2
- 108010081690 Pertussis Toxin Proteins 0.000 description 2
- 102100036050 Phosphatidylinositol N-acetylglucosaminyltransferase subunit A Human genes 0.000 description 2
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 description 2
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 2
- 208000003782 Raynaud disease Diseases 0.000 description 2
- 208000012322 Raynaud phenomenon Diseases 0.000 description 2
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 2
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 2
- 241000239226 Scorpiones Species 0.000 description 2
- 206010040550 Shigella infections Diseases 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 2
- 206010042276 Subacute endocarditis Diseases 0.000 description 2
- 206010057603 Syndesmophyte Diseases 0.000 description 2
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 description 2
- 208000018359 Systemic autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 208000031981 Thrombocytopenic Idiopathic Purpura Diseases 0.000 description 2
- 206010043561 Thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 2
- 241000256856 Vespidae Species 0.000 description 2
- 206010047642 Vitiligo Diseases 0.000 description 2
- 244000126002 Ziziphus vulgaris Species 0.000 description 2
- 235000008529 Ziziphus vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 208000002552 acute disseminated encephalomyelitis Diseases 0.000 description 2
- 210000005006 adaptive immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 230000003872 anastomosis Effects 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 2
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 2
- 229940003504 avonex Drugs 0.000 description 2
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- UHYPYGJEEGLRJD-UHFFFAOYSA-N cadmium(2+);selenium(2-) Chemical compound [Se-2].[Cd+2] UHYPYGJEEGLRJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 2
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 2
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 2
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 2
- 201000005795 chronic inflammatory demyelinating polyneuritis Diseases 0.000 description 2
- 238000002052 colonoscopy Methods 0.000 description 2
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 2
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 2
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 2
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 2
- 208000004267 erosive arthropathy Diseases 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000005530 etching Methods 0.000 description 2
- 230000000763 evoking effect Effects 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 206010016766 flatulence Diseases 0.000 description 2
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 2
- 235000015220 hamburgers Nutrition 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000009634 interleukin-1 receptor antagonist activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 108040001669 interleukin-1 receptor antagonist activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 238000001459 lithography Methods 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 2
- 210000004705 lumbosacral region Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N monobenzene Natural products C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 2
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 2
- 108010055123 myelin basic protein 1-11 Proteins 0.000 description 2
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 description 2
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 2
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 2
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 2
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 description 2
- 210000001328 optic nerve Anatomy 0.000 description 2
- 201000003045 paroxysmal nocturnal hemoglobinuria Diseases 0.000 description 2
- 201000001976 pemphigus vulgaris Diseases 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 2
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 2
- CTRLRINCMYICJO-UHFFFAOYSA-N phenyl azide Chemical class [N-]=[N+]=NC1=CC=CC=C1 CTRLRINCMYICJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006303 photolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000015843 photosynthesis, light reaction Effects 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 2
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 201000000742 primary sclerosing cholangitis Diseases 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 210000003131 sacroiliac joint Anatomy 0.000 description 2
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 208000010157 sclerosing cholangitis Diseases 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 201000005113 shigellosis Diseases 0.000 description 2
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 2
- 208000008467 subacute bacterial endocarditis Diseases 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 210000001258 synovial membrane Anatomy 0.000 description 2
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 2
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 150000003568 thioethers Chemical group 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 2
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 2
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoate Chemical compound C1=CC(NC(=O)CI)=CC=C1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QYEAAMBIUQLHFQ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoylamino]hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCNC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 QYEAAMBIUQLHFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VKZRWSNIWNFCIQ-WDSKDSINSA-N (2s)-2-[2-[[(1s)-1,2-dicarboxyethyl]amino]ethylamino]butanedioic acid Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NCCN[C@H](C(O)=O)CC(O)=O VKZRWSNIWNFCIQ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- RQPKNXVVIBYOBX-KDBLBPRBSA-N (2s)-2-amino-3-(3,4-dihydroxyphenyl)propanoic acid;(2s)-2-(dihydroxyamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1.ON(O)[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 RQPKNXVVIBYOBX-KDBLBPRBSA-N 0.000 description 1
- YLOCGHYTXIINAI-XKUOMLDTSA-N (2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid;(2s)-2-aminopentanedioic acid;(2s)-2-aminopropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 YLOCGHYTXIINAI-XKUOMLDTSA-N 0.000 description 1
- MGOWNVYDCIBVKC-FNHRVDEZSA-N (2s)-5-[3-[2-[2-[3-[5-[(3as,4s,6ar)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]propoxy]ethoxy]ethoxy]propylamino]-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-5-oxopentanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)N[C@H](C(=O)O)CCC(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)CCCC[C@H]1[C@H]2NC(=O)N[C@H]2CS1 MGOWNVYDCIBVKC-FNHRVDEZSA-N 0.000 description 1
- 0 **CN(*)CC(N(*)CC(N(*)CC(N(*)C(*)=O)=O)=*)=O Chemical compound **CN(*)CC(N(*)CC(N(*)CC(N(*)C(*)=O)=O)=*)=O 0.000 description 1
- WOAHJDHKFWSLKE-UHFFFAOYSA-N 1,2-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC=CC1=O WOAHJDHKFWSLKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DIYPCWKHSODVAP-UHFFFAOYSA-N 1-[3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)benzoyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)C1=CC=CC(N2C(C=CC2=O)=O)=C1 DIYPCWKHSODVAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CULQNACJHGHAER-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)C1=CC=C(NC(=O)CI)C=C1 CULQNACJHGHAER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASNTZYQMIUCEBV-UHFFFAOYSA-N 2,5-dioxo-1-[6-[3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoylamino]hexanoyloxy]pyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)CCCCCNC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 ASNTZYQMIUCEBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZJJNYYDFJCYHTM-UHFFFAOYSA-N 2-(4-methylpyridin-2-yl)pyridine-4-carboxylic acid 2-pyridin-2-ylpyridine ruthenium Chemical compound [Ru].N1=CC=CC=C1C1=CC=CC=N1.N1=CC=CC=C1C1=CC=CC=N1.CC1=CC=NC(C=2N=CC=C(C=2)C(O)=O)=C1 ZJJNYYDFJCYHTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WUPHOULIZUERAE-UHFFFAOYSA-N 3-(oxolan-2-yl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC1CCCO1 WUPHOULIZUERAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HQFLTUZKIRYQSP-UHFFFAOYSA-N 3-ethyl-2h-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=C2N(CC)CSC2=C1 HQFLTUZKIRYQSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000023769 AA amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000026872 Addison Disease Diseases 0.000 description 1
- 102100039677 Adenylate cyclase type 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710194155 Adenylate cyclase type 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000006696 Adrenocorticotropic hormone deficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 208000008190 Agammaglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 101710092462 Alpha-hemolysin Proteins 0.000 description 1
- 101710197219 Alpha-toxin Proteins 0.000 description 1
- 206010001935 American trypanosomiasis Diseases 0.000 description 1
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 1
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 1
- 241000269350 Anura Species 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 206010002915 Aortic valve incompetence Diseases 0.000 description 1
- 241000256837 Apidae Species 0.000 description 1
- 206010002961 Aplasia Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241000244185 Ascaris lumbricoides Species 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 206010003591 Ataxia Diseases 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010071576 Autoimmune aplastic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010071577 Autoimmune hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010064539 Autoimmune myocarditis Diseases 0.000 description 1
- 206010069002 Autoimmune pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000022106 Autoimmune polyendocrinopathy type 2 Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 241000193388 Bacillus thuringiensis Species 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- 241000606125 Bacteroides Species 0.000 description 1
- 201000002827 Balo concentric sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 description 1
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 description 1
- 208000009299 Benign Mucous Membrane Pemphigoid Diseases 0.000 description 1
- 241000271935 Bitis Species 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 102100036846 C-C motif chemokine 21 Human genes 0.000 description 1
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 1
- 102100031658 C-X-C chemokine receptor type 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100025277 C-X-C motif chemokine 13 Human genes 0.000 description 1
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 1
- 102100033620 Calponin-1 Human genes 0.000 description 1
- 241000589876 Campylobacter Species 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 235000012766 Cannabis sativa ssp. sativa var. sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000012765 Cannabis sativa ssp. sativa var. spontanea Nutrition 0.000 description 1
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 1
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 description 1
- 206010048610 Cardiotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 208000024699 Chagas disease Diseases 0.000 description 1
- 241001463014 Chazara briseis Species 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 206010008469 Chest discomfort Diseases 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010008874 Chronic Fatigue Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 108010069112 Complement System Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000000989 Complement System Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000013586 Complex regional pain syndrome type 1 Diseases 0.000 description 1
- 206010010252 Concentric sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010010264 Condition aggravated Diseases 0.000 description 1
- 208000027205 Congenital disease Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- 241000223935 Cryptosporidium Species 0.000 description 1
- 241000192700 Cyanobacteria Species 0.000 description 1
- 108010037462 Cyclooxygenase 2 Proteins 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 208000019505 Deglutition disease Diseases 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 206010048768 Dermatosis Diseases 0.000 description 1
- 208000004986 Diffuse Cerebral Sclerosis of Schilder Diseases 0.000 description 1
- 201000003066 Diffuse Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003164 Diplopia Diseases 0.000 description 1
- 208000021866 Dressler syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010013786 Dry skin Diseases 0.000 description 1
- 206010013887 Dysarthria Diseases 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010049119 Emotional distress Diseases 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 206010014954 Eosinophilic fasciitis Diseases 0.000 description 1
- 241000195955 Equisetum hyemale Species 0.000 description 1
- 208000004332 Evans syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010048049 Factor IXa Proteins 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- 206010016173 Fall Diseases 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010088842 Fibrinolysin Proteins 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 206010016717 Fistula Diseases 0.000 description 1
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000005577 Gastroenteritis Diseases 0.000 description 1
- 206010061166 Gastroenteritis bacterial Diseases 0.000 description 1
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 108010026132 Gelatinases Proteins 0.000 description 1
- 102000013382 Gelatinases Human genes 0.000 description 1
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 241000224467 Giardia intestinalis Species 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 208000003807 Graves Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035895 Guillain-Barré syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000145313 Gymnocorymbus ternetzi Species 0.000 description 1
- 208000001204 Hashimoto Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 206010019755 Hepatitis chronic active Diseases 0.000 description 1
- 208000028782 Hereditary disease Diseases 0.000 description 1
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 1
- 208000013260 Hirata disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000713085 Homo sapiens C-C motif chemokine 21 Proteins 0.000 description 1
- 101000922405 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000858064 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 13 Proteins 0.000 description 1
- 101000945318 Homo sapiens Calponin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000652736 Homo sapiens Transgelin Proteins 0.000 description 1
- 101000798731 Homo sapiens Transmembrane 9 superfamily member 3 Proteins 0.000 description 1
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000004044 Hypesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010020983 Hypogammaglobulinaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 1
- 208000010159 IgA glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 206010021263 IgA nephropathy Diseases 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 229910000673 Indium arsenide Inorganic materials 0.000 description 1
- GPXJNWSHGFTCBW-UHFFFAOYSA-N Indium phosphide Chemical compound [In]#P GPXJNWSHGFTCBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 206010022472 Insulin autoimmune syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 102100026018 Interleukin-1 receptor antagonist protein Human genes 0.000 description 1
- 101710144554 Interleukin-1 receptor antagonist protein Proteins 0.000 description 1
- 102000004551 Interleukin-10 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010017550 Interleukin-10 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000004553 Interleukin-11 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010017521 Interleukin-11 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010038486 Interleukin-4 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010022557 Intermediate uveitis Diseases 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- 241000256602 Isoptera Species 0.000 description 1
- 206010023509 Kyphosis Diseases 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 201000010743 Lambert-Eaton myasthenic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000032514 Leukocytoclastic vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 206010051326 Ligament calcification Diseases 0.000 description 1
- 206010024604 Lipoatrophy Diseases 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 241000186779 Listeria monocytogenes Species 0.000 description 1
- 101710164436 Listeriolysin O Proteins 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 208000005777 Lupus Nephritis Diseases 0.000 description 1
- 108090000362 Lymphotoxin-beta Proteins 0.000 description 1
- 102100026894 Lymphotoxin-beta Human genes 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 1
- 102000000422 Matrix Metalloproteinase 3 Human genes 0.000 description 1
- 208000026139 Memory disease Diseases 0.000 description 1
- 208000024556 Mendelian disease Diseases 0.000 description 1
- 208000027530 Meniere disease Diseases 0.000 description 1
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 1
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M Methylprednisolone sodium succinate Chemical compound [Na+].C([C@@]12C)=CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@](O)(C(=O)COC(=O)CCC([O-])=O)CC[C@H]21 FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M 0.000 description 1
- 206010049567 Miller Fisher syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010027940 Mood altered Diseases 0.000 description 1
- 206010027951 Mood swings Diseases 0.000 description 1
- 101000686985 Mouse mammary tumor virus (strain C3H) Protein PR73 Proteins 0.000 description 1
- 208000012192 Mucous membrane pemphigoid Diseases 0.000 description 1
- 241000204801 Muraenidae Species 0.000 description 1
- 101100096028 Mus musculus Smok1 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000010428 Muscle Weakness Diseases 0.000 description 1
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 description 1
- 241000187482 Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis Species 0.000 description 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 241000872931 Myoporum sandwicense Species 0.000 description 1
- 201000002481 Myositis Diseases 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003521 Nervous System Paraneoplastic Syndromes Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 241000906034 Orthops Species 0.000 description 1
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 1
- 208000025174 PANDAS Diseases 0.000 description 1
- 206010053869 POEMS syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000021155 Paediatric autoimmune neuropsychiatric disorders associated with streptococcal infection Diseases 0.000 description 1
- 206010033557 Palpitations Diseases 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 206010048705 Paraneoplastic cerebellar degeneration Diseases 0.000 description 1
- 206010069587 Paraneoplastic encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 208000031481 Pathologic Constriction Diseases 0.000 description 1
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 1
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710124951 Phospholipase C Proteins 0.000 description 1
- 244000082204 Phyllostachys viridis Species 0.000 description 1
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 description 1
- 206010065159 Polychondritis Diseases 0.000 description 1
- 206010036105 Polyneuropathy Diseases 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 208000002389 Pouchitis Diseases 0.000 description 1
- 206010036774 Proctitis Diseases 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 208000037534 Progressive hemifacial atrophy Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100038277 Prostaglandin G/H synthase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108050003243 Prostaglandin G/H synthase 1 Proteins 0.000 description 1
- 108050003267 Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100039641 Protein MFI Human genes 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 101000762949 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) Exotoxin A Proteins 0.000 description 1
- 208000028017 Psychotic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006311 Pyoderma Diseases 0.000 description 1
- 206010037779 Radiculopathy Diseases 0.000 description 1
- 241001506137 Rapa Species 0.000 description 1
- 206010071141 Rasmussen encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 208000004160 Rasmussen subacute encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 201000001947 Reflex Sympathetic Dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000033464 Reiter syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 208000036071 Rhinorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 239000012327 Ruthenium complex Substances 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 206010039705 Scleritis Diseases 0.000 description 1
- 241000242583 Scyphozoa Species 0.000 description 1
- 206010039811 Secondary amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 1
- 108010017898 Shiga Toxins Proteins 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 208000032023 Signs and Symptoms Diseases 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000020307 Spinal disease Diseases 0.000 description 1
- 208000007156 Spondylarthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000035286 Spontaneous Remission Diseases 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 108010011834 Streptolysins Proteins 0.000 description 1
- 241000244177 Strongyloides stercoralis Species 0.000 description 1
- 208000007271 Substance Withdrawal Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 108091005735 TGF-beta receptors Proteins 0.000 description 1
- QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N Tacrolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1\C=C(/C)[C@@H]1[C@H](C)[C@@H](O)CC(=O)[C@H](CC=C)/C=C(C)/C[C@H](C)C[C@H](OC)[C@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)O[C@@]2(O)C(=O)C(=O)N2CCCC[C@H]2C(=O)O1 QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N 0.000 description 1
- 241000244159 Taenia saginata Species 0.000 description 1
- 208000001106 Takayasu Arteritis Diseases 0.000 description 1
- 108030001722 Tentoxilysin Proteins 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- 208000003217 Tetany Diseases 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 208000024799 Thyroid disease Diseases 0.000 description 1
- 206010051526 Tolosa-Hunt syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010044248 Toxic shock syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000650 Toxic shock syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 102000016715 Transforming Growth Factor beta Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100032504 Transmembrane 9 superfamily member 3 Human genes 0.000 description 1
- 241000223109 Trypanosoma cruzi Species 0.000 description 1
- 208000026928 Turner syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010057266 Type A Botulinum Toxins Proteins 0.000 description 1
- 208000012670 Uhthoff phenomenon Diseases 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 206010046543 Urinary incontinence Diseases 0.000 description 1
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 1
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- 241000271897 Viperidae Species 0.000 description 1
- 206010047505 Visceral leishmaniasis Diseases 0.000 description 1
- 206010047571 Visual impairment Diseases 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000027207 Whipple disease Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 1
- 241000607734 Yersinia <bacteria> Species 0.000 description 1
- 210000003489 abdominal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 230000036982 action potential Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 208000005298 acute pain Diseases 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N aldrithiol Chemical compound C=1C=CC=NC=1SSC1=CC=CC=N1 HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000009961 allergic asthma Diseases 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 238000005275 alloying Methods 0.000 description 1
- 239000002776 alpha toxin Substances 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002344 aminooxy group Chemical group [H]N([H])O[*] 0.000 description 1
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000003460 anti-nuclear Effects 0.000 description 1
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- 201000002064 aortic valve insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 201000007201 aphasia Diseases 0.000 description 1
- 230000004596 appetite loss Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 201000005000 autoimmune gastritis Diseases 0.000 description 1
- 201000011385 autoimmune polyendocrine syndrome Diseases 0.000 description 1
- 201000009780 autoimmune polyendocrine syndrome type 2 Diseases 0.000 description 1
- 206010071578 autoimmune retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 229940097012 bacillus thuringiensis Drugs 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 229960004168 balsalazide Drugs 0.000 description 1
- IPOKCKJONYRRHP-FMQUCBEESA-N balsalazide Chemical compound C1=CC(C(=O)NCCC(=O)O)=CC=C1\N=N\C1=CC=C(O)C(C(O)=O)=C1 IPOKCKJONYRRHP-FMQUCBEESA-N 0.000 description 1
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 description 1
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 1
- 229940097320 beta blocking agent Drugs 0.000 description 1
- 229940021459 betaseron Drugs 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 239000003131 biological toxin Substances 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 208000024330 bloating Diseases 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 229940019700 blood coagulation factors Drugs 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 230000010072 bone remodeling Effects 0.000 description 1
- 229940089093 botox Drugs 0.000 description 1
- 210000000133 brain stem Anatomy 0.000 description 1
- 229910052980 cadmium sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002308 calcification Effects 0.000 description 1
- 235000009120 camo Nutrition 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 230000001451 cardiotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000259 cardiotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008614 cellular interaction Effects 0.000 description 1
- 210000001638 cerebellum Anatomy 0.000 description 1
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 235000005607 chanvre indien Nutrition 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000012707 chemical precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 1
- 208000030949 chronic idiopathic urticaria Diseases 0.000 description 1
- 208000025302 chronic primary adrenal insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010072757 chronic spontaneous urticaria Diseases 0.000 description 1
- 208000024376 chronic urticaria Diseases 0.000 description 1
- 201000010002 cicatricial pemphigoid Diseases 0.000 description 1
- 230000001886 ciliary effect Effects 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 1
- 108700021073 cold agglutinins Proteins 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 208000008609 collagenous colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000006854 communication Effects 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 208000018631 connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 1
- 229940038717 copaxone Drugs 0.000 description 1
- 239000011258 core-shell material Substances 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 201000003146 cystitis Diseases 0.000 description 1
- 238000007822 cytometric assay Methods 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000013872 defecation Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005115 demineralization Methods 0.000 description 1
- 230000002328 demineralizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 230000037336 dry skin Effects 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 210000003027 ear inner Anatomy 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 238000002848 electrochemical method Methods 0.000 description 1
- 238000000609 electron-beam lithography Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000005421 electrostatic potential Methods 0.000 description 1
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 1
- 230000002996 emotional effect Effects 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002662 enteric coated tablet Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 1
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 238000000407 epitaxy Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Chemical group CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-amino-4-(trifluoromethyl)-1,3-thiazole-5-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C=1SC(N)=NC=1C(F)(F)F XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 210000003499 exocrine gland Anatomy 0.000 description 1
- 208000012997 experimental autoimmune encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 1
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 208000002980 facial hemiatrophy Diseases 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 210000004905 finger nail Anatomy 0.000 description 1
- 238000009093 first-line therapy Methods 0.000 description 1
- 230000003890 fistula Effects 0.000 description 1
- 238000002866 fluorescence resonance energy transfer Methods 0.000 description 1
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 1
- 210000000285 follicular dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 208000021302 gastroesophageal reflux disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 229940085435 giardia lamblia Drugs 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229940042385 glatiramer Drugs 0.000 description 1
- 210000000585 glomerular basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 239000001046 green dye Substances 0.000 description 1
- 210000004884 grey matter Anatomy 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 210000004247 hand Anatomy 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 210000003709 heart valve Anatomy 0.000 description 1
- 208000024798 heartburn Diseases 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000007475 hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000767 hemotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000011487 hemp Substances 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 208000010726 hind limb paralysis Diseases 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000004047 hole gas Substances 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 201000006362 hypersensitivity vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 208000034783 hypoesthesia Diseases 0.000 description 1
- 238000007455 ileostomy Methods 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000037451 immune surveillance Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 1
- 208000018879 impaired coordination Diseases 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 201000001881 impotence Diseases 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 201000008319 inclusion body myositis Diseases 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- RPQDHPTXJYYUPQ-UHFFFAOYSA-N indium arsenide Chemical compound [In]#[As] RPQDHPTXJYYUPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 1
- 230000006749 inflammatory damage Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 230000008611 intercellular interaction Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 230000003871 intestinal function Effects 0.000 description 1
- 230000008991 intestinal motility Effects 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008606 intracellular interaction Effects 0.000 description 1
- 229940124625 intravenous corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 239000002085 irritant Substances 0.000 description 1
- 231100000021 irritant Toxicity 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229960004502 levodopa Drugs 0.000 description 1
- 201000011486 lichen planus Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012153 long-term therapy Methods 0.000 description 1
- 208000019017 loss of appetite Diseases 0.000 description 1
- 235000021266 loss of appetite Nutrition 0.000 description 1
- 208000030208 low-grade fever Diseases 0.000 description 1
- 238000009593 lumbar puncture Methods 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001288 lysyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003120 macrolide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000006984 memory degeneration Effects 0.000 description 1
- 208000023060 memory loss Diseases 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000002488 metal-organic chemical vapour deposition Methods 0.000 description 1
- 229960004584 methylprednisolone Drugs 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000002991 molded plastic Substances 0.000 description 1
- 238000007479 molecular analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001451 molecular beam epitaxy Methods 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007510 mood change Effects 0.000 description 1
- 210000002161 motor neuron Anatomy 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 229940035363 muscle relaxants Drugs 0.000 description 1
- 208000029766 myalgic encephalomeyelitis/chronic fatigue syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000002637 mydriatic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003158 myorelaxant agent Substances 0.000 description 1
- 210000000282 nail Anatomy 0.000 description 1
- 208000026721 nail disease Diseases 0.000 description 1
- 201000003631 narcolepsy Diseases 0.000 description 1
- 230000003533 narcotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002956 necrotizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009707 neogenesis Effects 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 238000002610 neuroimaging Methods 0.000 description 1
- 230000004751 neurological system process Effects 0.000 description 1
- 208000008795 neuromyelitis optica Diseases 0.000 description 1
- 230000007827 neuronopathy Effects 0.000 description 1
- 239000002581 neurotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000618 neurotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 108010087904 neutravidin Proteins 0.000 description 1
- 208000004235 neutropenia Diseases 0.000 description 1
- 230000000422 nocturnal effect Effects 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 230000006911 nucleation Effects 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 206010029864 nystagmus Diseases 0.000 description 1
- 229960004110 olsalazine Drugs 0.000 description 1
- QQBDLJCYGRGAKP-FOCLMDBBSA-N olsalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=C(C(O)=CC=2)C(O)=O)=C1 QQBDLJCYGRGAKP-FOCLMDBBSA-N 0.000 description 1
- 230000014207 opsonization Effects 0.000 description 1
- 238000011369 optimal treatment Methods 0.000 description 1
- 125000002524 organometallic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 201000005580 palindromic rheumatism Diseases 0.000 description 1
- 206010057056 paraneoplastic pemphigus Diseases 0.000 description 1
- 208000012111 paraneoplastic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 208000035824 paresthesia Diseases 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000032696 parturition Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 210000004197 pelvis Anatomy 0.000 description 1
- 239000000863 peptide conjugate Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 208000008494 pericarditis Diseases 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 1
- 230000001699 photocatalysis Effects 0.000 description 1
- 238000005362 photophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000000554 physical therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000005987 polymyositis Diseases 0.000 description 1
- 230000007824 polyneuropathy Effects 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 208000012934 primary antiphospholipid syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000007639 printing Methods 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 206010036807 progressive multifocal leukoencephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 230000004853 protein function Effects 0.000 description 1
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 210000001747 pupil Anatomy 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 238000006862 quantum yield reaction Methods 0.000 description 1
- 206010061928 radiculitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000941 radioactive substance Substances 0.000 description 1
- 238000002601 radiography Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 229940038850 rebif Drugs 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 102000037983 regulatory factors Human genes 0.000 description 1
- 108091008025 regulatory factors Proteins 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000000552 rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 1
- 230000001020 rhythmical effect Effects 0.000 description 1
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 230000037390 scarring Effects 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- 230000002784 sclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012106 screening analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 239000004054 semiconductor nanocrystal Substances 0.000 description 1
- 210000000697 sensory organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 208000026773 severe abdominal cramp Diseases 0.000 description 1
- 208000026775 severe diarrhea Diseases 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 210000002832 shoulder Anatomy 0.000 description 1
- 238000002579 sigmoidoscopy Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000007958 sleep Effects 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 239000003711 snail venom Substances 0.000 description 1
- VUFNRPJNRFOTGK-UHFFFAOYSA-M sodium;1-[4-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methyl]cyclohexanecarbonyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)C1CCC(CN2C(C=CC2=O)=O)CC1 VUFNRPJNRFOTGK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RPENMORRBUTCPR-UHFFFAOYSA-M sodium;1-hydroxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].ON1C(=O)CC(S([O-])(=O)=O)C1=O RPENMORRBUTCPR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 208000027765 speech disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000036262 stenosis Effects 0.000 description 1
- 208000037804 stenosis Diseases 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 108091007196 stromelysin Proteins 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 208000035458 subtype of a disease Diseases 0.000 description 1
- JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate Chemical compound C1CC(CN2C(C=CC2=O)=O)CCC1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000617 superantigen Toxicity 0.000 description 1
- 238000009120 supportive therapy Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000009747 swallowing Effects 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 1
- 230000002889 sympathetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005222 synovial tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000002437 synoviocyte Anatomy 0.000 description 1
- QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N tacrolimus Natural products CO[C@H]1C[C@H](CC[C@@H]1O)C=C(C)[C@H]2OC(=O)[C@H]3CCCCN3C(=O)C(=O)[C@@]4(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]4C)OC)[C@@H](C[C@H](C)CC(=C[C@@H](CC=C)C(=O)C[C@H](O)[C@H]2C)C)OC QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N 0.000 description 1
- 229960001967 tacrolimus Drugs 0.000 description 1
- 210000001138 tear Anatomy 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N thiolan-2-imine Chemical compound N=C1CCCS1 CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006177 thiolation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 210000003813 thumb Anatomy 0.000 description 1
- 208000021510 thyroid gland disease Diseases 0.000 description 1
- 210000001578 tight junction Anatomy 0.000 description 1
- 210000004906 toe nail Anatomy 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 208000009174 transverse myelitis Diseases 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N trehalose 6,6'-dimycolate Chemical compound C([C@@H]1[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COC(=O)C(CCCCCCCCCCC3C(C3)CCCCCCCCCCCCCCCCCC)C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)O2)O)O1)O)OC(=O)C(C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)CCCCCCCCCCC1CC1CCCCCCCCCCCCCCCCCC XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005641 tunneling Effects 0.000 description 1
- 230000005533 two-dimensional electron gas Effects 0.000 description 1
- 229940079023 tysabri Drugs 0.000 description 1
- 210000002438 upper gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 1
- 208000009935 visceral pain Diseases 0.000 description 1
- 238000001429 visible spectrum Methods 0.000 description 1
- 208000029257 vision disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004393 visual impairment Effects 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
- 229910052724 xenon Inorganic materials 0.000 description 1
- FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N xenon atom Chemical compound [Xe] FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124629 β-receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
- G01N33/5047—Cells of the immune system
- G01N33/505—Cells of the immune system involving T-cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/0004—Screening or testing of compounds for diagnosis of disorders, assessment of conditions, e.g. renal clearance, gastric emptying, testing for diabetes, allergy, rheuma, pancreas functions
- A61K49/0008—Screening agents using (non-human) animal models or transgenic animal models or chimeric hosts, e.g. Alzheimer disease animal model, transgenic model for heart failure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
- A61M37/00—Other apparatus for introducing media into the body; Percutany, i.e. introducing medicines into the body by diffusion through the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к области молекулярной биологии, иммунологии и медицины и предназначена для идентификации популяций аутореактивных Т-клеток у индивидуумов с аутоиммунными заболеваниями. Для взятия аутоиммунных Т-клеток у индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием, получают пептоид, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками. Указанный пептоид связан с носителем. Выполняют контактирование образца, взятого от указанного индивидуума, с указанным пептоидом, связанным с носителем, в течение периода времени, достаточного для связывания аутоиммунных Т-клеток с указанным пептоидом, связанным с носителем. Затем отделяют указанный носитель от указанного образца. В других воплощениях обеспечиваются способы уничтожения аутоиммунных Т-клеток, взятых у индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием. Использование группы изобретений обеспечивает более эффективную идентификацию аутоиммунных заболеваний различного типа и проведение терапии, направленной против таких популяций. 4 н. и 46 з.п. ф-лы, 15 ил., 1 табл., 3 пр.
Description
В настоящей заявке испрашивается приоритет предварительной заявки на патент США рег. № 61/182368, поданной 29 мая 2009 г., и предварительной заявки на патент США рег. № 61/260608, поданной 12 ноября 2009 г., каждая из которых полностью включена в настоящее описание посредством ссылки.
Настоящее изобретение было создано при финансовой поддержке правительства, выдавшего грант № N01-HV28185 Национальному институту заболеваний сердца, легких и крови, и грант № DP10D00066301 Национальному институту здравоохранения. Правительство имеет определенные права на данное изобретение.
Предшествующий уровень техники
1. Область, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение главным образом относится к области молекулярной биологии, иммунологии и медицины. Более конкретно, настоящее изобретение относится к идентификации пептоидов, распознаваемых аутоиммунными Т-клетками. Такие пептоиды могут быть использованы для идентификации индивидуумов, страдающих аутоиммунным заболеванием или подверженных риску развития аутоиммунного заболевания, а также для нацеливания на клетки-мишени в целях их удаления, ингибирования или разрушения.
2. Описание предшествующего уровня техники
Этиология многих аутоиммунных заболеваний на молекулярном уровне пока неясна. Из-за отсутствия достаточной информации о таких заболеваниях на молекулярном уровне, существующая ситуация в отношении разработки диагностических средств и эффективной терапии аутоиммунных заболеваний далека от оптимальной. Так, например, в настоящее время еще не найдены маркеры сывороточного белка, которые позволяли бы с высокой степенью надежности диагностировать большинство аутоиммунных заболеваний. Почти без исключения все лекарственные средства, используемые для лечения таких состояний, либо подавляют результат самого аутоиммунного ответа, такой как воспаление, либо направлены на неселективную модуляцию или супрессию всей иммунной системы (Hemmer & Hartung, 2007) со значительными нежелательными побочными эффектами. Для диагностики и терапии было бы идеально получить молекулы, которые будут нацелены на аутореактивные В-клетки (и на антитела, которые они продуцируют) и непосредственно на Т-клетки, но не на В- и Т-клетки, которые распознают чужеродные антигены. Такие молекулы могли бы быть использованы в качестве диагностических средств и аналитических инструментов для детектирования и обогащения аутоиммунных антител, В-клеток и Т-клеток. Кроме того, эти молекулы могли бы служить в качестве фундамента для разработки новой программы по поиску лекарственных средств, направленных на уничтожение этих аутореактивных клеток, но не влияющих на нужные функции иммунной системы.
Таким образом, для диагностики указанных заболеваний необходимо разработать способы, которые были бы (i) точными и объективными, (ii) простыми и воспроизводимыми и (iii) эффективными для использования, как на ранней, так и на поздней стадии заболевания.
Описание сущности изобретения
Настоящее изобретение относится к способам применения синтетических молекул, то есть лигандов, которые связываются с лиганд-связывающими молекулами, такими как белки, нуклеиновые кислоты, углеводы или н-адгезивные клетки, присутствующие в сложных биологических смесях, в качестве биомаркеров для оценки конкретного(ых) физиологического(их) состояния(й). В некоторых аспектах изобретения лигандом является пептоид.
Таким образом, настоящее изобретение относится к способу идентификации лиганда или пептоида, которые специфически распознаются аутоиммунными Т-клетками, включающему: (a) получение первой популяции Т-клеток от здорового индивидуума, где указанную популяцию метят первой детектируемой меткой; (b) получение второй популяции Т-клеток от индивидуума с аутоиммунным заболеванием, где указанную популяцию метят второй детектируемой меткой; (c) контактирование указанных первой и второй Т-клеточных популяций с множеством указанных пептоидов-кандидатов; и (d) оценку связывания указанных первой и второй Т-клеточных популяций с указанным пептоидом-кандидатом, где, в случае, если указанный пептоид связывается с указанной второй Т-клеточной популяцией, но не с указанной первой Т-клеточной популяцией, указанный пептоид распознается аутоиммунными клетками, но не распознается нормальными Т-клетками.
Аутоиммунным заболеванием может быть рассеянный склероз или ревматоидный артрит. Лигандом или пептоидом может быть 3-мер, 4-мер, 5-мер, 6-мер, 7-мер, 8-мер, 9-мер или 10-мер. Первая и вторая метки могут быть флуоресцентными или хемилюминесцентными, либо они могут представлять собой квантовые точки. Пептоид может быть связан с носителем, таким как гранула, чип, фильтр, тест-полоска, мембрана, полимерная матрица или лунка. Стадия контактирования может включать приведение указанного носителя в контакт с указанными первой и второй Т-клеточными популяциями одновременно. T-клеточная популяция может включать CD4+-T-клетки. Индивидуумами могут быть человек или мышь.
В другом своем варианте настоящее изобретение относится к способу взятия аутоиммунных T-клеток у индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием, включающему: (a) получение лиганда или пептоида, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками, где указанный лиганд или пептоид связан с носителем; (b) контактирование образца, содержащего Т-клетки и взятого у указанного индивидуума, с указанным пептоидом, связанным с носителем, в течение периода времени, достаточного для связывания аутоиммунных Т-клеток с указанным лигандом или пептоидом, связанным с носителем; и (c) отделение указанного носителя от указанного образца. Этот способ может дополнительно включать возращение образца со стадии (c) указанному индивидууму. Аутоиммунным заболеванием может быть рассеянный склероз или ревматоидный артрит.
Лигандом или пептоидом может быть 3-мер, 4-мер, 5-мер, 6-мер, 7-мер, 8-мер, 9-мер или 10-мер. Носителем может быть гранула, чип, фильтр, тест-полоска, мембрана, полимерная матрица или лунка. Образцом может быть кровь, цереброспинальная жидкость или сперма. Если образцом является кровь, то она может быть взята у указанного индивидуума, обработана ex vivo и возвращена указанному индивидууму, после чего эта кровь может быть пропущена через связанный с носителем лиганд или пептоид и возвращена индивидууму по замкнутой цепи кровообращения. Указанный способ может дополнительно включать получение указанного образца от указанного индивидуума. Указанным индивидуумом может быть человек или мышь.
В другом своем варианте настоящее изобретение относится к способу уничтожения аутоиммунных Т-клеток, полученных от индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием, где указанный способ включает: (a) получение лиганда или пептоида, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками, где указанный лиганд или пептоид конъюгирован с токсином; и (b) контактирование образца, содержащего Т-клетки и взятого у указанного индивидуума, с указанным конъюгатом в течение периода времени, достаточного для связывания по меньшей мере одной аутоиммунной Т-клетки с указанным конъюгатом, где указанный конъюгат вызывает гибель указанных аутоиммунных Т-клеток. Образец может быть обработан ex vivo, а указанный способ может дополнительно включать возвращение данного образца указанному индивидууму. Указанным аутоиммунным заболеванием может быть рассеянный склероз или ревматоидный артрит.
Лигандом или пептоидом может быть 3-мер, 4-мер, 5-мер, 6-мер, 7-мер, 8-мер, 9-мер или 10-мер. Токсином может быть рицин, дифтерийный токсин или холерный токсин. Альтернативно, токсином может быть фотоактивируемый токсин, такой как трис-бипептидил-рутений(II), а стадия (b) может дополнительно включать облучение указанного образца видимым светом. Образцом может быть кровь, цереброспинальная жидкость или сперма. Указанный способ может дополнительно включать получение указанного образца от указанного индивидуума. Указанным индивидуумом может быть человек или мышь.
В другом своем варианте настоящее изобретение относится к способу уничтожения аутоиммунных Т-клеток, полученных от индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием, где указанный способ включает: (a) получение лиганда или пептоида, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками, где указанный лиганд или пептоид конъюгирован с Fc-содержащими молекулами IgG; и (b) контактирование популяции аутоиммунных Т-клеток с указанным конъюгатом в течение периода времени, достаточного для связывания по меньшей мере одной аутоиммунной Т-клетки с указанным конъюгатом, где указанный конъюгат индуцирует приток иммунных эффекторов в указанную популяцию аутоиммунных Т-клеток, что приводит к их гибели. Популяция аутоиммунных Т-клеток может быть обработана ex vivo, а указанный способ может дополнительно включать возвращение данного образца, полученного в стадии (b), указанному индивидууму. Указанным аутоиммунным заболеванием может быть рассеянный склероз или ревматоидный артрит.
Лигандом или пептоидом может быть 3-мер, 4-мер, 5-мер, 6-мер, 7-мер, 8-мер, 9-мер или 10-мер. Fc-содержащей молекулой IgG может быть антитело, одноцепочечное антитело или Fc-фрагмент, например, антитела или одноцепочечного антитела, где указанный лиганд или пептоид присоединяют к антигенсвязывающему сайту указанного антитела или его Fc-фрагмента, не содержащего вариабельных областей IgG, и где указанный лиганд или пептоид присоединяют к карбокси-концу указанного Fc-фрагмента. Образцом может быть кровь, цереброспинальная жидкость или сперма. Указанный способ может дополнительно включать получение указанного образца от указанного индивидуума. Указанным индивидуумом может быть человек или мышь.
В некоторых вариантах изобретения соединение согласно изобретению имеет нижеследующие формулы, включая их фармацевтически приемлемые соли:
Формула I
Формула II
где n равно 0-8; L представляет собой линкер; Y представляет собой токсин или фрагменты антител; Z представляет собой NH2, N(C1-C6алкил)2, OH или O(C1-C6алкил)); а Rl, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 (где к формуле I или формуле II с каждым значением n больше 4 добавляется следующая группа R в порядке нумерации), могут представлять собой водород; алкил; аллил; метил; этил; н-пропил; изопропил; н-бутил; изобутил; втор-бутил; трет-бутил; пентил; гексил; изопентил; арил; гетероарил; фуранил; индолил; тиофенил; тиазолил; имидазолил; изоксазоил; оксазоил; пиперонил; пиразоил; пирролил; пиразинил; пиридил; пиримидил; пиримидинил; пуринил; циннолинил; бензофуранил; бензотиенил; бензотриазолил; бензоксазолил; хинолин; изоксазолил; изохинолин-циклоалкил; алкенил; циклоалкенил; фенил; пиридил; метоксиэтил; (R)-метилбензил; C1-C6алкил, который является незамещенным или замещен группами NH2, OH, SH, N(C1-C6алкил)2, О(C1-C6алкил) или S(C1-C6алкил); C2-C6алкинил, который является незамещенным или замещен группами NH2, OH, SH, N(C1-C6алкил)2, O(C1-C6алкил) или S(C1-C6алкил); C2-C6алкенил, который является незамещенным или замещен группами NH2, OH, SH, N(C1-C6алкил)2, O(C1-C6алкил) или S(C1-C6алкил).
В некоторых аспектах изобретения Rl, R2 и/или R3 может независимо представлять собой C1-C6алкил, который является незамещенным или замещен группами NH2, OH, SH, N(C1-C6алкил)2, O(C1-C6алкил), или S(C1-C6алкил); C2-C6алкинил, который является незамещенным или замещен группами NH2, OH, SH, N(C1-C6алкил)2, O(C1-C6алкил) или S(C1-C6алкил); C2-C6алкенил, который является незамещенным или замещен группами NH2, OH, SH, N(C1-C6алкил)2, O(C1-C6алкил) или S(C1-C6алкил).
В некоторых аспектах изобретения R1 представляет собой C1-C6алкил, замещенный по концу группой NH2, а в частности, 4-аминобутан.
В других аспектах изобретения R2 представляет собой C1-C6алкил, замещенный по концу группой NH2, а в частности, 4-аминобутан.
В других аспектах изобретения R3 представляет собой C1-C6алкил, C2-C6алкинил или C2-C6алкенил. В некоторых аспектах изобретения R3 представляет собой изобутил.
В некоторых аспектах изобретения R4 представляет собой C1-C6алкил, замещенный по концу группой NH2, а в частности, 4-аминобутан.
В других аспектах изобретения R5 представляет собой (R)-метилбензил.
В других аспектах изобретения R6 представляет собой фуранил.
В некоторых аспектах изобретения R7 представляет собой C1-C6алкил, замещенный по концу группой NH2, а в частности, 4-аминобутан.
В других аспектах изобретения R8 представляет собой C1-C6алкил, а в частности изобутил.
В некоторых своих вариантах настоящее изобретение включает 8-мер, где Rl, R2, R4 и R7 представляют собой 4-аминобутан; R3 и R8 представляют собой изобутил; R5 представляет собой (R)-метилбензил, а R6 представляет собой фуранил (соединение AG12A). AG12A может содержать на своем конце лизильную группу (4-аминобутан), гидроксильную группу или карбоксильную группу.
В других аспектах изобретения концевая группа R заканчивается лизильной, карбоксильной или гидроксильной группой.
Следует отметить, что любой описанный здесь способ или любая описанная здесь композиция могут быть применены с использованием любого другого описанного здесь способа или любой другой описанной здесь композиции.
Употребление существительного единственного числа в сочетании со словом «включающий», используемым в формуле изобретения и/или в описании настоящей заявки, может означать какой-либо «один» элемент, а также «один или более» элементов, «по меньшей мере один» элемент и «один либо более чем один» элемент.
При этом подразумевается, что любой вариант, обсуждаемый в настоящем описании, может быть осуществлен с применением любого способа или любой композиции согласно изобретению и наоборот. Кроме того, композиции и наборы согласно изобретению могут быть использованы для осуществления способов согласно изобретению.
Термин «примерно», употребляемый в настоящем описании, относится к величине, включающей присущую этой величине дисперсию ошибок, а именно, инструментальных ошибок, ошибок метода, применяемого для определения этой величины, или вариабельность, существующая между обследуемыми индивидуумами.
Краткое описание графического материала
Описанный ниже графический материал составляет часть настоящего описания и приводится для дополнительной иллюстрации некоторых аспектов настоящего изобретения. Для лучшего понимания настоящего изобретения оно проиллюстрировано ниже со ссылками на одну или несколько фигур в комбинации с подробным описанием представленных здесь конкретных вариантов.
Фиг. 1A-D: Идентификация пептоидов, связывающихся с аутореактивными Т-клетками, в соответствии с протоколом скрининга с использованием двухцветных гранул. (Фиг. 1A) Схематическое представление протокола скрининга пептоидов. (Фиг. 1B) Изображения, полученные на флуоресцентном микроскопе для пептоидных гранул после скрининга и промывки (100х увеличение; DAPI-фильтр); (i) и (ii): две гранулы, которые были выбраны как «наилучшие» и которые, как наблюдалось, связываются только с клетками, окрашенными красным красителем; (iii): гранулы, связывающиеся с CD4+-T-клетками, взятыми у здоровых мышей и у мышей с EAE. (Фиг. 1C) Химические структуры двух «наилучших» величин, идентифицированных в этом скрининге. (Фиг. 1D) Изображения, полученные на флуоресцентном микроскопе для гранул Tentagel, на которых представлен AG12A, связанный с аутореактивными T-клетками; (i): CD4+-T-клетки, которые были взяты у контрольных B10.PL-мышей дикого типа и которые не связываются с пептоидными гранулами AG12A; (i)i: CD4+-T-клетки, которые были взяты у Vα2.3/Vβ8.2 MBP Ас-1-11 TCR-трансгенных мышей и которые связываются с пептоидными гранулами AG12A.
Фиг. 2A-C: AG12A связывается с MBP Acl-11-специфическими T-клетками со средней микромолярной аффинностью и с высокой специфичностью. (Фиг. 2A) Проточный цитометрический анализ CD4+-T-клеток, взятых у Vα2.3/Vβ8.2 MBP Ac1-11 TCR-трансгенных мышей и мышей B10.PL дикого типа в присутствии возрастающих концентраций биотин-DOPA-AG12A. Клетки предварительно инкубировали с концентрациями 1 мкM, 10 мкM, 100 мкM, 250 мкM или 500 мкM биотин-DOPA-AG12A, подвергали перекрестному связыванию и окрашивали анти-CD4-PerCP-Cy5.5 антителом и антителом против стрептавидина-аллофикоцианина (APC). Двухцветную проточную цитометрию проводили для определения аффинности связывания биотинилированного AG12A с аутореактивными CD4+-T-клетками. Результаты представлены в виде перекрывающихся гистограмм, где зеленая линия соответствует Vα2.3/Vβ8.2 MBР Ac1-11 TCR-трансгенным T-клеткам, а синяя линия соответствует CD4+-T-клеткам дикого типа B10.PL. Красная линия и соответствует непептоидному негативному контролю. Среднюю интенсивность флуоресценции (MFI) определяли для каждой концентрации пептоида, тестируемого с помощью компьютерной программы Flowjo. Было обнаружено, что только Vα2.3/Vβ8.2 MBP Ac1-11 TCR-трансгенные T-клетки связываются с AG12A. Полученные результаты были репрезентативными для трех независимых экспериментов. (Фиг. 2B) Изотерму связывания AG12F c Vα2.3/Vβ8.2 MBP Ac1-11 TCR-трансгенными T-клетками оценивали с помощью проточной цитометрии. Строили график зависимости MFI от концентрации каждого тестируемого пептоида для TCR-трансгенных T-клеток + AG12A, Т-клеток дикого типа + AG12A, TCR-трансгенных T-клеток + контрольный пептоид, и Т-клеток дикого типа + контрольный пептоид. Величину Kd вычисляли с помощью компьютерной программы Graphard Prism, и эта величина составляла приблизительно 40 мкM. (Фиг. 2C) После индуцированного периодатом перекрестного связывания биотин-DOPA-AG12A с Vα2.3/Vβ8.2 MBP Ac1-11-TCR-трансгенными T-клетками и последующего электрофореза в ДСН-геле и вестерн-блот-анализа, проводимого с использованием нейтравидина-ПХ (НА-ПХ), получали главный перекрестно-связанный продукт с молекулярной массой приблизительно 45 кДа (правая сторона). Этот продукт не наблюдался при использовании CD4+-T-клеток, взятых у мышей дикого типа или CD4-негативных спленоцитов, взятых у TCR-трансгенных мышей. Дорожка 1: CD4+-T-клетки дикого типа, дорожка 2: Vα2.3/Vβ8.2 трансгенные Т-клетки, дорожка 3: CD4-негативные спленоциты. Правая сторона: аналогична левой стороне, за исключением того, что блот зондировали анти-Vα2 TCR антителом. Полученные результаты являются репрезентативными для двух независимых экспериментов.
Фиг. 3A-C: AG12A ингибирует пролиферацию аутореактивных T-клеток в зависимости от дозы. (Фиг. 3A) СD4+ MBP Ac1-11-специфичные мышиные TCR-трансгенные T-клетки выделяли, метили CFSE и инкубировали с возрастающими концентрациями пептоида AG12A или контрольного пептоида. Клетки разводили антигенпрезентирующими клетками, выделенными из селезенки мышей B10.PL дикого типа, и стимулировали пептидом MBP Ac1-11 в конечной концентрации 10 мкг/мл. Клетки окрашивали анти-CD4+-PerCP-CY5.5 антителом и анализировали с помощью проточной цитометрии для определения процента делящихся клеток. Результаты представлены в виде линейной кривой, где на оси X отложена концентрация пептоида, а на оси Y отложен процент деления клеток. Клетки, обработанные пептоидом AG12A, обозначены квадратами, а клетки, обработанные контрольным пептоидом, обозначены треугольниками. (Фиг. 3B) B-клетки выделяли у мышей B10.PL дикого типа и обрабатывали, как описано на фиг. 3A. Клетки стимулировали LPS и осуществляли проточную цитометрию, описанную выше. (Фиг. 3C) CD4+-T-клетки, полученные от MOG 35-55 TCR-трансгенных мышей, выделяли и обрабатывали, как описано выше, за исключением того, что указанные клетки стимулировали пептидом MOG 35-55 в присутствии антигенпрезентирующих клеток. Все результаты являются репрезентативными для трех независимых экспериментов.
Фиг. 4A-D: Добавление радиоактивного рутения приводит к повышению активности AG12A и к предупреждению адоптивной передачи EAE. (Фиг. 4A) График иллюстрирует фотокаталитическую деструкцию аутореактивного TCR. AG12A был химически связан с Ru2+. После инкубирования с комплексом «рутений-пептоид», клетки облучали видимым светом (<380 нм). Облучение приводило к образованию синглетного кислорода, который инактивирует рецептор-мишень. (Фиг. 4B) CD4+-MBP Ac1-11-специфические мышиные TCR-трансгенные T-клетки выделяли у мышей B10.PL и инкубировали с AG12A-Ru2+, контрольным Ru2+-пептоидом в концентрациях 1 мкM или 100 нM, или только с растворителями (PBS или ДМСО). Клетки либо облучали при <380 нм в течение 10 минут (заштрихованные столбцы), либо не облучали (черные столбцы). Культуры разводили антигенпрезентирующими клетками, выделенными из селезенки мышей дикого типа B10.PL, и стимулировали пептидом MBP Ac1-11 в конечной концентрации 10 мкг/мл. Пролиферацию определяли путем добавления [3H]тимидина к клеткам в течение последних 16 часов культивирования. Фоновые уровни пролиферации клеток, которые не были стимулированы антигеном, вычитали из полученных результатов. (Фиг. 4C) Панель, аналогичная панели B, за исключением того, что используемые CD4+-T-клетки выделяли у MOG 35-55-специфических TCR-трансгенных мышей. AG12A-Ru2+ не оказывал негативного влияния на пролиферацию этих клеток. (Фиг. 4D) Обработка пептоидом AG12A-Ru2+ приводит к предупреждению адоптивной передачи EAE. CD4+-T-клетки выделяли у MBP Ac1-11-специфических TCR-трансгенных мышей, инкубировали со 100 нМ пептоида AG12A-Ru2+ или контрольного Ru2+-пептоида, а затем облучали. После этого клетки стимулировали антигенпрезентирующими клетками и 10 мкг/мл пептида MBP Ac1-11 в течение 72 часов, и переносили путем i.р.-инъекции мышам B10.PL, которые ранее не подвергались обработке. Мышей ежедневно обследовали на клинические признаки EAE, и полученные средние клинические оценки использовали для построения графика для групп, обработанных AG12A-Ru2+ (незаштрихованные кружки), контрольным Ru2+-пептоидом (незаштрихованные квадраты), только антигеном (незаштрихованные треугольники), и не обработанных антигеном (звездочки). Все результаты являются репрезентативными для 2 независимых экспериментов.
Фиг. 5A-B: Средние клинические оценки, полученные у мышей с EAE, используемых в целях скрининга и структурной иллюстрации пептоидной библиотеки, применяемой в этом скрининге. (Фиг. 5A) Мышей B10.PL иммунизировали 50 мкг пептида MBP Ac1-11, эмульгированного в полном адъюванте Фрейнда (CFA) для индуцирования EAE. Мышей ежедневно обследовали на клинические признаки заболевания и присваивали клиническую оценку исходя из стандартных критериев. Контрольных мышей иммунизовали только CFA, и у этих мышей не развивался EAE. Когда заболевание достигало своего пика, мышей умерщвляли, и у этих мышей выделяли CD4+-T-клетки, которые затем использовали для скрининга пептоидной библиотеки. Оценки для мышей с EAE (квадраты) и контрольных мышей (треугольники) представлены на графике. (Фиг. 5B) Проиллюстрирована пептоидная библиотека, используемая для скрининга. Верхняя часть: общая химическая структура соединений в библиотеке. Три остатка у С-конца оставались неизменными, а остальные 6 остатков варьировались. В рамке: амины, используемые для создания библиотеки.
Фиг. 6: Структуры контрольного пептоида и контрольного Ru 2+ -пептоида. На данной фигуре представлены химические структуры контрольных пептоидов, используемых для этих исследований.
Описание репрезентативных вариантов осуществления настоящего изобретения
Авторами настоящего изобретения описаны способы идентификации синтетических молекул, которые связываются с аутореактивными CD4+-T-клетками с высокой специфичностью. Для осуществления протокола исследования, проводимого авторами на животных с экспериментальным аутоиммунным энцефаломиелитом (EAE) и на животных с моделью человеческого рассеянного склероза (MS), не требовалось каких-либо предварительных знаний о природе нативного(ых) антигена(ов). Вместо этого была разработана стратегия конкурентного связывания, в которой проводили одновременную оценку способности каждого соединения библиотеки связываться с аутореактивными Т-клетками и нормальными Т-клетками в нативной популяции. В качестве «наилучших соединений» были выбраны только те соединения, которые обладали высокой специфичностью к аутореактивным Т-клеткам. Подробная характеризация одного «наилучшего соединения» в скрининге EAE позволяет предположить, что он связывается с T-клеточным рецептором (TCR). Кроме того, было обнаружено, что это соединение является антагонистом индуцируемой антигеном пролиферации T-клеток in vitro. И наконец, в случае конъюгирования этого соединения с рутениевым комплексом, способным опосредовать окислительное разрушение молекулы с образованием родственных белков при ее фотолизе (Lee et al., 2008), такой конъюгат будет ингибировать способность аутореактивных T-клеток опосредовать развитие заболевания в эксперименте по адоптивной передаче заболевания. В целом, полученные данные подтверждают возможность применения данного метода для идентификации синтетических соединений, обладающих способностью связываться с антиген-специфическими аутореактивными T-клетками и ингибировать эти клетки.
I. Аутоиммунные заболевания
Как обсуждалось выше, настоящее изобретение относится к идентификации молекул, которые могут связываться с аутоиммунными Т-клетками, взятыми у пациентов с различными патологическими состояниями. Хотя примеры описаны для EAE, на моделях животных с MS, однако, настоящее изобретение может быть применено к различным аутоиммунным заболеваниям, некоторые из которых обсуждаются ниже. В некоторых аспектах изобретения такими патологическими состояниями являются, но не ограничиваются ими, острый диссеминированный энцефаломиелит (ADEM), острый некрозирующий геморрагический лейкоэнцефалит, болезнь Аддисона, агаммаглобулинемия, аллергическая астма, аллергический ринит, гнездная аллопеция, амилоидоз, анкилозирующий спондилит, нефрит, вызываемый анти-GBM/анти-TBM антителами, антифосфолипидный синдром (APS), аутоиммунная апластическая анемия, аутоиммунная диссинергия, аутоиммунный гепатит, аутоиммунная гиперлипидемия, аутоиммунный иммунодефицит, аутоиммунное заболевание внутреннего уха (AIED), аутоиммунный миокардит, аутоиммунный панкреатит, аутоиммунная ретинопатия, аутоиммунная тромбоцитопеническая пурпура (АTP), аутоиммунное заболевание щитовидной железы, невропатии аксонов и нервных тканей, болезнь Бало, болезнь Бехчета, буллезный пемфигоид, кардиомиопатия, болезнь Кастлемана, кишечная спру (не трофическая), болезнь Шагаса, синдром хронической усталости, хроническая воспалительная демиелинизирующая полиневропатия (CIDP), хронический рецидивирующий мультифокальный остеомиелит (CRMO), синдром Черга-Штраусса, рубцующийся пемфигоид/доброкачественный пемфигоид слизистой, болезнь Крона, синдром Когана, болезнь холодовых агглютининов, застойная сердечная недостаточность, миокардит Коксаки, болезнь CREST, эссенциальная смешанная криоглобулинемия, демиелинизирующие невропатии, дерматомиозит, болезнь Девика (нейромиелит зрительного нерва), дискоидная волчанка, синдром Дресслера, эндометриоз, эозинофильный фасцит, нодозная эритема, экспериментальный аллергический энцефаломиелит, синдром Эванса, фибромиалгия, фиброзирующий альвеолит, гигантоклеточный артериит (височный артериит), гломерулонефрит, синдром Гудпасчера, болезнь Грейвса, синдром Гийена-Барре, энцефалит Хашимото, тиреоидит Хашимото, гемолитическая анемия, пурпура Геноха-Шенлейна, герпес беременных, гипогаммаглобулинемия, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ITP), IgA-нефропатия, заболевание, вызываемое иммунорегуляторными липопротеинами, миозит, вызываемый тельцами включения, инсулинозависимый диабет (типа 1), кишечный цистит, юношеский артрит, юношеский диабет, синдром Кавазаки, синдром Ламберта-Итона, лейкоцитокластический васкулит, плоский лишай, склеротический лишай, фиброзный конъюнктивит, болезнь линейных цепей IgA (LAD), волчанка (SLE), болезнь Лайма, болезнь Меньера, микроскопический полиангит, смешанная болезнь соединительных тканей (MCTD), язва Мурена, болезнь Мухи-Хабермана, рассеянный склероз, тяжелая миастения, миозит, нарколепсия, нейромиелит зрительного нерва (болезнь Девика), нейтропения, рубцующийся пемфигоид зрачка, нейрит зрительного нерва, палиндромный ревматизм, PANDAS (детские аутоиммунные нервно-психические расстройства, вызываемые стрептококками), паранеопластическая дегенерация мозжечка, пароксизмальная ночная гемоглобинурия (PNH), синдром Парри-Ромберга, синдром Персонейджа-Тернера, заболевание ресничного кружка (периферический увеит), пемфигоид, периферическая нейропатия, околовенозный энцефаломиелит, пернициозная анемия, синдром POEMS, нодозный полиартериит, аутоиммунные полигландулярные синдромы типа I, II и III, ревматический полимиалгит, полимиозит, постинфарктный синдром, посткардиомиотомный синдром, дерматит, вызываемый прогестероном, первичный билиарный цирроз, первичный склерозирующий холангит, псориаз, псориатический артрит, идиопатический фиброз легких, гангренозная пиодермия, истинная эритроцитарная аплазия, болезнь Рейно, рефлекторная симпатетическая дистрофия, синдром Рейтера, рецидивирующий полихондрит, синдром «усталых ног», ретроперитонеальный фиброз, ревматическая лихорадка, ревматоидный артрит, саркоидоз, синдром Шмидта, склерит, склеродермия, синдром Сьегрена, аутоиммунная реакция, направленная на аутоантигены спермы и яичек, синдром «негнущегося человека», подострый бактериальный эндокардит (SBE), симпатический иридоциклит, артериит Такаясу, височный артериит/гигантоклеточный артериит, тромбоцитопеническая пурпура (TPP), синдром Толосы-Ханта, поперечный миелит, язвенный колит, недифференцированное заболевание соединительной ткани (UCTD), увеит, васкулит, везикулобуллезный дерматоз, витилиго или гранулематоз Вегенера, или хронический активный гепатит, первичный билиарный цирроз, сердечная кардиомиопатия, миокардит, аутоиммунный полиэндокринный синдром типа I (APS-I), фиброзно-кистозный васкулит, приобретенный гипопаратиреоидит, ишемическая болезнь сердца, листовидная пузырчатка, вульгарная пузырчатка, энцефалит Расмуссена, аутоиммунный гастрит, синдром инсулиновой гипогликемии (болезнь Хираты), инсулинорезистентность типа B, акантоз, системная красная волчанка (SLE), пернициозная анемия, резистентный к лечению артрит Лайма, полиневропатия, демиелинизирующие заболевания, атопический дерматит, аутоиммунный гипотиреоидит, витилиго, офтальмопатия, ассоциированная с заболеванием щитовидной железы, аутоиммунная глютеновая болезнь, заболевание, вызываемое дефицитом ACTH, дерматомиозит, синдром Сьегрена, системный склероз, прогрессирующий системный склероз, кольцевидная склеродермия, первичный антифосфолипидный синдром, хроническая идиопатическая крапивница, синдромы соединительных тканей, некрозирующий и серповидный гломерулонефрит (NCGN), системный васкулит, синдром Рейно, хроническое заболевание печени, висцеральный лейшманиоз, заболевание, вызываемое дефицитом аутоиммунных анти-Cl антител, мембранозный пролиферирующий гломерулонефрит (MPGN), заболевание, вызываемое замедленным свертыванием крови, иммунодефицит, атеросклероз, нейронопатия, паранеопластическая пузырчатка, паранеопластический синдром «негнущегося человека», паранеопластический энцефаломиелит, подострая вегетативная невропатия, ассоциированная с раком ретинопатия, паранеопластическая атаксия, а именно, синдром «пляшущих глаз», синдром поражения нижних двигательных нейронов и миастения Ламберта-Итона.
A. Анкилозирующий спондилит
AS представляет собой подгруппу заболеваний, входящих в более широкую группу заболеваний, классифицированную как спондилоартропатия. У пациентов, страдающих спондилоартропатией различных типов, этиология этого заболевания часто варьируется в очень широких пределах, от бактериальных инфекций до врожденного заболевания. Но, в конечном счете, у всех этих индивидуумов, развивается аксиальный артрит. Несмотря на ранние клинические различия этих заболеваний, проявляющиеся у различных групп пациентов, исход многих этих заболеваний, протекающих в течение 10-20 лет, почти идентичен. Недавно проведенные исследования позволяют предположить, что средний период времени от начала заболевания до клинической диагностики анкилозирующего спондилита составляет 7,5 лет (Khan, 1998). Эти же самые исследования позволяют предположить, что симптомы спондилоартропатии могут быть очень похожими на симптомы ревматоидного артрита (Feldtkeller et al., 2003; Doran et al., 2003).
AS представляет собой хроническое системное воспалительное ревматическое расстройство осевого скелета с наличием или отсутствием внескелетных проявлений. При этом, главным образом, поражаются крестцово-подвздошные суставы и позвоночник, но могут быть также поражены бедра и плечи, а в меньшей степени, периферические суставы или некоторые внесуставные структуры, такие как глаза, мускулатура, нервная система и желудочно-кишечный тракт. Этиология данного заболевания пока еще абсолютно не ясна (Wordsworth, 1995; Calin and Taurog, 1998). Это заболевание тесно ассоциируется с аллелем HLA-B27 главного комплекса гистосовместимости класса I (МНС I) (Calin and Taurog, 1998). AS развивается у индивидуумов в начале жизни и представляет опасность из-за возможного возникновения хронических болей и необратимого поражения сухожилий, связок, суставов и костей (Brewerton et al., 1973; Brewerton et al., 1973; Schlosstein et al., 1973). AS возникает независимо или в сочетании с другими формами спондилоартропатии, такими как реактивный артрит, псориаз, псориатический артрит, энтезит, язвенный колит, синдром раздраженного кишечника или болезнь Крона, и в этом случае он классифицируется как вторичный AS.
Обычно поражаемыми участками являются дисковертебральные суставы, апофизарные суставы, ребернопозвоночные суставы и суставы ребер с поперечными отростками позвонков, а также паравертебральные структуры связок. При этом заболевании также явно выражено воспаление энтезисов, которые являются участками сухожильномышечной системы и местом прикрепления связок к кости (Calin and Taurog, 1998). Известно, что на участке энтезиса наблюдается инфильтрация клеток плазмы, лимфоцитов и полиморфонуклеарных клеток. Такой процесс воспаления часто приводит к постепенному развитию фиброзного и костного анкилозита (Ball, 1971; Khan, 1990).
Это заболевание диагностируется поздно, поскольку его симптомы часто ассоциируются с более часто встречающимися заболеваниями в области спины. Ранним признаком AS является потеря гибкости в поясничном отделе позвоночника. Другими распространенными симптомами являются хронические боли и скованность в области поясницы, которые обычно возникают в области соединения поясницы и таза, или в области ребер.
Хотя большинство симптомов возникают в поясничной и в крестцово-подвздошных областях, однако, они могут также наблюдаться и в области шеи и верхнего отдела позвоночника. Артрит может также возникать в области плеч, бедер и ступней. У некоторых пациентов наблюдается воспаление глаз, а в более тяжелых случаях может возникать поражение сердечного клапана.
Наиболее часто встречающимся проявлением являются боли в спине, но заболевание может начинаться атипически в периферических суставах, особенно у детей и у женщин, а в более редких случаях оно может сопровождаться острым иритом (передним увеитом). Другими ранними симптомами и признаками являются патологическое расширение грудной клетки в результате диффузного поражения реберно-позвоночного отдела, субфебрильная температура, усталость, анорексия, снижение массы тела и анемия. Возможными жалобами являются рецидивирующие боли в спине, часто возникающие ночью и варьирующиеся по своей интенсивности, поскольку утренняя скованность обычно сменяется активностью. Боли в спине и параспинальные мышечные спазмы облегчаются при согнутом или сгорбленном положении, а поэтому, при отсутствии лечения, у пациентов часто наблюдается определенная степень кифоза.
Системные проявления наблюдаются у 1/3 пациентов. Рецидивирующий, обычно самокупирующийся, острый ирит (передний увеит) является достаточно затяжным и тяжелым заболеванием и приводит к ухудшению зрения. Неврологические признаки могут иногда возникать из-за присоединившегося радикулита или ишалгии, перелома позвоночника или неполного вывиха и синдрома «конского хвоста» (который проявляется импотенцией, ночным недержанием мочи, слабым мочевым пузырем, ощущением прямой кишки и отсутствием ахиллова рефлекса). Сердечно-сосудистые проявления могут включать недостаточность клапана аорты, стенокардию, перикардит и аномалии, наблюдаемые на ЭКГ. Редко встречающимся легочным симптомом является фиброз верхней доли, который иногда сопровождается образованием полости, ошибочно принимаемой за туберкулез (TB), и может осложняться инфекцией, вызываемой Aspergillus.
AS характеризуется слабыми или умеренными вспышками активного спондилита, чередующимися с периодами почти или полностью неактивного воспаления. У большинства пациентов правильное лечение позволяет минимизировать или избежать потери трудоспособности и вернуться к полноценной жизни, несмотря на скованность в спине. Иногда, течение этого заболевания бывает тяжелым и прогрессирующим и приводит к явно выраженным деформациям, приводящим к потере трудоспособности. Для пациентов с неподдающимся лечению иритом, а в редких случаях у пациентов с вторичным амилоидозом, прогноз заболевания является плохим.
ESR и другие реагенты острой фазы заболевания (например, уровни C-реактивного белка и сывороточного Ig) являются слегка повышенными у большинства пациентов с активным AS. Тесты на ревматоидный фактор IgM и антиядерные антитела являются отрицательными. Тест на HLA-B27 является обычно положительным, но непостоянным и неспецифическим (для исключения AS, при диагностике этого заболевания, отрицательный тест является более полезным, чем положительный). Этот тест не является необходимым для пациентов с типичным заболеванием.
Диагноз должен быть подтвержден рентгенографическим анализом. Патологии, возникающие на самой ранней стадии (псевдорасширение в результате эрозии, склероза или последующего сужения субхондральной зоны), наблюдаются в крестцово-подвздошных суставах. Ранними изменениями в области позвоночника являются увеличение площади и деминерализация верхнего пояснично-позвоночного отдела, неоднородный кальциноз связок и сращение позвонков (синдесмофиты), наблюдающиеся в одном или в двух участках позвоночника. Классическая картина «бамбукового» позвоночника с явно выраженными синдесмофитами и диффузным параспинальным кальцинозом связок не является характерной для ранней диагностики; и такие изменения проявляются у небольшого числа пациентов за период, в среднем, 10 лет.
Тяжесть поражения суставов и тяжесть системных симптомов значительно варьирует у различных индивидуумов. Точный диагноз и правильное лечение на ранней стадии заболевания могут минимизировать продолжительность болей, длящихся годами, и нетрудоспособность.
Дискомфорт в суставах может быть устранен путем приема лекарственных средств. Лечение, проводимое по определенной схеме, обычно позволяет предотвращать, замедлять или исправлять деформации, и необходимо для психосоциальной адаптации и реабилитации. Для придания правильной осанки и улучшения двигательной функции суставов, ежедневные физические упражнения и другие вспомогательные меры (например, тренировка для улучения осанки, лечебная физкультура) являются жизненно необходимыми для укрепления групп мышц, которые действуют в направлении, препятствующем потенциальной деформации (то есть, для укрепления групп мышц-удлинителей, но не мышц-сгибателей). Чтение в лежачем положении и, таким образом, растягивание шеи может способствовать сохранению гибкости спины.
NSAID облегчают выполнение упражнений и применение других вспомогательных мер посредством снижения воспаления суставов, болей и мышечных спазмов. Было подтверждено, что NSAID являются эффективными для лечения АS, однако, при выборе лекарственного средства необходимо учитывать скорее его переносимость и токсичность, а не маргинальные измерения его эффективности. Пациенты должны пройти обследование на наличие возможных побочных реакций и должны быть предупреждены о возможности их появления. Ежедневная доза NSAID должна быть низкой насколько это возможно, однако, в активной фазе заболевания могут потребоваться максимальные дозы лекарственного средства, такого как индометацин. После снижения системных и суставных признаков активной фазы заболевания в течение нескольких месяцев, необходима отмена приема лекарственного средства, однако, это должно быть сделано постепенно. Несколько новых NSAID, называемых лекарственными средствами COX-2, благодаря их способности ингибировать циклооксигеназу-2, обладают такой же эффективностью, как и лекарственные средства, ингибирующие COX-1, но, при этом, с меньшим риском возникновения побочного действия на слизистую желудка и агрегации тромбоцитов.
Кортикостероиды находят ограниченное терапевтическое применение, поскольку их длительное использование ассоциируется с возникновением многих серьезных побочных эффектов, включая остеопороз ригидного позвоночника. При остром ирите местное применение кортикостероидов (и мидриатических средств) дает адекватный эффект; тогда как пероральное введение кортикостероидов показано в редких случаях. Внутрисуставные кортикостероиды могут оказывать благоприятное действие, особенно в том случае, когда более воспаленными являются лишь один или два периферических сустава, которые препятствуют выполнению физических упражнений и ухудшают возможность реабилитации.
Большинство лекарственных средств замедленного действия (ремиттирующих лекарственных средств) для лечения RA (например, золотосодержащие средства, называемые IM) либо еще не изучены, либо являются неэффективными для лечения AS. В этих целях может быть использован сульфасалазин, в частности, в случае поражения периферических суставов. Начальная доза может составлять 500 мг/день и через интервалы времени в 1 неделю может быть увеличена до 1 г и вводиться два раза в день (см. также «Ревматоидный артрит» в главе 50). Наиболее частым побочным эффектом является тошнота, которая имеет, в основном, центральное действие, а поэтому пациентами лучше переносятся таблетки с энтеросолюбильным покрытием. Может также оказаться эффективным снижение дозы.
Наркотические средства, другие сильные аналгетики и мышечные релаксанты не обладают противовоспалительными свойствами и должны назначаться для приема только в течение короткого промежутка времени в качестве вспомогательных лекарственных средств для снижения сильных болей в спине и спазмов. Лучевая терапия позвоночника, хотя и является эффективной, рекомендуется только как крайняя мера, поскольку она в десять раз повышает риск развития острого миелогенного лейкоза.
Реабилитационная терапия имеет важное значение. Хороший сон и прогулки вместе с физическими упражнениями для мышц брюшного пресса и упражнениями для укрепления мышц спины способствуют улучшению осанки. Эти упражнения помогают сохранить гибкость суставов. Дыхательная гимнастика повышает емкость легких, а плаванье служит в качестве ритмической гимнастики. Даже при оптимальном лечении, у некоторых людей развивается ригидность или «анкилоз» позвоночника, но все же такой позвоночник может сохранять свои функции, если ригидность ощущается в вертикальном положении. При этом решающее значение имеет поддерживающая терапия. AS влияет на продолжительность жизни, и люди, у которых наблюдается патологическая потеря осанки и потеря подвижности, часто не могут продолжать лечение.
B. Псориатический артрит
Псориаз представляет собой воспалительное и пролиферативное кожное заболевание, которым страдают 1,5-3% людей. Приблизительно у 20% пациентов с псориазом развивается характерная форма артрита, которая имеет несколько признаков (Gladman, 1992; Jones et al., 1994; Gladman et al., 1995). У некоторых индивидуумов сначала наблюдаются симптомы поражения суставов, однако, у большинства индивидуумов сначала появляется псориаз кожи. Примерно у одной трети пациентов наблюдается одновременное обострение кожного заболевания и заболевания суставов (Gladman et al., 1987), и при этом наблюдается топографическая взаимосвязь между поражениями ногтей и поражением дистальных суставов между фалангами (Jones et al., 1994; Wright, 1956). Хотя воспалительные процессы, которые ассоциируются с кожными болезнями, болезнями ногтей и заболеваниями суставов, остаются слабовыраженными, однако, они осложняют иммуно-опосредуемые патологии.
Псориатический артрит (PsA) представляет собой хроническую воспалительную артропатию, характеризующуюся наличием артрита и псориаза, и в 1964 году оно было классифицировано как патологическое состояние, отличающееся от ревматоидного артрита (RA) (Blumberg et al., 1964). Последующие исследования показали, что PsA имеет генетические, патогенные и клинические признаки, аналогичные признакам других спондилоартропатий (SpA), то есть он принадлежит к группе заболеваний, которые включают анкилозирующий спондилит, реактивный артрит и энтеропатический артрит (Wright, 1979). Следует отметить, что тот факт, что PsA принадлежит к группе SpA, недавно получил новое подтверждение по результатам исследования, которое продемонстрировало, что при этих заболеваниях, включая PsA, наблюдается обширный энтезит, который не наблюдается при RA (McGonagle et al., 1999; McGonagle et al., 1998). Более конкретно, было высказано предположение, что энтезит представляет собой один из самых ранних симптомов, наблюдаемых при SpA и приводящих к ремоделированию кости и к анкилозу позвоночника, а также к синовиту суставов, в том случае, если воспаленный энтез находится рядом с периферическими суставами. Однако взаимосвязь между энтезитом и клиническими проявлениями PsA, в основном, остается неясной, поскольку при PsA могут наблюдаться едва заметные гетерогенные признаки воспаления суставов с различной степенью тяжести (Marsal et al., 1999; Salvarani et al., 1998). Таким образом, другие факторы должны быть оценены с учетом различных признаков PsA, лишь немногие из которых были идентифицированы (такие как экспрессия молекулы HLA-B27, которая в значительной степени ассоциируется с заболеванием позвоночника). А поэтому, идентификация проявлений заболевания, соответствующих конкретным механизмам патогенеза, представляет определенные трудности, а это означает, что лечение такого состояния остается, главным образом, эмпирическим.
Изучение семейного анамнеза позволяет предположить о генетическом вкладе в развитие PsA (Moll & Wright, 1973). Считается, что другие хронические воспалительные формы артрита, такие как анкилозирующий спондилит и ревматоидный артрит, имеет сложную генетическую природу. Однако генетический компонент PsA трудно поддается оценке по ряду причин. Имеются очевидные данные о генетической предрасположенности к самому псориазу, которая может маскировать генетические факторы, играющие важную роль в развитии PsA. Хотя большинство специалистов приписывают PsA к отдельной группе заболеваний, однако, при этом существует мнение о его фенотипическом перекрывании с ревматоидным артритом и анкилозирующим спондилитом. Кроме того, сам PsA не является гомогенным состоянием и, как предполагается, он может быть подразделен на различные подгруппы. И хотя не все эти сопутствующие факторы были идентифицированы в современных исследованиях, однако авторы настоящего изобретения сконцентрировали свое внимание на исследовании генов-кандидатов у трех широких категорий пациентов с PsA, которые представляют весь спектр данного заболевания.
Полиморфизм в промоторной области TNF-α представляет особый интерес, поскольку он может влиять на уровни секреции TNF-α (Jacob et al., 1990; Bendzen et al., 1988). В литературе имеются сообщения о присутствии повышенных количеств TNF-α в коже, пораженной псориазом (Ettehadi et al., 1994), и в синовиальной жидкости (Partsch et al., 1997).
Недавно проведенные испытания указывали на положительный эффект лечения PsA (Mease et al., 2000) и анкилозирующего спондилита (Brandt et al., 2000) анти-TNF антителами. Кроме того, локус для TNF-α остается в области МНС класса III, а поэтому можно говорить о более тесной взаимосвязи PsA с этой областью, чем с фланкирующими областями класса I и класса II. Причем у всех групп пациентов с PsA согласно изобретению наблюдалась относительно слабая взаимосвязь с аллелями TNF-α. Частота встречаемости редкого аллеля TNF-α-238А была выше у группы пациентов с периферическим полиартритом, а у пациентов со спондилитом такой аллель отсутствовал, хотя это можно объяснить неравновесием по сцеплению HLA-Cw*0602. При этом неясно, ассоциируются ли функциональные осложнения с полиморфизмом в аллеле TNF-α-238А или нет (Pociot et al., 1995). Тем не менее, возможно, что характер артрита, который развивается у пациентов с псориазом, может быть прямо или опосредованно ассоциирован с этим конкретным аллелем.
Hohler et al. (1997) обнаружили увеличение частоты встречаемости аллеля TNF-α-238А у пациентов с PsA, а также у юношей, у которых наблюдается начальная стадия развития псориаза. Взаимосвязь аллеля TNF-α-238А с началом развития псориаза и PsA у юношей была более высокой, чем взаимосвязь этих заболеваний с HLA-Cw6. Аналогичным образом, в исследовании, проведенном авторами настоящего изобретения, была обнаружена тесная взаимосвязь между развитием юношеского псориаза и наличием обоих аллелей HLA-Cw*0602 и TNF-α-238А, хотя, в данном случае, какая-либо взаимосвязь между наличием этих аллелей и возрастом, в котором происходит развитие псориаза, не наблюдалась. В исследованиях, проведенных авторами настоящего изобретения, все пациенты с PsA, которые имели по меньшей мере один аллель TNF-α-238А, были HLA-Cw6-позитивными, что еще раз подчеркивает тесную взаимосвязь между этими аллелями при PsA. Однако в противоположность исследованиям, которые были проведены Hohler и сотрудниками (1997), и которые объясняют тесное сцепление с аллелем HLA-Cw*0602, встречаемость аллеля TNF-α-238А была повышенной у пациентов с периферическим артритом. Также интересно отметить, что в отдельном исследовании анкилозирующего спондилита, у той же самой группы, у которой были обнаружены редкие аллели TNF-α-308А и -238А, наблюдался протективный эффект в отношении развития спондилита (Hohler et al., 1998).
C. Реактивный артрит
При реактивном артрите (ReA), механизм поражения суставов пока неясен, но возможно, что решающую роль в таком поражении играют цитокины. Как сообщалось в литературе, преобладающим профилем Th1 являются высокие уровни интерферона-гамма (IFN-γ) и низкие уровни интерлейкина-4 (IL-4) (Lahesmaa et al., 1992; Schlaak et al., 1992; Simon et al., 1993; Schlaak et al., 1996; Kotake et al., 1999; Ribbens et al., 2000), но некоторые исследования показали, что у пациентов с реактивным артритом по сравнению с пациентами, страдающим ревматоидным артритом (RA), наблюдается относительное преобладание IL-4 и IL-10 и относительно низкий уровень IFN-γ и фактора некроза опухоли альфа (TNF-α) в синовиальной оболочке (Simon et al., 1994; Yin et al., 1999) и в синовиальной жидкости (СЖ) (Yin et al., 1999; Yin et al., 1997). Также сообщалось, что у пациентов с реактивным артритом, по сравнению с пациентами с RA, наблюдается более низкий уровень секреции TNF-α после ex vivo стимуляции мононуклеарных клеток периферической крови (PBMS) (Braun et al., 1999).
Было подтверждено, что для клиренса бактерий, ассоциированных с реактивным артритом, требуется продуцирование соответствующих уровней IFN-γ и TNF-α, тогда как IL-10 действует по механизму подавления этих ответов (Autenrieth et al., 1994; Sieper & Braun, 1995). IL-10 представляет собой регуляторный цитокин, который ингибирует синтез IL-12 и IFN-γ, активированный макрофагами (de Waal et al., 1991; Hart et al., 1995; Chomarat et al., 1995), и синтез IFN-γ, активированный T-клетками (Macatonia et al., 1993).
D. Энтеропатический артрит
Энтеропатический артрит (EA) развивается вместе воспалительным заболеванием кишечника (IBD), таким как болезнь Крона или язвенный колит. Он также негативно влияет на суставы позвоночника и суставы крестцово-подвздошной области. Энтеропатический артрит поражает периферические суставы, а обычно, нижние конечности, такие как колени или лодыжки. Энтеропатический артрит обычно поражает только несколько или ограниченное число суставов и может сопутствовать заболеванию кишечника. Это наблюдается приблизительно у 11% пациентов с язвенным колитом и у 21% пациентов с болезнью Крона. Синовит обычно является самокупирующимся и недеформирующим.
Энтеропатические артропатии включают ряд ревматологических состояний, которые ассоциируются с патологиями ЖКТ. Такими состояниями являются реактивный (то есть, ассоциированный с инфекцией) артрит, вызываемый бактериями (например, Shigella, Salmonella, Campylobacter, видами Yersinia, Clostridium difficile), паразитами (например, Strongyloides stercoralis, Taenia saginata, Giardia lamblia, Ascaris lumbricoides, видами Cryptosporidium), и спондилоартропатии, ассоциированные с воспалительными заболеваниями кишечника (IBD). Другими состояниями и расстройствами являются подвздошно-тощекишечный обходной анастомоз (на тощей кишке), артриты, глютеновая болезнь, болезнь Уиппла и коллагенозный колит.
Этиология энтеропатических артропатий пока неясна. Воспаление желудочно-кишечного тракта может приводить к повышению его проницаемости и, тем самым, к абсорбции антигенного материала, включая бактериальные антигены. Эти артрогенные антигены могут затем локализоваться в скелетно-мышечных тканях (включая энтезис и синовий), что может приводить к вырабатыванию воспалительного ответа. Альтернативно, аутоиммунный ответ может индуцироваться посредством молекулярной мимикрии, при которой факторы, продуцирующиеся в результате иммунного ответа хозяина на эти антигены, перекрестно реагируют с аутоантигенами в синовии.
Особый интерес представляет тесная взаимосвязь между реактивным артритом и HLA-B27, то есть молекулой HLA класса I. Потенциально артрогенный и происходящий от бактерий антигенный пептид может входить в антигенпрезентирующую бороздку молекулы B27, что приводит к вырабатыванию CD8+-Т-клеточного ответа. У HLA-B27-трансгенных крыс развиваются признаки энтеропатической артропатии, ассоциированной с артритом и воспалением кишечника.
E. Язвенный колит
Язвенный колит представляет собой заболевание, вызывающее воспаление и повреждение тканей, называемые язвами, в выстилке толстого кишечника. Воспаление обычно возникает в прямой кишке и в нижнем отделе толстой кишки, но может также поражаться вся толстая кишка. Язвенный колит редко поражает тонкий кишечник, за исключением ее конечного участка, называемого терминальным отделом подвздошной кишки. Язвенный колит может также называться колитом или проктитом. Воспаление кишечника приводит к его частому опорожнению, называемому диареей. Язвы обычно образуются на участках, где воспаление приводит к уничтожению клеток, выстилающих толстую кишку, а поэтому язвы кровоточат и образуют гной.
Язвенный колит представляет собой воспалительное заболевание кишечника (IBD), которое является общим названием заболеваний, вызывающих воспаление тонкой и толстой кишки. Язвенный колит трудно диагностируется, поскольку его симптомы совпадают с симптомами других расстройств кишечника и IBD другого типа, например, болезни Крона. Болезнь Крона отличается от язвенного колита тем, что она вызывает воспаление в более глубоком отделе стенок тонкой кишки. Кроме того, болезнь Крона обычно наблюдается в тонком кишечнике, хотя она может также поражать ротовую полость, пищевод, желудок, двенадцатиперстную кишку, толстый кишечник, аппендикс и задний проход.
Язвенный колит может наблюдаться у людей любого возраста, но преимущественно, он встречается у людей в возрасте от 15 до 30 лет или, но менее часто, в возрасте от 50 до 70 лет. Такое заболевание иногда развивается у детей и юношей. Язвенный колит в равной степени поражает мужчин и женщин и часто наблюдается у членов одной и той же семьи. Существует множество теорий о причинах возникновения язвенного колита, но ни одна из них не нашла своего подтверждения. Самая распространенная гипотеза состоит в том, что иммунная система организма реагирует на вирус или бактерию путем индуцирования воспалительной реакции в стенках тонкого кишечника. У людей с язвенным колитом наблюдаются патологии иммунной системы, но врачи не знают, являются ли такие патологии причиной или следствием. Язвенный колит не вызывается эмоциональным дистрессом или чувствительностью к пище или к некоторым пищевым продуктам, но у некоторых людей эти факторы могут инициировать развитие таких симптомов.
Наиболее распространенными симптомами язвенного колита являются боли в брюшной полости и кровянистая диарея. Пациенты могут также ощущать усталость, и у них может наблюдаться похудание, потеря аппетита, кровотечение из прямой кишки, потеря физиологических жидкостей и снижение уровня микроэлементов. Почти у половины пациентов эти симптомы слабо выражены. У других пациентов часто наблюдается повышенная температура, кровянистая диарея, тошнота и сильные судороги в брюшной полости. Язвенный колит может также вызывать такие заболевания, как артрит, воспаление глаз, болезнь печени (гепатит, цирроз и первичный склерозирующий холангит), остеопороз, покраснение кожи и анемия. Однако никто не может с уверенностью сказать, почему указанные осложнения возникают на участках, расположенных далеко за пределами толстой кишки. Ученые считают, что такие осложнения могут возникать в том случае, когда иммунная система индуцирует воспаление в других частях организма. Некоторые из этих осложнений исчезают при излечивании колита.
Для диагностики язвенного колита может потребоваться тщательное физическое обследование и проведение ряда анализов. С помощью анализа крови можно выявить анемию, которая часто указывает на наличие кровотечения в толстой или в прямой кишке. С помощью анализа крови можно также выявить большое число лейкоцитов в крови, что является признаком воспалительного процесса в каком-либо участке организма. Путем анализа кала, врач может установить наличие кровотечения или инфицирования в толстой или прямой кишке. Врач может провести колоноскопию или сигмоидоскопию. Для проведения любого теста, врач вставляет эндоскоп, то есть длинную гибкую и освещаемую трубку, соединенную с компьютером и ТВ-монитором, в анальное отверстие для осмотра внутренней части толстой и прямой кишки. Таким образом, врач может увидеть любое воспаление, кровотечение или язвы на стенках толстой кишки. Во время обследования врач может сделать биопсию, которая заключается во взятии образца ткани из выстилки толстой кишки для его последующего наблюдения под микроскопом. При этом может также потребоваться рентгенография толстой кишки с использованием бариевой клизмы. Эта процедура заключается в заполнении толстой кишки барием, белым меловым раствором. Барий дает белый цвет на рентгеновской пленке, что позволяет врачу получить ясную картину толстой кишки, включая наличие каких-либо язв или других патологий, которые могут присутствовать в толстой кишке.
Успех лечения язвенного колита зависит от тяжести заболевания. Большинству людей назначают медикаментозное лечение. В тяжелых случаях пациенту может быть проведена хирургическая операция по удалению пораженной толстой кишки. Хирургическая операция является единственным средством лечения язвенного колита. У некоторых людей, у которых появление симптомов вызывается приемом пищи определенного типа, эти симптомы могут быть устранены путем отказа от приема пищи, которая негативно воздействует на тонкий кишечник, а именно, исключительно сезонной пищи, сырых фруктов и овощей или молочного сахара (лактозы). У людей могут наблюдаться различные симптомы язвенного колита, а поэтому лечение каждого человека должно быть индивидуальным. Важную роль играют эмоциональные и психологические факторы. У некоторых людей наблюдаются ремиссии, то есть периоды исчезновения симптомов, продолжающиеся в течение нескольких месяцев или даже лет. Однако у большинства пациентов такие симптомы возникают снова. При изменении картины заболевания не всегда можно сказать, помогло данное лечение или нет. Некоторым людям с язвенным колитом может быть проведено медикаментозное лечение в течение определенного периода времени, при этом врач должен регулярно навещать больного для наблюдения за его состоянием.
Целью терапии является индуцирование и поддержание состояния пациента в период ремиссии, а также улучшение качества жизни людей, страдающих язвенным колитом. При этом могут применяться лекарственные средства нескольких типов:
- Аминосалицилаты - лекарственные средства, которые содержат 5-аминосалициловую кислоту (5-ASA) и ослабляют воспаление. Сульфасалазин представляет собой комбинацию сульфапиридина и 5-ASA и применяется для индуцирования и поддержания ремиссии. Компонент сульфапиридин обеспечивает доставку противовоспалительного 5-ASA в тонкий кишечник. Однако сульфапиридин может вызывать побочные эффекты, такие как тошнота, рвота, изжога, диарея и головная боль. Другие 5-ASA-содержащие агенты, такие как олсалазин, мезаламин и балсалазид, имеют различные носители, дают более слабые побочные эффекты и могут назначаться людям, которые не могут принимать сульфасалазин. 5-ASA принимают перорально, либо вводят через клизму или в виде суппозиториев, в зависимости от участка воспаления толстой кишки. Лечение этими лекарственными средствами первого ряда назначают большинству людей с язвенным колитом слабой или умеренной тяжести.
- Контикостероиды, такие как преднизон и гидрокортизон, также снижают степень воспаления. Эти средства могут быть назначены людям, страдающим умеренным или тяжелым язвенным колитом, или людям, у которых не вырабатывается ответ на лечение лекарственными средствами 5-ASA. Кортикостероиды, также известные как стероиды, могут быть введены перорально, внутривенно, через клизму или в виде суппозиториев, в зависимости от участка воспаления. Такие лекарственные средства могут вызвать побочные эффекты, такие как увеличение массы тела, акнэ, появление волос на лице, гипертензия, изменение настроения и повышенный риск инфекционного заражения. По этой причине они не рекомендуются для длительного применения.
- Иммуномодуляторы, такие как азатиоприн и 6-меркаптопурин (6-MP), способствуют ослаблению воспаления посредством их воздействия на иммунную систему. Они могут быть назначены пациентам, у которых не вырабатывается ответ на 5-ASA или на кортикостероиды, или пациентам, у которых вырабатывается зависимость от кортикостероидов. Однако иммуномодуляторы обладают медленным действием, и может пройти 6 месяцев до получения нужного эффекта. Пациентов, принимающих такие лекарственные средства, обследуют на наличие осложнений, включая панкреатит и гепатит, на снижение числа лейкоцитов и на повышенный риск инфекционного заражения. Циклоспорин А может быть использован в комбинации с 6-MP или с азатиоприном для лечения активного тяжелого язвенного колита у людей, у которых не вырабатывается ответ на внутривенно вводимые кортикостероиды.
Для снятия напряжения у пациента или для ослабления болей, снижения степени диареи или устранения инфекций, этому пациенту могут быть назначены и другие лекарственные средства.
В некоторых случаях, когда симптомы являются достаточно тяжелыми, пациент должен быть госпитализирован. Так, например, у индивидуума может наблюдаться сильное кровотечение или сильная диарея, которые могут вызывать обезвоживание. В таких случаях врач может попытаться устранить диарею, а также потерю крови, физиологической жидкости и минеральных солей. Данный пациент может нуждаться в специальной диете, во введении питательных веществ через вену, в медикаментозном лечении, а иногда, в хирургической операции.
Примерно 25-40% пациентов с язвенным колитом должны быть, в конечном счете, подвергнуты удалению толстой кишки по причине сильного кровотечения, тяжести состояния, разрыва толстой кишки или риска развития рака. Иногда врач может рекомендовать удаление толстой кишки в случае, если медикаментозное лечение не дает результатов, или если побочные эффекты, вызываемые кортикостероидами или другими лекарственными средствами, представляют угрозу для здоровья пациента. Хирургическую операцию по удалению толстой и прямой кишки, известную как проктоколэктомия, проводят в соответствии с одной из нижеследующих процедур:
- Илеостомия, при которой хирург создает небольшое отверстие в брюшной полости, называемое стомой, и подсоединяет к нему конец тонкого кишечника, называемого подвздошной кишкой. Экскременты будут проходить через тонкую кишку и выходить из организма через стому. Эта стома имеет примерно размер монеты в 25 центов и обычно локализована в нижней правой части брюшины возле талии. Поверх этого отверстия надевают мешочек для сбора экскрементов, который опустошается самим пациентом по мере необходимости.
- Илеоанальный анастомоз или операция низведения подвздошной кишки, которая позволяет сохранить нормальную перистальтику кишечника у пациента благодаря сохранению у него части заднего прохода. При этой операции хирург удаляет пораженную часть толстой кишки и внутреннюю часть прямой кишки, но оставляет внешние мышцы прямой кишки. Затем хирург соединяет подвздошную кишку с внутренней частью прямой кишки и заднего прохода с созданием кармана. Экскременты собираются в этом кармане и проходят через задний проход обычным способом. Выделения из кишечника могут быть более частыми и более водянистыми, чем это наблюдалось до операции. Возможным осложнением может быть воспаление кармана (pouchitis).
Не каждая операция может быть показана любому пациенту. Выбор хирургической операции зависит от тяжести заболевания и от потребностей пациента, прогноза и стиля жизни пациента. Люди, решающиеся на такую операцию, должны получить как можно больше информации от своего лечащего врача, от медсестер, ухаживающих за пациентами после хирургической операции по удалению толстой кишки (специалистов по энтеростомии), и от других пациентов, подвергавшихся такой хирургической операции. Организация по защите интересов пациентов может направить данного пациента в группу поддержки и обеспечить ему доступ к другим источникам информации.
Большинство пациентов с язвенным колитом не нуждаются в хирургической операции. Однако, если такая операция все же необходима, то некоторые люди находят утешение в уверенности в том, что после проведения хирургической операции они смогут излечиться от колита и вернуться к нормальной активной жизни.
F. Болезнь Крона
Другим расстройством, для лечения которого требуется подавление иммунной системы, является болезнь Крона. Симптомами болезни Крона является воспаление тонкого кишечника, развитие стеноза тонкого кишечника и появление свищей, а также невропатия, которая часто сопровождается этими симптомами. В таких случаях обычно назначают противовоспалительные лекарственные средства, такие как 5-аминосалицилаты (например, мезаламин) или кортикостероиды, но такие средства не всегда являются эффективными (см. публикацию Botoman et al., 1998). Подавление иммунной системы под действием циклоспорина иногда может иногда давать благоприятный эффект у пациентов, у которых наблюдается резистентность или невосприимчивость к кортикостероидам (Brynskov et al., 1989).
Тем не менее, в конечном счете, 90% пациентам назначают соответствующую хирургическую операцию, а 50% пациентов назначают операцию по резекции толстой кишки (Leiper et al., 1998; Makowiec et al., 1998). После операции часто возникают рецидивы, причем 50% пациентов также нуждаются в повторном проведении операции через 5 лет (Leiper et al., 1998; Besnard et al., 1998).
Одной из гипотез относительно этиологии болезни Крона является недостаточность барьерного слоя слизистой тонкой кишки, которая возникает, возможно, из-за генетической нагрузки и внешних факторов (например, курения); и недостаточность воздействия иммунной системы на антигены, присутствующие в просвете тонкого кишечника, включая бактериальные и пищевые антигены (например, Soderholm et al., 1999; Hollander et al., 1986; Hollander, 1992). Другая гипотеза заключается в том, что персистентное инфицирование тонкого кишечника патогенами, такими как Mycobacterium paratuberculosis, Listeria monocytogenes, модифицированная Escherichia coli или парамиксовирус, стимулирует иммунный ответ; или альтернативно, симптомы этого заболевания возникают в результате нарушения регуляции иммунного ответа на повсеместно встречающиеся антигены, такие как обычная микрофлора тонкого кишечника, а также метаболиты и токсины, которые она продуцирует (Sartor, 1997). Было обнаружено, что присутствие в сыворотке антител, а именно, IgA и IgG, направленных против Saccharomyces cerevisiae (ASCA), позволяет с высокой степенью вероятности диагностировать болезнь Крона у детей (Ruemmele et al., 1998; Hoffenberg et al., 1999).
При болезни Крона нарушение регуляции иммунного ответа смещается в сторону клеточно-опосредуемой иммунной патологии (Murch, 1998). Однако применение иммунодепрессантов, таких как циклоспорин, такролимус и мезаламин для лечения случаев резистентной к кортикостероидам болезни Крона, не всегда давало успех (Brynskov et al., 1989; Fellerman et al., 1998).
Предпринятые недавно усилия по разработке диагностических и терапевтических средств для лечения болезни Крона были сосредоточены на центральной роли цитокинов в развитии такого заболевания (Schreiber, 1998; van Hogezand & Verspaget, 1998). Цитокины представляют собой небольшие секретируемые белки или факторы (5-20 кДа), которые обладают специфическим действием на межклеточные взаимодействия, внутриклеточные взаимодействия или на поведение других клеток. Цитокины продуцируются лимфоцитами, а в частности, TH1- и TH2-лимфоцитами, моноцитами, макрофагами тонкого кишечника, гранулоцитами, эпителиальными клетками и фибробластами (см. обзор Rogler & Andus, 1998; Galley & Webster, 1996). Некоторые цитокины обладают провоспалительным действием (например, TNF-α, IL-1(α и β), IL-6, IL-8, IL-12 или лейкоз-ингибирующий фактор или LIF); а другие цитокины обладают противовоспалительным действием (например, антагонист рецептора IL-1, IL-4, IL-10, IL-11 и TGF-β). Однако, при некоторых воспалительных состояниях, действие этих цитокинов может быть перекрывающимся и функционально избыточным.
При активных формах болезни Крона, повышенные концентрации TNF-α и IL-6 секретируются в кровоток, а TNF-α, IL-1, IL-6 и IL-8 продуцируются локально в избыточном количестве клетками слизистой оболочки (id.; Funakoshi et al., 1998). Такие цитокины могут обладать очень широким спектром действия на физиологические системы, включая остеогенез, гемопоэз, а также функции печени, щитовидной железы и нейропсихические функции. Кроме того, у пациентов с болезнью Крона наблюдается дисбаланс отношений IL-lβ/IL-lra в пользу провоспалительных цитокинов IL-lβ (см. Rogler & Andus, 1998; Saiki et al., 1998; Dionne et al., 1998; Kuboyama, 1998). Одно из проведенных исследований позволяет предположить, что профили цитокинов в образцах кала могут служить ценным диагностическим средством для лечения болезни Крона (Saiki et al., 1998).
Предложенным методом лечения болезни Крона является применение различных антагонистов цитокинов (например, IL-1ra), ингибиторов (например, IL-lβ-конвертирующих ферментов и антиоксидантов) и антител против цитокинов (Rogler and Andus, 1998; van Hogezand & Verspaget, 1998; Reimund et al., 1998; Lugering et al., 1998; McAlindon et al., 1998). В частности, определенный успех в лечении болезни Крона был достигнут при применении моноклональных антител против TNF-α (Targan et al., 1997; Stack et al., 1997; van Dullemen et al., 1995).
Другой подход к разработке способа лечения болезни Крона был сконцентрирован по меньшей мере на частичном удалении бактериального сообщества, которое может стимулировать воспалительный ответ, и на замене такого сообщества сообществом непатогенных бактерий. Так, например, в патенте США 5599795 описан способ предупреждения и лечения пациентов с болезнью Крона. Этот способ направлен на стерилизацию кишечного тракта по меньшей мере одним антибиотиком и по меньшей мере одним противогрибковым средством в целях уничтожения имеющейся флоры и ее замены другими выбранными и хорошо охарактеризованными бактериями, взятыми у здоровых людей. В публикации Borody описан метод лечения болезни Крона путем по меньшей мере частичного удаления существующей микрофлоры тонкого кишечника посредством лаважа и замены имеющейся микрофлоры новым бактериальным сообществом, вводимым с использованием фекального инокулята, взятого у донора, обследованного на наличие заболевания, или с использованием композиции, содержащей Bacteroides и некоторые виды Escherichia coli (патент США 5443826). Однако причина возникновения болезни Крона, которая должна быть диагностирована и подвергнута лечению, пока не ясна.
G. Ревматоидный артрит
Этиология RA пока точно не известна, и первые признаки поражения суставов появляются в синовий-выстилающем слое, где происходит пролиферация синовиальных фибробластов и их присоединение к поверхности сустава в его краевой части (Lipsky, 1998). Впоследствии, макрофаги, Т-клетки и другие воспалительные клетки мигрируют в сустав, где они продуцируют ряд медиаторов, включая цитокины, такие как интерлейкин-1 (IL-1), которые вносят свой вклад в хронические осложнения, приводящие к деструкции кости и хряща; и фактор некроза опухоли (TNF-α), который играет определенную роль в воспалении (Dinarello, 1998; Arend & Dayer, 1995; van den Berg, 2001). У пациентов с RA, концентрации IL-1 в плазме значительно выше, чем у здоровых индивидуумов, а это указывает на то, что уровни IL-1 в плазме коррелируют с активностью RA (Eastgate et al., 1988). Кроме того, уровни IL-1 в синовиальной жидкости коррелируют с различными радиографическими и гистологическими признаками RA (Kahle et al., 1992; Rooney et al., 1990).
В нормальных суставах действие этих и других провоспалительных цитокинов уравновешивается действием различных противовоспалительных цитокинов и регуляторных факторов (Burger & Dayer, 1995). Важное значение такого баланса цитокинов становится очевидным на примере пациентов с юношеским RA, у которых наблюдается периодическое повышение температуры в течение одного дня (Prieur et al., 1987). После каждого пика повышения температуры, в сыворотке и в моче этих пациентов обнаруживается фактор, блокирующий действие IL-1. Этот фактор был выделен, клонирован и идентифицирован как антагонист рецептора IL-1 (IL-lra), то есть член семейства генов IL-1 (Hannum et al., 1990). IL-lra, в соответствии со своим названием, представляет собой природный антагонист рецептора, который конкурирует с IL-1 за связывание с рецепторами IL-1 типа 1, что приводит к блокированию действия IL-1 (Arend et al., 1998). 10-100-кратный избыток IL-1ra может оказаться необходимым для эффективного блокирования IL-1, однако синовиальные клетки, выделенные у пациентов с RA, не продуцируют IL-lra в количестве, достаточном для блокирования действия IL-1 (Firestein et al., 1994; Fujikawa et al., 1995).
H. Системная красная волчанка
Этиология аутоиммунных заболеваний, таких как системная красная волчанка пока также не ясна. Системная красная волчанка (SLE) представляет собой аутоиммунное ревматическое заболевание, характеризующееся отложением в тканях аутоантител и иммунных комплексов, приводящих к поражению ткани (Kotzin, 1996). В отличие от аутоиммунных заболеваний, таких как MS и сахарный диабет типа 1, SLE может непосредственно поражать множество системных органов, а ее клинические проявления являются разнообразными и изменчивыми (см. обзор Kotzin & O'Dell, 1995). Так, например, у некоторых пациентов может наблюдаться, главным образом, покраснение кожи и боль в суставах, при этом могут возникать спонтанные ремиссии, при которых требуется лишь незначительное медикаментозное лечение. В других крайних случаях широкого спектра этого заболевания, у пациентов наблюдается тяжелое и прогрессирующее поражение почек, которое требует проведение лечения высокими дозами стероидов и цитотоксических лекарственных средств, таких как циклофосфамид (Kotzin, 1996).
Серологическим признаком SLE и первичным диагностически доступным критерием является повышение сывороточных уровней антител IgG против компонентов клеточного ядра, таких как двухцепочечная ДНК (дцДНК), одноцепочечная ДНК (оцДНК) и хроматин. Из этих аутоантител антитела IgG против дцДНК играют главную роль в развитии волчаночного гломерулонефрита (GN) (Hahn & Tsao, 1993; Ohnishi et al., 1994). Гломерулонефрит представляет собой тяжелое состояние, при котором капиллярные стенки клеток почечной крови, очищающие клубочки, становятся утолщенными в результате разрастания со стороны эпителия гломерулярной базальной мембраны. Такое заболевание часто является хроническим и прогрессирующим и, в конечном счете, может приводить к почечной недостаточности.
Механизм, посредством которого индуцируются аутоантитела при этих аутоиммунных заболеваниях, остается пока неясным. Если причина системной красной волчанки (SLE), которая должна быть диагностирована и/или подвергнута лечению, не известна, то лечение может быть направлено лишь на подавление иммунных ответов, например, с использованием макролидных антибиотиков, а не на причину, лежащую в основе этого заболевания (см., например, патент США 4843092).
I. Синдром раздраженного кишечника
Синдром раздраженного кишечника (IBS) представляет собой функциональное расстройство, характеризующееся болями в области брюшины и нарушением работы кишечника. Этот синдром может проявляться в молодости и может ассоциироваться со значительным снижением работоспособности. Такой синдром не является однородным расстройством. Точнее, существуют подтипы IBS, которые были описаны по их преобладающим симптомам: диареи, запорам или болям. При отсутствии «тревожных» симптомов, таких как повышенная температура, похудание и кровотечение в области желудочно-кишечного тракта, необходимо ограниченное обследование больного. После установления диагноза IBS может быть назначено комплексное лечение, которое может эффективно ослаблять тяжесть симптомов. IBS представляет собой широко распространенное расстройство, хотя частота его возникновения варьирует. В общих чертах, в США заболеванием IBS страдает примерно 15% взрослого населения, и у женщин такое заболевание возникает примерно в три раза чаще, чем у мужчин (Jailwala et al., 2000).
Каждый год врачами регистрируется от 2,4 миллиона до 3,5 миллионов визитов к врачу пациентов с IBS. Это заболевание является не только самым распространенным состоянием, регистрируемым гастроэнтерологами, но также одним из самых распространенных желудочно-кишечных заболеваний, регистрируемых врачами общей практики (Everhart et al., 1991; Sandler, 1990).
IBS также представляет собой расстройство, приносящее значительные экономические убытки. По сравнению с индивидуумами, у которых отсутствуют симптомы расстройства кишечника, индивидуумы с IBS имеют в три раза меньше рабочих дней и, по имеющимся данным, часто не в состоянии работать. (Drossman et al., 1993; Drossman et al., 1997). Кроме того, пациенты с IBS расходуют на медикаменты на сотни долларов больше, чем индивидуумы, не страдающие расстройствами кишечника (Talley et al., 1995).
У пациентов с IBS не наблюдается каких-либо конкретных патологий, связанных с обострениями, проявляющимися абдоминальными болями и нарушениями дефекации, и последующими ремиссиями. Была высказана теория, которая позволяет предположить, что в основе IBS лежит нарушение регуляции оси «головной мозг-кишечник» на различных уровнях. Такое заболевание осложняется нарушением моторики, висцеральной гиперчувствительностью, аномальной модуляцией центральной нервной системы (ЦНС) и инфекцией. Кроме того, важную модицифирующую роль играют психосоциальные факторы. Нарушение моторики тонкого кишечника долгое время рассматривалось как фактор, участвующий в патогенезе IBS. Было показано, что у пациентов с IBS, при котором преобладает диарея, время прохождения пищи через тонкий кишечник после ее употребления меньше, чем у пациентов, у которых преобладают запоры или боли (Cann et al., 1983).
Обследование тонкого кишечника в период голодания показало, что у пациентов с IBS наблюдаются дискретные групповые сокращения и пролонгированные интенсивные сокращения кишечника (Kellow & Phillips, 1987). У таких пациентов чаще возникают боли, связанные с нерегулярными сокращениями, чем у здоровых индивидуумов (Kellow & Phillips, 1987; Horwitz & Fisher, 2001)
Такие нарушения моторики не являются составляющими полного комплекса симптомов у пациентов с IBS, и у большинства таких пациентов, фактически, не наблюдается рассматриваемых патологий (Rothstein, 2000). Пациенты с IBS обладают повышенной чувствительностью к висцеральной боли. Исследования, включающие баллонное расширение ректосигмовидной толстой кишки, показали, что у пациентов с IBS боли и метеоризм, при увеличении давления и объема, были гораздо ниже, чем у контрольных индивидуумов (Whitehead et al., 1990). У таких пациентов сохраняется обычное ощущение соматических раздражителей.
Для объяснения этого феномена было предложено множество теорий. Так, например, рецепторы во внутренних органах могут иметь повышенную чувствительность в ответ на расширение или на содержимое внутреннего просвета органа. Нейроны в заднем роге спинного мозга могут иметь повышенную возбудимость. Кроме того, могут возникать изменения в ЦНС, ответственной за вырабатывание определенны ощущений (Drossman et al., 1997). Функциональные исследования, проводимые недавно путем визуализации методом магнитного резонанса, показали, что у пациентов с IBS, по сравнению с контрольными индивидуумами, наблюдается повышение активации коры головного мозга в области переднего пояса, то есть важного болевого центра, в ответ на болезненные раздражители прямой кишки (Mertz et al., 2000).
Появляется все больше данных, которые позволяют предположить о наличии взаимосвязи между инфекционным энтеритом и последующим развитием IBS. Определенную роль в этом процессе могут играть воспалительные цитокины. При обследовании пациентов, в анамнезе которых имеется подтвержденный бактериальный гастроэнтерит (Neal et al., 1997), было выявлено, что у 25% пациентов наблюдается персистентное нарушение дефекации. Персистентность этих симптомов может быть обусловлена психологическим стрессом во время острой инфекции (Gwee et al., 1999).
Недавно полученные данные позволяют предположить, что избыточное размножение бактерий в тонком кишечнике может играть определенную роль в развитии симптомов IBS. В одном из исследований (Pimentel et al., 2000), 157 человек (78%) из 202 пациентов с IBS, которым был проведен тест на поглощение водорода, обнаруживали положительный результат на размножение бактерий. Из 47 индивидуумов, которым было проведено общее обследование, 25 человек (53%) обнаруживали ослабление симптомов (то есть, ослабление абдоминальных болей и диареи) после лечения антибиотиками.
IBS может проявляться рядом симптомов. Однако абдоминальные боли и нарушение дефекации остаются главными признаками IBS. Дискомфорт в области брюшины часто описывается, фактически как судороги, и ощущается в левом нижнем квадранте брюшины, хотя тяжесть и локализация такого ощущения могут сильно варьировать. У пациентов может наблюдаться диарея, запор или чередующиеся эпизоды диареи и запора. Диарея обычно описывается как необильный жидкий стул, который иногда сопровождается выделением слизи. Пациент может также жаловаться на вздутие живота, частые позывы к дефекации, неполное опорожнение кишечника и метеоризм. Могут также наблюдаться симптомы в верхнем отделе желудочно-кишечного тракта, такие как гастроэзофагальный рефлюкс, диспепсия или тошнота (Lynn & Friedman, 1993).
Персистентность симптомов не является показанием для проведения дополнительных анализов, то есть она является характерным признаком IBS и сама представляет собой ожидаемый симптом данного синдрома. Более обширное диагностическое обследование показано пациентам с ухудшением или изменением симптомов. Показаниями для дополнительного проведения анализов также являются наличие тревожных симптомов, начало появления симптомов после 50 лет и наличие в анамнезе рака толстой кишки. Обследование может включать колоноскопию, компьютерную томографию брюшной полости и таза, и исследование тонкой или толстой кишки с использованием бария.
J. Ювенильный ревматоидный артрит
Термин «ювенильный ревматоидный артрит» (JRA) означает наиболее распространенную форму артрита у детей, которую относят к семейству заболеваний, характеризующихся хроническим воспалением и гипертрофией синовиальных оболочек. Этот термин совпадает с термином «семейство заболеваний, называемых ювенильным хроническим артритом и/или ювенильным идиопатическим артритом, и распространенных в Европе», но не является его полным синонимом.
Jarvis (1998) и сотрудниками (Arend, 2001) было высказано предположение, что в патогенезе ревматоидного заболевания у взрослых и детей участвуют сложные взаимодействия между природной и адаптивной иммунными системами. Такие сложные взаимодействия создают значительные трудности в выявлении патогенеза данного заболевания.
Природная и адаптивная иммунные системы осуществляют свои функции благодаря действию клеток множества типов, обширному массиву клеточной поверхности и секретируемых белков, и взаимосвязанных сетей положительной и отрицательной обратной связи (Lo et al., 1999). Кроме того, существует независимое мнение, что природная и адаптивная ветви иммунной системы функционально пересекаются (Fearon & Locksley, 1996), а поэтому патологические события, возникающие в этих точках пересечения, вероятно, имеют важное значение для понимания патогенеза некоторых форм хронического артрита у взрослых и детей (Warrington, et al., 2001).
Полиартрит JRA представляет собой другой клинический подтип заболевания, характеризующийся воспалением и синовиальной пролиферацией во множестве суставов (четырех или более), включая мелкие суставы рук (Jarvis, 2002). JRA этого подтипа может иметь тяжелое течение, что обусловлено вовлечением в патологический процесс множества суставов и быстрым прогрессированием этого процесса. По своим клиническим признакам полиартрит JRA не является однородным, и у пациентов с JRA наблюдаются различия в симптомах, а также в таких факторах как возраст, при котором наблюдается начало заболевания, прогноз и терапевтический эффект. Такие различия, по всей вероятности, отражают спектр разнообразия природы иммунной и воспалительной атак, которые могут иметь место при этом заболевании (Jarvis, 1998).
K. Синдром Сьегрена
Первичным синдромом Сьегрена (SS) является хроническое медленно прогрессирующее системное аутоиммунное заболевание, которое встречается, главным образом, у женщин средних лет (отношение заболеваемости у женщин и мужчин составляет 9:1), хотя оно может наблюдаться у людей любого возраста, включая подростков (Jonsson et al., 2002). Это заболевание характеризуется инфильтрацией лимфоцитов и деструкцией экзокринных желез, которые инфильтрируются мононуклеарными клетками, включая CD4+-, CD8+-лимфоциты и B-клетки (Jonsson et al., 2002). Кроме того, у трети пациентов наблюдаются экстрагландулярные (системные) проявления (Jonsson et al., 2001).
Гландулярная инфильтрация лимфоцитов представляет собой прогрессирующий процесс (Jonsson et al., 1993), который, если он является интенсивным, может охватывать обширные участки органов. Интересно отметить, что гландулярные инфильтраты у некоторых пациентов очень напоминают эктопические лимфоидные микроструктуры в слюнных железах (называемые эктопическими зародышевыми центрами) (Salomonsson et al., 2002; Xanthou & Polihronis, 2001). При SS эктопические зародышевые центры (ЗЦ) определяют как T- и В-клеточные агрегаты пролиферирующих клеток с образованием сети фолликулярных дендритных клеток и активированных эндотелиальных клеток. Такие ЗЦ-подобные структуры, образующиеся в ткани-мишени, также обладают функциональными свойствами, заключающимися в продуцировании аутоантител (анти-Ro/SSA и анти-La/SSB аутоантител)(Salomonsson &, Jonsson, 2003).
При других системных аутоиммунных заболеваниях, таких как RA, были идентифицированы факторы, играющие важную роль в образовании эктопических ЗЦ. Было показано, что ревматоидные синовиальные ткани, содержащие ЗЦ, продуцируют хемокины CXCLl3, CCL21 и лимфотоксин (LT)-β (детектируемые на В-клетках фолликулярного центра и зоны коры головного мозга). Мультидисперсный регрессионный анализ этих аналитов позволил идентифицировать CXCL13 и LT-β как одиночные цитокины, что дало возможность сделать предположение о наличии ЗЦ при ревматоидном синовите (Weyand & Goronzy, 2003). Недавно было показано, что CXCLl3 и CXCR5 в слюнных железах играют важную роль в воспалительном процессе посредством рекрутинга B- и T-клеток и, тем самым, вносят определенный вклад в лимфоидный неогенез и образование эктопических ЗЦ при SS (Salomonsson & Larsson, 2002).
L. Артрит на начальной стадии
На ранней стадии течения заболевания клинические проявления различных воспалительных артропатий являются одинаковыми. Поэтому часто бывает трудно дифференцировать пациентов с риском развития тяжелого и персистентного синовита, приводящего к эрозивному повреждению суставов, от пациентов с артритом, который носит более самокупирующийся характер. Такая дифференциация имеет важное значение для назначения соответствующей целевой терапии, для лечения прогрессирующего заболевания с эрозивными повреждениями и для предотвращения необязательно возникающей токсичности у пациентов с заболеванием, имеющим большую тенденцию к самокупированию. Современные клинические критерии для диагностики эрозивных артропатий, таких как ревматоидный артрит (RA), являются менее эффективными на ранней стадии заболевания, и традиционные показатели активности заболевания, такие как число суставов, вовлеченных в данный процесс, и ответ в период острой фазы заболевания, пока не позволяют адекватно идентифицировать пациентов с точки зрения плохого прогноза (Harrison & Symmons et al., 1998). Параметры, отражающие патологические процессы, протекающие в синовии, имеют, по всей вероятности, очень важное прогностическое значение.
Предпринятые недавно попытки идентифицировать прогностические факторы плохого исхода заболевания при воспалительном артрите на ранней стадии выявили присутствие RA-специфических аутоантител, а в частности антител, направленных против цитрулин-содержащих пептидов и ассоциирующихся с эрозивным и персистентным заболеванием у групп пациентов с воспалительным артритом на ранней стадии. Исходя из этих данных, для облегчения идентификации анти-ССР антител в сыворотке пациента, был получен циклический цитрулин-содержащий пептид (CCP). При таком подходе было обнаружено, что по присутствию анти-ССР антител, которые являются специфичными и восприимчивыми к RA, можно дифференцировать RA от других артропатий и можно предсказать наличие персистентного эрозивного синовита еще до появления клинических симптомов заболевания (Schellekens et al., 2000). Важно отметить, что анти-ССР антитела часто детектируются в сыворотке за много лет до появления клинических симптомов, что дает основание предположить, что такие антитела могут служить показателем субклинических иммунных ответов (Nielen et al., 2004; Rantapaa-Dahlqvist et al., 2003).
На ранней стадии течения заболевания, клинические проявления различных воспалительных артропатий являются одинаковыми. Поэтому, часто бывает трудно дифференцировать пациентов с риском развития тяжелого и персистентного синовита, который приводит к эрозивному повреждению суставов от пациентов с заболеванием, которое имеет большую тенденцию к самокупированию. Такая дифференциация имеет важное значение для назначения соответствующей целевой терапии, для лечения прогрессирующего заболевания с эрозивными повреждениями и для предотвращения необязательно возникающей токсичности у пациентов с заболеванием, которое имеет большую тенденцию к самокупированию. Современные клинические критерии для диагностики эрозивных артропатий, таких как ревматоидный артрит (RA), являются менее эффективными на ранней стадии развития заболевания, и традиционные показатели активности заболевания, такие как число суставов, вовлеченных в данный патологический процесс, а также ответ на острой фазе заболевания, пока не позволяют адекватно идентифицировать пациентов с точки зрения плохого прогноза (Harrison et al., 1998). Параметры, отражающие патологические процессы, протекающие в синовии, имеют, по всей вероятности, очень важное прогностическое значение.
Предпринятые недавно попытки идентифицировать прогностические факторы плохого исхода заболевания при воспалительном артрите на ранней стадии выявили присутствие RA -специфических аутоантител, а в частности антител, направленных против цитрулин-содержащих пептидов и ассоциирующихся с эрозивным и персистентным заболеванием у групп пациентов с воспалительным артритом на ранней стадии. Исходя из этих данных, для облегчения идентификации анти-ССР антител в сыворотке пациента, был получен циклический цитрулин-содержащий пептид (CCP). При таком подходе было обнаружено, что по присутствию анти-ССР антител, которые являются специфичными и восприимчивыми к RA, можно дифференцировать RA от других артропатий и можно предсказать наличие персистентного эрозивного синовита еще до появления клинических симптомов заболевания. Важно отметить, что анти-ССР антитела часто детектируются в сыворотке за много лет до появляния клинических симптомов, что дает основание предположить, что такие антитела могут служить показателем субклинических иммунных ответов (Nielen et al., 2004; Rantapaa-Dahlqvist et al., 2003).
M. Псориаз
Псориаз представляет собой хроническое кожное заболевание, которое характеризуется шелушением и воспалением кожи, и которым страдает 2-2,6 процента населения или 5,8-7,5 миллионов людей, проживающих в Соединенных Штатах. Хотя такое заболевание наблюдается у людей всех возрастных групп, однако, он, главным образом, встречается у взрослых людей. Это заболевание в равной степени встречается как у мужчин, так и у женщин. Псориаз возникает в случае, когда клетки кожи быстро выходят из области их образования под поверхностью кожи и скапливаются на поверхности еще до своего созревания. Обычно такая миграция (также называемая функциональным циклом) происходит примерно в течение месяца, но при псориазе этот процесс может протекать всего за несколько дней. В своей типичной форме псориаз приводит к образованию пятен в виде толстой красной (воспаленной) кожи, покрытой серебристыми чешуйками. Эти пятна, которые иногда называются бляшками, обычно вызывают зуд или болезненное ощущение. Псориаз чаще всего поражает локти, колени, другие части ног, волосистую часть головы, поясницу, лицо, ладони и подошвы стопы, но он может также поражать кожу в любой части организма. Такое заболевание может также поражать ногти пальцев рук, ногти пальцев ног, мягкие ткани гениталий и внутреннюю часть ротовой полости. Обычно наблюдается растрескивание кожи вокруг пораженных суставов, и приблизительно у 1 миллиона человек, страдающих псориазом, наблюдается воспаление суставов, которое приводит к появлению симптомов артрита. Такое состояние называется псориатическим артритом.
Псориаз представляет собой кожное заболевание, индуцированное иммунной системой, а в частности лейкоцитами определенного типа, называемыми Т-клетками. Обычно Т-клетки защищают организм от инфекций и заболеваний. В случае псориаза, Т-клетки начинают действовать по несвойственному им механизму и становятся настолько активными, что они запускают другие иммунные ответы, что приводит к воспалению и ускорению функционального цикла клеток кожи. Примерно в одной трети случаев, псориаз является наследственным заболеванием. Специалистами было проведено обследование большого числа семей, члены которых страдают псориазом, и у них были идентифицированы гены, ассоциированные с таким заболеванием. Люди, страдающие псориазом, могут отметить, что, временами, состояние их кожи то ухудшается, то улучшается. Состояниями, которые могут вызывать обострение заболевания, являются инфекции, стресс и изменение климата, которые вызывает сухость кожи. Кроме того, некоторые медицинские препараты, включая литий и бета-блокаторы, которые назначают для снижения повышенного кровяного давления, могут вызывать обострение или ухудшение заболевания.
N. Рассеянный склероз
Рассеянный склероз (сокращенно обозначаемый MS, а также известный как диссеминированный склероз или диссеминированный энцефаломиелит) представляет собой аутоиммунное состояние, при котором иммунная система атакует центральную нервную систему, что приводит к демиелинизации. Это заболевание обычно начинает развиваться у молодых людей, а чаще всего у женщин. Данное заболевание встречается примерно у 2-150 человек на 100000. MS был впервые описан в 1868 году Жан-Мартеном Шарко.
При MS подавляется способность нервных клеток головного и спинного мозга взаимодействовать друг с другом. Взаимодействия нервных клеток происходят путем подачи электрических сигналов, называемых потенциалами действия, на длинные волокна, называемые аксонами, которые покрыты изолирующим веществом, называемым миелином. При MS собственная иммунная система организма атакует и разрушает миелин. При потере миелина эти аксоны не могут больше эффективно проводить сигналы. Название «рассеянный склероз» происходит от слова «рубцы» (scars) (слово «склероз» (scleroses) больше известно как бляшки или поражения), присутствующие в белом веществе головного и спинного мозга, где указанное вещество, главным образом, состоит из миелина. Хотя в настоящее время имеется много информации о механизмах, участвующих в данном патологическом процессе, однако причина возникновения такого заболевания до сих пор остается неизвестной. Согласно теории, в основе такого заболевания лежат генетические факторы или инфекции. Были также выявлены различные факторы риска, связанные с изменением окружающей среды.
Данное заболевание может ассоциироваться почти с любыми неврологическими симптомами и, в большинстве случаев, оно прогрессирует, что приводит к соматическим и психическим нарушениям. MS имеет несколько форм, при которых появляются новые симптомы, проявляющиеся в виде дискретных атак (рецидивирующие формы), или медленно накапливающиеся симптомы (прогрессирующие формы). Между атаками эти симптомы могут полностью исчезать, но в большинстве случаев остаются перманентные неврологические расстройства, а в частности осложнения заболевания.
Какого-либо известного метода лечения MS не существует. Были предприняты попытки восстановления функции нервной системы после атаки, а также предупреждения новых атак и предотвращения потери трудоспособности (см. подробное обсуждение, приведенное ниже). Лекарственные препараты для лечения MS могут давать побочные эффекты, либо они могут плохо переноситься пациентами, и многим пациентам назначают альтернативное лечение, несмотря на отсутствие подтверждающего его научного исследования. Прогноз данного заболевания трудно предсказать, то есть он зависит от подтипа заболевания, признаков заболевания у данного индивидуума, начальных симптомов этого заболевания и степени потери трудоспособности индивидуума по мере прогрессирования заболевания. Вероятная продолжительность жизни у этих пациентов почти аналогична продолжительности жизни здорового населения.
Симптомы MS обычно появляются периодически в острые периоды обострения заболевания (рецидивы, обострения, приступы или кризы) при постепенно прогрессирующем ухудшении неврологической функции, или во время всех вместе взятых периодов обострений.
Наиболее частыми проявлениями MS является клинически изолированный синдром (КИС). При КИС у пациента наблюдается приступ, напоминающий событие демиелинизации, но этот приступ не удовлетворяет критериям диагностики рассеянного склероза. Только у 30-70% пациентов с КИС в дальнейшем развивается MS. Это заболевание обычно проявляется симптомами сенсорной недостаточности (46% случаев), ухудшением зрения (33%), нарушением мозжечковой функции (30%) и нарушением двигательной функции (26%). В литературе также описано множество редко встречающихся ранних симптомов, включая афазию, психоз и эпилепсию. У пациентов, впервые обращающихся за медицинской консультацией, обычно наблюдается множество симптомов. Первые признаки и симптомы MS часто являются преходящими, слабыми и самокупирующимися. Пациент с такими признаками и симптомами часто не обращается к врачу, а иногда эти признаки могут быть идентифицированы лишь ретроспективно после установления диагноза MS. Заболевание MS иногда случайно обнаруживается во время обследования у невропатолога, к которому пациент обращается по другому поводу. Такие заболевания называются субклиническим MS.
У пациента с MS могут наблюдаться почти все неврологические симптомы или признаки, включая изменения ощущений (гипестезия и парестезия), слабость в мышцах, мышечные спазмы или нарушение двигательной способности; нарушения координации и равновесия (атаксия); расстройство речи (дизартрия) или затруднения глотания (дисфагия), проблемы со зрением (нистагм, нейрит зрительного нерва или диплопия), усталость, острые или хронические боли, и расстройство мочеиспускания и кишечника. Распространенными симптомами также являются нарушение познавательной способности различной степени и психических расстройств типа депрессии или смены настроения. Главным клиническим критерием прогрессирования потери работоспособности и тяжести симптомов является Расширенная шкала статуса инвалидности или EDSS.
Рецидивы рассеянного склероза часто являются непредсказуемыми и возникают спонтанно и без видимых причинных факторов. Однако некоторые приступы вызываются общеизвестными провоцирующими факторами. Чаще всего рецидивы возникают весной и летом. Факторами, повышающими риск возникновения рецидивов, являются инфекции, такие как насморк, грипп или гастроэнтерит. Приступ может быть также вызван стрессом. Беременность может подавлять восприимчивость к рецидиву и обеспечивать защиту, например, в последний ее триместр. Однако, в первые несколько месяцев после родов, риск появления рецидивов возрастает. В целом, очевидно, что беременность не оказывает какого-либо влияния на продолжительность потери трудоспособности. Были исследованы многие провоцирующие факторы, и было обнаружено, что они не влияют на частоту рецидивов MS. Также отсутствуют какие-либо данные о том, что вакцинация против гриппа, гепатита В, опоясывающего лишая, столбняка или туберкулеза повышает риск возникновения рецидива. Физические травмы также не вызывают рецидивов. Воздействие температур, превышающих температуру окружающей среды, может приводить к обострению уже имеющихся симптомов, и это действие известно как феномен Утхоффа. Однако феномен Утхоффа не является установленным фактором, вызывающим рецидив.
Было описано несколько подтипов или профилей прогрессирования данного заболевания. При установлении этих подтипов учитывалось предшествующее течение заболевания в попытке предсказания дальнейшего течения заболевания. Это имеет важное значение не только с прогностической точки зрения, но также и для назначения лечения. В 1996 году специалистами Национального комитета по изучению рассеянного склероза в Соединенных Штатах было стандартизировано определение четырех подтипов заболевания: рецидивирующее ремиттирующее, вторичное прогрессирующее, первичное прогрессирующее и прогрессирующее рецидивирующее заболевание.
Заболевание рецидивирующего-ремиттирующего подтипа характерируется непредсказуемыми рецидивами с последующими относительно «тихими» периодами (ремиссиями), которые продолжаются от нескольких месяцев до нескольких лет, и во время которых каких-либо новых признаков активности заболевания не наблюдается. При этом какие-либо расстройства, возникающие во время приступов, либо исчезают, либо сохраняются в виде остаточных явлений. Описанное начало течения заболевания характерно для 85-90% индивидуумов с MS. Если в период между приступами симптомы всегда исчезают, то такое заболевание иногда называют доброкачественным MS.
Вторичный прогрессирующий MS описывают как начальную стадию рецидивирующего-ремиттирующего MS, при котором между острыми атаками возникает прогрессирующее неврологическое расстройство с отсутствием каких-либо определенных периодов ремиссии. При этом могут наблюдаться спонтанные рецидивы и кратковременные ремиссии. Средняя продолжительность периода между началом заболевания и его переходом из рецидивирующей ремиттирующей стадии во вторичный прогрессирующий MS составляет 19 лет.
MS первичного прогрессирующего подтипа наблюдается приблизительно у 10-15% индивидуумов, у которых никогда не наступает ремиссии после появления первых симптомов MS. Такое заболевание характеризуется прогрессированием нетрудоспособности с самого начала заболевания с отсутствием или лишь со случайным и непродолжительным появлением ремиссий и улучшением состояния. Признаки заболевания первичного прогрессирующего подтипа появляются в более позднем возрасте, чем это наблюдается в случае заболеваний других подтипов.
Прогрессирующий рецидивирующий MS наблюдается у индивидуумов, у которых с самого начала заболевания наблюдается устойчивое нарушение неврологических функций, а также появление четко выраженных повторных атак. Эти признаки являются по меньшей мере типичными для заболеваний всех подтипов.
Были также описаны случаи нестандартного течения заболевания. Эти случаи иногда называют пограничными формами рассеянного склероза, и такими формами являются болезнь Девика, концентрический склероз Бало, диффузный склероз Шильдера и рассеянный склероз Марбурга. У детей рассеянный склероз также протекает по-разному. В настоящее время ведутся обсуждения по поводу того, является ли это заболевание атипичными вариантами MS, или другим заболеванием.
Рассеянный склероз трудно поддается диагностике, поскольку его признаки и симптомы могут быть сходны с признаками и симптомами многих других патологических состояний. Медицинские организации разрабатывают диагностические критерии для облегчения и стандартизации способов диагностики для практических врачей. В прошлом, популярностью пользовались критерии Шумахера и Позера. В настоящее время используется критерий МакДональда, который основан на получении клинических, лабораторных и радиологических данных распространения патологического процесса MS по его длительности и степени поражения органов. Диагноз не может быть поставлен до тех пор, пока не будут исключены другие возможные состояния, и пока не будут получены данные, свидетельствующие о событиях демиелинизации, разделенных как анатомически, так и во времени.
Отдельные клинические данные могут быть достаточными для установления диагноза MS, если у индивидуума наблюдаются отдельные эпизоды обострения неврологических симптомов, характерных для MS. Поскольку некоторые люди обращаются к врачу только после первого приступа, то для ускорения и облегчения установления диагноза могут быть проведены и другие анализы. Наиболее распространенными способами диагностики являются нейровизуализация, анализ цереброспинальной жидкости и вызванных потенциалов. Магнитно-резонансная томография головного и спинного мозга позволяет определить площадь демиелинизации (поражений или бляшек). Для выявления активных бляшек, в качестве контрастирующего агента может быть внутривенно введен гадолиний, и по его элиминации может быть определено наличие поражений, которые в прошлом не признавались как поражения, ассоциированные с симптомами, имеющимися в момент проведения анализа. Анализ цереброспинальной жидкости, взятой путем люмбальной пункции, может дать информацию о хроническом воспалении центральной нервной системы. Цереброспинальную жидкость анализируют на присутствие олигоклональных зон, которые являются маркерами воспаления, обнаруживаемыми у 75-85% людей с MS. Нервная система индивидуума с MS часто менее активно отвечает на стимуляцию зрительного нерва и чувствительного нерва, что обусловлено демиелинизацией таких путей. Такие реакции в головном мозге могут быть оценены с использованием вызванных потенциалов в органах зрения и органах чувств.
В настоящее время MS считается иммуноопосредованным расстройством, вызываемым провоцирующим фактором, который может иметь вирусную природу, хотя такая концепция обсуждается уже много лет, и у нее все еще имеются противники. Считается, что данное заболевание вызывается собственной иммунной системой пациента. Иммунная система атакует нервную систему, вероятно, в результате воздействия молекул, имеющих структуру, аналогичную структуре полной из молекул, присутствующей в организме.
Поражения MS часто охватывают области белого вещества, расположенные рядом с желудочками мозжечка, со стволом головного мозга, со спинномозговыми узлами и со спинным мозгом, а также рядом со зрительным нервом. Функция клеток белого вещества заключается в передаче сигналов между участками серого вещества, где происходит их обработка, и остальными участками организма. При этом периферическая нервная система затрагивается редко.
Более конкретно, при MS разрушаются олигодендроциты, то есть клетки, ответственные за создание и сохранение жирного слоя, известного как миелиновая оболочка, которая способствует передаче электрических сигналов нейронами. MS приводит к истончению или к полной потере миелинового слоя, а по мере прогрессирования заболевания, к разрыву (рассечению) нейронных отростков или аксонов. При потере миелина нейрон больше не способен эффективно проводить электрические сигналы. Процесс репарации, называемый ремиелинизацией, происходит на ранних стадиях заболевания, но олигодендроциты уже не способны полностью восстановить миелиновую оболочку клеток. Повторные атаки приводят к последующей, но менее эффективной, ремиелинизации, до тех пор, пока вокруг пораженных аксонов не будут образовываться рубцевидные бляшки. В литературе описаны четыре различных характера поражения.
Помимо демиелинизации, другим характерным патологическим признаком заболевания является воспаление. В соответствии со строго иммунологическим объяснением MS, воспалительный процесс вызывается Т-клетками, то есть клетками типа лимфоцитов. Лимфоциты представляют собой клетки, которые играют важную роль в защите организма. При MS T-клетки начинают проникать в головной мозг через гематоэнцефалический барьер, то есть капиллярную систему, которая должна предотвращать поступление Т-клеток в нервную систему. Гематоэнцефалический барьер обычно является непроницаемым для клеток такого типа, если только они не индуцируются инфекциями или вирусами, которые нарушают целостность плотных контактов, образующих этот барьер. Если гематоэнцефалический барьер снова приобретает свою целостность, что обычно происходит после устранения инфекции или удаления вирусов, то T-клетки остаются внутри головного мозга. Эти Т-клетки распознают миелин как чужеродное вещество и атакуют его так, как если бы он представлял собой инвазивный вирус. Это приводит к запуску воспалительных процессов, а следовательно и к стимуляции образования других иммунных клеток и растворимых факторов, таких как цитокины и антитела. В гематоэнцефалическом барьере происходят утечки, которые, в свою очередь, приводят к ряду других поражений, таких как набухание и активация макрофагов, а также дополнительная активация цитокинов и других деструктивных белков.
Хотя способ лечения рассеянного склероза пока не известен, однако, было предложено несколько полезных способов терапии. Терапией первого ряда является восстановление функции органов после атаки, предотвращение новых атак и предупреждение наступления нетрудоспособности. Что касается любого медикаментозного лечения, то медицинские препараты, используемые для лечения MS, дают несколько побочных эффектов. Некоторым пациентам назначают альтернативное лечение, несмотря на отсутствие подтверждающего, сравнительного и повторного научного исследования.
Во время симптоматических атак внутривенное введение высоких доз кортикостероидов, таких как метилпреднизолон, представляет собой рутинный метод лечения острых рецидивов заболевания. Целью проведения лечения такого типа является более быстрое прекращение атаки и сведение до минимума степени прогрессирования данного заболевания у пациента. Хотя лечение кортикостероидами является, в основном, эффективным для кратковременного ослабления симптомов, однако, очевидно, что такое лечение не дает длительного эффекта. Возможными побочными эффектами являются остеопороз и потеря памяти, которая затем может восстанавливаться.
Заболевание-модифицирующее лечение является дорогостоящим и, в большинстве случаев, требует частого (почти ежедневного) введения инъекций. Другие способы лечения требуют i.v. вливания с интервалами в 1-3 месяца. Самыми ранними клиническими проявлениями рецидивирующего-ремиттирующего MS (RRMS) является клинически изолированный синдром (КИС). Некоторые исследования показали, что лечение интерферонами во время начальных атак может снижать риск развития у пациента клинического MS.
В 2007 году Регуляторными органами различных стран было дано разрешение на шесть способов проведения заболевание-модифицирующего лечения RRMS. Три способа предусматривают использование интерферонов: двух препаратов интерферона βla (торговые знаки Avonex, CinnoVex, ReciGen и Rebif) и одного препарата интерферона βlb (торговый знак Betaseron в США, и Betaferon в Европе и Японии). Четвертым медицинским препаратом является ацетат глатирамера (Copaxone). Пятый медицинский препарат, митоксантрон, представляет собой иммунодепрессант, также используемый для противораковой химиотерапии, который был разрешен только в США и который предназначен, главным образом, для лечения вторичного прогрессирующего MS. Шестым препаратом является натализумаб (имеющийся в продаже под торговым знаком Tysabri). Все эти шесть лекарственных препаратов дают умеренный эффект с точки зрения снижения частоты атак и замедления прогрессирования заболевания до наступления нетрудоспособности, хотя степень их эффективности варьирует, а исследования продолжительности этих эффектов пока не проводились. Сравнение различных иммуномодуляторов (всех, за исключением митоксантрона) показало, что наиболее эффективным является натализумаб, как с точки зрения снижения частоты рецидивов, так и с точки зрения прекращения прогрессирования заболевания, приводящего к инвалидности; и было также показано, что эти препараты снижают тяжесть MS. Из всех этих препаратов наиболее эффективным может быть митоксантрон, однако, обычно он не рассматривается, как препарат, подходящий для длительной терапии, поскольку его применение ограничивается из-за его сильного кардиотоксического действия.
Интерфероны и ацетат глатирамера вводят в виде частых инъекций, частота которых варьирует от одного раза в день для ацетата глатирамера до одного раза в неделю (но внутримышечно) для препарата Avonex. Натализумаб и митоксантрон вводят путем внутривенного (i.v.) вливания с интервалами в несколько месяцев.
Лечение прогрессирующего MS является более трудным, чем лечение рецидивирующего-ремиттирующего MS. Митоксантрон дает положительные эффекты у пациентов с вторичным прогрессирующим заболеванием и прогрессирующим рецидивирующим заболеванием. При кратковременном обследовании было установлено, что такое лечение дает умеренный эффект в отношении снижения прогрессирования заболевания и снижения частоты рецидивов у пациентов. Какого-либо лечения, оказывающего воздействие на течение первичного прогрессирующего заболевания, пока не существует.
Как и при любом медикаментозном лечении, эти способы лечения дают несколько побочных эффектов. Одним из наиболее распространенных побочных эффектов является раздражение в месте инъекции ацетата глатирамера и введения интерферона. Со временем, на участке инъекции могут появляться видимые выступы на коже, вызываемые локальной деструкцией ткани, известной как липоатрофия. Интерфероны продуцируют симптомы, аналогичные симптомам гриппа; при этом у некоторых пациентов, которым вводят глатирамер, наблюдаются постинъекционные реакции, проявляющиеся в виде резкого покраснения, стеснения в груди, учащенного сердцебиения, одышки и тревожных состояний, которые обычно длятся не менее чем тридцать минут. Более опасными побочными эффектами являются поражение печени, вызываемое интерферонами и митоксантроном, и иммунодепрессивное воздействие и кардиотоксичность; при этом было высказано предположение о взаимосвязи между натализумабом и некоторыми случаями прогрессирующей мультифокальной лейкоэнцефалопатии.
Заболевание-модифицирующее лечение приводит к снижению степени прогрессирования заболевания, но не к его прекращению. По мере прогрессирования рассеянного склероза его симптоматика имеет тенденцию к усилению. Такое заболевание ассоциируется с рядом симптомов и функциональных нарушений, которые приводят к прогрессированию заболевания и к потере трудоспособности. Поэтому, лечение таких заболеваний имеет очень важное значение. Было показано, что терапия лекарственными средствами и восстановление нервной системы ослабляют тяжесть некоторых симптомов, хотя и не оказывает никакого влияния на прогрессирование заболевания. Как и для любого пациента с нарушением неврологических функций, междисциплинарный подход является ключевым фактором в ограничении и в предотвращении нетрудоспособности, однако, существуют определенные проблемы в идентификации «основной группы», поскольку индивидуумы с MS могут нуждаться в помощи врача почти любой медицинской специальности или медицинской службы в любом регионе. Аналогичным образом, каждый симптом требует различных способов лечения. Поэтому такое лечение должно быть индивидуальным и зависит от особенностей пациента и от квалификации врача.
При большинстве хронических заболеваний, некоторым пациентам назначают альтернативное лечение, несмотря на отсутствие подтверждающего, сравнительного и повторного научного исследования. Примерами такого лечения являются соблюдение режима питания, лечение лекарственными растениями, включая использование медицинской конопли для облегчения симптомов и оксибаротерапия. Считается, что снятие усталости может быть достигнуто благодаря терапевтическому применению военного искусства, такого как тай-ши, методов релаксации, таких как йога, или выполнению общих упражнений, но эти методы не влияют на познавательную функцию.
II. Диагностика аутоиммунных заболеваний
В одном из своих аспектов настоящее изобретение относится к диагностике аутоиммунных заболеваний, таких как заболевания, обсуждаемые выше. Такие методы диагностики позволяют врачам дифференцировать различные заболевания с рядом перекрывающихся симптомов и, тем самым, правильно установить физиологическую причину, лежащую в основе возникновения симптомов у пациента, а также открывают возможность раннего вмешательства в процесс развития заболевания и его лечения. Действительно, поскольку многие способы лечения аутоиммунных заболеваний замедляют их прогрессирование и направлены на подавление симптомов, но не способны предупреждать или излечивать данное заболевание, то возможность осуществления ранней диагностики этих заболеваний будет играть решающую роль в замедлении развития более тяжелых симптомов. Кроме того, возможность назначения пациентам соответствующих лекарственных средств для ослабления таких симптомов, не прибегая, при этом, к методу «проб и ошибок», который иногда применяют из-за неправильного диагноза, позволит в значительной степени снизить стоимость лечения и избежать ощущения у пациента дискомфорта и возможного появления у него побочных эффектов.
Все эти анализы проводят путем взятия у пациента образцов, содержащих Т-клетки. Наиболее часто используемыми биологическими образцами могут быть кровь или сыворотка, что обусловлено преобладанием в них Т-клеток. Однако могут быть использованы и другие образцы, такие как слезы, слюна, мокрота, цереброспинальная жидкость, сперма или моча.
В анализах на присутствие аутореактивных Т-клеток у индивидуума, наблюдаемые профили реактивности могут сравниваться со стандартом. Стандарт может быть выбран на основе известных профилей связывания с пептоидом, установленных для индивидуумов с заболеванием и у здоровых индивидуумов, что позволяет избежать необходимости использования какого-либо другого способа кроме реакционного контроля, то есть контроля, указывающего на то, что данные реагенты и состояния являются необходимыми для прохождения положительной реакции. Альтернативно, может быть выбран способ осуществления фактического контроля, который включает взятие аналогичного образца у конкретного индивидуума, о котором известно, что он является здоровым или имеет диагностированное заболевание. Кроме того, у одного и того же пациента может быть взята серия образцов в течение определенного периода времени для того, чтобы выявить тенденцию к увеличению аутореактивных Т-клеток, которое является показателем прогрессирования заболевания.
Существуют различные методы детектирования аутореактивных Т-клеток согласно изобретению. Анализ одного типа может представлять собой анализ с использованием антител, включая такие его формы, как твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA), радиоиммуноанализ (РИА), иммунорадиометрический анализ, флуоресцентный иммуноанализ, хемилюминесцентный анализ, биолюминесцентный анализ, FACS, FRET, вестерн-блот-анализ, и другие анализы, либо такие анализы могут быть смоделированы на основе вышеупомянутых анализов. Стадии различных методов иммунодетектирования были описаны в научной литературе, например, в публикации Doolittle & Ben-Zeev (1999), Gulbis & Galand (1993), De Jager et al. (1993) и Nakamura et al. (1987). В основном, такие анализы проводят с использованием пептоида, нанесенного на носитель. Пептоид может быть предварительно идентифицирован как релевантный лиганд для популяции аутореактивных Т-клеток, либо, вместо этого, он может представлять собой часть массива неохарактеризованных пептоидов, которые имеют общий профиль связывания с Т-клетками, характерный для предсказания наличия заболевания или его отсутствия.
Твердый носитель может быть получен в форме колоночной матрицы, гранул, фильтра, мембраны, полоски, планшета или лунки, и на этот носитель с иммобилизованным на нем пептоидом может быть нанесен образец. После контактирования этого пептоида с образцом, нежелательные (неспецифически связанные) компоненты вымывают из носителя и оставляют только Т-клетки, которые образуют комплекс с пептоидом, после чего эти клетки детектируют различными методами, такими как последовательное добавление антител, которые распознают поверхностные маркеры на Т-клетках (например, CD4, CD8), связанных с носителем, или меченый(ые) пептоид(ы).
Контактирование выбранного биологического образца с пептоидом в соответствующих условиях и в течение периода времени, достаточного для образования комплексов «пептоид-Т-клетка», в общих чертах, представляет собой простой метод контактирования образца с пептоидом и инкубирования смеси в течение определенного периода времени, достаточного для связывания Т-клеток с пептоидами. По истечении этого времени, композицию «образец-пептоид», такую как планшет, фильтр или блот, обычно промывают для удаления каких-либо неспецифически связанных клеток или дебриса, и оставляют только те клетки, которые специфически связывались с детектируемым иммобилизованным пептоидом.
В целом, детектирование образования биологического комплекса хорошо известно специалистам и может быть достигнуто с применением различных методов. Такие методы, в основном, основаны на детектировании меток или маркеров, таких как любые радиоактивные, флуоресцентные, биологические и ферментативные метки. Патентами, в которых описано использование таких меток, являются патенты США 3817837, 3850752, 3939350, 3996345, 4277437, 4275149 и 4366241. Совершенно очевидно, что использование вторичных связывающих лигандов, таких как «второе» антитело и/или комплекс, связывающийся с лигандами биотин/авидин, хорошо известно специалистам.
Рассматриваются также анализы, проводимые в других форматах, и такие анализы хорошо известны специалистам. Ниже обсуждаются три конкретных анализа, которые рассматриваются как анализы, подходящие для их применения в настоящем изобретении.
A. Анализы ELISA
Самыми простыми и прямыми иммуноанализами являются анализы на связывание. Некоторыми иммуноанализами, которые могут быть применены в настоящем изобретении, являются различные твердофазные иммуноферментные анализы (ELISA) и радиоиммуноанализы (РИА), известные специалистам.
В одном репрезентативном анализе ELISA, пептоиды согласно изобретению иммобилизуют на выбранной поверхности, такой как лунка в полистироловом микротитрационном планшете. Затем тестируемую композицию, предположительно содержащую Т-клетки, добавляют в лунки. После связывания и промывки для удаления неспецифически связанных комплексов, связанные Т-клетки могут быть детектированы. Детектирование может быть осуществлено путем добавления другого пептоида, связанного с детектируемой меткой. Анализ такого типа аналогичен простому анализу «сэндвич»-ELISA, за исключением того, что связывание меченого агента осуществляется непосредственно в антиген-связывающей части Т-клеточного рецептора. Детектирование может быть также осуществлено путем добавления меченого антитела, связывающегося с любым поверхностным антигеном, специфичным к Т-клеткам, который, например, распознает структуру, уникальную для Т-клеток в целом или Т-клеток конкретного класса. Или, но необязательно, указанное антитело может быть немеченым, и к нему затем добавляют «второе» антитело, которое обладает аффинностью связывания с первым антителом (Fc), причем указанное «второе» антитело связано с детектируемой меткой.
В другом репрезентативном ELISA, образцы, предположительно содержащие Т-клетки, иммобилизуют на поверхности лунки, а затем подвергают контактированию с мечеными пептоидами согласно изобретению. После связывания и промывки для удаления неспецифически связанных иммунных комплексов, связанные меченые пептоиды детектируют.
Анализы ELISA, независимо от используемого формата, имеют некоторые общие признаки, такие как нанесение покрытий, инкубирование и связывание, промывка для удаления неспецифически связанных молекул и детектирование связанных иммунных комплексов. Благодаря простоте и предсказуемости химической структуры пептоидов, они могут быть связаны с носителем посредством специфической химической реакции.
Термин «в условиях, эффективных для образования иммунных комплексов» означает, что такие условия предпочтительно включают разведение Т-клеток растворами, такими как BSA, бычий γ-глобулин (BGG) или забуференный фосфатом физиологический раствор (PBS)/твин. Такие добавленные агенты также способствуют снижению неспецифического фона. Термин «подходящие» условия также означает, что инкубирование осуществляют при температуре или в течение периода времени, достаточных для эффективного связывания. Стадии инкубирования обычно проводят в течение примерно 1, 2 или 4 часов или т.п. или при температуре предпочтительно 25°C-27°C, либо они могут быть проведены в течение ночи примерно при 4°C или т.п.
После проведения всех стадий инкубирования в ELISA, контактируемую поверхность промывают для удаления материала, не образующего комплекс. Предпочтительная процедура промывки включает промывку раствором, таким как PBS/твин, или боратным буфером. После образования специфических иммунных комплексов между тест-образцом и исходным связанным материалом и после промывки может быть определено присутствие даже минимальных количеств иммунных комплексов.
При детектировании может быть использован фермент, который дает окраску после инкубирования с соответствующим хромогенным субстратом. Так, например, контактирование или инкубирование иммунных комплексов с антителом или пептоидом, конъюгированным с уреазой, глюкозооксидазой, щелочной фосфатазой или с пероксидазой хрена, желательно осуществлять в течение определенного периода времени и в условиях, способствующих образованию такого иммунного комплекса (например, инкубирование желательно осуществлять в течение 2 часов при комнатной температуре в PBS-содержащем растворе, таком как PBS-твин).
После инкубирования с меченым антителом или пептоидом и после промывки для удаления несвязанного материала, количество метки, например, в случае использования пероксидазы в качестве ферментной метки, определяют путем инкубирования с хромогенным субстратом, таким как мочевина или бромкрезоловый пурпурный, или с 2,2'-азино-ди-(3-этил-бензтиазолин-6-сульфоновой кислотой (ABTS) или с H2O2. Затем проводят количественную оценку путем измерения степени образования окраски, например, на спектрофотометре, работающем в режиме видимого спектра.
B. Квантовые точки
Как обсуждается ниже, в некоторых аспектах настоящего изобретения, для мечения клеточных популяций предпочтительно использовать квантовые точки. Квантовая точка представляет собой полупроводник, экситоны которого имеют ограниченную пространственную локализацию. В результате этого, они имеют свойства, которые присущи легированным полупроводникам и дискретным молекулам. Они были открыты Льюисом Брюсом, который затем работал в лаборатории Белла. Учеными были исследованы квантовые точки в транзисторах, в солнечных батареях, в светодиодах (СИД) и в диодных лазерах. Ученые исследовали квантовые точки как средства для осуществления клинической визуализации в надежде, что их можно будет использовать в качестве квантовых битов.
Для получения квантовых точек существует несколько способов. В общих чертах, с применением усовершенствованных эпитаксиальных методов, квантовые нити, квантовые ямы и квантовые точки могут быть получены в нанокристаллах, продуцируемых химическими методами или путем имплантации ионов, или в наноаппаратах, изготовленных методами литографии, известными специалистам.
Коллоидальные полупроводниковые нанокристаллы синтезируют из соединений-предшественников, растворенных в растворах, почти так же, как это осуществляется с применением традиционных химических методов. Синтез коллоидальных квантовых точек осуществляют на основе трехкомпонентной системы, состоящей из предшественников, органических поверхностно-активных веществ и растворителей. При нагревании реакционной среды до достаточно высокой температуры, соединения-предшественники подвергаются химическому превращению в мономеры. После достижения мономерами достаточно высокого уровня сверхнасыщения, рост нанокристаллов начинается с процесса зародышеобразования. Температура в процессе такого роста является одним из главных факторов при определении оптимальных условий для роста нанокристаллов. Такая температура должна быть достаточно высокой для перегруппировки и сопряжения атомов в процессе синтеза, и достаточно низкой для стимуляции роста кристаллов. Другим решающим фактором, который должен строго регулироваться в процессе роста нанокристаллов, является концентрация мономера. Процесс роста нанокристаллов может проходить в двух различных режимах, таких как «фокусирование» и «дефокусирование». При высоких концентрациях мономеров критический размер (размер, при котором нанокристаллы не растут и не сжимаются) является относительно небольшим, что обеспечивает рост почти всех частиц. В этом режиме более мелкие частицы растут быстрее, чем крупные (поскольку более крупным кристаллам для их роста требуется больше атомов, чем мелким кристаллам), что приводит к «фокусированию» их распределения по размеру, в результате чего образуются почти монодисперсиные частицы. «Фокусирование» размера является оптимальным, если концентрация мономеров поддерживается такой, чтобы средний размер нанокристалла всегда был несколько больше его критического размера. При снижении концентрации мономеров в процессе роста, критический размер становится больше, чем средний размер, и такое распределение «дефокусируется» в результате созревания по Освальду.
Для получения множества различных полупроводников применяются коллоидальные методы, включая методы с использованием селенида кадмия, сульфида кадмия, арсенида индия и фосфида индия. Такие квантовые точки могут содержать по меньшей мере 100-100000 атомов по объему квантовой точки, а диаметр этих квантовых точек составляет от 10 до 50 атомов. Это соответствует примерно 2-10 нанометрам, и диаметру 10 нм, при этом почти 3 миллиона квантовых точек должны быть вытянуты в одну плотную линию, ширина которой соответствует ширине большого пальца человека.
Большие количества квантовых точек могут быть синтезированы посредством коллоидального синтеза. В настоящее время коллоидальный синтез является самым дешевым методом синтеза, а его преимущество состоит в том, что он может быть проведен в лабораторных условиях. Также известно, что из всех существующих методов синтеза, этот метод является наименее токсичным.
Размер самособирающихся квантовых точек обычно составляет 10-50 нм. Квантовые точки, сформированные с помощью литографически профилированных управляющих электродов или путем травления двухмерными электронными газами в полупроводниковых гетероструктурах, могут иметь поперечные размеры, превышающие 100 нм.
Некоторые квантовые точки имеют небольшие области, где один материал скрыт другим материалом с большей шириной запрещенной зоны. Эти области могут также называться структурами «ядро в оболочке», например, CdSe в ядре и ZnS в оболочке, или они могут быть получены из специально приготовленных форм двуокиси кремния, известных под названием ормосил.
Иногда квантовые точки образуются спонтанно в структурах, называемых квантовыми ямами, что обусловлено флуктуациями монослоев в толщине этой квантовой ямы.
В определенных условиях самособирающиеся квантовые точки спонтанно образуют зародыш кристаллизации в процессе молекулярно-лучевой эпитаксии (MBE) и металлоорганической газофазной эпитаксии (MOVPE), в том случае, если материал выращивают на субстрате, кристаллическая решетка которого не соответствует этому материалу. Образующаяся в результате деформация продуцирует когерентно деформированные островки поверх двухмерного «смачивающего слоя». Такой тип роста известен как рост по методу Странского-Крастанова. Эти островки могут быть затем скрыты с образованием квантовой точки. Такой метод изготовления может быть использован в квантовой криптографии (то есть, на основе однофотонных источников) и в квантовых вычислениях. Главными ограничениями этого метода являются его высокая стоимость и отсутствие контроля за позиционированием отдельных точек.
Отдельные квантовые точки могут быть созданы из двумерных электронных или дырочных газов, присутствующих в дистанционно легированных квантовых ямах или в полупроводниковых гетероструктурах, называемых побочными квантовыми точками. Поверхность образца покрывают тонким слоем резиста. Затем в этом резисте определяют боковой профиль посредством электронно-лучевой литографии. Этот профиль может быть затем перенесен на электронный или дырочный газ путем травления или путем осаждения на металлических электродах (методом обратной литографии), что позволяет подавать внешнее напряжение между электронным газом и электродами. Такие квантовые точки представляют интерес, главным образом, для проведения экспериментов и применения методов, в которых используются электронные или дырочные переходы, то есть электрический ток.
Энергетический спектр квантовой точки может быть сконструирован путем регуляции геометрического размера, формы и величины удерживающего потенциала. Кроме того, в отличие от атомов, квантовые точки посредством туннельных переходов относительно легко присоединяются к проводящим элементам, что позволяет применять методы туннельной спектроскопии для исследования. Удерживание квантовых точек может также обеспечиваться электростатическим потенциалом (создаваемым внешними электродами, легированием, деформацией или примесями).
Высокоупорядоченные массивы квантовых точек могут быть также самособирающимися при применении электрохимических методов. Матрица может быть создана путем индуцирования ионной реакции на поверхности раздела «электролит-металл», которая приводит к спонтанной сборке наноструктур, включая квантовые точки, на металле, после чего эту структуру используют в качестве маски для мезатравления этих наноструктур на выбранном субстрате.
Обычно лабораторное изготовление квантовых точек основано на способе, называемом «двойной инжекцией при высокой температуре», который не применяется в промышленном производстве, поскольку он требует больших количеств квантовых точек. Воспроизводимый метод создания большего количества соответствующих высококачественных квантовых точек включает генерирование наночастиц из химических соединений-предшественников в присутствии соединений молекулярных кластеров в условиях, которые благоприятствуют сохранению целостности молекулярного кластера, и действует как предварительно полученная затравочная матрица. Отдельные молекулы кластерного соединения действуют как затравки или как зародыши кристаллизации, из которых начинается рост наночастиц. В этом методе стадия образования зародышей кристаллизации, проводимая при высоких температурах, необязательно должна инициировать рост наночастиц, поскольку подходящие участки образования зародыша кристаллизации уже были образованы в данной системе посредством молекулярных кластеров. Значительным преимуществом этого метода является его высокая масштабируемость.
В современных биологических анализах используются различные виды органических красителей. Однако с каждым годом становится очевидной потребность в красителях, обладающих большей адаптируемостью, и традиционные красители часто уже не удовлетворяют нужным требованиям. Для этой цели квантовые точки, по нескольким своим свойствам, обладают явно превосходящими свойствами традиционных органических красителей, быстро заняли свою нишу, где такими наиболее явно выраженными свойствами являются их яркость (обусловленная высоким квантовым выходом), а также их стабильность (дающая гораздо меньшую степень фотоотбеливания). Было установлено, что квантовые точки имеют в 20 раз большую яркость и в 100 раз большую стабильность, чем традиционные флуоресцентные репортеры. Для слежения одной частицы, небольшим недостатком квантовых точек является их неоднородное мерцание.
Очевидно, что применение квантовых точек для высокочувствительной визуализации клеток имеет большие преимущества по сравнению с методом, применяемым в последнем десятилетии. Повышенная фотостабильность квантовых точек, например, позволяет получить множества последовательных изображений в плоском фокусе, которые затем могут быть преобразованы в трехмерное изображение с высоким разрешением. Другим применением, при котором используется экстраординарная фотостабильность зондов квантовых точек, является слежение за молекулами и клетками в реальном времени, проводимое в течение длительных периодов времени. Исследователи могут наблюдать квантовые точки в лимфоузлах мышей в течение более 4 месяцев.
Полупроводниковые квантовые точки также были использованы для in vitro визуализации предварительно помеченных клеток. При этом ожидается, что возможность прослеживать миграцию одной клетки в реальном времени будет играть важную роль в некоторых исследованиях в различных областях науки, например, в исследованиях по эмбриогенезу, по выявлению метастазов рака, в терапии с использованием стволовых клеток и в лимфоцитарной иммунологии.
C. Наборы для детектирования
В других своих вариантах настоящее изобретение относится к наборам для детектирования, которые могут быть использованы в описанных выше методах. Этот набор включает пептоиды согласно изобретению. Таким образом, эти наборы будут содержать, в соответствующих упаковках, один или несколько пептоидов, которые связываются с аутореактивными Т-клетками, присоединенными, но необязательно, к детектирующему реагенту и/или к носителю.
В некоторых вариантах изобретения, в которых пептоид был предварительно связан с твердым носителем, полученный носитель может представлять собой колоночную матрицу, гранулы, полоску или лунку микротитрационного планшета. Иммунодетектирующие реагенты данного набора могут быть также получены в различных формах, включая детектируемые метки, ассоциированные или связанные с данным пептоидом или антителом. Репрезентативными антителами являются антитела, обладающие аффинностью связывания с поверхностными антигенами на Т-клеточных рецепторах.
Упаковки наборов обычно представляют собой по меньшей мере один сосуд, одну тест-пробирку, одну колбу, одну бутыль, один шприц или один другой контейнер, в которые может быть помещен пептоид, или которые предпочтительно предназначены для взятия аликвот. Наборы согласно изобретению могут также включать контейнеры для хранения пептоида и антитела, и контейнеры для любых других реагентов, где указанные контейнеры, перед их поступлением в продажу, должны быть герметично упакованы. Такие контейнеры могут включать инъекции или пластиковые упаковки, сформованные путем выдувания, в которых хранятся нужные сосуды.
III. Терапия
В настоящем изобретении также рассматривается применение пептоидов, специфически связывающихся с аутореактивными Т-клетками, в целях терапии. При аутоиммунном заболевании иммунный ответ организма направлен против собственных антигенов. Чаще всего, такой процесс инициируется некоторыми Т-клетками, которые становятся восприимчивыми к антигену собственного организма, и такой процесс не происходит у здоровых индивидуумов. Если количество этих аутореактивных Т-клеток будет селективно снижаться или если они будут элиминироваться и при этом не будут элиминироваться другие Т-клетки, необходимые для нормального иммунного надзора и нормальной активности, то симптомы аутоиммунного заболевания должны быть если не совсем устранены, то по меньшей мере ослаблены.
A. Методы элиминации Т-клеток, основанные на адгезии
В одном из вариантов изобретения было высказано предположение, что носители, покрытые пептоидами, имеющими подтвержденную специфичность к аутореактивным Т-клеткам, могут быть использованы для «сортировки» клеток крови, взятых у индивидуумов, страдающих аутоиммунным заболеванием. В этом методе должны быть использованы такие же параметры и такое же оборудование для лейкафереза, которые применяются в других методах, таких как лечение рака или сбор стволовых клеток.
В общих чертах, лейкаферез представляет собой лабораторную процедуру, при которой лейкоциты выделяют из пробы крови. Это может быть осуществлено для снижения очень большого числа лейкоцитов у индивидуумов с раковой опухолью (лейкозом) или в целях удаления лейкоцитов для переливания крови. Альтернативно, удалены могут быть только гранулоциты, макрофаги и моноциты, а лимфоциты, в основном, должны быть оставлены без изменения. Указанный метод применяется для лечения аутоиммунных заболеваний, таких как язвенный колит и ревматоидный артрит, при которых указанные клетки принимают активное участие в воспалительном процессе.
Пептоид может быть связан с носителем, через который может проходить кровь, что позволяет аутореактивным Т-клеткам связываться с носителем, в результате чего они могут быть удалены из образца перед возвращением пациенту. В противоположность этому, Т-клетки, не связывающиеся с пептоидом, не будут связанными и они должны быть возвращены пациенту. Забор крови у пациента осуществляют внутривенно и возвращают тем же способом, обычно в другую руку. Кровь обычно подают через носитель с помощью насоса. Такую процедуру обычно осуществляют в течение 3-4 часов.
B. Терапия с применением токсинов и иммуноконъюгатов
В другом варианте изобретения, пептоиды согласно изобретению используют в качестве нацеливающих агентов для доставки нужного вещества, специфичного для Т-клеток, с которыми оно связывается. В одном из вариантов изобретения нужным веществом может быть токсин, который может быть связан с пептоидами стандартными химическими методами перекрестного связывания. Токсин имеет различные формы и обладает широким спектром действия, как подробно обсуждается ниже. Другим вариантом является связывание иммунного эффектора с пептоидом для нацеливания на Т-клетки. Одним из таких иммунных эффекторов является Fc-содержащая молекула IgG. Обсуждение Fc-содержащих молекул также приводится ниже.
Для связывания пептоидов могут быть использованы линкеры широкого ряда. Обычно некоторые линкеры являются более предпочтительными по сравнению с другими линкерами, что обусловлено различием их фармакологических свойств и активностей, но, в основном, для объединения пептоидов согласно изобретению с токсинами могут быть использованы любые линкерные/связывающие агенты, известные специалистам, такие как авидин-биотиновые связи; амидные связи; сложноэфирные связи; связи, образуемые сложными тиоэфирами, эфирные связи; связи, образуемые простыми тиоэфирами; фосфоэфирные связи; фосфорамидные связи; ангидридные связи; дисульфидные связи; ионные связи и гидрофобные связи.
Таблица 1 | |||
Гетеро-бифункциональные перекрестно-связывающие линкеры | |||
Линкер | Реактивность с веществами, перечисленными ниже | Преимущества и применения | Длина спейсерной ножки |
SMPT | Сульфгидрилы первичных аминов | - Более высокая стабильность | 11,2 Å |
SPDP | Сульфгидрилы первичных аминов | - Тиолирование - Способность к перекрестному связыванию с последующим отщеплением |
6,8 Å |
LC-SPDP | Сульфгидрилы первичных аминов | - Удлиненная спейсерная ножка | 15,6 Å |
Сульфо-LC-SPDP | Сульфгидрилы первичных аминов | - Удлиненная спейсерная ножка - Растворимость в воде |
15,6 Å |
SMCC | Сульфгидрилы первичных аминов | - Стабильная малеимидная реакционноспособная группа - Конъюгирование фермента с антителом - Конъюгирование гаптена с белком-носителем |
11,6 Å |
Сульфо-SMCC | Сульфгидрилы первичных аминов | - Стабильная малеимидная реакционноспособная группа - Растворимость в воде - Конъюгирование фермента с антителом |
11,6 Å |
MBS | Сульфгидрилы первичных аминов | - Конъюгирование фермента с антителом - Конъюгирование гаптена с белком-носителем |
9,9 Å |
Сульфо-MBS | Сульфгидрилы первичных аминов | - Растворимость в воде | 9,9 Å |
SIAB | Сульфгидрилы первичных аминов | - Конъюгирование фермента с антителом | 10,6 Å |
Сульфо-SIAB | Сульфгидрилы первичных аминов | - Растворимость в воде | 10,6 Å |
SMBP | Сульфгидрилы первичных аминов | - Удлиненная спейсерная ножка - Конъюгирование фермента с антителом |
14,5 Å |
Сульфо- SMBP | Сульфгидрилы первичных аминов | - Удлиненная спейсерная ножка - Растворимость в воде |
14,5 Å |
EDC/ Сульфо-NHS | Карбоксильные группы первичных аминов | - Конъюгирование гаптена с носителем | 0 |
АВН | Неселективные углеводы | - Способность реагировать с сахарными группами | 11,9 Å |
Репрезентативный гетеробифункциональный перекрестно-связывающий линкер содержит две реакционноспособных группы: одну группу, которая реагирует с первичной аминогруппой (например, N-гидроксисукцинимид), и другую группу, которая реагирует с тиоловой группой (например, пиридилдисульфид, малеимиды, галогены и т.п.). Посредством первичной реакционноспособной аминогруппы перекрестно-связывающий линкер может реагировать с лизиновым(ми) остатком(ами) белка (например, выбранного антитела или его фрагмента), а посредством реакционноспособной тиоловой группы перекрестно-связывающий линкер, уже связанный с первым белком, реагирует с цистеиновым остатком (свободной сульфгидрильной группой) другого белка (например, селективного агента).
В частности, может быть использован перекрестно-связывающий линкер, обладающий подходящей стабильностью в крови. Специалистам известно множество типов линкеров, содержащих дисульфидную связь, которые с успехом могут быть использованы для конъюгирования нацеливающих агентов и терапевтических/профилактических средств. Линкеры, содержащие дисульфидную связь, которая является стерически затрудненной, может обладать большей стабильностью in vivo, что обеспечивает предотвращение высвобождения нацеливающего пептида еще до достижения им активного сайта. Таким образом, указанные линкеры входят в одну из групп связывающих агентов.
Другим перекрестно-связывающим реагентом является SMPT, который представляет собой бифункциональный перекрестно-связывающий линкер, содержащий дисульфидную связь, которая является «стерически затрудненной» из-за присутствия смежного бензольного конца и метильных групп. Очевидно, что стерическое затруднение дисульфидной связи обеспечивает защиту такой связи от атаки тиолатных анионов, таких как глутатион, которые могут присутствовать в тканях и в крови, и, тем самым, предупреждает нарушение взаимодействия конъюгата перед доставкой связанного агента в сайт-мишень.
Перекрестно-связывающий реагент SMPT, как и многие другие известные перекрестно-связывающие реагенты, обладает способностью к перекрестному связыванию с функциональными группами, такими SH цистеина или первичных аминов (например, эпсилон-аминогруппа лизина). Другие возможные типы перекрестно-связывающих линкеров включают гетеро-бифункциональные фотореактивные фенилазиды, содержащие расщепляемую дисульфидную связь, такие как сульфосукцинимидил-2-(п-азидосалициламидо)этил-l,3'-дитиопропионат. N-гидрокси-сукцинимидильная группа реагирует с первичными аминогруппами, а фенилазид (после фотолиза) неспецифически реагирует с любым аминокислотным остатком.
В настоящем изобретении, помимо стерически затрудненных перекрестно-связывающих линкеров, могут быть также использованы стерически незатрудненные линкеры. Другими подходящими перекрестно-связывающими линкерами, которые, как считается, не содержат или не образуют защищенного дисульфида, являются SATA, SPDP и 2-иминотиолан (Wawrzynczak & Thorpe, 1986). Использование таких перекрестно-связывающих линкеров хорошо известно специалистам. Другой вариант включает использование гибких линкеров.
В патенте США 4680338 описаны бифункциональные линкеры, используемые для получения конъюгатов лигандов с амин-содержащими полимерами и/или белками, а в частности для получения конъюгатов антител с хелатообразующими агентами, ферментами, детектируемыми метками и т.п. В патентах США 5141648 и 5563250 описаны расщепляемые конъюгаты, содержащие лабильные связи, которые расщепляются в различных условиях умеренной жесткости. Особая ценность такого линкера заключается в том, что представляющий интерес агент может быть связан непосредственно с этим линкером, а его расщепление приводит к высвобождению активного агента. Предпочтительно, такое применение включает присоединение свободной аминогруппы или свободной сульфгидрильной группы к белку, такому как антитело, или к лекарственному средству.
В патенте США 5856456 описаны пептидные линкеры, используемые для связывания полипептидных компонентов, с получением гибридных белков, например, одноцепочечных антител. Линкер имеет длину примерно 50 аминокислот, содержит по меньшей мере одну заряженную аминокислоту (предпочтительно, аргинин или лизин), за которой следует пролин, и характеризуется более высокой стабильностью и пониженной способностью к образованию агрегатов. В патенте США 5880270 описаны аминоокси-содержащие линкеры, которые могут быть использованы в различных методах иммунодиагностики и разделения.
В настоящем изобретении также рассматриваются пептидные линкеры, включающие сайт расщепления для фермента, который преимущественно находится в клеточной среде или является активным в этой среде. Репрезентативными формами таких пептидных линкеров являются пептидные линкеры, расщепляемые урокиназой, плазмином, тромбином, фактором IXa, фактором Xa или металлопротеиназой, такой как коллагеназа, желатиназа или стромелизин.
Однако, по сравнению с пептидами и белками, пептоиды, полученные посредством синтеза, кроме того, дают уникальную возможность для более простого и более эффективного введения положений присоединения.
1. Токсины
В настоящем изобретении могут быть использованы различные биологические токсины. Используемый здесь термин «биотоксин» означает токсин биологического происхождения. Токсины, продуцируемые микроорганизмами, представляют собой ценные детерминанты вирулентности, ответственные за микробную патогенность и/или «ускользание» от «надзора» иммунной системы хозяина. Биотоксины широко варьируют по своему действию и механизмам этого действия и могут представлять собой белок с очень сложной структурой (яд колпачковидных улиток содержит дюжину небольших белков, каждый из которых нацелен на конкретный нервный канал или рецептор), или относительно небольшой белок. Биотоксины по своей природе обладают двумя главными функциями, а именно, поражающими (у пауков, змей, скорпионов, медуз, ос) и защитными (у пчел, муравьев, термитов, медоносных пчел, ос, лягушек-древолазов). Из множества биотоксинов хорошо известных типов, некоторые типы биотоксинов включают цианотоксины (продуцируемые цианобактериями), гемотоксины (направленные на эритроциты и разрушающие их; у гремучих змей, таких как гремучники), некротоксины (вызывающие некроз; у коричневого отшельника и у африканской гадюки - Bitis arietans), нейротоксины (у паука черная вдова, у скорпионов, у кубомедуз).
В соответствии с настоящим изобретением, особый интерес представляют цитотоксины, такие как рицин, получаемый из клещевины. Могут быть также использованы и бактериальные токсины, включая токсины Clostridium: tetani (тетаноспазмин), perfringens (альфа-токсин, энтеротоксин), difficile (A, B), botulinum (ботокс), Staphylococcus (альфа/бета/дельта S. aureus, эксфолиатин, токсин синдрома токсического шока, SEB), а также токсин сибирской язвы, листериолизин O, стрептолизин, лейкоцидин (лейкоцидин Пэнтона-Валентина), фактор спинного мозга, дифтерийный токсин, токсин, вызывающий шигеллез, веротоксин/токсин, подобный шигеллез-индуцирующему токсину (E. coli), термостабильный энтеротоксин E. coli/энтеротоксин, холерный токсин, коклюшный токсин, экзотоксин Pseudomonas, внеклеточная аденилатциклаза типа I (суперантиген), типа II (порообразующие токсины), типа III (AB-токсин/AB5), липополисахарид (липид A), дельта-эндотоксин Bacillus thuringiensis, фактор свертывания крови А, и белок А, связывающийся с фибронектином.
Инактивация белков под действием излучения, испускаемого хромофорами (CALI), включает генерирование в высокой степени реакционноспособных молекул (часто синглетного кислорода) из хромофора (радиоактивного вещества, используемого в боеголовках) под действием света. Реакционноспособные молекулы разрушают белок-мишень путем инактивации его биологической функции. Эти молекулы могут быть использованы для блокирования функций белка.
Эксперименты, проведенные авторами настоящего изобретения, показали, что хромофор на основе рутения является эффективной радиоактивной меткой. Эти эксперименты продемонстрировали, что хромофор на основе рутения может проникать в клетки и инактивировать мишень, что позволяет осуществлять CALI-обработку живых клеток in vivo и ex vivo.
2. Fc-содержащие молекулы
Двухвалентные антитела состоят из четырех полипептидных цепей, то есть из двух коротких фрагментов, имеющих вариабельные области, и двух более длинных фрагментов, имеющих вариабельные и константные области. Длинные и короткие цепи взаимодействуют посредством дисульфидной связи и образуют половину обычной молекулы антитела, причем вариабельная область ответственна за связывание с антигеном (Fv или вариабельный фрагмент). Две половины антитела взаимодействуют посредством отдельных дисульфидных связей и образуют Fc-часть (кристаллизующийся фрагмент).
Fc-часть играет важную роль в модуляции активности клеток иммунной системы, а именно, в связывании с различными клеточными рецепторами и иммунными молекулами, такими как белки комплемента. Благодаря этому механизму она опосредует различные физиологические эффекты, включая опсонизацию, лизис клеток и дегрануляцию тучных клеток, базофилов и эозинофилов. В частности, такая молекула может служить маркером деструкции клеток другими иммунными компонентами. Настоящее изобретение относится к применению антител или их Fc-содержащих фрагментов для нацеливания на T-клетки с последующей их деструкцией.
Один конкретный метод, который может применяться для этих целей, описан Popkov и сотрудниками (2009). Авторами настоящего изобретения были сконструированы антитела, содержащие лиганды-адаптеры интегрина α(v)β(3) и α(v)β(5), которые, в случае их самосборки, могут вырабатывать постоянный химически программируемый поликлональный ответ против имплантируемых опухолей, содержащих эти мишени. Значительный терапевтический ответ наблюдается без применения вспомогательной терапии. Химически программируемые иммунные ответы запускаются антителозависимой клеточной цитотоксичностью и комплемент-опосредуемой цитотоксичностью. Это свидетельствует о способности небольших молекул-лигандов «захватывать» антитела путем перенацеливания их специфичности связывания.
C. Комбинированная терапия
Обсуждаемая выше терапия может быть осуществлена в комбинации с другим агентом, используемым для лечения аутоиммунного заболевания. При объединении этих агентов может быть достигнут аддитивный эффект без повышения токсичности (если она присутствует), ассоциированной с монотерапией. Кроме того, может наблюдаться эффект, превышающий аддитивный эффект (синергия). Таким образом, комбинированная терапия является широко распространенным способом применения новых терапевтических схем лечения.
Лечение пептоидами может быть осуществлено до, одновременно и/или после введения другого(их) агента(ов) через интервалы времени, составляющие от нескольких минут до нескольких недель. В некоторых вариантах изобретения, в которых предусматривается лечение пептоидами вместе с введением другого(их) агента(ов), обычно необходимо, чтобы период времени между каждой доставкой не был слишком большим, и чтобы лечение пептоидом и другим(ими) агентом(ами) еще оказывало преимущественно комбинированное действие на индивидуума. Так, например, в таких случаях предусматривается, что вместе с введением пептоидов могут быть, в основном, одновременно введены два, три, четыре или более лекарственных средства (то есть, примерно менее чем через минуту). В других аспектах изобретения один или несколько агентов могут быть введены, в основном, одновременно или в определенный промежуток времени до или после введения пептоида, где указанный промежуток времени составляет примерно 1 минуту, примерно 5 минут, примерно 10 минут, примерно 20 минут, примерно 30 минут, примерно 45 минут, примерно 60 минут, примерно 2 часа, примерно 3 часа, примерно 4 часа, примерно 5 часов, примерно 6 часов, примерно 7 часов, примерно 8 часов, примерно 9 часов, примерно 10 часов, примерно 11 часов, примерно 12 часов, примерно 13 часов, примерно 14 часов, примерно 15 часов, примерно 16 часов, примерно 17 часов, примерно 18 часов, примерно 19 часов, примерно 20 часов, примерно 21 час, примерно 22 часа, примерно 23 часа, примерно 24 часа, примерно 25 часов, примерно 26 часов, примерно 27 часов, примерно 28 часов, примерно 29 часов, примерно 30 часов, примерно 31 час, примерно 32 часа, примерно 33 часа, примерно 34 часа, примерно 35 часов, примерно 36 часов, примерно 37 часов, примерно 38 часов, примерно 39 часов, примерно 40 часов, примерно 41 час, примерно 42 часа, примерно 43 часа, примерно 44 часа, примерно 45 часов, примерно 46 часов, примерно 47 часов, примерно 48 часов, примерно 1 день, примерно 2 дня, примерно 3 дня, примерно 4 дня, примерно 5 дней, примерно 6 дней, примерно 7 дней, примерно 8 дней, примерно 9 дней, примерно 10 дней, примерно 11 дней, примерно 12 дней, примерно 13 дней, примерно 14 дней, примерно 15 дней, примерно 16 дней, примерно 17 дней, примерно 18 дней, примерно 19 дней, примерно 20 дней, примерно 21 день, примерно 1, примерно 2, примерно 3, примерно 4, примерно 5, примерно 6, примерно 7 или примерно 8 недель или более, и любой другой промежуток времени в указанных интервалах.
В настоящем изобретении могут быть использованы различные комбинированные схемы лечения пептоидом и одним или несколькими агентами. Неограничивающие примеры таких комбинаций представлены ниже, где лечение пептоидом обозначается «А», а лечение другим средством обозначается «В»:
A/B/A B/A/B B/B/A A/A/B A/B/B B/A/A A/B/B/B B/A/B/B
B/B/B/A B/B/A/B A/A/B/B A/B/A/B A/B/B/A B/B/A/A
B/A/B/A B/A/A/B A/A/A/B B/A/A/A A/B/A/A A/A/B/A
Таким образом, пептоидная терапия согласно изобретению может быть проведена в комбинации с другими терапиями, применяемыми для лечения обсуждаемых выше расстройств, но она также включает терапию различными противовоспалительными средствами и иммунодепрессантами.
IV. Примеры
Нижеследующие примеры приводятся для иллюстрации предпочтительных вариантов настоящего изобретения. Специалистам в данной области очевидно, что способы, описанные в примерах и разработанные авторами настоящего изобретения для практического осуществления изобретения, представляют собой репрезентативные способы, а поэтому эти способы рассматриваются как предпочтительные варианты его осуществления. Однако, исходя из настоящего описания, очевидно, что в конкретные варианты может быть внесено множество изменений, которые будут давать аналогичные или подобные результаты, не выходящие за рамки существа и объема изобретения.
ПРИМЕР 1 - Методы
Синтез пептоидной библиотеки. Подробное описание конструирования пептоидной библиотеки было опубликовано ранее в литературе (Udugamasooriya et al., 2008). Вкратце, библиотеку синтезировали на макрогранулах TentaGel (диаметр 140-170 мкM; реагент для замены: 0,48 ммол/г смолы; Rapp Polymere). Синтез библиотеки осуществляли с использованием восьми различных аминов с получением теоретического разнообразия из 262144 соединений. 9-мерную библиотеку синтезировали в соответствии с протоколом синтеза в микроволновой печи (1000 Ватт) и методом разделения и объединения (Olivos et al., 2002). По окончании синтеза библиотеки, гранулы обрабатывали 95% TFA, 2,5% триизопропилсилана и 2,5% водной смеси в течение 2 часов для удаления защитных групп боковой цепи, а затем нейтрализовали 10% диизопропилэтиламином в ДМФ. Гранулы промывали дихлорметаном, сушили и хранили при 4°C вплоть до их использования.
Повторный синтез растворимых пептоидов. Повторный синтез пептоидных лигандов и скрэмблированных контрольных пептидов проводили на амидной смоле MBHA Knorr (Novabiochem) в соответствии со стандартным протоколом синтеза в микроволновой печи (Olivos et al., 2002) (микроволнолновая печь 1000 ватт, 10% мощность, подаваемая 2×15 секунд с быстрым перемешиванием между подачами). Для получения биотинилированных пептоидов и биотин-DOPA-пептоидов, Fmoc-Glu(биотинил-ПЭГ)-OH (Novabiochem) и Fmoc-DOPA (Novabiochem) последовательно присоединяли к амидной смоле MBHA Knorr в соответствии со стандартным протоколом пептидного синтеза с применением химического Fmoc-метода (Udugamasooriya et al., 2008). Для создания пептоидной части молекул, описанных выше, применяли стандартный протокол синтеза, проводимого в микроволновой печи. Пептоиды отщепляли от смолы добавлением 95% TFA, 2,5% триизопропилсилана и 2,5% воды в течение 2 часов, а затем очищали с использованием ВЭЖХ-системы Waters Breeze. Массу пептоидов определяли на масс-спектрометре MALDI-Voyager DE Pro.
Мыши. Самок мышей B10.PL и 2D2 MOG-TCR-трансгенных мышей 35-55 закупали в лаборатории Jackson Laboratories (Bar Harbor, ME) и содержали в условиях, одобренных Федеральными регуляторными органами, в лаборатории Юго-западного Медицинского центра при Университете штата Техас (Даллас, Техас) в соответствии с инструкциями Комитета по содержанию и использованию экспериментальных животных. Vα2.3Vβ8.2-TCR-трансгенные мыши B10.PL были любезно предоставлены Dr. Olaf Stuve (Юго-западный Медицинский центр при Техасском университете, Даллас, Техас), а затем их размножали и содержали в описанных выше условиях содержания. При осуществлении экспериментов возраст всех мышей составлял от 7 до 10 недель.
Индуцирование EAE. EAE индуцировали у мышей B10.PL дикого типа путем введения в бок в 4 участка подкожной инъекции 50 мкг пептида основного миелинового белка MBP Ac1-11, эмульгированного в полном адъюванте Фрейнда. Коклюшный токсин вводили во время иммунизации и через 48 часов путем i.р. инъекции. Мышей ежедневно наблюдали на клинические признаки EAE, и им присваивали клиничекую оценку по следующим критериям: 0 = заболевание отсутствует, 1 = обвислый хвост, 2 = нарушение функции задних конечностей, 3 = сильное нарушение функции задних конечностей/частичный паралич, 4 = паралич задних конечностей, 5 = предсмертное состояние, и 6 = гибель от EAE (Racke, 2001).
Выделение CD4 + -T-клеток. У мышей с EAE, у мышей дикого типа или у TCR-трансгенных мышей выделяли селезенку и лимфоузлы, а затем получали моноклеточные суспензии путем пропускания через нейлоновый 70 мкм-фильтр для клеток (BD Biosciences). Затем CD4+-T-клетки выделяли путем негативного отбора с использованием набора для обогащения CD4+-T-клетками (BD Biosciences) в соответствии с инструкциями производителей. Вкратце, к клеточной суспензии добавляли коктейль, обогащенный биотинилированными мышиными CD4+-T-лимфоцитами. Добавление этого коктейля позволяло осуществлять мечение эритроцитов и лейкоцитов, но не CD4+-T-клеток. После промывки к суспензии добавляли магнитные частицы со стрептавидином, и все помеченные клетки переносили на магнит, а немеченые CD4+-T-клетки оставляли в суспензии. CD4+-T-клетки сохраняли, а все остальные клетки отбрасывали. После выделения клетки промывали, подсчитывали и ресуспендировали в полной среде RPMI 1640 для последующего применения.
Анализ на связывание с помощью проточной цитометрии. После выделения CD4+-T-клеток у TCR-трансгенных мышей и у контрольных мышей дикого типа, клетки промывали и ресуспендировали в 0,1% PBS/BSA (FACS-буфер). Клетки инкубировали с возрастающими концентрациями (1 мкМ, 10 мкМ, 100 мкМ, 250 мкМ или 500 мкМ) либо биотин-DOPA-AG12A-пептоида, либо контрольного биотин-DOPA-пептоида и инкубировали в течение 30 минут при 37°C. После этого к клеткам быстро добавляли 5 мM периодата натрия для перекрестного связывания пептоида с рецептором-мишенью. Эту реакцию гасили DTT, и клетки два раза промывали 0,1% PBS/BSA. Затем к клеткам добавляли Fc-блок (BD Biosciences) и оставляли на 15 минут на льду в целях снижения уровня неспецифического связывания с Fc-рецепторами. Клетки окрашивали 1 мкг анти-CD4-PerCp Cy5.5 антитела и 0,02 мкг антитела против стрептавидина-АПК (BD Biosciences) в течение 15 минут на льду. После окрашивания проводили 2 промывки 0,1% PBS/BSA, и клетки помещали на проточный цитометр FACS Calibur для оценки связывания с пептоидом. Данные анализировали с помощью компьютерной программы Flowjo (Treestar) для определения средней интенсивности флуоресценции, и результаты представляли в виде гистограмм. Затем строили график зависимости величин средней интенсивности флуоресценции (MFI) с использованием компьютерной программы Graphpad Prism для оценки величины Kd, и полученные результаты представляли в виде линейной кривой.
Химическое перекрестное связывание. CD4+-T-клетки выделяли у Vα2.3/Vβ8.2-TCR-трансгенных мышей и у мышей дикого типа, описанных выше. Кроме того, спленоциты, отделенные от CD4+-T-клеток, также использовали в качестве негативного контроля. Реакции перекрестного связывания проводили в ½ буфере для экстрации клеточных ядер (NEB), как было описано ранее (Lim et al., 2007). Приблизительно 10×106 клеток для каждого эксперимента инкубировали с 5 мкМ биотин-DOPA-AG12A-пептоида в течение 30 минут при комнатной температуре. После инкубирования добавляли 5 мM NaIО4 для перекрестного связывания пептоида с рецептором-мишенью. После быстрого инкубирования реакцию гасили 6X загрузочным буфером, содержащим 100 мM DTT. Затем осуществляли стандартный электрофорез в ДСН-ПААГ и проводили иммуноблот-анализ с использованием ПХ-конъюгированных антител против нейтравидина и анти-Vα2 TCR антител (eBioscience).
Анализ на пролиферацию с использованием CFSE. После выделения CD4+-T-клеток, Vα2.3Vβ8.2-TCR-трансгенные Т-клетки, В-клетки или MOG-35-55-TCR-трансгенные Т-клетки метили CFSE (молекулярные зонды) в соответствии с инструкциями производителей. Вкратце, клетки ресуспендировали в концентрации 1×106 на мл в PBS и инкубировали с 0,5 мкM CFSE при 37°C в течение 10 минут. Реакцию окрашивания гасили добавлением 5 объемов культуральной среды, содержащей 10% FBS. Клетки центрифугировали, промывали и ресуспендировали в полной среде RPMI 1640. Затем клетки высевали при плотности 1×106 на мл и инкубировали с возрастающими концентрациями либо пептоида AG12A, либо контрольного пептоида (1 мкМ, 10 мкМ, 20 мкМ, 40 мкМ, 60 мкМ, 80 мкМ, 100 мкМ, 200 мкМ или 500 мкМ) в течение 30 минут при 37°C. Антигенпрезентирующие клетки выделяли из селезенки мышей дикого типа B10.PL, а затем к культуре добавляли 10 мкг/мл MBP Ac1-11, MOG 35-55 или LPS для стимуляции клеток. Клетки оставляли в культуре на 5 дней, окрашивали анти-CD4-PerCp антителом (BD Biosciences) и помещали на проточный цитометр FACS Calibur для оценки деления клеток. Данные анализировали с использованием платформы для выполнения компьютерных программ Flowjo (Treestar) по пролиферации для определения процента делящихся клеток. Затем с использованием компьютерной программы Graphpad Prism строили график по данным процента деления клеток, и этот график представляли в виде линейной кривой.
Получение конъюгатов «рутений-пептоид». Бис(2,2'-бипиридин)-4'-метил-4-карбоксибипиридин-рутений-бис(гексафторфосфат), диизопропилкарбодиимид и HOBt растворяли в ДМФ и подвергали реакции с ранее полученными деблокированными пептоидами в течение 2 часов при комнатной температуре (Lee et al., 2008). Соединения промывали, отщепляли от смолы, как описано выше, и очищали с помощью ВЭЖХ. Массу каждого пептоида определяли с помощью масс-спектрометра MALDI-Voyager DE Pro.
Анализ на пролиферацию путем включения меченного тритием тимидина. У Vα2.3/Vβ8.2-TCR-трансгенных мышей, ранее не подвергавшихся обработке, или у 2D2 MOG 35-55 TCR-трансгенных мышей брали селезенку и получали моноклеточные суспензии путем пропускания под давлением через 70 мкм-фильтр для клеток (BD Biosciences). CD4+-T-клетки выделяли, как описано выше, и ресуспендировали в полной среде RPMI, не содержащей фенолового красного. 1×105 клеток на лунку высевали в 96-луночный планшет и инкубировали с 1 мкМ- или 100 нМ-концентрациями AG12A-Ru2+, контрольного пептида-Ru2+, ДМСО или PBS с четырьмя повторностями. Затем клетки облучали в течение 10 минут под ксеноновой дуговой лампой 150 ватт (Oriel, Stamford, CT), как описано в литературе (Lee et al., 2008). После облучения Т-клетки активировали 10 мкг/мл MBP Ac1-11 и 3×105 антигенпрезентирующих клеток на лунку. Культуры выдерживали в 96-луночных плоскодонных планшетах в течение 96 часов при 37°C в условиях повышенной влажности в атмосфере 5% CO2/воздуха. На лунки подавали импульс 0,5 мкКи/лунку [метил-3Н]тимидина в течение последних 16 часов культивирования. Клетки собирали на стеклянных фильтрах и включение [метил-3Н]тимидина измеряли на счетчике Betaplate (PerkinElmer Wallac, Gaithersburg, MD). Фоновые уровни пролиферации клеток, которые не были стимулированы антигеном, вычитали для определения процента максимальной пролиферации для каждого условия. Результаты определяли как среднее для культур с четырьмя повторностями, и представляли как ср. ст. ош.
Адоптивный перенос. У Vα2.3/Vβ8.2-TCR-трансгенных мышей, ранее не подвергавшихся обработке, брали селезенку и получали моноклеточные суспензии путем пропускания под давлением через 70 мкм-фильтр для клеток (BD Biosciences). CD4+-T-клетки выделяли, обрабатывали AG12A-Ru2+ или контрольным пептоидом-Ru2+, облучали и активировали пептидом MBP Ac1-11, как описано выше. Через 72 часа клетки промывали PBS, и 10×106 клеток i.р. инъецировали мышам B10.PL, ранее не подвергавшимся обработке. Затем мышей ежедневно наблюдали на выявление клинических признаков EAE, как описано в литературе (Racke, 2001).
Скрининг-анализ гранул методом Bicolor. Приблизительно 300000 гранул подвергали набуханию в ДМФ, промывали PBS и уравновешивали в полной среде RPMI 1640, содержащей 3% BSA. CD4+-T-клетки, выделенные у мышей с EAE или у мышей дикого типа, ресуспендировали в RPMI и метили с использованием квантовых точек (Invitrogen) в соответствии с инструкциями производителей. CD4+-T-клетки, выделенные у мышей с EAE, метили красителем Qtracker 655 (красным), а CD4+-T-клетки, выделенные у мышей дикого типа, метили красителем Qtracker 565 (зеленым). Меченые клетки смешивали в отношении 1:1 с клетками каждого типа при плотности приблизительно 10×106. Затем клетки инкубировали с библиотекой пептоидных гранул в течение ночи в инкубаторе при 37°C с 5% CO2 при легком встряхивании. Гранулы осторожно промывали 2 раза средой RPMI, а затем визуализировали под флуоресцентным микроскопом (Olympus BX-51) с возбуждением 340-380 нм с использованием фильтра DAPI (с полным увеличением 100X). Гранулы, связывающиеся только с клетками, меченными красным, отбирали вручную с помощью 20-мкл пипетки. Затем «наилучшие» гранулы промывали, кипятили с 1% ДСН в течение 30 минут и подвергали автоматическому секвенированию по Эдману.
ПРИМЕР 2 - Результаты
Скрининг на специфические аутореактивные Т-клеточные лиганды при EAE. Заболевание EAE, подобное рассеянному склерозу (MS) (Noseworthy et al., 2000), индуцировали у генетически восприимчивых видов грызунов путем иммунизации миелиновыми белками или пептидами, или путем пассивного переноса миелин-специфических CD4+-T-клеток (Zamvil and Steinman, 1990). Исследования EAE показали, что миелин-специфические CD4+-T-клетки, которые активируются в периферических органах и продуцируют провоспалительные цитокины, играют важную роль в патогенезе MS (Zamvil and Steinman, 1990). Кроме того, эти Т-клетки экспрессируют Т-клеточные рецепторы, которые, очевидно, преимущественно распознают миелиновый основный белок в центральной нервной системе индивидуумов с заболеванием, что приводит к деструкции миелиновой оболочки и, в конечном счете, к нарушению неврологической функции (Zamvil and Steinman, 1990). Поэтому терапевтическая стратегия, которая специфически направлена только на аутореактивные Т-клетки, представляет интерес для исследования MS, а также других заболеваний, опосредуемых Т-клетками. Как и в первой стадии исследования, авторы настоящего изобретения сосредоточили свое внимание на получении синтетических соединений, обладающих способностью к высокоспецифическому связыванию с аутореактивными Т-клетками при EAE.
Для этих целей авторами настоящего изобретения была адаптирована стратегия скрининга, разработанная ранее в их лаборатории, для выделения пептоидов (Simon et al., 1992), которые обладают высокой специфичностью связывания с интегральными мембранными рецепторами (Udugamasooriya et al., 2008). В этом протоколе клетки, которые экспрессируют или не экспрессируют рецептор-мишень, но которые, предположительно, являются идентичными друг другу, метят красными и зелеными квантовыми точками, соответственно. Затем клетки этих двух типов смешивают и инкубируют с тысячами гидрофильных гранул, каждая из которых представляет уникальный пептоид. После этого гранулы, которые связываются только с клетками, меченными красным красителем, но не с зелеными клетками, собирают, при этом предполагается, что эти клетки обладают высокой специфичностью связывания с рецептором-мишенью, поскольку пептоид не должен распознавать все другие молекулы на клеточной поверхности, что позволяет исключить клетки, окрашенные зеленым, и выявить только «нужные» клетки (фиг. 1A).
Для применения такой технологии двухцветного скрининга в целях решения рассматриваемой проблемы, EAE индуцировали у мышей B10.PL путем иммунизации пептидом основного миелинового белка Ac1-11 (MBP Ac1-11). Иммунизация этим миелиновым пептидом приводит к активации и размножению CD4+-T-клеток, экспрессирующих MBP Ac1-11-специфичный Vα2.3/Vβ8.2 TCR (Ando et al., 1989). Мышей с EAE и здоровых контрольных мышей умерщвляли после развития у них клинически подтвержденного EAE (фиг. 5A), и выделяли CD4+-T-клетки. CD4+-T-клетки, выделенные у мышей с EAE, метили квантовыми точками, излучающими в красном диапазоне спектра, а Т-клетки, взятые у контрольных мышей, метили квантовыми точками, излучающими в зеленом диапазоне спектра. Затем клетки смешивали в отношении 1:1 и инкубировали с представленной на гранулах пептоидной библиотекой, содержащей приблизительно 300000 пептоидов (фиг. 5B). Гипотеза, высказанная авторами настоящего изобретения, заключается в том, что миллионы различных Т-клеток во всех популяциях должны присутствовать на низких уровнях, и что эти две популяции могут присутствовать, до некоторой степени, в одинаковых количествах. Основным исключением должно быть возрастающее количество MBP Ac1-11-специфичных аутореактивных Т-клеток, которые размножаются в ответ на иммунизацию мышей с EAE указанным аутоантигеном. Это позволяет предположить, что, если гранулы связываются только с красными клетками, то такие клетки, по всей вероятности, будут представлять собой аутореактивные Т-клетки (фиг. 1A).
После инкубирования с пептоидными гранулами, авторами настоящего изобретения были идентифицированы два предполагаемых наилучших пептоида, которые, как наблюдалось, специфически связываются с CD4+-T-клетками, выделенными у мышей с EAE, но не с Т-клетками, выделенными у здоровых контрольных мышей (фиг. 1B, панели i и ii). Представлена другая фотография, на которой изображены пептоидные гранулы, неспецифически связывающиеся с CD4+-T-клетками, выделенными у мышей с EAE и у здоровых контрольных мышей (фиг. 1B, панель iii). Пептоиды на двух гранулах, оцененных как наилучшие, секвенировали путем деградации по Эдману (Alluri et al., 2003), и их выведенные структуры проиллюстрированы на фиг. 1C. Было обнаружено, что последовательности двух «наилучших» пептоидов имеют некоторое сходство. Авторы настоящего изобретения сосредоточили свое внимание на более подробной характеризации одного из пептоидов (AG12A).
Пептоид AG12A представляет собой лиганд для аутореактивных Т-клеток при EAE. Для того чтобы определить, связывается ли AG12A с аутореактивным TCR, авторами настоящего изобретения были использованы трансгенные мыши, у которых подавляющее большинство CD4+-T-клеток экспрессируют MBP Ac1-11-специфический TCR (Vα2.3/Vβ8.2 TCR) (Goverman et al., 1993). У этих мышей выделяли CD4+-T-клетки и тестировали на связывание с AG12A. Эту процедуру проводили несколькими способами. Сначала, AG12A повторно синтезировали на гранулах, поскольку такой пептоид представляет собой контрольный пептоид, который не был выбран в качестве Т-клеточного лиганда (фиг. 6). Затем гранулы инкубировали с Т-клетками, меченными квантовыми точками, излучающими в красном диапазоне спектра. Как показано на фиг. ID, CD4+-T-клетки, взятые от MBP-Ac1-11-TCR-трансгенных мышей, связывались с пептоидом AG12A, представленным на гранулах, а CD4+-T-клетки дикого типа не связывались с этим пептоидом (фиг. 1D).
Для дополнительного зондирования связывания AG12A с MBP- Ac1-11-специфическими Т-клетками, авторами настоящего изобретения был проведен эксперимент по химическому перекрестному связыванию, который включает окисление дигидроксифенилаланина (DOPA), присоединенного к пептоиду, с образованием промежуточного соединения ортохинона. Это промежуточное соединение может перекрестно связываться с расположенными рядом нуклеофильными остатками на белке рецептора-мишени (Burdine et al., 2004; Liu et al., 2006; Lim et al., 2007). При этом перекрестное связывание должно наблюдаться только в том случае, если DOPA-AG12A и рецептор-мишень находятся в непосредственной близости друг от друга, поскольку крупномасштабные контрольные эксперименты показали, что такой химический метод не может быть применен для связывания молекул, если только они не составляют комплекс (Liu et al., 2006). CD4+-T-клетки, взятые у Vα2.3/Vβ8.2-TCR-трансгенных мышей, инкубировали с возрастающими концентрациями меченного биотином DOPA-AG12A или контрольного DOPA-пептоида, меченного биотином. После обработки периодатом натрия, клетки окрашивали стрептавидином, конъюгированным с флуорохромом, и анти-CD4+ антителом, конъюгированным с другим флуорохромом. Пептоиды, связывающиеся с Т-клетками, оценивали путем вычисления средней интенсивности флуоресценции CD4+/стрептавидин+-клеток. Было обнаружено, что AG12A связывается с MBP Ac1-11-специфичными Т-клетками с KD, равным приблизительно 40 мкМ (фиг. 2A-B). Однако какого-либо взаимодействия между биотинилированным AG12A и Т-клетками, взятыми у мышей дикого типа, и между биотинилированным контрольным пептоидом, связанным с Vα2.3/Vβ8.2-TCR-трансгенными Т-клетками, не детектировалось (фиг. 2B).
Взаимодействие «пептоид-клетка» также анализировали с помощью электрофореза в ДСН-ПААГ и вестерн-блоттинга, проводимого с использованием нейтравидина, связанного с пероксидазой хрена (НА-ПХ). Биотин-содержащий продукт с кажущейся массой 45 кДа детектировался при инкубировании биотин-DOPA-AG12A с TCR-трансгенными Т-клетками, но не с CD4--клетками или CD4+-T-клетками, взятыми у мышей дикого типа (фиг. 2C). Молекулярная масса α- и β-цепей TCR составляет приблизительно 45 и 40 кДа, соответственно (Zamvil and Steinman, 1990), что позволяет предположить о наличии перекрестного связывания AG12A с TCR. Кроме того, при зондировании блота анти-α-Vα2 TCR антителом наблюдался продукт, который имел массу приблизительно 45 кДа и который перекрывался с полосой, детектируемой с использованием НА-ПХ, что также дает основание предположить, что AG12A перекрестно связывается с MBP Ac1-11-специфическим TCR (фиг. 2C).
AG12A представляет собой специфический антагонист опосредуемой антигеном пролиферации аутореактивных Т-клеток. Для того чтобы определить, может ли связывание пептоида с TCR подавлять антигенспецифическую пролиферацию Т-клеток, CD4+-T-клетки, взятые у MBP-Ac1-11-TCR-трансгенных мышей, инкубировали с возрастающими концентрациями AG12A или контрольного пептоида, метили сукцинимидоэфиром диацетата карбоксифлуоресцеина (CFSE) и стимулировали пептидом MBP Ac-11 и антигенпрезентирующими клетками. CSFE способен проникать в клетки в форме сложного эфира, но эти группы, после проникновения соединения в клетку, гидролизуются, что делает клетку непроницаемой. Таким образом, деление клеток приводит к снижению внутриклеточной концентрации флуорофора. После инкубирования в течение 5 дней, деление клеток оценивали с помощью проточной цитометрии. Было обнаружено, что AG12A ингибирует пролиферацию аутореактивных MBP Ac1-11-специфических Т-клеток в зависимости от дозы, где IC50 составляет приблизительно 60-80 мкM (фиг. 3A). Такое снижение пролиферации не наблюдается в случае стимуляции трансгенных Т-клеток в присутствии контрольного пептоида (фиг. 3A), и AG12A не ингибирует пролиферацию В-клеток (фиг. 3B). Особенно важно отметить, что AG12A также не ингибирует стимулированную антигеном пролиферацию TCR-трансгенных Т-клеток, специфичных к миелиновому олигодендроцитарному гликопротеину (MOG) 35-55 (фиг. 3C). Этот эксперимент со всей очевидностью продемонстрировал, что AG12A является специфичным к Т-клеткам, которые распознают антиген MBP Ac1-11, и такое распознавание не связано с какой-либо общей аффинностью по отношению к любым активированным Т-клеткам.
Ex vivo инактивация аутореактивных Т-клеток с использованием конъюгата «рутений-пептоид». Антагонист AG12A (наилучший антагонист в первичном скрининге (Kodadek et al., 2004)), обладающий активностью, превышающей активность при IC50=40 мкМ, может оказаться желательным для его практического применения. Для этой цели AG12A конъюгировали с комплексом трис-бипиридил-рутения(II), который представляет собой эффективный катализатор для получения синглетного кислорода при облучении этого комплекса видимым светом (Lee et al., 2008). Синглетный кислород представляет собой в высокой степени реакционноспособную молекулу, которая может модифицировать и инактивировать большинство белков, но которая имеет ограниченный радиус рассеяния, составляющий только 40-80 Å. Таким образом инактивируются только те белки, которые расположены в непосредственной близости от радиоактивного рутения. При нацеливании на белки-мишени посредством пептоидного лиганда может быть достигнута в высокой степени специфическая инактивация белка, стимулированного облучением (Lee et al., работа находится на стадии подготовки к печати). MBP-Ac1-11-специфичные TCR-трансгенные Т-клетки инкубировали с возрастающими концентрациями конъюгата AG12A-рутений (фиг. 4A) или конъюгата контрольный пептид-рутений (фиг. 6), а затем клетки облучали видимым светом (фильтр с отсечкой <380 нм). После облучения в течение десяти минут, Т-клетки активировали аутоантигеном MBP Ac1-11 в присутствии антигенпрезентирующих клеток. Пролиферацию клеток оценивали с помощью анализа с использованием меченного тритием тимидина. Как показано на фиг. 4B, конъюгат AG12A-рутений ингибировал пролиферацию MBP Ac1-11-специфических аутореактивных Т-клеток на достаточно высоком уровне при концентрации 100 нM (фиг. 4B). Активность этого конъюгата приблизительно в 700 раз превышала активность отдельно взятого пептоида. Ингибирования не наблюдалось в случае использования CD4+-T-клеток, взятых у MOG-35-55-TCR-трансгенных мышей (фиг. 4C), что также указывало на специфичность AG12A к MBP Ac1-11-специфичным аутореактивным Т-клеткам.
Была проведена терапия методом фотофореза, при которой клетки удаляли, обрабатывали фотореактивным лекарственным средством, облучали УФ-светом и снова вводили пациенту путем вливания (Rostami et al., 1999; Besnier et al., 2002; Cavaletti et al., 2006). Таким образом, хотя синий цвет, необходимый для запуска продуцирования синглетного кислорода, катализируемого трис-бипиридилрутением, не может проникать в живой организм, однако, ex vivo инактивация аутоиммунных Т-клеток посредством конъюгата «пептоид-рутений» вполне осуществима, как показали уже ранее проведенные исследования. Для проверки этой теории и для подтверждения того факта, что аутореактивные Т-клетки становятся невосприимчивыми после их обработки конъюгатом «пептоид-рутений» и облучения светом, авторами настоящего изобретения была использована модель адоптивной передачи EAE. CD4+-T-клетки выделяли у MBP-Ac1-11-TCR-трансгенных мышей, обрабатывали конъюгатом «AG12A-рутений» или конъюгатом «контрольный пептоид-рутений», облучали, стимулировали пептидом MBP Ac1-11 в присутствии антигенпрезентирующих клеток и снова инъецировали реципиентам, которые ранее не участвовали в экспериментах. Затем этих животных обследовали на клинические признаки EAE. Как и предполагалось, у животных, которым были инъецированы стимулированные антигеном аутореактивные Т-клетки, обработанные конъюгатом «контрольный пептоид-рутений» или вообще не обработанные пептоидом, развивался EAE (фиг. 4D). Если Т-клетки не были стимулированы ни антигеном, ни пептоидом, то адоптивный перенос не приводил к развитию EAE, как и ожидалось. Удивительно то, что MBP Ac1-11 специфические CD4+-T-клетки, стимулированные антигеном и обработанные конъюгатом «AG12A-рутений», не индуцировали развитие EAE у животных-реципиентов (фиг. 4D). Этот эксперимент продемонстрировал возможность применения конъюгатов «рутений-пептоид», нацеленных на аутореактивные Т-клетки, в качестве эффективных фотоактивированных ингибиторов активации аутоиммунных Т-клеток ex vivo.
ПРИМЕР 3 - Обсуждение
Авторами настоящего изобретения был представлен протокол скрининга комбинаторной библиотеки, который может быть использован для получения синтетических молекул, обладающих высокой специфичностью связывания с антигенспецифическими аутоиммунными Т-клетками. В этом исследовании CD4+-T-клетки, взятые у мышей с EAE, и CD4+-T-клетки, взятые у здоровых контрольных мышей, метили различным образом окрашенными квантовыми точками, смешивали и инкубировали с библиотекой, состоящей приблизительно из 300000 пептоидов, представленных на гидрофильных гранулах (фиг. 1A). Библиотеку создавали методом разделения и объединения так, чтобы каждая гранула представляла уникальный пептоид. Затем выделяли две гранулы, которые, как было обнаружено, связывались с Т-клетками, помеченными красным красителем, но не с T-клетками, помеченными зеленым красителем. Гипотеза, высказанная авторами настоящего изобретения, состоит в том, что две популяции могут отличаться главным образом тем, что в них присутствуют или отсутствуют высокие уровни аутореактивных T-клеток, которые запускают EAE, и, таким образом, пептоиды, которые являются предпочтительными для клеток, происходящих от мышей с EAE, аналогичным образом могут представлять собой лиганды для этих аутореактивных T-клеток. Кроме того, авторами настоящего изобретения было высказано предположение, заключающееся в том, что наиболее вероятным механизмом, посредством которого пептоид может дифференцировать различные Т-клетки, является прямое связывание с Т-клеточным рецептором (TCR).
Один из пептоидов, выявленных в результате этого скрининга, представляет собой AG12A (фиг. 1C), который был подробно охарактеризован, и полученные данные подтвердили вышеуказанные предположения. Было показано, что AG12A представляет собой высокоспецифичный лиганд для MBP Ac1-11-специфичных аутореактивных Т-клеток, которые инициируют развитие заболевания у данной модели. Было показано, что повторно синтезированный пептоид связывается с трансгенными MBP Ac1-11-реактивными Vα2.3/Vβ8.2 TCR-содержащими Т-клетками, но не с нормальными Т-клетками, если указанный пептоид присутствовал на гранулах (фиг. 1D). Специфическое связывание также наблюдалось в анализе, проводимом методом проточной цитометрии, в том случае, если флуоресцентно меченный растворимый пептоид был инкубирован с аутоиммунными Т-клетками (фиг. 2A-B). Было подтверждено, что AG12A, по своей функции, представляет собой антагонист антиген-зависимой пролиферации MBP Ac1-11-специфичных Т-клеток. Важно отметить, что этот пептоид не оказывал воздействия на миелин-специфические Т-клетки, которые распознавали другой антиген (фиг. 3C), и это также указывало на высокую специфичность связывания с MBP Ac1-11-специфическими Т-клетками. И наконец, данные по перекрестному связыванию показали, что этот пептоид непосредственно связывается с TCR этих клеток (фиг. 2C), хотя полученные данные не могут абсолютно исключать возможности перекрестного связывания пептоида с другим белком, масса которого аналогична массе одной из цепей TCR, и который присутствует только на MBP Ac1-11-специфических клетках. Однако это кажется совсем маловероятным.
Насколько известно авторам настоящего изобретения, описанный пример является первым примером синтетических неприродных молекул, способных специфически связываться с антигенспецифическими Т-клетками без требований MHC-презентации. В предыдущих попытках осуществления нацеливания на аутореактивные Т-клетки были, в частности, использованы пептидные антигены, которые, как известно или как предполагается, ассоциируются с развитием заболевания, и была проведена вакцинация этими молекулами или их слегка модифицированными производными, например, путем введения D-аминокислот (Vandenbark et al., 1989; Howell et al., 1989; Wraith et al., 1989). Этот подход очень отличался от описанного здесь подхода. Кроме того, использование таких модифицированных пептидных лигандов в испытаниях с участием человека не дали положительных результатов, а точнее результатов в отношении обострения заболеваний (Bielekova et al., 2000; de Haan et al., 2005), что еще раз подчеркивает трудности, связанные с рациональной разработкой терапевтических средств, нацеленных на аутореактивные Т-клетки. Важной особенностью технологии скрининга, с помощью которой были идентифицированы эти молекулы, является то, что в данном случае не требуется каких-либо знаний о нативном антигене, распознаваемом T-клетками. Стоит признать, что при исследовании EAE, проведенном для подтверждения эффективности AG1A, авторами настоящего изобретения были использованы аутореактивные Т-клетки, природа которых уже хорошо охарактеризована, но сам по себе простой скрининг включал идентификацию представленных на гранулах соединений, связывающихся с клетками, которые являются более распространенными в одной популяции, чем в другой. Поэтому такая технология, в общих чертах, представляет собой эффективное средство для выделения комплексов «пептоид-аутоиммунные клетки».
Так, например, очевидно, что описанный здесь подход может быть применен для обследования пациентов и пациентов соответствующей контрольной группы в целях идентификации пептоидов, которые связываются с высокоамплифицированными Т-клетками у человека. Также вероятно, что тот же подход должен оказаться эффективным для выделения пептоидов, связывающихся с антигенспецифичными В-клетками. Совершенно очевидно, что природа иммунного ответа у человека с аутоиммунным заболеванием должна быть более поликлональной, чем это наблюдалось у используемых здесь мышей с простой моделью EAE. Это должно способствовать идентификации нескольких пептоидов, имитирующих связывание различных антигенов с другими Т-клетками. Тем не менее, несмотря на избыточность уровня поликлональности, применяемый здесь подход такого же типа должен оказаться эффективным для идентификации пептоидов, распознающих по меньшей мере большинство встречающихся антигенспецифичных аутоиммунных клеток.
Авторами настоящего изобретения было высказано предположение, что такая технология будет представлять собой ценный инструмент, который может быть применен в общей и прикладной иммунологии. Эксперимент, проводимый методом проточной цитометрии и проиллюстрированный на фиг. 2B, показал, что эти пептоиды могут быть использованы для обогащения популяции аутореактивными Т-клетками, что позволит проводить более тщательное их исследование. Было также подтверждено, что протокол этого типа может представлять собой эффективную процедуру диагностики аутоиммунных заболеваний, таких как MS, для которого пока не существует подходящего молекулярного анализа. И наконец, возможно, что такие пептоиды, связывающиеся с аутореактивными Т-клетками, могут быть с успехом использованы в способе терапии. Эксперимент, подробно проиллюстрированный на фиг. 4, показал, что конъюгат «трис-бипиридилрутений-пептоид» может инактивировать аутореактивные T-клетки ex vivo при его облучении видимым светом, что позволяет предположить о возможности применения такого конъюгата в терапии типа фотофереза. Альтернативно, возможно, что такой пептоид может быть использован для сообщения токсической нагрузки определенного типа Т-клеткам-мишеням. Совершенно очевидно, что преимущество такого подхода состоит в том, что в данном случае разрушаются только те аутореактивные Т-клетки, на которые нацелен данный пептоид, а функция Т-клеток со специфичностью к другим антигенам остается неизменной. Все современные методы лечения, направленные на блокирование или модуляцию функций иммунной системы при аутоиммунных заболеваниях, не могут идентифицировать «хорошие» Т-клетки от «плохих» Т-клеток, а дают скорее общий ответ, вызывающий серьезные побочные эффекты (Hauser, 2008; Hemmer and Hartung, 2007; Stuve, 2008; Schneider, 2008; Coles et al., 2008).
Все описанные и заявленные здесь композиции и способы могут быть применены в соответствии с настоящим описанием без излишнего экспериментирования. Хотя композиции и способы согласно изобретению описаны на предпочтительных вариантах его осуществления, однако, для специалистов в данной области очевидно, что в указанные композиции и способы, а также в стадии или порядок проведения стадий описанного здесь способа могут быть внесены изменения, не выходящие за рамки концепции, существа и объема изобретения. В частности, очевидно, что описанные здесь агенты могут быть заменены некоторыми другими агентами, которые являются химически и физиологически родственными, но могут давать те же самые или аналогичные результаты. Все эти аналогичные замены и модификации, очевидные для специалиста в данной области, не должны выходить за рамки существа, объема и концепции настоящего изобретения, определенных в прилагаемой формуле изобретения.
V. Библиография
Нижеследующие публикации, в той степени, в которой они относятся к описанным здесь процедурам или другим подробно описанным объектам изобретения, помимо тех публикаций, на которые авторы уже ссылались при описании изобретения, конкретно вводятся в настоящее описание посредством ссылки.
Патент США 3817837
Патент США 3850752
Патент США 3939350
Патент США 3996345
Патент США 4275149
Патент США 4277437
Патент США 4366241
Патент США 4680338
Патент США 4843092
Патент США 5141648
Патент США 5443826
Патент США 5563250
Патент США 5599795
Патент США 5856456
Патент США 5880270
Alluri et al., J. Am. Chem. Soc. 125:13995-4004, 2003.
Ando et al., Cell Immunol., 124:132-43, 1989.
Arend & Dayer, Arthritis Rheum., 38:151-60, 1995.
Arend et al., Annu. Rev. Immunol., 16:27-55, 1998.
Arend, Arthritis Rheum., 44:2224-2234, 2001.
Autenrieth et al., Infect. Immun., 62:2590-9, 1994.
Ball, Ann. Rheum. Dis., 30:213-223, 1971.
Bendzen et al., Scand. J. Rheumatol., 28:599-606, 1988.
Besnard et al., Gut, 43(5):634-38, 1998.
Besnier et al., Photodermatol. Photoimmunol. Photomed., 18:36-41, 2002.
Bielekova et al., Nat. Med., 6:1167-75, 2000.
Blumberg et al., Arthritis Rheum., 7:93-7, 1964.
Botoman et al., Am. Fam. Physician, 57(1):57-68, 1998.
Brandt et al., Arthritis Rheum., 43:1346-52, 2000.
Braun et al., Arthritis Rheum., 42:2039-44, 1999.
Brewerton et al., Lancet, 1:904-907, 1973a.
Brewerton et al., Lancet, 1:956-957, 1973b.
Brynskov et al., N. Engl. J. Med., 321(13):845-50, 1989.
Burdine et al., J. Amer. Chem. Soc., 126:11442-11443, 2004.
Burger & Dayer, Neurology, 45(6 Suppl. 6):S39-43, 1995.
Calin et al., In: The Spondylarthritides, Calin et al. (Eds.), Oxford, UK. Oxford University Press, 179, 1998.
Cann et al., Gut, 24(5):405-11, 1983.
Cavaletti et al., Neurol. Sci., 27:24-32, 2006.
Chomarat et al., Arthritis Rheum., 38:1046-54, 1995.
Coles et al., N. Engl. J. Med., 359:1786-801, 2008.
de Haan et al., Mol. Immunol., 42:365-73, 2005.
De Jager et al., Semin. Nucl. Med., 23(2):165-179, 1993.
de Waal et al., J. Exp. Med., 174:1209-20, 1991.
Dinarello, Int. Rev. Immunol., 16:457-99, 1998.
Dionne et al., Clin. Exp. Imunol., 112(3):435-42, 1998.
Doolittle and Ben-Zeev, Methods Mol Biol, 109:215-237, 1999.
Doran et al., J. Rheumatol. 30(2):316-20, 2003.
Drossman et al., Dig Dis Sci., 38(9):1569-80, 1999.
Drossman et al., Gastroenterology, 112(6):2120-37, 1997.
Drossman et al., Gastroenterology, 112(6):2120-37, 1997.
Eastgate et al., Lancet, 2:706-9, 1988.
Ettehadi et al., Clin. Exp. Immunol., 96:146-51, 1994.
Everhart and Renault, Gastroenterology, 100(4):998-1005, 1991.
Fearon and Locksley, Science, 72:50-53, 1996.
Feldtkeller et al., Rheumatol. Int. 23(2):61-66, 2003.
Fellerman et al., Am. J. Gastroenterol., 93(10):1860-66, 1998.
Firestein et al., Arthritis Rheum., 37:644-52, 1994.
Fujikawa et al., Ann. Rheum. Dis., 54:318-20, 1995.
Funakoshi et al., Digestion, 59(1):73-78, 1998.
Galley & Webster, Br. J. Anaesth., 77:11-16, 1996.
Gladman et al., J. Rheumatol., 22:675-9, 1995.
Gladman et al., Q. J. Med., 62:127-141, 1987.
Gladman, Rheum Dis Clin North Am, 18:247-56, 1992.
Goverman et al., Cell, 72:551-60, 1993.
Gulbis and Galand, Hum. Pathol., 24(12):1271-1285, 1993.
Gwee et al., Gut, 44(3):400-6, 1999.
Hahn & Tsao, In: Dubois' Lupus Erythematosus, 4th Ed., Wallace & Hahn (Eds.), Lea and Febiger, Philadelphia, 195-201, 1993.
Hannum et al., Nature, 343:336-40, 1990.
Harrison et al., J Rheumatol., 25(12):2324-2330, 1998.
Harrison et al., J Rheumatol., 25(12):2324-2330, 1998.
Hart et al., Clin. Exp. Immunol., 99(3):331-337, 1995.
Hart et al., Immunology, 84:536-42, 1995.
Hauser, N. Eng. J. Med., 359:1838-1841, 2008.
Hemmer and Hartung, Ann. Neurol., 62:314-26, 2007.
Hoffenberg et al., J. Pediatr., 134(4):447-52, 1999.
Hohler et al. J. Invest. Dermatol., 109(4):562-5, 1997.
Hollander et al., Ann. Intern. Med., 105:883-85, 1986.
Hollander, Scand. J. Gastroenterol. 27:721-26, 1992.
Horwitz and Fisher, N. Engl. J. Med., 344(24):1846-50, 2001.
Howell et al., Science, 246:668-70, 1989.
Jacob et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87:1233-7, 1990.
Jailwala et al., Ann. Intern. Med., 133(2):136-47, 2000.
Jarvis, Curr Opin Rheumatol., 10:459-467, 1998.
Jarvis, Curr Opin Rheumatol., 10:459-467, 1998.
Jarvis, Pediatr Ann., 31:437-446, 2002.
Jones et al., Br. J. Rheumatol., 33:834-9, 1994.
Jonsson and Brokstad, In: A Textbook of Rheumatology, 6th Ed., Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins, 495-504, 2001.
Jonsson et al., Br J Rheumatol., 32: 578-81, 1993.
Jonsson et al., Oral Dis., 8:130-140, 2002.
Kahle et al., Ann. Rheum. Dis., 51:731-4, 1992.
Kellow and Phillips, Gastroenterology, 92(6):1885-93, 1987.
Khan, Clin. Exp. Rheumatol. 20(6):6-10, 1998.
Khan, In: Ankylosing spondylitis and related spondyloarthropathies, Spine, State of the Art Reviews, 1990.
Kodadek et al., Acc. Chem. Res., 37:711-718, 2004.
Kotake et al., Infect. Immun., 67:2682-6, 1999.
Kotzin & O'Dell, In: Samler's Immunologic Diseases, 5th Ed., Frank et al. (Eds.), Little Brown & Co., Boston, 667-97, 1995.
Kotzin, Cell, 85:303-06, 1996.
Kuboyama, Kurume Med. J., 45(1):33-37, 1998.
Lahesmaa et al., J. Immunol., 148:3079-85, 1992.
Lee et al., Mol. Biosyst., 4:59-65, 2008.
Lee et al., Mol. Biosyst., 4:59-65, 2008.
Leiper et al., Baillieres Clin. Gastroenterol., 12(1):179-99, 1998.
Lim et al., J. Amer. Chem. Soc., 129:12936-12937, 2007.
Lim et al., J. Amer. Chem. Soc., 129:12936-12937, 2007.
Lipsky, In: Harrison's principles of internal medicine, Fauci et al. (Eds.), 14th Ed., NY, McGraw-Hill, 1880-1888, 1998.
Liu et al., J. Amer. Chem. Soc., 128:15228-15235, 2006.
Lo et al., Immunol Rev., 169:225-239, 1999.
Lugering et al., Ital. J. Gastroenterol. Hepatol., 30(3):338-44, 1998.
Lynn and Friedman, N. Engl. J. Med., 329(26):1940-5, 1993.
Macatonia et al., J. Immunol., 150:3755-65, 1993.
Makowiec et al., Z. Gastroenterol., 36(8):619-24, 1998.
Marsal et al., Rheumatology, 38:332-7, 1999.
McAlindon et al., Gut, 42(2):214-19, 1998.
McGonagle et al., Arthritis Rheum., 41:694-700, 1998.
McGonagle et al., Curr. Opin. Rheumatol., 11:244-50, 1999.
Mertz et al., Gastroenterology, 118(5):842-8, 2000.
Moll & Wright, Ann. Rheum. Dis., 32:181-201, 1973.
Moll & Wright, Semin. Arthritis Rheum., 3:55-78, 1973.
Murch, Nutrition, 14:780-83, 1998.
Nakamura et al., In: Handbook of Experimental Immunology (4th Ed.), Weir et al. (Eds), 1:27, Blackwell Scientific Publ., Oxford, 1987.
Neal et al., BMJ, 314(7083):779-82, 1997.
Nielen et al., Arthritis Rheum., 50(2):380-386, 2004.
Noseworthy et al., N. Engl. J. Med., 343:938-52, 2000.
Ohnishi et al., Int. Immunol., 6:817-30, 1994.
Olivos et al., Org. Lett., 4:4057-4059, 2002.
Partsch et al., Br. J. Rheumatol., 24:518-23, 1997.
Pimentel et al., Am. J. Gastroenterol., 95(12):3503-6, 2000.
Pociot et al., Scand. J. Immunol., 42:501-4, 1995.
Popkov et al., Nat. Proc. Acad. Sci. USA, 106(11):4378-83, 2009.
Prieur et al., Lancet, 2:1240-2, 1987.
Racke, Curr. Protoc. Neurosci., Chapter 9:Unit 97, 2001.
Rantapaa-Dahlqvist et al., Arthritis Rheum., 48(10):2741-2749, 2003.
Reimund et al., Eur. J. Clin. Invest., 28(2):145-50, 1998.
Ribbens et al., Eur. Cytokine Netw., 11:669-76, 2000.
Rogler &. Andus, World J. Surg., 22(4):382-89, 1998.
Rooney et al., Rheumatol. Int., 10:217-9, 1990.
Rostami et al., Mult. Scler., 5:198-203, 1999.
Rothstein, Med. Clin. North Am., 84(5):1247-57, 2000.
Ruemmele et al., Gastroenterol., 115(4):822-29, 1998.
Saiki et al., Scand. J. Gastroenterol., 33(6):616-22, 1998.
Salomonsson et al., Arthritis Rheum., 48:3187-201, 2003.
Salomonsson et al., Scand. J. Immunol., 55:336-42, 2002.
Salvarani et al., Curr. Opin. Rheumatol., 10:299-305, 1998.
Sandler, Gastroenterology, 99(2):409-15, 1990.
Sartor, Am. J. Gastroenterol., 92(12):5S-11S, 1997.
Schellekens et al., Arthritis Rheum., 43(1):155-163, 2000.
Schlaak et al., Clin. Exp. Rheumatol., 14:155-62, 1996.
Schlaak et al., Eur. J. Immunol., 22:2771-6, 1992.
Schlosstein et al., NE J. Medicine, 288:704-706, 1973.
Schneider, Curr. Pharm. Biotechnol., 9:431-8, 2008.
Schreiber, Neth. J. Med., 53(6):S24-31, 1998.
Sieper & Braun, Arthritis Rheum., 38:1547-54, 1995.
Simon et al., Clin. Exp. Immunol., 94:122-6, 1993.
Simon et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:9367-71, 1992.
Simon et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91:8562-6, 1994.
Soderholm et al., Gastroenterol., 117:65-72, 1999.
Stack et al., Lancet, 349(9051):521-24, 1997.
Stuve, J. Neurol. Sci., 274:39-41, 2008.
Talley et al., Gastroenterology, 109(6):1736-41, 1995.
Targan et al., N. Engl. J. Med., 337(15):1029-35, 1997.
Udugamasooriya et al., J. Amer. Chem. Soc., 130:5744-5752, 2008.
van den Berg, Semin Arthritis Rheum., 30(5 Suppl.2):7-16, 2001.
van Dullemen et al., Gastroenterol., 109(1):129-35, 1995.
van Hogezand & Verspaget, Drugs, 56(3):299-305, 1998.
Vandenbark et al., Nature, 341:541-4, 1989.
Warrington et al., Arthritis Rheum., 44:13-20, 2001.
Wawrzynczak and Thorpe, FEBS Lett., 207(2):213-216, 1986.
Weyand and Goronzy, Ann. NY Acad. Sci., 987:140-9, 2003.
Whitehead et al., Gastroenterology, 98(5 Pt 1):1187-92, 2000.
Wordsworth, In: Genes and Arthritis, Brit. Medical Bulletin, 51:249-266, 1995.
Wraith et al., Cell, 57:709-15, 1989.
Wright, Ann. Rheum. Dis., 15:348-56, 1956.
Wright, Clin. Orthop. Related Res., 143:8-14, 1979.
Xanthou et al., Arthritis Rheum., 44: 408-18, 2001.
Yin et al., Arthritis Rheum., 40:1788-97, 1997.
Yin et al., Rheumatology, 38:1058-67, 1999.
Zamvil and Steinman, Annu. Rev. Immunol., 8:579-621, 1990.
Claims (50)
1. Пептоид, имеющий формулу:
где n равно 0-8; L представляет собой линкер; Y представляет собой токсин или фрагменты антител; a R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 (где к формуле I или формуле II с каждым значением n выше 4 добавляется следующая группа R в порядке нумерации) независимо представляют собой водород; алкил; аллил; метил; этил; н-пропил; изопропил; н-бутил; изобутил; втор-бутил; трет-бутил; пентил; гексил; изопентил; арил; гетероарил; фуранил; индолил; тиофенил; тиазолил; имидазолил; изоксазоил; оксазоил; пиперонил; пиразоил; пирролил; пиразинил; пиридил; пиримидил; пиримидинил; пуринил; циннолинил; бензофуранил; бензотиенил; бензотриазолил; бензоксазолил; хинолин; изоксазолил; изохинолин-циклоалкил; алкенил; циклоалкенил; фенил; метоксиэтил; (R)-метилбензил; С1-С6алкил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(С1-С6алкил); С2-С6алкинил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(C1-С6алкил); С2-С6алкенил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(С1-С6алкил).
где n равно 0-8; L представляет собой линкер; Y представляет собой токсин или фрагменты антител; a R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 (где к формуле I или формуле II с каждым значением n выше 4 добавляется следующая группа R в порядке нумерации) независимо представляют собой водород; алкил; аллил; метил; этил; н-пропил; изопропил; н-бутил; изобутил; втор-бутил; трет-бутил; пентил; гексил; изопентил; арил; гетероарил; фуранил; индолил; тиофенил; тиазолил; имидазолил; изоксазоил; оксазоил; пиперонил; пиразоил; пирролил; пиразинил; пиридил; пиримидил; пиримидинил; пуринил; циннолинил; бензофуранил; бензотиенил; бензотриазолил; бензоксазолил; хинолин; изоксазолил; изохинолин-циклоалкил; алкенил; циклоалкенил; фенил; метоксиэтил; (R)-метилбензил; С1-С6алкил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(С1-С6алкил); С2-С6алкинил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(C1-С6алкил); С2-С6алкенил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(С1-С6алкил).
2. Пептоид по п. 1, где n равно 5.
3. Пептоид по п. 1, где R1 представляет собой С1-С6алкил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(С1-С6алкил); С2-С6алкинил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(С1-С6алкил);
С2-С6алкенил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(С1-С6алкил).
С2-С6алкенил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(С1-С6алкил).
4. Пептоид по п. 1, где R1 представляет собой С1-С6алкил, замещенный по концу группой NH2.
5. Пептоид по п. 1, где R1 представляет собой 4-аминобутан.
6. Пептоид по п. 1, где R2 представляет собой С1-С6алкил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(С1-С6алкил); С2-С6алкинил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(С1-С6алкил); С2-С6алкенил, который является незамещенным или замещен группами NH2, ОН, SH, N(С1-С6алкил)2, О(С1-С6алкил) или S(С1-С6алкил).
7. Пептоид по п. 1, где R2 представляет собой С1-С6алкил, замещенный по концу группой NH2.
8. Пептоид по п. 7, где R1 представляет собой 4-аминобутан.
9. Пептоид по п. 1, где R3 представляет собой С1-С6алкил, С2-С6алкинил или С2-С6алкенил.
10. Пептоид по п. 9, где R3 представляет собой изобутил.
11. Пептоид по п. 1, где R4 представляет собой С1-С6алкил, замещенный по концу группой NH2.
12. Пептоид по п. 11, где R4 представляет собой 4-аминобутановую группу.
13. Пептоид по п. 1, где R5 представляет собой (R)-метилбензильную группу.
14. Пептоид по п. 1, где R6 представляет собой фуранильную группу.
15. Пептоид по п. 1, где R7 представляет собой С1-С6алкил, замещенный по концу группой NH2.
16. Пептоид по п. 15, где R7 представляет собой 4-аминобутановую группу.
17. Пептоид по п. 1, где R8 представляет собой С1-С6алкил.
18. Пептоид по п. 17, где R8 представляет собой изобутильную группу.
19. Пептоид по п. 1, где R1, R2, R4 и R7 представляют собой 4-аминобутановые группы; R3 и R8 представляют собой изобутильные группы; R5 представляет собой (R)-метилбензильную группу, a R6 представляет собой фуранильную группу.
20. Пептоид по п. 19, где R8 содержит на своем конце лизильную, гидроксильную или карбоксильную группу.
21. Способ взятия аутоиммунных Т-клеток у индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием, включающий:
(a) получение пептоида по пп. 1-20, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками, где указанный пептоид связан с носителем;
(b) контактирование образца, содержащего Т-клетки и взятого от указанного индивидуума, с указанным пептоидом, связанным с носителем, в течение периода времени, достаточного для связывания аутоиммунных Т-клеток с указанным пептоидом, связанным с носителем; и
(с) отделение указанного носителя от указанного образца.
(a) получение пептоида по пп. 1-20, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками, где указанный пептоид связан с носителем;
(b) контактирование образца, содержащего Т-клетки и взятого от указанного индивидуума, с указанным пептоидом, связанным с носителем, в течение периода времени, достаточного для связывания аутоиммунных Т-клеток с указанным пептоидом, связанным с носителем; и
(с) отделение указанного носителя от указанного образца.
22. Способ по п. 21, дополнительно включающий возращение образца со стадии (с) указанному индивидууму.
23. Способ по п. 21, где указанным аутоиммунным заболеванием является рассеянный склероз или ревматоидный артрит.
24. Способ по п. 21, в котором указанным пептоидом является 3-мер, 4-мер, 5-мер, 6-мер, 7-мер, 8-мер, 9-мер или 10-мер.
25. Способ по п. 21, в котором указанным носителем являются гранула, чип, фильтр, тест-полоска, мембрана, полимерная матрица или лунка.
26. Способ по п. 21, в котором указанным образцом является кровь, цереброспинальная жидкость или сперма.
27. Способ по п. 26, в котором указанным образцом является кровь, и указанную кровь берут у указанного индивидуума, обрабатывают ex vivo и возвращают указанному индивидууму.
28. Способ по п. 27, в котором указанную кровь пропускают через указанный лиганд, связанный с носителем, и возвращают указанному индивидууму по замкнутой цепи кровообращения.
29. Способ по п. 21, дополнительно включающий взятие указанного образца у указанного индивидуума.
30. Способ по п. 21, где указанным индивидуумом является человек или мышь.
31. Способ уничтожения аутоиммунных Т-клеток, взятых у индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием, включающий:
(a) получение пептоида по пп. 1-20, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками, где указанный пептоид конъюгирован с токсином; и
(b) контактирование образца, содержащего Т-клетки и взятого у указанного индивидуума, с указанным конъюгатом в течение периода времени, достаточного для связывания по меньшей мере одной аутоиммунной Т-клетки с указанным конъюгатом,
где указанный конъюгат вызывает гибель указанной аутоиммунной Т-клетки.
(a) получение пептоида по пп. 1-20, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками, где указанный пептоид конъюгирован с токсином; и
(b) контактирование образца, содержащего Т-клетки и взятого у указанного индивидуума, с указанным конъюгатом в течение периода времени, достаточного для связывания по меньшей мере одной аутоиммунной Т-клетки с указанным конъюгатом,
где указанный конъюгат вызывает гибель указанной аутоиммунной Т-клетки.
32. Способ по п. 31, в котором указанный образец обрабатывают ex vivo и где указанный способ дополнительно включает возвращение образца указанному индивидууму.
33. Способ по п. 31, где указанным аутоиммунным заболеванием является рассеянный склероз или ревматоидный артрит.
34. Способ по п. 31, в котором указанным пептоидом является 3-мер, 4-мер, 5-мер, 6-мер, 7-мер, 8-мер, 9-мер или 10-мер.
35. Способ по п. 31, в котором указанным токсином является рицин, дифтерийный токсин или холерный токсин.
36. Способ по п. 31, в котором указанным токсином является фотоактивируемый токсин.
37. Способ по п. 31, в котором указанным фотоактивируемым токсином является трис-бипиридил-рутений (II), а стадия (b) дополнительно включает облучение указанного образца видимым светом.
38. Способ по п. 31, в котором указанным образцом является кровь, цереброспинальная жидкость или сперма.
39. Способ по п. 31, дополнительно включающий взятие указанного образца у указанного индивидуума.
40. Способ по п. 31, где указанный индивидуумом является человек или мышь.
41. Способ уничтожения аутоиммунных Т-клеток, взятых у индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием, или находящихся у него, включающий:
(a) получение пептоида по пп. 1-20, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками, где указанный пептоид конъюгирован с молекулой, содержащей Fc IgG; и
(b) контактирование популяции аутоиммунных Т-клеток с указанным конъюгатом в течение периода времени, достаточного для связывания по меньшей мере одной аутоиммунной Т-клетки с указанным конъюгатом,
где указанный конъюгат индуцирует приток иммунных эффекторов к указанным аутоиммунным Т-клеткам, что приводит к их гибели.
(a) получение пептоида по пп. 1-20, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками, где указанный пептоид конъюгирован с молекулой, содержащей Fc IgG; и
(b) контактирование популяции аутоиммунных Т-клеток с указанным конъюгатом в течение периода времени, достаточного для связывания по меньшей мере одной аутоиммунной Т-клетки с указанным конъюгатом,
где указанный конъюгат индуцирует приток иммунных эффекторов к указанным аутоиммунным Т-клеткам, что приводит к их гибели.
42. Способ по п. 41, в котором указанную популяцию аутоиммунных Т-клеток обрабатывают ex vivo, и где указанный способ дополнительно включает возвращение образца со стадии (b) указанному индивидууму.
43. Способ по п. 41, где указанным аутоиммунным заболеванием является рассеянный склероз или ревматоидный артрит.
44. Способ по п. 41, в котором указанным пептоидом является 3-мер, 4-мер, 5-мер, 6-мер, 7-мер, 8-мер, 9-мер или 10-мер.
45. Способ по п. 41, в котором указанной молекулой, содержащей Fc IgG, является антитело, одноцепочечное антитело или Fc-фрагмент.
46. Способ по п. 45, в котором указанной молекулой, содержащей Fc IgG, является антитело или одноцепочечное антитело и указанный пептоид присоединен к антигенсвязывающему сайту указанного антитела.
47. Способ по п. 46, в котором указанной молекулой, содержащей Fc IgG, является Fc-фрагмент, не содержащий вариабельных областей IgG, и указанный пептоид присоединен к карбоксиконцу указанного Fc-фрагмента.
48. Способ по п. 41, в котором указанным образцом является кровь, цереброспинальная жидкость или сперма.
49. Способ по п. 41, дополнительно включающий взятие указанного образца у указанного индивидуума.
50. Способ по п. 41, в котором указанным индивидуумом является человек или мышь.
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US18236809P | 2009-05-29 | 2009-05-29 | |
US61/182,368 | 2009-05-29 | ||
US26060809P | 2009-11-12 | 2009-11-12 | |
US61/260,608 | 2009-11-12 | ||
PCT/US2010/036537 WO2010138797A1 (en) | 2009-05-29 | 2010-05-28 | Peptoid ligands for isolation and treatment of autoimmune t-cells |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2011154024A RU2011154024A (ru) | 2013-07-10 |
RU2563822C2 true RU2563822C2 (ru) | 2015-09-20 |
Family
ID=42335126
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011154024/15A RU2563822C2 (ru) | 2009-05-29 | 2010-05-28 | Пептоидные лиганды для выделения и обработки аутоиммунных т-клеток |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20100303835A1 (ru) |
EP (1) | EP2435827A1 (ru) |
JP (2) | JP5991916B2 (ru) |
KR (1) | KR20120034683A (ru) |
CN (1) | CN102449481B (ru) |
AU (1) | AU2010253797B2 (ru) |
BR (1) | BRPI1014995A2 (ru) |
CA (1) | CA2763685A1 (ru) |
CL (1) | CL2011002959A1 (ru) |
CO (1) | CO6440595A2 (ru) |
IL (1) | IL216658A (ru) |
MX (1) | MX2011012680A (ru) |
RU (1) | RU2563822C2 (ru) |
TW (1) | TWI606238B (ru) |
WO (1) | WO2010138797A1 (ru) |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20120122869A (ko) | 2009-06-02 | 2012-11-07 | 보드 오브 리전츠, 더 유니버시티 오브 텍사스 시스템 | 신경변성 질환을 갖는 대상에서 항체에 의해 인식되는 소분자의 확인법 |
MX344791B (es) * | 2011-01-10 | 2017-01-06 | Opko Pharmaceuticals Llc | Antígeno sustituto en enfermedades autoinmunes. |
WO2012129423A2 (en) | 2011-03-24 | 2012-09-27 | Opko Pharmaceuticals, Llc | Biomarker discovery in complex biological fluid using bead or particle based libraries and diagnostic kits and therapeutics |
US9770504B2 (en) | 2013-05-03 | 2017-09-26 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Generating peptoid vaccines |
WO2017004168A1 (en) | 2015-06-29 | 2017-01-05 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Compositions and methods for treating cancer and promoting wound healing |
JP7011830B2 (ja) | 2015-10-14 | 2022-01-27 | エックス-サーマ インコーポレイテッド | 氷晶形成を低減するための組成物および方法 |
EP3426672B1 (en) | 2016-03-09 | 2021-09-01 | Mike-Ann, LLC | Peptoid affinity ligands |
WO2017165438A1 (en) | 2016-03-25 | 2017-09-28 | Muralidhar Reddy Moola | Combinatorial synthesis and biomarker development |
CN108588020B (zh) * | 2018-03-30 | 2021-09-14 | 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 | 一种含有硒元素的近红外ii区量子点的新应用 |
CN110045105B (zh) * | 2018-11-09 | 2022-04-26 | 广州市妇女儿童医疗中心 | 柯萨奇A16病毒IgA抗体量子点免疫荧光层析试纸条及试剂盒 |
US20220242907A1 (en) * | 2019-07-03 | 2022-08-04 | University Of Houston System | Inhibitors of il-15 and their use in treating autoimmune/inflammatory disorders |
CN113024643B (zh) * | 2021-04-30 | 2022-05-13 | 武汉大学 | 一种人工拟肽及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (49)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5011771A (en) * | 1984-04-12 | 1991-04-30 | The General Hospital Corporation | Multiepitopic immunometric assay |
US4789628A (en) * | 1986-06-16 | 1988-12-06 | Vxr, Inc. | Devices for carrying out ligand/anti-ligand assays, methods of using such devices and diagnostic reagents and kits incorporating such devices |
US5149626A (en) * | 1987-05-14 | 1992-09-22 | Mclean Hospital Corporation | Multiple antigen immunoassay |
CA2115333A1 (en) * | 1993-02-16 | 1994-08-17 | Shigeo Hozumi | Polyfunctional vinyl ether compounds and photoresist resin composition containing the same |
US5705614A (en) * | 1993-04-09 | 1998-01-06 | Chiron Corporation | Methods of producing antigen forks |
ATE242485T1 (de) * | 1993-05-28 | 2003-06-15 | Baylor College Medicine | Verfahren und massenspektrometer zur desorption und ionisierung von analyten |
ZA95605B (en) * | 1994-04-28 | 1995-12-20 | Qualcomm Inc | Method and apparatus for automatic gain control and dc offset cancellation in quadrature receiver |
AUPO591797A0 (en) * | 1997-03-27 | 1997-04-24 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | High avidity polyvalent and polyspecific reagents |
ZA964814B (en) * | 1995-06-07 | 1998-02-09 | Glaxo Group Ltd | Peptides and compounds that bind to a receptor. |
US20020022227A1 (en) * | 1996-10-17 | 2002-02-21 | Short Jay M. | Morphatides: novel shape and structure libraries |
US20020006620A1 (en) * | 1996-10-17 | 2002-01-17 | Invitrogen Corporation | Morphatides: novel shape and structure libraries |
WO1998027209A1 (en) * | 1996-12-18 | 1998-06-25 | Emory University | Polycationic oligomers |
US6365347B1 (en) * | 1997-04-11 | 2002-04-02 | The Regents Of The University Of California | Method for identifying disruptors of biological pathways using genetic selection |
NZ516848A (en) * | 1997-06-20 | 2004-03-26 | Ciphergen Biosystems Inc | Retentate chromatography apparatus with applications in biology and medicine |
US6344330B1 (en) * | 1998-03-27 | 2002-02-05 | The Regents Of The University Of California | Pharmacophore recombination for the identification of small molecule drug lead compounds |
US6406632B1 (en) * | 1998-04-03 | 2002-06-18 | Symyx Technologies, Inc. | Rapid characterization of polymers |
AU4829099A (en) * | 1998-06-22 | 2000-01-10 | Regents Of The University Of California, The | Triggered optical biosensor |
US6406921B1 (en) * | 1998-07-14 | 2002-06-18 | Zyomyx, Incorporated | Protein arrays for high-throughput screening |
US6780582B1 (en) * | 1998-07-14 | 2004-08-24 | Zyomyx, Inc. | Arrays of protein-capture agents and methods of use thereof |
US6197599B1 (en) * | 1998-07-30 | 2001-03-06 | Guorong Chin | Method to detect proteins |
US6306643B1 (en) * | 1998-08-24 | 2001-10-23 | Affymetrix, Inc. | Methods of using an array of pooled probes in genetic analysis |
US6465183B2 (en) * | 1999-07-01 | 2002-10-15 | Agilent Technologies, Inc. | Multidentate arrays |
GB9919452D0 (en) * | 1999-08-17 | 1999-10-20 | Osteometer Biotech As | Specific autoimmune reactions against isomerised/optically inverted epitopes:application for diagnosis of autoimmune diseases |
WO2001027624A2 (en) * | 1999-10-08 | 2001-04-19 | Superarray, Inc. | Compositions and methods for detecting protein modification and enzymatic activity |
WO2001070685A2 (en) * | 2000-03-22 | 2001-09-27 | Solulink, Incorporated | Hydrazine-based and carbonyl-based bifunctional crosslinking reagents |
JP2004511753A (ja) * | 2000-05-04 | 2004-04-15 | イエール ユニバーシティー | タンパク質活性のスクリーニング用タンパク質チップ |
US20020103349A1 (en) * | 2000-05-25 | 2002-08-01 | Asher Nathan | Drug-oligonucleotides chimeric molecules |
JP2004501364A (ja) * | 2000-05-25 | 2004-01-15 | スノル・モレキュラー・コーポレーション | T−細胞レセプター相互作用のモジュレーション |
AU2001268173A1 (en) * | 2000-06-05 | 2001-12-17 | Chiron Corporation | Microarrays for performing proteomic analyses |
US7153682B2 (en) * | 2000-06-05 | 2006-12-26 | Chiron Corporation | Microarrays on mirrored substrates for performing proteomic analyses |
CA2419490C (en) * | 2000-08-15 | 2010-01-26 | Discerna Limited | Functional protein arrays |
GB0022978D0 (en) * | 2000-09-19 | 2000-11-01 | Oxford Glycosciences Uk Ltd | Detection of peptides |
US20030092009A1 (en) * | 2000-11-16 | 2003-05-15 | Kaia Palm | Profiling tumor specific markers for the diagnosis and treatment of neoplastic disease |
US7091046B2 (en) * | 2000-12-11 | 2006-08-15 | Hk Pharmaceuticals, Inc. | Multiplexed protein expression and activity assay |
JP4880188B2 (ja) * | 2001-01-23 | 2012-02-22 | プレジデント アンド フェロウズ オブ ハーバード カレッジ | 核酸プログラム型タンパク質アレイ |
US20020137106A1 (en) * | 2001-03-09 | 2002-09-26 | Ciphergen Biosystems, Inc. | Detection of biological pathway components |
CA2443777A1 (en) * | 2001-04-10 | 2002-10-24 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Therapeutic and diagnostic uses of antibody specificity profiles |
AU2002303384A1 (en) * | 2001-04-17 | 2002-10-28 | William J. Dower | Epitope-captured antibody display |
EP1379545A2 (de) * | 2001-04-19 | 2004-01-14 | Gesellschaft für biotechnologische Forschung mbH (GBF) | Verfahren zur herstellung stabiler, regenerierbarer antikörper-arrays |
US6989276B2 (en) * | 2001-05-10 | 2006-01-24 | Battelle Energy Alliance, Llc | Rapid classification of biological components |
NO20013192L (no) * | 2001-06-25 | 2002-12-27 | Medinnova As | Metode for monitering av T-celler |
WO2003019192A1 (en) * | 2001-08-27 | 2003-03-06 | The Trustees Of Boston University | Apparatus, composition and method for proteome profiling |
US7504364B2 (en) * | 2002-03-01 | 2009-03-17 | Receptors Llc | Methods of making arrays and artificial receptors |
JP2005529873A (ja) * | 2002-04-12 | 2005-10-06 | メダレックス インコーポレイテッド | Ctla−4抗体を使用した治療の方法 |
US7736909B2 (en) * | 2003-01-09 | 2010-06-15 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions comprising capture agents |
US7884052B2 (en) * | 2004-09-03 | 2011-02-08 | Receptors Llc | Combinatorial artificial receptors including tether building blocks on scaffolds |
JP4864425B2 (ja) * | 2005-03-18 | 2012-02-01 | 株式会社膠原病研究所 | 全身性エリテマトーデスの発症の判定のためのデータ取得方法およびその利用 |
WO2006124644A2 (en) * | 2005-05-12 | 2006-11-23 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Protein and antibody profiling using small molecule microarrays |
US8334239B2 (en) * | 2007-07-10 | 2012-12-18 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | High affinity VEGF-receptor antagonists |
-
2010
- 2010-05-28 AU AU2010253797A patent/AU2010253797B2/en not_active Ceased
- 2010-05-28 CA CA2763685A patent/CA2763685A1/en not_active Abandoned
- 2010-05-28 EP EP10722884A patent/EP2435827A1/en not_active Withdrawn
- 2010-05-28 WO PCT/US2010/036537 patent/WO2010138797A1/en active Application Filing
- 2010-05-28 BR BRPI1014995A patent/BRPI1014995A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2010-05-28 MX MX2011012680A patent/MX2011012680A/es unknown
- 2010-05-28 CN CN201080023677.7A patent/CN102449481B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2010-05-28 JP JP2012513284A patent/JP5991916B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2010-05-28 US US12/789,711 patent/US20100303835A1/en not_active Abandoned
- 2010-05-28 KR KR1020117031495A patent/KR20120034683A/ko not_active Application Discontinuation
- 2010-05-28 RU RU2011154024/15A patent/RU2563822C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2010-05-31 TW TW099117529A patent/TWI606238B/zh not_active IP Right Cessation
-
2011
- 2011-10-11 CO CO11134818A patent/CO6440595A2/es active IP Right Grant
- 2011-11-23 CL CL2011002959A patent/CL2011002959A1/es unknown
- 2011-11-28 IL IL216658A patent/IL216658A/en not_active IP Right Cessation
-
2013
- 2013-02-28 US US13/780,925 patent/US20130178835A1/en not_active Abandoned
-
2016
- 2016-04-14 JP JP2016080780A patent/JP2016185147A/ja active Pending
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
SIMON RJ et al. Peptoids: a modular approach to drug discovery. Proc Natl Acad Sci U S A., 1992, 89(20), p.9367-9371. ALLURI PG et al. Isolation of protein ligands from large peptoid libraries. J Am Chem Soc., 2003, 125(46), p.13995-4004 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR20120034683A (ko) | 2012-04-12 |
WO2010138797A1 (en) | 2010-12-02 |
US20100303835A1 (en) | 2010-12-02 |
EP2435827A1 (en) | 2012-04-04 |
IL216658A (en) | 2016-11-30 |
CO6440595A2 (es) | 2012-05-15 |
IL216658A0 (en) | 2012-02-29 |
TWI606238B (zh) | 2017-11-21 |
JP5991916B2 (ja) | 2016-09-14 |
CN102449481B (zh) | 2016-05-25 |
AU2010253797A1 (en) | 2011-10-27 |
CA2763685A1 (en) | 2010-12-02 |
CN102449481A (zh) | 2012-05-09 |
JP2012527904A (ja) | 2012-11-12 |
AU2010253797B2 (en) | 2015-03-12 |
TW201109658A (en) | 2011-03-16 |
JP2016185147A (ja) | 2016-10-27 |
MX2011012680A (es) | 2012-03-06 |
BRPI1014995A2 (pt) | 2016-04-26 |
CL2011002959A1 (es) | 2012-03-23 |
US20130178835A1 (en) | 2013-07-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2563822C2 (ru) | Пептоидные лиганды для выделения и обработки аутоиммунных т-клеток | |
Wolff et al. | National institutes of health consensus development project on criteria for clinical trials in chronic graft-versus-Host disease: IV. the 2020 highly morbid forms report | |
US9458199B2 (en) | Antigen surrogates in autoimmune disease | |
EP3463482B1 (en) | Methods relating to t peripheral helper cells in autoantibody-associated conditions | |
CN106668852A (zh) | 治疗和/或预防ⅰ型糖尿病的疫苗及其应用 | |
Talayero et al. | Donor‐specific antibodies in pediatric intestinal and multivisceral transplantation: the role of liver and human leukocyte antigen mismatching | |
CN106061491A (zh) | 细菌通过模拟Alpha‑MSH的CLPB蛋白对食欲调节的影响 | |
CN103260612A (zh) | MeCP2相关性病症的治疗 | |
CN107106543A (zh) | 自身免疫性疾病中的褪黑激素 | |
JP4864425B2 (ja) | 全身性エリテマトーデスの発症の判定のためのデータ取得方法およびその利用 | |
WO2017083809A1 (en) | Targeting oxazole structures for therapy against inflammatory diseases | |
KR20040096554A (ko) | 경색방지 분자 | |
CN107849061A (zh) | H3K9me3调控用于增强认知功能的用途 | |
GOCKE et al. | Patent 2763685 Summary | |
ES2626491B1 (es) | Anticuerpos monoclonales frente a bambi y uso para tratamiento de enfermedades inflamatorias | |
Delgado et al. | Metabolic Association Between the Gut–Brain Axis in Autism Spectrum Disorders | |
Runyan | Social Behavior Deficits in Adolescence Following Neonate Traumatic Brain Injury | |
Sakurai et al. | SAT0072 Frequency of interferon-gamma-positive TH17 (TH17-1) cells is up-regulated in synovial fluids in patients with rheumatoid arthritis | |
Bratslavska et al. | SAT0071 Dependence of rheumatoid arthritis disease aggressivity and activity on the presence of parvovirus B19 infection markers | |
Welker et al. | SAT0073 Theranostic approach in arthritis: A feasibility study in rats | |
张旗 et al. | Epidemiological survey of human cytomegalovirus antibody levels in children from Southeastern China | |
CN106715472A (zh) | 用于监测组织蛋白酶s抑制的方法 | |
CN101410130A (zh) | 新颖的免疫调节肽 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180529 |