RU2533826C2 - Казеинсукцинилат железа (iii) и способ его получения - Google Patents

Казеинсукцинилат железа (iii) и способ его получения Download PDF

Info

Publication number
RU2533826C2
RU2533826C2 RU2013103799/04A RU2013103799A RU2533826C2 RU 2533826 C2 RU2533826 C2 RU 2533826C2 RU 2013103799/04 A RU2013103799/04 A RU 2013103799/04A RU 2013103799 A RU2013103799 A RU 2013103799A RU 2533826 C2 RU2533826 C2 RU 2533826C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
casein
iron
iii
succinylate
less
Prior art date
Application number
RU2013103799/04A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2013103799A (ru
Inventor
Андреа СТЕВЕНАЦЦИ
ФЕРРА Лоренцо ДЕ
Барбара ПИНТО
Original Assignee
Италфармако С.П.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Италфармако С.П.А. filed Critical Италфармако С.П.А.
Publication of RU2013103799A publication Critical patent/RU2013103799A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2533826C2 publication Critical patent/RU2533826C2/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
    • C07K1/1072—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides by covalent attachment of residues or functional groups
    • C07K1/1077—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides by covalent attachment of residues or functional groups by covalent attachment of residues other than amino acids or peptide residues, e.g. sugars, polyols, fatty acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4732—Casein

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к казеинсукцинилату железа (III), в котором содержание железа составляет от 4,5 масс.% до 7 масс.%, растворимость в воде составляет приблизительно более чем 92%, и его соотношение фосфор/азот составляет более чем примерно 5 масс.%. Настоящее изобретение дополнительно относится к способу получения казеинсукцинилата железа (III) и фармацевтическим композициям, содержащим казеинсукцинилата железа (III). 4 н. и 13 з.п. ф-лы, 4 табл., 9 пр.

Description

Настоящее изобретение относится к казеинсукцинилату железа (III), отличающемуся тем, что содержание железа в нем составляет от 4,5 масс.% до 7 масс.%, и тем, что его растворимость в воде составляет приблизительно более чем 92%.
Настоящее изобретение дополнительно относится к способу получения казеинсукцинилата железа (III).
Предшествующий уровень техники
Производные железа широко применяются в медицине для предотвращения и лечения анемии и дефицита железа при беременности, в случае синдрома малабсорбции, при грудном кормлении и в процессе роста. Среди них белоксодержащий сукцинилат железа, часто обозначаемый с помощью сокращения IPS, положительно отличается по его характеристикам биодоступности и переносимости.
Химические, физические и биологические свойства, а также получение IPS, названного Иронлатом (Ironlat), который получали исходя из молочных белков, описано в итальянском патенте IT1150213. Кроме того, растворимость Иронлата указана при pH>5, и она является неполной для комплекса, содержащего 6,7% железа, и полной для комплекса, содержащего 4,6% железа. В работе Cremonesi et al. International Journal of Clinical Pharmacology Therapy and Toxicology vol.31 (1993) pages 40-51, выявлены химические и фармакологические свойства казеинсукцинилата железа (III), комплекса железа (III), получаемого из сукцинилированного казеина. В экспериментах in vivo этот продукт, имеющий содержание железа, эквивалентное 5%, обнаружил более хорошую желудочно-кишечную переносимость по отношению к другим производным железа.
Европейский патент EP939083B1 описывает способ получения казеинсукцинилата железа (III), который предусмотрен для использования процедур специфического расщепления и сушки для решения проблемы присутствия нерастворимых компонентов в продукте. Кроме того, описано применение пищевого казеина в качестве сырья, используемого в процессе получения казеинсукцинилата железа (III).
С целью содействия поддержания продукта в определенных рамках по части микробиологического загрязнения при осуществлении процесса добавляют консерванты метилпарабен и пропилпарабен; присутствие на уровне 3% и 1,05%, соответственно, определяют, анализируя конечный продукт. Такое использование консервантов также описано в патенте EP1776382B1, в котором представлено применение влажных гранул в комбинации с распылительной сушкой или с лиофилизацией продукта для облегчения солюбилизации в процессе осуществления способа.
В патентной заявке EP319664 предлагается способ на основе ферментативной деградации казеинсукцинилата железа (III) для решения проблем растворимости и вязкости, наблюдаемых в комплексе, конкретно, когда относительный показатель железа превышает 10%.
Международная патентная заявка WO2007/065812 описывает получение казеинсукцинилата железа (III), осуществляемое посредством реакции сукцинилирования и последующего комплексообразования с использованием операций с ионом железа(III) в суспензии, при этом не решаются аспекты, касающиеся трудностей солюбилизации казеинсукцинилата железа (III). Фактически, данная патентная заявка не предоставляет информации, касающейся солюбилизации получаемого комплекса, и вязкость возможно получаемого раствора не измеряется.
Такие проблемы солюбилизации особенно очевидны, когда относительное содержание железа превышает 5% предел.
Явление увеличения вязкости, которое наблюдается по мере увеличения концентрации продукта в водном растворе, затрудняет или даже препятствует использованию казеинсукцинилата железа (III) за пределами определенных концентраций.
Комбинация этих эффектов ограничивает дозировку продукта значением, не превышающим 800 мг, что соответствует примерно 40 мг железа (III) на дозу за исключением использования составов, превышающих 15 мл раствора.
Кроме того, вязкость водного раствора казеинсукцинилата железа (III) затрудняет операции уменьшения микробного содержания продукта посредством фильтрации или микрофильтрации, и требуется применение высоких количеств консервантов.
Таким образом очевидно, что в данной области не предлагаются простые решения для преодоления проблем солюбилизации казеинсукцинилата железа (III), исключительного лекарственного средства при лечении различных форм дефицита железа.
Описание изобретения
Было обнаружено, что могут быть получены неожиданные преимущества при получении казеинсукцинилата железа (III), если в качестве исходного сырья использовать пищевой казеин, который был подвергнут процессу очистки с целью удаления примесей, неорганических примесей и/или для увеличения соотношения фосфор/азот (соотношение P/N). На самом деле, таким образом возможно получение казеинсукцинилата железа (III), который отличается не только белковым профилем, с содержанием меньшего количества примесей, но также с неожиданным повышением растворимости в воде. Такая повышенная растворимость влечет за собой возможность получения водных растворов и/или суспензий, обнаруживающих меньшую вязкость по отношению к вязкости продуктов, полученных из коммерческого пищевого казеина.
Относительно казеина, выражение "белковые примеси" согласно изобретению используется для обозначения белков, отличных от казеина в его различных вариантах, что измерено посредством одномерного электрофореза с окрашиванием с помощью Кумасси синего и с помощью денсиометрического анализа. Предпочтительно указанные белковые примеси по изобретению представляют собой белки, отличные от казеина альфа-S1, казеина альфа-S2, казеина бета, казеина каппа и/или казеина псевдо-каппа.
Аналогично, относительно казеинсукцинилата железа (III), выражение "белковые примеси" согласно изобретению используется для обозначения белков, отличных от сукцинилированного казеина в его различных вариантах, что измерено посредством одномерного электрофореза с окрашиванием с помощью Кумасси синего и с помощью денсиометрического анализа. Предпочтительно указанные белковые примеси по изобретению представляют собой сукцинилированные белки, отличные от продуктов сукцинилирования казеина альфа-S1, казеина альфа-S2, казеина бета, казеина каппа и/или казеина псевдо-каппа.
Выражение "неорганические примеси" согласно изобретению используется для обозначения сульфатированной золы.
Термин "соотношение P/N" используется для обозначения соотношения между массовым количеством фосфора, присутствующего в образце, которое измерено посредством метода ICP, и массовым количеством азота, которое измерено посредством элементарного анализа.
Согласно настоящему изобретению значения, выраженные в массовых процентах (масс.%), будут иметь в виду массу по отношению к общей массе казеинсукцинилата железа (III) или казеина.
Таким образом, целью настоящего изобретения является предложение казеинсукцинилата железа (III), отличающегося тем, что содержание железа составляет от 4,5 масс.% до 7 масс.%, и тем, что его растворимость в воде составляет более чем примерно 92%. Предпочтительно такую растворимость в воде следует рассматривать как растворимость примерно в 11,5 частях воды.
Указанный казеинсукцинилат железа (III) дополнительно содержит белковые примеси в количестве менее чем примерно 15%, предпочтительно менее чем примерно 10%, и/или соотношение P/N более чем примерно 5%, предпочтительно более чем примерно 5,5%.
Следующей целью настоящего изобретения является способ получения казеинсукцинилата железа (III), включающий следующие стадии:
а) реакцию казеина и янтарного ангидрида в воде с получением сукцинилированного казеина,
b) реакцию сукцинилированного казеина с хлоридом железа (III) с получением казеинсукцинилата железа (III),
отличающийся тем, что указанный казеин согласно стадии a) представляет собой очищенный казеин, имеющий низкое содержание белковых примесей и/или неорганических примесей и/или имеющий высокое соотношение P/N.
Предпочтительно содержание указанных белковых примесей составляет менее чем 15 масс.%, а содержание указанных неорганических примесей составляет менее чем 1 масс.%, и соотношение между массовым содержанием фосфора и азота составляет более чем примерно 5 масс.%.
Более предпочтительно содержание указанных белковых примесей составляет менее чем 10 масс.%, и/или содержание указанных неорганических примесей составляет менее чем 0,4 масс.%, и соотношение между массовым содержанием фосфора и азота составляет более чем примерно 5,5 масс.%.
Указанные белковые примеси по изобретению представляют собой белки, отличные от казеина альфа-S1, казеина альфа-S2, казеина бета, казеина каппа и/или казеина псевдо-каппа.
Пищевые казеины, как правило, идентифицируют с помощью метода осаждения, применяемого при их получении: что касается кислотного казеина, то его осаждение осуществляют посредством подкисления, в то время как казеины, полученные с использованием сычужного фермента, являются сычужными, которые также часто обозначаются как (rennet) сычужные казеины.
Согласно настоящему изобретению, пищевой казеин, используемый в качестве исходного сырья, может быть кислотным казеином или сычужным казеином.
Эти коммерческие продукты, независимо от типа (кислотный или сычужный) обычно сопровождаются немногочисленной аналитической документацией; указанные параметры, как правило, представляют собой содержание воды, содержание белка (определенное с помощью применения коэффициента умножения к значению общего содержания азота), уровень микробного загрязнения и гранулометрия. Этот уровень характеризации полностью подходит для применения казеинов в пищевой промышленности, но нами обнаружено, что получение казеинсукцинилата железа (III) требует углубленной аналитической оценки данного сырьевого материала.
Коммерческие пищевые казеины и очищенные казеины, используемые в качестве сырьевых материалов согласно настоящему изобретению для получения казеинсукцинилата железа (III), анализировали посредством ВЭЖХ с обращенной фазой согласно методу, указанному в работе Bonizzi et al. Journal of Chromatography A vol.1261(2009) pages 165-168, включенной в данный документ ссылкой.
Таким образом, возможна идентификация трех типов казеинов: альфа-S1, альфа-S2, бета, каппа и псевдо-каппа.
Также возможна оценка присутствия белковых примесей посредством анализа электрофореза как одномерного, так и двухмерного, с использованием Кумасси синего в качестве реагента-индикатора, наряду с разделением различных типов казеина и их различных вариантов, полученных в результате пост-транскрипционных модификаций (таких как гликозилирование и фосфорилирование).
Конкретно, для количественного определения белковых примесей использовали SDS-PAGE-электрофорез с использованием 14% полиакриламидного геля, окрашенный с помощью Кумасси-синего, и денсиометрический анализ на основе калибровочной кривой, созданной с использованием различных количеств BSA.
Указанные казеины и очищенные казеины также анализировали с помощью метода с использованием сульфатированной золы согласно Европейской Фармакопее (метод Eu.Pharm. 2.4.14). Затем определяли в них содержание фосфора (P) посредством метода ICP и содержание азота (N) посредством элементарного анализа и, таким образом, рассчитывали соотношение P/N % путем деления массового количества, наблюдаемого для фосфора, на массовое количество, наблюдаемое для азота, и путем умножения результата на 100. Таблица 1 ниже демонстрирует результаты, полученные для различных типов казеинов, т.е. коммерческих пищевых казеинов (кислотный и сычужный) и очищенных казеинов согласно способу по настоящему изобретению.
Таблица 1
Казеин Сырье для Белковые примеси Сульфатированная зола P/N%
Кислотный казеин Сравнительные примеры 1 и 2 15% 1,6%  
Сычужный казеин Сравнительный пример 3 20% 9,2%  
Пример 4 Примеры 8А и 9А 5% 0,4% 5,5%
Пример 5 Пример 8В 9% 0,9% 5,1%
Пример 6 Пример 8С 8% 0,2% 5,6%
Пример 7 Примеры 8D и 9В 10% 0,8% 5,2%
Таким образом, наблюдали, что анализируемые коммерческие пищевые казеины обнаруживают содержание белковых примесей, эквивалентное 15-20% от суммарного белка в образце, в то время как уровень содержания неорганических примесей, установленный с помощью определения значения, соответствующего количеству сульфатированной золы, которые включают 1 масс.% - 2,5 масс.% в коммерческих кислотных казеинах и 7 масс.% - 10 масс.% в сычужных казеинах, что как можно видеть в примерах, приведенных в таблице 1 выше.
Таким образом, следующей целью настоящего изобретения также является способ очистки указанных пищевых казеинов, приводящий к частичному или полному удалению белковых примесей, неорганических примесей и/или к увеличению соотношения P/N.
Согласно настоящему изобретению указанный пищевой казеин обрабатывают водой, полярным органическим растворителем или его смесью, предпочтительно с водой.
Предпочтительно указанный полярный органический растворитель представляет собой спирт C1-C4, более предпочтительно метанол, этанол, изопропанол или их смесь.
Согласно первому воплощению настоящего изобретения выбранный растворитель используют для очистки казеина, растворяя таким образом белковые примеси и неорганические примеси для их отделения от нерастворимого казеина посредством центрифугирования или фильтрации. Характеристики растворимости казеина в выбранном растворителе в виде функции от температуры, pH и/или от добавления добавок, таких как, например, хлорид натрия, хлорид кальция и/или ацетат аммония, используют для осуществления данного способа очистки.
Пищевой казеин в процессе очистки может быть непосредственно приведен в контакт с выбранным растворителем при условиях растворения белковых и неорганических примесей и через подходящий промежуток времени контакта при перемешивании, он отделяется от раствора, содержащего примеси, с помощью фильтрации или центрифугирования.
Согласно второму воплощению настоящего изобретения очистку осуществляют сначала путем растворения казеина в выбранном растворителе и последующего осаждения его посредством подходящего варьирования pH, температуры и/или добавления добавок, таких как, например, хлорид натрия, хлорид кальция и/или ацетат аммония. Даже в этом случае отделение казеина от белковых и неорганических примесей будет осуществляться посредством фильтрации или центрифугирования, причем такие примеси заканчивают растворяться в растворителе, используемом для очистки.
Согласно вышеупомянутому первому воплощению настоящего изобретения пищевой казеин приводят в контакт с выбранным растворителем, pH смеси необязательно доводят до pH в интервале 3-5 или до pH в интервале 5-10. Указанные корректировки pH могут осуществляться, например, с использованием водных растворов хлористоводородной кислоты или гидроксида натрия. Указанную смесь доводят до температуры в интервале 0°C-40°C, предпочтительно в интервале 0°C-10°C. Необязательно могут быть добавлены добавки, такие как, например, хлорид натрия, хлорид кальция и/или ацетат аммония. Полученную в результате смесь оставляют перемешиваться в течение периода времени 1-24 часа, предпочтительно 2-10 часов.
Указанный выбранный растворитель таким образом используют для растворения белковых примесей и неорганических примесей и для их отделения от нерастворимого казеина, предпочтительно казеин затем отделяют от примесей посредством центрифугирования или фильтрации. Фильтрация может быть стандартного типа или может осуществляться посредством применения мембран подходящей пористости согласно методу проточной фильтрации вдоль потока или с использованием типа тупиковой фильтрации.
Согласно вышеупомянутому второму воплощению настоящего изобретения пищевой казеин растворяют в выбранном растворителе, подвергая его затем осаждению с доведением до pH в интервале 4-6, предпочтительно в интервале 4,5-5. Любой метод, известный специалисту в данной области, может использоваться для отделения казеина от раствора, содержащего белковые и неорганические примеси, предпочтительно указанный казеин отделяют посредством фильтрации или центрифугирования.
С целью получения целевой степени очистки эти стадии очистки могут повторяться один или несколько раз. Таким образом, тот же способ очистки может повторяться или может быть оптимизирован для последовательного осуществления методов очистки, отличных друг от друга.
Таким образом, следующей целью настоящего изобретения является очищенный пищевой казеин, получаемый посредством ранее описанных способов по настоящему изобретению, причем казеин имеет содержание белковых примесей, составляющее предпочтительно менее чем 15 масс.%, более предпочтительно менее чем 10 масс.%; содержание неорганических примесей предпочтительно менее чем 1 масс.%, более предпочтительно менее чем 0,4 масс.% и/или имеет соотношение между массовым содержанием фосфора и азота, составляющее более чем 5 масс.%, более предпочтительно более чем 5,5 масс.%.
Следующей целью настоящего изобретения является применение указанного очищенного казеина для получения казеинсукцинилата железа (III).
Получение казеинсукцинилата железа (III) может осуществляться согласно способам, известным специалисту в данной области, таким как, например, те, что описаны в патентах IT1150213 и EP939083B1, включенных в данный документ ссылкой.
В одном воплощении настоящего изобретения способ получения казеинсукцинилата железа (III), описанного выше, включает стадии:
a) реакцию казеина и янтарного ангидрида в воде с получением сукцинилированного казеина,
b) реакцию сукцинилированного казеина с хлоридом железа (III) с получением казеинсукцинилата железа (III),
где казеин на стадии a) представляет собой очищенный казеин, имеющий низкое содержание белковых примесей и/или неорганических примесей и/или имеющий высокое соотношение P/N, как описано выше, осуществляют следующим образом:
очищенный казеин сукцинилируют в воде с использованием янтарного ангидрида, поддерживая pH во время реакции предпочтительно в интервале 7,5-8,5 путем добавления водного раствора гидроксида натрия.
Температура реакции составляет примерно 20-25°C. По окончании реакции продукт осаждают путем добавления при перемешивании водного раствора хлористоводородной кислоты с доведением pH примерно до 3.
Полученный таким образом сукцинилированный казеин фильтруют и растворяют в воде путем добавления водного раствора гидроксида натрия. Раствор фильтруют для отделения возможных нерастворимых твердых частиц; затем водный раствор хлорида железа (III) добавляют в определенном количестве, которое выполняет функцию целевого содержания железа в конечном продукте.
В процессе добавления происходит понижение pH и осаждение казеинсукцинилата железа (III).
Во время добавления раствора хлорида железа (III) pH может корректироваться с использованием водного раствора гидроксида натрия во избежание излишне кислых условий. В этом случае по окончании добавления хлорида железа (III) осаждение комплекса выполняется путем добавления водного раствора хлористоводородной кислоты.
Образованное твердое вещество извлекают и суспендируют в воде. На этой стадии возможно добавление консервантов (метил- и пропилпарабена). Водный раствор гидроксида натрия добавляют до получения pH примерно 8,5, нерастворимое вещество удаляют путем центрифугирования и казеинсукцинилат железа (III) осаждается при подкислении с использованием хлористоводордной кислоты в водном растворе. Продукт сушат при низком давлении.
Альтернативно сушке при низком давлении казеинсукцинилат железа (III) может быть получен из его водного раствора посредством распылительной сушки.
Указанный способ также может включать дополнительную стадию микрофильтрации водного раствора казеинсукцинилата железа (III). Указанная стадия микрофильтрации по изобретению предназначена для уменьшения микробного загрязнения.
Таким образом, другой целью настоящего изобретения является казеинсукцинилат железа (III), получаемый посредством ранее описанного способа.
Такой казеинсукцинилат железа (III) по изобретению обладает улучшенной характеристикой растворимости в воде по отношению к известной в данной области; предпочтительно такой казеинсукцинилат железа (III) обладает растворимостью в воде более чем примерно 92%. Подразумевается, что такое значение растворимости предпочтительно относится к 11,5 частям воды.
Расчет растворимости в воде осуществляют путем солюбилизации образца при pH примерно 8,0 с использованием гидроксида натрия с конечным соотношением между водой и казеинсукцинилатом железа (III), эквивалентным 11,5 по массе, и с использованием фильтрации препарата на фильтре с пористостью 6 мкм и с определением нерастворенного количества после сушки путем взвешивания фильтра. Процентное выражение растворимости образца рассчитывают путем вычитания из массы образца той массы, которая относится к компоненту, оставшемуся на фильтре, и путем сравнения результата с исходной массой образца. Вязкость различных водных препаратов измеряли при pH продуктов примерно 8,0 с концентрацией, эквивалентной 5 масс.%, 6 масс.% и 8 масс.%.
Кроме того, скорости фильтрации измеряли на мембранах с пористостью, эквивалентной 0,45 мкм для создания возможности посредством микрофильтрации снижения микробного загрязнения для различных полученных образцов. Этот расчет осуществляли путем измерения времени, требуемого для прохождения в условиях вакуумной системы - 5 мл раствора образца в воде при pH примерно 8,0 при концентрации 5 масс.% через мембрану с пористостью 0,45 мкм 3 см2.
Таблица 2 ниже демонстрирует полученные результаты.
Таблица 2
Образец Растворимость в 11,5 частях воды Вязкость раствора (мПа·с) Время фильтрации 5 мл раствора 5% в воде на 0,45 мкм (сек)
5% в воде 6% в воде 8% в воде
Сравн. Пр. 1 89% 17 54 715 ∞ (блокировалась)
Сравн. Пр. 2 84% 21 67 957 ∞ (блокировалась)
Сравн. Пр. 3 85% 17 53 863 560
Пример 8A 97% 14 29 207 120
Пример 8B 94% 13 33 351 150
Пример 8C 98% 11 24 195 90
Пример 8D 93% 15 44 387 180
Пример 9A 98% 12 28 240 180
Пример 9B 92% 14 36 411 120
Следующей целью настоящего изобретения является композиция, содержащая казеинсукцинилат железа (III) по настоящему изобретению и, по меньшей мере, один физиологически приемлемый эксципиент.
Указанная композиция может быть предпочтительно включена в состав в твердой или в жидкой форме, более предпочтительно в жидкой форме. Указанная жидкая форма предпочтительно представляет собой раствор или суспензию, более предпочтительно водный раствор. Указанный водный раствор может вводиться перорально или парентерально. Указанная композиция включает количество казеинсукцинилата железа (III) согласно изобретению, которое предпочтительно находится в интервале 10-200 мг железа, более предпочтительно 20-100 мг железа, еще более предпочтительно примерно 40 мг, 60 мг или 80 мг железа.
Согласно предпочтительному воплощению изобретения указанная композиция представляет собой водный раствор, включающий примерно 40 мг, 60 мг или 80 мг железа, растворенного в 15 мл раствора.
Кроме того, неожиданно выяснили, что жидкая композиция на основе казеинсукцинилата железа (III) согласно настоящему изобретению обнаруживает значительное снижение вязкости по отношению к композициям, известным в данной области.
Вязкость жидких композиций, содержащих казеинсукцинилат железа (III) по изобретению, значительно понижена по отношению к вязкости композиций с эквивалентным содержанием железа, известных в данной области. Такое снижение вязкости в препаратах, содержащих казеинсукцинилат железа (III) по изобретению, наблюдается в препаратах, полученных из казеинсукцинилата железа (III) с содержанием железа, эквивалентным 5%, и, еще более очевидно, при сравнении между продуктами с более высоким содержанием железа, в частности, между продуктами с содержанием железа 6% и за его пределами, как видно из таблицы 2. Предпочтительно вязкость жидкой композиции, содержащей в солюбилизированной форме примерно 8 масс.% казеинсукцинилата железа (III) по изобретению, составляет менее чем 400 мПа·с, более предпочтительно менее чем 300 мПа·с.
Эти неожиданные характеристики более высокой растворимости казеинсукцинилата железа (III) по изобретению и более низкой вязкости жидких композиций, их содержащих, конкретно используются для получения казеинсукцинилата железа (III) при высокой концентрации железа (такие как, например, равные или более высокие, чем 40 мг для 15 мл раствора). Предпочтительный раствор согласно настоящему изобретению содержит количество казеинсукцинилата железа (III), заключенное в интервале 4-15 масс.%, предпочтительно 4,5-12 масс.%, более предпочтительно 5-8 масс.%, по отношению к общей массе.
Такие характеристики низкой вязкости также дают возможность микрофильтрации жидких композиций, содержащих казеинсукцинилиат железа (III) по изобретению.
Эта операция исключительно полезна для сохранения свойств продукта, последующей композиции и ее консервации. При осуществлении операции микрофильтрации и снижении микробного загрязнения также возможно снизить или даже избежать использования консервантов, таких как, например, парабены, обычно используемые для предотвращения микробной пролиферации.
Фактически, это дает возможность значительного снижения микробного содержания композиций, предпочтительно жидких композиций, содержащих казеинсукцинилат железа (III) согласно изобретению.
До настоящего времени высокая вязкость жидких композиций (например, водных растворов) на основе казеинсукцинилата железа (III), получаемого из пищевого казеина, не подвергнутого подходящему процессу очистки, мешала проведению такой операции микрофильтрации.
Микрофильтрация согласно изобретению может проводиться на мембранах с контролируемой пористостью или тангенциальная микрофильтрация на мембранах с контролируемой пористостью с целью снижения микробного загрязнения.
Указанная операция микрофильтрации, также связанная с более низкой вязкостью жидких композиций (предпочтительно водных растворов) казеинсукцинилата железа (III), конкретно полезна для получения пероральных жидких композиций с высоким сроком годности, не требующих использования рассматриваемых высоких количеств консервантов.
Следующие примеры имеют единственную цель иллюстрации некоторых воплощений изобретения, и их не следует рассматривать как какие-либо его ограничения.
ПРИМЕРЫ
ПРИМЕР 1
Сравнительный пример для получения казеинсукцинилата железа (III) с содержанием железа, эквивалентным примерно 5% от коммерческого исходного кислотного казеина.
600 мл деминерализованной воды добавляли к 50 г пищевого кислотного казеина, смесь перемешивали в течение 30 минут и pH доводили до стабильного pH 8,4 с помощью 9,5% водного раствора гидроксида натрия.
15 г янтарного ангидрида добавляли небольшими частями при перемешивании. В процессе добавления поддерживали pH на уровне примерно 8,4 путем постепенного добавления 9,5% раствора гидрохлорида натрия. Водный раствор 17% хлористоводородной кислоты добавляли до стабильного значения pH 2,8. Выделение осуществляли путем фильтрации осажденного сукцинилированного казеина, который ресуспендировали в 600 мл деминерализованной воды. pH доводили до pH 8,5 с использованием 9,5% водного раствора гидроксида натрия, его поддерживали путем перемешивания, небольшую нерастворимую фракцию фильтровали на фильтровальной бумаге и раствор, составленный 14,1 г гексагидрата хлорида железа (III) и 119 мл воды, добавляли при перемешивании. В процессе добавления происходит понижение pH и осаждение казеинсукцинилата железа (III). После поддержания условий перемешивания в течение 30 минут, значение pH составило pH 2,9, и продукт фильтровали. Продукт суспендировали в 600 мл воды и добавляли постепенно 5% водного раствора гидроксида натрия и при перемешивании доводили pH до стабильного значения pH 8,5. Центрифугирование осуществляли для удаления нерастворимого компонента, эквивалентного примерно 20 г влажного вещества; pH корректировали с использованием хлористоводородной кислоты в водном растворе при 17% до стабильного значения pH 2,8. Осадок фильтровали и сушили с получением 54,1 г казеинсукцинилата железа (III).
ПРИМЕР 2
Сравнительный пример для получения казеинсукцинилата железа (III) с содержанием железа, эквивалентным примерно 6% от коммерческого исходного кислотного казеина.
600 мл деминерализованной воды добавляли к 50 г пищевого кислотного казеина, смесь перемешивали в течение 30 минут и pH доводили до стабильного pH 8,4 с помощью 9,5% водного раствора гидроксида натрия.
15 г янтарного ангидрида добавляли небольшими частями при перемешивании. В процессе добавления pH поддерживали на уровне примерно 8,4 путем постепенного добавления 9,5% раствора гидрохлорида натрия. Водный раствор 17% хлористоводородной кислоты добавляли до стабильного значения pH 2,8. Выделение осуществляли путем фильтрации осажденного сукцинилированного казеина, который ресуспендировали в 600 мл деминерализованной воды. pH доводили до pH 8,5 с использованием 9,5% водного раствора гидроксида натрия, его поддерживали путем перемешивания, небольшую нераствормую фракцию фильтровали на фильтровальной бумаге, и раствор, составленный 17 г гексагидрата хлорида железа (III) в 150 мл воды, добавляли при перемешивании. Во время добавления раствора хлорида железа (III) pH поддерживали в интервале pH 6,0-6,5 путем одновременного добавления гидроксида натрия в 5% водном растворе. По завершении добавления раствора хлорида железа (III) pH корректировали до pH 2,8 с использованием 17% водного раствора хлористоводородной кислоты. Суспензию поддерживали в состоянии перемешивания в течение 30 минут, и продукт фильтровали. Продукт суспендировали в 600 мл воды и добавляли постепенно 5% водный раствор гидроксида натрия и при перемешивании доводили pH до стабильного значения pH 8,5. Центрифугирование осуществляли для удаления нерастворимого компонента, эквивалентного примерно 25 г влажного вещества; pH корректировали с использованием хлористоводородной кислоты в водном растворе при 17% до стабильного значения pH 2,8. Осадок фильтровали и сушили с получением 53,5 г казеинсукцинилата железа (III).
ПРИМЕР 3
Сравнительный пример для получения казеинсукцинилата железа (III) с содержанием железа, эквивалентным примерно 5% от коммерческого исходного сычужного казеина.
Следуя способу, описанному в примере 1, казеинсукцинилат железа (III) получают из 50 г пищевого сычужного казеина. После сушки получают 54,2 г казеинсукцинилата железа (III).
ПРИМЕР 4
Очистка коммерческого кислотного казеина.
6 л деминерализованной воды добавляли к 180 г пищевого кислотного казеина, pH корректировали до pH 7,0 с помощью 1 M водного раствора гидроксида натрия. Смесь охлаждали до 4°C, pH доводили до pH 4,5 с помощью 1 M водного раствора хлористоводородной кислоты. Суспензию поддерживали в состоянии перемешивания в течение 16 часов, и твердое вещество фильтровали через воронку Бюхнера.
Влажный продукт суспендировали в 6 л деминерализованной воды, pH корректировали до pH 7,0 с помощью 1 M водного раствора гидроксида натрия. Смесь охлаждали до 4°C, pH доводили до pH 4,5 с помощью 1 M водного раствора хлористоводородной кислоты. Суспензию поддерживали в состоянии перемешивания в течение 3 часов, и твердое вещество фильтровали через воронку Бюхнера.
Влажный продукт ресуспендировали в 3 л деминерализованной воды, pH корректировали до pH 7,0 с помощью 1 M водного раствора гидроксида натрия. Смесь охлаждали до 4°C, pH доводили до pH 4,5 с помощью 1 M водного раствора хлористоводородной кислоты. Суспензию поддерживали в состоянии перемешивания в течение 3 часов, и 390 г твердого влажного вещество фильтровали через воронку бюхнера, продукт сушили на барабанной сушке в течение 20 часов при 25°C и при 30 мм ртутного столба с получением 146 г очищенного казеина.
ПРИМЕР 5
Очистка коммерческого кислотного казеина.
6 л деминерализованной воды добавляли к 18 г пищевого кислотного казеина, pH корректировали до pH 7,0 с помощью 1 M водного раствора гидроксида натрия. Смесь охлаждали до 4°C, pH доводили до pH 4,5 с помощью 1 M водного раствора хлористоводородной кислоты. Суспензию поддерживали в состоянии перемешивания в течение 16 часов, и твердое вещество фильтровали через воронку Бюхнера. Получали 408 грамм влажного вещества, которое сушили на барабанной сушке в течение 20 часов при 25°C и при 30 мм ртутного столба с получением 162 г очищенного казеина.
ПРИМЕР 6
Очистка коммерческого кислотного казеина.
42 л деминерализованной воды добавляли к 144 г пищевого кислотного казеина. pH корректировали до стабильного значения pH 7,0 с помощью 8% раствора гидроксида натрия в воде. pH доводили до pH 3,0 с помощью водного раствора 0,5 M хлористоводородной кислоты. Смесь охлаждали до 2°C и pH доводили до pH 4,0 с помощью 0,01 M водного раствора гидроксида натрия. Суспензию поддерживали в состоянии перемешивания в течение часа, и 318 г влажного твердого вещества фильтровали через воронку Бюхнера, продукт сушили на барабанной сушке в течение 20 часов при 25°C и при 30 мм ртутного столба с получением 126 г очищенного казеина.
ПРИМЕР 7
Очистка коммерческого сычужного казеина.
6 л деминерализованной воды добавляли к 180 г пищевого сычужного казеина, смесь перемешивали в течение 30 минут, охлаждали до 4°C, смесь поддерживали в состоянии перемешивания в течение 16 часов, и pH доводили до pH 4,5 с помощью 1 М водного раствора хлористоводородной кислоты. Суспензию поддерживали в состоянии перемешивания в течение часа, и твердое вещество фильтровали через воронку Бюхнера.
Влажный продукт суспендировали в 6 л деминерализованной воды, pH корректировали до pH 7,0 с помощью 1 M водного раствора гидроксида натрия. Смесь охлаждали до 4°C, pH доводили до pH 4,5 с помощью 1 M водного раствора хлористоводородной кислоты. Суспензию поддерживали в состоянии перемешивания в течение 3 часов, и твердое вещество фильтровали через воронку Бюхнера.
Влажный продукт ресуспендировали в 6 л деминерализованной воды, pH корректировали до pH 7,0 с помощью 1 M водного раствора гидроксида натрия. Смесь охлаждали до 4°C, pH доводили до pH 4,5 с помощью 1 M водного раствора хлористоводородной кислоты. Суспензию поддерживали в состоянии перемешивания в течение 16 часов, и твердое вещество фильтровали через воронку Бюхнера.
Получали 290 грамм влажного вещества, которое сушили на барабанной сушке в течение 20 часов при 25°C и при 30 мм ртутного столба с получением 126 г очищенного казеина.
ПРИМЕР 8
Получение казеинсукцинилата железа (III) с содержанием железа, эквивалентным примерно 5% исходных очищенных казеинов, определенных в примерах 4, 5, 6 и 7.
Следуя способу, описанному в примере 1, казеинсукцинилат железа (III) получали из очищенных казеинов, полученных как описано в примерах 4, 5, 6 и 7.
Таблица ниже демонстрирует количества, относящиеся к каждому из препаратов.
Таблица 3
Казеинсукцинилат железа (III) Сырье Используемое количество казеина Полученное количество казеинсукцинилата железа (III)
Пример 8A Кислотный казеин, очищенный в Примере 4 50 г 54,6 г
Пример 8B Кислотный казеин, очищенный в Примере 5 50 г 55,2 г
Пример 8C Кислотный казеин, очищенный в Примере 6 50 г 54,3 г
Пример 8D Сычужный казеин, очищенный в Примере 7 50 г 52,7 г
ПРИМЕР 9
Получение казеинсукцинилата железа (III) с содержанием железа, эквивалентным примерно 6% от исходных очищенных казеинов, определенных в примерах 4 и 7.
Следуя способу, описанному в примере 2, получали казеинсукцинилат железа (III) из очищенных казеинов, полученных как описано в примерах 4 и 7.
Таблица ниже демонстрирует количества, относящиеся к каждому из препаратов железа (III).
Таблица 4
Казеинсукцинилат железа (III) Сырье Используемое количество казеина Полученное количество казеинсукцинилата железа (III)
Пример 9A Кислотный казеин, очищенный в Примере 4 50 г 56,0 г
Пример 9B Сычужный казеин, очищенный в Примере 7 50 г 52,5 г

Claims (17)

1. Казеинсукцинилат железа (III), отличающийся тем, что содержание железа составляет от 4,5 до 7 масс.%, и тем, что его растворимость составляет более чем примерно 92%, и тем, что его соотношение фосфор/азот составляет более чем примерно 5 масс.%, предпочтительно более чем примерно 5,5 масс.%.
2. Казеинсукцинилат железа (III) по п.1, отличающийся тем, что он содержит белковые примеси в количестве менее чем примерно 15 масс.%, предпочтительно менее чем примерно 10 масс.%.
3. Способ получения казеинсукцинилата железа (III), включающий следующие стадии:
a) реакцию казеина и янтарного ангидрида в воде с получением сукцинилированного казеина,
b) реакцию сукцинилированного казеина с хлоридом железа (III) с получением казеинсукцинилата железа (III),
с) отличающийся тем, что указанный казеин согласно стадии a) представляет собой очищенный казеин, содержащий белковые примеси менее чем 15 масс.% и/или неорганические примеси менее чем 1 масс.%, и/или имеющий соотношение фосфор/азот более чем примерно 5%.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что содержание указанных белковых примесей составляет менее чем примерно 10 масс.% и/или содержание указанных неорганических примесей составляет менее чем примерно 0,4 масс.%.
5. Способ по п.3, отличающийся тем, что указанные белковые примеси представляют белки, отличные от казеина альфа-S1, казеина альфа-S2, казеина бета, казеина каппа, казеина псевдо-каппа.
6. Способ по п.3, отличающийся тем, что указанный очищенный казеин имеет соотношение фосфор/азот более чем примерно 5 масс.%.
7. Способ по п.3, отличающийся тем, что указанный очищенный казеин получают из кислотного казеина или из сычужного казеина.
8. Способ по п.3, включающий дополнительную стадию микрофильтрации водного раствора казеинсукцинилата железа (III).
9. Казеинсукцинилат железа, получаемый посредством способа по любому из пп.3-8.
10. Фармацевтическая композиция, содержащая казеинсукцинилат железа (III) по пп.1-2 и/или 9 и, по меньшей мере, один физиологически приемлемый эксципиент.
11. Композиция по п.10, отличающаяся тем, что она представлена в жидкой или твердой форме, предпочтительно в жидкой форме.
12. Композиция по п.11, отличающаяся тем, что указанная жидкая форма представляет собой раствор или суспензию, предпочтительно водный раствор.
13. Композиция по п.10, отличающаяся тем, что указанная композиция представляет собой раствор, содержащий примерно 8 масс.% казеинсукцинилата железа (III), обладающий вязкостью менее чем примерно 400 мПа·с, предпочтительно менее чем примерно 300 мПа·с.
14. Композиция по любому из пп.10-13, где казеинсукцинилат железа (III) содержится в количестве, включающем от 5 до 15 масс.%, предпочтительно от 6 до 12 масс.%, более предпочтительно от 7 до 9 масс.% по отношению к общей массе композиции.
15. Композиция по любому из пп.10-13 для перорального или парентерального применения, предпочтительно для перорального применения.
16. Композиция по любому из пп.10-13 для применения в лечении дефицита железа.
17. Композиция по п.16 для применения в лечении анемии, дефицита железа при беременности, синдрома малабсорбции, дефицита железа при грудном кормлении и дефицита железа в процессе роста.
RU2013103799/04A 2010-06-30 2010-06-30 Казеинсукцинилат железа (iii) и способ его получения RU2533826C2 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/IT2010/000287 WO2012001712A1 (en) 2010-06-30 2010-06-30 Iron (iii) caseinsuccinylate and method for the preparation thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2013103799A RU2013103799A (ru) 2014-08-10
RU2533826C2 true RU2533826C2 (ru) 2014-11-20

Family

ID=43302532

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2013103799/04A RU2533826C2 (ru) 2010-06-30 2010-06-30 Казеинсукцинилат железа (iii) и способ его получения

Country Status (20)

Country Link
US (1) US20130102529A1 (ru)
EP (1) EP2588488B1 (ru)
KR (1) KR101701830B1 (ru)
CN (2) CN107090011A (ru)
AR (1) AR122394A2 (ru)
BR (1) BR112012032364B1 (ru)
CY (1) CY1119054T1 (ru)
DK (1) DK2588488T3 (ru)
ES (1) ES2628306T3 (ru)
HR (1) HRP20170541T1 (ru)
HU (1) HUE032746T2 (ru)
LT (1) LT2588488T (ru)
MA (1) MA34319B1 (ru)
MX (1) MX346317B (ru)
PL (1) PL2588488T3 (ru)
PT (1) PT2588488T (ru)
RS (1) RS55978B1 (ru)
RU (1) RU2533826C2 (ru)
SI (1) SI2588488T1 (ru)
WO (1) WO2012001712A1 (ru)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102836419B (zh) * 2012-09-25 2014-06-25 济川药业集团有限公司 一种蛋白琥珀酸铁口服溶液及其制备方法
CN108498454B (zh) * 2018-04-03 2020-11-06 济川药业集团有限公司 一种蛋白琥珀酸铁口服液及其制备方法
CN111000977A (zh) * 2019-03-22 2020-04-14 江苏中天药业有限公司 一种蛋白琥珀酸铁固体新剂型及其制备方法
CN112063676B (zh) * 2020-09-02 2021-11-12 杭州汉库医药科技有限公司 酪蛋白纯化方法和蛋白琥珀酸铁的制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006021843A1 (en) * 2004-07-29 2006-03-02 Biofer S.P.A. A process for producing iron succinyl casein and acetyl-aspartate iron casein complexes and use thereof in pharmaceutical mixtures
WO2007065812A1 (en) * 2005-12-06 2007-06-14 Vifor (International) Ag Process for the preparation of ferri-succinylcasein

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1150213B (it) * 1982-03-02 1986-12-10 Italfarmaco Spa Derivati di ferro biodisponibile esenti da gastrolesivita',procentimento di preparazione e relative composizioni farmaceutiche
IT1222912B (it) 1987-10-14 1990-09-12 Italfarmaco Spa Derivati polipeptidici a elevato tenore di ferro e altamente solubili atti alla terapia marziale procedimenti di preparazione e loro forme farmaceutiche
IT1297022B1 (it) * 1997-12-24 1999-08-03 Chemi Spa Complesso di ferro-succinilcaseina, processo per la sua preparazione e composizioni farmaceutiche che lo contengono
WO2007143088A2 (en) * 2006-06-02 2007-12-13 Abbott Laboratories Protein ingredient with improved sensory quality and nutritionals with improved flavor containing same
TWI346666B (en) * 2007-12-31 2011-08-11 Animal Technology Inst Taiwan Method for seperating casein from casein-contained solution

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006021843A1 (en) * 2004-07-29 2006-03-02 Biofer S.P.A. A process for producing iron succinyl casein and acetyl-aspartate iron casein complexes and use thereof in pharmaceutical mixtures
WO2007065812A1 (en) * 2005-12-06 2007-06-14 Vifor (International) Ag Process for the preparation of ferri-succinylcasein

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CREMONESI P ET AL: "IRON DERIVATIVES OF MODIFIED MILK PROTEIN", ARZNEIMITTEL FORSCHUNG. DRUG RESEARCH, 1984, vol. 34, no. 9, pages 948-952 *

Also Published As

Publication number Publication date
CY1119054T1 (el) 2018-01-10
PL2588488T3 (pl) 2017-09-29
DK2588488T3 (en) 2017-04-03
US20130102529A1 (en) 2013-04-25
RS55978B1 (sr) 2017-09-29
WO2012001712A1 (en) 2012-01-05
PT2588488T (pt) 2017-06-26
RU2013103799A (ru) 2014-08-10
ES2628306T3 (es) 2017-08-02
CN107090011A (zh) 2017-08-25
KR101701830B1 (ko) 2017-02-13
EP2588488A1 (en) 2013-05-08
AR122394A2 (es) 2022-09-07
CN103025751B (zh) 2016-12-21
EP2588488B1 (en) 2017-03-15
BR112012032364B1 (pt) 2021-08-31
SI2588488T1 (sl) 2017-07-31
LT2588488T (lt) 2017-05-10
HUE032746T2 (en) 2017-10-30
CN103025751A (zh) 2013-04-03
HRP20170541T1 (hr) 2017-06-16
KR20130136422A (ko) 2013-12-12
MX346317B (es) 2017-03-15
BR112012032364A2 (pt) 2016-10-04
MA34319B1 (fr) 2013-06-01
MX2012014199A (es) 2013-05-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8197853B2 (en) Process for solubilizing protein from a proteinaceous material and compositions thereof
RU2533826C2 (ru) Казеинсукцинилат железа (iii) и способ его получения
Kok et al. Synthetic dityrosine-linked β-amyloid dimers form stable, soluble, neurotoxic oligomers
AU2019204601A1 (en) Preparation of pulse protein products ("yp810")
BR112020005651A2 (pt) produto de proteína de milho, produto de proteína de milho derivado de farinha de glúten de milho desengomada, e, método para obter o produto de proteína de milho.
KR101830803B1 (ko) 형질전환 쌀 알곡으로부터 인간 혈청 알부민을 추출하는 방법
Iwata et al. The organic matrix of urinary uric acid crystals
EP0082587B1 (en) Preparation of storage-stable serum
JPH11512425A (ja) グルテン生地のグリアジンおよびグルテニンへの無アルコール湿式抽出
EP2658876B1 (en) Method for the preparation of sodium chondroitin sulphate
JP2006104461A (ja) グリコサミノグリカン画分中の不純物の除去方法
AU2018228294A1 (en) Preparation of acid soluble pulse protein hydrolyzates with little or no astringency and pulse protein hydrolyzates of improved amino acid score
EP0116043A1 (en) PROCESS FOR DECOMPOSITION OF BLOOD HEMOGLOBIN INTO HEME AND GLOBIN.
WO2003011307A1 (en) Use of oversulfated polysaccharides as inhibitors of hiv
CN108936694A (zh) 一种连续稳定制备蛋白质多肽保健品的方法
RU2261112C1 (ru) Способ получения иммуноглобулинового препарата
JP2018193346A (ja) Ｔｉｅ２活性化組成物及びその製造方法
EP3071589B1 (en) Method for reducing colour of a biotechnological liquid
CN107929349A (zh) 一种天花粉注射制剂药物组合物的制备方法
JP2024038771A (ja) プロテオグリカンの精製法
CN112159487A (zh) 一种高纯度依诺肝素钠的制备方法
JP2021526840A (ja) 非バイタル小麦タンパク質及びその製造プロセス
KR910003188B1 (ko) 치자황색소의 정제방법
CN108220377A (zh) 一种生产鱼皮胶原蛋白的方法
AU2002319837A1 (en) Use of oversulfated polysaccharides as inhibitors of HIV