RU2470662C2 - Способы и композиции для лечения сухости глаз - Google Patents

Способы и композиции для лечения сухости глаз Download PDF

Info

Publication number
RU2470662C2
RU2470662C2 RU2010123929/15A RU2010123929A RU2470662C2 RU 2470662 C2 RU2470662 C2 RU 2470662C2 RU 2010123929/15 A RU2010123929/15 A RU 2010123929/15A RU 2010123929 A RU2010123929 A RU 2010123929A RU 2470662 C2 RU2470662 C2 RU 2470662C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
gelatin
mmp
substrate
amount
composition according
Prior art date
Application number
RU2010123929/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2010123929A (ru
Inventor
Бор-Шиуе ХОНГ
Дэвид Л. МИДОУЗ
Original Assignee
Алькон Рисерч, Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Алькон Рисерч, Лтд. filed Critical Алькон Рисерч, Лтд.
Publication of RU2010123929A publication Critical patent/RU2010123929A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2470662C2 publication Critical patent/RU2470662C2/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/736—Glucomannans or galactomannans, e.g. locust bean gum, guar gum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A61K38/012—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals
    • A61K38/014—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals from connective tissue peptides, e.g. gelatin, collagen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A61K38/012—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals
    • A61K38/018—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals from milk
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/39—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/38—Cellulose; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/04—Artificial tears; Irrigation solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Группа изобретений относится к офтальмическим композициям, содержащим протеазоингибирующие пептидные субстраты. Офтальмическая композиция включает пептидный субстрат в растворе в количестве примерно от 0,01% масс./об., до 10% масс./об., и указанный субстрат выбран из группы, состоящей из желатина, овомакроглобулина, коллагена и казеина в офтальмически приемлемом носителе. Композиция дополнительно включает галактоманнан и соль борной кислоты. В изобретении также описан способ применения композиции для лечения сухости глаз. Группа изобретений обеспечивает увеличение жизнеспособности и уменьшение потери влаги эпителиальных клеток роговицы. 2 н. и 10 з.п. ф-лы, 12 ил., 11 пр.

Description

Для настоящей заявки испрошен приоритет по предварительной патентной заявке США с регистрационным номером 60/988623, от 16 ноября 2007, которая включена в настоящее описание с помощью ссылки.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Сухость глаз или ксерофтальмия - это состояние, которое для многих является причиной боли и дискомфорта. Для большинства индивидов мигание и пополнение жидкости в течение дня обеспечивает чистую и кондиционированную поверхность глаз. При сухости глаз поверхность глаза становится весьма чувствительной, и в результате появляются боль и раздражение. Этиология сухости глаз неизвестна, хотя существует множество теорий причины или причин этого состояния. Одна теория утверждает наличие гландулярного дефекта, где глазные железы, которые секретируют жидкость для ее пополнения при ее потере при мигании, при оттоке и испарении, становятся дефицитными и секретируют недостаточное количество жидкости. Другая возможная причина сухости глаз включает нервы, которые располагаются в конъюнктиве и роговице. Нервы также становятся десенсибилизированными, что приводит к меньшей частоте мигания и, следовательно, к высыханию, или они становятся сверхсенсибилизированным, что приводит к увеличению боли и раздражения, характеризующих симптоматику сухости глаз. Хроническое воспаление может быть другим причинным фактором или фактором, способствующим сухости глаз, независимо от происхождения воспалительного поражения. Инфекция в глазах может вызывать сухость глаз, а также воспаление, возникшее в результате инфекции, может вызывать блокирование слезных протоков. Аутоиммунные расстройства, где организм, ошибочно идентифицируя свои собственные ткани, как имеющие чужеродное происхождение, может подвергать ткани глаза иммунологической атаке, также могут представлять собой фактор, способствующий этиологии сухости глаз. В одном таком аутоиммунном расстройстве, синдроме Шегрена, сухость глаз (и сухость во рту) среди прочих отличительных симптомов вызвана иммунными клетками, атакующими железы внешней секреции, которые производят слезы и слюну. Синдромом Шегрена по оценкам только в Соединенных Штатах страдает не менее четырех миллионов человек, что делает его вторым наиболее распространенным аутоиммунным заболеванием. Другие возможные причины сухости глаз включают гормональный или витаминный дефицит или избыток. Фактически, сухость глаз может быть результатом множества различных условий, любое или многие из которых могут приводить к состоянию любого индивидуального пациента.
Независимо от причинного фактора(ов) освобождение от болезненных и ослабляющих симптомов требуется большинству пациентов с сухостью глаз. Для этой цели были опробованы многие способы, начиная от хирургических вмешательств до применения предписанных лекарственных средств и до безрецептурных продуктов в виде глазных капель. Хирургические операции включают постоянное или временное удаление нормальных путей отвода жидкости посредством закупоривания слезного канала. Для временного закупоривания используют средства, известные как тампоны местного действия. Безоперационные средства, разработанные для лечения сухости глаз, включают влажные камеры, используемые для увеличения влажности глаз. Терапевтические агенты, которые могут быть представлены в форме глазных капель или в другом виде, стремятся исправить основное физиологическое состояние и, таким образом, уменьшают тяжесть состояния сухости глаз или ликвидируют его полностью. Однако к настоящему времени лишь один терапевтический агент был одобрен FDA для лечения сухости глаз. Хотя каждый из этих терапевтических или мелиоративных способов может обеспечить благоприятное действие для отдельных пациентов, эти способы влекут за собой значительные риски, расходы и/или неудобства для пациента. Для страдающих сухостью глаз в свободном доступе имеется удобное, относительно недорогое и обладающее низким риском лечение для страдающих сухостью глаз в виде продуктов - искусственных слез. Эти местные агенты, как правило, применяются в виде глазных капель, когда это необходимо для дополнения или восстановления слезной пленки. Таким образом, искусственные слезы, в наиболее общем смысле, просто являются еще одним методом увлажнения глаз. Хотя в некоторых случаях они могут обеспечить облегчение симптомов, они редко изменяют какую-либо основную глазную патологию или патологию роговицы.
Одно из относительно последних направлений исследований происхождения или этиологии сухости глаз рассматривает потенциальную роль металлопротеиназ в роговице. Металлопротеиназы относятся к группе протеолитических ферментов, характеризующихся необходимостью их связывания с ионом металла, таким как Zn2+ или Ca2+, в их активном сайте с целью придания ферментам каталитической активности. Металлопротеиназы, сокращенно MMP, как известно, включены в процессы, которые включают ремоделирование ткани. Таким образом, физиологически MMP играют роль в метастазировании опухоли, эмбриональном развитии и в заживлении ран. Существует примерно 20 известных MMP, имеющих аминокислотную гомологию, составляющую примерно 40%, каждый из ферментов, по-видимому, структурно связан друг с другом. Исторически, индивидуальные MMP получали названия на основе того, что считают их основным субстратом (например, (i) коллагеназы, которые деградируют внутритканевые коллагены (типов I, II и III); (ii) коллагеназы типа IV и желатиназы, которые деградируют коллаген типа 4 базальной мембраны и желатины (денатурированные коллагены); (iii) стромелизины, которые деградируют широкий спектр субстратов, включающих протеогликаны, ламинин, желатины и фибронектин) или иногда на основе клеточного источника фермента (например, полиморфноядерная лейкоцитарная желатиназа). Наконец было признано, что большинство из этих ферментов расщепляют множество субстратов, включая неактивные полипептидные проформы (зимоген) членов других семейств, и что эти ферменты также могут деградировать нематриксные белки, такие как основной миелиновый белок и альфа-1-антитрипсин. Структурно, большинство MMP имеет каталитический домен, карбоксиконцевой гемопексинподобный домен (гемопексиновый домен) и продомен, который расщепляется во время активации фермента.
В статье, опубликованной H. Nagase et al в 1992, представлена численная номенклатура и словарь ММР, известных в настоящее время (например, MMP-1, MMP-2 и т.д.), и открытые позднее ММР следуют этой системе. MMP-9 (желатиназа-B, коллагеназа типа IV-B), в качестве физиологического агента ремоделирования ткани, является активным при деградации широкого спектра компонентов внеклеточного матрикса (ECM) и компонентов базальной мембраны. По-видимому, MMP-9 играет роль в опосредовании воспаления путем превращения цитокина воспаления - интерлейкина IL-lβ в его активную секретированную форму путем катализа посттрансляционной активации фактора некроза опухоли (TNFα), с помощью потенциирования IL-8, процессов хемокинов и путем деградации ингибиторов сериновых протеаз. Кроме того, MMP-9 также может играть роль в аутоиммунитете, поскольку она может стимулировать развитие аутоиммунных неоэпитопов. Было показано, что локальная активность ММР-9 повышается в слезной жидкости пациентов с синдромом Шегрена. Некоторые исследования продемонстрировали значительное увеличение активности желатиназ, включая MMP-9, в слезной пленке людей и других млекопитающих с язвенным кератитом по сравнению со слезной пленкой здоровой роговицы. Также исследовали роль желатиназ в патогенезе язвенного кератита. Исследование с использованием MMP-9-нокаутных мышей показало, что отсутствие MMP-9 придает некоторую степень устойчивости по отношению к разрушению эпителиального барьера роговицы при экспериментально индуцированной сухости глаз.
В своих попытках получения терапевтического агента, который функционирует с ингибированием активности различных MMP in vivo, многими различными исследовательскими организациями было синтезировано большое количество новых химических компонентов. Некоторые из этих рационально созданных MMP-ингибиторов прошли ряд преклинических испытаний и продемонстрировали потенциал в качестве лекарственных средств для ряда патологических состояний, в которые, как считается, вовлечены MMP. К сожалению, некоторые из этих соединений, например, маримастат (BB-2516), ингибитор широкого спектра MMP, и трокад (Ro 32-3555), селективный ингибитор MMP-1, не прошли, несмотря на ожидания, клинических испытаний. Одна причина, способствующая отсутствию у них успеха, заключается в существенных побочных эффектах, таких как скелетно-мышечная токсичность, конкретно, у широкого спектра ингибиторов. Отсутствие эффективности модификации заболевания является еще одним вопросом, как в случае трокада, где обнадеживающие результаты, полученные на модели артрита кролика, не дублировались в испытаниях, проводимых на людях. Фактически, маримастат от British Biotech был подвергнут, по меньшей мере, пяти неудачным испытаниям Фазы III, и Bayer и Pfizer прекратили испытания MMP-ингибиторов на Фазе III.
Недавно был открыт новый сайт связывания желатина в части гемопексиновой субъединицы MMP-9.
WIPO Публикация No. WO 95/2969 относится к композициям для слезозаместительной терапии, содержащим цитокины или факторы роста, конкретно, TGFβ8.
Патент США No. 6444791 (Quay) относится к способу лечения кератоконуса с использованием ингибиторов протеаз, включающих альфа2-макроглобулин и ингибитор альфа 1-протеазы.
Патент США No. 4923700 (Kaufman) относится к системе искусственных слез, включающей водную суспензию частиц типа муцина и вещества липидного типа. Частицы типа муцина образованы из коллагена, желатина и/или сыворотки.
Патент США No. 6455583 (Pflugfelder et al.) относится к местному применению тетрациклина для уменьшения воспаления, ассоциированного с замедлением очищения с помощью слез.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящее время неожиданно обнаружили, что относительно небольшое количество природных ингибиторов пептидных протеаз демонстрирует существенное ингибирование металлопротеиназ при включении в офтальмически совместимые носители, такие как используемые в композициях типа искусственных слез. Также неожиданно было обнаружено, что полученные в результате композиции могут функционировать с увеличением жизнеспособности и уменьшением потери влаги эпителиальных клеток роговицы. Настоящее изобретение относится к MMP-ингибирующим местным офтальмическим композициям, включающим протеазоингибирующий пептидный субстрат в офтальмически приемлемом носителе. Настоящее изобретение также относится к способам лечения сухости глаз, включающим применение к поверхности глаза композиции, содержащей протеазоингибирующий пептидный субстрат в офтальмически приемлемом носителе. Первая группа воплощений настоящего изобретения относится к местным офтальмическим композициям, включающим протеазоингибирующий пептидный субстрат и офтальмически приемлемый носитель. Предпочтительное воплощение в этой группе воплощений представляет собой протеазоингибирующий пептидный субстрат и галактоманнан в офтальмически приемлемом носителе. Следующее предпочтительное воплощение представляет собой местную офтальмическую композицию, включающую желатин и галактоманнан. Следующее предпочтительное воплощение представляет собой композицию альфа-2-макроглобулина и галактоманнана. Другие воплощения настоящего изобретения включают композиции, включающие галактоманнан и овомакроглобулин, галактоманнан и коллаген и галактоманнан и казеин. Предпочтительным галактоманнаном является HP-гуар.
Вторая группа воплощений настоящего изобретения относится к способу лечения сухости глаз, включающему применение к поверхности глаза эффективного количества MMP-9-ингибирующего пептидного субстрата. В предпочтительных воплощениях, представленных здесь, количеств пептидного субстрата достаточно для ингибирования MMP-9, по меньшей мере, на 50%.
Без особой связи с теорией, считается, что протеазоингибирующие пептидные субстраты, функционирующие с ингибированием активности протеаз, таких как MMP-9, уменьшают таким образом способность протеаз воздействовать на эндогенные субстраты, как правило, присутствующие в тканях глаза, подверженных расстройству сухости глаз. Таким образом, они могут функционировать с уменьшением непосредственно разрушающих эффектов MMP-9 или других протеаз ткани глаза. Некоторые или все ингибирующие эффекты протеазоингибирующих пептидных субстратов, оказываемые на протеазы, такие как MMP-9, могут быть косвенными, то есть проявляться в виде ингибирования аллостерического типа. Размер или молекулярная масса протеазоингибирующего пептидного субстрата могут влиять на эффективность этого ингибирования. Кроме того, протеазоингибирующие пептидные субстраты могут обеспечивать прямой или косвенный противовоспалительный эффект, оказываемый на сенсибилизированные ткани поверхности глаза, а также антитканевый эффект ремоделирования. Эти функции, как считается, опосредованы взаимодействием пептидных субстратов с ферментами MMP, конкретно с MMP-9. Кроме того, определенные воплощения настоящего изобретения могут продлевать эти терапевтические функции путем обеспечения длительного высвобождения протеазоингибирующих пептидов. Например, в предпочтительном воплощении настоящего изобретения протеазоингибирующий петидный субстрат объединяют с HP-гуаром и боратом с образованием геля. Этот гель функционирует с усилением стабильности слезной пленки и защищает поверхность глаза от потери влаги. Кроме того, гель может улавливать протеазоингибирующий пептидный субстрат, и таким образом субстраты сохраняются в слезной пленке, приводя в результате к длительному периоду активности. Протеазоингибирующие пептидные субстраты также могут функционировать как каркасная структура для растворимого муцина с образованием желатин-муцинового гелевого матрикса, усиливая, таким образом, стабильность слезной пленки.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На Фигуре 1 показано дозозависимое ингибирование MMP-9 Желатином А в буфере Tricine.
На Фигуре 2 показано, что Желатин A в концентрации 0,1% масс./об. в комбинации со смягчающими полимерами показывает существенное ингибирование MMP-9.
На Фигуре 3 показано дозозависимое ингибирование MMP-9 Желатином А, включенным в Систейн (Systane).
На Фигуре 4 показано дозозависимое ингибирование MMP-9 Желатином А в препарате Tears Naturale II.
На Фигуре 5 показано дозозависимое ингибирование бактериальной коллагеназы Желатином А.
На Фигуре 6 показано дозозависимое ингибирование бактериальной коллагеназы Желатином А в Систейне.
На Фигуре 7 показано дозозависимое ингибирование бактериальной коллагеназы Желатином А в препарате Tears Naturale II.
На Фигуре 8 показано, что Желатин А в комбинации со смягчающими полимерами показывает различные степени ингибирования бактериальной коллагеназы.
На Фигуре 9 показана увеличенная защита от потери влаги и увеличенная жизнеспособность клеток, обработанных продуктами в виде искусственных слез, включающими Желатин А.
На Фигуре 11 показано дозозависимое ингибирование MMP-9 с помощью рекомбинантного человеческого желатина 8,5 кДа.
На Фигуре 12 показано дозозависимое ингибирование MMP-9 с помощью рекомбинантного человеческого коллагена.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
При использовании в настоящем описании, если не определено иначе, следующие термины следует понимать в следующих значениях:
Термин "протеаза" охватывает ферменты, которые катализируют расщепление пептидных связей. Характерные протеазы включают коллагеназы и матриксные металлопротеиназы. Термин "протеазоингибирующий пептидный субстрат" охватывает вещества, которые имеют прежде всего пептидную природу, то есть состоят из одной или более аминокислотных цепей и обладают свойством субстрата для протеазных ферментов. Характерные примеры протеазоингибирующих пептидных субстратов включают желатин, альфа-2-макроглобулин, овомакроглобулин, казеин и коллаген.
Термин "MMP" обозначает матриксную металлопротеиназу (фермент).
Термин "MMP-9" обозначает фермент, известный как матриксная металлопротеиназа-9.
Термин "галактоманнан" обозначает полисахариды, полученные из натуральных смол или из аналогичных натуральных или синтетических смол, содержащих компоненты маннозы или галактозы, или обе группы в качестве основных структурных компонентов.
Термин "CMC" обозначает карбоксиметилцеллюлозу и ее соли.
Термин "HPMC" обозначает гидроксипропилметилцеллюлозу.
Термин "HP-гуар" обозначает гидроксипропил-гуар. Гидроксипропил-гуар с низким молярным замещением (например, менее чем 0,6) является предпочтительным.
Термин "поверхность глаз" обозначает доступные извне ткани глаз, характерные, но не ограничивающие примеры которых включают роговицу, конъюнктиву, свод и склеру.
Термин "ингибирующее количество" обозначает нетоксичное, но достаточное количество ингибирующего вещества для обеспечения целевой активности.
Термин "офтальмически приемлемый носитель" обозначает композицию, обладающую физическими свойствами (например, pH и/или осмоляльность), которые физиологически совместимы с офтальмическими тканями.
Неожиданно, было обнаружено, что относительно небольшое количество природных ингибиторов пептидных протеаз демонстрирует существенное ингибирование металлопротеиназ при включении в композиции типа искусственных слез. Еще более неожиданным оказалось, что количество протеазоингибирующего пептидного субстрата может быть достаточно низким, поскольку было обнаружено, что настолько низкие концентрации протеазоингибирующего пептидного субстрата, как 0,1% масс./об., одним из воплощений которого является желатин, могут обеспечивать ингибирование MMP-9 более чем на 50%.
Типичные протеазоингибирующие пептидные субстраты включают желатин, альфа-2-макроглобулин, овомакроглобулин, коллаген и казеин, а также следующие, описанные ниже. Однако следует понимать, что другие протеазоингибирующие пептидные субстраты могут использоваться и, как обнаружено, находятся в рамках настоящего изобретения.
Желатин представляет собой белок, получаемый с помощью частичного гидролиза коллагена, экстрагированного из соединительной ткани животного. Коммерчески доступны два типа желатина: тип А получают из обработанного кислотой предшественника, в то время как тип В получают из обработанного щелочью предшественника. Оба типа желатина являются субстратами различных ММР и функционируют в качестве конкурирующих ингибиторов MMP.
Альфа-2-макроглобулин, крупный белок, получаемый печенью и обнаруженный в крови, способен инактивировать ряд протеиназ, включающих металлопротеиназы. Механизм этой инактивации, как сообщается, заключается в том, что есть участок из 35 аминокислот, которые функционируют в качестве 'затравки' для протеиназы: когда протеиназа связывается и расщепляет этот участок, то она становится связанной с альфа-2-макроглобулином. Полученный в результате комплекс затем выводится из крови с помощью макрофагов.
Казеин представляет собой фосфопротеин, обнаруженный в сыре и молоке. Казеин содержит относительно высокое количество остатков пролина и в результате имеет слабую вторичную или третичную структуру. Будучи относительно гидрофобным, он легко диспергируется в разведенной щелочи и в растворах солей.
Овомакроглобулин, также обозначаемый как овостатин, представляет собой гликопротеин, состоящий из четырех субъединиц, соединенных в пары с помощью дисульфидных связей. Он продемонстрировал ингибирующую активность широкого спектра действия против различных типов протеаз, включающих сериновые протеазы, цистеиновые протеазы, тиоловые протеазы и металлопротеиназы.
Коллаген представляет собой основной белок у животных, обеспечивая почти 25% суммарного содержания белка, и является основным белком в соединительной ткани. Он представляет собой длинный волокнистый белок и образует жесткие слои или волокна, которые вместе образуют внеклеточный матрикс, который обеспечивает структуру тканей и клеток. Коллаген также может быть обнаружен внутри определенных клеток. Коллаген, наиболее часто встречающийся в форме тройной спирали, известен как тропоколлаген. С помощью частичного гидролиза тропоколлагена получается желатин.
Источник протеазоингибирующих пептидных субстратов, применяемых в настоящем изобретении, как правило, имеет животное происхождение. Например, желатин, получаемый из бычьей или свиной кожи или кости, является превалирующей формой, используемой в настоящее время в фармацевтических продуктах. Осуществляется экстенсивная обработка с целью получения насколько возможно гомогенного и чистого продукта с учетом предполагаемого использования (пероральное, парентеральное средство). Коллаген и/или желатин, который свободен от трансмиссивной спонгиозной энцефалопатии (TSR) и Бычьей спонгиозной энцефалопатии (BSE), коммерчески доступен от ряда поставщиков, включающих, например, Gelita (Sergeant Bluff, Iowa) и Rousselot (Компания Sobel, Dubuque, Iowa).
Использование материалов, получаемых с помощью синтетической и/или рекомбинантной технологии, представляет собой другой вариант. Например, Фиброген (San Francisco, California) производит полностью синтетические желатины и коллагены с использованием рекомбинантной дрожжевой системы. Эти синтетические материалы могут обладать некоторыми преимуществами с точки зрения постоянства (однообразия от партии к партии, определяемого молекулярной массой и физико-химическими свойствами), соответствия требованиям заказчика (определенные заранее характеристики, дизайн молекул) и с точки зрения биосовместимости и безопасности (уменьшенный риск индуцирования иммунного ответа, ликвидации загрязнений).
Композиции и способы по настоящему изобретению включают протеазоингибирующие пептидные субстраты в количестве, достаточном для ингибирования металлопротеиназ. Предпочтительной металлопротеиназой является MMP-9. Количество протеазоингибирующего пептидного субстрата может варьироваться в зависимости от конкретного субстрата, но, как правило, количество составляет примерно от 0,010% до 10% масса/объем (масс./об.), более предпочтительно, примерно от 0,05% до 1% (масс./об.), еще более предпочтительно, примерно от 0,05% до 0,25% (масс./об.). Процентная степень ингибирования MMP составляет, предпочтительно, более чем примерно 50%, более предпочтительно более чем примерно 60%, еще более предпочтительно более чем примерно 70%.
В одном воплощении настоящего изобретения протеазоингибирующий пептидный субстрат объединяют с существующей фармацевтической композицией для сухости глаз, такой как Глазные капли СИСТЕЙН® Любрикант (SYSTANE® Lubricant Eye Drops) (Alcon Laboratories, Inc.), которая содержит смягчающую полимерную систему. Полимеризационная защита СИСТЕЙНА® достигается за счет взаимодействия смягчающих веществ (полиэтиленгликоля 400 и пропиленгликоля), HP-Гуара и натуральных слез пациента. При объединении HP-Гуара с натуральными слезами происходит химическая реакция. HP-Гуар связывается с гидрофобной (отталкивающей воду) поверхностью с образованием сети гелеподобной консистенции. HP-Гуар также помогает поддерживать смягчающую систему на поверхности глаза дольше.
Одно воплощение настоящего изобретения представляет собой композицию, объединяющую галактоманнан, борат и желатин. Типы галактоманнанов, которые могут использоваться в настоящем изобретении, как правило, получают из гуаровой камеди, камеди бобов рожкового дерева и камеди цезальпинии колючей. Дополнительно, галактоманнаны также могут быть получены с помощью классических синтетических способов или с помощью химической модификации природных галактоманнанов.
При использовании в настоящем описании термин "галактоманнан" обозначает полисахариды, полученные из вышеописанных натуральных смол или из аналогичных натуральных или синтетических смол, содержащих компоненты маннозы или галактозы, или обе группы в качестве основных структурных компонентов. Предпочтительные галактоманнаны по настоящему изобретению состоят из линейных цепей (1-4)-.бета.-D-маннопиранозильных единиц с.альфа.-D-галактопиранозильными единицами, присоединенными с помощью связей (1-6). У предпочтительных галактоманнанов соотношение D-галактозы к D-маннозе варьируется, но, как правило, составляет примерно от 1:2 до 1:4. Галактоманнаны, содержащие D-галактозу и D-маннозу с их соотношением, составляющим примерно 1:2, являются наиболее предпочтительными. Дополнительно, в определение "галактоманнан" также могут быть включены другие химически модифицированные варианты полисахаридов. Например, гидроксиэтил, гидроксипропил и карбоксиметилгидроксипропил-замены могут быть получены для галактоманнанов по настоящему изобретению. Особенно предпочтительны неионные замены в галактоманнанах, такие как содержащие алкокси- и алкильные группы (C1-C6), если целевым является получение мягкого геля (например, гидроксипропильные замены). Замены в положениях гидроксила, отличных от cis-положения, являются наиболее предпочтительными. Примером композиции, образованной с помощью неионной замены галактоманнана, является гидроксипропил-гуар с молярной заменой, составляющей примерно 0,4. Анионные замены также могут быть произведены с галактоманнанами. Анионная замена является особенно предпочтительной, когда целевым является получение сильнореактивных гелей.
Боратные соединения могут использоваться в определенных воплощениях настоящего изобретения. Боратные соединения, которые могут использоваться в композициях настоящего изобретения, включают борную кислоту и другие фармацевтически приемлемые соли, такие как борат натрия (бура) и борат калия. При использовании в настоящем описании термин "борат" обозначает все фармацевтически приемлемые формы боратов. Бораты представляют собой распространенные вспомогательные вещества в офтальмических фармацевтических композициях благодаря хорошей буферной способности при физиологическом рН, а также хорошо известной безопасности и совместимости с широким спектром лекарственных средств и консервантов. Бораты также обладают собственными бактериостатическими и фунгистатическими свойствами и, таким образом, помогают в сохранности композиций.
Предпочтительное воплощение настоящего изобретения представляет собой композицию, включающую желатин в количестве, составляющем 0,01%-5% (масс./об.), один или более галактоманнанов в количестве, составляющем примерно от 0,1 до 5% (масс./об.), и борат в количестве, составляющем примерно от 0,05 до 5% (масс./об.). Предпочтительно, композиции будут содержать 0,01%-1% желатина (масс./об.), 0,2-2% (масс./об.) галактоманнана и 0,1-2% (масс./об.) соединения бората. Наиболее предпочтительно, композиции будут содержать 0,05%-0,5% желатина (масс./об.), 0,3-0,8% (масс./об.) галактоманнана и 0,25-1% (масс./об.) соединения бората. Конкретные количества будут варьироваться в зависимости от конкретных целевых гелеобразующих свойств. Как правило, концентрацией желатина, бората или галактоманнана можно манипулировать с целью приближения к подходящей вязкости композиции при активации геля (т.е. после введения). Манипулирование концентрацией желатина, бората или галактоманнана может обеспечивать более сильное или более слабое гелеобразование при данном рН. Если целевой является композиция с сильным гелеобразованием, то концентрация желатина, бората или галактоманнана может быть увеличена. Если целевой является композиция с более слабым гелеобразованием, такая как композиция с частичным гелеобразованием, то концентрация желатина, бората или галактоманнана может быть уменьшена. На гелеобразующие свойства композиций по настоящему изобретению могут влиять другие факторы, такие как природа и концентрация дополнительных ингредиентов в композиции, таких как соли, консерванты, хелатирующие агенты и так далее. Как правило, предпочтительные негелевые композиции по настоящему изобретению, т.е. композиции, не активирующие гель в глазах, будут иметь вязкость, составляющую примерно от 5 до 1000 сП. Как правило, предпочтительные гелевые композиции по настоящему изобретению, т.е. композиции, активирующие гель в глазах, будут иметь вязкость, составляющую примерно от 50 до 50000 сП.
Один из самых ранних и наиболее успешных растворов искусственных слез описан в Патенте США No. 4039662 (Hecht, et al.). Этот раствор присутствовал на рынке в течение многих лет в виде Глазных Капель Любриканта TEARS NATURALETM (Alcon Laboratories, Inc., Fort Worth, Texas). Раствор, описанный и заявленный Hecht, et al. в патенте '662, и соответствующий коммерческий продукт основаны на использовании уникальной комбинации гидроксипропилметилцеллюлозы, Декстрана 70 и хлорида бензалкония. В более поздней версии этого продукта, который в настоящее время присутствует на рынке под названием Глазных Капель Любрикант TEARS NATURALE(TM) II Polyquad® (Alcon Laboratories, Inc.), хлорид бензалкония заменили на поликватерниум-1, который представляет собой полимерный противомикробный агент/консервант.
Примером органического буфера, который может использоваться в настоящем изобретении, является Tricine, или N-[трис(гидроксиметил)метил]глицин. Органический буфер содержит одновременно основную и кислотную группы, и в результате является цвиттерионным; в условиях физиологического рН эти буферы несут одновременно положительный и отрицательный заряды.
В случае контактных линз и офтальмических растворов добавляют различные агенты для усиления совместимости с глазами. Чтобы избежать жжения или раздражения, важно, чтобы раствор обладал тоничностью и pH в физиологическом диапазоне, например, 200-350 мОсмол для тоничности и 6,5-8,5 для pH. С этой целью часто добавляют различные буферные и осмотические агенты. Простейшим осмотическим агентом является хлорид натрия, поскольку это основное растворенное вещество в слезах человека. Кроме того, для частичной или полной замены хлорида натрия также могут быть добавлены пропиленгликоль, лактулоза, трегалоза, сорбит, маннит или другие осмотические агенты. Также могут использоваться различные буферные системы для обеспечения физиологического рН в интервале между 6,5 и 8,5, такие системы, как цитрат, фосфат (подходящие смеси Na2HPO4, NaH2PO4 и КН2РО4), борат (борная кислота, борат натрия, тетраборат калия, метаборат калия и смеси), бикарбонат, и трометамин, а также другие соответствующие азотсодержащие буферы (например, ACES, BES, BICINE, BIS-Tris, BIS-Tris Пропан, HEPES, HEPPS, имидазол, MES, MOPS, PIPES, TAPS, TES, Tricine).
Композиции протеазоингибирующего пептидного субстрата по изобретению могут быть объединены с одним или более из дополнительных терапевтических агентов из других терапевтических классов, которые, как считается, обладают полезными эффектами при лечении сухости глаз, с такими агентами, как, например, антибиотики, иммунодепрессанты и противовоспалительные агенты.
Противовоспалительные агенты, которые могут быть включены в композиции по изобретению, включают стероидные и нестероидные лекарственные средства (NSAID). Типичные NSAID включают, но не ограничиваются ими, кеторолак трометамин (Acular®), индометацин, флурбипрофен натрия, непафенак, бромфенак, супрофен и диклофенак (Voltaren®). Типичные кортикостероиды включают, но не ограничиваются ими, римексолин, гидрокортизон, флудрокортизон, фторметалон, лотепреднол, триамцинолон, дексаметазон, преднизолон, кортизон, алдостерон, мидризон и бетаметазон. Типичные половые стероиды включают стероиды на основе андрогенов, эстрогенов и/или прогестинов.
Типичные антибиотики включают, но не ограничиваются ими, тетрациклин, доксициклин, и химически модифицированные тетрациклины, бета-лактамные антибиотики, такие как цефокситин, н-формамидоилтиенамицин и другие производные тиенамицина, хлорамфеникол, неомицин, карбенициллин, колистин, пенициллин G, полимиксин В, ванкомицин, цефазолин, цефалоридин, хиброрифамицин грамицидин, бацитрацин, сульфаниламиды эноксацина, офлоксацин, циноксацин, спарфлоксацин, тиамфеникол, налидиксовая кислота, тосуфлоксацина тозилат, норфлоксацин, тригидрата пипемидовой кислоты, пиромидовая кислота, флероксацин, биомицин, ципрофлоксацин, эритромицин, гентамицин, норфлоксацин, сульфацетамид, сулфиксоксазол, тобрамицин, моксифлоксацин и левофлоксацин.
Типичные иммунодепрессанты включают, например, циклоспорины, такие как циклоспорин А, и аскомицины, такие как FK-506, рапамицин и такролимус.
К композициям по настоящему изобретению могут быть добавлены другие ингредиенты. Такие ингридиенты, как правило, включают агенты, регулирующие тоничность, хелатирующие агенты, активные фармацевтические агенты, солюбилизатор, консерванты, агенты, регулирующие рН, и носители. Другие полимерные или мономерные агенты, такие как полиэтиленгликоль и глицерин, также могут быть добавлены для специальной обработки. Агенты тоничности, используемые в композициях по настоящему изобретению, могут включать соли, такие как хлорид натрия, хлорид калия и хлорид кальция; неионные агенты тоничности могут включать пропиленгликоль и глицерин; хелатирующие агенты могут включать пропиленгликоль и глицерин; хелатирующие агенты могут включать EDTA и ее соли; солюбилизирующие агенты могут включать Cremophor EL® и tween 80; другие носители могут включать Amberlite® IRP-60; pH-регулирующие агенты могут включать хлорводородную кислоту, Tris, триэтаноламн и гидроксид натрия; а также подходящие консерванты могут включать хлорид бензалкония, поликватерниум-1 и полиэкзамэтиленбигуанид. Вышеперечисленные примеры приведены для иллюстративных целей и не претендуют на то, чтобы быть всеобъемлющими. Примеры других агентов, используемых для вышеуказанных целей, хорошо известны в офтальмических фармацевтических композициях и предусмотрены настоящим изобретением.
Следующие примеры дополнительно иллюстрируют различные воплощения изобретения. Примеры представлены для помощи в понимании изобретения и не должны рассматриваться, как его ограничения.
Пример 1:
В этом и в следующих примерах, пока не определено иначе, активность MMP оценивали с использованием флуорогенных субстратов, чувствительных к MMP-1, -2 и -9, включая DNP-Pro-Leu-Gly-Met-Trp-Ser-Arg-OH и DNP-Pro-Cha-Gly-Cys (Me)-His-Ala-Lys (N-Me-Abz)-NH2. Эти анализы флуорогенных субстратов хорошо известны из уровня техники; например, смотри Bickett et al. Analytical Biochemistry 212, 58-64 (1993) и Netzel-Arnett et al, Analytical Biochemistry 195, 86-92 (1991), обе публикации включены в настоящее описание с помощью ссылки. Перед проведением анализа про-MMP-9 активировали с помощью ацетата п-аминофенилртути, и требовалось отсутствие активации бактериальной коллагеназы. Для анализа готовили основной раствор субстрата с концентрацией 0,1 mM в ДМСО, и все анализы активности фермента вместе или без ингибиторов осуществляли в 50 mM буфере tricine, pH 7,5, содержащем 0,2M NaCl, 10 mM CaCl2, 50 mM ZnSO4, и 0,05% Brij-35, при комнатной температуре. (Brij-35 представляет собой коммерчески доступное поверхностно-активное вещество, эфир полиоксиэтиленлаурила). Суммарный объем образца составляет 200 мкл, и анализ проводят в 96-луночном микропланшете. Изменения флуоресценции записывали каждую минуту в течение 10 минут с помощью прибора, считывающего флуоресценцию с микропланшетов (Model FL x800I, Bio-Tek Instrument), с установками соответствующей длины волны возбуждения/эмиссии (т.e. λвозб.=280 нм; λэм.=360 нм и λвозб.=280 нм; λэм.=360 нм) для конкретного используемого субстрата. Активность фермента выражали в виде изменения флуоресценции в минуту, что соответствовало наклону прямой линии относительно флуоресценции против времени, записанного для ферментативной реакции в течение 10 минут. Процент ингибирования рассчитывали путем вычитания доли образца с ингибитором из доли образца без ингибитора и затем деления на долю образца без ингибитора и умножения на 100%.
Это исследование было предпринято для изучения потенциала Желатина А в ингибировании активности MMP-9. В этом конкретном исследовании концентрация MMP-9 составила 360 мкЕдиниц/анализ в буфере Tricine, в качестве желатина использовали Желатин А (Sigma каталог #1890-50G, Lot #014K0077, кислый экстракт из свиной кожи), и в качестве субстрата использовали MMP-2/MMP-9 флуорогенный субстрат I (Calbiochem Каталог #44215, lot #B47246; пептидная структура = DNP-Pro-Leu-Gly-Met-Trp-Ser-Arg-OH.) 20 мкМ/анализ. Желатин А в буфере Tricine показал дозозависимое ингибирование активности MMP-9. Начиная от 0,01% до 0,2% (масс./об.) наблюдали пропорциональное увеличение ингибирования. После 0,2%, ингибирование начало выравниваться. Результаты исследования описаны на Фигуре 1.
Пример 2:
Это исследование было предпринято для изучения потенциала Желатина А в ингибировании активности MMP-9 при использовании с различными смягчающими полимерами. Для этой цели был выбран 0,1% масс./об. Желатин A, который обеспечил приблизительно 59% ингибирования в Примере 1. MMP-9 = Calbiochem Кат# 444231;Lot# B56458; человеческие нейтрофилы. Используемая активность составила 200 мкЕдиниц/анализ. Желатин = Желатин A. Sigma Кат# 1890-50G, Lot# 014K0077 (кислый экстракт из свиной кожи). Аналитический буфер = 50 mM Tricine, pH 7,5, содержащий 0,2M NaCl, 10 mM CaCl2. Субстрат = MMP-l/MMP-9 флуорогенный субстрат. Calbiochem кат# 44221, lot# B54710. Молекулярная масса, 1077,2; 1 мкМ в анализе. Пептидная структура = DNP-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(N-Me-Abz)-NH2. Возб. 365 нм; Эмм., 450 нм.
Результаты этого исследования показывают, что Желатин А в концентрации 0,1% масс./об., в комбинации с 0,18% масс./об. HP-гуаром, 0,3% масс./об. HPMC и 0,5% масс./об. CMC, способен обеспечивать 74,8%, 71,8% и 79,1% ингибирования MMP-9, соответственно, как показано на Фигуре 2.
Пример 3:
Следующие серии исследований изучали способность Желатина А ингибировать активность ММР-9 при включении в репрезентативные растворы искусственных слез. Для этой цели выбрали растворы искусственных слез, известные как Систейн и Tears Naturale II. Для этой серии исследований различные концентрации желатина А в интервале от 0,01% до 0,20% (масс./об.) включали одновременно в имеющиеся на рынке растворы Систейн и Tears Naturale II. Анализ проводили с использованием того же фермента и субстрата и следуя той же процедуре, как описано в Примере 2. Результаты этого исследования демонстрируют, что Желатин-А показал дозозависимое ингибирование активности MMP-9 при включении одновременно в растворы Систейн и Tears Naturale II, способствуя более чем 50% ингибированию от 0,01% масс./об. и выше в Систейне, и от 0,05% масс./об. и выше в Tears Naturale II. Результаты этих исследований описаны графически на Фигурах 3 и 4.
Пример 4:
Это исследование было предпринято для изучения ингибирующей реактивности Желатина А по отношению к бактериальной коллагеназе. Бактериальные коллагеназы представляют собой экзотоксины, которые способствуют разрушению внеклеточных структур в процессе бактериального патогенеза. Для исследования готовили различные концентрации желатина А в интервале от 0,05% до 0,8% (масс./об.) в 50mM буфера tricine pH 7,5, содержащего 0,2 M NaCl, 10 mM CaCl2, ZnSO4, и Brij-35. Активность бактериальной коллагеназы оценивали с помощью записи изменения флуоресценции в течение 10 мин на спектрофлюориметре при 25°С. Активность выражали в виде изменения флуоресценции в минуту. Концентрации бактериальной коллагеназы и субстрата I составили 20 Единиц/анализ и 20 мкМ/анализ, соответственно. В качестве коллагеназы использовали Клостридопептидазу (Sigma Каталог #C-7657; lot #107H8632). В качестве желатина использовали Желатин А (Sigma Кат #1890-50G, Lot #014K0077. Кислый экстракт из свиной кожи). В качестве субстрата использовали MMP-2/MMP-9 флуорогенный субстрат I (Calbiochem кат #44215, lot #B47246; Пептидная структура = DNP-Pro-Leu-Gly-Met-Trp-Ser-Arg-OH). Результаты показывают, что требуется более чем 0,4% масс./об. Желатина A для достижения более 50% ингибирования бактериального фермента, тогда как желатин А в интервале 0,05%-0,1% (масс./об.) легко может обеспечивать более чем 50% ингибирования MMP-9. Таким образом, ингибирование Желатином А бактериальной коллагеназы оказывается не настолько эффективным, как ингибирование ММР-9. Результаты исследования описаны графически на Фигуре 5.
Пример 5:
Это исследование тестировало способность Желатина А ингибировать бактериальную коллагеназу при включении в продукты искусственных слез. Для этой серии исследований различные концентрации желатина А в интервале от 0,05% до 0,25% (масс./об.) включали одновременно в имеющиеся на рынке растворы Систейн и Tears Naturale II. Анализ проводили с помощью той же процедуры и того же субстрата, как описано в Примере 4. Результаты показывают, что Желатин А при включении в продукты искусственных слез Систейн и Tears Naturale II, также может обеспечивать дозозависимое ингибирование бактериальной коллагеназы. Однако он менее эффективен и требуется более чем 0,25% масс./об. желатина для достижения 50% ингибирования в обоих продуктах искусственных слез, как показано графически на Фигурах 6 и 7.
Пример 6:
Это исследование было предпринято для изучения потенциала Желатина А в ингибировании активности бактериальной коллагеназы при использовании с различными смягчающими полимерами. Для этой цели Желатин А 0,1% масс./об. объединяли с HP-Гуаром, CMC и HPMC. Исследование проводили с помощью той же процедуры и того же субстрата, как описано в Примере 4. Результаты показывают, что вместе с 0,18% HP-гуаром достигают 51% ингибирования, в то время как вместе с 0,3% HPMC и 0,5% CMC достигают только 24% и 21% ингибирования, соответственно. Эти результаты показаны графически на Фигуре 8.
Пример 7:
Эти исследования изучали способность Желатина А обеспечивать защиту от потери влаги и усиливать жизнеспособность человеческих эпителиальных клеток роговицы. В этих исследованиях анализировали человеческие эпителиальные клетки CEPI 17 с использованием метода Alamar Blue, описанного здесь. Клетки роговицы человеческой эпителиальной клеточной линии (CEPI 17, Alcon Laboratories Inc.) растили до конфлюэнтного состояния в 96-луночном микропланшете. Среду удаляли из тестируемых лунок и добавляли 100 мкл каждого тестируемого раствора. Контрольные лунки со средой оставляли отдельно. Планшет помещали обратно в инкубатор на 60 минут. После инкубации все лунки аспирировали и промывали один раз с помощью 200 мкл на лунку буфера HyQ (Модифицированный Dulbecco фосфатный буферный раствор, Hyclone кат# SH30028.02). Делали разведение 1/10 Alamar Blue (Biosource, DAL 1100) в HyQ и добавляли 100 мкл в каждую лунку для инкубации при 37°C. Через 4 часа инкубации планшет считывали с помощью прибора для считывания флуоресценции с микропланшетов (Model FLx800, Bio-Tek Instrument) с установкой возбуждения при 560 нм и эмиссии при 590 нм. Расчет % жизнеспособности клеток проводили путем деления средней флуоресценции образца на среднюю флуоресценцию контроля и умножали на 100%.
Для оценки защиты от потери влаги используется похожая процедура с предварительной инкубацией в течение 15 минут и с периодом потери влаги в течение 30 минут. После предварительной инкубации аспирировали все тестируемые лунки за исключением контролей. Контроли накрывали парафильмом. Планшет помещали в вытяжку с нисходящим потоком воздуха на 30 минут для того, чтобы подвергнуть клетки потере влаги. После потери влаги все лунки промывали один раз с помощью 200 мкл HyQ. Клетки анализировали на жизнеспособность с помощью анализа с использованием Alamar Blue, как описано в процедуре анализа на клеточную жизнеспособность. Расчет защиты от потери влаги проводили путем деления средней флуоресценции образца на среднюю флуоресценцию контроля и умножали на 100%.
Результаты этого исследования демонстрируют, что включение Желатина А в различные продукты искусственных слез, включающие Систейн, Tears Naturale II и GenTeal Mild, оказывается обеспечивает лучшую защиту клеток от потери влаги и усиливает жизнеспособность клеток. Результаты этого исследования показаны графически на Фигуре 9.
Пример 8:
Это исследование было предпринято для определения способности альфа-2-макроглобулина ингибировать активность MMP-9. Активность MMP-9 оценивали путем записи изменения флуоресценции в течение 10 минут на спектрофлюориметре при 25°C. Активность выражали в виде изменения флуоресценции в минуту. Использовали 360 мкЕдиниц/анализ MMP-9 (Calbiochem кат #444231, Lot #B56458; человеческие нейтрофилы). Альфа-2-макроглобулин (Sigma Кат #M-6159, Lot #118H7606; из человеческой плаценты). В качестве субстрата использовали MMP-2/MMP-9 флуорогенный субстрат I 10 мкМ/анализ (Calbiochem кат #44215, lot #B47246; Пептидная структура = DNP-Pro-Leu-Gly-Met-Trp-Ser-Arg-OH). Результаты показывают, что альфа-2-макроглобулин ингибирует активность MMP-9 дозозависимым образом. Результаты описаны графически на Фигуре 10.
Пример 9:
Это исследование было предпринято для определения эффекта ингибирования рекомбинантным желатином известного размера активности MMP-9. Активность MMP-9 оценивали путем записи изменения флуоресценции в течение 10 минут с помощью спектрофлюориметра при 25°C. Активность выражали в виде изменения флуоресценции в минуту. Концентрация MMP-9 (Calbiochem каталог #444231, lot #B56458, человеческие нейтрофилы) составила 200 мкЕдиниц/анализ в буфере Tricine (50 mM Tricine, pH 7,5, содержащий 0,2M NaCl, 10 mM CaCl2). В качестве желатина использовали рекомбинантный человеческий желатин 8,5 кДа (FibroGen, Lot #04AE001R-01). В качестве субстрата использовали MMP-l/MMP-9 флуорогенный субстрат (Calbiochem Каталог #44221, lot #B54710; пептидная структура = DNP-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(N-Me-Abz)-NH2; Возб. 365 нм; Эм. 450 нм). Использовали 1 мкМ/анализ. В этом анализе для достижения более чем 50% ингибирования требовался рекомбинантный человеческий желатин 8,5 кДа с концентрацией в интервале между 0,15%-0,25% (масс./об.). Результаты исследования описаны графически на Фигуре 11.
Пример 10:
Это исследование было предпринято для определения эффекта ингибирования рекомбинантным человеческим Коллагеном Типа I активности MMP-9. Активность MMP-9 оценивали путем записи изменения флуоресценции в течение 10 минут с помощью спектрофлюориметра при 25°C. Активность выражали в виде изменения флуоресценции в минуту. Концентрация MMP-9 (Calbiochem каталог #444231, lot #B56458, человеческие нейтрофилы) составила 200 мкЕдиниц/анализ в буфере Tricine (50 mM Tricine, pH 7,5, содержащий 0,2M NaCl, 10 mM CaCl2). В качестве коллагена использовали рекомбинантный человеческий коллаген типа I (FibroGen, Lot #04AE001R-01). В качестве субстрата использовали MMP-1/MMP-9 флуорогенный субстрат (Calbiochem Каталог #44221, lot #B54710; пептидная структура = DNP-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(N-Me-Abz)-NH2; Возб. 365 нм; Эм. 450 нм). Использовали 1 мкМ/анализ. В этом анализе для достижения более чем 50% ингибирования требовался рекомбинантный человеческий коллаген типа I с концентрацией в интервале между 0,03%-0,04% (масс./об.). Результаты исследования описаны графически на Фигуре 12.
Пример 11:
Далее представлен пример двух растворов искусственных слез по настоящему изобретению.
Соединение Количество % (масс./об.)
  Систейн Tears Naturale II
Желатин 0,1 0,1
Борная кислота 1 отсутствует
Борат натрия отсутствует 0,35
HPMC отсутствует 0,3
Гидроксипропил-Гуар 0,18 отсутствует
Пропиленгликоль 0,3 отсутствует
ПЭГ-400 0,4 отсутствует
Декстран 70 отсутствует 0,1
Хлорид натрия 0,1 0,6
Хлорид калия 0,12 0,12
Хлорид кальция (безводный) 0,0053 отсутствует
Хлорид магния (гексагидрат) 0,0064 отсутствует
Поликватерниум-1 0,001 0,001
Гидроксид натрия/
Хлороводородная кислота		 до pH 7,0 до pH 7,4
Очищенная вода qs до 100% qs до 100%

Claims (12)

1. Местная офтальмическая композиция, включающая протеазо-ингибирующий пептидный субстрат в растворе в количестве примерно от 0,010% мас./об., до 10% мас./об., где указанный субстрат выбран из группы, состоящей из желатина, овомакроглобулина, коллагена и казеина в офтальмически приемлемом носителе.
2. Композиция по п.1, дополнительно включающая галактоманнан и борат.
3. Композиция по п.1 или 2, где протеазо-ингибирующий пептидный субстрат способен ингибировать матриксную металлопротеазу-9.
4. Композиция по п.2, где галактоманнан включает гидроксипропил-гуар.
5. Композиция по п.1 или 2, дополнительно содержащая терапевтический агент, выбранный из группы, состоящей из антибиотиков, противовоспалительных агентов и иммунодепрессантов.
6. Композиция по п.1, где субстрат представляет собой желатин в количестве от 0,01% мас./об. до 0,2% мас./об.
7. Композиция по п.2, где желатин присутствует в количестве от 0,01% мас./об., до 5% мас./об., галактоманнан присутствует в количестве от 0,1% мас./об. до 5% мас./об., и борат присутствует в количестве от 0,05% мас./об. до 5% мас./об.
8. Композиция по п.7, где желатин присутствует в количестве от 0,05% мас./об. до 0,5% мас./об., галактоманнан присутствует в количестве от 0,3% мас./об. до 0,8% мас./об., и борат присутствует в количестве от 0,25% мас./об. до 1% мас./об.
9. Композиция по п.1, где субстрат представляет собой коллаген в количестве более чем примерно 0,03% мас./об.
10. Композиция по п.1, дополнительно содержащая смягчающий полимер.
11. Композиция по п.10, в которой смягчающий полимер выбран из группы, состоящей из НРМС, CMC, полиэтиленгликоля и пропиленгликоля.
12. Способ лечения сухости глаз, который включает применение к поверхности глаз композиции, включающей протеазо-ингибирующий пептидный субстрат в растворе в количестве примерно от 0,010% мас./об. до 10% мас./об., где указанный субстрат выбран из группы, состоящей из желатина, овомакроглобулина, коллагена и казеина, и офтальмически приемлемый носитель для него.
RU2010123929/15A 2007-11-16 2008-11-14 Способы и композиции для лечения сухости глаз RU2470662C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US98862307P 2007-11-16 2007-11-16
US60/988,623 2007-11-16
PCT/US2008/083551 WO2009064983A1 (en) 2007-11-16 2008-11-14 Methods and compositions for treating dry eye

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2010123929A RU2010123929A (ru) 2011-12-27
RU2470662C2 true RU2470662C2 (ru) 2012-12-27

Family

ID=40347942

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2010123929/15A RU2470662C2 (ru) 2007-11-16 2008-11-14 Способы и композиции для лечения сухости глаз

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20090131303A1 (ru)
EP (1) EP2207598A1 (ru)
JP (1) JP2011503202A (ru)
KR (1) KR20100087188A (ru)
CN (1) CN101861187A (ru)
AU (1) AU2008322545A1 (ru)
BR (1) BRPI0819331A2 (ru)
CA (1) CA2703814A1 (ru)
RU (1) RU2470662C2 (ru)
TW (1) TW200930383A (ru)
WO (1) WO2009064983A1 (ru)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2620568C1 (ru) * 2016-04-12 2017-05-26 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО СПбГПМУ Минздрава России) Препарат для лечения синдрома "сухого глаза"
RU2632107C2 (ru) * 2013-04-18 2017-10-02 Самджин Фармасьютикал Ко., Лтд. Пероральная фармацевтическая композиция для профилактики или лечения синдрома "сухого глаза", содержащая ребамипид или его предшественник
RU2677190C1 (ru) * 2017-11-28 2019-01-15 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тюменский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Тюменский ГМУ Минздрава России) Способ лечения патологии суммарной слезопродукции у пациентов с ревматоидным артритом
US11202832B2 (en) 2016-03-04 2021-12-21 Johnson & Johnson Consumer Inc. Preservative containing compositions

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1400996B1 (it) * 2010-06-14 2013-07-05 Silvestrini Metodo per il trattamento dell'occhio secco con gelatina somministrata per via orale
US9453833B2 (en) 2011-01-07 2016-09-27 Digital Diagnostics Pty. Ltd. System and method for detecting and monitoring proteolysis of protein matrices
RU2013136826A (ru) * 2011-01-07 2015-02-20 Те Юниверсити Оф Квинсленд Детекция протеолиза
CN103533926A (zh) * 2011-01-24 2014-01-22 安特里奥公司 空纳米颗粒组合物及其用于治疗皮肤病学病症的用途
MX2014006056A (es) * 2011-12-06 2014-08-08 Alcon Res Ltd Composicion de gel de celulosa con una mejor estabilidad de la viscosidad.
AU2014212275B2 (en) 2013-02-01 2018-09-06 Ocuphire Pharma, Inc. Methods and compositions for daily ophthalmic administration of phentolamine to improve visual performance
PT2950648T (pt) 2013-02-01 2020-01-06 Ocuphire Pharma Inc Soluções oftálmicas aquosas de fentolamina e usos médicos
KR101721059B1 (ko) * 2014-12-26 2017-03-30 주식회사 아이바이오코리아 안구 표면 질환 예방 또는 치료용 약학조성물
US10071181B1 (en) 2015-04-17 2018-09-11 Teleflex Innovations S.À.R.L. Resorbable embolization spheres
KR101690539B1 (ko) * 2015-07-30 2016-12-29 주식회사 아이바이오코리아 건성안 예방 또는 치료용 약학조성물
WO2017175963A1 (ko) * 2016-04-08 2017-10-12 주식회사 아이바이오코리아 연골세포 세포외기질 유래 펩타이드
KR101798183B1 (ko) 2016-04-08 2017-11-15 주식회사 아이바이오코리아 건성안 예방 또는 치료용 약학조성물
RU2646804C1 (ru) * 2016-12-28 2018-03-07 федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Казанский (Приволжский) федеральный университет" (ФГАОУ ВО КФУ) Офтальмологическое средство для регенерации роговицы глаза
BR112019024040A2 (pt) * 2017-05-17 2020-09-24 Yuyu Pharma, Inc. peptídeo e composição farmacêutica para tratamen-to de doenças oculares comprendendo o mesmo peptídeo como ingrediente ativo
MX2021004708A (es) 2018-10-26 2021-11-03 Ocuphire Pharma Inc Metodos y composiciones para tratamiento de presbicia, midriasis y otros trastornos oculares.
US11613558B2 (en) 2018-11-14 2023-03-28 Yuyu Pharma, Inc. Peptides and pharmaceutical compositions for treating eye diseases
TWI757773B (zh) 2019-06-28 2022-03-11 瑞士商愛爾康公司 眼用組成物
AU2020347951B2 (en) 2019-09-18 2023-11-02 Alcon Inc. Wet-packed soft hydrogel ocular inserts
US20210196652A1 (en) * 2019-12-27 2021-07-01 Meshaberase, LLC Use of cysteamine and derivatives thereof to treat dysfunctional tear syndrome (dts)
CN115368310A (zh) 2021-05-18 2022-11-22 奥库菲尔医药公司 合成甲磺酸酚妥拉明的方法
CN113713086A (zh) * 2021-08-20 2021-11-30 山西锦波生物医药股份有限公司 一种含有重组iii型人源化胶原蛋白的组合物及其制备方法和用途
WO2023187672A1 (en) * 2022-03-31 2023-10-05 Alcon Inc. Ophthalmic compositions

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4923700A (en) * 1988-06-03 1990-05-08 Kaufman Herbert E Artificial tear suspension
RU2094031C1 (ru) * 1992-04-09 1997-10-27 Малое государственное предприятие "Научно-экспериментальное производство" Способ профилактики новообразованных сосудов роговицы после сквозной и послойной кератопластики
US6444791B1 (en) * 1999-10-27 2002-09-03 K-Quay Enterprises, Llc Methods and compositions for the treatment of keratoconus using protease inhibitors
US20060062777A1 (en) * 1999-07-13 2006-03-23 University Of Southern California Novel method and composition for inhibition of angiogenesis using antagonists based on MMP-9 and beta1 integrins
US7169767B2 (en) * 1997-07-29 2007-01-30 Alcon Manufacturing, Ltd. Ophthalmic compositions containing galactomannan polymers and borate

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4039662A (en) * 1975-12-04 1977-08-02 Alcon Laboratories, Inc. Ophthalmic solution
US4365050A (en) * 1981-07-15 1982-12-21 Ivani Edward J Amino-polysaccharides and copolymers thereof for contact lenses and ophthalmic compositions
US4447562A (en) * 1981-07-15 1984-05-08 Ivani Edward J Amino-polysaccharides and copolymers thereof for contact lenses and ophthalmic compositions
US5112805A (en) * 1985-11-22 1992-05-12 Labsystems, Oy Pharmaceutical preparation for promoting epithelial healing and prevention of epithelial destruction
FI854634A0 (fi) * 1985-11-22 1985-11-22 Labsystems Oy Foerfarande foer bestaemning av proteolytisk aktivitet.
US5188826A (en) * 1988-02-08 1993-02-23 Insite Vision Incorporated Topical ophthalmic suspensions
DE3827561C1 (ru) * 1988-08-13 1989-12-28 Lts Lohmann Therapie-Systeme Gmbh & Co Kg, 5450 Neuwied, De
JPH06256209A (ja) * 1993-03-03 1994-09-13 Fuji Yakuhin Kogyo Kk 眼球及びその周辺部組織の潰瘍に対する予防・治療剤
US5652209A (en) * 1994-04-29 1997-07-29 University Of Miami Use of secretory products of human lacrimal gland acinar epithelia for tear replacement therapy
US5698533A (en) * 1994-07-26 1997-12-16 Kang; Meng-Che Ophthalmic pharmaceutical composition
US5518732A (en) * 1995-02-14 1996-05-21 Chiron Vision, Inc. Bio-erodible ophthalmic shield
US5888493A (en) * 1996-12-05 1999-03-30 Sawaya; Assad S. Ophthalmic aqueous gel formulation and related methods
GB2320431B (en) * 1996-12-20 2000-08-30 Johnson & Johnson Medical Compositions for the treatment of chronic wounds
US5800807A (en) * 1997-01-29 1998-09-01 Bausch & Lomb Incorporated Ophthalmic compositions including glycerin and propylene glycol
PT1676579E (pt) * 1998-05-08 2009-03-24 Univ Miami Utilização de tetraciclinas sub-antimicrobianas para o tratamento de rosácea ocular
US6217896B1 (en) * 1999-04-01 2001-04-17 Uab Research Foundation Conjunctival inserts for topical delivery of medication or lubrication
AU2002232437A1 (en) * 2000-12-20 2002-07-01 Alcon Universal Ltd. Ophthalmic lubricating solution adapted for use in lasik surgery
US20030215471A1 (en) * 2001-01-31 2003-11-20 Wilmott James M. Surfactant free topical compositions and method for rapid preparation thereof
US20030223957A1 (en) * 2002-04-10 2003-12-04 Schwartz Daniel M. Biodegradable PEG based polymer formulations in ocular applications
EP1720555A1 (en) * 2004-02-26 2006-11-15 Advanced Ocular Systems Limited Tetracycline derivatives for the treatment of ocular pathologies
US20060074108A1 (en) * 2004-10-04 2006-04-06 Bioderm Research Matrix metalloprotease (MMP) inhibitors and their application in cosmetic and pharmaceutical composition
AU2006270041B2 (en) * 2005-07-18 2011-08-18 Minu, Llc Enhanced ocular neuroprotection/neurostimulation
CN100381169C (zh) * 2005-09-08 2008-04-16 佟刚 复合胶原蛋白滴眼液
AR062046A1 (es) * 2006-07-25 2008-08-10 Osmotica Pharmaceutical Argentina S A Soluciones oftalmicas

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4923700A (en) * 1988-06-03 1990-05-08 Kaufman Herbert E Artificial tear suspension
RU2094031C1 (ru) * 1992-04-09 1997-10-27 Малое государственное предприятие "Научно-экспериментальное производство" Способ профилактики новообразованных сосудов роговицы после сквозной и послойной кератопластики
US7169767B2 (en) * 1997-07-29 2007-01-30 Alcon Manufacturing, Ltd. Ophthalmic compositions containing galactomannan polymers and borate
US20060062777A1 (en) * 1999-07-13 2006-03-23 University Of Southern California Novel method and composition for inhibition of angiogenesis using antagonists based on MMP-9 and beta1 integrins
US6444791B1 (en) * 1999-10-27 2002-09-03 K-Quay Enterprises, Llc Methods and compositions for the treatment of keratoconus using protease inhibitors

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PFLUGFELDER SC at al. Matrix metalloproteinase-9 knockout confers resistance to corneal epithelial barrier disruption in experimental dry eye. Am.J.Pathol. 2005 Jan; 166(1):61-71. PMID:15632000. *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2632107C2 (ru) * 2013-04-18 2017-10-02 Самджин Фармасьютикал Ко., Лтд. Пероральная фармацевтическая композиция для профилактики или лечения синдрома "сухого глаза", содержащая ребамипид или его предшественник
US11202832B2 (en) 2016-03-04 2021-12-21 Johnson & Johnson Consumer Inc. Preservative containing compositions
RU2620568C1 (ru) * 2016-04-12 2017-05-26 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО СПбГПМУ Минздрава России) Препарат для лечения синдрома "сухого глаза"
RU2677190C1 (ru) * 2017-11-28 2019-01-15 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тюменский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Тюменский ГМУ Минздрава России) Способ лечения патологии суммарной слезопродукции у пациентов с ревматоидным артритом

Also Published As

Publication number Publication date
AU2008322545A1 (en) 2009-05-22
US20090131303A1 (en) 2009-05-21
KR20100087188A (ko) 2010-08-03
TW200930383A (en) 2009-07-16
CN101861187A (zh) 2010-10-13
BRPI0819331A2 (pt) 2015-05-12
JP2011503202A (ja) 2011-01-27
RU2010123929A (ru) 2011-12-27
CA2703814A1 (en) 2009-05-22
WO2009064983A1 (en) 2009-05-22
EP2207598A1 (en) 2010-07-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2470662C2 (ru) Способы и композиции для лечения сухости глаз
CA2627215C (en) Ophthalmic pharmaceutical compositions comprising amino acids and sodium hyaluronate
US20080139458A1 (en) Methods of Treatment For Injured or Diseased Joints
ES2551120T3 (es) Preparaciones antimicrobianas sinérgicas que contienen peróxido de clorito y de hidrógeno
JP2011503202A5 (ru)
US20210315805A1 (en) Ketorolac compositions for corneal wound healing
US20080213188A1 (en) Novel ophthalmic compositions containing human recombinant lysozyme and use thereof for treating eye conditions and as contact lens solutions
BR112017006939B1 (pt) Composições e kits para o desbridamento de enzima e métodos de utilização dos mesmos
WO2009068926A1 (en) Use of urokinase type plasminogen activator inhibitors for the treatment of corneal disorders
JP2015091887A (ja) シリコーンハイドロゲルコンタクトレンズ用点眼剤
US20150297687A1 (en) Protease compositions for the treatment of damaged tissue
JP2006052160A (ja) ドライアイ治療用眼科組成物
US20190151352A1 (en) Ophthalmic composition comprising a synergistic combination of glycogen and hyaluronic acid or a salt thereof
Borage et al. Study on the efficacy of Jalaukavacharana (Leech therapy) in Puyalasa with special reference to Acute
TR2021015778A2 (tr) Multi̇fonksi̇yonlu ekonomi̇k kontakt lens temi̇zleme solüsyonu ve üreti̇m yöntemi̇

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20141115