RU2435782C2 - Hla-a*3303-рестриктированный пептид wt1 и содержащая его фармацевтическая композиция - Google Patents
Hla-a*3303-рестриктированный пептид wt1 и содержащая его фармацевтическая композиция Download PDFInfo
- Publication number
- RU2435782C2 RU2435782C2 RU2008137635/10A RU2008137635A RU2435782C2 RU 2435782 C2 RU2435782 C2 RU 2435782C2 RU 2008137635/10 A RU2008137635/10 A RU 2008137635/10A RU 2008137635 A RU2008137635 A RU 2008137635A RU 2435782 C2 RU2435782 C2 RU 2435782C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- peptide
- hla
- cells
- cancer
- present
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 121
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title description 28
- 108700020467 WT1 Proteins 0.000 claims abstract description 169
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims abstract description 30
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims abstract description 15
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims abstract description 10
- 101000621309 Homo sapiens Wilms tumor protein Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 102100022748 Wilms tumor protein Human genes 0.000 claims abstract 4
- 102100028972 HLA class I histocompatibility antigen, A alpha chain Human genes 0.000 claims description 84
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 claims description 84
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims description 29
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 23
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 23
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 23
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 20
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 12
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 9
- JLWZLIQRYCTYBD-IHRRRGAJSA-N Leu-Lys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O JLWZLIQRYCTYBD-IHRRRGAJSA-N 0.000 claims description 8
- VAIZFHMTBFYJIA-ACZMJKKPSA-N Ser-Asp-Gln Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O VAIZFHMTBFYJIA-ACZMJKKPSA-N 0.000 claims description 8
- LIEIYPBMQJLASB-SRVKXCTJSA-N His-Gln-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 LIEIYPBMQJLASB-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 abstract description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 36
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 108010026122 HLA-A*33 antigen Proteins 0.000 abstract 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 abstract 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 abstract 1
- 101150084041 WT1 gene Proteins 0.000 description 184
- 102000040856 WT1 Human genes 0.000 description 167
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 70
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 43
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 33
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 20
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 15
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 15
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 9
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 8
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 7
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 6
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 6
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 5
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 5
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 5
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 5
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 4
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 4
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 4
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 4
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 4
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 4
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 4
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- FHKZHRMERJUXRJ-DCAQKATOSA-N His-Ser-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 FHKZHRMERJUXRJ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 2
- AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N Leu-Gln-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- ADJWHHZETYAAAX-SRVKXCTJSA-N Leu-Ser-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N ADJWHHZETYAAAX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- LECIJRIRMVOFMH-ULQDDVLXSA-N Lys-Pro-Phe Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 LECIJRIRMVOFMH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- WEDZFLRYSIDIRX-IHRRRGAJSA-N Phe-Ser-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 WEDZFLRYSIDIRX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- BLPYXIXXCFVIIF-FXQIFTODSA-N Ser-Cys-Arg Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CO)N)CN=C(N)N BLPYXIXXCFVIIF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- XHWCDRUPDNSDAZ-XKBZYTNZSA-N Thr-Ser-Glu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N)O XHWCDRUPDNSDAZ-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000002308 embryonic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 2
- 108010027345 wheylin-1 peptide Proteins 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 102000025850 HLA-A2 Antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010074032 HLA-A2 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 1
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101100103014 Homo sapiens WT1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101800000324 Immunoglobulin A1 protease translocator Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000006819 RNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 102000001742 Tumor Suppressor Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010040002 Tumor Suppressor Proteins Proteins 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000009640 blood culture Methods 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 208000019691 hematopoietic and lymphoid cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 description 1
- 102000046004 human WT1 Human genes 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000026938 proteasomal ubiquitin-dependent protein catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/26—Lymph; Lymph nodes; Thymus; Spleen; Splenocytes; Thymocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464452—Transcription factors, e.g. SOX or c-MYC
- A61K39/464453—Wilms tumor 1 [WT1]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4748—Tumour specific antigens; Tumour rejection antigen precursors [TRAP], e.g. MAGE
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
- G01N33/5047—Cells of the immune system
- G01N33/505—Cells of the immune system involving T-cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
Abstract
Изобретение относится к области биохимии и иммунологии и может быть применено в медико-биологической промышленности при производстве препаратов для профилактики и лечения раковых заболеваний. Получен новый пептид, обладающий способностью избирательно связываться с молекулой HLA-A*3303, который представляет собой фрагмент транскрипционного фактора WT-1 и характеризуется аминокислотной последовательностью Ser-Asp-Gln-Leu-Lys-Arg-His-Gln-Arg. В изобретении раскрыты средства для получения данного пептида методом рекомбинантных ДНК и предложено его использование в качестве основного компонента в процессе индукции WT1 - специфичных цитотоксических лимфоцитов. 4 н.п. ф-лы, 8 ил., 1 табл.
Description
Область техники
Настоящее изобретение относится к HLA-A*3303-рестриктированному пептиду, особенно к пептиду, содержащему аминокислотную последовательность, состоящую из 9 последовательных аминокислот из белка WT1, в котором аминокислота в положении 2 аминокислотной последовательности выбрана из группы, состоящей из Ala, Ile, Leu, Val, Phe, Tyr, Ser и Asp, а аминокислота в положении 9 представляет собой Arg. Кроме того, настоящее изобретение относится к кодирующему пептид полинуклеотиду, содержащей его фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака и т.п.
Предпосылки изобретения
Ген WT1 (ген 1 опухоли Вилма) был идентифицирован как ген, ответственный за возникновение опухоли Вилма, которая представляет собой рак почек у детей (непатентные документы 1 и 2). WT1 представляет собой транскрипционный фактор, имеющий структуру цинковых пальцев. Вначале ген WT1 считали опухолевым супрессором. Однако дальнейшие исследования (непатентные документы 3, 4, 5 и 6) показали, что ген WT1 скорее действует как онкоген в опухолях гематопоэтической системы и солидном раке.
Ген WT1 экспрессируется на высоком уровне в многих типах злокачественных опухолей. Было проверено, действительно ли свободный от мутаций продукт гена WT1, который является аутологичным белком, обладает иммуногенностью в организме. В результате было выяснено, что белок, получаемый в результате экспрессии гена WT1, который экспрессируется на высоком уровне в опухолевых клетках, является фрагментированным в результате внутриклеточного процессинга; полученные пептиды образуют комплексы с молекулами МНС класса I, и эти комплексы представлены на поверхности клеток; а вакцинацией пептидом можно индуцировать цитотоксические лимфоциты, узнающие такие комплексы (непатентные документы 7, 8 и 9). Также было показано, что у мышей, иммунизированных пептидом WT1 или кДНК WT1, с высокой вероятностью происходило отторжение пересаженных опухолевых клеток, экспрессирующих ген WT1 (непатентные документы 7 и 10), в то время как нормальные ткани, в которых ген WT1 экспрессируется на физиологическом уровне, не лизируются индуцированными цитотоксическими лимфоцитами (непатентный документ 7). В экспериментах на клетках человека in vitro было показано, что когда пептиды Db126 или WH187 (аминокислоты 187-195 из SEQ ID No: 1, SLGEQQYSV), обладающие высокой способностью связывать молекулу HLA-A*0201, которая является молекулой, принадлежащей к МНС класса I, используются для стимуляции периферических мононуклеарных клеток крови человека, имеющих HLA-A*0201, то происходит индукция цитотоксических лимфоцитов, специфичных к WT1; при этом они обладают цитотоксической активностью, специфичной к опухолевым клеткам, экспрессирующим высокий уровень эндогенного WT1, и цитотоксическая активность таких лимфоцитов рестриктирована HLA-A2 (непатентный документ 11). В экспериментах на клетках человека in vitro с использованием пептида WT1, который соответствует HLA-A*2402 (наиболее часто встречаемая HLA-A аллель у жителей Японии) (WT1235; аминокислоты 235-243 из SEQ ID No: 1, CMTWNQMNL), была продемонстрирована индукция специфичных к WT1 цитотоксических лимфоцитов (ТАК-1) (непатентный документ 12) и было показано, что индуцированные цитотоксические лимфоциты не подавляют колониеобразующую активность нормальных гематопоэтических стволовых клеток, которые физиологически частично экспрессируют ген WT1 (непатентные документы 13 и 14). Эти данные подтверждают гипотезу о том, что не только у мышей, но также и у человека можно индуцировать специфичные к WT1 цитотоксические лимфоциты, причем такие лимфоциты обладают цитотоксической активностью против раковых клеток, экспрессирующих ген WT1 на высоком уровне, но не обладают цитотоксической активностью против нормальных клеток, физиологически экспрессирующих ген WT1 (непатентные документы 7, 10, 11, 12, 13 и 14).
Продукт гена WT1 присутствует в клетке в виде ядерного белка, а в цитоплазме он подвергается протеасомальному процессингу до пептидов. Фрагментированные пептиды транспортируются в просвет эндоплазматического ретикулума молекулами ТАР (транспортер, ассоциированный с процессингом антигенов), образуют комплексы с МНС класса I и экспонируются на поверхности клеток. Цитотоксические лимфоциты (ЦТЛ), специфичные к WT1, индуцируются в результате узнавания TCR на клетках-предшественниках ЦТЛ молекулярных комплексов МНС класса I c пептидом WT1, таким образом оказывая цитотоксическое действие на раковые клетки, на которых молекулами МНС класса I представлен продукт гена WT1 (непатентные документы 7, 8 и 9). Поэтому, если пептид WT1 используется в иммунотерапии рака, мишенью которого является продукт гена WT1, то необходимо, чтобы он связывался с молекулой МНС класса I в организме. Однако диапазон молекул МНС класса I широк, аминокислотные последовательности пептидов WT1, связывающихся с соответствующими молекулами МНС класса I, отличаются друг от друга. Следовательно, необходимо обеспечить соответствие пептидов каждому подтипу МНС класса I. Однако на сегодняшний день в качестве пептидов WT1, связывающихся с молекулами HLA, известны только HLA-A*2402-, HLA-A*0201- и HLA-A*2601-рестриктированные пептиды (патентный документ 1, непатентный документ 11 и патентный документ 2 соответственно). Молекула HLA-A*3303 является второй по распространенности после HLA-A*2402 среди жителей Японии. Таким образом, необходимо найти HLA-A*3303-рестриктированный пептид WT1.
Патентный документ 1: WO 2003/106682
Патентный документ 2: WO 2005/095598
Непатентный документ 1: Daniel A. Haber et al., Cell. 1990 Jun 29; 61(7): 1257-69.
Непатентный документ 2: Call KM et al., Cell. 1990 Feb 9; 60(3): 509-20.
Непатентный документ 3: Menke AL et al., Int Rev Cytol. 1998; 181: 151-212. Review.
Непатентный документ 4: Yamagami T et al., Blood. 1996 Apr 1; 87(7): 2878-84.
Непатентный документ 5: Inoue K et al., Blood. 1998 Apr 15; 91(8): 2969-76.
Непатентный документ 6: Tsuboi A et al., Leuk Res. 1999 May; 23(5): 499-505.
Непатентный документ 7: Oka Y et al., J Immunol. 2000 Feb 15; 164(4): 1873-80.
Непатентный документ 8: Melief CJ et al., Immunol Rev. 1995 Jun; 145: 167-77.
Непатентный документ 9: Ritz J, J Clin Oncol. 1994 Feb; 12(2): 237-8.
Непатентный документ 10: Tsuboi A et al., J Clin Immunol. 2000 May; 20(3): 195-202.
Непатентный документ 11: Oka Y et al., Immunogenetics. 2000 Feb; 51(2): 99-107.
Непатентный документ 12: Ohminami H et al., Blood. 2000 Jan 1; 95(1): 286-93.
Непатентный документ 13: Gao L et al., Blood. 2000 Apr 1; 95(7): 2198-203.
Непатентный документ 14: Ohminami H et al., Blood. 2000 Jan 1; 95(1): 286-93.
Описание изобретения
Проблемы, которые должно разрешить изобретение
Проблемами, которые должно разрешить изобретение, являются предоставление HLA-A*3303-рестриктированного пептида WT1 и кодирующего его полинуклеотида, а также содержащей его фармацевтической композиции для лечения/профилактики рака и т.п.
Средства решения проблем
В результате интенсивных исследований вышеописанной проблемы авторы изобретения обнаружили, что пептид, содержащий аминокислотную последовательность, состоящую из 9 последовательных аминокислот из белка WT1, в котором аминокислота в положении 2 аминокислотной последовательности выбрана из группы, состоящей из Ala, Ile, Leu, Val, Phe, Tyr, Ser и Asp, а аминокислота в положении 9 аминокислотной последовательности представляет собой Arg, может индуцировать высокий процент WT1-специфичных ЦТЛ. Тем самым настоящее изобретение было выполнено.
Настоящее изобретение относится к:
(1) пептиду, содержащему аминокислотную последовательность, состоящую из 9 последовательных аминокислот из белка WT1, в котором аминокислота в положении 2 аминокислотной последовательности выбрана из группы, состоящей из Ala, Ile, Leu, Val, Phe, Tyr, Ser и Asp, а аминокислота в положении 9 аминокислотной последовательности представляет собой Arg:
(2) пептиду по п. (1), в котором аминокислотная последовательность выбрана из группы, состоящей из:
Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg (SEQ ID No: 2),
Phe Ser Arg Ser Asp Gln Leu Lys Arg (SEQ ID No: 3),
Ser Asp Gln Leu Lys Arg His Gln Arg (SEQ ID No: 4) и
Thr Ser Glu Lys Pro Phe Ser Cys Arg (SEQ ID No: 5);
(3) пептиду по п. (2), в котором аминокислотная последовательность представляет собой Ser Asp Gln Leu Lys Arg His Gln Arg (SEQ ID No: 4);
(4) фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака, содержащей пептид по п. (1);
(5) способу лечения или профилактики рака, включающему в себя введение эффективного количества фармацевтической композиции по п. (4) субъекту, несущему аллель HLA-A*3303;
(6) применению пептида по п.(1) для изготовления фармацевтической композиции по п.(4);
(7) полинуклеотиду, кодирующему пептид по п.(1);
(8) экспрессионному вектору, содержащему полинуклеотид по п.(7);
(9) фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака, содержащей полинуклеотид по п.(7) или вектор по п.(8);
(10) способу лечения или профилактики рака, включающему в себя введение эффективного количества фармацевтической композиции по п.(9) субъекту, несущему аллель HLA-A*3303;
(11) применению полинуклеотида по п.(7) или вектора по п.(8) для изготовления фармацевтической композиции по п.(9);
(12) WT1-специфичным ЦТЛ, индуцируемым пептидом по п.(1);
(13) способу индукции WT1-специфичных ЦТЛ, включающему в себя культивирование мононуклеарных клеток периферической крови в присутствии пептида по п.(1) для индукции WT1-специфичных ЦТЛ из мононуклеарных клеток периферической крови;
(14) набору для индукции WT1-специфичных ЦТЛ, содержащему пептид по п.(1) в качестве основного компонента;
(15) антиген-представляющим клеткам, представляющим пептид WT1, который индуцируется пептидом по п.(1);
(16) способу индукции антиген-представляющих клеток, представляющих пептид WT1, включающий в себя культивирование незрелых антиген-представляющих клеток в присутствии пептида по п.(1) для индукции антиген-представляющих клеток, представляющих пептид WT1, из незрелых антиген-представляющих клеток;
(17) набору для индукции антиген-представляющих клеток, представляющих пептид WT1, содержащему пептид по п.(1) в качестве основного компонента;
(18) способу диагностики рака, включающему в себя применение ЦТЛ по п.(12) или антиген-представляющих клеток по п.(15);
(19) способу определения присутствия или количества WT1-специфичных ЦТЛ у субъекта, несущего аллель HLA-A*3303, включающему в себя:
(а) реакцию комплекса пептида WT1 и молекулы HLA-A*3303 с образцом, забранным у субъекта; и
(б) определение присутствия или количества ЦТЛ, распознающих комплекс, содержащийся в образце; и
(20) способу по п.(19), где комплекс находится в виде тетрамера.
Результаты изобретения
Настоящее изобретение относится к HLA-A*3303-рестриктированному пептиду WT1 и кодирующему его полинуклеотиду, а также к содержащей его фармацевтический композиции для лечения или профилактики рака и т.п. Таким образом, у субъектов, несущих аллель HLA-A*3303, возможна индукция WT1-специфичных ЦТЛ in vivo и in vitro. Поскольку у 24% жителей Японии присутствует, по крайней мере, одна молекула HLA-A*3303, то WT1-специфичные ЦТЛ можно индуцировать у широкого круга субъектов.
Краткое описание чертежей
На фиг.1 представлена цитотоксическая активность ЦТЛ, индуцированных WT1337.
На фиг.2 представлена цитотоксическая активность ЦТЛ, индуцированных WT1364.
На фиг.3 представлена цитотоксическая активность ЦТЛ, индуцированных WT1367.
На фиг.4 представлена цитотоксическая активность ЦТЛ, индуцированных WT1409.
На фиг.5 представлена цитотоксическая активность ЦТЛ, индуцированных WT1364, против клетки, эндогенно экспрессирующей ген WT1.
На фиг.6 представлена цитотоксическая активность ЦТЛ, индуцированных WT1367, против клетки, эндогенно экспрессирующей ген WT1.
На фиг.7 представлена цитотоксическая активность ЦТЛ, индуцированных WT1409, против клетки, эндогенно экспрессирующей ген WT1.
На фиг.8 представлена цитотоксическая активность ЦТЛ, индуцированных WT1367, против клетки, экспрессирующей ген WT1.
Наилучший вариант осуществления изобретения
Аминокислотная последовательность белка WT1 человека приведена в SEQ ID No: 1. Ген WT1 экспрессируется на высоком уровне в своей нативной форме, например, в гематопоэтических опухолях, таких как лейкемия, миелодиспластический синдром, множественная миелома или злокачественная лимфома, и солидных раковых заболеваниях, таких как рак желудка, рак толстой кишки, рак легких, рак молочной железы, рак эмбриональных клеток, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак простаты, рак матки, рак шейки матки или рак яичников. Кроме того, якорный мотив для HLA-A*3303 отличается тем, что аминокислотой в положении 2 является любая из Ala, Ile, Leu, Val, Phe, Tyr, Ser и Asp, а аминокислотой в положении 9 является Arg. Таким образом, в одном аспекте настоящее изобретение относится к HLA-A*3303-рестриктированному пептиду WT1, содержащему аминокислотную последовательность, состоящую из 9 последовательных аминокислот из белка WT1, в котором аминокислота в положении 2 аминокислотной последовательности, предпочтительно, выбрана из группы, состоящей из Ala, Ile, Leu, Val, Phe, Tyr, Ser и Asp, а аминокислота в положении 9 аминокислотной последовательности предпочтительно является Arg (здесь и далее именуется как пептид WT1).
Состоящая из 9 аминокислот аминокислотная последовательность, содержащаяся в пептиде по настоящему изобретению, представляет собой, предпочтительно, Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg (SEQ ID No: 2), Phe Ser Arg Ser Asp Gln Leu Lys Arg (SEQ ID No: 3), Ser Asp Gln Leu Lys Arg His Gln Arg (SEQ ID No: 4) или Thr Ser Glu Lys Pro Phe Ser Cys Arg (SEQ ID No: 5). Наиболее предпочтительной является Ser Asp Gln Leu Lys Arg His Gln Arg (SEQ ID No: 4). Кроме того, она может иметь от одной до нескольких, предпочтительно от одной до пяти аминокислот, замещенных другими аминокислотами, в 9 аминокислотах любой из последовательностей с SEQ ID No: 2-5. Любая из 9 аминокислот или других замещенных аминокислот может быть модифицирована соответствующим образом. В любых случаях пептид по настоящему изобретению сохраняет способность связывать молекулу HLA-A*3303.
Как описано выше, целью настоящего изобретения является получение HLA-A*3303-рестриктированного пептида WT1. Следовательно, пептидом по настоящему изобретению может являться любой до тех пор, пока он содержит аминокислотную последовательность, полученную из белка WT1, и состоит из 9 последовательных аминокислот. Следовательно, пептидом по настоящему изобретению может являться, например, пептид, состоящий из только аминокислотной последовательности, приведенной в любой из SEQ ID No: 2-5, или белок WT1, или его часть, включающие в себя аминокислотную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID No: 2-5. На N-конец и/или С-конец аминокислотной последовательности, состоящей из 9 последовательных аминокислот, в пептиде по настоящему изобретению можно присоединить различные вещества. Например, можно присоединить аминокислоту, пептид или их аналог. Если такие вещества присоединены к пептиду по настоящему изобретению, они могут процессироваться, например, ферментом в организме или в результате внутриклеточного процессинга, и в конце может получаться аминокислотная последовательность, состоящая из 9 последовательных аминокислот и представленная на поверхности клетки в виде комплекса с молекулой HLA-A*3303, тем самым давая в результате эффект индукции ЦТЛ. Эти вещества могут представлять собой вещества, модулирующие растворимость пептидов по настоящему изобретению или увеличивающие их стабильность (резистентность к протеолитической деградации и т.д.) В качестве альтернативы, эти вещества могут являться веществами, доставляющими пептиды по настоящему изобретению в определенную область, например к данным ткани или органу, или они могут увеличивать эффективность поглощения антиген-представляющей клеткой и т.п. Эти вещества могут являться веществами, увеличивающими способность индуцировать ЦТЛ, такими как хелперные пептиды и т.п.
Пептид по настоящему изобретению можно синтезировать при помощи методов, обычно используемых в данной области, или при помощи их модификаций. Такие методы описаны, например, в Peptide Synthesis, Interscience, New York, 1966; The Proteins, Vol 2, Academic Press Inc., New York, 1976; Peptide-Gosei, Maruzen Co., Ltd., 1975; Peptide-Gosei No Kiso To Jikken, Maruzen Co., Ltd., 1985; и Iyakuhin No Kaihatsu (Zoku), Vol.14, Peptide-Gosei, Hirokawa - Book store, 1991.
Пептид по настоящему изобретению можно также получить, используя методы генной инженерии, на основе информации о нуклеотидной последовательности, кодирующей пептид по настоящему изобретению. Такие генно-инженерные методы хорошо известны специалисту в данной области.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака, содержащей HLA-A*3303-рестриктированный пептид WT1. Ген WT1 экспрессируется на высоком уровне в гематопоэтических опухолях, таких как лейкемия, миелодиспластический синдром, множественная миелома или злокачественная лимфома, и солидных раковых заболеваниях, таких как рак желудка, рак толстой кишки, рак легких, рак молочной железы, рак эмбриональных клеток, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак простаты, рак матки, рак шейки матки или рак яичников. Следовательно, фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно применять для лечения или профилактики рака. При введении фармацевтической композиции по настоящему изобретению субъекту, несущему аллель HLA-A*3303, WT1-специфичные ЦТЛ индуцируются HLA-A*3303-рестриктированным пептидом WT1, содержащимся в фармацевтической композиции, и такие ЦТЛ лизируют раковые клетки у субъекта.
В дополнение к HLA-A*3303-рестриктированному пептиду WT1 в качестве действующего ингредиента фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может содержать, например, носитель, вспомогательное вещество и т.п. HLA-A*3303-рестриктированный пептид WT1, содержащийся в фармацевтической композиции по настоящему изобретению, индуцирует WT1-специфичные ЦТЛ. Поэтому фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может содержать соответствующий адъювант или ее можно вводить вместе с соответствующим адъювантом для усиления эффективности индукции. Примеры предпочтительных адъювантов включают, но не ограничены этим, полный или неполный адъювант Фрейнда и гидроксид алюминия.
Способ введения фармацевтической композиции по настоящему изобретению можно соответствующим образом выбрать в зависимости от условий, таких как тип заболевания, состояние субъекта или местоположение мишени. Примеры таких способов включают, но не ограничены этим, внутрикожное введение, подкожное введение, внутримышечное введение, внутривенное введение, назальное введение и пероральное введение. Количество пептида, содержащегося в фармацевтической композиции по настоящему изобретению, а также лекарственная форма, число введений и т.п. для фармацевтической композиции по изобретению можно выбрать соответствующим образом в зависимости от условий, таких как тип заболевания, состояние субъекта или местоположение мишени. Одиночная доза пептида обычно составляет 0,0001 мг-1000 мг, предпочтительно 0,001 мг-10000 мг.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения или профилактики рака, включающему в себя введение эффективного количества фармацевтической композиции субъекту, несущему аллель HLA-A*3303. При лечении или профилактике рака раковое заболевание может быть любым, его примеры включают гематопоэтические опухоли, такие как лейкемия, миелодиспластический синдром, множественная миелома или злокачественная лимфома, и солидные злокачественные опухоли, такие как рак желудка, рак толстой кишки, рак легких, рак молочной железы, рак эмбриональных клеток, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак простаты, рак матки, рак шейки матки или рак яичников.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению HLA-A*3303-рестриктированного пептида WT1 для изготовления фармацевтической композиции.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к способу определения присутствия или количества WT1-специфичных ЦТЛ у субъекта, несущего аллель HLA-A*3303, включающему в себя:
(а) реакцию комплекса пептида WT1 и молекулы HLA-A*3303 с образцом, забранным у субъекта; и
(б) определение присутствия или количества ЦТЛ, распознающих комплекс, содержащийся в образце. Образом, забранным у субъекта, может быть любой, если есть вероятность, что он содержит лимфоцит. Примеры образцов включают жидкости организма, такие как кровь, или лимфа, или ткань. Комплекс пептида WT1 и молекулы HLA-A*3303 можно получить в виде, например, тетрамера или пентамера, используя методы, известные специалисту в данной области, такие как биотин-стрептавидиновый метод. Присутствие или количество ЦТЛ, распознающих такой комплекс, можно измерить методом, известным специалисту в данной области. В этом аспекте настоящего изобретения комплекс может иметь метку. В качестве метки можно использовать известные метки, такие как флуоресцентные или радиоактивные метки. Мечение делает определение присутствия или количества ЦТЛ легким и быстрым. Способ по этому аспекту настоящего изобретения можно использовать в диагностике рака, его прогнозировании или в аналогичных целях.
Таким образом, настоящее изобретение также касается композиции для определения присутствия или количества WT1-специфичных ЦТЛ у субъекта, несущего аллель HLA-A*3303, содержащей комплекс пептида WT1 и молекулы HLA-A*3303.
Кроме того, настоящее изобретение относится к набору для определения присутствия или количества WT1-специфичных ЦТЛ у субъекта, несущего аллель HLA-A*3303, содержащему комплекс пептида WT1 и молекулы HLA-A*3303.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к способу получения WT1-специфичных ЦТЛ с использованием комплекса пептида WT1 и молекулы HLA-A*3303, включающему в себя:
(а) реакцию комплекса с образцом; и
(б) получение ЦТЛ, распознающих комплекс, содержащийся в образце. Комплекс пептида WT1 и молекулы HLA-A*3303 описан выше. Образцом, забранным у субъекта, может быть любой, если есть вероятность, что он содержит лимфоцит. Примеры образцов включают образцы, забранные у субъекта, такие как кровь, или клеточная культура. Распознающие комплекс ЦТЛ можно получить, используя способ, известный специалисту, такой как проточная цитофлуориметрия или разделение на магнитных частицах. Настоящее изобретение дает возможность культивировать полученные WT1-специфичные ЦТЛ и использовать их для лечения или профилактики различных раковых заболеваний.
Таким образом, настоящее изобретение также относится к WT1-специфичным ЦТЛ, которые можно получить способом получения WT1-специфичных ЦТЛ с использованием комплекса пептида WT1 и молекулы HLA-A*3303.
Кроме того, настоящее изобретение относится к набору для получения WT1-специфичных ЦТЛ, содержащему комплекс пептида WT1 и молекулы HLA-A*3303.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к полинуклеотиду, кодирующему HLA-A*3303-рестриктированный пептид WT1 (здесь и далее именуемый как полинуклеотид WT1). Полинуклеотидом по настоящему изобретению может являться ДНК или РНК. Последовательность оснований полинуклеотида настоящего изобретения можно определить на основе аминокислотной последовательности HLA-A*3303-рестриктированного пептида WT1. Полинуклеотид можно получить, например, методом синтеза ДНК или РНК, ПЦР-методом или аналогичными методами.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к экспрессионному вектору, содержащему полинуклеотид (здесь и далее именуемый как экспрессионный вектор WT1). Тип экспрессионного вектора, его последовательность, отличную от последовательности полинуклеотида, и т.п. можно соответственно выбрать в зависимости от типа хозяина, в который встраивается экспрессионный вектор по настоящему изобретению, цели применения или аналогичных факторов. Возможно лечение или профилактика возникновения гематопоэтических опухолей или солидных раковых заболеваний путем введения субъекту, несущему аллель HLA-A*3303, экспрессионного вектора по настоящему изобретению, чтобы в организме этого субъекта получить пептид WT1 и индуцировать WT1-специфичные ЦТЛ и таким образом лизировать клетки гематопоэтических опухолей или солидных раковых заболеваний у субъекта.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака, содержащей полинуклеотиды WT1 или вектор, экспрессирующий WT1. Композиция, способ введения и другие параметры фармацевтической композиции по настоящему изобретению в этом аспекте описаны выше.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения или профилактики рака, включающему в себя введение субъекту, несущему аллель HLA-A*3303, эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей пептид WT1, или вектор, экспрессирующий WT1. Примеры раковых заболеваний, которые можно лечить или предотвратить подобным образом, включают гематопоэтические опухоли, такие как лейкемия, миелодиспластический синдром, множественная миелома или злокачественная лимфома, и солидные раковые заболевания, такие как рак желудка, рак толстой кишки, рак легких, рак молочной железы, рак эмбриональных клеток, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак простаты, рак матки, рак шейки матки или рак яичников.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению полинуклеотида WT1 или вектора, экспрессирующего WT1, для изготовления фармацевтической композиции, содержащей полинуклеотид WT1 или вектор, экспрессирующий WT1.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к клетке, содержащей экспрессионный вектор. Клетку по настоящему изобретению можно получить, например, трансформацией клетки-хозяина, такой как клетка E.coli, дрожжей, насекомых или животного. Способ для введения экспрессионного вектора в клетку-хозяина можно соответственно выбрать из различных способов. Пептид по настоящему изобретению можно получить культивированием трансформированных клеток и выделением или очисткой полученного пептида WT1.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к WT1-специфичным ЦТЛ, которые индуцируются HLA-A*3303-рестриктированным пептидом. ЦТЛ по настоящему изобретению распознают комплекс пептида WT1 и молекулы HLA-A*3303. Таким образом, ЦТЛ по настоящему изобретению можно применять для специфического лизиса опухолевых клеток, несущих молекулы HLA-A*3303 на поверхности и экспрессирующих WT1 на высоком уровне.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения или профилактики рака, включающему введение WT1-специфичных ЦТЛ субъекту, несущему аллель HLA-A*3303. Способ введения WT1-специфичных ЦТЛ можно выбрать соответствующим образом в зависимости от условий, таких как тип заболевания, состояние субъекта и местоположение мишени. Примеры таких способов включают, но не ограничены этим, внутривенное введение, внутрикожное введение, подкожное введение, внутримышечное введение, назальное введение и пероральное введение.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу индукции WT1-специфичных ЦТЛ, включающему в себя культивирование мононуклеарных клеток периферической крови в присутствии HLA-A*3303-рестриктированного пептида WT1 для индукции WT1-специфичных ЦТЛ из мононуклеарных клеток периферической крови. Субъект, от которого получают мононуклеарные клетки периферической крови, может являться любым индивидуумом, если он имеет аллель HLA-A*3303. При культивировании мононуклеарных клеток периферической крови в присутствии HLA-A*3303-рестриктированного пептида WT1 индуцируются WT1-специфичные ЦТЛ из клеток предшественников ЦТЛ, входящих в мононуклеарные клетки периферической крови. Возможно проводить лечение или предотвратить возникновение гематопоэтических опухолей или солидных раковых заболеваний у субъекта, несущего аллель HLA-A*3303, путем введения субъекту WT1-специфичных ЦТЛ, полученных по настоящему изобретению.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к набору для индукции WT1-специфичных ЦТЛ, содержащему HLA-A*3303-рестриктированный пептид WT1 в качестве основного компонента. Предпочтительно, чтобы набор использовался в способе для индукции WT1-специфичных ЦТЛ. Набор по настоящему изобретению может содержать в дополнение к HLA-A*3303-рестриктированному пептиду WT1, например, средства получения мононуклеарных клеток периферической крови, адъювант, реакционные пробирки или аналогичные предметы. Обычно к набору прилагают руководство по использованию. Индукция WT1-специфичных ЦТЛ эффективно осуществляется с использованием набора по настоящему изобретению.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к антиген-представляющей клетке (такой, как дендритная клетка), представляющей пептид WT1 на молекуле HLA-A*3303, которая индуцируется HLA-A*3303-рестриктированным пептидом WT1. Индукция WT1-специфичных ЦТЛ эффективно осуществляется с использованием антиген-представляющей клетки по настоящему изобретению.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения или профилактики рака, включающему введение субъекту, несущему аллель HLA-A*3303, антиген-представляющей клетки, представляющей пептид WT1 на молекуле HLA-A*3303. Способ введения антиген-представляющих клеток можно выбрать соответствующим образом в зависимости от условий, таких как тип заболевания, состояние субъекта и местоположение мишени. Примеры таких способов включают, но не ограничены этим, внутривенное введение, внутрикожное введение, подкожное введение, внутримышечное введение, назальное введение и пероральное введение.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу индукции антиген-представляющей клетки, представляющей пептид WT1 на молекуле HLA-A*3303, включающему культивирование незрелой антиген-представляющей клетки в присутствии HLA-A*3303-рестриктированного пептида WT1 для индукции антиген-представляющей клетки, представляющей пептид WT1 на молекуле HLA-A*3303, из незрелой антиген-представляющей клетки. Незрелой антиген-представляющей клеткой называется клетка, такая как незрелая дендритная клетка, которая может развиться в антиген-представляющую клетку. Субъект, от которого получают незрелые антиген-представляющие клетки, может являться любым индивидуумом, если он имеет аллель HLA-A*3303. Поскольку незрелые антиген-представляющие клетки входят, например, в мононуклеарные клетки периферической крови, то можно культивировать такие клетки в присутствии пептида WT1.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к набору для индукции антиген-представляющих клеток, представляющих пептид WT1 на молекуле HLA-A*3303, содержащему HLA-A*3303-рестриктированный пептид WT1 в качестве основного компонента. Предпочтительно, чтобы набор использовался в способе индукции антиген-представляющих клеток. Другие компоненты, которые могут содержаться в наборе и т.п., описаны выше. Набор по настоящему изобретению можно использовать для эффективной индукции антиген-представляющих клеток, представляющих пептид WT1 на молекуле HLA-A*3303.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к антителу против HLA-A*3303-рестриктированного пептида WT1 или антителу против кодирующего полипептид полинуклеотида. Антитело по настоящему изобретению может являться поликлональным антителом или моноклональным антителом.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к способу диагностики рака, включающему применение WT1-специфичных ЦТЛ, антиген-представляющих клеток, представляющих пептид WT1 на молекуле HLA-A*3303, или антитела против HLA-A*3303-рестриктированного пептида WT1 или антитела против кодирующего полипептид полинуклеотида. Предпочтительно, чтобы в способе диагностики по настоящему изобретению применялись WT1-специфичные ЦТЛ. Например, возможно диагностировать рак посредством инкубации ЦТЛ, антиген-представляющих клеток или антитела с образцом от субъекта, несущего аллель HLA-A*3303, или посредством введения их субъекту, несущему аллель HLA-A*3303, и определяя, например, их местоположение, участок связывания или количество. ЦТЛ, антиген-представляющие клетки или антитело могут нести метку. В результате присоединения метки способ диагностики по настоящему изобретению можно эффективно применять на практике.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к набору для диагностики рака, содержащему WT1-специфичные ЦТЛ, антиген-представляющие клетки, представляющие пептид WT1 на молекуле HLA-A*3303, или антитело против HLA-A*3303-рестриктированного пептида WT1 или антитело против кодирующего полипептид полинуклеотида, в качестве основного компонента.
В следующих примерах изобретение будет пояснено подробнее, но их не следует истолковывать как ограничивающие объем изобретения.
Примеры
Пример 1
Выбор пептида WT1
С помощью программы NetMHC2.0 (Technical University of Denmark) были выбраны пептиды WT1337, WT1364, WT1367 и WT1409, которые представляют собой гидрофильные пептиды, состоящие из 9 аминокислот с соответствующим HLA-A*3303 якорным мотивом (вторая аминокислота от N-конца является любой из Ala, Ile, Leu, Val, Phe, Tyr, Ser и Asp, а аминокислота на С-конце является Arg), и которые, как ожидается, имеют высокую аффинность связывания пептида WT1 из белка WT1 (SEQ ID No: 1) с молекулой HLA-A*3303. Аминокислотные последовательности и аффинность связывания этих пептидов с молекулой HLA-A*3303 приведены в таблице.
| Пептид | Положение аминокислоты в SEQ ID No: 1 | Аминокислотная последовательность | Аффинность связывания с молекулой HLA-A*3303 |
| WT1337 (SEQ ID No: 2) |
337-345 | LSHLQMHSR | 18,827 |
| WT1364 (SEQ ID No: 3) |
364-372 | FSRSDQLKR | 15,143 |
| WT1367 (SEQ ID No: 4) |
367-375 | SDQLKRHQR | 14,496 |
| WT1409 (SEQ ID No: 5) |
409-417 | TSEKPFSCR | 15,310 |
Получение клеток B-LCL (В-лимфобластоидной клеточной линии)
Выделяли мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) центрифугированием в градиенте плотности Ficoll-Hypaque из периферической крови, забранной у здорового донора, несущего аллель HLA-A*3303 (HLA-A*3303/0207). Затем клетки РВМС высевали на 24-луночный культуральный планшет с плотностью примерно 1×107 в среде RPMI 1640, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки, и добавляли культуральный супернатант от клеток В95-8 (клеток, продуцирующих вирус Эпштейна-Барра). Клетки культивировали при 37°С в 5% CO2 в течение месяца. Таким образом были получены клетки B-LCL, трансформированные вирусом Эпштейна-Барра, которые являются опухолевыми В-клетками. Было подтверждено, что полученные клетки B-LCL не экспрессируют ген WT1. Клеткам был дан импульс путем инкубации их с 20 мкг/мл WT1337, WT1364, WT1367 или WT1409 в течение 2 часов, и они получили дозу ионизирующего облучения в 80 Гр. Полученные клетки B-LCL (здесь и далее именуемые как клетки B-LCL, получившие импульс пептидом WT1) использовали как антиген-представляющие клетки для нижеследующих экспериментов.
Индукция WT1-специфичных ЦТЛ
3×106 клеток PBMCs (HLA-A*3303/1101) культивировали в 24-луночном культуральном планшете в полной среде (45% среды RPMI, 45% среды AMI-V и 10% сыворотки АВ человека), содержащей 20 мкг/мл WT1337, WT1364, WT1367 или WT1409 при 37°С в 5% CO2 в течение 1 недели, чтобы получить отвечающие на стимул клетки. 2×106 полученных отвечающих на стимул клеток культивировали совместно с 1×106 клеток B-LCL, которые получили импульс тем же пептидом WT1 в полной среде в течение 1 недели (первая стимуляция). Клетки PBMC культивировали совместно с клетками B-LCL, которые получили импульс пептидом WT1, еще три раза (вторая-четвертая стимуляции) при условиях, при которых добавляли 20 ед./мл (конечная концентрация) IL-2 по следующей схеме: вторая стимуляция: два раза через день, начиная с третьего дня от начала стимуляции; третья и четвертые стимуляции: три раза с интервалами в один день, начиная со следующего дня после начала стимуляции. Полученные клетки концентрировали, используя набор Negative Selection Columns Gravity Feed Kit (StemSp), для того чтобы соотношение Т-клеток CD8+ стало примерно 80%, и культивировали совместно с клетками B-LCL, которым был дан импульс пептидом WT1 (пятая стимуляция). Т-клетки CD8+ (ЦТЛ), полученные на 5 день после последней стимуляции, использовали для измерения цитотоксической активности.
Цитотоксическая активность ЦТЛ
Цитотоксическую активность ЦТЛ измеряли, используя метод высвобождения 51Cr. Клетки ЦТЛ (здесь и далее именуемые эффекторные клетки) смешивали в соотношении (соотношение эффекторные клетки/клетки-мишени) 1:1, 5:1 или 10:1 в 200 мкл среды с клетками-мишенями, в которые был встроен 51Cr, и культивировали в 96-луночном культуральном планшете при 37°С в 5% CO2 в течение 4 часов. В качестве клеток-мишеней использовали клетки B-LCL, которые получили импульс тем же пептидом WT1, как и тот, что использовали для индукции ЦТЛ (BLCL-P), и клетки B-LCL, которые не получали импульс пептидом WT1 (BLCL-NP). После культивирования супернатанты собирали центрифугированием. Количество высвобожденного в супернатант 51Cr измеряли в жидкостном сцинтилляционном счетчике. Цитотоксическую активность (%) определяли по следующей формуле:
(Высвобождение 51Cr в супернатанте образца - Спонтанное высвобождение 51Cr)/(Максимальное высвобождение 51Cr - Спонтанное высвобождение 51Cr)×100,
в которой спонтанное высвобождение 51Cr представляет собой высвобождение 51Cr, наблюдаемое при культивировании в тех же условиях только клеток-мишеней, в которых встраивался 51Cr, а максимальное высвобождение 51Cr представляет собой высвобождение 51Cr, наблюдаемое при полном лизисе в 1% Triton X-100 клеток-мишеней, в которые встраивался 51Cr. Результаты приведены на фиг.1-4. На фигурах ось ординат представляет специфический лизис (%), а ось абсцисс представляет соотношение эффекторные клетки/клетки-мишени. Клетки BLCL-P представлены сплошными линиями, а клетки BLCL-NP представлены пунктирными линиями. Было подтверждено, что ЦТЛ, индуцированные WT1337, WT1364, WT1367 или WT1409 специфически лизируют клетки BLCL-P, представляющие пептид WT1 в виде комплекса с молекулой HLA-A*3303, по сравнению с клетками BLCL-NP. Для приведенных ниже дальнейших экспериментов использовали ЦТЛ, индуцированные WT1364, WT1367 или WT1409.
Цитотоксическая активность ЦТЛ против клеток, эндогенно экспрессирующих ген WT1
Цитотоксическую активность ЦТЛ, индуцированных WT1364, WT1367 или WT1409 против клеток TF-1, которые представляют собой опухолевые клетки, экспрессирующие ген WT1 (несущие HLA-A*3303), определяли с использованием описанного выше метода. В качестве контроля использовали клетки К-562, которые экспрессируют ген WT1 и не имеют HLA-A*3303. Результаты представлены на фиг.5-7. На фигурах ось ординат представляет специфический лизис (%), а ось абсцис представляет соотношение эффекторные клетки/клетки-мишени. Клетки TF-1 представлены сплошными линиями, а клетки К-562 представлены пунктирными линиями. Было подтверждено, что ЦТЛ, индуцированные WT1364, WT1367 или WT1409 также обладают цитотоксической активностью против клеток, эндогенно экспрессирующих ген WT1.
Цитотоксическую активность ЦТЛ, индуцированных WT1367 против клеток B-LCL, экспрессирующих WT1, определяли, используя описанный выше метод. Клетками B-LCL, экспрессирующими WT1 (B-LCL-WT1), называются клетки B-LCL, в которые встроен ген WT1 человека, экспрессирующий белок WT1 в клетке и представляющий на молекуле HLA-A*3303 состоящий из примерно 9 аминокислот пептид, являющийся результатом процессинга. В качестве контроля использовали клетки B-LCL (B-LCL-CV), в которые был встроен контрольный ген, исключая ген WT1. Результаты показаны на фиг.8. На фигуре ось ординат представляет специфический лизис (%), а ось абсцисс представляет соотношение эффекторные клетки/клетки-мишени. Клетки B-LCL-WT1 представлены сплошными линиями, а клетки B-LCL-CV представлены пунктирными линиями. Было подтверждено, что ЦТЛ, индуцированные WT1367 лизируют только клетки, которые несут HLA-A*3303 и экспрессируют WT1.
Промышленное применение
Настоящее изобретение относится к HLA-A*3303-рестриктированному пептиду, кодирующему его полинуклеотиду, содержащей его фармацевтической композиции и т.п. Таким образом, настоящее изобретение можно использовать в медицине и т.п., например, в области разработки и производства фармацевтических композиций для профилактики или лечения различных гематопоэтических опухолей и солидных раковых заболеваний, экспрессирующих ген WT1 на высоком уровне.
Claims (4)
1. Пептид, состоящий из аминокислотной последовательности
Ser Asp Gln Leu Lys Arg His Gln Arg (SEQ ID No: 4), где указанный пептид обладает способностью избирательно связываться с молекулой HLA-А*3303.
Ser Asp Gln Leu Lys Arg His Gln Arg (SEQ ID No: 4), где указанный пептид обладает способностью избирательно связываться с молекулой HLA-А*3303.
2. Полинуклеотид, кодирующий пептид по п.1.
3. Экспрессионный вектор, содержащий полинуклеотид по п.2.
4. Набор для индукции WT1-специфичных цитотоксических лимфоцитов (ЦТЛ) или для индукции антиген-представляющих клеток, представляющих пептид WT-1, где набор содержит пептид, состоящий из аминокислотной последовательности Ser Asp Gln Leu Lys Arg His Gln Arg (SEQ ID No: 4) в качестве основного компонента.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2006045287 | 2006-02-22 | ||
| JP2006-045287 | 2006-02-22 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011132212/10A Division RU2011132212A (ru) | 2006-02-22 | 2011-07-29 | Hla-a*3303-рестриктированный пептид wt1 и содержащая его фармацевтическая композиция |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008137635A RU2008137635A (ru) | 2010-03-27 |
| RU2435782C2 true RU2435782C2 (ru) | 2011-12-10 |
Family
ID=38437397
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008137635/10A RU2435782C2 (ru) | 2006-02-22 | 2007-02-21 | Hla-a*3303-рестриктированный пептид wt1 и содержащая его фармацевтическая композиция |
| RU2011132212/10A RU2011132212A (ru) | 2006-02-22 | 2011-07-29 | Hla-a*3303-рестриктированный пептид wt1 и содержащая его фармацевтическая композиция |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011132212/10A RU2011132212A (ru) | 2006-02-22 | 2011-07-29 | Hla-a*3303-рестриктированный пептид wt1 и содержащая его фармацевтическая композиция |
Country Status (23)
| Country | Link |
|---|---|
| US (5) | US8759483B2 (ru) |
| EP (3) | EP1988163B1 (ru) |
| JP (1) | JP5393144B2 (ru) |
| KR (1) | KR101391561B1 (ru) |
| CN (3) | CN101384716B (ru) |
| AU (1) | AU2007218649B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0708125A2 (ru) |
| CA (4) | CA2886615A1 (ru) |
| CY (1) | CY1113117T1 (ru) |
| DK (2) | DK2518149T3 (ru) |
| ES (3) | ES2387685T3 (ru) |
| HK (1) | HK1125968A1 (ru) |
| IL (4) | IL193026A (ru) |
| MX (1) | MX2008010842A (ru) |
| MY (1) | MY149527A (ru) |
| NO (1) | NO20084008L (ru) |
| PH (1) | PH12012502372A1 (ru) |
| PL (1) | PL1988163T3 (ru) |
| PT (1) | PT1988163E (ru) |
| RU (2) | RU2435782C2 (ru) |
| SI (1) | SI1988163T1 (ru) |
| WO (1) | WO2007097358A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA200806542B (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2774820C2 (ru) * | 2017-02-12 | 2022-06-23 | БАЙОНТЕК ЮЭс ИНК. | Основанные на hla способы и композиции и их применение |
Families Citing this family (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE540111T1 (de) | 2003-11-05 | 2012-01-15 | Int Inst Cancer Immunology Inc | Hla-dr-bindendes antigenpeptid, das von wt1 abgeleitet ist |
| CA2626238C (en) | 2005-10-17 | 2015-10-06 | Sloan Kettering Institute For Cancer Research | Wt1 hla class ii-binding peptides and compositions and methods comprising same |
| EP1988163B1 (en) | 2006-02-22 | 2012-06-27 | International Institute of Cancer Immunology, Inc. | Hla-a*3303-restricted wt1 peptide and pharmaceutical composition comprising the same |
| ES2591029T3 (es) | 2006-04-10 | 2016-11-24 | Sloan Kettering Institute For Cancer Research | Péptidos WT-1 inmunogénicos y métodos para su uso |
| UA101608C2 (ru) | 2007-02-27 | 2013-04-25 | Интэрнэшнл Инститьют Оф Кэнсэр Иммунолоджы, Инк. | Способ активации хелперных т-клеток |
| US10654892B2 (en) | 2010-10-05 | 2020-05-19 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Method for activating helper T cell |
| PE20141271A1 (es) * | 2011-04-01 | 2014-10-08 | Sloan Kettering Inst Cancer | Anticuerpos tipo receptor de celulas t especificos para un peptido wt1 presentado por hla-a2 |
| AU2012309417B2 (en) | 2011-09-14 | 2017-09-14 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Method for measuring anti-WT1 antibody |
| AU2013207669C1 (en) | 2012-01-13 | 2018-05-31 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Immunogenic WT-1 peptides and methods of use thereof |
| CN104797711B (zh) | 2012-09-12 | 2018-09-21 | 株式会社癌免疫研究所 | 抗原特异性辅助性t细胞受体基因 |
| AU2013358947B2 (en) | 2012-12-13 | 2016-10-20 | Inovio Pharmaceuticals, Inc. | WT1 vaccine |
| MX2015007745A (es) | 2012-12-17 | 2015-12-15 | Otsuka Pharma Co Ltd | Metodo para activar la celula t auxiliar. |
| PL2945647T3 (pl) | 2013-01-15 | 2021-03-08 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Immunogenne peptydy wt-1 i sposoby ich zastosowania |
| US10815273B2 (en) | 2013-01-15 | 2020-10-27 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Immunogenic WT-1 peptides and methods of use thereof |
| RU2687026C2 (ru) | 2013-02-05 | 2019-05-06 | Нитто Денко Корпорейшн | Вакцинная композиция против злокачественной опухоли на основе пептида wt1 для мукозального введения |
| KR20140099828A (ko) | 2013-02-05 | 2014-08-13 | 닛토덴코 가부시키가이샤 | 점막 투여용 백신 조성물 |
| CA2840941A1 (en) | 2013-02-05 | 2014-08-05 | Nitto Denko Corporation | Wt1 peptide cancer vaccine composition for transdermal administration |
| JP2014169280A (ja) | 2013-02-05 | 2014-09-18 | Nitto Denko Corp | 経皮または粘膜投与用ワクチン組成物 |
| CN103961307B (zh) | 2013-02-05 | 2019-11-29 | 日东电工株式会社 | 经皮给予用wt1肽癌症疫苗组合物 |
| RU2014102939A (ru) | 2013-02-05 | 2015-08-10 | Нитто Денко Корпорейшн | Вакцинная композиция для чрескожного введения |
| US10076491B2 (en) | 2013-02-05 | 2018-09-18 | Nitto Denko Corporation | Vaccine composition |
| US10195258B2 (en) | 2013-02-05 | 2019-02-05 | Nitto Denko Corporation | Tape preparation of WT1 peptide cancer vaccine for transdermal administration |
| CN114949171A (zh) * | 2014-12-11 | 2022-08-30 | 株式会社癌免疫研究所 | 血管生成性疾病的免疫疗法 |
| JP6723164B2 (ja) | 2014-12-25 | 2020-07-15 | 株式会社癌免疫研究所 | Ｔ細胞集団の改変方法 |
| CN107530557A (zh) | 2015-03-20 | 2018-01-02 | 宾夕法尼亚大学理事会 | Isg15和其作为佐剂的用途 |
| JP6994201B2 (ja) | 2016-11-09 | 2022-02-21 | 国立大学法人大阪大学 | Ｔ細胞集団の改変方法 |
Family Cites Families (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE69033127T2 (de) * | 1989-11-13 | 1999-10-14 | Massachusetts Inst Technology | Lokalisation und charakterisierung des wilms-tumor-gens |
| US5595756A (en) * | 1993-12-22 | 1997-01-21 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Liposomal compositions for enhanced retention of bioactive agents |
| US6344436B1 (en) * | 1996-01-08 | 2002-02-05 | Baylor College Of Medicine | Lipophilic peptides for macromolecule delivery |
| US6270777B1 (en) * | 1996-12-20 | 2001-08-07 | University Technologies International Inc. | Conserved metalloprotease epitopes |
| GB9805877D0 (en) * | 1998-03-20 | 1998-05-13 | Imp Cancer Res Tech | Cancer |
| RU2237674C2 (ru) * | 1998-09-30 | 2004-10-10 | Корикса Корпорейшн | Композиции и способы wt1-специфичной иммунотерапии |
| US20030235557A1 (en) | 1998-09-30 | 2003-12-25 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| US7655249B2 (en) | 1998-09-30 | 2010-02-02 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| US7063854B1 (en) | 1998-09-30 | 2006-06-20 | Corixa Corporation | Composition and methods for WTI specific immunotherapy |
| US20030072767A1 (en) | 1998-09-30 | 2003-04-17 | Alexander Gaiger | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| US7144581B2 (en) | 2000-10-09 | 2006-12-05 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| US7115272B1 (en) | 1998-09-30 | 2006-10-03 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| US20030039635A1 (en) | 1998-09-30 | 2003-02-27 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| US7901693B2 (en) | 1998-09-30 | 2011-03-08 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| WO2001025273A2 (en) * | 1999-10-04 | 2001-04-12 | Corixa Corporation | Compositions and methods for wt1 specific immunotherapy |
| US6797695B1 (en) * | 1999-10-22 | 2004-09-28 | Kyoto University | Human FGF-20 gene and gene expression products |
| AU2001285018A1 (en) | 2000-08-17 | 2002-02-25 | Agensys, Inc. | Nucleic acids and corresponding proteins entitled 83p2h3 and catrf2e11 useful in treatment and detection of cancer |
| ES2298353T3 (es) * | 2001-03-22 | 2008-05-16 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Peptido wt1 modificado. |
| US20040197892A1 (en) * | 2001-04-04 | 2004-10-07 | Michael Moore | Composition binding polypeptides |
| SI20875A (sl) * | 2001-04-25 | 2002-10-31 | LEK, tovarna farmacevtskih in kemi�nih izdelkov, d.d. | Kristalna oblika omeprazola |
| WO2003106682A1 (ja) | 2002-06-12 | 2003-12-24 | 中外製薬株式会社 | Ｈｌａ−ａ２４拘束性癌抗原ペプチド |
| AU2003262094A1 (en) * | 2002-09-12 | 2004-04-30 | Haruo Sugiyama | Cancer antigen peptide preparation |
| DE602004023476D1 (de) * | 2003-01-15 | 2009-11-19 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Dimerisiertes peptid |
| EP1590437A4 (en) * | 2003-01-24 | 2008-06-18 | Agensys Inc | NUCLEIC ACIDS SUITABLE FOR THE TREATMENT AND DETECTION OF CANCER AND CORRESPONDING PROTEINS NAMED 254P1D6B |
| US6980709B2 (en) | 2003-06-20 | 2005-12-27 | Northrop Grumman Corporation | Polymeric material with voids that compress to allow the polymeric material to absorb applied force and decrease reaction force to one or more sensor fibers |
| ES2556232T3 (es) | 2004-03-31 | 2016-01-14 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Péptidos antigénicos del cáncer derivados de WT1 |
| EP1988163B1 (en) | 2006-02-22 | 2012-06-27 | International Institute of Cancer Immunology, Inc. | Hla-a*3303-restricted wt1 peptide and pharmaceutical composition comprising the same |
-
2007
- 2007-02-21 EP EP07714676A patent/EP1988163B1/en not_active Not-in-force
- 2007-02-21 EP EP11161436.8A patent/EP2385117B1/en not_active Not-in-force
- 2007-02-21 CN CN2007800059709A patent/CN101384716B/zh active Active
- 2007-02-21 JP JP2008501735A patent/JP5393144B2/ja active Active
- 2007-02-21 ES ES07714676T patent/ES2387685T3/es active Active
- 2007-02-21 CA CA2886615A patent/CA2886615A1/en not_active Abandoned
- 2007-02-21 EP EP12174393.4A patent/EP2518149B1/en not_active Not-in-force
- 2007-02-21 PL PL07714676T patent/PL1988163T3/pl unknown
- 2007-02-21 WO PCT/JP2007/053176 patent/WO2007097358A1/ja active Application Filing
- 2007-02-21 CA CA002638122A patent/CA2638122A1/en not_active Abandoned
- 2007-02-21 MY MYPI20082861A patent/MY149527A/en unknown
- 2007-02-21 DK DK12174393.4T patent/DK2518149T3/en active
- 2007-02-21 CN CN2011101569270A patent/CN102250211A/zh active Pending
- 2007-02-21 BR BRPI0708125-1A patent/BRPI0708125A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2007-02-21 PT PT07714676T patent/PT1988163E/pt unknown
- 2007-02-21 AU AU2007218649A patent/AU2007218649B2/en not_active Ceased
- 2007-02-21 ES ES11161436.8T patent/ES2587980T3/es active Active
- 2007-02-21 DK DK07714676.9T patent/DK1988163T3/da active
- 2007-02-21 CA CA2886552A patent/CA2886552A1/en not_active Abandoned
- 2007-02-21 CN CN201210158264.0A patent/CN102702319B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-02-21 CA CA2886551A patent/CA2886551A1/en not_active Abandoned
- 2007-02-21 RU RU2008137635/10A patent/RU2435782C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2007-02-21 MX MX2008010842A patent/MX2008010842A/es active IP Right Grant
- 2007-02-21 US US12/280,268 patent/US8759483B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-02-21 ES ES12174393.4T patent/ES2558330T3/es active Active
- 2007-02-21 SI SI200730972T patent/SI1988163T1/sl unknown
-
2008
- 2008-07-24 IL IL193026A patent/IL193026A/en not_active IP Right Cessation
- 2008-07-28 ZA ZA200806542A patent/ZA200806542B/xx unknown
- 2008-08-21 KR KR1020087020447A patent/KR101391561B1/ko active IP Right Grant
- 2008-09-19 NO NO20084008A patent/NO20084008L/no not_active Application Discontinuation
-
2009
- 2009-04-28 HK HK09103920.0A patent/HK1125968A1/xx unknown
-
2011
- 2011-07-29 RU RU2011132212/10A patent/RU2011132212A/ru not_active Application Discontinuation
-
2012
- 2012-02-16 IL IL218172A patent/IL218172A0/en unknown
- 2012-03-02 US US13/411,453 patent/US8778350B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2012-09-18 CY CY20121100848T patent/CY1113117T1/el unknown
- 2012-11-29 PH PH12012502372A patent/PH12012502372A1/en unknown
-
2013
- 2013-12-31 US US14/145,144 patent/US8968745B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-12-31 US US14/145,221 patent/US8933038B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-12-31 US US14/145,363 patent/US8945578B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2014
- 2014-05-01 IL IL232409A patent/IL232409A0/en unknown
- 2014-05-01 IL IL232408A patent/IL232408A0/en unknown
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ADDO M. ET AL. AIDS, 2002, 16(7), 1071-1073. TSUBOI ET AL. Cancer immunology and immunotherapy, 2002, 51, no.11-12, 614-620. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2774820C2 (ru) * | 2017-02-12 | 2022-06-23 | БАЙОНТЕК ЮЭс ИНК. | Основанные на hla способы и композиции и их применение |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2435782C2 (ru) | Hla-a*3303-рестриктированный пептид wt1 и содержащая его фармацевтическая композиция | |
| JP5484734B2 (ja) | Ｈｌａ−ａ＊１１０１拘束性ｗｔ１ペプチド、およびそれを含む医薬組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160222 |