RU2434879C2 - Средство для преодоления множественной лекарственной устойчивости - Google Patents
Средство для преодоления множественной лекарственной устойчивости Download PDFInfo
- Publication number
- RU2434879C2 RU2434879C2 RU2008146409/04A RU2008146409A RU2434879C2 RU 2434879 C2 RU2434879 C2 RU 2434879C2 RU 2008146409/04 A RU2008146409/04 A RU 2008146409/04A RU 2008146409 A RU2008146409 A RU 2008146409A RU 2434879 C2 RU2434879 C2 RU 2434879C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- hexapeptide
- multidrug resistance
- patient
- calcein
- Prior art date
Links
- 230000036457 multidrug resistance Effects 0.000 title claims abstract description 51
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 15
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 10
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 claims description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 8
- 235000013905 glycine and its sodium salt Nutrition 0.000 claims description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 4
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 4
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 claims description 3
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 claims description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 3
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 claims description 3
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 claims description 2
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 claims description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 claims description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 claims description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims 4
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 33
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 32
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 29
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 17
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 abstract description 14
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 abstract description 14
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 8
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 7
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 3
- 238000002483 medication Methods 0.000 abstract 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 79
- DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N calcein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(O)=O)CC(=O)O)C(O)=C1 DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 229960002378 oftasceine Drugs 0.000 description 25
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 24
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 22
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 22
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 22
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 22
- 102000014842 Multidrug resistance proteins Human genes 0.000 description 19
- 108010091105 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Proteins 0.000 description 19
- 238000011127 radiochemotherapy Methods 0.000 description 19
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 17
- 101001017818 Homo sapiens ATP-dependent translocase ABCB1 Proteins 0.000 description 13
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 13
- 102100033350 ATP-dependent translocase ABCB1 Human genes 0.000 description 12
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 10
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 10
- 238000009096 combination chemotherapy Methods 0.000 description 9
- 238000011161 development Methods 0.000 description 9
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 7
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 6
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 6
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 6
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 6
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QRLVDLBMBULFAL-UHFFFAOYSA-N Digitonin Natural products CC1CCC2(OC1)OC3C(O)C4C5CCC6CC(OC7OC(CO)C(OC8OC(CO)C(O)C(OC9OCC(O)C(O)C9OC%10OC(CO)C(O)C(OC%11OC(CO)C(O)C(O)C%11O)C%10O)C8O)C(O)C7O)C(O)CC6(C)C5CCC4(C)C3C2C QRLVDLBMBULFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 5
- BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N calcein am Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=C(OC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(=O)C)C(OC(C)=O)=C1 BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- UVYVLBIGDKGWPX-KUAJCENISA-N digitonin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)C[C@@H](O)[C@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O[C@H]6[C@@H]([C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO7)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)O[C@H]6[C@@H]([C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@@H](CO)O5)O)C[C@@H]4CC[C@H]3[C@@H]2[C@@H]1O)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@@H](C)CO1 UVYVLBIGDKGWPX-KUAJCENISA-N 0.000 description 5
- UVYVLBIGDKGWPX-UHFFFAOYSA-N digitonine Natural products CC1C(C2(CCC3C4(C)CC(O)C(OC5C(C(O)C(OC6C(C(OC7C(C(O)C(O)CO7)O)C(O)C(CO)O6)OC6C(C(OC7C(C(O)C(O)C(CO)O7)O)C(O)C(CO)O6)O)C(CO)O5)O)CC4CCC3C2C2O)C)C2OC11CCC(C)CO1 UVYVLBIGDKGWPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 5
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 5
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 5
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 4
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 230000008359 toxicosis Effects 0.000 description 4
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 4
- 230000036269 ulceration Effects 0.000 description 4
- DJHGAFSJWGLOIV-UHFFFAOYSA-K Arsenate3- Chemical compound [O-][As]([O-])([O-])=O DJHGAFSJWGLOIV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 3
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 3
- 206010023825 Laryngeal cancer Diseases 0.000 description 3
- 206010048723 Multiple-drug resistance Diseases 0.000 description 3
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 229940000489 arsenate Drugs 0.000 description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 3
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 3
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 3
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 3
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 3
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 3
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 206010023841 laryngeal neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 238000009607 mammography Methods 0.000 description 3
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 3
- 239000006215 rectal suppository Substances 0.000 description 3
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- RMVRSNDYEFQCLF-UHFFFAOYSA-N thiophenol Chemical compound SC1=CC=CC=C1 RMVRSNDYEFQCLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 Boc group Chemical group 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229940127291 Calcium channel antagonist Drugs 0.000 description 2
- 102000000584 Calmodulin Human genes 0.000 description 2
- 108010041952 Calmodulin Proteins 0.000 description 2
- 208000017897 Carcinoma of esophagus Diseases 0.000 description 2
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 2
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 2
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 2
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 2
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 2
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 2
- WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N Malondialdehyde Chemical compound O=CCC=O WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010047230 Member 1 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 2
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 230000009056 active transport Effects 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 239000000480 calcium channel blocker Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 2
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 2
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 2
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 2
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229940118019 malondialdehyde Drugs 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 2
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 2
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 2
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-{[2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethyl](methyl)amino}-2-(propan-2-yl)pentanenitrile Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1CCN(C)CCCC(C#N)(C(C)C)C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100025218 B-cell differentiation antigen CD72 Human genes 0.000 description 1
- 206010057687 Bloody discharge Diseases 0.000 description 1
- 230000005461 Bremsstrahlung Effects 0.000 description 1
- 206010007247 Carbuncle Diseases 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102100035882 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 108010075016 Ceruloplasmin Proteins 0.000 description 1
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 1
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010036941 Cyclosporins Proteins 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 101000934359 Homo sapiens B-cell differentiation antigen CD72 Proteins 0.000 description 1
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 102000010445 Lactoferrin Human genes 0.000 description 1
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 108050005144 Multidrug resistance proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000224016 Plasmodium Species 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 101000986624 Streptococcus pyogenes Fibrinogen- and Ig-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 208000007271 Substance Withdrawal Syndrome Diseases 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 206010050283 Tumour ulceration Diseases 0.000 description 1
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- LAIYIBPWDBSUAJ-UHFFFAOYSA-N acetyl acetate;n-ethyl-n-propan-2-ylpropan-2-amine Chemical compound CC(=O)OC(C)=O.CCN(C(C)C)C(C)C LAIYIBPWDBSUAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N aldehydo-D-glucuronic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N 0.000 description 1
- 125000000266 alpha-aminoacyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004202 aminomethyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- IPDQVJYWUCDNBB-UHFFFAOYSA-N chloroform;2,2,2-trifluoroacetic acid Chemical compound ClC(Cl)Cl.OC(=O)C(F)(F)F IPDQVJYWUCDNBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPEIMTDSQAKGNT-UHFFFAOYSA-N chlorpromazine Chemical compound C1=C(Cl)C=C2N(CCCN(C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1 ZPEIMTDSQAKGNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001076 chlorpromazine Drugs 0.000 description 1
- 230000007665 chronic toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000160 chronic toxicity Toxicity 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 1
- 239000003218 coronary vasodilator agent Substances 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 238000001839 endoscopy Methods 0.000 description 1
- 230000001667 episodic effect Effects 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 244000000013 helminth Species 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 229930005303 indole alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000002475 indoles Chemical class 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000000622 irritating effect Effects 0.000 description 1
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 description 1
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 description 1
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 210000001370 mediastinum Anatomy 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000243 mutagenic effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037125 natural defense Effects 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000025402 neoplasm of esophagus Diseases 0.000 description 1
- 208000004235 neutropenia Diseases 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009057 passive transport Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- WIKYUJGCLQQFNW-UHFFFAOYSA-N prochlorperazine Chemical compound C1CN(C)CCN1CCCN1C2=CC(Cl)=CC=C2SC2=CC=CC=C21 WIKYUJGCLQQFNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003111 prochlorperazine Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 1
- 238000002601 radiography Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- TUFFYSFVSYUHPA-UHFFFAOYSA-M rhodamine 123 Chemical compound [Cl-].COC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C(C=CC(N)=C2)C2=[O+]C2=C1C=CC(N)=C2 TUFFYSFVSYUHPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000037390 scarring Effects 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- 125000006633 tert-butoxycarbonylamino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000003325 tomography Methods 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000036228 toxication Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 239000006216 vaginal suppository Substances 0.000 description 1
- 229960001722 verapamil Drugs 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/02—Suppositories; Bougies; Bases therefor; Ovules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины, в частности к области химиотерапии. Предложено средство для преодоления множественной лекарственной устойчивости, которое представляет собой гексапептид структурной формулы: лизил-гистидил-глицил-лизил-гистидил-глицин. На основе данного вещества возможно создание лекарственных средств, обладающих повышенной эффективностью преодоления множественной лекарственной устойчивости, увеличенной специфичностью действия в отношении транспортных белков множественной лекарственной резистентности (MRP), повышенной безвредностью и не вызывающих токсических реакций. Эти лекарственные средства могут применяться для профилактики и терапии больных с явлениями множественной лекарственной устойчивости. 3 з.п. ф-лы, 7 ил.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для устранения множественной лекарственной устойчивости у онкологических и инфекционных больных, длительно получающих химиопрепараты.
Возникновение множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) опухолевых клеток, грамм-отрицательных бактерий и простейших к цитостатическим и антимикробным препаратам возникает в результате активации естественных защитных механизмов клетки. Такие механизмы посредством АТФ-зависимых транспортных белков обеспечивают интенсивное откачивание из клетки любых токсических соединений, включая химиотерапевтические агенты. Усиление интенсивности работы транспортного насоса клеток в период химиотерапии вызывает резкое падение концентрации препаратов в клетке и, таким образом, снижает терапевтическое действие лекарственных препаратов у больных бактериальными, паразитарными, грибковыми инфекциями и онкологическими заболеваниями. Из перечисленного широкого спектра заболеваний, лечение которых осложняется, а порой становится невозможно из-за развития МЛУ, очевидна полезность создания эффективных лекарственных средств преодоления МЛУ.
В клетках млекопитающих за МЛУ ответственны, в основном, два типа транспортных белков: белки множественной лекарственной резистентности - multidrug resistance (MRP) и Р-гликопротеин - Р-glycoprotein (P-gp). MRP и P-gp обнаружены в опухолях различного происхождения: лимфомах, саркомах, карциномах и нейробластомах.
Субстратами для обоих типов транспортных белков является широкий спектр противоопухолевых соединений: антрациклины, этопозид, винкристин, таксол и др. Однако, в отличие от P-gp, MRP транспортирует различные соединения из клеток в виде коньюгатов с глутатионом или глюкуроновой кислотой. В результате работы транспортных белков цитостатические препараты поступают во внеклеточное пространство и опухолевые клетки приобретают устойчивость одновременно ко множеству лекарственных препаратов.
Известно, что целый ряд соединений ингибируют активность транспортного белка P-gp и тормозят выведение химиопрепаратов из клеток. По физико-химическим свойствам все известные соединения ингибиторы МЛУ объединяют признаки низкой молекулярной массы, наличия гидрофобных физико-химических свойств и присутствия ароматического кольца в молекуле. К числу ингибиторов МЛУ относят препараты следующих групп: блокаторы кальциевых каналов, ингибиторы кальмодулина, коронарные вазодилятаторы, алкалоиды индола, гормоны, циклоспорины, сурфактанты и антибиотики [(Krishna R., Mayer R.D., Eur. J. Pharmacol. Sci. 2000. Vol.11. №4. 265-283)].
Однако указанные препараты обладают низкой удельной активностью в отношении ингибирования МЛУ опухолевых клеток. Так, блокаторы кальциевых каналов, например верапамил, обладают ингибирующей активностью in vitro в дозе порядка 10 мкМ.
Другая известная группа препаратов - антагонисты кальмодулина: трифторперазин, хлорпромазин, прохлорперазин проявляют способность снижать резистентность опухолевых клеток к химиопрепаратам только при относительно высоких концентрациях порядка 5-50 мкМ. Однако клиническое применение известных препаратов для преодоления МЛУ оказывается невозможным. Введение известных препаратов в действующих концентрациях экспериментальным животным требует их назначения в таких высоких дозах, которые вызывают летальные исходы или тяжелые осложнения [Sandor V., Fojo,T., Bates S.E. Drug Res. Updates 1998. V.1, 190-200]. Тяжелые токсические реакции известных ингибиторов МЛУ не позволяют их использовать у больных для преодоления МЛУ. Поэтому до настоящего времени не существует препаратов, обеспечивающих возможность преодоления МЛУ у онкологических или инфекционных больных.
Развитие МЛУ опухолевых клеток определяется не только транспортерами P-gp, но и другими транспортными агентами, в том числе белками множественной лекарственной резистентности - MRP. Данный белок вызывает устойчивость к тем же химиопрепаратам, что и P-gp, но с несколько другим спектром перекрестной резистентности. Белки множественной лекарственной резистентности семейства MRP, в отличие от белков P-gp, обладают широким межвидовым представительством и контролируют появление МЛУ как опухолевых клеток, так и гельминтов, простейших и бактерий [Borst T., Kool M., Evers R. Sem. Cancer Biol. 1997. V.8, 205-213]. Поэтому препараты способные влиять на активность транспортных белков MRP имеют более широкий спектр действия по сравнению с препаратами, влияющими на активность транспортных белков P-gp. Первые могут влиять не только на формирование МЛУ опухолевых клеток, но и на проявление множественной лекарственной резистентности глистов, простейших, в том числе малярийного плазмодия, и бактерий.
Известно применение циклогексапептида структурной формулы цикло-лизил-гистидил-глицил-лизил-гистидил-глицин в качестве лекарственного средства для лечения иммунодефицитных состояний [Патент Российской Федерации RU 2157235 - Средство для лечения иммунодефицитных состояний]. Однако известная фармакологически активная субстанция не обладает способностью преодолевать МЛУ и отличается по химической формуле от предложенного гексапептида линейной структуры - лизил-гистидил-глицил-лизил-гистидил-глицин. Брутто формула C28H44O6N12. Молекулярная масса 644,7 Д. Поэтому рассмотрение касается совершенно разных химических соединений, обладающих разным действием: одно цикло-лизил-гистидил-глицил-лизил-гистидил-глицин влияет на иммунную систему, другое - лизил-гистидил-глицил-лизил-гистидил-глицин на множественную лекарственную устойчивость.
Одним из наиболее активных ингибиторов МЛУ, принимаемый за ближайший аналог настоящего изобретения, является известный лекарственный препарат, содержащий в качестве действующего вещества пептид - Циклоспорин А [Регистр лекарственных средств России, т.16, с.983-984, 2008]. Препарат нашел применение клинике в качестве иммунодепрессанта при трансплантации органов и тканей. Для преодоления МЛУ известный препарат применяют только в экспериментальных целях в культуре клеток. Циклоспорин А представляет собой гидрофобный циклический пептид структурной формулы:
Известный пептид Циклоспорин А подавляет МЛУ преимущественно путем конкурентного ингибирования АТФ-зависимых транспортных белков семейства P-gp. Действия на белки множественной лекарственной резистентности (MRP) Циклоспорин А практически не оказывает [Legrand О., Simonin G., Perrot J.Y. Blood. 1998. V.91. №12. 4480-4488]. Циклоспорин А в опытах in vitro ингибирует активность транспортных белков при концентрациях 0.5-2 мкМ. Циклоспорин А ингибирует МЛУ в опытах на животных и повышает эффективность действия доксорубицина на рост опухолей мышей. Однако его клиническое применение для преодоления МЛУ у больных оказывается невозможным, поскольку в эффективных дозах препарат оказывает мощное токсическое действие.
Предложенное изобретение направлено на создание лекарственного средства, обеспечивающего повышение эффективности преодоления множественной лекарственной устойчивости, увеличение специфичности действия в отношении транспортных белков множественной лекарственной резистентности (MRP), повышение безвредности, устранение токсических реакций и создание приемлемых лекарственных форм для профилактики и терапии больных с явлениями множественной лекарственной устойчивости.
Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что в качестве средства для преодоления МЛУ к различным химиотерапевтическим препаратам используют гидрофильный гексапептид структурной формулы: лизил-гистидил-глицил-лизил-гистидил-глицин. Брутто-формула: С28Н46О7N12.
Краткое описание чертежей
На Фигуре 1 показано накопление кальцеина в клетках Р388 ВР в контроле (1) и после добавления 12 нМ гексапептида (2) в присутствии в среде ионов Со для тушение внеклеточного кальцеина.
На Фигуре 2 показана скорость выход кальцеина из предварительно нагруженных им клеток Р388 ВР в контроле (1) и после добавления 120 нМ гексапептида (2).
На Фигуре 3 показана кинетика выхода R123 из клеток Нер-2 в контроле (1) после добавления циклоспорина А 1 мкг/мл (2) и дигитонина 0.02% (3).
На Фигуре 4 показана кинетика выхода R123 из клеток Нер-2 в контроле (1) и после добавления циклоспорина А 1 мкг/мл (2).
На Фигуре 5 показана зависимость ингибирования скорости выхода R 123 (R) из клеток Нер-2 гексапептидом и циклоспорином А (Цс. А) от их концентраций.
На Фигуре 6 показана выживаемость клеток Нер-2 после воздействия 50 мкМ арсената с 1(2) и 100(3) мг/мл гексапептида.
На Фигуре 7 показано действие гексапептида на рост клеток Нер-2.
Предложенное средство содержит в качестве действующего вещества синтетический гексапептид молекулярной массой 662,7 Д.
Действующее вещество представляет собой белый порошок без запаха, легко растворимый в воде и изотоническом растворе хлорида натрия. Вещество не растворимо в спирте и хлороформе.
Предложенное средство для преодоления МЛУ содержит гексапептид в дозе 1-0,001% (10-0,01 мг). Лекарственные формы выпуска предложенного средства содержат стерильный раствор гексапептида для подкожных или внутримышечных инъекций в ампулах. В качестве стабилизатора средство содержит 1,0-0,5% раствор (10-0,5 мг) аминоуксусной кислоты. Лекарственная форма для подкожных или внутримышечных инъекций наиболее предпочтительна для применения в виде 0,005% стерильного раствора гексапептида в ампулах по 1,0 мл и 0,5% стабилизатора аминоуксусной кислоты. Срок хранения 2 года при 4-8 С°.
Лекарственная форма в виде спрея для дозированного интраназального применения наиболее предпочтительна во флаконах объемом 10,0-20,0 мл по 10-20 доз заявленного средства. Каждая доза содержит по 0,05-0,1 мг гексапептида и в качестве стабилизатора аминоуксусную кислоту в количестве 5-10 мг. В качестве консерванта раствор для дозированного интраназального применения содержит бензалкония хлорида от 0,0040 до 0,00012 г/мл. Наиболее предпочтительная лекарственная форма содержит разовую дозу 100 мкг гексапептида, 0,5% стабилизатора аминоуксусной кислоты и бензалкония хлорида 0,00010 г/мл. Срок хранения 2 года при 4-8 С°.
Лекарственная форма в виде ректальных или вагинальных суппозиториев содержит действующее вещество - гексапептид в разовой дозе 5-0,05 мг, в качестве стабилизатора аминоуксусную кислоту 20-0,5 мг (ВФС 42-599-92, НД 42-11253-00) или другого зарегистрированного в России аналогичного качества, твин 80 (Полисорбат 80) (ФС 42-2540-88) 120-150 мг, воды для инъекций (ФС 42-2620-97) и твердого жира (ФС 42-346-97, НД 42-8991-98) до получения суппозитория массой 1,2-2,5 г. Срок хранения 2 года при 4-8 С°.
Заявленное лекарственное средство обладает следующими новыми свойствами, которые не являются очевидными для специалиста в данной области техники:
- преодоление множественной лекарственной устойчивости клеток;
- специфичности действия в отношении транспортных белков множественной лекарственной резистентности (MRP);
- повышение безвредности;
- устранение токсических реакций организма;
- создание приемлемых лекарственных форм для профилактики и терапии больных с явлениями множественной лекарственной устойчивости.
Результаты доклинического и клинического изучения предложенного средства демонстрируют, что оно не вызывает выраженной токсической реакции или развитие побочных эффектов.
Экспериментальные и клинические данные показывают, что:
1. Гексапептид обеспечивает преодоление множественной лекарственной устойчивости в 3.000 раз эффективнее по сравнению с веществом по прототипу (пример 3, фиг.5) и обладает достаточной безопасностью в отношении опухолевого роста (пример 4, фиг.7).
2. Заявленное средство обладает специфичностью действия в отношении транспортных белков множественной лекарственной резистентности (MRP). Вещество по прототипу - циклоспорин А не обладает подобным действием (пример 3). Гексапептид в концентрации 1,2 нМ увеличивает в 3 раза чувствительность клеток рака гортани человека Нер-2 к специфическому ингибитору белка множественной лекарственной резистентности цитостатическому веществу - арсенату (фиг.4).
3. Гексапептид обладает исключительно низкой токсичностью и обеспечивает широкий резерв терапевтической безопасности. Разовая доза, в тысячу раз превышающая среднюю терапевтическую (1,5 мг/кг), не вызывает гибели экспериментальных животных.
4. В тесте изучения хронической токсичности предложенного лекарственного средства выявлена его безвредность. Колебания гематологических и биохимических показателей при назначении животным лекарственного средства ежедневно, в течение одного месяца, в терапевтической (1,5 мкг/кг) или 10-кратно превышающей терапевтическую (15 мкг/кг) дозе после отмены лекарственного средства возвращаются к исходному уровню.
5. Введение лекарственного средства не вызывает местно раздражающего действия, не обладает аллергенностью и мутагенной активностью.
Лекарственное средство показало хорошие клинические результаты в комплексной химиолучевой терапии рака шейки матки, рака пищевода и других злокачественных опухолей человека. Предложенное средство назначают курсами до начала химиолучевой терапии и в период ее проведения.
Эффективность терапии оценивают по клинико-лабораторным показателям, в том числе по степени патоморфоза опухоли, развитию токсических и лучевых реакций, непрерывности химиотерапии, состоянию окислительно-антиокислительной и иммунной систем организма. Лекарственное средство предпочтительно назначают курсами введения в разовой дозе 1-1,5 мкг/кг массы тела ежедневно перед началом химиолучевой терапии в течение 5-10 дней и непосредственно в период проведения курсов химиотерапии. При необходимости для купирования токсических реакций лекарственное средство назначают после окончания химиолучевой терапии в течение 2-3 недель.
Ниже представлены конкретные примеры получения заявленного вещества, а также примеры, подтверждающие его биологические и лечебные свойства.
Пример 1
Получение действующего вещества
Гексапептид синтезируют по методу твердофазного синтеза на автоматизированном синтезаторе "Beckman-990".
Аминометилполимеразу (1.8 г, 1 ммоль) дают набухнуть в хлороформе в течение 30 минут, затем присоединяют трет-бутоксикарбонил-Gly-ОСН2С6H4СН2СООН (0,65 г, 2 ммоль) с помощью N,N-дициклогексилкарбодиимид (ДЦГК) (0,4 г, 2 ммоль в 15 мл хлороформа в течение 2 часов). После промывки диметилформамидом полимер обрабатывают 20 мл смеси диизопропилэтиламин-уксусный ангидрид, 2:1 в течение 30 минут. После промывки диметилформамидом и хлороформом полимер обрабатывают 30 мл смеси трифторуксуная кислота-хлороформ 1:1 20 минут, промывают хлороформом и нейтрализуют 7% раствором диизопропилэтиламина в диметилформамиде в течение 10 минут, затем аминоацилполимер промывают диметилформамидом. Присоединения трет-бутоксикарбонил-аминокислоты (Вос-аминокислоты) проводят с помощью симметричного ангидрида Вос-аминокислоты: 4 ммоль Вос-аминокислоты растворяют в 5 мл хлороформа, охлаждают до 0°С, добавляют раствор 2 ммоль ДЦГК в 5 мл хлороформа. После перемешивания в течение 10 минут при 0°С смесь добавляют к пептидилполимеру, приливают 10 мл диметилформамида и перемешивают с пептидилполимером 30 минут при 28°С.
После присоединения очередной аминокислоты пептидилполимер промывают диметилформамидом, хлороформом, затем удаляют защитную Вос-группу.
Удаление динитрофенильной группы: 2 г пептидилполимера перемешивают в течение 1,5 часов при комнатной температуре в 40 мл 20% раствора тиофенола в диметилформамиде. Затем пептидилполимер промывают диметилфорамидом, хлороформом и сушат в вакууме.
Снятие пептида со смолы: 2 г пептидилполимера помещают в реакционный сосуд прибора для работы с фтористым водородом, добавляют 1 г n-крезола, охлаждают жидким азотом и после вакуумирования сосуда перегоняют в него 10 мл жидкого безводного фтористого водорода. Доводят температуру реакционного сосуда до -20°С и перемешивают полимер в течение 30 минут, поддерживая температуру смеси ССl4-твердый СO2, затем помещают реакционный сосуд в ледяную баню и выдерживают при перемешивании еще 30 минут. После этого втористый водород упаривают на водоструйном насосе, полимер промывают на фильтре диэтиловым эфиром. Затем пептид экстрагируют 20% уксусной кислотой и лиофилизируют.
Удаление трифторацетильной группы. Снятый со смолы пептид обрабатывают 60 мл одномолярного водного раствора пиперидина при 0°С в течение 2 часов. Затем реакционную смесь лиофилизируют и обессоливают гельфильтрацией на колонке Sephadex G-25 в 5% уксусной кислоте.
Пример 2. Специфичность действия предложенного вещества по сравнению с прототипом
Исследование влияния гексапептида (заявленного вещества) и циклоспорина А (вещества по прототипу) на специфичность действия в отношении транспортных белков, ответственных за МЛУ.
Клетки рака гортани человека Нер-2 в среде DMEM (Sigma) с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки (Sigma) и 40 мкг/мл гентамицина (Sigma) рассевали в 96-луночный планшет по 0.1 мл при концентрации 50000/мл, добавляли исследуемые агенты и инкубировали трое суток при 37°С в атмосфере с 5% CO2. По окончании инкубации клетки окрашивали 0.02% фиолетовым кристаллическим (Sigma) в 20% этаноле 10 минут, затем раствор красителя удаляли, промывали ячейки водой и добавляли 0.1% раствор SDS для экстракции красителя из клеток. Оптическую плотность определяли при 570 нм на спектрофотометре Multiscan Plus. Эффект воздействия определяли по формуле: No/Nk=(Do-D)/(Dk-D)100%, где Do, Dk, D - оптические плотности в опыте, контроле и фоновая, соответственно, a No/Nk - выживаемость клеток: количество живых клеток в опыте относительно контроля.
Клетки Р388 выращивали в брюшной полости мышей DBA2. Резистентные к винкристину клетки Р388 получали путем их выращивания в мышах-самцах DBA2 при воздействии 1 мкг/г винкристина (Гедеон, Рихтер, Венгрия). Винкристин вводили внутрибрюшинно через сутки после прививки опухоли (106 клеток на мышь). После нарастания клеток их перевивали и снова вводили 1 мкг/г винкристина. Процедуру повторяли шесть раз. Полученный штамм клеток обозначили Р388ВР (винкристин-резистентный).
Все измерения флуоресценции проводили на спектрофотометре Perkin-Elmer MF44 при постоянном перемешивании и температуре 37°С. Длины волн возбуждения и эмиссии для кальцеина 493 и 515 нм. Клетки Нер-2 (1-1.5 млн) помещали в кювету прикрепленными к прозрачной пластиковой пластинке, а клетки Р388 (500 тыс) были в суспензии. При определении образования кальцеина кальцеин AM добавляли в кювету, прописывали скорость образования кальцеина в контроле, затем вводили в кювету исследуемые агенты и продолжали регистрировать увеличение флуоресценции. Эффект воздействия оценивали коэффициентом увеличения скорости после добавления агента. При исследовании скорости выхода из клеток кальцеина клетки предварительно нагружали этим же флуорохромом в присутствии 1 мкг\мл циклоспорина А для подавления их откачки из клеток, затем отмывали и хранили до измерения на льду. При определении выхода кальцеина из клеток в суспензии (Р388ВР) в кювету перед клетками добавляли 2 мкМ Со2+ для тушения флуоресценции внеклеточного кальцеина, и таким образом регистрировался кальцеин только в клетках. Вначале определялась скорость выхода флуорохрома в контроле, затем в кювету добавляли исследуемый агент и продолжали запись уменьшения кальцеина в клетках. Эффект воздействия оценивали отношением скоростей выхода в контроле и после введения агента. Все эффекты пептида сравнивали с действием циклоспорина А.
Скорость образования в кювете кальцеина при добавлении в среду кальцеина AM без ионов Со, позволяет определять активность транспортных белков, откачивающих из клеток кальцеин AM, но не белков, способных транспортировать из клеток кальцеин (MRP), поскольку в этом случае регистрируется весь кальцеин: в клетках и вне клеток.
Циклоспорин А, как преимущественный ингибитор P-gp, эффективно увеличивает скорость образования кальцеина в кювете с клетками Р388ВР, в которых МЛУ обусловлено в основном сверхэкспрессией P-gp. Коэффициент увеличения скорости образования кальцеина в клетках Р388 ВР циклоспорином А достигает 7±0.4 при его концентрации 0.8 и более мкМ. Гексапептид не действует на скорость образования кальцеина в кювете с клетками Р388ВР вплоть до 1.2 мкМ. Однако в присутствии Со (тушение внеклеточного кальцеина) гексапептид уже при концентрации 12 нМ увеличивает скорость образования кальцеина в этих клетках в два раза (фиг.1). Результаты показывают, что гексапептид не действует на активность P-gp (откачка кальцеина AM в клетках Р388ВР), но ингибирует MRP, который транспортирует из клеток кальцеин. Действительно, при исследовании скорости выхода кальцеина из предварительно им нагруженных клеток Р388ВР оказалось, что гексапептид эффективно подавляет MRP: скорость выхода кальцеина снижается в 1.5 раза уже при концентрации пептида 1.2 нМ, а при концентрации 120 нМ коэффициент ингибирования скорости равен 2.6 (фиг.2).
Напротив, циклоспорин А проявляет крайне низкую эффективность в ингибировании MRP: коэффициент равен 1.3±0.1 при концентрации 0.8 мкМ.
Полученные данные демонстрируют, что гексапептид (заявленное вещество) не действует на активность P-gp (откачка кальцеина AM в клетках Р388ВР), но ингибирует MRP, который в небольшом количестве также присутствует в клетках Р388ВР и транспортирует из клетки кальцеин. Аналогичные выводы следуют из результатов, полученных на другой модели - клетках Нер-2. Белки MRP в клетках Нер-2, в отличии от клеток Р388ВР, несут доминирующий вклад в появление МЛУ. Поэтому гексапептид в клетках Нер-2 ингибирует МЛУ гораздо более эффективно, чем в клетках Р388ВР. Так гексапептид уже в концентрации 1.2 нМ в два раза увеличивает скорость образования кальцеина в клетках (в присутствии ионов Со), а при возрастании концентрации пептида до 120 нМ коэффициент увеличения скорости образования кальцеина достигает 3.7 (фиг.2). Таким образом, гексапептид (заявленное вещество), в отличии от циклоспорина А, обладает выраженным специфическим действием в отношении ингибирования транспортных белков множественной лекарственной резистентности (MRP).
Пример 3
Исследование влияния гексапептида и вещества по прототипу (Циклоспорина А) на преодоление множественной лекарственной устойчивости опухолевых клеток Нер-2.
Активность в клетках транспортных белков, обеспечивающих множественную лекарственную устойчивость, определяли по скорости выхода из клеток родамина 123 (R123) ("ICN", США). Известно, что отношение скоростей выхода R 123 из клеток в норме и при полном подавлении активного транспорта минус единицу: (R-1)max равно отношению активного и пассивного транспорта и, следовательно, характеризует активность в клетках белков, обеспечивающих множественную лекарственную устойчивость. Клетки Нер-2 высевали в количестве 1-1.5 млн в среде DMEM+10% эмбриональной телячьей сыворотки с гентамицином на пластинки (50×9×2 мм), помещенные в чашки диаметром 6 см, объем среды 8 мл. Инкубировали в СО2 инкубаторе. Через сутки инкубации в CO2 инкубаторе при 37°С клетки отмывали в среде RPMI1640 и нагружали их R123, 0.5 мкг/мл в присутствии ингибитора транспортных белков циклоспорина А, 3 мкг/мл в среде RPMI1640, содержащей 5% эмбриональной сыворотки, в течение 60 мин при 37°С. После инкубации клетки трижды (по 10 мин) отмывали от красителя холодным (2°С) физиологическим раствором с 1% эмбриональной сывороткой. После отмывания и до момента измерения пластинки с клетками хранили в растворе Хэнкса с 0.5% сыворотки на льду. Отмытую пластинку с клетками ставили в кювету спектрофотометра MF44 Perkin-Elmer с раствором Хэнкса и 0.5% эмбриональной сывороткой, объем 3 мл, 37°С и определяли увеличение количества R123 в среде при постоянном перемешивании. Длины волн возбуждения и эмиссии 488 и 520 нм соответственно. В конце эксперимента для определения максимального количества R123 в клетках клетки разрушали добавлением в кювету 0,02% дигитонина ("Sigma", США).
При исследовании действия ингибиторов на выход R123 в кювету через несколько минут нормального выхода красителя добавляли ингибитор в необходимой концентрации. Определение контрольной и ингибированной констант скоростей выхода родамина на одной пластинке уменьшает ошибку определения их отношения, необходимого для получения значения R. На фиг.3 приведена кинетика увеличения R 123 в среде в контроле (1), после добавления циклоспорина А (2) и дигитонина (3). Общее количество родамина в клетках определяли по разнице уровней флуоресценции после добавления дигитонина и перед добавлением в кювету клеток. Относительное количество R123 в клетках (W) определяли по формуле: N=1-{It-I0/Imax-I0}, где It, I0, Imax - флуоресценция R123 в среде в моменты времени t, 0 и максимальная, после добавления дигитонина, соответственно. Как видно на фиг.4, количество R123 в клетках в контроле и после добавления ингибитора уменьшается по экспоненте, поскольку в полулогарифмическом масштабе эти кинетики описываются прямыми линиями. В данном примере Циклоспорин А, 1 мкг/мл в 3.8 раза в данном опыте снижал константу скорости выхода родамина 123: R=2.8.
Описанным выше методом определяли влияние заявленного гексапептида и для сравнения известного ингибитора МЛУ - циклоспорина А на выход R123 из клетки Нер-2. Влияние каждой концентрации агентов на выход R123 определяли в нескольких опытах. На фиг.5 приведены средние значения R с квадратичными отклонениями, для концентраций, где было больше 3 повторностей.
Как видно из фиг.5, гексапептид (ГП) максимально ингибирует выход R123 при оптимуме концентрации 1нг/мл. Величина R для гексапептида равняется 3.2. Аналогичное значение R для циклоспорина А достигается при концентрации, более чем в три тысячи раз большей, чем для заявленного гексапептида.
Таким образом, заявленное вещество - гексапептид обеспечивает преодоление множественной лекарственной устойчивости более чем в три тысячи раз эффективнее по сравнению с веществом по прототипу - циклоспорином А.
Пример 4
Онкологическая безопасность и безвредность заявляемого гексапептида.
Клетки рака гортани человека Нер-2 в среде DMEM с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки и 40 мкг/мл гентамицина рассевали в пенициллиновые флаконы по 200 тыс на флакон в объеме 2 мл. Гексапептид в дозе 1 мкг/мл добавляли через 3 час после посева клеток (когда они уже прикреплялись к стеклу) и оставляли в среде на весь оставшийся период инкубации. Через 3 суток после посева клетки открепляли от стекла трипсином и подсчитывали количество живых клеток, не окрашенных 0.04% раствором трипанового синего.
Таким образом, гексапептид не вызывает стимуляцию роста опухолевых клеток. Напротив, гексапептид повышает чувствительность клеток опухоли к цитостатическому препарату арсенату и тормозит выживаемость клеток Нер-2 (фиг.6). На фиг.7 приведены данные по действию гексапептида на рост клеток Нер-2.
Видно, что гексапептид в концентрации 1 мкг/мл практически не влияет на рост опухолевых клеток Нер-2 (фиг.7).
Таким образом, полученные данные демонстрируют, что гексапептид (заявленное вещество) является безопасным в отношении стимуляции опухолевого роста.
Пример 5
Больная Р., 37 лет. Клинический диагноз: рак шейки матки III стадии (Т3NX-1М0). Обследование больной включало клиническую и лабораторную оценку при поступлении и в период лечения. Общее состояние больной средней тяжести. На фоне практически нормальных значений показателей окислительно-антиокислительной системы у больной отмечена резкая иммуносупрессия по показателю процентного содержания основных субпопуляций Т-лимфоцитов. Процентное содержание CD3, CD4, CD8, СD16-позитивных клеток снижено относительно среднестатистических нормальных значений в два раза. Больная до начала противоопухолевого лечения получила курс из 5-кратного введения гексапептида по 1 мл 0.005% раствора подкожно ежедневно в течение 5 дней. Химиолучевое лечение проводили по схеме: 500 мг 5-фторурацила (суммарная доза 2500 мг). В течение всего курса химиолучевой терапии больная получала по 1 мл 0.005% раствора гексапептида (биопоэтина) 5 раз ежедневно. Через 2 дня после окончания 5-фторурацила больной проводили дистанционное облучение в разовой дозе 4 Гр на фоне внутривенного введения 30 мг циспластина в течение 3 дней (суммарная доза циспластина 90 мг). Далее продолжали лучевое лечение в режиме ежедневного мультифракционирования дозы. Облучение проводили до очаговой дозы 20 Гр на область первичного очага и зон регионарного метастазирования. Затем присоединяли внутриполостную гамма-терапию (10 фракций по 5 Гр), а дистанционное облучение продолжали на зоны параметрального метастазирования до суммарной дозы 44 Гр. Выраженных побочных и постлучевых реакций у больной не отмечено, что позволило обеспечить непрерывность курсов химиолучевой терапии. Явлений развития МЛУ не отмечено. В тоже время среднестатистические показатели химиолучевой терапии больных раком шейки матки III стадии демонстрируют появление специфических реакций, требующих длительного перерыва в терапии у 33-34%, развитие эпителиита в 78-87%, у 55-58% островчатый эпителиит и у 15-20% пленчатый эпителиит, требующий 4-5 месячного лечения. Существенным является и тот факт, что показатели иммунитета и общая формула крови после химиолучевой терапии у больной практически не изменились, в то время как в контрольной группе, не получавшей раствор гексапептида, после химиотерапии отмечается их дальнейшее снижение. В результате проведенного лечения у больной достигнута полная резорбция опухоли.
Таким образом, заявленное средство сокращает явления токсикоза, развитие побочных эффектов и лучевых реакций химиолучевой терапии.
Пример 6
Больной Н., 52 года.
Клинический диагноз: рак пищевода III стадии (T3-4N0-2MOP3). При поступлении общее состояние больного средней тяжести. Лабораторные показатели общей формулы крови без выраженных изменений. Отмечен значительный дисбаланс показателей окислительно-антиокислительной системы на фоне умеренной иммуносупрессии.
Состояние окислительно-антиокислительной системы у больных оценивали по интенсивности перекисного окисления липидов путем измерения в сыворотке крови концентрации малонового диальдегида (МДА, мкмоль/л) и эндогенных антиоксидантов: лактоферрина (ЛФ, мг/л), церулоплазмина (ЦП, усл. ед.) и антиокислительного фермента каталазы (Кат, усл. ед). Анализ процентного содержания основных субпопуляций Т-лимфоцитов проводили к поверхностным рецепторам CD3 (Т-лимфоциты), CD4 (Т-хелперы/индукторы), CD8 Т (супрессоры/цитотоксические лимфоциты), CD16 естественные киллеры), CD25 (активированные лимфоциты, экспрессирующие рецептор к интерлейкину-2), CD72 (В-лимфоциты). При поступлении больного в отделение химиотерапии отмечен значительный дисбаланс окислительно-антиокислительной системы: МДА - 3,5 (норма 3,0±0,1), КАТ - 450 (норма 576±48), ЦП - 0,59 (норма 0,53±0,04), ЛФ - 3,8 (норма 1,0±04). В тоже время показатели лимфоцитарного звена находились практически в пределах нормальных значений. Поскольку ЦП и ЛФ являются белками острой фазы воспаления, повышение их уровня в сыворотке крови отражает наличие воспалительного процесса, сопутствующего развитию рака пищевода. Перед проведением химиолучевого лечения больному назначали 5-кратное введение гексапептида внутримышечно ежедневно по 1 мл 0,1% раствора 5 раз в день в течение 5 дней. Комплексную химиолучевую терапию проводили по следующей схеме: 750 мг 5-фторурацила (5-ФУ) вводили внутривенно в течение 5 дней (суммарная доза 3750 мг); через 2 дня после окончания введения 5-ФУ больного облучали по схеме динамического фракционирования дозы в разовой дозе 4 Гр на фоне внутривенного введения циспластина в дозе 30 мг в течение 3 дней (суммарная доза циспластина 90 мг, СОД 12 Гр). В течение всего указанного периода химиолучевой терапии больной получал гексапептид в разовой дозе 100 мкг дважды в день (утром и вечером). С 11 дня продолжали лучевую терапию в режиме классического фракционирования дозы с разовой очаговой дозой 2 Гр (СОД 40 Гр). Выраженных побочных и постлучевых реакций у больного не отмечено, что позволило обеспечить непрерывность курсов химиолучевой терапии. В течение всего курса химиолучевой терапии показатели активности естественного клеточного и Т-лимфоцитарного звена иммунитета, продукция белков острой фазы воспаления существенно не менялись. Отмечено улучшение показателей окислительно-антиокислительной системы организма и снижение концентрации малонового диальдегида до 3,2 мкмоль/л. Симптомов МЛУ не отмечено. В результате проведенного лечения у больной раком пищевода III стадии достигнуто значительное улучшение общего состояния, сокращение явлений токсикоза, устранение побочных эффектов и лучевых реакций химиолучевой терапии полная резорбция опухоли.
Таким образом, заявленное средство сокращает явления токсикоза, развитие побочных эффектов и лучевых реакций химиолучевой терапии. В результате проведенного лечения у больного достигнута полная резорбция опухоли.
Наблюдение в течение 12 месяцев за больным, прошедшим курс лечения с применением заявленного средства, не выявили рецидива заболевания.
Пример 7
Больная П., 54 года.
Заболевание проявилось болями за грудиной, слабостью, похуданием. При обследовании на основании эндоскопии, рентгеноконтрастного исследования выявлен рак средне- и нижнегрудинных отделов пищевода, протяженностью около 10 см с метастатическим поражением региональных лимфатических узлов. Гистологическое исследование биоптата опухоли - плоскоклеточный рак. Перед проведением химиолучевого лечения больной назначали 5-кратное введение гексапептида в виде ректальных суппозиторий ежедневно по 5 мг 5 раз в день в течение 5 дней.
На первом этапе комбинированного лечения проведено два курса полихимиотерапии.
В течение всего периода химиолучевой терапии больная получала лечение заявленным средством в виде ректальных суппозиторий по 50 мкг дважды в день (утром и вечером).
В период проведения полихимиотерапии сильно выраженных явлений токсикоза не наблюдалось: отмечена умеренная нейтропения, снижение показателей Т-клеточного иммунитета, эпизодически диарея, тошнота, головокружение.
При контрольных исследованиях опухоль пищевода не определялась, значительно уменьшились размеры региональных лимфоузлов. Исследования гистологического и биоптического материала наличие опухолевых клеток не подтвердили. Гистологическое исследование биологического материала субтотальной резекции пищевода позволило выявить полный лечебный патоморфоз опухоли. В лимфатических узлах метастазов не выявлено.
Пример 8
Больная П., 1938 г.р., поступила с диагнозом: РМЖ T4cN2Mo с изъязвлением кожи молочной железы.
Из анамнеза: больная около 2-х лет, когда впервые заметила опухолевое образование в левой молочной железе, которое постепенно увеличивалось.
При поступлении: жалобы на наличие опухоли в левой груди с кровоточащим изъязвлением, общую слабость, головную боль, тошноту, боли в левой молочной железе.
Результаты обследования:
В левой молочной железе визуально на границе верхних квадрантов бугристое опухолевое образование в виде карбункула с изъязвлением в центре, с кровянистыми выделениями и неприятным запахом. На маммограммах: в левой молочной железе опухолевый узел более 10 см в диаметре с инфильтрацией кожи и деструкцией в центре (язвой). Маммосцинтиграфия: очаги гиперфиксации 99 Тс диаметром около 10 см в левой молочной железе и около 6 см в левой подмышечной области. По результатам ультразвукового исследования определяется округлое шаровидное образование с гипоэхогенными контурами диаметром 92 мм на границе верхних квадрантов левой молочной железы. Гистологически: опухолевые клетки низкодифференцированной аденокарциномы.
Заключение: рак молочной железы с распадом опухоли, метастаз в подмышечные лимфатические узлы слева.
На область левой молочной железы с двух тангенциальных встречных полей и фигурным полем на зоны регионарного лимфооттока слева начата лучевая терапия на линейном ускорителе (ЛУ-20-SL с энергией тормозного излучения 6 МЭВ) в режиме среднего фракционирования дозы; по 3 Гр в день 5 раз в неделю на область опухоли до суммарной дозы (СОД) 45 Гр, эквивалентной режиму обычного фракционирования по 2 Гр в день - СОД 60 Гр, и на зоны регионарного лимфооттока слева (надподключично-подмышечную и парастернальную зоны) по 3 Гр до СОД 33-36 Гр, эквивалентной 44-48 Гр обычного фракционирования.
Состояние больной после курса облучения удовлетворительное, опухолевое изъязвление в стадии рубцевания, выделений практически нет. Спустя 2 недели начата полихимиотерапия по схеме CMF, которая проводилась в течение 4-х недель 1 раз в неделю. В течение 5 дней до начала химиотерапии больная ежедневно получала гексапептид в виде интраназального дозированного спрея 5 раз в день по 100 мкг. Схема CMF включала в себя внутривенное капельное введение 1 г 5-фторурацила и 40 мг метотрексата и внутримышечное - 1 г циклофосфана. В период полихимиотерапии больная ежедневно получала гексапептид в виде инраназального дозированного спрея 5 раз в день по 100 мкг. Химиолучевое лечение больная переносила удовлетворительно: лейкоциты - 4,5×109, тромбоциты - 200×103/л. Больная выписана из клиники в удовлетворительном состоянии.
Повторный курс CMF. Больной было ведено внутривенно 40 мг метотрексата и 1 г 5-фторурацила и внутримышечно 1 г циклофосфана. Состояние после полихимиотерапии удовлетворительное. На месте изъязвления молочной железы сформировался рубец. Регионарные лимфатические узлы не определялись, молочная железа мягкая, свежих инфильтратов нет. На маммограммах опухолевый узел по сравнению с данными маммографии уменьшился в диаметре до 5 см. В дальнейшем начат курс полихимиотерапии по той же схеме и в тех же дозах. В течение 5 дней до начала химиотерапии больная ежедневно получала гексапептид в виде интраназального дозированного спрея 5 раз в день по 100 мкг. В период полихимиотерапии больная ежедневно получала гексапептид в виде интраназального дозированного спрея 5 раз в день по 100 мкг.
Больная была выписана из клиники под наблюдение онколога, а затем вновь госпитализирована для проведения 4-го курса полихимиотерапии. Состояние ее удовлетворительное, на месте язвы гладкий рубец, инфильтративных явлений нет, подмышечные и подключичные лимфатические узлы не определялись, правая молочная железа не изменена. На маммограммах опухолевый узел в виде фиброзной ткани уменьшился по сравнению с последними данными маммографии до 3.8 см. Клинический анализ крови в норме.
Начат 2-недельный курс химиотерапии по схеме CMF. В течение 5 дней до начала химиотерапии больная ежедневно получала гексапептид в виде интраназального дозированного спрея 5 раз в день по 100 мкг. В период полихимиотерапии больная ежедневно получала гексапептид в виде интраназального дозированного спрея 5 раз в день по 100 мкг. Полихимиотерапию больная переносила удовлетворительно: лейкоциты - 4,0×109, тромбоциты - 200×103/л.
При клинико-рентгенологическом обследовании (осмотр, маммография, УЗИ молочных желез и органов брюшной полости, рентгенография и томография легких и средостения, остеосцинтиграфия, клиническое и биохимическое исследование крови и мочи) данных за наличие рецидива опухоли в молочной железе и метастазов не получено.
Проведен 5 курс 2-недельный курс полихимиотерапии по схеме CMF, который больная перенесла хорошо. Развитие МЛУ не отмечено. В течение 5 дней до начала химиотерапии больная ежедневно получала гексапептид в виде интраназального дозированного спрея 5 раз в день по 50 мкг. В период полихимиотерапии больная ежедневно получала гексапептид в виде интраназального дозированного спрея 5 раз в день по 50 мкг
Состояние больной удовлетворительное. При клинико-рентгенологическом обследовании данных за продолженный рост опухоли не получено. Проведен снова 2-недельный курс полихимиотерапии по CMF, который больная по-прежнему перенесла удовлетворительно. Выписана под наблюдение районного онколога. На контрольном осмотре (через 15 месяцев от начала лечения) - без признаков рецидива заболевания.
Claims (4)
1. Средство для преодоления множественной лекарственной устойчивости, содержащее пептид и целевую добавку, отличающееся тем, что в качестве пептида оно содержит гексапептид структурной формулы: лизил-гистидил-глицил-лизил-гистидил-глицин.
2. Средство по п.1, отличающееся тем, что оно выполнено в форме раствора для подкожных и внутримышечных инъекций, а в качестве целевой добавки содержит аминоуксусную кислоту,
3. Средство по п.1, отличающееся тем, что оно выполнено в форме спрея для дозированного применения, а в качестве целевой добавки содержит аминоуксусную кислоту и бензалкония хлорид.
4. Средство по п.1, отличающееся тем, что оно выполнено в форме суппозитория, а в качестве целевой добавки содержит аминоуксусную кислоту, твин 80 (Полисорбат 80), воду для инъекций и твердый жир.
Priority Applications (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008146409/04A RU2434879C2 (ru) | 2008-11-25 | 2008-11-25 | Средство для преодоления множественной лекарственной устойчивости |
| DE112009003659T DE112009003659T5 (de) | 2008-11-25 | 2009-11-23 | Mittel zur Beseitigung einer Multiarzneimitelresistenz |
| PCT/RU2009/000639 WO2010062217A1 (ru) | 2008-11-25 | 2009-11-23 | Средство для преодоления множественной лекарственной устойчивости |
| GB1108788.9A GB2478456B (en) | 2008-11-25 | 2009-11-23 | Agent for eliminating multidrug resistance |
| US13/115,472 US20120129792A1 (en) | 2008-11-25 | 2011-05-25 | Agent for eliminating multidrug resistance |
| SM201100028T SMP201100028B (it) | 2008-11-25 | 2011-06-24 | Agente per eliminare la resistenza multifarmacologia |
| US14/853,529 US20160022762A1 (en) | 2008-11-25 | 2015-09-14 | Agent for Eliminating Multidrug Resistance |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008146409/04A RU2434879C2 (ru) | 2008-11-25 | 2008-11-25 | Средство для преодоления множественной лекарственной устойчивости |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008146409A RU2008146409A (ru) | 2010-05-27 |
| RU2434879C2 true RU2434879C2 (ru) | 2011-11-27 |
Family
ID=42225900
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008146409/04A RU2434879C2 (ru) | 2008-11-25 | 2008-11-25 | Средство для преодоления множественной лекарственной устойчивости |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20120129792A1 (ru) |
| DE (1) | DE112009003659T5 (ru) |
| GB (1) | GB2478456B (ru) |
| RU (1) | RU2434879C2 (ru) |
| SM (1) | SMP201100028B (ru) |
| WO (1) | WO2010062217A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2494742C1 (ru) * | 2012-08-10 | 2013-10-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова Дальневосточного отделения Российской академии наук (ТИБОХ ДВО РАН) | Средство, ингибирующее множественную лекарственную устойчивость опухолевых клеток |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11042047B1 (en) | 2014-08-22 | 2021-06-22 | Sunlight Aerospace Inc. | Mobile system incorporating flexible and tunable optically reflective skin and method of use |
| US9841616B1 (en) | 2014-08-22 | 2017-12-12 | Sunlight Photonics Inc. | Mobile system incorporating flexible and tunable anti-reflective skin and method of use |
| US9391700B1 (en) | 2015-06-16 | 2016-07-12 | Sunlight Photonics Inc. | Integrated optical receiver skin |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2157234C1 (ru) * | 1999-10-08 | 2000-10-10 | Лебедев Василий Вячеславович | Средство для лечения иммунодефицитных состояний |
| RU2157235C1 (ru) | 1999-10-08 | 2000-10-10 | Лебедев Василий Вячеславович | Средство для лечения иммунодефицитных состояний |
| CN101255189A (zh) * | 2008-04-07 | 2008-09-03 | 广东大华农动物保健品有限公司 | 一种动物疫苗免疫增强剂及其生产方法 |
-
2008
- 2008-11-25 RU RU2008146409/04A patent/RU2434879C2/ru active
-
2009
- 2009-11-23 GB GB1108788.9A patent/GB2478456B/en active Active
- 2009-11-23 WO PCT/RU2009/000639 patent/WO2010062217A1/ru active Application Filing
- 2009-11-23 DE DE112009003659T patent/DE112009003659T5/de not_active Ceased
-
2011
- 2011-05-25 US US13/115,472 patent/US20120129792A1/en not_active Abandoned
- 2011-06-24 SM SM201100028T patent/SMP201100028B/it unknown
-
2015
- 2015-09-14 US US14/853,529 patent/US20160022762A1/en not_active Abandoned
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Tutel'yan A.V. ET AL"Comparative study of antioxidant properties of immunoregulatory peptides", BULLETIN OF EXPERIMENTAL BIOLOGY AND MEDICINE, 2003, 136(2), 155-158. Тутельян А.В. и др. Прайминг фагоцитов и его применение в системе оценки специфической активности иммунорегуляторных соединений, Иммунология, 2004, №1, с.14-16. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2494742C1 (ru) * | 2012-08-10 | 2013-10-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова Дальневосточного отделения Российской академии наук (ТИБОХ ДВО РАН) | Средство, ингибирующее множественную лекарственную устойчивость опухолевых клеток |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SMAP201100028A (it) | 2011-09-09 |
| RU2008146409A (ru) | 2010-05-27 |
| WO2010062217A1 (ru) | 2010-06-03 |
| SMP201100028B (it) | 2012-01-18 |
| DE112009003659T5 (de) | 2012-10-11 |
| US20120129792A1 (en) | 2012-05-24 |
| GB201108788D0 (en) | 2011-07-06 |
| GB2478456B (en) | 2012-11-28 |
| GB2478456A (en) | 2011-09-07 |
| US20160022762A1 (en) | 2016-01-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2806634B2 (ja) | 前立腺癌，胃癌および乳癌に関連する腫瘍を抑制するための医薬製剤 | |
| US6632798B2 (en) | Methods for inhibiting angiogenesis | |
| CN103687624A (zh) | 靶向的聚合缀合物和其用途 | |
| CN102821777B (zh) | 神经丝肽用于神经胶质瘤的治疗的用途 | |
| RU2434879C2 (ru) | Средство для преодоления множественной лекарственной устойчивости | |
| EP3508221A1 (en) | Tumor-targeting photosensitizer-drug conjugate, method for preparing same and pharmaceutical composition for preventing or treating tumor containing same | |
| OA10698A (en) | Cytokine and hemopoietic factor endogenous production enhancer and methods of use thereof. | |
| CN112043834A (zh) | 一种负载顺铂的纤维蛋白胶复合体系 | |
| CN109692326A (zh) | 一种蜂毒脂质纳米颗粒的应用 | |
| CN102731517A (zh) | 喜树碱衍生物、其制备方法及其在制备治疗肿瘤药物中的应用 | |
| CN109700799A (zh) | 牛樟芝素及其微纳米颗粒在制备肿瘤免疫治疗药物中的应用 | |
| CN113274485A (zh) | 蝎毒多肽Smp24在制备抗肿瘤药物的应用 | |
| ES2315404T3 (es) | Uso de aplidina para el tratamiento de cancer de pancreas. | |
| CN101792484A (zh) | 含酪-异亮-甘-丝-精氨酸多肽的蒽环型衍生物 | |
| KR19990082064A (ko) | 피페라진 옥시란 유도체를 사용하여 신생 세포의 사멸을유도하는 방법 | |
| KR102694803B1 (ko) | A-노르-5α안드로스테인 화합물계 약물 및 항암제의 병용 | |
| ES2965179T3 (es) | Derivado polimérico soluble en agua de venetoclax | |
| CN105879040B (zh) | 聚天冬酰-rgdf-抗肿瘤药物复合物的制备和应用 | |
| RU2282438C1 (ru) | Средство, обладающее противоопухолевой активностью | |
| RU2682039C1 (ru) | Пептид, обладающий противоопухолевой и антиметастатической активностью, и готовая лекарственная форма на его основе | |
| CN111592580A (zh) | 一种具有免疫检查点ctla-4抑制活性的多肽及其应用 | |
| CN107753476B (zh) | 含4-乙酰基-安卓奎诺-b的组合物用于制备抑制卵巢癌细胞生长的药物的用途 | |
| EP1325026B1 (en) | Tetrapeptide stimulating functional activity of hepatocytes and its therapeutical use | |
| CN109762042B (zh) | 一种治疗癌症的药物、其合成方法和应用 | |
| JPWO2006035515A1 (ja) | 膀胱表在性癌の治療又は予防用医薬組成物、及びその利用 |