RU2368390C2

RU2368390C2 - Применение кальцитонина при остеоартрите

Info

Publication number: RU2368390C2
Application number: RU2006105479/14A
Authority: RU
Inventors: Мойзе АЦРИА (CH); Мойзе АЦРИА; Клаус КРИСТИАНСЕН (DK); Клаус КРИСТИАНСЕН; Саймон Дейвид БЕЙТМАН (US); Саймон Дейвид БЕЙТМАН; Шоуфен ЛИ (DK); Шоуфен ЛИ
Original assignee: Новартис Аг; Нордик Байосайенс А/С
Priority date: 2003-07-23
Filing date: 2004-07-22
Publication date: 2009-09-27
Also published as: EP1651249A1; NZ544645A; PL2316473T3; HK1089935A1; AU2004262906B2; NO20060890L; MXPA06000807A; KR20060034298A; US20140271735A1; ES2398237T3; EP1651249B1; TWI343816B; EP2316473B1; TNSN06022A1; US7749954B2; KR101070036B1; PT1651249E; EP2316473A1; JP4716987B2; US20100278881A1

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к артрологии, и касается предупреждения и/или лечения остеоартрита. Для этого пациенту перорально вводят композицию, включающую 0,4-2,5 мг кальцитонина в свободной форме или в форме соли и агент доставки, выбранный из группы, включающей N-(5-хлорсалицилоил)-8-аминокаприловой кислоты (5-CNAC), N-(10-[2-гидроксибензоил]амино)декановой кислоты (SNAD), N-(8-[2-гидроксибензоил]амино)каприловой кислоту (SNAC) и их мононатриевые и динатриевые соли, этанольные сольваты и моногидраты их натриевых солей, а также любые их комбинации. Такое введение кальцитонина в указанных композициях и дозах позволяет создать определенные условия биодоступности и пика его концентрации в плазме, что обеспечивает уменьшение разрушения хряща и тем самым эффективное лечение и профилактику остеоартрита. 7 з.п.ф-лы, 8 табл.

Description

Настоящее изобретение относится к новому применению кальцитонина при остеоартрите и способам лечения и/или предупреждения остеоартрита у млекопитающих, в частности у человека.

Кальцитонины настоящего изобретения, например кальцитонины лосося, угря (Asu 1-7) или человека, являются длинноцепочечными пептидными гормонами, секретируемыми парафолликулярными клетками щитовидной железы у млекопитающих и ультимобранхиальной железой у птиц и рыб. Кальцитонин в основном известен в качестве мощного ингибитора остеокластной резорбции кости, следствием которой является присоединение остеокластов и ферментативное разрушение. Также было обнаружено, что интраназальная форма кальцитонина лосося эффективна при ювенильном идиопатическом артрите у людей (Siamopoulou А. и др., Calcif Tissue hit 69, 2001, cc.25-30) и для предупреждения костной эрозии и потери костной массы при ревматоидном артрите у людей (Sileghem A., Annals of Rheumatic Diseases 51, 1992, cc.761-764). Процесс разрушения связывает синтез различных протеаз и металлопротеиназ, активацию инактивированных проферментов и ингибирование активных ферментов (Leloup G, J Bone Miner Res, 9, 1994, cc.891-902). Известно, что кальцитонин индуцирует ретракцию остеокластов (Zheng М.Н. и др. Exper Mole Pathol, 57,1992, cc.105-115) и влияет, по меньшей мере, на некоторые стадии ферментативного процесса резорбции кости (Einhorn Т.А. и др., din Orthop 262, 1991, cc.286-297). Опубликовано несколько исследований воздействия кальцитонина на суставной хрящ. Было обнаружено, что кальцитонин in vitro стимулирует синтез протеогликана и коллагена в эпифизарном хряще животных (Baxter и др. Endocrinology 114, 1984, cc.1196-1202), а также у кроликов и людей (Franchimont Р, J Clin End Metab 69, 1989, cc.259-266). При исследовании роли кальцитонина в лечении экспериментального артрита были получены противоречивые результаты. Например, было обнаружено, что кальцитонин предупреждает деструкцию хрящей у кроликов, которых лечили стероидами, частичной менискэктомией или иммобилизацией суставов (Badurski JE и др., Lab Invest 49, 1991, cc.27-34), но не было обнаружено воздействия на другой модели менискэктомии (Colombo и др., Arthritis Rheum 26, 1983, сс.1132-1139). Кроме того, продолжается обсуждение относительного значения изменений в хрящевой и костной ткани при начальной стадии и при прогрессировании остеоартрита. По сведениям авторов, пока еще не была показана эффективность кальцитонина при исследованиях остеоартрита у людей.

В соответствии с настоящим изобретением неожиданно было обнаружено, что кальцитонины, например кальцитонин лосося, угря (Asu 1-7) или человека, применимы для предупреждения и лечения остеоартрита у млекопитающих, в том числе у человека. В частности, при пероральной доставке кальцитонина, например кальцитонина лосося или кальцитонина угря (Asu 1-7), согласно описанию настоящего изобретения показан такой эффект. Указанная пероральная доставка кальцитонина обычно является способом выбора, поскольку она удобна, относительно проста и обычно безболезненна, а потому более подходит пациенту по сравнению с другими способами доставки.

В соответствии с конкретными находками настоящего изобретения в нем описывается:

1.1. Способ предупреждения или/и лечения остеоартрита у пациента, нуждающегося в этом, заключающийся в введении указанному пациенту терапевтически эффективного количества кальцитонина, например кальцитонина лосося, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме пероральной доставки;

1.2. Способ предупреждения или/и лечения остеоартрита у пациента, нуждающегося в этом, заключающийся в введении указанному пациенту терапевтически эффективного количества кальцитонина, например кальцитонина лосося, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме пероральной доставки, согласно которому терапевтически эффективное количество кальцитонина доставляется перорально в композиции, включающей кальцитонин и агент доставки кальцитонина;

1.3. Способ предупреждения или/и лечения остеоартрита у пациента, нуждающегося в этом, заключающийся в введении указанному пациенту терапевтически эффективного количества кальцитонина, например кальцитонина лосося, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме пероральной доставки, согласно которому терапевтически эффективное количество кальцитонина доставляется перорально в композиции, включающей кальцитонин, конъюгированный с молекулой полимера;

1.4. Способ подавления резорбции и нормализации обновления субхондральной кости у пациента, нуждающегося в этом, заключающийся в введении указанному пациенту терапевтически эффективного количества кальцитонина, например кальцитонина лосося, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме пероральной доставки;

1.5. Способ сохранения и стимуляции хряща посредством прямого или непрямого воздействия на хондроциты пациента, нуждающегося в этом, заключающийся в введении указанному пациенту терапевтически эффективного количества кальцитонина, например кальцитонина лосося, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме пероральной доставки;

1.6. Способ подавления активности фосфолипазы А2 и/или коллагеназы у пациента, нуждающегося в этом, заключающийся в введении указанному пациенту терапевтически эффективного количества кальцитонина, например кальцитонина лосося, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме пероральной доставки;

1.7. Способ стимулирующего воздействия на синтез глюкозаминогликана и/или протеогликана у пациента, нуждающегося в этом, заключающийся в введении указанному пациенту терапевтически эффективного количества кальцитонина, например кальцитонина лосося, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме пероральной доставки;

1.8. Способ воздействия на неоднородность плотности или регидности субхондральной кости у пациента, нуждающегося в этом, заключающийся в введении указанному пациенту терапевтически эффективного количества кальцитонина, например кальцитонина лосося, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме пероральной доставки;

1.9. Способ воздействия на воспалительный процесс, приводящий к ослаблению боли при движении и связанных симптомов (например, припухлость колена, изменение угла сгибания колена, регидность из-за набухания) у пациента, нуждающегося в этом, заключающийся в введении указанному пациенту терапевтически эффективного количества кальцитонина, например кальцитонина лосося, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме пероральной доставки;

2.0. Способ понижения дегенеративного изменения в суставе у пациента, нуждающегося в этом, заключающийся в введении указанному пациенту терапевтически эффективного количества кальцитонина, например кальцитонина лосося, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме пероральной доставки;

2.1. Способ, подобный указанным выше, заключающийся в совместном введении терапевтически эффективного количества кальцитонина, например кальцитонина лосося, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме для пероральной доставки, и второго лекарственного вещества, которое является ингибитором костной резорбции, лекарственным средством для формирования кости или лекарственным средством для снижения боли, в свободной форме или в форме соли.

В настоящем изобретении также предусматривается особый дозовый диапазон для кальцитонина, например кальцитонина лосося, который является эффективным и хорошо переносимым, т.е. безопасным для принимающего его пациента. Предпочтительным является диапазон от 0,4 до 2,5 мг кальцитонина лосося для пациента, например, человека, например, средней массы 70 кг. Более предпочтительными являются дозы, близкие 1 мг, например от 0,8 до 1,2 мг. Также предпочтительными являются дозы ниже 1 мг, но выше 0,4 мг. Еще более предпочтительна доза, примерно равная 1 мг, например, составляющая 1 мг. Самой предпочтительной является доза, примерно равная 1 мг, например от 0,8 до 1,2 мг, введенная один раз в сутки пациенту, нуждающемуся в этом. Фармацевтические композиции, включающие указанные дозы согласно настоящему изобретению, могут быть композициями, указанными в примерах, но предпочтительно они могут быть пероральными композициями, например композициями, описанными в примере 8. Дозовый режим может заключаться в однократном или двукратном суточном введении, предпочтительно одном введении утром и одном введении вечером.

2.2. Способ предупреждения или/и лечения остеоартрита у пациента, нуждающегося в этом, заключающийся в введении указанному пациенту фармацевтической композиции, включающей от 0,4 до 2,5 мг, предпочтительно от 0,8 до 1,2 мг, наиболее предпочтительно примерно 1 мг кальцитонина, например кальцитонина лосося.

2.3. Фармацевтическая композиция, включающая от 0,4 до 2,5 мг, предпочтительно от 0,8 до 1,2 мг, наиболее предпочтительно примерно 1 мг кальцитонина, например кальцитонина лосося.

2.4. Применение кальцитонина, например кальцитонина лосося, для получения лекарственного средства для лечения и/или предупреждения остеоартрита, в котором указанный кальцитонин содержится в фармацевтической композиции, включающей от 0,4 до 2,5 мг, предпочтительно от 0,8 до 1,2 мг, наиболее предпочтительно примерно 1 мг кальцитонина, например кальцитонина лосося.

2.5. Фармацевтическая композиция для лечения или/и предупреждения остеоартрита, включающая от 0,4 до 2,5 мг, предпочтительно от 0,8 до 1,2 мг, наиболее предпочтительно примерно 1 мг кальцитонина, например кальцитонина лосося.

Подходящими вторыми лекарственными веществами могут быть кальцитонин различного происхождения, например кальцитонин лосося, угря (Asu 1-7) или человека, аналог или производное кальцитонина, стероидный гормон, например эстроген, в частности агонист эстрогена или комбинация эстрогена-гестагена, SERM (селективный модулятор рецептора эстрогена), например ралоксифен, лазофоксифен, TSE-424, FC1271, тиболон (продукт Livial ®), витамин D или его аналог, или РТН, фрагмент РТН, или производное РТН, например РТН (1-84), РТН (1-34), РТН (1-36), РТН (1-38), РТН (1-31)NH2 или PTS 893, бисфосфонаты (например, алендронат, ризедронат, золедроновая кислота, ибандронат); ингибиторы протеиназы, например, ингибитор катепсина, предпочтительно ингибитор катепсина К; релизоры РТН; SARM (селективные молекулы рецептора андрогена); ингибиторы ММР (ингибиторы маталлопротеазы), ранелат стронция, ингибиторы СОХ-2, например, люмиракоксиб (продукт Prexige®), целекоксиб (продукт Celebrex®), рофекоксиб (продукт Vioxx®), вальдекоксиб (продукт Вextra®), эторикоксиб (продукт Arcoxia®) или смеси ингибиторов СОХ-1 и СОХ-2, например диклофенак.

Понятия «совместное введение» или «комбинированное введение» и им подобные, применяемые в настоящем изобретении, означают одновременное введение выбранных терапевтических агентов одному пациенту, а также режимы лечения, при которых агенты не обязательно вводятся одним и тем же способом введения или в одно и то же время.

В другом варианте настоящего изобретения также предусматривается:

3. Кальцитонин, например кальцитонин лосося, угря (Asu 1-7) или человека, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме для пероральной доставки, для применения в одном из способов, описанных выше в п.п. с 1.1 по 2.2; или

4. Кальцитонин, например кальцитонин лосося, угря (Asu 1-7) или человека, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме для пероральной доставки, для использования при получении лекарственного средства для одного из показаний согласно приведенному выше описанию в п.п. с 1.1 по 2,2; или

5. Фармацевтическая композиция для использования согласно одному из показаний, приведенных выше в п.п. с 1.1 по 2.2, включающая кальцитонин, например кальцитонин лосося, угря (Asu 1-7) или человека, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме для пероральной доставки, вместе с одним или несколькими его фармацевтически приемлемыми растворителями или носителям.

6. Фармацевтическая комбинация, включающая:

а) первый агент, являющийся кальцитонином, например лосося, угря (Asu 1-7) или человека, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в фармацевтически приемлемой форме для пероральной доставки, и

б) сопутствующий агент, являющийся ингибитором костной резорбции, формирующим кость лекарственным средством или снижающим боль агентом, например, согласно описанному выше.

7. Набор частей для использования с целью предупреждения и/или лечения остеоартрита, включающий:

Понятие «пациент», используемое в настоящем изобретении, означает пациента, нуждающегося в лечении остеоартрита или в его предупреждении, или данное понятие в любом из способов, описанных выше в п.п. с 1.1 по 2.2, относится к упоминаемым в них млекопитающим, например, грызунам, коровам, свиньям, собакам, кошкам и приматам, в частности человеку.

Понятие «фармацевтическая комбинация», применяемое в настоящем изобретении, означает продукт, который образуется в результате смешивания или комбинирования более одного ингредиента и включает и фиксированные, и нефиксированные комбинации действующих ингредиентов. Понятие «фиксированная комбинация» означает, что действующие ингредиенты, например кальцитонин лосося и сопутствующий агент, оба вводятся пациенту одновременно в форме единого объекта или дозы. Под понятием «нефиксированная комбинация» подразумевается, что действующие ингредиенты, например кальцитонин лосося и сопутствующий агент, оба вводятся пациенту в виде отдельных объектов совместно, одновременно или последовательно без специальных временных ограничений, в которых с помощью таких введений обеспечивают эффективные уровни двух соединений в организме пациента.

Предпочтительно кальцитонин, например кальцитонин лосося, в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли, вводится совместно с ингибитором протеазы, например, ингибитором катепсина, например, ингибитором катепсина K.

Полезность кальцитонина, например кальцитонина лосося, в свободной форме или в форме соли, предпочтительно в форме фармацевтически приемлемой для пероральной доставки, при использовании любым из описанных способов по п.п.1.1-1.10, может быть продемонстрирована методами с применением экспериментальных животных, а также клиническими исследованиями, например, в соответствии со способом, описанным ниже в примере Б.

Если фармакологически действующий агент является кальцитонином лосося, необходимая доза может варьировать в зависимости, например, от организма, природы и тяжести состояния, подвергаемого лечению. Однако обычно удовлетворительные результаты могут быть получены системно при суточных дозах примерно от 0,5 мкг/кг до примерно 10 мкг/ кг массы тела животного, предпочтительно от 1 мкг/кг до примерно 6 мкг/кг массы тела. К фармацевтически приемлемым неактивным эксципиентам, которые применяются в составе кальцитонина, например в пероральном составе кальцитонина, могут относиться полимеры и неактивные соединения, которые, например, способствуют переработке или получению твердых пероральных дозовых форм, рассматриваемых в настоящем изобретении, или могут способствовать высвобождению твердой пероральной композиции в среде желудочно-кишечного тракта. К фармацевтически неактивным ингредиентам, указанным выше, например, необязательно относятся кросповидоны и повидоны, которые могут быть любым кросповидоном и повидоном. Кросповидон является синтетическим с поперечными сшивками гомополимером N-винил-2-пирролидоном, также называемым 1-этенил-2-пирролидоном, с молекулярной массой 1000000 или более. Коммерчески доступные кросповидоны, включая Polyplasdone XL, Polyplasdone XL-10, Polyplasdone INF-10, которые могут быть приобретены на фирме ISP, Kollidon CL и на фирме BASF Corporation. Предпочтительным кросповидоном является Polyplasdone XL. Повидон является синтетическим полимером, состоящим из линейных групп 1-винил-2-пирролидона и имеющим молекулярную массу обычно от 2500 до 3000000. К коммерчески доступным повидонам относятся продукты Kollidon K-30, Kollidon K-90F, производимые фирмой BASF Corporation, а также продукты Plasdone К-30 и Plasdone K-29/32, производимые фирмой ISP. Выше упоминалось, что кросповидоны и повидоны коммерчески доступны. Другим вариантом является синтез этих соединений известными способами. Кросповидон, повидон или их комбинация обычно содержатся в композиции в количестве от 0,5 до 50 мас.% относительно общей массы фармацевтической композиции, предпочтительно в количестве от 2 до 25 мас.%, более предпочтительно от 5 до 20 мас.% относительно общей массы фармацевтической композиции.

Агенты доставки, применимые в настоящем составе, например в пероральном составе, могут быть любыми агентами, пригодными для доставки определенного фармакологически действующего агента. Подходящими агентами доставки являются любые из модифицированных аминокислот, описанных в упоминавшемся выше патенте US 5866536, или любые из модифицированных аминокислот, описанных в упоминавшемся выше патенте US 5773647, или любые их комбинации. Содержание упоминавшихся выше патентов US 5773647 и 5866536 включено в настоящее описание в виде ссылок на их целостность. Кроме того, агентом доставки может быть динатриевая соль любой из вышеупомянутых модифицированных аминокислот, а также их этанольных сольватов и гидратов. К подходящим соединениям относятся соединения формулы I

в которой

R¹, R², R³ и R⁴ независимо обозначают водород, -OH, -NR⁶R⁷, галоген, С₁-С₄алкил или С₁-С₄алкокси;

R⁵ обозначает замещенный или незамещенный С₂-С₁₆алкилен, замещенный или незамещенный С₂-С₁₆алкенилен, замещенный или незамещенный C₁-С₁₂алкил(арилен) или замещенный или незамещенный арил(C₁-С₁₂алкилен); и

R⁶ и R⁷ независимо обозначают водород, кислород или С₁-С₄алкил, а также их гидраты и спиртовые сольваты. Соединения формулы I, а также их динатриевые соли и их спиртовые сольваты и гидраты, описаны в WO 00/059863 наряду со способами их приготовления.

Динатриевая соль может быть приготовлена из этанольного сольвата путем выпаривания или высушивания этанольного сольвата способами, известными в данной области, для образования безводной динатриевой соли. Высушивание обычно проводят при температуре примерно от 80 до примерно 120°С, предпочтительно примерно от 85 до примерно 90°С и наиболее предпочтительно примерно при 85°С. Стадия высушивания обычно проводится при давлении 26 ммHg или выше. Безводная динатриевая соль обычно содержит менее примерно 5 мас.% этанола и предпочтительно менее примерно 2 мас.% этанола от 100% общей массы безводной динатриевой соли. Динатриевая соль агента доставки также может быть получена приготовлением суспензии агента доставки в воде и внесением двух молярных эквивалентов водного гидроксида натрия, алкоксида натрия или им подобных соединений. К подходящим алкоксидам натрия относятся, но ими не ограничиваются, метоксид натрия, этоксид натрия и их комбинации. Еще одним способом приготовления динатриевой соли является взаимодействие агента доставки с одним молярным эквивалентом гидроксида натрия для получения динатриевой соли. Динатриевая соль может быть выделена в качестве твердого соединения путем концентрирования раствора, содержащего динатриевую соль, до густой пасты методом вакуумной отгонки. Эта паста может быть высушена в вакуумном шкафу для получения динатриевой соли агента доставки в виде твердого соединения. Твердое соединение также может быть выделено путем распыления, которое обеспечивает высушивание водного раствора динатриевой соли. Агенты доставки могут приготовляться способами, известными в данной области, например, упоминавшимися выше и описанными в US 5773647 и US 5866536. К этанольным сольватам, описанным и упоминавшимся выше в WO 00/059863, относятся, но ими не ограничиваются, молекулярный или ионный комплекс молекул или ионов этанольного сольвента с молекулами или ионами динатриевой соли агента доставки. Обычно этанольный сольват содержит примерно одну молекулу этанола или ион на каждую молекулу динатриевой соли агента доставки. Этанольный сольват динатриевой соли агента доставки может приготовляться путем растворения агента доставки в этаноле. Обычно каждый грамм агента доставки растворяют примерно в 1-50 мл этанола и, главным образом, примерно в 2-10 мл этанола. Раствор агента доставки/этанола затем подвергается взаимодействию с молярным избытком натрийсодержащей соли, например мононатриевой соли, относительно агента доставки, т.е. на каждый моль агента доставки приходится более одного моля катионов натрия, что приводит к образованию этанольного сольвата. К подходящим мононатриевым солям относятся, но ими не ограничиваются, гидроксид натрия; алкоксиды натрия, например метоксид натрия и этоксид натрия; и любые указанные выше комбинации. Предпочтительно, по меньшей мере, два мольных эквивалента мононатриевой соли добавляется к раствору этанола, т.е. на каждый моль агента доставки приходится, по меньшей мере, примерно два моля катионов натрия. Обычно реакция проводится при температуре равной или ниже рефлюксной температуры смеси, например, при температуре окружающего воздуха. Затем этанольный сольват восстанавливают способами, известными в данной области, например, концентрированием образуемой суспензии сухой перегонкой, охлаждением концентрируемой суспензии и фильтрацией твердого соединения. Восстанавливаемое твердое соединение затем может быть высушено в вакууме для получения этанольного сольвата. Гидраты динатриевых солей агентов доставки могут быть приготовлены высушиванием этанольного сольвата для образования безводной динатриевой соли согласно описанному выше и гидратированием безводной динатриевой соли. Предпочтительно формируется моногидрат динатриевой соли. Поскольку безводная динатриевая соль очень гигроскопична, гидраты образуются под воздействием атмосферной влаги. Обычно стадия гидратирования проводится при температуре от примерно равной температуре окружающего воздуха и до температуры, примерно равной 50°С, предпочтительно от температуры окружающего воздуха и до температуры примерно 30°С, в атмосфере, содержащей, по меньшей мере, 50% относительной влажности. В другом варианте безводная динатриевая соль может быть гидратирована паром. Предпочтительными агентами доставки являются N-(5-хлоросалицилоил)-8-аминокаприловая кислота (5-CNAC), N-(10-[2-гидроксибензоил]амино)декановая кислота (SNAD), N-(8-[2-гидроксибензоил]амино)каприловая кислота (SNAC), а также их мононатриевая и динатриевая соли, этанольные сольваты их натриевых солей, моногидраты их натриевых солей и любые их комбинации. Наиболее предпочтительным агентом доставки является динатриевая соль 5-CNAC и ее моногидрат. Предпочтительно динатриевая соль присутствует в количестве, превышающем 90 мас.% от общей массы 5-CNAC, присутствующей в композиции. Агенты доставки, 5-CNAC, SNAD и SNAC, очень хорошо растворяются в воде и почти полностью, т.е. более чем 90%, адсорбируются в желудочно-кишечном тракте, независимо от того, были ли они проглочены в микронизированной или грубой форме. Однако неожиданно было обнаружено, что если в композиции используется микронизированная форма одного из этих носителей, адсорбция и попадание в кровяное русло фармакологически активного агента данной композиции происходит более полно. Таким образом, применение микронизированного носителя является необходимым элементом настоящего изобретения. Под микронизированной формой носителя, используемого для приготовления твердой пероральной дозовой формы настоящего изобретения, подразумевается носитель, который при добавлении к смеси настоящей композиции фармакологически активного агента и фармацевтически неактивных ингредиентов подразумевается форма носителя со средним размером частиц менее 40 мкм. Желательно, чтобы носитель настоящего изобретения был в микронизированной форме, средний размер частиц которой составляет менее 20 мкм. Более желательно, если носитель настоящего изобретения в микронизированной форме, со средним размером частиц менее 10 мкм. Микронизированные формы носителя настоящего изобретения могут быть приготовлены его измельчением в шлифовальной мельнице, пригодной для измельчения фармацевтических ингредиентов, в том числе для измельчения фармацевтических ингредиентов и/или носителей до микронизированных частиц тонкого и однородного размера. Примером такой шлифовальной мельницы является воздушная реактивная мельница Gem T ® (фирма Copley Scientific, Ltd., Ноттингем, Великобритания). Затем тонкоизмельченный носитель либо отдельно, либо тонкоизмельченный носитель вместе с любой комбинацией тонкоизмельченных дополнительных ингредиентов настоящего изобретения могут быть просеяны, например, через сито с подходящими размерами отверстий, которые позволяют отобрать только те ингредиенты, которые имеют требуемый размер частиц, и собирают для использования в настоящем изобретении. Фармацевтические композиции настоящего изобретения обычно содержат эффективное для доставки количество одного или нескольких агентов доставки, т.е. количество, достаточное для доставки действующего агента, вызывающего желаемый эффект. Обычно агент доставки присутствует в количестве от 2,5 до 99,4 мас.%, более предпочтительно от 25 до 50 мас.%.

Предпочтительно кальцитонин, например кальцитонин лосося, в свободной форме или в форме соли, доставляется в составе фармацевтической композиции, включающей кальцитонин и агент доставки кальцитонина. Более предпочтительно указанная фармацевтическая композиция включает агент доставки, выбранный из группы, содержащей 5-CNAC, SNAD и SNAC. Более предпочтительно указанная фармацевтическая композиция включает агент доставки, выбранный из группы, содержащей динатриевую соль 5-CNAC, динатриевую соль SNAD и динатриевую соль SNAC. Более предпочтительно указанная фармацевтическая композиция включает агент доставки в микронизированной форме.

Согласно другому варианту осуществления настоящего изобретения кальцитонин может доставляться перорально также с помощью других технологий, например, подобных одной из описанных в WO 94/26778; US 5359030; US 5438040; US 5681811; US 6191105; US 6309633; US 6380405; US 6436990; US 6458776 и US 6479692 (содержание которых приводится в настоящем изобретении в виде ссылок на их сущность). Вкратце, такие пероральные составы обычно относятся к конъюгационно стабилизированным (поли)пептидным и белковым композициям. Более конкретно, такие формы пероральной доставки связываются в одном общем композиционном объекте с ковалентно конъюгированными кальцитониновыми комплексами, в которых кальцитонин является ковалентно связанным с одним или несколькими молекулами полимера, инкорпорированного в качестве составной части его гидрофильной части молекулы, например линейного полиалкиленгликоля, и в котором указанный полимер включает липофильную часть молекулы в качестве своей составной части. Согласно одному из вариантов осуществления настоящего изобретения подобные формы пероральной доставки относятся к физиологически активной композиции кальцитонина, включающей физиологически активный пептид, ковалентно связанный с полимером, включающим (i) линейную полиалкиленгликолевую часть и (ii) липофильную часть, в которой пептид, линейная полиалкиленгликолевая часть и липофильная часть конформационно аранжированы относительно друг друга таким образом, что физиологически активный пептид в композиции физиологически активного кальцитонина имеет повышенную in vivo устойчивость к ферментативному разрушению по сравнению с одним физиологически активным кальцитонином (т.е. в неконъюгированной форме, исключающей связывание с полимером). Согласно другому варианту такие формы пероральной доставки относятся к композиции физиологически активного кальцитонина трехмерной конформации, включающей физиологически активный кальцитонин, ковалентно связанный с полисорбатным комплексом, включающим (i) линейную полиалкиленгликолевую часть молекулы и (ii) липофильную часть молекулы, в котором физиологически активный кальцитонин, линейная полиалкиленгликолевая часть молекулы и липофильная часть молекулы конформационно аранжированы относительно друг друга таким образом, что (а) липофильная часть молекулы с внешней стороны представляет трехмерную конформацию и (б) физиологически активный кальцитонин в композиции физиологически активного кальцитонина обладает in vivo повышенной устойчивостью к ферментативному разрушению по сравнению с одним физиологически активным кальцитонином. Согласно еще одному объекту настоящего изобретения такие пероральные формы относятся к мультилигандному конъюгированному кальцитониновому комплексу, включающему триглицеридную каркасную часть молекулы, имеющую: биоактивный кальцитонин, ковалентный связанный с триглицеридной каркасной частью молекулы через полиалкиленгликолевую спейсерную группу, связанную с атомом углерода триглицеридной каркасной части молекулы; и, по меньшей мере, одну жирнокислотную часть молекулы, ковалентно присоединенную либо непосредственно к атому углерода триглицеридной каркасной части молекулы, либо ковалентно соединенную через полиалкиленгликолевую спейсерную часть молекулы. В таком мультилигандном конъюгированном кальцитониновом комплексе d и В атомы углерода триглицеридной биоактивной части молекулы могут содержать жирнокислотные части, присоединенные ковалентным связыванием либо непосредственно, либо опосредованно ковалентным связыванием через полиалкиленгликолевые спейсерные части молекулы. В другом варианте настоящего изобретения жирнокислотные части молекулы могут быть ковалентно соединены либо непосредственно, либо через полиалкиленгликолевую спейсерную часть молекулы к а и d атомам углерода триглицеридной каркасной части молекулы, с биоактивным кальцитонином, ковалентно связанным с 13-м атомом углерода триглицеридной каркасной части молекулы, либо непосредственно ковалентно, либо опосредованно связана через полиалкиленовую спейсерную часть молекулы. В таком мультилигандном конъюгированном кальцитониновом комплексе может быть полезным ковалентное связывание биоактивного кальцитонина с триглицеридной модифицированной каркасной частью молекулы через алкильные спейсерные группы, или, в другом варианте, другие приемлемые спейсерные группы в рамках охвата настоящего изобретения. В контексте настоящего изобретения приемлемость спейсерных групп относится к стерическим, композиционным и концевым применениям специфических приемлемых характеристик. Еще одно свойство таких пероральных форм доставки связано с полисорбатным комплексом, представляющим полисорбатную часть молекулы, включающую триглицеридный каркас и функциональные группы, включая: (i) жирнокислотную группу; и (ii) полиэтиленгликолевую группу, имеющую физиологически активную часть молекулы, ковалентно связанную, например, с подходящей функциональностью полиэтиленгликолевой группы.

Такое ковалентное связывание может быть либо прямым, например, с гидроксильными концевыми группами полиэтиленгликолевой группы, или, напротив, ковалентное связывание может быть непрямым, например, за счет реакционноспособного блокирования гидроксиконцов полиэтиленгликолевой группы с концевой карбоксифункциональной спейсерной группой, таким образом, что образующаяся блокированная полиэтиленгликольная группа обладает концевой карбоксифункциональностью, с которой физиологически активная часть молекулы может быть ковалентно связана. Такие формы пероральной доставки связаны с другой особенностью стабильного водорастворимого конъюгированного кальцитонинового комплекса, включающего физиологически активный кальцитонин, ковалентно связанный с физиологически совместимой полиэтиленгликолевой модифицированной гликолипидной части молекулы. В таком комплексе физиологически активный кальцитонин может быть ковалентно связан с физиологически совместимой полиэтиленгликолевой модифицированной гликолипидной частью молекулы лабильной ковалентной связью с тройной аминокислотной группой полипептида. Физиологически совместимая полиэтиленгликолевая модифицированная гликолипидная часть молекулы может выгодно включать полисорбатный полимер, например, полисорбатный полимер, включающий группы сложного эфира жирной кислоты, выбранные из группы, включающей монопальмитат, дипальмитат, монолаурат, дилаурат, трилаурат, моноолеат, диолеат, триолеат, моностеарат, дистеарат и тристеарат. В таком комплексе физиологически совместимая полиэтиленгликолевая модифицированная гликолипидная часть молекулы может соответствующим образом включать полимер, выбранный из группы, включающей полиэтиленгликолевые простые эфиры жирных кислот и полиэтиленгликолевые сложные эфиры жирных кислот, в которых жирные кислоты, например, включают жирные кислоты, выбранные из группы, содержащей лауриновую, пальмитиновую, олеиновую и стеариновую кислоты. В приведенном выше комплексе физиологически активный кальцитонин может в качестве иллюстрации включать кальцитонин, выбранный из группы, включающей инсулин, кальцитонин, АСТН, глюкагон, соматостатин, соматотропин, соматомедин, паратиреоидный гормон, эритропоэтин, гипоталамические факторы высвобождения, пролактин, гормоны стимулирования щитовидной железы, эндорфины, энкефалины, вазопрессин, опиоиды неприродного происхождения, супероксиддисмутазу, интерферон, аспарагиназу, аргиназу, аргининдеаминеазу, аденозиндеаминазную рибонуклеазу, трипсин, хемотрипсин и папаин. Согласно другому варианту настоящее изобретение относится к пероральному введению дозовой формы для опосредования дефицита инсулина, включающей фармацевтически приемлемый носитель и стабильный водорастворимый конъюгированный инсулиновый комплекс, включающий инсулин или проинсулин, ковалентно связанный с физиологически совместимой полиэтиленгликолевой модифицированной гликолипидной частью молекулы.

Также другим, вторым, вариантом дозы пероральной доставки, которая может быть применена согласно настоящему изобретению, является технология, описанная в WO 97/33531; US 5912014 и US 608618 (содержание которых упоминается в настоящем изобретении в виде ссылок на их сущность). Вкратце, такая форма пероральной доставки защищает кальцитонин от кислотной среды и пищеварительных ферментов во время прохождения через желудок и кишечник и высвобождает свое содержимое в кровяное русло. Находясь в целостности в кровяном русле, кальцитонин может проявлять свой терапевтический эффект. Такая форма пероральной доставки является, например, фармацевтической композицией для пероральной доставки кальцитонина лосося, включающей: (А) терапевтически эффективное количество указанного кальцитонина лосося; (Б) по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый pH-понижающий агент; (В) по меньшей мере, один усилитель абсорбции, эффективный в активировании биодоступности указанного кальцитонина лосося; и (Г) кишечное покрытие, в которой указанный pH-понижающий агент присутствует в указанной фармацевтической композиции в количестве, которое, будучи добавленным к 10 мл 0,1М водных растворов бикарбонатов натрия, достаточно для понижения pH указанного раствора до величины, не превышающей 5,5. Фармацевтическая композиция, в которой указанное кишечное покрытие содержится в количестве, не превышающем 20 мас.% от массы фармацевтической композиции, за исключением кишечного покрытия. Указанная выше фармацевтическая композиция, в которой указанное кишечное покрытие содержится в количестве, не превышающем 5-15 мас.% от массы фармацевтической композиции, за исключением кишечного покрытия.

Фармацевтические композиции, для которых польза кальцитонина при лечении остеоартрита показана, могут быть предусмотрены в виде капсул, включая мягкие желатиновые капсулы, таблеток, каплеток, суппозиториев или других твердых пероральных дозовых форм, каждая из которых может быть приготовлена способами, хорошо известными в данной области.

Твердые фармацевтические композиции настоящего изобретения могут быть приготовлены, во-первых, измельчением либо носителя, либо носителя с любой комбинацией дополнительных ингредиентов настоящей композиции, для получения частиц микронизированного размера. Микронизированный носитель или микронизированный носитель вместе с микронизированными дополнительными ингредиентами настоящего изобретения затем могут быть переработаны традиционными способами, например, путем перемешивания смеси действующего агента или действующих агентов, агента доставки, кросповидона или повидона, и других ингредиентов, замешивая и заполняя капсулы, или, вместо заполнения капсул, сплавляя с последующим таблетированием или, с помощью компрессионного сплавления, для получения таблеток. Кроме того, твердые дисперсии могут быть сформированы известными способами с последующим процессом формирования таблеток или капсул.

Приводимые ниже примеры предназначены для дополнительного иллюстрирования настоящего изобретения и могут быть легко поняты любым рядовым специалистом в данной области. Эти примеры никоим образом не ограничивают настоящее изобретение.

Примеры

А. Примеры составов

Пример 1: состав 1 (3 партии)

Приготовление микронизированного 5-CNAC: грубый 5-CNAC, предназначенный для микронизации, вносят в реактивную мельницу (воздушная реактивная мельница Gem Т ® фирмы Copley Scientific, Ltd., Ноттингем, Великобритания), используя реактивную мельницу с керамическим твердым поддоном 80, диаметром 8 см, 6 бар N2, 0,5 мм насадками с ручной загрузкой примерно 700 г/ч. Грубый 5-CNAC измельчают в реактивной мельнице и образцы периодически анализируют с помощью микроскопа с целью определения, когда микронизированные частицы достигнут требуемого размера. Три разные партии измельчают до получения партий с размером частиц 6 мкм, 35 мкм, 46 мкм. Затем проводят отдельное просеивание раздельных микронизированных партий с использованием конической просеивающей мельницы (фирма Quadro Comil, Ватерлоу, Онтарио, Канада), оснащенной коническим ситом U10, 813 мкм, засыпной мешалкой с 1500 об/мин с пропускной способностью примерно 150 кг/ч.

Состав 1-3. Состав кальцитонина лосося с 5-CNAC с различным размером частиц

Ингредиент		Количество (мг)	Процент(%)
Кальцитонин лосося		1	0,25
Микронизированный 5-CNAC		228	57
AvicelPH102®		147	36,75
Ингредиент	Количество (мг)		Процент(%)
Кросповидон, NF	20		5
Стеарат магния	4		1
Всего	400		100

Приготовление состава 1: три различные партии таблеток приготавливают, используя три различные партии микронизированной динатриевой 5-CNAC:

одна партия таблеток имеет средний размер частиц динатриевой 5-CNAC 46 мкм (серия А), вторая партия таблеток имеет средний размер частиц динатриевой 5-CNAC 6 мкм (серия Б), третья партия таблеток имеет средний размер частиц динатриевой 5-CNAC 35 мкм (серия В).

0,50 г кальцитонина лосося, предварительно просеянного через сито 40, 57 г микронизированной динатриевой соли 5-CNAC, просеянной через сито 35, и 10 г полипласдона XL (кросповидон, NF, фирма International Specialty Products, Нью-Джерси, USA) объединяют в емкости объемом 500 мл и перемешивают, используя смеситель Turbula, на протяжении 100 оборотов со скоростью 46 об/мин.

Дополнительные 57 г микронизированной динатриевой соли 5-CNAC, просеянной через сито 35, и 36,75 г продукта Avicel PH 102 ®, вносят в емкость и перемешивают на протяжении 500 оборотов со скоростью 46 об/мин. Затем 36,75 г продукта Avicel PH 102 ® вносят в емкость и перемешивают с помощью еще 100 дополнительных оборотов со скоростью 46 об/мин. 4,0 г стеарата магния просеивают в емкость через сито 35 и перемешивают в течение 1 мин со скоростью 46 об/мин. Полученную смесь прессуют в таблетки с помощью пресса для таблеток Manesty В3В. Вес таблеток составляет примерно 400 мг.

Биодоступность таблеток, полученных в примере 1, может быть протестирована описанным ниже методом.

Пример 2: введение приматам

Таблетки приготовляют согласно описанию в примере 1 с применением трех разных партий микронизированной динатриевой 5-CNAC: одна партия таблеток имеет средний размер частиц динатриевой 5-CNAC 46 мкм (партия А), вторая партия таблеток имеет средний размер частиц динатриевой 5-CNAC 6 мкм (партия Б), третья партия таблеток имеет средний размер частиц динатриевой 5-CNAC 35 мкм (партия В). Таблетки каждой из трех разных приготовленных партий вводят одним и тем же четырем макакам-резус раздельно в разные сутки следующим образом.

Макак-резус, которых не кормят в течение ночи перед дозированием и которые находятся в полном сознании, фиксируют на стуле на время исследования. По одной таблетке партии А, или партии Б, или партии В вводят обезьянам через желудочный зонд и затем вводят по 10 мл воды.

Образцы крови макак-резус собирают непосредственно перед введением и через 0,25, 0,5, 0,75, 1, 1,5, 2, 3, 4, 5 и 6 ч после введения. Таблетку из каждой из оставшихся двух партий таблеток водят и берут образцы крови аналогичным образом, но в определенные сутки для каждой из оставшихся партий таблеток. Остающийся в плазме кальцитонин лосося для каждой дозы и для каждой обезьяны определяют радиоиммуноанализом. Для каждой обезьяны подсчитывают и приводят ниже в табл.1, 2 и 3 содержание кальцитонина лосося (SCt) в плазме для одной партии и для одного периода, среднее значение концентраций SCt в плазме у всех обезьян для одной партии и одного периода, стандартное отклонение (SD) концентраций SCt в плазме для одной партии и для одного периода, и среднюю квадратичную ошибку (SEM) для концентраций SCt в плазме у всех обезьян для одной партии и одного периода.

Таблица 1. Партия А: средний размер частиц 5-CNAC равен 46 мкм. Концентрация кальцитонина лосося (SCt) в плазме (пг/мл) (одна таблетка для перорального введения (200 мг 5CNAC+1 мг SCt) для макаки-резус)
№ животного	Время (ч)
№ животного	0	0,25	0,50	0,75	1	1,5	2	3	4	5	6
1	0,0	17,8	91,7	279,7	449,2	278,8	48,0	10,5	5,3	3,3	0,0
2	0,0	117,4	535,0	430,8	981,4	1718,0	2396,4	719,5	253,6	102,1	62,9
3	0,0	133,9	754,5	1502,0	2351,0	2066,0	2684,4	1310,0	649,6	280,6	156,5
4	0,0	46,0	127,0	425,5	765,8	1102,0	1599,0	1022,0	419,3	87,0	23,4
Среднее	0,0	73,8	377,1	659,5	1136,9	1291,9	1682,0	765,5	332,0	118,3	60,7
SD	0,0	49,7	322,2	566,0	838,4	783,8	1182,1	558,1	271,6	116,6	68,9
SEM	0,0	24,9	161,1	283,0	419,2	391,9	591,0	279,0	135,8	58,3	34,5

Нижний предел подсчета (НПП)=2,5 пг/мл, концентрации ниже НПП в

табл.1 равны 0.

Таблица 2. Партия Б: средний размер частиц 5-CNAC составляет 46 мкм. Концентрация кальцитонина лосося (SCt) в плазме (пг/мл) (одна таблетка

для перорального введения (200 мг 5CNAC+1 мг SCt) для макаки-резус)

№ животного	Время (ч)
№ животного	0	0,25	0,50	0,75	1	1,5	2	3	4	5	6
1	0,0	265,6	315,8	245,6	357,2	1927,0	3010,0	863,2	139,4	48,5	20,8
2	0,0	607,0	777,0	1336,0	1602,0	4146,0	7521,0	2681,0	420,8	73,9	43,2
3	0,0	80,9	255,5	325,6	655,6	1478,0	3979,0	2775,0	520,2	91,5	41,3
4	0,0	286,4	155,3	237,7	241,0	269,7	294,2	321,0	179,8	67,5	13,6
Среднее	0,0	310,0	368,4	536,2	714,0	1955,2	3701,1	1660,1	315,1	70,4	29,7
SD	0,0	218,5	280,2	534,7	617,2	1619,6	2986,3	1253,5	184,8	17,8	14,8
SEM	0,0	109,2	140,1	267,3	308,6	809,8	1493,1	626,7	92,4	8,9	7,4

Нижний предел подсчета (НПП)=2,5 пг/мл, концентрации ниже НПП в табл.2 равны 0.

Таблица 3. Партия В: средний размер частиц 5-CNAC равен 35 мкм.

Концентрация кальцитонина лосося (SCt) в плазме (пг/мл) (одна таблетка для перорального введения (200 мг 5CNAC+1 мг SCt) для макаки-резус)

№ животного	Время (ч)
№ животного	0	0,25	0,50	0,75	1	1,5	2	3	4	5	6
1	0,0	36,1	94,7	428,0	739,4	2568,0	4025,0	1348,0	499,6	218,4	98,1
2	0,0	10,9	55,0	168,9	248,2	507,3	654,0	434,8	177,3	68,8	38,9
3	0,0	172,3	336,6	409,5	584,9	1487,0	2087,0	1479,0	162,0	52,0	17,2
4	0,0	7,9	46,9	208,1	390,1	1237,0	2347,0	1342,0	192,3	42,3	19,2
Среднее	0,0	56,8	133,3	303,6	490,7	1449,8	2278,3	1151,0	257,8	95,4	43,4
SD	0,0	78,0	137,1	134,1	215,8	853,56	1382,1	481,6	161,7	82,7	37,9
SEM	0,0	39,0	68,6	67,1	107,9	426,7	691,1	240,8	80,8	41,4	18,9

Нижний предел подсчета (НПП)=2,5 пг/мл, концентрации ниже НПП в табл.3 равны 0.

Пример 3: приготовление составов 2-4

Другой вариант, в котором предусмотрены составы:

Состав 2:

Ингредиент	Количество (мг)
SCt	0,25
5-CNAC (микронизированная)	28,5
Avicel PHI 02	238,25
Кросповидон XL	15
Pluronic F68	3
Cab-0-Sil	3
Тальк	6
Стеарат магния	6
Всего	300

Состав 3:

Ингредиент	Количество (мг)
SCt	0,5
5-CNAC (микронизированная)	28,5
Avicel PH102	238
Кросповидон XL	15
Pluronic F68	3
Cab-O-Sil	3
Тальк	6
Стеарат магния	6
Всего	300
Ингредиент	Количество (мг)
SCt	0,5
5-CNAC (немикронизированная)	28,5
Avicel PH102	238
Кросповидон XL	15
Pluronic F68	3
Cab-O-Sil	3
Тальк	6
Стеарат магния	6
Всего	300

Состав 4:

Процесс приготовления указанных выше составов схож с процессом, описанным в примере 1. Однако поскольку в составе присутствует еще несколько компонентов, есть несколько отличий, описанных ниже:

1. Предварительную навеску 0,3 г SCt пропускают через сито №60

2. Взвешивают 0,25 г просеянного SCt DS

3. Смешивают SCt и кросповидон в подходящем контейнере с помощью смесителя Turbula в течение 10 мин

4. Пропускают через сито №45

5. В смесь добавляют 5-CNAC, полученный на этапе №3, перемешивают в течение 10 мин

6. Пропускают через сито №35

7. Половину Avicel добавляют в смесь №5, перемешивают в течение 10 мин

8. Пропускают через сито №35

9. Добавляют оставшиеся Avicel, Pluronic F68 и Cab-O-Sil, перемешивают в течение 20 мин

10. Добавляют тальк и стеарат магния в указанную выше смесь и перемешивают в течение 2 мин.

Все используемое оборудование то же, что и в примере 1.

Пример 4: приготовление состава 5:

Другой вариант состава кратко приводят ниже: 0,502 кальцитонина лосося, предварительно просеянного через сито №40, 120 г динатриевой соли 5-CNAC, предварительно просеянной через сито №35, и 20 г полипласдона XL (кросповидон, NF) объединяют в емкости объемом 500 мл и перемешивают с помощью смесителя Turbula в течение 2 мин при скорости вращения 46 об/мин. Дополнительные 125,4 г динатриевой соли 5-CNAC, предварительно просеянной через сито №35, и 32,5 г Avicel PH 102 добавляют в емкость и перемешивают в течение 5 мин со скоростью 46 об/мин. Еще 32,5 г продукта Avicel добавляют в емкость и перемешивают в течение 5 мин при скорости вращения 46 об/мин. 4,0 г стеарата магния просеивают в емкость с помощью сита 35 и перемешивают в течение 1 мин при скорости вращения 46 об/мин. Итоговую смесь прессуют в таблетки с помощью пресса для таблеток Manesty B3B. Таблетки весят примерно по 400 мг.

Пример 5: приготовление состава 6:

Другой вариант состава, включающий кальцитонин лосося, пригодный для интраназального введения:

Количество ингредиента/мл
1) Кальцитонин лосося (действующий ингредиент)	0,1375 мг
10% избыток	0,01375 мг
	0,15125 мг
3) Хлорид бензалкониума	0,1 мг
4) НСl (1 н) для доведения значения pH до 3,7
5) Дистиллированная вода до конечного объема 1,0 мл

Компоненты 1-3 объединяют под защитой газообразного азота (до конечного объема 2500 мл) обычным способом с добавлением 10% кальцитонина лосося для компенсации потери при фильтрации. Затем добавляют компонент 4) для доведения значения pH до 3,7 и дистиллированную воду до конечного объема 2500 мл. Полученный объем фильтруют (например, с помощью фильтра с порами 0,2 мкм) для получения композиции, пригодной для интраназального применения, и для заполнения в дозирующее устройство для впрыскивания раствора в нос объемом 2 мл.

Пример 6: приготовление состава 7:

Суппозитории, содержащие 300 ЕД (международных единиц) кальцитонина лосося, приготовляют, например, согласно US 5149537 (содержание которого упоминается в настоящем изобретении в качеств ссылок) и один суппозиторий содержит следующую композицию:

Ингредиент	мг/суппозиторий
Кальцитонин лосося (300 ЕД)	0,0692 суппозитория + (1 мг вещества, содержащего 4767 БД (примерно 10% используемого)
Безводная лимонная кислота	0,78
Тринатриевый цитрат дигидрат	0,50
Маннит	48,651
Таурохолат натрия	30,0
Основание суппозитория А	1420,0
	1500 мг

В качестве основания суппозитория А может быть применен буфер-какао. Предпочтительно использовать синтетические или полусинтетические основания суппозитория. Ими могут быть нерастворимые в воде жиры, например, глицериды (моно-, ди- и/или три-) жирных кислот, например, полученных из кокосового масла или масла сердцевины пальмы.

Предпочтительными являются глицериды С-замещенных С₁₀-₁₈жирных кислот с прямой цепью. Примерами являются продукты Witepsol (зарегистрированная торговая марка), например, серии Witepsol H, которые производит фирма Dynamit Nobel, Западная Германия; продукты Suppocire (зарегистрированная торговая марка), например, Suppocire AM или AS2, которые производит фирма Gattefosse, Франция, и продукты Novata (зарегистрированная торговая марка), например, Novata BD, производимые фирмой Henkel GmbH, Западная Германия.

В других вариантах могут применяться спирты Guerbet и водорастворимые основания суппозиториев, например полиэтиленгликоль.

Предпочтительно основание суппозитория имеет низкий диапазон температур плавления, например от 30 до 36°С.

Методика приготовления:

а) Приготовление гранулята (для 3500 доз)

Смешивают находящиеся в сухом состоянии 0,2423 г кальцитонина, 2,73 г лимонной кислоты, 1,75 г тринатриевой соли и растворяют в 14,0 г воды. Добавляют 170,3 г просеянного маннита (AS 700 мкм, WD 120 мкм). Массу замешивают и просеивают (AS 1600 мкм, WD 450 мкм). Дезагломерированный порошок высушивают при 40°С в течение 25 мин и просеивают (AS 450 мкм, AS 120 мкм) для получения 167 г порошка.

б) Добавление усиливающего агента и формование (3000 доз)

150 г порошка, полученного на стадии а), и 90 г измельченного таурохолата натрия перемешивают, просеивают (AS 250; WD 100 мкм) и еще раз перемешивают. Смесь добавляют к 4260 г расплавленного при температуре 38°С основания суппозитория. Гомогенизацию проводят в течение 3 мин (аппарат Polyton, режим скорости 4). Масса переносится при 33°С в предварительно подогретый сосуд в машине для получения суппозиториев (BONAPACE).

Суппозитории формуют при температуре от 33 до 33,5°С на нейтральном поливинилхлоридном пластике (или алюминиевой фольге) в дозах, примерно равных 1,5 мл и 1,5 г. Охлаждение осуществляется потоком воздуха при 20°С, выход составляет 2590 суппозиториев. Время дезинтеграции составляет 6 мин. Точка плавления 34,9°С. Прочность составляет 81Н при 20°С, значение pH в водном растворе равно 4,2.

Б. Пример, демонстрирующий эффективность кальцитонина при остеопорозе:

Пример 7: клиническое исследование

36 пациентов с остеоартритом на протяжении 12 недель (84 суток) участвует в исследовании двойным слепым методом с плацебо контролем многоцентровом параллельном эксперименте. Цель заключается в оценке in vivo воздействия перорального состава кальцитонина на биохимические маркеры костного, хрящевого и синовиального метаболизма при остеоартрите у человека. Пациентов разделяют на три группы: в двух группах лечат пероральным кальцитонином в количестве 0,5 или 1 мг один раз в сутки ежедневно, в контрольной группе получают плацебо.

Таблица 4: Учитываемые параметры:

- Женщины в возрасте либо старше 55 лет, либо старше 50 лет, у которых менопауза наступила не менее 5 лет назад (естественным путем или в результате хирургического вмешательства).

- Мужчины старше 50 лет. Те из них, которые имеют половые контакты с женщинами, не пребывающими на стадии менопаузы, должны применять презервативы на протяжении всего времени исследования и последующие после прекращения исследования 4 недели.

- Пациенты, страдающие тяжелой формой остеоартрита тазобедренного сустава и/или колена. Для подтверждения обострения заболевания ( = 6 месяцев до начала исследования) должна прилагаться сцинтиграмма.

- Пациенты, по меньшей мере, с умеренной болью при активном движении (выше или равном 10 по шкале LEQUESNE; MG Lequesne, J of Rheumatology 24, 1997, cc.779-781).

- Пациенты, ознакомившиеся с сутью исследования и подписавшие согласие на участие в нем.

Таблица 5: Исключение представляют:

- Пациенты, страдающие острым остеоартритом и нуждающиеся в артропластике во время исследования или нуждающиеся в иммобилизации сустава в течение нескольких недель перед исследованием или во время периода исследования.

- Пациенты, страдающие отложением солей, или о которых известно, что у них имеются наследуемые или врожденные дефекты.

- Пациенты, страдающие от клинически значимых гепатита, болезней почек, сердечно-сосудистой системы, психических, эндокринных и/или гематологических заболеваний.

- Пациенты, страдающие от каких-либо других системных или местных заболеваний, которые по усмотрению исследователя несовместимы с протоколом исследований.

- Пациенты с несоответствующими норме показателями клинических анализов, признанными существенными.

- Пациенты, получавшие какие-либо внутрисуставные инъекции или системное введение кортикостероидов на протяжении 8 недель до начала исследования.

- Пациенты, о которых известно, что они злоупотребляют алкоголем /или наркотиками, или которые неохотно идут на сотрудничество с исследователем в рамках протокола исследования.

Таблица 6: Итоговые параметры исследования:

- Основными итоговыми параметрами исследования являются уровни циркулирования маркеров человека, участвующих в метаболизме хрящей, синовиальной оболочки и костей.

- Другими итоговыми параметрами исследования являются эффективность лечения лекарственным средством и переносимость, оцениваемые пациентом и исследователем.

- К дополнительным оценкам безопасности относятся мониторинг и записи всех нежелательных последствий, в том числе нежелательных последствий, регулярный мониторинг показателей гематологии, биохимии крови и мочи, регулярные измерения основных показателей состояния организма и проведение клинических обследований.

Процедура исследования: После двух недель периода предварительной обработки промыванием, на протяжении которого можно употреблять только парацетамол в максимальной суточной дозе 3000 мг, каждого пациента рандомизируют для потребления только плацебо или одной из двух доз перорального состава кальцитонина. В течение 12 недель периода лечения пациенту разрешается применять парацетамол в случае необходимости в максимальной суточной дозе 3000 мг.

Таблица 7: Оценка пациентов в определенные моменты исследования.

- Визит 1: сутки - 14: первичная оценка, начало периода промывания организма.

- Визит 2: сутки 0: основной визит, начало лечения.

- Визит 3: сутки 14: завершение двух недель лечения.

- Визит 4: сутки 42: завершение шести недель лечения.

- Визит 5: сутки 84: заключительный визит, завершение двенадцати недель лечения.

Таблица 8: Типы оценок:

- Во время визитов 2, 3, 4 и 5 берут на анализ вторую порцию утренней мочи натощак, а также плазму, сыворотку и синовиальную жидкость (если возможно) и анализируют с помощью специфических иммуноисследований метаболизм хрящей, синовиальной оболочки и костей.

- Нежелательные последствия фиксируются во время визитов 3, 4 и 5.

- Состояние одного или нескольких суставов (тазобедренных и коленных) оценивают с помощью анкеты LEQUESNE во время визита 1 (первичная оценка) и документируют в качестве пригодного для выбора объектом оценки на следующем визите на основании интенсивности боли при активном движении. Во время визита 2 (основной визит) эти выбранные суставы повторно исследуют и наиболее болезненный сустав, для которого интенсивность боли равна или примерно равна 10 по анкете LEQUESNE, выбирают в качестве целевого сустава.

- Эффективность лекарственного средства для целевого сустава оценивают на основании изменения интенсивности боли между 2 и 5 визитами (относительно интенсивности боли о время визита 1) путем клинической оценки и результатам анкеты LEQUESNE.

- Независимо от оценки эффективности лечения количество учитывают количество обезболивающего лекарственного средства (парацетамола), употребленного пациентом в течение 12 недель периода лечения.

- Дополнительно оценивают эффективность и переносимость лекарственного средства, а также состояние пациента во время визитов 3, 4 и 5, с помощью двух разных шкал VAS (Е.С.Huskinson, The Lancet, 1974, cc.1127-1131).

Пример 8: трехмесячное лечение пероральным кальцитонином лосося подавляет продукты распада коллагена мочи II типа у женщин на стадии менопаузы

Объекты и методы: Исследуемая группа включает 152 в основном здоровые датчанки в возрасте 55-85 лет, у которых менопауза длится не менее 5 лет. Женщины получают либо суточные пероральные дозы (0,15, 0,4, 1,0 или 2,5 мг) SCt, объединенные с подходящими технологически обоснованными молекулами носителя (200 мг), либо плацебо, на протяжении 3 месяцев. Все участницы получают добавку кальция в количестве 1000 мг вместе с 400 ЕД витамина D ежедневно на протяжении исследования. Параметрами эффективности являются 24-часовой мочевой С-концевой телопептид коллагена I типа (CTX-I) и СТХ-П с поправкой на сходный уровень и через три месяца лечения.

Применяемые в исследовании фармацевтические композиции, включающие кальцитонин лосося

Ингредиент	Количество в таблетке (мг)
Кальцитонин лосося	0,15	0,4	1		2,5
Динатриевая соль 5-CNAC (немикронизированная)	228	228	228		228
Ингредиент	Количество в таблетке (мг)
Микрокристаллическая целлюлоза, NF(AvicelPH-102)	147,85	147,6		147	145,5
Кросповидон, NF	20	20		20	20
Стеарат магния, NF, ЕР	4	4		4	4
Всего	400	400		400	400

Процесс получения:

i) Взвешивают 5-CNAC и разделяют на 2 равные части, обозначают их А и Б.

ii) Взвешивают Avicel и разделяют на 2 равные части, обозначают их А и Б.

1) Помещают кросповидон на сито №35. Помещают предварительно взвешенный кальцитонин поверх кросповидона, затем добавляют 5-CNAC (часть А).

2) Просеивают кросповидон/кальцитонин/5-CNAC, переносят в смеситель подходящего размера и перемешивают на протяжении 500 оборотов.

3) 5-CNAC (часть Б) просеивают через сито №35.

4) Добавляют часть Б просеянного 5-CNAC и часть А продукта Avicel к перемешиваемой смеси стадии 2) и перемешивают на протяжении 800 оборотов.

5) Добавляют Avicel (часть Б) к упомянутой выше смеси стадии 4) и смесь премешивают на протяжении 500 оборотов.

6) Просеивают стеарат магния через сито №35 и добавляют к перемешенным порошкам стадии 5) и перемешивают на протяжении 100 оборотов.

Результаты: Отсутствуют достоверные различия в разных группах лечения SCt, касающиеся возраста, индекса массы тела, исходного уровня концентрации в моче CTX-I и CTX-II. Наблюдается четкая и значительная дозовая зависимость, выражаемая 24-часовым ответом мочевого CTX-II на пероральное введение SCt (ANOVA=0,012). По сравнению с плацебо в группе, получавшей суточную дозу по 1,0 мг, проявляется наибольшее снижение мочевого CTX-II через 3 месяца лечения (-19,7%, р=0,009). У женщин, получавших по 0,4 мг и 2,5 мг SCt также наблюдается значительное снижение мочевого CTX-II (-15,2%, р=0,04, и -17,5%, р=0,02 соответственно). Сходные дозозависимые ответы обнаружены у 24-часового мочевого CTX-I через 3 месяца лечения. Женщины, получающие 1,0 мг SCt, имеют наибольшее снижение 24-часовых мочевых СТХ-I (-41,0%, р<0,001) по сравнению с женщинами в группе плацебо. При наложении результатов исследования популяции на результаты исходных данных по СТХ-II в моче, средние данные по CTX-II в моче составляют 114,6, 197,9 и 385,4 нг/ммоль соответственно. Женщины с наибольшим показателем СТХ-II в моче на исходном уровне показали наибольший ответ на пероральное применение SCt дозозависимым способом. Женщины, получающие по 1,0 мг SCt и имевшие наивысший обмен в хрящевой ткани на исходном уровне, имеют наибольшее снижение CTX-II в моче через 3 месяца лечения по сравнению с женщинами с наименьшим уровнем обмена (-36,6% vs. -9,9%, р=0,005). Сходная тенденция наблюдается при ведении 0,4 мг SCt при сопоставлении женщин с наибольшим уровнем СТХ-II в моче с наименьшим уровнем.

С-телопептид коллагена I типа (CTX-I) оценивают в качестве специфического маркера, чувствительного к костной резорбции; в отличие от него С-телопептид коллагена II типа (СТХ-II) оценивают в качестве подходящего маркера хрящевой ткани.

Вывод: проведенное исследование убедительно показывает, что кальцитонин лосося может понизить разрушение хряща и тем самым может обеспечить лечебные эффекты при остеоартрите в диапазоне доз от 0,4 до 2,5 мг кальцитонина лосося, более предпочтительно примерно в количестве около 1 мг кальцитонина лосося.

Claims

1. Способ предупреждения и/или лечения остеоартрита у пациента, нуждающегося в этом, заключающийся во введении указанному пациенту перорального состава, включающего от 0,4 до 2,5 мг кальцитонина в свободной форме или в форме соли и агент доставки, выбранный из группы, включающей N-(5-хлорсалицилоил)-8-аминокаприловой кислоты (5-CNAC), N-(10-[2-гидроксибензоил]амино)декановой кислоты (SNAD), N-(8-[2-гидроксибензоил]амино)каприловой кислоты (SNAC) и их мононатриевых и динатриевых солей, этанольные сольваты их натриевых солей, моногидраты их натриевых солей и любые их комбинации.

2. Способ по п.1, в котором агент доставки выбран из группы, включающей динатриевую соль 5-CNAC, динатриевую соль SNAD и динатриевую соль SNAC.

3. Способ по п.1, в котором агент доставки представляет собой 5-CNAC или его динатриевую соль.

4. Способ по любому из пп.1-3, в котором кальцитонин коъюгирован с молекулой полимера.

5. Способ по любому из предыдущих пунктов, в котором кальцитонин доставляется с эффективной дозой пероральной фармацевтической композиции, включающей кальцитонин, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый pH-понижающий агент, по меньшей мере, один усилитель адсорбции и кишечное покрытие.

6. Способ по любому из предыдущих пунктов, в котором кальцитонин является кальцитонином лосося.

7. Способ по любому из предыдущих пунктов, где состав включает от 0,8 до 1,2 мг кальцитонина.

8. Способ по любому из предыдущих пунктов, в котором агент доставки находится в микронизированной форме.