RU2353293C2 - Устройство и способ для одновременной идентификации антигенов групп крови - Google Patents
Устройство и способ для одновременной идентификации антигенов групп крови Download PDFInfo
- Publication number
- RU2353293C2 RU2353293C2 RU2006103022/14A RU2006103022A RU2353293C2 RU 2353293 C2 RU2353293 C2 RU 2353293C2 RU 2006103022/14 A RU2006103022/14 A RU 2006103022/14A RU 2006103022 A RU2006103022 A RU 2006103022A RU 2353293 C2 RU2353293 C2 RU 2353293C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- indicator
- antibodies
- sample
- blood
- membrane
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 239000000126 substance Substances 0.000 title abstract 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 144
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims abstract description 68
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 34
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims abstract description 23
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 100
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 100
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 59
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 50
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 45
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 41
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 41
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims description 30
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 26
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 13
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 8
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 claims description 6
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 claims description 6
- 239000002523 lectin Substances 0.000 claims description 6
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 claims description 6
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 claims description 5
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 claims description 5
- NHZLNPMOSADWGC-UHFFFAOYSA-N 4-amino-N-(2-quinoxalinyl)benzenesulfonamide Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CN=C(C=CC=C2)C2=N1 NHZLNPMOSADWGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 3
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims description 2
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 claims description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 claims description 2
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims description 2
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 claims description 2
- -1 polyethylene Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 claims description 2
- 239000000306 component Substances 0.000 claims 2
- 239000012503 blood component Substances 0.000 claims 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 51
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 24
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 18
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 17
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 17
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 238000005206 flow analysis Methods 0.000 description 12
- 239000000463 material Substances 0.000 description 11
- KPTYXJLOWLVCMU-UHFFFAOYSA-N 67252-82-8 Chemical compound C1=CC2=CC=CC=C2C2=C1C(C1OC1C(C1O)O)=C1C=C2 KPTYXJLOWLVCMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 8
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 238000004026 adhesive bonding Methods 0.000 description 4
- 239000002390 adhesive tape Substances 0.000 description 4
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 4
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 4
- 230000002457 bidirectional effect Effects 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 239000013024 dilution buffer Substances 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 2
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 2
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N Atorvastatin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 244000043261 Hevea brasiliensis Species 0.000 description 1
- 239000011358 absorbing material Substances 0.000 description 1
- 239000002313 adhesive film Substances 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002820 assay format Methods 0.000 description 1
- 238000004159 blood analysis Methods 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007877 drug screening Methods 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 1
- 208000031169 hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003703 image analysis method Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000012125 lateral flow test Methods 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000011527 multiparameter analysis Methods 0.000 description 1
- 229920003052 natural elastomer Polymers 0.000 description 1
- 229920001194 natural rubber Polymers 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 238000009597 pregnancy test Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000000565 sealant Substances 0.000 description 1
- 229920002379 silicone rubber Polymers 0.000 description 1
- 239000004945 silicone rubber Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/80—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood groups or blood types or red blood cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/97—Test strip or test slide
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/80—Fluorescent dyes, e.g. rhodamine
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
- Y10S436/808—Automated or kit
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
- Y10S436/81—Tube, bottle, or dipstick
Abstract
Изобретение относится к медицине и используется для качественного или количественного определения нескольких аналитов в жидкой пробе. Устройство состоит из мембраны с загрузочной зоной для нанесения жидкой пробы, двух индикаторных зон, которые могут взаимодействовать с аналитом (или аналитами), и, одной абсорбционной зоны (3), которая поглощает жидкость после прохождения через индикаторные зоны. Индикаторные зоны расположены между загрузочной зоной и абсорбционной зоной. Направления потоков от загрузочной зоны через индикаторные зоны к абсорбционной зоне параллельны. Способ включает нанесение пробы на загрузочную зону мембраны устройства. Количество пробы достаточно для обеспечения движения жидкости пробы в направлении абсорбционной зоны через индикаторные зоны и обеспечения возможности образования аналитами или их производными, содержащимися в жидкости пробы, комплексов в индикаторных зонах. Изобретение обеспечивает одновременную идентификацию антигенов групп крови. 4 н. и 14 з.п. ф-лы, 17 ил., 8 табл.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Изобретение относится к устройству для латерально-диагонально-потоковых многопараметрических анализов, в частности в области серологии групп крови, предназначенному для одновременного качественного или количественного определения нескольких аналитов в одной жидкой пробе, которое содержит одну мембрану с загрузочной зоной для нанесения жидкой пробы, по меньшей мере, две индикаторные зоны, которые могут вступать во взаимодействие с аналитом (или аналитами), и, по меньшей мере, одну абсорбционную зону, которая поглощает жидкость после ее прохождения через индикаторные зоны, причем индикаторные зоны находятся между загрузочной зоной и абсорбционной зоной; устройство отличается тем, что направления потоков от загрузочной зоны через соответствующие индикаторные зоны к абсорбционной зоне (дорожки) практически параллельны, и имеется, по меньшей мере, две различные дорожки.
Изобретение далее относится к способу определения нескольких аналитов в одной жидкой пробе, который включает в себя нанесение пробы на загрузочную зону мембраны устройства согласно настоящему изобретению, при этом количество пробы является достаточным для того, чтобы обеспечить течение жидкости по направлению к абсорбционной зоне через индикаторные зоны и обеспечить возможность образования аналитами или их производными, содержащимися в жидкости пробы, комплексов в индикаторных зонах, в частности для одновременного определения антигенов групп крови.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
В ходе серологической диагностики групп крови обычно выявляют параметры, имеющие особое значение в связи с трансфузиями или геморрагической болезнью новорожденных (Morbus Hamoliticus Neonatorum). При этом речь идет, среди прочего, о выявлении на поверхности эритроцитов тех антигенов, которые характерны для групп крови. Другие важные системы антигенов находятся на тромбоцитах, гранулоцитах, лимфоцитах, которые также играют роль при трансфузии и трансплантации.
Как известно, для определения антигенов групп крови эритроциты исследуемого человека (донора или реципиента) соединяют с реактивами, которые содержат антитела, специфичные для групп крови. Обычно речь идет об анализах в жидких средах, при которых исследуемую смесь получают посредством смешивания пробы, содержащей эритроциты, с пробой, содержащей антитела к определенному признаку группы крови. Затем исследуемую смесь инкубируют в течение определенного периода времени в определенных условиях, а после завершения инкубации, сразу же или после этапа центрифугирования, визуально или с использованием оптических способов проверяют на наличие вероятной агглютинации или адсорбции эритроцитов. Преобладающим измерением конечной точки в серологии групп крови по-прежнему является гемагглютинация. Для каждой определяемой группы крови необходимо с помощью пипетки составить специальную смесь, то есть, например, для определения 9 важнейших групп крови А, В, D, С, с, Е, е, Cw и K необходимо, без учета контроля, 9 отдельных образцов.
Анализы с латеральными потоками в настоящее время часто используются в качестве экспресс-анализов, например в качестве тестов на беременность, для определения маркеров инфекционных заболеваний или для скрининга на наркотики. Оборудование для анализа с латеральными потоками состоит, как известно, из твердого носителя, на котором имеется загрузочная зона, куда наносят исследуемую пробу, разделительная мембрана, с которой соединены связывающие элементы, например акцепторные антитела или антигены, и на которой удается обнаружить реакции связывания, и поглощающая абсорбционная зона, которая вынуждает исследуемую пробу прямолинейно протекать через разделительную мембрану.
Стандартные тесты с латеральными потоками на испытательных мембранах описаны, как правило, с разделением, напоминающим хроматографическое. Аналит, содержащийся в пробе, специфически связывается с фиксированными на мембране связывающими элементами, которые, как правило, образуют расположенные друг за другом или накладывающиеся друг на друга ряды индикаторных зон. Образующийся в результате связывания комплекс становится видимым за счет индикаторных частиц, которые, как правило, уже присутствуют в сухом виде в определенном порядке на подушечке для высвобождения конъюгата. Подушечка для высвобождения конъюгата в типичном случае расположена между загрузочной зоной и мембраной. Предварительно нанесенные цветные индикаторные частицы покрыты, например, антителом к выявляемому аналиту.
Стандартным форматом анализа с боковыми потоками является так называемый “сэндвич-анализ”, при котором как индикаторная зона, так и индикаторные частицы покрыты лигандами, ориентированными на определяемые аналиты, обычно - антителами. При этом лиганд (связывающий элемент) иммобилизован на мембране. Реактив-детектор, обычно - антитело, связанное с окрашенной полистирольной частицей или коллоидными металлами, депонирован в подушечке для высвобождения конъюгата и может оттуда вымываться. Этот комплекс служит индикаторной частицей. После нанесения пробы, подлежащей исследованию, она очень быстро увлажняет подушечку для высвобождения конъюгата, за счет чего индикаторные частицы мобилизируются. Индикаторные частицы мигрируют вместе с фронтом жидкости вдоль пористой мембраны. Находящийся в пробе аналит связывается антителом, которое находится на поверхности индикаторной частицы. Когда проба проходит через индикаторную зону, комплекс аналита и индикаторной частицы иммобилизуется в индикаторной зоне за счет реакции аналита с антителом, связанным в индикаторной зоне, что ведет к появлению видимого сигнала.
Следующим известным форматом анализа на мелкие аналиты с одной антигенной детерминантой, не способные связывать одновременно два антитела, является так называемый “конкурентный анализ”. Связанный с поверхностью индикаторной частицы реагент-детектор в норме является молекулой, идентичной или аналогичной аналиту. Индикаторные частицы депонированы в подушечке для высвобождения конъюгата. Индикаторные частицы мигрируют вместе с фронтом жидкости вдоль пористой мембраны. Когда проба, содержащая аналит, и индикаторные частицы (которые также эффективно захватывают аналит) проходят через индикаторную зону, связывается часть молекул аналита, содержащихся в пробе, и часть индикаторных частиц. Чем больше аналита содержится в пробе, тем эффективнее он конкурирует за связывание с индикаторными частицами, и тем слабее становится сигнал.
Как известно, эти индикаторные частицы преимущественно состоят из коллоидного золота или из полистирола, которые получают способами, известными в данной области техники, и на которые наносят покрытие. В типичных форматах анализов с латеральными потоками аналиты определяют непрямыми способами. Под прямым определением аналита в контексте настоящего изобретения понимают, что аналит уже связан с индикаторной частицей (например, эритроцитом) естественным образом. В наиболее употребительном случае непрямого определения аналита проба, подлежащая анализу, содержит, как правило, в качестве аналитов не связанные с клетками, например, плазматические компоненты, и кроме пробы, подлежащей анализу, необходимы два реагента, а именно индикаторная частица и связывающий элемент. При непрямом определении аналит сначала связывается с выделившимися из подушечки для высвобождения конъюгата индикаторными частицами, после чего этот комплекс в ходе второй реакции со связывающим элементом иммобилизуется в индикаторных зонах.
При проведении стандартных анализов с латеральными потоками, в которых в качестве индикаторных частиц использовались эритроциты, связанные с аналитами, подлежащими определению, например с антигенами, специфичными для групп крови, до сих пор в индикаторных зонах антитела к соответствующим групповым антигенам, выполнявшие роль связывающих элементов, располагали в расположенных друг за другом или накладывающихся друг на друга полосах только в одной проточной дорожке, например анти-А и анти-В антитела к групповым антигенам А или В или антитела к антигенам Rh-системы групп крови. При этом стандартные анализы с латеральными потоками обнаруживают недостаток, состоящий в том, что эритроциты, связавшиеся с антителами, образуют барьер для потока других аналитов, подлежащих определению в данной пробе, например для других связанных с клетками антигенов. Из-за агглютинации или адсорбции клеток в полосах связывающих элементов, расположенных проксимально по отношению к загрузочной зоне (т.е. вблизи нее), другие аналиты, в особенности находящиеся на клетках или фрагментах клеток, содержащихся в пробе, подлежащей исследованию, невозможно беспрепятственно и явно разделить, и вследствие этого невозможно однозначно или полностью доказать их присутствие. Это может привести, например, у пациента с АВ Rh-положительной D группой крови к ослаблению или устранению В- и D-полос, что может привести к неправильной интерпретации его группы крови как А Rh-отрицательной. Поэтому до сих пор в серологической диагностике групп крови намеренно не использовали анализы с латеральными потоками с более чем одной индикаторной зоной. Для измерения нескольких, в особенности связанных с клетками и плазматических, параметров групп крови до сих пор нужно было проводить раздельные анализы отдельных параметров.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Задача изобретения состоит в том, чтобы преодолеть недостатки, существующие на современном уровне техники, прежде всего недостатки стандартных анализов с латеральными потоками, в которых используют расположенные друг за другом или накладывающиеся друг на друга индикаторные зоны, или зоны обнаружения, для одновременного измерения различных параметров пробы, более конкретно клеточных и плазматических параметров.
Эта задача согласно настоящему изобретению достигнута за счет устройства для одновременного качественного или количественного определения одного или нескольких аналитов в жидкой пробе или в нескольких жидких пробах, которое содержит мембрану, содержащую загрузочную зону для нанесения жидкой пробы, по меньшей мере, две индикаторные зоны, которые могут взаимодействовать с аналитом или аналитами, или с которыми могут вступать во взаимодействие аналиты и, по меньшей мере, одну абсорбционную зону, которая поглощает жидкость после того, как она проходит через индикаторные зоны, причем индикаторные зоны расположены между загрузочной зоной и абсорбционной зоной; это устройство отличается тем, что направления потоков от загрузочной зоны через соответствующие индикаторные зоны к абсорбционной зоне, которые представляют собой проточные дорожки, практически параллельны, и имеются, по меньшей мере, две различные дорожки.
Индикаторные зоны устройства согласно настоящему изобретению расположены на мембране и содержат связывающие элементы, которые захватывают или присоединяют к себе содержащийся в пробе (или пробах) аналит (или аналиты), подлежащий определению. В индикаторных зонах обнаруживаются реакции соединения между аналитом и связывающим элементом.
В одной из форм осуществления настоящего изобретения индикаторные зоны расположены так, что жидкость пробы при движении по проточной дорожке протекает не более чем через одну индикаторную зону. Например, индикаторные зоны могут быть расположены на мембране со смещением. При этом индикаторные зоны предпочтительно расположены в диагональном ряду, идущем от проксимальной стороны к дистальной или наоборот. Особые конструктивные решения являются V-образными, W-, М- или N-образными или перевернутыми V-образными, W-, М- или N-образными. В еще одной форме осуществления индикаторные зоны расположены параллельно рядом друг с другом в виде линейного ряда.
Только использование параллельно расположенных индикаторных зон обеспечивает возможность проведения многопараметрического анализа с латеральными потоками с использованием в качестве индикаторных частиц эритроцитов. Особо предпочтительная форма осуществления с диагональным расположением обладает преимуществом, состоящим в том, что на устройство согласно настоящему изобретению можно нанести особенно практичную и легко читаемую маркировку результатов; так как каждый параметр, подлежащий определению, занимает определенное Х- или Y-положение, можно рассматривать устройство согласно настоящему изобретению как систему координат с ординатой (плоскость проточных дорожек) и абсциссой (плоскость загрузочной зоны).
Индикаторные зоны содержат антитела, или фрагменты антител, и/или лектины, или фрагменты пектинов, которые могут захватывать или связывать антигены групп крови, подлежащие определению, а значит - и несущие их клетки, содержащиеся в пробе крови. В качестве предпочтительных связывающих элементов в индикаторные зоны на пористой мембране наносят антитела, фрагменты антител и/или лектины или фрагменты пектинов к антигенам любых известных систем групп крови. Предпочтительно, в одной индикаторной зоне этого ряда индикаторных зон, предпочтительно в индикаторной зоне, расположенной дистально по отношению ко всем остальным индикаторным зонам этого ряда, помещают контрольный связывающий элемент (контроль = ctl), который посредством позитивной реакции подтверждает протекание пробы через индикаторные зоны. Контрольным связывающим элементом предпочтительно является поликлональное антиэритроцитарное антитело.
В предпочтительной форме осуществления изобретения каждая индикаторная зона содержит один связывающий элемент, предпочтительно антитело или фрагмент антитела, для связывания одного из аналитов, подлежащих определению. Предпочтительными антителами, или фрагментами антител, или лектинами, или фрагментами антител в индикаторных зонах являются антитела или лектины к антигенам системы групп крови АВО, Rh-системы, систем Келла, Льюиса, Hh, Даффи, Кидда, MNS, Лютерана, Р-системы. Далее предпочтительными в качестве связывающих элементов индикаторных зон являются антитела к антигенам систем групп крови Диего, Yt, Скианна, Домброка, Колтона, Чидо/Роджерса, Гербиха, Кромера, Кнопса, Ландштайнера-Винера, Xg, Kx, Индиана, Ok, Рафа, Джона Милтона Хагена, Лангерайса и/или Сида. В особо предпочтительной форме осуществления устройство согласно настоящему изобретению содержит индикаторные зоны со связывающими элементами в виде анти-А, анти-В, анти-АВ, анти-D, анти-D, анти-С, анти-с, анти-Е, анти-е, анти-CW и/или анти-K-антител или фрагментов этих антител, причем оба анти-D-элемента представляют собой различные антитела или фрагменты этих антител. В частности, у беременных или новорожденных эти элементы предпочтительно являются моноклональными антителами IgM класса, которые не включают в себя DVI-категорию. У доноров эти элементы предпочтительно представляют собой одно антитело, включающее DVI-категорию, и одно антитело, не включающее DVI-категорию.
При использовании устройства согласно настоящему изобретению для определения группы крови больше не требуется пипетировать каждый образец для каждого отдельного определения, а в одной пробе можно одновременно определять большое число желаемых антигенов систем групп крови, подлежащих определению, например важнейшие групповые признаки систем групп крови АВО, Rh и Келла (А, В, АВ, D, С, с, Е, е, Cw, K). Это обеспечивает исключительную рационализацию рабочих процессов. Также значительно более удобным является считывание результатов, расположенных по диагонали. Далее, с использованием устройства согласно настоящему изобретению можно в одном устройстве определять и считывать результаты определения, например, АВ0-характеристик и Rh-характеристик. Двухмерное плоскостное представление результатов и стабильная конечная точка реакции благоприятствуют как считыванию результатов невооруженным глазом, так и автоматическому считыванию результатов с использованием общеупотребительных способов анализа изображений, например ПЗС-камер. Снижаются трудозатраты, даже при ручной обработке результатов. Устройство согласно настоящему изобретению также обеспечивает снижение загрязнения окружающей среды и экономические эффекты. Даже в экстренных ситуациях можно за короткое время в ходе одного единственного анализа провести, например, полное определение АВ0-группы крови и Rh-подгрупп. С производственно-технической точки зрения конструкция с латерально-диагональными потоками обеспечивает значительные преимущества, по сравнению с устройствами, соответствующими современному уровню техники, так как при этом значительно снижается расход используемых реагентов и обеспечивается определение нескольких исследуемых параметров, которые раньше определяли раздельно, в одном единственном устройстве.
С использованием устройства согласно настоящему изобретению выполняют анализ с латеральным потоком, более конкретно серологическую диагностику групп крови, в котором в качестве индикаторных частиц используют эритроциты, и в одном испытательном устройстве можно одновременно определить несколько клеточных параметров, например эритроцитарные антигены или эпитопы антигенов, плазматические параметры и/или свойства клеток крови, более конкретно свойства составных частей цельной крови, в исследуемой пробе. Кроме того, таким образом получают наиболее простую в изготовлении и простую в обращении, более конкретно требующую малого числа серий опытов и не требующую подготовки пробы, а также требующую меньших затрат испытательную систему, с помощью которой можно одновременно определить различные клеточные параметры и/или плазматические параметры одной пробы или нескольких проб, подлежащих исследованию, более конкретно признаки групп крови.
Мембрана устройства согласно настоящему изобретению представляет собой пористую мембрану. Предпочтительными материалами для изготовления мембраны являются, например, нитроцеллюлоза (например, UniSart производства компании Sartorius, HiFlow производства компании Millipore, Whatman, AE99 или FF85/100 производства компании Schleicher&Schuell), полиэтилен (Lateral Flo производства корпорации Porex) или найлон (Novylon производства компании CUNO). Предпочтительно, мембрана должна иметь поры как можно большего размера, так как высокая пористость мембран способствует проникновению в пористую структуру, например, клеточных компонентов пробы, подлежащей анализу, например эритроцитов. Особо предпочтительным является использование адсорбирующих мембран. Устройство согласно настоящему изобретению, тем не менее, не ограничивается этими свойствами. Предпочтительными являются все мембраны с высокой скоростью движения жидкости по капиллярам (капиллярной скоростью), при этом скорость движения жидкости по капиллярам - это время, которое требуется для того, чтобы раствор красителя прошел 40 мм по данной мембране. Особо предпочтительными являются мембраны со скоростью движения жидкости по капиллярам <100.
В предпочтительной форме осуществления изобретения за загрузочной зоной устройства согласно настоящему изобретению и перед индикаторными зонами в направлении течения жидкости на пористой мембране размещают уплотнитель. Можно использовать двух- или трехмерные уплотнители, которые помещают на пористую мембрану, и за счет которых образуется загрузочная зона, изолированная от остальной поверхности пористой мембраны. Уплотнительный элемент согласно настоящему изобретению играет роль барьера для течения жидкости и обеспечивает направленное распределение жидкости пробы и используемых для анализа реактивов в пористой мембране. Кроме того, уплотнительный элемент согласно настоящему изобретению изолирует загрузочную зону для предотвращения нежелательного перехода жидкости в другие области устройства для проведения анализа с латеральными потоками.
Предпочтительными формами осуществления уплотнительных элементов являются форма перегородки, форма ванночки или форма воронки. Формирование уплотнительного элемента осуществляют в процессе вырезания из материала, используемого для изготовления уплотнительного элемента. В случае формы воронки или формы ванночки уплотнительный элемент имеет внутреннее отверстие, предпочтительными формами которого являются круглая, квадратная или прямоугольная, в случае формы воронки к нижней стороне (стороне контакта с мембраной) уплотнительный элемент суживается.
Предпочтительными материалами для изготовления уплотнительного элемента, являются такие материалы, которые не поглощают воду (гидрофобные). В особой форме осуществления материалы с одной стороны покрыты слоем клеящего вещества, например чувствительного к изменениям давления или самоклеящегося акрилатного клея. Благодаря этому слою, уплотнительный элемент может быть приклеен непосредственно к поверхности пористой мембраны. Альтернативно уплотнительный элемент может быть соединен с корпусом устройства для проведения анализа с латеральными потоками, например приклеен, так что в этой форме осуществления корпус устройства для проведения анализа с латеральными потоками прижимает уплотнительный элемент к поверхности пористой мембраны, и за счет этого обеспечиваются функции уплотнительного элемента.
Предпочтительными материалами для изготовления двухмерных уплотнительных элементов являются любые формы клейких лент или клейких пленок (например - Tesa 4124 производства компании Beiersdorf AG, ARcare 7815 производства компании Adhesives Research).
Предпочтительными материалами для изготовления трехмерных уплотнительных элементов являются гибкие эластомерные материалы с закрытыми порами или гибкие силиконовые материалы с различными значениями толщины материалов, предпочтительно - в диапазоне 3-5 мм (например, ячеистая резина EPDM140 производства компании Pitzner, силиконовый каучук или натуральный каучук с твердостью 40° или менее производства компании Castan).
Благодаря такой конструкции согласно настоящему изобретению устройство согласно настоящему изобретению способно воспринимать жидкие пробы, содержащие клетки, например цельную кровь, не отфильтровывая клетки. Далее, уплотнительный элемент обеспечивает возможность нанесения на пористую мембрану (в загрузочную зону) пробы большого объема без переполнения загрузочной зоны. При этом уплотнительный элемент способствует использованию адсорбционных свойств пористой мембраны. Кроме того, уплотнительный элемент гарантирует направленное течение пробы. Однако устройство согласно настоящему изобретению может хорошо функционировать как с уплотнительным элементом, так и без него.
Для абсорбционной зоны (абсорбционной подушечки) устройства согласно настоящему изобретению предпочтительны механически стабильные материалы, предпочтительно с абсорбцией воды в диапазоне 20-30 г/100 см2 (например, бумага Wicking, тип 300, производства компании Schleicher&Schull). Контакт между абсорбционной подушечкой и мембраной, обеспечивающей латеральный поток, в устройстве согласно настоящему изобретению обеспечивается за счет ее прижимания и перекрытия с пористой мембраной. Точное позиционирование абсорбционной подушечки на мембране осуществляется за счет приклеивания абсорбционной подушечки к опорному слою (подложке), к которому прикреплена мембрана, обеспечивающая латеральные потоки.
В следующей форме осуществления настоящего изобретения компоненты устройства согласно настоящему изобретению с целью механического укрепления укладывают на подложку, или опорный слой. Тем не менее, устройство согласно настоящему изобретению может функционировать и без опорного слоя. Предпочтительными являются механически стабильные и не поглощающие воду материалы, предпочтительно - с толщиной, равной 100 мкм или больше, которые с одной или с двух сторон покрыты слоем клеящего вещества, например чувствительного к изменениям давления или самоклеящегося акрилатного клея (например, 0,005" Polyester W/GL-187, G&L). На опорном слое фиксируют пористую мембрану и абсорбционную подушечку. В случае опорного слоя, покрытого клеем с двух сторон, вторую клеящую сторону используют для фиксации устройства на других поверхностях, например внутри корпуса устройства для проведения анализа с латеральными потоками.
В следующей форме осуществления изобретения устройство согласно настоящему изобретению, либо с опорным слоем, на котором размещены компоненты устройства согласно настоящему изобретению, либо без него, вставлено в корпус, за счет чего мембранные компоненты прижимаются друг к другу, и корпус способствует выполнению своей функции уплотнительным элементом. Однако устройство согласно настоящему изобретению может одинаково хорошо функционировать как с корпусом, так и без корпуса.
Следующим объектом изобретения является применение устройства согласно настоящему изобретению для анализа крови, более конкретно для одновременного проведения определения антигенов групп крови или эпитопов антигенов всех мыслимых систем групп крови, предпочтительно различных аналитов, находящихся на поверхности эритроцитов. Определяемыми антигенами или эпитопами антигенов являются, например, антигены или эпитопы антигенов системы групп крови АВ0, Rh-системы, систем Келла, Льюиса, Hh, Даффи, Кидда, MNS, Лютерана, Р-системы, системы групп крови Диего, Yt, Скианна, Домброка, Колтона, Чидо/Роджерса, Гербиха, Кромера, Кнопса, Ландштайнера-Винера, Xg, Kx, Индиана, Ok, Рафа, Джона Милтона Хагена, Лангерайса и/или Сида, более конкретно -А1, А2, В, D, С, с, Е, е, Cw, К, к, М, N, S, s, Jk(a), Jk(b), Fy(a), Fy(b), Kp(a), Kp(b), Js(a), Js(b), Le(a), Le(b), Lu(a), Lu(b), P1, I, H, Xg(a), U, Vw, Wr(a), Lan.
В предпочтительной форме осуществления устройства согласно настоящему определению одновременно определяют несколько признаков группы крови, например А, В, АВ, D, С, с, Е, е, Cw и K. Пробу, подлежащую исследованию, например нативную цельную кровь или цельную кровь с добавлением антикоагулянта, или концентрат эритроцитов, или разбавленные суспензии эритроцитов, наносят на загрузочную зону устройства согласно настоящему изобретению. Содержащиеся в пробе эритроциты, несущие аналит (или аналиты), одновременно служат и индикаторными частицами.
Эта задача согласно настоящему изобретению решена, прежде всего, за счет создания способа определения нескольких аналитов или их производных в жидкой пробе, который включает в себя нанесение пробы на загрузочную зону мембраны устройства согласно настоящему изобретению, причем эту пробу наносят в количестве, достаточном для того, чтобы заставить жидкость пробы течь в направлении абсорбционной зоны через индикаторные зоны, и чтобы заставить аналиты или их производные, содержащиеся в жидкости пробы, связываться в соответствующих индикаторных зонах или образовывать в индикаторных зонах комплексы.
В способе согласно настоящему изобретению аналитами, подлежащими определению, являются, более конкретно, антигены групп крови или эпитопы антигенов всех систем групп крови, предпочтительно те, которые находятся на поверхности эритроцитов. Антигенами или эпитопами антигенов являются, например, антигены или эпитопы антигенов АВ0-системы групп крови, Rh-системы, систем Келла, Льюиса, Hh, Даффи, Кидда, MNS, Лютерана, Р-системы, систем групп крови Диего, Yt, Скианна, Домброка, Колтона, Чидо/Роджерса, Гербиха, Кромера, Кнопса, Ландштайнера-Винера, Xg, Kx, Индиана, Ok, Рафа, Джона Милтона Хагена, Лангерайса и/или Сида, более конкретно - А1, А2, В, D, С, с, Е, е, Cw, K, k, M, N, S, s, Jk(a), Jk(b), Fy(a), Fy(b), Kp(a), Kp(b), Js(a), Js(b), Le(a), Le(b), Lu(a), Lu(b), P1, I, H, Xg(a), U, Vw, Wr(a), Lan.
В предпочтительной форме осуществления способа согласно настоящему определению одновременно определяют несколько признаков группы крови, например А, В, АВ, D, С, с, Е, е, Cw и K. Пробу, подлежащую исследованию, например нативную цельную кровь, или цельную кровь с добавлением антикоагулянта, или суспензии эритроцитов, содержащие исследуемую жидкость или не содержащие ее, например контрольную кровь, наносят на загрузочную зону устройства согласно настоящему изобретению. Содержащиеся в пробе эритроциты, несущие аналит (или аналиты), одновременно служат и индикаторными частицами.
ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
Далее изобретение будет описано более подробно с использованием рисунков и примеров, не ограничивающих настоящее изобретение. На рисунках изображено следующее:
Фиг.1 - перспективное изображение устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE;
Фиг.2 - изображение в разобранном виде представленного на Фиг. 1 устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками;
Фиг.3 - перспективное изображение устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE, изготовленного с использованием трехмерного уплотнительного элемента в форме перегородки;
Фиг.4 - изображение в разобранном виде представленного на Фиг.3 устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками;
Фиг.5 - перспективное изображение устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE, изготовленного с использованием трехмерного уплотнительного элемента в форме ванночки;
Фиг.6 - изображение в разобранном виде представленного на Фиг. 5 устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками;
Фиг.7 - перспективное изображение устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D, С, с, Е, е, Cw и К;
Фиг.8 - перспективное изображение устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками, выполненного в виде устройства для проведения анализа у постели больного с целью проверки идентичности АВО-признаков реципиента и консервированной крови;
Фиг.9 - изображение в разобранном виде представленного на Фиг.8 устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками;
Фиг.10 - перспективное изображение устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE;
Фиг.11 - перспективное изображение устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE;
Фиг.12 - перспективное изображение устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE;
Фиг.13 - перспективное изображение устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE;
Фиг.14 - перспективное изображение устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE;
Фиг.15 - изображение в разобранном виде представленного на Фиг.14 устройства согласно настоящему изобретению для проведения анализа с латеральными потоками.
На Фиг.1 в качестве примера приведено перспективное изображение устройства для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE. В приведенном примере устройство состоит из опорного слоя 1, пористой мембраны 2, абсорбционной подушечки 3 и двумерного уплотнительного элемента 4, выполненного в форме перегородки. При этом пористая мембрана 2 зафиксирована на опорном слое 1, покрытом чувствительным к давлению или самоклеящимся акрилатным клеящим веществом. Абсорбционная подушечка 3 также зафиксирована на опорном слое 1, при этом часть абсорбционной подушечки 3 перекрывается с пористой мембраной 2. Зафиксированный на верхней стороне пористой мембраны 2 уплотнительный элемент 4 отделяет загрузочную зону 5 от остальной поверхности мембраны и обеспечивает направленное поступление жидкости пробы и анализируемых веществ в пористую мембрану 2. Между загрузочной зоной 5 и областью пористой мембраны 2, контактирующей с абсорбционной подушечкой 3, расположена область индикаторных зон 6. Она состоит из смещенных по диагонали относительно друг друга, расположенных в определенных положениях с координатами Х и Y, точечных индикаторных зон I-VI, причем индикаторные зоны состоят из следующих связывающих элементов:
| Индикаторная зона | Связывающий элемент | Описание |
| I | Антитела | Анти-А (моноклональные) |
| II | Антитела | Анти-В (моноклональные) |
| III | Антитела | Анти-АВ (моноклональные) |
| IV | Антитела | Анти-D (моноклональные) |
| V | Антитела | Анти-CDE (моноклональные) |
| VI | Антитела | Антиэритроцитарные (поликлональные) |
Индикаторная зона VI является контролем (ctl) и содержит поликлональные антиэритроцитарные антитела. Она расположена дистально по отношению ко всем остальным индикаторным зонам (т.е. в удалении от них).
На Фиг.2 представлено в разобранном виде изображенное на Фиг.1 устройство для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению, которое состоит из следующих компонентов: опорного слоя 1, пористой мембраны 2, абсорбционной подушечки 3 и уплотнительного элемента 4, при этом загрузочная зона 5 отделена от остальной мембраны, которая содержит область индикаторных зон 6 с расположенными со смещением друг относительно друга по диагонали индикаторными зонами I-VI.
На Фиг.3 в качестве примера приведено перспективное изображение устройства для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE. В приведенном примере компоненты устройства соответствуют компонентам устройства, изображенного на Фиг.1, за исключением фиксированного на верхней стороне пористой мембраны 2, выполненного в форме трехмерной перегородки уплотнительного элемента 4.
На Фиг.4 представлено в разобранном виде изображенное на Фиг.3 устройство для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению, которое состоит из следующих компонентов: опорного слоя 1, пористой мембраны 2, абсорбционной подушечки 3 и уплотнительного элемента 4, выполненного в форме трехмерной перегородки, которая отделяет загрузочную зону 5 от остальной мембраны, содержащей область индикаторных зон 6 с расположенными со смещением друг относительно друга по диагонали от проксимальной стороны к дистальной индикаторными зонами I-VI.
На Фиг.5 в качестве примера приведено перспективное изображение устройства для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE. В приведенном примере компоненты устройства соответствуют компонентам устройства, изображенного на Фиг.1, за исключением фиксированного на верхней стороне пористой мембраны 2, выполненного в форме трехмерной ванночки уплотнительного элемента 4.
На Фиг.6 представлено в разобранном виде изображенное на Фиг.5 устройство для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению, которое состоит из следующих компонентов: опорного слоя 1, пористой мембраны 2, абсорбционной подушечки 3 и уплотнительного элемента 4, выполненного в форме трехмерной ванночки, которая отделяет загрузочную зону 5 от остальной мембраны, содержащей область индикаторных зон 6 с расположенными со смещением друг относительно друга по диагонали от проксимальной стороны к дистальной индикаторными зонами I-VI.
На Фиг.7 в качестве примера приведено перспективное изображение устройства для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D, С, с, Е, е, Cw и K. В приведенном примере устройство состоит из опорного слоя 1, пористой мембраны 2, абсорбционной подушечки 3 и двумерного уплотнительного элемента 4, выполненного в форме перегородки. При этом пористая мембрана 2 зафиксирована на опорном слое 1, покрытом чувствительным к давлению или самоклеящимся акрилатным клеящим веществом. Абсорбционная подушечка 3 также зафиксирована на опорном слое 1, при этом часть абсорбционной подушечки 3 перекрывается с пористой мембраной 2. Зафиксированный на верхней стороне пористой мембраны 2 уплотнительный элемент 4 отделяет загрузочную зону 5 от остальной поверхности мембраны и обеспечивает направленное поступление жидкости пробы и анализируемых веществ в пористую мембрану 2. Между загрузочной зоной 5 и областью пористой мембраны 2, контактирующей с абсорбционной подушечкой 3, расположена область индикаторных зон 6. Она состоит из смещенных по диагонали относительно друг друга, расположенных в определенных положениях с координатами Х и Y, точечных индикаторных зон I-XI, причем индикаторные зоны состоят из следующих связывающих элементов:
| Индикаторная зона | Связывающий элемент | Описание |
| I | Антитела | Анти-А (моноклональные) |
| II | Антитела | Анти-В (моноклональные) |
| III | Антитела | Анти-АВ (моноклональные) |
| IV | Антитела | Анти-D (моноклональные) |
| V | Антитела | Анти-С (моноклональные) |
| VI | Антитела | Анти-с (моноклональные) |
| VII | Антитела | Анти-Е (моноклональные) |
| VIII | Антитела | Анти-е (моноклональные) |
| IX | Антитела | Анти-Cw (моноклональные) |
| Х | Антитела | Анти-K (моноклональные) |
| XI | Антитела | Антиэритроцитарные (поликлональные) |
Индикаторная зона XI является контролем (ctl) и содержит поликлональные антиэритроцитарные антитела. Она расположена дистально по отношению ко всем остальным индикаторным зонам.
На Фиг.8 в качестве примера приведено перспективное изображение устройства для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению, выполненного как устройство для проведения анализа у постели больного с целью проверки АВ0-идентичности крови донора и консервированной крови. В приведенном примере устройство состоит из опорного слоя 1, двух пористых мембран 2а и 2b, абсорбционной подушечки 3 и двухмерных, выполненных в форме перегородок уплотнительных элементов 4а и 4b. Обе пористые мембраны 2а и 2b зафиксированы параллельно и в одном направлении на опорном слое 1, снабженном чувствительным к давлению или самоклеящимся акрилатным клеящим веществом. Абсорбционная подушечка 3 также зафиксирована на опорном слое 1, при этом часть абсорбционной подушечки 3 перекрывается с пористыми мембранами 2а и 2b на одинаковое расстояние. Зафиксированные на верхней стороне пористых мембран 2а и 2b уплотнительные элементы 4а и 4b отделяют загрузочные зоны 5а и 5b от остальной поверхности мембран и обеспечивает направленное поступление жидкости пробы и анализируемых веществ в пористые мембраны 2а и 2b. Между загрузочными зонами 5а или 5b и соответствующими областями пористых мембран 2а и 2b, контактирующими с абсорбционной подушечкой 3, расположены области индикаторных зон 6а и 6b. Они состоят из смещенных по диагонали относительно друг друга, расположенных в определенных положениях с координатами Х и Y, точечных индикаторных зон Ia-IIIa и Ib-IIIb, причем индикаторные зоны состоят из следующих связывающих элементов:
| Индикаторная зона | Связывающий элемент | Описание |
| Ia, Ib | Антитела | Анти-А (моноклональные) |
| IIa, IIb | Антитела | Анти-В (моноклональные) |
| IIIa, IIIb | Антитела | Антиэритроцитарные (поликлональные) |
Индикаторные зоны IIIa и IIIb являются контролями (ctl) и содержат поликлональные антитела к эритроцитам. Они расположены дистально по отношению ко всем остальным индикаторным зонам.
На Фиг.9 в качестве примера приведено в разобранном виде изображенное на Фиг.8 устройство для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению, которое состоит из следующих компонентов: опорного слоя 1, пористых мембран 2а и 2b, абсорбционной подушечки 3 и уплотнительных элементов 4а и 4b, которые отделяют загрузочные зоны 5а и 5b от остальных частей мембран, которые содержат области индикаторных зон 6а и 6b со смещенными по диагонали от проксимальной стороны к дистальной индикаторными зонами Ia-IIIa и Ib-IIIb.
На Фиг.10 в качестве примера приведено перспективное изображение устройства для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE. В приведенном примере устройство для проведения анализа с латеральными потоками предназначено для праворуких лаборантов и состоит из опорного слоя 1, пористой мембраны 2, абсорбционной подушечки 3 и двумерного уплотнительного элемента 4, выполненного в форме перегородки. При этом пористая мембрана 2 зафиксирована на опорном слое 1, покрытом чувствительным к давлению или самоклеящимся акрилатным клеящим веществом. Абсорбционная подушечка 3 также зафиксирована на опорном слое 1, при этом часть абсорбционной подушечки 3 перекрывается с пористой мембраной 2. Зафиксированный на верхней стороне пористой мембраны 2 уплотнительный элемент 4 отделяет загрузочную зону 5 от остальной поверхности мембраны и обеспечивает направленное поступление жидкости пробы и анализируемых веществ в пористую мембрану 2. Между загрузочной зоной 5 и областью пористой мембраны 2, контактирующей с абсорбционной подушечкой 3, расположена область индикаторных зон 6. Она состоит из смещенных по диагонали относительно друг друга, расположенных в линейном ряду в определенных положениях с координатами Х и Y, точечных индикаторных зон I-VI, причем индикаторные зоны состоят из следующих связывающих элементов:
| Индикаторная зона | Связывающий элемент | Описание |
| I | Антитела | Анти-А (моноклональные) |
| II | Антитела | Анти-В (моноклональные) |
| III | Антитела | Анти-АВ (моноклональные) |
| IV | Антитела | Анти-D (моноклональные) |
| V | Антитела | Анти-CDE (моноклональные) |
| VI | Антитела | Антиэритроцитарные (поликлональные) |
Индикаторная зона VI является контролем (ctl) и содержит поликлональные антиэритроцитарные антитела. Она расположена дистально по отношению ко всем остальным индикаторным зонам.
На Фиг.11 в качестве примера приведено перспективное изображение устройства для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE. В приведенном примере устройство для проведения анализа с латеральными потоками предназначено для леворуких лаборантов и состоит из опорного слоя 1, пористой мембраны 2, абсорбционной подушечки 3 и двумерного уплотнительного элемента 4, выполненного в форме перегородки. При этом пористая мембрана 2 зафиксирована на опорном слое 1, покрытом чувствительным к давлению или самоклеящимся акрилатным клеящим веществом. Абсорбционная подушечка 3 также зафиксирована на опорном слое 1, при этом часть абсорбционной подушечки 3 перекрывается с пористой мембраной 2. Зафиксированный на верхней стороне пористой мембраны 2 уплотнительный элемент 4 отделяет загрузочную зону 5 от остальной поверхности мембраны и обеспечивает направленное поступление жидкости пробы и анализируемых веществ в пористую мембрану 2. Между загрузочной зоной 5 и областью пористой мембраны 2, контактирующей с абсорбционной подушечкой 3, расположена область индикаторных зон 6. Она состоит из смещенных по диагонали относительно друг друга, расположенных в линейном ряду в определенных положениях с координатами Х и Y, точечных индикаторных зон I-VI, причем индикаторные зоны состоят из следующих связывающих элементов:
| Индикаторная зона | Связывающий элемент | Описание |
| I | Антитела | Анти-А (моноклональные) |
| II | Антитела | Анти-В (моноклональные) |
| III | Антитела | Анти-АВ (моноклональные) |
| IV | Антитела | Анти-D (моноклональные) |
| V | Антитела | Анти-CDE (моноклональные) |
| VI | Антитела | Антиэритроцитарные (поликлональные) |
Индикаторная зона VI является контролем (ctl) и содержит поликлональные антиэритроцитарные антитела. Она расположена дистально по отношению ко всем остальным индикаторным зонам.
На Фиг.12 в качестве примера приведено перспективное изображение устройства для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE. В приведенном примере устройство для проведения анализа с латеральными потоками предназначено для праворуких лаборантов и состоит из опорного слоя 1, пористой мембраны 2, абсорбционной подушечки 3 и двумерного уплотнительного элемента 4, выполненного в форме перегородки. При этом пористая мембрана 2 зафиксирована на опорном слое 1, покрытом чувствительным к давлению или самоклеящимся акрилатным клеящим веществом. Абсорбционная подушечка 3 также зафиксирована на опорном слое 1, при этом часть абсорбционной подушечки 3 перекрывается с пористой мембраной 2. Зафиксированный на верхней стороне пористой мембраны 2 уплотнительный элемент 4 отделяет загрузочную зону 5 от остальной поверхности мембраны и обеспечивает направленное поступление жидкости пробы и анализируемых веществ в пористую мембрану 2. Между загрузочной зоной 5 и областью пористой мембраны 2, контактирующей с абсорбционной подушечкой 3, расположена область индикаторных зон 6. Она состоит из смещенных по диагонали относительно друг друга, расположенных в определенных положениях с координатами Х и Y, удлиненных или имеющих форму полос индикаторных зон I-VI, причем индикаторные зоны состоят из следующих связывающих элементов:
| Индикаторная зона | Связывающий элемент | Описание |
| I | Антитела | Анти-А (моноклональные) |
| II | Антитела | Анти-В (моноклональные) |
| III | Антитела | Анти-АВ (моноклональные) |
| IV | Антитела | Анти-D (моноклональные) |
| V | Антитела | Анти-CDE (моноклональные) |
| VI | Антитела | Антиэритроцитарные (поликлональные) |
Индикаторная зона VI является контролем (ctl) и содержит поликлональные антиэритроцитарные антитела. Она расположена дистально по отношению ко всем остальным индикаторным зонам.
На Фиг.13 в качестве примера приведено перспективное изображение устройства для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE. В приведенном примере устройство для проведения анализа с латеральными потоками предназначено для леворуких лаборантов и состоит из опорного слоя 1, пористой мембраны 2, абсорбционной подушечки 3 и двумерного уплотнительного элемента 4, выполненного в форме перегородки. При этом пористая мембрана 2 зафиксирована на опорном слое 1, покрытом чувствительным к давлению или самоклеящимся акрилатным клеящим веществом. Абсорбционная подушечка 3 также зафиксирована на опорном слое 1, при этом часть абсорбционной подушечки 3 перекрывается с пористой мембраной 2. Зафиксированный на верхней стороне пористой мембраны 2 уплотнительный элемент 4 отделяет загрузочную зону 5 от остальной поверхности мембраны и обеспечивает направленное поступление жидкости пробы и анализируемых веществ в пористую мембрану 2. Между загрузочной зоной 5 и областью пористой мембраны 2, контактирующей с абсорбционной подушечкой 3, расположена область индикаторных зон 6. Она состоит из смещенных по диагонали относительно друг друга, расположенных в линейном ряду в определенных положениях с координатами Х и Y, удлиненных или имеющих форму полос индикаторных зон I-VI, причем индикаторные зоны состоят из следующих связывающих элементов:
| Индикаторная зона | Связывающий элемент | Описание |
| I | Антитела | Анти-А (моноклональные) |
| II | Антитела | Анти-В (моноклональные) |
| III | Антитела | Анти-АВ (моноклональные) |
| IV | Антитела | Анти-D (моноклональные) |
| V | Антитела | Анти-CDE (моноклональные) |
| VI | Антитела | Антиэритроцитарные (поликлональные) |
Индикаторная зона VI является контролем (ctl) и содержит поликлональные антиэритроцитарные антитела. Она расположена дистально по отношению ко всем остальным индикаторным зонам.
На Фиг.14 в качестве примера приведено перспективное изображение устройства для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению с двунаправленными потоками для одновременного определения признаков групп крови А, В, АВ, D и CDE. В приведенном примере устройство состоит из опорного слоя 1, пористой мембраны 2, абсорбционных подушечек 3а и 3b и двумерных уплотнительных элементов 4а и 4b, выполненных в форме перегородок. При этом пористая мембрана 2 зафиксирована на опорном слое 1, покрытом чувствительным к давлению акрилатным клеящим веществом. Абсорбционные подушечки 3а и 3b также зафиксированы на опорном слое 1, при этом часть абсорбционных подушечек 3а и 3b перекрывается с пористой мембраной 2. Зафиксированные на верхней стороне пористой мембраны 2 уплотнительные элементы 4а и 4b отделяют расположенную в середине мембраны загрузочную зону 5 от остальной поверхности мембраны и обеспечивают направленное распределение жидкости пробы и анализируемых веществ в пористой мембране 2 в двух направлениях. Между загрузочной зоной 5 и областью пористой мембраны 2, контактирующей с абсорбционными подушечками 3а и 3b, расположены области индикаторных зон 6а и 6b. Они состоят из смещенных по диагонали относительно друг друга, расположенных в линейном ряду в определенных положениях с координатами Х и Y, точечных индикаторных зон I-VI, причем индикаторные зоны состоят из следующих связывающих элементов:
| Индикаторная зона | Связывающий элемент | Описание |
| I | Антитела | Анти-А (моноклональные) |
| II | Антитела | Анти-В (моноклональные) |
| III | Антитела | Анти-АВ (моноклональные) |
| IV | Антитела | Анти-D (моноклональные) |
| V | Антитела | Анти-CDE (монокпональные) |
| VIa, VIb | Антитела | Антиэритроцитарные (поликпональные) |
Индикаторные зоны VIa и VIb являются контролями (ctl) и содержат поликлональные антиэритроцитарные антитела. Они расположены дистально по отношению ко всем остальным индикаторным зонам.
На Фиг.15 в качестве примера приведено в разобранном виде изображенное на Фиг.14 устройство для проведения анализов с латеральными потоками согласно настоящему изобретению с двунаправленными потоками, которое состоит из следующих компонентов: опорного слоя 1, пористой мембраны 2, абсорбционных подушечек 3а и 3b и уплотнительных элементов 4а и 4b, которые отделяют расположенную в центре загрузочную зону 5 от остальной поверхности мембраны, которая содержит области индикаторных зон 6а и 6b со смещенными по диагонали от проксимальной стороны к дистальной индикаторными зонами I, II, III, VIa или IV, V, VIb.
ОПИСАНИЕ ПРИМЕРОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Пример 1: Определение группы крови
Изготовление испытательных полосок:
Испытательные полоски состоят из загрузочной зоны, области индикаторных зон и абсорбционной зоны. Мембраны сорта Millipore HiFlow Plus 065 разрезали на полосы размером 15 мм × 35 мм (ширина/длина; x/y) для варианта с 6 индикаторными зонами или размером 26×40 мм для варианта с 11 индикаторными зонами и наклеивали на опорный слой (подложку, например - производства компании G&L). В области индикаторных зон с помощью дозатора, например - AD3200 (Biodot), со смещением по диагонали или, альтернативно, со смещением в линейном ряду наносят точечно по 0,2 мл растворов различных моноклональных антител, специфичных для различных групп крови:
анти-А-антитела - клон Birma-1 (производства компании Serologicals, TLJ0105); анти-В-антитела - клон ES-4 (производства компании Serologicals, NCA0201); анти-АВ-антитела - клоны АВ6, АВ26, АВ92 (производства компании Medion Diagnostics, 010062); анти-D-антитела - клон LDM3 (SNBTS, Z71180100); анти-С-антитела - клон MS-24 (производства компании Serologicals, без рецептуры, KGK0212); анти-с-антитела - клон MS-33 (производства компании Serologicals, KNI0207); анти-Е-антитела - клоны MS-80 + MS-258 (производства компании Serologicals, KXE0201); анти-е-антитела - клоны MS-21 + MS-63 (производства компании Serologicals, KLL0205+KQK0205); анти-Cw-антитела - клон MS-110 (производства компании Serologicals, JPK0201); анти-K-антитела - клон MS-56 (производства компании Serologicals, KOA0201).
Анти-А-антитела размещают в положении x=3 мм/y=10 мм. Все остальные антитела наносят последовательно со смещением на расстояния x=1,5 мм/y=2,2 мм относительно положения анти-А-антител. Специфические антиэритроцитарные контрольные антитела (фракция IgG кролика к эритроцитам человека, производства компании Rockland, 209-4139) наносят со смещением от последнего пятна серии антител, специфичных к группам крови, на расстояния x=2 мм/y=3,5 мм. Разведения антител выполняют в 15 мМ калийфосфатном буфере с рН 7,5, содержавшем 10% (объем/объем) метанола, следующим образом: анти-А-антитела 1:3, анти-В-антитела 1:2, анти-АВ-антитела 1:4, анти-D-антитела 1:4, антиэритроцитарные антитела 1:3. Все остальные растворы антител предварительно не разводят, только добавляют метанол в концентрации 10% (объем/объем).
После нанесения антител мембраны в течение 20 минут сушили при 40°С, после чего хранили при постоянной влажности воздуха до проведения анализа. На дистальном относительно загрузочной зоны конце приклеивают абсорбционную подушечку размером 15 мм×10 мм или 26×10 мм (Schleicher&Schull, 300) так, чтобы она перекрывала мембрану на 3 мм. Загрузочную зону отделяют от остальной мембраны приклеиванием клейкой ленты (Tesa 4124) шириной 1-2 мм в положении y=5 через всю ширину мембраны.
Проведение анализа:
В качестве проб крови используют цельную кровь с добавлением антикоагулянта. Для собственно анализа на загрузочную зону наносят разведенную в соотношении 1:3 буфером-разбавителем (Enlisstll, производства Medion Diagnostics, или Разбавитель 1, производства DiaMed) кровь в количестве 100 мкл (вариант с 6 индикаторными зонами) или 150 мкл (вариант с 11 индикаторными зонами). Когда кровь покидает загрузочную зону, на нее один раз с помощью пипетки наносят 100 мкл или 150 мкл буфера-разбавителя или, предпочтительно, 100 мкл гипоосмотического промывочного буфера (15 мМ калийфосфатный буфер, рН 7,4, 0,3-0,45% (вес/объем) NaCI), чтобы удалить из мембраны несвязанные эритроциты. Альтернативно для нанесения пробы можно использовать также 50 мкл разведенной в соотношении 1:3 или неразведенной крови. После нанесения этих проб мембрану два раза промывают буфером-разбавителем, или один раз -буфером-разбавителем, а затем гипоосмотическим промывочным буфером.
При выбранном разведении 1:6 антиэритроцитарный контроль становится видимым через 2 минуты как индикатор успешно проведенного анализа. В случае неразведенной крови анализ длится дольше.
Результаты:
Результаты анализа считаются действительными, если антиэритроцитарный контроль обнаруживает явно положительный сигнал (красная точка). В зависимости от наличия или отсутствия соответствующих антигенов групп крови в соответствующих положениях проявляются красные точки (положительная реакция) или почти белый цвет фона мембраны (отрицательная реакция).
Пример 2: Экспресс-анализ, проводимый у постели больного
Изготовление испытательных полосок:
Устройство для проведения экспресс-анализа состоит из двух фиксированных на опорном слое (подложке) мембран (“Консервированная кровь”, “Реципиент”), каждая из которых состоит из загрузочной зоны, области индикаторных зон и абсорбционной зоны.
Мембраны сорта Millipore HiFlow Plus 065 разрезают на полосы размером 12,5 мм×30 мм (ширина/длина; x/y). Их наклеивают по две на опорный слой (подложку, например, производства компании G&L) на расстоянии 5 мм друг от друга, так что общий размер устройства составляет 30×30 мм.
На обеих мембранах с помощью дозатора, например AD3200 (Biodot), со смещением по диагонали осуществляют следующие, каждый раз одинаковые нанесения: точечно по 0,2 мл растворов моноклональных антител: анти-А-антитела - клон Birma-1 (производства компании Serologicals, TLJ0105) - в положении x=4 мм/y=12 мм; анти-В-антитела - клон ES-4 (производства компании Serologicals, NCA0201) - в положении x=7 мм/y=14 мм. Специфические антиэритроцитарные контрольные антитела (фракция IgG кролика к эритроцитам человека, производства компании Rockland, 209-4139) наносят со смещением на расстояния x=3 мм/y=4 мм от места нанесения анти-В-антител. Разведения антител выполняют в 15 мМ калийфосфатном буфере с рН 7,5, содержавшем 10% (объем/объем) метанола, следующим образом: анти-А-антитела 1:3, анти-В-антитела 1:2, антиэритроцитарные антитела 1:3.
После нанесения антител мембраны в течение 20 минут сушат при 40°С, после чего хранят при постоянной влажности воздуха до проведения анализа. На дистальном относительно загрузочной зоны конце приклеивают абсорбционную подушечку размером 30 мм×10 мм (Schleicher&Schull, 300) так, чтобы она перекрывала обе мембраны на 3 мм. Загрузочную зону отделяют от остальной мембраны приклеиванием клейкой ленты (Tesa 4124) шириной 1-2 мм в положении y=5 через всю ширину мембраны.
Проведение анализа:
В качестве проб крови используют: для мембраны “консервированная кровь” - концентрат эритроцитов; для мембраны “Реципиент” - цельную кровь. Для собственно анализа на соответствующие загрузочные зоны наносят 50 мкл цельной крови на стороне “Реципиент” и 50 мкл концентрата эритроцитов на стороне “Консервированная кровь”. После того как кровь полностью впитывается в мембраны, загрузочные зоны промывают, нанося на каждую из них 2×100 мкл буфера-разбавителя или один раз - буфер-разбавитель, а затем гипоосмотический промывочный буфер.
Результаты:
Антиэритроцитарный контроль, являющийся индикатором успешно проведенного анализа, становится видимым на обеих мембранах через 2 минуты.
Результаты анализа считаются действительными, если антиэритроцитарный контроль обнаруживает явно положительный сигнал (красная точка). В зависимости от наличия или отсутствия соответствующих антигенов групп крови в соответствующих положениях проявляются красные точки (положительная реакция) или почти белый цвет фона мембраны (отрицательная реакция). Идентичная картина на мембранах “Реципиент” и “Консервированная кровь” означает АВ0-идентичность реципиента и консервированной крови.
Пример 3: Определение группы крови с помощью анализа с двунаправленными латеральными потоками
Изготовление испытательных полосок:
Испытательные полоски состоят из находящейся в центре мембраны загрузочной зоны, двух областей индикаторных зон и двух абсорбционных зон. Мембраны сорта Millipore HiFlow Plus 065 разрезают на полосы размером 15 мм×50 мм (ширина/длина; x/y) и наклеивают на опорный слой (подложку, например, производства компании G&L). В области индикаторных зон со смещением по диагонали или, альтернативно, со смещением в линейном ряду наносят точечно по 0,2 мл растворов моноклональных антител, специфичных для различных групп крови. При этом середина длины полоски (y=0 мм) является исходной точкой для размещения индикаторных зон в y-направлении. С помощью дозатора, например AD3200 (производства компании Biodot), наносят следующие антитела:
анти-А-антитела - клон Birma-1 (производства компании Serologicals, TLJ0105); анти-В-антитела - клон ES-4 (производства компании Serologicals, NCA0201); анти-АВ-антитела - клоны АВ6, АВ26, АВ92 (производства компании Medion Diagnostics, 010062); анти-D-антитела - клон LDM3 (SNBTS, Z71180100); анти-С-антитела - клон MS-24 (производства компании Serologicals, без рецептуры, KGK0212); анти-Е-антитела - клоны MS-80 + MS-258 (производства компании Serologicals, KXE0201. Для индикаторной зоны с анти-CDE-антителами анти-D- и анти-С-антитела концентрировали в два раза, анти-Е-антитела - в три раза и смешивали их в равных объемных долях.
В форме осуществления со смещением индикаторных зон по диагонали анти-А-антитела наносят в положении x=4 мм/y=10 мм. Анти-В- и анти-АВ-антитела наносят последовательно со смещением на расстояния x=3,5 мм/y=2 мм относительно положения анти-А-антител. Специфические антиэритроцитарные контрольные антитела (фракция IgG кролика к эритроцитам человека, производства компании Rockland, 209-4139) наносят со смещением от последнего пятна серии анти-А-, анти-В- и анти-АВ-антител на расстояния x=3,5 мм/y=3,5 мм. Анти-D-антитела наносят в положении x=4 мм/y=-10 мм, анти-CDE-антитела - на расстояниях x=3,5 мм/y=-2 мм. Специфические антиэритроцитарные контрольные антитела (фракция IgG кролика к эритроцитам человека, производства компании Rockland, 209-4139) наносят со смещением от места нанесения анти-CDE-антител на расстояния x=3,5 мм/y=-3,5 мм. Разведения антител выполняют в 15 мМ калийфосфатном буфере с рН 7,5, содержащем 10% (объем/объем) метанола, следующим образом: анти-А-антитела 1:3, анти-В-антитела 1:2, анти-АВ-антитела 1:4, анти-D-антитела 1:4, антиэритроцитарные антитела 1:3. Смесь анти-CDE-антител предварительно не разводят, только добавляют метанол в концентрации 10% (объем/объем).
После нанесения антител мембраны в течение 20 минут сушат при 40°С, после чего хранят при постоянной влажности воздуха до проведения анализа. На дистальных относительно загрузочной зоны концах приклеивают абсорбционные подушечки размером 15 мм×10 мм (Schleicher&Schull, 300) так, чтобы они перекрывали мембрану на 3 мм. Загрузочную зону отделяют от остальной мембраны приклеиванием двух полосок клейкой ленты (Теза 4124) шириной 1-2 мм в положениях y=3 мм и y=-3 мм через всю ширину мембраны.
Проведение анализа:
В качестве проб крови используют цельную кровь с добавлением антикоагулянта. Для собственно анализа на загрузочную зону наносят разведенную в соотношении 1:6 буфером-разбавителем (Enlisstll, производства Medion Diagnostics) кровь в количестве 100 мкл. Когда кровь покидает загрузочную зону, на нее один раз с помощью пипетки наносят 100 мкл буфера-разбавителя или 100 мкл гипоосмотического промывочного буфера (15 мМ калийфоссратный буфер, рН 7,4, 0,3-0,45% (вес/объем) NaCl), чтобы удалить из мембраны несвязанные эритроциты. Альтернативно для нанесения пробы можно использовать также 50 мкл разведенной в соотношении 1:3 или неразведенной крови. После нанесения этих проб мембрану два раза промывают буфером-разбавителем или один раз - буфером-разбавителем, а затем гипоосмотическим промывочным буфером.
При выбранном разведении 1:6 антиэритроцитарный контроль как индикатор успешно проведенного анализа становится видимым через 2 минуты. В случае неразведенной крови анализ длится дольше.
Результаты:
Результаты анализа считаются действительными, если антиэритроцитарный контроль обнаруживает явно положительный сигнал (красная точка). В зависимости от наличия или отсутствия соответствующих антигенов групп крови в соответствующих положениях проявляются красные точки (положительная реакция) или почти белый цвет фона мембраны (отрицательная реакция).
Пример 4: Количественное определение аналитов
На Фиг.16 и Фиг.17 показаны результаты исследования крови с использованием устройства согласно изобретению, демонстрирующие осуществление количественного определения антигенов групп крови.
Кроме характерной слабой реакции D-недостаточного фенотипа, Фиг.16 дополнительно демонстрирует градацию между реакциями промежуточной интенсивности (Е и е) и сильными реакциями (с; В), которую можно различить невооруженным глазом. В-антиген имеет наиболее высокую плотность антигена, и поэтому дает самую яркую полосу, с-антиген присутствует как гомозигота (в отсутствие в реакции С-антигена), и потому имеет большее количество антигена на поверхности клетки, чем Е- и е-антигены, которые являются гетерозиготными и, вследствие этого, проявляются в реакции с несколько пониженной интенсивностью.
На Фиг.17 видна сильная реакция D-антигена, а также А-антигена (высокое число антигенов по системе групп крови АВО), с-антигена и Е-антигена (оба присутствуют как гомозиготы).
Анализ, показанный на Фиг.16, выявил низкое содержание D-антигенов на эритроцит, что свидетельствует о наличии D-недостаточного фенотипа. Анализ, показанный на Фиг.17, выявил высокое содержание D-антигенов на эритроцит, что свидетельствует о наличии D-нормального фенотипа.
Claims (18)
1. Устройство для одновременного качественного или количественного определения нескольких аналитов в одной жидкой пробе, включающее мембрану, содержащую
одну загрузочную зону для нанесения жидкой пробы,
по меньшей мере, две индикаторные зоны, имеющие возможность взаимодействия с аналитом (или аналитами), и
по меньшей мере, одну абсорбционную зону, имеющую возможность поглощать жидкость после ее прохождения через индикаторные зоны, причем индикаторные зоны расположены между загрузочной зоной и абсорбционной зоной, отличающееся тем, что оно имеет, по меньшей мере, две разные дорожки, проходящие от загрузочной зоны через соответствующие индикаторные зоны к абсорбционной зоне, при этом дорожки выполнены параллельными, а индикаторные зоны расположены с возможностью прохождения жидкости пробы по каждой дорожке не более чем через одну индикаторную зону.
одну загрузочную зону для нанесения жидкой пробы,
по меньшей мере, две индикаторные зоны, имеющие возможность взаимодействия с аналитом (или аналитами), и
по меньшей мере, одну абсорбционную зону, имеющую возможность поглощать жидкость после ее прохождения через индикаторные зоны, причем индикаторные зоны расположены между загрузочной зоной и абсорбционной зоной, отличающееся тем, что оно имеет, по меньшей мере, две разные дорожки, проходящие от загрузочной зоны через соответствующие индикаторные зоны к абсорбционной зоне, при этом дорожки выполнены параллельными, а индикаторные зоны расположены с возможностью прохождения жидкости пробы по каждой дорожке не более чем через одну индикаторную зону.
2. Устройство по п.1, отличающееся тем, что индикаторные зоны расположены в диагональном, V-образном, W-образном, М-образном, N-образном или прямолинейным порядке.
3. Устройство по п.1, отличающееся тем, что индикаторные зоны содержат антитела, или фрагменты антител, и/или лектины, и/или фрагменты лектинов.
4. Устройство по п.1, отличающееся тем, что индикаторные зоны содержат анти-А-, анти-В-, анти-АВ-, анти-D-, анти-D-, анти-С-, анти-с-, анти-Е-, анти-е-, анти-Cw- и/или анти-К-антитела или фрагменты антител.
5. Устройство по п.1, отличающееся тем, что мембрана состоит из полиэтилена, нитроцеллюлозы или нейлона.
6. Устройство по п.1, отличающееся тем, что после загрузочной зоны и перед индикаторными зонами на мембране расположен, по меньшей мере, один уплотнительный элемент.
7. Устройство по п.1, отличающееся тем, что компоненты устройства для повышения механической прочности укреплены на опорном слое.
8. Устройство по п.1, отличающееся тем, что компоненты устройства собраны в одном корпусе.
9. Применение устройства по пп.1-8 для определения антигенов групп крови.
10. Применение устройства по пп.1-8 для одновременного определения А-, В-, АВ-, D-, С-, с-, Е-, е-, Cw- и/или К-антигенов групп крови.
11. Способ определения нескольких аналитов или их производных в одной жидкой пробе, включающий: нанесение пробы на загрузочную зону мембраны устройства по любому из пп.1-8, передвижение жидкости пробы в направлении абсорбционной зоны через индикаторные зоны за счет количества пробы, образование в индикаторных зонах комплекса аналитов, содержащихся в жидкости пробы.
12. Способ по п.11, отличающийся тем, что аналиты являются антигенами групп крови.
13. Способ по п.11, отличающийся тем, что аналиты содержат А-, В-, АВ-, D-, С-, с-, Е-, е-, Cw- и/или К-антигены групп крови.
14. Способ по п.11, отличающийся тем, что аналиты, являющиеся А-, В-, АВ-, D-, С-, с-, Е-, е-, Cw- и/или К-антигенами групп крови, определяют одновременно.
15. Способ по п.11, отличающийся тем, что индикаторными частицами являются эритроциты.
16. Способ по п.11, отличающийся тем, что после нанесения индикаторных частиц мембрану промывают.
17. Способ по п.16, отличающийся тем, что промывочный буфер предпочтительно является гипоосмотическим.
18. Способ по п.11, отличающийся тем, что жидкая проба состоит из цельной крови или компонентов крови.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE10330982.9 | 2003-07-09 | ||
| DE10330982A DE10330982A1 (de) | 2003-07-09 | 2003-07-09 | Vorrichtung und Verfahren zur simultanen Bestimmung von Blutgruppenantigenen |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2006103022A RU2006103022A (ru) | 2006-08-10 |
| RU2353293C2 true RU2353293C2 (ru) | 2009-04-27 |
Family
ID=34041724
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006103022/14A RU2353293C2 (ru) | 2003-07-09 | 2004-07-08 | Устройство и способ для одновременной идентификации антигенов групп крови |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8053226B2 (ru) |
| EP (1) | EP1646876B1 (ru) |
| JP (1) | JP5090734B2 (ru) |
| KR (1) | KR101214620B1 (ru) |
| CN (1) | CN1816746B (ru) |
| AT (1) | ATE514092T1 (ru) |
| AU (1) | AU2004256210B9 (ru) |
| BR (1) | BRPI0411866B8 (ru) |
| CA (1) | CA2531688C (ru) |
| CY (1) | CY1112563T1 (ru) |
| DE (1) | DE10330982A1 (ru) |
| DK (1) | DK1646876T3 (ru) |
| EG (1) | EG24046A (ru) |
| ES (1) | ES2368715T3 (ru) |
| HK (1) | HK1094721A1 (ru) |
| IL (1) | IL172998A (ru) |
| NZ (1) | NZ544545A (ru) |
| PL (1) | PL1646876T3 (ru) |
| PT (1) | PT1646876E (ru) |
| RU (1) | RU2353293C2 (ru) |
| WO (1) | WO2005005991A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA200601129B (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2554754C2 (ru) * | 2009-07-02 | 2015-06-27 | Омик Аб | Аналитическое устройство капиллярного действия и его изготовление |
Families Citing this family (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102006062619B4 (de) * | 2006-12-29 | 2012-04-26 | Medion Diagnostics Ag | Verfahren zur Bestimmung von minoren Zellpopulationen in heterogenen Zellpopulationen |
| GB0717043D0 (en) * | 2007-04-10 | 2007-10-10 | Inverness Medical Switzerland | Assay device |
| FR2918460B1 (fr) * | 2007-07-02 | 2013-10-04 | Najim Chaibi | Nouveau dispositif permettant l'obtention des resultats des systemes abo,rhesus et autres pherotypes et systemes rares, rai. |
| NZ570601A (en) * | 2007-09-01 | 2009-11-27 | Inverness Medical Switzerland | Assay device with shared zones |
| CN101965225B (zh) * | 2008-03-11 | 2014-04-30 | 皇家飞利浦电子股份有限公司 | 用于过滤流体的过滤装置 |
| GB2460660B (en) | 2008-06-04 | 2013-05-22 | Alere Switzerland Gmbh | Assay reader device & method for measuring hCG |
| CN101603967B (zh) * | 2008-06-10 | 2015-02-18 | 英科新创(厦门)科技有限公司 | 快速检测人ABO/Rh/MN血型的方法及试剂盒 |
| WO2010040103A1 (en) | 2008-10-03 | 2010-04-08 | Micronics, Inc. | Microfluidic apparatus and methods for performing blood typing and crossmatching |
| JP5543310B2 (ja) * | 2010-09-29 | 2014-07-09 | 富士フイルム株式会社 | イムノクロマトグラフ検査方法および装置 |
| JP5543888B2 (ja) * | 2010-09-29 | 2014-07-09 | 富士フイルム株式会社 | イムノクロマトグラフ検査方法および装置 |
| WO2012142763A1 (en) * | 2011-04-21 | 2012-10-26 | Siemens Aktiengesellschaft | Blood typing devices and methods for testing blood type |
| DE102011055070B3 (de) * | 2011-11-04 | 2013-03-07 | Seramun Diagnostica Gmbh | Probenanalysevorrichtung zum Bestimmen von Proben in einer Probenmatrix und Verfahren zum Bestimmen von Proben in einer oder mehreren Probenmatrizen |
| US9804161B1 (en) * | 2012-05-14 | 2017-10-31 | Lawrence Livermore National Security, Llc | Detector and related, devices, methods and systems |
| DE102012013888A1 (de) * | 2012-07-09 | 2014-05-22 | Schebo Biotech Ag | Testkit (Kombi-Schnelltest) zum synchronen Nachweis von Biomarkern im Stuhl zur Erkennung pathologischer Veränderungen im Gastrointestinaltrakt, insbesondere im Darm |
| DE202012012084U1 (de) * | 2012-07-09 | 2013-04-15 | Schebo Biotech Ag | Testkit (Kombi-Schnelltest) zum synchronen Nachweis von Biomarkern im Stuhl zur Erkennung pathologischer Veränderungen im Gastrointestinaltrakt, insbesondere im Darm |
| JP6361037B2 (ja) * | 2013-01-29 | 2018-07-25 | 国立大学法人三重大学 | イムノクロマト法で血漿タンパクを測定する方法 |
| PT106871B (pt) | 2013-04-08 | 2015-06-15 | Univ Do Minho | Dispositivo e método de análises de sangue por processamento de imagem |
| USD735926S1 (en) * | 2013-04-29 | 2015-08-04 | Osram Sylvania Inc. | Strain relief |
| WO2014182844A1 (en) | 2013-05-07 | 2014-11-13 | Micronics, Inc. | Microfluidic devices and methods for performing serum separation and blood cross-matching |
| DE102014007851B3 (de) * | 2014-05-26 | 2015-11-12 | Medion Grifols Diagnostics Ag | Vorrichtung und Verfahren zur Bestimmung von Blutgruppenantigenen mit einem inkompletten Antikörper |
| CA3001918C (en) * | 2015-10-15 | 2023-08-22 | Inbios International, Inc. | Multiplexed lateral flow assay systems and methods for their use |
| GB201520903D0 (en) * | 2015-11-26 | 2016-01-13 | Qbd Qs Ip Ltd | Purification method |
| DE102017011883A1 (de) * | 2017-11-14 | 2019-05-16 | Medipee Gmbh | Vorrichtung zur Vor-Ort-Analyse von Exkrementen, Verfahren zum Betreiben einer derartigen Vorrichtung und Anordnung bestehend aus einer Toilette und einer derartigen Vorrichtung |
| DE102018111822B4 (de) * | 2018-05-16 | 2021-10-07 | Microfluidic Chipshop Gmbh | Fluidisches System zur Aufnahme, Abgabe und Bewegung von Flüssigkeiten, Verfahren zur Verarbeitung von Fluiden in einem fluidischen System |
| EP3833975A4 (en) * | 2018-08-21 | 2022-04-27 | Intelligent Material Solutions, Inc. | LINEAR ARRANGEMENT MULTIPLEX DEVICE WITH OBLIQUE TEST LINES ON A LATERAL FLOW TEST STRIP OR MICROFLUID DEVICE |
| CN110327057A (zh) * | 2019-07-30 | 2019-10-15 | 三诺生物传感股份有限公司 | 一种多指标检测试条 |
Family Cites Families (42)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6212827A (ja) * | 1985-07-10 | 1987-01-21 | Hitachi Ltd | エンジンの燃焼圧検出装置 |
| ATE79679T1 (de) | 1985-10-11 | 1992-09-15 | Abbott Lab | Diagnostische probe. |
| JPH01501819A (ja) | 1986-11-13 | 1989-06-22 | ジェネ ラブス，インコーポレイティド | 血液親和性診断方法 |
| JPS63273585A (ja) * | 1987-04-30 | 1988-11-10 | Fanuc Ltd | Ｃｎｃレ−ザ加工機のパワ−制御方式 |
| CA1313616C (en) * | 1987-06-01 | 1993-02-16 | Robert B. Sargeant | Lateral flow, non-bibulous membrane protocols |
| US4943522A (en) | 1987-06-01 | 1990-07-24 | Quidel | Lateral flow, non-bibulous membrane assay protocols |
| US5252496A (en) | 1989-12-18 | 1993-10-12 | Princeton Biomeditech Corporation | Carbon black immunochemical label |
| US5141850A (en) * | 1990-02-07 | 1992-08-25 | Hygeia Sciences, Inc. | Porous strip form assay device method |
| DE4024544A1 (de) | 1990-08-02 | 1992-02-06 | Boehringer Mannheim Gmbh | Analyseelement und verfahren zu seiner herstellung |
| GB2250342B (en) * | 1990-11-27 | 1995-04-12 | Pall Corp | A method and device for typing human blood groups |
| US5877028A (en) | 1991-05-29 | 1999-03-02 | Smithkline Diagnostics, Inc. | Immunochromatographic assay device |
| DE4202850A1 (de) * | 1992-01-31 | 1993-08-05 | Boehringer Mannheim Gmbh | Analysenelement fuer immunoassays |
| US5869252A (en) | 1992-03-31 | 1999-02-09 | Abbott Laboratories | Method of multiplex ligase chain reaction |
| CA2133220A1 (en) | 1992-03-31 | 1993-10-14 | Stanley R. Bouma | Method of multiplex ligase chain reaction |
| US6100099A (en) * | 1994-09-06 | 2000-08-08 | Abbott Laboratories | Test strip having a diagonal array of capture spots |
| WO1994006940A1 (en) * | 1992-09-18 | 1994-03-31 | Abbott Laboratories | Multiple assay test strip devices |
| WO1994023299A1 (en) | 1993-03-31 | 1994-10-13 | Quidel Corporation | Multiple assay device |
| JPH08511621A (ja) | 1993-06-09 | 1996-12-03 | クイデル コーポレイション | 抗原特異的１段階検定 |
| DE4323672A1 (de) * | 1993-07-15 | 1995-01-19 | Boehringer Mannheim Gmbh | Vorrichtung zur gleichzeitigen Bestimmung von Analyten |
| CA2167362A1 (en) | 1995-02-10 | 1996-08-11 | Alexei Dmitri Klimov | Apparatus and method for conducting a binding assay on an absorbent carrier material |
| WO1997031268A1 (en) * | 1996-02-23 | 1997-08-28 | Universal Healthwatch, Inc. | Chromatographic strip having detection and control zones oriented parallel to the direction of flow |
| EP0883879A1 (en) | 1996-02-27 | 1998-12-16 | Yury Vasilievich Drobyshevsky | Method and reactor for the generation of energy in the process of a controlled nuclear fission |
| AU2191297A (en) | 1996-03-01 | 1997-09-16 | Majesco Biologicals, Inc. | Blood testing kit |
| US6372515B1 (en) | 1996-03-11 | 2002-04-16 | American Bio Medica Corporation | Device for the testing of fluid samples and process for making the device |
| US5976895A (en) * | 1996-03-11 | 1999-11-02 | American Biomedica Corporation | Device for the collection, testing and shipment of body fluid samples |
| EP0888547B1 (en) | 1996-03-14 | 2003-03-12 | Spectral Diagnostics Inc. | Immunoassay with whole blood |
| US5962215A (en) | 1996-04-05 | 1999-10-05 | Mercury Diagnostics, Inc. | Methods for testing the concentration of an analyte in a body fluid |
| GB9700759D0 (en) * | 1997-01-15 | 1997-03-05 | Carbury Herne Limited | Assay device |
| US6924153B1 (en) | 1997-03-06 | 2005-08-02 | Quidel Corporation | Quantitative lateral flow assays and devices |
| US6103536A (en) * | 1997-05-02 | 2000-08-15 | Silver Lake Research Corporation | Internally referenced competitive assays |
| JPH11108927A (ja) | 1997-10-01 | 1999-04-23 | Sekisui Chem Co Ltd | 免疫クロマトグラフィー装置 |
| DE19906005C2 (de) * | 1998-06-19 | 2002-12-19 | Biomar Diagnostic Systems Gmbh | Testgerät |
| US6203757B1 (en) | 1998-12-02 | 2001-03-20 | Bionike, Inc. | Fluid sample distriution system for test device |
| JP2001056341A (ja) * | 1999-08-20 | 2001-02-27 | Wako Pure Chem Ind Ltd | 血液型判定方法 |
| US6436722B1 (en) * | 2000-04-18 | 2002-08-20 | Idexx Laboratories, Inc. | Device and method for integrated diagnostics with multiple independent flow paths |
| US20020130955A1 (en) | 2001-01-12 | 2002-09-19 | Daniel Pelletier | Method and apparatus for determining camera movement control criteria |
| JP2004517325A (ja) | 2001-01-15 | 2004-06-10 | デーエスエム イーペー アセッツ ベスローテン フェンノートシャップ | 試験装置 |
| US7087389B2 (en) | 2001-02-09 | 2006-08-08 | Council Of Scientific & Industrial Research | Highly cost-effective analytical device for performing immunoassays with ultra high sensitivity |
| US20030045001A1 (en) * | 2001-08-29 | 2003-03-06 | Deborah Burgess | Immunochromatographic test strip with arcuate sample application zone for ease-of-use in the field |
| US7090802B1 (en) * | 2002-09-05 | 2006-08-15 | Phenogenomics Corporation | Sampling assembly for simultaneously testing a liquid biological sample for a plurality of hormones and method thereof |
| CN1186636C (zh) * | 2002-12-31 | 2005-01-26 | 江西中德生物工程有限公司 | 一种检测abo血型的免疫层析用试纸条的制备方法及其制得的试纸条 |
| KR100594150B1 (ko) * | 2004-10-18 | 2006-06-28 | 삼성전자주식회사 | 카메라 모듈의 떨림 보정 장치 |
-
2003
- 2003-07-09 DE DE10330982A patent/DE10330982A1/de not_active Withdrawn
-
2004
- 2004-07-08 US US10/563,659 patent/US8053226B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2004-07-08 CN CN2004800192913A patent/CN1816746B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2004-07-08 AU AU2004256210A patent/AU2004256210B9/en not_active Ceased
- 2004-07-08 PL PL04740826T patent/PL1646876T3/pl unknown
- 2004-07-08 BR BRPI0411866A patent/BRPI0411866B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2004-07-08 KR KR1020067000569A patent/KR101214620B1/ko active IP Right Grant
- 2004-07-08 NZ NZ544545A patent/NZ544545A/en not_active IP Right Cessation
- 2004-07-08 AT AT04740826T patent/ATE514092T1/de active
- 2004-07-08 CA CA2531688A patent/CA2531688C/en not_active Expired - Fee Related
- 2004-07-08 RU RU2006103022/14A patent/RU2353293C2/ru active
- 2004-07-08 PT PT04740826T patent/PT1646876E/pt unknown
- 2004-07-08 ES ES04740826T patent/ES2368715T3/es active Active
- 2004-07-08 WO PCT/EP2004/007536 patent/WO2005005991A1/de active Application Filing
- 2004-07-08 JP JP2006518154A patent/JP5090734B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2004-07-08 EP EP04740826A patent/EP1646876B1/de active Active
- 2004-07-08 DK DK04740826.5T patent/DK1646876T3/da active
-
2006
- 2006-01-05 IL IL172998A patent/IL172998A/en active IP Right Grant
- 2006-01-08 EG EGNA2006000017 patent/EG24046A/xx active
- 2006-02-08 ZA ZA200601129A patent/ZA200601129B/en unknown
-
2007
- 2007-01-22 HK HK07100759.4A patent/HK1094721A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2011
- 2011-09-22 CY CY20111100914T patent/CY1112563T1/el unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2554754C2 (ru) * | 2009-07-02 | 2015-06-27 | Омик Аб | Аналитическое устройство капиллярного действия и его изготовление |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BRPI0411866B1 (pt) | 2016-10-04 |
| AU2004256210A1 (en) | 2005-01-20 |
| BRPI0411866B8 (pt) | 2021-07-27 |
| AU2004256210B9 (en) | 2011-01-27 |
| WO2005005991A1 (de) | 2005-01-20 |
| CA2531688C (en) | 2013-05-28 |
| US8053226B2 (en) | 2011-11-08 |
| CN1816746B (zh) | 2010-05-05 |
| RU2006103022A (ru) | 2006-08-10 |
| PT1646876E (pt) | 2011-09-19 |
| ATE514092T1 (de) | 2011-07-15 |
| KR101214620B1 (ko) | 2012-12-21 |
| JP5090734B2 (ja) | 2012-12-05 |
| HK1094721A1 (en) | 2007-04-04 |
| EP1646876A1 (de) | 2006-04-19 |
| AU2004256210B2 (en) | 2010-07-01 |
| ZA200601129B (en) | 2007-09-26 |
| CN1816746A (zh) | 2006-08-09 |
| IL172998A (en) | 2011-12-29 |
| ES2368715T3 (es) | 2011-11-21 |
| NZ544545A (en) | 2009-02-28 |
| EG24046A (en) | 2008-04-13 |
| KR20060059958A (ko) | 2006-06-02 |
| CA2531688A1 (en) | 2005-01-20 |
| JP2009513939A (ja) | 2009-04-02 |
| US20070248983A1 (en) | 2007-10-25 |
| DK1646876T3 (da) | 2011-09-19 |
| CY1112563T1 (el) | 2016-02-10 |
| BRPI0411866A (pt) | 2006-08-08 |
| IL172998A0 (en) | 2006-06-11 |
| PL1646876T3 (pl) | 2012-02-29 |
| DE10330982A1 (de) | 2005-02-17 |
| EP1646876B1 (de) | 2011-06-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2353293C2 (ru) | Устройство и способ для одновременной идентификации антигенов групп крови | |
| RU2358267C2 (ru) | Устройство и способ для одновременного определения группы крови, серологического перекрестного контроля и анализа на антитела | |
| US8841082B2 (en) | Method and device for the determination of minor cell population in heterogeneous cell populations | |
| US20220003789A1 (en) | Device and method for detecting blood group antigens by means of an incomplete antibody | |
| MXPA06000346A (en) | Device and method for simultaneously identifying blood group antigens |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20180518 |
|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20180521 Effective date: 20180521 |