RU2319741C2 - Микроорганизмы в качестве носителей нуклеотидных последовательностей, кодирующих клеточные антигены, для лечения опухолей - Google Patents
Микроорганизмы в качестве носителей нуклеотидных последовательностей, кодирующих клеточные антигены, для лечения опухолей Download PDFInfo
- Publication number
- RU2319741C2 RU2319741C2 RU2004128929/13A RU2004128929A RU2319741C2 RU 2319741 C2 RU2319741 C2 RU 2319741C2 RU 2004128929/13 A RU2004128929/13 A RU 2004128929/13A RU 2004128929 A RU2004128929 A RU 2004128929A RU 2319741 C2 RU2319741 C2 RU 2319741C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- protein
- tumor
- cell
- component
- nucleotide sequence
- Prior art date
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 66
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 60
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 60
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 59
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 title claims description 14
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 title claims description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 7
- 239000000969 carrier Substances 0.000 title claims description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title abstract description 47
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 62
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 59
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 48
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 33
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 33
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims abstract description 21
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims abstract description 20
- 230000032258 transport Effects 0.000 claims abstract description 20
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 20
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims abstract description 17
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims abstract description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 9
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 claims abstract description 5
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims abstract description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims abstract 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 57
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 55
- -1 Ras Proteins 0.000 claims description 13
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 claims description 13
- 241000186779 Listeria monocytogenes Species 0.000 claims description 12
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 11
- 108010029869 Proto-Oncogene Proteins c-raf Proteins 0.000 claims description 11
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 11
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 10
- 101000623895 Bos taurus Mucin-15 Proteins 0.000 claims description 8
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 claims description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 8
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 claims description 8
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 claims description 8
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 8
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 7
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 claims description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 7
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 claims description 7
- KKVYYGGCHJGEFJ-UHFFFAOYSA-N 1-n-(4-chlorophenyl)-6-methyl-5-n-[3-(7h-purin-6-yl)pyridin-2-yl]isoquinoline-1,5-diamine Chemical compound N=1C=CC2=C(NC=3C(=CC=CN=3)C=3C=4N=CNC=4N=CN=3)C(C)=CC=C2C=1NC1=CC=C(Cl)C=C1 KKVYYGGCHJGEFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 101150019464 ARAF gene Proteins 0.000 claims description 6
- 108010006464 Hemolysin Proteins Proteins 0.000 claims description 6
- 101100381978 Mus musculus Braf gene Proteins 0.000 claims description 6
- 102100036735 Prostate stem cell antigen Human genes 0.000 claims description 6
- 239000003228 hemolysin Substances 0.000 claims description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 6
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 claims description 5
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 claims description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 claims description 5
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 5
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 claims description 4
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 claims description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 4
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 claims description 4
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 claims description 4
- 108010080146 androgen receptors Proteins 0.000 claims description 4
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 claims description 4
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 claims description 4
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 claims description 4
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 4
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 claims description 4
- 102100032187 Androgen receptor Human genes 0.000 claims description 3
- 102100025475 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Human genes 0.000 claims description 3
- 102000001327 Chemokine CCL5 Human genes 0.000 claims description 3
- 108010055166 Chemokine CCL5 Proteins 0.000 claims description 3
- 101000668058 Infectious salmon anemia virus (isolate Atlantic salmon/Norway/810/9/99) RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit Proteins 0.000 claims description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 3
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 claims description 3
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 claims description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 102100033479 RAF proto-oncogene serine/threonine-protein kinase Human genes 0.000 claims description 3
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 3
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 claims description 3
- 241000607447 Yersinia enterocolitica Species 0.000 claims description 3
- 230000032823 cell division Effects 0.000 claims description 3
- 230000003399 chemotactic effect Effects 0.000 claims description 3
- 229960001231 choline Drugs 0.000 claims description 3
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 3
- 229940096397 interleukin-8 Drugs 0.000 claims description 3
- XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N interleukin-8 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N 0.000 claims description 3
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 3
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 229940118696 vibrio cholerae Drugs 0.000 claims description 3
- 229940098232 yersinia enterocolitica Drugs 0.000 claims description 3
- 102100022089 Acyl-[acyl-carrier-protein] hydrolase Human genes 0.000 claims description 2
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 claims description 2
- 101100064323 Arabidopsis thaliana DTX47 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 108700003785 Baculoviral IAP Repeat-Containing 3 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000051819 Baculoviral IAP Repeat-Containing 3 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100021663 Baculoviral IAP repeat-containing protein 5 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100027522 Baculoviral IAP repeat-containing protein 7 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100026596 Bcl-2-like protein 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 206010004950 Birth mark Diseases 0.000 claims description 2
- 101000964894 Bos taurus 14-3-3 protein zeta/delta Proteins 0.000 claims description 2
- 101150012716 CDK1 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 101100026251 Caenorhabditis elegans atf-2 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 101100439046 Caenorhabditis elegans cdk-2 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 101100005789 Caenorhabditis elegans cdk-4 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 101100495324 Caenorhabditis elegans cdk-7 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 101100314454 Caenorhabditis elegans tra-1 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 claims description 2
- 241000010804 Caulobacter vibrioides Species 0.000 claims description 2
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 claims description 2
- 108010068192 Cyclin A Proteins 0.000 claims description 2
- 102000002554 Cyclin A Human genes 0.000 claims description 2
- 108010060273 Cyclin A2 Proteins 0.000 claims description 2
- 108010068150 Cyclin B Proteins 0.000 claims description 2
- 102000002427 Cyclin B Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000259 Cyclin D Proteins 0.000 claims description 2
- 102000003910 Cyclin D Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000257 Cyclin E Proteins 0.000 claims description 2
- 102000003909 Cyclin E Human genes 0.000 claims description 2
- 108010068237 Cyclin H Proteins 0.000 claims description 2
- 102000002495 Cyclin H Human genes 0.000 claims description 2
- 102100024458 Cyclin-dependent kinase inhibitor 2A Human genes 0.000 claims description 2
- 101100499270 Drosophila melanogaster Diap1 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 108050002772 E3 ubiquitin-protein ligase Mdm2 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000012199 E3 ubiquitin-protein ligase Mdm2 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100037024 E3 ubiquitin-protein ligase XIAP Human genes 0.000 claims description 2
- 108010051542 Early Growth Response Protein 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 102100023226 Early growth response protein 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100025614 Galectin-related protein Human genes 0.000 claims description 2
- 101100272587 Gallus gallus ITA gene Proteins 0.000 claims description 2
- 108090001053 Gastrin releasing peptide Proteins 0.000 claims description 2
- 102100039289 Glial fibrillary acidic protein Human genes 0.000 claims description 2
- 101710193519 Glial fibrillary acidic protein Proteins 0.000 claims description 2
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims description 2
- 102100039619 Granulocyte colony-stimulating factor Human genes 0.000 claims description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims description 2
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 claims description 2
- 101000824278 Homo sapiens Acyl-[acyl-carrier-protein] hydrolase Proteins 0.000 claims description 2
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001056180 Homo sapiens Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001133056 Homo sapiens Mucin-1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001050288 Homo sapiens Transcription factor Jun Proteins 0.000 claims description 2
- 101000611023 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 Proteins 0.000 claims description 2
- 101150032161 IAP1 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 102100026539 Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 claims description 2
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 claims description 2
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 claims description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 2
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 claims description 2
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims description 2
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 claims description 2
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 108010011536 PTEN Phosphohydrolase Proteins 0.000 claims description 2
- 102100032543 Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate 3-phosphatase and dual-specificity protein phosphatase PTEN Human genes 0.000 claims description 2
- 102100036691 Proliferating cell nuclear antigen Human genes 0.000 claims description 2
- 101710141955 RAF proto-oncogene serine/threonine-protein kinase Proteins 0.000 claims description 2
- 102100029981 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Human genes 0.000 claims description 2
- 101710100963 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Proteins 0.000 claims description 2
- 241000607768 Shigella Species 0.000 claims description 2
- 108010002687 Survivin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000002259 TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand Receptors Human genes 0.000 claims description 2
- 108010000449 TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand Receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 108010048992 Transcription Factor 4 Proteins 0.000 claims description 2
- 102100035101 Transcription factor 7-like 2 Human genes 0.000 claims description 2
- 102100023132 Transcription factor Jun Human genes 0.000 claims description 2
- 101710102803 Tumor suppressor ARF Proteins 0.000 claims description 2
- 108700031544 X-Linked Inhibitor of Apoptosis Proteins 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 claims description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 claims description 2
- 102000013529 alpha-Fetoproteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 claims description 2
- 108700000711 bcl-X Proteins 0.000 claims description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000005046 glial fibrillary acidic protein Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims description 2
- 108010071397 lactoferrin receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 229940115931 listeria monocytogenes Drugs 0.000 claims description 2
- 108010030017 midkine receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 2
- 235000021241 α-lactalbumin Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 claims 3
- 102100031092 C-C motif chemokine 3 Human genes 0.000 claims 2
- 101710155856 C-C motif chemokine 3 Proteins 0.000 claims 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 claims 2
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 claims 2
- 102100034540 Adenomatous polyposis coli protein Human genes 0.000 claims 1
- 108010062544 Apoptotic Protease-Activating Factor 1 Proteins 0.000 claims 1
- 102100034524 Apoptotic protease-activating factor 1 Human genes 0.000 claims 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 claims 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 claims 1
- 101000924577 Homo sapiens Adenomatous polyposis coli protein Proteins 0.000 claims 1
- 101001136592 Homo sapiens Prostate stem cell antigen Proteins 0.000 claims 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 claims 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims 1
- 102100021768 Phosphoserine aminotransferase Human genes 0.000 claims 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- 108700025695 Suppressor Genes Proteins 0.000 claims 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 claims 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims 1
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 claims 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 claims 1
- 210000003739 neck Anatomy 0.000 claims 1
- 208000025440 neoplasm of neck Diseases 0.000 claims 1
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 claims 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 claims 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims 1
- 208000025444 tumor of salivary gland Diseases 0.000 claims 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 230000006058 immune tolerance Effects 0.000 abstract description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 abstract 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 abstract 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 15
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 13
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 11
- 102000001788 Proto-Oncogene Proteins c-raf Human genes 0.000 description 10
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 8
- 102000007066 Prostate-Specific Antigen Human genes 0.000 description 7
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 7
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 6
- 241000186781 Listeria Species 0.000 description 5
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 5
- 101710120463 Prostate stem cell antigen Proteins 0.000 description 5
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 4
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 4
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 4
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 4
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 206010056342 Pulmonary mass Diseases 0.000 description 3
- 241001138501 Salmonella enterica Species 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 3
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 3
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 3
- 102000016914 ras Proteins Human genes 0.000 description 3
- 230000022983 regulation of cell cycle Effects 0.000 description 3
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 3
- 239000013606 secretion vector Substances 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 3
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 3
- 108010073254 Colicins Proteins 0.000 description 2
- 206010011968 Decreased immune responsiveness Diseases 0.000 description 2
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 description 2
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 description 2
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091061960 Naked DNA Proteins 0.000 description 2
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 2
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 108700023313 Bacteriophage Receptors Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000724252 Cucumber mosaic virus Species 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101100071194 Escherichia coli hlyA gene Proteins 0.000 description 1
- 206010053172 Fatal outcomes Diseases 0.000 description 1
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 1
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 101000712530 Homo sapiens RAF proto-oncogene serine/threonine-protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001059454 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase MARK2 Proteins 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010010995 MART-1 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102100028123 Macrophage colony-stimulating factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100028389 Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 241000186366 Mycobacterium bovis Species 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 102100033237 Pro-epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 102000052575 Proto-Oncogene Human genes 0.000 description 1
- 108700020978 Proto-Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- 101100406813 Salmonella typhimurium (strain LT2 / SGSC1412 / ATCC 700720) pagC gene Proteins 0.000 description 1
- 102100028904 Serine/threonine-protein kinase MARK2 Human genes 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 230000029662 T-helper 1 type immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 208000037386 Typhoid Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 102000001307 androgen receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- KQNZDYYTLMIZCT-KQPMLPITSA-N brefeldin A Chemical compound O[C@@H]1\C=C\C(=O)O[C@@H](C)CCC\C=C\[C@@H]2C[C@H](O)C[C@H]21 KQNZDYYTLMIZCT-KQPMLPITSA-N 0.000 description 1
- JUMGSHROWPPKFX-UHFFFAOYSA-N brefeldin-A Natural products CC1CCCC=CC2(C)CC(O)CC2(C)C(O)C=CC(=O)O1 JUMGSHROWPPKFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 208000028104 epidemic louse-borne typhus Diseases 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 1
- 101150079947 hlyB gene Proteins 0.000 description 1
- 101150104052 hlyD gene Proteins 0.000 description 1
- 102000057592 human Raf1 Human genes 0.000 description 1
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 1
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000010212 intracellular staining Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 208000037841 lung tumor Diseases 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000012737 microarray-based gene expression Methods 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000012243 multiplex automated genomic engineering Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 108091008819 oncoproteins Proteins 0.000 description 1
- 208000003154 papilloma Diseases 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 210000000680 phagosome Anatomy 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 229940021993 prophylactic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012770 revaccination Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 108091006024 signal transducing proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000034285 signal transducing proteins Human genes 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 101150107585 tetA gene Proteins 0.000 description 1
- 208000013076 thyroid tumor Diseases 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 201000008297 typhoid fever Diseases 0.000 description 1
- 206010061393 typhus Diseases 0.000 description 1
- 230000028973 vesicle-mediated transport Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/12—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
- C12N9/1205—Phosphotransferases with an alcohol group as acceptor (2.7.1), e.g. protein kinases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001102—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001148—Regulators of development
- A61K39/001149—Cell cycle regulated proteins, e.g. cyclin, CDC, CDK or INK-CCR
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001152—Transcription factors, e.g. SOX or c-MYC
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001154—Enzymes
- A61K39/001162—Kinases, e.g. Raf or Src
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001166—Adhesion molecules, e.g. NRCAM, EpCAM or cadherins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/00118—Cancer antigens from embryonic or fetal origin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/24—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Enterobacteriaceae (F), e.g. Citrobacter, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella, Yersinia
- C07K14/255—Salmonella (G)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4748—Tumour specific antigens; Tumour rejection antigen precursors [TRAP], e.g. MAGE
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
- A61K2039/523—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/42—Salmonella
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Virology (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
Abstract
Изобретение относится к генетически модифицированной бактерии, в геном которой введены и экспрессируются следующие компоненты: I) нуклеотидная последовательность, кодирующая по меньшей мере один эпитоп антигена опухолевой клетки, и/или нуклеотидная последовательность по меньшей мере одного эпитопа антигена, специфичного к тканевой клетке, от которой происходит опухоль, II) нуклеотидная последовательность, кодирующая протеин, который стимулирует клетки иммунной системы, IIIA) нуклеотидная последовательность транспортной системы, обеспечивающая экспрессию продукта экспрессии компонентов I) и II) на наружной поверхности бактерии и/или секрецию продукта экспрессии компонента I) и компонента II), и/или IIIB) нуклеотидная последовательность протеина для лизиса бактерии в цитозоле клеток млекопитающих и для внутриклеточного высвобождения плазмид, содержащихся в лизируемых бактериях, и IV) активирующая последовательность, активируемая в бактерии, специфичная к тканевой клетке и неспецифичная к клетке, для экспрессии одного или нескольких компонентов от I) до IIIB), причем каждый из компонентов от I) до IV) может быть представлен однократно или многократно. Данная бактерия пригодна для использования как лекарственное средство в составе противоопухолевой вакцины. Описаны плазмида или вектор экспрессии для получения генетически модифицированной бактерии и способ ее получения. Вакцина на основе генетически модифицированной бактерии является улучшенной в случае профилактики и терапии опухолей с преодоленной иммунотолерантностью по отношению к опухолям. 5 н. и 16 з.п. ф-лы, 2 ил.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к микроорганизму с чужеродными нуклеотидными последовательностями, его применению в качестве лекарственного средства, в особенности вакцины, плазмиде с чужеродными нуклеотидными последовательностями, а также способу получения такого микроорганизма.
Предпосылки создания изобретения и уровень техники
Главной причиной протекания, чаще всего со смертельным исходом, злокачественных опухолевых болезней является неспособность защитной системы организма распознавать и разрушать злокачественные раковые клетки. Онкологические заболевания в промышленных странах относятся к самым частым заболеваниям со смертельным исходом. Так, только в Германии ежегодно умирают свыше 210000 человек со злокачественными новообразованиями (источник: WHO, данные на 1997 г.), что соответствует ежегодному количеству свыше 255 смертельных случаев на 100000 жителей.
Основой настоящего изобретения являются полученные в последнее время новые данные о молекулярных механизмах, которые приводят к злокачественному новообразованию. Уже на очень ранней стадии возникновения онкологического заболевания происходят характерные изменения контроля в отношении роста клеток и/или дифференцировки клеток (Ponten, Cancer Surv., 32, 5-35 (1998)). По существу причастными к этим изменениям являются протеины сигнальной трансдукции и контроля клеточного цикла, которые идентифицированы в последние годы и представляют собой также опухолевые антигены.
Опухолевые антигены грубо подразделяют на три класса (Pardoll, Nat. Med., 4, 525-531 (1998)): i) специфичные к опухоли неоантигены, которые находятся в опухолевой клетке в мутированной и/или суперэксперссируемой форме, как, например, EGF-R, HER-2; ii) специфичные к опухоли эмбриональные антигены, такие как представители протеинового семейства MAGE или СЕА; iii) специфичные к опухолевой ткани дифференцировочные антигены, такие как тирозиназа, Mart-1/melan-A и gp100.
Для эффективности противоопухолевой вакцины решающее значение имеет эффективная индукция CD8+ Т-клеток, так как опухолевые клетки чаще всего не представляют никакие молекулы класса II главного комплекса гистосовместимости, и находящиеся внутри клетки опухолевые антигены чаще всего ограничены классом I главного комплекса гистосовместимости. В случае онкологических больных, естественно имеющихся популяций CD8+, цитотоксических Т-клеток (CTL), по-видимому, недостаточно для распознавания и устранения опухолевых клеток (Jaffee, Ann. N.Y. Acad. Sci., 886, 67-72 (1999)). Сверх того, специфичные к опухоли Т-клетки за счет различных механизмов (анергия, толерантность, нейтрализация) часто не могут эффективно воздействовать на опухолевую ткань (Smyth и др., Nat. Immunol., 2, 293-299 (2001)). Успешно действующая противоопухолевая вакцина поэтому должна нарушать эту анергию или толерантность и индуцировать достаточное количество активированных специфичных CTL, а также специфичных антител. Роль специфичных антител проявляется в успешном использовании моноклональных антител (mAb) против опухолевых антигенов группы (а), как в случае уже коммерчески доступного Herceptin, mAb к HER-2 (Colomber и др., Cancer Invest., 19, 49-56 (2001)).
Уже известно, что аттенуированные внутриклеточные бактерии пригодны в качестве вакциноносителей против определенных бактериальных инфекций, с которыми нужно бороться прежде всего путем так называемого Th1 иммунного ответа (Hess и Kaufmann, FEMS Immunology and Medical Microbiology, 23, 165-173 (1999)). Этот ответ отличается цитотоксическими лимфоцитами (CTL), а также наличием специфичных, секретирующих гамма-интерферон (IFN-g) CD4+ Т-клеток (также Т-клеток-хелперов, Th) (Abbas и др., Nature, 383, 787-793 (1996)). Другие группы исследователей показали, что рекомбинантные бактерии могут защищать против гетерологичной опухоли (Medina и др., Eur. J. Immunol., 29, 693-699 (1999); Pan и др., Cancer Res., 59, 5264-5269 (1999); Woodlock и др., J. Immunother., 22, 251-259 (1999); Paglia и др., Blood, 92, 3172-3176 (1998); Paglia и др., Eur. J. Immunol., 27, 1570-1575 (1997); Pan и др., Nat. Med. 1, 471-477 (1995); Pan и др., Cancer Res., 55, 4776-4779 (1995)). В этих случаях, однако, животных иммунизировали против суррогатного антигена и затем использовали опухолевые клетки, которые экспрессируют этот антиген.
Эти опухолевые системы, однако, нельзя сравнивать с клиническими опухолями, так как в случае этих моделей нет никакой толерантности в отношении опухолевого антигена.
Клинически уже испытано значительное число различных противоопухолевых вакцин. До сих пор, однако, ни с помощью каких-либо противоопухолевых вакцин и ни при использовании какого-либо способа вакцинации не смогли достичь никакого прорыва в лечении опухолевых болезней. Таким образом, существует до сих пор крайне большая потребность в новом способе терапии опухолей.
Известна экспрессия продуктов экспрессии введенных в бактерии нуклеотидных последовательностей в клеточной мембране этих бактерий или возможность секреции этими бактериями. Основой этого способа является гемолизиновая система Escherichia coli HlyAs, которая представляет собой прототип секреторной системы типа I грамотрицательных бактерий. С помощью HlyAs сконструированы векторы секреции, которые делают возможным эффективное выведение антигенов протеинов в случае Salmonella enterica, Yersinia enterocolitica и Vibrio cholerae. Такого рода векторы секреции содержат кДНК любого антигена протеина, связанную с нуклеотидной последовательностью сигнального пептида HlyA, аппарата секреции гемолизина, hlyB и hlyD и специфичного к hly промотора. С помощью этого вектора секреции протеин можно экспрессировать на поверхности этой бактерии. Такого рода генетически модифицированные бактерии в качестве вакцин индуцируют гораздо более сильную иммунную защиту, чем бактерии, в которых экспрессированный введенной нуклеиновой кислотой протеин остается внутри клетки (Donner и др., заявка на Европейский патент ЕР-1015023-А; Gentschev и др., Gene, 179, 133-140 (1996); Vaccine, 19, 2621-2618 (2001); Hess и др., PNAS, 93, 1458-1463 (1996)). Недостатком этой системы, однако, является то, что за счет применения специфичного к hly промотора количество экспрессированного на наружной поверхности бактерии протеина является очень незначительным.
Разработан способ введения плазмидной ДНК в клетки млекопитающих с помощью бактерий-носителей, таких как Salmonella и Listeria monocytogenes. Содержащиеся в этих плазмидах гены могут экспрессироваться в клетках млекопитающих также в случае, когда они находятся под контролем эукариотического промотора. В микроорганизмы Listeria monocytogenes вводят плазмиды, которые содержат нуклеотидную последовательность любого антигена под контролем любого эукариотического промотора. Введение нуклеотидных последовательностей специфического лизисного гена способствует тому, что микроорганизмы Listeria monocytogenes попадают в цитозоль антигенпредставляющей клетки и высвобождают свои плазмиды, что приводит к последующей экспрессии, процессингу и представлению кодирующих плазмиду протеинов и заметно повышает иммуногенность этих протеинов (Dietrich и др., Nat. Biotechnol., 16, 181-185 (1998); Vaccine, 19, 2506-2512 (2001)).
Получены аттенуированные в отношении вирулентности варианты бактерий, которые попадают внутрь клетки. Например, такого рода варианты Listeria monocytogenes, Salmonella enterica sv. Typhimurium и Typhu, а также Mycobacterium bovis уже используют в качестве приемлемых живых вакцин против тифа и туберкулеза. Эти бактерии, включая их аттенуированные мутанты, в общем, являются иммуностимулирующими и могут вызывать на достаточно хорошем уровне клеточный иммунный ответ. Например, L. monocytogenes за счет активации клеток ТН1 в особенности стимулирует пролиферацию цитотоксических лимфоцитов. Эти бактерии "поставляют" выделенные антигены прямо в цитозоль антигенпредставляющих клеток (АРС; макрофаги и дендритные клетки), которые, со своей стороны, экспрессируют костимулирующие молекулы и вызывают эффективную стимуляцию Т-кеток. Листерии отчасти подвергаются разложению в фагосомных компартментах и продуцированные этими бактериями-носителями антигены поэтому, с одной стороны, могут представляться молекулами класса II главного комплекса гистосовместимости и вместе с тем приводят к индукции Т-клеток-хелперов. С другой стороны, листерии, после высвобождения из фагосомы, реплицируются в цитозоле антигенпредставляющих клеток (APC); продуцированные и выделенные этими бактериями антигены поэтому предпочтительно представляются молекулами класса I главного комплекса гистосовместимости, благодаря чему индуцируются CTL ответы против этих антигенов. Кроме того, показано, что за счет взаимодействия листерий с макрофагами, естественными клетками-киллерами (NK) и нейтрофилами гранулоцитарного ряда индуцируется экспрессия таких цитокинов (альфа-фактор некроза опухоли, гамма-интерферон, интерлейкин-2, интерлейкин-12; Unanue, Curr. Opin. Immunol., 9, 35-43 (1997); Mata и Paterson, J. Immunol., 163, 1449-1456 (1999)), для которых доказана противоопухолевая эффективность. Так, за счет введения L. monocytogenes, которые подвергнуты трансдукции в отношении экспрессии опухолевых антигенов, можно ингибировать антигенспецифическиЙ рост экспериментальных опухолей (Pan и др., Nat. Med., 1, 471-477 (1995); Cancer Res., 59, 5264-5269 (1999); Voest и др., Natl. Cancer Inst., 87, 581-586 (1995); Beatty и Paterson, J. Immunol., 165, 5502-5508 (2000)).
Аттенуированные в отношении вирулентности штаммы Salmonella enterica, в которые введены нуклеотидные последовательности, кодирующие опухолевые антигены, в качестве экспрессирующих опухолевые антигены бактериальных носителей после введения перорально могут вызывать специфическую защиту против различных экспериментальных опухолей (Medina и др., Eur. J. Immunol., 30, 768-777 (2000); Zoller и Christ, J. Immunol., 166, 3440-3450 (2001); Xiang и др., PNAS, 97, 5492-5497 (2000)).
Рекомбинантные штаммы Salmonella также в качестве профилактических вакцин оказались эффективными против вирусных инфекций (вирус папилломы человека (HPV)) (Benyacoub и др., Infect. Immun., 67, 3674-3679 (1999)) и для терапевтической обработки иммортализированной онкогенным вирусом (вирус папилломы человека) мышиной опухоли (Revaz и др., Virology, 279, 354-360 (2001)).
Техническая задача согласно изобретению
В основу изобретения положена техническая задача получения лекарственного средства, которое в особенности в случае профилактики и терапии опухолей представляет собой улучшенную вакцину с преодоленной иммунотолерантностью по отношению к опухолям.
Основная концепция изобретения
В целях решения этой технической задачи изобретение относится к микроорганизму с нуклеотидной последовательностью, кодирующей клеточный антиген, в геном которого вводят и подвергают экспрессии следующие компоненты: I) нуклеотидная последовательность, кодирующая по меньшей мере один эпитоп антигена или нескольких антигенов опухолевой клетки, и/или нуклеотидная последовательность по меньшей мере одного эпитопа антигена или нескольких антигенов, специфичного к тканевой клетке, от которой происходит опухоль; II) необязательно, нуклеотидная последовательность, кодирующая протеин, который стимулирует клетки иммунной системы; IIIA) нуклеотидная последовательность транспортной системы, которая обеспечивает экспрессию продукта экспрессии компонентов I) и, необязательно, II) на наружной поверхности бактерии и/или секрецию продукта экспрессии компонента I) и, необязательно, компонента II); и/или IIIB) нуклеотидная последовательность протеина для лизиса микроорганизмов в цитозоле клеток млекопитающих и для внутриклеточного высвобождения плазмид, содержащихся в лизируемых микроорганизмах; и IV) активирующая последовательность для экспрессии одного или нескольких компонентов от I) до IIIB), выбираемая из группы, состоящей из "активируемой в микроорганизме, специфичной к тканевой клетке и неспецифичной к клетке активирующей последовательности", причем каждый из компонентов от I) до IV) может быть представлен однократно или многократно, соответственно, будучи одинаковыми или разными; а также к применениям такого микроорганизма для получения лекарственного средства.
Объектом изобретения, таким образом, являются микроорганизмы, которые представляют собой носители нуклеотидных последовательностей, кодирующих клеточные антигены, которые, в свою очередь, экспрессируются или секретируются снова в наружной мембране микроорганизмов, и применение этих микроорганизмов для подавления иммунотолерантности в отношении опухолей, и новые противоопухолевые вакцины, которые содержат микроорганизмы в качестве носителей нуклеотидных последовательностей, кодирующих клеточные антигены нормальных клеток и/или опухолевых клеток. Согласно изобретению, в конечном счете, возникает направленная против опухоли иммунная реакция.
В частности, предлагаемые согласно изобретению микроорганизмы содержат следующие компоненты: I) по меньшей мере одна нуклеотидная последовательность, кодирующая по меньшей мере один эпитоп по меньшей мере одного антигена по меньшей мере одного клеточного протеина опухолевой клетки и/или, на выбор, по меньшей мере одна нуклеотидная последовательность по меньшей мере одного эпитопа по меньшей мере одного антигена, специфичного к тканевой клетке, от которой происходит опухоль; II) на выбор, по меньшей мере одна нуклеотидная последовательность по меньшей мере одного протеина, который стимулирует клетки иммунной системы; IIIA) по меньшей мере одна нуклеотидная последовательность транспортной системы для постоянной мембранной экспрессии или для секреции кодированного компонентом I) клеточного антигена и для секреции кодированного компонентом II) иммуностимулирующего протеина; IIIB) на выбор, нуклеотидная последовательность лизина, которая лизирует микроорганизм в цитозоле, так что содержащиеся в микроорганизме плазмиды высвобождаются в цитозоле; IV) по меньшей мере одна нуклеотидная последовательность активирующей последовательности, активируемой в микроорганизме или активируемой неспецифично к клетке, специфично к опухолевой клетке, специфично к тканевой клетке или специфично к функции, для экспрессии компонентов I) и II).
Предпочтительные варианты осуществления
Ниже по отдельности описываются компоненты предлагаемого согласно изобретению микроорганизма.
Компонент I)
Компонент I) представляет собой по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность по меньшей мере одного эпитопа по меньшей мере одного антигена по меньшей мере одного клеточного протеина или по меньшей мере одного онкогенно мутированного клеточного протеина опухолевой клетки. Онкогенная мутация клеточного протеина может быть вызвана потерей или усилением его первоначальных клеточных функций. Далее, этот клеточный протеин может быть выбран из группы, состоящей из "рецепторных молекул или их частей, а именно внеклеточных, трансмембранных или внутриклеточных частей рецепторов; адгезионных молекул или их частей, а именно внеклеточной, трансмембранной или внутриклеточной части адгезионных молекул; протеинов сигнальной трансдукции; протеинов контроля клеточного цикла; дифференцировочных протеинов; эмбриональных протеинов и индуцированных вирусом протеинов". Такого рода клеточные антигены осуществляют в клетке регуляцию роста и деления клетки и представляются в клеточной мембране нормальных клеток, например, благодаря молекуле класса I главного комплекса гистосовместимости. В опухолевых клетках эти клеточные антигены часто суперэкспрессируются или специфически подвергаются мутации. Следствием такого рода мутаций могут быть ограничения функции онкогенных супрессоров или активация протоонкогенов до онкогенов, и сами мутации или в совокупности со сверхпродуцированиями в значительной степени могут принимать участие в росте опухоли. Такого рода клеточные антигены представляются в мембране опухолевых клеток и соответственно этому представляют собой антигены опухолевых клеток, однако, не вызывая влияющей на опухолевую болезнь пациента иммунной реакции. Раппом (Rapp; патент США 5156841) уже описано применение онкопротеинов, то есть продуктов экспрессии онкогенов в качестве иммуногенов противоопухолевых вакцин. Этот литературный источник включен в настоящую заявку путем ссылки.
Примерами клеточных антигенов и их онкогенных мутаций согласно изобретению являются: i) рецепторы, такие как, например, Her-2/neu, андрогеновый рецептор, эстрогеновый рецептор, мидкиновый рецептор, EGF-рецептор, ERBB2, ERBB4, TRAIL-рецептор, FAS, рецептор альфа-фактора некроза опухоли; ii) трансдуцирующие сигнал протеины и их онкогенные мутации, такие как, например, с-Raf (Raf-1), A-Raf, B-Raf, Ras, Bcl-2, Bcl-X, Bcl-W, Bfl-1, Brag-1, Mcl-1, A1, Bax, BAD, Bak, Bcl-Xs, Bid, Bik, Hrk, Bcr/abl, Myb, C-Met, IAP1, IAО2, XIAP, ML-IAP LIVIN, Survivin, APAF-1; iii) протеины контроля клеточного цикла и их онкогенные мутации, такие как, например, циклин-D (1-3), циклин-E, циклин-A, циклин-B, циклин-H, Cdk-1, Cdk-2, Cdk-4, Cdk-6, Cdk-7, Cdc25C, P16, p15, p21, p27, p18, pRb, p107, p130, E2F (1-5), GAAD45, MDM2, PCNA, ARF, PTEN, APC, BRCA, P53 и гомологи; iv) факторы транскрипции и их онкогенные мутации, такие как, например, С-Myc, NFkB, c-Jun, ATF-2, Sp1; v) эмбриональные протеины, такие как, например, карциноэмбриональный антиген, альфа-фетопротеин, Mage, PSCA; vi) антигены дифференцировки, такие как, например, Mart, Gp100, тирозиназа, GRP, TCF-4; vii) вирусные антигены, такие как, например, антигены следующих вирусов: вирус папилломы человека, вирус гепатита С, вирус Эпштейна-Барра, вирус огуречной мозаики, вирус простого герпеса.
Альтернативно или дополнительно, компонент I) может представлять собой по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность по меньшей мере одного антигена, специфичного к нормальной тканевой клетке, от которой происходит соответствующая опухоль. Такого рода специфичными антигенами являются, например, i) рецепторы, такие как, например, андрогеновые рецепторы, эстрогеновые рецепторы, лактоферриновый рецептор; ii) антигены дифференцировки, такие как, например, основной миелин, альфа-лактальбумин, GFAP, PSA, фибриллярный кислый протеин, тирозиназа, EGR-1, MUC1.
Компонент II)
Компонент II) представляет собой по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность по меньшей мере одного протеина, который стимулирует клетки иммунной системы. За счет выбора протеина можно усиливать иммунную реакцию в отношении продукта экспрессии компонента I) и/или более ориентировать на активацию клеток Th1 (в случае клеточной иммунной реакции) или на активацию клеток Th2 (в случае гуморальной иммунной реакции). Иммуностимулирующими протеинами являются, например, i) цитокины, такие как M-CSF, GM-CSF, G-CSF; ii) интерфероны, как альфа-интерферон, бета-интерферон, гамма-интерферон; iii) интерлейкины, такие как интерлейкин-1, -2, -3, -4, -5, -6, -7, -9, -10, -11, -12, -13, -14, -15, -16, фактор ингибирования лейкоза человека (LIF); iv) хемокины, такие как Rantes, хемотактический и активирующий моноциты фактор (MCAF), протеин-1 воспаления макрофагов (MIP-1-a, -Я), протеин-2 активации нейтрофилов (NAP-2), интерлейкин-8.
Компонент IIIA)
Компонентом IIIA) является по меньшей мере одна нуклеотидная последовательность, кодирующая по меньшей мере одну транспортную систему, которая делает возможной экспрессию продуктов экспрессии компонента I) и, необязательно, компонента II) на наружной поверхности микроорганизма. Соответствующий компонент при этом, на выбор, может либо секретироваться, либо экспрессироваться на мембране микроорганизма, то есть подвергаться постоянной мембранной экспрессии. Такого рода транспортными системами являются, например, i) гемолизиновый транспортный сигнал E. coli (нуклеотидные последовательности, содержащие HlyA, HlyB и HlyD при контроле специфичного к hly промотора); можно использовать следующие транспортные сигналы: для секреции - С-концевой транспортный сигнал HlyA, в присутствии протеинов HlyB и HlyD; для постоянной мембранной экспрессии - С-концевой транспортный сигнал HlyA, в присутствии протеина HlyB; ii) гемолизиновый транспортный сигнал E. coli (нуклеотидные последовательности, содержащие HlyA, HlyB и HlyD под контролем неспецифичного к hly бактериального промотора); iii) транспортный сигнал протеина S-ряда (Rsa A) Caulobacter crescentus; можно использовать следующие транспортные сигналы: для секреции и для постоянной мембранной экспрессии - С-концевой транспортный сигнал RsaA; iv) транспортный сигнал TolC-протеина Escherichia coli; можно использовать следующие транспортные сигналы: для постоянной мембранной экспрессии - N-концевой транспортный сигнал протеина TolC (интегральный мембранный протеин TolC из E. coli представляет собой многофункциональный порообразующий протеин наружной мембраны E. coli, который наряду с такими функциями, как, например, поглощение колицина Е1 (Morona и др., J. Bacteriol., 153, 693-699 (1983)) и секреция колицина V (Fath и др., J. Bacteriol., 173, 7549-7556 (1991)), также служит в качестве рецептора U3-фагов (Austin и др., J. Bacteriol., 172, 5312-5325 (1990)); этот протеин находится не только у E. coli, но и также у множества грамотрицательных бактерий (Wiener, Structure Fold. Des., 8, 171-175 (2000)); локализация в наружной мембране и наличие в большом количестве делают TolC идеальным кандидатом для представления гетерологичных антигенов для того, чтобы, например, вызвать иммунный ответ).
Компонент IIIB)
Компонент IIIB) представляет собой нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере один литический протеин, который экспрессируется в цитозоле клетки млекопитающего и лизирует микроорганизм для высвобождения плазмид в цитозоле клетки-хозяина. Такого рода литическими протеинами (эндолизинами) являются, например, специфичные к листериям лизисные протеины, такие как, например, PLY551 (Loessner и др., Mol. Microbiol., 16, 1231-1241 (1995)) и/или специфичный к Listeria холин под контролем листерийного промотора.
Предпочтительным вариантом осуществления настоящего изобретения является комбинация различных компонентов IIIB), например комбинация лизисного протеина с холином.
Компоненты IIIA и/или IIIB могут быть конститутивно активны.
Компонент IV)
Компонент IV) представляет собой по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность по меньшей мере одной активирующей последовательности для экспрессии компонента I) и, необязательно, компонента II).
Если имеет место постоянная мембранная экспрессия на наружной поверхности микроорганизма, то активирующую последовательность предпочтительно нужно выбирать так, чтобы она активировалась в микроорганизме. Такого рода активирующими последовательностями, например, являются: i) конститутивно активные участки промотора, такие как участок промотора с "участком связывания рибосомы" (RBS) бета-лактамазного гена E. coli или tetA-гена (Busby и Ebright, Cell, 79, 743-746 (1994)); ii) индуцируемые промоторы, предпочтительно промоторы, которые после попадания в клетку становятся активными. К ним относится actA-промотор L. monocytogenes (Dietrich и др., Nat. Biotechnol., 6, 181-185 (1998)) или pagC-промотор S. typhimurium (Bumann, Infect. Immun., 69, 7493-7500 (2001)).
Если плазмиды высвобождаются из микроорганизма после его лизиса в цитозоле клетки, то активирующая последовательность является неспецифичной к клетке, специфичной к тканевой клетке, специфичной к клеточному циклу или функционально специфичной. Предпочтительно выбирают активирующие последовательности, которые особенно активируются в макрофагах, дендритных клетках и лимфоцитах.
Микроорганизмами в смысле настоящего изобретения являются вирусы, бактерии или одноклеточные паразиты, которые обычно используют для переноса микроорганизмом чужеродных нуклеотидных последовательностей.
Согласно особому варианту настоящего изобретения микроорганизмы представляют собой грамположительные или грамотрицательные бактерии, предпочтительно такие бактерии, как, например, Escherichia coli, Salmonella, Yersinia enterocolitica, Vibrio cholerae, Listeria monocytogenes, Shigella.
Предпочтительно используют такие бактерии, которые аттенуированы в отношении своей вирулентности.
Компоненты согласно изобретению вводят в микроорганизмы известными специалисту способами. Если микроорганизмы представляют собой бактерии, то компоненты вводят в плазмиды и плазмиды переносят в бактерии. Пригодные для этой цели способы и плазмиды в достаточной степени известны специалисту.
Объектом изобретения являются лекарственные композиции, содержащие предлагаемые согласно изобретению микроорганизмы или мембранные оболочки этих микроорганизмов. Эти мембранные оболочки получают, например, по способу, описанному в заявке на Европейский патент ЕР-А-0540525. Такого рода лекарственными композициями являются, например, суспензии предлагаемых согласно изобретению микроорганизмов в обычно используемых специалистом растворах, которые пригодны для инъекции.
Еще одним объектом изобретения является введение лекарственной композиции, содержащей предлагаемые согласно изобретению микроорганизмы. Введение осуществляют локально или системно, например, в эпидермис, подкожно, в мускулатуру, в полость тела, в орган, в опухоль или в систему кровообращения.
Особым объектом настоящего изобретения является пероральное или ректальное введение предлагаемой согласно изобретению лекарственной композиции для профилактики и/или лечения пролиферативного заболевания. Введение можно осуществлять однократно или многократно. В случае любого введения вводят в пределах от 10 до 109 предлагаемых согласно изобретению микроорганизмов. Если введение этого количества предлагаемых согласно изобретению микроорганизмов не вызывает никакой достаточной иммунной реакции, нужно повышать инъецируемое количество.
После введения предлагаемых согласно изобретению микроорганизмов нарушается толерантность к клетке, представляющей компонент I), например к опухолевой клетке или к тканевой клетке, от которой происходит опухоль, и возбуждается цитотоксическая иммунная реакция, направленная против опухоли и/или против ее тканевых клеток.
В зависимости от выбора компонента I) эта цитотоксическая иммунная реакция направлена либо исключительно против опухоли, либо также против опухолевых клеток, включая тканевые клетки, от которых происходят опухолевые клетки.
Объектом изобретения является, таким образом, введение предлагаемой согласно изобретению лекарственной композиции для профилактики или лечения пролиферативного заболевания. К пролиферативным заболеваниям нужно отнести опухолевые заболевания, лейкозы, вызываемые вирусом заболевания, хронические воспаления, отторжения трансплантированных органов и аутоиммунные заболевания.
Согласно особому варианту осуществления настоящего изобретения, в случае которого компонент I) представляет собой по меньшей мере один клеточный антиген, который экспрессируется опухолевой клеткой и тканевыми клетками, от которых происходит опухоль, предлагаемую согласно изобретению лекарственную композицию вводят для профилактики или лечения опухоли щитовидной железы, молочной железы, желудка, почки, яичника, родимых пятен, простаты, шейки (органа) или мочевого пузыря.
Ниже изобретение поясняется подробнее с помощью примеров, представляющих собой только варианты осуществления.
Пример 1
Индукция иммунного ответа у ВхВ-мышей путем иммунизации с помощью экспрессирующих с-Raf сальмонелл
Raf представляет собой обычно цитозольную серин/треонинкиназу (PSK), которая в сочетании с другими протеинами сигнальных каскадов контролирует рост и выживание клеток (Kerkhoff и Rapp, Oncogene, 17, 1457-1462 (1998); Troppmair и Rapp, Recent Results Cancer Res., 143, 245-249 (1997)). Связывание фактора роста с соответствующим рецептором, обычно за счет активации Ras, активации Raf, за счет нескольких стадий фосфорилирования, за счет PSK- и тирозинкиназы МЕК и PSK ERK, приводит к активации механизма репликации в клеточном ядре (Kerkhoff и Rapp, Oncogene, 17, 1457-1462 (1998)). Первый член этой цепи, небольшой G-протеин Ras, бывает измененным примерно в 30% всех человеческих опухолей (Zachos и Spandidos, Crit. Rev. Oncol. Hematol., 26, 65-75 (1997)). Raf представляет собой эффектор Ras и суперэкспрессируется во множестве человеческих опухолей (Naumann и др., Recent Results Cancer Res., 143, 237-244 (1997)).
Для теста на мышиной модели используют трансгенных мышей, которые сверхпродуцируют полную молекулу или конститутивно активный киназный домен (ВхВ) (Kerkhoff и др., Cell Growth Differ, 11, 185-190 (2000)). Тем самым у этих мышей спустя примерно полгода обнаруживаются опухоли легких.
Для создания вакцины человеческую с-Raf кДНК клонировали с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) "в рамке считывания" с HlyA в плазмиде pMOhly-1 (фиг.1). Затем плазмиду pMO-Raf подвергали трансфекции в аттенуированных сальмонеллах (S. typi murium SL7207), которые обладают дефектом в ароматическом обмене веществ (Hoiseth и Stocker, Nature, 291, 238-239 (1981)). Согласно иммуноблоттингу с помощью антител, направленных к с-Raf, в бактериальном лизате, а также в культуральном супернатанте трансфицированных с помощью pMOhy-Raf бактерий SL7207 можно было обнаружить слитый протеин с-Raf HlyAs.
Теперь трансгенных ВхВ-мышей в возрасте 7-10 недель иммунизировали перорально с помощью сальмонелл (доза 5·109), причем вакцинацию повторяли 2 раза с интервалом 5 дней. Спустя 45 дней после последней иммунизации осуществляли ревакцинацию с помощью 5·105 сальмонелл. Для контроля мышам внутримышечно вводили "голую" ДНК, кодирующую с-Raf.
Спустя 5-7 дней после последней иммунизации отбирали пробы сыворотки и анализировали с помощью вестерн-блотирования антителогенез. Для этого разведенную в соотношении 1:200 сыворотку гибридизировали с мембранами трансфицированных с помощью отделенного протеина и блотированного протеина с-Raf или нетрансфицированных бактерий. Обнаружение связанных сывороточных антител осуществляли с помощью антител, специфичных к мышиному иммуноглобулину-G (IgG). В противоположность контрольным мышам у мышей, иммунизированных бактериями SL7207, трансфицированными с помощью pMohly-Raf, могли индуцироваться специфичные к с-Raf антитела изотипа IgG. Тем самым показано, что за счет иммунизации с помощью описанных сальмонелл можно нарушать самотолерантность, и иммунизация вызывает индукцию CD4+ Т-кеток, которые необходимы для изменения изотипов антител в отношении IgG.
Для анализа CD8+ Т-клеточного ответа, C57BL-6-мышей иммунизировали согласно такому же протоколу. Спустя 7 дней после последней иммунизации выделяли клетки селезенки и стимулировали их с помощью суперэкспрессирующих Raf клеток EL-4. Спустя 1 час после начала стимуляции блокировали везикулярный транспорт за счет брефелдина А и спустя следующие 4 часа клетки окрашивали с помощью специфичных к CD8 и IFN-g антител и анализировали путем проточной цитометрии (Mittrucker и др., Infect. Immun., 70, 199-203 (2002)). Только у иммунизированной с помощью рМО-Raf мыши можно было обнаружить специфичный к Raf антителогенез.
Для обнаружения уничтожающей опухолевые клетки активности иммунизированных и неиммунизированных ВхВ-мышей в возрасте 10, 12 и 14 месяцев умерщвляли и определяли путем взвешивания массу легких. Масса легких является прямым критерием в отношении величины опухоли. В группе, иммунизированной с помощью SL-pMO-Raf, спустя 14 месяцев заметно чаще можно было встретить мышей с уменьшением массы легких, чем в контрольных группах, включая ту группу, которая была иммунизирована "голой" ДНК, кодирующей с-Raf (SL-pCMV-raf). Обычно рост опухоли у необработанных животных является необратимым (Kerkhoff и др., Cell Growth Differ., 11, 185-190 (2000)). Эти данные, таким образом, показывают, что в этом эксперименте вакцинация с помощью SL-pMO-Raf может защищать животных от возникновения опухолей, и описанный согласно настоящему изобретению микроорганизм пригоден в качестве противоопухолевой вакцины.
Эти эксперименты также показывают, что с помощью представленной в настоящем изобретении системы-носителя в принципе можно нарушать самотолерантность и у толерантных в отношении с-Raf животных можно индуцировать специфичный к с-Raf антителогенез и гуморальный иммунный ответ.
С помощью такой экспериментальной системы можно получать в качестве вакцин сальмонеллы, которые экспрессируют изоформы С-Raf (как, например, В-Raf и A-Raf), мутированный С-Raf, B-Raf или A-Raf, эпитопы нормального или мутированного С-Raf, B-Raf или A-Raf, или комбинации эпитопов нормального и/или мутированного C-Raf, B-Raf или A-Raf. Примерами мутации, которая протекает с потерей активности Raf, являются мутации связывающего Ras домена, киназного домена и/или областей фосфорилирования.
Пример 2
Индукция иммунного ответа в случае BALB/c-мышей путем иммунизации с помощью экспрессирующих простатический антиген (PSA) сальмонелл
Наличие специфичных к ткани антигенов, в особенности таких, которые в повышенной мере синтезируются и экспрессируются опухолевыми клетками, является наряду с диагностической пригодностью этих маркеров также возможно применимым фактором для терапевтических целей. В случае карциномы простаты до сих пор идентифицированы три существенных антигена: PSA (специфичный к простате антиген), PSMA (специфичный к простате мембранный антиген) и PSCA (антиген стволовой клетки простаты). В то время как PSA суперэкспрессируется еще в ранних опухолевых формах (Watt и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83, 3166-3170 (1986); Wang и др., Prostate, 2, 89-96 (1981)) и тем самым способствует диагностике карциномы (Labrie и др., J. Urol., 147, 846-851; дискуссия 851-842, (1992)), экспрессия PSCA чаще всего повышена лишь в локально продвинутой, дедифференцированной и метастазированной опухолевой стадии (Gu и др., Oncogene, 19, 1288-1286 (2000); Reiter и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 1735-1740 (1998)). Специфичность к органу делает как PSA, так и PSCA потенциальным антигеном-мишенью при разработке иммунных терапий против карциномы простаты (Reiter и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 1735-1740 (1998); Hodge и др., Int. J. Cancer, 63, 231-237 (1995); Armbruster, Clin. Chem., 39, 181-195 (1993)).
В этом опыте нужно было показать, могут ли выделяющие PSA сальмонеллы на основе вектора pMOHLY-1 индуцировать у BALB/c-мышей иммунный ответ. Для этого сначала посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР) в последовательность кДНК простатического антигена вводили два сайта расщепления NsiI, чтобы сделать возможной вставку "в рамке считывания" амплифицированного фрагмента в вектор-мишень. Для амплификации выбирали фрагмент из 645 пар оснований (bp). В качестве праймеров служили 5'-GTGGATTGGTGATGCATCCCTCATC-3' и 5'-CAGGGCACATGCATCACTGCCCCA-3'. Продукт ПЦР сначала "по тупому концу" клонировали в векторе pUC18 и позднее в сайтах расщепления NsiI лигировали с вектором-мишенью pMOhly-1. Правильность вставки контролировали путем рестрикции и подтверждали путем секвенирования (фиг.2).
С помощью этого штамма сальмонелл иммунизировали BALB/c-мышей назально три раза с интервалом 3 недели с помощью дозы 1·107. Иммунный ответ обнаруживают путем вестерн-блоттинга и внутриклеточного окрашивания цитокинов.
Claims (21)
1. Генетически модифицированная бактерия, используемая в качестве противоопухолевой вакцины, геном которой содержит:
I) а) по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере один эпитоп одного антигена клеточного белка или онкогенно мутированного клеточного белка опухолевой клетки и/или
b) по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере один эпитоп одного антигена, специфичного к нормальной тканевой клетке, от которой происходит опухоль,
II) по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, стимулирующий клетки иммунной системы и представляющий собой цитокин, интерлейкин, интерферон и/или хемокин,
IIIA) по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, кодирующую транспортную систему, которая обеспечивает экспрессию продукта экспрессии компонентов I) и II) на наружной поверхности бактерии и/или секрецию продукта экспрессии компонентов I) и II) и представляет собой гемолизиновый транспортный сигнал Escherichia coli - нуклеотидные последовательности, содержащие HlyA, HlyB и HlyD под контролем hly-специфичного промотора, гемолизиновый транспортный сигнал Escherichia coli-нуклеотидные последовательности, содержащие HlyA, HlyB и HlyD под контролем не-hly-специфичного бактериального промотора, транспортный сигнал для белка S-ряда (Rsa A) Caulobacter crescentus или транспортный сигнал для TolC-белка Escherichia coli, и/или
IIIB) нуклеотидную последовательность белка для лизиса бактерии в цитозоле клеток млекопитающих и для внутриклеточного высвобождения плазмид, содержащихся в лизируемых бактериях, и
IV) по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность активирующей последовательности для экспрессии одного или нескольких компонентов от I) до IIIB), причем указанную активирующую последовательность выбирают из группы, состоящей из активируемой в бактерии, специфичной к тканевой клетке и неспецифичной к клетке активирующей последовательности, причем каждый из компонентов от I) до IV) может быть представлен однократно или многократно, одинаковым или разным.
2. Бактерия по п.1, где бактерия является грамположительной или грамотрицательной бактерией и, предпочтительно, выбрана из группы, состоящей из Escherichia coli, Salmonella, Yersinia enterocolitica, Vibrio cholerae, Listeria monocytogenes, Shigella.
3. Бактерия по п.1, где бактерия является аттенуированной.
4. Бактерия по п.1, где компонентом I) является нуклеотидная последовательность, кодирующая один эпитоп или несколько эпитопов антигена или нескольких антигенов белка или нескольких белков, который необязательно мутирован, опухолевой клетки, причем этот белок предпочтительно выбирают из группы, состоящей из внеклеточной, трансмембранной или внутриклеточной части рецептора, внеклеточной, трансмембранной или внутриклеточной части адгезионной молекулы, белка сигнальной трансдукции, белка, контролирующего клеточное деление, фактора транскрипции, дифференцировочного белка, эмбрионального белка и вирусного белка, причем белком предпочтительно является продукт онкогена или продукт гена-супрессора.
5. Бактерия по п.4, где компонент I) кодирует клеточный антиген и его онкогенные мутации, выбранные из группы, состоящей из: Her-2/neu, андрогенового рецептора, эстрогенового рецептора, мидкинового рецептора, EGF-рецептора, ERBB2, ERBB4, TRAIL-рецептора, FAS, рецептора альфа-фактора некроза опухоли, c-Raf (Raf-1), A-Raf, B-Raf, Ras, Bcl-2, Bcl-X, Bcl-W, Bfl-1, Brag-1, Mcl-1, Al, Bax, BAD, Bak, Bcl-Xs, Bid, Bik, Hrk, Bcr/abi, Myb, C-Met, IAP1, IAO2, XIAP, ML-IAP LIVIN, Survivin, APAF-1, циклина-D (1-3), циклина-Е, циклина-А, циклина-В, циклина-Н, Cdk-1, Cdk-2, Cdk-4, Cdk-6, Cdk-7, Cdc25C, P16, p15, p21, p27, p18, pRb, p107, p130, E2F(1-5), GAAD45, MDM2, PCNA, ARF, PTEN, APC, BRCA, P53 и гомологов, С-Мус, NFkB, c-Jun, ATF-2, Spl, карциноэмбрионального антигена, альфа-фетопротеина, Mage, PSCA, Mart, Gp100, тирозиназы, GRP, TCF-4, вирусных антигенов вирусовНРУ, HCV, HPV, EBV, CMV, HSV.
6. Бактерия по п.1, где компонентом I) является нуклеотидная последовательность, кодирующая антиген, который специфичен к тканевой клетке, выбираемой из группы, состоящей из щитовидной железы, молочной железы, слюнной железы, лимфатического узла, тимуса слизистой оболочки желудка, почки, яичника, простаты, шейки (органа), слизистой оболочки мочевого пузыря и родимого пятна, от которой происходит опухоль.
7. Бактерия по п.6, где специфический антиген выбирают из группы, состоящей из андрогенового рецептора, эстрогенового рецептора, лактоферринового рецептора, основного миелина, альфа-лактальбумина, GFAP, PSA, фибриллярного кислого белка, тирозиназы, EGR-1, MUC1.
8. Бактерия по п.1, где компонент II) кодирует белок, выбранный из группы, состоящей из M-CSF, GM-CSF, G-CSF, альфа-интерферона, бета-интерферона, гамма-интерферона, интерлейкина -1, -2, -3, -4, -5, -6, -7, -9, -10, -11, -12, -13, -14, -15, -16, фактора ингибирования лейкоза человека (LIF), Rantes, хемотактического и активирующего моноциты фактора (MCAF), белка-1 воспаления макрофагов (MIP-1-α, -β), белка-2 активации нейтрофилов (NAP-2), интерлейкина-8.
9. Бактерия по п.1, где компонент II) кодирует хемокин, и хемокин предпочтительно выбирают из группы, состоящей из Rantes, хемотактического и активирующего моноциты фактора (MCAF), белка-1 воспаления макрофагов (MIP-1-α, -β), белка-2 активации нейтрофилов (NAP-2), интерлейкина-8.
10. Бактерия по п.1, где компонент IIIB) кодирует литический белок, выбранный из группы, состоящей из литического белка грамположительных бактерий, литического белка Listeria monocytogenes, PLY551 Listeria monocytogenes и/или холина Listeria monocytogenes.
11. Бактерия по п.1, где компонент IV) кодирует активаторную последовательность, которая может быть активирована в бактерии и которая является специфичной к опухолевой клетке, тканевой клетке, макрофагам, дендритным клеткам, лимфоцитам, функционально специфичной или неспецифичной к клетке, активируемой последовательностью.
12. Бактерия по п.1, содержащая по меньшей мере один компонент I) по любому из пп.4 и 5 и по меньшей мере один компонент I) по любому из пп.6 и 7.
13. Бактерия по п.1, содержащая, по меньшей мере, один компонент IIIA) и не содержащая компонент IIIB).
14. Бактерия по п.1, содержащая компонент IIIB) и не содержащая компонент IIIA).
15. Лекарственное средство для использования в качестве противоопухолевой вакцины, содержащее генетически модифицированную бактерию по любому из пп.1-14.
16. Применение бактерии по любому из пп.1-14 для получения лекарственного средства для профилактики и/или лечения заболевания, вызываемого неконтролируемым клеточным делением предпочтительно опухолевой болезни, в частности карциномы простаты, карциномы яичника, рака молочной железы, рака желудка, опухоли почки, опухоли щитовидной железы, меланомы, опухоли шейки (органа), опухоли мочевого пузыря, опухоли слюнной железы, опухоли лимфатического узла и/или лейкоза.
17. Применение по п.16, где лекарственное средство используют для удаления опухоли и/или здоровой ткани, от которой происходит опухоль.
18. Применение по любому из пп.16 и 17, где лекарственное средство предназначено для локального, парентерального, перорального или ректального введения.
19. Применение по п.16, где бактерию по любому из пп.1-14 получают в физиологически эффективной дозе с одним или несколькими физиологически переносимыми носителями для перорального, внутримышечного, внутривенного, внутрибрюшинного, ректального или локального введения.
20. Плазмида или вектор экспрессии для получения генетически модифицированной бактерии по любому из пп.1-14, содержащая нуклеотидные последовательности, охарактеризованные как компоненты I)-IV) по любому из пп.1-14.
21. Способ получения бактерии по любому из пп.1-14, который включает конструирование плазмиды или вектора экспрессии по п.20 и трансформацию полученной плазмидой или вектором экспрессии исходной бактерии.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE10208653A DE10208653A1 (de) | 2002-02-28 | 2002-02-28 | Mikroorganismus als Träger von Nukleotidsequenzen kodierend für Zellantigene zur Behandlung von Tumoren |
DE10208653.2 | 2002-02-28 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2004128929A RU2004128929A (ru) | 2005-04-10 |
RU2319741C2 true RU2319741C2 (ru) | 2008-03-20 |
Family
ID=27762489
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2004128929/13A RU2319741C2 (ru) | 2002-02-28 | 2003-02-13 | Микроорганизмы в качестве носителей нуклеотидных последовательностей, кодирующих клеточные антигены, для лечения опухолей |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20060105423A1 (ru) |
EP (1) | EP1478756A2 (ru) |
JP (1) | JP2005518795A (ru) |
KR (1) | KR20040104464A (ru) |
CN (1) | CN1650014A (ru) |
AU (1) | AU2003206664A1 (ru) |
BR (1) | BRPI0308119A2 (ru) |
CA (1) | CA2513190A1 (ru) |
DE (1) | DE10208653A1 (ru) |
HR (1) | HRP20040785A2 (ru) |
IL (1) | IL163672A0 (ru) |
MX (1) | MXPA04008287A (ru) |
NO (1) | NO20043926L (ru) |
NZ (1) | NZ535312A (ru) |
PL (1) | PL372370A1 (ru) |
RS (1) | RS75604A (ru) |
RU (1) | RU2319741C2 (ru) |
WO (1) | WO2003072789A2 (ru) |
ZA (1) | ZA200407528B (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2551238C2 (ru) * | 2013-08-02 | 2015-05-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение "Медико-генетический научный центр" Российской академии медицинских наук | Способ индукции апоптоза клеток злокачественной опухоли колоректального рака и средство для его осуществления |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8221739B2 (en) | 2004-04-29 | 2012-07-17 | Botanic Oil Innovations, Inc. | Method of cancer treatment |
US8748126B2 (en) * | 2005-11-29 | 2014-06-10 | Actogenix N.V. | Induction of mucosal tolerance to antigens |
KR100818144B1 (ko) * | 2006-02-15 | 2008-03-31 | 고려대학교 산학협력단 | 인터페론감마를 발현하는 살모넬라 균주 및 이를 함유하는항암 치료용 조성물 |
WO2008027560A2 (en) * | 2006-09-01 | 2008-03-06 | Anza Therapeutics, Inc. | Holin-enhanced vaccines and reagents, and methods of use thereof |
EP1921149A1 (en) | 2006-11-13 | 2008-05-14 | AEterna Zentaris GmbH | Microorganisms as carriers of nucleotide sequences coding for antigens and protein toxins, process of manufacturing and uses thereof |
EP3351268B1 (en) | 2007-01-25 | 2020-08-05 | Intrexon Actobiotics NV | Treatment of immune disease by mucosal delivery of antigens |
KR101104077B1 (ko) | 2008-10-14 | 2012-01-11 | 건국대학교 산학협력단 | Egr-1의 발현을 증가시키는 활성을 갖는 신규한 엔터로박테리아속에 속하는 신규균주 및 그 균주를 포함하는 조성물의 항암제로서의 용도 |
KR101346620B1 (ko) * | 2011-11-30 | 2014-01-06 | 전남대학교산학협력단 | 신규 박테리아 용해 단백질 및 그의 용도 |
EP3550976A4 (en) | 2016-12-07 | 2020-06-10 | MD Biosciences, Inc. | METHOD FOR SYNERGISTIC TREATMENT OF CANCER |
WO2019155415A1 (en) * | 2018-02-09 | 2019-08-15 | Consejo Nacional De Investigaciones Cientificas Y Tecnicas (Conicet) | Immunomodulating and immunostimulating polypeptides for drug-delivery |
WO2020232389A1 (en) * | 2019-05-16 | 2020-11-19 | City Of Hope | Compositions and methods for targeting tumor-associated extracellular matrix components to improve drug delivery |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5156841A (en) * | 1988-08-26 | 1992-10-20 | United States Of America | Anti-tumor vaccine |
ZA941645B (en) * | 1994-03-09 | 1995-01-13 | South To South Co Operation In | Antibodies specifically reactive against human prostate specific antigen. |
US6051237A (en) * | 1994-11-08 | 2000-04-18 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Specific immunotherapy of cancer using a live recombinant bacterial vaccine vector |
DE60142646D1 (en) * | 2000-11-22 | 2010-09-02 | Univ Maryland | Fusionprotein |
-
2002
- 2002-02-28 DE DE10208653A patent/DE10208653A1/de not_active Ceased
-
2003
- 2003-02-13 RU RU2004128929/13A patent/RU2319741C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2003-02-13 KR KR10-2004-7013483A patent/KR20040104464A/ko not_active Application Discontinuation
- 2003-02-13 IL IL16367203A patent/IL163672A0/xx unknown
- 2003-02-13 NZ NZ535312A patent/NZ535312A/en unknown
- 2003-02-13 CN CNA03809598XA patent/CN1650014A/zh active Pending
- 2003-02-13 PL PL03372370A patent/PL372370A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2003-02-13 WO PCT/DE2003/000471 patent/WO2003072789A2/de not_active Application Discontinuation
- 2003-02-13 US US10/506,096 patent/US20060105423A1/en not_active Abandoned
- 2003-02-13 BR BRPI0308119A patent/BRPI0308119A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2003-02-13 CA CA002513190A patent/CA2513190A1/en not_active Abandoned
- 2003-02-13 MX MXPA04008287A patent/MXPA04008287A/es unknown
- 2003-02-13 AU AU2003206664A patent/AU2003206664A1/en not_active Abandoned
- 2003-02-13 RS YU75604A patent/RS75604A/sr unknown
- 2003-02-13 JP JP2003571470A patent/JP2005518795A/ja active Pending
- 2003-02-13 EP EP03704315A patent/EP1478756A2/de not_active Withdrawn
-
2004
- 2004-08-27 HR HRP20040785 patent/HRP20040785A2/hr not_active Application Discontinuation
- 2004-09-20 NO NO20043926A patent/NO20043926L/no unknown
- 2004-09-20 ZA ZA200407528A patent/ZA200407528B/en unknown
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2551238C2 (ru) * | 2013-08-02 | 2015-05-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение "Медико-генетический научный центр" Российской академии медицинских наук | Способ индукции апоптоза клеток злокачественной опухоли колоректального рака и средство для его осуществления |
RU2551238C9 (ru) * | 2013-08-02 | 2016-04-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Медико-генетический научный центр" Российской академии медицинских наук | Способ индукции апоптоза клеток злокачественной опухоли колоректального рака и средство для его осуществления |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2003072789A2 (de) | 2003-09-04 |
US20060105423A1 (en) | 2006-05-18 |
DE10208653A1 (de) | 2003-09-18 |
KR20040104464A (ko) | 2004-12-10 |
EP1478756A2 (de) | 2004-11-24 |
CN1650014A (zh) | 2005-08-03 |
IL163672A0 (en) | 2005-12-18 |
RU2004128929A (ru) | 2005-04-10 |
MXPA04008287A (es) | 2006-04-27 |
HRP20040785A2 (en) | 2004-12-31 |
NZ535312A (en) | 2008-03-28 |
NO20043926L (no) | 2004-09-20 |
AU2003206664A1 (en) | 2003-09-09 |
JP2005518795A (ja) | 2005-06-30 |
CA2513190A1 (en) | 2003-09-04 |
RS75604A (en) | 2006-12-15 |
ZA200407528B (en) | 2006-06-28 |
BRPI0308119A2 (pt) | 2016-06-28 |
PL372370A1 (en) | 2005-07-25 |
WO2003072789A3 (de) | 2004-02-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Le Bon et al. | Cross-priming of CD8+ T cells stimulated by virus-induced type I interferon | |
Lamikanra et al. | Regression of established human papillomavirus type 16 (HPV-16) immortalized tumors in vivo by vaccinia viruses expressing different forms of HPV-16 E7 correlates with enhanced CD8+ T-cell responses that home to the tumor site | |
US20190032064A1 (en) | Personalized Delivery Vector-Based Immunotherapy and Uses Thereof | |
JP2002509716A (ja) | テロメラーゼ抗原に対する免疫応答を惹起するための方法および組成物 | |
RU2008114624A (ru) | Композиции и способы для лечения опухолей, презентирующих антигены сурвивина | |
Chen et al. | Development of a Listeria monocytogenes-based vaccine against hepatocellular carcinoma | |
RU2319741C2 (ru) | Микроорганизмы в качестве носителей нуклеотидных последовательностей, кодирующих клеточные антигены, для лечения опухолей | |
JP2015520129A (ja) | 多価乳がんワクチン | |
JP6213969B2 (ja) | 免疫原性ポリペプチド表層発現ビフィズス菌 | |
KR20080101988A (ko) | 인간 간암 동물모델 및 이를 이용한 수지상세포-유래 간암면역치료제의 예방 및 치료 효능을 분석하는 방법 | |
Chen et al. | Recombinant DNA vaccines protect against tumors that are resistant to recombinant vaccinia vaccines containing the same gene | |
Wang et al. | A Mage3/Heat Shock Protein70 DNA vaccine induces both innate and adaptive immune responses for the antitumor activity | |
Wu et al. | Enhanced anti-tumor therapeutic efficacy of DNA vaccine by fusing the E7 gene to BAFF in treating human papillomavirus-associated cancer | |
WO2007018198A1 (ja) | Hla-a2陽性者用hsp105由来癌拒絶抗原ペプチド及びこれを含む医薬 | |
JP2012039877A (ja) | ユビキチン融合遺伝子およびそれを用いたdnaワクチン | |
Nakamura et al. | Induction of protective immunity to Listeria monocytogenes with dendritic cells retrovirally transduced with a cytotoxic T lymphocyte epitope minigene | |
Yan et al. | HLA-A2. 1-restricted T cells react to SEREX-defined tumor antigen CML66L and are suppressed by CD4+ CD25+ regulatory T cells | |
JP2006096663A (ja) | 癌遺伝子ワクチン | |
JP4459060B2 (ja) | ポリヌクレオチドからなるワクチン | |
Cohen et al. | Enhancing cellular cancer vaccines | |
Chopra et al. | Treatment of squamous carcinoma in mice with a vaccine enriched for cells that induce immunity to squamous carcinoma—A new vaccination strategy | |
US20050031649A1 (en) | Recombinant fusion proteins comprising BCG heat shock protein 65 and the epitope of MUC1 | |
AU2004237854B2 (en) | Melanoma cell lines expressing shared melanoma antigens and methods of using same | |
CN1646693A (zh) | 包膜微生物 | |
US20060121050A1 (en) | Fusion protein comprising bacillus calmette guerin heat shock protein 65 and the epitope of human prostate specific antigen |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080214 |