RU2280464C2 - Способ получения сухого пробиотического препарата "бацелл" - Google Patents

Способ получения сухого пробиотического препарата "бацелл" Download PDF

Info

Publication number
RU2280464C2
RU2280464C2 RU2004108581/13A RU2004108581A RU2280464C2 RU 2280464 C2 RU2280464 C2 RU 2280464C2 RU 2004108581/13 A RU2004108581/13 A RU 2004108581/13A RU 2004108581 A RU2004108581 A RU 2004108581A RU 2280464 C2 RU2280464 C2 RU 2280464C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
preparation
vkpm
preparing
lactobacillus acidophilus
albus
Prior art date
Application number
RU2004108581/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2004108581A (ru
Inventor
Александр Иванович Петенко (RU)
Александр Иванович Петенко
Виктор Андреевич Ярошенко (RU)
Виктор Андреевич Ярошенко
Андрей Георгиевич Кощаев (RU)
Андрей Георгиевич Кощаев
Нина Александровна Ушакова (RU)
Нина Александровна Ушакова
Борис Александрович Чернуха (RU)
Борис Александрович Чернуха
Original Assignee
Александр Иванович Петенко
Виктор Андреевич Ярошенко
Андрей Георгиевич Кощаев
Нина Александровна Ушакова
Борис Александрович Чернуха
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Александр Иванович Петенко, Виктор Андреевич Ярошенко, Андрей Георгиевич Кощаев, Нина Александровна Ушакова, Борис Александрович Чернуха filed Critical Александр Иванович Петенко
Priority to RU2004108581/13A priority Critical patent/RU2280464C2/ru
Publication of RU2004108581A publication Critical patent/RU2004108581A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2280464C2 publication Critical patent/RU2280464C2/ru

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к технологии приготовления бактериальных препаратов для профилактики болезней животных. Способ предусматривает раздельное выращивание в условиях глубинного культивирования микроорганизмов Bacillus subtilis ВКПМ В-8130, Lactobacillus acidophilus Scav. ВКПМ В-4625, и Rhuminococcus albus Kr. Выращенные маточные культуры В. subtilis ВКПМ В-8130 и L. acidophilus Scav. ВКПМ В-4625 и R. albus Kr смешивают в соотношении 1:1, засевают этой смесью автоклавированный подсолнечниковый шрот, при следующем соотношении компонентов, мас.%: автоклавированный подсолнечниковый шрот 45-55, маточная культура Lactobacillus acidophilus Scav. ВКПМ В-4625, Rhuminococcus albus Kr - 20-30, маточная культура Bacillus subtilis ВКПМ В-8130 20-30. Инкубируют полученную смесь при 30-45°С в течение 4-8 дней с получением в полувлажном препарате не менее 1·108 клеток/г препарата, причем смешивают полученный препарат с подсолнечниковым шротом в соотношении 1:10 - 1:12 с получением препарата с остаточной влажностью 8-10%. Изобретение обеспечивает повышение эффективности получения сухого пробиотического препарата, снижение материальных затрат при его производстве, упрощение технологии получения и использования дешевого сырья при изготовлении препарата, за счет исключения из технологической схемы стадии высушивания и получение препарата с более высоким титром. 3 табл.

Description

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к технологии приготовления бактериальных препаратов для профилактики болезней животных.
Известен способ получения сухого пробиотического препарата, включающий выращивание в жидкой питательной среде на основе ферментативного гидролизата казеина штаммами энтеробактерий, например Bifidobacterium globosum БФ-4 или Streptococcus falcium ВГНКИ-27 в течение 12-15 ч, затем нативную культуральную жидкость охлаждают до температуры 15-20°С и концентрируют в 10-15 раз, полученную концентрированную биомассу отмывают 2,5-3,5%-ным раствором сахарозы или лактозы и обезвоживают при температуре минус 25-35°С. При этом концентрированно нативной культуральной жидкости проводят методом ультрафильтрации на полых волокнах или микрофильтрацией на плоских мембранах или сепарированием в полупериодическом режиме работы (см. патент РФ №2065305, кл. А 61 К 35/74, бюл. №23, опубл. 08.20.1996 г.).
Однако данный способ имеет ряд существенных недостатков. Во-первых, необходимость использования гидролизата казеина значительно удорожает препарат. Во-вторых, использование в качестве метода концентрирования ультрафильтрации на полых волокнах или микрофильтрации на плоских мембранах делает данный метод дорогостоящим и требующим больших капиталовложений и высокой подготовки персонала. Также использование криогенной техники обезвоживания значительно усложняет технологический процесс. Кроме того, использование в качестве смешанной пробиотической культуры только двух видов бактерий делает эту смешанную популяцию неустойчивой, что снижает эффективность ее применения.
Известен способ получения сухого пробиотического препарата путем смешивания с защитной средой с последующим контактно-сорбционным обезвоживанием целевого продукта сорбентом, охлажденным до минус 8-10°С, например, окисью алюминия с остаточной влажностью менее 1% при массовом соотношении 1:10 - 1:12 соответственно, а досушивание осуществляют в течение 18-20 ч при температуре 0-5°С в замкнутом объеме (Патент РФ №2067114, Кл. 6 С 12 N 1/20, А 61 К 35/74, С 12 N 1/04. Бюл. №27. 27.09.96).
Однако в известном способе используется в качестве основы для пробиотического препарата монокультура бифидобактерий или стрептококков, что не может обеспечить получения пробиотической добавки с высокой эффективностью, так как у монокультур низкая резистентность к патогенным микроорганизмам, населяющим желудочно-кишечный тракт, и они не способны оказывать длительное терапевтическое или лечебное действие. Кроме того, использование в качестве сорбента окиси алюминия удорожает получаемый продукт, а кроме того, он является инертным веществом и выступает только в качестве балласта и только засоряет желудочно-кишечный тракт. Следует отметить, что пробиотический препарат, полученный по указанному способу, получится дорогостоящим для применения в животноводстве и птицеводстве за счет использования таких дорогостоящих технологических приемов, как контактно-сорбционное обезвоживание, использование низких температур.
Наиболее близким к заявляемому способу является способ получения препарата для кормления цыплят, предусматривающий выращивание консорциума пробиотических культур Lactobacillus acidophilus 1-33 и Rhuminococcus albus 1-33 на питательной среде, содержащей подсолнечниковый или соевый шрот и водопроводную воду при температуре 36-38°С в течение суток, после чего полученную производственную бактериальную культуру, состоящую из смеси обозначенных маточных культур, смешивают с подсолнечным или соевым шротом в соотношении от 1:1 до 1:2 и высушивают полученную смесь, пропуская сухой воздух при температуре 40-60°С до остаточной влажности 7-7,2%, высушенный препарат измельчают (Патент РФ №2171037, А 23 К 1/165, 27.07.2001, Бюл. №21. 27.07.2001 - прототип).
Однако в известном способе используется в качестве компонентов всего два штамма, что делает данную композицию неустойчивой при заселении ею желудочно-кишечного тракта, а значит и низкой эффективностью препарата. Предлагаемая авторами данного способа стадия высушивания негативно скажется на физиологическом состоянии подвергнутых термообработки микроорганизмов, а кроме того, приводит к удорожанию препарата за счет использования энергоносителя. Вызывает сомнение, что использования в питательной среде как равноценных таких субстратов, как соевый и подсолнечниковый шрот, позволит получить стандартизированый препарат, так как их химический состав различен. Следует отметить, что такой препарат не может обладать комплексным действием: пробиотическим, антимикробным, иммуномодулирующим и располагать целлюлозолитической активностью.
Известные способы не позволяют экономически эффективно получать сухой пробиотический препарат высокого качества, сочетающего противомикробную защиту организма со стимулирующим воздействием на него, при одновременном увеличении конверсии корма с высоким содержанием клетчатки и при использовании дешевого сырья с минимальными затратами и по упрощенной технологии производства, основанной на использовании трех культур пробиотических микроорганизмов и без использования стадии термического высушивания.
Техническим решением задачи является расширение ассортимента пробиотических препаратов, снижение материальных затрат за счет использования дешевого сырья и упрощения технологии изготовления препарата за счет исключения из технологической схемы стадии высушивания и получения препарата с более высоким титром, повышения эффективности применения препарата за счет дополнительного использования штамма Bacillus subtilis.
Поставленная задача достигается тем, что способ получения сухого пробиотического препарата включает в себя раздельное выращивание в условиях глубинного культивирования микроорганизмов Lactobacillus acidophilus и Rhuminococcus albus до заданного достижения титра каждого микроорганизма, смешивание полученной маточной культуры с подсолнечниковым шротом в заданном соотношении, причем в качестве микроорганизмов дополнительно используют Bacillus subtilis ВКПМ В-8130, из Lactobacillus acidophilus используют Lactobacillus acidophilus Suav. ВКПМ В-4625, из Rhuminococcus albus - Rhuminococcus albus KR, при этом выращенные маточные культуры смешивают в соотношении 1:1, засевают ею автоклавированный подсолнечниковый шрот, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
автоклавированный подсолнечниковый шрот 45-55
маточная культура Lactobacillus acidophilus Suav. ВКПМ
4625, Rhuminococcus albus Kr 20-30
маточная культура Bacillus subtilis ВКПМ В-8130 20-30
инкубируют полученную смесь при 30-45°С в течение 4-8 дней с получением в полувлажном препарате не менее 1·108 клеток/г препарата, причем смешивают полученный препарат с подсолнечниковым шротом в соотношении 1:10 - 1:12 с получением препарата с остаточной влажностью 8-10%.
Заявленный способ получения пробиотического препарата отличается от прототипа составом микроорганизмов (штаммами микроорганизмов Lactobacillus acidophilus и Rhuminococcus albus, а также дополнительным вводом Bacillus subtilis), иными технологическими режимами и упрощением технологической схемы получения препарата.
Эти отличия позволяют сделать вывод о соответствии заявляемых технических решений критерию "новизна".
Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение поставленной задачи и не выявлены при изучении патентной и научно-технической литературы в данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию "изобретательский уровень".
Производственным названием пробиотического препарата, полученного по указанному способу, является слово, образованное от слов бацилла и субстрата ассимилирующего включенными в состав препарата микроорганизмами целлюлоза - "Бацелл".
В сухом пробиотическом препарате с производственным названием "Бацелл" используются 3 штамма микроорганизмов: Lactobacillus acidophilus Scav. ВКПМ В-4625, Rhuminococcus albus Kr и Bacillus subtilis ВКПМ В-8130. Все штаммы являются непатогенными и не требуют специальных мер предосторожности при работе с ними.
Штамм Lactobacillus acidophilus Scav. ВКПМ В-4625 задепонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ФГУП ГосНИИ Генетика, г. Москва) под номером В-4625 и является неотипом вида и чаще всего используется для синтеза молочной кислоты.
Штамм Rhuminococcus albus Kr выделен из слепой кишки кролика Ушаковой Н.А. в 2000 году. Культурально-биохимические свойства: сферические кокки диаметром 0,8-1,0 мкм. Одиночные в парах и короткие цепочки. Грамположительные. Неподвижные. Глубинные колонии чечевицеобразные. Строгие анаэробы. Целлюлозу расщепляют. Каталазоотрицательные. Нитрат не восстанавливают, аммиак из аминокислот не образуют. Хемоорганотрофы со сложными пищевыми потребностями. Растут при температуре 25-40°С, оптимальное значение рН 6,5.
Применяется для биоконверсии клетчатки растительных субстратов. Непатогенен для лабораторных животных. Для данного штамма функции коллекции-депозитария выполняет коллекция микроорганизмов института экологии и эволюции им. Северцева (РАН, г. Москва).
Штамм Bacillus subtilis ВКПМ В-8130 задепонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ФГУП ГосНИИ Генетика, г. Москва) под номером В-8130 и выделен в 1998 году Ушаковой Н.А. из слепой кишки глухаря. Культурально-биохимические свойства: факультативно-анаэробные спорообразующие палочки, прямые или слегка изогнутые 0,3-0,5×3,0-7,0 мкм, иногда могут образовывать нити или цепочки. Грамположительные. Каталазоположительные. Спора овальная и субтермальная. Колонии на агаровой среде слегка округлые или с волнистым краем. Могут быть волнистыми, палевого цвета. При развитии на глюкозе образуют пленку, среду подкисляют без образования газа. Растут на сахарозе, лактозе, мальтозе, маните, разжижают желатин, гидролизуют эскулин. Разрушают пектин и полисахариды растительных тканей. Образуют эндоглюканазу. Растут при температуре 45-55°С.
Применяется для биоконверсии клетчатки растительных субстратов. Непатогенен для лабораторных животных.
Пример конкретного осуществления способа получения сухого пробиотического препарата осуществлялся в условиях ФГУ "Краснодарский биоцентр" г. Краснодар.
Выращивание бактериальных культур Lactobacillus acidophilus Scav. ВКПМ В-4625 и Rhuminococcus albus Kr осуществляют на жидкой питательной среде в колбах для культивирования микроорганизмов объемом 3 литра без встряхивания в течение 6 суток при температуре 37°С на среде следующего состава:
рубцовая жидкость 50 мл
целлобиоза 7,5 г
мясопептонный бульон 5,0 г
хлористый натрий 1,0 г
сульфат натрия 1,0 г
фосфат калия однозамещенный 1,0 г
сульфат аммония 2,0 г
мел 2,0 г
до получения титра бактериальных клеток не менее 2·108 клеток/мл среды.
Одновременно культивируют Bacillus subtilis ВКПМ В-8130 на жидкой питательной среде в колбах для культивирования микроорганизмов объемом 3 литра на качалке в течение 2 суток при температуре 37°С на глюкозопептонной среде следующего состава (г/л):
глюкоза 20 г
пептон 4 г
дрожжевой экстракт 1,5 г
сульфат магния 0,5 г
фосфат аммония двузамещенный 1,5 г
рН 7,2-7,4
до получения титра бактериальных клеток не менее 1·108 клеток/мл среды.
Полученные таким образом жидкие маточные культуры объединяются в соотношении 1:1. И смесь в стерильных условиях высевается в полипропиленовые пакеты, содержащие автоклавированный подсолнечниковый шрот массой 2 кг. В дальнейшем пакеты инкубируют при температуре 37°С в течение 6 дней с получением титра клеток в полувлажном препарате не менее 1·109 клеток/г препарата. Полученный полувлажный, препарат смешивают с нестерильным подсолнечниковым шротом в соотношении 1:10 с получением титра клеток не менее 1·108 клеток/г препарата и его конечной влажностью 8-10%.
Для оценки эффективности хранения предлагаемого препарата "Бацелл" провели эксперимент, результаты которого представлены в таблице 1.
Таблица 1
Содержание микроорганизмов в предлагаемом препарате "Бацелл" в процессе хранения
Препарат Время хранения, мес
0 2 4 6 8 10 12
Предлагаемый препарат 5·108 3·108 2·108 1·108 8·107 6·107 1·107
Как видно из таблицы, полученный препарат хранится в течение 6 месяцев без значительного изменения титра клеток.
Предлагаемый пробиотический препарат "Бацелл" является более дешевым по сравнению аналогами, так как в ценах 2003 года коммерческая стоимость 1 кг предлагаемого препарата 20 руб., а стоимость близкого по составу сухого препарата "Целлобактерин" составила 120 руб. Удешевление предлагаемого препарата в 6 раз достигается использованием дешевых питательных сред и отсутствием операции по его высушиванию, при этом концентрация микроорганизмов одинакова.
Для оценки эффективности применения сухого пробиотического препарата "Бацелл" провели производственные испытания на цыплятах-бройлерах в условиях птицефабрики "Кубань", г. Усть-Лабинска (Краснодарский край). Схема опыта представлена в таблице 2, а некоторые результаты экспериментов представлены в таблице 3.
Таблица 2
Схема опыта на цыплятах-бройлерах
Группы Количество голов в группе Характеристика кормления
контрольная 22939 Основные кормовые смеси, составленные по нормам ВНИТИП из кормов собственного производства с добавлением витаминно-минерального премикса по периодам выращивания 1-28 и 29-49 дней
опытная 25660 Основные кормовые смеси, составленные по нормам ВНИТИП из кормов
собственного производства с добавлением витаминно-минерального премикса по периодам выращивания 1-28 и 29-49 дней + предлагаемый пробиотический препарат "Бацелл" из расчета 2 кг на 1 тонну комбикорма или 0,2% по массе кормосмеси
Как видно из результатов производственных испытаний, в условиях птицефабрики предлагаемый пробиотический препарат "Бацелл" способствовал увеличению интенсивности роста цыплят, снижению затрат кормов на 1 кг прироста, повышению сохранности, а кроме этого, значительному улучшению мясных качеств цыплят-бройлеров. Экономические результаты опыта оказались значительно лучше в опытной группе с применением "Бацелла", где стоимость кормов, затраченных на 1 кг прироста, оказалась на 20,7% ниже (2,26 рубля), чем в контроле.
Таблица 3
Результаты производственных испытаний предлагаемого сухого пробиотического препарата на цыплятах-бройлерах
Группы Живая масса 1 головы, г Среднесуточный прирост, г Затраты корма на 1 кг прироста, г Сохранность, %
на начало опыта на конец опыта
контрольная 40 1457 28,9 2,64 94,7
опытная 41 1585 31,5 2,50 96,3
Для получения сухого пробиотического препарата смешивают между собой маточные культуры микроорганизмов с пробиотическими свойствами, относящиеся к Lactobacillus acidophilus Scav. ВКПМ В-4625, Rhuminococcus albus Kr и Bacillus subtilis ВКПМ В-8130. Данная совокупность микроорганизмов оптимально подобрана для нормализации микрофлоры желудочно-кишечного тракта животных. Так штамм Lactobacillus acidophilus Scav. ВКПМ В-4625 обеспечивает создание нормального кислотного равновесия в ЖКТ за счет выделения молочной кислоты, которая также обладает дополнительно антимикробными свойствами.
Введение в предлагаемый препарат штамма Rhuminococcus albus Kr, выделенный из слепой кишки кролика, позволяет обеспечить лучшее переваривание компонентов корма с высоким содержанием клетчатки за счет наличия у данного штамма высокой целлюлозолитической активности, Bacillus subtilis ВКПМ В-8130, обладая высокой антимикробной активностью, позволяет в короткие сроки избавиться от патогенных микроорганизмов, находящихся в ЖКТ, при том что нормальная микрофлора кишечника данным штаммом не угнетается. Выращивание микроорганизмов осуществляется в условиях глубинной культуры, что связано с необходимостью получения однородной по возрасту и активности популяции, чего невозможно достичь при использовании поверхностного культивирования. Кроме того, скорость роста глубинной культуры значительно быстрее, а ее получение менее трудоемко в сравнении с альтернативой. Культивирование осуществляют до получения титра каждой культурой не менее 1·108 клеток/мл суспензии. Получение суспензии с титром менее 1·108 клеток/мл не может обеспечить высокой эффективности заявляемых свойств препарата. Титр более 1·108 клеток/мл требует увеличения сроков культивирования и введения дополнительных веществ в питательную среду, что потребует увеличения стоимости препарата. Поэтому оптимальным титром суспензии в прелагаемом препарате является 1·108 клеток/мл. Выращенные суспензии смешивают с автоклавированным шротом. Если массовая доля подсолнечникового шрота будет менее 45%, то этого количества будет недостаточно для поддержания нужного титра препарата, так как он используется и как сорбент, и как источник питательных веществ. Если содержание шрота будет более 55%, это приведет к снижению влажности субстрата и степени размножения микроорганизмов, а значит снизится титр действующей основы и качество препарата снизится. Оптимальное значение содержания подсолнечникового шрота должно составлять 50%. Если доля суспензии микроорганизмов видов Lactobacillus acidophilus Scav. ВКПМ В-4625, Rhuminococcus albus Kr будет менее 20%, то уровень лактопродуцирующей и целлюлозолитической активности препарата снизится, а значит и качество препарата будет плохим. Если доля суспензии микроорганизмов видов Lactobacillus acidophilus Scav. ВКПМ В-4625, Rhuminococcus albus Kr будет более 30%, то общая влажность препарата повысится и он станет нетехнологичен. Поэтому оптимальной долей ввода указанной суспензии микроорганизмов является 25%. Если доля суспензии микроорганизмов вида Bacillus subtilis ВКПМ В-8130 будет менее 20%, то уровень антимикробной активности препарата снизится, а значит и качество препарата будет плохим. Если доля суспензии микроорганизмов вида Bacillus subtilis ВКПМ В-8130 будет более 30%, то общая влажность препарата повысится и он станет нетехнологичен. Поэтому оптимальной долей ввода Bacillus subtilis ВКПМ В-8130 является 25%.
Полученную смесь инкубируют при постоянной температуре. Если температура будет менее 30°С, то развитие микроорганизмов будет снижено или рост культуры будет отсутствовать полностью. Если температура будет более 45°С, то происходит гибель микроорганизмов. Поэтому оптимальной температурой культивирования является температура, равная 37°С. Культивирование осуществляют в течение нескольких дней. Если выращивание культуры будет менее 4 суток, то не будет достигнут нужный титр микроорганизмов и это снизит качество препарата. Если выращивание культуры будет более 8 суток, то питательных веществ субстрата не хватит и микроорганизмы начнут гибнуть, кроме того, качество сорбента ухудшится за счет большого разрушения клетчатки и технологические свойства влажного препарата не обеспечат равномерность смешивания с сухим шротом. Оптимальным временем культивирования является 6 суток. Смешивание осуществляют с сорбентом, в качестве которого используют подсолнечниковый шрот. Если температура сорбента будет менее 0°С, то происходит перерасход теплоносителей, так как понижение температуры до такого уровня требует специальных установок. Если температура сорбента будет более 30°С, то поддержание такой температуры сорбента потребует дополнительного перерасхода теплоносителей, что скажется на стоимости предлагаемого препарата. Оптимальной температурой сорбента является температура 15°С.
Для уменьшения влажности препарата необходимо ввести сорбент, в качестве которого используется подсолнечниковый шрот. Если влажность сорбента будет менее 10%, то для получения такой начальной влажности необходима дополнительная сушка подсолнечникового шрота, что приведет к увеличению расхода теплоносителей и удорожанию предлагаемого препарата. Если влажность сорбента будет более 12%, то такой сорбент плохо хранится и его качество снижается за счет повышения общей обсемененности патогенными микроорганизмами. Оптимальной влажностью подсолнечникового шрота является влажность 11%. Сорбент смешивается с влажным препаратом. Если соотношение влажного препарата и сорбента будет менее чем 1:10, то качество препарата снизится, так как нельзя получить при таком разбавлении требуемый титр препарата 1·108 кл/г. Если соотношение влажного препарата и сорбента будет более чем 1:12, то качество препарата снизится, так как повысится влажность препарата, и сроки хранения уменьшатся, а также будет происходить рост посторонней микрофлоры. Оптимальным соотношением влажного препарата и сорбента является соотношение 1:11.
Заявленный способ позволяет получить сухую пробиотическую добавку с низкой стоимостью за счет использования дешевого сырья, упрощения технологии получения добавки и повышения ее эффективности за счет использования смешанной культуры, адаптированной к используемому для нее сорбенту, введение предлагаемой добавки в растительные рационы с повышенным содержанием клетчатки позволяет получить высокую продуктивность сельскохозяйственных животных и птицы.

Claims (1)

  1. Способ получения сухого пробиотического препарата, предусматривающий приготовление маточной культуры совместным выращиванием в условиях глубинного культивирования микроорганизмов Lactobacillus acidophilus и Rhuminococcus albus до заданного достижения титра каждого микроорганизма, смешивание полученной маточной культуры с подсолнечниковым шротом, отличающийся тем, что дополнительно для приготовления маточной культуры используют Bacillus subtilis ВКПМ В-8130, из Lactobacillus acidophilus используют Lactobacillus acidophilus Scav. ВКПМ В-4625, из Rhuminococcus albus - Rhuminococcus albus Кг, при этом маточную культуру Lactobacillus acidophilus Scav. ВКПМ В-4625 и Rhuminococcus albus Kr и маточную культуру Bacillus subtilis ВКПМ В-8130 смешивают в соотношении 1:1, засевают ею автоклавированный подсолнечниковый шрот при следующем соотношении компонентов, мас.%:
    Автоклавированный подсолнечниковый шрот 45-55 Маточная культура Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-4625, Rhuminococcus albus Kr 20-30 Маточная культура Bacillus subtilis ВКПМ В-8130 20-30
    инкубируют полученную смесь при 30-45°С в течение 4-8 дней с получением в полувлажном препарате не менее 1·108 клеток/г препарата, причем смешивают полученный препарат с подсолнечниковым шротом в соотношении 1:10-1:12 с получением препарата с остаточной влажностью 8-10%.
RU2004108581/13A 2004-03-22 2004-03-22 Способ получения сухого пробиотического препарата "бацелл" RU2280464C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004108581/13A RU2280464C2 (ru) 2004-03-22 2004-03-22 Способ получения сухого пробиотического препарата "бацелл"

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004108581/13A RU2280464C2 (ru) 2004-03-22 2004-03-22 Способ получения сухого пробиотического препарата "бацелл"

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2004108581A RU2004108581A (ru) 2005-09-27
RU2280464C2 true RU2280464C2 (ru) 2006-07-27

Family

ID=35849715

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2004108581/13A RU2280464C2 (ru) 2004-03-22 2004-03-22 Способ получения сухого пробиотического препарата "бацелл"

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2280464C2 (ru)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2506810C1 (ru) * 2012-10-03 2014-02-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова Российской академии наук Способ получения комплексной биологически активной кормовой добавки для осетровых рыб
RU2515136C1 (ru) * 2012-11-30 2014-05-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Волгоградский государственный аграрный университет (ФГБОУ ВПО Волгоградский ГАУ) Премикс для лактирующих коров
RU2546880C2 (ru) * 2013-06-03 2015-04-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова Академии Наук Способ получения кормового пробиотического препарата для сельскохозяйственных животных
RU2576200C1 (ru) * 2014-12-12 2016-02-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова РАН Способ получения биологически активной кормовой добавки для сельскохозяйственных животных и птицы с пробиотиком и белком насекомых
RU2636040C1 (ru) * 2016-12-06 2017-11-17 Аркадий Пантелеймонович Синицын Штаммы-продуценты ферментов и способ получения мультиэнзимной композиции протеолитического и гемицеллюлолитического действия, предназначенной для применения в кормопроизводстве
RU2691594C1 (ru) * 2018-05-31 2019-06-14 Вячеслав Борисович Одеянко Композитная кормовая биополимерная добавка для имитации процессов естественного пищеварения при интенсивном выращивании в сельском хозяйстве птицы и животных и способ её получения
RU2816010C1 (ru) * 2023-07-25 2024-03-25 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный технологический университет им. В.Г. Шухова" Способ получения пробиотика с кутикулой куколок черной львинки для профилактики и лечения дисбактериоза птиц

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2506810C1 (ru) * 2012-10-03 2014-02-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова Российской академии наук Способ получения комплексной биологически активной кормовой добавки для осетровых рыб
RU2515136C1 (ru) * 2012-11-30 2014-05-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Волгоградский государственный аграрный университет (ФГБОУ ВПО Волгоградский ГАУ) Премикс для лактирующих коров
RU2546880C2 (ru) * 2013-06-03 2015-04-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова Академии Наук Способ получения кормового пробиотического препарата для сельскохозяйственных животных
RU2576200C1 (ru) * 2014-12-12 2016-02-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова РАН Способ получения биологически активной кормовой добавки для сельскохозяйственных животных и птицы с пробиотиком и белком насекомых
RU2636040C1 (ru) * 2016-12-06 2017-11-17 Аркадий Пантелеймонович Синицын Штаммы-продуценты ферментов и способ получения мультиэнзимной композиции протеолитического и гемицеллюлолитического действия, предназначенной для применения в кормопроизводстве
RU2691594C1 (ru) * 2018-05-31 2019-06-14 Вячеслав Борисович Одеянко Композитная кормовая биополимерная добавка для имитации процессов естественного пищеварения при интенсивном выращивании в сельском хозяйстве птицы и животных и способ её получения
RU2816010C1 (ru) * 2023-07-25 2024-03-25 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный технологический университет им. В.Г. Шухова" Способ получения пробиотика с кутикулой куколок черной львинки для профилактики и лечения дисбактериоза птиц

Also Published As

Publication number Publication date
RU2004108581A (ru) 2005-09-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2412612C1 (ru) Способ получения пробиотической кормовой добавки ферм км для сельскохозяйственных животных и птицы
CN105524866B (zh) 提高凝结芽孢杆菌出芽率及l-乳酸产量的发酵方法
CN111733091B (zh) 一种枯草芽孢杆菌用发酵培养基及其制备方法、枯草芽孢杆菌制剂的制备方法
CN115094012B (zh) 凝结芽孢杆菌bc-hyc株菌剂的制备方法及应用
CN102907585A (zh) 一种中猪用益生素维生素预混料及配合料
KR100287825B1 (ko) 가축용 복합 미생물 제제
RU2280464C2 (ru) Способ получения сухого пробиотического препарата "бацелл"
CN111944723B (zh) 一种利用白酒糟生产巨大芽孢杆菌的技术方法
CN106399155A (zh) 一种地衣芽孢杆菌发酵培养基
RU2546880C2 (ru) Способ получения кормового пробиотического препарата для сельскохозяйственных животных
KR101854705B1 (ko) 알파글루코시다아제 저해제를 다량 생산하는 바실러스 리케니포르미스 ny1505 균주
CN112741210A (zh) 提高动物机体免疫功能的生物制剂及制备方法
CN112226389A (zh) 一种三黄肉雏鸡肠道益生菌群的定植培养方法及其应用
CN109897800A (zh) 一株富硒坚强肠球菌a8-1及其应用
RU2475535C1 (ru) Способ получения пробиотического препарата лактоамиловорина
CN114190486A (zh) 一种预防和治疗母猪便秘的微生物发酵饲料及母猪养殖方法
CN112391317B (zh) 一种生产燕窝酸的益生菌株组合物及用途
KR102135554B1 (ko) 가축용 생균제 제조방법
CN103497988B (zh) 一种安全高效乳酸菌产品的发酵生产方法
RU2524117C1 (ru) Штамм бактерий lactobacillus acidophilus используемый для приготовления кисломолочного продукта
RU2266126C1 (ru) Способ получения жидкого пробиотического препарата
CN110178972A (zh) 一种白羽鸡饲养用微生态制剂及其制备方法
RU2184774C1 (ru) Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний животных, птицы и рыбы
KR20210076221A (ko) 페디오코커스 펜토사세우스 kcc-45 및 이를 포함하는 조성물
KR100801143B1 (ko) 바실러스 폴리퍼멘티쿠스와 사카로마이세스 세르비지에의혼합배양 방법

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20080323