RU2193038C2 - Способ получения металлсодержащих производных бактериохлорофилла, новые металлированные производные бактериохлорофилла, фармацевтическая композиция - Google Patents
Способ получения металлсодержащих производных бактериохлорофилла, новые металлированные производные бактериохлорофилла, фармацевтическая композиция Download PDFInfo
- Publication number
- RU2193038C2 RU2193038C2 RU98111943/04A RU98111943A RU2193038C2 RU 2193038 C2 RU2193038 C2 RU 2193038C2 RU 98111943/04 A RU98111943/04 A RU 98111943/04A RU 98111943 A RU98111943 A RU 98111943A RU 2193038 C2 RU2193038 C2 RU 2193038C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- metal
- bacteriochlorophyll
- group
- derivative
- bchl
- Prior art date
Links
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 110
- 239000002184 metal Substances 0.000 title claims abstract description 110
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 41
- DSJXIQQMORJERS-AGGZHOMASA-M bacteriochlorophyll a Chemical class C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC([C@H](CC)[C@H]3C)=[N+]4C3=CC3=C(C(C)=O)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 DSJXIQQMORJERS-AGGZHOMASA-M 0.000 title claims abstract description 29
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title abstract description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title abstract 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 24
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims abstract description 23
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 18
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 claims abstract description 17
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 claims abstract description 17
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 claims abstract description 15
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 12
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 10
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 claims abstract description 9
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 claims abstract description 8
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 125000004066 1-hydroxyethyl group Chemical group [H]OC([H])([*])C([H])([H])[H] 0.000 claims abstract description 6
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 44
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 23
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 21
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 18
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 18
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 18
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 14
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 claims description 14
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims description 13
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 108010003118 Bacteriochlorophylls Proteins 0.000 claims description 12
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 12
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims description 12
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 11
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 claims description 11
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 11
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 claims description 10
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 10
- 125000002686 geranylgeranyl group Chemical group [H]C([*])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])C([H])=C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 9
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 claims description 8
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 7
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 7
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 229910001510 metal chloride Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 claims description 5
- POILWHVDKZOXJZ-ARJAWSKDSA-M (z)-4-oxopent-2-en-2-olate Chemical compound C\C([O-])=C\C(C)=O POILWHVDKZOXJZ-ARJAWSKDSA-M 0.000 claims description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 4
- 231100000760 phototoxic Toxicity 0.000 claims description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims 1
- 125000002072 seryl group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 2
- 125000004400 (C1-C12) alkyl group Chemical group 0.000 abstract 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 abstract 1
- 150000002902 organometallic compounds Chemical class 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 26
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 20
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- XZSVAMUZTKNGDN-JBRJOJLESA-L bacteriochlorophylls Chemical compound [Mg+2].[N-]1C2=C(C=3C(C(C)C(=CC=4C(=C(C(C)=O)C(=C5)N=4)C)N=3)CCC(=O)OC\C=C(/C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)C(C(=O)OC)C([O-])=C2C(C)=C1C=C1C(CC)C(C)C5=N1 XZSVAMUZTKNGDN-JBRJOJLESA-L 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 10
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 10
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 9
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 9
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 9
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 8
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000001752 chlorophylls and chlorophyllins Substances 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 206010034972 Photosensitivity reaction Diseases 0.000 description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 6
- -1 for example Chemical class 0.000 description 6
- 208000007578 phototoxic dermatitis Diseases 0.000 description 6
- 231100000018 phototoxicity Toxicity 0.000 description 6
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 6
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 5
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 5
- 235000010378 sodium ascorbate Nutrition 0.000 description 5
- PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M sodium ascorbate Substances [Na+].OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M 0.000 description 5
- 229960005055 sodium ascorbate Drugs 0.000 description 5
- PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M sodium-L-ascorbate Chemical compound [Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 238000006478 transmetalation reaction Methods 0.000 description 5
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 150000002678 macrocyclic compounds Chemical class 0.000 description 4
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010070075 Bacteriochlorophyll A Proteins 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JFDZBHWFFUWGJE-UHFFFAOYSA-N benzonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CC=C1 JFDZBHWFFUWGJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 229930002868 chlorophyll a Natural products 0.000 description 3
- 108010025790 chlorophyllase Proteins 0.000 description 3
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 3
- 125000000168 pyrrolyl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 3
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 229910052718 tin Inorganic materials 0.000 description 3
- 229930195735 unsaturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- KAFZOLYKKCWUBI-HPMAGDRPSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-1-[(2s)-3-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-(3-cyclohexylpropanoylamino)-4-methylpentanoyl]amino]-5-methylhexanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]butanediamide Chemical compound N([C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(C)C)C(=O)N[C@@H](CN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(N)=O)C(=O)CCC1CCCCC1 KAFZOLYKKCWUBI-HPMAGDRPSA-N 0.000 description 2
- IOOQHEFLQLMYPZ-GNQFORKWSA-M (7R,8Z)-bacteriochlorophyll b Chemical compound O=C([C@@H](C1=C2N3[Mg]N45)C(=O)OC)C2=C(C)\C3=C\C(\C(\[C@H]/2C)=C/C)=N\C\2=C/C4=C(C(C)=O)C(C)=C5\C=C/2[C@@H](C)[C@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)C1=N\2 IOOQHEFLQLMYPZ-GNQFORKWSA-M 0.000 description 2
- IGVKWAAPMVVTFX-BUHFOSPRSA-N (e)-octadec-5-en-7,9-diynoic acid Chemical compound CCCCCCCCC#CC#C\C=C\CCCC(O)=O IGVKWAAPMVVTFX-BUHFOSPRSA-N 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- UGADAJMDJZPKQX-UHFFFAOYSA-N 2,3,22,24-tetrahydroporphyrin Chemical class N1C(C=C2N=C(C=C3NC(=C4)C=C3)C=C2)=CC=C1C=C1CCC4=N1 UGADAJMDJZPKQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKVJCVWFVRATSG-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxybenzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC(O)=C1 OKVJCVWFVRATSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UJKPHYRXOLRVJJ-MLSVHJFASA-N CC(O)C1=C(C)/C2=C/C3=N/C(=C\C4=C(CCC(O)=O)C(C)=C(N4)/C=C4\N=C(\C=C\1/N\2)C(C)=C4C(C)O)/C(CCC(O)=O)=C3C Chemical class CC(O)C1=C(C)/C2=C/C3=N/C(=C\C4=C(CCC(O)=O)C(C)=C(N4)/C=C4\N=C(\C=C\1/N\2)C(C)=C4C(C)O)/C(CCC(O)=O)=C3C UJKPHYRXOLRVJJ-MLSVHJFASA-N 0.000 description 2
- 229920002271 DEAE-Sepharose Polymers 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- 150000004036 bacteriochlorins Chemical class 0.000 description 2
- 108010010589 bacteriochlorophyll b Proteins 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 238000007324 demetalation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 2
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 2
- 229910052745 lead Inorganic materials 0.000 description 2
- AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M lithium bromide Chemical compound [Li+].[Br-] AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 2
- ANSUDRATXSJBLY-VKHMYHEASA-N methyl (2s)-2-amino-3-hydroxypropanoate Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CO ANSUDRATXSJBLY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 2
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 2
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- HBENZIXOGRCSQN-VQWWACLZSA-N (1S,2S,6R,14R,15R,16R)-5-(cyclopropylmethyl)-16-[(2S)-2-hydroxy-3,3-dimethylpentan-2-yl]-15-methoxy-13-oxa-5-azahexacyclo[13.2.2.12,8.01,6.02,14.012,20]icosa-8(20),9,11-trien-11-ol Chemical compound N1([C@@H]2CC=3C4=C(C(=CC=3)O)O[C@H]3[C@@]5(OC)CC[C@@]2([C@@]43CC1)C[C@@H]5[C@](C)(O)C(C)(C)CC)CC1CC1 HBENZIXOGRCSQN-VQWWACLZSA-N 0.000 description 1
- WLWNRAWQDZRXMB-YLFCFFPRSA-N (2r,3r,4r,5s)-n,3,4,5-tetrahydroxy-1-(4-phenoxyphenyl)sulfonylpiperidine-2-carboxamide Chemical compound ONC(=O)[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)CN1S(=O)(=O)C(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 WLWNRAWQDZRXMB-YLFCFFPRSA-N 0.000 description 1
- LJIOTBMDLVHTBO-CUYJMHBOSA-N (2s)-2-amino-n-[(1r,2r)-1-cyano-2-[4-[4-(4-methylpiperazin-1-yl)sulfonylphenyl]phenyl]cyclopropyl]butanamide Chemical compound CC[C@H](N)C(=O)N[C@]1(C#N)C[C@@H]1C1=CC=C(C=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)N2CCN(C)CC2)C=C1 LJIOTBMDLVHTBO-CUYJMHBOSA-N 0.000 description 1
- CAXCRXDCRBCENL-FQEVSTJZSA-N (2s)-3-hydroxy-2-(tritylazaniumyl)propanoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C=1C=CC=CC=1)(N[C@@H](CO)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CAXCRXDCRBCENL-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- FBOABHBVCZFNNR-QWRGUYRKSA-N (2s)-3-hydroxy-2-[[(2s)-3-hydroxy-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoyl]amino]propanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 FBOABHBVCZFNNR-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- VUDZSIYXZUYWSC-DBRKOABJSA-N (4r)-1-[(2r,4r,5r)-3,3-difluoro-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-4-hydroxy-1,3-diazinan-2-one Chemical compound FC1(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)N[C@H](O)CC1 VUDZSIYXZUYWSC-DBRKOABJSA-N 0.000 description 1
- AZUYLZMQTIKGSC-UHFFFAOYSA-N 1-[6-[4-(5-chloro-6-methyl-1H-indazol-4-yl)-5-methyl-3-(1-methylindazol-5-yl)pyrazol-1-yl]-2-azaspiro[3.3]heptan-2-yl]prop-2-en-1-one Chemical compound ClC=1C(=C2C=NNC2=CC=1C)C=1C(=NN(C=1C)C1CC2(CN(C2)C(C=C)=O)C1)C=1C=C2C=NN(C2=CC=1)C AZUYLZMQTIKGSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFIHLFGSTIFVLP-UHFFFAOYSA-N 1-pentoxyethane-1,2-diol Chemical compound CCCCCOC(O)CO CFIHLFGSTIFVLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KFKRXESVMDBTNQ-UHFFFAOYSA-N 3-[18-(2-carboxylatoethyl)-8,13-bis(1-hydroxyethyl)-3,7,12,17-tetramethyl-22,23-dihydroporphyrin-21,24-diium-2-yl]propanoate Chemical compound N1C2=C(C)C(C(C)O)=C1C=C(N1)C(C)=C(C(O)C)C1=CC(C(C)=C1CCC(O)=O)=NC1=CC(C(CCC(O)=O)=C1C)=NC1=C2 KFKRXESVMDBTNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010013593 3-acetyl-chlorophyll Proteins 0.000 description 1
- JOFDSYLCZIHGGO-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-cyclohexylphenyl)methyl-[2-[[5-(dimethylamino)naphthalen-1-yl]sulfonyl-methylamino]acetyl]amino]-2-hydroxybenzoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(N(C)C)=CC=CC2=C1S(=O)(=O)N(C)CC(=O)N(C=1C=C(O)C(C(O)=O)=CC=1)CC(C=C1)=CC=C1C1CCCCC1 JOFDSYLCZIHGGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 229910021591 Copper(I) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000186427 Cutibacterium acnes Species 0.000 description 1
- 208000034423 Delivery Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010073306 Exposure to radiation Diseases 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 229930194542 Keto Natural products 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000637 Melanocyte-Stimulating Hormone Substances 0.000 description 1
- 108010007013 Melanocyte-Stimulating Hormones Proteins 0.000 description 1
- 240000000233 Melia azedarach Species 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium on carbon Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150003085 Pdcl gene Proteins 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 241000191025 Rhodobacter Species 0.000 description 1
- 241000191043 Rhodobacter sphaeroides Species 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 208000002474 Tinea Diseases 0.000 description 1
- 208000000260 Warts Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000007171 acid catalysis Methods 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 159000000032 aromatic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000008378 aryl ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- BHPNXACHQYJJJS-UHFFFAOYSA-N bacteriochlorin Chemical compound N1C(C=C2N=C(C=C3NC(=C4)C=C3)CC2)=CC=C1C=C1CCC4=N1 BHPNXACHQYJJJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWOZSBGNAHVCKG-WFDCHTCOSA-N bacteriopheophytin a Chemical compound N1C(C=C2[C@H]([C@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)C(=N2)C2=C3NC(=C4)C(C)=C3C(=O)[C@@H]2C(=O)OC)C)=C(C)C(C(C)=O)=C1C=C1[C@H](C)[C@@H](CC)C4=N1 KWOZSBGNAHVCKG-WFDCHTCOSA-N 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 1
- LHQLJMJLROMYRN-UHFFFAOYSA-L cadmium acetate Chemical compound [Cd+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O LHQLJMJLROMYRN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 150000004035 chlorins Chemical class 0.000 description 1
- 229930002869 chlorophyll b Natural products 0.000 description 1
- NSMUHPMZFPKNMZ-VBYMZDBQSA-M chlorophyll b Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C=O)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 NSMUHPMZFPKNMZ-VBYMZDBQSA-M 0.000 description 1
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001142 circular dichroism spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- OXBLHERUFWYNTN-UHFFFAOYSA-M copper(I) chloride Chemical compound [Cu]Cl OXBLHERUFWYNTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 238000007323 disproportionation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005281 excited state Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BCDGQXUMWHRQCB-UHFFFAOYSA-N glycine methyl ketone Natural products CC(=O)CN BCDGQXUMWHRQCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000001095 inductively coupled plasma mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008863 intramolecular interaction Effects 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- LGAILEFNHXWAJP-BMEPFDOTSA-N macrocycle Chemical group N([C@H]1[C@@H](C)CC)C(=O)C(N=2)=CSC=2CNC(=O)C(=C(O2)C)N=C2[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)C2=CSC1=N2 LGAILEFNHXWAJP-BMEPFDOTSA-N 0.000 description 1
- UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L magnesium acetate Chemical compound [Mg+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- NDBQJIBNNUJNHA-DFWYDOINSA-N methyl (2s)-2-amino-3-hydroxypropanoate;hydrochloride Chemical compound Cl.COC(=O)[C@@H](N)CO NDBQJIBNNUJNHA-DFWYDOINSA-N 0.000 description 1
- NQIFXJSLCUJHBB-LBPRGKRZSA-N methyl (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=C(O)C=C1 NQIFXJSLCUJHBB-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- LXAWQKKSNNYYEK-NRFANRHFSA-N methyl (2s)-3-hydroxy-2-(tritylamino)propanoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C=1C=CC=CC=1)(N[C@@H](CO)C(=O)OC)C1=CC=CC=C1 LXAWQKKSNNYYEK-NRFANRHFSA-N 0.000 description 1
- WMKCPTRURVRKRM-RYUDHWBXSA-N methyl (2s)-3-hydroxy-2-[[(2s)-3-hydroxy-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoyl]amino]propanoate Chemical compound COC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 WMKCPTRURVRKRM-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- MWZPENIJLUWBSY-VIFPVBQESA-N methyl L-tyrosinate Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 MWZPENIJLUWBSY-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 238000006464 oxidative addition reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002926 oxygen Chemical class 0.000 description 1
- 238000006213 oxygenation reaction Methods 0.000 description 1
- 208000003154 papilloma Diseases 0.000 description 1
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- CQIKWXUXPNUNDV-AXRVZGOCSA-N pheophytin a Chemical group N1C(C=C2[C@H]([C@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)C(=N2)C2=C3NC(=C4)C(C)=C3C(=O)[C@@H]2C(=O)OC)C)=C(C)C(C=C)=C1C=C1C(C)=C(CC)C4=N1 CQIKWXUXPNUNDV-AXRVZGOCSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000002186 photoactivation Effects 0.000 description 1
- 230000002165 photosensitisation Effects 0.000 description 1
- 208000017983 photosensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 231100000434 photosensitization Toxicity 0.000 description 1
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001189 phytyl group Chemical group [H]C([*])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@](C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@](C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 150000004033 porphyrin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940055019 propionibacterium acne Drugs 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JUJWROOIHBZHMG-RALIUCGRSA-N pyridine-d5 Chemical compound [2H]C1=NC([2H])=C([2H])C([2H])=C1[2H] JUJWROOIHBZHMG-RALIUCGRSA-N 0.000 description 1
- 238000006862 quantum yield reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000002468 redox effect Effects 0.000 description 1
- 238000006479 redox reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 150000003354 serine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003667 tyrosine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229910052724 xenon Inorganic materials 0.000 description 1
- FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N xenon atom Chemical compound [Xe] FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/22—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
- A61K41/0071—PDT with porphyrins having exactly 20 ring atoms, i.e. based on the non-expanded tetrapyrrolic ring system, e.g. bacteriochlorin, chlorin-e6, or phthalocyanines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/10—Anti-acne agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/12—Keratolytics, e.g. wart or anti-corn preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Virology (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Новые способы получения металлированных производных [M]-бактериохлорофилла общей формулы I, где R1 представляет собой С1-С25 углеводородный остаток; R2 представляет собой Н, ОН или COOR5, где R5 представляет собой С1-С12 алкил или С3-С12 циклоалкил; R3 представляет собой Н, ОН или С1-С12 алкил или алкокоси; каждый R4 является независимо выбранным из группы, включающей винил, этил, ацетил, 1-гидроксиэтил и их простые и сложные эфиры; М представляет собой металл с ионным радиусом, меньшим, чем имеющийся у Cd (r≅95 пм), причем указанный металл выбран из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбранного из группы, включающей Pd, Co, Ni, Cu, Zn и Mn, новые металлированные производные [M]-бактериохлорофилла и фармацевтическая композиция, их содержащая. Металлированные производные бактериохлорофилла могут применяться в методах фотодинамической терапии и фотодинамического уничтожения вирусов и микроорганизмов. 5 с. и 9 з.п. ф-лы, 1 табл., 2 ил.
Description
Изобретение относится к новому методу получения металлированных производных бактериохлорофилла для применения в методах фотодинамической терапии (PDT) и диагностики in vivo и фотодинамического уничтожения вирусов и микроорганизмов in vitro, а также к некоторым новым металлозамещенным производным бактериохлорофилла.
Определения и сокращения
BChl = бактериохлорофилл-а (Мg-содержащий 7,8,17,18-тетрагидропорфирин формулы I, в которой и далее М представляет собой Мg, R1 является фитилом или геранилгеранилом, R2 представляет собой СООСН3, R3 представляет собой Н, R4 в положении 3 является ацетилом, а в положении 8 - этилом).
BChl = бактериохлорофилл-а (Мg-содержащий 7,8,17,18-тетрагидропорфирин формулы I, в которой и далее М представляет собой Мg, R1 является фитилом или геранилгеранилом, R2 представляет собой СООСН3, R3 представляет собой Н, R4 в положении 3 является ацетилом, а в положении 8 - этилом).
BChl производное = производное BChl с модификациями в макроцикле, центрального атома металла и/или на периферии, включая производные формул I, II, III и I', II', III', приводимых ниже.
BPhe = бактериофеофитин-а (BChl, в котором центральный Мg замещен двумя атомами Н).
Chl = хлорофилл (Мg-содержащее производное 17,18-дигидропорфирина, состоящее из макроцикла, включающего 4 пиррольных кольца, и одного изоциклического кольца, которые конъюгированы друг с другом и связаны с атомом Мg). Хлорофилл а имеет формулу I, приводимую ниже, где R1 представляет собой фитил, R2 представляет собой СООСН3, R3 представляет собой Н, R4 в положении 3 представляет винил, а в положении 8 - этил.
[M]-BChl = производное BChl, в котором центральный атом Мg замещен металлом М, как определено ниже.
PDT = фотодинамическая терапия.
Phe = феофитин а (Chl, в котором центральный Мg замещен двумя атомами Н).
Обоснование изобретения
Мg-содержащие (бактерио)хлорофиллы ((В)Chl) и их свободные основания, (бактерио)феофитины ((В)Phe) незаменимы для фотосинтеза. Они выполняют роль антенны или редокс-пигментов, способных под действием света к разделению заряда в реакционном центре. Пигменты также способны потенциально служить как фотосенсибилизаторы, например, применяться в фотодинамической терапии опухолей.
Мg-содержащие (бактерио)хлорофиллы ((В)Chl) и их свободные основания, (бактерио)феофитины ((В)Phe) незаменимы для фотосинтеза. Они выполняют роль антенны или редокс-пигментов, способных под действием света к разделению заряда в реакционном центре. Пигменты также способны потенциально служить как фотосенсибилизаторы, например, применяться в фотодинамической терапии опухолей.
Показано, что порфирины аккумулируются в опухолевой ткани и при облучении опухолевой ткани поглощают свет in situ, служа средством выявления опухолей по локализации флуоресценции. Неочищенное производное гаматопорфирина, известное как гематопорфириновое производное или HPD, предложено для применения с целью как выявления, так и фотодинамической терапии опухолей. Форма HPD, считающаяся более эффективной, включает часть HPD, имеющую агрегатный вес выше 10 кДа, и является предметом патента США 4649151. HPD или его активные компоненты описаны в патенте США 4753958 для местного лечения кожных болезней и в работе Matthews, J.L. et al., 1988, Transfusion, pp. 81-83, для стерилизации биологических образцов, содержащих инфекционные организмы, такие как бактерии и вирусы.
С целью оптимизации характеристик порфириновых лекарств для терапии и диагностики предложено несколько порфириновых производных, в которых, например, центральный атом металла образует комплекс с четырьмя пиррольными кольцами и/или модифицированы периферические заместители пиррольных колец, и/или макроцикл дигидрогенирован до Chl производных (хлоринов) или тетрагидрогенирован до BChl производных (бактериохлоринов).
Комплексы циклических тетрапирролов с металлами, отличными от Мg, исследовали в рядах порфиринов и 17,18-дигидропорфиринов для выяснения их спектроскопических и окислительно-восстановительных свойств (Hynninen P.H., in: Scheer, 1991, pp. 145-209). Бактериохлорофиллы имеют потенциальные преимущества по сравнению с хлорофиллами, поскольку они демонстрируют интенсивные полосы в области, близкой к инфракрасной, то есть при значительно больших длинах волн по сравнению с производными хлорофилла. Однако в настоящее время имеется мало информации относительно бактериохлорофиллов с центрально расположенными атомами металла, отличными от Мg.
РСТ Международная заявка, Публикация WO 90/12573 Dougherty описывает производные бактериохлорофилла-а или -b или соответствующие бактериохлорины, лишенные центрального атома металла, или в которых центральный атом металла может быть непарамагнитным металлом, выбранным из Mg2+, Sn2+ и Zn2+, и С-173-карбоксильная группа этерифицирована насыщенным или ненасыщенным углеводородным остатком из 8-25С, для получения композиции, применяемой для разрушения или повреждения нежелательных биологических объектов-мишеней, который включает фотосенсибилизацию названного объекта эффективным количеством указанного производного с последующим облучением объекта-мишени с помощью излучения в области длин волн, соответствующей полосе поглощения названным производным в течение периода времени, достаточного для повреждения или разрушения объекта. Кроме того, названные соединения применимы для фотодинамической терапии и диагностики. Следует отметить, что хотя Sn2+ и Zn2+ комплексы бактериохлорофилла-а или -b были заявлены в описании заявки WO 90/12573, эти металлопроизводные не описываются в примерах и не описан ни один метод их получения.
Losev et al. , 1990, Opt. Spektrosk., vol. 69, pp. 97-101 описывает комплексы [Pd]-BChl и [Cu]-BChl, полученные, как отмечено, прямым введением металла BPhe с помощью Pd бензонитрила в бензоле в потоке азота или с помощью концентрированного раствора CuCl2 в метаноле соответственно. Однако в этой публикации отсутствуют детали метода получения и характеристики металлокомплексов. Более того мы не смогли повторить получение [Pd]-BChl комплекса по Losev'y.
При нормальных условиях доставки, то есть в присутствии кислорода, при комнатной температуре и в условиях нормальной освещенности соединения группы BChl лабильны и имеют несколько меньшие квантовые выходы образования триплетного состояния по сравнению, например, с гематопорфириновым производным (HPD). Тем не менее их возможная роль в запуске биологических окислительно-восстановительных реакций, подходящие спектральные характеристики и легкое разрушение in vivo дают бактериохлорофиллам потенциальное преимущество перед другими соединениями, например, порфиринами и хлорофиллами, применительно к PDT терапии и диагностике и к уничтожению клеток, вирусов и бактерий в образцах и в живой ткани. Можно ожидать, что химическая модификация бактериохлорофиллов приведет к дальнейшему улучшению их свойств, однако подобные попытки были крайне ограниченны из-за отсутствия подходящих методов получения таких модифицированных бактериохлорофиллов (Hynninen, 1991).
Европейская патентная заявка, опубликованная за 0584552, того же заявителя, что и настоящая заявка, описывает новые конъюгаты Chl и BChl с аминокислотами, пептидами и белками для применения в PDT терапии и диагностике. Аминокислотный, пептидный или белковый остаток присоединяется непосредственно или через спейсер к С-173-карбоксильной группе молекулы Chl или BChl. Эти конъюгаты получаются методами, достаточно мягкими для сохранения кислото-лабильного центрального атома Мg. Там же описаны комплексы метилового эфира хлорофилла a-l73-cepина с Zn и Сu, но там не описаны ни металлопроизводные бактериохлорофилла, ни метод их получения.
Патентная заявка Германии DE 4121876 описывает производные бактериохлорофилла, в которых модифицированные эфиры в положениях С-132 и С-173 получаются в мягких условиях быстрой щелочной переэтерификации, допускающей последующие изменения в изоциклическом кольце при сохранении центрального Mg, благодаря которому поглощение пигментом смещается в область ниже 800 нм. В заявке также упоминаются металлокомплексы указанных производных BChl с Zn или Ni, однако там эти комплексы не представлены в примерах, а методы их получения не описаны.
Было бы желательно получить новые металлокомплексы BChl для применения в PDT с целью сохранения и даже улучшения благоприятных оптических и физиологических свойств BChls, оптимизируя при этом их фотосенсибилизирующий потенциал, а также улучшая их химическую стабильность и оптимизируя их физиологические периоды жизни. Замена металла (трансметаллирование) приводит к заметным изменениям в химической реакционной способности и стабильности BChls, являющихся существенными для новых модификаций макроцикла и периферических заместителей, и в особенности для оптимизации их транспорта, направленности действия и биологического периода жизни, а также сведения к минимуму их побочного токсического действия. Замена металла (трансметаллирование) приводит также к заметным изменениям в свойствах возбужденного состояния, включая выход и период жизни триплета, доступность более высоких уровней состояния возбуждения и возникновение цитотоксических производных кислорода.
Известно несколько методов замены центрального атома металла в порфиринах (см. Buchler, J.W., 1975, "Static coordination chemistry of metalloporphyrins", in Porphyrins and Metalloporphyrins, Smith, K.M., ed., pp. 157-232, Elsevier, New York). Порфирины легкодоступны и химически стабильны, хотя их спектральные и физиологические свойства неблагоприятны.
Известно несколько методов прямого и непрямого введения металла в хлорофиллы. Strell, M., Urumow, Т., 1977, Liebigs Ann. Chem., pp. 970-974 описывают комплексы [Cr]-Chl и [Mn]-Chl, получаемые заменой металла в комплексе [Cd]-Chl (получаемом в реакции лишенного металла производного Chl с ацетатом кадмия в метаноле или пиридине) в реакции с ацетатом Сr++ или Мn++ в метаноле в атмосфере N2. Сообщается, что этот метод замены металла пригоден также для комплексов производных хлорофилла с Сu, Zn, Со и Рb, но не с Fe3+, Ni и Мg. Однако, поскольку комплексы Сu, Zn, Со и Рb могут быть получены прямым введением металла в Phe, этот метод полезен лишь для Сr и Мn. Авторы описывают также получение комплекса [Mg]-Chl прямым введением металла в Phe в ацетоне с использованием ацетата Мg в диметилсульфоксиде.
В настоящее время имеется мало сведений о бактериохлорофиллах с центральными атомами металла, отличными от Мg. Введение металла в бактериохлорофиллы, как известно, является более затрудненным по сравнению с хлорофиллами из-за их сниженной реактивности к введению металла и повышенной реакционноспособности к побочным реакциям. Описан специфический метод введения Мg в бактериофеофитин-а (Wasielewsky, M.R., 1977, "A mild method for the introduction of Magnesium into bacteriopheophytin-a", Tetrahedron Letters, pp. 1373-76). Заявители настоящего изобретения пытались воспроизвести процедуры, описанные Strell и Urumow, для прямого введения металла и его замены в производных хлорофилла, применительно к получению металлокомплексов производных бактериохлорофилла, но все попытки были неудачными. Прямое введение металла в производные бактериофеофитина не удавалось с любым из использованных металлов, за исключением Сu и Zn, и, напротив, приводило к обнаружению в смеси непрореагировавшего бактериофеофитина и замещенных металлом продуктов окисления 3-ацетил-хлорофилла а типа.
Краткое содержание изобретения
В соответствии с настоящим изобретением теперь обнаружено, что металлокомплексы производных бактериохлорофилла могут быть получены модификацией процесса трансметаллирования (замены металла) для введения металла в производные хлорофилла, опубликованного Strell и Urumow, с помощью подходящих солей металла и растворителей.
В соответствии с настоящим изобретением теперь обнаружено, что металлокомплексы производных бактериохлорофилла могут быть получены модификацией процесса трансметаллирования (замены металла) для введения металла в производные хлорофилла, опубликованного Strell и Urumow, с помощью подходящих солей металла и растворителей.
Настоящее изобретение, таким образом, относится к новому способу получения синтетических замещенных металлом производных бактериохлорофилла формулы:
[M]-BChl,
где BChl представляет собой остаток (деметаллированного) лишенного металла природного или синтетического производного бактериохлорофилла, имеющего в положении 173 группу -COOR1, где R1 представляет собой C1-C25 гидрокарбильный остаток и
М представляет собой металл с ионным радиусом менее чем у Сd (r≅95 пм), упомянутый металл выбирается из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Pd, Co, Ni, Сu, Zn и Мn, трехвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Fe, Mn и Сr, и четырехвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Sn и Pt, этот процесс включает:
(i) реакцию подходящего производного бактериофеофитина, имеющего в положении 173 группу -COOR1, как определено выше, растворенного в диметилформамиде, с безводным ацетатом Сd в атмосфере Аr и отделения [Cd]-BChl комплекса из реакционной смеси хроматографией в условиях восстановления;
(ii) растворение полученного таким образом комплекса [Cd]-BChl, растворенного в безводном ацетоне, с соответствующей безводной солью металла М, выбранной из хлорида, ацетата и адетилацетоната металла М, в атмосфере Аr; и
(iii) выделение целевого замещенного металлом производного [М]-ВСhl из реакционной смеси.
[M]-BChl,
где BChl представляет собой остаток (деметаллированного) лишенного металла природного или синтетического производного бактериохлорофилла, имеющего в положении 173 группу -COOR1, где R1 представляет собой C1-C25 гидрокарбильный остаток и
М представляет собой металл с ионным радиусом менее чем у Сd (r≅95 пм), упомянутый металл выбирается из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Pd, Co, Ni, Сu, Zn и Мn, трехвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Fe, Mn и Сr, и четырехвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Sn и Pt, этот процесс включает:
(i) реакцию подходящего производного бактериофеофитина, имеющего в положении 173 группу -COOR1, как определено выше, растворенного в диметилформамиде, с безводным ацетатом Сd в атмосфере Аr и отделения [Cd]-BChl комплекса из реакционной смеси хроматографией в условиях восстановления;
(ii) растворение полученного таким образом комплекса [Cd]-BChl, растворенного в безводном ацетоне, с соответствующей безводной солью металла М, выбранной из хлорида, ацетата и адетилацетоната металла М, в атмосфере Аr; и
(iii) выделение целевого замещенного металлом производного [М]-ВСhl из реакционной смеси.
В одном из воплощений способ изобретения применяется для получения замещенных металлом производных BChl формулы I, II или III;
где R1 представляет собой C1-C25 углеводородный остаток;
R2 представляет собой Н, ОН или COOR5, где R5 представляет собой C1-C12 алкил или С3-С12 циклоалкил;
R3 представляет собой Н, ОН или C1-C12 алкил или алкокси;
каждый R4 является независимо выбранным из группы, состоящей из винила, этила, ацетила, 1-гидроксиэтила и их простых и сложных эфиров; и
М представляет собой металл с ионным радиусом, меньшим чем имеющийся у Сd (r≅95 пм), причем указанный металл М выбирается из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Pd, Co, Ni, Сu, Zn и Мn, трехвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Fe, Mn и Сr, и четырехвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Sn и Pt.
где R1 представляет собой C1-C25 углеводородный остаток;
R2 представляет собой Н, ОН или COOR5, где R5 представляет собой C1-C12 алкил или С3-С12 циклоалкил;
R3 представляет собой Н, ОН или C1-C12 алкил или алкокси;
каждый R4 является независимо выбранным из группы, состоящей из винила, этила, ацетила, 1-гидроксиэтила и их простых и сложных эфиров; и
М представляет собой металл с ионным радиусом, меньшим чем имеющийся у Сd (r≅95 пм), причем указанный металл М выбирается из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Pd, Co, Ni, Сu, Zn и Мn, трехвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Fe, Mn и Сr, и четырехвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Sn и Pt.
Из отмеченных выше производных [М]-BChl формул I, II и III могут быть получены дополнительные производные путем переэтерификации в положении 173 и, таким образом, в другом варианте изобретение относится к способу получения соединений формул I', II' и III'
где R1' выбирается из группы, состоящей из:
(i) C1-C25 углеводородного остатка, по желанию замещенного галогеном, оксо (= 0), ОН, СНО, СООН или NН2, или этот остаток прерывается одним или более гетероатомами, выбранными из О, S и NH, или фенильным кольцом;
(ii) остатка аминокислоты или пептида, содержащего гидроксильную группу, или их производного, выбранного из группы, состоящей из эфиров и N-защищенных производных, в которых названная гидроксилированная аминокислота или ее производное присоединены к СОО-остатку через гидроксильную группу;
(iii) остатка пептида, как указано в (ii), присоединенного к СОО-остатку через спейсер, как указано в (i), где названный С1-С25, насыщенный или ненасыщенный углеводородный остаток необязательно замещен галогеном, оксо, ОН, СНО, СООН или NH2, или такой остаток прерывается одним или более гетероатомами, выбранными из О, S и NH, или фенильным кольцом, и этот остаток также замещен концевой функциональной группой, выбранной из ОН, СООН или NH2, и
(iv) остатка, специфичного для клетки лиганда, выбранного из пептида и белка, прямо или через спейсер присоединенного к СОО-остатку, как указано в (i), где названный C1-C25, насыщенный или ненасыщенный углеводородный остаток необязательно замещается галогеном, оксо, ОН, СНО, СООН или NН2, или прерывается одним или более гетероатомами, выбранными из О, S и NH, или фенильным кольцом, и этот остаток также замещен концевой функциональной группой, выбранной из ОН, СООН или NН2;
R2 представляет собой Н, ОН или COOR5, где R5 представляет собой C1-C12 алкил или С3-C12 циклоалкил;
R3 представляет собой Н, ОН или C1-C12 алкил или алкокси;
каждый R4 является независимо выбранным из группы, состоящей из винила, этила, ацетила, 1-гидроксиэтила и их простых и сложных эфиров; и
М представляет собой металл с ионным радиусом, меньшим чем имеющийся у Cd (r≅95 пм), указанный металл выбирается из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Pd, Co, Ni, Cu, Zn и Мn, трехвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Fe, Mn и Сr, и четырехвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Sn и Pt, причем этот способ включает:
(i) реакцию подходящего бактериофеофитина, полученного из производного бактериохлорофилла формулы I, II или III, имеющего в положении 173 группу -COOR1, где R1 представляет C1-C25 углеводородный остаток, растворенного в диметилформамиде, с безводным ацетатом Cd в атмосфере Аr и выделения соответствующего [Cd]-BChl комплекса из реакционной смеси хроматографией при восстанавливающих условиях;
(ii) реакцию полученного таким образом комплекса [Cd]-BChl, растворенного в безводном ацетоне, с соответствующей безводной солью металла М, выбранной из хлорида, ацетата и ацетилацетоната металла М, в атмосфере Аr; и
(iii) реакцию полученного металлированного производного [M]-BChl, выделенного из реакционной смеси, с соединением формулы R1'-ОН в условиях переэтерификации для получения соединения формулы I', II', или III', где R1' как описано выше.
где R1' выбирается из группы, состоящей из:
(i) C1-C25 углеводородного остатка, по желанию замещенного галогеном, оксо (= 0), ОН, СНО, СООН или NН2, или этот остаток прерывается одним или более гетероатомами, выбранными из О, S и NH, или фенильным кольцом;
(ii) остатка аминокислоты или пептида, содержащего гидроксильную группу, или их производного, выбранного из группы, состоящей из эфиров и N-защищенных производных, в которых названная гидроксилированная аминокислота или ее производное присоединены к СОО-остатку через гидроксильную группу;
(iii) остатка пептида, как указано в (ii), присоединенного к СОО-остатку через спейсер, как указано в (i), где названный С1-С25, насыщенный или ненасыщенный углеводородный остаток необязательно замещен галогеном, оксо, ОН, СНО, СООН или NH2, или такой остаток прерывается одним или более гетероатомами, выбранными из О, S и NH, или фенильным кольцом, и этот остаток также замещен концевой функциональной группой, выбранной из ОН, СООН или NH2, и
(iv) остатка, специфичного для клетки лиганда, выбранного из пептида и белка, прямо или через спейсер присоединенного к СОО-остатку, как указано в (i), где названный C1-C25, насыщенный или ненасыщенный углеводородный остаток необязательно замещается галогеном, оксо, ОН, СНО, СООН или NН2, или прерывается одним или более гетероатомами, выбранными из О, S и NH, или фенильным кольцом, и этот остаток также замещен концевой функциональной группой, выбранной из ОН, СООН или NН2;
R2 представляет собой Н, ОН или COOR5, где R5 представляет собой C1-C12 алкил или С3-C12 циклоалкил;
R3 представляет собой Н, ОН или C1-C12 алкил или алкокси;
каждый R4 является независимо выбранным из группы, состоящей из винила, этила, ацетила, 1-гидроксиэтила и их простых и сложных эфиров; и
М представляет собой металл с ионным радиусом, меньшим чем имеющийся у Cd (r≅95 пм), указанный металл выбирается из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Pd, Co, Ni, Cu, Zn и Мn, трехвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Fe, Mn и Сr, и четырехвалентного металла, выбираемого из группы, состоящей из Sn и Pt, причем этот способ включает:
(i) реакцию подходящего бактериофеофитина, полученного из производного бактериохлорофилла формулы I, II или III, имеющего в положении 173 группу -COOR1, где R1 представляет C1-C25 углеводородный остаток, растворенного в диметилформамиде, с безводным ацетатом Cd в атмосфере Аr и выделения соответствующего [Cd]-BChl комплекса из реакционной смеси хроматографией при восстанавливающих условиях;
(ii) реакцию полученного таким образом комплекса [Cd]-BChl, растворенного в безводном ацетоне, с соответствующей безводной солью металла М, выбранной из хлорида, ацетата и ацетилацетоната металла М, в атмосфере Аr; и
(iii) реакцию полученного металлированного производного [M]-BChl, выделенного из реакционной смеси, с соединением формулы R1'-ОН в условиях переэтерификации для получения соединения формулы I', II', или III', где R1' как описано выше.
В предпочтительном воплощении изобретения производное [M]-BChl представляет собой такое производное [M]-BChl, в котором R1 представляет собой фитил или геранилгеранил, R2 представляет собой СООСН3, R3 представляет собой Н, R4 в положении 3 является ацетилом, а в положении 8 представляет собой этил, и металл М является Pd, Cu, Ni, Co, Zn и Мn. В другом предпочтительном воплощении изобретения соль металла М, используемая на стадии ii), представляет собой хлорид металла.
В еще одном варианте воплощения изобретения стадии i) и ii) могут объединяться в одну стадию, то есть производное бактериофеофитина реагирует с избытком соответствующей безводной соли металла М, например с хлоридом металла, в присутствии каталитических количеств безводной соли Cd, например ацетата Cd, в диметилформамиде или ацетоне.
В другом варианте настоящее изобретение относится к новым замещенным металлом производным бактериохлорофилла, формул I', II' и III', как указано выше, но исключаются компоненты формулы I, в которых R2 представляет собой СООСН3, R3 представляет собой Н, R4 в положении 3 является ацетилом, а в положении 8 представляет собой этил, R1 представляет собой фитил или этил, и металл М является Pd, или R1 представляет собой фитил, а М представляет собой Сu.
Новые производные металлобактериохлорофилла изобретения формул I', II' и III', как указано выше, применяются как фотосенсибилизаторы в качестве терапевтических и диагностических агентов и для уничтожения клеток, вирусов и бактерий в образцах и живых тканях, как хорошо известно в этой области для HPD и других фотосенсибилизаторов.
На фиг. 1 показана фототоксичность метилового эфира [Рd]-ВСhl-173-серила ([Pd] -BChl-Ser) и метилового эфира BChl-173-серила (BChl-Ser) в отношении бактериальных суспензий S. aureus.
На фиг. 2 показана фототоксичность [Pd]-BChl-Ser в отношении M2R клеток меланомы в культуре по включению [3H]тимидина.
Подробное описание изобретения
В отличие от порфиринов и хлорофиллов, прямое введение металла в бактериохлорофиллы затруднено. Способ настоящего изобретения позволяет получить замещенные металлом (металлированные) производные бактериохлорофилла путем замены металла соответствующих производных [Cd]-BChl, имеющих улучшенные свойства в отношении их применения в качестве фотосенсибилизаторов.
В отличие от порфиринов и хлорофиллов, прямое введение металла в бактериохлорофиллы затруднено. Способ настоящего изобретения позволяет получить замещенные металлом (металлированные) производные бактериохлорофилла путем замены металла соответствующих производных [Cd]-BChl, имеющих улучшенные свойства в отношении их применения в качестве фотосенсибилизаторов.
В соответствии с настоящим изобретением в комплексах [Cd]-BChl, которые легко получить ацетат/диметилформамидным методом, металл может быть заменен другим металлом в мягких условиях с прекрасным выходом других металлокомплексов. Легкость замены металла при применении [Cd]-BChl в качестве предшественника удивительна и, вероятно, частично обусловлена большим ионным радиусом (rм) Cd2- (95 пм) по сравнению с Мg2+ (rм=72 пм). Вторым фактором является растворитель (ацетон) в сочетании с противоионами металла (хлоридами), применяемый в реакции. При трансметаллировании образуются CdCl2 и [М]-BChl в равновесии с исходными веществами, а очень низкая растворимость CdCl2 в ацетоне сдвигает равновесие в сторону образования продуктов.
В одном из воплощений настоящего изобретения R1 представляет собой прямой или разветвленный, насыщенный или ненасыщенный, включая ароматический, углеводородный радикал, предпочтительно состоящий из 1-25 атомов углерода, такой как алкил, алкенил, фенил, предпочтительно низший алкил из C1-C4 атомов, наиболее предпочтительно этил, или радикал, образованный из природных BChl соединений, например, геранилгеранил (2,6-диметил-2,6-октадиенил) или фитил (2,6,10,14-тетраметилгексадек-14-ен-16-ил); и R1' имеет значения или указанные для R1, или представляет собой такую углеводородную цепь, замещенную атомом галогена, выбранного из F, Br, C1 и I, или ОН, оксо, СНО, СООН или NH2, или такую по желанию замещенную углеводородную цепь, прерванную О, S или NH, предпочтительно О, например, R1' представляет собой остаток олигооксиэтиленгликоля от 4 до 10 углеродных атомов, предпочтительно пентаоксиэтиленгликоль. Когда R1' служит в качестве спейсера для пептида или белка, как здесь указано, он обычно содержит концевую функциональную группу, выбранную из ОН, СООН и NH2, посредством которой концевая функциональная группа пептида или белка присоединяется эфирной или амидной связью.
В другом воплощении изобретения R1' представляет собой остаток аминокислоты или пептида, содержащий гидроксильную группу, такой как серин, треонин и тирозин или содержащие их пептиды, или производное указанной аминокислоты или пептида, выбранное из эфиров, например алкильных эфиров, и N-защищенные производные, в которых N-защитная группа представляет собой, например, третичный бутокси, карбобензокси или тритил, и указанная гидроксилированная аминокислота или пептид, или их производное присоединена к СОО-группе через гидроксильную группу. Примерами таких аминокислотных производных служат метиловый эфир серина, метиловый эфир N-тритилсерина, метиловый эфир тирозина и метиловый эфир N-третбутокси-тирозина, и примером такого пептида служит метиловый эфир N-карбобензокси-серилсерина; все они получены, как описано в ЕР 0584552. В наиболее предпочтительном воплощении изобретения производное [М] -BChl представляет собой [Pd]-BChl, этерифицированный метиловым эфиром L-серина.
В другом воплощении изобретения R1' представляет остаток специфичного для клетки лиганда, выбираемого из пептидов и белков, примерами которых служат, но не исчерпывают их, гормональные пептиды, например меланоцитстимулирующие гормоны (меланотропины), и антитела, например иммуноглобулины, и антитела, специфичные для опухолей.
Производные [М] -BChl изобретения формулы I', где М представляет Zn или Сu, могут быть получены также прямым введением металла в лишенное металла (деметаллированное) производное BChl, как описано ниже в примерах с 1 по 4.
Некоторые из металлокомплексов бактериохлорофиллов очень стабильны и, таким образом, могут быть использованы для дальнейших модификаций на периферии тетрапиррольной кольцевой системы, которые включают жесткие условия, такие как применение уксусной кислоты или сильной минеральной кислоты типа соляной или серной кислоты. Так, сложные эфиры, например, необязательно замещенные алкильные или арильные эфиры, могут быть получены реакцией гидроксильных групп, например, в положении 31 или 132, с соответствующими алифатическими или ароматическими кислотами, хлоридами кислот или аминокислотами, а простые эфиры в тех же положениях получаются реакцией с соответствующими алифатическими или ароматическими спиртами. Соединения, имеющие гидроксильную группу в положении 31, например производные 3-гидроксиэтил-BChl, или в положении 132, например производные 132-OH-BChl, могут быть получены стандартными методами (см. Struck, A. et al., 1992, Bacteriochlorophylls modified at position C-3. Long-range intramolecular interaction with position C-13.2, Biochim. Biophys. Acta, 1101; 321-328 и Hynninen, 1991). Кроме того, природные фитиловые и геранилгераниловые эфиры могут быть переэтерифицированы в положении 173 с помощью кислотного катализа в другие эфиры, например в этиловый эфир, путем реакции с соответствующим спиртом. Другие заместители могут быть введены в кольцо макроцикла путем реакции Витига природных СО групп, таких как 3-ацетил в BChl а, или введены химически такие заместители, как кетоспирты, этерифицированные по С-173 а также путем окислительного присоединения ОН групп с формированием эфирных связей в положении С-132, или путем кислотно-катализируемой этерификации ОН групп, например, в положении С-31, С-131, С-132, с карбоновыми кислотами.
В альтернативном варианте модификации на периферии тетрапиррольной кольцевой системы проводятся в природном производном Мg-содержащем BChl перед удалением металла (деметаллированием).
Производные BChl формул II и III в данном случае могут быть получены из соответствующих природных производных BChl формулы 1, как описано ранее (Struck, A., 1990, "Chemisch modifizierte Bakteriochlorophylle und phaeophytinc in den Bindungsstellen ВA,B und Ha,b von photosynthetischen Reaktionszentren aus Rhodobacter sphaeroides R26: Pigmentsynthese, Pigmentaustausch und Spektroskopie", Ph. D. Thesis, University of Munich, Germany).
Соединения изобретения, в которых R1' представляет собой остаток аминокислоты, пептид или белок, например антитело, получают после процедуры замены металла настоящего изобретения путем ферментативной переэтерификации с помощью фермента хлорофиллазы или путем каталитической конденсации соответствующего бактериохлорофиллида (свободная кислота BCh-173-COOH) с гидроксилированной аминокислотой, пептидом или белком с использованием дициклогексилкарбодиимида (DCC) и N-гидроксисукцинимида (NHS) или 4-диметиламинопиридина (DMAP), как описано в ЕР 0584552, или путем кислотно-катализируемых реакций неустойчивых Мg комплексов, таких как природный BChl.
Новые производные металлобактериохлорофилла изобретения предназначены для применения в качестве фотосенсибилизаторов как терапевтические и диагностические средства и для уничтожения клеток, вирусов и бактерий в образцах и живых тканях, как хорошо известно для HPD и других фотосенсибилизаторов. Эти соединения применимы, например, для сенсибилизации неопластических клеток или другой аномальной ткани к разрушению под действием облучения, либо in vivo или ex vivo при использовании света соответствующей длины волны. Считается, что энергия фотоактивации передается эндогенному кислороду, превращая его в синглетный (атомарный) кислород, который, как полагают, ответственен за цитотоксический эффект. Кроме того, фотоактивированные формы бактериохлорофиллов флуоресцируют, и эта флуоресценция может помочь в установлении локализации опухолей или других мест, в которые вводятся металлозамещенные бактериохлорофиллы.
Примеры известных в науке случаев, при которых может быть показано лечение новыми производными металлобактериохлорофилла по изобретению, включают разрушение опухолевой ткани в твердых опухолях, растворение бляшек в кровеносных сосудах (смотри, например, патент США 4,512,762); лечение местных нарушений, таких как акне, эпидермофития стопы, бородавки, папиллома и псориаз, обработку биологических продуктов (таких, как кровь для переливания) в отношении инфекционных агентов.
Производные металлобактериохлорофилла настоящего изобретения формируются в готовые фармацевтические композиции для введения больному или наносятся на объект in vitro с применением способов, хорошо известных в этой области, например суммированных в Remington's Farmaceutical Sciences, Marck Publishing Co; Easton, Penna; последнее издание. Композиции могут вводиться системно, в частности, путем инъекции или могут применяться местно.
Для диагностики производные металлобактериохлорофилла могут применяться как таковые или могут быть помечены радиоизотопом или другими средствами обнаружения, известными в науке.
Количество вводимого производного металлобактериохлорофилла должно определяться в соответствии с опытом, накопленным в отношении других порфиринов, применяемых в PDT, например, оно должно варьировать в зависимости от выбора производного, применяемого в качестве активного ингредиента, нарушения, подлежащего лечению, способа введения, возраста и состояния больного и заключения врача.
Длина волны облучающего света преимущественно подбирается в соответствии с максимумом поглощения металлобактериохлорофилльного фотосенсибилизатора. Подходящая длина волны для любого из соединений может быть легко определена по его спектру поглощения.
В дополнение к применению in vivo производные металлобактериохлорофилла изобретения могут быть применены для обработки материалов in vitro для уничтожения вредных вирусов или инфекционных агентов, таких как вредные бактерии. Например, кровь и плазма крови, подлежащие последующему переливанию, могут быть обработаны соединением изобретения и облучены для достижения стерилизации.
Таким образом, изобретение также относится к фармацевтическим композициям, включающим производные металлобактериохлорофилла указанных здесь формул I', II' и III' для фотодинамической терапии и диагностики злокачественных опухолей и для фотодинамического уничтожения клеток, бактерий и вирусов.
Для этих целей композиции должны быть получены и введены традиционными методами, например, как описано в патентах США 4649151, 4753958, 5256840 и 5238940, Заявке на Европейский Патент 0584552 и Заявке РСТ WO 90/12573, каждая из которых включена здесь в качестве ссылки.
Изобретение теперь будет иллюстрировано следующими примерами, не ограничивающими изобретение.
ПРИМЕРЫ
В примерах и таблице будут идентифицированы исходные соединения и полученные металлокомплексы следующими номерами:
la-BPhe 1b-BPhe-132-OH
2a-[Pd]-BChl 2b-[Pd]-BChl-132-OH
3a-[Co]-BChl 3b-[Co]-BChl-132-OH
4a-[Ni]-BChl 4b-[Ni]-BChl-132-OH
5a-[Cu]-BChl 5b-[Cu]-BChl-132-OH
6a-[Zn]-BChl 6b-[Zn]-BChl-132-OH
7a-BChl 7b-BChl-132-OH
8a-[Cd]-BChl 8b-[Cd]-BChl-132-OH
9a-[Mn]-BChl 9b-[Mn]-BChl-132-OH
Материалы и методы
(i) Выделение BChl. BChl [соединение 7а] выделяли из фотосинтезирующей бактерии, подобной Rhodobacter (Rb) sphaeroides или Rhodospirilium rubrum в соответствии с Scherz, A., Parson, W.W., 1984, Biochim. Biophys. Acta, vol. 766, pp. 653-55; Struck et al., 1992 или Svec, W.A., 1991, "The distribution and extraction of the Chlorophylls", in: Scheer, 1991, pp. 89-102. Очистку проводили на DEAE-Сефарозе согласно Omata, Т., Murata, N., 1983, "Preparation of Chlorophyll a, Chlorophyll b and Bacteriochlorophyll a by column chromatography with DEAE-Sepharose C1-6B and Sepharose C1-6B", Plant Cell Physiol., vol. 24, pp. 1093-1100.
В примерах и таблице будут идентифицированы исходные соединения и полученные металлокомплексы следующими номерами:
la-BPhe 1b-BPhe-132-OH
2a-[Pd]-BChl 2b-[Pd]-BChl-132-OH
3a-[Co]-BChl 3b-[Co]-BChl-132-OH
4a-[Ni]-BChl 4b-[Ni]-BChl-132-OH
5a-[Cu]-BChl 5b-[Cu]-BChl-132-OH
6a-[Zn]-BChl 6b-[Zn]-BChl-132-OH
7a-BChl 7b-BChl-132-OH
8a-[Cd]-BChl 8b-[Cd]-BChl-132-OH
9a-[Mn]-BChl 9b-[Mn]-BChl-132-OH
Материалы и методы
(i) Выделение BChl. BChl [соединение 7а] выделяли из фотосинтезирующей бактерии, подобной Rhodobacter (Rb) sphaeroides или Rhodospirilium rubrum в соответствии с Scherz, A., Parson, W.W., 1984, Biochim. Biophys. Acta, vol. 766, pp. 653-55; Struck et al., 1992 или Svec, W.A., 1991, "The distribution and extraction of the Chlorophylls", in: Scheer, 1991, pp. 89-102. Очистку проводили на DEAE-Сефарозе согласно Omata, Т., Murata, N., 1983, "Preparation of Chlorophyll a, Chlorophyll b and Bacteriochlorophyll a by column chromatography with DEAE-Sepharose C1-6B and Sepharose C1-6B", Plant Cell Physiol., vol. 24, pp. 1093-1100.
(ii) Получение 132-гидроксибактериохлорофилла a [BChl-132-OH]. BChl-132-OR [соединение 7b] , соединение формулы I, где R1 представляет собой фитил, R2 представляет собой СООСН3, R3 представляет собой ОН, R4 в положении 3 представляет ацетил, а в положении 8 - этил, получали гидроксилированием BChl [7a] в положении С-132 путем хранения 7 а в метаноле в течение 5-7 дней в темноте при 4oС (Struck, A. and Scheer, H., 1990, "Modified reaction centers from Rhodqbacter sphaeroides R26. 1. Exchange of monomeric bacteriochlorophyll with 13-hydroxy-bacteriochlorophyir, FEBS Lett. 261, pp. 385-388). В другом варианте применяли LiBr-процедуру согласно Schaber, P.M., J.E.Hunt, R.Fries and J.J.Katz, 1984, J. Chromatogr. 316, 25-41, что приводило к образованию меньшего количества побочных продуктов. В каждом случае очистку проводили на препаративных (20 х 20 см2) пластинах силикагеля (Silica gel 60 H, Merck) или колонках с применением смеси толуол/ацетон (9: 1, объем/объем) как элюента. Зеленовато-голубую полосу, содержащую продукт, названный в заголовке (Rf≈0,4), механически отделяли и непрореагировавший BChl экстрагировали из Si02 ацетоном.
(iii) Удаление металла (деметаллирование) из BChl и BChl-13-OH. BPhe [соединение 1а] и BPhe-132-OH [соединение 1b] получали удалением металла из BChl [7а] и BChl-132-OH [7b], согласно Rosenbach-Belkin, V., 1988, "The primary reactants in bacterial photosynthesis modelling by in vitro preparation". Ph. D. Thesis, Weizmann Institute of Science, Israel, 1988, с небольшим количеством уксусной кислоты (только для растворения пигмента). После удаления металла, происходящего немедленно, уксусную кислоту выпаривали под током N2 и BPhe и BPhe-132-OH выделяли в виде твердых продуктов.
(iv) Хлорофиллаза (Хлаза). Ацетоновый порошок Хлазы получали из Melia azedarach L. листьев китайского дерева, как описано в ЕР 0584552.
(v) Культура клеток. M2R клетки меланомы мыши культивировали в виде монослойной культуры в среде Игла/F12, модифицированной по Дюльбекко, содержащей 25 мМ HEPES рН 7,4, 10% плодной сыворотки коров, глутамин 2 мМ, пенициллин 0,06 мг/мл и стрептомицин 0,1 мг/мл при 37oС в увлажненной атмосфере 8% СO2, как описано ранее (Gerst, J.E., J.Sole, J.P.Mather and Y.Salomon, 1986, Mol. Cell. Endocrinol., vol. 46, pp. 137-47).
(vi) Исследования клеточной фотоцитотоксичности. M2R клетки меланомы мыши (1 х 105 клеток на лунку) культивировали в 24-луночных микропланшетах и выращивали в течение 24 ч до приблизительно 2 х 105 клеток на лунку, приблизительно 70-80% от конфлюентности. Производное [М] -BChl растворяют в культуральной среде и диспергируют звуком. Photosan-3 (коммерчески доступный HPD) разводят до его конечной концентрации в культуральной среде. Среду заменяют свободной от сыворотки средой, и клетки инкубируют в темноте с желаемой концентрацией фотосенсибилизаторов. После 2 ч инкубации клетки облучают при комнатной температуре в течение 5 мин со стороны дна планшеты. Среду заменяют средой, содержащей сыворотку, и планшеты с культурой вновь помещают в инкубатор на 24 ч. Цитотоксическую эффективность в культуре клеток определяют с помощью: (i) микроскопического исследования клеточной морфологии, (ii) флуоресцентной микроскопии клеток с последующей обработкой прижизненным красителем (пропидия иодидом [PID] [2,7-диамино-9-фенил-10-(диэтиламинопропил)-фенантридиния иодида метиодид] ), который избирательно накапливается в ядрах поврежденных клеток, и (iii) включения [3H]тимидина, как описано ниже. Контрольные эксперименты включают: (1) необработанные клетки, хранившиеся в темноте, (2) освещавшиеся необработанные клетки и (3) клетки, обработанные препаратом, но хранившиеся в темноте.
(vii) Источник света. Источник света для облучения представляет собой бытовую 250 Вт галогеновую лампу, фокусируемую через 10 см водный фильтр на стеклянной подложке и подогнанную жидкостным фильтром (хлорофилл а о.п.= 10,00 при 660 нм).
Интенсивность света доводят до 45 мВт/см2 во всех случаях.
(viii) Включение [3Н]тимидина. Двадцать четыре часа спустя после PDT к клеточным культурам одномоментно добавляют 1 мкКи/мл [3Н]тимидина на два часа при 37oC. Культуры затем промывают дважды забуференным фосфатным солевым раствором, обрабатывают 7,5% холодной трихлоруксусной кислотой в течение 30 мин при 4oС и промывают дважды этанолом. Добавляют гидроокись натрия (1N, 300 мкл на лунку), и планшеты хранили в течение 10 мин при 37oС. Образцы в 100 мкл переносят в сцинтилляционные флаконы, нейтрализуют 100 мкл 1N НСl и измеряют радиоактивность в жидкостном сцинтилляционном счетчике в 4 мл (20:8 [объем/объем] ) ксилольной сцинтилляционной lumax смеси согласно Chen, L., Могу, Y., Zilberstein A., Revel, М., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, vol. 85, pp. 8037-41.
Пример 1. Получение [Zn]-BChl и [Zn]-BChl-132-OH прямым введением металла
[Zn] -BChl [соединение 6а] и [Zn]-BChl-132-OH [соединение 6b] получали прямым введением металла в BPhe [la] и BPhe-132-ОН [lb] соответственно методом с применением ацетата/уксусной кислоты или ацетата/диметилформамида.
[Zn] -BChl [соединение 6а] и [Zn]-BChl-132-OH [соединение 6b] получали прямым введением металла в BPhe [la] и BPhe-132-ОН [lb] соответственно методом с применением ацетата/уксусной кислоты или ацетата/диметилформамида.
1а. Метод с применением ацетата/диметилформамида (DMF)
[Zn] -BChl и [Zn]-BChl-132-OH [6а, 6b] получали нагреванием с обратным холодильником BPhe и BPhe-132-OH [la, lb] соответственно (≈70 мкМ) в ДМФ с 1000-кратным избытком безводного Zn(OAc)2 в течение 60 (75) мин при 110oС (нагревание с обратным холодильником при 163oС снижает время реакции до 5 мин). За реакцией следили с помощью спектроскопии и давали ей пройти до конца. Выделение и очистку продуктов выполняли как для Сd комплексов 8а, 8b, как указано ниже (выход ≈80%).
[Zn] -BChl и [Zn]-BChl-132-OH [6а, 6b] получали нагреванием с обратным холодильником BPhe и BPhe-132-OH [la, lb] соответственно (≈70 мкМ) в ДМФ с 1000-кратным избытком безводного Zn(OAc)2 в течение 60 (75) мин при 110oС (нагревание с обратным холодильником при 163oС снижает время реакции до 5 мин). За реакцией следили с помощью спектроскопии и давали ей пройти до конца. Выделение и очистку продуктов выполняли как для Сd комплексов 8а, 8b, как указано ниже (выход ≈80%).
1b. Метод с применением ацетата/уксусной кислоты
[Zn] -BChl и [Zn]-BChl-132-OH (6a, 6b) получали нагреванием с обратным холодильником 1а, 1b или 7а, 7b (≈70 мкМ) в ледяной уксусной кислоте с 250-кратным избытком безводного Zn(OAc)2 и аскорбатом натрия 50 мМ в течение 120 (30) мин при 100oС. Уксусную кислоту выпаривали в токе N2, комплексы Zn экстрагировали диэтиловым эфиром и очищали на препаративной колонке ModCol HPLC (250 х 25.4 мм), заполненной Bakerbond Silica NP (размер частиц 10 мкм, диаметр пор 150). Соединение 6a элюировали с постоянным расходом (изократически) (10 мл/мин) смесью 2-пропанола (5%), метанола (5%) и н-гексана (90%, объем/объем) с временем удерживания около 17 мин и с выходом очищенного соединения ≈75%. Соединение 6b очищали колоночной хроматографией на силикагеле, используя ту же смесь растворителей, что и для ЖХВР, что давало выход в 90-95%.
[Zn] -BChl и [Zn]-BChl-132-OH (6a, 6b) получали нагреванием с обратным холодильником 1а, 1b или 7а, 7b (≈70 мкМ) в ледяной уксусной кислоте с 250-кратным избытком безводного Zn(OAc)2 и аскорбатом натрия 50 мМ в течение 120 (30) мин при 100oС. Уксусную кислоту выпаривали в токе N2, комплексы Zn экстрагировали диэтиловым эфиром и очищали на препаративной колонке ModCol HPLC (250 х 25.4 мм), заполненной Bakerbond Silica NP (размер частиц 10 мкм, диаметр пор 150). Соединение 6a элюировали с постоянным расходом (изократически) (10 мл/мин) смесью 2-пропанола (5%), метанола (5%) и н-гексана (90%, объем/объем) с временем удерживания около 17 мин и с выходом очищенного соединения ≈75%. Соединение 6b очищали колоночной хроматографией на силикагеле, используя ту же смесь растворителей, что и для ЖХВР, что давало выход в 90-95%.
Пример 2. Получение [Zn]-BChl-3-винила и [Zn]-BChl-3-винил-132-OH прямым введением металла
Введение металла методом с использованием ацетата/DMF, как в описанном выше примере 1а, может быть распространено на другие производные BPhe, в случае небольшого варьирования условий реакции. Например, введение металла в 3-винил-BPhe или 3-винил-132-гидрокси-ВРhе с помощью Zn(OAC)2 проводят при идентичных условиях в течение ≈40 мин при 120oС.
Введение металла методом с использованием ацетата/DMF, как в описанном выше примере 1а, может быть распространено на другие производные BPhe, в случае небольшого варьирования условий реакции. Например, введение металла в 3-винил-BPhe или 3-винил-132-гидрокси-ВРhе с помощью Zn(OAC)2 проводят при идентичных условиях в течение ≈40 мин при 120oС.
Пример 3. Получение [Zn]-ВСhl-132-декарбометокси путем прямого введения металла
Zn-комплексы 132-дeкapбoмeтoкcи-BPhe (или 132-декарбометокси-BChl) получают при тех же условиях, что и описанные в примере 1b. Время реакции составляет 30 мин при 100oС; выделение и очистка идентичны описанным для 6b.
Zn-комплексы 132-дeкapбoмeтoкcи-BPhe (или 132-декарбометокси-BChl) получают при тех же условиях, что и описанные в примере 1b. Время реакции составляет 30 мин при 100oС; выделение и очистка идентичны описанным для 6b.
Пример 4. Получение [Cu]-BChl, [Сu]-ВСhl-132-ОН и [Cu]-BChl-32-декарбометокси прямым введением металла
[Cu] -BChl (5a) получали нагреванием с обратным холодильником 1а или 7а (≈70 мкМ) в ледяной уксусной кислоте с 250-кратным избытком безводной Сu2О и аскорбатом натрия (50 мМ) в течение 15 мин при 100oС. [Сu]-BChl-l32-OH (5b) получали при температуре окружающей среды путем смешивания 1b или 7b (≈70 мкМ) в ледяной уксусной кислоте с 250-кратным избытком безводной Cu20 и аскорбатом натрия 50 мМ. Сu-производные 132-декарбометокси-ВРhе (или 132-декарбометокси-ВСhl) получали в условиях, идентичных описываемым для 5b. Несмотря на использование Cu2O, Сu-комплексы образовывались во всех случаях благодаря присутствию остаточного кислорода или диспропорционированию. Выделение и очистка были сделаны как в описанном выше примере 1b для Zn-комплексов, полученных с помощью метода с применением ледяной уксусной кислоты с выходом ≈75% (5a), ≈90% (5b) и ≈90% (Сu-производное 132-декарбометокси-BChl) соответственно.
[Cu] -BChl (5a) получали нагреванием с обратным холодильником 1а или 7а (≈70 мкМ) в ледяной уксусной кислоте с 250-кратным избытком безводной Сu2О и аскорбатом натрия (50 мМ) в течение 15 мин при 100oС. [Сu]-BChl-l32-OH (5b) получали при температуре окружающей среды путем смешивания 1b или 7b (≈70 мкМ) в ледяной уксусной кислоте с 250-кратным избытком безводной Cu20 и аскорбатом натрия 50 мМ. Сu-производные 132-декарбометокси-ВРhе (или 132-декарбометокси-ВСhl) получали в условиях, идентичных описываемым для 5b. Несмотря на использование Cu2O, Сu-комплексы образовывались во всех случаях благодаря присутствию остаточного кислорода или диспропорционированию. Выделение и очистка были сделаны как в описанном выше примере 1b для Zn-комплексов, полученных с помощью метода с применением ледяной уксусной кислоты с выходом ≈75% (5a), ≈90% (5b) и ≈90% (Сu-производное 132-декарбометокси-BChl) соответственно.
Пример 5. Получение [Cd]-BChl путем прямого введения металла в BPhe
[Cd] -BChl получали нагреванием с обратным холодильником около 70 мкМ BPhe в диметилформамиде с 300-кратным избытком безводного Cd(OAc)2 в течение 40 мин при 130oС. За реакцией следили с помощью спектроскопии и давали ей пройти до конца. Сырые продукты, выделенные путем распределения между диэтиловым эфиром (DE) и NаНСО3-насыщенной водой, могут быть очищены на силикагеле в условиях восстановления (с добавлением 1,5% аскорбата натрия) с использованием смеси для элюирования толуол/ацетон/триэтиламин (88/10/2 объем/объем/объем). Реакцию и смешивание составных частей проводили под прямым защитным действием Аr. Синюю полосу чистого [Cd]-BChl (Rf≈0,7) механически удаляли и экстрагировали смесью диэтиловый эфир/вода, как описано выше для сырого продукта. Чистый продукт использовали во всех процессах трансметаллирования, описанных ниже. Его спектральные свойства (соединение 8а) представлены в таблице.
[Cd] -BChl получали нагреванием с обратным холодильником около 70 мкМ BPhe в диметилформамиде с 300-кратным избытком безводного Cd(OAc)2 в течение 40 мин при 130oС. За реакцией следили с помощью спектроскопии и давали ей пройти до конца. Сырые продукты, выделенные путем распределения между диэтиловым эфиром (DE) и NаНСО3-насыщенной водой, могут быть очищены на силикагеле в условиях восстановления (с добавлением 1,5% аскорбата натрия) с использованием смеси для элюирования толуол/ацетон/триэтиламин (88/10/2 объем/объем/объем). Реакцию и смешивание составных частей проводили под прямым защитным действием Аr. Синюю полосу чистого [Cd]-BChl (Rf≈0,7) механически удаляли и экстрагировали смесью диэтиловый эфир/вода, как описано выше для сырого продукта. Чистый продукт использовали во всех процессах трансметаллирования, описанных ниже. Его спектральные свойства (соединение 8а) представлены в таблице.
Пример 6. Получение [М]-ВСhl и [М]-BChl-l32-OH комплексов Pd, Со, Ni, Сu, Zn, Cd и Мn путем замены металла в [Cd]-BChl и [Cd]-BChl-132-OH
Для получения [Pd]-BChl производного (2а), [Cd]-BChl (8а) из примера 5 растворяли в безводном ацетоне (А770=5 см-1, ≈50 мкМ) под прямым защитным действием Аr для предотвращения неконтролируемого окисления в положениях С-7 и С-8. Через примерно 15 мин добавляли (≈30 мг/100 мл
раствора) PdCl2 (Merck, p.а.), и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 40 мин. За реакцией можно наблюдать спектроскопически. (Qx-полоса сдвигается с ≈590 нм к ≈530 нм в результате образования продукта). По существу чистый продукт выделяли путем экстракции смесью диэтиловый эфир/вода, как описано в примере 5 для [Cd]-BChl. При необходимости осуществляют дальнейшую очистку на пластинах силикагеля, как описано для [Cd]-BChl. Спектральные свойства Pd-BCnl (2a) охарактеризованы в таблице.
Для получения [Pd]-BChl производного (2а), [Cd]-BChl (8а) из примера 5 растворяли в безводном ацетоне (А770=5 см-1, ≈50 мкМ) под прямым защитным действием Аr для предотвращения неконтролируемого окисления в положениях С-7 и С-8. Через примерно 15 мин добавляли (≈30 мг/100 мл
раствора) PdCl2 (Merck, p.а.), и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 40 мин. За реакцией можно наблюдать спектроскопически. (Qx-полоса сдвигается с ≈590 нм к ≈530 нм в результате образования продукта). По существу чистый продукт выделяли путем экстракции смесью диэтиловый эфир/вода, как описано в примере 5 для [Cd]-BChl. При необходимости осуществляют дальнейшую очистку на пластинах силикагеля, как описано для [Cd]-BChl. Спектральные свойства Pd-BCnl (2a) охарактеризованы в таблице.
Сходным путем получали [Pd]-ВСhl-132-ОН (2b) путем трансметаллирования [Cd]-BChl-132-OH, и металлокомплексы Со, Ni, Сu, Zn и Mn of BChl (соединения 3а, 4а, 5а, 6а, 9а) и BChl-132-OH (соединения 3b, 4b, 5b, 6b, 9b) получали путем реакции [Cd] -BChl и BChl-132-OH соответственно с соответствующим хлоридом металла. Безводные хлориды металлов добавляли в 10-кратном молярном избытке (Сu: 5а, 5b; Zn; 6а, 6b), в 100-кратном молярном избытке (Со: 3а, 3b) или в условиях насыщения как в случае Pd (Ni: 3а, 3b; Мn: 9а, 9b). Реакции начинались практически немедленно при температуре 25oС за исключением Pd и Ni (примерно в течение 30-40 мин кипячения с обратным холодильником) и за ходом реакции следили спектроскопически. Небольшие количества С7-С8 окисленных продуктов образовывались из-за присутствия остаточного кислорода, что можно было подавить добавлением аскорбата натрия (насыщенного). Выделение и очистку продуктов выполняли как для [Cd]-BChl, описанных выше в примере 5. Продукты характеризовали по поглощению, флуоресценции, 1H-ЯМР и FAB-MC, как показано в таблице. UV/VIS спектры поглощения записывали на Perkin Elmer Larnda 2 спектрофотометре, интенсивность флуоресцентной эмиссии на Spex Flubrolog 221, снабженном 450 Вт Xwnon-лампой, и нормализовали по чувствительности фотоумножительной трубки и энергии возбуждения. Максимумы оптической плотности для измерений флуоресценции были <0,1 см-1, и возбуждение наблюдали в полосе Qx-поглощения соединений от 1а, 1b до 9а, 9b. Спектры кругового дихроизма (CD) регистрировали на Diclirograph CD6 (Jobin Yvon). FAB-MC записывали на CH7a/SS масс-спектрометре (Varian MAT) или Finigan MAT 9000 с Cs-пушкой, в которой жидкостную поверхностную ионизацию проводили в матриксе м-гидроксибензилового спирта. Спектры 1H-ЯМР записывали на 360 МГц-Bruker модели АМ360. Стандартным растворителем был пиридин-d5, химические сдвиги выражали в м.д. относительно тетраметилсилана как внутреннего стандарта. Коэффициенты экстинкции определяли с помощью спектров ICP/ICPMS-атомной абсорбции (AAS) центральных металлов; перед сжиганием из образцов от 1а, 1b до 9а, 9b с измеренными значениями оптической плотности сначала выпаривали растворитель в пробирках из кварцевого стекла, и затем образцы обрабатывали концентрированной азотной кислотой для достижения полного высвобождения металла.
Пример 7: Переэтерификация [Pd] -BChl и модифицированных по периферии ВСhl в 173этилoвый эфир
Для получения Pd-Бактериофеофорбида этиловый эфир [Pd]-BChl растворяли в хлороформе (1 мг/мл) и добавляли равный объем этанола, содержащего 5% H2S04 об/об. Смесь кипятили с обратным холодильником в атмосфере Аr в течение 90 мин. Затем переэтерифицировали [Pd]-BPhe (100 мг) в 50 мл серной кислоты в смеси этанол/хлороформ (1:1; об/об) нагреванием с обратным холодильником под током Аr в течение 2,5 ч. После этого реакционную смесь разводили эфиром, промывали несколько раз 10% водным раствором бикарбоната натрия. Затем органическую фазу сушили и упаривали. Названное в заголовке соединение (Rf= 0,75) представлено менее подвижной из двух полос, полученных при препаративной TLC под азотом на силикагеле с использованием для элюирования 8% ацетона в толуоле. VIS обоих: λmax[нм] (относительная интенсивность) 329 (0,45); 385 (0,39); 527 (0,13); 755 (0,1). 1H-ЯМР [мд]: 9,25, 8,80, 8,70 (каждый с, 1 Н, 5-, 10-, 20-Н); 4,55 (д. 1 Н, 18-Н); 4,45 (д, 1 Н, 17-Н); 4,10 (кв, 2 Н, 8-СН2СН3); 3,85 (с, 3 Н, 3,7 (д, 1 Н, 7-Н); 3,6 (кв, 3 Н, 3,50, 3,32 (каждый с, 3 Н, 2-, 12-СН3); 3,30 (м, 1 Н, 8-Н); 3,06 (с, 3 Н, 3,04 (д, 3 Н, 7-СН3); 2,65 (2 Н, 171-Н2); 2,45 (2 Н, 172-Н2); 1,75 (д, 3 Н, 18-СН3); 1,65 (т, 3 Н, 8 1,38 (т, 3 Н, 0,10 и -1,90 (с, 2 Н, 2 NH). FAB-ш.с., рассчитанный для Рd-С37Н40N406: 742,38 (М+1). Найдено 742,2 (М+1).
Для получения Pd-Бактериофеофорбида этиловый эфир [Pd]-BChl растворяли в хлороформе (1 мг/мл) и добавляли равный объем этанола, содержащего 5% H2S04 об/об. Смесь кипятили с обратным холодильником в атмосфере Аr в течение 90 мин. Затем переэтерифицировали [Pd]-BPhe (100 мг) в 50 мл серной кислоты в смеси этанол/хлороформ (1:1; об/об) нагреванием с обратным холодильником под током Аr в течение 2,5 ч. После этого реакционную смесь разводили эфиром, промывали несколько раз 10% водным раствором бикарбоната натрия. Затем органическую фазу сушили и упаривали. Названное в заголовке соединение (Rf= 0,75) представлено менее подвижной из двух полос, полученных при препаративной TLC под азотом на силикагеле с использованием для элюирования 8% ацетона в толуоле. VIS обоих: λmax[нм] (относительная интенсивность) 329 (0,45); 385 (0,39); 527 (0,13); 755 (0,1). 1H-ЯМР [мд]: 9,25, 8,80, 8,70 (каждый с, 1 Н, 5-, 10-, 20-Н); 4,55 (д. 1 Н, 18-Н); 4,45 (д, 1 Н, 17-Н); 4,10 (кв, 2 Н, 8-СН2СН3); 3,85 (с, 3 Н, 3,7 (д, 1 Н, 7-Н); 3,6 (кв, 3 Н, 3,50, 3,32 (каждый с, 3 Н, 2-, 12-СН3); 3,30 (м, 1 Н, 8-Н); 3,06 (с, 3 Н, 3,04 (д, 3 Н, 7-СН3); 2,65 (2 Н, 171-Н2); 2,45 (2 Н, 172-Н2); 1,75 (д, 3 Н, 18-СН3); 1,65 (т, 3 Н, 8 1,38 (т, 3 Н, 0,10 и -1,90 (с, 2 Н, 2 NH). FAB-ш.с., рассчитанный для Рd-С37Н40N406: 742,38 (М+1). Найдено 742,2 (М+1).
Этиловые и другие эфиры других кислотоустойчивых металлокомплексов, таких как Ni, Cu, Zn производных ВСhl, могут быть получены сходным путем.
Пример 8: Получение метилового эфира [Pd]-ВChl-173-серила. [Pd]-BChl-173-Ser-CMe[Pd]-BChl-Ser)
Ферментативную переэтерификацию [Pd] -BChl, полученного в примере 6, представленном выше, с гидрохлоридом метилового эфира L-серина (Sigma) проводили с ацетоновым порошком хлорофиллазы, как описано в ЕР 0584552, что давало соединение, названное в заголовке, обозначенное здесь как [Pd]-BChl-Ser, соединение приводимой здесь формулы I', в которой R1' представляет собой остаток метилового эфира серила, присоединенного к СОО-группе через гидроксильную группу серина.
Ферментативную переэтерификацию [Pd] -BChl, полученного в примере 6, представленном выше, с гидрохлоридом метилового эфира L-серина (Sigma) проводили с ацетоновым порошком хлорофиллазы, как описано в ЕР 0584552, что давало соединение, названное в заголовке, обозначенное здесь как [Pd]-BChl-Ser, соединение приводимой здесь формулы I', в которой R1' представляет собой остаток метилового эфира серила, присоединенного к СОО-группе через гидроксильную группу серина.
С помощью той же процедуры ферментативной переэтерификации согласно изобретению могут быть получены соответствующие метиловые эфиры 173-серила для других металлокомплексов [M]-BChl, а также [М]-ВСhl-172-эфиры с другими производными серина, например, N-тритил-L-серина метиловым эфиром и N-карбобензоксисерилсерина метиловым эфиром, или с производными тирозина, например, N-трет-бутоксикарбонилтирозина метиловым эфиром, как описано в ЕР 0584552.
Пример 9: Фототоксичность [Pd]-BChl-Ser in vitro 9a. Бактерии и вирусы
Определение фототоксичности состоит из трех отдельных этапов: инкубации раствора бактерий с сенсибилизатором, освещении и определении фототоксичности.
Определение фототоксичности состоит из трех отдельных этапов: инкубации раствора бактерий с сенсибилизатором, освещении и определении фототоксичности.
Суспензии (≈1 х 107 бактерий/200 мкл) свежих S. аureus в буферированном фосфатном солевом растворе (PBS) инкубировали с данными концентрациями сенсибилизаторов [Pd] -BChl-Ser или BChl-Ser в течение 1 ч в темноте и затем отмывали от пигмента центрифугированием и ресуспендированием в PBS. Промытые суспензии бактерий освещали в течение 5 мин с помощью источника света в виде самодельной ксеноновой лампы с вертикальной эмиссией, с освещенностью на уровне мишени 1000 лк/см2, используя жидкий фильтр (хлорофилла О.П.=10.00 при 660 нм). Фотодинамическое повреждение оценивали путем определения выживаемости бактерий: образцы обработанной светом суспензии бактерий (30 мкл) культивировали в 3 мл жидкой бактериальной культуральной среды из настоя мозга и сердца (BHI) в течение 2 ч при 37oС при встряхивании. Плотность бактерий измеряли по помутнению при λ=660 нм.
Каждый эксперимент состоял из: (а) одной опытной (бактерии, подлежащие полной обработке) и трех контрольных групп; (b) бактерии, обработанные светом без сенсибилизатора; (с) бактерии, не подвергнутые действию света, но обработанные сенсибилизатором; и (d) необработанные бактерии (100% выживание).
Как показано на фиг.1, фототоксические эффекты [Pd]-BChl-Ser являются дозозависимыми в отношении концентраций сенсибилизатора (LD50≈0,6 мкМ), цитотоксичность не проявлялась в темноте. Сходные результаты были получены с BChl-Ser, анализировавшегося для сравнения при тех же условиях, с немного (незначительно) более низкой LD50.
Анализ был воспроизведен с В. subtilis и Propionibacterium acnes и с Herpes Simplex Virus I (HSV-I) в суспензии и в инфицированных клетках, и были получены сходные данные по фототоксичности (не показано).
9b. Клетки меланомы
Анализ проводили, как описано выше в Материалах и методах, разделах с (iv) до (viii). Монослойные культуры M2R клеток инкубировали с указанными концентрациями [Pd]-BChl-Ser в течение 1 ч и подвергали фотодинамической обработке, как описано выше. Фотоцитотоксичность оценивали по включению [3H] тимидина и проценту выживания обработанных клеток и соответствующих контролей, как описано на фиг. 2. Выживание необработанных клеток принимали за 100%.
Анализ проводили, как описано выше в Материалах и методах, разделах с (iv) до (viii). Монослойные культуры M2R клеток инкубировали с указанными концентрациями [Pd]-BChl-Ser в течение 1 ч и подвергали фотодинамической обработке, как описано выше. Фотоцитотоксичность оценивали по включению [3H] тимидина и проценту выживания обработанных клеток и соответствующих контролей, как описано на фиг. 2. Выживание необработанных клеток принимали за 100%.
Как видно из фиг. 2, фототоксическое действие было дозозависимым в отношении концентраций [Pd]-BChl-Ser с приблизительной LD50≈0,05 мкМ.
Фототоксический эффект не наблюдался для контроля в темноте.
Claims (14)
1. Способ получения металлированных производных [М] -бактериохлорофилла формулы I
где R1 представляет собой C1-C25 углеводородный остаток;
R2 представляет собой Н, ОН или СООR5, где R5 представляет собой C1-C12 алкил или С3-С12 циклоалкил;
R3 представляет собой Н, ОН или C1-C12 алкил или алкокси;
каждый R4 является независимо выбранным из группы, включающей винил, этил, ацетил, 1-гидроксиэтил и их простые и сложные эфиры;
М представляет собой металл с ионным радиусом, меньшим, чем имеющийся у Cd (r≅95 пм), причем указанный металл выбран из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбранного из группы, включающей Pd, Co, Ni, Cu, Zn и Мn, который включает (i) реакцию соответствующего производного бактериофеофитина формулы I, не имеющего атома металла М, растворенного в диметилформамиде, с безводным ацетатом Cd в атмосфере Аr и выделение из реакционной смеси комплекса [Cd] -бактериохлорофилл хроматографией в условиях восстановления; (ii) реакцию полученного таким образом комплекса [Cd] -бактериохлорофилл, растворенного в безводном ацетоне, с соответствующей безводной солью металла М, выбранной из хлорида, ацетата и ацетилацетоната металла М, в атмосфере Аr; и (iii) выделение целевого металлированного производного [М] -бактериохлорофилла из реакционной смеси.
где R1 представляет собой C1-C25 углеводородный остаток;
R2 представляет собой Н, ОН или СООR5, где R5 представляет собой C1-C12 алкил или С3-С12 циклоалкил;
R3 представляет собой Н, ОН или C1-C12 алкил или алкокси;
каждый R4 является независимо выбранным из группы, включающей винил, этил, ацетил, 1-гидроксиэтил и их простые и сложные эфиры;
М представляет собой металл с ионным радиусом, меньшим, чем имеющийся у Cd (r≅95 пм), причем указанный металл выбран из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбранного из группы, включающей Pd, Co, Ni, Cu, Zn и Мn, который включает (i) реакцию соответствующего производного бактериофеофитина формулы I, не имеющего атома металла М, растворенного в диметилформамиде, с безводным ацетатом Cd в атмосфере Аr и выделение из реакционной смеси комплекса [Cd] -бактериохлорофилл хроматографией в условиях восстановления; (ii) реакцию полученного таким образом комплекса [Cd] -бактериохлорофилл, растворенного в безводном ацетоне, с соответствующей безводной солью металла М, выбранной из хлорида, ацетата и ацетилацетоната металла М, в атмосфере Аr; и (iii) выделение целевого металлированного производного [М] -бактериохлорофилла из реакционной смеси.
2. Способ по п. 1, в котором металл М представляет собой Pd, Cu, Ni, Co, Zn или Mn, R1 представляет собой фитил или геранилгеранил, R2 является СООСН3, R3 является Н, R4 положении 3 представляет собой ацетил, а в положении 8 представляет собой этил.
3. Способ по п. 1 или 2, в котором солью металла М, используемой на стадии (ii), является хлорид металла.
4. Способ получения металлированных производных [М] -бактериохлорофилла формулы I
где R1 представляет собой C1-C25 углеводородный остаток;
R2 представляет собой Н, ОН или COOR5, где R5 представляет собой C1-C12 алкил или С3-C12 циклоалкил;
R3 представляет собой Н, ОН или C1-C12 алкил или алкокси;
каждый R4 является независимо выбранным из группы, включающей винил, этил, ацетил, 1-гидроксиэтил и их простые и сложные эфиры;
М представляет собой металл с ионным радиусом, меньшим, чем имеющийся у Cd (r≅95 пм), причем указанный металл М выбран из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбранного из группы, включающей Pd, Co, Ni, Cu, Zn и Мn, который включает реакцию соответствующего производного бактериофеофитина, не имеющего атома металла М, с избытком соответствующей безводной соли металла М, выбранной из хлорида, ацетата и ацетилацетоната металла М, в присутствии каталитических количеств безводного ацетата Cd в диметилформамиде или ацетоне.
где R1 представляет собой C1-C25 углеводородный остаток;
R2 представляет собой Н, ОН или COOR5, где R5 представляет собой C1-C12 алкил или С3-C12 циклоалкил;
R3 представляет собой Н, ОН или C1-C12 алкил или алкокси;
каждый R4 является независимо выбранным из группы, включающей винил, этил, ацетил, 1-гидроксиэтил и их простые и сложные эфиры;
М представляет собой металл с ионным радиусом, меньшим, чем имеющийся у Cd (r≅95 пм), причем указанный металл М выбран из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбранного из группы, включающей Pd, Co, Ni, Cu, Zn и Мn, который включает реакцию соответствующего производного бактериофеофитина, не имеющего атома металла М, с избытком соответствующей безводной соли металла М, выбранной из хлорида, ацетата и ацетилацетоната металла М, в присутствии каталитических количеств безводного ацетата Cd в диметилформамиде или ацетоне.
5. Способ получения синтетических металлированных производных [М] -бактериохлорофилла формулы I'
где R'1 выбран из группы, состоящей из (i) C1-C25 углеводородного остатка, необязательно замещенного галогеном, ОН, оксо, СНО, СООН или NH2; или этот остаток прерывается одним или более гетероатомами, выбранными из О, S и NH, или фенильным кольцом; (ii) остатка аминокислоты или пептида, содержащего гидроксильную группу, или их производного, выбранного из группы, состоящей из сложных эфиров и N-защищенных производных, в которых названная гидроксилированная аминокислота или ее производное присоединены к СОО-остатку через гидроксильную группу; (iii) остатка пептида, определенного в (ii), присоединенного к СОО-остатку через спейсер, определенный в (i), где названный C1-C25 углеводородный остаток необязательно замещен галогеном, ОН, оксо, СНО, СООН или NH2, или этот остаток прерывается одним или более гетероатомами, выбранными из О, S и NH, или фенильным кольцом, и этот остаток также дополнительно замещен концевой функциональной группой, выбранной из ОН, СООН или NH2; и (iv) остатка специфичного для клетки лиганда, выбранного из пептида и белка, прямо присоединенного к СОО-остатку или присоединенного через спейсер, определенный в (i), где названный C1-C25 углеводородный остаток необязательно замещен галогеном, ОН, оксо, СНО, СООН или NH2, или прерывается одним или более гетероатомами, выбранными из О, S и NH, или фенильным кольцом, и этот остаток также замещен концевой функциональной группой, выбранной из ОН, СООН или NH2;
R2 представляет собой Н, ОН или COOR5, где R5 представляет собой C1-C12 алкил или С3-С12 циклоалкил;
R3 представляет собой Н, ОН или C1-C12 алкил или алкокси;
каждый R4 независимо выбран из группы, состоящей из винила, этила, ацетила, 1-гидроксиэтила и их простых и сложных эфиров; и
М представляет собой металл с ионным радиусом, меньшим, чем имеющийся у Cd (r≅95 пм), причем указанный металл выбран из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбранного из группы, включающей Pd, Co, Ni, Сu, Zn и Мn, который включает (i) реакцию соответствующего производного бактериофеофитина, не имеющего атома металла М, растворенного в диметилформамиде, с безводным ацетатом Cd в атмосфере Аr и выделения из реакционной смеси комплекса [Cd] -бактериохлорофилл хроматографией в условиях восстановления; (ii) реакцию полученного таким образом комплекса [Cd] -бактериохлорофилл, растворенного в безводном ацетоне, с соответствующей безводной солью металла М, выбранной из хлорида, ацетата и ацетилацетоната металла М, в атмосфере Аr; и (iii) выделение целевого металлированного производного [М] -бактериохлорофилла из реакционной смеси; и (iv) реакцию металлированного производного [М] -бактериохлорофилла, полученного на стадии (iii), с соединением формулы R'1-OH в условиях реакции переэтерификации по положению 173, дающую, таким образом, металлированного производного [М] -бактериохлорофилла формулы I'.
где R'1 выбран из группы, состоящей из (i) C1-C25 углеводородного остатка, необязательно замещенного галогеном, ОН, оксо, СНО, СООН или NH2; или этот остаток прерывается одним или более гетероатомами, выбранными из О, S и NH, или фенильным кольцом; (ii) остатка аминокислоты или пептида, содержащего гидроксильную группу, или их производного, выбранного из группы, состоящей из сложных эфиров и N-защищенных производных, в которых названная гидроксилированная аминокислота или ее производное присоединены к СОО-остатку через гидроксильную группу; (iii) остатка пептида, определенного в (ii), присоединенного к СОО-остатку через спейсер, определенный в (i), где названный C1-C25 углеводородный остаток необязательно замещен галогеном, ОН, оксо, СНО, СООН или NH2, или этот остаток прерывается одним или более гетероатомами, выбранными из О, S и NH, или фенильным кольцом, и этот остаток также дополнительно замещен концевой функциональной группой, выбранной из ОН, СООН или NH2; и (iv) остатка специфичного для клетки лиганда, выбранного из пептида и белка, прямо присоединенного к СОО-остатку или присоединенного через спейсер, определенный в (i), где названный C1-C25 углеводородный остаток необязательно замещен галогеном, ОН, оксо, СНО, СООН или NH2, или прерывается одним или более гетероатомами, выбранными из О, S и NH, или фенильным кольцом, и этот остаток также замещен концевой функциональной группой, выбранной из ОН, СООН или NH2;
R2 представляет собой Н, ОН или COOR5, где R5 представляет собой C1-C12 алкил или С3-С12 циклоалкил;
R3 представляет собой Н, ОН или C1-C12 алкил или алкокси;
каждый R4 независимо выбран из группы, состоящей из винила, этила, ацетила, 1-гидроксиэтила и их простых и сложных эфиров; и
М представляет собой металл с ионным радиусом, меньшим, чем имеющийся у Cd (r≅95 пм), причем указанный металл выбран из группы, состоящей из двухвалентного металла, выбранного из группы, включающей Pd, Co, Ni, Сu, Zn и Мn, который включает (i) реакцию соответствующего производного бактериофеофитина, не имеющего атома металла М, растворенного в диметилформамиде, с безводным ацетатом Cd в атмосфере Аr и выделения из реакционной смеси комплекса [Cd] -бактериохлорофилл хроматографией в условиях восстановления; (ii) реакцию полученного таким образом комплекса [Cd] -бактериохлорофилл, растворенного в безводном ацетоне, с соответствующей безводной солью металла М, выбранной из хлорида, ацетата и ацетилацетоната металла М, в атмосфере Аr; и (iii) выделение целевого металлированного производного [М] -бактериохлорофилла из реакционной смеси; и (iv) реакцию металлированного производного [М] -бактериохлорофилла, полученного на стадии (iii), с соединением формулы R'1-OH в условиях реакции переэтерификации по положению 173, дающую, таким образом, металлированного производного [М] -бактериохлорофилла формулы I'.
6. Металлированное производное бактериохлорофилла формулы I', как указано в п. 5, за исключением соединений формулы I', где R2 представляет собой СООСН3, R3 представляет собой Н, R4 в положении 3 является ацетилом, а в положении 8 представляет собой этил, R'1 представляет собой фитил или этил, и М является Pd, или R'1 представляет собой метил или фитил, а М представляет собой Сu.
7. Металлированное производное бактериохлорофилла в соответствии с п. 6 формулы I', где R'1 представляет собой фитил или геранилгеранил, R2 представляет собой СООСН3, R3 представляет собой Н, R4 в положении 3 является ацетилом, а в положении 8 представляет собой этил, и М является Со, Ni, Zn или Мn.
8. Металлированное производное бактериохлорофилла в соответствии с п. 6 формулы I', где R'1 представляет собой фитил или геранилгеранил, R2 представляет собой СООСН3, R3 представляет собой ОН, R4 в положении 3 является ацетилом, а в положении 8 представляет собой этил, и М является Pd, Со, Ni, Сu, Zn или Мn.
9. Металлированное производное бактериохлорофилла в соответствии с п. 6 формулы I', где R'1 представляет собой фитил или геранилгеранил, R2 представляет собой СООСН3, R3 представляет собой Н или ОН, R4 в положении 3 является винилом, а в положении 8 представляет собой этил, и М является Zn или Сu.
10. Металлированное производное бактериохлорофилла в соответствии с п. 6 формулы I', где R'1 представляет собой фитил или геранилгеранил, R2 представляет собой Н, R3 представляет собой Н, R4 в положении 3 является ацетилом, а в положении 8 представляет собой этил, и М является Zn или Сu.
11. Металлированное производное бактериохлорофилла в соответствии с п. 6 формулы I', где R'1 представляет собой этил, R2 представляет собой СООСН3, R3 представляет собой Н, R4 в положении 3 является ацетилом, а в положении 8 представляет собой этил, и М является Ni, Zn или Сu.
12. Металлированное производное бактериохлорофилла в соответствии с п. 6 формулы I', где R'1 представляет собой метиловый эфир серила, R2 представляет собой СООСН3, R3 представляет собой Н, R4 в положении 3 является ацетилом, а в положении 8 представляет собой этил, и М является Pd.
13. Фармацевтическая композиция, обладающая фототоксической активностью в отношении клеток, бактерий и вирусов и обладающая свойством фотосенсибилизаторов, полезных в фотодинамической терапии и диагностике злокачественных опухолей, включающая в себя активный ингредиент и фармацевтически приемлемый носитель, отличающаяся тем, что в качестве активного ингредиента содержит металлированное производное бактериохлорофилла формулы I', как определено в п. 6.
14. Фармацевтическая композиция в соответствии с п. 13, в которой металлированное производное бактериохлорофилла представляет собой соединение, заявленное в п. 12.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
IL11612695A IL116126A0 (en) | 1995-11-24 | 1995-11-24 | Process for the preparation of bacteriochlorophyllis some novel compounds of this type and pharmaceutical compositions comprising them |
IL116126 | 1995-11-24 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU98111943A RU98111943A (ru) | 2000-03-27 |
RU2193038C2 true RU2193038C2 (ru) | 2002-11-20 |
Family
ID=11068225
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU98111943/04A RU2193038C2 (ru) | 1995-11-24 | 1996-11-24 | Способ получения металлсодержащих производных бактериохлорофилла, новые металлированные производные бактериохлорофилла, фармацевтическая композиция |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US6333319B1 (ru) |
EP (1) | EP0863903B1 (ru) |
JP (1) | JP2000500763A (ru) |
CN (1) | CN1085211C (ru) |
AT (1) | ATE365741T1 (ru) |
AU (1) | AU718961B2 (ru) |
BR (1) | BR9611452A (ru) |
DE (1) | DE69637149T2 (ru) |
DK (1) | DK0863903T3 (ru) |
ES (1) | ES2288757T3 (ru) |
HU (1) | HU223379B1 (ru) |
IL (1) | IL116126A0 (ru) |
MX (1) | MX9804143A (ru) |
NO (1) | NO323478B1 (ru) |
PL (1) | PL188811B1 (ru) |
PT (1) | PT863903E (ru) |
RU (1) | RU2193038C2 (ru) |
WO (1) | WO1997019081A1 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011031187A1 (ru) * | 2009-09-10 | 2011-03-17 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Фарминтерпрайсез" | Антимикробные средства на основе производных гемина |
RU2450018C2 (ru) * | 2006-08-23 | 2012-05-10 | Йеда Рисерч Энд Диверлопмент Ко. Лтд | Конъюгаты rgd-пептидов и фотосенсибилизаторов порфирина или (бактерио)хлорофилла и их применение |
RU2503682C2 (ru) * | 2007-02-23 | 2014-01-10 | Йеда Ресеарч Энд Девелопмент Ко. Лтд | Антитела и содержащие их фармацевтические композиции, подходящие для ингибирования активности металлопротеинов |
RU2588471C2 (ru) * | 2007-11-30 | 2016-06-27 | Фукутоме Хирофуми | Способ получения тетрапиррольных соединений и тетрапиррольные соединения |
Families Citing this family (24)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6413436B1 (en) * | 1999-01-27 | 2002-07-02 | Semitool, Inc. | Selective treatment of the surface of a microelectronic workpiece |
BRPI9916096B8 (pt) * | 1998-12-09 | 2021-05-25 | Yeda Res & Dev | derivados de bacterioclorofila substituídos com paládio, processos para sua preparação, composição compreendendo esses derivados e seu uso. |
US7045117B2 (en) * | 1999-12-01 | 2006-05-16 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Method for tumor diagnosis comprising administering of palladium-substituted bacteriochlorophyll derivatives |
IL133253A0 (en) * | 1999-12-01 | 2001-04-30 | Yeda Res & Dev | Chlorophyll and bacteriochlorophyll esters, their preparation and pharmaceutical compositions comprising them |
WO2002013820A1 (en) * | 2000-08-11 | 2002-02-21 | Ceramoptec Industries, Inc. | Photosensitizing ointment |
RU2183956C1 (ru) * | 2001-03-30 | 2002-06-27 | Общество с ограниченной ответственностью "РАДА-ФАРМА" | Фотосенсибилизатор и способ его получения |
EP1277470A1 (fr) * | 2001-07-17 | 2003-01-22 | Steba Biotech N.V. | Formulation galénique injectable pour utilisation dans un diagnostic ou une thérapie photodynamique et son procédé de préparation |
IL148921A0 (en) * | 2002-03-26 | 2002-09-12 | Peptor Ltd | Photo active backbone cyclized somatostatin analogs for optical imaging and photodynamic therapy |
EP2401962A1 (en) | 2002-05-08 | 2012-01-04 | Yeda Research And Development Co., Ltd. | Sensitized online BOLD-MRI imaging method |
CN2595398Y (zh) | 2002-09-25 | 2003-12-31 | 王健 | 动态加静态磁脉冲理疗仪 |
IL152900A0 (en) | 2002-11-17 | 2003-06-24 | Yeda Res & Dev | Water-soluble bacteriochlorophyll derivatives and their pharmaceutical uses |
CA2437638A1 (en) | 2003-08-20 | 2005-02-20 | John Robert North | Photodynamic therapy |
CA2457214A1 (en) | 2004-02-06 | 2005-08-06 | Qlt Inc. | Photodynamic therapy for the treatment of acne |
CN1980661B (zh) * | 2004-06-07 | 2011-09-28 | 耶达研究及发展有限公司 | 阳离子细菌叶绿素衍生物及其用途 |
MX2007000338A (es) | 2004-06-09 | 2007-03-28 | Quadra Logic Tech Inc | Terapia fotodinamica para el tratamiento de trastornos hiperactivos de glandulas sebaceas. |
WO2008018063A2 (en) * | 2006-08-07 | 2008-02-14 | Kodesh S.A | Tetraarylporphine derivatives and uses thereof |
US20090036952A1 (en) | 2007-07-30 | 2009-02-05 | National Yang-Ming University | Induction driven light module and use thereof |
CN101925382A (zh) * | 2008-01-28 | 2010-12-22 | 耶达研究及发展有限公司 | 内窥镜成像光动力学治疗系统及其使用方法 |
AU2009219682B2 (en) | 2008-02-27 | 2015-06-18 | Yeda Research & Development Co. Ltd | RGD-(bacterio)chlorophyll conjugates for photodynamic therapy and imaging of necrotic tumors |
CN102584837A (zh) * | 2012-01-18 | 2012-07-18 | 河北联合大学 | 天然叶绿素铁铬盐及制备方法 |
CN103405769A (zh) * | 2013-03-07 | 2013-11-27 | 北京亿仁赛博医疗科技研发中心有限公司 | 光敏剂在制备治疗疾病的病毒灭活药物中的应用 |
PL2971026T3 (pl) | 2013-03-11 | 2021-06-14 | Tookad Ip Sarl | Sposób wytwarzania bakteriochlorofilu a |
CN109679110B (zh) * | 2018-12-25 | 2020-10-09 | 北京科技大学 | 一种基于菌绿素的纳米金属-有机框架光敏剂及制备方法 |
CN114005684B (zh) * | 2021-11-05 | 2023-05-05 | 吉林大学 | 不饱和叶绿素的电化学聚合薄膜及其在超级电容器上的应用 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5171741A (en) * | 1989-04-21 | 1992-12-15 | Health Research, Inc. | Bacteriochlorophyll-a derivatives useful in photodynamic therapy |
DE4121876A1 (de) | 1991-07-02 | 1993-01-14 | Scheer Hugo | Modifizierte bakteriochlorophylle, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
IL102645A (en) | 1992-07-26 | 1998-02-22 | Yeda Res & Dev | Chlorophyll and bacteriochlorophyll derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions comprising them |
US5591847A (en) * | 1994-05-23 | 1997-01-07 | Health Research, Inc. | Long wavelength absorbing photosensitizers related to purpurin-18, bacteriopurpurin-18 and related compounds with imide linkages |
-
1995
- 1995-11-24 IL IL11612695A patent/IL116126A0/xx unknown
-
1996
- 1996-11-24 AU AU75857/96A patent/AU718961B2/en not_active Ceased
- 1996-11-24 PL PL96326745A patent/PL188811B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1996-11-24 DK DK96938445T patent/DK0863903T3/da active
- 1996-11-24 EP EP96938445A patent/EP0863903B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-24 ES ES96938445T patent/ES2288757T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-11-24 JP JP9519568A patent/JP2000500763A/ja not_active Ceased
- 1996-11-24 PT PT96938445T patent/PT863903E/pt unknown
- 1996-11-24 RU RU98111943/04A patent/RU2193038C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-11-24 HU HU9903582A patent/HU223379B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-11-24 US US09/077,208 patent/US6333319B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-24 DE DE69637149T patent/DE69637149T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-24 WO PCT/IL1996/000161 patent/WO1997019081A1/en active IP Right Grant
- 1996-11-24 CN CN96199752A patent/CN1085211C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-11-24 AT AT96938445T patent/ATE365741T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-11-24 BR BR9611452A patent/BR9611452A/pt not_active Application Discontinuation
-
1998
- 1998-05-22 NO NO19982348A patent/NO323478B1/no unknown
- 1998-05-25 MX MX9804143A patent/MX9804143A/es unknown
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
J. Am. Chem. Soc., т.117, № 29, 1995, p. 7776-7783. Chem. Abstr., vol. 110, № 9, реф. 72667К, 1989. * |
Гэрбэлэу Н.В., Арион В.Б. Темплатный синтез макроциклических соединений. - Кишинев: Штиинца, 1990, стр.122-124. * |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2450018C2 (ru) * | 2006-08-23 | 2012-05-10 | Йеда Рисерч Энд Диверлопмент Ко. Лтд | Конъюгаты rgd-пептидов и фотосенсибилизаторов порфирина или (бактерио)хлорофилла и их применение |
RU2503682C2 (ru) * | 2007-02-23 | 2014-01-10 | Йеда Ресеарч Энд Девелопмент Ко. Лтд | Антитела и содержащие их фармацевтические композиции, подходящие для ингибирования активности металлопротеинов |
RU2588471C2 (ru) * | 2007-11-30 | 2016-06-27 | Фукутоме Хирофуми | Способ получения тетрапиррольных соединений и тетрапиррольные соединения |
WO2011031187A1 (ru) * | 2009-09-10 | 2011-03-17 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Фарминтерпрайсез" | Антимикробные средства на основе производных гемина |
CN102906110A (zh) * | 2009-09-10 | 2013-01-30 | 制药有限责任公司 | 基于氯高铁血红素衍生物的抗微生物剂 |
US8906897B2 (en) | 2009-09-10 | 2014-12-09 | Obschestvo S Ogranichennoi Otvetstvennostiyu “Pharmenterprises” | Antimicrobial agents based on hemin derivatives |
EA020802B1 (ru) * | 2009-09-10 | 2015-01-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Фарминтерпрайсез" | Антимикробные средства на основе производных гемина |
CN102906110B (zh) * | 2009-09-10 | 2016-04-13 | 制药有限责任公司 | 基于氯高铁血红素衍生物的抗微生物剂 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
MX9804143A (es) | 1998-09-30 |
WO1997019081A1 (en) | 1997-05-29 |
DE69637149T2 (de) | 2008-02-28 |
JP2000500763A (ja) | 2000-01-25 |
NO323478B1 (no) | 2007-05-21 |
HU223379B1 (hu) | 2004-06-28 |
ATE365741T1 (de) | 2007-07-15 |
AU7585796A (en) | 1997-06-11 |
BR9611452A (pt) | 1999-02-17 |
PT863903E (pt) | 2007-09-07 |
NO982348L (no) | 1998-07-23 |
DK0863903T3 (da) | 2007-09-24 |
AU718961B2 (en) | 2000-05-04 |
IL116126A0 (en) | 1996-01-31 |
CN1207741A (zh) | 1999-02-10 |
DE69637149D1 (de) | 2007-08-09 |
EP0863903B1 (en) | 2007-06-27 |
EP0863903A1 (en) | 1998-09-16 |
US6333319B1 (en) | 2001-12-25 |
CN1085211C (zh) | 2002-05-22 |
PL188811B1 (pl) | 2005-04-29 |
PL326745A1 (en) | 1998-10-26 |
HUP9903582A3 (en) | 2002-02-28 |
NO982348D0 (no) | 1998-05-22 |
HUP9903582A2 (hu) | 2000-02-28 |
ES2288757T3 (es) | 2008-01-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2193038C2 (ru) | Способ получения металлсодержащих производных бактериохлорофилла, новые металлированные производные бактериохлорофилла, фармацевтическая композиция | |
EP1246826B1 (en) | Chlorophyll and bacteriochlorophyll esters, their preparation and pharmaceutical compositions comprising them | |
US5506255A (en) | Rhodoporphyrin and phylloerythrin related photosensitizers for photodynamic therapy | |
Pandey et al. | Chlorin and porphyrin derivatives as potential photosensitizers in photodynamic therapy | |
US5179120A (en) | Porphycene compounds for photodynamic therapy | |
US7749991B2 (en) | Substituted metal-phthalocyanines, their preparation and the use thereof | |
JP4976618B2 (ja) | 長波長吸収バクテリオクロリンアルキルエーテル類似体 | |
CA2237056C (en) | Synthetic metal-substituted bacteriochlorophyll derivatives and use thereof | |
Vallés et al. | HpD and second generation photosensitisers for the photodynamic therapy of cancer | |
NZ501912A (en) | Synthetic metal-substituted bacteriochlorophyll derivatives and use for killing viruses and microorganisms | |
KR100707655B1 (ko) | 포르피린 금속 착화합물 유도체 | |
KR100484206B1 (ko) | 포르피린 화합물 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20081125 |