RU2023257C1

RU2023257C1 - Sacharose determination method

Info

Publication number: RU2023257C1
Authority: RU
Inventors: В.К. Шорманов; М.В. Питерская; М.Д. Ванина
Original assignee: Шорманов Владимир Камбулатович
Priority date: 1991-04-15
Filing date: 1991-04-15
Publication date: 1994-11-15

Abstract

FIELD: analytical chemistry. SUBSTANCE: method involves the steps of: treating a sample to be analyzed by a concentrated sulfuric acid containing 10% of potassium nitrate under heating conditions at 60 degrees C, diluting a reaction mixture with water, alcalizing with sodium hydroxide solution, then providing pH of medium equal to 5, treating with crystalline violet solution, extracting a reaction product with toluene and photometering the extract. EFFECT: enhanced accuracy. 1 dwg

Description

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к анализу сахарозы, и может быть использовано в практике заводских контрольно-аналитических лабораторий, центральных заводских лабораторий химических предприятий и при биохимических исследованиях. Способ относится к числу массовых. The invention relates to analytical chemistry, namely to the analysis of sucrose, and can be used in the practice of factory control and analytical laboratories, central factory laboratories of chemical enterprises and in biochemical studies. The method belongs to the mass.

Известен способ определения сахаров путем нагревания при 25^оС в водно-щелочной среде, обработки раствором хлорида 2,3,5-трифенилтетразолия с последующим прибавлением пиридина, концентрированной хлорводородной кислоты и фотометрированием окрашенного раствора [1].Known method for determining sugars by heating at ²⁵ ° C in an aqueous-alkaline medium, treatment with a solution of 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride followed by the addition of pyridine, concentrated hydrochloric acid and photometry colored solution [1].

Способ малочувствителен и требует значительных затрат времени на его осуществление. The method is insensitive and requires a significant investment of time for its implementation.

Известен способ определения сахаров, заключающийся в обработке анализируемой пробы молибдатом аммония и дигидрофосфатом калия в водной среде при нагревании (100^оС) в течение получаса с последующим быстрым охлаждением и фотометрированием образующегося окрашенного раствора [2].Known method for determining sugars, consisting in the treatment of the sample analyzed ammonium molybdate and potassium dihydrogen phosphate in an aqueous medium under heating (100 ° ^C) for half an hour followed by rapid cooling, and the resulting colored solution photometry [2].

Способ характеризуется длительностью выполнения. The method is characterized by a duration of execution.

Наиболее близким по техническому решению и достигаемым результатам является способ определения сахаров, состоящий в обработке анализируемого соединения 77% -ным раствором серной кислоты, охлаждении реакционной смеси, прибавлении этанольного раствора тимола, воды, нагревании в течение 20 мин при 100^оС с последующим охлаждением и определением через 20 мин оптической плотности окрашенного раствора [3].The closest in its technical design and achieved result is a method for determination of sugars, consisting in processing an analyte 77% solution of sulfuric acid, cooling the reaction mixture, adding an ethanolic solution of thymol, water, heated for 20 minutes at 100 ^{° C} followed by cooling and determination after 20 minutes of optical density of the colored solution [3].

Способ отличается длительностью выполнения. The method differs in the duration of execution.

Целью изобретения является сокращение времени определения. The aim of the invention is to reduce the time of determination.

Цель достигается с помощью предлагаемого способа, который заключается в обработке анализируемой пробы концентрированной серной кислотой, содержащий 10 мас. % нитрата калия, в условиях нагревания при 60^оС, разбавлении реакционной смеси водой, обработке водным раствором кристаллического фиолетового при рН 5 с последующей экстракцией образующегося окрашенного продукта толуолом и фотометрированием экстракта.The goal is achieved using the proposed method, which consists in processing the analyzed samples with concentrated sulfuric acid, containing 10 wt. % Of potassium nitrate, under heating conditions at ⁶⁰ ° C, diluting the reaction mixture with water, treatment with an aqueous solution of crystal violet at pH 5, followed by extraction of the resulting colored product with toluene and the extract photometry.

Способ осуществляется следующим образом: анализируемую пробу обрабатывают концентрированной серной кислотой, содержащей 10% нитрата калия, в условиях нагревания при 60^оС, реакционную смесь разбавляют водой, подщелачивают раствором гидроксида натрия до рН 6-9, затем доводят рН среды до 5, обрабатывают раствором кристаллического фиолетового, экстрагируют продукт реакции толуолом, экстракт отделяют и фотометрируют.The process is carried out as follows: the test portion was treated with concentrated sulfuric acid containing 10% of potassium nitrate under heating at ⁶⁰ ° C, the reaction mixture was diluted with water, basified with sodium hydroxide to pH 6-9, then brought up to pH 5, was treated with a solution of crystalline violet, the reaction product is extracted with toluene, the extract is separated and photometric.

П р и м е р 1. Качественное определение сахарозы. PRI me R 1. Qualitative determination of sucrose.

Около 2 мг сахарозы помещают в выпарительную чашку, туда же вносят 0,5 мл концентрированной серной кислоты, содержащей 10% нитрата калия и нагревают реакционную смесь при 60^оС на водяной бане в течение 6 мин. По истечении указанного времени к смеси прибавляют 1 мл воды, 10%-ный раствор гидроксида натрия до рН 6-9, доводят рН среды до 5 путем прибавления 0,1 н. раствора хлорводородной кислоты. К полученному раствору прибавляют 2 мл 0,02% раствора кристаллического фиолетового, 10 мл толуола и экстрагируют 3 мин. Слой толуола при этом окрашивается в фиолетовый цвет (окраску сравнивают с результатом контрольного опыта). Чувствительность реакции - 10 мкг/мл.About 2 mg of sucrose was placed in vyparitelnuyu cup, there is introduced 0,5 ml of concentrated sulfuric acid containing 10% of potassium nitrate and the reaction mixture was heated at ⁶⁰ ° C in a water bath for 6 min. After the specified time, 1 ml of water is added to the mixture, a 10% solution of sodium hydroxide to pH 6-9, the pH of the medium is adjusted to 5 by adding 0.1 N. hydrochloric acid solution. To the resulting solution was added 2 ml of a 0.02% crystalline violet solution, 10 ml of toluene and extracted for 3 minutes. The toluene layer is then colored purple (the color is compared with the result of the control experiment). The sensitivity of the reaction is 10 μg / ml.

П р и м е р 2. Количественное определение сахарозы. PRI me R 2. Quantitative determination of sucrose.

Построение калибровочного графика. Construction of a calibration graph.

В шесть выпарительных чашей вносят 0,2, 0,4, 0,6, 0,8, 1,0, 1,2 мл стандартного (02%) раствора сахарозы в смеси воды и этанола, взятых в объемном отношении 1:4. Растворитель испаряют, к сухим остаткам прибавляют по 0,5 мл концентрированной серной кислоты, содержащей 10% нитрата калия, и выдерживают реакционные растворы 6 мин в условиях нагревания на водяной бане при 60^оС. По истечении указанного времени каждый раствор разбавляют 1 мл воды, прибавляют 10%-ный раствор гидроксида натрия до рН 6-9, а затем под контролем потенциометра доводят рН до 5 путем прибавления 0,1 н.раствора хлорводородной кислоты. К полученному раствору прибавляют 2 мл 0,02% раствора кристаллического фиолетового и экстрагируют 10 мл толуола в течение 3 мин. Окрашенный раствор отделяют и фотометрируют на приборе КФК-2 при светофильтре N 7 ( λ= 590 нм) в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм на фоне экстракта, полученного в контрольном опыте. Методом наименьших квадратов рассчитывают уравнение калибровочного графика, которое в данном случае имеет вид:
D = 4,6 ˙С + 0,08933, где L - оптическая плотность, С - концентрация сахарозы в фотометрируемом растворе, мг/мл.In six evaporation cups, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 1.2 ml of a standard (02%) solution of sucrose in a mixture of water and ethanol taken in a volume ratio of 1: 4 are added. The solvent was evaporated and to the dry residue was added 0.5 ml of concentrated sulfuric acid containing 10% of potassium nitrate, and the reaction solutions were incubated 6 min under heating conditions in a water bath at 60 ° ^C. After this time, each solution was diluted with 1 ml water add a 10% solution of sodium hydroxide to a pH of 6-9, and then, under the control of a potentiometer, adjust the pH to 5 by adding 0.1 N solution of hydrochloric acid. To the resulting solution was added 2 ml of a 0.02% crystal violet solution and extracted with 10 ml of toluene for 3 minutes. The colored solution is separated and photometrified on a KFK-2 device with a N 7 filter (λ = 590 nm) in a cuvette with a working layer thickness of 20 mm against the background of the extract obtained in the control experiment. The least squares method calculates the equation of the calibration graph, which in this case has the form:
D = 4.6 ° C + 0.08933, where L is the optical density, C is the concentration of sucrose in the photometric solution, mg / ml.

Подчинение основному закону светопоглощения наблюдается в интервале концентраций 0,04-2,4 мг/мл. Submission to the basic law of light absorption is observed in the concentration range of 0.04-2.4 mg / ml.

Методика количественного определения. Methodology for quantification.

Около 0,1 г (точная навеска) сахарозы растворяют в смеси воды и этанола, взятых в объемном отношении 1:4, в мерной колбе вместимостью 50 мл 0,6 мл полученного раствора помещают в выпарительную чашку и испаряют растворитель. К сухому остатку прибавляют 0,5 мл концентрированной серной кислоты, содержащей 10% нитрата калия, и дальнейшие операции осуществляют по схеме, описанной для построения калибровочного графика. Количественное содержание сахарозы определяют по уравнению калибровочного графика и пересчитывают на навеску. Результаты определения и метрологические характеристики представлены в таблице. About 0.1 g (accurately weighed) of sucrose was dissolved in a mixture of water and ethanol taken in a volume ratio of 1: 4, in a 50 ml volumetric flask, 0.6 ml of the resulting solution was placed in an evaporation cup and the solvent was evaporated. 0.5 ml of concentrated sulfuric acid containing 10% potassium nitrate was added to the dry residue, and further operations were carried out according to the scheme described for constructing a calibration graph. The quantitative content of sucrose is determined by the equation of the calibration graph and converted to a weighed portion. The results of determination and metrological characteristics are presented in the table.

Предлагаемый способ по сравнению с известным в 5 раз сокращает продолжительность определения (с 60-65 мин до 10-12 мин). The proposed method in comparison with the known 5 times reduces the duration of the determination (from 60-65 minutes to 10-12 minutes).

Claims

METHOD FOR DETERMINING SUGAROSE by processing the analyzed sample with sulfuric acid followed by the addition of a color reagent and photometry of the resulting colored product, characterized in that, in order to reduce the determination time, the analyzed sample is treated with concentrated sulfuric acid containing 10 wt.% Potassium nitrate when heated to 60 ^o C, as a color reagent, an aqueous solution of crystalline violet is used, treatment with a color reagent is carried out at pH 5, and before photometry, the colored product is stragiruyut toluene.