RU2020115025A - Ферментативный синтез n-ацетилнейраминовой кислоты - Google Patents
Ферментативный синтез n-ацетилнейраминовой кислоты Download PDFInfo
- Publication number
- RU2020115025A RU2020115025A RU2020115025A RU2020115025A RU2020115025A RU 2020115025 A RU2020115025 A RU 2020115025A RU 2020115025 A RU2020115025 A RU 2020115025A RU 2020115025 A RU2020115025 A RU 2020115025A RU 2020115025 A RU2020115025 A RU 2020115025A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- naturally occurring
- occurring microorganism
- paragraphs
- neu5ac
- functional
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
- C12P19/28—N-glycosides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/24—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Enterobacteriaceae (F), e.g. Citrobacter, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella, Yersinia
- C07K14/245—Escherichia (G)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pediatric Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Claims (26)
1. Не встречающийся в природе микроорганизм, способный продуцировать ацетилнейраминовую кислоту (Neu5Ac), отличающийся тем, что у указанного не встречающегося в природе микроорганизма имеется путь синтеза сиаловой кислоты, включающий по меньшей мере один гетерологичный фермент, причем в микроорганизме блокирован природный катаболический путь сиаловой кислоты, блокирована по меньшей мере одна система фосфоенолпируват: сахар-фосфотрансфераза для импорта сахарида, который не используется в качестве источника углерода в процессе ферментативного продуцирования Neu5Ac, и при этом микроорганизм может использовать источник экзогенного углерода, присутствующий в ферментативном бульоне, в качестве единственного источника углерода, не используя систему фосфоенолпируват : сахар-фосфотрансфераза для доступа к указанному источнику экзогенного углерода.
2. Не встречающийся в природе микроорганизм по п. 1, в котором путь биосинтеза сиаловой кислоты включает следующие ферменты: глутамин-фруктозо-6-фосфатаминотрансферазу, глюкозамин-6-фосфат-N-ацетилтрансферазу, N-ацетилглюкозамин-2-эпимеразу, синтазу N-ацетилнейраминовой кислоты и сахар-фосфатазу суперсемейства HAD-подобных фосфатаз.
3. Не встречающийся в природе микроорганизм по п. 1 или 2, в котором по меньшей мере один из ферментов пути биосинтеза сиаловой кислоты представляет собой гетерологичный фермент.
4. Не встречающийся в природе микроорганизм по любому из пп. 1-3, в котором блокирован природный катаболический путь сиаловой кислоты.
5. Не встречающийся в природе микроорганизм по любому из пп. 1-4, в котором один или более генов, кодирующих фермент, который участвует в катаболическом пути сиаловой кислоты, удален из генома не встречающегося в природе микроорганизма, в котором нарушена экспрессия одного или более генов, кодирующих фермент, который участвует в катаболическом пути сиаловой кислоты, или в котором изменена нуклеотидная последовательность области, кодирующей белок, по меньшей мере одного гена, кодирующего фермент, который участвует в катаболическом пути сиаловой кислоты, в результате чего полипептид, кодируемый измененной нуклеотидной последовательностью, кодирующей белок, не обладает ферментативной активностью фермента, кодируемого неизмененной нуклеотидной последовательностью.
6. Не встречающийся в природе микроорганизм по любому из пп. 1-5, отличающийся тем, что указанный не встречающийся в природе микроорганизм генетически модифицирован, для делеции одного или более генов, выбранных из группы генов, кодирующих N-ацетилманнозаминкиназу, N-ацетилманнозамин-6-фосфатэпимеразу, альдолазу N-ацетилнейраминовой кислоты и пермеазу сиаловой кислоты, в котором нарушена экспрессия одного или более указанных генов или в котором изменена нуклеотидная последовательность области, кодирующей белок, по меньшей мере одного из указанных генов, в результате чего полипептид, кодируемый указанной измененной нуклеотидной последовательностью, не обладает ферментативной активностью фермента, кодируемого неизмененной нуклеотидной последовательностью.
7. Не встречающийся в природе микроорганизм по любому из пп. 1-6, в котором устранены активности одного или более ферментов, выбранных из группы, состоящей из N-ацетилглюкозамин-6-фосфатдезацетилазы и N-ацетилглюкозамин-6-фосфатдезаминазы.
8. Не встречающийся в природе микроорганизм по любому из пп. 1-7, отличающийся тем, что указанный не встречающийся в природе микроорганизм генетически модифицирован, для устранения активности N-ацетилглюкозамин-6-фосфатдезацетилазы и/или N-ацетилглюкозамин-6-фосфатдезаминазы за счет делеции одного или обоих генов, кодирующих указанные ферменты, за счет нарушения экспрессии одного или обоих указанных генов или за счет мутации в кодирующей белок области одного или обоих генов, в результате чего полипептид, кодируемый каждой из измененных нуклеотидных последовательностей, не обладает ферментативной активностью фермента, кодируемого неизмененной нуклеотидной последовательностью.
9. Не встречающийся в природе микроорганизм по любому из пп. 1-8, в котором блокирована по меньшей мере одна фосфоенолпируват (РЕР)-зависимая система фосфотрансферазы - переносчик сахара для импорта углевода.
10. Не встречающийся в природе микроорганизм по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что указанный не встречающийся в природе микроорганизм включает симпортер сахарида/Н+, предпочтительно симпортер сахарида/Н+, выбранный из группы, состоящей из симпортера сахарозы-протона, симпортера лактозы-протона и симпортера глюкозы-протона.
11. Не встречающийся в природе микроорганизм по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что указанный не встречающийся в природе микроорганизм обладает улучшенным биосинтезом PEP по сравнению с микроорганизмом дикого типа, предпочтительно в результате сверхэкспрессии РЕР-синтазы.
12. Не встречающийся в природе микроорганизм по любому из пп. 1-11, отличающийся тем, что не встречающийся в природе микроорганизм не содержит одного или более, выбранных из группы, состоящей из функциональной РЕР-карбоксилазы, функциональной глутаматсинтазы, функционального WzxC-белка, функциональной трансферазы UDP-глюкозы:ундекапренилфосфат-глюкозо-1-фосфата, функциональной β-галактозидпермеазы, функциональной β-галактозидазы, функционального YjhC-белка, функциональной фукозоизомеразы, функциональной фукулокиназы и функциональной N-ацетилглутаминаминоацилазы.
13. Не встречающийся в природе микроорганизм по любому из пп. 1-12, отличающийся улучшенным синтезом глутамина по сравнению с микроорганизмом дикого типа, предпочтительно в результате сверхэкспрессии глутаминсинтазы.
14. Применение не встречающегося в природе микроорганизма по любому из пп. 1-13 для получения Neu5Ac.
15. Способ получения Neu5Ac посредством ферментации с использованием не встречающегося в природе микроорганизма, способного продуцировать Neu5Ac, где способ включает следующие этапы:
a) предоставление не встречающегося в природе микроорганизма по любому из пп. 1-13;
b) культивирование не встречающегося в природе микроорганизма в ферментативном бульоне в условиях, пермиссивных для продуцирования Neu5Ac не встречающимся в природе микроорганизмом; и
c) необязательно выделение Neu5Ac из ферментативного бульона.
16. Способ по п. 15, в котором ферментативный бульон содержит источник углерода для роста не встречающегося в природе микроорганизма, при этом указанный источник углерода предпочтительно выбран из группы, состоящей из глюкозы, ксилозы, сахарозы, фруктозы, лактозы, глицерина, синтез-газа и их комбинаций.
17. Применение Neu5Ac, полученной способом по п. 15 или 16, для изготовления питательной композиции.
18. Питательная композиция, содержащая Neu5Ac, полученную способом по п. 15 или 16.
19. Питательная композиция по п. 18, где указанная композиция также содержит по меньшей мере один олигосахарид грудного молока (НМО), предпочтительно по меньшей мере один нейтральный НМО и/или по меньшей мере один сиалилированный НМО.
20. Питательная композиция по п. 18 или 19, где указанная питательная композиция также содержит пробиотический микроорганизм.
21. Питательная композиция по любому из пп. 18-20, где указанная питательная композиция представляет собой композицию, выбранную из группы, состоящей из лекарственных препаратов, детских питательных смесей и пищевых добавок.
22. Питательная композиция по любому из пп. 18-21, где указанная питательная композиция находится в жидкой форме, предпочтительно в форме концентрата или готовой для питья форме, или в твердой форме, предпочтительно в виде порошка, гранул, хлопьев или крупинок.
23. Детская питательная смесь, содержащая Neu5Ac, полученную способом по любому из пп. 15, 16.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP17196925.6 | 2017-10-17 | ||
| EP17196925.6A EP3473644A1 (en) | 2017-10-17 | 2017-10-17 | Fermentative production of n-acetylneuraminic acid |
| PCT/EP2018/078318 WO2019076941A1 (en) | 2017-10-17 | 2018-10-17 | FERMENTATIVE PRODUCTION OF N-ACETYLNEURAMINE ACID |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2020115025A true RU2020115025A (ru) | 2021-11-18 |
| RU2020115025A3 RU2020115025A3 (ru) | 2022-03-02 |
| RU2809787C2 RU2809787C2 (ru) | 2023-12-18 |
Family
ID=
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BR112020007532A2 (pt) | 2020-10-06 |
| SG11202003360QA (en) | 2020-05-28 |
| US11920173B2 (en) | 2024-03-05 |
| JP7305630B2 (ja) | 2023-07-10 |
| CN111556873A (zh) | 2020-08-18 |
| US20200332331A1 (en) | 2020-10-22 |
| WO2019076941A1 (en) | 2019-04-25 |
| EP3697805A1 (en) | 2020-08-26 |
| EP3473644A1 (en) | 2019-04-24 |
| MX2020003629A (es) | 2020-07-29 |
| KR20200067176A (ko) | 2020-06-11 |
| RU2020115025A3 (ru) | 2022-03-02 |
| AU2018350754A1 (en) | 2020-05-07 |
| PH12020550441A1 (en) | 2021-04-26 |
| JP2020537530A (ja) | 2020-12-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7305630B2 (ja) | Ｎ－アセチルノイラミン酸の発酵生産 | |
| EP2927316B1 (en) | Total fermentation of oligosaccharides | |
| ES2856749T3 (es) | Proceso para la producción de oligosacáridos fucosilados | |
| US10829508B2 (en) | Fermentative production of oligosaccharides | |
| ES2933995T3 (es) | Producción fermentativa de sacáridos sialilados | |
| JP2024010049A (ja) | シアリルトランスフェラーゼ及びシアリル化オリゴ糖の生産におけるその使用 | |
| CN113166789A (zh) | 岩藻糖基化寡糖lnfp-v的合成 | |
| DK2596113T3 (en) | GALACTOOLIGOSACCHARIDE-CONTAINING COMPOSITION AND PROCEDURE FOR PREPARING THEREOF | |
| ES2965229T3 (es) | Producción fermentativa de oligosacáridos mediante fermentación total usando una materia prima mixta | |
| CN110637091B (zh) | 利用源自舞蹈拟土地杆菌的岩藻糖基转移酶的2’-岩藻糖基乳糖的生产方法 | |
| JP2022522366A (ja) | 混合原料を利用する微生物細胞による炭水化物の発酵生産 | |
| JP6364506B2 (ja) | 新規β−ガラクトシダーゼ | |
| CN112662604B (zh) | 一种合成3-岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌及其构建方法 | |
| JP2022546825A (ja) | バチルス属細胞におけるシアリル化オリゴ糖の生産 | |
| US20230304052A1 (en) | Improved Export of Oligosaccharides From Bacterial Cells | |
| DK180952B1 (en) | A dfl-producing strain | |
| JP7331278B1 (ja) | ３’ｓｌのインビボ合成のための新規なシアリルトランスフェラーゼ | |
| KR102462125B1 (ko) | 조효소 엔지니어링을 통한 모유올리고당의 생물학적 생산방법 | |
| WO2024110667A1 (en) | Two-strain system for producing oligosaccharides | |
| WO2024042235A1 (en) | Hybrid method for producing complex hmos | |
| KR101794972B1 (ko) | α-1,3-푸코실락토오즈의 대량 생산 방법 | |
| EP4179102A1 (en) | Oligosaccharide production | |
| CN117355613A (zh) | 产生以lnfp-i和2’-fl作为主要化合物的hmo共混物分布的方法 | |
| RU2020139928A (ru) | Ферментативное получение сиалилированных сахаридов |