RU2018134295A - Линейная дуплексная днк с закрытым концом для невирусного переноса генов - Google Patents

Линейная дуплексная днк с закрытым концом для невирусного переноса генов Download PDF

Info

Publication number
RU2018134295A
RU2018134295A RU2018134295A RU2018134295A RU2018134295A RU 2018134295 A RU2018134295 A RU 2018134295A RU 2018134295 A RU2018134295 A RU 2018134295A RU 2018134295 A RU2018134295 A RU 2018134295A RU 2018134295 A RU2018134295 A RU 2018134295A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
nucleic acid
self
stem
loop
sequence
Prior art date
Application number
RU2018134295A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2752882C2 (ru
RU2018134295A3 (ru
Inventor
Роберт М. КОТИН
Сильвейн СЕККИНИ
Original Assignee
Юниверсити Оф Массачусетс
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Юниверсити Оф Массачусетс filed Critical Юниверсити Оф Массачусетс
Publication of RU2018134295A publication Critical patent/RU2018134295A/ru
Publication of RU2018134295A3 publication Critical patent/RU2018134295A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2752882C2 publication Critical patent/RU2752882C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/0075—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the delivery route, e.g. oral, subcutaneous
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/12—Mucolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/102—Mutagenizing nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/64—General methods for preparing the vector, for introducing it into the cell or for selecting the vector-containing host
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/66—General methods for inserting a gene into a vector to form a recombinant vector using cleavage and ligation; Use of non-functional linkers or adaptors, e.g. linkers containing the sequence for a restriction endonuclease
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/50—Physical structure
    • C12N2310/53—Physical structure partially self-complementary or closed
    • C12N2310/531—Stem-loop; Hairpin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/14011—Baculoviridae
    • C12N2710/14041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2710/14043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vectore
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2750/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14151—Methods of production or purification of viral material

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)

Claims (77)

1. Нуклеиновая кислота, содержащая вставку гетерологичной нуклеиновой кислоты, фланкированную по меньшей мере одной расщепленной самокомплементарной последовательностью, причем каждая самокомплементарная последовательность имеет сайт оперативного концевого разрешения и связывающий элемент репликационного белка по типу разматывающегося рулона, где самокомплементарная последовательность расщепляется поперечной последовательностью с образованием двух противоположных продольно-симметричных «петель-на-стебле», причем каждая из противоположных продольно-симметричных «петель-на-стебле» имеет часть «стебель» длиной в диапазоне от 5 до 15 пар оснований и часть «петля», имеющую от 2 до 5 неспаренных дезоксирибонуклеотидов.
2. Нуклеиновая кислота по п. 1, в котором вторая расщепленная самокомплементарная последовательность расщеплена усеченной поперечной последовательностью.
3. Нуклеиновая кислота, содержащая вставку гетерологичной нуклеиновой кислоты, фланкированную расщепленными самокомплементарными последовательностями, причем каждая самокомплементарная последовательность имеет сайт оперативного концевого разрешения и связывающий элемент репликационного белка по типу разматывающегося рулона, где самокомплементарная последовательность расщепляется поперечной последовательностью с образованием двух противоположных продольно-симметричных «петель-на-стебле», причем каждая из противоположных продольно-симметричных «петель-на-стебле» имеет часть «стебель» длиной в диапазоне от 5 до 15 пар оснований и часть «петля», имеющую от 2 до 5 неспаренных дезоксирибонуклеотидов, где другая из самокомплементарных последовательностей расщепляется усеченной поперечной последовательностью.
4. Нуклеиновая кислота по любому из пп. 1-3, в которой расщепленная самокомплементарная последовательность(и) имеет длину в диапазоне от 40 до 1000 нуклеотидов.
5. Нуклеиновая кислота по п. 4, в которой расщепленная самокомплементарная последовательность(и) имеет длину в диапазоне от 100 до 160 нуклеотидов.
6. Нуклеиновая кислота по любому одному из пп. 1-5, в которой поперечная последовательность имеет свободную энергию Гиббса (ΔG) разворачивания в физиологических условиях в диапазоне от -12 ккал/моль до -30 ккал/моль.
7. Нуклеиновая кислота по п. 6, в которой поперечная последовательность имеет свободную энергию Гиббса (ΔG) разворачивания в физиологических условиях в диапазоне от -20 ккал/моль до -25 ккал/моль.
8. Нуклеиновая кислота по любому из предыдущих пунктов, в которой каждая из противоположных продольно-симметричных «петель-на-стебле» имеет часть «стебель» длиной в диапазоне от 3 до 15 пар оснований.
9. Нуклеиновая кислота по любому из предыдущих пунктов, в которой каждая из противоположных продольно-симметричных «петель-на-стебле» имеет часть «стебель» длиной в диапазоне от 8 до 10 пар оснований.
10. Нуклеиновая кислота по любому из предыдущих пунктов, в которой каждая часть «петля» имеет от 2 до 5 неспаренных дезоксирибонуклеотидов.
11. Нуклеиновая кислота по любому из предыдущих пунктов, в которой каждая часть «петля» имеет три дезоксирибонуклеотида.
12. Нуклеиновая кислота по любому из предыдущих пунктов, в которой одна часть «петля» имеет три дезокситимидина, а другая часть «петля» имеет три дезоксиаденозина.
13. Нуклеиновая кислота по любому из предыдущих пунктов, в которой связывающий элемент репликационного белка по типу разматывающегося рулона представляет собой связывающий элемент Rep (RBE).
14. Нуклеиновая кислота по п. 13, в которой RBE содержит последовательность 5'-GCTCGCTCGCTC-3'.
15. Нуклеиновая кислота по любому из предыдущих пунктов, в которой сайт оперативного концевого разрешения содержит последовательность 5'-ТТ-3'.
16. Нуклеиновая кислота по любому из предыдущих пунктов, в которой 3'-конец сайта оперативного концевого разрешения составляет от 15 до 25 нуклеотидов из 5'-конца связывающего элемента репликационного белка по типу разматывающегося рулона.
17. Нуклеиновая кислота по любому одному из пп. 2-16, в которой усеченная поперечная последовательность образует две противоположные продольно-асимметричные «петли-на-стебле».
18. Нуклеиновая кислота по п. 17, в которой одна из противоположных продольно-асимметричных «петель-на-стебле» имеет часть «стебель» длиной в диапазоне от 8 до 10 пар оснований и часть «петля», имеющую от 2 до 5 неспаренных дезоксирибонуклеотидов.
19. Нуклеиновая кислота по п. 18, в которой одна продольно-асимметричная «петля-на-стебле» имеет часть «стебель» длиной менее чем 8 пар оснований и часть «петля», имеющую от 2 до 5 дезоксирибонуклеотидов.
20. Нуклеиновая кислота по п. 19, в которой одна продольно-асимметричная «петля-на-стебле» имеет часть «стебель» длиной менее чем 3 пары оснований.
21. Нуклеиновая кислота по п. 18, в которой одни продольно-асимметричные «петли-на-стебле» имеют часть «петля», имеющую 3 или менее дезоксирибонуклеотидов.
22. Нуклеиновая кислота по любому одному из пп. 17-21, в которой усеченная поперечная последовательность имеет свободную энергию Гиббса (ΔG) разворачивания в физиологических условиях в диапазоне от 0 ккал/моль до более чем -22 ккал/моль.
23. Нуклеиновая кислота по любому из предыдущих пунктов, в которой вставка гетерологичной нуклеиновой кислоты сконструирована для экспрессии белка или функциональной РНК.
24. Нуклеиновая кислота по любому из предыдущих пунктов, в которой вставка гетерологичной нуклеиновой кислоты представляет собой беспромоторную конструкцию в качестве субстрата для редактирования генов.
25. Нуклеиновая кислота по п. 24, в которой беспромоторная конструкция обеспечивает субстрат для TALENS, нуклеаз «цинковые пальцы» (ZFN), мегануклеаз, Cas9 и других белков, редактирующих ген.
26. Нуклеиновая кислота по любому из предыдущих пунктов, где нуклеиновая кислота имеет длину в диапазоне от 500 до 50000 нуклеотидов.
27. Нуклеиновая кислота по любому из предыдущих пунктов, где нуклеиновая кислота содержит единственную нить с закрытым концом.
28. Композиция, содержащая множество нуклеиновых кислот по любому одному из пп. 1-27.
29. Композиция по п. 28, в которой множество нуклеиновых кислот связаны конец-к-концу.
30. Композиция, содержащая нуклеиновую кислоту по любому одному из пп. 1-27 и фармацевтически приемлемый носитель.
31. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по любому одному из пп. 1-27.
32. Клетка-хозяин по п. 31, где клетка-хозяин дополнительно содержит репликационный белок по типу разматывающегося рулона, который селективно связывается со связывающим элементом репликационного белка по типу разматывающегося рулона нуклеиновой кислоты.
33. Способ доставки гетерологичной нуклеиновой кислоты в клетку, включающий доставку в клетку нуклеиновой кислоты по любому одному из пп. 1-27.
34. Способ доставки гетерологичной нуклеиновой кислоты субъекту, где способ включает доставку субъекту нуклеиновой кислоты по любому одному из пп. 1-27, где доставка нуклеиновой кислоты не приводит к иммунному ответу против нуклеиновой кислоты у субъекта.
35. Способ по п. 34, где иммунный ответ представляет собой гуморальный ответ.
36. Способ по п. 34, где иммунный ответ представляет собой клеточный ответ.
37. Способ по п. 34, где гетерологичная нуклеиновая кислота доставляется субъекту несколько раз.
38. Способ по п. 34, где количество случаев, при которых гетерологичная нуклеиновая кислота доставляется субъекту, находится в диапазоне от 2 до 10 раз.
39. Способ по п. 37 или 38, где гетерологичная нуклеиновая кислота доставляется субъекту ежечасно, ежедневно, еженедельно, раз в две недели, ежемесячно, ежеквартально, раз в полгода или ежегодно.
40. Способ доставки гетерологичной нуклеиновой кислоты субъекту, где способ включает доставку клетки-хозяина по п. 31 или 32 субъекту.
41. Способ по п. 40, где клетка-хозяин представляет собой клетку крови.
42. Способ по п. 40 или 41, где клетка-хозяин доставляется несколько раз.
43. Способ по п. 42, где клетка-хозяин доставляется субъекту ежечасно, ежедневно, еженедельно, раз в две недели, ежемесячно, ежеквартально, раз в полгода или ежегодно.
44. Способ получения нуклеиновых кислот, где способ включает
(i) введение в пермиссивную клетку нуклеиновой кислоты, кодирующей вставку гетерологичной нуклеиновой кислоты, фланкированную по меньшей мере одной расщепленной самокомплементарной последовательностью, причем каждая самокомплементарная последовательность имеет сайт оперативного концевого разрешения и связывающий элемент репликационного белка по типу разматывающегося рулона, где самокомплементарная последовательность расщепляется поперечной последовательностью с образованием двух противоположных продольно-симметричных «петель-на-стебле», где каждая из противоположных продольно-симметричных «петель-на-стебле» имеет часть «стебель» длиной в диапазоне от 5 до 15 пар оснований и часть «петля», имеющую от 2 до 5 неспаренных дезоксирибонуклеотидов; и
(ii) поддержание пермиссивной клетки в условиях, при которых репликационный белок по типу разматывающегося рулона в пермиссивной клетке инициирует продуцирование множественных копий нуклеиновой кислоты, причем пермиссивная клетка не экспрессирует вирусные капсидные белки, способные упаковывать репликативные копии нуклеиновой кислоты в вирусную частицу.
45. Способ по п. 44, дополнительно включающий стадию очистки множественных копий нуклеиновой кислоты.
46. Способ по п. 44, где стадия очистки включает контактирование нуклеиновой кислоты со смолой на силикагеле.
47. Способ по любому одному из пп. 44-46, где репликационный белок по типу разматывающегося рулона выбирается из группы, состоящей из AAV78, AAV52, AAV Rep68 и AAV Rep 40.
48. Способ по любому одному из пп. 44-47, где пермиссивная клетка не является клеткой млекопитающего.
49. Способ по п. 48, где пермиссивная клетка представляет собой линию клеток насекомых, линию клеток дрожжей или линию клеток бактерий.
50. Способ по любому одному из пп. 44-49, где репликационный белок по типу разматывающегося рулона кодируется вектором вируса-помощника, необязательно где вектор вируса-помощника представляет собой вектор вируса множественного ядерного полиэдроза Autograph californica (AcMNPV) или векторы экспрессии бакуловируса (BEV).
51. Композиция, содержащая i) мономерную нуклеиновую кислоту, содержащую одну субъединицу, и ii) по меньшей мере одну мультимерную нуклеиновую кислоту, содержащую две или более субъединицы, где каждая субъединица мономерной нуклеиновой кислоты и по меньшей мере одной мультимерной нуклеиновой кислоты содержит вставку гетерологичной нуклеиновой кислоты, фланкированную расщепленными самокомплементарными последовательностями, причем каждая самокомплементарная последовательность имеет сайт оперативного концевого разрешения и связывающий элемент репликационного белка по типу разматывающегося рулона, где одна самокомплементарная последовательность расщепляется поперечной последовательностью с образованием двух противоположных, продольно-симметричных «петель-на-стебле», а другая из самокомплементарных последовательностей расщепляется усеченной поперечной последовательностью.
52. Композиция по п. 51, в которой по меньшей мере одна мультимерная нуклеиновая кислота содержит две субъединицы.
53. Композиция по п. 52, в которой две субъединицы соединены в конфигурацию хвост-к-хвосту.
54. Способ получения нуклеиновых кислот, где способ включает
(i) введение в пермиссивную клетку нуклеиновой кислоты, кодирующей вставку гетерологичной нуклеиновой кислоты, фланкированную по меньшей мере одной расщепленной самокомплементарной последовательностью, причем каждая самокомплементарная последовательность имеет сайт оперативного концевого разрешения и связывающий элемент репликационного белка по типу разматывающегося рулона, где одна самокомплементарная последовательность определена как расщепленная поперечной последовательностью с образованием двух противоположных продольно-симметричных «петель-на-стебле», где другая из самокомплементарных последовательностей определена как расщепленная усеченной поперечной последовательностью, где пермисивная клетка экспрессирует репликационный белок по типу разматывающегося рулона, но не экспрессирует вирусные капсидные белки, способные упаковывать репликативные копии нуклеиновой кислоты в вирусную частицу; и
(ii) поддержание пермиссивной клетки в условиях, при которых репликационный белок по типу разматывающегося рулона в пермиссивной клетке реплицирует нуклеиновую кислоту.
55. Способ по п. 54, дополнительно включающий выделение реплицированной нуклеиновой кислоты из пермиссивной клетки.
56. Способ анализа нуклеиновой кислоты, где способ включает
i) получение препарата нуклеиновой кислоты, содержащего продукты репликации нуклеиновой кислоты, выделенные из пермиссивной клетки, где пермиссивная клетка содержит нуклеиновую кислоту, содержащую вставку гетерологичной нуклеиновой кислоты, фланкированную расщепленными самокомплементарными последовательностями, причем каждая самокомплементарная последовательность имеет сайт оперативного концевого разрешения и связывающий элемент репликационного белка по типу разматывающегося рулона, где одна самокомплементарная последовательность расщепляется поперечной последовательностью с образованием двух противоположных продольно-симметричных «петель-на-стебле», где другая из самокомплементарных последовательностей расщепляется усеченной поперечной последовательностью, где пермиссивная клетка экспрессирует репликационный белок по типу разматывающегося рулона, но не экспрессирует вирусные капсидные белки, способные упаковывать репликативные копии нуклеиновой кислоты в вирусную частицу, и где репликационный белок по типу разматывающегося рулона связывается со связывающим элементом репликационного белка по типу разматывающегося рулона нуклеиновой кислоты и реплицирует нуклеиновую кислоту с получением продуктов репликации нуклеиновой кислоты; и
ii) определение физико-химического свойства одного или нескольких продуктов репликации.
57. Способ по п. 56, в котором физико-химическое свойство представляет собой нуклеотидную последовательность одной или каждой самокомплементарной последовательности.
58. Способ по п. 56, в котором физико-химическое свойство представляет собой степень мультимеризации одного или нескольких продуктов репликации.
59. Способ по п. 56, в котором физико-химическое свойство представляет собой стехиометрию мономерных и/или мультимерных форм продукта репликации в препарате нуклеиновой кислоты.
60. Способ по п. 56, в котором физико-химическое свойство представляет собой восприимчивость одного или нескольких продуктов репликации к перевариванию рестрикционной эндонуклеазой.
61. Способ по п. 56, в котором физико-химическое свойство представляет собой полярность мономеров в димерной форме продукта репликации, где полярность представляет собой «голова-к-голове», «голова-к-хвосту» или «хвост-к-хвосту».
62. Способ по п. 56, в котором физико-химическое свойство представляет собой молекулярную массу одного или нескольких продуктов репликации или фрагмента продукта репликации.
63. Способ по п. 62, в котором молекулярная масса является массой фрагмента одного или более продуктов репликации, который содержит одну или каждую самокомплементарную последовательность.
64. Способ по п. 62 или 63, в котором молекулярная масса определяется на основе электрофоретической подвижности.
65. Способ по п. 62 или 63, в котором молекулярная масса определяется на основе масс-спектроскопии.
66. Способ по п. 62, в котором молекулярная масса является массой фрагмента одного или нескольких продуктов репликации и где до определения молекулярной массы фрагмент амплифицируют по реакции, включающей удлинение праймера полимеразой.
67. Способ по п. 62, в котором реакция, включающая удлинение праймера, представляет собой полимеразную цепную реакцию.
68. Способ получения нуклеиновых кислот, где способ включает
(i) введение в пермиссивную клетку нуклеиновой кислоты, содержащей вставку гетерологичной нуклеиновой кислоты, фланкированную по меньшей мере одной расщепленной самокомплементарной последовательностью, причем каждая самокомплементарная последовательность имеет сайт оперативного концевого разрешения и связывающий элемент репликационного белка по типу разматывающегося рулона, где самокомплементарная последовательность расщепляется поперечной последовательностью с образованием двух противоположных продольно-симметричных «петель-на-стебле», где другая из самокомплементарных последовательностей расщепляется усеченной поперечной последовательностью, где пермисивная клетка экспрессирует репликационный белок по типу разматывающегося рулона, но не экспрессирует вирусные капсидные белки, способные упаковывать репликативные копии нуклеиновой кислоты в вирусную частицу; и
(ii) поддержание пермиссивной клетки в условиях, при которых репликационный белок по типу разматывающегося рулона в пермиссивной клетке реплицирует нуклеиновую кислоту.
69. Способ по п. 68, дополнительно включающий выделение реплицированной нуклеиновой кислоты из пермиссивной клетки.
RU2018134295A 2016-03-03 2017-03-03 Линейная дуплексная днк с закрытым концом для невирусного переноса генов RU2752882C2 (ru)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662303047P 2016-03-03 2016-03-03
US62/303,047 2016-03-03
US201662394720P 2016-09-14 2016-09-14
US62/394,720 2016-09-14
US201662406913P 2016-10-11 2016-10-11
US62/406,913 2016-10-11
PCT/US2017/020828 WO2017152149A1 (en) 2016-03-03 2017-03-03 Closed-ended linear duplex dna for non-viral gene transfer

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2018134295A true RU2018134295A (ru) 2020-04-06
RU2018134295A3 RU2018134295A3 (ru) 2020-06-29
RU2752882C2 RU2752882C2 (ru) 2021-08-11

Family

ID=59743259

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018134295A RU2752882C2 (ru) 2016-03-03 2017-03-03 Линейная дуплексная днк с закрытым концом для невирусного переноса генов

Country Status (18)

Country Link
US (2) US11066679B2 (ru)
EP (2) EP3423110B1 (ru)
JP (3) JP6994140B2 (ru)
KR (1) KR102336362B1 (ru)
CN (2) CN109195636B (ru)
AU (1) AU2017228413A1 (ru)
CA (1) CA3014683A1 (ru)
DK (1) DK3423110T3 (ru)
ES (1) ES2898337T3 (ru)
HR (1) HRP20211697T1 (ru)
IL (2) IL302398A (ru)
LT (1) LT3423110T (ru)
MX (1) MX2018010633A (ru)
PT (1) PT3423110T (ru)
RU (1) RU2752882C2 (ru)
SG (2) SG11201806663TA (ru)
WO (1) WO2017152149A1 (ru)
ZA (1) ZA201806544B (ru)

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2020109343A (ru) 2014-11-05 2020-03-17 Вояджер Терапьютикс, Инк. Полинуклеотиды aadc для лечения болезни паркинсона
DK3218386T3 (da) 2014-11-14 2021-06-07 Voyager Therapeutics Inc Modulatorisk polynukleotid
MX2017006216A (es) 2014-11-14 2018-08-29 Voyager Therapeutics Inc Composiciones y métodos para tratar la esclerosis lateral amiotrófica (ela).
EP3230441A4 (en) 2014-12-12 2018-10-03 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the production of scaav
IL302748A (en) 2016-05-18 2023-07-01 Voyager Therapeutics Inc modulatory polynucleotides
JOP20190269A1 (ar) 2017-06-15 2019-11-20 Voyager Therapeutics Inc بولي نوكليوتيدات aadc لعلاج مرض باركنسون
KR20200051708A (ko) * 2017-09-08 2020-05-13 제너레이션 바이오 컴퍼니 비-바이러스성 캡시드-비함유 dna 벡터의 지질 나노입자 제형
EP3678710A4 (en) * 2017-09-08 2021-06-09 Generation Bio Co. MODIFIED CLOSED-END DNA (CEDNA)
US11680296B2 (en) * 2017-10-16 2023-06-20 Massachusetts Institute Of Technology Mycobacterium tuberculosis host-pathogen interaction
BR112020009858A2 (pt) * 2017-12-06 2020-11-17 Generation Bio Co. edição de genes com o uso de um dna modificado com extremidades fechadas (cedna)
WO2019126222A1 (en) * 2017-12-18 2019-06-27 Spark Therapeutics, Inc. Adeno-associated virus (aav) vector lipid nanoparticle compositions and methods of use
JP2021511047A (ja) * 2018-01-19 2021-05-06 ジェネレーション バイオ カンパニー 無細胞合成から得ることができる閉端ＤＮＡベクターおよびｃｅＤＮＡベクターを得るためのプロセス
BR112020016288A2 (pt) * 2018-02-14 2020-12-15 Generation Bio Co. Vetores de dna não virais e usos dos mesmos para produção de anticorpos e proteínas de fusão
AU2019225937A1 (en) * 2018-02-22 2020-08-13 Generation Bio Co. Controlled expression of transgenes using close-ended DNA (ceDNA) vectors
SG11202007577QA (en) * 2018-03-02 2020-09-29 Generation Bio Co Closed-ended dna (cedna) vectors for insertion of transgenes at genomic safe harbors (gsh) in humans and murine genomes
CN117757842A (zh) * 2018-03-15 2024-03-26 星际治疗有限公司 合成dna运载体及使用方法
WO2019191109A1 (en) * 2018-03-28 2019-10-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Microrna inhibitors and their use in treating epiretinal membranes
WO2019226650A1 (en) 2018-05-23 2019-11-28 Modernatx, Inc. Delivery of dna
WO2019237391A1 (zh) * 2018-06-16 2019-12-19 深圳市博奥康生物科技有限公司 CRISPR/Cas9 靶向敲除人 TXGP1 基因及其特异性 gRNA
WO2019237383A1 (zh) * 2018-06-16 2019-12-19 深圳市博奥康生物科技有限公司 用于人 tnfsf18 基因编辑的修饰载体、其制备方法及应用
CN112639110A (zh) * 2018-06-22 2021-04-09 阿斯克肋匹奥生物制药公司 用于基因递送以在细胞内持续存在的载体
WO2020037254A1 (en) * 2018-08-17 2020-02-20 City Of Hope Compounds of chemically modified oligonucleotides and methods of use thereof
KR20210090619A (ko) * 2018-11-09 2021-07-20 제너레이션 바이오 컴퍼니 대칭인 변형된 역말단반복을 포함하는 변형된 폐쇄형 DNA(ceDNA)
CN113412331A (zh) * 2019-01-24 2021-09-17 世代生物公司 闭合端DNA(ceDNA)及其在减少与基因或核酸疗法相关的免疫应答的方法中的用途
CA3129321A1 (en) * 2019-02-15 2020-08-20 Generation Bio Co. Modulation of rep protein activity in closed-ended dna (cedna) production
CA3131130A1 (en) * 2019-03-06 2020-09-10 Generation Bio Co. Non-active lipid nanoparticles with non-viral, capsid free dna
JP2022523806A (ja) * 2019-03-06 2022-04-26 ジェネレーション バイオ カンパニー 閉端ｄｎａ（ｃｅｄｎａ）および免疫調節化合物
KR20210149702A (ko) * 2019-03-13 2021-12-09 제너레이션 바이오 컴퍼니 비바이러스성 dna 벡터 및 페닐알라닌 히드록실라아제(pah) 치료제 발현을 위한 이의 용도
SG11202109850SA (en) * 2019-03-13 2021-10-28 Generation Bio Co Non-viral dna vectors and uses thereof for expressing fviii therapeutics
WO2020206385A1 (en) * 2019-04-05 2020-10-08 Earli Inc. Improved methods and compositions for synthetic biomarkers
CA3151464A1 (en) 2019-09-18 2021-03-25 Bruce C. SCHNEPP Synthetic dna vectors and methods of use
US20210330759A1 (en) * 2020-04-22 2021-10-28 The Cleveland Clinic Foundation Methods and compositions for treating cytokine storm, ards, and acute lung injury using beta-glucocerebrosidase
WO2021247507A1 (en) 2020-06-01 2021-12-09 Modernatx, Inc. Phenylalanine hydroxylase variants and uses thereof
JP2023535632A (ja) 2020-07-27 2023-08-18 アンジャリウム バイオサイエンシズ エージー Ｄｎａ分子の組成物、その作製方法、及びその使用方法
JP2023538666A (ja) 2020-08-23 2023-09-08 バイオベラティブ セラピューティクス インコーポレイテッド 閉端ＤＮＡ（ｃｅＤＮＡ）の改善された製造のための改変バキュロウイルス系
EP4333906A1 (en) * 2021-05-07 2024-03-13 Generation Bio Co. Lyophilized non-viral dna vector compositions and uses thereof
JP2024517281A (ja) * 2021-05-07 2024-04-19 ジェネレーション バイオ カンパニー ワクチン送達のための非ウイルスｄｎａベクター
EP4337177A1 (en) 2021-05-11 2024-03-20 Modernatx, Inc. Non-viral delivery of dna for prolonged polypeptide expression in vivo
AU2022334711A1 (en) 2021-08-23 2024-04-04 Bioverativ Therapeutics Inc. Baculovirus expression system
WO2023028004A1 (en) * 2021-08-23 2023-03-02 Avirmax, Inc. Compositions and methods for transgene expression

Family Cites Families (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4683195A (en) * 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US5549910A (en) 1989-03-31 1996-08-27 The Regents Of The University Of California Preparation of liposome and lipid complex compositions
US5252334A (en) 1989-09-08 1993-10-12 Cygnus Therapeutic Systems Solid matrix system for transdermal drug delivery
US5316908A (en) * 1990-07-13 1994-05-31 Life Technologies, Inc. Size markers for electrophoretic analysis of DNA
JP3218637B2 (ja) 1990-07-26 2001-10-15 大正製薬株式会社 安定なリポソーム水懸濁液
JP2958076B2 (ja) 1990-08-27 1999-10-06 株式会社ビタミン研究所 遺伝子導入用多重膜リポソーム及び遺伝子捕捉多重膜リポソーム製剤並びにその製法
US5399363A (en) 1991-01-25 1995-03-21 Eastman Kodak Company Surface modified anticancer nanoparticles
US5543158A (en) 1993-07-23 1996-08-06 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable injectable nanoparticles
DE69433425T2 (de) * 1993-08-30 2004-10-07 Promega Corp Zusammensetzungen und verfahren zur reinigung von nukleinsäuren
US5741516A (en) 1994-06-20 1998-04-21 Inex Pharmaceuticals Corporation Sphingosomes for enhanced drug delivery
US5795587A (en) 1995-01-23 1998-08-18 University Of Pittsburgh Stable lipid-comprising drug delivery complexes and methods for their production
US5697899A (en) 1995-02-07 1997-12-16 Gensia Feedback controlled drug delivery system
IE80468B1 (en) 1995-04-04 1998-07-29 Elan Corp Plc Controlled release biodegradable nanoparticles containing insulin
US5738868A (en) 1995-07-18 1998-04-14 Lipogenics Ltd. Liposome compositions and kits therefor
US5656016A (en) 1996-03-18 1997-08-12 Abbott Laboratories Sonophoretic drug delivery system
US5797898A (en) 1996-07-02 1998-08-25 Massachusetts Institute Of Technology Microchip drug delivery devices
US5783208A (en) 1996-07-19 1998-07-21 Theratech, Inc. Transdermal drug delivery matrix for coadministering estradiol and another steroid
US7098320B1 (en) 1996-07-29 2006-08-29 Nanosphere, Inc. Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses therefor
US5779708A (en) 1996-08-15 1998-07-14 Cyberdent, Inc. Intraosseous drug delivery device and method
JP2001500015A (ja) 1996-09-06 2001-01-09 トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア Ｔ７ポリメラーゼを利用する組換えアデノ随伴ウイルスの誘導可能な製造方法
US6177403B1 (en) 1996-10-21 2001-01-23 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions, methods, and apparatus for delivery of a macromolecular assembly to an extravascular tissue of an animal
WO2000034343A1 (en) 1998-12-04 2000-06-15 Mosaic Technologies, Inc. Method for the immobilization of oligonucleotides
US8137695B2 (en) 2006-08-18 2012-03-20 Arrowhead Madison Inc. Polyconjugates for in vivo delivery of polynucleotides
DE10066104A1 (de) 2000-09-08 2003-01-09 Medigene Ag Wirtszellen zur Verpackung von rekombinantem Adeno-assoziiertem Virus (rAAV), Verfahren zu ihrer Herstellung und deren Verwendung
US8241622B2 (en) * 2001-07-13 2012-08-14 University Of Iowa Research Foundation Adeno-associated virus vectors with intravector heterologous terminal palindromic sequences
AU2007303205A1 (en) 2006-10-03 2008-04-10 Tekmira Pharmaceuticals Corporation Lipid containing formulations
CA2910760C (en) 2007-12-04 2019-07-09 Muthiah Manoharan Targeting lipids
US8507455B2 (en) 2007-12-04 2013-08-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Folate conjugates
TR201811076T4 (tr) 2009-06-10 2018-08-27 Arbutus Biopharma Corp Geliştirilmiş lipit formulasyonu.
EP2640400A4 (en) 2010-11-19 2016-01-20 Sirna Therapeutics Inc POLYMERIC POLYMERS (AMIDE) FOR THE ADMINISTRATION OF OLIGONUCLEOTIDES
EP2500434A1 (en) * 2011-03-12 2012-09-19 Association Institut de Myologie Capsid-free AAV vectors, compositions, and methods for vector production and gene delivery

Also Published As

Publication number Publication date
CA3014683A1 (en) 2017-09-08
AU2017228413A1 (en) 2018-08-23
SG11201806663TA (en) 2018-09-27
IL261524B1 (en) 2023-06-01
EP3423110A4 (en) 2019-09-11
MX2018010633A (es) 2019-06-13
EP3423110B1 (en) 2021-08-11
IL261524B2 (en) 2023-10-01
SG10201913688TA (en) 2020-03-30
JP7193096B2 (ja) 2022-12-20
DK3423110T3 (da) 2021-11-15
EP3957331A1 (en) 2022-02-23
IL302398A (en) 2023-06-01
RU2752882C2 (ru) 2021-08-11
PT3423110T (pt) 2021-11-09
US20220195456A9 (en) 2022-06-23
EP3423110A1 (en) 2019-01-09
KR102336362B1 (ko) 2021-12-08
LT3423110T (lt) 2021-12-27
CN115287301A (zh) 2022-11-04
ES2898337T3 (es) 2022-03-07
US20190032083A1 (en) 2019-01-31
WO2017152149A1 (en) 2017-09-08
ZA201806544B (en) 2022-07-27
JP2019506889A (ja) 2019-03-14
CN109195636B (zh) 2022-07-05
IL261524A (en) 2018-10-31
CN109195636A (zh) 2019-01-11
JP6994140B2 (ja) 2022-02-03
HRP20211697T1 (hr) 2022-02-04
US11066679B2 (en) 2021-07-20
RU2018134295A3 (ru) 2020-06-29
US20210355507A1 (en) 2021-11-18
JP2022025123A (ja) 2022-02-09
KR20180117171A (ko) 2018-10-26
JP2023024489A (ja) 2023-02-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2018134295A (ru) Линейная дуплексная днк с закрытым концом для невирусного переноса генов
Lee et al. NP and L proteins of lymphocytic choriomeningitis virus (LCMV) are sufficient for efficient transcription and replication of LCMV genomic RNA analogs
Hirochika et al. A linear DNA plasmid from Streptomyces rochei with an inverted terminal repetition of 614 base pairs.
Singh et al. A nuclear factor that binds to a conserved sequence motif in transcriptional control elements of immunoglobulin genes
EP2152889B1 (en) Vectors and methods for genetic immunization
CN101426535B (zh) Dna病毒微小rna及其抑制方法
Rodriguez et al. Genes homologous to ubiquitin-conjugating proteins and eukaryotic transcription factor SII in African swine fever virus
FI3872085T3 (fi) Esimuotoiset virussekvenssit ja niiden käytöt
Flick et al. Functional analysis of the noncoding regions of the Uukuniemi virus (Bunyaviridae) RNA segments
JP2013507935A5 (ru)
Ikegami et al. Characterization of Rift Valley fever virus transcriptional terminations
RU2020100919A (ru) СПОСОБ НОКАУТИРОВАНИЯ ГЕНА-МИШЕНИ В T-КЛЕТКЕ IN VITRO И crRNA, ПРИМЕНЯЕМАЯ В ДАННОМ СПОСОБЕ
Mir et al. The triplet repeats of the Sin Nombre hantavirus 5′ untranslated region are sufficient in cis for nucleocapsid-mediated translation initiation
Lymperopoulos et al. Specific binding of Bluetongue virus NS2 to different viral plus-strand RNAs
CN112063622A (zh) I型ifnar功能缺失的细胞系的构建方法及其应用
KR950012759B1 (ko) 특정 염기 배열을 포함하는 약독화(弱毒化)된 홍역 백신 바이러스주 및 그의 절대적 동정법
Brammar et al. The nucleotide sequence of the amiE gene of Pseudomonas aeruginosa
CN113322282A (zh) 稳定表达NS1蛋白的犬肾细胞系MDCK-pCDH-NS1及其构建方法和应用
Gudima et al. Reconstitution in cultured cells of replicating HDV RNA from pairs of less than full-length RNAs
Bauernfeind et al. An unexpected role for RNA in the recognition of DNA by the innate immune system
EP4223881A1 (en) Nucleic acid delivery method and system
Tsurumi EBV replication enzymes
Neuhausser et al. Screening Method for CRISPR/Cas9 Inhibition of a Human DNA Virus: Herpes Simplex Virus
CN109266684B (zh) 一种构建病原感染敏感性动物模型的方法
Roller et al. Cellular proteins specifically bind single-and double-stranded DNA and RNA from the initiation site of a transcript that crosses the origin of DNA replication of herpes simplex virus 1.

Legal Events

Date Code Title Description
HZ9A Changing address for correspondence with an applicant