RU2018130525A - РЕКОМБИНАНТНЫЕ Fc-МУЛЬТИМЕРЫ IgG - Google Patents

Claims (32)

1. Гексамерный белок, содержащий шесть слитых Fc-мономеров, где каждый слитый Fc-мономер содержит две полипептидные цепи SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 или варианты SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2 с не более чем 5 консервативными аминокислотными заменами, где белок не содержит полипептид Fab.

2. Гексамерный белок по п.1, где белок связывается с C1q-компонентом комплемента, и где связывание белка с C1q не индуцирует активацию полного каскада классического пути комплемента.

3. Гексамерный белок по п.2, где связывание белка с C1q приводит к расщеплению С4, но не индуцирует расщепление большей части С2.

4. Гексамерный белок по п.2 или 3, где белок не индуцирует расщепление С2.

5. Гексамерный белок по любому из пп.2-4, где белок ингибирует расщепление большей части С2, индуцированное термогрегированным IgG, инкубированным с нормальной человеческой сывороткой.

6. Гексамерный белок по п.2, где связывание белка с C1q не приводит к образованию C3-конвертазы.

7. Гексамерный белок по любому из пп.2-6, где белок в концентрации 1 мг/мл, инкубированный с цельной кровью, индуцирует продукцию менее 20% растворимого С5b-9 по сравнению с продукцией растворимого С5b-9, индуцированной термогрегированным IgG, инкубированным с цельной кровью.

8. Гексамерный белок по любому из пп.2-7, где белок, инкубированный с цельной кровью, индуцирует продукцию менее 10% растворимого C5b-9 по сравнению с продукцией растворимого C5b-9, индуцированной термоагрегированным IgG, инкубированным с цельной кровью.

9. Гексамерный белок по любому из пп.2-8, где белок ингибирует продукцию С5b-9.

10. Гексамерный белок по любому из пп.2-9, где белок ингибирует продукцию С5b-9, индуцированную термоагрегированным IgG, инкубированным с цельной крови.

11. Гексамерный белок по любому из пп.2-9, где белок активирует классический путь комплемента менее чем на 20% по сравнению с нормальной человеческой сывороткой, активированной термогрегированным IgG.

12. Гексамерный белок по любому из пп.1-11, где введение белка в дозе 200 мг/кг на сутки 6 на мышиной модели артрита, индуцированного антителами против коллагена, вызывает:

а) снижение балла клиническоой оценки в период 7-14 суток;

b) снижение среднего балла клинической оценки, рассчитанного за период 7-14 суток;

с) уменьшение количества клеток CD45+, выделенных из коленных суставов на сутки 8; или

d) снижение балла гистологического анализа голеностопного сустава на сутки 8 или 14, где мышей, которым вводили гексамерный белок, сравнивают с необработанными мышами с артритом.

13. Гексамерный белок по любому из пп.1-12, где введение белка в дозе 200 мг/кг на сутки 6 на мышиной модели артрита, индуцированного антителами против коллагена, вызывает:

а) более чем 50% снижение балла клинической оценки в период 7-14 суток;

b) более чем 50% снижение среднего балла клинической оценки, рассчитанного за период 7-14 суток;

с) более чем 50% уменьшение числа клеток CD45+, выделенных из коленных суставов на сутки 8; или

d) более чем 25% снижение балла гистологического анализа голеностопного сустава на сутки 8 и/или более чем 50% снижение балла гистологического анализа голеностопного сустава на сутки 14, где мышей, которым вводили гексамерный белок, сравнивают с необработанными мышами с артритом.

14. Гексамерный белок по пп.1-13, где белок ингибирует лизис опсонизированных овечьих эритроцитов в анализе гемолитической активности классического пути комплемента по сравнению с рекомбинантным Fc-мономером, содержащим два полипептида SEQ ID NO: 3.

15. Гексамерный белок по п.14, где белок в концентрации 0,5 мг/мл ингибирует лизис опсонизированных овечьих эритроцитов в анализе гемолитической активности классического пути комплемента более чем на 70% по сравнению с рекомбинантным Fc-мономером, содержащим два полипептида SEQ ID NO: 3.

16. Гексамерный белок по любому из пп.1-15, где белок индуцирует снижение экспрессии FcγRII или экспрессии FcγRIII на нейтрофилах или моноцитах.

17. Гексамерный белок по любому из пп.1-16, где введение белка в дозе 200 мг/кг на сутки 6 на мышиной модели артрита, индуцированного антителами против коллагена, вызывает более чем 50% снижение уровня FcγRII или уровня FcγRIII на нейтрофилах или моноцитах на сутки 8, где мышей, которым вводили гексамерный белок, сравнивают с необработанными мышами с артритом.

18. Гексамерный белок по любому из пп.1-17, где белок ингибирует повышающую регуляцию C5aR (CD88) на моноцитах.

19. Гексамерный белок по любому из пп.1-18, где введение белка в дозе 200 мг/кг на сутки 6 на мышиной модели артрита, индуцированного антителами против коллагена, индуцирует снижение уровней CD64 на моноцитах на сутки 8, где мышей, которым вводили гексамерный белок, сравнивают с необработанными мышами с артритом.

20. Способ лечения аутоиммунного или воспалительного заболевания у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей гексамерный белок по пп.1-19.

21. Способ по п.20, где фармацевтическую композицию вводят внутривенным путем или путем, отличным от внутривенного пути.

22. Способ по п.21, где фармацевтическую композицию вводят подкожно.

23. Способ по любому из пп.20-22, где аутоиммунное или воспалительное заболевание выбрано из иммунной цитопении, синдрома Гийена-Барре, болезни Кавасаки, хронической воспалительной демиелинизирующей полинейропатии, миастении гравис, воспалительной невропатии, нейромиелита зрительного нерва, других аутоиммунных каналопатий, аутоиммунной эпилепсии, дерматомиозита, полимиозита, пемфигуса, пемфигоида, системной красной волчанки, трансплантации, реперфузионного повреждения и ревматоидного артрита.

24. Способ по любому из пп.20-23, где фармацевтическая композиция вводится в дозе от 10 мг/кг до 1000 мг/кг.