RU2017120211A - Мутантные микроорганизмы, устойчивые к гибели под действием лактозы - Google Patents
Мутантные микроорганизмы, устойчивые к гибели под действием лактозы Download PDFInfo
- Publication number
- RU2017120211A RU2017120211A RU2017120211A RU2017120211A RU2017120211A RU 2017120211 A RU2017120211 A RU 2017120211A RU 2017120211 A RU2017120211 A RU 2017120211A RU 2017120211 A RU2017120211 A RU 2017120211A RU 2017120211 A RU2017120211 A RU 2017120211A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lactose
- specified
- microorganism
- transporter
- sequence
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/24—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Enterobacteriaceae (F), e.g. Citrobacter, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella, Yersinia
- C07K14/245—Escherichia (G)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/80—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi
- C12N15/81—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi for yeasts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
- C12N9/1051—Hexosyltransferases (2.4.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/12—Disaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y204/00—Glycosyltransferases (2.4)
- C12Y204/01—Hexosyltransferases (2.4.1)
- C12Y204/01022—Lactose synthase (2.4.1.22)
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Claims (18)
1. Способ получения микроорганизмов, устойчивых к явлению гибели под действием лактозы, выращенных в окружении, в котором лактоза комбинируется с другим источником углерода, где способ включает:
a. мутирование экспрессии лактозного транспортера в микроорганизмах, где указанная мутация приводит к экспрессии указанного лактозного транспортера,
b. выращивание мутированных микроорганизмов на среде, включающей источник углерода, отличный от лактозы,
c. добавление лактозы к указанной среде в процессе роста указанных мутированных микроорганизмов, и
d. отбор микроорганизмов, устойчивых к явлению гибели под действием лактозы, растущих на указанной среде, включающей лактозу, которые сохраняют, по меньшей мере, 50% от уровня транспорта лактозы в клетку, достигаемого с экспрессионной кассетой дикого типа указанного лактозного транспортера.
2. Способ по п. 1, где стадию а) осуществляют путем введения гетерологичного промотора перед эндогенным или экзогенным геном лактозного транспортера, и/или путем мутирования нетранслируемой области перед кодирующей последовательностью, которая содержит последовательность связывания рибосомы или последовательность Козак, и/или путем модифицирования частоты использования кодонов эндогенного гена лактозного транспортера.
3. Способ по п. 2, где введение гетерологичного промотора перед эндогенным или экзогенным геном лактозного транспортера осуществляют за счет а) делеции эндогенных лактозных транспортеров из генома и введения их в другой участок в геноме указанного микроорганизма, или b) за счет введения гетерологичного промотора перед эндогенными лактозными транспортерами, или с) за счет нокаута эндогенного лактозного промотора и введения гетерологичного промотора в тот же участок генома указанного микроорганизма.
4. Способ по пп. 1-3, где указанный экспрессированный лактозный транспортер обнаруживают с помощью трансляционного связывания с репортерным геном и/или через связывание с аптамером.
5. Способ по пп. 1-4, где указанный экспрессированный лактозный транспортер обнаруживают посредством генетических конструкций, приведенных в SEQ ID n° 2, 3, 4 и/или 5.
6. Способ по пп. 1-5, где указанный лактозный транспортер представляет собой лактозную пермеазу.
7. Способ по пп. 1-6, где указанный микроорганизм представляет собой бактериальную, дрожжевую или грибную клетку.
8. Последовательности промотора, последовательности нетранслируемой области перед кодирующей последовательностью, которые содержат последовательности связывания рибосомы или последовательности Козак, и/или последовательности лактозной пермеазы, приводящие к экспрессии лактозного транспортера, которые не приводят к фенотипу гибели под действием лактозы, и которые получают способом по пп. 1-7.
9. Микроорганизм, устойчивый к явлению гибели под действием лактозы, выращенный в окружении, в котором лактоза комбинируется с другим (другими) источником (источниками) углерода, и получаемый способом по пп. 1-7.
10. Микроорганизм по п. 9, содержащий гетерологичную последовательность перед геном лактозного транспортера, приведенную в SEQ ID N° 1, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56 или 57.
11. Микроорганизм по пп. 9-10, в котором гены, кодирующие ферменты из путей деградации лактозы и/или галактозы, являются менее функциональными или нефункциональными.
12. Применение микроорганизма и/или последовательности по пп. 9-11 и/или 8, соответственно, для производства специальных продуктов на основе лактозы и/или галактозы.
13. Применение микроорганизма и/или последовательности по п. 12, где указанные специальные продукты на основе лактозы представляют собой специальные углеводы, гликолипиды и галактозилированные соединения.
14. Применение микроорганизма по п. 13, где указанные специальные углеводы представляют собой 2-фукозиллактозу, или 2'-фукозиллактозу, или 3-фукозиллактозу, или 2',3-дифукозиллактозу, или лакто-N-триозу, или лакто-N-тетраозу, или лакто-N-тетраозу, или 3'-сиалиллактозу, или 6'-сиалиллактозу.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP14193151.9 | 2014-11-14 | ||
| EP14193151 | 2014-11-14 | ||
| PCT/EP2015/076449 WO2016075243A1 (en) | 2014-11-14 | 2015-11-12 | Mutant microorganisms resistant to lactose killing |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021109889A Division RU2021109889A (ru) | 2014-11-14 | 2015-11-12 | Мутантные микроорганизмы, устойчивые к гибели под действием лактозы |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017120211A true RU2017120211A (ru) | 2018-12-14 |
| RU2017120211A3 RU2017120211A3 (ru) | 2019-04-25 |
| RU2746410C2 RU2746410C2 (ru) | 2021-04-13 |
Family
ID=51893928
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021109889A RU2021109889A (ru) | 2014-11-14 | 2015-11-12 | Мутантные микроорганизмы, устойчивые к гибели под действием лактозы |
| RU2017120211A RU2746410C2 (ru) | 2014-11-14 | 2015-11-12 | Мутантные микроорганизмы, устойчивые к гибели под действием лактозы |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021109889A RU2021109889A (ru) | 2014-11-14 | 2015-11-12 | Мутантные микроорганизмы, устойчивые к гибели под действием лактозы |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US10858684B2 (ru) |
| EP (1) | EP3218509B1 (ru) |
| JP (2) | JP6765372B2 (ru) |
| KR (1) | KR102579346B1 (ru) |
| CN (2) | CN107075506B (ru) |
| AU (2) | AU2015345073B9 (ru) |
| BR (1) | BR112017006295B1 (ru) |
| CA (1) | CA2958786A1 (ru) |
| DK (1) | DK3218509T3 (ru) |
| RU (2) | RU2021109889A (ru) |
| SG (1) | SG11201701585VA (ru) |
| WO (1) | WO2016075243A1 (ru) |
Families Citing this family (35)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101731263B1 (ko) * | 2016-04-25 | 2017-05-02 | 서울대학교 산학협력단 | 코리네박테리움 글루타미쿰을 이용한 2'-푸코실락토오스의 생산방법 |
| PL3315610T3 (pl) | 2016-10-29 | 2021-06-14 | Jennewein Biotechnologie Gmbh | Sposób wytwarzania fukozylowanych oligosacharydów |
| AU2017385601B2 (en) | 2016-12-27 | 2022-08-25 | Inbiose N.V. | In vivo synthesis of sialylated compounds |
| WO2019106147A1 (en) * | 2017-12-01 | 2019-06-06 | Nestec S.A. | Human milk fortifier composition |
| US11913046B2 (en) | 2018-04-23 | 2024-02-27 | Inbiose N.V. | Increasing export of 2'fucosyllactose from microbial cells through the expression of a heterologous nucleic acid |
| WO2019209245A1 (en) * | 2018-04-23 | 2019-10-31 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Increasing activity of 2' fucosyllactose transporters endogenous to microbial cells |
| US10519475B1 (en) * | 2018-11-21 | 2019-12-31 | Amyris, Inc. | Biosynthesis of compounds in yeast |
| KR20210107736A (ko) | 2018-12-18 | 2021-09-01 | 인바이오스 엔.브이. | 3-푸코실락토스 및 락토스 전환 α-1,3-푸코실트란스퍼라제 효소를 제조하는 방법 |
| CN109735479B (zh) * | 2019-01-30 | 2022-04-01 | 光明乳业股份有限公司 | 一种合成2’-岩藻糖基乳糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用 |
| JP2022541287A (ja) | 2019-07-19 | 2022-09-22 | インバイオス エン．フェー． | 宿主細胞におけるフコシルラクトースの産生 |
| JP2023506287A (ja) | 2019-12-17 | 2023-02-15 | インバイオス エン．フェー． | ラクトースを変換するアルファ－１，２－フコシルトランスフェラーゼ酵素 |
| EP4077678A1 (en) | 2019-12-18 | 2022-10-26 | Inbiose N.V. | Production of sialylated oligosaccharide in host cells |
| CA3171157A1 (en) | 2020-02-14 | 2021-08-19 | Inbiose N.V. | Production of glycosylated product in host cells |
| EP4103685A1 (en) | 2020-02-14 | 2022-12-21 | Inbiose N.V. | Glycominimized bacterial host cells |
| EP3954769A1 (en) | 2020-08-10 | 2022-02-16 | Inbiose N.V. | Production of oligosaccharide mixtures by a cell |
| WO2022034079A2 (en) | 2020-08-10 | 2022-02-17 | Inbiose N.V. | Process for purification of an oligosaccharide solution produced by cell cultivation or microbial fermentation |
| EP4192965A1 (en) | 2020-08-10 | 2023-06-14 | Inbiose N.V. | Method to produce a purified mixture of different oligosaccharides produced by cell cultivation or microbial fermentation |
| EP4192945A1 (en) | 2020-08-10 | 2023-06-14 | Inbiose N.V. | Cellular production of sialylated di- and/or oligosaccharides |
| CN116323927A (zh) | 2020-08-10 | 2023-06-23 | 因比奥斯公司 | 双糖及/或寡糖的细胞生产 |
| CN116261597A (zh) | 2020-08-10 | 2023-06-13 | 因比奥斯公司 | α-1,3糖基化形式的Fuc-a1,2-Gal-R的产生 |
| CN116710559A (zh) | 2020-12-18 | 2023-09-05 | 因比奥斯公司 | 变体蔗糖渗透酶多肽 |
| EP4019534A1 (en) | 2020-12-22 | 2022-06-29 | Chr. Hansen HMO GmbH | Microbial cells possessing a reduced lactose internalization for producing an oligosaccharide |
| EP4281577A1 (en) | 2021-01-20 | 2023-11-29 | Inbiose N.V. | Production of oligosaccharides comprising ln3 as core structure in host cells |
| EP4323507A2 (en) | 2021-04-16 | 2024-02-21 | Inbiose N.V. | Fermentative production |
| US20240294959A1 (en) | 2021-04-16 | 2024-09-05 | Inbiose N.V. | Cellular production of bioproducts |
| AU2022258874A1 (en) | 2021-04-16 | 2023-11-30 | Inbiose N.V. | Cellular production of sialylated di- and/or oligosaccharides |
| EP4370664A1 (en) | 2021-07-16 | 2024-05-22 | Inbiose N.V. | Lacto-n-biose converting fucosyltransferases |
| CN113881586B (zh) * | 2021-09-27 | 2023-03-10 | 四川大学 | 耐高温、耐高糖、耐高盐酿酒酵母菌株及构建方法和应用 |
| EP4448734A1 (en) | 2021-12-14 | 2024-10-23 | Inbiose N.V. | Production of alpha-1,3-fucosylated compounds |
| EP4448781A1 (en) | 2021-12-14 | 2024-10-23 | Inbiose N.V. | Production of alpha-1,4-fucosylated compounds |
| CN114645070B (zh) * | 2022-02-28 | 2022-12-20 | 北京焉支山科技有限公司 | 一种己糖-6-磷酸组合物的制备方法及其在化妆品中的应用 |
| WO2024017987A1 (en) | 2022-07-20 | 2024-01-25 | Inbiose N.V. | Production of oligosaccharides in host cells |
| WO2024165524A1 (en) | 2023-02-06 | 2024-08-15 | Inbiose N.V. | Production of a saccharide by a cell with reduced synthesis of lactobionic acid |
| WO2024165525A1 (en) | 2023-02-06 | 2024-08-15 | Inbiose N.V. | Production of a saccharide, lactobionic acid and/or glycosylated forms of lactobionic acid |
| WO2024165611A1 (en) | 2023-02-07 | 2024-08-15 | Inbiose N.V. | Production of a disaccharide and/or milk oligosaccharide by a cell with reduced synthesis of udp-glcnac |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5858752A (en) | 1995-06-07 | 1999-01-12 | The General Hospital Corporation | Fucosyltransferase genes and uses thereof |
| WO2007101862A1 (en) * | 2006-03-09 | 2007-09-13 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Method of producing sialylated oligosaccharides |
| WO2012112777A2 (en) * | 2011-02-16 | 2012-08-23 | Glycosyn LLC | Biosynthesis of human milk oligosaccharides in engineered bacteria |
| DK2791367T3 (da) * | 2011-12-16 | 2019-07-01 | Inbiose Nv | Mutante mikroorganismer til syntetisering af colansyre, mannosylerede og/eller fucosylerede oligosaccharider |
| CN102604849B (zh) * | 2012-03-23 | 2013-08-14 | 天津科技大学 | 一株高效利用乳糖生产燃料乙醇的酿酒酵母工程菌 |
| WO2014048439A1 (en) * | 2012-09-25 | 2014-04-03 | Glycom A/S | Glycoconjugate synthesis |
-
2015
- 2015-11-12 RU RU2021109889A patent/RU2021109889A/ru unknown
- 2015-11-12 CN CN201580053480.0A patent/CN107075506B/zh active Active
- 2015-11-12 US US15/505,809 patent/US10858684B2/en active Active
- 2015-11-12 EP EP15797912.1A patent/EP3218509B1/en active Active
- 2015-11-12 WO PCT/EP2015/076449 patent/WO2016075243A1/en active Application Filing
- 2015-11-12 KR KR1020177007250A patent/KR102579346B1/ko active IP Right Grant
- 2015-11-12 RU RU2017120211A patent/RU2746410C2/ru active
- 2015-11-12 DK DK15797912.1T patent/DK3218509T3/da active
- 2015-11-12 AU AU2015345073A patent/AU2015345073B9/en active Active
- 2015-11-12 SG SG11201701585VA patent/SG11201701585VA/en unknown
- 2015-11-12 BR BR112017006295-0A patent/BR112017006295B1/pt active IP Right Grant
- 2015-11-12 JP JP2017525844A patent/JP6765372B2/ja active Active
- 2015-11-12 CN CN202111280441.8A patent/CN114015714A/zh active Pending
- 2015-11-12 CA CA2958786A patent/CA2958786A1/en active Pending
-
2020
- 2020-09-15 JP JP2020154738A patent/JP2021000116A/ja active Pending
- 2020-10-30 US US17/085,380 patent/US20210095321A1/en active Pending
-
2021
- 2021-06-17 AU AU2021204038A patent/AU2021204038B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114015714A (zh) | 2022-02-08 |
| RU2017120211A3 (ru) | 2019-04-25 |
| US10858684B2 (en) | 2020-12-08 |
| CN107075506B (zh) | 2022-06-03 |
| AU2021204038A1 (en) | 2021-07-08 |
| CA2958786A1 (en) | 2016-05-19 |
| CN107075506A (zh) | 2017-08-18 |
| AU2021204038B2 (en) | 2024-03-14 |
| BR112017006295B1 (pt) | 2023-10-17 |
| SG11201701585VA (en) | 2017-05-30 |
| WO2016075243A1 (en) | 2016-05-19 |
| JP6765372B2 (ja) | 2020-10-07 |
| RU2021109889A (ru) | 2021-05-06 |
| JP2021000116A (ja) | 2021-01-07 |
| US20180066294A1 (en) | 2018-03-08 |
| KR20170076650A (ko) | 2017-07-04 |
| RU2746410C2 (ru) | 2021-04-13 |
| JP2017534292A (ja) | 2017-11-24 |
| EP3218509A1 (en) | 2017-09-20 |
| AU2015345073B9 (en) | 2021-04-29 |
| KR102579346B1 (ko) | 2023-09-15 |
| AU2015345073B2 (en) | 2021-04-08 |
| DK3218509T3 (da) | 2024-05-21 |
| BR112017006295A2 (pt) | 2017-12-12 |
| US20210095321A1 (en) | 2021-04-01 |
| EP3218509B1 (en) | 2024-02-28 |
| AU2015345073A1 (en) | 2017-03-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2017120211A (ru) | Мутантные микроорганизмы, устойчивые к гибели под действием лактозы | |
| Song et al. | CRISPR-Cas9D10A nickase-assisted genome editing in Lactobacillus casei | |
| US8865468B2 (en) | Homologous recombination in an algal nuclear genome | |
| RU2014128987A (ru) | Быстрый способ клонирования и экспрессии сегментов гена родственной вариабельной области антитела | |
| CN104651401A (zh) | 一种mir-505双等位基因敲除的方法 | |
| JP6473510B2 (ja) | ビブリオで汎用される遺伝子ノックアウト用の自殺ベクターおよびその利用 | |
| CN107151677B (zh) | 基于CRISPR/Cas9多基因敲除低转染效率细胞系的方法 | |
| US11680270B2 (en) | Recombinant acid-resistant yeast with inhibited lactate metabolism and alcohol production and method of producing lactic acid using the same | |
| WO2015158115A1 (zh) | 一种简便高效的基因编辑方法 | |
| CN104561077A (zh) | 重组工程介导的谷氨酸棒杆菌atcc 13032的基因敲除方法 | |
| JP2014207885A (ja) | 遺伝子改変クロストリジウム・サッカロパーブチルアセトニカム | |
| CN103923940A (zh) | 一种定点整合外源基因的方法 | |
| Wei et al. | Efficient generation of the mouse model with a defined point mutation through haploid cell-mediated gene editing | |
| CN111321154B (zh) | 基于高等真菌灵芝功能基因编辑的调节灵芝酸产量的方法 | |
| EP2267126A1 (en) | Process for the stable gene interruption in clostridia | |
| CA2969294A1 (en) | Clostridium acetobutylicum strains unable to produce hydrogen and useful for the continuous production of chemicals and fuels | |
| CN109628361B (zh) | 整合双拷贝功能性f4菌毛操纵子基因猪源益生菌ep1克隆株、构建方法及应用 | |
| CN107523568B (zh) | 毕赤酵母的一种组成型启动子及其应用 | |
| US9157086B2 (en) | Shuttle vectors for Corynebacterium and Escherichia coli | |
| US20200017867A1 (en) | Method of Producing Transformant | |
| Mahipant et al. | An alternative genome-integrated method for undomesticated Bacillus subtilis and related species | |
| KR102226714B1 (ko) | tetA 유전자를 이용한 이중선별에 의한 대장균의 지놈 엔지니어링 방법 | |
| JP6499587B2 (ja) | 形質転換体およびその製造方法、ならびに乳酸の製造方法 | |
| JP6274502B2 (ja) | 相同組換えの頻度が増大されたクリプトコッカス属のウラシル要求性の菌株を取得する方法 | |
| WO2019237391A1 (zh) | CRISPR/Cas9 靶向敲除人 TXGP1 基因及其特异性 gRNA |