RU2016131408A - Ганглиозиды для стандартизации и повышения чувствительности клеток к нейротоксинам ботулизма в тест-системах in vitro - Google Patents
Ганглиозиды для стандартизации и повышения чувствительности клеток к нейротоксинам ботулизма в тест-системах in vitro Download PDFInfo
- Publication number
- RU2016131408A RU2016131408A RU2016131408A RU2016131408A RU2016131408A RU 2016131408 A RU2016131408 A RU 2016131408A RU 2016131408 A RU2016131408 A RU 2016131408A RU 2016131408 A RU2016131408 A RU 2016131408A RU 2016131408 A RU2016131408 A RU 2016131408A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- stem cells
- induced pluripotent
- pluripotent stem
- neurons derived
- neurotoxin polypeptide
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
- G01N33/5058—Neurological cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0618—Cells of the nervous system
- C12N5/0619—Neurons
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
- G01N33/5073—Stem cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
- C12N2500/36—Lipids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/50—Cell markers; Cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/998—Proteins not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2506/00—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells
- C12N2506/45—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from artificially induced pluripotent stem cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/195—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria
- G01N2333/33—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria from Clostridium (G)
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Claims (30)
1. Способ стандартизации чувствительности нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (iPS), к полипептиду нейротоксина, включающий стадии:
a) культивирования различных групп нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, в культуральной среде, содержащей GT1b, в течение по меньшей мере 3 часов;
b) приведения в контакт указанных различных групп нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, стадии а) с полипептидом нейротоксина;
c) культивирования указанных различных групп нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, стадии b) в течение по меньшей мере 24 часов в присутствии GT1b в условиях, которые позволяют указанному полипептиду нейротоксина проявлять свою биологическую активность;
в результате чего, происходит стандартизация чувствительности указанных нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, к полипептиду нейротоксина.
2. Способ получения происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток нейронов, которые имеют стандартизованную чувствительность по отношению к полипептиду нейротоксина, включающий стадии:
a) обеспечения различных групп нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток;
b) культивирования указанных различных групп нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, стадии а) в культуральной среде, содержащей GT1b, в течение по меньшей мере 3 часов,
в результате чего, происходит стандартизация чувствительности указанных нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, к полипептиду нейротоксина.
3. Способ по п. 2, дополнительно включающий:
c) приведение в контакт указанных различных групп нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, стадии b) с полипептидом нейротоксина; и
d) культивирование указанных различных групп нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, стадии с) в течение по меньшей мере 24 часов в присутствии GT1b в условиях, которые позволяют указанному полипептиду нейротоксина проявлять свою биологическую активность.
4. Способ определения биологической активности полипептида нейротоксина, включающий стадии:
a) культивирования нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, в культуральной среде, содержащей GT1b, в течение по меньшей мере 3 часов;
b) приведения в контакт указанных нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, стадии а) с полипептидом нейротоксина;
c) культивирования указанных нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, стадии b) в течение по меньшей мере 24 часов в присутствии GT1b в условиях, которые позволяют указанному полипептиду нейротоксина проявлять свою биологическую активность; и
d) определения биологической активности указанного полипептида нейротоксина в указанных клетках.
5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что используют различные группы нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток.
6. Способ по п. 1 или 3, дополнительно включающий определение биологической активности указанного полипептида нейротоксина в различных группах нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток.
7. Способ по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что стандартизация чувствительности представляет собой снижение вариабельности чувствительности указанных различных групп нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, к полипептиду нейротоксина по сравнению с контрольными группами нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, обработанными в отсутствии GT1b.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что указанное снижение вариабельности чувствительности указанных различных групп нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, к полипептиду нейротоксина представляет собой снижение по меньшей мере в 1,5 раза или по меньшей мере в 2 раза.
9. Способ по любому из пп. 1-8, отличающийся тем, что указанные нейроны, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, представляют собой нейроны, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека, предпочтительно нейроны iCell® (Cellular Dynamics International).
10. Способ по любому из пп. 1-3 и пп. 5-9, отличающийся тем, что указанные различные группы нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, отличаются по числу пассажей, числу циклов заморозки-разморозки, условиям культивирования, сроку хранения, времени роста, условиям дифференцировки или комбинациям этих параметров.
11. Способ по п. 1, 2 или 4, отличающийся тем, что указанная культуральная среда включает среду Neurobasal, добавку В27 (2%), Глутамин или Глутамакс (1%).
12. Способ по любому из пп. 1-11, отличающийся тем, что GT1b добавляют в концентрации от 1 до 300 мкМ, предпочтительно 30 мкМ.
13. Способ по любому из пп. 1-12, отличающийся тем, что указанный полипептид нейротоксина представляет собой BoNT/A, BoNT/B, BoNT/Cl, BoNT/D, BoNT/E, BoNT/F, BoNT/G, BoNT/H или TeNT или его подтип.
14. Способ по п. 4 или 6, отличающийся тем, что биологическую активность указанного полипептида нейротоксина определяют путем количественного анализа расщепленного нейротоксином субстрата с помощью иммуно-вестерн-блоттинга, иммуноблоттинга с ДСН-ПААГ-электрофорезом или ELISA.
15. Применение GT1b для
a) стандартизации чувствительности различных групп нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, к полипептиду нейротоксина; или
b) снижения вариабельности чувствительности различных групп нейронов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, к полипептиду нейротоксина.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP14155726.4 | 2014-02-19 | ||
| EP14155726 | 2014-02-19 | ||
| PCT/EP2015/053403 WO2015124618A1 (en) | 2014-02-19 | 2015-02-18 | Gangliosides for standardizing and increasing the sensitivity of cells to botulinum neurotoxins in in vitro test systems |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2016131408A true RU2016131408A (ru) | 2018-03-22 |
| RU2016131408A3 RU2016131408A3 (ru) | 2018-08-09 |
| RU2694191C2 RU2694191C2 (ru) | 2019-07-09 |
Family
ID=50115731
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016131408A RU2694191C2 (ru) | 2014-02-19 | 2015-02-18 | Ганглиозиды для стандартизации и повышения чувствительности клеток к нейротоксинам ботулизма в тест-системах in vitro |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10921312B2 (ru) |
| EP (1) | EP3108243B1 (ru) |
| JP (1) | JP6549599B2 (ru) |
| KR (1) | KR102282266B1 (ru) |
| CN (1) | CN106133522B (ru) |
| AU (1) | AU2015220915B2 (ru) |
| BR (1) | BR112016019104A2 (ru) |
| CA (1) | CA2940082C (ru) |
| ES (1) | ES2812769T3 (ru) |
| HK (1) | HK1226481B (ru) |
| IL (1) | IL247162A0 (ru) |
| MX (1) | MX2016010144A (ru) |
| RU (1) | RU2694191C2 (ru) |
| SG (1) | SG11201606810SA (ru) |
| WO (1) | WO2015124618A1 (ru) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2913686C (en) | 2013-06-28 | 2021-08-03 | Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa | Means and methods for the determination of the biological activity of neurotoxin polypeptides in cells |
| JP7018955B2 (ja) * | 2017-10-03 | 2022-02-14 | オリンパス株式会社 | 培養情報処理装置 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9508204D0 (en) * | 1995-04-21 | 1995-06-07 | Speywood Lab Ltd | A novel agent able to modify peripheral afferent function |
| EP2398897B1 (en) | 2009-02-20 | 2017-06-28 | Cellular Dynamics International, Inc. | Methods and compositions for the differentiation of stem cells |
| US8372642B2 (en) | 2009-02-27 | 2013-02-12 | Cellular Dynamics International, Inc. | Differentiation of pluripotent cells |
| EP3330372A1 (en) | 2009-03-13 | 2018-06-06 | Allergan, Inc. | Cells useful for immuno-based botulinum toxin serotype a activity assays |
| JP6185907B2 (ja) | 2011-03-30 | 2017-08-23 | セルラー ダイナミクス インターナショナル， インコーポレイテッド | 神経分化のための多能性幹細胞の予備刺激 |
-
2015
- 2015-02-18 CA CA2940082A patent/CA2940082C/en active Active
- 2015-02-18 JP JP2016552628A patent/JP6549599B2/ja active Active
- 2015-02-18 AU AU2015220915A patent/AU2015220915B2/en active Active
- 2015-02-18 ES ES15705022T patent/ES2812769T3/es active Active
- 2015-02-18 US US15/119,553 patent/US10921312B2/en active Active
- 2015-02-18 WO PCT/EP2015/053403 patent/WO2015124618A1/en active Application Filing
- 2015-02-18 MX MX2016010144A patent/MX2016010144A/es active IP Right Grant
- 2015-02-18 KR KR1020167024793A patent/KR102282266B1/ko active IP Right Grant
- 2015-02-18 EP EP15705022.0A patent/EP3108243B1/en active Active
- 2015-02-18 BR BR112016019104A patent/BR112016019104A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2015-02-18 RU RU2016131408A patent/RU2694191C2/ru active
- 2015-02-18 CN CN201580009292.8A patent/CN106133522B/zh active Active
- 2015-02-18 SG SG11201606810SA patent/SG11201606810SA/en unknown
-
2016
- 2016-08-08 IL IL247162A patent/IL247162A0/en active IP Right Grant
- 2016-12-23 HK HK16114641A patent/HK1226481B/zh unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2015220915A1 (en) | 2016-08-11 |
| EP3108243B1 (en) | 2020-07-15 |
| EP3108243A1 (en) | 2016-12-28 |
| AU2015220915B2 (en) | 2020-09-17 |
| CA2940082C (en) | 2023-09-19 |
| RU2016131408A3 (ru) | 2018-08-09 |
| CN106133522A (zh) | 2016-11-16 |
| US20170059558A1 (en) | 2017-03-02 |
| BR112016019104A2 (pt) | 2017-10-10 |
| CA2940082A1 (en) | 2015-08-27 |
| KR102282266B1 (ko) | 2021-07-27 |
| ES2812769T3 (es) | 2021-03-18 |
| MX2016010144A (es) | 2016-10-07 |
| JP2017506892A (ja) | 2017-03-16 |
| US10921312B2 (en) | 2021-02-16 |
| KR20160120752A (ko) | 2016-10-18 |
| RU2694191C2 (ru) | 2019-07-09 |
| CN106133522B (zh) | 2018-10-12 |
| JP6549599B2 (ja) | 2019-07-24 |
| WO2015124618A1 (en) | 2015-08-27 |
| IL247162A0 (en) | 2016-09-29 |
| HK1226481B (zh) | 2017-09-29 |
| SG11201606810SA (en) | 2016-09-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bisson et al. | Irradiated human dermal fibroblasts are as efficient as mouse fibroblasts as a feeder layer to improve human epidermal cell culture lifespan | |
| Ankam et al. | Actomyosin contractility plays a role in MAP2 expression during nanotopography-directed neuronal differentiation of human embryonic stem cells | |
| Tochio et al. | Fructose-1, 6-bisphosphate aldolase A is involved in HaCaT cell migration by inducing lamellipodia formation | |
| RU2014117161A (ru) | Композиции и способы испытаний на токсикогенность | |
| CN102959400B (zh) | 受试物质的判定或评价方法 | |
| RU2684404C2 (ru) | Способы повышения специфического захвата ботулиновых нейротоксинов клетками | |
| CN110997928B (zh) | 判定多能干细胞的未分化状态的方法、多能干细胞的传代培养方法及这些方法中使用的装置 | |
| RU2017104838A (ru) | Новая культуральная среда для удаления недифференцированных стволовых клеток, а также для очистки и оптимизации клеток миокарда | |
| Deng et al. | Scalable generation of sensory neurons from human pluripotent stem cells | |
| RU2016131408A (ru) | Ганглиозиды для стандартизации и повышения чувствительности клеток к нейротоксинам ботулизма в тест-системах in vitro | |
| Min et al. | Mechanosensitive physiology of Chlamydomonas reinhardtii under direct membrane distortion | |
| Cho et al. | Efficient gene expression in human stem cell derived-cortical organoids using adeno associated virus | |
| Yeap et al. | From 2D to 3D: development of monolayer dopaminergic neuronal and midbrain organoid cultures for parkinson’s disease modeling and regenerative therapy | |
| Mazurkevich et al. | FEATURES CONDITIONS SELECTION AND CULTIVATION MOUSE BONE MARROW ADHEZIVE FRACTION MONONUKLEAR CELLS. | |
| ATE469239T1 (de) | Verfahren zum nachweis lebensfähiger zellen in einer probe unter verwendung eines virus | |
| Fujimura et al. | Loss of contraction force in dermal fibroblasts with aging due to decreases in myosin light chain phosphorylation enzymes | |
| Andreeva et al. | Controlled formaldehyde fixation of fibronectin layers for expansion of mesenchymal stem cells | |
| Dolde et al. | Profiling of human neural crest chemoattractant activity as a replacement of fetal bovine serum for In vitro chemotaxis assays | |
| EA201591558A1 (ru) | Составы и способы увеличения производства рекомбинантного белка | |
| Deng et al. | Scalable generation of pseudo-unipolar sensory neurons from human pluripotent stem cells | |
| EA202190892A1 (ru) | Клеточные анализы клостридиальных нейротоксинов | |
| EA202192893A1 (ru) | Среда для культивирования эукариотических клеток | |
| ATE463582T1 (de) | Screening-verfahren zur identifizierung neuer aminoacyl-trna-synthetase-inhibitoren | |
| Fuchs et al. | Adipose-derived stem cells improve angiogenesis and lymphangiogenesis in a hypoxic dermal regeneration model in vitro | |
| CN104017768B (zh) | 细胞体外收集方法及其应用、体外细胞材料及其应用 |