RU2015121131A - Способ получения концентрата рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих ген гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1) или A/California/07/2009(H1N1)-подобного - Google Patents

Способ получения концентрата рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих ген гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1) или A/California/07/2009(H1N1)-подобного Download PDF

Info

Publication number
RU2015121131A
RU2015121131A RU2015121131A RU2015121131A RU2015121131A RU 2015121131 A RU2015121131 A RU 2015121131A RU 2015121131 A RU2015121131 A RU 2015121131A RU 2015121131 A RU2015121131 A RU 2015121131A RU 2015121131 A RU2015121131 A RU 2015121131A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
rpan
pfu
california
bank
cell
Prior art date
Application number
RU2015121131A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2614127C2 (ru
Inventor
Ирина Леонидовна Тутыхина
Рустам Равшанович Атауллаханов
Светлана Викторовна Алексеева
Татьяна Викторовна Каштиго
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "НТфарма"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "НТфарма" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "НТфарма"
Priority to RU2015121131A priority Critical patent/RU2614127C2/ru
Publication of RU2015121131A publication Critical patent/RU2015121131A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2614127C2 publication Critical patent/RU2614127C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/02—Separating microorganisms from their culture media

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Способ получения концентрата рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих ген гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1) или A/California/07/2009(H1N1)-подобного,отличающийся тем, чтотехнологические стадии включают следующие последовательности:- получение из мастер-банка производственной культуры клеток - рабочего банка производственной суспензионной культуры клеток с концентрацией 2,0×10кл/мл с увеличением выхода клеток не менее чем в 700 раз, и получение с увеличением активных единиц РПАН не менее чем в 33 раза из мастер-банка РПАН - рабочего банка РПАН с титром не менее 2×10БОЕ/мл;- подготовка образцов дезагрегированной стартовой культуры РПАН с активностью не менее 2×10БОЕ/мл из рабочего банка РПАН, полученного на предыдущей стадии, путем очистки от гемагглютининов, экспрессированных РПАН в процессе выращивания рабочего банка РПАН;- проведение однораундовой инфекции производственной суспензионной культуры клеток с концентрацией клеток 1,0×10кл/мл в биореакторе с питательной средой посредством внесения дезагрегированной стартовой производственной культуры РПАН с титром не менее 2×10БОЕ/мл, с получением в результате РПАН-содержащей суспензии неочищенной с титром не менее 10БОЕ/мл путем культивирования продолжительностью 24 часа с увеличением выхода активных единиц РПАН в процессе выращивания не менее чем в 10 раз, с дальнейшим осаждением клеточной массы центрифугированием и отведением отработанной питательной среды;- ресуспендирование осажденной на предыдущей стадии клеточной массы в лизисном буфере, содержащем неионный детергент Triton Х-100 в концентрации 1% в течение 3 часов, затем однократное замораживание в течение 2 часов в криохранилище с последующим

Claims (1)

  1. Способ получения концентрата рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих ген гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1) или A/California/07/2009(H1N1)-подобного,
    отличающийся тем, что
    технологические стадии включают следующие последовательности:
    - получение из мастер-банка производственной культуры клеток - рабочего банка производственной суспензионной культуры клеток с концентрацией 2,0×106 кл/мл с увеличением выхода клеток не менее чем в 700 раз, и получение с увеличением активных единиц РПАН не менее чем в 33 раза из мастер-банка РПАН - рабочего банка РПАН с титром не менее 2×108 БОЕ/мл;
    - подготовка образцов дезагрегированной стартовой культуры РПАН с активностью не менее 2×108 БОЕ/мл из рабочего банка РПАН, полученного на предыдущей стадии, путем очистки от гемагглютининов, экспрессированных РПАН в процессе выращивания рабочего банка РПАН;
    - проведение однораундовой инфекции производственной суспензионной культуры клеток с концентрацией клеток 1,0×106 кл/мл в биореакторе с питательной средой посредством внесения дезагрегированной стартовой производственной культуры РПАН с титром не менее 2×108 БОЕ/мл, с получением в результате РПАН-содержащей суспензии неочищенной с титром не менее 108 БОЕ/мл путем культивирования продолжительностью 24 часа с увеличением выхода активных единиц РПАН в процессе выращивания не менее чем в 10 раз, с дальнейшим осаждением клеточной массы центрифугированием и отведением отработанной питательной среды;
    - ресуспендирование осажденной на предыдущей стадии клеточной массы в лизисном буфере, содержащем неионный детергент Triton Х-100 в концентрации 1% в течение 3 часов, затем однократное замораживание в течение 2 часов в криохранилище с последующим размораживанием суспензии на водяной бане при температуре 23-25°С, затем обрабатывание бензоназой, и проведение отделения РПАН от разрушенных клеток последовательно путем центрифугирования, ультрафильтрации, анион-обменной хроматографии, эксклюзионной хроматографии, стерилизующей фильтрации с получением стерильного концентрата РПАН фармацевтического качества с высоким уровнем хроматографической чистоты и с титром не менее 5×108 БОЕ/мл.
RU2015121131A 2015-06-04 2015-06-04 Способ получения концентрата рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих ген гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1) RU2614127C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015121131A RU2614127C2 (ru) 2015-06-04 2015-06-04 Способ получения концентрата рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих ген гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015121131A RU2614127C2 (ru) 2015-06-04 2015-06-04 Способ получения концентрата рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих ген гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2015121131A true RU2015121131A (ru) 2016-12-27
RU2614127C2 RU2614127C2 (ru) 2017-03-22

Family

ID=57759282

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015121131A RU2614127C2 (ru) 2015-06-04 2015-06-04 Способ получения концентрата рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих ген гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1)

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2614127C2 (ru)

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW570803B (en) * 1997-04-09 2004-01-11 Duphar Int Res Influenza vaccine
RU2507257C1 (ru) * 2012-08-07 2014-02-20 Общество с ограниченной ответственностью "НТфарма" Рекомбинантная псевдоаденовирусная частица на основе генома аденовируса человека 5 серотипа для индукции специфического иммунитета к вирусу гриппа а субтипа н1n1 и способ ее использования в качестве компонента для создания вакцины
JP2016508133A (ja) * 2012-12-18 2016-03-17 アイカーン スクール オブ メディシン アット マウント サイナイ インフルエンザウイルスワクチン及びその使用
RU2535153C1 (ru) * 2013-09-04 2014-12-10 Федеральное государственное унитарное предприятие "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов" Федерального медико-биологического агентства России (ФГУП СПбНИИВС ФМБА России) Способ получения высокоочищенных вирионных концентратов

Also Published As

Publication number Publication date
RU2614127C2 (ru) 2017-03-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2009034115A5 (ru)
JP5945270B2 (ja) 発現産物を採取するための方法
RU2706693C2 (ru) Вирусная вакцина и способы ее производства
KR20220110865A (ko) 교번 접선 유동식의 신속한 수확
Cunha et al. Filtration methodologies for the clarification and concentration of human mesenchymal stem cells
KR20170076679A (ko) 파종 밀도 한계를 증가시키고 원하는 팽창 시간을 감소시키는 접착 세포 생물반응기에의 비접착세포의 파종
FI3677271T3 (fi) Menetelmä mikrovesikkelien eristämiseksi ja puhdistamiseksi soluviljelyn supernatanteista ja biologisista fluideista
CN103827296A (zh) 用于产生病毒抗原和疫苗的方法
CN104371982A (zh) 一种慢病毒的纯化方法
US10851350B1 (en) Bioreactor production of virus from adherent cells
CN106540249A (zh) 一种禽流感(h5n1)或猪繁殖与呼吸综合征(prrs)病毒疫苗的抗原浓缩纯化方法
WO2020000636A1 (zh) 生产重组腺病毒的方法
CN102406927A (zh) 一种人二倍体细胞乙型脑炎灭活疫苗的生产方法
CN112704733A (zh) 四价流感病毒鸡胚尿囊液纯化工艺、四价流感病毒裂解疫苗及其制备方法
KR102245547B1 (ko) 고밀도의 미정제 세포 배양 수거물의 정화를 위한 방법
RU2015121131A (ru) Способ получения концентрата рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих ген гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1) или A/California/07/2009(H1N1)-подобного
CN111494615A (zh) 用于预防新型冠状病毒的重组腺病毒基因疫苗的生产方法
CN114645024B (zh) 降低狂犬病病毒产品中细胞蛋白及dna残留的方法
KR101862332B1 (ko) 인플루엔자 전바이러스 백신 제조 방법
JP2023524015A (ja) 使い捨て培養工程システムを用いたインフルエンザウイルス生産方法及びインフルエンザウイルス抗原精製条件の迅速確認試験
CN112469821A (zh) 一种制备重组人凝血因子ⅷ的方法
CN111166873B (zh) 重组汉逊酵母表达的手足口病疫苗抗原的粗纯工艺、疫苗原液及其制备方法
CN106609257B (zh) 高效分离体外诱导的rpe细胞和rpc的方法
CN115011566B (zh) 一种人用狂犬病疫苗中残留dna的去除方法
KR102546626B1 (ko) 인플루엔자 바이러스 항원 정제 조건 신속 확인 시험