RU2014153674A - Способ получения полностью человеческих биспецифических антител с применением общей легкой цепи - Google Patents

Способ получения полностью человеческих биспецифических антител с применением общей легкой цепи Download PDF

Info

Publication number
RU2014153674A
RU2014153674A RU2014153674A RU2014153674A RU2014153674A RU 2014153674 A RU2014153674 A RU 2014153674A RU 2014153674 A RU2014153674 A RU 2014153674A RU 2014153674 A RU2014153674 A RU 2014153674A RU 2014153674 A RU2014153674 A RU 2014153674A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
human
heavy chain
gene
rearranged
light chain
Prior art date
Application number
RU2014153674A
Other languages
English (en)
Inventor
Роберт БАББ
Джон МКУИРТЕР
Линн МАКДОНАЛД
Шон СТИВЕНС
Сэмюэл ДЭВИС
Дэвид Р. БАКЛЕР
Каролина А. ХОСИАВА
Эндрю Джей. МЕРФИ
Original Assignee
Регенерон Фармасьютикалз, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US13/488,628 external-priority patent/US20130045492A1/en
Application filed by Регенерон Фармасьютикалз, Инк. filed Critical Регенерон Фармасьютикалз, Инк.
Publication of RU2014153674A publication Critical patent/RU2014153674A/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
    • A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
    • A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
    • A01K67/0278—Knock-in vertebrates, e.g. humanised vertebrates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2207/00—Modified animals
    • A01K2207/15—Humanized animals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/07—Animals genetically altered by homologous recombination
    • A01K2217/072—Animals genetically altered by homologous recombination maintaining or altering function, i.e. knock in
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/15—Animals comprising multiple alterations of the genome, by transgenesis or homologous recombination, e.g. obtained by cross-breeding
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2227/00—Animals characterised by species
    • A01K2227/10—Mammal
    • A01K2227/105—Murine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2267/00—Animals characterised by purpose
    • A01K2267/01—Animal expressing industrially exogenous proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

1. Способ получения биспецифического антигенсвязывающего белка, включающий:получение двух различных генных последовательностей вариабельных участков тяжелой цепи человека, полученных от различных В-клеток, выделенных из одной и той же или отдельной мыши, которая экспрессирует единственный вариабельный домен легкой цепи человека и множество вариабельных доменов тяжелой цепи человека, иполучение биспецифического антигенсвязывающего белка, имеющего две тяжелые цепи человека, содержащие аминокислотные последовательности, кодируемые указанными двумя генными последовательностями вариабельных участков тяжелой цепи человека, и легкую цепь человека, содержащую указанный вариабельный домен легкой цепи человека.2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что единственный вариабельный домен легкой цепи человека, экспрессируемый в одной и той же или отдельной мыши, кодируется нуклеотидной последовательностью, полученной от единственного перестроенного сегмента V зародышевой линии человека и единственного перестроенного сегмента J зародышевой линии человека.3. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что единственный перестроенный сегмент V зародышевой линии человека представляет собой перестроенный генный сегмент Vκ1-39 человека или перестроенный генный сегмент Vκ3-20 человека.4. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что единственный перестроенный сегмент J зародышевой линии человека представляет собой перестроенный генный сегмент Jκ5 человека или перестроенный генный сегмент Jκ1 человека.5. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что одна и та же мышь или отличная мышь содержит локус тяжелой цепи, включающий один или несколько неперестроен

Claims (29)

1. Способ получения биспецифического антигенсвязывающего белка, включающий:
получение двух различных генных последовательностей вариабельных участков тяжелой цепи человека, полученных от различных В-клеток, выделенных из одной и той же или отдельной мыши, которая экспрессирует единственный вариабельный домен легкой цепи человека и множество вариабельных доменов тяжелой цепи человека, и
получение биспецифического антигенсвязывающего белка, имеющего две тяжелые цепи человека, содержащие аминокислотные последовательности, кодируемые указанными двумя генными последовательностями вариабельных участков тяжелой цепи человека, и легкую цепь человека, содержащую указанный вариабельный домен легкой цепи человека.
2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что единственный вариабельный домен легкой цепи человека, экспрессируемый в одной и той же или отдельной мыши, кодируется нуклеотидной последовательностью, полученной от единственного перестроенного сегмента V зародышевой линии человека и единственного перестроенного сегмента J зародышевой линии человека.
3. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что единственный перестроенный сегмент V зародышевой линии человека представляет собой перестроенный генный сегмент Vκ1-39 человека или перестроенный генный сегмент Vκ3-20 человека.
4. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что единственный перестроенный сегмент J зародышевой линии человека представляет собой перестроенный генный сегмент Jκ5 человека или перестроенный генный сегмент Jκ1 человека.
5. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что одна и та же мышь или отличная мышь содержит локус тяжелой цепи, включающий один или несколько неперестроенных генных сегментов VH человека, один или несколько неперестроенных генных сегментов DH человека и один или несколько неперестроенных генных сегментов JH человека, функционально связанных с одним или несколькими не являющимися человеческими генами константного участка тяжелой цепи.
6. Способ по п. 5, характеризующийся тем, что локус тяжелой цепи содержит 80 неперестроенных генных сегментов VH человека, 27 неперестроенных генных сегментов DH человека и шесть неперестроенных генных сегментов JH человека, функционально связанных с одним или несколькими генами константного участка тяжелой цепи мыши.
7. Способ по п. 5, характеризующийся тем, что один или несколько генных сегментов VH содержат VH1-2, VH1-8, VH1-24, VH1-69, VH2-5, VH3-7, VH3-9, VH3-11, VH3-13, VH3-15, VH3-20, VH3-23, VH3-30, VH3-33, VH3-48, VH3-53, VH4-31, VH4-39, VH4-59, VH5-51, VH6-1 человека или их комбинацию.
8. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что одна и та же или отдельная мышь не содержит эндогенный генный сегмент вариабельного участка легкой цепи, который способен к реаражнировке с образованием гена, кодирующего вариабельный домен легкой цепи.
9. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что каждая из двух генных последовательностей вариабельного участка тяжелой цепи человека содержит последовательность, полученную от одного и того же или различных сегментов VH, при этом сегмент VH выбирают из VH1-2, VH1-8, VH1-24, VH1-69, VH2-5, VH3-7, VH3-9, VH3-11, VH3-13, VH3-15, VH3-20, VH3-23, VH3-30, VH3-33, VH3-48, VH3-53, VH4-31, VH4-39, VH4-59, VH5-51 и VH6-1.
10. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что две тяжелые цепи человека связывают:
два различных антигена или
два различных эпитопа одного антигена.
11. Способ получения биспецифического антигенсвязывающего белка, включающий:
воздействие на первую мышь, которая экспрессирует единственный вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, кодируемый последовательностью нуклеиновой кислоты, полученной из единственной перестроенной генной последовательности вариабельного участка, и множество вариабельных доменов тяжелой цепи человека, первым представляющим интерес антигеном, который содержит первый эпитоп,
воздействие на вторую мышь, которая экспрессирует единственный вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, кодируемый последовательностью нуклеиновой кислоты, полученной из единственной перестроенной генной последовательности вариабельного участка, и множество вариабельных доменов тяжелой цепи человека, вторым представляющим интерес антигеном, который содержит второй эпитоп,
предоставление возможности каждой из первой и второй мыши дать иммунные ответы на представляющие интерес антигены,
определение у первой мыши вариабельного участка первой тяжелой цепи человека, который связывает первый эпитоп представляющего интерес первого антигена,
определение у второй мыши вариабельного участка второй тяжелой цепи человека, который связывает второй эпитоп представляющего интерес второго антигена,
получение гена первой полностью человеческой тяжелой цепи, который кодирует первую тяжелую цепь, содержащую вариабельный домен первой тяжелой цепи человека, и гена второй полностью человеческой тяжелой цепи, который кодирует вторую тяжелую цепь, содержащую вариабельный домен второй тяжелой цепи человека,
введение генов первой и второй тяжелых цепей в клетку, которая содержит ген единственной полностью человеческой легкой цепи, содержащий единственную перестроенную генную последовательность вариабельного участка человека,
экспрессию первой и второй полностью человеческих тяжелых цепей, кодируемых генами полностью человеческих тяжелых цепей, и полностью человеческой легкой цепи, кодируемой единственным геном полностью человеческой легкой цепи, в клетке с образованием биспецифического антигенсвязывающего белка, и
выделение биспецифического антигенсвязывающего белка из указанной клетки.
12. Способ по п. 11, характеризующийся тем, что единственная перестроенная генная последовательность вариабельного участка человека содержит перестроенный генный сегмент Vκ1-39 или Vκ3-20 человека.
13. Способ по п. 12, характеризующийся тем, что единственная перестроенная генная последовательность вариабельного участка человека дополнительно содержит перестроенный генный сегмент Jκ1 или Jκ5 человека.
14. Способ по п. 11, характеризующийся тем, что:
первый антиген и второй антиген не являются идентичными; или
первый антиген и второй антиген являются идентичными, а первый эпитоп и второй эпитоп не являются идентичными.
15. Способ по п. 11, характеризующийся тем, что полностью человеческая легкая цепь при образовании пары с первой полностью человеческой тяжелой цепью специфично связывает первый эпитоп первого антигена, а полностью человеческая легкая цепь при образовании пары со второй полностью человеческой тяжелой цепью специфично связывает второй эпитоп второго антигена.
16. Способ по п. 11, характеризующийся тем, что первая или вторая полностью человеческая тяжелая цепь, но не обе, несет аминокислотную модификацию, которая уменьшает ее аффинность к белку А.
17. Способ по п. 16, характеризующийся тем, что модификацию выбирают из 95R (EUR 435R), 96F (EUR 436F) и их комбинации.
18. Способ по п. 11, характеризующийся тем, что единственная перестроенная генная последовательность вариабельного участка человека представляет собой последовательность зародышевой линии.
19. Способ по п. 11, характеризующийся тем, что множество вариабельных доменов тяжелой цепи человека у первой и второй мыши кодируются локусом тяжелой цепи, включающим один или несколько неперестроенных генных сегментов VH человека, один или несколько неперестроенных генных сегментов DH человека и один или несколько неперестроенных генных сегментов JH человека, функционально связанных с одним или несколькими генами константных участков тяжелой цепи, не являющимися человеческими.
20. Способ по п. 19, характеризующийся тем, что локус тяжелой цепи у первой или второй мыши содержит 80 неперестроенных генных сегментов VH человека, 27 неперестроенных генных сегментов DH человека и шесть неперестроенных генных сегментов JH человека, функционально связанных с одним или несколькими генами константного участка тяжелой цепи мыши.
21. Способ по п. 19, характеризующийся тем, что один или несколько генных сегментов VH включают VH1-2, VH1-8, VH1-24, VH1-69, VH2-5, VH3-7, VH3-9, VH3-11, VH3-13, VH3-15, VH3-20, VH3-23, VH3-30, VH3-33, VH3-48, VH3-53, VH4-31, VH4-39, VH4-59, VH5-51, VH6-1 человека или их комбинацию.
22. Способ отбора двух вариабельных доменов тяжелой цепи иммуноглобулина человека для применения в биспецифическом антигенсвязывающем белке, включающий:
иммунизацию первой мыши первым представляющим интерес антигеном с получением вариабельного домена первой тяжелой цепи иммуноглобулина человека, который связывается с первым антигеном, причем первая мышь экспрессирует единственный вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина человека, полученный с единственной перестроенной генной последовательности вариабельного участка человека, и множество вариабельных доменов тяжелой цепи иммуноглобулина человека; и
иммунизацию второй мыши вторым представляющим интерес антигеном с получением вариабельного домена второй тяжелой цепи иммуноглобулина человека, который связывается со вторым антигеном, причем вторая мышь экспрессирует единственный вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина человека, полученный с единственной перестроенной генной последовательности вариабельного участка человека, и множество вариабельных доменов тяжелой цепи иммуноглобулина человека.
23. Способ по п. 22, характеризующийся тем, что единственная перестроенная генная последовательность вариабельного участка человека содержит перестроенный генный сегмент Vκ1-39 или Vκ3-20 человека.
24. Способ по п. 23, характеризующийся тем, что единственная перестроенная генная последовательность вариабельного участка человека дополнительно содержит перестроенный генный сегмент Jκ1 или Jκ5 человека.
25. Способ по п. 22, характеризующийся тем, что первая и вторая мышь не содержат эндогенный генный сегмент вариабельного участка легкой цепи, который способен к реаранжировке с образованием легкой цепи иммуноглобулина.
26. Способ по п. 22, характеризующийся тем, что первый и второй антигены являются:
различными; или
идентичными, и вариабельные домены первой и второй тяжелой цепи связывают различные эпитопы.
27. Клетка-хозяин, содержащая:
(a) первую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую первую тяжелую цепь иммуноглобулина человека, которая связывает первый антиген, причем первая тяжелая цепь человека содержит последовательность вариабельного домена первой тяжелой цепи человека, и последовательность вариабельного домена первой тяжелой цепи человека кодируется нуклеотидной последовательностью, полученной из первой мыши, иммунизированной первым антигеном;
(b) вторую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую вторую тяжелую цепь иммуноглобулина человека, которая связывает второй антиген, причем вторая тяжелая цепь человека содержит последовательность вариабельного домена второй тяжелой цепи человека, и последовательность вариабельного домена второй тяжелой цепи человека кодируется нуклеотидной последовательностью, полученной из второй мыши, иммунизированной вторым антигеном;
причем каждая из первой и второй мыши экспрессирует единственный вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина человека, который кодируется единственной перестроенной генной последовательностью вариабельного участка легкой цепи иммуноглобулина человека, и множество вариабельных доменов тяжелой цепи иммуноглобулина человека; и
(с) третью последовательность нуклеиновой кислоты, содержащую единственную перестроенную генную последовательность вариабельного участка легкой цепи иммуноглобулина человека, причем третья нуклеиновая кислота кодирует легкую цепь иммуноглобулина человека;
причем первая, вторая и третья последовательности нуклеиновой кислоты экспрессируются с образованием антигенсвязывающего белка, который связывает первый и второй антиген.
28. Клетка-хозяин по п. 27, причем единственная перестроенная генная последовательность вариабельного участка легкой цепи иммуноглобулина человека содержит перестроенный генный сегмент Vκ1-39 или Vκ3-20 человека.
29. Клетка-хозяин по п. 28, причем единственная перестроенная генная последовательность вариабельного участка легкой цепи иммуноглобулина человека дополнительно содержит перестроенный генный сегмент Vκ1-39 или Vκ35 человека.
RU2014153674A 2012-06-05 2013-06-05 Способ получения полностью человеческих биспецифических антител с применением общей легкой цепи RU2014153674A (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US13/488,628 2012-06-05
US13/488,628 US20130045492A1 (en) 2010-02-08 2012-06-05 Methods For Making Fully Human Bispecific Antibodies Using A Common Light Chain
PCT/US2013/044257 WO2013184761A1 (en) 2012-06-05 2013-06-05 Methods for making fully human bispecific antibodies using a common light chain

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2014153674A true RU2014153674A (ru) 2016-07-27

Family

ID=48652344

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2014153674A RU2014153674A (ru) 2012-06-05 2013-06-05 Способ получения полностью человеческих биспецифических антител с применением общей легкой цепи

Country Status (12)

Country Link
EP (1) EP2854523A1 (ru)
JP (1) JP2015525071A (ru)
KR (1) KR20150023535A (ru)
CN (1) CN104582476B (ru)
AU (1) AU2013271737A1 (ru)
CA (1) CA2874846A1 (ru)
HK (1) HK1208994A1 (ru)
IL (1) IL235781A0 (ru)
MX (1) MX2014014891A (ru)
RU (1) RU2014153674A (ru)
SG (2) SG11201407644UA (ru)
WO (1) WO2013184761A1 (ru)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100069614A1 (en) 2008-06-27 2010-03-18 Merus B.V. Antibody producing non-human mammals
US9796788B2 (en) 2010-02-08 2017-10-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mice expressing a limited immunoglobulin light chain repertoire
SG183149A1 (en) 2010-02-08 2012-09-27 Regeneron Pharma Common light chain mouse
US20120021409A1 (en) 2010-02-08 2012-01-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Common Light Chain Mouse
US20130045492A1 (en) 2010-02-08 2013-02-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods For Making Fully Human Bispecific Antibodies Using A Common Light Chain
US20140013456A1 (en) 2012-03-16 2014-01-09 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Histidine Engineered Light Chain Antibodies and Genetically Modified Non-Human Animals for Generating the Same
NZ629639A (en) 2012-03-16 2017-03-31 Regeneron Pharma Histidine engineered light chain antibodies and genetically modified non-human animals for generating the same
CN107361011B (zh) 2012-03-16 2021-08-27 瑞泽恩制药公司 制备表达ph敏感性免疫球蛋白序列的非人动物的方法
CN106318951A (zh) 2012-03-16 2017-01-11 瑞泽恩制药公司 生产具有ph依赖性结合特性的抗原结合蛋白的小鼠
EA035344B1 (ru) 2012-04-20 2020-05-29 Мерюс Н.В. Способ получения двух антител из одной клетки-хозяина
TWI635098B (zh) 2013-02-01 2018-09-11 再生元醫藥公司 含嵌合恆定區之抗體
SG11201506294TA (en) * 2013-03-13 2015-09-29 Regeneron Pharma Common light chain mouse
TWI701042B (zh) 2014-03-19 2020-08-11 美商再生元醫藥公司 用於腫瘤治療之方法及抗體組成物
ES2809455T3 (es) 2014-11-17 2021-03-04 Regeneron Pharma Métodos para tratamiento tumoral usando anticuerpo biespecífico CD3xCD20
MX2017006626A (es) * 2014-11-20 2017-08-21 Hoffmann La Roche Cadenas ligeras comunes y metodos de uso.
EP3023437A1 (en) * 2014-11-20 2016-05-25 EngMab AG Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA
WO2016161010A2 (en) 2015-03-30 2016-10-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Heavy chain constant regions with reduced binding to fc gamma receptors
MA43987A (fr) 2015-05-12 2018-12-19 Regeneron Pharma Détermination de la pureté de protéine multimère
EA201890785A1 (ru) * 2015-09-23 2018-10-31 Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. Оптимизированные биспецифические анти-cd3 антитела и их применение
IL260526B2 (en) 2016-01-13 2023-10-01 Regeneron Pharma Rodents with an engineered heavy chain diversity region
EP4023059A1 (en) 2018-06-14 2022-07-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals capable of dh-dh rearrangement in the immunoglobulin heavy chain coding sequences
WO2020047389A1 (en) 2018-08-31 2020-03-05 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Dosing strategy that mitigates cytokine release syndrome for cd3/c20 bispecific antibodies
CN113302207A (zh) * 2018-11-16 2021-08-24 维尔托索宾科公司 Cd38和icam1抗体及其用途
KR20210129083A (ko) 2019-02-22 2021-10-27 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 유전적으로 변형된 나트륨 채널을 갖는 설치류 및 이의 사용 방법
KR20210095781A (ko) 2020-01-24 2021-08-03 주식회사 에이프릴바이오 항원결합 단편 및 생리활성 이펙터 모이어티로 구성된 융합 컨스트럭트를 포함하는 다중결합항체 및 이를 포함하는 약학조성물
IL301137A (en) 2020-09-11 2023-05-01 Regeneron Pharma Identification and production of antigen-specific antibodies
WO2022132943A1 (en) 2020-12-16 2022-06-23 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Mice expressing humanized fc alpha receptors
BR112023011689A2 (pt) 2020-12-23 2023-10-31 Regeneron Pharma Método para obter uma célula produtora de anticorpos, anticorpo, e, célula hospedeira de mamífero
KR20230125236A (ko) 2020-12-23 2023-08-29 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 앵커 변형된 항체를 암호화하는 핵산 및 이의 사용
CN118496357A (zh) * 2023-02-15 2024-08-16 康源博创生物科技(北京)有限公司 一种多肽以及包含其作为轻链的抗体

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1341351C (en) * 1988-09-06 2002-03-26 Marc D. Better Production of chimeric mouse-human antibodies with specificity to human tumor antigens
US5770429A (en) * 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
AU6819494A (en) * 1993-04-26 1994-11-21 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US6596541B2 (en) * 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
US6881557B2 (en) * 2001-07-12 2005-04-19 Arrowsmith Technologies Llp Super humanized antibodies
ES2350178T3 (es) * 2001-10-01 2011-01-19 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Procedimiento de producción de bibliotecas de proteínas y de selección de proteínas a partir de las mismas.
WO2003061363A2 (en) * 2002-01-17 2003-07-31 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Mutations caused by activation-induced cytidine deaminase
ES2524767T3 (es) * 2002-06-14 2014-12-12 Immunomedics, Inc. Anticuerpo monoclonal humanizado HPAM4
CN101962408A (zh) * 2002-07-12 2011-02-02 杰斐逊·富特 超人源化抗体
RU2559524C2 (ru) * 2008-06-27 2015-08-10 Мерюс Б.В. Продуцирующие антитела млекопитающие, не являющиеся человеком
SG183149A1 (en) * 2010-02-08 2012-09-27 Regeneron Pharma Common light chain mouse
SI2739740T1 (sl) * 2011-08-05 2019-12-31 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Humanizirane univerzalne lahkoverižne miši

Also Published As

Publication number Publication date
AU2013271737A1 (en) 2015-01-22
EP2854523A1 (en) 2015-04-08
JP2015525071A (ja) 2015-09-03
IL235781A0 (en) 2015-01-29
CN104582476A (zh) 2015-04-29
HK1208994A1 (en) 2016-03-24
SG10201609535TA (en) 2017-01-27
MX2014014891A (es) 2015-06-17
CN104582476B (zh) 2017-03-08
SG11201407644UA (en) 2014-12-30
WO2013184761A1 (en) 2013-12-12
CA2874846A1 (en) 2013-12-12
KR20150023535A (ko) 2015-03-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2014153674A (ru) Способ получения полностью человеческих биспецифических антител с применением общей легкой цепи
JP2015525071A5 (ru)
HRP20190706T1 (hr) Miševi koji izražavaju ograničeni repertoar lakog lanca imunoglobulina
JP2023011882A5 (ru)
RU2015147726A (ru) Мышь с общей легкой цепью
RU2019121863A (ru) Антитела со встроенным в легкие цепи гистидином и генетически модифицированные отличные от человека животные для их получения
RU2014118869A (ru) Мыши с ограниченной тяжелой цепью иммуноглобулина
JP2016512034A5 (ru)
RU2014127339A (ru) Мыши с гуманизированной легкой цепью
JP2014110814A5 (ru)
HRP20200093T1 (hr) Humanizirane neljudske životinje s ograničenim lokusima imunoglobulinskog teškog lanca
JP2015519055A5 (ru)
RU2021129958A (ru) Отличные от человека животные со сконструированным локусом легкой лямбда-цепи иммуноглобулина
RU2016109443A (ru) Мыши adam6
JP2020530760A5 (ru)
JP2015519076A5 (ru)
JP2014524243A5 (ru)
JP2013535213A5 (ru)
JP2015509380A5 (ru)
RU2017108634A (ru) Отличные от человека животные, экспрессирующие антитела с общей легкой цепью
RU2017114166A (ru) Не являющиеся человеком животные с модифицированными последовательностями тяжелых цепей иммуноглобулинов
JP2015502177A5 (ru)
RU2014114172A (ru) Легковыделяемые биспецифические антитела с природным иммуноглобулиновым форматом
MX2014010794A (es) Raton con cadena ligera comun.
RU2015143108A (ru) Мышь с общей легкой цепью

Legal Events

Date Code Title Description
FA92 Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted)

Effective date: 20180314