RU2014148704A - Конструкции одноруких моновалентных антител и их использование - Google Patents

Конструкции одноруких моновалентных антител и их использование Download PDF

Info

Publication number
RU2014148704A
RU2014148704A RU2014148704A RU2014148704A RU2014148704A RU 2014148704 A RU2014148704 A RU 2014148704A RU 2014148704 A RU2014148704 A RU 2014148704A RU 2014148704 A RU2014148704 A RU 2014148704A RU 2014148704 A RU2014148704 A RU 2014148704A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
polypeptide
design
construct
antibody
monovalent antibody
Prior art date
Application number
RU2014148704A
Other languages
English (en)
Inventor
Гордон Иу Кон НГ
Сержит Бхимарао ДИКСИТ
ФОН КРЕДЕНШТАЙН Томас ШПРЕТЕР
Original Assignee
Займворкс Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Займворкс Инк. filed Critical Займворкс Инк.
Publication of RU2014148704A publication Critical patent/RU2014148704A/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68033—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a maytansine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6855—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from breast cancer cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3015—Breast
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/72—Mass spectrometers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/35—Valency
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/526—CH3 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/64—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising a combination of variable region and constant region components
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/77—Internalization into the cell
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/808—Materials and products related to genetic engineering or hybrid or fused cell technology, e.g. hybridoma, monoclonal products
    • Y10S530/809—Fused cells, e.g. hybridoma

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

1. Конструкция изолированного моновалентного антитела, содержащаяконструкцию антигенсвязывающего полипептида, которая моновалентным образом связывается с антигеном; и димерную конструкцию Fc-полипептида, указанная Fc-полипептиднная конструкция содержит два мономерных Fc-полипептида, каждый из которых содержит СН3-домен, при этом один указанный мономерный Fc-полипептид соединен с по меньшей мере одним полипептидом из антигенсвязывающей полипептидной конструкции; при этом указанная моновалентная конструкция антитела избирательно и/или специфично связывает клетку-мишень, на которой присутствует указанный антиген с:повышенной плотностью связывания и Bпо сравнению с соответствующей конструкцией моноспецифического бивалентного антитела с двумя антигенсвязывающими участками;константой диссоциации (K), сравнимой с константой указанной конструкции моноспецифического бивалентного антитела;скоростью диссоциации, сравнимой или меньшей скорости указанной конструкции моноспецифического бивалентного антитела;и при этом указанная конструкция моноспецифического антитела демонстрирует биофизическую и in vivo стабильность, сравнимую с указанной конструкцией моноспецифического бивалентного антитела, а нацеленная цитотоксичность сравнима или больше чем у указанной конструкции моноспецифического бивалентного антитела.2. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 1, отличающаяся тем, что конструкция моновалентного антитела блокирует связывание распознаваемого лиганда с целевым антигеном.3. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 1, отличающаяся тем, что конструкция моновалентного ант

Claims (90)

1. Конструкция изолированного моновалентного антитела, содержащая
конструкцию антигенсвязывающего полипептида, которая моновалентным образом связывается с антигеном; и димерную конструкцию Fc-полипептида, указанная Fc-полипептиднная конструкция содержит два мономерных Fc-полипептида, каждый из которых содержит СН3-домен, при этом один указанный мономерный Fc-полипептид соединен с по меньшей мере одним полипептидом из антигенсвязывающей полипептидной конструкции; при этом указанная моновалентная конструкция антитела избирательно и/или специфично связывает клетку-мишень, на которой присутствует указанный антиген с:
повышенной плотностью связывания и Bmax по сравнению с соответствующей конструкцией моноспецифического бивалентного антитела с двумя антигенсвязывающими участками;
константой диссоциации (Kd), сравнимой с константой указанной конструкции моноспецифического бивалентного антитела;
скоростью диссоциации, сравнимой или меньшей скорости указанной конструкции моноспецифического бивалентного антитела;
и при этом указанная конструкция моноспецифического антитела демонстрирует биофизическую и in vivo стабильность, сравнимую с указанной конструкцией моноспецифического бивалентного антитела, а нацеленная цитотоксичность сравнима или больше чем у указанной конструкции моноспецифического бивалентного антитела.
2. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 1, отличающаяся тем, что конструкция моновалентного антитела блокирует связывание распознаваемого лиганда с целевым антигеном.
3. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 1, отличающаяся тем, что конструкция моновалентного антитела не блокирует связывание распознаваемого лиганда с целевым антигеном.
4. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 1, отличающаяся тем, что при соотношении антитело к мишени 1:1 увеличение плотности связывания и Bmax по сравнению с моноспецифическим бивалентным антителом наблюдается в концентрации больше, чем экспериментальная константа равновесия (Kd) для этих антител вплоть до насыщающих концентраций.
5. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, отличающаяся тем, что указанная конструкция моновалентного антитела демонстрирует по меньшей мере одно из следующего: увеличенную ADCC, увеличенную ADCP и увеличенную CDC эффективность по сравнению с указанной соответствующей конструкцией бивалентного антитела в концентрации больше, чем экспериментальная константа равновесия (Kd) для этих антител вплоть до насыщающих концентраций.
6. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, отличающаяся тем, что указанная конструкция является конструкцией моновалентного литического антитела, которая содержит Fc-домен, обладающий эффекторной активностью,
при этом указанная конструкция литического антитела является неагонистической, может блокировать связывание распознаваемого лиганда с целевым антигеном, блокирует передачу сигнала от антигена, ингибирует клеточный рост; и
при этом указанная конструкция литического антитела связывает и насыщает указанные клетки-мишени с увеличенным Bmax, быстрой скоростью ассоциации и сравнимой скоростью диссоциации по сравнению с соответствующей конструкцией моноспецифического бивалентного антитела с двумя антигенасвязывающими участками.
7. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 6, отличающаяся тем, что указанная конструкция не интернализируется.
8. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, отличающаяся тем, что указанная конструкция интернализируется.
9. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, отличающаяся тем, что указанная конструкция является конструкцией моновалентного интернализируемого антитела, которая эффективно интернализируется; при этом указанная конструкция интернализируемого антитела может блокировать передачу сигнала от антигена, является неагонистической, блокирует связывание распознаваемого лиганда с антигеном-мишенью и не индуцирует клеточный рост; и при этом указанная конструкция интернализируемого антитела связывает указанные клетки-мишени с увеличенным Bmax, быстрой скоростью ассоциации и медленной скоростью диссоциации по сравнению с соответствующей конструкцией моноспецифического бивалентного антитела с двумя антигенасвязывающими участками.
10. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, отличающаяся тем, что интернализация указанной конструкции превышает, равна или меньше, чем такая интернализация для моноспецифического бивалентного антитела.
11. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4 или 7, отличающаяся тем, что указанное увеличение плотности связывания и Bmax не зависит от плотности антигена на клетке-мишени.
12. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4 или 7, отличающаяся тем, что указанное увеличение плотности связывания и Bmax не зависит от эпитопа целевого антигена.
13. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4 или 7, отличающаяся тем, что клетка-мишень представляет собой клетку, экспрессирующую распознаваемый антиген, а указанная клетка выбирается из перечня, содержащего раковую клетку и поврежденную клетку, экспрессирующую рецепторы HER.
14. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 13, отличающаяся тем, что клетка-мишень представляет собой поврежденную клетку, экспрессирующую HER2.
15. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7 или 14, отличающаяся тем, что указанная конструкция не проявляет авидности.
16. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7 или 14, отличающаяся тем, что указанная конструкция димерного Fc-полипептида является гетеродимерной.
17. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7 или 14, отличающаяся тем, что указанная антигенсвязывающая полипептидная конструкция связывает HER2, отличающаяся тем, что клетка-мишень является по меньшей мере одной из: низко, средне и высоко экспрессирующей HER2 клеткой, отрицательной по рецепторам прогестерона клеткой или отрицательной по рецепторам эстрогена клеткой.
18. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7 или 14, отличающаяся тем, что указанная антигенсвязывающая полипептидная конструкция связывает внеклеточный домен HER2, отличающаяся тем, что указанный внеклеточный домен представлен по меньшей мере одним из ECD 1, 2, 3 и 4.
19. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7 или 14, отличающаяся тем, что указанная моновалентная антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой Fab-фрагмент, scFv, sdAb, антигенсвязывающий пептид или белковый домен, способные связывать антиген.
20. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 19, отличающаяся тем, что указанный Fab-фрагмент содержит полипептид тяжелой цепи и полипептид легкой цепи.
21. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 6, отличающаяся тем, что указанная конструкция не является агонистической или является частично агонистической.
22. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 16, отличающаяся тем, что указанная гетеродимерная конструкция Fc-полипептида содержит первый и второй мономерные Fc-полипептиды, указанный первый мономерный Fc-полипептид содержит последовательность конечного белкового продукта, показаную в SEQ ID №:12, SEQ ID №40 или SEQ ID №36; и указанный второй мономерный Fc-полипептид, содержащий последовательность конечного белкового продукта, показанную в SEQ ID №16, SEQ ID №42 или SEQ ID №38, при этом каждая указанная последовательность конечного белкового продукта не содержит сигнальную полипептидную последовательность.
23. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 19, отличающаяся тем, что указанная моновалентная антигенсвязывающая полипептидная конструкция содержит scFv, включающий последовательность конечного белкового продукта, как показано в SEQ ID №:36, при этом указанная последовательность конечного белкового продукта не содержит сигнальную полипептидную последовательность.
24. Конструкция изолированного моновалентного антитела, которая связывает HER2, содержащая
конструкцию антигенсвязывающего полипептида, которая моновалентным образом связывается с HER2; и димерную конструкцию Fc-полипептида, содержащую два мономерных Fc-полипептида, каждый из которых содержит СН3-домен, отличающаяся тем, что указанный мономерный Fc-полипептид соединен с антигенсвязывающей полипептидной конструкцией;
при этом указанная конструкция антитела медиирует повышенное покрытие клетки-мишени рецепторами FcγR иммунных эффекторных клеток по сравнению с соответствующей конструкцией бивалентного антитела, которая связывает HER2 в эквимолярных концентрациях более KD и при насыщении.
25. Конструкция изолированного моновалентного антитела, которая связывает HER2, содержащая
конструкцию антигенсвязывающего полипептида, которая моновалентным образом связывает HER2; и
димерную конструкцию Fc-полипептида, содержащую два мономерных Fc-полипептида, каждый из которых содержит СН3-домен, отличающаяся тем, что указанный мономерный Fc-полипептид соединен с антигенсвязывающей полипептидной конструкцией;
при этом указанная конструкция антитела интернализуется клеткой-мишенью,
при этом указанная конструкция проявляет увеличение плотности связывания и Bmax к белку HER2, присутствующем на клетке-мишени по сравнению с соответствующей конструкцией бивалентного антитела, которая связывает HER2, и причем указанная конструкция проявляет по меньшей мере увеличенную ADCC, увеличенную ADCP и увеличенную CDC активность по сравнению с указанной соответствующей конструкцией бивалентного HER2-связывающего антитела в эквимолярных концентрациях больше KD и при насыщении.
26. Конструкция изолированного моновалентного антитела, которая связывает HER2, содержащая
конструкцию антигенсвязывающего полипептида, которая моновалентным образом связывается с HER2; и
димерную конструкцию Fc-полипептида, содержащую два мономерных Fc-полипептида, каждый из которых содержит СН3-домен, отличающаяся тем, что указанный мономерный Fc-полипептид соединен с антигенсвязывающей полипептидной конструкцией;
при этом указанная конструкция антитела связывает FcRn, но не проявляет больший Vss по сравнению с соответствующей конструкцией моноспецифического бивалентного антитела с двумя антигенсвязывающими участками.
27. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, отличающаяся тем, что конструкция моновалентного антитела конъюгирована с одной и более молекул лекарственных веществ.
28. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, отличающаяся тем, что указанная конструкция антитела не проявляет авидности.
29. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 24-26, отличающаяся тем, что указанная моновалентная НЕR2-связывающая полипептидная конструкция представляет собой по меньшей мере один из фрагментов Fab, scFv, sd Ab или полипептид.
30. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, отличающаяся тем, что указанная конструкция обладает более чем около 105% по меньшей мере одной из ADCC, ADCP и CDC активности соответствующей конструкции бивалентного антитела с полипептидной конструкцией, связывающей два антигена.
31. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, отличающаяся тем, что указанная конструкция обладает по меньшей мере около 125% по меньшей мере одной из ADCC, ADCP и CDC активности соответствующей конструкции бивалентного антитела с полипептидной конструкцией, связывающей два антигена.
32. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, отличающаяся тем, что указанная конструкция обладает по меньшей мере около 150% по меньшей мере одной из ADCC, ADCP и CDC активности соответствующей конструкции бивалентного антитела.
33. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, отличающаяся тем, что указанная конструкция обладает по меньшей мере около 300% по меньшей мере одной из ADCC, ADCP и CDC активности соответствующей конструкции бивалентного антитела с полипептидной конструкцией, связывающей два антигена.
34. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, отличающаяся тем, что указанное увеличение плотности связывания и Bmax составляет по меньшей мере около 125% плотности связывания и Bmax соответствующей конструкции бивалентного антитела.
35. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, отличающаяся тем, что указанное увеличение плотности связывания и Bmax составляет по меньшей мере около 150% плотности связывания и Bmax соответствующей конструкции бивалентного антитела.
36. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, отличающаяся тем, что указанное увеличение плотности связывания и Bmax составляет по меньшей мере около 200% плотности связывания и Bmax соответствующей конструкции бивалентного антитела.
37. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, отличающаяся тем, что димерная Fc-конструкция является гетеродимерной Fc-конструкцией, содержащей вариант СН3-домена.
38. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 37, отличающаяся тем, что указанный вариант СН3-домена содержит аминокислотные мутации, которые способствуют образованию указанного гетеродимера, обладающего стабильностью, сравнимой с нативным гомодимерным Fc-участком.
39. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 38, отличающаяся тем, что вариант СН3-домена имеет температуру плавления (Tm) около 70°С или выше.
40. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 38, отличающаяся тем, что вариант СН3-домена имеет температуру плавления (Tm) около 75°С или выше.
41. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 38, отличающаяся тем, что вариант СН3-домена имеет температуру плавления (Tm) около 80°С или выше.
42. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, 38-41, отличающаяся тем, что димерная Fc-конструкция дополнительно содержит вариант СН2-домена, включая его аминокислотные модификации, для облегчения избирательного связывания с Fc-гамма-рецепторами.
43. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 38-41, отличающаяся тем, что гетеродимерная Fc-конструкция не содержит дополнительную дисульфидную связь в СН3-домене, относящуюся к Fc-участку дикого типа.
44. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 38-41, отличающаяся тем, что гетеродимерная Fc-конструкция содержит дополнительную дисульфидную связь в варианте СН3-домене, относящуюся к Fc-участку дикого типа, и при этом вариант СН3-домена имеет температуру плавления (Tm) по меньшей мере около 77,5°С.
45. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, 38-41, отличающаяся тем, что димерная Fc-конструкция представляет собой гетеродимерную Fc-конструкцию, полученную с чистотой более чем приблизительно 75%.
46. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, 38-41, отличающаяся тем, что димерная Fc-конструкция представляет собой гетеродимерную Fc-конструкцию, полученную с чистотой более чем приблизительно 80%.
47. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, 38-41, отличающаяся тем, что димерная Fc-конструкция представляет собой гетеродимерную Fc-конструкцию, полученную с чистотой более чем приблизительно 90%.
48. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, 38-41, отличающаяся тем, что димерная Fc-конструкция представляет собой гетеродимерную Fc-конструкцию, полученную с чистотой более чем приблизительно 95%.
49. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-4, 7, 14, 22-26, 38-41, отличающаяся тем, что указанный мономерный Fc-полипептид соединен с помощью линкера с конструкцией антигенсвязывающего полипептида.
50. Конструкция изолированного моновалентного антитела по п. 49, отличающаяся тем, что указанный линкер является полипептидным линкером.
51. Конструкция изолированного моновалентного HER2-связывающего антитела по любому из пп. 24-26, отличающаяся тем, что указанная антигенсвязывающая полипептидная конструкция содержит полипептид, включающий последовательность конечного белкового продукта, как показано в SEQ ID №:14, SEQ ID №44 или SEQ ID №36, при этом указанная последовательность конечного белкового продукта не содержит сигнальную полипептидную последовательность.
52. Конструкция изолированного моновалентного НЕR2-связывающего антитела по любому из пп. 24-26, отличающаяся тем, что указанная димерная конструкция Fc-полипептида содержит первый и второй мономерные Fc-полипептиды, указанный первый мономерный Fc-полипептид содержит последовательность конечного белкового продукта, показанную в SEQ ID №:12, SEQ ID №40 или SEQ ID №36; и указанный второй мономерный Fc-полипептид, содержащий последовательность конечного белкового продукта, показанную в SEQ ID №16, SEQ ID №42 или SEQ ID №38, при этом каждая указанная последовательность конечного белкового продукта не содержит сигнальную полипептидную последовательность.
53. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту, кодирующую конструкцию изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-52.
54. Клетка-хозяин по п. 53, отличающаяся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая конструкцию антигенсвязывающего полипептида, и нуклеиновая кислота, кодирующая Fc-конструкцию, представлены в одном векторе.
55. Способ получения конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 1-52, при этом указанный способ включает стадии: (а) культивирования клетки-хозяина, содержащей нуклеиновую кислоту, кодирующую фрагмент антитела; и (b) выделение фрагмента антитела из культуры клетки-хозяина.
56. Фармацевтическая композиция, содержащая конструкцию моновалентного антитела по любому из пп. 1-52 и фармацевтически приемлемый носитель.
57. Фармацевтическая композиция по п. 56, дополнительно содержащая молекулу лекарственного вещества, конъюгированную с конструкцией моновалентного антитела.
58. Способ лечения рака, включающий назначение пациенту, нуждающемуся в лечении, эффективного количества фармацевтической композиции по любому из пп. 56 или 57.
59. Способ лечения нарушения передачи HER-сигнала, включающий назначение пациенту, нуждающемуся в лечении, эффективного количества фармацевтической композиции по любому из пп. 56 или 57.
60. Способ ингибирования роста опухоли, включающий осуществление контакта опухоли с композицией, содержащей эффективное количество конструкции моновалентного антитела по любому из пп. 1-52.
61. Способ уменьшения опухоли, включающий осуществление контакта опухоли с композицией, содержащей эффективное количество конструкции моновалентного антитела по любому из пп. 1-52.
62. Способ ингибирования передачи сигнала молекулой антигена, включающий осуществление контакта антигена с композицией, содержащей эффективное количество конструкции моновалентного антитела по любому из пп. 1-52.
63. Способ ингибирования связывания антигена со своим распознаваемый участником связывания, включающий осуществление контакта антигена с композицией, содержащей эффективное количество конструкции моновалентного антитела по любому из пп. 1-52, достаточное для связывания с антигеном.
64. Способ лечения рака молочной железы, включающий назначение пациенту, нуждающемуся в лечении, эффективного количества конструкции моновалентного антитела по любому из пп. 17-52.
65. Способ лечения рака молочной железы у пациента, частично отвечающего на лечение одним или более антителами трастузумаб, пертузумаб, TDM1 и анти-HER бивалентными антителами, указанный способ, включающий назначение пациенту, нуждающемуся в лечении, эффективного количества конструкции моновалентного антитела по любому из пп. 17-52.
66. Способ лечения рака молочной железы у пациента, не отвечающего на лечение одним или более антителами трастузумаб, пертузумаб, TDM1 (ADC) и анти-HER бивалентными антителами, включающий назначение пациенту, нуждающемуся в лечении, эффективного количества конструкции моновалентного антитела по любому из пп. 17-52.
67. Способ лечения рака молочной железы по любому из пп. 64-66, отличающийся тем, что указанный способ включает назначение указанной конструкции антитела в дополнение к другому терапевтическому агенту.
68. Способ лечения рака молочной железы по п. 67, отличающийся тем, что указанная конструкция антитела назначается одновременно с указанным терапевтическим агентом.
69. Способ лечения рака молочной железы по п. 67, отличающийся тем, что указанная конструкция антитела конъюгирована с указанным терапевтическим агентом.
70. Способ получения конструкции гликозилированного моновалентного антитела или конструкции гликосконструированного афукозилированного моновалентного антитела, включающий осуществление трансфекции по меньшей мере одной стабильной клетки млекопитающего:
первой последовательностью ДНК, кодирующей первый полипептид тяжелой цепи, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи и первый полипептид Fc-домена;
второй последовательностью ДНК, кодирующей второй полипептид тяжелой цепи, содержащий второй полипептид Fc-домена, при этом указанный второй полипептид тяжелой цепи лишен вариабельного домена; и
третьей последовательностью ДНК, кодирующей полипептид легкой цепи, содержащий вариабельный домен легкой цепи,
такими, что указанная первая последовательность ДНК, указанная вторая последовательность ДНК и указанная третья последовательность ДНК трансфецируются в указанную клетку млекопитающего в установленном соотношении;
транслируя указанную первую последовательность ДНК, указанную вторую последовательность ДНК и указанную третью последовательность ДНК в по меньшей мере одной клетке млекопитающего таким образом, что указанные полипептиды тяжелой и легкой цепей экспрессируются в виде требуемого гликозилированного асимметричного моновалентного антитела в указанной по меньшей мере одной стабильной клетке млекопитающего.
71. Способ по п. 70, включающий осуществление трансфекции по меньшей мере двух различных клеток с разными установленными соотношениями указанной первой последовательности ДНК, указанной второй последовательности ДНК и указанной третьей последовательности ДНК, таким образом, что по меньшей мере две клетки экспрессируют полипептиды тяжелой цепи и полипептид легкой цепи в разном соотношении.
72. Способ по п. 70, включающий осуществление трансфекции по меньшей мере одной клетки млекопитающего с мультицистронным вектором, содержащим по меньшей мере две из указанной первой, второй и третьей последовательностей ДНК.
73. Способ по любому из пп. 70-72, отличающийся тем, что указанная по меньшей мере одна клетка млекопитающего выбирается из группы, состоящей из: клеток VERO, HeLa, НЕК, NS0, яичника китайского хомяка (СНО), W138, ВНK, COS-7, Сасо-2 и MDCK, и их подклассов и вариантов.
74. Способ по любому из пп. 70-72, отличающийся тем, что указанное установленное соотношение первая последовательность ДНК:вторая последовательность ДНК и третья последовательность ДНК равно приблизительно 1:1:1.
75. Способ по любому из пп. 70-72, отличающийся тем, что указанное установленное соотношение первая последовательность ДНК:вторая последовательность ДНК:третья последовательность ДНК такое, что количество транслированного первого полипептида тяжелой цепи приблизительно равно количеству второго полипептида тяжелой цепи и количеству полипептида легкой цепи.
76. Способ по любому из пп. 70-72, отличающийся тем, что продукт экспрессии по меньшей мере одной стабильной клетки млекопитающего содержит больший процент требуемого гликозилированного моновалентного антитела по сравнению с мономерными полипептидами тяжелой и легкой цепей или других антител.
77. Способ по любому из пп. 70-72, включающий определение и очистку требуемого гликозилированного моновалентного антитела.
78. Способ по п. 77, отличающийся тем, что указанное определение выполняется одним или обеими методами жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии.
79. Способ получения конструкций антител с улучшенной ADCC-активностью, включающий осуществление трансфекции по меньшей мере одной стабильной клетки млекопитающего:
первой последовательностью ДНК, кодирующей первый полипептид тяжелой цепи, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи и первый полипептид Fc-домена;
второй последовательностью ДНК, кодирующей второй полипептид тяжелой цепи, содержащий второй полипептид Fc-домена, при этом указанный второй полипептид тяжелой цепи лишен вариабельного домена; и
третьей последовательностью ДНК, кодирующей полипептид легкой цепи, содержащий вариабельный домен легкой цепи,
такими, что указанная первая последовательность ДНК, указанная вторая последовательность ДНК и указанная третья последовательность ДНК трансфецируются в указанную клетку млекопитающего в установленном соотношении;
транслируя указанную первую последовательность ДНК, указанную вторую последовательность ДНК и указанную третью последовательность ДНК в по меньшей мере одной клетке млекопитающего таким образом, что указанные полипептиды тяжелой и легкой цепей экспрессируются в виде гликозилированного моновалентного антитела в указанной по меньшей мере одной стабильной клетке млекопитающего, при этом указанное гликозилированное моновалентное асимметричное антитело имеет увеличенную ADCC активность по сравнению с соответствующим антителом дикого типа.
80. Способ получения конструкций НЕR2-связывающих антител с по меньшей мере одной улучшенной ADCC, ADCP и CDC активностью, включающий осуществление трансфекции по меньшей мере одной стабильной клетки млекопитающего:
первой последовательностью ДНК, кодирующей первый полипептид тяжелой цепи, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи и первый полипептид Fc-домена;
второй последовательностью ДНК, кодирующей второй полипептид тяжелой цепи, содержащий второй полипептид Fc-домена, при этом указанный второй полипептид тяжелой цепи лишен вариабельного домена; и
третья последовательность ДНК, кодирующая полипептид легкой цепи, содержащий вариабельный домен легкой цепи
такими, что указанная первая последовательность ДНК, указанная вторая последовательность ДНК и указанная третья последовательность ДНК трансфецируются в указанную клетку млекопитающего в установленном соотношении;
транслируя указанную первую последовательность ДНК, указанную вторую последовательность ДНК и указанную третью последовательность ДНК в по меньшей мере одной клетке млекопитающего таким образом, что указанные полипептиды тяжелой и легкой цепей экспрессируются в виде асимметричного гликозилированного моновалентного HER2-связывающего антитела в указанной по меньшей мере одной стабильной клетке млекопитающего, причем указанное гликозилированное моновалентное HER2-связывающее антитело имеет по меньшей мере одно из следующего: улучшенную ADCC, ADCP и CDC активность по сравнению с соответствующим HER2-связывающим антителом дикого типа.
81. Способ увеличения концентрации антитела на по меньшей мере одной клетке-мишени, обеспечивающий применение к клетке-мишени конструкции моновалентного антитела, содержащей:
конструкцию антигенсвязывающего полипептида, которая моновалентным образом связывается с антигеном; димерный Fc-участок;
при этом указанная конструкция моновалентного антитела проявляет повышенную плотность связывания и Bmax к клетке-мишени, на которой присутствует указанный антиген, по сравнению с соответствующей конструкцией бивалентного антитела с двумя антигенсвязывающими участками, и
при этом указанная конструкция моновалентного антитела показывает улучшенную эффективность по сравнению с соответствующей конструкцией бивалентного антитела, и причем указанная улучшенная эффективность не обусловлена перекрестным связыванием с антигеном, димеризацией антигена.
82. Способ увеличения концентрации антитела на по меньшей мере одной клетке-мишени, обеспечивающий применение к клетке-мишени конструкции моновалентного антитела, содержащей
конструкцию антигенсвязывающего полипептида, которая моновалентным образом связывается с антигеном; димерный Fc-участок;
при этом указанная конструкция моновалентного антитела проявляет повышенную плотность связывания и Bmax к клетке-мишени, на которой присутствует указанный антиген, по сравнению с соответствующей конструкцией бивалентного антитела с двумя антигенсвязывающими участками, и
при этом указанная конструкция моновалентного антитела показывает улучшенную эффективность по сравнению с соответствующей конструкцией бивалентного антитела, и причем указанная улучшенная эффективность может индуцировать антигенную модуляцию.
83. Способ уничтожения опухоли, включающий осуществление контакта опухоли с композицией, содержащей эффективное количество конструкции моновалентного антитела по любому из пп. 1-52.
84. Конструкция изолированного моновалентного антитела, которая связывает HER2, содержащая
полипептид легкой цепи, содержащий последовательность конечного белкового продукта, как показано в SEQ ID №14;
первый полипептид тяжелой цепи, содержащий последовательность конечного белкового продукта, как показано в SEQ ID №12; и
второй полипептид тяжелой цепи, содержащий последовательность конечного белкового продукта, как показано в SEQ ID №16;
при этом указанная конструкция антитела способна моновалентным образом связывать клетку-мишень, на которой присутствует HER2, и при этом каждая указанная последовательность конечного белкового продукта не содержит сигнальную полипептидную последовательность.
85. Конструкция изолированного моновалентного антитела, которая связывает HER2, содержащая
полипептид легкой цепи, содержащий полипептидную последовательность, кодированную последовательностью ДНК, показанную в SEQ ID №13;
первый полипептид тяжелой цепи, содержащий полипептидную последовательность, кодированную последовательностью ДНК, показанную в SEQ ID №11; и
второй полипептид тяжелой цепи, содержащий полипептидную последовательность, кодированную последовательностью ДНК, показанную в SEQ ID №15;
при этом указанная конструкция антитела способна моновалентным образом связывать клетку-мишень, на которой присутствует HER2, и при этом каждая указанная полипептидная последовательность не содержит сигнальную полипептидную последовательность.
86. Конструкция изолированного моновалентного антитела, которая связывает HER2, содержащая
полипептид легкой цепи, содержащий последовательность конечного белкового продукта, как показано в SEQ ID №44;
первый полипептид тяжелой цепи, содержащий последовательность конечного белкового продукта, как показано в SEQ ID №40; и
второй полипептид тяжелой цепи, содержащий последовательность конечного белкового продукта, как показано в SEQ ID №42;
при этом указанная конструкция антитела способна моновалентным образом связывать клетку-мишень, на которой присутствует HER2, и при этом каждая указанная последовательность конечного белкового продукта не содержит сигнальную полипептидную последовательность.
87. Конструкция изолированного моновалентного антитела, которая связывает HER2, содержащая
полипептид легкой цепи, содержащий полипептидную последовательность, кодированную последовательностью ДНК, показанную в SEQ ID №43; и
первый полипептид тяжелой цепи, содержащий полипептидную последовательность, кодированную последовательностью ДНК, показанную в SEQ ID №39; и
второй полипептид тяжелой цепи, содержащий полипептидную последовательность, кодированную последовательностью ДНК, показанную в SEQ ID №41;
при этом указанная конструкция антитела способна моновалентным образом связывать клетку-мишень, на которой присутствует HER2, и при этом каждая указанная полипептидная последовательность не содержит сигнальную полипептидную последовательность.
88. Конструкция изолированного моновалентного антитела, которая связывает HER2, содержащая
первый полипептид, содержащий последовательность конечного белкового продукта, как показано в SEQ ID №36; и
второй полипептид, содержащий последовательность конечного белкового продукта, как показано в SEQ ID №38;
при этом указанная конструкция антитела способна моновалентным образом связывать клетку-мишень, на которой присутствует HER2, и при этом каждая указанная последовательность конечного белкового продукта не содержит сигнальную полипептидную последовательность.
89. Конструкция изолированного моновалентного антитела, которая связывает HER2, содержащая
первый полипептид, содержащий полипептидную последовательность, кодированную последовательностью ДНК, показанную в SEQ ID №35; и
второй полипептид, содержащий полипептидную последовательность, кодированную последовательностью ДНК, показанную в SEQ ID №37;
при этом указанная конструкция антитела способна моновалентным образом связывать клетку-мишень, на которой присутствует HER2, и при этом каждая указанная полипептидная последовательность не содержит сигнальную полипептидную последовательность.
90. Конструкция изолированного моновалентного антитела по любому из пп. 84-89, отличающаяся тем, что указанная конструкция моновалентного антитела избирательно и/или специфично связывает клетку-мишень, на которой присутствует HER2 с повышенной плотностью связывания и Bmax, по сравнению с соответствующей конструкцией моноспецифического бивалентного антитела с двумя HER2-связывающими участками; и при этом указанная конструкция моновалентного антитела демонстрирует целевую цитотоксичность сравнимую или более чем у указанной конструкции моноспецифического бивалентного антитела.
RU2014148704A 2012-05-10 2013-05-08 Конструкции одноруких моновалентных антител и их использование RU2014148704A (ru)

Applications Claiming Priority (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261645547P 2012-05-10 2012-05-10
US61/645,547 2012-05-10
US201261671640P 2012-07-13 2012-07-13
US61/671,640 2012-07-13
US201261722070P 2012-11-02 2012-11-02
US61/722,070 2012-11-02
US201361762812P 2013-02-08 2013-02-08
US61/762,812 2013-02-08
PCT/CA2013/050358 WO2013166604A1 (en) 2012-05-10 2013-05-08 Single-arm monovalent antibody constructs and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2014148704A true RU2014148704A (ru) 2016-07-10

Family

ID=49550028

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2014148704A RU2014148704A (ru) 2012-05-10 2013-05-08 Конструкции одноруких моновалентных антител и их использование

Country Status (9)

Country Link
US (2) US20150125449A1 (ru)
EP (1) EP2847224A4 (ru)
JP (1) JP6849868B2 (ru)
KR (1) KR20150008171A (ru)
CN (1) CN104520327B (ru)
AU (1) AU2013258844B2 (ru)
CA (1) CA2873720A1 (ru)
RU (1) RU2014148704A (ru)
WO (1) WO2013166604A1 (ru)

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112013011811A2 (pt) 2010-11-05 2023-02-23 Zymeworks Inc Modelo de anticorpo heterodimérico estável com mutações no domínio fc
WO2012116453A1 (en) 2011-03-03 2012-09-07 Zymeworks Inc. Multivalent heteromultimer scaffold design and constructs
RS62689B1 (sr) 2011-11-04 2021-12-31 Zymeworks Inc Dizajn stabilnog heterodimernog antitela sa mutacijama u fc domenu
BR112014022692A8 (pt) 2012-03-14 2021-07-20 Regeneron Pharma molécula de ligação de antígeno multiespecífica
WO2014004586A1 (en) 2012-06-25 2014-01-03 Zymeworks Inc. Process and methods for efficient manufacturing of highly pure asymmetric antibodies in mammalian cells
AU2013289881B2 (en) 2012-07-13 2018-01-18 Zymeworks Bc Inc. Multivalent heteromultimer scaffold design and constructs
CA2889951C (en) * 2012-11-02 2023-04-18 Zymeworks Inc. Crystal structures of heterodimeric fc domains
US9914785B2 (en) 2012-11-28 2018-03-13 Zymeworks Inc. Engineered immunoglobulin heavy chain-light chain pairs and uses thereof
EP3068892A4 (en) * 2013-11-13 2017-05-31 Zymeworks Inc. Monovalent antigen binding constructs targeting egfr and/or her2 and uses thereof
JP6817064B2 (ja) * 2013-11-27 2021-01-20 ザイムワークス，インコーポレイテッド Ｈｅｒ２を標的とする二重特異性抗原結合性コンストラクト
US20170355779A1 (en) * 2014-11-27 2017-12-14 Zymeworks Inc. Methods of using bispecific antigen-binding constructs targeting her2
EP3514181A1 (en) * 2015-02-24 2019-07-24 Academia Sinica A phage-displayed single-chain variable fragment library and antibodies selected therefrom
AU2016262168B2 (en) * 2015-05-13 2022-06-23 Zymeworks Bc Inc. Antigen-binding constructs targeting HER2
WO2017007796A1 (en) 2015-07-06 2017-01-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Multispecific antigen-binding molecules and uses thereof
EP3322735A4 (en) 2015-07-15 2019-03-13 Zymeworks Inc. BISPECIFIC ANTIGEN-BINDING CONSTRUCTS CONJUGATED TO A MEDICINAL PRODUCT
US11014983B2 (en) 2015-08-20 2021-05-25 Sutro Biopharma, Inc. Anti-Tim-3 antibodies, compositions comprising anti-Tim-3 antibodies and methods of making and using anti-Tim-3 antibodies
SG11201803703UA (en) 2015-11-24 2018-06-28 Annexon Inc Anti-complement factor c1q fab fragments and uses thereof
KR20180135460A (ko) * 2016-04-15 2018-12-20 자임워크스 인코포레이티드 면역치료제를 표적으로 하는 다중-특이적 항원-결합 작제물
US11352446B2 (en) 2016-04-28 2022-06-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of making multispecific antigen-binding molecules
WO2018156785A1 (en) * 2017-02-22 2018-08-30 Sutro Biopharma, Inc. Pd-1/tim-3 bi-specific antibodies, compositions thereof, and methods of making and using the same
JOP20190222A1 (ar) 2017-04-11 2019-09-24 Zymeworks Inc الأجسام المضادة ثنائية النوعية المضادة لـ pd-l1 والمضادة لـ tim-3
AR112603A1 (es) 2017-07-10 2019-11-20 Lilly Co Eli Anticuerpos biespecíficos inhibidores de punto de control
SG11202101369XA (en) 2018-08-17 2021-03-30 Regeneron Pharma Method and chromatography system for determining amount and purity of a multimeric protein
WO2022225329A1 (ko) * 2021-04-20 2022-10-27 고려대학교 산학협력단 향상된 암세포 사멸효능을 갖는 비대칭 항체
US20230279103A1 (en) * 2021-12-13 2023-09-07 Annexon, Inc. Anti-complement factor c1q antibodies with single binding arms and uses thereof
WO2023242371A1 (en) * 2022-06-15 2023-12-21 argenx BV Ph-dependent hsa-binding molecules and methods of use

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101658672B (zh) * 2002-10-08 2017-09-26 免疫医疗公司 用iii类抗cea单克隆抗体和治疗剂进行联合治疗
PL1718677T3 (pl) * 2003-12-19 2012-09-28 Genentech Inc Jednowartościowe fragmenty przeciwciała stosowane jako środki lecznicze
GB0614780D0 (en) * 2006-07-25 2006-09-06 Ucb Sa Biological products
US20080260738A1 (en) * 2007-04-18 2008-10-23 Moore Margaret D Single chain fc, methods of making and methods of treatment
EP2235064B1 (en) * 2008-01-07 2015-11-25 Amgen Inc. Method for making antibody fc-heterodimeric molecules using electrostatic steering effects
WO2009111707A1 (en) * 2008-03-06 2009-09-11 Genentech, Inc. Combination therapy with c-met and her antagonists
MX2011004050A (es) * 2008-10-17 2011-05-10 Genentech Inc Metodo de tratamiento.
MX341925B (es) * 2010-03-29 2016-09-07 Zymeworks Inc Anticuerpos con funcion efectora suprimida o mejorada.
KR101930964B1 (ko) * 2010-04-20 2018-12-19 젠맵 에이/에스 이종이량체 항체 ｆｃ-함유 단백질 및 그의 생산 방법
NZ604007A (en) * 2010-05-27 2015-03-27 Genmab As Monoclonal antibodies against her2 epitope
PL2591006T3 (pl) * 2010-07-09 2019-10-31 Bioverativ Therapeutics Inc Przetwarzalne cząsteczki jednołańcuchowe i polipeptydy wytworzone przy ich zastosowaniu
BR112013011811A2 (pt) * 2010-11-05 2023-02-23 Zymeworks Inc Modelo de anticorpo heterodimérico estável com mutações no domínio fc
SG11201408161RA (en) * 2012-06-08 2015-01-29 Sutro Biopharma Inc Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
CA2929834A1 (en) * 2013-11-13 2015-05-21 Zymeworks Inc. Methods using monovalent antigen binding constructs targeting her2
JP6531010B2 (ja) * 2015-08-19 2019-06-12 本田技研工業株式会社 駆動装置、輸送機器及び蓄電器制御方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN104520327A (zh) 2015-04-15
US20150125449A1 (en) 2015-05-07
WO2013166604A1 (en) 2013-11-14
EP2847224A1 (en) 2015-03-18
AU2013258844A1 (en) 2014-12-04
KR20150008171A (ko) 2015-01-21
CA2873720A1 (en) 2013-11-14
JP2015522526A (ja) 2015-08-06
AU2013258844B2 (en) 2017-12-21
JP6849868B2 (ja) 2021-03-31
EP2847224A4 (en) 2016-04-27
CN104520327B (zh) 2019-01-18
US20170174783A1 (en) 2017-06-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2014148704A (ru) Конструкции одноруких моновалентных антител и их использование
US11208459B2 (en) Constructs having a SIRP-alpha domain or variant thereof
ES2751915T3 (es) Proteínas de fusión de inmunoglobulina con SIRP alfa
EP3237006B1 (en) Bispecific tetravalent antibodies and methods of making and using thereof
Choi et al. A heterodimeric Fc-based bispecific antibody simultaneously targeting VEGFR-2 and Met exhibits potent antitumor activity
US20160009824A1 (en) Tetravalent bispecific antibodies
CN109963876B (zh) 抗pd-1/抗her2天然抗体结构样异源二聚体形式双特异抗体及其制备
Gong et al. Fabs-in-tandem immunoglobulin is a novel and versatile bispecific design for engaging multiple therapeutic targets
EP4047018B1 (en) Tetravalent bispecific antibody against pd-1 and vegf, preparation method therefor, and use thereof
TW201934582A (zh) 抗pd-1/抗her2天然抗體結構樣異源二聚體形式雙特異抗體及其製備
CN115066274A (zh) 三价结合分子
EP4303231A1 (en) Bispecific antibody
JP2023550419A (ja) 二機能性分子
WO2020135804A1 (zh) 异源二聚体融合蛋白
US20220127362A1 (en) Tetravalent bispecific antibody against pd-1/lag-3, preparation method therefor, and use thereof
WO2023221936A9 (zh) 双功能蛋白质及其制剂和用途
CA3233085A1 (en) Composition of recombinant antigen binding molecules and method of making and using thereof

Legal Events

Date Code Title Description
FA92 Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted)

Effective date: 20171011