RU2010107271A - Оптимизированный способ очистки рекомбинантного белка фактора роста - Google Patents
Оптимизированный способ очистки рекомбинантного белка фактора роста Download PDFInfo
- Publication number
- RU2010107271A RU2010107271A RU2010107271/10A RU2010107271A RU2010107271A RU 2010107271 A RU2010107271 A RU 2010107271A RU 2010107271/10 A RU2010107271/10 A RU 2010107271/10A RU 2010107271 A RU2010107271 A RU 2010107271A RU 2010107271 A RU2010107271 A RU 2010107271A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- protein
- gdf
- arginine
- inclusion bodies
- solubilization
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
1. Способ получения очищенного рекомбинантного GDF-5-подобного белка, который включает этапы разрушения бактериальных клеток и солюбилизацию телец включения для получения солюбилизированного мономера GDF-5-подобного белка, в котором ! а) бактериальные клетки разрушают с помощью гомогенизатора высокого давления при давлении разрушения между 800 и 900 бар; и/или ! б) выделенные тельца включения обрабатывают денатурирующим буфером для солюбилизации, содержащим L-аргинин. ! 2. Способ по п.1, в котором буфер для солюбилизации содержит 4-8 М мочевину и 400-500 мМ аргинин, предпочтительно 6 М мочевину и 500 мМ аргинин. ! 3. Способ по п.1, в котором буфер для солюбилизации содержит хелатор в концентрации от 5 до 100 мМ. ! 4. Способ по п.1, в котором буфер для солюбилизации имеет рН между 9,0 и 11,0. ! 5. Способ по п.1, дополнительно включающий удаление высокомолекулярных примесей непосредственно после этапа солюбилизации телец включения путем применения одного или более способов, выбранных из группы, состоящей из центрифугирования, объемной фильтрации и стерилизующей фильтрации. ! 6. Способ по п.1, дополнительно включающий удаление с помощью диафильтрации упомянутого L-аргинина из раствора, содержащего солюбилизированный белок телец включения. ! 7. Способ по п.1, в котором штамм-хозяин, экспрессирующий GDF-5-подобный белок в тельцах включения, является штаммом Е.coli, предпочтительно выбранным из штаммов Е.coli D1210 и Е.coli W3110. ! 8. GDF-5-подобный белок, полученный способом по любому из пп.4-7. ! 9. Белок по п.8, который содержит аминокислоты с 1 по 119 или с 1 по 120 последовательности SEQ ID NO: 3 (зрелый человеческий GDF-5). ! 10. Белок по п.8, который содержит аминокислоты с 400 по 501
Claims (12)
1. Способ получения очищенного рекомбинантного GDF-5-подобного белка, который включает этапы разрушения бактериальных клеток и солюбилизацию телец включения для получения солюбилизированного мономера GDF-5-подобного белка, в котором
а) бактериальные клетки разрушают с помощью гомогенизатора высокого давления при давлении разрушения между 800 и 900 бар; и/или
б) выделенные тельца включения обрабатывают денатурирующим буфером для солюбилизации, содержащим L-аргинин.
2. Способ по п.1, в котором буфер для солюбилизации содержит 4-8 М мочевину и 400-500 мМ аргинин, предпочтительно 6 М мочевину и 500 мМ аргинин.
3. Способ по п.1, в котором буфер для солюбилизации содержит хелатор в концентрации от 5 до 100 мМ.
4. Способ по п.1, в котором буфер для солюбилизации имеет рН между 9,0 и 11,0.
5. Способ по п.1, дополнительно включающий удаление высокомолекулярных примесей непосредственно после этапа солюбилизации телец включения путем применения одного или более способов, выбранных из группы, состоящей из центрифугирования, объемной фильтрации и стерилизующей фильтрации.
6. Способ по п.1, дополнительно включающий удаление с помощью диафильтрации упомянутого L-аргинина из раствора, содержащего солюбилизированный белок телец включения.
7. Способ по п.1, в котором штамм-хозяин, экспрессирующий GDF-5-подобный белок в тельцах включения, является штаммом Е.coli, предпочтительно выбранным из штаммов Е.coli D1210 и Е.coli W3110.
8. GDF-5-подобный белок, полученный способом по любому из пп.4-7.
9. Белок по п.8, который содержит аминокислоты с 1 по 119 или с 1 по 120 последовательности SEQ ID NO: 3 (зрелый человеческий GDF-5).
10. Белок по п.8, который содержит аминокислоты с 400 по 501 последовательности SEQ ID NO: 1 (домен цистинового узла человеческого GDF-5).
11. Белок по п.8, который содержит аминокислоты с 1 по 119 и с 1 по 120 последовательности SEQ ID NO: 4 (зрелый мономерный человеческий GDF-5).
12. Применение раствора, содержащего мочевину и L-аргинин, для солюбилизации бактериальных телец включения для получения содержащегося в них мономера GDF-5-подобного белка.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP07014798A EP2019117A1 (en) | 2007-07-27 | 2007-07-27 | Optimized purification process of recombinant growth factor protein |
EP07014798.8 | 2007-07-27 | ||
PCT/EP2008/005016 WO2009015736A1 (en) | 2007-07-27 | 2008-06-20 | Optimized purification process of recombinant growth factor protein |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2010107271A true RU2010107271A (ru) | 2011-09-10 |
RU2491290C2 RU2491290C2 (ru) | 2013-08-27 |
Family
ID=38698247
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2010107271/10A RU2491290C2 (ru) | 2007-07-27 | 2008-06-20 | Оптимизированный способ очистки рекомбинантного белка фактора роста |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8187837B2 (ru) |
EP (2) | EP2019117A1 (ru) |
JP (1) | JP2010534690A (ru) |
CN (1) | CN101990546B (ru) |
AU (1) | AU2008281090B2 (ru) |
CA (1) | CA2694453C (ru) |
HK (1) | HK1154031A1 (ru) |
PT (1) | PT2173767E (ru) |
RU (1) | RU2491290C2 (ru) |
WO (1) | WO2009015736A1 (ru) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1574210B1 (en) | 1999-02-26 | 2016-04-06 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Microemulsions with adsorbed macromolecules |
AU2007234612B2 (en) | 2006-12-14 | 2013-06-27 | Johnson & Johnson Regenerative Therapeutics, Llc | Protein stabilization formulations |
US7678764B2 (en) | 2007-06-29 | 2010-03-16 | Johnson & Johnson Regenerative Therapeutics, Llc | Protein formulations for use at elevated temperatures |
US8058237B2 (en) | 2007-08-07 | 2011-11-15 | Advanced Technologies & Regenerative Medicine, LLC | Stable composition of GDF-5 and method of storage |
CN102026619A (zh) | 2008-04-14 | 2011-04-20 | 先进科技及再生医学有限责任公司 | 液体缓冲的gdf-5制剂 |
CA2815342A1 (en) * | 2010-10-20 | 2012-04-26 | Medimmune, Llc | Methods for processing inclusion bodies |
US8956829B2 (en) | 2013-01-25 | 2015-02-17 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Human recombinant growth and differentiaton factor-5 (rhGDF-5) |
US9169308B2 (en) | 2013-01-25 | 2015-10-27 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Methods and compositions of human recombinant growth and differentiation factor-5 (rhGDF-5) isolated from inclusion bodies |
US8945872B2 (en) | 2013-01-25 | 2015-02-03 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Methods of purifying human recombinant growth and differentiation factor-5 (rhGDF-5) protein |
US9359417B2 (en) | 2013-01-25 | 2016-06-07 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Cell cultures and methods of human recombinant growth and differentiaton factor-5 (rhGDF-5) |
US9051389B2 (en) | 2013-01-25 | 2015-06-09 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Expression conditions and methods of human recombinant growth and differentiation factor-5 (rhGDF-5) |
CN103897052B (zh) * | 2014-03-27 | 2017-01-04 | 华东理工大学 | 一种白细胞介素-24突变体及其制备方法和应用 |
CN106163553B (zh) | 2014-04-03 | 2021-07-23 | 彼昂德瓦克斯医药有限公司 | 多聚体-多表位流感多肽的组合物及其产生 |
CN111411138A (zh) * | 2020-03-27 | 2020-07-14 | 苏州佑宁康生物技术有限公司 | 一种重组蛋白的制备方法 |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2057809C1 (ru) * | 1985-12-02 | 1996-04-10 | Чугай Сейяку Кабусики Кайся | Способ получения фактора, стимулирующего образование колоний гранулоцитов |
TW360711B (en) * | 1991-06-10 | 1999-06-11 | Lucky Ltd | CDNAs of Korean hepatitis C virus and polypeptides encoded thereby |
AU674500B2 (en) * | 1991-11-04 | 1997-01-02 | Genetics Institute, Llc | Recombinant bone morphogenetic protein heterodimers, compositions and methods of use |
EP1439190A1 (en) * | 1993-01-12 | 2004-07-21 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Growth differentiation factor-5 |
US5399677A (en) * | 1993-12-07 | 1995-03-21 | Genetics Institute, Inc. | Mutants of bone morphogenetic proteins |
PT733109E (pt) * | 1993-12-07 | 2006-07-31 | Genetics Inst Llc | Proteinas morfogeneticas dos 0ss0s pmo-12 e pmo-13 e as suas composicoes para inducao de tendao |
PL186518B1 (pl) * | 1995-04-19 | 2004-01-30 | Bioph Biotech Entw Pharm Gmbh | Białko, kompozycja farmaceutyczna i sposób wytwarzania białka |
JPH11335398A (ja) * | 1998-05-22 | 1999-12-07 | Hoechst Marion Roussel Kk | 新規な骨誘導活性を有する単量体蛋白質およびそれらからなる軟骨・骨疾患の予防および治療薬 |
US6846906B1 (en) * | 1998-10-07 | 2005-01-25 | Stryker Corporation | Modified proteins of the TGF-β superfamily, including morphogenic proteins |
US20030120042A1 (en) * | 2000-03-30 | 2003-06-26 | Takao Yamada | Process for producing recombinant protein |
EP1449848A1 (en) * | 2003-02-20 | 2004-08-25 | GBF German Research Centre for Biotechnology | Method for the production of cystine-knot proteins |
EP1698691A1 (en) * | 2005-03-04 | 2006-09-06 | Biopharm Gesellschaft zur biotechnologischen Entwicklung von Pharmaka mbH | Growth factor mutants with improved biological activity |
-
2007
- 2007-07-27 EP EP07014798A patent/EP2019117A1/en not_active Withdrawn
-
2008
- 2008-06-20 WO PCT/EP2008/005016 patent/WO2009015736A1/en active Application Filing
- 2008-06-20 US US12/670,734 patent/US8187837B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-06-20 CN CN200880105242.XA patent/CN101990546B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2008-06-20 RU RU2010107271/10A patent/RU2491290C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-06-20 AU AU2008281090A patent/AU2008281090B2/en not_active Ceased
- 2008-06-20 CA CA2694453A patent/CA2694453C/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-06-20 EP EP08759313.3A patent/EP2173767B1/en not_active Not-in-force
- 2008-06-20 JP JP2010518515A patent/JP2010534690A/ja active Pending
- 2008-06-20 PT PT87593133T patent/PT2173767E/pt unknown
-
2011
- 2011-08-11 HK HK11108401.3A patent/HK1154031A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101990546A (zh) | 2011-03-23 |
JP2010534690A (ja) | 2010-11-11 |
CN101990546B (zh) | 2015-03-04 |
CA2694453A1 (en) | 2009-02-05 |
CA2694453C (en) | 2016-10-11 |
RU2491290C2 (ru) | 2013-08-27 |
EP2019117A1 (en) | 2009-01-28 |
PT2173767E (pt) | 2013-05-08 |
EP2173767B1 (en) | 2013-04-17 |
HK1154031A1 (en) | 2012-04-20 |
WO2009015736A1 (en) | 2009-02-05 |
US20110160441A1 (en) | 2011-06-30 |
EP2173767A1 (en) | 2010-04-14 |
AU2008281090B2 (en) | 2013-06-27 |
AU2008281090A1 (en) | 2009-02-05 |
US8187837B2 (en) | 2012-05-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2010107271A (ru) | Оптимизированный способ очистки рекомбинантного белка фактора роста | |
Clark | Protein refolding for industrial processes | |
CN105755078B (zh) | 一种医用级鱼皮胶原的制备方法及其应用 | |
US7709227B2 (en) | Multimeric ELP fusion constructs | |
EP2367847B1 (en) | Collagen extraction from aquatic animals | |
CN103966294B (zh) | 生物活性胶原提取方法 | |
EA201270322A1 (ru) | НОВЫЙ ЭНДОЛИЗИН OBPgpLYS | |
JP5437378B2 (ja) | ヒャッポダ由来のヘモコアグラーゼ | |
US20070017447A1 (en) | Avian eggshell membrane polypeptide extraction via fermentation process | |
CN107849551A (zh) | 新型胰蛋白酶同功异型物和其用途 | |
RU2016152151A (ru) | Препарат, содержащий фактор viii и пептиды фактора фон виллебранда | |
CN100402646C (zh) | 一种生产重组人骨形态发生蛋白的方法 | |
KR20140122532A (ko) | 축산 부산물로부터의 고순도 콜라겐의 추출방법 | |
Mohamad Razali et al. | Improving collagen processing towards a greener approach: current progress | |
Ahmed et al. | In-vitro self-assembly and antioxidant properties of collagen type I from Lutjanus erythropterus, and Pampus argenteus skin | |
CN1786017A (zh) | 重组人成骨蛋白-1的复性及其制剂制备方法 | |
CN107630058B (zh) | 一种新型自组装胶原蛋白及制备方法 | |
CN112028980B (zh) | 丝胶蛋白、提取方法、作为细胞抗病毒免疫增强剂和应用 | |
JP6754982B2 (ja) | 発育障害抑制材 | |
Panggabean et al. | Cutting edge aquatic-based collagens in tissue engineering | |
CN109593765A (zh) | CpG寡脱氧核苷酸、免疫组成物及其用途 | |
TWI236501B (en) | Process for extracting soluble collagen from animal tissue and products containing soluble collagen prepared therefrom | |
Gerami et al. | Co-solute assistance in refolding of recombinant proteins | |
US7741441B2 (en) | Method for producing type IV collagen | |
JPWO2019239751A1 (ja) | 細胞移植用組成物及び細胞移植方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180621 |