RU2005113706A - Вариация человеческого гормона роста и ее применения - Google Patents

Claims (28)

1. Изолированный вариант молекулы нуклеиновой кислоты гормона роста человека, GH1, содержащий следующую замену: +1491 C→G, где 1491 относится к местоположению нуклеотида относительно сайта инициации транскрипции этого гена, который обозначен как 1.

2. Изолированный вариант молекулы нуклеиновой кислоты гормона роста, GH1, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок, то есть белок гормона роста (ГР), включающий замену lle179Met.

3. Изолированный вариант молекулы нуклеиновой кислоты по п.1 или 2, отличающийся тем, что молекула представляет собой гДНК (геномную ДНК), кДНК (комплементарную ДНК) или мРНК (матричную РНК).

4. Транскрипт молекулы нуклеиновой кислоты, как она определена в пп.1, 2 или 3.

5. Изолированный полипептид, кодируемый молекулой нуклеиновой кислоты, как она определена в пп.1, 2 или 3.

6. Изолированный полипептид, который является вариантом белка гормона роста ГР, и который включает замену lle179Met.

7. Способ скрининга для отбора индивидуума, у которого предполагают наличие ГР с нарушенной функцией, включающий следующие этапы:

(a) получение от индивидуума испытуемой пробы, содержащей молекулу нуклеиновой кислоты гена GH1 человека;

(b) секвенирование указанной молекулы;

(c) обследование последовательности молекулы на наличие замены +1491 C→G; и

(d) если указанная замена наличествует, делается вывод о наличии дисфункции ГР.

8. Способ скрининга по п.7, отличающийся тем, что этап секвенирования включает способ полимеразной цепной реакции (ПЦР).

9. Способ скрининга для отбора индивидуума, у которого предполагают наличие ГР с нарушенной функцией, включающий следующие этапы:

(a) получение от индивидуума испытуемой пробы, содержащей полипептид гормона роста, ГР;

(b) секвенирование полипептида;

(с) обследование последовательности полипептида на наличие замены lle179Met; и

(d) если указанная замена наличествует, делается вывод о наличии дисфункции ГР.

10. Набор, пригодный для осуществления способа скрининга, как он определен в пп.7, 8 или 9, причем указанный набор содержит

(а) олигонуклеотид, имеющий нуклеотидную последовательность, соответствующую области +1491 гена GH1, причем эта область содержит замену +1491 C→G; и

(b) олигонуклеотид, имеющий нуклеотидную последовательность, соответствующую нуклеотидной последовательности дикого типа в области, определенной в (а); и, по усмотрению,

(c) один или более реагентов, подходящих для проведения ПЦР с целью амплификации необходимых участков ДНК пациента.

11. Олигонуклеотид, пригодный для использования в способах по пп.7-9, и, по усмотрению, предусматриваемый в наборе по п.10.

12. Изолированный полипептид или белок гормона роста, который содержит замену lle179Met и который далее обеспечивает избирательную активацию опосредованных рецептором путей клеточной сигнализации.

13. Изолированный полипептид или белок по п.12, отличающийся тем, что полипептид или белок активирует путь STAT5, но проявляет сниженную способность к активации пути активируемой митогеном протеин-киназы (МАРК).

14. Изолированный полипептид или белок по п.13, отличающийся тем, что сниженная способность к активации пути МАРК составляет менее 70% от способности к активации этого пути у белка ГР дикого типа.

15. Изолированный полипептид или белок по п.14, отличающийся тем, что сниженная способность к активации составляет менее 50%.

16. Изолированный полипептид или белок по п.14, отличающийся тем, что сниженная способность к активации составляет менее 45%.

17. Изолированный полипептид или белок гормона роста, который характеризуется наличием сниженной способности к активации пути MAP киназы.

18. Изолированный полипептид или белок по п.17, отличающийся тем, что указанный путь МАРК - это путь киназы, регулируемой внеклеточными сигналами (ERK).

19. Способ скрининга для отбора индивидуума, у которого предполагается наличие ГР с нарушенной функцией, включающий следующие этапы:

(а) получение от индивидуума испытуемой пробы, содержащей эндогенный гормон роста индивидуума;

(b) исследование гормона роста для определения того, активирует ли он и до какой степени активирует опосредованный рецептором путь клеточной сигнализации МАРК; и

(c) в случае снижения эффективности пути клеточной сигнализации МАРК, в сравнении с ГР дикого типа, делается заключение о наличии дисфункции ГР.

20. Применение изолированной молекулы нуклеиновой кислоты, как она определена в пп.1-3, для диагностики дисфункции гормона роста или для разработки подходящих способов ее лечения.

21. Изолированный полипептид или белок по пп.12-18, предназначенный для диагностики дисфункции гормона роста или для разработки подходящих способов ее лечения.

22. Антитела, специфичные к отдельному полипептиду или белку гормона роста, как он определен в пп.12-18.

23. Фармацевтическая композиция, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты, как она определена в пп.1-3, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем.

24. Фармацевтическая композиция, содержащая изолированный полипептид или белок, как он определен в пп.12-18, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем.

25. Вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты, как она определена в пп.1-3.

26. Клетка-хозяин, содержащая вектор, по п.25

27. Способ получения изолированного полипептида или белка, как он определен в пп.12-18, который включает

(а) культивирование клетки-хозяина, по п.26; и

(b) выделение из культуральной среды полипептида или белка, продуцируемого указанной клеткой.

28. Полипептид или белок, полученный способом по п.27.