RU2004119814A - Способ получения рекомбинантного полипептида - Google Patents
Способ получения рекомбинантного полипептида Download PDFInfo
- Publication number
- RU2004119814A RU2004119814A RU2004119814/13A RU2004119814A RU2004119814A RU 2004119814 A RU2004119814 A RU 2004119814A RU 2004119814/13 A RU2004119814/13 A RU 2004119814/13A RU 2004119814 A RU2004119814 A RU 2004119814A RU 2004119814 A RU2004119814 A RU 2004119814A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- nucleotide sequence
- host cell
- interest
- recombinant polypeptide
- polypeptide
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/505—Erythropoietin [EPO]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
- C12N15/90—Stable introduction of foreign DNA into chromosome
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
- C12N15/90—Stable introduction of foreign DNA into chromosome
- C12N15/902—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination
- C12N15/907—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination in mammalian cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2121/00—Preparations for use in therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2840/00—Vectors comprising a special translation-regulating system
- C12N2840/20—Vectors comprising a special translation-regulating system translation of more than one cistron
- C12N2840/203—Vectors comprising a special translation-regulating system translation of more than one cistron having an IRES
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Claims (24)
1. Способ получения трансформированной эукариотической клетки-хозяина, которая экспрессирует представляющий интерес рекомбинантный полипептид, заключающийся в том, что в эукариотическую клетку-хозяина осуществляют интродукцию:
(а) первого полинуклеотидного вектора, который содержит (I) первую нуклеотидную последовательность, кодирующую представляющий интерес рекомбинантный полипептид; и (II) вторую нуклеотидную последовательность, кодирующую селектируемый маркер, где вторая нуклеотидная последовательность амплифицируется, когда клетку-хозяина приводят в контакт с селектирующим агентом, и
(б) второго полинуклеотидного вектора, имеющего практически такую же нуклеотидную последовательность, что и первый полинуклеотидный вектор, за исключением того, что вторая нуклеотидная последовательность заменена третьей нуклеотидной последовательностью, которая кодирует другой селектируемый маркер;
при этом первый полинуклеотидный вектор и второй полинуклеотидный вектор интегрируют в геном клетки-хозяина.
2. Способ по п.1, в котором вторая нуклеотидная последовательность кодирует полипептид дигидрофолат-редуктазу, а селектирующий агент представляет собой метотрексат.
3. Способ по п.1, в котором представляющим интерес рекомбинантным полипептидом является человеческий эритропоэтин.
4. Способ по п.1, в котором третья нуклеотидная последовательность кодирует ген, обусловливающий устойчивость к антибиотику.
5. Способ по п.4, в котором антибиотик представляет собой G-418, неомицин или другой антибиотик из группы неомицина.
6. Способ по п.1, в котором клетка-хозяин представляет собой клетку яичника китайского хомячка (СНО).
7. Трансформированная эукариотическая клетка-хозяин, в одну или несколько хромосом которой интегрированы:
(а) первый полинуклеотидный вектор, который содержит (I) первую нуклеотидную последовательность, кодирующую представляющий интерес рекомбинантный полипептид; и (II) вторую нуклеотидную последовательность, кодирующую селектируемый маркер, где вторая нуклеотидная последовательность амплифицируется, когда клетку-хозяина приводят в контакт с селектирующим агентом, и
(б) второй полинуклеотидный вектор, имеющий практически такую же нуклеотидную последовательность, что и первый полинуклеотидный вектор, за исключением того, что вторая нуклеотидная последовательность заменена третьей нуклеотидной последовательностью, которая кодирует другой селектируемый маркер.
8. Клетка-хозяин по п.7, в которой вторая нуклеотидная последовательность кодирует полипептид дигидрофолат-редуктазу.
9. Клетка-хозяин по п.7, в которой представляющим интерес рекомбинантным полипептидом является эритропоэтин.
10. Клетка-хозяин по п.7, представляющая собой СНО-клетку.
11. Способ получения представляющего интерес рекомбинантного человеческого эритропоэтина, заключающийся в том, что трансформированную клетку-хозяина по одному из пп. 7-10 культивируют в условиях, при которых происходит экспрессия первой нуклеотидной последовательности.
12. Способ по п.11, в котором клетку-хозяина культивируют в присутствии селектирующего агента, который обусловливает амплификацию второй нуклетидной последовательности.
13. Способ по п.12, в котором вторая нуклеотидная последовательность кодирует полипептид дигидрофолат-редуктазу, а селектирующий агент представляет собой метотрексат.
14. Способ по п.11, в котором представляющим интерес рекомбинантным полипептидом является эритропоэтин.
15. Способ по п.11, в котором представляющий интерес экспрессируемый рекомбинантный полипептид секретируется в культуральную среду.
16. Способ по п.15, который дополнительно предусматривает выделение представляющего интерес экспрессируемого рекомбинантного полипептида из культуральной среды.
17. Способ по п.16, в котором представляющим интерес рекомбинантным полипептидом является эритропоэтин.
18. Трансформированная клетка-хозяин из организма млекопитающего, в одну или несколько хромосом которой стабильно интегрированы: (а) а полинуклеотидная последовательность, которая кодирует полипептид дигидрофолат-редуктазу и эритропоэтин, и (б) полинуклеотидная последовательность, отличающаяся от полинуклеотидной последовательности, указанной в (а), и кодирующая эритропоэтин и полипептид, который обусловливает устойчивость к антибиотикам.
19. Способ получения рекомбинантного человеческого эритропоэтина, заключающийся в том, что клетку-хозяина по п.18 культивируют в условиях, при которых происходит экспрессия полинуклеотидной последовательности, кодирующей человеческий эритропоэтин.
20. Способ по п.19, в котором клетку-хозяина культивируют в присутствии метотрексата.
21. Способ по п.19, в котором что представляющий интерес рекомбинантный полипептид секретируется в культуральную среду.
22. Способ по п.21, который дополнительно предусматривает выделение представляющего интерес экспрессируемого рекомбинантного полипептида из культуральной среды.
23. Композиция, содержащая:
(а) первый полинуклеотидный вектор, который содержит (I) первую нуклеотидную последовательность, кодирующую представляющий интерес рекомбинантный полипептид; и (II) вторую нуклеотидную последовательность, которая при интеграции в геном клетки хозяина амплифицируется, когда клетку-хозяина приводят в контакт с селектирующим агентом, который обусловливает амплификацию нуклеотидной последовательности, и
(б) второй полинуклеотидный вектор, имеющий практически такую же нуклеотидную последовательность, что и первый полинуклеотидный вектор, за исключением того, что вторая нуклеотидная последовательность заменена третьей нуклеотидной последовательностью, которая кодирует другой селектируемый маркер.
24. Композиция по п.23, в которой представляющим интерес рекомбинантным полипептидом является человеческий эритропоэтин.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US33386801P | 2001-11-28 | 2001-11-28 | |
US60/333,868 | 2001-11-28 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2004119814A true RU2004119814A (ru) | 2005-04-20 |
Family
ID=23304597
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2004119814/13A RU2004119814A (ru) | 2001-11-28 | 2002-11-26 | Способ получения рекомбинантного полипептида |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20050084969A1 (ru) |
EP (1) | EP1453966B1 (ru) |
JP (1) | JP4723185B2 (ru) |
KR (1) | KR20040063937A (ru) |
CN (1) | CN1596310A (ru) |
AU (1) | AU2002358047A1 (ru) |
BR (1) | BR0214489A (ru) |
CA (1) | CA2468832A1 (ru) |
HR (1) | HRP20040477A2 (ru) |
HU (1) | HUP0500059A2 (ru) |
IL (1) | IL161909A0 (ru) |
MX (1) | MXPA04005191A (ru) |
NO (1) | NO20042173L (ru) |
NZ (1) | NZ533133A (ru) |
PL (1) | PL370550A1 (ru) |
RU (1) | RU2004119814A (ru) |
SI (1) | SI1453966T1 (ru) |
WO (1) | WO2003046187A1 (ru) |
ZA (1) | ZA200403802B (ru) |
Families Citing this family (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007528195A (ja) * | 2003-10-09 | 2007-10-11 | デウン カンパニー,リミテッド | 高シアル酸含量のヒトトロンボポエチンを精製する方法 |
AR053416A1 (es) | 2005-11-10 | 2007-05-09 | Protech Pharma S A | Combinacion de glicoisoformas para el tratamiento o prevencion de la septicemia, linea celular transgenica productora de glicoformas de eritropoyetina, composicion farmaceutica que comprende a dicha combinacion, procedimientos para obtener la linea celular, procedimiento para producir dicha combinac |
ES2695999T3 (es) | 2007-10-12 | 2019-01-11 | Hoffmann La Roche | Expresión de proteínas a partir de múltiples ácidos nucleicos |
WO2012077128A1 (en) * | 2010-12-07 | 2012-06-14 | Intas Biopharmaceuticals Limited | A novel cell line development process to produce recombinant proteins using twin vector expression system |
EP2702077A2 (en) | 2011-04-27 | 2014-03-05 | AbbVie Inc. | Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins |
US9334319B2 (en) | 2012-04-20 | 2016-05-10 | Abbvie Inc. | Low acidic species compositions |
US9067990B2 (en) | 2013-03-14 | 2015-06-30 | Abbvie, Inc. | Protein purification using displacement chromatography |
WO2013158273A1 (en) | 2012-04-20 | 2013-10-24 | Abbvie Inc. | Methods to modulate c-terminal lysine variant distribution |
US9512214B2 (en) | 2012-09-02 | 2016-12-06 | Abbvie, Inc. | Methods to control protein heterogeneity |
SG11201507230PA (en) | 2013-03-12 | 2015-10-29 | Abbvie Inc | Human antibodies that bind human tnf-alpha and methods of preparing the same |
WO2014151878A2 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Abbvie Inc. | Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosacharides |
US9017687B1 (en) | 2013-10-18 | 2015-04-28 | Abbvie, Inc. | Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography |
US10066001B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-09-04 | Apotex Inc. | Enhanced liquid formulation stability of erythropoietin alpha through purification processing |
JP6050289B2 (ja) * | 2013-07-11 | 2016-12-21 | Jcrファーマ株式会社 | 組換え蛋白質高発現細胞株の選択法 |
EP3052640A2 (en) | 2013-10-04 | 2016-08-10 | AbbVie Inc. | Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins |
US9085618B2 (en) | 2013-10-18 | 2015-07-21 | Abbvie, Inc. | Low acidic species compositions and methods for producing and using the same |
US9181337B2 (en) | 2013-10-18 | 2015-11-10 | Abbvie, Inc. | Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same |
WO2015073884A2 (en) | 2013-11-15 | 2015-05-21 | Abbvie, Inc. | Glycoengineered binding protein compositions |
RU2750721C2 (ru) | 2017-03-10 | 2021-07-01 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Способ получения мультиспецифических антител |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FI86885C (fi) * | 1984-04-20 | 1992-10-26 | Genentech Inc | Foerfarande foer framstaellning av human rekombinantfaktor viii och nukleinsyrasekvenser och vektorer anvaend daertill |
US4965199A (en) * | 1984-04-20 | 1990-10-23 | Genentech, Inc. | Preparation of functional human factor VIII in mammalian cells using methotrexate based selection |
DE3624453A1 (de) * | 1986-07-19 | 1988-01-28 | Behringwerke Ag | Verfahren zur herstellung von humanem antithrombin iii (atiii), dafuer geeignete vektoren und wirtszellen, so erhaltenes, biologisch aktives atiii und dieses enthaltende arzneimittel |
EP0319206A3 (en) * | 1987-11-30 | 1990-04-18 | Berlex Laboratories, Inc. | Gene amplification |
IL118201A (en) * | 1995-05-11 | 2004-12-15 | Roche Diagnostics Gmbh | Preparation comprising a protein with human erythropoietin activity which is free of serum and non-recombinant mammalian protein and process for the preparation thereof |
-
2002
- 2002-11-26 NZ NZ533133A patent/NZ533133A/en unknown
- 2002-11-26 EP EP20020791720 patent/EP1453966B1/en not_active Revoked
- 2002-11-26 US US10/497,015 patent/US20050084969A1/en not_active Abandoned
- 2002-11-26 KR KR10-2004-7008030A patent/KR20040063937A/ko not_active Application Discontinuation
- 2002-11-26 BR BR0214489-1A patent/BR0214489A/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-11-26 CN CNA028236963A patent/CN1596310A/zh active Pending
- 2002-11-26 IL IL16190902A patent/IL161909A0/xx unknown
- 2002-11-26 SI SI200231005T patent/SI1453966T1/sl unknown
- 2002-11-26 JP JP2003547619A patent/JP4723185B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2002-11-26 HU HU0500059A patent/HUP0500059A2/hu unknown
- 2002-11-26 MX MXPA04005191A patent/MXPA04005191A/es not_active Application Discontinuation
- 2002-11-26 AU AU2002358047A patent/AU2002358047A1/en not_active Abandoned
- 2002-11-26 CA CA002468832A patent/CA2468832A1/en not_active Abandoned
- 2002-11-26 WO PCT/EP2002/013297 patent/WO2003046187A1/en active Application Filing
- 2002-11-26 PL PL02370550A patent/PL370550A1/xx not_active Application Discontinuation
- 2002-11-26 RU RU2004119814/13A patent/RU2004119814A/ru not_active Application Discontinuation
-
2004
- 2004-05-18 ZA ZA200403802A patent/ZA200403802B/en unknown
- 2004-05-26 NO NO20042173A patent/NO20042173L/no not_active Application Discontinuation
- 2004-05-27 HR HR20040477A patent/HRP20040477A2/xx not_active Application Discontinuation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
NZ533133A (en) | 2006-02-24 |
EP1453966A1 (en) | 2004-09-08 |
PL370550A1 (en) | 2005-05-30 |
CN1596310A (zh) | 2005-03-16 |
NO20042173L (no) | 2004-08-11 |
AU2002358047A1 (en) | 2003-06-10 |
ZA200403802B (en) | 2005-07-01 |
JP4723185B2 (ja) | 2011-07-13 |
WO2003046187A1 (en) | 2003-06-05 |
IL161909A0 (en) | 2005-11-20 |
JP2005510242A (ja) | 2005-04-21 |
HUP0500059A2 (hu) | 2005-04-28 |
SI1453966T1 (sl) | 2012-11-30 |
CA2468832A1 (en) | 2003-06-05 |
US20050084969A1 (en) | 2005-04-21 |
HRP20040477A2 (en) | 2005-06-30 |
BR0214489A (pt) | 2004-10-19 |
MXPA04005191A (es) | 2005-04-29 |
KR20040063937A (ko) | 2004-07-14 |
EP1453966B1 (en) | 2012-07-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2004119814A (ru) | Способ получения рекомбинантного полипептида | |
EP1409667B2 (en) | Process for preparing variant polynucleotides | |
JP2005510242A5 (ru) | ||
US20230212236A1 (en) | Protein secretory factor with high secretory efficiency and an expression vector comprising the same | |
RU2003116125A (ru) | Способы модификации эукариотических клеток | |
WO2006012414A3 (en) | Novel polyadenylation signal for use in expression vectors | |
US20220380749A1 (en) | Base editing systems for achieving c to a and c to g base mutation and application thereof | |
EP1409666B1 (en) | Process for preparing variant polynucleotides | |
Yoshikawa et al. | Flow cytometry: an improved method for the selection of highly productive gene‐amplified CHO cells using flow cytometry | |
DK1078081T3 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af heterologe polypeptider i trichothecen deficiente filamentöse svampe mutantceller | |
CN112899252A (zh) | 一种高活性转座酶及其应用 | |
WO2004067709A3 (en) | Identification of essential genes of aspergillus fumigatus and methods of use | |
CA2480684A1 (en) | Host cells having improved cell survival properties and methods to generate such cells | |
CN112899296A (zh) | 一种转座酶的筛选报告载体及其制备方法和应用 | |
US20080268503A1 (en) | Method for Achieving High-Level Expression of Recombinant Human Interleukin-2 Upon Destabilization of the Rna Secondary Structure | |
Xiong et al. | High efficiency and throughput system in directed evolution in vitro of reporter gene | |
JP4031154B2 (ja) | 遺伝子増幅細胞の迅速選択法 | |
JP2004129654A (ja) | 挿入dnaユニットを含むプラスミドの製造方法 | |
Fang et al. | Antisense RNA inactivation of gp138 gene expression results in repression of sexual cell fusion in Dictyostelium discoideum | |
US7138515B2 (en) | Translational activity-promoting higher-order structure | |
JPS62118895A (ja) | 蛋白質の高生産株の取得方法 | |
JP2007135533A (ja) | 高効率遺伝子発現方法 | |
Kunze et al. | The human QARS locus: assignment of the human gene for glutaminyl-tRNA synthetase to chromosome 1q32–42 | |
CA2295310A1 (en) | Method for increasing secretion of proteins in eukaryotic host cells | |
JP2001520888A (ja) | 発現系 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20070409 |