RS51136B - Supstituisani pirolopiridini, kompozicije koje ih sadrže, postupak za njihovo dobijanje i upotreba - Google Patents

Abstract

Proizvodi formule (I):gde:1) A i Ar su supstituisane fenil grupe; 2)L je NH-CO-NH;3) W je C(R6), jedan od Y i Z je odabran od N i NO, a drugi je C(R5);4) R1, R5, i R6 su H;5) Ra je H.Prijava sadrži još 17 patentnih zahteva.

Description

SUPSTITUISANI

PIROLOPIRIDINI, KOMPOZICIJE KOJE

IH SADRŽE, POSTUPAK ZA NJIHOVO

DOBIJANJE I UPOTREBA

[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na nova hemijska jedinjenja, posebno supstituisane pirolopiridine, na kompozicije koje ih sadrže i njihova upotreba kao lekova. [0002) Tačnije, prema prvom aspektu, pronalazak se odnosi na nove specifično supstituisane pirolopiridin sa antikanceroznom aktivnošću, preko modulacije aktivnosti proteina, posebno kinaza.

[0003] Do danas, najveći deo komercijalnih jedinjenja koja se upotrebljavaju u hemoterapiji izazivaju velike probleme u vidu sporednih efekata i tolerancije pacijenta. Ovi efekti se mogu ograničiti ukoliko upotrebljeni lekovi deluju selektivno na ćelije raka, isključujući zdrave ćelije. Jedno od rešenja za ograničenje štetnih efekata hemoterapije može da se sastoji u upotrebi lekova koji deluju na metaboličke puteve ili sastavne elemente ovih puteva, prventstveno eksprimriani u ćelijama raka, koji su umereno eksprimirani ili nisu eksprimirani u zdravim ćelijama.

[0004] Protein kinaze su familija enzima koji katalizuju fosforilaciju hidroksilinih grupa specifičnih ostataka proteina kao što su ostaci tirozina, serina ili treonina. Ova fosforilacija može veoma damodifikuje funkciju proteina; tako, protein kinaze igraju važnu ulogu u regulaciji različitih ćelijskih procesa, posebno uključujući metabolizasm, ćelijsku proliferaciju, ćelijsku diferencijaciju, ćelijsku migraciju ili ćelijsko preživljavanje. Od različitih ćelijskih funkcija u čiju je aktivnost uključena protein kinaza, određeni procesi predstavlaju atraktivne ciljeve za lečenje raka kao i drugih bolesti.

[0005] Shodno tome, jedan od predmeta pronalska su i kompozicije sa antikancer aktivnošću, koje deluju posebno na kinaze. Od kinaza za koje je poželjna modulacija aktivnosti, preferentne su KDR i Tie2.

[0006]Ovim proizvodima odgovara formula (I) u daljem tekstu :

gde:

1) A i Ar odabrani z grupe fenil supstituenata; 2) LjeNH- CO- NH; 3) W je C(R6); jedan od Y i Z jeodabran od N i NO, i drugi od Y i Z je C(R5), i

4) Rl,R5,iR6 su H,

5) RajeH.

[0007] Prihvatljive kombinacije supstituenata obuhvataju one u kojima Rl, R5 i R6 su H i jedan od Y i Z je odabran od N i NO.

[0008] A je poželjno supstituisan prvim supstituentom koji je odabran iz grupe koju čine: (Cl-C12)alkil, (Cl-C12)alkil halogen , (C3- C12)cikloalkil, (C2- C12)alkilen, (C2- C12)alkinil, (C8-C14)aril, (Cl-C13)heteroaril, 0-(Cl-C3)alkil, 0-(C6-C14)Aril, 0-(Cl-C13)heteroaril, S-(C1-C3)alkil, S-(C6-C14)Aril, S-(Cl-C13)heteroaril, svaki po izboru supstituisan sa supstituentom odabranim od : (Cl-C3)alkil, halogen , O-(Cl-C3)alkil, N(R8)(R9); gde R8 it R9 se nezavisno odabrani od : H, (Cl-C3)alkil, (Cl-C3)alkilOH, (Cl-C3)alkil halogen , (Cl-C3)alkilNH2, (Cl-C3)alkilCOOM, (Cl-C3)alkilS03M , u kojima, us slučaju kada su R8 i R9 istovremeno drugi supstiuenti izuzev H, oni mogu da budu vezani tako da formiraju 5- do 7 - člani prsten koji sadrži od 0 do 3 heteroatoma odarbrana od O, N i S, u kojima M je H ili katjon alkalnog metala odabran od Li, Na i K.

[0009] Dodatno, A je pogodno supstituisan drugim supstituentom koji je odabran iz grupe koju čine : F, Cl, Br, I, OH, SH, S03M COOM, CN, N02, CON(R8)(R9), N(R8)CO(R9), (Cl-C3)alkil-OH, (Cl-C3)alkil-N(R8)(R9), (Cl-C3)alkil-(R10), (Cl-C3)alkil-COOH, N(R8)(R9) ; u kojima R8 i R9 su nezavisno odabrani od H, (Cl-C3)alkil, (Cl-C3)alkilOH, (Cl-C3)alkil halogen , (Cl-C3)alkilNH2, (Cl-C3)alkilCOOM, (Cl-C3)alkilS03M ; u kojima R8 i R9 su istovremeno drugi supstituent izuzev H, oni mogu da budu vezani tako da formiraju 5- do 7 - člani prsten koji sadrži od 0 do 3 heteroatoma odarbrana od O, N i S, u kojima M je H ili katjon alkalnog metala odabran od Li, Na i K; i u kojima RIO je H ili po izboru supstituisani nearomatični heterocikl sa 2 do 7 atoma ugljenika, i 1 do 3 heteroatoma odabrana od N, O i S.

{0010] Kada je A, disupstituisan, dva supstituenta mogu da budu povezani tako da formiraju 5- do 7 - člani prsten koji sadrži od 0 do 3 heteroatoma odabrana od N, O i

S.

[0011]Prema jednoj poželjnoj realizaciji, A je fenil susptituisan bar jednom grupom odabranom od : halogena, (Cl-C4)alkil, (Cl-C3)alkil halogen , 0-(Cl-C4)alkil, S-(Cl-C4)alkil, 0-(Cl-C4)alkil halogen , S-(C1-C4)alkil halogen , i u kojima, u slučaju kada je A, dva supstituenta mogu da budu povezani tako da formiraju 5- do 7 - člani prsten koji sadrži od 0 do 3 heteroatoma odabrana od N, O i S.

[0012] Proizvodi u skladu sa pronalaskom mogu da budu :

1) u nehiralnom obliku,

2) u racemskom obliku

3) obogaćen jedan steroizomerni obli, ili

4) obohgaćen jedan enantiomerni oblik ;

(Cl -C3)alkilCOOM, (Cl-C3)alkilS03M ; u kojima R8 i R9 su istovremeno drugi supstituent izuzev H, oni mogu da budu vezani tako da formiraju 5- do 7 - člani prsten koji sadrži od 0 do 3 heteroatoma odarbrana od O, N i S, u kojima M je H ili katjon alkalnog metala odabran od Li, Na i K; i u kojima Rl 0 je H ili po izboru supstituisani nearomatični heterocikl sa 2 do 7 atoma ugljenika, i 1 do 3 heteroatoma odabrana od Li, Na i K.

[0013] Dodatno, A je pogodno supstituisan drugim supstituentom koji je odabran iz grupe koju čine : F, Cl, Br, I, OH, SH, S03M COOM, CN, N02, CON(R8)(R9), N(R8)CO(R9), (Cl-C3)alkil-OH, (Cl-C3)alkil-N(R8)(R9), (Cl-C3)alkil-(R10), (Cl-C3)alkil-COOH, N(R8)(R9); u kojima R8 i R9 su nezavisno odabrani od dans, (Cl-C3)alkil, (Cl-C3)alkilOH, (Cl-C3)alkil halogen , (Cl-C3)alkilNH2, (Cl-C3)alkilCOOM, (Cl-C3)alkilS03M ; u kojima R8 i R9 su istovremeno drugi supstituent izuzev H, oni mogu da budu vezani tako da formiraju 5- do 7 - člani prsten koji sadrži od 0 do 3 heteroatoma odarbrana od O, N i S, u kojima M je H ili katjon alkalnog metala odabran od Li, Na i K; i u kojima RIO je H ili po izboru supstituisani nearomatični heterocikl sa 2 do 7 atoma ugljenika, i 1 do 3 heteroatoma odabrana od N, O i S.

[0014] Kada je A, disupstituisan, dva supstituenta mogu da budu povezani tako da formiraju 5- do 7 - člani prsten koji sadrži od 0 do 3 heteroatoma odabrana od N, O i

S.

[0015] Prema jednoj poželjnoj realizaciji, A je fenil susptituisan bar jednom grupom odabranom od: halogena, (Cl-C4)alkil, (Cl-C3)alkil halogen, 0-(Cl-C4)alkil, S-(Cl-C4)alkil, 0-(Cl-C4)alkil halogen, S-(C1-C4)alkil halogen, i u kojima, u slučaju kada je A, dva supstituenta mogu da budu povezani tako da formiraju 5- do 7 - člani prsten koji sadrži od 0 do 3 heteroatoma odabrana od N, O i S.

[0016] Proizvodi u skladu sa pronalaskom mogu da budu :

1) u nehiralnom obliku,

2) u racemskom obliku

3) obogaćen jedan steroizomerni obli, ili

4) obohgaćen jedan enantiomerni oblik ;

I o izboru mogu da budu u obliku soli.

[0017] Proizvod u skladu sa pronalaskom se može upotrebiti za proizvodnju lke akoji je koristan za lečenje patoloških stanja, psoebno kancera (rakova).

[0018] Predmetni pronalaza se takođe odnosi na lekove koji sadrže proizvod u skladu sa pronalaskom i na terapeutske kompozicije koje sadrže proizvod u skladu sa pronalaskom u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim eksipijensom prema odabranom načinu administracije. Farmaceutska kompozicija može da bude u čvrstom ili tečnom obliku ili u obliku lipozoma.

[0019] Čvrste kompozicije koje možemo pomenuti su prahovi, gel kapsulei tablete. Takođe možemo pomenuti i sledeće oralne oblike odnosno čvrste oblike koji su zaštićeni od kisele sredine (medijuma) želuca (stomaka). Podloge koji se upotrebljava za čvrste oblike posebno čine mineralne podloge, na primer fosfati ili or karbonato, ili organske podloge, na primer laktoza, celuloze, skrom ili polimeri. Tečne oblike čine: rastvori, suspenzije ili disperzije.oni, kao dispezivnu podlogu sadrže bilo vodu, bilo organski rastvarač (etanol, NMP ili slične) vili njihove smeše ili smeše površinski aktivnih sredstava (sufaktanata) i rastvarača, ili agenasea za kompleksiranje i rastvarača.

[0020] Tečni oblici bi verovatno poželjno bili u obliku pogodnom za injektiranje i kao rezultat, imaćeformulaciju koja je prihvatljiva za ovu upotrebu.

[0021] Načini administracije koji su prihvatljivi za injektiranje su intravenski, intraperitonealni, intramuskularni i subkutani način, pri čemu je intravenski preferentan.

[0022] Doza jedinjenja predmetnog pronalaska koja će se administrirati biće prilagođena onoj koju odredti lekar, kao funkciju načina administracije pacijentu i u zavisnosti od stanja pacijenta.

[0023] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se administrrati sama ili u kombinaciji sa drugim antikancer agensom. Od mogućih kombinacija možemo pomenuti sledeće: • agensi za alkilovanje i posebno ciklofosfamid, melfalan, ifosfamid, hlorambucil, busulfan, tiotepa, prednimustin, carmustin, lomustin, semustin, steptozotocin, dekarbazin, temozolomid, prokarbazin i heksametilmelamin

• derivati platine kao što je, posebno, cisplatina, karboplatina ili oksaliplatina

• antibiotici kao što su, posebno, bleomicin, mitomicin, dactinomicin

• antimicrotubularni agensi kao što su posebno , vinblastin, vincristin, vindesin, vinorelbin, taksoidei (paklitaksel i docetaksel) • antraciklini kao što su, posebno, doksorubicin, daunorubicin, idarubicin, epirubicine, mitoksantron, losoksantron • inhibitori topoizomeraza grupa I i II kao što su: etoposid, teniposid, amsacrin, irinotecan, topotecan i tomudeks

• fluorpirimidini kao što su 5-fluoruracil, UFT, floksuriđin

• analozi citidina kao što su 5-azacitidin, citarabin, gemcitabin, 6-mercaptomurin, 6-tioguanin

• analozi adenozina kao što su pentostatin, citarabin ili fludarabin fosfat

• metotreksat i folna kiselina

• različiti enzimi i jedinjenja kao što su la L-asparaginaza, hidroksiurea, trans-retinoična kiselina, suramine, [0024] deksrazoksan, amifostin, herceptin kao i estrogeni i androgeni hormoni • antivascularni agensi kao što su derivati combretastatina, na primer, CA4P, derivati halkona ili colhicina, na primer, ZD6126, i njihovi prolekovi.

[0025] Takođe je moguće kombinovati jedinjenja predmetnog pronalaska sa radijacionim tretmanom (radijacjiom, zračenjem). Ovi tretmani mogu se administrirati istovremeno, odvojeno ili sekvencijano. Tretman će priklagoditi lekar u zavisnosti od stanja pacijenta koji se leci.

[0026] Proizvodi pronalaska su korisni kao inhibitori reakcije katalizovane kinazom, posebnoFAK, KDR, Tie2, Aurora A, Aurora B i CDK2. FAK, KDR i Tie2 su kinaze za koje su proizvodi predmetnog pronalaska posebno korisni kao inhibitori.

[0027] Razlozi zbog kojih su odabrane ove kinaze su dati u tekstu koji sledi:

FAK

[0028] FAK je citoplazmična tirozin kinaza koja igra važnu ulogu u prenošenju signala koje prenose tr integrini, familija heterodimemih ćelijskih adhezionih receptora. FAK i integrini su locirani zajedno u perimembranskim strukturama opznatim kao adhezioni pakovi. Pokazano je u različitim vrsta ćelija, da aktivacija FAK-a i njihova fosforilacija na tirozinskim ostacima i posebno njihova autofosforilacija na tirozinu 397 je zavisna od vezivanja integrina na njihove ekstracelulame ligande i tako indkovani tokom ćelijske adhezije [Kornberg L, i al. J. Biol. Chem. 267(33): 23439-442. (1992)]. Autofosforilacija na tirozinu 397 FAK-a predstavlja mesto vezivanja za druge tirozin kinaze , Src, via njegovog domena SH2 [Schaller i al. Mol. Cell. Biol. 14 :1680-1688. 1994; Xingi al. Mol. Cell. Biol. 5 :413-421. 1994]. Src mož zatim da fosforiluje FAK na tirozinu 925, regrutujući tako adapter protein Grb2 i indukujući aktivaciju oćelija dređenih ras i MAP Kinaza putanje koja je uključena u kontrolu ćelijske proliferacije [Schlaepfer i al. Nature; 372:786-791. 1994; Schlaepfer i al. Prog. Biophy. Mol. Biol. 71:435-478. 1999; Schlaepfer and Hunter, J. Biol. Chem. 272:13189-13195. 1997]. Aktivacija FAK može takođe da indukuje jun NH2- terminal nu kinaza (JNK) signalizirajuću putanju i rezultuju u progresiji ćelija ka fazi Gl ćelijskog ciklusa [Oktay i al., J. Cell. Biol. 145 :1461-1469. 1999]. Fosfatidilinozitol-3- OH kinazase (P13- kinaza) se takođe vezuje za FAK na tirozinu 397 i ova interakcija može da bude neophodna za aktivaciju P13-kinazse [Chen and Guan, Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 91: 10148-10152. 1994; Ling i al. J. Cell. Biochem. 73 :533- 544. 1999]. kompleks FAK/Src fosforiluje različite supstrate, na primer, paxilline i pl30CAS u fibroblastima [Vuori i al. Mol. Cell. Biol. 16:2606-2613.1996].

[0029] Rezultati brojnih ispitivanja podržavaju hipotezu da FAK inhibitori mogu da budu korisni za lečenje kancera. Ispitivanja su ukazala na to da FAK može da igra važnu ulogu u ćelijskoj proliferaciji i/ili preživljavanju ćelijain vitro.Na primer, u ćelijama CHO, neki autori su pokazali da prekomema ekspresija pl25FAK dovodi do ubrzavanja tranzicije Gl u S, sugerišući na to da pl25FAK favorizuje ćelijsku proliferaciju [Zhao J.-H i al. J. Cell Biol. 143:1997-2008. 1998]. Drugi autori su pokazali da ćelije tumora tretirane sa FAK antisens oligonukleotidima gube svoju adheziju i ulaze u apoptozu (Xu i al, Cell Grovvth Differ. 4:413- 4.18. 1996). Takođe je pokazano da FAK pospešuje migraciju ćelijain vitro.Tako, fibroblasti koji su nepotpuni za ekspresiju FAK-a( FAK « knockout » miš)pokazuju okruglu morfologiju i nedostatak ćelijske migracije u odgovoru na hemostatičke signale i ovi nedostaci su eliminisani ponovnom ekpresijom (re-ekspresijom) FAK-a [DJ. Sieg i al., J. Cell Science. 112:2677-91. 1999]. Prekomerna ekspresija C-terminalnog domena FAK-a (FRNK) blokira istezanje adhenretnih ćelija i smanjuje ćelijsku migracijuin vitro

[Richardson A. and Parsons J.T. Nature. 380:538-540. 1996]. Prekomerna ekspresija FAK-a u ćelijama CHO, COS ili u humanim astrocitoma ćelijama pospešuje ,igraciju ćelija. Učešće FAK u pospešivanju proliferacije i migracije ćelija u brojnim tipovima ćelijain vitro,ukazuje na važnu ulogu FAK u neoplastičnim procesima. Nedavna ispitivanja su efikanso pokazala povećanje proliferacije ćelija tumorain vivoposle indukovanja ekspresije FAK u humanim astrocitroma ćelijama humain [Cary L.A. i al. J. Cell Sci. 109:1787-94. 1996; WangD i al. J. Cell Sci. 113:4221-4230. 2000]. Dodatno, imunohistohemijska ispitivanja himanih biopsija su pokazala daje FAK prekomerno eksprimiran kod raka prostate, raka dojke, raka tioride, raka debelog creva, melanoma, raka mozga i raka pluća, nivo ekspresije FAK je direktno povezan sa tumorima najagresivnijeg fenotipa [Weiner TM, i al. Lancet. 342(8878): 1024-1025. 1993 ; Owens i al. Kancer Research. 55:2752- 2755. 1995; Maung K. i al. Oncogene. 18:6824-6828. 1999; Wang D i al. J. Cell Sci. 113:4221-4230. 2000].

KDR

J0030]KDR( Kinaza insert Domain Receptor)takođe poznat i kao VEGF-R2( Vascular Endothelial Growth Factor Receptor2), je eksprimiran isključivo u endotelnim ćelijama.ovaj receptor se vezu za angiogeni faktor rasta VEGF, i shodno tome služi kao medijastor transdukcionog signala preko aktivacije svog og kinaza domena. Direkta inhibicija aktivnosti kinaze VEGF-R2 omogućava smanjenje fenomena angiogeneze u prisustvu oksogenog VEGF( Vascular Endothelial GrowthFactor )(Strawn i al., Kancer Research, 1996, vol. 56, p.3540-3545). Pvaj proces je posebno prikazan korišćenjem VEGF-R2 mutanata(Millauer i al., Kancer Research, 1996, vol. 56, p. 1615-1620). Izgeda da VEGF-R2 recptor nema drugu funkciju kod odraslih nego onu koja je povezana sa angiogensom aktivnosti VEGF. Tako, selektivni inhibitor aktivnosti kinaze VEGF-R2 bi trebalo da pokaže samo malu toksičnost.

[0031] Pored svoje cetralne uloge u dnamici angiogenih procesa, nedavni rezultati ukazuju na to daekspresij VEGF doprinosi preživljavanju ćelija tumora špsle hemoterapije ili radioterapije, naglašavajući potencijalnu sinergiju KDR inhibitora sa drugim agensima (Lee i al. Kancer Research, 2000, vol. 60, p.5565-5570).

Tie2

[0032] Tie-2 (TEK) je član familije receptora tirozin kinaza, koji je specifičan za endotelne ćelije. Tie2 je prvi receptor sa tirozin kinaznom aktivnosti za koji su poznati i agonist (angiopoietin 1 ili Angl) koji stimuliše fosforilaciju receptora i signalnih ćelija [S. Daviš i al (1996) Cell 87, 1161-1169] i antagonist (angiopoietin 2 iliAng2)

[P.C. Maisonpierre i al. (1997) Science 277, 55-60]. Angiopoietin 1, može da se sinergizuje sa VEGF krajnjem stadijumu neo-angiogeneze [AsaharaT. Circ. Res.(1998) 233- 240].Knock- outeksperimenti i transgenska manipulacija eksprimiranja Tie2 ili Angl vode do životinja koje predstavljaju defekte vaskularizacije [D.J. Dumont i al (1994) Genes Dev. 8, 1897-1909 i C. Suri (1996) Cell 87, 1171-1180]. VezivanjeAngl za svoje receptore dovodi do autofosforilacije kinaza domena Tie2 koji je esencijalan za neovaskularizaciju i takde za angažovanje i interakciju krvnih sudova sa periditima i ćelijama glatkih mišića; ovaj fenomen

dorpinosi maturaciji i stabilnosti novoformiranih krvnih sudova [P. C. Maisonpierre i al (1997) Science 277, 55-60]. Lin i al (1997) J. Clin. Invest. 100, 8: 2072- 2078 i Lin P. (1998) PNAS 95, 8829-8834, su pokazali inhibiciju rasta i vaskularizacije tumora i takođe smanjenja metastaza na plućima, tokom adenoviralne infekcije ili injekcije ekstracelularnog domena Tie-2 (Tek) u modele ksenografta melanoma i raka dojke.

[0033] Tie2 inhibitori mogu se upotrebiti u situacijama u kojima je neprikladna neovaskularizacija (tj. kod dijabetčne retinopatije, hronične neovaskularizacije usled makularne degeneracije, psorijaze, hromične inflamacije, Kaposi-jevog sarkoma, reumatoidnog artritisa, infantilnog hemoangioma i kancera).

[0034]Napredovanje ćelijskog ciklusa je vođen ciklin-zavisnim kinazama (CDK) koje su aktivirane interakcijom proteina koji pripadaju familiji ciklina, ova aktivacija dovodi do doforilacije supstrata i na kraju do deobe ćelija. Dodatno, endogeni inhibitori CDK koji su aktivirani (familija INK4 i KIP/CIP) negativno regulišu aktivnost CDK. Rast normalnih ćelija je psoeldica ravnoteže između aktivatora CDK (ciklini) i endogenih inhibitora CDK. Kod nekoliko tipova kancera, opisana je nekontrolisana ekspresija ili aktivnost nekoliko regulatora ćelijskogciklusa.

[0035]Ciklin E aktivira kinazu Cdk2 koja onda deluje na fosforilaciju proteina pRb (protein retinoblastoma) što dovodi do ireverzibilnog vezivanja u deobi ćelija i tranzicji S faze (PL Toogood, Medicinal Research Reviews (2001), 21(6); 487-498. Kinaza CDK2 i moguće CDK3 su neophodni za napredovanje u Gl i i ulazak u S fazu. Tokom formiranja kompleksa sa ciklinom E, oni održavaju hiperfosforilaciju pRb kako bi pomogli nastavak iz Gl faze u S fazu . U kompleksima sa ciklinom A, CDK2 igra ulogu u inaktivaciji E2F i neophodan je je za realiazciju S faze (TD. Davies i al. (2001) Structure 9, 389-3).

[0036]KOmpleks CDKl/ciklin B reguliše napredovanje ćelijskog ciklusa između G2 faze i M faze. Negativna regulacija kompleksa CDK/Ciklin B sprečava normalne ćelije da uđu u S fazu pre nego što je G2 faza pravilno i potpuno završena. (K.K. Roy and E.A. Sausville Current Pharmaceutical Design, 2001, 7, 1669-1687.

[0037] Postoji nivo regulacije aktivnosti CDK. Ciklin- zavisni aktivatori kinaza (CAK) imaju pozitivno dejstvo u regulaciji CDK. CAK fosforiluje CDK na otacima treonina kako bi učinio ciljni enzim potpuno aktivnim.

[0038]Prisutvo defekata u meolkulima koji su uključeni u ćelisjki ciklus dovodi do aktivacije CDK i napredovanja ciklusa, normalno je poželeti da se inhibiraaktivnost CDK enzima i time blokira rast ćelija raka.

[0039]U kvascu i drozofilama identifikovani su brojni proteini koji su uključeni u segragaciju hromozoma i imaju vretenast raspored. Dezorganizacija ovih proteina vodi do nesegragacije hromozoma i monopolarnih ili dezorganizovanih vretena. Od ovih proteina, određene kinaze, uključujući Aurora i Ipll, koje potiču od drozofila i od S.cerevisiae,su neophodne za segragaciju hromozoma razdvajanje centrozoma. Humani analog Ipll iz kvasca je nedavno kloniran i okarakterisan u različitim laboratorij ama. Ove kinaze, poznate kao Aurora2, STK15 ili BTAK pripadaju familiji serin/treonin kinaza. Bischoff i al. je pokazao da je Aurora2 onkogena, i umnožava se u raku debelog creva kod čoveka (EMBO J, 1998, 17, 3052- 3065). Ovo je opisano i kod kancera koji uključuju epitelne tumore kao što je rak dojke.

Definicije

[0040] Izraz « halogen » se odnmosi na element odabran od F, Cl, Br, i I.

[0041] Izraz « alkil » se odnosi na linearan ili razgranat zasićen ugljovodonični supstituent koji sadrži od 1 do 12 atomes ugljenika. Susptituenti metil, etil, propil, 1-metiletil, butil, 1-mctilpropil, 2- metilpropil, 1,1-Dimetiletil, pentil, 1-metilbutil, 2-metilbutil, 3- metilbutil, 1,1-Dimetilpropil, 1,2- Dimetilpropil, 2,2- Dimetilpropil, 1-etilpropil, heksil, 1-metilpentil, 2- metilpentil, 1-etilbutil, 2- etilbutil, 3,3-Dimetilbutil, heptil, 1-etilpentil, oktil, nonil, decil, undecil, i dodecil su primeri alkil supstituent.

[0042] Izraz « alkilen »se odnosi na linearan ili razgranat zasićen ugljovodonični supstituent koji sadrži, od 2 do 12 atoma ugljenika. Supstituenti etilenil, 1-metiletilenil, prop-l-enil, prop-2- enil, Z-1-metilprop-l-enil, E-1-metilprop-l-enil, Z-1,2- Dimetil-prop-l-enil, E-1,2- Dimetilprop-1-enil, but-1,3- dienil, 1-metilidenil-prop- 2- enil, Z-2- metilbut-1,3- dienil, E-2- metilbut-1,3- dienil, 2- metil-1-metilidenilprop-2- enil, undek-l-enil i undek-10-enil su primeri alkilen supstituenata.

[0043] Izraz « alkinil » se odnosi na linearan ili razgranat zasićen ugljovodonični supstituent koji sadrži najmanje dve nezasićene veze na paru atoma ugljenika, i sadrže od 2 do 12 atomes ugljenika. Primeri ovih alkinil supstieunata su : etinil; prop-l-inil; prop-2- inil; i but-l-inil..

[0044] Izraz « aril » se odnosi na monociklične ili policiklične atomatične supstituente koji sadrže od 6 do 14 atomes ugljenika. Primeri aril susptituenta su : fenil, naft-l-il; naft-2- il; antracen-9-il; l,2,3,4-tetrahidronaft-5-il; i l,2,3,4-tetrahidronaft-6-il.

[0045] Izraz « heteroaril » odnosi se na monociklične ili pomliciklične heteroaromatične supstituente koji sadrže od 1 do 13 atomes ugljenika i od 1 do 4 heteroatoma. Primeri heteroaril susptituenta su : pirol-l-il; pirol- 2- il; pirol-3- il; furil ; tienil ; imidazolil; oksazolil; tiazolil ; izoksazolil; izotiazolil; 1,2,4-triazolil ; oksadiazolil; tiadiazolil; tetrazolil; piridil ; pirimidil; pirazinil ; 1,3,5-triazinil; indolil; benzo[b]furil; benzo[b]tienil; indazolil; benzimidazolil; azaindolil; hiinolil; izohinolel; karbazolil; i akridil.

[0046] Izraz « heteroatom » se u ovom kontekstu odnosi na najmanje dvovalentan atom koji nije ugljenik. Primeri ovih heteroatoma su : N; O; S; i Se.

[0047] Izraz « cikloalkil » se odnosi na zasićeni ili delimično nezasićen ciklični ugljovodonični supstituent koji sadrži od 3 do 12 atoma ugljenika. Primeri ovih cikloalkil susptituenata su : ciklopropil; ciklobutil; ciklopentil; ciklopentenil; ciklopentadienil; cikloheksil; cikloheksenil; cikloheptil; biciklo[2.2.1]heptil; ciklooktil; biciklo[2.2.2]oktil; adamantil; i perhidronaftil.

[0048] Izraz « heterociklil » odnosi se na zasićen ili delimično nezasićen ciklični ugljovodonični supstituent koji sadrži od 1 do 13 atoma ugljenika i od 1 do 4 heteroatoma. Poželjno, zasićen ili delimično nezasićen ciklični ugljovodonični supstituent je monocikličan i ima 4 ili 5 atoma ugljenika i 1 do 3 heteroatoma.

[0049] Izraz « supstituisan » odnosi se na jedan ili više susptituenata koji nisu H, na primer halogen ; alkil; aril; heteroaril, cikloalkil ; heterociklil ; alkilen; alkinil; OH ; O-alkil; O-alkilen ; O-aril; O-heteroaril; NH2; NH-alkil; NH-aril; NH-hetcroaril; N-alkil-alkil'; SH ; S-alkil; S-aril; S(02)H ; S(02)-alkiI; S(02)-aril; S03H ; S03- alkil; S03-aril; CHO ; C(0)-alkil; C(0)-aril; C(0)OH ; C(0)0-alkil; C(0)0-aril; OC(O)-alkil; OC(0)-aril; C(0)NH2 ; C(0)NH-alkil; C(0)NH-aril; NHCHO; NHC(0)-alkil; NHC(0)-aril; NH-cikloalkil; NH-heterociklil.

[0050] Proizvodi prema predmetnogm pronalasku mogu se pripremiti prema postupcima koji su uobičajeni u organskoj herniji. Shema 1 u daljem tekstu ilustruje postupak prema kojem je dobijeno jedinjenje iz Primer 1, a odnosi se na supstituisane 6-aza-indole. U tom smislu, ne može predstavljati ograničenje obima predmetnog pronalaska, za postupke za dobijanje jedinjenja čija se zaštita traži predmetnim pronalaskom. Dobijanje 6-aza-indol -2- karboksamidnih derivata supstituisanih na položaju 3 :

[0051] Shema 2 u daljem tekstu ilustruje postupke upotrebljene za dobijanje primera koji se odnose na supstituisane 7-aza-indole, posebno na jedinjenje iz primera 7. U tom smislu, ne može da predstavjla ograničenje obima pronalaska, po pitanju postupaka za dobijanje jedinejnja čija se zaštita traži. Dobijanje derivata 7-aza-indol - 2- karboksamida supstituisanih na položaju 3 :

[0052] Proizvodi opšte formule (I) fde Raje drugi supstituent od H mogu se dobiti prema uobičajenim postupcima koji su poznati prosečnom stručnjaku , na prime, zamenom amonijaka u aminolizii odgovarajućim primarnim alkilaminom.

[0053] La Predmet pronalaska je takođe postupak za dobijanjeproizvoda formule (I) kao stoje prethodno defmisano, okarakterisan time što proizvod opštee formule (V) u daljem tesktu:

Je podvrgnut sledećim koracima :

a) halogenizacijom u položaju 3, pa zatim b) Suzuki kuplovanju u položaju 3, pri čemu se dobij a proizvod opšte (III) odnosno :

nakon čega sledi

c) reakciji amidacije estra u pložaju 2 pri čemu se dobija proizvod opšte formule (II) odnosno:

izatim

d) acilaciji amino-fenil grupe u položaju 3.

[0054] predmet pronalaska su takođe, kao intermedijerni proizvodi, jedinjenja opšte

formule (II) u daljem tekstu :

Gde su Z, Y, W kao što je prethodno defmisano, za dobijanje proizvoda opšte formule

(I).

[0055] Analize LC/MS su izvedene na Micromass modelu LCT koji je povezan sa HP 1100. Većina proizvoda je merena na detektoru HP G1315A sa diodnim detektorom pri talasnoj dužini u opsegu od 200-600 nm i Sedex 65 detektoru sa raspršiivačem svetlosti. Maseni spektri su snimljeni u opsegu od 180 do 800. Podaci su analizirani pomoću softvera Micromass MassLinx. Razdajanje je sprovedeno na Hvpersil BDS Cl8, 3 um (50 x 4.6 mm) koloni, eluiranjem gradijentom 5 do 90% acetonitrila koji sadrži 0,05% (v/v) trifluorsirćetne kiseline (TFA) u vodi koja sadrži 0,05% (v/v) TFA u toku 3,5 min pri protoku od 1 mL/mn. Ukupno vreme analize uključujući re-ekvilibraciju kolone je 7 min.

[0056] Maseni spektri MS su snimljeni u elektrosprej (ES<+>) modu na instrumentu Platform II (Micromass). Opisanu su zapaženi glavni (osnovni) joni.

[0057] Tačke topljenja su merene kapilarno, na Mettler FP62 instrumentu, u opsegu od 30°C do 300°C, sa porastom temperature od 2°C u minuti.

Prečišćavanje pomoću LC/MS:

[0058] Proizvodi mogu da budu prečišćeni pomoću LC/MS na sistemu Waters FractionsLinx koji se sastoji od gradijentne pumpe Waters model 600, pumpe za regeneraciju Waters model 515, pumpe za razblaživanje Waters Reagent Manager, auto- injektora Waters model 2700, Rheodine model LabPro sa dva ventila, Waters model 996 diodni detektor, maseni spektometar Waters model ZMD i kolektor frakcija Gilson model 204. Sistem je kontrolisan Waters FractionLinx. Razdvajanje je izvedeno naizmenično na dve kolone Waters Symmetry (Cl 8, 5uM, 19x50 mm, referenca u katalogu 186000210), jedna kolona se nalazi u modu za regeneraciju pomoću smeše voda/acetonitril 95/5 (v/v) sa 0,07% (v/v) rastvorom trifluorsirćetne kiseline u vodi, dok se druga kolona koristi za razdvajanje. Kolone su eluirane primenom gradijenta od 5 do 95% acetonitrila sa 0,07% (v/v) rastvorom trifluorsirćente kiseline u vodi pri protoku od 10 mL/mn. Posle izlaska iz kolone za razdvajanje, jedan hiljaditi deo efluenta je izdvojen pomoću instrumenta LC Packing Accurate, razblažen metanolom pri protoku od 0,5 mL/mn i i usmeren na detektore u odnosu 75% na diiodni detektor, i preostalih 25% na maseni spektrometar. Ostatak efluenta (999/1000) je usmeren na kolektor frakcija, gde je isti odbačen ako masa očekivanog proizvoda nije detektovana pomoću softvera FractionLinx . Molekulske formule očekivanih proizvoda su unete u softver FractionLinx koji pokreće proces sakupljanja proizvoda kada je detektovanmaseni signal koji odgovara [M+H]<+>jonu i/ili [M+Na]<+>jonu. U određenim slučajevima, u zavisnosti od analitički rezultata LC/MS, kada je detektovan izrazit [M+2H]<++>jon, vrednost koja odgovara polovini izračunate molekulske mase (MW/2) je takođe uneta u softver FractionLinx. Pod ovim uslovima, sakupljanje je takođe pokrenuto kada je detektovan signal [M+21-l]^ i/ili [M+Na+H]<++>jona. Proizvodi su sakpljani u izmerenoj staklenoj epruveti. Posle sakupljanja, rastvarači su upareni, u Savant AES 2000 ili Genevac HT8 centrifugalnom uparivaču i mase proizvoda su određene merenjem težine peruvete posle uparavanja rastvarača.

[0059] naredni predmet pronalaska se odnosi na proizvode iz primera datih u daljem tekstu, koji ilustruju predmetni pronalazak na neograničavajući način.

Primer 1 :

3- {4-[3- (2- Fluor -5-trifluormetil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- c]piridin - 2- karboksamid

[0060]

10061]Rastvor 90 mg 3- (4-aminofenil)-l H-pirolo[2,3- c]piridin -2- karboksamida u 5 mL tetrahidrofurana dodato je, u kapima, 50 uL 2- fluor -5-(trifluormetil)fenilizocijanata. Reakciona smeša je mešana 16 h na temperaturie ambijenta u atmosferi argona i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je mešan 30 minua u 2 mL dihlormetana. Suspendvana čvrsta supstanca je profiltrirana i osušena . Posle sušenja u vakuumu, na 40°C, dobijeno je 115 mg 3- {4-[3- (2- Fluor -5-trifluormetil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida, sa sledećim karakteritikama: IR(KBr): 3455; 1661; 1602; 1542; 1444; 1341; 1312; 1127; 1070 i 819 cm-1

'H NMR.: 6,98 (s širok, IH); 7,39 (m širok, IH) ; od 7,42 do 7,56 (m, 4H); 7,60 (d širok, J = 8,0 Hz, 2H) ; 7,74 (s širok, IH) ; 8,17 (d, J = 6,0 Hz, IH); 8,65 (d širok, J = 7,5 Hz, 1 H); 8,82 (s, IH); 8,94 (s širok, IH); 9,31 (s, IH); 12,15 (s širok, IH).

Maseni spektar (ES+) : m/z = 458 [M+H]<+>

Tačka topljenja: 286° C (Kofler).

3-(4-AminofeniI)-lH-pirolo[2,3- c]piridin -2- karboksamid :

[0062] U rastvor 600 mg etil 3- (4-aminofenil)-lH-pirolo[2,3- c]piridin -2-karboksilata u 62 mL 3N rastvora amonijaka u metanolu dodato je 11 mL 22%. vodenog rastvora amonijaka Reakciona smeša je mešana 20 h u autoklavu na 80°C (12 bara), i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je razblažcn u 100 mL metanola, tretiran aktivnim ugljem i refluksovan 30 minuta. Smeša je profiltrirana na toplo kroz Celite i zatim isprana 2x10 mL metanola. Ffiltrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom dajući 490 mg 3- (4-aminofenil)-l H-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida u obliku pene, sa sledećim karakteristikama: Maseni spektar (EI) m/z - 252 [M]+°, m/z = 235 [M-NH3]+°

etil 3- (4-Aminofenil)-l H-piroJo[2,3- c]piridin- 2-karboksilat:

[0063] U rastvor etil 1 3- bromo-lH-pirolo[2,3- c]piridin -2- karboksilata u 100 mL dioksana, dodato je 773 mg hidrohlorida 4-aminofenil-boronske kiseline, 1,1 g kalijum fluorida u 9 mL vode. Reakciona smeša je mešana u atmosferi argona 15 minuta. Dodato je 425 mg tetrakis (trifenilfosfine) paladijuma (0) i 630 uL trietilamina. Reakciona smeša je mešana 17 h na refluksu. Posle tretaman sa aktivnim ugljem i zatim filtracijom kroz Celite®, le filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom . Osttak je prečišćen flash- hromatografijom na koloni od silicijum dioksida (60 ; 35-70 uM), emuiranjem sa smešom dihlormetana, metanola i acetonitrila (90/5/5 odnos zapremina). Dobijeno je 600 mg etil 3- (4-aminofenil)-l H- pirolo[2,3-c]piridin -2- karboksilata, sa sledećim karakteirstikama:

Maseni spektar (EI) m/z =281[ M]+\m/z = 235 [M-OEt]<+>°

etil 3- Bromo-1 H-pirolo[2,3- c]piridin -2- karboksilat:

[0064] U rastvor 2,24 g etil lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksilata u 150 mL piridina, dodat je, u kapima, rastvor3,53g piridin- tribromida u 30 mL o piridina, na 5°C. Reakciona smeša je zatim mešana 16 h na temperature od oko 20°C i zatim je isprana sa 500 mL ledeno hladne vode. Suspenzija je pro filtrirana. Dobijeni čvrsti ostatak je ispran vodom i zatim osušen u vakuum usnici na 40°C. Dobijeno je 1,97 g etil 3- bromo-1 H-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksilat, sa sledećim karakteristikama: Maseni spektar (EI) m/z = 269 [M]<+>°, m/z = 189 [M-Br]<+>°, m/z = 144 [M-OEt]<+>°

etil lH-Pirolo[2,3- c]piridin -2- karboksilat:

[0065]U atuklav je dodato 1,8 g paladijuma-na -ugljeniku 10 %, nakon čega je atmosfera promenjena u inertnu pomoću argona. Dodat je rastvor 6 g etil 3- (3-nitropiridin-4-il)-2- okso-propionata u 72 mL apsolutnog etanola. Rcakcioni medijum je zatim mešan 3 h na 20 °C pod pritiskom vodonika od 2 bara. Smeša je zatim profiltrirana kroz Celite®. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom , i osušen u sušnici na 40°C dajući tako 4g etil 1 H-pirolo[2,3- c]piridin -2- karboksilata, sa sledećim karakteristikama:

Maseni spektar (EI) m/z = 190 [M<+>°], m/z = 144 [M-OEt]<+>°

etil 3- (3-Nitropiridin-4-il)-2- oxo-propionate:

[0066] U rastvor 930 mg natrijuma u 50 mL apslutnog etanola brzo je dodato 26 mL dietil oksalata. Reakcioni medijum je mešan 15 minutea na 20°C. Rastvor 3,8 g 4-metil-3- nitropiridina u 50 mL apsolutnog etanola je zatim dodat u kapima tokom 1 h. Reakciona smeša je mešana 4 h na temperaturi od oko 20°C, i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatku je dodato 100 mL etileetra i zatim je pro filtriran. Čvrsti ostatak je mešan sa 40 mL 5N rasstvora hlorovodonične kiseline, ispran vodom i osušen pod vakuumom na 40°C , pri čemu je dobijeno 6,2 g etil 3- (3- nitropiridin-4-il)- 2- okso-propionata, sa sledećim karakteirstikama:

Maseni spektar (EI) m/z = 238 [M<+>].

Primer2 : 3- {4-[3-(2- Metoksi-5-Metil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin-2-karboksamid

[0067]

[0068]U rastvor 100 mg 3- (4-aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida u 5 mL o tetrahidrofurana dodato je, u kapima, 54,4 uL 2- metoksi-5-metilfenilisocijanata. Reakciona smeša je mešana 16 h natemperaturi ambijenta u atmosferi argona i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je mešan 30 minuta u 2 mL dihlormetana. Suspendovan čvrsti ostatak je profiltriran, ispran vodom i sukcijom. Posle sušenja u vakuumu na 40°C, dobijeno je 40 mg 3- {4-[3- (2- metoksi-5-Metil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida, sa sledećim karakteristikama: IR(KBr), 3458; 3331; 1664; 1595; 1537; 1315; 1285; 1213; 1135; 1033 cm"<1>'H NMR : 2,24 (s, 3H) ; 3,86 (s, 3H); 6,75 (d širok, J = 8,5 Hz, IH) ; od 6,85 do 6,95 (m, 2H); 7,43 (d širok, J = 8,5 Hz, 2H); 7,46 (d, J - 5,5 Hz, 1 H); 7,58 (d širok, J = 8,5 Hz, 2H); 7,73 (s širok, IH); 8,02 (s širok, IH); 8,16 (d, J = 5,5 Hz, IH); 8,22 (s, IH); 8,82 (s, IH); 9,44 (s širok, IH); 12,1 (s širok, 1 H).

Maseni spektar (EI): m/z = 415 [M<+>°j

Tačka topljenja: 227°C

Primer 3 : 3- {4-[3- (3- hlor-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid trifluoracetat

[0069]

[0070]U rastvor 100 mg 3- (4-aminofenil)-lH-pirolo[2,3- c]piridin -2- karboksamida u 5 mL tetrahidrofurana dodato je, u kapima, 45,2 uL 3- hlorfenilisocijanata. Reakciona smeša je mešana 16 h na temperaturi ambijenta u atmosferi argona i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je mešan 30 minuta u 2 mL dihlormetana. Suspendovani čvrsti ostatak je pro filtriran, ispran vodom i osušen. Prečišćavanje je izvedeno preparativnom LC/MS dajući posle sušenja u vakuumu na 40°C , 70 mg 3- {4-[3- (3- hlor-fenil)-ureido]-fenil)-lH- pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida u obliku trifluoracetatne soli i sa sledećim karakteirstikama: IR(KBr): 3390; 1672; 1592; 1537; 1483; 1203; 1138; 836; 722 cm"<1> 'H NMR.: 7,03 (m, IH); od 7,26 do 7,34 (m, 2H); od 7,42 do 7,52 (m, 3H); 7,63 (d širok, J = 8,5 Hz, 2H); 7,74 (s širok, IH); 7,97 (d, J = 6,0Hz, IH); 8,06 (s širok, IH); 8,31 (d, J = 6,0 Hz, IH); 9,03 (s širok, 2H); 9,13 (s, IH); 13,35 (m širok, IH).

Maseni spektar (ES<+>): m/z = 406 [MH<+>]

Tačka topljenja: 221 °C

Primer 4: 3- {4-[3- (3- hlor-4-fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin - 2- karboksamid trifluoracetat

[0071]

[0072]U rastvor 100 mg 3- (4-aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida u 5 mL tetrahidrofurana dodato je, u kapima, 46,2 uL 3- hlor-4- fluorfenilizocijanat. Reakciona smeša je mešana 16 h na temperaturi ambijenta u atmosferi argona i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je mešan 30 minuta u 2 mL dihlormetana. Suspendovani čvrsti ostatak je profiltriran, ispran vodom i osušen. Prečišćavanje je izvedeno preparativnom LC/MS dajući, posel sušenja u vakuumu an 40°C, 105 mg 3- {4-[3- (3- hlor-4-fluor -fenil)-ureido]-fenil}- lH-pirolo[2,3- cjpiridin

-2- karboksamida u obliku trifluoroacetatne soli, sa sledećim karakteristikama:

IR (KBr): 3452; 1673; 1601; 1544; 1500; 1208; 1143; 836; 803; 722 crn 1

<*>H NMR: od 7,32 do 7,38 (m, 2H) ; od 7,44 do 7,54 (m, 3H) ; 7,64 (d širok, J = 8,5 Hz, 2H); 7,84 (d širok, J = 7,5 Hz, IH) ; 8,01 (d, J = 6,0 Hz, IH) ; 8,09 (s širok, IH); 8,32 (d, J = 6,0 Hz, IH); 9,10 (s širok, 2H); 9,16 (s, IH); 13,4 (m širok, IH).

Maseni spektar (ES<+>): m/z = 424 [MH<+>]

Tačka topljenja: 214°C

Primer 5 : 3- {4-[3- (2- fluor -5-Metil-fenil)-ureido]-feniI}-lH-pirolo[2,3-c]piridin -2- karboksamid trifluoroacetat

[0073]

[0074]U rastvor 100 mg 3- (4-aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida u 5 mL tetrahidrofurana dodato je, u kapima, 48,3 uL 2- fluor -5-metilfenilizocijanata. Reakciona smeša je mešana 16 h na temperaturi ambijenta u atmosferi argona i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je mešan 30 minuta u 2 mL dihlormetana. Suspendovani čvrsti ostatak je pro filtriran, ispran vodom i osušen. Konačno prečišćavanje je izvedeno preparativnom LC/MS dajući posle usšenja u vakuumu na 40°C, 36 mg 3- {4-[3- (2- fluor -5-Metil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida u obliku trifluoroacetatne soli, sa sledećim karakteristikama: IR (KBr): 3452; 1675; 1603; 1544;1314; 1202; 1144; 836; 805; 722 cr<n1>'H NMR.: 2,29 (s, 3H); 6,82 (m, IH); 7,12 (dd, J = 8,5 i 11,5 Hz, IH) ; od 7,46 do 7,51 (m, 3H); 7,62 (d širok, J = 8,5 Hz, 2H); od 7,97 do 8,03 (m, 2H); 8,08 (s širok,

1 H); 8,32 (d, J = 6,5 Hz, 1 H); 8,54 (d širok, J = 2,5 Hz, IH) ; 9,15 (s, IH); 9,25 (s, IH); 13,4 (m širok, 1 H)

Maseni spektar (ES<+>): m/z = 404 [MH<+>J

Tačka topljenja: 222°C

Primer 6: 3- [4-(3- m-toliI-ureido)-fenil]-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid trifluoroacetat

[0075]

[0076] U rastvor 100 mg 3- (4-aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida u 5 mL tetrahidrofurane dodato je, u kapima, 47,8 uL m-tolil-izocijanata. Reakciona smeša je mešanal6 h na temperaturi ambijenta u atmosferi argona i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je mešan 30 minuta u 2 mL dihlormetana. Suspendovani čvrsti ostatak je pro filtriran, ispran vodom i osušen. Konačno prečišćavanje je izvedeno preparativnom LC/MS dajući, posle sušenja u vakuumu na 40°C, 40 mg 3- [4-(3- m-tolil-ureido)-fenil]-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida u obliku trifluoracetatne soli, koja ima sledeće karakteristike: IR(KBr): 3408; 1699; 1595; 1526; 1203; 1138; 834; 797; 724 cm"<1>NMR. 'H: 2,29 (s, 3H); 6,81 (d širok, J = 7,5 Hz, IH); 7,17 (t, J = 7,5 Hz, 1 H); 7,25 (d širok, J = 7,5 Hz, IH); 7,32 (s širok, 1 H); 7,44 (s širok, IH) ; 7,47 (d širok, J = 8,5 Hz, 2H); 7,62 (d širok, J = 8,5 Hz, 2H) ; 7,96 (m širok, IH); 8,06 (s širok, IH) ; 8,30 (d, J = 6,0 Hz, IH); 8,67 (s, IH); 8,86 (s, IH) ; 9,12 (s, IH) ; 13,3 (m širok, 1

H).

Maseni spektar (ES<+>): m/z = 386 [MH<+>]

Primer 7:3- {4-[3- (2- Fluor -5 trifluorometil-feniI)-ureiđo]-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin- 2- karboksamid

[0077]

[0078]U rastvor 130 mg 3- (4-aminofenil)-lH-pirolo[2,3- b]piridin -2- karboksamida u 5 mL tetrahidrofurana dodato je, u kapima, 85 uL 2- fluor -5-(trifluorometil)fenilisocijanata. Reakciona smeša je mešana 16 h na temperaturi ambijenta u atmosferi argona i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je hromatgrafisan na koloni os islicijum dioksida (eluent đihlormetan -metanol 9-1 odnos zapremina). Frakcije koje sadrže očekivano jedinjenje su koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 237 mg 3- {4-[3- (2- fluor -5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- b]piridin -2- karboksamida u obliku bele čvrste suptanvce, sa sledećim karakteirstikama: IR (KBr): 1659; 1623; 1542; 1443; 1339; 1316; 1119 cm"<1>•H NMR: 7,08 (m širok, IH); 7,14 (dd, J = 5,0 i 8,0 Hz, IH); 7,40 (m, IH); 7,46 (d širok, J = 8,5 Hz, 2H); 7,51 (m, IH) ; 7,57 (d širok, J = 8,5 Hz, 2H) ; od 7,55 do 7,60 (m masque, IH) ; 7,92 (d širok, J = 8,0 Hz, IH) ; 8,38 (d širok, J = 5,0 Hz, 1 H) ; 8,64 (d širok, J = 7,5 Hz, IH) ; 9,01 (s širok, IH); 9,36 (s širok, IH); 12,1 (s širok, IH).

Maseni spektar (ES<+>): m/z = 458 [M+H<+>]

Tačka topljenja: 232°C (Kofler).

3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- b]piridin -2- karboksamid :

[0079] U rastvor 260 mg metil 3- (4-aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksilata u 30 mL 7N rastvora amonijaka u metanolu, dodato je 5 mL22% vodenog rastvora amonijaka. Reakciona smeša je mešana 20 h u autoklavu do 80°C (12.6 bara), i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je hromatografisan na koloni os silicijum dioksida (eluent đihlormetan -methanol 9-1 odnos zapremina ). Frakcije koje sadrže očekivano jedinjenje su koncentrovane pod sniženim pritiskom. Dobijeno je 140 mg 3- (4-aminofenil)-lH-pirolo[2,3- b]piridin - 2- karboksamida u obliku bledo žutie čvrste supstance, sa sledećim karakteirstikama: Tačka topljenja : 139°C

metil 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksilat:

[0080] U rastvor 0.64 g metil 3- brom -1 H-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksilata u 50 mL toluena i 50 ml metanola, dodato je 1.08 g hidrohlorida 4-aminofenil-boronske kiseline i 0.9 ml trietilamina. Reakciona smeša je mešana u atmosferi argona tokom 15 minuta. Zatim je redom dodato : 144 mg tetrakis(trifenilfosfm)- paladijuma (0), 0.3 g litijum hlorida, 0.66g natrijum karbonata, i 7.5 mL destilovane vode. Reakciona smeša je mešana 8 h na refluksu. Posle filtracije kroz Celite®, filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni od silicijum dioksida eluiranjem sa smešom, etili acetata i cikloheksana (7-3 odnos zapremina). Dobijeno je 400 mg metil 3- (4-aminofenil)-lH- pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksilata u obliku žute čvrste suptance, sa sledećim karakteristikama:

Tačka topljenja: 236°C

Metil 3- Bromo-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksilat:

[0081] U rastvor 3.2 g metil 1 H-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksilat hidrohlorida u 165 mL piridina, dodato je u kapima na 0°C u atmosferi argona rastvor 5.04 g piridinijum tribromida u 35 mL piridina. Reakciona smeša je zatim mešana na 0°C, zonda je sipana u smešu 250 g od smrvljenog leda i 750 ml destilovane vode. Suspenzija je profiltrirana, čvrsti ostatak je ispran 2 puta sa 25 mL destilovane vode, i zatim osušen na vazduhu. Dobijeno je 0.87 gmetil 3- bromo-1 H-pirolo[2,3- bjpiridin

-2- karboksilata u obliku čvrste supstance bež boje, sa sledećim karakteristikama: Maseni spektar (ES+) : m/z = 256 [M+H<*>]

Metil 1 H-pirolo[2,3- b]piridin -2- karboksilat hidrohlorid :

[0082] U rastvor 4 g hidrohlorida 1 H-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksilne kiseline u 100 mL metanola u kapima je dodato 6 mL tionil hlorida na temperaturi ambijenta. Reakciona smeša je zatim mešana 5 h na temperaturi ambijenta, i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je triturisan u 50 mL etil etra, i zatim osušen u vakuumu na 40°C. Dobijeno je 3.22g hidrohlorida metil 1 H-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksilata u obliku čvste usptance svetio žute boje, koja je upotrebljena u sledećem koraku.

lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksilna kiselina hidrohlorid

[0083] U rastvor, ohlađen na -70°C, 6.03 g 1 H-pirolo[2,3- bjpiridina u 75 ml anhidrovanog THF-a u kapima je dodato 33mL rastvora 1.6M n-butilitijuma u heksanu. Posle mešanja u trajanju od 15 minuta na -70°C , dodato j e 20g suvog leda. Smeša je zatim ostavljena da se ugreje do temperature ambijenta, pa je koncentrovana pod sniženim pritiskom . Dobijeno je 8.4g bele čvrste supstance koja je rastvorena u 175 mL tetrahidrofurana. Rastvor je ohlađen na -70°C, zatim je u kapima dodato 35 mL rastvora 1.5M t-butilitijum u heksanu. Posle mešanja od 30 na - 70°C, u rastvor je dodato 20 g suvog leda. Smeša je zatim ostavljena da se ugreje do temperature ambijenta, pa je ova reakciona smeša zatim sipana u 50 mL destilvoane vode koja je ohlađena na 0°C. Tetrahidro turanje uapren pod sniženim pritiskom. Zaostali vodeni rastvor je razblažen sal50 mL destilovane vode, ispran dva puta sa 100 mL dihlormetana, zakišeljen do pHl dodatkom 30 mL vodenog rastvora 5N hlorovodonične kiseline, i zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijeno je 10.01 g proizvoda u obliku paste, koji je zatim rekristalisan iz 50 mL metanola. Dobijeni čvrsti ostatak je tretiran smešom 50 mL 7N rastvora hlorovodonične kiseline u izopropanolu i 50 mL izopropil etra. Posle sušenja na vazduhu, dobijeno je 5.71 g hidrohlorida lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksilne kiseline u obliku čvrste supstance, krem boje.

Maseni spektar (EI): m/z = 162 [M<+>°J

Primer 8: 3- {4-[3- (2- Fluor -5-trifluorometil-fenil)-ureido|-fenil}-7-oksi-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamid

[0084]

[0085]U rastvor 50 mg 3- {4-[3- (2- fluor -5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- b]piridin -2- karboksamida u 2 mL hlorforma, na temepraturi od 0°C, u kapima je dodat 0.31 mL 7M rastvora meta- hlorperbenzojeve kiseline u hlorformu. Rastvor je mešan na 0°C tokom 4 h i zatim na temperaturi ambijentajoš 16 h . Reakciona smeša je razblažena sa 3 mL dihlormetana, profiltriran kroz levak od sinterovanog stakla br. 4, i dobijeni čvrsti ostatak je ispran dva puta sa 3 mL đihlormetan, i osušen na vazduhu. Dobijeno je 40 mg 3- {4-[3- (2- fluor -5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-7-oksi-l H-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida u obliku svetio žute čvrste supstance, sa sledećim karakteirstikama: IR (KBr): 3352; 1671; 1609; 1545; 1442; 1340; 1315; 1239; 1119; 1069 i 885 cm"<1>

'H NMR.: 7,16 (m, IH) ; od 7,35 do 7,58 (m, 7H); 7,63 (m širok, IH); 7,77 (m širok, IH); 8,31 (d širok, J = 6,0 Hz, IH) ; 8,65 (d širok, J = 8,5 Hz, IH) ; 8,94 (s širok, IH) ; 9,29 (s, IH) ; od 12,5 do 13,2 (m tres širok, IH).

Maseni spektar (ES<+>) : m/z = 474 [M+Hf ]

Tačka topljenja: 220°C (Kofler).

Primer 9 : 3- {4-[3- (2- Fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid

[0086]

[0087]66.6 mg čvrstog 3- {4-[3- (2- Fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamida, bež boje, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i 2- Fluor - fenilisocijanata.

Tačka topljenja = 268.7°C (Biichi)

Maseni spektar (ES+) : [M + H]<+>= 390

Retenciono vreme (min) : 3.71

Primer 10 : 3- {4-{3- (2- Metoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid

[0088]

[0089]83.6 mg čvrstog 3- {4-[3- (2- Metoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-b]piridin -2- karboksamid bež boje, dobijeno je kao što je opisano u primeru 7 do polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 2- metoksi-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 227.1 °C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M + Hj<+>= 402

Retenciono vreme (min): 3.77

Primer11 :3- {4-[3- (4-Trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-b]piridin-2-karboksamid

[0090]

[0091] 77.6mg čvrstog 3- {4-[3- (4-Triflurometil-fenil)-ureido]-fenil} lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamida bele boje, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamid i od 4-trifluorometil-fenilizocijanata.

Tačka topljenja : 296.2 °C (Biichi)

Maseni spektar (ES+) : [M + Hj<+>= 440

Retenciono vreme (min) : 4.24

Primer 12:3- {4-[3- (2- Hlor-5-trifluorometil-feniI)-ureido]-fenil)-lH-pirolo[2,3-

bjpiridin -2- karboksamid.

[00921

[0093]40.56 mg čvrstog 3- {4-[3- (2- Hlor-5-trilfuorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamid bele boje, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 2- Hlor-5-trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 188.3°C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M + H]<+>- 474

Retenciono vreme (min) : 4.51

Primer 13 : 3- {4-[3- (2- Fluor -3- trifluorometil-fenil)-ureido]-feniI)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamid.

[0094]

[0095]79 mg čvrstog 3- {4-[3- (2- Fluor -3- trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida bež boje, dobijeno je kao što je opisano u primeru 7 polazeći od 3- (4- Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 2- Fluor -3- trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 265.4°C (Biichi)

Maseni spektar (ES+) : [M + H]<+>= 458

Retenciono vreme (min) : 4.24

Primer 14: 3- {4-[3- (4-Fluor -3- trifluorometil-feniI)-ureido]-fenil}-lH-piro!o[2,3- b)piridin -2- karboksamid.

[0096]

f0097]76.5 mg čvrstog 3- {4-[3- (4-Fluor-3- trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida braon boje, dobijeno je kao što je opisano u primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 4-Fluor -3- trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 234.7°C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>) : [M + HJ<+>= 458

Retenciono vreme (min) :4.22

Primer 15: 3- {4-[3- (3-Fluor -5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenii}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin-2-karboksamid

[0098]

[0099]78.1 mg čvrstog 3- {4-[3- (3- Fluor-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida bež boje, dobijeno je kao što je opisano u primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 3- Fluor -5-trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 257.5 °C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M + Hj<+>= 458

Retenciono vreme (min): 4.42

Primer 16: 3- {4-[3- (4-TrifluoroMetoksi-fenil)-ureidol-fenil}-lH-piroIo[2,3-bjpiridin -2- karboksamid.

[0100]

[0101]92.3 mg 3- {4-[3- (4-TrifluoroMetoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH- pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamida u obliku braon praha dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od - (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 4-Trifluorometoksi-fenilisocij anata.

Tačka topljenja: 258.9°C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>) : [M + H]<+>= 456

Retenciono vreme (min) : 4.29

Primer 17 : 3- {4-[3- (3,4-Dimetoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin-2- karboksamid

[0102]

[0103]79 mg o3- {4-[3- (3,4-Dimetoksi-fenil)-ureidoj-fenil}-l H-piroIo[2,3-b]piridin -2- karboksamid u obliku čvrste supstance bež boje dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamida i od 3,4-Dimetoksi-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 223.7°C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M + H]<+>= 432

Retenciono vreme (min) : 3.27

Primer 18 : 3- {4-[3- (2,5-Dimetil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid

[0104]

[0105]75.9 mg 3- {4-[3-(2,5-Dimetil-fenil)-ureidoj-fenil}-l H-pirolo[2,3-bjpiridin-2- karboksamida obliku belc čvrste supstance dobijeno je kao stoje opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 2,5-dimetil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 308.8 °C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M+HJ<+>= 400

Retenciono vreme (min): 3.90

Primer 19: 3- {4-[3- (3- Metoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid

[0106]

[0107]55.5 mg 3- {4-[3- (3- Metoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin - 2- karboksamida obliku čvrste supstance bež boje dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 3- metoksi-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 306.2 °C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M+H]<+>= 402

Retenciono vreme (min) : 3.39

Primer 20: 3- {4-]3- (3- Trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin-2- karboksamid

[0108]

[0109]56.5 mg 3- (4-[3- (3- Trifluorometil-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamida, bele čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 3- Trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 263.6°C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M+H]<+>= 440

Retenciono vreme (min): 3.95

Primer 21: 3- {4-[3-(3,4-DimetU-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin-2-karboksamid

[0110J

[0111]45.2 mg 3- {4-[3- (3,4-Dimetil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin - 2- karboksamida bele čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 3,4-Dimetil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 274.7 °C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M + HJ<+>= 400

Retenciono vreme (min): 3.75

Primer 22:3-{4-[3-(2-Metoksi-5-Metil-fenil)-ureido]-feniI}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin-2-karboksamid.

[0112]

[0113]44.9 mg 3- {4-[3- (2- Metoksi-5-Metil-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamida obliku čvrste supstance bež boje dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamida i od 2- Metoksi-5-metil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 327.7°C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M + Hj<+>= 416

Retenciono vreme (min): 3.76

Primer 23 : 3- [4-(3- m-Tolil-ureido)-feniI]-lH-pirolo[2,3- bjpiridin-2-karboksamid

[0114]

[0115]62.5 mg 3- [4-(3- m-Tolil-ureido)-fenilj-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamida obliku čvrste supstance bež boje dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od m-tolilizocijanata.

Tačka topljenja : 266 °C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M+Hj+ = 386

Retenciono vreme (min): 3.60

Primer 24 :3- {4-[3-(4-Fluor -feniI)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-

karboksamid

[0116]

[0117]49.7 mg 3- {4-[3- (4-Fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamida obliku čvrste supstance bež boje dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 4-Fluor -fenilizocijanata.

Point fusion : 299.9°C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>) : [M+H]<+>= 390

Retenciono vreme (min) : 3.45

Primer 25 : 3- [4-(3- p-ToliI-ureido)-fenil]-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid

[0118]

[0119]68.4 mg 3- [4-(3- p-Tolil-ureido)-fenilj-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamida obliku čvrste supstance bež boje dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od p-tolilizocijanata.

Tačka topljenja : 293 °C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>) : [M+HJ<+>= 386

Retenciono vreme (min) : 3.58

Primer 26 : 3- {4-J3- (4-Metil-3- trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamid

[0120]

[0121]47.1 mg 3- {4-[3- (4-Metil-3- trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida u obliku bele čvrste supstance, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od - (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamida i od 4-Metil-3- trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 285°C

Maseni spektar (ES<+>) : [M+H]<+>= 454

Retenciono vreme (min): 4.10

Primer 27 : 3- {4-[3- (4-Difluorometoksi-fenil)-ureido]-feniI}-lH-pirolo[2,3-b]piridin -2- karboksamid

[0122]

[0123]47.5 mg 3- {4-[3- (4-Difluorometoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamida kao bele čvrste supstance , dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 4-Difluorometoksi-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 283.5°C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M+H]<+>= 438

Retenciono vreme (min) : 3.64

Primer 28 : 3- {4-[3- (3,5-Dimetoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin

-2- karboksamid

[0124]

[0125]59.2 mg o solide beige od 3- {4-[3- (3,5-Dimetoksi-fenil)-ureiđo]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida kao čvrste supstance bež boje, dobijeno je kao stoje opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamida i od 3,5-Dimetoksi-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 266.5°C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>) : [M+HJ<+>= 432

Retenciono vreme (min): 3.45

Primer 29 : 3- {4-[3- (4-Hlor-3- trifluorometil-fenil)-ureido]-feniI}-lH-pirolo[2,3-b|piridin -2- karboksamid

[0126]

[0127]29.8 mg 3- (4-[3- (4-Hlor-3- trifluorometil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida u obliku bele čvrste supstance, dobijeno je kao stoje opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridina -2-karboksamid i od 4-Hlor-3- trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 311.1 °C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M + H]<+>= 474

Retenciono vreme (min): 4.22

Primer 30 : 3- {4-[3- (2,5-Dimetoksi-fenii)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- b]piridin

-2- karboksamid

[0128]

[0129]33.1 mg 3- {4-[3-(2,5-Dimetoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamida liofilizata žute boje, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7, polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 2,5-Dimetoksi-fenili socij anata.

Maseni spektar : LC-MS-DAD-ELSD :432 (+) = (M + H)(+); 430 (-) = (M - H)(-) Retenciono vreme (min) : 3.53

Primer 31 :3- {4-[3- (3- Fluor -fenil)-ureido]-feniI}-lH-pirolo[2,3- b]piridin -2-karboksamid.

[0130]

[0131]31.5 mgbelog liofilizata 3- {4-[3~(3- Fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida dobijeno je kao stoje opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 3- Fluor

-fenilisocijanata.

Maseni spektar LC-MS-DAD-ELSD : 390(+) = (M+H)(+); 388(-) = (M-H)(-) Retenciono vreme (min): 3.55

Primer 32:3-{4-[3- (2-Metoksi-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-feniI}-lH-piro!o[2,3- bjpiridin-2-karboksamid

[0132]

[0133]50 mg čvrstog 3- {4-[3- (2- Metoksi-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida bež boje, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7, polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 2- Metoksi-5-trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 221 °C (Kofler- sublimacija)

Maseni spektar LC-MS-DAD-ELSD : 470(+) = (M+H)(+) 468(-) = (M-H)(-)

Primer 33: Trifluoroacetate od 3- {4-[3- (2- Acetilamino-5-trilfuorometil-fenil)-ureido]-feniI}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid.

[0134]

[0135]12 mg čvrstog žutog 3- {4-[3- (2- AcetiIamino-5-trifluorometil-fen<i>l)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od 2- Acetilamino-5-trifluorometil-fenilizocijanata.

Maseni spektar (ES<+>): [M + H]<+>= 497

Retenciono vreme (min) : 2.63

Primer 34:3- {4-[3- (2- Metoksi-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid

[0136]

[0137]25 mg čvrstog 3- {4-[3- (2- Metoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamida žute boje, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od 2-Metoksi-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 216°C (Kofler)

Maseni spektar (ES<+>): [M+H]<+>= 402

Retenciono vreme (min) : 3.06

Primer 35 : 3{4-[3- (2- Trifluorometil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamid.

[0138]

[0139]80 mg 3- {4-[3- (2-Trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamida, u obliku žute čvrste supstance, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida i od 2- Trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 228°C (Kofler)

Maseni spektar (ES*) : [M + Hj<+>- 440

Retenciono vreme (min): 3.17

Primer 36 : 3- {4-[3- (3- Trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamid

[0140]

[0141]77 mg 3- {4-[3- (3- Trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-c]piridin -2- karboksamida u obliku čvrste supstance žute boje dobijeno, je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida i od 3- Trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 256°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>): [M+H]<+>= 440

Retenciono vreme (min): 3.48

Primer37 : 3- {4-[3-(4-Fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin-2-karboksamid

[0142]

[0143]73 mg 3- {4-[3- (4-Fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida, u obliku žute čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od 4-Fluor -fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 271°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>) : [M+H]<+>= 390

Retenciono vreme (min): 2.93

Primer 38 : 3- {4-[3- (4-TrifluorometiI-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamid

[0144[

[0145]91 mg 3- {4-[3- (4-Trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamida, u obliku žute čvrste supstance, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-

karboksamida i od 4-Trifluorometil-fenilizocijanata.

Tačka topljenja: 289°C

Maseni spektar (ES<+>): [M+H]<+>= 440

Retenciono vreme (min): 3.48

Primer39 :3- [4-(3- p-To!iI-ureido)-fenil]-lH-pirolo[2,3- cjpiridin-2-karboksamid

10146]

[0147]76 mg 3- [4-(3- p-Tolil-ureido)-fenil]-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida, u obliku čvrste supstance žute boje dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od p-tolilizocijanata.

Tačka topljenja : 277°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>): [M+HJ<+>= 386

Retenciono vreme (min): 3.13

Primer 40: 3- {4-[3- (4-HIor-3- trifluorometU-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-

cjpiridin-2-karboksamid

[0148]

[0149] 103mg 3- {4-[3- (4-Hlor-3- trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamida, u obliku žute čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida i od 4-Hlor-3- trifluorometil-fenilizocijanata.

Tačka topljenja: 228°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>): [M + H]<+>= 474

Retenciono vreme (min): 3.64

Primer 41:3- {4-[3- (2- Hlor-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-c]piridin-2-karboksamid

[0150]

[0151]76 mg 3- {4-[3- (2- Hlor-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamida u obliku žute čvrste supstance, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida i od 2- Hlor-5-trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 243°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES+) : [M+H]<+>= 474

Retenciono vreme (min) : 3.56

Primer 42: 3- {4-[3- (4-TrifluoroMetoksi-fenil)-ureido]-feniI}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamid

[0152]

[0153]94mg 3- {4-[3- (4-TrifluoroMetoksi4enil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-c]piridin -2- karboksamida, u obliku žute čvrste supstance, dobijeno je kao što je opisano u Primeru l polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida i od 4-Trifluorometoksi-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 276°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>) : [M+H]<+>= 456

Retenciono vreme (min) : 3.63

Primer 43: 3- {4-[3- (4-Difluorometoksi-feniI)-ureido]-fenil}-lH-piroIo[2,3-c]piridin -2- karboksamid

[0154]

[0155]87 mg 3- {4-[3- (4-Difluorometoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamida u obliku žute čvrste supstance, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida i od 4-Difluorometoksi-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 257°C

Maseni spektar (ES<+>): [M+HJ<+>=4.38

Retenciono vreme (min): 3.23

Primer 44: 3- {4-[3-(3,4-DimetiI-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin-2-karboksamid

[0156]

[0157]82 mg 3- {4-[3- (3,4-Dimetil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida, u obliku žute čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od 3,4-dimetil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 230°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>) : [M+H]<+>= 400

Retenciono vreme (min) : 3.32

Primer 45: 3- {4-[3- (3,5-Dimetoksi-feniI)-ureido]-fenil}-lH-pirolo]2,3-cjpiridin

-2-karboksamid

[0158]

[0159]87 mg 3- {4-[3- (3,5-Dimetoksi-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin - 2- karboksamida, u obliku žute čvrste supstance, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od 3,5-Dimetoksi-fenilizocijanata.

Tačka topljenja : 225°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>): [M+H]<+>= 432

Retenciono vreme (min): 3.07

Primer 46: 3- {4-[3- (2,5-Dimetil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-piroIo[2,3- cjpiridin-2-karboksamid

[0160]

[01611 87mg 3- {4-[3- (2,5-Dimetil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- c]piridin -2-karboksamida, u obliku žute čvrste supstance, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od 2,5-Dimetil-feniIisocijanata.

Tačka topljenja : 261 °C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>): [M+H]<+>= 400

Retenciono vreme (min): 3.25

Primer 47:3- {4-13- (2-Fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- c]piridin-2-karboksamid

[0162]

[0163]59 mg 3- {4-[3- (2- Fluor -fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida, u obliku bledo žute čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od 2- Fluor -fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 242°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>) : [M + H]<+>= 390

Retenciono vreme (min): 2.41

Primer 48 : 3- {4-[3- (3- Fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid

[0164]

[0165]63 mg 3- {4-[3- (3- Fluor -fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida, u obliku bledo žute čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od 3- Fluor -fenilizocijanata.

Tačka topljenja : 252°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES+) : [M + HJ+ = 390

Retenciono vreme (min): 2.55

Primer 49 : 3- {4-[3- (2- Fluor -3- trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-l H-pirolo[2,3- c]piridin -2- karboksamid

[0166]

[0167]69 mg 3- {4-[3- (2- Fluor -3- trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida u obliku bledo žute čvrste supstance dobijeno je kao stoje opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-l H-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamida i od 2- Fluor -3- trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 240°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>): [M + H]<+>= 458

Retenciono vreme (min): 2.75

Primer 50 : 3- {4-[3- (3- Fluor -5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid

[01681

[0169J69 mg 3- {4-[3- (3- Fluor -5-trifluorometil-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamida u obliku bledo žute čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-l H-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida i od 3- Fluor -5-trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 261 °C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>): [M + H]<+>- 458

Retenciono vreme (min) : 2.88

Primer 51 : 3- {4-[3- (4-Fluor -3- trifluorometil-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid

[0170]

[0171]56 mg 3- {4-[3- (4-Fluor -3- trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamida, u obliku bledo žute čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida i od 4-Fluor -3- trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 201 °C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>) : [M + HJ<+>= 458

Retenciono vreme (min): 2.85

Primer 52 : 3- {4-[3- (4-Metil-3- trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-c|piridin -2- karboksamid

[0172]

[0173]61 mg 3- {4-[3- (4-Metil-3- trifluorometil-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamida, u obliku bledo žute čvrste supstance dobijeno je kao stoje opisano u Primeru 1, polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida i od 4-metil-3- trifluorometil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 199°C

Maseni spektar (ES<+>): [M + HJ<+>= 454

Retenciono vreme (min): 2.84

Primer 53: 3- {4-{3- (3- Metoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid trifluoroacetat

[0174]

[0175] 33.3 mg žuto liofilizata 3- {4-[3- (3- Metoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida bele čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida i od 3- Metoksi-fenilisocijanata.

Maseni spektar (ES<+>) : [M + H]<+>= 402

Retenciono vreme (min) : 2.60

Primer 54 : 3- {4-[3- (3,4-Dimetoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH- pirolo[2,3- cjpiridin

-2-karboksamid trifluoroacetat

[0176]

[0177]80.5 mg žutog liofilizata 3- {4-[3- (3,4-Dimetoksi-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid trifluoracetata dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od 3,4-Dimetoksi-fenilisocijanata.

Maseni spektar (ES<+>): [M + H]<+>= 432

Retenciono vreme (min): 2.27

Primer 55 : 3- {4-[3- (2,5-Dimetoksi-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH- pirolo[2,3- cjpiridin

-2- karboksamid trifluoroacetat

[0178]

[0179]90.7 mg žutog liofilizata 3- {4-[3- (2,5-Dimetoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid trifluoracetata, dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od 2,5-Dimetoksi-fenilisocijanata.

Maseni spektar (ES<+>): [M + H]<+=>432

Retenciono vreme (min) : 2.62

Primer 56 : 3- [4-(3- o-Tolil-ureido)-fenil]-lH-pirolo[2,3- cjpiridin-2-karboksamid

[0180]

[0181]75.3 mg 3- [4-(3- o-Tolil-ureido)-fenil]-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida, u obliku bledo žute čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1, polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od o-Tolilisocijanata.

Tačka topljenja : 270°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>): [M + Hj+ = 386

Retenciono vreme (min): 2.54

Primer 57 :3- {4-[3- (4-Metoksi-fenil)-ureido]-feniI}-lH-piroIo[2,3- c]piridin -2-

karboksamid

[0182]

[0183]51.1 mg3- {4-[3-(4-Metoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin-2-karboksamida, u obliku bledo žute čvrste supstance dobijeno, je kao što je opisano u Primeru 1 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid i od 4-Metoksi-fenilisocijanata.

Tačka topljenja: 275°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES+): [M + HJ+ = 402

Retenciono vreme (min): 2.28

Primer 58 : 3- {4-[3- (3- Hlor-4-Difluorometoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- c] piridin -2- karboksamid

[0184]

[0185]93 mg 3- {4-[3- (3- Hlor-4-Difluorometoksi-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida u obliku bledo žute čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1, polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamida i od 3- Hlor-4-Difluorometoksi-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 267°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>): [M + H]<+=>472

Retenciono vreme (min): 2.90

Primer 59 : 3- {4-[3- (3,5-Dimetil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin-2-karboksamid

[0186]

[0187]61 mg 3- {4-[3- (3,5-Dimetil-fenil)-ureidoJ-fenil}-l H-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida, u obliku bledo žute čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1, polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od 3,5-Dimetil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 188°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<+>): [M + HJ<+>= 400

Retenciono vreme (min) : 2.68

Primer 60 : 3- {4-[3- (3- etil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- c]piridin -2-karboksamid

[0188J

[0189]61 mg 3- {4-[3- (3- etil-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamida, u obliku žute čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 1, od 3- (4-aminofenil)-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamida i od 3- etil-

fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 257°C (Biichi B-545)

Maseni spektar (ES<4>) : [M + H]<+>= 400

Retenciono vreme (min): 2.97

Primer 61: 3- {4-[3- (3-etil-fentt)-ureido]-fenU}-lH-pirolo[2,3- b]piridin-2-karboksamid

[0190J

[0191]0.8 mg 3- {4-[3- (3- etil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- b]piridin -2-karboksamida, kao bele čvrste supstance dobijeno je kao što je opisano u Primeru 7 polazeći od 3- (4-Aminofenil)-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamida i od 3-metil-fenilisocijanata.

Tačka topljenja : 254 °C (Biichi)

Maseni spektar (ES<+>): [M+H]<+>= 400

Retenciono vreme (min) : 7.18

Određivanje aktivnosti jedinjenja - Eksperimentalni protokoli

1. FAK

[0192]Inhibitorna aktivnost jedinjenja na FAK je određena merenjem inhibicije autofosforilacije enzima pomoću testa razlažuće fluorscencije (HTRF).

[0193]Cela cDNK humane FAK, N-terminalni kraj koji je obeležen histidinom, kloniran je u ekspresioni vektor pFastBac HTc baculovirusa. Protein je eksprimiran i prečišćen na oko 70% homogenosti.

[0194]Aktivnost kinaze je određena inkubacijom enzima (6.6 ug/ml) sa različitim koncentracijama testoranog jedinjenja (test-jedinjenja) u 50 mM Hepes pH = 7,2, 10 mM MgCl2, 100 uM Na3V04,15 uM d'ATP puferu, tokom lh, na 37°C. Enzimska reakcija je zaustavljena dodatkom Hepes pH = 7,0 pufera koji sadrži 0.4 mM KF, 133 mM EDTA, 0.1 % BSA i urađeno je obeležavanje, tokom 1 do 2 h na temperaturi ambijenta, dodavanjem u u ovaj pufer, anti-Histidin antitelo obeleženo (markirano) sa XL665 i monoklonalna antitela fosfospecifična za tirozin konjugovana sa europium kriptatom(Eu-K). Karakteristike ova dva fluorofora mogu se naći u G. Mathis i al., Antikancer Research, 1997,17, strane 3011-3014. Prenos (transfer) energije od ekscitovanog europijum kriptata na akceptor XL665 proprocionalan je stepenu autofosforilacije FAK-a. Dugotrajni signal specifičan za XL-665 je meren u Packard Discoverv čitaču. Svi testovi su izvedeni u duplikatu i izračunata je prosečna vrednost dve vrednosti. Inhibicija autofosforilacione aktivnostiod FAK -a, sa jedinjenima pronalaska izražena je kao proenat inhibicije u odnosu na kontrolu čija je aktivnost merena bez test-jedinjenja. Za izračunavanje procenta inhibicije, razmatran je odnos [signal na 665 nm/signal na 620 nm].

2. KDR

[0195] Inhibitorni efekat jedinjenja je određen uin vitrotestu fosforilacije supstrata sa KDR enzimom putem scintilaciione tehnike (ploča sa 96-ležišta, NEN).

[0196] Citoplazmični domen humanog KDR enzima je kloniranu obliku GST fuzije u vektoru ekspresije baculovirusa pFastBac. Protein je eksprimiran u ćelijama SF21 i prečišćen na oko 60 % homogenosti.

[0197] Aktivnost KDR kinaze je merena u 20 mM MOPS, 10 mM MgC12, 10 mM MnC12, 1 mM DTT, 2.5 mM EGTA, 10 mM b-glicerofosfat, pH = 7.2, u prisistvu 10 mM MgCl2, 100 uM Na3V04, 1 mM NaF. 10 ul jedinjenja dodato je u 70 ul kinaza pufera koji sadrži 100 ng KDR enzima, na 4°C. Reakcija je inicirana dodatkom 20 ul rastvora koji sadrži 2 ug supstrata (SH2- SH3 fragment PLCy eksprimiran u oliku GST fuzionog proteina), 2 uCiy<33>P[ATP] i 2 uM hladnog ATP. Posle inkubacije u trajanju od 1 h na 37°C, reakcija je zaustavljena doadtkom 1 zapremine (100 ul) od 200 mM EDTA. Uklonjen je pufer za inkubaciju, i zidovi su isparani tri puta sa 300 ul PBS-a. Radioaktivnost je merena u svakom ležištu pomoću radioaktivnog brojača Top Count NXT (Packard).

[0198] Fon je određen merenjem radioktivnosti u četiri različita ležišta sa radioaktivnim ATP -om i supstratom.

[0199] Ukupna kontrola aktivnosti merenja u četiri različita ležišta sasvim reagensima(y3<3>P-[ATP], KDR i supstrat PLC7) , ali bez jedinjenja.

[0200] Inhibcija aktvnosti KDR-a sajedinjenjem predmetnog pronalaska je izražena u procentima određene inhibicije kontrolne aktivnosti, u odsustvu jedinjenja.

[0201] Jedinjenje SU5614 (Calbiochem) (1 uM) je uključeno u svaku ploču kao kontrola inhibicije.

3. Tie2

[0202J Kodirajuća sekvenca humanog Tie2 koja odgovara amino kiselinama intracelularnog domena 776-1124 je generisan sa PCR pomoću cDNK izolovane iz humane placente kao model. Ova sekvenca je uvedena u ekspresioni vektorbaculovirusapFastBacGT u obliku fuzionog proteina GST.

[0203] Inhibitorni efekat molekula je odrđen u testu fosforilacije PLC sa Tie2 u prisustvu GST-Tie2 prečišćen na oko 80% homogenosti. Supstrat je sastavljen od SH2- SH3 fragmenata PLC-a eksprimiraog u obliku GST fuzionog proteina.

[0204] Aktivnost kinaze Tie2 merena je u MOPS 20mM pH 7.2 puferu, koji sadrži 10 mM MgCl2, 10 mM MnCl2, 1 mM DTT, 10 mM glicerofosfata. U ploči sa 96-ležišsta FlashPlate koja je držana na ledu, dodata je reakciona smeša, sastavljena od 70 uL okinaza pufera koji sadrži 100 ng GST-Tie2 enzima po ležištu. Dalje, dodato je 10 uL test moelkula razblaežnog u DMSO do maksimalne koncentracije od 10%. Za date koncentracije, svako merenje je izvedeno četiri puta. Reakcija je inicirana dodatkom 20 ul rastvor akoji sadrži 2 pg GST-PLC, 2 uM hladnog ATP i 1 uCi<33>P[ATP]. Posle inkubacije od 1 h na 37°C, rekacija je zaustavljena dodatkom 1 zapremine (lOOul) 200 mM EDTA. Posle uklanjanja inkubacionog pufeera, ležišta su isprana tri puta sa 300 (iL PBS-a. Radioaktivnost je merena na MicroBetal450 Wallac.

[0205] Inhibicija aktivnosti Tie2 je izračunata i izražena kao procebnat inhibicije u odnosu na kontrolnu kativnost određenu u odsustvu jedinjenja 4. Aurora 1 i Aurora 2

[0206] Inhibitorni efekat jedinjenja u odnosu na Auroral i Aurora2 kinaze, određena je enzimatskim testom, detekijom radioaktivnosti.

[0207] Kinazna aktivnost Aurora 1 i Aurora 2 je određena preko fosforilacije supstrata Numa-histidin u prisustvu radioaktivno obeleženog ATP-a ([<33>P]ATP) na Flashplate pločama sa 96 ležišta u kojima je nikl helat vezan za površinu mikroploče. Količina<33>P fosfata inkorpriranog u NuMA je supstratu je proporcionalan aktivnosti enzima Auroral ili Aurora2.

Proteini:

[0208] Proteini su dobijeni u laboratoriji za poizvodnju protiena Sanofi-Aventis grupe.

[0209] Aurora 1 : kompleks rekombinantnog Aurora-B/INCENP-C3, prečišćen do oko50% , N-terminalni kraj Aurora-B koji je obeležen histidinom.

[0210] Aurora 2 : cela rekombinantni rotein sadrži N-terminalni histidinski rep, eksprimiran uE. colii prečišćen do biše od 82 %.

[0211] NuMA (nuklearni protein koji se kombinuje sa mitotičkim aparatom): fragment od 424 amino kiseline, ekrpimrian u E.coli, N-terminalni kraj koji je obeležen sa histidinom i upotrebljen kao supstart za dva Aurora enzima.

Protokol:

[0212] Korišćene su mikroploče Flash-Plate sa 96 ležišta, nikl helatne (Perkin Elmer, model SMP107).

[0213] Proizvodi koji su ispitivani, inkubirani su u reakcionoj zapremini od 100 uL po ležištu, u prisustvu 10 nM Aurora 1 ili Aurora 2, 500 nM NuMA supstrata u puferu koji se sastoji od 50 mM Tris/HCl (pH 7.5), 50 mM NaCl, 5 mM MgCl2(Aurora-B) ili 10 mM MgCl2(Aurora-A) i 1 mM DTT, na 37°C.

[0214] U avko ležiššte dodato je 80 uL enzim/supstrat inkubacionog pufera , pa zatim je ododato 10 uL proizvoda za analizu, u različitim koncentracijama. Reakcija je inicirana dodatkom luM ATP -a krajnje koncentracije od 0.2 uCi [<33>P]ATP (10 uL). Posle inkubacije od 30 minuta, reakcija je pekinuta jednostavnim uklanjanjem reakcionog pufera i svako ležište je isprano sa 300 ul Tris/HCl pufera. Zatim je merena radioaktivnost u svakom ležištu pomoću scintilacionog aparata Packard, model Top -Count.

[0215] Kontrolna enzimatska aktivnost Aurora je izražena kao brojočitanih vrednosti u minuti dobijenih tokom 30 minuta posle oduzimanja fona ( reakciona smeša koja ne sadrži enzim). Evaluacija različitih test prizvoda izražena je kao procenat inhibicije aktivnosti Aurora u odnosu na kontrolu.

5. CDK2/ciklin E :

Prečišćavanje kompleksa CDK2/ CiklineE-( His) g pomoću IMAC ( afinitetnom

hromatografijom na nepokretnom metalu- Immobilized MetalAffinitv

Chromato£raphy ) :

[0216] Dva rekombinantna bacilovirusa sa humanim sekvencama koje kodiraju, respektivno, CDK2 i Ciklin E ( ovaj drugi ima tag heksa-histidina na C terminalnom kraju) su upotrebljena za ko-infekciju Sf21 ćelija insekta. Dva do tri dana posle početka ko-infekcije, ćelije su sakupljene centrifugiranjem i zatim čuvane (konzervirane) na -40°C do upotrebe. Posle odmrzavanja mehaničke lize ćelija, kompleks prisutan u supernantatnu dobijenom prilikom liziranja, je prečišćen afinitetnom hromatografijom na niklu (IMAC), i ostavljne na -80°C.

Test CDK2/ CiklinE naFlashvlate- u u formatu sa 96 ležišta.

[0217] Ploče u formatu sa 96 ležišta bloženih streptavidinom je su upotrebljene za određivanje aktivnosti jedinjenja na aktivnost kinaze CDK2/Ciklina E.

[0218] Za izvođenje ovog testa, biotinilisan, fragment proteina pRb, (biotinil-SACPLNLPLQNNHTAADMILSPVRSPKKKGSTTR-OH) je rastvoren do koncentracije od 1 mM u kinaza puferu (HEPES/ NaOH 50 mM, NaCl 1 mM, MgCl25 mM, pH 7.5) kako bi se dobio osnovni (stok) rastvor čuvan na -20°C u obliku alikvota od 110 uL. Le Na dan eksperimenta, alikvoti ovog rastvora su odmrznuti i razblaženi u kinaza puferu koji sadrži 1 mM ditiotreitola, dodat u pufer bez prethodne pripreme kako bi se postigla koncentracija od 14.3uM.70 uL ovog rastvora je dodato u svako ležište ploče Flashplate kako bi se dobila krajnja koncentracija supstrata od 10 uM tokom enzimatske reakcije izevnde u krajnjoj zapremini reakcionog medijuma od 100 uL (cf. u daljem tekstu).

[0219] Intermedijerna razblažnja inhibitora (proizvoda pronalaska) pri različitim koncentracijama su pripremljena u DMSO polazeći od osnovnog (stok) rastvora od 10 mM u odvojenim epruvetama. Tako su pripremljena sledeća razblaženja : 1000 uM, 333.3 uM, 111.1 uM, 37.03 uM, 12.35 uM,4.11 uM i 1.37 uM. Jedan uL od svakog od ovih rastora (ili 1 uL DMSO za kontrolu) jc prebačeno u ležišta ploče.

[0220] U svako ležište dodato je 19 ul rastvora smeše adenozinetrifosfata (ATP) i ATPy<33>P u kinaza puferu pri totalnoj koncentraciji od 5,26 uM ATP i od 52,6 uCi/ml<33>P. Enzimska rekacija je inicirana dodatkom 10 uL po udubljenju 200 nM rastvora CDK2/Ciklin E kinaza puferu koji sadrži 1 mM ditiotreitola (ili 1 OuL kinaza pufera koji sadrži 1 mM ditiotreitola za slepe probe).

[0221] Posle dodatka svakog od reagenasa, krajnja zapremina svakog ležišta je lOOuL, krajnja koncentracija supstrata je 10 uM, krajnje koncentracije inhibitora sulO uM, 3,33 uM, 1,11 uM, 0,37 uM, 0,123 uM, 0,041 uM i 0,014 uM (prema koncentracijama intermedijernih razblaženja), konačna koncentracija ATP -a je 1 uM, krajnja koncentracija<33>Pje lpCi/ležištu, i krajnja koncentracija CDK2/Ciklina Eje 20 nM.

[0222] Nakon dodatka svih reagenasa, ploča je inkubirana na 30°C uz mšanje na orbitalnoj mešalici na 650 rpm.

[0223] Po završetku inkubacije, ploča je isprana tri puta sa 300 uL PBS-a (Fosfat puferovani rastvor soli, pH=7,4 bez kalcijuma ili magnezijuma, referenca 10010-015, Gibco BRL). po ležištu. Inkroporacija<33>P u peptid je kvatitativno određena scinitlacionim brojačm Packard Topcount.NXT. Inhibitorna aktivnost proizvoda pronalaska je određena merenjem inhibitorne koncentraacije koja omogućava 50 %

(IC50) redukcije enzimske aktivnosti.

Rezultati:

Claims (18)

1. Proizvodi formule (I): A Z H Formula {I) gde:

1) A i Ar su supstituisane fenil grupe;

2) LjeNH-CO-NH;

3) W je C(R6), jedan od Y i Z je odabran od N i NO, a drugi je C(R5);

4) Rl,R5,iR6 suH;

5) RajeH.

2. Proizvod prema zahtevu 1, naznačen time, što Y je N.

3. Proizvod prema zahtevu 1, naznačen time, što Z je N.

4. Proizvod prema zahtevu 1, naznačen time, što Z je NO.

5. Proizvod prema zahtevu 1, naznačen time, što A je supstituisan prvim supstituentom odabranim iz grupe koju čine: (Cl-C12)alkil, halo(Cl-C3)alkil, ciklo(Cl-C3)alkil, (C2- C12)alkilen, (C2- C12)alkinil, (C6-C14)aril, (CI-CI 3)heteroaril sa 1 to 4 heteroatoms, 0-(Cl-C3)alkil, 0-(Cl-C13)aril, 0-(Cl-C13)heteroariI, S-(C1-C3)alkil, S-(C1-C13)aril, S-(Cl-C13)heteroaril, svaki po izboru supstituisan sa supstituentom odabranim od: (Cl-C12)alkil, halogen, 0-(Cl-C3)alkil, N(R8)(R9); gde R8 i R9 su nezavisno odabrani od H, (Cl-C3)alkil, (Cl-C3)alkilOH, halo(Cl-C3)alkil, (Cl-C3)alkilNH2, (Cl-C3)alkilCOOM, (Cl-C3)alkilS03M; u kojima, kada su R8 i R9 istovremeno supstituenti koji nisu H, oni su mogu povezati tako da formiraju 5- do 7- člani prsten sa 0 do 3 heteroatoma odabrana od O, N i S, i u kojima M je H ili katjon alkalnog metala odabran od Li, Na i K.

6. Proizvod prema jendom od zahteva 1 do 5, naznačen time, što A je supstituisano drugim supstituentom odabranim iz grupe koju čine: F, Cl, Br, I, OH, SH, S03M, COOM, CN, N02, CON(R8)(R9), N(R8)CO(R9), (Cl-C3)alkil-OH, (Cl-C3)alkil-N(R8)(R9), (Cl-C3)alkil-(R10), (Cl-C3)alkil-COOH, N(R8)(R9); gde su R8 i R9 nezavisno odabrani od H, (Cl-C3)alkil, (Cl-C3)alkilOH, (Cl-C3)haloalkil, (Cl-C3)alkilNH2, (Cl-C3)alkilCOOM, (Cl-C3)alkilS03M; u kojima, kada su R8 i R9 istovremeno supstituenti koji nisu H, oni se mogu povezati tako da formiraju 5- do 7-člani prsten koji sadrži 0 do 3 heteroatoma odabrana od O, N i S; gde M je H ili katjon alkalnog metala odabran od Li, Na i K; i gde RIO je H ili po izboru supstituisan nearomatičan heterocikl koji sadrži 2 do 7 atoma ugljenika i 1 do 3 heteroatoma odabrana od N, O i S.

7. Proizvod prema jendom od zahteva 5 i 6, naznačen time, što A je fenil supstituisan najmanje jednom grupom koja je odabrana od: halogena, (Cl-C4)alkil, (Cl-C3)haloalkil, 0-(Cl-C3)alkil, S-(C1-C3)alkil, 0-(C1-C3)haloalkil, S-(C1-C3)haloalkil, i u kojem, u slučaju kada A je disupstituisan, dva supstituenta mogu da budu povezani tako da formiraju 5-do 7- člani prsten sa 0 do 3 heteroatoma odabrana odN, OiS.

8. Proizvod prema jednom od prethodnih zahteva, naznačen time, što je: u ne-hiralnom obliku, ili u racemskom obliku, ili obogaćen jednim stereoizomerom ili odogaćen jednim enantiomerom; i po izboru je u obliku soli.

9. Proizvod prema jednnom od prethodnih zahteva, naznačen time, što je: 3- {4-[3- (2- Fluor -5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-b]piridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (2- Fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (2- Metoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (4-Trifluorometil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (2- Hlor-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (2- Fluor -3- trifluorometil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (4-Fluor -3- trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-b)piridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (3- Fluor -5-trifluorometil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (4-TrifluoroMetoksi-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin - 2- karboksamid, 3- {4-[3- (3,4-Dimetoksi-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (2,5-Dimetil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (3- Metoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (3- Trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (3,4-Dimetil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid 3- {4-[3- (2- Metoksi-5-Metil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid, 3- [4-(3- m-Tolil-ureido)-fenil]-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (4-Fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid, 3- [4-(3- p-Tolil-ureido)-fenilj-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (4-Metil-3- trifluorometii-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (4-Difluorometoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid 3- {4-[3- (3,5-Dimetoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (4-Hlor-3- trifluorometil-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (2,5-Dimetoksi-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (3- Fluor -fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2-karboksamid, .3. {4_[3_ (2- Metoksi-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-bjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (3- etil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- bjpiridin-2-karboksamid.

10. Proizvod prema jednom od prethodnih zahteva, naznačen time, što je : 3- {4-[3- (2- Fluor -5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-7-oksi-lH-pirolo[2,3- bjpiridin -2- karboksamid.

11. Proizvod prema jednom od prethodnih zahteva, naznačen time, što je: 3- {4-[3- (2- Fluor -5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (2- Metoksi-5-Metil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, Trifluoroacetate od 3- {4-[3- (3- hlor-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamid, Trifluoroacetate od 3- {4-[3- (3- hlor-4-fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid, Trifluoroacetate od 3- {4-[3- (2- fluor -5-Metil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid, Trifluoroacetate od 3- [4-(3- m-tolil-ureido)-fenil]-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, Trifluoroacetate od 3- {4-[3- (2- Acetilamino-5-trifluorometil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (2- Metoksi-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (2- Trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (3- Trifluorometil-fenil)-ureiđo]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid 3. {4_[3- (4-Fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, 3. {4_[3- (4-Trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, 3- [4-(3- p-Tolil-ureido)-fenilj-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (4-Hlor-3- trifluorometil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamid, 3- (4-[3- (2- Hlor-5-trifluorometil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamid, 3. {4-[3- (4-TrifluoroMetoksi-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (4-Difluorometoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (3,4-Dimetil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (3,5-Dimetoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid 3- {4-[3- (2,5-Dimetil-fenil)-ureidoj-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (2- Fluor -fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, 3. {4_[3. (3_ Fluor -fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (2- Fluor -3- trifluonnetil-fenil)-ureiđo]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (3- Fluor -5-trifluormetil-fenil)-ureido]-feml}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (4-Fluor-3- tjifluormetil-feriil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (4-Metil-3- trifluormetil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3-c]piridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (3- Metoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin - 2-karboksamid trifluoracetate, 3- {4-[3- (3,4-Dimetoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid trifluoracetat, 3- {4-[3- (2,5-Dimetoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid trifluoracetat, 3- [4-(3- o-Tolil-ureido)-fenilJ-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (4-Metoksi-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (3- Hlor-4-Difluormetoksi-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3-cjpiridin -2- karboksamid, 3- {4-[3- (3,5-Dimetil-fenil)-ureidoJ-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid, 3- {4-[3- (3- etil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirolo[2,3- cjpiridin -2-karboksamid.

12. Lek, naznačen time, što sadrži proizvod formule (I) prema jednom od zahteva 1 do 11, ili adicionu so ovog jedinjenja sa farmaacutski prihvatljivom kiselinom, ili alternativno hidrat ili solvat proizvoda formule (1).

13. Farmaceutska kompozicija, naznačena time, što sadrži proizvod prema jednom od prethodnih zahteva, u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim eksipijensom.

14. Upotreba proizvoda prema jednom od zahteva 1 do 11, kao agensa za inhibiciju reakcije aktalizovane kinazom.

15. Upotreba proizvoda pema zahtevu 14, pri čemu je kinaza odabrana od FAK, KDR, Tie2, Aurora A, Aurora B i CDK2.

16. Upotreba prema zahtevu 15, pri čemu je kinaza odabrana od KDR i Tie2.

17. Upotreba proizvoda prema jednom od zahteva 1 do 11, za proizvodnju leka koji je koristan lečenje patoloških stanja.

18. Upotreba prema zahtevu 17, naznačena time, što je patološko stanje, rak.