RO127722B1 - Preparate farmaceutice, de tip apă de gură, pe bază de complecşi metalici ai clorhexidinei şi procedeu de obţinere a acestora - Google Patents

Description

Invenția se referă la preparate farmaceutice de tip apă de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei și la un procedeu de obținere a acestora. Preparatele farmaceutice de tip ape de gură cu acțiune la nivelul mucoasei orofaringiene sunt destinate domeniului sănătății umane și veterinare după caz, privind acțiunea dezinfectantă și antimicotică, putând fi utilizate pentru igiena cavității orofaringiene, având acțiune antimicrobiană, dezinfectantă.

în ultimii ani există o preocupare și o cerere crescută de realizare de agenți antimicrobieni frecvent comercializați, ca principali ingredienți activi alături de alcooli, iod, iodoform, hexaclorofen fiind și clorhexidină (CHX). CHX este activă împotriva bacteriilor Gram pozitive și mai puțin activă împotriva bacteriilor Gram negative, fungi, și specii de Proteus; are activitate numai împotriva unor tipuri de virusuri (hepatită, herpes simplex, HIV, citomegalovirus și virus respirator). CHX - activitate redusă împotriva micobacteriilorși nulă pentru endospori și chisturi ale protozoarelor. CHX acționează asupra: membranei celulare provocând distrugerea acesteia și pierderea materialului intracelular, inhibiția respiratorie și coag ul area ci topi as matică.

Clorhexidină (DCI) este o bază tare cu solubilitate redusă în apă. Pentru creșterea solubilității în apă, CHX formează săruri cu acizi: gluconic (CHX-digluconat 20 g/100 ml_, CHX-acetat 1,9 g/100 mL) [US 2006/0051385 A1J.

în ceea ce privește natura ionilor metalici utilizați drept centre de coordinare, un număr important de studii vizează complecși ai metalelor cu relevanță biologică semnificativă, cum sunt zincul, cuprul și argintul. Dintre acțiunile biologice specifice acestor ioni metalici, interesul maxim a fost suscitat de activitatea antimicrobiană și cicatrizantă a acestora [Bryan Greener, Antimicrobial biguanide metal complexes, J. Pharmaceutical Sciences, 69(2), 215-217, 2006], [Farrigton, K. L„, Morrow, L.E., Antimicrobial Metals: A Nonantibiotic Approach to Nosocomial Infections - Silver and copper may prove key în preventing a problem that kills nearly 88.000 per year, 2005, www.rxmed.com/monographs]. Este cunoscută combinația complexă a Ag(l) cu sulfodiazina, polimer de coordinatie în care ionul Ag⁺ este pentacoordinat, un agent antibacterian mult mai eficient comparativ cu ligandul liber, împotriva unor tulpini bacteriene, cum ar fi Pseudomonas aeruginosa și Staphylococcus aureus [US 20030035848 A1 /2003], [US 2002/0072480 A1J.

Preparatele farmaceutice de tip ape de gură cu activitate antimicrobiană, propuse în cadrul brevetului, destinate exercitării acțiunii dezinfectante a complecșilor metalici printr-un efect sinergie datorat reunirii acțiunii antibacteriene și antifungice a clorhexidinei și a derivaților săi cu cea a ionilor metalici Zn, Cu și Ag, concomitent cu creșterea eficacității terapeutice, se pot utiliza atât pentru igiena cavității orofaringiene cât și a suprafețelor și a instrum enta rului medical.

Capacitatea antibacteriană a ionilor de argint este corelată cu starea de oxidare și este dovedit faptul ca ionii de argintîn stări de oxidare II și III au o acțiune antibacteriană mai bună/mai eficientă și mai puternică decât Ag(l). Totuși, AgNO₃ și alti complecși, cum ar fi Ag(l)-sulfadiazina sunt agenți antibacterieni eficienți cu Ag(l). Un complex Ag(l Il)-CHX sub formă nanocristalină - sintetizat prin tehnica microemulsiei inverse - a prezentat activitate antibacteriană puternică pe bacterii Gram-pozitive (Enterococcus faecalis (ATCC 29212), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228), Propionibacterium acnes (ATCC 6919)) și Gram-negative (Acinetobacter calcoaceticus (ATCC 23055), Citrobacter freundii (ATCC 6750), Klebsiella pneumonia (ATCC 10031), și Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853)) și pe tulpini rezistente la meticilinăde Staphylococcus aureus. Concentrațiile inhibitorii minime (MIC) ale complexului Ag(lll)-CHX

RO 127722 Β1 au fost mult mai mici decât cele ale ligandului liber, (clorhexidina bază), AgNO₃ și Ag(l) - 1 sulfadiazina [Synthesis of Highly Antibacterial Nanocrystalline Trivalent Silver

Rolydiguanide, Sukdeb Pal, Eun Jeong Yoon, Yu Kyung Tak, Eung Chil Choi, and Joon 3

Myong Song, J. AM. CHEM. SOC. 2009,131,16147-16155].

Complecși ai clorhexidinei cu Ag(ll I) au fost obținuți sub formă de compoziții stabile 5 la temperatura ambiantă, compatibile cu materialele utilizate ca substrat în dispozitivele medicale, și au fost utilizate în tratamentul sau profilaxia infecțiilor microbiene (bacteriene) 7 [US WO 2007/000590 A1], [US 2006/0051385 A1 ].

Acțiunea antimicrobiană a unor astfel de complecși CHX-Ag(ll I) este superioară celei 9 a ligandului liber sau a ionului Ag(l) în compușii AgNO₃ sau Ag(l)-sulfadiazina, utilizați deja în tratamentul clinic al infecțiilor bacteriene. Articole destinate uzului medical (instrumentar 11 cu peliculă antiseptică, e.g. sonde de inhibare - evitarea infecțiilor nosocomiale, pansamente antimicrobienebioadezive) produse prin impregnarea cu CHX-Ag(l II) (prin imersare în soluția 13 de complex) sau prin acoperirea cu CHX-Ag(lll) pulbere pot fi păstrate perioade îndelungate (câțiva ani) la presiunea și temperatura ambiantă în ambalaje sterile tradiționale. CHX-Ag(l II) 15 dispersat prin amestecare mecanică în IntraSite Gel (Smith&Nephew Medical Ltd.) conduce la obținerea unui hidrogel stabil chimic cu acțiune antimicrobiană față de Staphylococcus 17 aureus (zona de inhibiție = 6,4 mm), Pseudomonas aeruginosa (zona de inhibiție = 5,4 mm) [US 2002/0072480 A1 ], [US WO 2007/000590 A1], 19

Complecși ai CHX cu Ag(l) și Ag(ll): [Ag(CHX)]⁺ și [Ag(CHX)]²⁺au prezentat activitate antibacteriană superioară și viteze letale mai mari în comparație cu clorhexidina și AgNO₃ 21 și pot reprezenta o nouă generație/clasă de agenți antibacterieni în tratamentul răni lor. Acești complecși [Ag(CHX)](NO₃) și [Ag(CHX)](NO₃)₂ au fost sintetizați prin precipitare din soluții 23 apoase neutre sau slab acide (H₂SO₄, 2N) de clorhexidină (CHX) și AgNO₃. Complexul [Ag(CHX)](NO₃)₂ cu Ag(ll) a fost obținut în 2 etape: oxidarea Ag(l) din soluția CHX:AgNO₃ 25 cu sodiu persulfat (Na₂S₂O₈), formarea complexului CHX;Ag(ll) [Metallopharmaceuticals based on silverfl) and silver(ll) polydiguanide complexes; activity against burn wound 27 pathogens, Pal S, Yoon EJ, Park SH, Choi EC, Song JM, J Antimicrob Chemother. 2010;65(10):2134-40], Activitatea antibacteriană a acestor complecși a fost stabilită prin 29 determinarea concentrațiilor MIC și MBC pe 4 bacterii Gram-pozitive și pe 4 bacterii Gramnegative: Acinetobacter calcoaceticus, Pseudomonas aeruginosa, Citrobacter freundii, 31 Staphylococcus epidermidis, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae. Concentrațiile MIC pentru complecșii [Ag(CHX)]⁺ și [Ag(CHX)]²⁺ au fost mult 33 mai scăzute decât cele ale clorhexidinei, AgNO₃ și complexului Ag-sulfadiazină. Vitezele letale/biocide? ale complecșilor [Ag(CHX)]⁺ și [Ag(CHX)]²⁺ pe bacteriile testate au fost de 2-8 35 ori mai mari decât cele corespunzătoare clorhexidinei sau AgNO₃ la concentrații egale cu MIC sau de 4 ori mai mari decât aceasta. 37 în studiile clinice, produsele de îngrijire orală (pasta de dinți, ape de gură) ce conțin amestecuri clorhexidină: Zn(ll) s-au dovedit mult mai eficiente în controlul formării plăcii 39 dentare, gingivitei și a compușilor cu sulf volatili din cavitatea bucală (i.e. respirație mirositoare, halenă) decât produsele care au în componență doar clorhexidină. 41

Apa de gură cu CHX este extensiv utilizată ca adjuvant în tratamentul periodontitei și există studii preliminare care arată că CHX inhibă numeroase activități glicozidice și 43 proteolitice ale bacteriilor orale, e.g. P. gingivalis [Inhibition of Porphyromonas gingivalis proteinases (gingipains) by chlorhexidine: synergistic effect ofZn(ll), C. A. Cronan, J. 45 Potempa, J. Travis, J. A. Mayo, Oral Microbiology Immunology 2006: 21: 212-217], Activitățile enzimelor răspunzătoare de durerea gingivală lys (Kgp) și arg (2 forme, RgpB și 47

RO 127722 Β1

HrgpA) au fost măsurate în prezența unor concentrații variabile de CHX și în prezența amestecului CHX:Zn. Constantele de inhibiție (Kj) au fost determinate în ambele cazuri. RgpB, HrgpA și Kgp au fost inhibate de clorhexidină cu Kj cu valori în domeniul micromolar. Pentru RgpB și HrgpA, efectele inhibitorii ale CHX au fost potentate de 30 de ori la adăugarea Zn(ll). Interacția CHX-Zn(ll) determină un efect sinergie în inhibarea HrgpA și RgpB. Pentru Kgp, efectele Zn(ll) și CHX în activitatea de inhibiție au fost antagonice.

Ionii de zinc și clorhexidină prezintă un efect inhibitoriu sinergie asupra creșterii in vitro a S. sobrinusși S. sanguis. Efectele asupra plăcii bacteriene au fost determinate pentru 8,0 mM, 0,44 mM CHXși a combinării celor două, mai eficientă combinația [E. Gîerstein, A. A. Scheie, G. Rolla, Scandinavian Journal of Dental Research, 1988, 96(6), 541-550],

Ionii de zinc, clorhexidină (CHX) și clorura de cetilpiridiniu sunt compuși cunoscuți pentru inhibarea compușilor volatili pe baza de S (VCS). Ionii de zinc la concentrația de 1% au un gust neplăcut, este de dorit să fie eficienți la concentrații mai mici.

CHX are gust neplăcut la 0,2%. Zn are cel mai bun efect anti-VCS în concentrația de 1%, 1 h, CHX are același efect la 0,2%, în 3 h [A. Young, G. Jonski, G. Rolla, European Journal of Oral Sciences, 2003,111(5), 400],

Cuprul este un metal de interes clinic, metal esențial în nutriția umană și are toxicitate redusă.

Clorhexidină și Cu²⁺, soluții de 1,1 mM au fost folosite în experimente vizând reducerea plăcii bacteriene. Clorhexidină, în concentrația 1,1 mM, este mai eficientă decât Cu²⁺ [S. M. Waler, G. Rolla, Scandinavian Journal of Dental Research, 1982,90(2), 131-133].

Complecși pe bază de CHX-I, se regăsesc în următoarele formulări: [GB 1128833/1966] și [PEP 1340490 B1/2003], colutoriu pe bază de clorhexidină, sub formă de soluție pentru igiena orală bazată pe clorhexidină și acid ascorbic, care nu are ca efect secundar pigmentarea dinților. La soluția de clorhexidină și acid ascorbic (cu rol de reducere a Fe³* la Fe²⁺, împiedicarea reacțiilor Maillard) se adaugă sodiu metabisulfit care are rolul de a stabiliza acidul ascorbic (împiedicarea oxidării acestuia) în soluție apoasă. Cu cifrat de sodiu pH-ul colutoriului este păstrat la valori: 5,7-6,3, domeniu în care activitatea clorhexidinei este maximă.

Alte patente ce conțin compuși pe bază de clorhexidină [WO 03/096999 A1], Formulări pentru mascarea gustului neplăcut (compoziția 1,4% wt. NaF, 4,3% wt. clorhexidină acetat, 14,3% aspartam, 74,0-74,3% celuloză microcristalină, 5,7% polioxietilenglicol 4000, 0,0-0,3% ulei de mentă; [WO 03/084461 A2], Formulări orale ce conțin clorhexidină sau săruri (digluconat, diacetat, diclorhidrat), sare de zinc, gluconat de zinc și agent de mascare/aromatizare - zaharină sau sare a zaharinei; [US 2005/0191247 A1], complecși ai clorhexidinei cu săruri de Cu²⁺ și Zn²⁺, sunt prezente în concentrații 1 %, 0,5%, 0,1%, cel puțin 0,01%.

în prezent se produc și se comercializează un număr însemnat de medicamente antiseptice care conțin ca substanță activă clorhexidină, administrate sub formă de soluții, ape de gură sau geluri, pentru uz extern, ca OTC [1], Agenda Medicală, Editura Medica, București, 2009, Memomed, Ediția 15, Editura Minesan și Editura Universitară, 2009, în:

1. Afecțiuni oro-dentare, protetică-ortodonție (Corsodyl Mint Mouthwash soluție SmithKline Beecham/Anglia; Corsodyl gel - SmithKline Beecham/Anglia; Klorhexidin Dental soluție - ACO; Plack out soluție - Santa/Grecia; Plack out gel - Santa/Grecia; Peridex Procter & Gambie Comp.; Dentosmin-P - Arzneimittelwerk/Germania; TrachisanEngelhard/Germania);

RO 127722 Β1

2. Afecțiuni cutanate, ginecologice și anfisepsia suprafețelor (Betagin - Biofarm 1

S.A./Romania; Chlorhexidine-Gifrer Barbezat/Franta; Chlorhexidine gluconat - Ferrosan;

Clorhexidin - Biofarm S.A./Romania; Clohexin-A, -B, -C- Pharma Labor/Romania; Desmanol - 3

Schulke Mayr/Germania; Hibiscrub - Zeneca LtdVAnglia; Hibitane - ICI-Zeneca/Anglia;

Septofort - Pharmavit). 5

Dezavantajele sau limitele clorhexidinei prezente ca principiu activ în actualele preparate farmaceutice comercializate sunt: 7

Transformarea liganduluiîntr-o formă hidrosolubilă. CHX (baza liberă) este insolubilă în apa și există doar la pH>12. CHX este folosită ca sare a unor acizi organici: CHX diacetat, 9 CHX diclorhidrat, CHX digluconat. Totuși, posibilitatea unor interactii nedorite a ionului metalic cu alte specii organice sau anorganice sau coprecipitarea face din aceste specii - 11 surse nu foarte potrivite de ligand CHX. întrucât valorile pKa pentru CHX (2,2 și 10,3) arată că CHX este diprotonată pe întreg domeniul de valori corespunzătoare pH-ului fiziologic, 13 solubilizarea acesteia se poate ușor realiza prin tratarea cu H₂SO₄ diluat și transformarea în CHX²⁺-2(HSO₄). 15

Limitările clorhexidinei prezente ca principiu activ în actualele forme farmaceutice comercializate constau în obținerea de forme farmaceutice lichide (ape de gură) care permit 17 o scădere a concentrației clorhexidinei la nivelul cavității orale prin diluare rapidă cu salivă, reacții adverse, limitarea activității antimicrobiene ca și durata efectului terapeutic. 19

Problema tehnică pe care o rezolvă invenția constă în prezentarea de preparate farmaceutice de tip apă de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei pentru igiena 21 cavității orofaringiene, având acțiune antimicrobiană, dezinfectantă și un procedeu de obținere a acestora. 23

Preparatele farmaceutice de tip apă de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei, conform invenției, înlătură dezavantajele de mai sus,prin aceea că sunt 25 constituite din 0,03...0,1% complecși metalici ai clorhexidinei, 0,1...0,5%, polioxietilen-20 sorbitan monooleat, 1...20% ulei de castor polioxil-40-hidrogenat, 20...80% glicerină, 27

10...50% alcool etilic, 0,05...0,10% ulei de mentă, 5...50% apă, procentele fiind în greutate.

Procedeul de obținere a preparatelor farmaceutice de tip geluri bioadezive pe bază 29 de complecși metalici ai clorhexidinei conform invenției, înlătură dezavantajele de mai sus prin aceea că se amestecă complecșii metalici ai clorhexidinei cu ulei de castor polioxil-40- 31 hidrogenat, respectiv poliOxietilen-20 sorbitan monooleat, prin triturare într-o patentulă și se încălzește pe baia de apă, separat se prepară o soluție prin dizolvarea cantităților 33 corespunzătoare de alcool concentrat, glicerină și apă și se aduce la aceeași temperatura că prima soluție prin încălzire pe baia de apă și se adaugă treptat și cu agitare continuă 35 peste amestecul obținut anterior, apoi se supun controlului calitativ, în care se determină proprietățile organoleptice, pH-ul și densitatea relativă, conform F. R. X, se condiționează în 37 flacoane de sticlă, pline, bine închise și se depozitează la loc răcoros, ferit de lumină.

Prin aplicarea invenției, se obțin următoarele avantaje: 39

- alegerea solventului-cosolvenți și a celorlalți excipienți din formulă, principiilor active complecșii Cu(ll) cu diacetat și diclorhidrat de clorhexidină, au permis obținerea de forme 41 farmaceutice lichide cu o viscozitate și densitate aparentă mai mare, ceea ce prelungește timpul de contact cu mucoasa bucală a substanței active, implicit durata acțiunii terapeutice; 43

- forma farmaceutică se încadrează în parametrii de calitate oficinali pentru apele de gură; 45

- complecșii metalici utilizați ca principii active au prezentat o acțiune antioxidantă și antimicrobiană superioară iiganzilor organici (clorhexidină) folosiți sau a sării metalice. 47

RO 127722 Β1

Prin asocierea clorhexidinei și a sărurilor acesteia, cu ioni metalici cu activitate farmacologică proprie (antibacteriană, antifungică, cicatrizantă, antiinflamatoare) în compuși cu proprietăți dezinfectante și antimicotice, se pot elimina problemele generate de utilizarea

CHX libere. Complecși metalici ai clorhexidinei ca agenți antimicrobieni au structura corespunzătoare formulei generale:

și formula chimică [M^aM^b(CHX)(R¹)2(R²)2]-X, în care

M^a și M^b sunt identici sau diferiți, și sunt aleși dintr-un grup constând dintre Cu, Zn și Ag; R¹ sunt fiecare CI sau împreună CH₃COO

R² este ales dintr-un grup constând dintre CH₃COO și CI sau absent;

X = este ales dintr-un grup constând dintre 2NO₃-2C₂H₅OH, 2CI, 2NO₃ și 2C₂H₅OH;

într-un prim aspect al invenției, preparatele farmaceutice de tip apă de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei cresc contactul contactului preparatului cu mucoasa bucală, respectiv cale topică, respectiv prelungirea acțiunii terapeutice, precum și posibilitatea folosirii de noi compuși neutilizați în terapeutică, activi in vitro la concentrații mai mici comparativ cu sărurile de clorhexidină folosite;

într-un alt aspect al invenției, preparatele farmaceutice de tip geluri bioadezive pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei elimină reacțiile adverse (dermatite iritante de contact -CHX liberă) și minimalizarea efectelor secundare (gingivite descuamative, decolorarea dinților și a limbii, alterarea gustului, alergii care pot conduce la șoc anafilactic).

într-un alt aspect al invenției , sunt descrise formulări/compoziții farmaceutice care să aibă o solubilitate în medii apoase superioară concentrației minime inhibitorii (MIC) a organismului tratat;

într-un alt aspect al invenției, este descrisă alegerea excipienților astfel încât să se evite formarea complecșilor insolubili CHX-excipient anionic;

într-un alt aspect al invenției, preparatele farmaceutice sunt stabile chimicîn domeniul de pH = 5,5-7, domeniul de eficacitate maximă al CHX;

într-un alt aspect al invenției, este descrisă evitarea contaminării produsului în procesul de sinteză - pentru păstrarea activității biologice nealterate.

Pentru obținerea apelor de gură s-au folosit ca substanțe active, complecși metalici pe bază de clorhexidină. Complecșii se prezintă ca pulberi de culoare violet până la violet închis care au o solubilitate scăzută în solvenții polari. Complexul metalic este parțial solubil în etanol și acetonă, solubil în dimetilsulfoxid la rece și parțial solubil în dimetilformamidă. Pentru obținerea apelor de gură a fost necesară creșterea gradului de solubilitate al complecșilor în solvenți polari prin hidrotropie și solubilizare micelară.

Compușii cu grupări puternic polare hidrofile, glicerina și sorbitolul, în molecula lor măresc solubilitatea substanțelor greu solubile prin hidrotropie, care se bazează pe activarea punților de hidrogen și pe scăderea tensiunii interfaciale.

RO 127722 Β1

Pentru aducerea în soluție a substanțelor active greu solubile în apă complecși 1 metalici ai clorhexidinei, s-a efectuate solubilizare micelară prin legături active la suprafață, care sunt capabile să transfere substanța activă în soluții apoase clare sau cel mult 3 opalescente, fără ca prin acest proces să se modifice structura chimică a substanței medicamentoase. Ca agenți de solubilizare se folosesc substanțe tensioactive bipolare. 5

Ca mediatori ai dizolvării pentru soluțiile studiate s-a utilizat ulei de castor polioxil 40hidrogenatși polioxietilen-20 sorbitan monooleat, capacitatea de solubilizare bazându-se pe 7 formarea spontană a agregatelor moleculare sau micelelor, stabile din punct de vedere termodinamic și protejate de reacțiile de degradare. 9

Alcoolii (glicerol, sorbitol, etanol) utilizați la preparare conform invenției, îmbunătățesc capacitatea de solubilizare a tensioactivilor încorporându-se peste punțile de hidrogen în 11 stratul palisadical micelelor și potențează tăria acestora, prin cosolubilizare.

Glicerolul este un alcool polihidric, obținut prin saponificarea grăsimilor, solvent polar 13 și hidrofil, miscibil în orice proporție cu apa și alcoolul. Puterea solubilizantă a glicerolului, lichid dens, siropos, crește prin încălzire, când viscozitatea scade. Nu trebuie depășită însă 15 temperatura de 130°C când se descompune formând acroleină. Este utilizat în brevetul de față ca și cosolvent. 17

Polioxietilen-20 sorbitan monooleat este un tensioactiv neionic constituit dintr-un amestec de monoesteri ai acidului oleic cu sorbitolul sau cu anhidridele acestuia (sorbitani), 19 copoiimerizați cu aproximativ 20 de molecule de oxid de etilen pentru fiecare moleculă de sorbitol sau sorbitan. Este un lichid vâscos, limpede, galben până la galben-brun, cu miros 21 slab caracteristic și gust slab amar urmat de o senzație de căldură. Diluat cu apă produce prin agitare o spumă abundentă. 23

Uleiul de mentă sau uleiul volatil de izmă bună este un ulei volatil obținut prin distilare cu vapori de apă din frunzele și vârfurile înflorite ale plantei Mentha piperita L. (fam. 25 Laibiatae). Este un lichid incolor sau galben-deschis până la galben-verzui, cu miros caracteristic de mentă și gust arzător, răcoritor, însă nu amar. Conține cel puțin 50,0% alcooli 27 totali exprimați în mentei (C₁₀H₂₀O) și cel puțin 4% esteri exprimați în acetat de metil (C₁₂H₂₂O₂). 29

Se amestecă principiul activ complexul metalic al clorhexidinei cu ulei de castor polioxil-40-hidrogenat, respectiv polioxietilen-20 sorbitan monooleat, prin triturare într-o 31 patentulă și se încălzește pe baia de apă.

Separat, se prepară o soluție prin dizolvarea în cantitățile corespunzătoare de alcool 33 concentrat, glicerina și apă. Soluția se aduce, prin încălzire pe baia de apă, la aceeași temperatură și se adaugă treptat și continuă agitare peste amestecul obținut anterior. 35

După preparare soluțiile obținute au fost supuse controlului calitativ, în care s-au determinat atât proprietățile organoleptice, pH-ul și densitatea relativă, conform F.R.X, s-au 37 condiționat în flacoane de sticlă, pline, bine închise și s-au depozitat la loc răcoros, ferit de lumină. 39 în continuare se prezintă 2 exemple nelimitative de realizare a invenției, în legătură cu tabelul 2 și cu figura care reprezintă schema tehnologică a procedeului de obținere a 41 preparatelor farmaceutice tip ape de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei.

Exemplul 1. Se amestecă 0,03 g complecși metalici ai clorhexidinei cu 1 g ulei de 43 castor polioxil-40-hidrogenat, respectiv 0,1 g polioxietilen-20-sorbitan monooleat, prin triturare într-o patentulă și se încălzește pe baia de apă la 50°C, separat se prepară o soluție 45 prin dizolvarea a 25 g alcool etilic 90%, 20 g glicerină și 5 g apă și se aduce la aceeași temperatură ca prima soluție prin încălzire pe baia de apă și se adaugă treptat și cu agitare 47 continuă peste amestecul obținut anterior, apoi se supun controlului calitativ, în care se

RO 127722 Β1 determină proprietățile organoleptice, pH-ul și densitatea relativă, conform F.R. X, se condiționează în flacoane de sticlă, pline, bine închise și se depozitează la loc răcoros, ferit de lumină.

Exemplul 2. Se amestecă 0,1 g complecși metalici ai clorhexidinei cu 10 g ulei de castor polioxil-40-hidrogenat, respectiv 0,5 g polioxietilen-20-sorbitan monooleat, prin triturare într-o patentulă și se încălzește pe baia de apă la 50°C, separat se prepară o soluție prin dizolvarea a 35 g alcool etilic 90%, 80 g glicerină și 35 g apă și se aduce la aceeași temperatură ca prima soluție prin încălzire pe baia de apă și se adaugă treptat și cu agitare continuă peste amestecul obținut anterior, apoi se supun controlului calitativ, în care se determină proprietățile organoleptice, pH-ul și densitatea relativă, conform F.R. X, se condiționează în flacoane de sticlă, pline, bine închise și se depozitează la loc răcoros, ferit de lumină.

Tabelul 1

Exemple nelimitative de realizare a invenției

Materiale componente	Exemplul 1 (g)	Exemplul 2 (g)
Complexul metalic diacetat de 1,1'-hexametilen-bis-[5-(4clorfenil)-biguanido]nitrat, cupru	0,03-0,1	-
complexul metallic diclorhidrat de bis 1,1'-hexametilen-bis-[5-(4clorfeni I) big u an idjcu pru	-	0,04-0,1
Polioxietilen-20 sorbitan monooleat	0,1-0,5	-
Ulei de castor polioxil-40-hidrogenat	1 - 10	10-20
Glicerină	20-80	20-50
Alcool etilic	25-35	10-50
Ulei de mentă	0,05-0,10	0,05-0,10
Apă	5-35	20-50

Se obțin preparate farmaceutice de tip ape de gură conform invenției, cu caracteristicile fizico -chimice din tabelul 2.

Tabelul 2

Caracteristici fizico - chimice ale preparatelor farmaceutice de tip ape de gură pe bază de complecși metalici ai clOrhexidinei

Caracteristica	Rezultate
Examen organoleptic	Soluții colorate, slab violet, limpede, cu miros caracteristic de ihentă
pH	5,00 - 6,00
Densitate relativă	1,1200-1, 300

Procedeul de obținere a apei de gură conform invenției, constă în următoarea schemă tehnologică prezentată în figură.

RO 127722 Β1 în urma studiului: efectuat privind activitatea antimicrobiană s-a observat că 1 preparatele farmaceutice de tip ape de gură care conțin complecși metalici ai clorhexidinei prezintă activitate antimicrobiană față de tulpinile microbiene Staphylococcus aureus 3 (diametrul de inhibiție 1-18 mm), Escherichia coli (diametrul de inhibiție 1-10 mm), Candida aibicans (diametrul de inhibiție 1-8 mm), mai ridicată comparativ cu liganzii organici și 5 combinațiile complexe din care au fost obținute.

Preparatele farmaceutice cu aplicare pe mucoasa orofaringiană pe bază de 7 complecși metalici ai clorhexidinei, condiționate sub formă de ape de gură au fost testate in vitro în culturi de fibroblaste. Aceste teste au rolul de a reduce numărul de animale pe care 9 se vor efectua experimentele in vivo prin stabilirea concentrației de la care produsele analizate nu mai prezintă efect citotoxic. Pentru testarea efectului compușilor studiați asupra 11 celulelor s-au analizat viabilitatea celulară (prin metoda cu MTT) și morfologia celulară. Citotoxicitatea a fost testată prin metoda extractului , luând în lucru mai multe concentrații ale 13 extractelor și mai multe grade de diluție ale produselor sub formă de soluție. Rezultatele obținute au demonstrat un pronunțat efect citotoxic al produselor în forma în care au fost 15 obținute, comparativ cu proba martor (cultura de celule). La diluții mai mici de 1,4 a produselor condiționate ca ape de gură nu s-au mai observat efecte de modificare a 17 morfologiei fibroblastelor, acestea având o viabilitate de peste 95% după 24 h de cultivare în prezenta respectivelor extracte. 19

Testarea activității antioxidante a preparatelor farmaceutice de tip ape de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei conform invenției, prin metoda chemiluminis- 21 centei , a evidențiat că acestea prezintă valori ale activității antioxidante în domeniul 50-95%, ceea ce le indică drept agenți antioxjdanți eficienți. 23

Claims (3)

1. Revendicări

   1. Preparate farmaceutice de tip apă de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei, caracterizate prin aceea că sunt constituite din 0,03L.0,1 % complecși metalici ai clorhexidinei, 0,1...0,5%, polioxietilen-20 sorbitan monooleat, 1...20% ulei de castor polioxil-40-hidrogenat, 20...80% glicerină, 10...50% alcool etilic, 0,05 ...0,10% ulei de mentă,

   5...50% apă, procentele fiind în greutate.
2. 2. Preparate farmaceutice de tip apă de gură, conform revendicării 1, caracterizate prin aceea că se prezintă sub formă de soluții limpezi, colorate în violet, cu un pH slab acid, densitate relativă mai mare ca a apei, topice de uz extern, prezintă activitate antimicrobiană și antioxidantă, având acțiune dezinfectantă și antimicotică, sunt biocompatibile, au toxicitate redusă sau neglijabilă și nu sunt factori poluanți ai mediului.
3. 3. Procedeu de obținere a preparatelor farmaceutice de tip apă de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei, definite în revendicarea 1, caracterizat prin aceea că se amestecă complecșii metalici ai clorhexidinei cu ulei de castor polioxil-40-hidrogenat, respectiv polioxietilen-20 sorbitan monooleat, prin triturare într-o patentulă și se încălzește pe baia de apă, separat se prepară o soluție prin dizolvarea cantităților corespunzătoare de alcool concentrat, glicerină și apă, și se aduce la aceeași temperatură ca prima soluție prin încălzire pe baia de apă și se adaugă treptat și cu agitare continuă peste amestecul obținut anterior, apoi se supun controlului calitativ, în care se determină proprietățile organoleptice, pH-ul și densitatea relativă, conform F.R. X, se condiționează în flacoane de sticlă, pline, bine închise și se depozitează la loc răcoros, ferit de lumină.