RO127722A2 - Preparate farmaceutice, de tip ape de gură, pe bază de complecşi metalici ai clorhexidinei şi procedeu de obţinere a acestora - Google Patents

Abstract

Invenţia se referă la un preparat farmaceutic, tip apă de gură şi la un procedeu de obţinere a acestuia. Preparatul conform invenţiei cuprinde 0,03...0,1% complecşi metalici ai ciclohexidinei şi substanţe auxiliare, constând din polioxietilen-20 sorbitan monooleat, ulei de ricin polioxil-40 hidrogenat, glicerină, alcool etilic, ulei de mentă şi apă, care se prezintă sub formă de soluţii limpezi, de culoare violet, cuH slab acid şi densitate relativă mai mare decât a apei. Procedeul conform invenţiei constă din cântărirea materiilor prime şi amestecarea, triturarea, dizolvarea la cald, completarea la masă, controlul şi condiţionarea produsului finit.

Description

Invenția de față se referă la preparate farmaceutice de tip ape de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei și la un procedeu de obținere a acestora. Preparatele farmaceutice de tip ape de gură cu acțiune la nivelul mucoasei orofaringiene sunt destinate domeniului sănătății umane și veterinare după caz, privind acțiunea dezinfectantă și antimicotică, putând fi utilizate pentru igiena cavității orofaringiene, având acțiune antimicrobiană, dezinfectantă.

în ultimii ani există o preocupare și o cerere crescută de realizare de agenți antimicrobieni frecvent comercializați, ca principali ingredienti activi alaturi de alcooli, iod, iodoform, hexaclorofen fiind si clorhexidina (CHX). CHX este activa împotriva bacteriilor Gram pozitive si mai puțin activa împotriva bacteriilor Gram negative, fungi, si specii de Proteus; are activitate numai împotriva unor tipuri de virusuri (hepatita, herpes simplex, HIV, citomegalovirus si virus respirator). CHX - activitate redusa împotriva micobacteriilor si nula pentru endospori si chisturi ale protozoarelor. CHX actioneaza asupra: membranei celulare provocând distrugerea acesteia si pierderea materialului intracelular, inhibiția respiratorie si coagularea citoplasmatica.

Clorhexidina (DCI) este o baza tare cu solubilitate redusa in apa. Pentru creșterea solubilitatii in apa, CHX formează săruri cu acizi: gluconic (CHX-digluconat 20g/100 mL, CHX-acetat 1.9 g/100 mL) [US 2006/0051385 Al].

In ceea ce privește natura ionilor metalici utilizați drept centre de coordinare, un număr important de studii vizeaza complecși ai metalelor cu relevanta biologica semnificativa, cum sunt zincul, cuprul si argintul. Dintre acțiunile biologice specifice acestor ioni metalici, interesul maxim a fost suscitat de activitatea antimicrobiana si cicatrizanta a acestora [Bryan Greener, Antimicrobial biguanide metal complexes, J. Pharmaceutical Sciences, 69(2), 215-217, 2006], [Farrigton, K. L., Morrow, L.E., Antimicrobial Metals: A Nonantibiotic Approach to Nosocomial Infections - Silver and copper may prove key in preventing a problem that kills nearly 88.000 per year, 2005, www.rxmed.com/monographs]. Este cunoscută combinația complexă a Ag(I) cu sulfodiazina, polimer de coordinație în care ionul Ag⁺ este pentacoordinat, un agent antibacterian mult mai eficient comparativ cu ligandul liber, împotriva unor tulpini bacteriene, cum ar fi Pseudomonas aeruginosa si Staphylococcus aureus [US 20030035848 Al/2003], [US 2002/0072480 Al].

Preparatele farmaceutice de tip ape de gură cu activitate antimicrobiana, propuse in cadrul brevetului, destinate exercitării acțiunii dezinfectante a complecșilor metalici printr-un efect sinergie datorat reunirii acțiunii antibacteriene si antifungice a clorhexidinei si a derivatilor sai cu cea a ionilor metalici Zn, Cu si Ag, concomitent cu creșterea eficacității terapeutice, se pot utiliza atat pentru igienizarea cavității orofaringiene cât și a suprafețelor si a instrumentarului medical.

Capacitatea antibacteriana a ionilor de argint este corelata cu starea de oxidare si este dovedit faptul ca ionii de argint in stări de oxidare II si III au o acțiune antibacteriana mai buna/mai eficienta si mai puternica decât Ag(I). Totuși, AgNCh si alti complecși, cum ar fi Ag(I)-sulfadiazina sunt agenți antibacterieni eficienți cu Ag(I). Un complex Ag(III)-CHX sub forma nanocristalina - sintetizat prin tehnica microemulsiei inverse- a prezentat activitate antibacteriana puternica pe bacterii Gram-pozitive (Enterococcus faecalis (ATCC 29212), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228), Propionibacterium acnes (ATCC 6919)) si Gram-negative (Acinetobacter calcoaceticus (ATCC 23055), Citrobacter freundii (ATCC 6750), Klebsiella pneumonia (ATCC 10031), si Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853)) si pe tulpini rezistente la meticilina de Staphylococcus aureus. Concentrațiile inhibitorii minime (MIC) ale complexului Ag(III)-CHX au fost mult mai mici de [Synthesis of Higl Eun Jeong Yoon, 2009,131, 16147cat cele ale ligandului liber, (clorhexidina baza), AgNCh si AgCîfc hly Antibacterial Nanocry stal line Trivalent Silver Polydigu Yu Kyung Tak, Eung Chil Cboi, and Jtoeun Myong Song, Jjftț 16155].

r2 9 -Π- ZUW

Complecși ai clorhexidinei cu Ag(III) au fost obținuți sub forma de compoziții stabile la temperatura ambianta, compatibile cu materialele utilizate ca substrat in dispozitivele medicale, si au fost utilizate in tratamentul sau profilaxia infecțiilor microbiene (bacteriene) [US WO 2007/000590

Al], [US 2006/0051385 Al]

Acțiunea antimicrobiana a unor astfel de complecși CHX-Ag(III) este superioara celei a ligandului .liber sau a ionului Ag(I) in compușii AgNOț sau Ag(I)-sulfadiazina, utilizați deja in tratamentul clinic al infecțiilor bacteriene. Articole destinate uzului medical (instrumentar cu pelicula antiseptica, e.g. sonde de intubare - evitarea infecțiilor nosocomiale, pansamente antimicrobiene bioadezive) produse prin impregnarea cu CHX-Ag(III) (prin imersare in soluția de complex) sau prin acoperirea cu CHX-Ag(III) pulbere pot fi păstrate perioade îndelungate (cativa ani) la presiunea si temperatura ambianta in ambalaje sterile tradiționale. CHX-Ag(III) dispersat prin amestecare mecanica in IntraSite Gel (Smith&Nephew Medical Ltd.) conduce la obținerea unui hidrogel stabil chimic cu acțiune antimicrobiana fata de Staphylococcus aureus (zona de inhibitie=6.4 mm), Pseudomonas aeruginosa (zona de inhibitie=5.4 mm) [US 2002/0072480 Al], [US WO 2007/000590 Al],

Complecși ai CHX cu Ag(I) si Ag(II): [Ag(CHX)]⁺ si [Ag(CHX)]²⁺ au prezentat activitate antibacteriana superioara si viteze letale mai mari in comparație cu clorhexidină si AgNOî si pot reprezenta o noua generatie/clasa de agenti antibacterieni in tratamentul rănilor. Acești complecși [Ag(CHX)](NOs) si [Ag(CHX)](NOj)2 au fost sintetizați prin precipitare din soluții apoase neutre sau slab acide (H2SO4, 2N) de clorhexidină (CHX) si AgNOi Complexul [Ag(CHX)](NO3)2 cu Ag(II) a fost obtinut in 2 etape: oxidarea Ag(I) din soluția CHX:AgNO3 cu sodiu persulfat (Na2S2Os), formarea complexului CHXAg(II) [Metallopharmaceuticals based on silver(l) and silver(II) polydiguanide complexes: activity against bum wound pathogens, Pal S, Yoon EJ, Park SH, Choi EC, Song JM, J Antimicrob Chemother. 2010;65(10):2134-40|. Activitatea antibacteriana a acestor complecși a fost stabilita prin determinarea concentrațiilor MIC si MBC pe 4 bacterii Gram-pozitive si pe 4 bacterii Gram-negative: Acinetobacter calcoaceticus, Pseudomonas aeruginosa, Citrobacter freundii, Staphylococcus epidermidis, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae. Concentrațiile MIC pentru complecșii [Ag(CHX)]⁺ si [Ag(CHX)]²⁺ au fost mult mai scăzute decât cele ale clorhexidinei, AgNOț si complexului Ag-sulfadiazina. Vitezele letale/biocide ale complecșilor [Ag(CHX)]⁺ si [Ag(CHX)]²⁺ pe bacteriile testate au fost de 2-8 ori mai mari decât cele corespunzătoare clorhexidinei sau AgNC>3 la concentrații egale cu MIC sau de 4 ori mai mari decât aceasta.

In studiile clinice, produsele de îngrijire orala (pasta de dinți, ape de gura) ce conțin amestecuri clorhexidină: Zn(II) s-au dovedit mult mai eficienți in controlul formarii plăcii dentare, gingivitei si a compușilor cu sulf volatili din cavitatea bucala (i.e. respirație mirositoare, halena) decât produsele care au in componenta doar clorhexidină.

Apa de gura cu CHX este extensiv utilizata ca adjuvant in tratamentul periodontitei si exista studii preliminare care arata ca CHX inhiba numeroase activitati glicozidice si proteolitice ale bacteriilor orale, e.g. P.gingivalis [Inhibition of Porphyromonas gingivalis proteinases (gingipains) by chlorhexidine: synergistic effect of Zn(II), C. A. Cronan, J. Potempa, J. Travis, J. A. Mayo, Oral Microbiology Immunology 2006: 21: 212-217], Activitățile enzimelor răspunzătoare de durerea gingivala lys (Kgp) si arg (2 forme, RgpB si HrgpA) au fost măsurate in prezenta unor concentrații variabile de CHX si in prezenta amestecului CHX:Zn. Constantele de inhibiție (Kj) au fost determinate in ambele cazuri. RgpB, HrgpA si Kgp au fost inhibate de clorhexidină cu K cu valori in domeniul micromolar. Pentru RgpB si HrgpA, efectele inhibitorii ale CHX au fost potentate de 30 de ori la adaugarea Zn(II). Interactia CHX-Zn(II) determina un efect sinergie in inhibarea HrgpA si RgpB. Pentru Kgp, efectele Zn(II) si CHX in activitatea de inhibiție au fost antagonice

Ionii de zinc si clorhexidină prezintă un efect inhibitoriu sinergie asupra creste sobrinus si S. sanguis. Efectele asupra plăcii bacteriene au fost determinate pentru 8. CHX si a combinării celor doua, mai eficienta combinația (E. Gierstein, A. A. S Scandinavian Journal of P«iitSÎ7Resfca.rch, 1988,96(6), 54U550].

^ERE%^

C\-2 Ο 1 Ο - Ο ? ζ 2 - 2 9 -11- 2CW

CHX si a combinării celor doua, mai eficienta combinația [E. Gierstein. A. A. Scheie, G. Rolla. Scandinavian Joumal of Dental Research, 1988, 96(6), 541-550.].

Ionii de zinc, clorhexidina (CHX) si clorura de cetilpiridiniu sunt compuși cunoscut! pentru inhibarea compușilor volatili pe baza de S (VCS). Ionii de zinc la concentrația de 1% au un gust neplăcut, este de dorit sa fie eficienți la concentrații mai mici.

CHX are gust neplăcut la 0.2%. Zn are cel mai bun efect anti-VCS in concentrația de 1%, lh, CHX are același efect la 0.2%, in 3h [A. Young, G. Jonski, G. Rolla, European Joumal of Oral Sciences, 2003,111(5), 400.].

Cuprul este un metal de interes clinic, metal esențial in nutriția umana si are toxicitate redusa.

Clorhexidina si Cu²⁺, soluții de 1.1 mM au fost folosite in experimente vizând reducerea plăcii bacteriene. Clorhexidina, in concentrația 1.1 mM, este mai eficienta decât Cu²⁺ [S. M. Waler, G. Rolla, Scandinavian Journal of Dental Research, 1982, 90(2), 131-133].

Complecși pe bază de CHX-I, se regăsesc în următoarele formulări: (GB1128833/1966] și [PEP1340490B1/2003], colutoriu pe baza de clorhexidină, sub formă de soluție pentru igiena orala bazata pe clorhexidina si acid ascorbic, care nu are ca efect secundar pigmentarea dinților. La soluția de clorhexidina si acid ascorbic (cu rol de reducere a Fe³⁺ la Fe²⁺, împiedicarea reacțiilor Maillard) se adauga sodiu metabisulfit care are rolul de a stabiliza acidul ascorbic (împiedicarea oxidarii acestuia) in soluție apoasa. Cu citrat de sodiu /?H-ul colutoriului este pastrat la valori: 5.7-6.3, domeniu in care activitatea clorhexidinei este maxima

Alte patente ce conțin compuși pe bază de clorhexidină [WO 03/096999 Al], Formulări pentru mascarea gustului neplăcut (compoziția 1.4% wt. NaF, 4.3% wt. clorhexidina acetat, 14.3% aspartam, 74.0-74.3% celuloza microcristalină, 5.7% polioxietilenglicol 4000, 0.0-0.3% ulei de menta; [WO 03/084461 A2], Formulări orale ce conțin clorhexidina sau săruri (digluconat, diacetat, diclorhidrat), sare de zinc, gluconat de zinc și agent de mascare/aromatizare - zaharina sau sare a zaharinei; [US 2005/0191247 Al], complecși ai clorhexidinei cu săruri de Cu²⁺și Zn²⁺, sunt prezente in concentrații 1%, 0.5%, 0.1%, cel puțin 0.01%.

In prezent se produc si se comercializează un număr însemnat de medicamente antiseptice care conțin ca substanța activa clorhexidina, administrate sub forma de soluții, ape de gura sau geluri, pentru uz extern, ca OTC [1], Agenda Medicala. Editura Medica, București, 2009, Memomed, Ediția 15, Editura Minesan si Editura Universitara, 2009, in.

1. Afecțiuni oro-dentare, protetica-ortodontie (Corsodyl Mint Mouthwash soluție - SmithKline Beecham/Anglia; Corsodyl gel - SmithKline Beecham/Anglia; Klorhexidin Dental soluție - ACO; Plack out soluție -Santa/Grecia; Plack out gel - Santa/Grecia; Peridex - Procter & Gambie Comp.; Dentosmin-P- Arzneimittelwerk/Germania; Trachisan- Engelhard/Germania)

2. Afecțiuni cutanate, ginecologice si antisepsia suprafețelor (Betagin - Biofarm S.A./Romania; Chlorhexidine-Gifrer Barbezat/Franta; Chlorhexidine gluconat - Ferrosan; Clorhexidin -Biofarm

S.A./Romania; Clohexin-A, -B, -C- Pharma Labor/Romania; Desmanol- Schulke Mayr/Germania; Hibiscrub - Zeneca Ltd./Anglia; Hibitane - ICI-Zeneca/Anglia; Septofort - Pharmavit)

Dezavantajele sau limitele clorhexidinei prezente ca principiu activ in actualele preparate farmaceutice comercializate:

Transformarea ligandului intr-o forma hidrosolubila. CHX (baza libera) este insolubila in apa si exista doar la/>H>12. CHX este folosita ca sare a unor acizi organici: CHX diacetat, CHX diclorhidrat, CHX digluconat. Totuși, posibilitatea unor interactii nedorite a ionului metalic cu alte specii organice sau anorganice sau coprecipitarea face din aceste specii - surse nu foarte potrivite de li întrucât valorile pKa pentru CHX (2.2 si 10.3) arata ca CHX este diprotonata pe intr valori corespunzătoare //H-ului fiziologic., solubilizarea acesteia se poate ușor reali H2SO4 diluat si transformarea in CHX²⁺-2(HSO4').

Limitările clorhexidinei prezente ca principiu activ in actualele fi

HX comercializate, constau în farinhc^tîcglichide (a

(\-ι.: ’ c - ?'; 2 2

9 -IV Zllli

a concentrației clorhexidinei la nivelul cavității orale prin diluare rapidă cu saliva, reacții adverse, limitarea activității antimicrobiene ca și durata efectului terapeutic

Problema tehnica pe care o rezolva invenția si ce dezavantaje' înlătură invenția:

Prin asocierea clorhexidinei si a sărurilor acesteia, cu ioni metalici cu activitate farmacologica proprie (antibacteriana, antifiingica, cicatrizanta, antiinflamatoare) in compuși cu proprietăți dezinfectante și antimicotice, se pot elimina problemele generate de utilizarea CHX libere.

Invenția rezolvă următoarele probleme biofarmaceutice si anume:

- creșterea contactului preparatului cu mucoasa bucală, respectiv cale topică, respectiv prelungirea acțiunii terapeutice, precum și posibilitatea folosirii de noi compuși neutilizați în terapeutică, activi in vitro la concentrații mai mici comparativ cu sărurile de clorhexidină folosite

- eliminarea reacțiilor adverse (dermatite iritante de contact -CHX libera) si minimalizarea efectelor secundare (gingivite descuamative, decolorarea dinților si a limbii, alterarea gustului, alergii care pot conduce la soc anafilactic)

- gasirea unei formulari/compozitii farmaceutice care sa aiba o solubilitate in medii apoase superioara concentrației minime inhibitorii (MIC) a organismului tratat

- alegerea excipientilor astfel incat sa se evite formarea complecșilor insolubili de tip, CHX-excipient anionic

-preparate farmaceutice stabile chimic in domeniul de pH = 5.5-7, domeniul de eficacitate maxima al CHX

- evitarea contaminării produsului in procesul de sinteza - pentru pastrarea activitatii biologice nealterate

Procedeul de obținere a preparatelor farmaceutice de tip ape de gură pe baza de complecși metalici ai clorhexidinei conform invenției, prezintă următoarele avantaje:

- alegerea solventului-cosolvenți și a celorlalți excipienți din formulă, principiilor active complecșii Cu(II) cu diacetat și diclorhidrat de clorhexidină, au permis obținerea de: forme farmaceutice lichide cu o vâscozitate și densitate aparentă mai mare, ceea ce prelungește timpul de contact cu mucoasa bucală a substanței active, implicit durata acțiunii terapeutice

- forma farmaceutică se încadrează în parametrii de calitate oficinali pentru apele de gură

- complecșii metalici utilizați ca principii active, au prezentat o acțiune antioxidantă și antimicrobiană superioară liganzilor organici (clorhexidină) folosiți sau a sării metalice.

Pentru obținerea apelor de gură s-au folosit ca substanțe active, complecși metalici pe bază de clorhexidină. Complecșii se prezintă ca pulberi de culoare violet până la violet - închis care au o solubilitate scăzută în solvenții polari. Complexul metalic este parțiali solubil în etanol si acetonă, solubil in dimetilsulfoxid la rece și parțial solubil în dimetilformamidă. Pentru obținerea apelor de gură a fost necesară creșterea gradului de solubilitate al complecșilor în solvenți polari prin hidrotropie și solubilizare micelară.

Compușii cu grupări puternic polare hidrofile, glicerina și sorbitolul, în molecula lor măresc solubilitatea substanțelor greu solubile prin hidrotropie, care se bazează pe activarea punților de hidrogen și pe scăderea tensiunii interfaciale.

Pentru aducerea în soluție a substanțelor active greu solubile în apă complecși metalici ai clorhexidinei, s-a efectuat o solubilizare micelară prin legături active la suprafață, care sunt capabile să transfere substanța activă în soluții apoase clare sau cel mult opalescente, iară ca prin acest proces să se modifice structura chimică a substanței medicamentoase. Ca agenți de solubilizare se folosesc substanțe tensioactive bipolare.

Ca mediatori ai dizolvării pentru soluțiile studiate s-a utilizat ulei de castor p hidrogenat și polioxietilen-20 sorbitan monooleat, capacitatea de solubilizare bazându-s

(Λ-2 9 1 Ο - Ο 1 2 2 2 - 2 9 -11- 2010

Alcoolii (glicerol, sorbitol, etanol) utilizați la preparare conform invenției, îmbunătățesc capacitatea de solubilizare a tensioactivilor încorporându-se peste punțile de hidrogen în stratul palisadic al micelelor și potențează tăria acestora, prin cosolubilizare.

Glicerolul este un alcool polihidric, obținut prin saponificarea grăsimilor, solvent polar și hidrofil, miscibil în orice proporție cu apa și alcoolul. Puterea solubilizantă a glicerolului, lichid dens, siropos, crește prin încălzire, când vâscozitatea scade. Nu trebuie depășită însă temperatura de 130°C când se descompune formând acroleină. Este utilizat în brevetul de față ca și cosolvent.

Polioxietilen-20 sorbitan monooleat este un tensioactiv neionic constituit dintr-un amestec de monoesteri ai acidului oleic cu sorbitolul sau cu anhidridele acestuia (sorbitani), copoiimerizați cu aproximativ 20 de molecule de oxid de etilen pentru fiecare moleculă de sorbitol sau sorbitan. Este un lichid vâscos, limpede, galben până la galben-brun, cu miros slab caracteristic și gust slab amar urmat de o senzație de căldură. Diluat cu apă produce prin agitare o spumă abundentă.

Uleiul de mentă sau uleiul volatil de izmă bună este un ulei volatil obținut prin distilare cu vapori de apă din frunzele și vârfurile înflorite ale plantei Mentha piperita L. (fam. l.abiatae) Este un lichid incolor sau galben-deschis până la galben-verzui, cu miros caracteristic de mentă și gust arzător, răcoritor, însă nu amar. Conține cel puțin 50,0% alcooli totali exprimați în mentol (C10H20O) și cel puțin 4% esteri exprimați în acetat de metil (C12H22O2).

Se amestecă principiul activ complexul metalic al clorhexidinei cu ulei de castor polioxil-40hidrogenat, respectiv polioxietilen-20 sorbitan monooleat, prin triturare într-o patentulă și se încălzește pe baia de apă.

Separat, se prepară o soluție prin dizolvarea în cantitățile corespunzătoare de alcool concentrat, glicerină și apă. Soluția se aduce, prin încălzire pe baia de apă, la aceeași temperatură și se adaugă treptat și continuă agitare peste amestecul obținut anterior.

După preparare soluțiile obținute au fost supuse controlului calitativ, în care s-au determinat atât proprietățile organoleptice, /?H-ul și densitatea relativă, conform F.R.X, s-au condiționat în flacoane de sticlă, pline, bine închise și s-au depozitat la loc răcoros, ferit de lumină.

Se dau 2 exemple nelimitative de realizare a invenției, în legătură cu Tabelul nr. 1 și cu Figura nr. 1, care reprezintă schema tehnologică a procedeului de obținere a apelor de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei.

Tabel nr. 1. Exemple nelimitative de realizare a invenției

Materiale componente	Exemplul Kg)	Exemplul 2(g)
complexul metalic diacetatde l,l’-hexamelilen-bis-[5-(4clorfenil)- biguanido] nitrat, cupru	0,03-0,1
complexul metallic diclorhidrat de bis 1,1’- hexametilen-bis-|5-(4clorfenil) biguanid] cupru		0,04-0,1
Polioxietilen-20 sorbitan monooleat	0,1-0,5	-
Ulei de castor polioxil-40-hidrogenat	1 - 10	10-20
Glicerină	20-80	20-50
Alcool etilic	25-35	10-50
Ulei de mentă	0,05-0,10	0,05-0.10
Apă	5 - 35	20-50

Se obțin preparate farmaceutice de tip ape de gură conform invenției, cu caracteristicile fizico -

v

0<ΐ Μ C - Ο ‘ 1 Ί1 - <9 -ii- <ο ο

Tabel nr. 2. Caracteristici fizico - chimice ale preparatelor farmaceutice de tip ape de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei

Caracteristica	Rezultate
Examen organoleptic	Soluții colorate, slab violet, limpede, cu miros caracteristic de mentă
PH	5,00 - 6,00
Densitate relativă	1,1200- 1, 300

Procedeul de obținere a apei de gură conform tehnologică prezentată în Figura nr. 1.

invenției, constă în următoarea schemă

(\-2010-01222-2 9 -îi- 2010 în urma studiului efectuat privind activitatea antimicrobiană s-a observat că preparatele farmaceutice de tip ape de gură care conțin complecși metalici ai clorhexidinei prezintă activitate antimicrobiană față de tulpinile microbiene Staphylococcus aureus (diametrul de inhibiție 1-18 mm), Escherichia coli (diametrul de inhibiție 1-10 mm), Candida albicans (diametrul de inhibiție 1-8 mm), mai ridicată comparativ cu liganzii organici și combinațiile complexe din care au fost obținute.

Preparatele farmaceutice cu aplicare pe mucoasa orofaringiană pe baza de complecși metalici ai clorhexidinei, condiționate sub forma de ape de gură au fost testate in vitro in culturi de fibroblaste. Aceste teste au rolul de a reduce numărul de animale pe care se vor efectua experimentele in vivo prin stabilirea concentrației de la care produsele analizate nu mai prezintă efect citotoxic. Pentru testarea efectului compușilor studiati asupra celulelor s-au analizat viabilitatea celulara (prin metoda cu MTT) si morfologia celulara. Citotoxicitatea a fost testata prin metoda extractului, luând in lucru mai multe concentrații ale extractelor si mai multe grade de dilutie ale produselor sub forma de soluție. Rezultatele obținute au demonstrat un pronunțat efect citotoxic al produselor in forma in care au fost obținute, comparativ cu proba martor (cultura de celule). La dilutii mai mici de 1:4 a produselor condiționate ca ape de gură nu s-au mai observat efecte de modificare a morfologiei fibroblastelor, acestea avand o viabilitate de peste 95% după 24 ore de cultivare in prezenta respectivelor extracte.

Testarea activitatii antioxidante a preparatelor farmaceutice de tip ape de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei conform invenției, prin metoda chemiluminiscentei, a evidențiat că acestea prezintă valori ale activității antioxidante in domeniul 50-95%, ceea ce le indică drept agenți antioxidanți eficienți.

Claims (3)

1. Revendicări

   1. Preparate farmaceutice de tip ape de gură pe baza de complecși metalici ai clorhexidinei caracterizate prin aceea câ sunt constituite din principiul activ complecși metalici ai clorhexidinei în proporții cuprinse între 0,03% - 0,1%, și substanțe auxiliare în proporții cuprinse între (0,1 - 0,5%, polioxietilen-20 sorbitan monooleat, ulei de castor polioxil-40hidrogenat (1 - 20%), glicerină (20 - 80%), alcool etilic (10 - 50%), ulei de mentă (0,05 0,10%), apă (5 - 50%), procentele fiind în greutate.
2. 2. Preparate farmaceutice de tip ape de gură pe bază de complecși metalici ai clorhexidinei conform Revendicării 1, caracterizate prin aceea că se prezintă sub formă de soluții limpezi, colorate în violet, cu un pH slab acid, densitate relativă mai mare ca a apei.
3. 3. Procedeul de obținere a preparatelor farmaceutice de tip ape de gură pe baza de complecși metalici ai clorhexidinei de la Revendicarea 1 caracterizat prin aceea că se amestecă principiul activ complecși metalici ai clorhexidinei cu ulei de castor polioxil-40-hidrogenat, respectiv polioxietilen-20 sorbitan monooleat, prin triturare într-o patentulă și se încălzește pe baia de apă. Separat, se prepară o soluție prin dizolvarea în cantitățile corespunzătoare de alcool concentrat, glicerină și apă. Soluția se aduce, prin încălzire pe baia de apă, la aceeași temperatură și se adaugă treptat și continuă agitare peste amestecul obținut anterior, apoi se supun controlului calitativ, în care se determină proprietățile organoleptice, pH-ul și densitatea relativă, conform F.R. X, se condiționează în flacoane de sticlă, pline, bine închise și se depozitează la loc răcoros, ferit de lumină. Preparatele farmaceutice conform invenției, topice de uz extern, prezintă activitate antimicrobiană și antioxidantă, având acțiune dezinfectantă și antimicotică, sunt biocompatibile, au toxicitate redusă sau neglijabilă și nu sunt factori poluanți ai mediului.