PT99412A

PT99412A - Processo de preparacao de indolizino{1,2-b}quinolinonas substituidas e de composicoes farmaceuticas que as contem

Info

Publication number: PT99412A
Application number: PT99412A
Authority: PT
Inventors: William Dennis Kingsbury; Hameed Sheik Allaudeen; David Alan Berges; Robert Philip Hertzberg; Randall Keith Johnson; Stephen Robert Petteway Jr
Original assignee: Smithkline Beecham Corp
Priority date: 1990-10-31
Filing date: 1991-10-31
Publication date: 1992-10-30
Also published as: JPH06502642A; WO1992007856A1; AU8940491A; KR930702289A; IE913790A1; EP0555347A1; EP0555347A4; NZ240406A; CA2095219A1

Description

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Este pedido é uma continuação em parte do Pedido U.S. na de série 07/606,216, depositado a 31 de Outubro de 1990. Âmbito do Invento

Este invento refere-se ao processo de preparação de certos derivados indolizino[l,2-b]-quinolinilo que possuem actividade anti-viral e de suas composições farmacêuticas.

Antecedentes

Sabe-se que alguns lH-pirano[3',4':6,7]indolizino[1,2--b]quinolinonas possuem actividade citotóxica e anti-viral. A camptotecina é um exemplo destes compostos. É um alcaloide citotóxico, insolúvel em água produzido por árvores Camptotheca acuminata indígenas da China e por árvores Nothapodvtes foetida indígenas da índia. A camptotecina e alguns congéneres próximos são a única classe de compostos que se sabe inibir a topoisomerase I eucariótica. De facto, a actividade citotóxica e antitumoral da camptotecina e dos seus congéneres próximos resulta da inibição da topoisomerase I eucariótica (Câncer Res. 1988, 48, 1722? Molec. Pharmacol. 1988, 34, 755). Os compostos que estão relacionados, em estrutura, com a camptotecina mas que não inibem a topoisomerase I eucariótica não são citotóxicos para as células de mamífero e não possuem actividade antitumoral (J. Med. Chem. 1988, 32, 715; Câncer Res. 1989, 49, 1465? Câncer Res. 1989, 49, 4358). Vários investigadores têm mostrado que a camptotecina possui actividade antiviral. Contudo, embora a camptotecina tenha demonstrado actividade antiviral em sistemas de cultura de tecido in vitro. a camptotecina e os seus análogos próximos que têm uma porção hidroxilactona no anel E não podem ser considerados como agentes antivirais úteis in vivo visto que inibem, indesejavelmente, a topoisomerase I de mamífero, bem como a replicação de ADN de células hospedeiras e que são citotóxicos 73 308 14539-1 -3-

para as células de mamífero. Além disso, a camptotecina não é um candidato atraente para o desenvolvimento de drogas, como agente antiviral, devido a inaceitável toxicidade limitadora de dose, toxicidade impredizível e fraca solubilidade aquosa e/ou inaceitável estabilidade de vida em prateleira.

Existe necessidade de novos agentes antivirais. As indolizino[l,2-b]quinolinonas substituídas, desprovidas da porção α-hidroxilactona do anel E da camptotecina, têm-se mostrado não citotóxicas para as células de mamífero e desprovidas de actividade antitumoral (Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 1977, 17, 117; J. Med. Chem. 1989, 32, 715). Isto deve--se ao facto destes compostos não conterem as características estruturais essenciais, necessárias para inibir a topoisomerase I eucariótica. Contudo, verificámos recentemente que certas indolizino[l,2-b]quinolinonas substituídas desprovidas da porção hidroxilactona do anel E têm de facto actividade antiviral mas não a citotoxicidade indesejável da camptotecina. Assim, essas indolizino[1,2-b]quinolinonas substituídas são úteis para o tratamento de infecções virais.

Sumário do Invento

0 presente invento proporciona um processo de preparação de um composto de Fórmula I, ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável: R9 R7

(I) na qual R7 é -H, -N02, -CN, alcoxi inferior, alquilo inferior, -OAr, -NHCH2Ar, -C=CCH2NRR1, -CH=CHCH2NRR1, -(CH2)0„3CH2V; R9 é -H, -OR, -N02, -NRR1, -CN, halo, -(CH2)0_3CH2V; R10 é -H, -0R, -N02, -NRR1, -CN, -COR12, -CH(OH)R12, -0C(0)R12, -0C(0)0R12, -0C(0)0R12, -0C(0)CH2CH2C00R13, -0-(CH2)1_5CH2NRR1, -OCÍOJNRR1, 73 308 14539-1 -4-

1,4'-bipiperidina-1'-carboxi, -(CH2)0-3CH2V; v é -OH, -OalquíloC1_6/ -OCOR12, -OCOOR13, -OCONRR1, -NRR1, ou -CN; R11 é -H, -CN ou -OR; R12 é -H ou alquilo inferior; R13 é alquilo inferior; R e R1 são seleccionados, independentemente um do outro, de entre o grupo consistindo em -H, -alquilo C^g e R e R1 tomados em conjunto formam um anel heterocíclico saturado com 5-7 membros contendo azoto; X é -H, -OH, -c=cch2nrr1, -CN, -SOR, -CH(0H)CH(0H)CH3, -CHR3R4, R5 -CH2CH2CH2NRR-*-, alquilo inferior, '^6

ou -C(ch2ch3)(OH)COOH; Y é -H, -CH3, -CH2OR2; R2 é -H, —C(O)H, -C(0)alquiloC2_5, -CÍOJalquilCj^COOH ou -C(O)alquilC1-4NRR1; R3 é -OH, halo, ou -NH2; R4 é -H, alquilo inferior ou -OR; R5 é =0, =N0H, ou =CHR; R6 é -H, alquilo inferior, ou -NRR1; e

Ar é fenilo, fenilo monossubstituído, fenilo dissubstituído, 3-piridilo, 3-piridilo monossubstituído ou 3-piridilo dissubstituído, em que os substituintes podem ser -CN ou alcoxi inferior; desde que: a) se um de R7, R9, R1(^ ou R11 é diferente de -H, apenas um dos outros pode ser diferente de -H; b) apenas um de R7, R9, R10 ou R11 pode ser -N02 ou -NRR1; c) quando X é -CHR3R4 e R4 é -OR, R3 é -OH; d) quando R6 é -NRR1, R5 é =0; e) quando R^ é =CHR, R6 é -H; 0 0v,- f) quando X é R10 é -OH, e R7, R9 e R11 são -H, e rv

Rs Y é -CHo; g) quando Y é -CH2OR2, X é R , R3 é =0, e R° é -H ou alquilo inferior. h) quando R7, R9, R10 e R11 são todos -H e Y é -CH3, então 73 308 14539-1 -5-

X não é -Η, -0(0)11, -CH20H, -CH(0H)CH(0H)CH3, -C(0)CH2CH3 OU -CH(OH)CH2CH3; i) quando R7, R9, R10 e R11 são todos -H e Y é -CH20C(0)H, então X não é -0(0)0Η20Η3; j) quando R7, R9, R10, R11 e Y são todos -H, então X não é -CH20H, -C(0)H, -CH2Br, -OH ou -H; e k) quando R7 é -OCH3, então X e Y não são -H; processo que compreende: i) a abertura do anel lactona de um derivado de camptotecina por aquecimento do referido derivado num solvente de elevado ponto de ebulição, a uma temperatura não inferior a cerca de 150°C, obtendo-se um composto de fórmula I; ii) (a) a abertura do anel lactona da camptotecina por aquecimento da referida camptotecina num solvente de elevado ponto de ebulição, a uma temperatura não inferior a cerca de 150°C; e, em seguida (b) a introdução de pelo menos um substituinte R7-R-*--*· obtendo-se um composto de fórmula I; ou iii) a modificação de pelo menos um substituinte R7-R·*--*- de uma indolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona, obtendo-se um composto de fórmula I.

Descrição Detalhada do Invento

As definições que se seguem são usadas ao longo deste pedido de patente. mas "Alifático" pretende incluir radicais saturados e insaturados. Isto inclui cadeias normais e ramificadas, cadeias saturadas ou mono ou poli insaturadas, nas quais podem estar presentes, em qualquer combinação, ligações duplas e triplas. A frase "alquilo inferior" refere-se a um grupo alquilo de 1 a 6 átomos de carbono em qualquer forma isomérica, 73 308 14539-1 -6-

particularmente na forma normal ou linear. "Alcoxi inferior" significa o grupo alquil inferior-0-. "Halo" significa fluoro, cloro, bromo ou iodo. "Acilo" significa o radical possuindo um carbono carbonílico terminal. A frase "anel heterocíclico saturado de 5-7 membros contendo o azoto" pretende incluir anéis saturados tais como piperidina, pirrolidina, morfolina, piperazina e N-alquilpiperazina. 0 termo " 1,4 ' -bipiperidina-1'-carboxi" é usado para identificar o seguinte radical:

Os sais de qualquer tipo podem ser feitos a partir dos compostos preparados pelo presente processo, desde que exista um grupo acídico ou um azoto suficientemente básico no ácido ou base. São particularmente preferidos os sais farmaceuticamente aceitáveis dos presentes compostos. Estes sais são definidos como aqueles que são aceitáveis na sua aplicação a um uso farmacêutico, o que significa que o sal reterá a actividade biológica do composto progenitor e que o sal não terá efeitos indesejáveis ou perniciosos na sua aplicação e uso no tratamento de doenças.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis são preparados de uma maneira padrão. O composto progenitor, num solvente adequado, é feito reagir com um excesso de um ácido orgânico ou inorgânico, no caso de sais de adição de ácido de uma porção base; ou com um excesso de uma base orgânica ou inorgânica, no caso do progenitor conter um grupo ácido. São ácidos representativos o ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido acético, ácido maleico, ácido succínico e ácido metanossulfónico. Os sais catiónicos são facilmente preparados a partir de metais alcalinos tais como sódio, potássio, cálcio, magnésio, zinco, cobre ou semelhantes bem como de amoníaco. As 73 308 14539-1 -7-

bases orgânicas incluem aminas mono ou dissubstituídas, etilenodiamina, piperazina, aminoácidos, cafeína e semelhantes. A nomenclatura química usada ao longo deste pedido de patente para nomear os compostos preparados pelo processo do presente invento está de acordo com a fórmula estrutural representada como fórmula (II) 1 12 n

(II) x

No caso de alguma combinação de substituintes criar um centro quiral ou outra forma de um centro isomérico num composto preparado pelo processo deste invento, todas as formas deste(s) isoméro(s) são consideradas aspectos do presente invento. Quando um composto preparado pelo processo do presente invento contém um centro quiral, o presente invento inclui a mistura racémica, os enantiómeros puros e qualquer sua mistura enantiomericamente enriquecida. O presente processo proporciona compostos de fórmula I que são úteis para tratar infecções virais em animais e plantas, causadas por uma larga variedade de vírus. Os compostos preparados pelo presente processo são particularmente úteis para tratar infecções virais provocadas por vírus herpes simplex, particularmente vírus herpes simplex tipo 1 (HSV1) e vírus herpes simplex tipo 2 (HSV2) ou citomegalovírus quando o hospedeiro infectado é um mamífero, particularmente quando o hospedeiro infectado é o Homem.

O processo do presente invento proporciona compostos preferidos de fórmula INI 73 308 14539-1 -8

β correspondendo a Fórmula INI à fórmula I onde R7, R9, R10 e R11 R5 são -Η, X é -CN, -SOR, onde R5 é =0 e R6 é -H ou alquilo inferior, ou CHR3R4 onde R3 é -OH e R4 é -H ou alquilo inferior (desde que R4 não seja -CH2CH3), e Y é -CH3. 0 processo do presente invento proporciona compostos também preferidos de fórmula IN2

correspondendo a Fórmula IN2 à Fórmula I onde R7, R9, e R11 são, cada um, -H, R10 é descrito como anteriormente para a Fórmula I com excepção de R10 não ser -H, e X e Y são definidos como anteriormente para a Fórmula I. Compostos mais preferidos de Fórmula IN2 preparados pelo presente processo incluem aqueles em que R10 é -0R, -CN, -C0R12 ou -(CH2)nCH2V, e X é CHR3R4 onde R3 -<R5 é -OH e R4 é -H ou alquilo inferior, ou R6 onde R5 é =0 e R6 é -H ou alquilo inferior, e Y é -CH3.

Outro grupo preferido de compostos preparados pelo processo do presente invento é o de compostos de Fórmula IN3 R9

correspondendo a Fórmula IN3 à Fórmula I onde R7, e R11 são, cada um, H, R9 e R10 são descritos como anteriormente para a Fórmula I com excepção de R9 e R10 não serem -H, e X e Y são definidos como anteriormente para a Fórmula I. Compostos de Fórmula IN3 mais preferidos preparados pelo processo do presente invento incluem aqueles em que R9 é -(σΗ2)ηΟΗ2ν, R10 é -0R, X é 73 308 14539-1 -9- >3 ó _r»w λ t?4

á*L“!ÍJSUJpí CHR3R4 onde RJ é -OH e R4 é -H ou alquilo inferior, ou RD r6 onde R5 é =0 e R6 é -H ou alquilo inferior, e Y é -CH3.

Ainda outro grupo preferido de compostos preparados pelo processo do presente invento é dos compostos de Fórmula IN4 R7

correspondendo a Fórmula IN4 à Fórmula I onde R9, R-'·^ e R11 são, cada um, -H, R7 é descrito como anteriormente para a Fórmula I com excepção de R7 não ser -H, e X e Y são definidos como anteriormente para a Fórmula I. Compostos de Fórmula IN4 mais preferidos incluem aqueles em que R7 é alquilo inferior -CN, -(CH2)nCH2V ou -NHCH2Ar, X éCHR3R4 onde R3 é -OH e R4 é -H ou y R5

-K alquilo inferior, ou R6 onde R5 é =0 e R6 é -H ou alquilo inferior, e Y é -CH3.

Outro grupo preferido de compostos preparados de acordo com o presente invento é o dos compostos de Fórmula IN5 R9

correspondendo a Fórmula IN5 à Fórmula I onde R7, R10 e R11 são, cada um, -H, R9 é descrito como anteriormente para a Fórmula I com excepção de R9 não ser -H, e X e Y são definidos como anteriormente para a Fórmula I. Compostos de Fórmula IN5 preparados pelo processo do presente invento mais preferidos incluem aqueles em que R9 é -0R, X é CHR3R4 onde R3 é -OH e R4 é

onde é =0 e R^ é -H ou 73 308 14539-1 -10-

-H ou alquilo inferior, ou alquilo inferior, e Y é -CH3.

Ainda um outro grupo preferido de compostos preparados pelo processo do invento é o do compostos representados pela Fórmula IN6

IN6

correspondendo a Fórmula IN6 à Fórmula I onde R7, R9e R10 são, cada um, -H, R11 é -CN ou -0R, e X e Y são definidos como anteriormente para a Fórmula I. Compostos de Fórmula IN6 preparados pelo processo do invento mais preferidos são os compostos em que R11 é -0CH3, X é CHR3R4 onde R3 é -OH e R4 é -H -^R5 ou alquilo inferior, ou R6 onde R5 é =0 e R6 é -H ou alquilo inferior, e Y é -CH3.

Ainda outro grupo preferido de compostos preparados de acordo com o processo do presente invento é o dos compostos representados pela Fórmula IN7

correspondendo a Fórmula IN7 à Fórmula I onde R7, R9' R10 e R11 são, cada um, -Η, X é -CN, -CH2CH3, -CH=CH2, e Y é -H. 0 presente invento prepara os seguintes compostos particularmente preferidos: 8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona; (+)7-(1-hidroxipropil)-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)- 73 308 14539-1 -11--ona; 8-formiloximetil-7-(l-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin--9(llH)-ona; (±)7-(treo-l,2-di-hidroxipropil)-8-metilindolizino[1,2-b]quino-lin-9(llH)-ona; (±)7-[(hidroxi Jmetoximetil]-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin--9(llH)-ona; 7-(hidroximetil)-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona; 2-hidroxi-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin-9-(HH)-ona; 1- (dimetilamino)metil-2-hidroxi-8-metil-7-(l-oxopropil)indolizi-no[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona;

2- ciano-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)--ona; 1- metoxi-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[lf2-b]quinolin-9(llH)--ona; 2- aminometil-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin--9(11H)-ona; 2-metoxi-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)--ona; 12-hidroximetil-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[l,2-b]quinolin-9 ( 11H ) -ona ; 7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-2-hidroxi-8-metilindolizino[1,2-b]-quinolin-9(11H)-ona;

7-acetil-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona; 12-ciano-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)--ona; 12-aminometil-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin--9(llH)-ona; (±)-12-ciano-7-(1-hidroxipropil)-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin-9 (11H)-ona; (±)-2-ciano-7-(1-hidroxipropil)-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin-9 (11H)-ona; 2-acetil-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)--ona; 12-propil-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin--9(llH)-ona; (±)-l-metoxi-7-(1-hidroxipropil)-8-metilindolizino[1,2-b]quino-

73 308 14539-1 -12- lin-9(llH)-ona; e 3-metoxi-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)--ona.

Em geral, os compostos preparados de acordo com o invento são preparados por abertura do anel E da camptotecina ou de um derivado da camptotecina que pode ter o substituinte R7-Ri:l desejado, para obter uma 8-metil-7-(1-oxopropilJindolizino-[1,2-b]quinolin-9-(11H)-ona. Alternativamente o anel E pode ser aberto e depois introduzidos os substituintes R7-R-*--*-. Ainda num outro processo alternativo, um grupo R^R11 é modificado para se obter o composto desejado. Uma vez aberto o anel E, os grupos x e Y resultantes podem ainda ser modificados na medida do necessário, para fazer os compostos em apreço. 0 processo sintético para preparar os compostos do invento é delineado nos seguintes diagramas.

Os materiais de partida estão disponíveis comercialmente ou podem ser feitos por processos publicados. A camptotecina, 10--hidroxicamptotecina e 9-hidroxicamptotecina são produtos naturais. A camptotecina e a 10-hidroxicamptotecina estão disponíveis em fontes da República Popular da China. Um composto 9-hidroxicamptotecina que pode ser usado como material de partida para fazer alguns dos compostos preparados de acordo com o invento é descrito no Pedido de Patente Japonesa Publicado ns 59-51,289. A síntese de 9-nitrocamptotecina é descrita por Wall et al. J. Med. Chem. 1986, 29, 2358. Uma síntese total da camptotecina é descrita por Wall et al., J. Med. Chem. 1980, 23,554. A síntese de Wall et al. de 1980 pode ser usada como meio para introduzir um ou mais substituintes R7-R·1·1 nos compostos de fórmula I. Isto envolve a modificação da síntese de Wall no passo apropriado de maneira a colocar no lugar o substituinte desejado, continuando-se depois a síntese descrita.

Graficamente, a reacção de abertura do anel é ilustrada pelo Esquema 1, onde o símbolo Q indica um substituinte que pode ser hidrogénio.

Esquema 1 73 308 14539-1

Os compostos de fórmula 1 são convertidos nos compostos de fórmula 2 por aquecimento dos compostos num solvente de elevado ponto de ebulição, preferivelmente não reactivo, tal como N,N--dimetilformamida ou triglima (éter trietilenoglicol dimetílico).

Como se mostra no Esquema 2, o grupo ceto dos compostos de Fórmula 2 pode ser reduzido para dar os correspondentes compostos hidroxi 3, a partir dos quais se podem derivar os compostos halo 4. 0 grupo ceto também pode ser convertido numa oxima (compostos 5) que pode, por sua vez, ser reduzida para dar os compostos amino primário 6. O grupo ceto também pode ser convertido num grupo cetal tal como 1,3-dioxolano (compostos 7, que são intermediários úteis para posteriores transformações). O grupo hidroxilo dos compostos 3 também pode ser acilado para produzir ésteres (8) e carbamatos (9) onde R indica um grupo alquilo, ao passo que R' e R' ' indicam grupos alquilo ou átomos de hidrogénio.

Esauema 2

Q Q 3

Como se ilustra no Esquema 3, a desidratação de álcoois 3 dá alcenos 10 que podem ser hidroxilados a dióis 11. A clivagem oxidativa dos dióis gera os aldeídos 12 que podem ser solvatados covalentemente com água ou com um solvente alcoólico, para produzir os compostos de fórmula 13. A redução com hidreto dos compostos de fórmula 12 e 13 dá os álcoois primários 14.

Esquema 3

Q Q

RO 73 308 14539-1

-15- «rtt·

Q Q

CH2OH São também derivados das camptotecinas os ácidos a-hidroxi 15 que são formados por clivagem hidrogenolítica do anel lactona, como se mostra no Esquema 4.

Alguns substituintes do anel podem ser lábeis nas condições usadas no processo preferido para fazer compostos 2, como apresentado no Esquema 1. Para fazer compostos que são instáveis nessas condições, a sequência apresentada no Esquema 5 pode proporcionar acesso a alguns desses compostos ou proporcionar intermediários para fazer outros compostos.

Esquema 5

73 308 14539-1 -16-

Mais especificamente, o grupo ceto dos compostos 16 é primeiro protegido como um cetal (17) e depois o anel piridina é reduzido para dar compostos 18, por exemplo com cianoboro--hidreto de sódio num solvente ácido, tal como ácido acético. Finalmente, a oxidação dos compostos 18, por exemplo com diacetato de iodobenzeno, dá os 2-hidroxicetais 19, os quais conjuntamente com os compostos ceto 20 derivados dos cetais por hidrólise ácida podem ser usados para fazer compostos com outros substituintes, como se ilustra no Esquema 6.

Esquema 6

Q Q 20

Q Q

73 308 14539-1 -17-

Q Q

Q Q 25

R* O-

32

Q Q

R’ i

Q Q

Os compostos do Esquema 6 são preparados por alquilação (compostos 21) ou por acilação (compostos 22, 23 e 24) das 2--hidroxicetonas 20 ou por substituição do grupo 2-hidroxi nos cetais (19) via triflatos (25). A cianação dos triflatos pelo método de Kosugi, M. et al, Chem. Lett. 1981, 69, dá compostos 26 que são hidrolisados a compostos 27. A hidrogenação catalítica do grupo ciano dos compostos 26 dá aminometilcetais 28, os quais após hidrólise dão as cetonas 29.

Alternativamente, começando com os triflatos (25), pode-se introduzir um grupo carbonilo no anel, por exemplo pelo procedimento de Cacchi, S. et al, Tetrahedron Lett. 1986, 27, 3931. Se se usa uma amina ou álcool, obtêm-se as correspondentes 73 308 14539-1 -19-amidas (30) ou ésteres (32) que são depois hidrolisados nos correspondentes compostos ceto 31 e 33. A redução dos ésteres 32 com um hidreto dá os álcoois primários 34, que após hidrólise produzem os cetoálcoois 35, os quais podem ser acilados para dar carboxilatos, carbonatos e carbamatos por métodos similares aos usados para preparar compostos 22 , 23 e 24. Os aldeídos (compostos 36), podem ser feitos por oxidação dos álcoois 34 usando um oxidante suave, o que dá o aldeído de preferência ao ácido (por exemplo Mn02). A desprotecção dá os cetoaldeídos 37.

Similarmente, os triflatos são convertidos em viniléteres 38 seguindo o método de Cabri, W. et. al. (J. Org. Chem. 1990, 55, 3654), e em seguida os compostos 38 são hidrolisados em dicetonas 39. A hidrólise selectiva da função enol-éter nos compostos 38, produz os compostos 2-ceto que podem ser reduzidos a álcoois secundários, dos quais os grupos cetal podem ser removidos e a função álcool acilada para dar carboxilatos, carbonatos e carbamatos como se descreveu para os compostos 20 e 35.

A introdução de um grupo amino na posição 2- é conseguida hidrolisando os ésteres 32, convertendo os ácidos resultantes em halogenetos de ácido (cloretos de ácido), tratando os halogenetos de ácido com azida de sódio e aquecendo esses produtos e em seguida tratando-os com água para formar as aminas (40), as quais após desbloqueamento dão compostos 41. Estas aminas podem ser alquiladas (42), sulfoniladas (44) ou aciladas (46) por meio conhecidos e em seguida desprotegidas para dar compostos 43, 45 e 47, respectivamente.

Os compostos com um substituinte na posição 1, que não podem ser feitos pelo método do Esquema 1, podem ser feitos usando o efeito activante do grupo 2-hidroxi em compostos 19; o grupo hidroxi pode ser mantido no produto ou ser removido. Estas preparações são ilustradas no Esquema 7. 73 308 14539-1 -20- Bscruema 7

X Q

J HO. CNQ íVr V — HO CNQ rW)H0 4 o (X = I) cr 50 R' 0J RJ 51 >= R’

1 9

A halogenação de compostos 19 é conseguida por meios comuns para produzir 1-halocetais 48 que são clivados, obtendo-se as correspondentes cetonas 49. Os cianocetais 50 são preparados usando iodetos (48) na reacção de cianação descrita para a síntese dos compostos 26. A clivagem dos compostos 50 dá compostos 51, ou alternativamente, a função hidroxi pode ser removida de 50 por conversão dos compostos nos correspondentes triflatos 52 e em seguida redução aos compostos 53 pelo método de Cacchi, S. et al., Tetrahedron Lett. 1986, 27, 5541. A hidrólise do cetais 53 dá cetonas 54.

73 308 14539-1 -21- A conversão dos compostos 19 em compostos 55 é conseguida usando tetrametildiaminometano e um ácido. 0 grupo protector de dioxolano pode ser hidrolisado para se obterem os compostos ceto 56.

Os processos para fazer compostos com diferentes grupos na posição 7- são ilustrados no Esquema 8.

Escruema 8

73 308

Os compostos hidroxi 57 são feitos como descreveu Sugasawa T., et al. Chem. Pharm. Buli. 1974, 22, 771. Os triflatos (58) são preparados da maneira usual. A redução a compostos 59 é realizada pelo mesmo método usado para os compostos 52. A cianação dos triflatos para dar compostos 60 usa o método empregue para preparar compostos 26. A alcoxivinilação dos triflatos para dar compostos 61 é realizada como na preparação de compostos 38; a hidrólise ácida dos éteres vinílicos dá as cetonas 62, que após reacção com diazometano pelo método de Kametani, T., et al., (Heterocycles 1975, 3, 167) dá derivados metilo 63 que são reduzidos por hidretos a álcoois 64. 0 acoplamento dos triflatos com 3-dialquilaminopropino pelo método de Echavarren, A. M. e Stille, J.K. (J. Am. Chem. Soc. 1988, 110, 1557) dá compostos 65 que são cataiiticamente hidrogenados a compostos 66. A vinilação dos triflatos pelo procedimento de Chen, Q-Y. e Yang, Z-Y. 73 308 14539-1 n~- -23- S*· t C '

(Tetrahedron Lett. 1986, 27, 1171) dá compostos 67 que são cataiiticamente hidrogenados a compostos de etilo 68. A carbonilação dos triflatos na presença de uma amina ou de um álcool, pelo procedimento usado para fazer compostos 30 e 32, conduz a amidas 69 e ésteres 70, respectivamente. Como se descreveu para os compostos 62, os compostos 70 são metilados com diazometano para dar derivados 71, os quais são então reduzidos a álcoois 72 por hidretos. 0 deslocamento da função triflato dos compostos 58 por tióis dá sulfuretos 73 que são oxidados a sulfóxidos 74.

Os compostos com substituintes na posição 12 são preparados como se ilustra no Esquema 9.

Esquema 9

73 308 14539-1

80

Qv Tl - 0 N-4 CT \/}~ 83 Vo R’ 0-

Q NHCH2Ar O

80

Q Q

90 73 308 14539-1

Os compostos 12-hidroximetilo 75 são preparados pelo método de Miyaska, T. et al. (Heterocycles 1981, 16, 1713) usando sulfato ferroso, peróxido de hidrogénio, e metanol com ácido sulfúrico. Estes álcoois são acilados como se descreveu para os compostos 20 e 35, para produzir carboxilatos, carbonatos e carbamatos. Similarmente, os compostos de 12-alquilo 77 são preparados pelo método de Miyasaka, T. et al. (Patente E.U.A. 4399 282). A oxidação de compostos 78, por exemplo, com peróxido de hidrogénio em ácido acético, dá os N-óxidos 79, os quais após 73 308 14539-1

.Λ -26 aquecimento com cloreto de tosilo em Ν,Ν-dimetilformamida dão os compostos 12-cloro 80 que podem ser convertidos em muitos outros compostos. 0 aquecimento dos compostos de cloro com arilóis, tais como fenol, dá os compostos 12-ariloxi 81 que após desprotecção dão as cetonas 82? se, contudo, se inclui na reacção um aminometilareno, os produtos são compostos 83 que após hidrólise dão compostos ceto 84. 0 substituinte cloro dos compostos 80 pode ser substituído com um grupo iodo (85) por aquecimento com iodeto de potássio em ácido acético contendo algum anidrido acético. Os derivados iodo são facilmente usados em várias reacções de acoplamento similares às realizadas com os triflatos 25 e 58. A cianação dá compostos 86 que são desbloqueados para dar cetonas 87 ou que são reduzidos a compostos de aminometilo 88, os quais dão cetonas 89 após hidrólise. Do mesmo modo, as propinilaminas 90 podem ser produzidas e depois desprotegidas para se obterem compostos 91 ou hidrogenadas cataliticamente para se obterem compostos 92 e 94 que são hidrolisados a compostos ceto 93 e 95, respectivamente. 0 aquecimento dos compostos 85 com acetato de sódio em ácido acético dá os compostos 12-hidroxi 96 que podem ser alquilados usando base e halogenetos de alquilo ou diazoalcanos para dar compostos 12-alcoxi 97 que após desprotecção proporcionam cetonas 98. Os compostos 12--hidroximetilo 76 podem ser protegidos e depois activados por reacções de deslocamento por conversão a um sulfonato (99), por exemplo um mesilato. O deslocamento com cianeto nos compostos 99 dá os cetais 100, que após hidrólise dão 12-cianometilcetonas 101. Os cianocetais também podem ser reduzidos a compostos de aminoetilo 102 que dão cetonas 103 após hidrólise. O tratamento de sulfonatos 99 com álcoois na presença de bases dá éteres 104 que podem ser convertidos em cetoéteres 105.

As reacções ilustradas no Esquema 9 para os compostos 12--hidroximetilo 76 podem ser igualmente aplicadas a compostos hidroximetilo 34 para produzir derivados correspondendo a compostos 99 a 105.

Os compostos preparados pelo processo do presente invento exibem actividade antiviral e são geralmente úteis no tratamento

73 308 14539-1 -27-de uma grande variedade de infecções por vírus, tanto em plantas como em animais. Estes compostos são particularmente úteis no tratamento de infecções por vírus animais de ADN replicante, mais particularmente, as causadas pelo vírus herpes simplex (HSV). Mais especificamente estes compostos são úteis no tratamento de infecções causadas pelos seguintes patogénios humanos: Vírus Herpes Simplex tipo 1 e 2? Citomegalovírus; Vírus Zoster da Varicela; Vírus Epstein Barr? e Vírus Papiloma (múltiplos tipos).

As infecções causadas pelos seguintes patogénios animais também podem ser tratadas com os presentes compostos: Vírus Herpes Equino; Vírus Herpes Porcino? e Vírus da doença de Marek.

Ensaios 0 ensaio usado para testar os compostos preparados pelo processo do presente invento relativamente à actividade antiviral foi retirado da literatura e foi modificado de modo bem conhecido, para o adaptar à tecnologia disponível. Segue-se uma descrição geral do ensaio.

Procedimento de Ensaio

Placas com alvéolos foram semeadas com células apropriadas, a uma concentração de 1 x 105 células por alvéolo, suspensas em 0,5 ml de Meio Mínimo Essencial de Earle (EMEM) contendo 10% de soro de bovino fetal (FBS) e solução de antimicótico e antibiótico. Depois das células estarem 80-90% confluentes (24 horas), o meio velho foi removido e lavado com solução salina tamponada de Hank (HBSS). As células foram então infectadas durante 1 hora a 37°C com 100-200 unidades formadoras de placas, 73 308 14539-1 -28-

por alvéolo, de um vírus herpes simplex suspenso em 250 μΐ de HBSS. A seguir à adsorção, adicionou-se: A) 250 μΐ,/alvéolo 2 x EMEM contendo IgG Humana (ca 0,1 μg/mL; Sigma No. G-6763); B) 250 μΐί/alvéolo EMEM contendo 10% de FBS e solução de antibiótico/antimicótico; C) 250 μΙ/alvêolo HBSS contendo o composto apropriadamente diluído.

Após 24-48 horas (tempo óptimo determinado por exame das placas ao microscópico) o meio velho foi aspirado. Cada alvéolo foi corado com uma solução corante seleccionada (0,5% de violeta de cristal em MeOH:H20 7:3) e em seguida enxaguada com água e seca ao ar e as placas foram contadas. A eficácia do composto foi avaliada em termos de percentagem da redução de placas, quando comparada com a de controlos infectados, não tratados.

Este procedimento pode ser usado para testar a eficácia do composto contra muitos vírus, além do herpes simplex, modificando simplesmente o tipo de célula usado no primeiro passo para corresponder ao vírus a testar e seguindo o procedimento delineado acima. Outros tipos de células que podem ser usadas neste ensaio incluem células de tumor mamário de ratinho, fibroblastos do pulmão humano, células do corioplexus da ovelha e células de rim de macaco verde.

Outros ensaios que são úteis para a determinação da actividade antiviral dos presentes compostos incluem os seguintes tipos: contagem de células, efeito citopático, clonogénico, formação de colónia em prato, microtitulação, inibição do crescimento, incorporação de timidina e redução do rendimento. Cada um destes bem conhecidos ensaios está na literatura e os ensaios seleccionados estão disponíveis comercialmente.

Formulações O presente invento proporciona uma larga variedade de

73 308 14539-1

-29- formulações preparadas a partir de compostos do presente invento. Estas formulações têm utilidade para uso antiviral veterinário e em humanos e para tratar infecções virais em plantas, p. exp. em sementes e plantas agrícolas ou ornamentais. Estas formulações compreendem um portador que é aceitável para o uso final a que se destina, em conjunto com pelo menos um composto do invento. Por exemplo, para uso veterinário, o portador pode ser um líquido ou aspersão, ou pode ser formulado numa forma sólida não degradável ou degradável para inserção no rúmen. Para uso agrícola, o composto pode ser misturado com um fertilizante, outros microbiocidas tais como fungicidas ou insecticidas e semelhantes. Os presentes compostos também podem ser formulados em pós ou aspersões para aplicação nas superfícies das plantas.

As formulações deste invento compreendem um ou mais compostos do presente invento em mistura com um portador ou diluente farmaceuticamente aceitável e inerte. As formulações podem conter uma quantidade eficaz do composto do invento numa unidade, tal como uma pílula ou cápsula simples, ou dose intravenosa previamente medida ou seringa previamente cheia para injecção ou, como é frequentemente o caso, a formulação pode ser preparada em formas de dose individual, nas quais uma unidade tal como uma pílula, contém uma dose sub-óptima, sendo o utilizador instruído para tomar duas ou mais doses unitárias por tratamento. Quando a formulação se apresenta como creme, ela contém uma quantidade discreta de droga e o utilizador aplica uma quantidade eficaz do creme, uma ou mais vezes até a doença estar em remissão ou ter sido eficazmente tratada. Podem também preparar-se concentrados para diluição posterior pelo utilizador final, por exemplo para formulação IV e formulações injectáveis multi-dose.

Os portadores ou diluentes cujo uso se contempla nestas formulações são geralmente conhecidos na arte das formulações farmacêuticas. Pode encontrar-se referência a materiais úteis em compilações conhecidas tais como Reminqton/s Pharmaceutical Sciences. Mack Publishing Co., Easton, PA, 18042, EUA. A natureza da formulação e do portador ou diluente -30- 73 308 14539-1 /· /

farmaceuticamente aceitável dependerá, evidentemente, da via de administração pretendida, por exemplo, por injecção intravenosa e intramuscular, parentericamente, topicamente, oralmente ou por inalação.

Para administração parentérica, a formulação pode estar na forma de um líquido injectável estéril tal como uma ampola ou uma suspensão líquida aquosa ou não aquosa.

Para administração tópica, a formulação pode estar na forma de um creme, unguento, linimento, loção, pasta, aspersão ou gotas adequadas para administração à pele, olho, ouvido, nariz ou orgãos genitais.

Para administração oral, a formulação pode estar na forma de um comprimido, cápsula, pó, pelota, trocisco, pastilha, xarope, líquido ou emulsão. 0 portador farmaceuticamente aceitável empregue pode ser sólido ou líquido. Exemplos de portadores sólidos são lactose, caulino, terra alba, sacarose, talco, gelatina, ágar, pectina, acácia, estearato de magnésio, manitol, ácido esteárico e semelhantes.

Exemplos de portadores ou diluentes apropriados e farmaceuticamente aceitáveis incluem: para sistemas aquosos, água; para sistemas não aquosos, etanol, glicerina, propilenoglicol, óleo de milho, óleo de sementes de algodão, óleo de amendoim, óleo de sésamo, parafinas líquidas e suas misturas com água. Para sistemas de aerossol, os portadores farmaceuticamente aceitáveis incluem diclorodifluorometano, clorotrifluoroetano e dióxido de carbono comprimido. As presentes composições podem também incluir, além do portador ou diluente farmacêutico, outros ingredientes tal como estabilizantes, antioxidantes, conservantes, lubrificantes, agentes de suspensão, modificadores da viscosidade e semelhantes, desde que os ingredientes adicionais não tenham um efeito prejudicial sobre a acção terapêutica das presentes composições. Similarmente, o 73 308 14539-1 -31-portador ou diluente, pode incluir materiais retardadores bem conhecidos na arte, tais como monoestearato de glicerilo ou diestearato de glicerilo, sozinhos ou com ma cera, etilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, metacrilato de metilo e semelhantes.

Para se obter uma forma de dose solúvel em água e estável, dissolve-se um sal farmaceuticamente aceitável de um composto preparado pelo processo do presente invento numa solução aquosa de um ácido ou base orgânicos ou inorgânicos. Se não estiver disponível uma forma de sal solúvel, o composto do invento pode ser dissolvido num co-solvente adequado ou em suas combinações. Os exemplos destes co-solventes adequados incluem, não exclusivamente, álcool, propilenoglicol, polietilenoglicol 300, polisorbato 80, glicerina e semelhantes, em concentrações variando entre 0-60% do volume total.

Dever-se-à ter em conta que as dosagens reais preferidas dos compostos do presente invento usadas nas formulações e nas outras composições deste invento variarão de acordo com o complexo particular usado, a formulação particular formulada, o modo de administração, e o local, hospedeiro e doença a tratar particulares. Estes compostos são activos nas gamas de concentrações de duas drogas anti-virais comerciais, Cytovene (ganciclovir) e Zovirax (aciclovir). Por exemplo, a última é produzida em cápsulas de 200 mg, com instruções para o tratamento do vírus herpes simplex, tomando uma cápsula de 4 em 4 horas, não excedendo 5 cápsulas por dia. Nos Exemplos que se seguem a temperatura está em graus centrígrados (°C). A não ser que se indique o contrário, todos os materiais de partida foram obtidos de fontes comerciais. Sem mais elaboração pensa-se que o perito na arte, com base na descrição anterior, pode utilizar o presente invento na sua extensão máxima. Estes exemplos são apresentados para ilustrar o invento e não para lhe limitar o âmbito. Relativamente àquilo que é reservado pelos inventores faz-se referência às reivindicações. 73 308 14539-1

-32- çXã·'- ey*J·

Exemplo 1 8-Formiloximetil-7-(1-oxopropil)indolizinoΓ1.2-blquinolin- -9fllH^-ona

A uma suspensão de (4S,3R,S)-etil-3,4-di-hidroxi-lH-pirano-[3',4': 6,7]indolizino[l,2-b]quinolin-14(4H,12H)-ona (1,04 g, 3,0 mmol) (preparada pelo método de T.R. Govindachari, K. R. Ravindranath e N. J. Viswanathan, J. Chem. Soc.. Perkin Trans., 1974, 1215) em ácido acético glacial (70 ml) adicionou-se, gota a gota, uma solução de metaperiodato de sódio (1,0 g, 4,7 mmol) em H20 (20 ml). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos, altura em que se adicionou etilenoglicol (1 ml). Adicionou-se lentamente água (350 ml) e arrefeceu-se a mistura a 0°C. Recolheu-se por filtração o precipitado que se formou e recristalizou-se em acetona/H20 obtendo-se agulhas amarelas do composto do título sob a forma de hidrato p.f.>200°C (dec). % RMN (CDCl3/DMSO-d6) δ 8,43 (s largo, 1H), 8,20-7,40 (m, 5H), 7,23 (s, 1H), 5,28 (s largo, 4H), 2,95 (q obscurecido por pico HOD, 2H), 1,18 (t, J = 6 Hz, 3H). Anal. Cale. para C20H16N2O4.H20: C, 65,57; H, 4,95; N, 7,65. Encontrado: C, 65,53; H, 4,84; N, 7,33.

Exemplo 2 8-Metil-7-f1-oxoprooil)indolizino Γ1.2-b1auinolin-9(11H^-ona Agitou-se com 46 ml de Ν,Ν-dimetilformamida uma amostra de 4,6 g de 4-etil-4-hidroxi-lH-pirano-[3/,4': 6,7]indolizino[1,2--b]quinolin-3,14(4H,12H)-diona [(20S) camptotecina]. A suspensão foi aquecida ao refluxo e controlou-se o desaparecimento do material de partida por HPLC ( coluna de fase inversa C18, fase móvel acetonitrilo:água 20-25%, tampão de perclorato a pH de aproximadamente 3,0). A reacção foi controlada por detecção de UV a um comprimento de onda de 228 nm. As únicas respostas detectadas sob estas condições foram um pico para a N,N--dimetilformamida próximo da frente de solvente, um pico para o material de partida e um pico para o produto desejado com um tempo de retenção de aproximadamente 3,2 relativo ao material de partida. A reacção foi aquecida até o material de partida estar completamente consumido (aproximadamente 8 dias). Depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, o produto sólido foi

73 308 14539-1 -33- recolhido por filtração e lavado com metanol. Após secagem sob vácuo até se obter um peso constante, obtiveram-se 3,48 g (87%) de produto, p.f. 233-234°C.

Exemplo 3 l-Metoxi-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino Γ1.2-bl -cruinolin-9 (11ΗΪ -ona

Suspendeu-se (S)-4-etil-4-hidroxi-10-metoxi-lH-pirano[3/, 4':6,7]indolizino[l,2-b]quinolina-3,14(4H,12H)-diona (T.R. Govin-dachari e N. Viswanathan, Indian J. Chem. 1972, 10, 453) (100 mg, 0,28 mmol) em éter tetraetilenoglicol-dimetílico (2 ml), aqueceu-se ao refluxo durante 3 minutos e deixou-se arrefecer até à temperatura ambiente. 0 sólido que se formou foi suspenso em Et20, recolhido por filtração e seco. 0 sólido foi purificado por cromatografia em coluna em alumina básica (desactivada por adição de 15% em peso de H20), eluindo com CH2C12. 0 sólido obtido foi ainda purificado por cromatografia radial em sílica-gel, eluindo com 2% de MeOH em CH2C12 para proporcionar o composto do título sob a forma de um sólido "beige". RMN (CDClg) S 8,80 (s largo, 1H), 7,77 (d largo, J = 8,7 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 8,7, 7,3 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 6,94 (d largo, J = 7,4 Hz, 1H), 5,27 (d, J = = 1,0 Hz, 2H), 4,06 (ε, 3H), 2,91 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 2,30 (s, 3H), 1,24 (t, J = 7,3 Hz, 3H). Anal. Cale para C20H18N2O3: C, 71,84? H, 5,43; N, 8,38. Encontrado: C, 71,51; H, 5,42; N, 8,45.

Exemplo 4 3-Metoxi-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino Γ1,2-b) -quinolin-9(11H)-ona

Aqueceu-se ao refluxo durante 2,5 horas (±)-4-etil-4--hidroxi-8-metoxi-lH-pirano[3/,4': 6,7]indolizino[l,2-b]quinoli- na-3,14-(4H,12H)-diona (100 mg, 0,26 mmol) (preparada pelo método de M.E. Wall, M.C. Wani, S.M. Natschke e A. W. Nicholas, J. Med. Chem. 1986, 29, 1553) em éter trietilenoglicol-dimetílico (2 ml) sob uma atmosfera de árgon. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, adicionou-se hexano e a mistura foi deixada repousar durante 30 minutos. O sólido que se formou foi recolhido por filtração e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. 0 resíduo foi tratado com hexano e solvente foi removido por -34- 73 308 14539-1 decantação. 0 resíduo oleoso e o material sólido foram combinados e purificados por cromatografia em coluna em alumina básica (desactivada por adição de 15% em peso de H20), eluindo com 1% de MeOH em CH2CI2· O material que foi recolhido foi tratado com MeOH (2 ml) e após tratamento ultrassónico, formou-se um sólido que foi recolhido por filtração para proporcionar o composto do título. l-H RMN (CDCI3) δ 8,29 (s, 1H) , 7,80 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,20 (m, 2H), 5,26 (s, 2H), 4,00 (s, 3H), 2,91 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 2,29 (s, 3H), 1,24 (t, J = 7,3 Hz, 3H). Anal. Cale para C20H18N203·1/4 H20: c/ 70,89; H, 5,35; N, 8,27. Encontrado: C, 70,77? H, 5,39; N, 8,12.

Exemplo 5 7—11-Hidroxiiminopropil^-8-metilindolizino Γ1.2-blauinolin- -9fΙΙΗΪ-ona

Aqueceu-se a 100“C durante 20 horas uma solução de 8-metil--7-(l-oxopropil)indolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (112 mg, 0,37 mmol) e sulfato de hidroxilamina (224 g, 1,36 mmol) numa mistura de 5 ml de EtOH absoluto e 7 ml de piridina. A mistura reaccional foi deixada arrefecer à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi suspenso em H20 (8 ml) e o pH foi ajustado a pH 6 com NaOH a 10% (1 gota). A mistura foi agitada durante 10 minutos e filtrada. 0 sólido que se recolheu foi recristalizado em EtOH a 95%, obtendo-se o composto do título sob a forma de uma mistura hidratada de quantidades aproximadamente iguais dos isómeros sin e anti, p.f.261-263°C (dec). % RMN (CDCl3/MeOH-d4) δ 8,43 (s, 1H), 8,2--7,5 (m, 4H), 7,28 e 7,18 (2s, 1H), 5,23 (s largo, 2H), 2,78 e 2,55 (2q, J = 7,5 Hz, 2H), 2,24 e 2,17 (2s, 3H), 1,13 e 1,09 (2t, J = 7,5 Hz, 3H). Anal. Cale. para CigH17N302.9/10 H20: C, 68,01; H, 5,65; N, 12,52. Encontrado: C, 68,09; H, 5,68; N, 12,19.

Exemplo 6 (±)7-(1-Aminopropil)-8-metilindolizino Γ1.2-blouinolin-9(11ΗΪ- -ona. Hidrocloreto A uma solução de 7-(1-hidroxiiminopropil)-8-metilindoli-zino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (60g, 0,19mmol) em EtOH a 95% (4 ml) a 0eC adicionou-se NaOH a 10% (4 ml), seguido de liga de -35- 73 308 14539-1 r r níquel-alumínio. (130 mg). A mistura reaccional foi deixada arrefecer à temperatura ambiente. Após agitação durante 2 dias, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Adicionou-se água (15 ml) ao resíduo, o qual foi em seguida extractado com CHC13 (3X10 ml). Os extractos orgânicos combinados foram evaporados in vacuo. e o resíduo foi purificado por cromatografia "flash" em sílica-gel, eluindo com um gradiente de solvente de 0-10% de MeOH em CHCI3 para dar, após evaporação do solvente, um pó amarelo claro. Adicionaram-se duas gotas de HC1 concentrado a uma suspensão do pó em água (1 ml) e deixou-se a mistura repousar durante a noite. A mistura foi filtrada e o sólido foi lavado com acetonitrilo, seguido de Et20, proporcionando o composto do título amarelo esverdeado. ΧΗ RMN (D20/DC1, HOD a 5 4,55) δ 7,43 (s, 1H), 7,17-6,66 (m, 5H), 3,81 (s largo, 2H), 2,0-1,7 (m largo, 5H), 0,85 (t largo, J = 7,5 Hz, 3H).

Exemplo 7 (±) 7-( 1-Hidroxipropil) -8-metilindolizino f 1.2-bl cruinolin-9 (11H) - -ona

Preparada pelo método de T. Kametani, H. Takeda, H. Nemoto e K. Fukumoto, J. Chem. Soe., Perkin Trans I.. 1975, 1825.

Exemplo 8 (±)7-(1-Bromopropil)-8-metilindolizinoΓ1,2-b1auinolin-9f11H)- -ona

Aqueceu-se, a 85“C sob uma atmosfera de árgon, uma solução de (±)7-(1-hidroxipropil)-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin--9(llH)-ona (700 mg, 2,3 mmol) em brometo de tionilo (10 ml, 0,13mol). Após 1,5 horas, o brometo de tionilo em excesso foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido numa mistura de MeOH (1 ml) e CH2CI2 (20 ml). Depois de repousar durante a noite a 0°C, o sólido que se formou foi recolhido por filtração, lavado com CH2C12 e seco, obtendo-se o composto do título sob a forma de um sal hidrobrometo. Este sal foi dissolvido em 10% de H20 em MeOH (370 ml) e deixado repousar à temperatura ambiente durante a noite. A solução de cor amarela tornou-se gradualmente incolor e o solvente foi removido in vacuo. 0 resíduo foi tratado com mais 10% de H2o em MeOH e o

73 308 14539-1 -36- sólido que se formou foi recolhido por filtração. 0 filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi tratado com 10% de H20 em MeOH. 0 sólido que se formou foi recolhido por filtração. Os sólidos foram combinados para proporcionarem o composto do título sob a forma de um hidrato. ^ RMN (CDC13) 5 8/34 (S largo/1H), 8,0-7/5 (m, 4H)7 7,49 (s, 1H), 5,28 (d, J = = 1,1 Hz, 2H), 5,13 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 2,45-2,20 (m obscurecido, 2H), 2,34 (s, 3H), 1,06 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Anal. CalC. para CigH17BrN20.5/8 H20: C, 59,97; H, 4,83; N, 7,36. Encontrado: C, 59,92; H, 4,84; N, 7,40.

Exemolo 9 8-Metil-7-rifE)-propenil1indolizinori.2-blauinolin-9(11H)--ona A 110 mg (0,36 mmol) de (±)7-(l-hidroxipropil)-8-metil-indolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona, num balão seco, sob uma atmosfera de árgon, adicionou-se uma solução de 680 mg (Ϊ,Ο mmol) de bis [a, a-bis (trifluorometil)benzenometanolato ] difenilen- xofre em 5,5 ml de CH2C12 seco. 0 sólido dissolveu-se todo num minuto. Após 1 hora a mistura reaccional foi adicionada a uma coluna de 25 g de sílica-gel em CH2C12. Depois da eluição inicial com CH2Cl2, o produto foi removido com 2% de MeOH em CH2C12. o resíduo amarelo resultante foi triturado com MeOH, obtendo-se o composto do título puro sob a forma de um hidrato, p.f.283-4°C (dec). λΕ RMN (CDC13) 5 8,30 (d, J = 0,6 Hz, 1H), 8,19 (dd, J = = 8,3, 0,6 Hz, 1H) 7,89 (dd, J = 8,1, 1,2 Hz, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,61 (m, 1H), 7,44 (s, 1H), 6,69 (dd largo, J = 15,7, 1,1 Hz, 1H), 6,56 (dq, J = 15,6, 6,1 Hz, 1H), 5,24 (d, J = 1,0 Hz, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,00 (d largo, J = 5,3 Hz, 3H). Anal. Cale. para C19H16N2O.1/8H20: C, 78,53; H, 5,64; N, 9,64. Encontrado: C, 78,47; H, 5,73; N, 9,53.

Exemplo 10 (±)7-(treo-1,2-Di-hidroxipropil)8-metilindoli zino Γ1.2-blauinolin-9 (llH)-ona A uma suspensão de 55 mg (0,19 mmol) de 8-metil-7-[l(E)--propenil]indolizino[l,2-b]quinolin-9(HH)-ona em 2,0 ml de piridina seca, adicionaram-se 77 mg (0,30 mmol) de tetróxido de 73 308 14539-1 -37- β) tr Λ»'

ósmio. A mistura reaccional enegreceu imediatamente e o sólido dissolveu-se. Em 5 minutos precipitou um sólido ligeiramente corado. Após 1 hora, adicionou-se hexano (-10 ml) à mistura reaccional para completar a precipitação do éster osmato que foi recolhido por filtração. Fez-se borbulhar sulfureto de hidrogénio numa solução do éster osmato em CH2C12 durante -1 hora e removeu-se por filtração o precipitado preto de sulfureto de ósmio resultante. 0 filtrado originou um sólido amarelo claro que foi triturado com MeOH, obtendo-se o composto do título sob a forma de um hidrato, p.f.267-9°C (dec). 1H rmn (CDCl3/MeOH-d4, referido a CD2HOD a δ 3,35) δ 8,44 (s, 1H), 8,11 (d, J = 8,5 Hz, 1H) 7,93 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,80 (dt aparente, J = 7,2, 1,1 Hz, 1H), 7,64 (m, 2H), 5,25 (s, 2H), 4,79 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 3,98 (quinteto, J = 6,3 Hz, 1H),2,31 (s, 3H), 1,19 (d , J = 6,4 Hz, 3H). Anal. Cale. para C19H18N2030.7/8H20: C, 67,49; H, 5,89; N, 8,28. Encontrado: C, 67,58; H, 5,65; N, 8,35.

Exemplo 11 (±)7-Γ(Hidroxi ^metoximetill-8-metilindolizino Γ1.2-blquinolin- 9(11H^-ona A uma solução de 34,5 mg (0,10 mmol) de (±)7-(treo-l,2-di--hidroxipropil)-8-metilindolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona em 5 ml de ácido acético glacial adicionou-se ao longo de 3 minutos uma solução de 32,5 mg (0,15 mmol) de periodato de sódio em l ml de água. Após 1 hora adicionaram-se 6 gotas de etilenoglicol para destruir o periodato em excesso e a mistura reaccional foi destilada ("stripped") até à secura in vacuo. O resíduo resultante foi triturado com H20 e, em seguida, dissolvido em CH2C12 quente mais MeOH. Depois da filtração, a solução foi destilada e adicionou-se MeOH para produzir um sólido limpo. A % RMN mostrou que , em vez do esperado 7-carboxaldeído, o produto era o composto do título, um hemiacetal do carboxaldeído com MeOH que deu na análise um hidrato, p.f.284-6"C (dec). ^H RMN (CDCl3/MeOH-d4) δ 8,47 (s, 1H), 8,15 (d, J = 8,5 Hz, 1H) , 7,97 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,82 (m, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,68 (m, 1H), 5,71 (s, 1H), 5,28 (s, 2H), 3,64 (s, 3H), 2,33 (s, 3H). Anal. Cale. para C18H16N203.1/2 H20: C, 68,13; H, 5,40; N, 8,83. Encontrado: C, 68,27; H, 5,36; N, 8,58.

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Exemplo 12 7-( Hidroximetil) -8-metilindolizino Γ1,2-bl auinolin-9 (11ΗΪ -ona A uma solução de 34,0 mg (0,10 mmol) de (±)7-(treo-l,2-di-hidroxipropil)-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin--9(llH)-ona em 5,0 ml de ácido acético glacial adicionou-se ao longo de 1,5 minutos uma solução de 32,1 mg (0,15 mmol) de periodato de sódio em 1 ml de H20. Após 0,75 horas adicionaram-se 6 gotas de etilenoglicol para destruir o periodato em excesso. Após 2 horas adicionaram-se 32,8 mg (0,52 mmol) de cianoboro-hidreto de sódio. Depois de mais 1 hora, a mistura reaccional foi destilada in vacuo. adicionou-se H20 e recolheu-se um sólido amarelo. 0 sólido foi dissolvido em CH2C12 quente mais MeOH e a solução foi filtrada e destilada até à secura. 0 resíduo foi triturado com MeOH, obtendo-se o composto do título sob a forma de um hidrato, p.f.>320eC. λΕ RMN (CDCl3/MeOH-d4) δ 8,51 (s largo, 1H), 8,20 (d largo, J = 9,0 Hz, 1H), 8,01 (d largo, J = = 8,4 Hz, 1H), 7,86 (m, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,69 (m, 1H), 5,31 (s, 2H) , 4,74 (s, 2H) , 2,23 (s, 3H). Anal. Cale. para C17H14N2°2,1/2H20: c' 71/°7'* H/ 5,26; N, 9,75. Encontrado: C, 70,75; H, 5,12; N, 9,52.

Exemplo 13 7-f2-Etil-l.3-dioxolan-2-il)-2-hidroxi-8-metilindoli-zino Γ1.2-blauinolin-9(11H)-ona 13A. 7-f2-Etil-1.3-dioxolan-2-ill-8-metilindolizinoΓ1,2-bl- cruinolin-9 (11H1-ona

Fez-se borbulhar cloreto de hidrogénio gasoso numa suspensão de 15,0 g (49 mmol) de 8-metil-7-(l-oxopropil)indoli-zino[1,2-b]quinolin-9(llH)-ona em 150 ml de etilenoglicol (exotérmico) e fez-se a dissolução gradual do sólido. Quando a solução ficou saturada com cloreto de hidrogénio, aqueceu-se num banho de vapor durante 40 minutos e em seguida deixou-se arrefecer até à temperatura ambiente. Depois de repousar durante a noite, a solução viscosa foi deitada num litro de uma mistura de gelo e hidróxido de amónio concentrado para produzir um sólido de cor bronze. Esta mistura foi extractada três vezes com 1 1 de CH2C12. Após lavagem com 500 ml de H20, a solução de CH2Cl2 foi 73 308 14539-1

-39- seca sobre sulfato de sódio e evaporada. O resíduo foi cristalizado em 3,5 1 de acetonitrilo, obtendo-se agulhas castanhas âmbar do composto do título, p.f. 272-4 °C. -*-H RMN (CDCI3) S 8,31 (s, 1H), 8,20 (d largo, J = 8,1 Hz, 1H), 7,86-7,50 (m, 3H), 7,58 (s, 1H), 5,25 (d, J = 1,1 Hz, 2H), 4,05 (m, 2H), 3,85 (m, 2H) 2,45 (s, 3H), 2,02 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 1,06 (t, J = 7,4 Hz, 3H). Anal. Cale para C21H2oN2°3: c/ 72,40; H, 5,79; N, 8,04. Encontrado; C, 72,37; H, 5,65; N, 8,26. 13B. 7-(2-Etil-l,3-dioxolan-2-il)-5.5a,11a.12-tetra-hidro-8- -metilindolizino Γ1.2-blauinolin-9(11H)-ona A uma solução de 1,39 g (4,00 mmol) de 7-(2-etil-l,3--dioxolan-2-il)-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona em 100 ml de ácido acético glacial adicionou-se cianoboro-hidreto de sódio (1,60 g, 25,5 mmol) durante 2 minutos. A reacção virou de cor-de-laranja para amarelo. Após 50 minutos, removeu-se o ácido acético em vácuo. O resíduo foi retomado em CH2CI2 e a solução foi lavada com H20 e depois seca sobre sulfato de sódio e destilada. A espuma resultante foi triturada com acetona para proporcionar o composto do título sob a forma de uma mistura sólida de dois isómeros, p.f. 218-222°c. As experiências de ΧΗ RMN NOE mostraram que o isómero trans predominava. RMN (CDCI3) S 7,13 - 6,97 (m, 2H), 6,85-6,58 (m, 2H), 6,47 e 6,42 (2 s largos, 1H), 4,82 e 4,64 (m e dd, J = 12,2, 7,1 Hz, 1H), 4,40-4,05 (m, 2H), 4,03 (m, 2H) 3,78 (m, 2H), 3,57 (t, J = 11,7 HZ, 1H), 3,05 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 2,85-2,42 (2m, 1H), 2,29 (2s, 3H), 1,94 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 0,94 (t, J *= 7,5 Hz, 3H). Anal.

Cale para C21H24N2°3: C, 71,57; H, 6,86; N, 7,95. Encontrado: C, 71,51; H, 6,91; N, 8,02. 13C. 7-f 2-Etil-l.3-dioxolan-2-il)-2-hidroxi-8-metilindolizino- -f1.2-blauinolin-9(11H)-ona A 7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-5,5a,11a,12-tetra-hidro-8--metilindolizino[l,2-b]-quinolin-9(11H)-ona foi preparada como anteriormente, a partir de 6,96 g (20,0 mmol) de 7-(2-etil-l,3--dioxolan-2-il)-8-metilindolizino[1,2-b] quinolin-9(11H)-ona, mas o produto não foi triturado com acetona mas redissolvido em 275 ml de ácido acético glacial. A esta solução adicionaram-se 350 ml 73 308 14539-1

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c^Sw-lãiSgíií de H20 e depois, gota a gota durante 10 minutos, uma solução de 19,3 g (60 mmol) de diacetato de iodobenzeno em 225 ml de ácido acético glacial morno. Após 45 minutos, a reacção foi destilada até à secura em vácuo. O resíduo foi extractado com CH2C12 quente mais MeOH. 0 extracto foi destilado até à secura e redissolvido em CH2C12 mais uma quantidades mínimas de MeOH e depois adicionado a uma coluna de 1,5 kg de sílica-gel em CH2C12. Depois de se eluir com 4 1 de CH2C12 usaram-se 14 1 de 3% de MeOH em CH2C12 para eluir a maior parte do produto, usando como "caçador" ("chaser") MeOH a 5%. Com base na TLC (8% de MeOH em CH2C12), combinaram-se as fracções em conjuntos de 7-(2-etil--1,3-dioxolan-2-il)-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona recuperada e produto. Ambos os materiais foram triturados com MeOH para produzir sólidos amarelos; 1,73 g de material de partida recuperado limpo e 2,35 g (43% com base no material de partida consumido) do composto do título sob a forma de um solvato de metanol, p.f. >300 °C. % RMN (CDCl3/MeOH-d4) δ 8,17 (S, 1H), 8,05 (d, J = 9,2 HZ, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,42 (dd, J = = 9,2, 2,6 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 0,8 HZ, 2H), 4,08 (m, 2H), 3,85 (m, 2H), 2,44 (S, 3H), 2,02 (q, J = = 7,4 Hz, 2H), 0,98 (t, J = 7,4 Hz, 3H). Anal. Cale para C21H20N2°4·1/10 CH3OH: C, 68,94; H, 5,59; N, 7,62. Encontrado; C, 68,74; H, 5,73; N, 7,36.

Exemplo 14 2-Hidroxi-8-metil-7-fl-oxopropil^indolizinori,2-bl-auinolin-9(11H)-ona A uma suspensão de 7-(2-etil-l,3-dioxolanil)-2-hidroxi-8--metilindolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (25 mg, 69 mmol) em ácido acético glacial (2,4 ml) adicionou-se HC1 2N (0,20 ml) e a mistura resultante foi aquecida a 70 °C durante 1 hora. A mistura reaccional foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente e o solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi triturado com H20 (2 ml) para proporcionar um sólido amarelo pálido que foi recolhido por filtração, lavado com H20 e seco para proporcionar o composto do título sob a forma de um hidrato, p.f. >305 °C ^ RMN (DMS0-d6) S 8,35 (S, 1H), 7,90 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,33 (dd, J = 9,1, 2,7 HZ, 1H), 7,19 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,12 (s, 1H), 73 308 14539-1 -41-5,13 (s, 2H), 2,89 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,01 (s, 3H), 1,03 (t, J = 7,1 Hz, 3H) . Anal. Cale para .H20: C, 67,45; H, 5,36; N, 8,28. Encontrado: C, 67,34; H, 5,28; N, 8,06.

Exemplo 15 2-Metoxi-8-metil-7-(l-oxopropil)indolizinori.2-bl-quinolin-9(11H^-ona

A uma suspensão de 2-hidroxi-8-metil-7-(l-oxopropil)indoli-zino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona (160 mg, 0,50 mmol) em dimetilformamida (2 ml) sob uma atmosfera de árgon adicionou-se K2C03 (345 mg, 2,5 mmol). Depois de se agitar 20 minutos à temperatura ambiente, adicionou-se iodeto de metilo (31 ml, 0,5 mmol) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A análise por cromatografia de camada fina indicou que a reacção estava incompleta e adicionou-se mais iodeto de metilo (16 ml, 0,25 mmol). Depois de se agitar à temperatura ambiente durante a noite, a mistura reaccional foi concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi submetido a partição entre H20 e CH2C12. A fase aquosa foi extractada com CH2C12 (2x) e os extractos orgânicos combinados foram secos (Na2S04). 0 solvente foi removido em vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia "flash" em sílica-gel, eluindo com um gradiente de solvente de 0-2% de MeOH em CH2C12. Obteve-se um material cristalino amarelo que foi recristalizado em MeOH/CH2Cl2. % RMN (CDCI3) δ 8,22 (S, 1H) , 8,07 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 7,46 (dd, J = 9,3, 2,8 Hz, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,14 (d, J = = 2,8 HZ, 1H), 5,25 (d, J = 0,9 Hz, 2H), 3,98 (s, 3H), 2,90 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 2,28 (s, 3H), 1,24 (t, J = 7,3 Hz, 3H). Anal. Cale para c20H18N2o3: c, 71,84; H, 5,43; N, 8,38. Encontrado: C, 71,72; H, 5,63; N, 8,21.

Exemplo 16 2-(4-Etoxi-l,4-dioxo-l-butanil)oxi-8-metil-7-(1-oxopropil)--indolizino Γ1.2-b1auinolin-9(11H)-ona A uma mistura de 2-hidroxi-8-metil-7-(1-oxopropil)--indolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (160 mg, 0,5 mmol) em DMF anidra (12 ml) sob uma atmosfera de árgon, adicionou-se hidreto de sódio (19 mg de dispersão em óleo mineral a 80%, 0,55 mmol).

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Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 30 min, adicionou-se cloreto de etilsuccinilo (78 ml, 0,55 mmol). A mistura resultante foi deixada agitar durante a noite à temperatura ambiente e, em seguida, foi submetida a partição entre H20 e CH2CI2· A fase aquosa foi extractada com CH2CI2 e os extractos orgânicos combinados foram secos (Na2so4). 0 solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado por cromatografia flash, eluindo com 2% de MeOH em CH2C12. 0 material que foi isolado foi filtrado através de uma pequena coluna de alumina desactivada, eluindo com CH2C12 , obtendo-se o composto do título sob a forma de um sólido cor-de-rosa claro. -^H RMN (CDCI3) δ 8,30 (s, 1H), 8,19 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,69 (d, J = = 2,5 Hz, 1H), 7,56 (dd, J = 9,2, 2,5 Hz, 1H),7,25 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 2,5 Hz, 2H), 4,21 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,95 (m, 4H), 2,80 (m, 2H), 1,30 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,24 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Anal. Cale. para C25H24N2°6; C, 66,95, H, 5,39; N, 6,25. Encontrado: C, 67,07; H, 5,65; N, 6,08.

Exemplo 17 8-Metil-7-f1-oxopropil)indolizinoTl.2-b1auinolin-9f11H)--οη-2-il-Γ1.4·-bipjperidinal-1'-carboxilato, Hidrocloreto A uma suspensão agitada de 3,0 g (9,4 mmol) de (S)-4-etil--4,9-di-hidroxi-lH-pirano[ 3,4': 6,7 ]indolizino[1,2-b]quinolina--3,14(4H,12H)-diona em 128 ml de piridina seca sob árgon adicionaram-se, numa só porção, 5,00 g (18,7 mmol) hidrocloreto de cloreto de [l,4,-bipiperidina]-l,-carbonilo. Depois de se agitar durante a noite, adicionou-se mais uma porção de 1,00 g (3,74 mmol) de cloreto de carbonilo. Depois de se agitar durante uma segunda noite, adicionou-se uma porção final de 0,75 g (2,8 mmol) de cloreto de carbonilo e a reacção foi agitada durante mais uma noite. A mistura reaccional foi evaporada até à secura sob vácuo elevado e o resíduo foi retomado numa mistura de 200 ml de CH2C12 e 200 ml de H20, adicionando-se bicarbonato de sódio sólido para elevar o pH a 7. Em seguida separam-se as camadas e a fase aquosa foi extractada duas vezes com 250 ml de CH2Cl2· Depois de se secar sobre sulfato de sódio anidro, a fase orgânica escura foi feita descer através de uma coluna de 200 g de alumina básica que tinha sido desactivada com 40 ml de água. A eluição

73 308 14539-1 -43-com CH2CI2 e a evaporação do eluído originou 4,0 g de sólido dourado. Este material foi cromatografado numa coluna "flash" de sílica-gel, eluindo primeiro com CH2C12 e depois com um gradiente de 2-10% de MeOH em CHgC^· As fracções contendo produto foram combinadas e destiladas até se obterem 3,4 g da base livre do composto do título sob a forma de um sólido amarelo pálido, p.f. 178-183°C. Anal. Cale. para C30H34N4O4.l/2H2O: C, 68,81; H, 6,74; N, 10,70. Encontrado: C, 69,13; H, 6,97; N, 10,75. A uma suspensão da base livre (13,4 mg, 25,6 μτ&οΐ) em 2 ml de água adicionaram-se 15 βΐ de ácido clorídrico 2N e a suspensão foi submetida a tratamento ultrassónico para conseguir a dissolução. A liofilização originou 15,4 mg do composto do título, amarelo brilhante, sob a forma de um hidrato. Anal. Cale. para c30H34N4°4*HC-l-*3H2O: C, 59,55; H, 6,83; N, 9,26. Encontrado: C, 59,40; H, 6,34; N, 9,26.

Exemplo 18 l-Bromo-2-hidroxi-8-metil-7-( 1-oxopropil )indolizino Γ1.2-bl - quinolin-9(11H)-ona 18A. l-Bromo-7-(2-etil-l.3-dioxolan-2-il)-2-hidroxi-8-metil-indolizinori.2-blguino1in-9(11H)-ona A uma suspensão agitada de 7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-2-hidroxi-8-metilindolizino[l,2-b]guinolin-9(HH)-ona (0,50 g, 1,37 mmol) e acetato de sódio (1,23 g, 15,0 mmol) em ácido acético glacial (10 ml) sob uma atmosfera de árgon, adicionou-se Br2 (76ml). Depois de se agitar durante 4 h à temperatura ambiente, adicionou-se mais Br2 (10 ml) e a mistura reaccional foi deixada agitar durante a noite. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi submetido a partição entre CH2C12 e H20 e filtrado. As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extractada com CH2C12. Os extractos orgânicos combinados foram secos (Na2S04) e evaporados in vacuo. 0 resíduo foi purificado por cromatografia "flash" em sílica-gel, eluindo com 2% de MeOH em CH2C12, obtendo-se um sólido branco-sujo que foi recristalizado em MeOH em CH2C12. 1H RMN (CDCl3/MeOH-d4) S 8,70 (d, J = 0,8 HZ, 1H), 8,04 (dd, J = 9,2, 0,7 HZ, 1H), 7,61 (S, -44- 73 308 14539-1 1Η), 7,53 (d, J = 9,2, HZ, 1H), 5,28 (d, J = 1,1 Hz, 2H), 4,09 (m, 2H), 3,86 (m, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,03 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 0,99 (t, J = 7,4 Hz, 3H). Anal. Cale. para c2lHi9BrN2°4·3/4 H20: C, 55,22, H, 4,52; N, 6,13. Encontrado; C, 55,05; H, 4,67; N, 6,16. 18B. l-Bromo-2-hidroxi-8-metil-7-(1-oxopropil) indolizino Γ1.2-bl -quinolin-9(11H)-ona

Tratou-se uma mistura de l-bromo-7-(2-etil-l,3--dioxolan-2-il)-2-hidroxi-8-metilindolizino[1,2-b]guinolin-9--(llH)-ona (12 mg, 27 mmol) em ácido acético glacial (lml), sob uma atmosfera de árgon, com HC1 2N (100 ml). A mistura reaccional foi aquecida a 80"C durante 3,5 h e em seguida foi deixada arrefecer e foi evaporada sob pressão reduzida. 0 resíduo cor-de-laranja sólido foi tratado com H20 (vários ml) , sonicado, filtrado e lavado com H20 fria, obtendo-se o composto do título. 1H RMN (CDCI3) 8 8,84 (s, 1H), 8,11 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 9,2 HZ, 1H), 7,48 (S, 1H), 5,35 (S, 2H), 2,97 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,29(s, 3H), 1,26 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Anal. Cale. para c19H15BrN2°3*5/8 h20: C' 55/57/ 3,99; N, 6,80. Encontrado; C, 55,54; H, 4,34; N, 6,83.

Exemplo 19 1-fDimetilamino)metil-2-hidroxi-8-metil-7-(1-oxopropil)-indolizino Γ1.2-b1auinolin-9(11H)-ona. Hidrocloreto 19A. 1-fDimetilamino^metil-7-f 2-etil-l.3-dioxolan-2-il)-2-hi-droxi-8-metilindolizino Γ1.2-blauinolin-9(llH)-ona

Agitou-se durante 1,25 horas uma mistura de 7-(2-etil-l,3--dioxolan-2-il) -2-hidroxi-8-metilindolizino [1,2-b]quinolin-9--(llH)-ona (36,4 mg, 0,100 mmol) e tetrametildiaminometano (51 mg, 0,50 mmol) em 2 ml de ácido glacial mais 2 ml de CH2C12 e em seguida "destilou-se·1 em vácuo. Adicionou-se acetona ao resíduo e formaram-se cristais do composto do titulo, p.f. >300 °c. ^H RMN (CDCI3) 8 8,31 (s, 1H), 8,05 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,38 (d, J = 9,2 HZ, 1H), 5,23 (S, 2H), 4,13 (s, 2H), 4,06 (m, 2H), 3,85 (m, 2H), 2,46 (s, 6H), 2,44 (s, 3H), 2,01 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 0,97 (t, J s= 7,4 Hz, 3H). Anal. Cale para C24H27N304; C,

73 308 14539-1 -45- 68,39; Η, 6,46; Ν, 9,97. Encontrado: C, 68,72; Η, 6,71; Ν, 9,67. 19Β.1—(Dimetilamino)metil-2-hidroxi-8-metil-7-(1-oxopropil)indo-lizinon.2-b1 quinolin-9 (11H)-ona. Hidrocloreto

Aqueceu-se a 70°C, durante 50 minutos, uma solução de 24,1 mg (0,057 mmol) de l-(dimetilamino)metil-7-(2-etil-l,3-dioxolan--2-il)-2-hidroxi-8-metilindolizino [1,2-b]quinolin-9(11H)-ona em 2 ml de ácido acético glacial mais 0,25 ml de ácido clorídrico 2N e em seguida destilou-se até à secura em vácuo. Adicionou-se água e a solução foi de novo destilada. Adicionou-se um pouco de água para provocar a dissolução parcial e em seguida adicionou-se bastante acetona para se obter o composto do título sob a forma de um sólido amarelo fino. A % RMN mostrou a presença de 1/4 de mole de etileno glicol, que foi confirmada por análise elementar, a qual indicou também 1 mole de água de hidratação. ^-H RMN (TFA-d1) δ 9,65 (s largo, 1H), 8,70 (d largo, 2H), 8,16 (m, 2H), 5,92 (s largo, 2H), 5,08 (s largo, 2H), 4,09 (s, 1H), 3,21 (s, 6H), 3,15 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,50 (s, 3H), 1,39 (t, J = 7,1 Hz, 3H). Anal. Cale para C22H24CIN3O3.I/4 C2H602.H20: C, 60,40; H, 6,19; N, 9,39. Encontrado: C, 60,15; H, 6,19; N, 9,11.

Exemplo 20 2-Ciano-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino Γ1.2-bl-auinolin-9fllH)-ona 20A.7-(2-Etil-l.3-dioxolan-2-il^-8-metil-2-trifluorometil-sulfo-niloxiindolizinori,2-b1quinolin-9f11ΗΪ-ona A uma solução de 7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-2-hidroxi-8--metilindolizino[l,2-b]quinolin-9(11H)-ona (109 mg, 0,30 mmol) em dimetilformamida (20 ml) adicionaram-se N-feniltrifluo-rometanossulfonimida (161 mg, 0,45 mmol) e trietilamina (0,13 ml, 0,9 mmol). A mistura resultante foi aquecida a 55°C durante 1,5 horas, deixada arrefecer até à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado por cromatografia "flash" em sílica-gel, eluindo com um gradiente de solvente de 0-2% de MeOH em CH2C12 para proporcionar o composto do título sob a forma de um sólido amarelo, p.f. 250-1°C. % RMN (CDCI3) δ 8,38 (s, 1H), 8,30 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,68 -46- -46- Λ 73 308 14539-1

(dd, J = 9,3, 2,7 HZ, 1H), 7,60 (s, 1H), 2H), 4,08 (m, 2H), 3,85 (m, 2H), 2,48 (s, Hz, 2H}, 0,99 (t, J = 7,4 Hz, 3H). C22H19F3N206S,:L/2 H20: C' 52/28'* H/ 3/99? N 5,30 3H), (d, J = 1,0 Hz, 2,02 (q, J = 7,4

Anal. Cale. para , 5,54. Encontrado: C, 52,51; H, 3,86; N, 5,50. 20B. 2-Ciano-7-if 2-etil-l. 3-dioxolan-2-il)-8-metilindolizinori. 2--b1auinolin-9(llH^-ona

Aqueceu-se ao refluxo durante 2 horas uma mistura contendo tetraquis(trifenilfosfina)paládio (322 mg, 0,28 mmol) e cianeto de tri-n-butilestanho (242 mg, 0,77 mmol) em 1,2-dicloroetano anidro (3 ml) sob uma atmosfera de árgon e em seguida adicionou--se uma solução de 7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8-metil-2--trifluorometilsulfoniloxiindolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona (119 mg, 0,24 mmol) em 1,2-dicloroetano anidro (2,5 ml). A mistura reaccional foi mantida em refluxo durante mais 1,3 horas e depois foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente. Os cristais amarelos que se formaram após arrefecimento foram recolhidos por filtração e secos em vácuo para produzir o composto do título, p.f. >320°C. ΧΗ RMN (CDCI3) S 8,47 (s, 1H), 8,36 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 8,30 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,95 (dd, J = = 8,8, 1,8 HZ, 1H), 7,70 (S, 1H), 5,31 (d, J = 0,8 Hz, 2H), 4,10 (m, 2H), 3,86 (m, 2H), 2,47 (s, 3H) , 2,02 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 0,99 (t, J = 7,4 Hz). Anal. Cale. para C22H19N3°3·0'03 ΰ2Η4012: C, 70,39; H, 5,12; N, 11,16. Encontrado: C, 70,09; H, 5,09; N, 11,01. 20C. 2-Ciano-8-metil-7-(1-oxopropil^ indolizino Γ1.2-b1quinolin--9íllH)-ona A uma suspensão de 2-ciano-7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8--metilindolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (18,9 mg, 0,05 mmol) em ácido acético (20 ml) adicionou-se HC1 2 N (0,25 ml, 0,5 mmol). A mistura resultante foi aquecida a 70DC durante 2,3 horas e depois deixada arrefecer. Adicionaram-se acetato de sódio (41 mg, 0,5 mmol) e H2O e concentrou-se a mistura sob pressão reduzida. Adicionou-se cloreto de metileno, contendo algumas gotas de MeOH, ao resíduo e removeu-se o sólido que se formou, por filtração. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida.

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Adicionou-se metanol ao resíduo e após tratamento ultrassónico/ o sólido que se formou foi recolhido por filtração e seco em vácuo para proporcionar o composto do título, p.f. 3 07-9 °C. -^H RMN (CDC13) δ 8,43 (s, 1H), 8,32 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 8,28 (d, J = = 8,8 Hz, 1H), 7,95 (dd, J = 8,8, 1,9 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 5,34 (d, J = 1,0 Hz, 2H), 2,92 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 2,31 (s, 3H), 1,26 (t, J = 7,3 Hz, 3H). Anal. Cale. para C20H15N3°2·1/4 H20: c/ 71,95; H, 4,68; N, 12,59. Encontrado: C, 72,07; H, 4,69; N, 12,50.

Exeimolo 21 2-Aminometil-8-metil-7-<’l-oxopropil)indolizinof 1.2-blauinolin- 9(11H1-ona. Hidrocloreto A uma mistura de 2-ciano-7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8-metilindolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (48g, 0,13mmol) em ácido acético (15ml) adicionou-se níquel Raney (preparado lavando pasta aquosa a 50%, sucessivamente com H20, etanol absoluto e ácido acético e secando parcialmente para produzir um pó, 79 mg). A mistura resultante foi hidrogenada a 552 kPa de H2 durante 25 horas. A análise por cromatografia de camada fina indicou que a reacção estava incompleta, de modo que se adicionou mais níquel Raney (79 mg da amostra preparada acima) e a mistura reaccional foi hidrogenada a 517 kPa de H2 durante 24 horas. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. 0 resíduo foi tratado com H20 contendo pequenas quantidades de MeOH e ácido acético, e filtrado. 0 filtrado foi purificado por cromatografia de fase inversa (suporte Whatman 40 μΜ ODS-3), eluíndo com um gradiente de solvente de 0-15% de MeOH em H20 para proporcionar 2-aminometil-7-(2-etil-l,3-dioxolan-2--il)-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona, hidroacetato, sob a forma de um sólido amarelo claro. A este material adicionou-se ácido acético (2ml) e HC1 2N (0,30ml, 0,6mmol) e a mistura resultante foi aquecida a 70°C sob uma atmosfera de árgon. Após aquecimento durante 3 horas, a mistura reaccional foi concentrada sob pressão reduzida. Adicionou-se etanol absoluto ao resíduo e, após sonicação, o sólido que se formou foi recolhido por filtração e seco in vacuo. obtendo-se o composto do título. % RMN (TFA-d1/CDCl3) δ 9,39 (m, 1H), 8,62 (m, 2H), 8,46 (m, 1H), 73 308 14539-1 8,20 (m, 1H), 3H), 1,38 (m, H20: C, 62,43;

-48- 3H). Anal. Cale. para C20H20C1N3°2*1/4 c2H6°2*1/2 H, 5,75; N, 10,66. Encontrado: C, 62,16; H, 5,53; N, 10,32.

Exemplo 22 2-Acetil-8-metil-7-(1-oxopropil) indolizino |~1,2-bl -cruinolin-9 (11H) -ona A uma suspensão de 7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8-metil-2--trifluorometilsulfoniloxiindolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona (40 mg, 0,08 mmol) em DMF anidra (0,4 ml) sob uma atmosfera de árgon adicionaram-se, sucessivamente, trietilamina (31 ml, 0,22 mmol), éter n-butilvinilico (71 ml, 0,55 mmol), l,3-bis(difenil-fosfino)propano (1,4 mg, 3,4 mmol) e acetato de paládio (0,6 mg, 2,7 mmol). A mistura resultante foi aquecida a 80eC durante 2,5 h e depois deixada arrefecer e repousar à temperatura ambiente durante a noite. A adição de EtOAc e Et20 provocou a formação de agulhas amarelas claras que foram recolhidas por filtração, lavadas com Et20 e secas; p.f. 215-20°C (dec.). A este material adicionou-se ácido acético glacial (0,3 ml) e HC1 3N (1 gota). A mistura resultante foi deixada agitar à temperatura ambiente durante 3 dias e em seguida foi submetida a partição entre CH2C12 e H20. 0 extracto orgânico foi lavado com H20 (2x) e seco (Na2S04). 0 solvente foi removido em vácuo. A análise de HPLC do resíduo indicou que a reacção estava incompleta. O resíduo foi tratado com ácido acético/HCl 3 N 10:1 (0,3 ml) e a mistura foi aquecida a 70°C durante lhe deixada arrefecer. A mistura foi submetida a partição entre CH2C12 e H20. O extracto orgânico foi lavado com H2o (2x) e seco (Na2S04). O solvente foi removido em vácuo e o resíduo sólido foi recristalizado em 1,2-dicloroetano para proporcionar o composto do título sob a forma de um sólido cristalino amarelo, p.f. 255-7°C. 1H RMN (CDC13) S 8,45 (d largo, 2H), 8,26 (m, 2H), 7,25 (s, 1H), 5,30 (s, 2H), 2,90 (q, 2H), 2,76 (s, 2H) 2,27 (s, 2H) 1,24 (t, 3H). Anal. Cale para C21H18N203: C, 72,82; H, 5,24; N, 8,09. Encontrado: C, 72,86; H, 5,53; N, 7,52.

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Exemplo 23 12-Hidroximetil-8-metll-7-fl-oxopropiDindolizino-ri . 2-b1quinolin-9 (IlEO-ona A uma solução de 8-metil-7-(l-oxopropil)indolizino[l,2-b]-quinolin-9(llH)-ona (91 mg, 0,3 mmol) em MeOH (1 ml) e H2S04 a 50% (2 ml) sob uma atmosfera de árgon a 0°C adicionou-se, simultaneamente, durante um período de 50 minutos, uma mistura de hepta-hidrato de sulfato de ferro (II) (834 mg, 3,0 mmol) em H20 (2 ml) e H202 a 30% (0,35 ml, 3,0 mmol). A mistura resultante foi deixada aquecer à temperatura ambiente e foi agitada durante 24 horas. A análise por cromatografia de camada fina indicou que a reacção estava incompleta e adicionou-se mais H202 a 30% (0,35 ml, 3,0 mmol) durante um período de 45 minutos. Depois de se agitar durante mais 19 horas à temperatura ambiente, a mistura reaccional foi deitada em H20 gelada (50 ml). Adicionou-se bicarbonato de sódio (3,51 g, 42 mmol), lentamente, e a mistura foi filtrada. O filtrado foi extractado com CH2C12 e o sólido que se formou foi removido por filtração. 0 solvente foi removido em vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia "flash" em sílica-gel, eluindo com 5% de MeOH em CH2C12 para proporcionar o composto do título, p.f. 247°C (dec.) ΧΗ RMN (CDCl3/MeOH-d4) δ 8,17 (dd, J = 8,4, 0,8 Hz, 1H), 8,04 (d largo, J = 8,2 Hz, 1H), 7,80 (m, 1H), 7,65 (m, 1H), 7,35 (s, 1H), 5,50 (s, 2H), 5,40 (s, 2H), 2,94 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 2,28 (s, 3H), 1,26 (t, J = 7,3 Hz, 3H). Anal. Cale. para 020Η18Ν203.1/3H20: C, 70,57; H, 5,53; N, 8,23. Encontrado: C, 70,27; H, 5,44; N, 8,22.

Exemplo 24 8-Meti1-7-f1-oxopropil)-12-fenoxiindolizino Γ1,2-blquinolin- -9f HH^-ona 24A. l-(2-etil-l.3-dioxolan-2-il)-8-metilindolizino Γ1.2-blcrui- nolin-9fllH)-ona. 5-óxido

Dissolveu-se 7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8-metilindolizi-no[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (5,00g, l4,4mmol) em ácido acético glacial (75ml) por aquecimento a 65°C. À solução resultante adicionou-se H202 aquosa a 30% (50ml) e a mistura foi aquecida a 65°C durante 5 h e em seguida deixada arrefecer. 0 sólido que se 73 308 14539-1

-50- formou foi recolhido por filtração , lavado com H2O e seco. Obteve-se material adicional por evaporação do filtrado e recristalização do resíduo sólido com MeOH/CH2Cl2, que proporciona o composto do título, p.f. 270-l°C (dec). RMN (CDCI3) δ 8,79 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,32 (S, 1H), 7,97 (d, J = = 8,1 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,86 (ddd, J = 8,4, 7,1, 1,3 Hz, 1H), 7,74 (ddd, J = 8,1, 7,0, 1,1Hz, 1H), 5,29 (d, J = 1,0 Hz, 2H), 4,08 (m, 2H), 3,85 (a, 2H), 2,46 (s, 3H), 2,02 (q, J = 7,4

Hz, 2H) , 0,98 (t, J = 7,4 Hz, 3H). Anal. Cale. para C21H20N2°4·1/4 h20: C' 68,37, H, 5,60; N, 7,59. Encontrado: C, 68,68; H, 5,61; N, 7,50. 24B. 12-Cloro-7-(2-etil-l.3-dioxolan-2-il)-8-metilindolizino-Γ1.2-b1quinolin-9(11H)-ona A uma suspensão de 7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8-metil-indolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona, 5-óxido (1,92 g, 5,3 mmol) em DMF anidra (40ml) adicionou-se cloreto de p-toluenossulfonilo (5,03 g, 56,4 mmol) e piridina (2,1 ml). A mistura resultante foi aquecida a 115°C durante 15 minutos e em seguida deixada arrefecer à temperatura ambiente e cristalizar durante a noite. Adicionou-se metanol à mistura reaccional e recolheram-se os cristais por filtração , lavaram-se com MeOH e secaram-se in vacuo. p.f. 261-3°C. Obteve-se material adicional por evaporação do filtrado, adição de MeOH ao resíduo e filtração. ^-H RMN (CDCI3) δ 8,30 (dd, J = 1,1, 8,5 HZ), 8,22 (dd, J = 0,6, 8,4 Hz), 7,86 (ddd, J = 8,5, 7,0, 1,5 Hz), 7,72 (ddd, J = 1,2, 7,0, 8,2 HZ), 7,56 (s, 1H), 5,28 (s, 2H), 4,05 (m, 2H), 3,87 (m, 2H), 2,47 (S, 3H), 2,02 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 0,98 (t, J = 7,4 Hz, 3H). CIMS (NH3, m/e, rei. int.) 385 (34), 383 (100) [(M+H)+j. Anal. Cale. para C21H19C1N2°3: c, 65,88, H, 5,00; N, 7,32. Encontrado: C, 65,67; H, 4,97; N, 7,37. 24C. 7-f 2-Etil-l,3-dioxolan-2-il)-8-metil-12-fenoxiindolizino- Γ1.2-b 1 quinolin-9 (HH^-ona

Aqueceu-se, a 175°C durante 1,5 h, uma mistura contendo 12-cloro-7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8-metilindolizino[1,2-b]-quinolin-9(11H)-ona (19,2 mg, 0,05 mmol), fenol (94 mg, 1,0 mmol) e carbonato de potássio (6,9 mg, 0,05 mmol) e deixou-se 73 308 14539-1 -51-

arrefecer. A mistura foi dissolvida em CH2C12 e purificada por cromatografia radial em sílica-gel, eluíndo com um gradiente de solvente de 0-2% de MeOH em CH2C12, obtendo-se o composto do título sob a forma de um sólido cristalino, p.f. 290-1°C. EMN (CDC13) S 8,35 (dd, J = 8,4, 0,9 Hz, 1H), 8,22 (dd, J = 8,2, 0,7 Hz, 1H), 7,83 (ddd, J = 8,5, 7,0, 1,5 Hz, 1H), 7,63 (ddd, J = 8,2, 7,0, 1,2 Hz, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,43 (m, 2H), 7,28 (m, 1H), 7,14 (m, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,04 (m, 2H), 3,82 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,00 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 0,94 (t, J = 7,4 Hz, 3H) . Anal. Cale. para C27H24N204.l/4 H20: C, 72,88, H, 5,55; N, 6,30. Encontrado: C, 72,90; H, 5,66; N, 6,14.

24D. 8-Metil-7-(1-oxopropil)-12-fenoxiindolizino Γ1.2-blquinolin--9(llH)-ona A uma solução de 7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8-metil-l2--fenoxiindolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (12 mg, 27 mmol) em ácido acético glacial (1,5 ml) adicionou-se HC1 2N (300 ml). A mistura resultante foi aquecida a 75°C durante 2,5 h e em seguida foi deixada arrefecer à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo e adicionou-se H20 ao resíduo sólido. A sonicação e filtração da mistura proporcionaram o composto do título sob a forma de um sólido amarelo claro, 212-3 °C. ΧΗ RMN (CDCI3) δ 8,38 (dd, J = 8,3, 1,2 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,85 (ddd, J = 8,3, 6,9, 1,4 Hz, 1H), 7,65 (ddd, J = 8,1, 7,0, 1,1 Hz, 1H), 7,45 (m, 2H), 7,30 (m, 1H), 7,18

(m, 3H) , 4,57 (s, 2H), 2,88 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 2,21 (s, 3H), 1,22 (t, J = 7,3 Hz, 3H). Anal. Cale. para C25H20N2°3*3/4 H20: C' 73,25, H, 5,29; N, 6,83. Encontrado: C, 73,09; H, 5,35; N, 6,48.

Exemolo 25 12-Γ(3. 4-Dimetoxifenil)metilla:mino-8-:πletil-7-(l-oxopropil)indo-lizinoΓl. 2-blquinolin-9(llH)-ona 25A. 12-Γ(3.4-Dimetoxifenil^metil1amino-7-(2-etil-1.3-dioxolan- -2-il)-8-metilindolizinofl.2-b1cruinolin- 9fllH^-ona (SB 201043) Aqueceu-se, a 175eC durante 1,5 h, uma mistura contendo 12-cloro-7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8-metilindolizino[1,2-b]qui-nolin-9(llH)-ona (38 mg, 0,1 mmol), fenol (66 mg, 0,7 mmol),

73 308 14539-1 -52-3,4-dimetoxibenzilamina (105 ml, 0,7 mmol) e um cristal de iodeto de potássio e deixou-se arrefecer à temperatura ambiente e repousar durante a noite. A mistura reaccional foi dissolvida em CH2C12 contendo uma pequena quantidade de MeOH e purificada por cromatografia radial em silica-gel, eluíndo com um gradiente de solvente de 0-5% de MeOH em ΟΗ2012. 0 material que foi isolado foi ainda purificado por recristalização em MeOH em CH2C12, obtendo-se o composto do título, p.f. 232-7°C. ^H RMN (CDCI3) 5 8,09 (dd, J = 8,4, 0,9 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,69 (ddd, J = 8,0, 7,1, 0,9 Hz, 1H), 7,47 (m, 2H), 6,86 (m, 3H), 5,68 (t largo aparente, J = 5,7 Hz, 1H), 5,34 (s, 2H), 4,82 (d, J = = 5,7 Hz, 2H), 4,03 (m, 2H), 3,9-3,7 (sem sobrepostos, 8H) , 2,42 (s, 3H), 1,99 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 0,96 (t, J = 7,4 Hz, 3H) . Anal. Cale. para C3oH3iN3°5·3/2 H20: C, 66,65, H, 6,34; N, 7,77. Encontrado: C, 66,58; H, 6,40; N, 7,46. 25B. 12-Γ(3,4-Dimetoxifenil)metil1amino-8-metil-7-f1-oxopropil)- indolizinof1.2-b1quinolin-9f HHl-ona A uma solução de 12-[(3,4-dimetoxifenil)metil]amino-7-(2--etil-1,3-dioxolan-2-il)-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin-9-(11H)--ona (24 mg, 45 mmol) em ácido acético glacial (2 ml) adicionou-se HCl 2N (0,3 ml). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h e, em seguida, aquecida a 70°C durante 1 h. Após arrefecimento, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em MeOH/CH2Cl2 e purificado por cromatografia flash em silica-gel, eluíndo com um gradiente de solvente de 0-2% de MeOH em CH2Cl2. O material que foi isolado foi sonicado com uma mistura de MeOH e H20. 0 sólido que se formou foi recolhido por filtração e seco sob pressão reduzida, obtendo-se o composto do título, p.f. 240-2°C. ^H RMN (CDCI3) δ 8,08 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,71 (ddd, J = 8,2, 7,2, 1,0 Hz, 1H), 7,50 (ddd, J = 8,3, 7,0, 1,3 Hz, 1H), 7,19 (s largo, 1H), 6,90 (m, 3H), 5,57 (largo, 1H), 5,42 (S, 2H), 4,87 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 3,88 (S, 3H), 3,87 (s, 3H), 2,89 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 2,25 (s, 3H), 1,22 (t, J = 7,3 Hz, 3H). Anal. Cale. para C28H27N304.3/4 CH3OH: C, 69,96, H, 6,13; N, 8,51. Encontrado: C, 70,22; H, 6,43; N, 8,08.

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Exemplo 26 12-Ciano-8-metil-7-(1-oxopropil^ indolizino Γ1.2-b1Quinolin-9(11H)-ona 26A. l-(2-Etil-1.3-dioxolan-2-il^-12-iodo-8-metilindolizinori.2- -b1auinolin-9(llH)-ona

Aqueceu-se a 120°C durante 45 min uma mistura contendo 12-cloro-7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8-metilindolizino[1,2-b]qui-nolin-9(llH)-ona (38,3 mg, 0,1 mmol), iodeto de potássio (166 mg, 1,0 mmol), anidrido acético (0,3 ml) e ácido acético glacial (3 ml). Após arrefecimento, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi coberto com H20, tratado por ultrassons e filtrado. 0 sólido foi lavado cuidadosamente com H20. 0 resíduo sólido foi tratado com MeOH/CH2Cl2 e filtrado. Este material foi ainda purificado por trituração repetida com MeOH/CH2Cl2 para proporcionar o composto do título, p.f. >320°C. KMN (CDC13) 8 8,17 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,86 (m, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,61 (s, 1H), 5,17 (s, 2H), 4,09 (m, 2H), 3,86 (m, 2H), 2,46 (s, 3H), 2,02 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 0,98 (t, J = 7,4 Hz, 3H). Anal. Cale para C21HigIN203: C, 53,18? H, 4,04; N, 5,91. Encontrado: C, 52,94; H, 4,19; N, 5,86. 26B. 12-Ciano-7-(2-etil-1.3-dioxolan-2-il^-8-metilindolizinori,2--b1cfuinolin-9( HH^-ona

A 1,2-dicloroetano anidro (4 ml) sob uma atmosfera de árgon adicionaram-se tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) (434 mg, 0,38 mmol) e cianeto de tributilestanho (338 mg, 1,03 mmol). A mistura resultante foi aquecida ao refluxo durante 2 h e depois adicionada a uma solução de 7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-l2--iodo-8-metilindolizino[1,2-b]quino1in-9(11H)-ona em 1,2-dicloroetano (1 ml). A mistura resultante foi aquecida ao refluxo durante 1,3 h e depois deixada arrefecer à temperatura ambiente e deixada repousar durante a noite. A mistura reaccional foi colocada directamente numa coluna de cromatografia "flash" em sílica-gel e eluída com um gradiente de solvente de 0-5% de MeOH/CH2Cl2. 0 composto do título foi isolado e ainda purificado por cromatografia radial em sílica-gel, eluindo com um gradiente de solvente de 10-20% de acetona em hexano; p.f. 257-8eC. % RMN 73 308 14539-1

Ar ·

-54- (CDCI3) δ 8,28 (2 dd sobrepostos, 2H), 7,93 (ddd, J = 8,6, 7,0, 1,6 Hz, 1H), 7,82 (ddd, J = 8,3, 7,0, 1,3 Hz, 1H), 7,59 (S, 1H), 5,43 (S, 2H), 4,09 (m, 2H), 3,86 (m, 2H), 2,47 (s, 3H) 2,02 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 0,98 (t, J = 7,4 Hz, 2H) . Anal. Cale para C22H19N3°3: C' 7°/76? H, 5,13; N, 11,25. Encontrado: c, 71,13; H, 5,37; N, 10,79. 26C. 12-Ciano-8-metil-7-fl-oxopropil)indolizinori.2-blquinolin--9(11H^-ona A uma solução de 12-ciano-7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8--metilindolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (20 mg, 54 mmol) em ácido acético glacial (2 ml) adicionou-se HC1 2 N (0,3 ml). A mistura resultante foi aquecida a 75°C durante 30 min e em seguida, depois de arrefecer, foi concentrada sob pressão reduzida. Adicionou-se metanol ao resíduo sólido que foi em seguida recolhido e seco, proporcionando o composto do título, p.f. 270-5°C. 1H RMN (CDCl3) δ 8,29 (2 d sobrepostos, 2H) 7,96 (ddd, J = 8,5, 7,0, 1,5 Hz, 1H), 7,86 (ddd, J = 8,3, 7,0 1,3 Hz, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,48 (S, 2H), 5,48 (S, 2H), 2,92 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,32 (s, 3H), 1,26 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Anal. Cale para C20H15N3°2/1/4 h20: C' 71/95'* h/ 4/68/ N, 12,59. Encontrado: C, 72,27; H, 4,74; N, 12,22.

Exemplo 27 (±)-12-Ciano-7-(l-hidroxipropil)-8-metilindolizino-Γ1.2-b1 cminolin-9(11H)-ona

Colocou-se 12-ciano-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2--b]quinolin-9(llH)-ona (11,5 mg, 34 mmol) em MeOH/THF/CH2Cl2 1:1:1,5 (1,4 ml) e adicionou-se boro-hidreto de sódio (7,6 mg, 0,20 mmol). Após agitação à temperatura ambiente durante 1 h, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi tratado com NH4CI aquoso a 10% e deixado repousar a 0°c durante a noite. O sólido que se formou foi recolhido por filtração, ligeiramente lavado com H20 e seco para proporcionar o composto do título. % RMN (CDCI3) δ 8,11 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,82 (m, 2H), 7,56 (m, 2H), 5,43 (d, J = 20,1 Hz, 1H), 5,26 (d, J = 20,1 HZ, 1H), 4,91 (dd, J = 7,6, 5,4 Hz, 1H), 2,21 (s, 3H), 1,90-1,50 (m obscurecido pelo pico HOD, 4H), 1,03 (t, J = 7,4 Hz, 3H). 73 308 14539-1 -55-

Anal. Cale para ¢20^7^()2.1 1/8 H20: C, 68,31; H, 5,52; N, 11,95. Encontrado: C, 68,62; H, 5,12; N, 11,21.

Exemplo 28 2-Aminometil-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino-Γ1.2-blauinolin-9(llH)-ona 28A. 12-Aminometil-7-(2-etil-1.3-dioxolan-2-il)-8-metilindolizi-no Γ1,2-blauinolin-9(11H)-ona

A uma solução de 12-ciano-7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8--metilindolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (47 mg, 0,13 mmol) em ácido acético glacial (10 ml) adicionou-se níquel Raney (109 mg) que tinha sido recentemente lavado com ácido acético e seco. A mistura resultante foi agitada num hidrogenador de Parr a 552 Kpa de H2 durante 49 h, sendo depois o catalisador retirado por filtração e o solvente removido sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado por cromatografia "flash” em sílica-gel, eluindo-se com um gradiente de solvente de 95:5:0,3 a 90:10:0,3 de CH^C^/MeOH/EtgN. 0 material que foi isolado foi triturado com MeOH e seco para proporcionar o composto do título sob a forma de sal hidroacetato parcial, p.f. 235-45eC (dec.). % RMN (CDC13, MeOH-d4) δ 8,23 (m, 2H), 7,82 (m, 1H), 7,71 (m, 2H), 7,37 (s, 1H), 5,39 (S, 2H) 4,46 (S, 2H), 4,10 (m, 2H) , 3,87 (m, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,03 (q, J - 7,4 Hz, 2H), 0,99 (t, J = 7,4 Hz, 3H). Anal. Cale. para C22H23N3O3.1/2 H20.3/5 C2H402: C,65,96; H, 6,30; N, 9,95. Encontrado: C, 66,27; H, 6,19; N, 9,68. 28B. 12-Aminometil-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1.2-blqui-nolin-9(11H1-ona

Aqueceu-se a 75°C, durante 2 h, uma solução contendo 12--aminometil-7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-8-metilindolizino[1,2--b]quinolin-9(llH)-ona (18 mg, 44 mmol) e HC1 2 N (0,3 ml) em ácido acético glacial (2,75 ml) e após arrefecimento, concentrou--se sob pressão reduzida. Adicionou-se metanol ao resíduo sólido que foi em seguida submetido a tratamento ultrassónico, filtrado e seco para proporcionar o composto do título sob a forma de sal hidrocloreto, p.f. 285-95°C (dec.) 1H RMN (TFA-d1) δ 8,70 (m, 2H), 8,40 (m, 1H), 8,25 (m, 2H), 6,05 (s largo, 2H), 5,36 (s lar- 73 308 14539-1 -56-go, 2H), 3,20 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,46 (s, 3H), 1,39 (t, J = 6,8 Hz, 3H). Anal. Cale, para C2oHi9N302.HCl.l/4 H20.1/6 C2H602: C, 63,48; H, 5,63; N, 10,92. Encontrado: C, 63,59; H, 5,73; N, 10,92.

Exemplo 29 12-Γ 3-(Dimeti1amino)orooi11-8-meti1-7-f1-oxopropi1)indo1i z ino-Γ1,2-b1auinolin-9(11H^-ona 29A. 12-r3-fDimetilamino^-l-propin-l-in-7-f 2-etil-l.3-dioxolan--2-il)-8-metilindolizino Γ1.2-b1quinolin-9(11H)-ona

A uma solução de 7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-12-iodo-8-me-tilindolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (89 mg, 0,19mmol) em DMF (lml) adicionou-se l-dimetilamino-2-propino (30 ml, 0,28mmol), trietilamina (112 ml, 0,22 mmol) e dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio (4,8 mg, 6,8 mmol). A mistura resultante foi aquecida a 90-5"C durante 3 h e deixada arrefecer. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia "flash" em sílica-gel, eluindo com um gradiente de solvente de 0-5% de MeOH em CH2C12. Obteve-se o composto do título sob a forma de um sólido cristalino amarelo, p.f. 161,5-2,5 DC. l-H RMN (CDCI3) δ 8,34 (dd, J = 8,4 , 1,2 Hz, 1H), 8,21 (dd, J = 8,2, 0,6 Hz, 1H), 7,81 (ddd, J = 8,4, 6,9, 1,5 HZ, 1H), 7,67 (ddd, J = 8,0, 6,9, 1,1 Hz, 1H), 7,57 (s, 1H), 5,29 (s, 2H) , 4,08 (m, 2H), 3,89 (m, 2H), 3,78 (s, 2H), 2,50 (s, 6H), 2,46 (s, 3H), 2,03 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 0,98 (t, J = 7,4 Hz, 3H). Anal. Cale. para C26H27N3°3'V4 H20: c' 71i98/ h/ 6f39? N/ 9,68. Encontrado: C, 72,12; H, 6,27; N, 9,50. 29B. 12-r3-fDimetilamino^proPin-7-f 2-etil-l.3-dioxolan-2-il)-8--metilindolizinoQ .2-b1cruinolin-9(llH^-ona

Agitou-se uma solução , sob uma atmosfera de H2 durante a noite, de 12-[3-(dimetilamino)-l-propin-l-il]-7-(2-etil-l,3--dioxolan-2-il)-8-metilindolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona (43,2 mg, 0,10 mmol) em EtOH absoluto contendo Pt02 (3,6 mg). A mistura foi então concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia "flash" em sílica-gel, eluindo com um gradiente de solvente de 3-10% de MeOH em CH2C12. 0 material

•1

73 308 14539-1 -57- obtido foi ainda purificado por tratamento com EtOAc contendo algum ácido trifluoroacético, obtendo-se o composto do título sob a forma do sal de hidrotrif luoroacetato. ^H RMN (CDCl3/MeOH-d4) 8 8,22 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 8,3 Hz, 1H) , 7,81 (ddd, J = 8 / 2 / 6 ,9, 1,3 Hz, 1H) , 7,68 (m, 1H) , 7, 66 ( S , 1H) , 5,26 (s, 2H) , 4, 07 (m , 2H), 3 ,88 (m, 2H), 3,24 (m, 2H) , 2,65 (m, 2H), 2,46 (s , 3H) , 2, 38 (s, 6H), 2, 03 (m e q sobrepostos, 2H) , 0,99 (t, J = 7,4 Hz , 3H) . Anal. Cale. para C2 6 h3iN3o3.c2hf 3 °2 . 5/2 H20: C , 56,7 5; H, 6,2 !9; N, 7,09. Encontrado: C, 56 ,66; H, 6 ,20; N, 7,05. 29C. 7-(2-Etil-l.3-dioxolan-2-il)-8-metil-l2-propilindolizino- -Γ1.2-blquinolin-9(11H^-ona

Isolou-se também, da cromatografia anterior, 7-(2-etil--1,3-dioxolan-2-il)-8-metil-12-propilindolizino[1,2-b]-quinolin--9(11H)-ona. 1H RMN (CDC13) δ 8,22 (d largo , J = 8,7 Hz, 1H), 8,10 (d largo, J = 8,5 Hz, 1H), 7,77 (m, 1H), 7,62 (m, 1H), 7,57 (s, 1H), 5,23 (s, 2H), 4,07 (m, 2H), 3,85 (m, 2H) , 3,15 (t aparente, J = 7,8 Hz, 2H), 2,46 (s, 3H), 2,02 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 1,83 (sexteto aparente, J = 7,6 Hz, 2H), 1,08 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,98 (t, J = 7,4 Hz, 3H). 29D. 12-Γ 3-f Dimetilamino ^nronill-8-metil-7-f1-oxopropil)indo-lizinofl.2-b1quinolin-9(HH^-ona

Aqueceu-se a 70-5°C, durante 2 h, uma solução de 12-[3-- (dimetilamino) propil ] -7- (2-etil-l, 3-dioxolan-2-il) -8-metilindo-lizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (19,5 mg, 45 mmol) e HCl 2N (0,3 ml) em ácido acético glacial (1,5 ml). A mistura foi então deixada arrefecer e concentrada sob pressão reduzida, dissolvida em água e liofilizada, obtendo-se o composto do título sob a forma do sal di-hidrocloreto. Anal. Cale. para C24H27N3O2.2 HCl.9/4 H20: C, 57,31; H, 6,71; N, 8,35; Cl 14,10. Encontrado: C, 57,63; H, 6,28; N, 7,82; Cl, 14,00.

Exemnlo 30 8-Metil-7-( l-oxopropil)-12-propilindolizinori. 2-blquinolin- 9(lim-ona

Aqueceu-se a 70-5°C, durante 2 h, uma solução de 7-(2-

73 308 14539-1 -58--etil-1,3-dioxolan-2-il)-8-metil-12-propilindolizino[1,2-b]qui-nolin-9(11H)-ona (9,7 mg, 25 mmol) e HCl 2N (0,3 ml) em ácido acético glacial (1,5 ml). Após arrefecimento, a mistura reaccional foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi tratado com uma mistura de MeOH e H20 e o sólido formado foi recolhido por filtração, lavado com H20 e seco, obtendo-se o composto do título, p.f. 179-80°C. ^-H RMN (CDC13) S 8,20 (dd, J = 8,5, 1,1 Hz, 1H), 8,12 (dd, J = 8,5, 1,2 Hz, 1H), 7,79 (ddd, J = 8,3, 6,9, 1,4 Hz, 1H), 7,66 (ddd, J = 8,1, 6,8, 1,3 Hz, 1H), 7,24 (s, 1H), 5,27 (s, 2H), 3,17 (m, 2H), 2,91 (q, J = 7,3 Hz, 2H), 2,30 (s, 3H), 1,84 (sexteto aparente, J = 7,6 Hz, 3H). Anal. Cale. para C22H22N202.5/8 H20: C/ 73#87' H, 6,55; N, 7,83. Encontrado: C, 73,74; H, 5,91; N, 7,55.

Exemplo 31 Ácido a-etil-9,ll-di-hidro-a-hidroxi-8-metil-9-oxo-indolizino Γ1.2-blauinolina

Agitou-se, durante 24 h, uma mistura de camptotecina (150 mg, 0,43 mmol), trietilamina (1 ml) e 10% de paládio em carvão (36 mg) em DMF (10 ml), sob uma atmosfera de hidrogénio. 0 catalisador foi removido por filtração e o filtrado foi evaporado in vacuo. 0 resíduo foi redissolvido numa mistura de DMF (10 ml), H20 (10 ml) e ácido acético (2 ml) e cromatografado numa coluna inversa preparativa Dynamax C18, usando uma mistura de MeOH, H20 e ácido acético 57,5/42,5/0,15, como fase móvel, obtendo-se o composto do título. ^-H RMN (dg-DMSO) S 8,64 (s, 1H), 8,16 (d, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,84 (dd, 1H), 7,68 (dd, 1H), 7,47 (s, 1H), 5,24 (S, 2H), 2,13 (s, 3H), 2,05 (m, 2H), 0,82 (s, 3H). CIMS (NH3, m/e, rei. int.) 351 (100) [(M+H)+].

Exemplo 32

IndolizinoQ.2-b1quinolin-9(llH)-ona 32A. 7-Trifluorometanossulfoniloxiindolizinori.2-b1ouinolin- 9(llH)-ona A uma solução contendo 7-hidroxi-indolizino[l,2-b]quinolin--9(llH)-ona (25 mg, 0,10 mmol) em dimetilformamida (5 ml), adicionou-se trietilamina (42 ml, 0,30 mmol) e N--feniltrifluorometanossulfonimida (54 mg, 0,15 mmol). A mistura 73 308 14539-1 -59-

resultante foi aquecida a 50°C durante 2 h, deixada arrefecer à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida, o resíduo foi suspenso em Et0Ac/Et20 1:1, filtrado e o sólido foi lavado com Et20, obtendo-se cristais amarelo-claro do composto do título, p.f. 266-268°C (dec). Anal. Cale. para C16H9F3N2°4Sí C, 50,27; H, 2,37; N, 7,33. Encontrado: C, 50,40; H, 2,42; N, 7,22. 32B. Indolizinofl.2-b1auinolin-9fllH)-ona A uma solução de 7-trifluorometanossulfoniloxiindolizino--[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona (38 mg, 0,10 mmol) em dimetil-formamida (5 ml) sob uma atmosfera de árgon adicionou-se acetato de paládio (II) (12,5 mg, 55,7 mmol), trifenilfosfina (29 mg, 111 mmol), tri-n-butilamina (104 ml, 4,4 mmol) e ácido fórmico a 98% (10 ml, 0,3 mmol). A solução resultante foi aquecida a 65eC durante 2 h, deixada arrefecer à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia "flash" em sílica-gel, eluindo com 5% de MeOH em CHClg. O sólido escuro que foi isolado foi dissolvido em CHC13 (2 ml) e extractado com HC1 6 N (3X2 ml). Os extractos aquosos combinados foram neutralizados com NH^OH concentrado. O precipitado que se formou foi recolhido por filtração, seco e recristalizado em MeOH/CHCl3, obtendo-se o composto do título (7 mg, 30%). % RMN (CDCl3/MeOH-d4) S 8,36 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,86 (d largo, 1H), 7,79-7,52 (m, 3H), 7,33 (dd, 1H), 6,66 (d, 1H), 5,17 (s, 2H).

Exemplo 33 7-Cianoindolizino Γ1.2-blquinolin-9(HH^-ona

Aqueceu-se ao refluxo, durante 2,5 horas, uma mistura contendo cianeto de tri-n-butilestanho (565 mg, 1,79 mmol) e tetraquis(trifenilfosfina)paládio (879 mg, 0,76 mmol) em 1,2--dicloroetano anidro (40 ml) sob uma atmosfera de árgon. A mistura reaccional, que se tornou homogénea durante este período, foi deixada arrefecer e adicionou-se 7-trifluoro-metanossulfoniloxiindolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (290 mg, 0,76 mmol). A mistura resultante foi aquecida ao refluxo durante 2 horas, deixada arrefecer à temperatura ambiente e agitada -60- 73 308 14539-1 durante 48 horas. 0 sólido que se formou foi recolhido por filtração, lavado sucessivamente com 1,2-dicloroetano e Et20 e seco, obtendo-se o composto do título sob a forma de um pó amarelo. XH RMN (CDCl3/MeOH-d4) δ 8,49 (s largo, 1H), 8,21 (d largo, J = 9 Hz, 1H), 8,07-7,59 (m, 3H), 7,46 (s largo, 1H), 7,00 (s largo, 1H), 5,30 (s, 2H) . EM FAB+ (m/e, rei. int.) 260 [(M+H)+, 17], 155 (64), 119 (100), 85 (80). IV (KBr) 3500-3400, 3080, 2240, 1680-1660, 1630-1605 cm”1. Anal. Cale. para C-LgHc^O: C, 74,12; H, 3,50; N, 16,21. Encontrado: C, 73,82; H, 3,49; N, 16,13.

Exemplo 34 7-EtenilindolizinoQ. 2-b1quinolin-9f llHWona A uma suspensão de 7-trif luorometanossulfoniloxiindolizino--[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona (120 mg, 0,31 mmol) em dimetil-formamida (8 ml) sob uma atmosfera de árgon adicionou-se dicloro[l,l/-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (9,2 mg, 12,6 mmol), cloreto de litio (41,2 mg, 0,97 mmol), tetravinilestanho (77,2 ml, 0,43 mmol), peneiros 4A (30 mg) e 2,6—di-t-butil-4-metilfenol (quantidade catalítica). A mistura resultante foi aquecida a 70°C a uma pressão de monóxido de carbono de 448 kPa. Após 18 horas a mistura reaccional foi deixada arrefecer, ventilada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi submetido a partição entre H20 e 10% de MeOH em CHCI3. A fase aquosa foi extractada com 10% de MeQH em CHCI3 (2X) e os extractos orgânicos combinados foram concentrados in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia "flash" em sílica-gel, eluíndo com 2% de MeOH em CHCI3, obtendo-se um pó de cor bronze que foi triturado com Et20 (3X). A recristalização em MeOH quente (0,5 ml) originou o composto do título sob a forma de um sólido cristalino e não como o composto 7-(l-oxopropil) esperado. ^-H RMN (CDCI3) δ 8,38 (S, 1H), 8,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,94 (d, J = = 8,2 Hz, 1H), 7,82 (m, 1H), 7,65 (m, 1H), 7,47 (s, 1H), 6,71 (dd, J = 17,6, 10,7 HZ, 1H), 6,62 (S, 1H), 6,11 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 5,60 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H). CIMS (NH3) m/e 261 (M+H)+. IV (KBr) 3450-3400, 3050, 1675, 1620, 1600 cm”1. Anal. Cale. para C17H12N20: C, 78,45; H, 4,65; N, 10.76. Encontrado: C, 78,26; H, 4,89; N, 10,55.

73 308 14539-1 -61-

Exemplo 35 7-Etilindolizino Γ1,2-blquinolin-9(11H)-ona A uma solução de 7-etenilindolizino[1,2-b]quinolin-9(11H) -ona (10,2 mg, 0,04 mmol) em MeOH (2,5 ml) adicionou-se 5% de paládio em carvão activado (1,2 mg). A mistura resultante foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio, durante a noite. A análise por cromatografia em camada fina indicou que a reacção estava incompleta, de modo que se adicionou mais 5% de paládio em carvão activado (1,2 mg) e a mistura foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio durante mais 1 hora. A mistura reaccional foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, obtendo-se um pó branco-sujo. A recristalização em MeOH (0,25 ml) proporcionou o composto do título sob a forma de um sólido cristalino. XH RMN (CDC13) 8 8,36 (s, 1H) , 8,25 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,0-7,5 (m, 3H), 7,22 (s largo, 1H), 6,56 (s, 1H), 5,23 (s, 2H), 2,67 (q, J - 7 Hz, 2H), 1,30 (t, J = 7 Hz, 3H). CIMS (CH4) (rn/e, rei. int.) 263 [(M+H)+, 42], 262 (M+, 100), 247 (30). IV (KBr) 3480-3420, 2970, 1670, 1600 cm"1.

Exemplo 36 7-Acetilindolizinori.2-b1ouinolin-9(llH^-ona 36A. 7 —f 1-Butoxietenil) indolizino Γ1.2—b]quinolin—9 (llH)-ona A uma suspensão de 7-trifluorometanossulfoniloxiindolizino--[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (382 mg, 1,0 mmol) em DMF anidra (3 ml) sob uma atmosfera de árgon, adicionou-se sucessivamente trietilamina (0,28 ml, 2,0 mmol), éter n-butil-vinílico (0,64 ml, 5,0 mmol), l,3-bis(difenilfosfino)propano (12,2 mg, 29 mmol) e acetato de paládio (5,6 mg, 25 mmol). A mistura resultante foi aquecida a 80°C durante 3,5 h e, em seguida, deixada arrefecer e repousar à temperatura ambiente, durante a noite. A mistura foi vertida em Et20 (5 ml) e o sólido foi recolhido e seco, obtendo-se o composto do título sob a forma de agulhas cor-de-laranja claras. RMN (CDC13) δ 8,10 (m, 2H), 7,90-7,38 (m, 3H), 7,32 (m, 1H), 6,96 (S, 1H), 5,04 (s, 2H), 4,95 (d, 1H), 4,43 (d, 1H), 3,87 (t largo, 2H) 1,91-1,33 (m, 4H), 1,00 (t largo, 3H). 73 308 14539-1 -62- 36Β. 7-Acetilindolizinori,2-blouinolin-9(llH)-ona A uma solução de 7-(l-butoxietenil)indolizino[l,2-b]quino-lin-9(llH)-ona (213 mg, 0,64 mmol) em ácido acético glacial (10 ml) adicionou-se HC1 3N (4 gotas) e a mistura resultante foi deixada agitar à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura reaccional foi diluida com água e o sólido resultante foi removido por filtração. O sólido foi dissolvido em CH2C12, lavado com H20 e seco (Na2S04). 0 solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi recristalizado em 1,2-dicloroetano, obtendo-se o composto do título sob a forma de agulhas cor-de-laranja claras, p.f. 265—85°C. % RMN (CDCI3) δ 8,40 (s, 1H), 8,24 (d, J = 8,4

HZ, 1H), 7,90 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,84 (m, 1H), 7,75 (d, J = = 1,4 HZ, 1H), 7,70 (ddd, J = 8,4, 7,0, 1,4 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 5,31 (s, 2H), 2,66 (s, 3H). Anal. Cale. para c17h12n2°2: C' 73#90? H, 4,38; N, 10.14. Encontrado: C, 73,49; H, 4,48; N, 9,95.

Exemplo 37

7-Acetil-8-metilindolizinori. 2-b1auinolin-9(llH)-ona A uma solução de 7-acetilindolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)--ona (64 mg, 0,23 mmol) em CHCl3/MeOH 5:1 (18 ml) a 0°C adicionou-se, gota a gota, uma solução de diazometano em Et20 (10 ml). A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 0,5 h e depois deixada aquecer lentamente até à temperatura ambiente e agitada durante a noite. 0 diazometano em excesso foi destruído pela adição de ácido acético e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo sólido foi dissolvido em CHC13 (volume mínimo) e tratado com Et20. 0 precipitado que se formou foi recolhido e recristalizado em 1,2-dicloroetano (2,5 ml). 0 sólido cor-de-rosa claro foi ainda purificado por HPLC preparativa (coluna Zorbax, 2,1 x 25 cm), eluindo com EtOH a 3% em CH2C12 para proporcionar um pó branco-sujo que foi recristalizado em 1,2-dicloroetano, p.f. 274-6eC (dec.). ^H RMN (CDCI3) 8 8,39 (s, 1H), 8,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,94 (d, J = = 8,0 HZ, 1H), 7,83 (m, 1H), 7,66 (m, 1H), 7,35 (s, 1H), 5,31 (d, J = 1,1 Hz, 2H), 2,63 (s, 3H), 2,36 (s, 3H). Anal. Cale. para C18H14N2°2: C' 74/47' H, 4,86; N, 9,65. Encontrado: C, 74,78; H, 4,99; N, 9,59.

t ί » ! 4

73 308 14539-1 -63-

Exemolo 38 7-Γ 3-(Dimetilamino)-l-propin-l-il1indolizino Γ1.2-blquinolin- -9fllH^-ona A uma mistura contendo 7-trifluorometanossulfoniloxiindoli-zino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (191 mg, 0,5 mmol) , trietilamina (0,3 ml, 2,2 mmol) e N,N-dimetilpropargilamina (82 ml, 0,7 mmol) em DMF anidra (1,5 ml) sob uma atmosfera de árgon, adicionou-se cloreto de bis(trifenilfosfinajpaládio (II) (10 mg, 14 mmol). A mistura resultante foi aquecida a 85°C durante lhe, em seguida, deixada arrefecer e à temperatura ambiente. 0 sólido que se formou foi recolhido por filtração , lavado sucessivamente com EtOAc e Et20 e seco. O composto do título foi obtido sob a forma de um sólido cristalino amarelo. Uma porção deste material foi recristalizada em acetonitrilo, p.f. 201-3°c. % RMN (CDC13) δ 8,40-8,13 (m, 2H), 8,00-7,50 (m, 3H), 7,28 (m, 1H), 6,77 (s largo, 1H), 5,30 (s, 2H), 2,55 (s, 2H), 2,41 (s, 6H). Anal. Cale. para c20H17N3O: c, 76,17; H, 5,43; N, 13,32. Encontrado: c, 76,39; H, 5,63; N, 12,68.

Exemplo 39 7-Γ 3-fDimetilamino)propil]indolizinoΓ1,2-b1auinolin-9fllH)-ona

Agitou-se à temperatura ambiente, sob uma atmosfera de hidrogénio, uma mistura de 7-[3-(dimetilamino)-l-propin-l--il]indolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona (29 mg, 0,09 mmol) e 5% de paládio em sulfato de bário (3 mg) em piridina seca (2 ml). Após 3 h, removeu-se o catalisador por filtração e concentrou-se o filtrado sob pressão reduzida, obtendo-se um pó de cor bronze claro que foi cristalizado em acetonitrilo e seco, p.f. 169-71°C. ΧΗ KMN (CDCI3) S 8,33-8,12 (m, 2H), 7,96-7,50 (m, 3H), 7,20 (s largo, 1H), 6,57 (s, 2H), 5,21 (s, 2H), 2,80-2,50 (m, 2H), 2,50-2,29 (sem sobrepostos, 8H), 2,10-1,70 (m, 2H). Anal. Cale. para C20H21N3°*H20: C, 71,19; H, 6,87; N, 12,45. Encontrado: C, 71,50; H, 6,60; N, 12,18.

Claims

73 308 14539-1

-64- » REIVINDICACÕES 1 - Processo de preparação de um composto de Fórmula I, ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável: R9 R7

na qual

R7 é -H, -N02, -CN, alcoxi inferior, alquilo inferior, -OAr, -NHCH2Ar, -C=CCH2NRR1, -CH=CHCH2NRR1, -(CH2)q_3CH2V; R9 é -H, -OR, -N02, -NRR1, -CN, halo, -(CH2)0_3CH2V; R10 é -H, -OR, -N02, -NRR1, -CN, -COR12, -CH(OH)R12, -0C(0)R12, —OC(O)OR12, -0C(0)0R12, -0C(0)CH2CH2C00R13, -o-(ch2)1_5ch2nrr1, -OC(O)NRR1, 1,4'-bipiperidina-1'-carboxi, -(CH2)0_3CH2V; V é -OH, -OalquiloC1_g, -OCOR12, -OCOOR13, -OCONRR1, -NRR1, ou -CN; R11 é -H, -CN OU -OR; R12 £ _jj ou alquilo inferior; R13 é alquilo inferior;

R e R1 são seleccionados, independentemente um do outro, de entre o grupo consistindo em -H, -alquilo e R e R1 tomados em conjunto formam um anel heterocíclico saturado com 5-7 membros contendo o azoto; X é -H, -OH, -c=cch2nrr1, -CN, -SOR, -CH(OH)CH(OH)CH3, -CHR3R4,—K -CH2CH2CH2NRR1, alquilo inferior, R5 R6

ou -C(CH2CH3)(OH)COOH; Y é -H, -CH3, -CH2OR2; R2 é -H, -C(O)H, -C(0)alquiloC2_5, -C(O)alquilC1_4COOH ou -C(O)alquilC1_4NRR1; R3 é -oh, halo, ou -nh2; R4 é -H, alquilo inferior ou -OR; R5 é =0, =N0H, ou =CHR; 73 308 14539-1

-65- R6 é -H, alquilo inferior, ou -NRR1; e Ar é fenilo, fenilo monossubstituído, fenilo dissubstituído, 3-piridilo, 3-piridilo monossubstituído ou 3-piridilo dissubstituído, em que os substituintes podem ser -CN ou alcoxi inferior; desde que; a) se um de R7, R9, R10 ou R11 é diferente de -H, apenas um dos outros pode ser diferente de -H; b) apenas um de R7, R9, R·*·9 ou R-*-·*- pode ser -N02 ou -NRR·*·; c) quando X é -CHR3R4 e R4 é -0R, R3 é -OH; d) quando R^ é -NRR-*-, R^ é =0; e) quando R5 é =CHR, R6 é -H; Q f) quando X é R10 é -OH, e R7, R9 e R11 são -H, e Y é -CHo; g) quando Y é -CH2OR2, X é R6 , R5 é =0, e R6 é -H ou alquilo inferior; h) quando R7, R9, R10 e R11 são todos -H e Y é -CH3, então X não é -H, —C(0)H, -CH20H, -CH(OH)CH(OH)CH3, -c(0)ch2ch3 ou -CH(0H)CH2CH3; i) quando R7, R9, R10 e R11 são todos -H e Y é -CH20C(0)H, então X não é -C(0)CH2CH3; j) quando R7, R9, R10, R11 e Y são todos -H, então X não é -CH2OH, -C(0)H, -CH2Br, -OH ou -H; e k) quando R7 é -0CH3, então X e Y não são -H; caracterizado por compreender: i) a abertura do anel lactona de um derivado de camptotecina por aquecimento do referido derivado num solvente de elevado ponto de ebulição, a uma temperatura não inferior a cerca de 150°C, obtendo-se um composto de fórmula I; ii) (a) a abertura do anel lactona da camptotecina por aquecimento da referida camptotecina num solvente de elevado ponto de ebulição, a uma temperatura não inferior a cerca de 150°C; e, em seguida (b) a introdução de pelo menos um substituinte R7-R1:l obtendo-se um composto de fórmula I; ou iii) a modificação de pelo menos um substituinte R7-Ri:l de uma indolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona, obtendo-se um composto -66- 73 308 14539-1 de fórmula I.
2 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R7, R1, R2 e R3 serem cada um -Η; X ser -CN, -SOR, -C(CH2CH3)(OH)COOH, -CHR3R4 em que R3 é -OH e R4 é -H ou alquilo R5 inferior, ou em que R5 é =0 e R6 é -H ou alquilo inferior; e Y ser -CH3.
3 - Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por se preparar 7-acetil-8-metilindolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)--ona.
4 - Processo de acordo com a reivindicação l, caracterizado por R7, R1 e R3 serem cada um -H; desde que R2 não seja -H.
5 - Processo de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por R2 ser -0R, -CN, -COR12, ou -(CH2)nCH2V; X ser -CHR3R4 em ,r5 que R3 é -OH e R4 é -H ou alquilo inferior, ou X ser R6 em que R5 é =0 e R6 é -H ou alquilo inferior? e Y ser -CH3.
6 - Processo de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por se preparar 7-(2-etil-l,3-dioxolan-2-il)-2-hidroxi-8-metil-indolizino [1,2-b]quinolin-9 (11H) -ona.
7 - Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por se preparar (±)-2-ciano-7-(l-hidroxipropil)-8-metilindoli-zino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona.
8 - Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado _ R5 por R2 ser -(CH2)nCH2V; e X ser~~^RÓ em que R5 é =0 e R6 é CH2CH3. 1 - Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado 2 por se preparar 2-aminometil-8-metil-7-(l-oxopropil)indolizino- 3 [1,2-b]quinolin-9(11H)-ona. 73 308 14539-1 -67-
10 - Processo de acordo com a reivindicação 5f caracterizado por se preparar 2-ciano-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]-quinolin-9(11H)-ona.
11 - Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por se preparar 2-metoxi-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2--b]quinolin-9(11H)-ona.
12 - Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por se preparar 2-hidroxi-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona.
13 - Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por se preparar 2-acetil-8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona.
14 - Processo de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por se preparar 8-metil-7-(1-oxopropil)indolizino[l,2-b]quinolin-—9(11H)-οη-2-il[1,4'-bipiperidina]-1'-carboxilato.
15 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R7 e R11 serem cada um -H; desde que R9 e R10 não sejam, cada um, -H.
16 - Processo de acordo com a reivindicação 15, caracteriza do por R9 ser -(CH2)nCH2V; R10 ser -0R? X ser -CHR3R4 em que R3 é OH e R4 é -H ou alquilo inferior, ou X ser

R6 em que R5 é =0 e R6 é -H ou alquilo inferior; e Y ser -CH3.
17 - Processo de acordo com a reivindicação 16, caracterizado por se preparar l-(dimetilamino)metil-2-hidroxi-8-metil-7-(l--oxopropil)indolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona.
18 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R9, R10, e R11 serem cada um -H; desde que R7 não seja -H.
19 - Processo de acordo com a reivindicação 18, caracteriza- 73 308 14539-1 -68-

do por R7 ser alquilo inferior, -CN, -(CH2)nCH2V ou -NHCH2Ar; X ser -CHR3R4 em que R3 é -OH e R4 é -H ou alquilo inferior, ou R5 _S rõ em que R5 é =0 e R6 é -H ou alquilo inferior; e Y ser -ch3.
20 - Processo de acordo com a reivindicação 19, caracteriza-do por se preparar 12-ciano-8-metil-7-(l-oxopropil)indolizino-[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona.
21 - Processo de acordo com a reivindicação 19, caracteriza-do por se preparar 12-aminometil-8-metil-7-(l-oxopropil)indo-lizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-on-ona.
22 - Processo de acordo com a reivindicação 19, caracteriza-do por se preparar 12-hidroximetil-8-metil-7-(l-oxopropil)in-dolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona.
23 - Processo de acordo com a reivindicação 19, caracteriza-do por se preparar 2-propil-8-metil-7-(l-oxopropil)indolizino-[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona.
24 - Processo de acordo com a reivindicação 19, caracteriza-do por se preparar (±)-12-ciano-7-(l-hidroxipropil)-8-metilin-dolizino[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona.
25 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R7, R10 e R11 serem cada um -H; desde que R9 não seja -H.
26 - Processo de acordo com a reivindicação 25, caracterizado por R9 ser -0R, X ser -CHR3R4 em que R3 é -OH e R4 é -H ou al- quilo inferior, ou R6 em que R5 é =0 e R6 é -H ou alquilo inferior; e Y ser -CH3.
27 - Processo de acordo com a reivindicação 26, caracterizado por se preparar l-metoxi-8-metil-7-(1-oxopropil)indo-lizino-[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona. -69- 73 308 14539-1
28 - Processo de acordo com a reivindicação 26, caracteriza-do por se preparar (±)-l-metoxi-7-(l-hidroxipropil)-8-metilin-dolizino[l,2-b]quinolin-9(llH)-ona.
29 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R7, r9, e R10 serem cada um -H; desde que R11 não seja -H.
30 - Processo de acordo com a reivindicação 29, caracterizado por se preparar 3-metoxi-8-metil-7-(l-oxopropil)indo-lizino-[1,2-b]quinolin-9(11H)-ona.
31 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R7, R9, R10, e R11 serem cada um -Η; X ser -CN ou -CH=CH2; e Y ser -H.
32 - Processo de preparação de uma formulação, caracterizado por se misturar um composto preparado de acordo com a reivindicação 1, com um portador ou excipiente.
33 - Processo de acordo com a reivindicação 32, caracterizado por o portador ou o excipiente serem um portador ou excipiente farmaceuticamente aceitáveis. Lisboa, Ol!t 199*1 Por SMITHKLINE BEECHAM CORPORATION =0 AGENTE OFICIAIr5