PT96107A - Processo para a preparacao de deerivados de anfotericina b - Google Patents

Description

* *

0 presente inventa diz respeita a novas compostas possuindo actividade farmacológicas à sua prsparaçao5 a composi-çSes que as conttm e è sua utilização no tratamento de xnfscçSss fúngicas em animais5 incluindo seres humanos« 0 macrélido polisna anfotericina B? produzido por Btreptamyces nodososé amplamente utilizado no tratamento ds infscçSes fúngicas» A anfotericina B é o único macrolido polieno compIsKO cuja estrutura molecular e configuração absoluta foi íirmemsnts estabelecida por meio de análise cristalogréfica ds raios X« A anfotericina B possui a fórmula (A> s

Pr sparararo~ss agora derivados de anfotericina B substituídos na posição 14 do núcleo de anfotericina B= Estes derivados revelaram possuir actividade antifúngica e são potenciaimente úteis como agentes antifúngicos»

Consequentemente5 o prsssnts invento proporciona um composta ds fórmula (ϊ)3 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável s

qus R.| á um grupa ácido carboKilica5 ura seu derivado? um resíduo cstona? uma funçSo aldaido ou metilo facultativamants subst.itu.idop FU é hidra;<i5 C.s aleoxi ou ura átomo da flúor? a R-3· é um grupo amina ou um -seu derivada*

Tal como é aqui utilisado? o termo derivado de grupo ácida carboxilico inclui ésteres e amidas* Os grupos éster incluem grupos alcoxicarbonilo* alqueniloKÍcarbonilos ariloxicar— bonilo,; hstsroariloxicarboniloj aralquíloxlcarbonilo e hstara-aralquiloxicarbonilo* As amidas incluem amidas primáriass secundárias s terciárias* Por exemplo* a fracçlo amino pode estar substituída com um ou dois grupos alquilo* Um resíduo cetona pode ser um resídua alquil, aril ou heteroaril cefcona* Um valor adequado para R« quando for metilo facultaiivamente substituído é hidroximetilo*

Salvo indicaçâto em contrário^ cada grupo alquilo,; alquenilo ou aleoxi é5 de prefer@ncia? um grupo C, com maior preferfncia ainda ura grupo s pode ser de cadeia linear ou ramificada* t

Quando aqui. utilisado5 α termo arilo inclui fracçSes carboclclicas snonaeic liças e híciclicas» por exemplo íenilo e nafiilo» Uma fracção arilo pode estar mono~3 di-s ou trissubsti-tuida com grupos que incluem carboxi? slcoxicarbonilo» hidraxig aIquiIos alcoxiP haloqénio s amino faciltativamsnte substituído com alquilo^ estando preferencialments mono- ou dissubstxtuida» 0 termo beteroarilcs inclui heteroarilo nsonocíclica de 5 ou ò membros e heteroarilo biclclico de 9 ou 1Θ membros»

Além di5303 o heteroarilo monociclico de 5 ou h membros ou o heteroarilo biclclico de 9 ou 1® membros contêm9 de prsfe-rlncia5 um ou dois heteroàiomos seleccionados de entre asoto5 oxigénio & snKofrBs que podem ser iguais ou diferentes no caso de estar presente ma is de um heteroátomo» No caso de heteroarilo faiciclico de 9 ou i@ membros» os dois anéis estão fundidos» de preferência com um anel tíe 5 ou 6 membros contendo um único hsteroátooío»

Salvo indicação em contrário» o termo halogénio inclui flúor» claro» bromo s iodo»

Quando aqui utilisado» o termo derivado de grupo amino incliu derivadíss de scilo» em particular derivados da acila com um substituinte básico tal como derivados de N-D-lisilo e ím-D-ογ·-nitilo» dsrivadcjs de guanidina e derivados de fr-glicosilo» A preparação de derivados de grupos amino apropriados é descrita na Publicação de Patente Europeia Θ ©1Θ 297 (Schsring)5 Publicação de Patente Europeia β Θ31 722 íDumex) e na Patente dos E»U»A» 4 3195 5172»

Us compostos de fórmula (I) e os seus sais podem também formar solvatos tais como hidrafcoss e o inventa abrange tanbèm

estas formas = Quando aqui for feita referência a um composto do invento ou a um seu sal? ela deve ser entendida como incluindo solvatos»

Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de fórmula Cl) podem ser formados por meios convencionais:; por exemplo por rsacção com d ácido ou base apropriados» us compostos de fórmula (1) podsm formar sais de adição de ácido com ácidos tais como ácidos farmacsuticamente aceitáveis ccnvsncionais5, por eaempla ácido clorídrico^ bromídrico? fosfórico» acèticop fumáricD:. salicílico» cítrico.. làctíco5 mantíéiicc,, tsrtárico, oxálico5 metanossu 1 fónico? aspártico e ascárbico» 0 invento abrange também sais quaternários»

Os compostos de fórmula (I) eni que R» é hidroxicarbo-aila podem formar sais de adição básicos com basess tais como bases farmaceulicamente aceitáveis convencionais.; por exemplo hidroganocarbonato de sódio,; carbonato de potássio? Hidróxido de li tio» trietilamina ? piridina5 lutidina e N~n>eti Iglucamina» A formação de compostos de fórmula íl) de acordo com o presente invento proporciona a criação de um centro qairsl adicional na posição 14 do núcleo da anfotsricina .8= Os compostos de fórmula Cl 5 podem» por isso,, existir sob várias formas estersQinéricas = 0 invento abrange também cada uma destas formas e as suas misturas» Os compostos de fórmula \I> possuindo uma configuração estsroquimica diferente na posição Ϊ4 podei» ser obtidos por intermédio de sinteses estereoespecificas5 adiante descritas»

Valores adequados para R., incluem hidroxicarbonilo,, Calcoxicarbonilo tal como mstoxicarbonilo,, 01μΛ alqusniloxi-· carhonilo tal como prop-2-eniloxioarbonilo» e hidroximetilo» *

valores adequados para incluem hidroKÍ3 alcoKi tal como matOKÍ? s flúor, é ds preferência um grupo suíno,, ·—£ ~ 0 presente invento proporciona também um processo para a preparação d© compostos de fórmula <ϊ)3 o qual compreende a reacçSo de um composto de fórmula i11> =

(II) sm que R.r è R0 tal como foi definido para a fórmula CI)p R^.' è um grupo amino protegidos s cada ' é hidrogénio ou um grupo protsctor ds sililop com um perâcido5 seguida de substituição sslsctiva na posição anomérica 13 do intermediário assim formado na presença de um composto R~—H em que é tal como foi definido para a fórmula (Σ)ρ s por3 seguidamsnte? ds modo facultativo ou sendo necessário e na ordem que for apropriada, se converter R_/ num grupo amino sa remover quando se tratar de um grupa protsctor de sililQg ss interconvertsr R15 se intsrconverter ss farmar um derivado do grupo ainino5 e ss formar um sal farma-ceuticamsnts aceitável, r

Um parácido adequado para reacçSo com um composto ds fórmula <!!> é o ácido m-cloropsrbensóico» Quando R*, é sililo, a reacçSo é adequadamente levada a cabo sob condições anidras? a uma teaípsratura redualda, num solvente inerte, por exemplo n;-hsKSRos cloreto de metileno ou tetrahidrafurano= O composto intermédio formado por reacçSo com um perácido pode ser transformado, sem necessidade de isolamento, num composto de fórmula (1), mediante reacçSo com perácido na presença ds um coníposto R0-H (em que R0 é hidroxi ou 0.,_ο slco-xl)= Por exemplo, quando R.-j é hidroxi e R^, é hidrogénio, a reacçSo com perácido é convsnisntemente levada a cabo em tetrahi™ drofurano» AIternativamente, o composto intermédio isolado poda ser feito reagir de seguida com um composto R_~H=

No caso em que cada R,, num composto de fórmula (1Σ) é um grupo protector de sililo, α composto intermédio formado por reacção com um perácido foi isolado, tendo-se demonstrado tratar--•se ds um composto de fórmula < 111 > g

em que Ft .· s sSo tal como foram definidos para a fórmula (II)s cada um dos é um grupo protector de sililon s é aciloxi, Notar-se-á que o substituinte aciloxi R.-,.. na posição 13 Ί

corresponde ao perácido escolhido» Assim? por exsiiiplaP quando α perâcido ê ácido sv-c 1 oroperbenz ó i c o ? R^, è gç-clorQbenzoiloKi» 0 substiiuinte 14-hidroxi nos compostos de fórmula <III> revelou ter a configuração (S) em análises espectroscópi-cas» A estereoquimica CB> é conservada na posição 14 em compostas de acordo com o invento de fórmula <1)? quando preparados por meio desta variante do processo»

Inversamente5 os compostos de fórmula (I) preparados a partir de um composto intermédio de fórmula (11) em que cada um dos é hidrogériios revelaram possuir estereoquimica CR) na posição 14»

Mos casos em que é isolado um composto intermédio de fórmula CIII)5 as condições sob as quais ê sfsctuada a substituição selectivs na posição anomérica 13 podem variarΗ de acordo com o valor desejado de

Assim» nos casos em que R.-* num composto de fórmula Cl) for Ci_cj aleoKis um composto de fórmula (III) pode ser dissolvido num solvente inerte e agitado è temperatura ambiente com o álcool C.,_p aiquillca correspondente» Por exemplo5 nos casos em que num composto de fórmula (I) for nístoxi,, um composto de fórmula (III) pode ser agitado durante 2Θ a 24 horas numa mistura de cloreto de metileno e metanol»

Mos casos em que R~ num composto cie fórmula (I) for hidroxi» um composto de fórmula (III) pode ser convenientemente hidroiisada por meia de cromatografia de permuta ióníca5 com utilização de uma resina de permuta iénioa ácida» A resina Amberlyst 15 é parliculannente adequada para a substituição de

ésier3 utilÍ2;andQ---5&5 por εκεπ)pio, uma soluçSo ds um composto de fórmula (III) num solvente tal como n-hexano.

Nos casos em que RU num composto ds fórmula (I) é flúor, im composta de fórmula (III) poda ser dissolvido num solvente inerte5 por exemplo tetrahidrofurano? e tratado com fluoretcs de hidrogênio-piridina sob condições anidras. Este procedimento leva à clivagem concomitante aos grupos protestaras de siliIo R,,, A inierconversão de noutros valores de R~s pode ser levada a cabo empregando metodologias tradicionais, Assim3 um átomo ds flúor Fu pode ser convertido em hidroxi R„ sob condições aquosas na presença de um catalisador ácido tal coíbo g-tolusnos-sulfonato de piridínio ou ácido 10-canforsulfónico.

Valores adequados para grupos de protecclo de amina R?r

O incluem trifluoroacetilo, 9-fluarenilmetoxicarbonilOj 252?2-fcri~ cloroetoxicarbonilog 2-feniIsuIfonilstoxicarbonilo e 2-trimetil-sililetoxicarbonilo. Um grupo de protecçlo de amina preferido é 9--f luoreni Imetoxicarboni lo,

A conversão de um grupo amino protegido em amino FU pode ser levada a cabo sob condições básicas,

Um grupo de protecçlo de amina tal como trifluoroaceii-lo pode ser removido utilizando uma base tal como amónia ou carbonato de potássio em metanol anidro.

Um grupo de protecçlo de araino? tal como 9-fluorenilme-toxicarbonilOj pode ser removido sob condições básicas num solvente tal como sulfóxido da dimeti lo íBstanólico, Bases adequadas para desprotecçSo ds amina incluem amónia^ )

dialquilaminas tais como dimetilamina e distilamina, trialquil-aminas tais como tríeiilamina. aminas cíclicas e especialmente aminas secundárias cíclicas, tais coso morfolina, pipsrazina e ma is especial mente piperidona, e bases diazabicíclioas tais como 1,5-diazahiciclaC4»3.03nan-5-ena (DBN) e, de preferência, l,8~dia™ EabicicloC5=4=03undec-7-sno CDBU). A dssprotecçlo ds amina pode ser levada a cabo usando j.·--:!.® equivalentes de base, de preferência 1-2 equivalentes, a temperaturas reduzidas ou elevadas, por exemplo a uma temperatura entre -30° e 5ô° e de preferência entre 0° s a temperatura ambiente5 durante um período que pode ir de 1 minuto a 5 horas, ds preferência ds 3Θ minutos a 2„5 horas. A interconversão de R1 noutros valores ds R., pode ser levada a cabo usando procedimentos de interconversão ds grupos funcionais adequados no domínio da química dos macrólidos polia-nos.

Por exemplo, um grupo ácido carboxílico R., pode ser ssterifiçado para dar origem a um éster meti.lico R, utilizando diazomstano num solvente éter a temperaturas reduzidas. Um éster alilico pode ser convertido num grupo ácido carboxílico por tratamento com uma amina tal coma pirralidina ou morfolina em presença de uma quantidade catalítica de im catalisador de paládio <0)s por exemplo tetrakisC trifsnilfosfina) paládio (Θ) =

Pode haver conveniência ou ser necessário realizar íntsrconvsrsSss de grupas funcionais , caso seja dssajsdo, usando compostos de fórmula (I) em que R·^ está numa forma protegida.

Grupos protestares de silila , adequadas incluem triffletilsililo, trietilsililo e t-butildimetilsililo, ds preferência trimetiisililo ou trietilsililo* Qs grupos protectores de silila podem ser removidos usando métodos ds dsspratscção conhecidos, por exemplo usando uma solução de fluorsto de hidra-génio-piridina tal como atrás se dascrvau* A dissociação pode ser a temperatura normal ou reduzida, por exemplo a uma temperatura entre ~1&°C e S0°C5 ds preferência sntre 0°C s a temperatura ambiente,, durante um período que pode ir até 6Φ horas, de preferência entre 4 a 24 horas*

Os compostos intermédios ds fórmula (II) podem ser preparados a partir do produto natural anfotericina B mediante protecção da função amina na posição 19 da fracção açúcar com um grupo ds protecção de aminas derivação do grupo earboxi na posição lè de acordo com as necessidades * s tratamento com um agente tíe si 1 ilação* Estas transformações pode ser sfectuadas em qualquer ordem julgada adequada*

Qs grupos tíe protecção de araina podem ser introduzidos por procedimentos convencionais* Por exemplo* um grupo ds protecção de amina trifluoroacetilo pode ser introduzido por reacção da amina primária com trifluoroacetalo de etiio numa base tal como diisopropiletilamina numa mistura solvente da metanol--sulfóKitío de dimetilo ou metanol-dimetiIformamida a uma temperatura que pode ir da normal a reduzida, por exemplo a θ°0=

Um grupo 9—fluorsniImetoxicarbonilo pode ser introduzido por adição tíe N--£9--fluorenilmetOKicarhoníloxi)-succinimida a uma pasta da amina primária em metanol-dimeti1formamida sob condições anidras, na presença de uma base tal como piridina* >

A1 ternativamen ts s um grupo de protecção de amina 9-fluareniImetoxicarbonilo pode ser introduz ido por adição de cloroformato de 9—fluorenilmetilo a uma solução da amina primária em metanol-dimetiiformamida sob condições anidras» na presença de uma base tal como carbonato de potássio» 0 grupo carboxilo arsomèrico na posição 13 pode facultativamente ser permutada selectivamente antes da reaeção com um agente de sililaçlo mediante reaeção com um álcool C1__cí alquilico tal como atrás se descreveu para a interconverslo de hidroxi em alcaxi H.~., em compostos de férmula (I)»

Os grupos hidroxilo livres podem ser sililados usando procedimentos convencionais» A reaeção com agentes de sililaçlo tais como trifluorometanossultonato de trimetilsililo e trifluo-rometanossulíanato de trietilsililo pode ser levada a cabo num solvente inerte adequados por exemplo em diclorometanog sob uma atmosfera inertes numa gama de valores ds temperatura» por exemplo entre ®°C e 50°C» A reaeção é eonvenientemente levada a cabo usando um excesso de agente de sililaçlo na presença de uma base fracas por exemplo um derivado de piriuina tal como 2sõ~lu~ tidina» Aiternativafl)ente5 a base pode substituir o solvente nos casos em que for um líquido» 0 tempo de reaeção é função da dimensão do grupo sililo5 podendo ir de alguns minutos para um grupo trimetilsililo até várias Horas para grupos sililo maiores» A introdução ds grupos protsctorss ds sililo R^.. é acompanhada da eliminação ou eliminação parcial do sufastiiuinte na posição 13 para dar origem a derivados 13?14—anidroanfoterici— na 8. 0 grau de eliminação varia ds acordo com o agente de si1 ilação e o solvente5 sendo dominante quando o solvente é dxclorometano e o agente de sililação é triflato ds trimetilsililo» Mos casos em que a reaeção de sililação dá origem a uma

mistura de compostos, estes podem ser separados por técnicas sroíísatográf icas·

Após ã formação do composto intermédio i3514~ariidrD tis fórmula CII) em que cada um dos R... é um grupo protestar de sililo, é necessário remover os grupos protsctores de sililo Rã, a fim de levar a cabo a reacçlo com perácido para preparar um composto de fórmula (I) com sstersoquimica íR> na posição 14= Os grupos de sililsçSo podem ser removidos tal como atrás se descreveu=

Os compostos intermédios de fórmula CII) podem ser preparados utiliçando procedimentos descritos na Publicação de Patente Europeia = EP-A 0 35Θ 1ó4 CBeecham> =

Gs compostos intermédios de fórmula ¢111) são novos e como tal tacem parte do invento»

Os compostos tís fórmula (I) s os seus sais farmaceuii-caments aceitáveis são agentes antifúngicos potencia1ments úteis no combate a infacçSes fúngicas em animais, incluindo seres humanos» ror exemplo, são potencial mente úteis no tratamento de infecçõas fúngicas tópicas em seres humanos provocadas, entre outros organismos 5 por variedades de C and ida» Trichophvtpn Microsporum ou Epidermophyton» ou infscções das mucosas causadas Par Candida albicans (por ex= aftas & candidiase vaginal)» Podem também ser usados no tratamento de infecçSes fúngicas sistémicas provocadas, por exemplo,, por Candida albicans» Crypto-SfiSaig.. „neofor.fliani? Asgerqillus fumiqatus, Cocçidioldes, Paracqc c: ία loides,, Histoplasma ou Blastofltyces» Podem também ser usados no tratamento de micetoms eumicótico, croiiíoblastomicose s ficoraico-se. )

Q inventa proporciona ainda uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula kl) ou um seu sal farmaceu-iioamsnts aceitável, juntamente com um diluents ou suporte farmaceuticamenie aceitável» A composição dsstina-se preferencial mente a utilização por seres humanos, sob a forma de comprimidos, cápsulas, creme ou sob uma forma injsctàvel» 0 invento proporciona também um processo de preparação de uma composição farmacêutica que compreende a mistura de um composto de fórmula CI), ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável;, com um suporte farmaceuticamente aceitável.

Para utilização por seres humanos» um composto antifún— gioo de fórmula Cl) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável pode ser administrado isoladamente, sendo todavia administrada, de um modo geral, numa mistura com um suporte farmacêutico seleccionado tendo em conta a via de administração pretendida e a prática farmacêutica convencional» Por exemplo, pode ser administrado par via oral sob a forma de um comprimido contendo excipientss como amido ou lactose, ou numa cápsula ou óvulo, quer isoladamente, quer misturado com excipientes, ou sob a forma de um elixir ou suspensão contendo um agente aromaiizante ou corante» Um composto pode ser injectado por via parsntérica, por exemplo, por via intravenosa, intramuscular ou subcutânea» Para efeitos de administração parsntérica, um composto é preferencial-mente usado sob a forma de uma solução aquosa esterilizada que pode conter outras substâncias, por exemplo, sais ou glucose em quantidade suficiente para tornar a solução isotónica»

Para efeitos de administração oral e parsntérica a seres humanos, presume-se que o nível de dosagem diária de um composto antifúngico de fórmula Cl) se situará entre Θ,Ι e 1 mg/kg Cem doses divididas), quando administrado pela via oral ou

parsntérica» Assim;, presume~se que os comprimidas ou cápsulas contenham entre 5 mg e θ»5 g de composto activo para administração única ou de dais gu mais ao mesmo tempos como for apropriado» 0 médica dsterminaráu de qualquer modo s em cada csso5 a dosagem mais indicada para cada paciente s que variará com a idade, peso, e rsacçao ao medicamento do paciente,. Podem existir, videntemente 3 casos individuais em que sejam necessárias doses mais elevadas, e estes são também abrangidos pelo invento» AIternativamente, um composto antifúngico de fórmula (I) pode ser administrado sob a forma de um supositório ou pessário» ou pode ser aplicado topicamente sob a forma de uma loção, solução, creme» unguento ou pó» Por exemplo» uni composto pode ser incorporado num creme consistindo numa emulsão aquosa da glicóis de poiistileno ou parafina liquida5 ou pode ser incorporado,, numa concentração entre 1 e 1#%3 num unguento consistindo numa base de cera branca ou de parafina macia branca em conjunto com agentes de estabilização e conservantes, na medida em que tal seja necessário»

No âmbito das gamas de dosagem indicadas, não foram observados quaisquer efeitos toxicológicos adversos com os compostos de acordo com o invento que pudessem impedir a sua administração a pacientes adequados para o tratamento de infseções- fúngicas» 0 presente invento proporciona um composto de fórmula íl) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável para utilização como substância terap@uti.ca activa»

Uns composto para utilização como substância terapêutica activa destina-ss a ser utilizado no tratamento de doenças em animais, incluindo seres humanos» Tal como atrás se referiu» os

compostos de fórmula (I) e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis possuem sctividade sntifúngica s sãte potencialmente úteis no combate a infseções fúngicas s® animais, incluindo seres humanas.

Consequentemente? o presente inventa proporciona ainda um composto de fórmula (1) ou um seu sal íarmaceuticaments aceitável para utilização no tratamento de infecçSes fúngicas, 0 presente invento proporciona adicionalmente um método ds tratamento de infecçSes fúngicas em animais, incluindo seres humanos, que compreende a administração de uma quantidade anti— fúngica eficaz de u® composto de fórmula (!) ou de um seu sal farmaesuticamente aceitável aa animal. 0 presente invento proporciona também a utilização de um composto de fórmula (I) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável na preparação de um medicamente para ser usado no tratamento de infecçSes fúngicas em animais, incluindo seres humanos.:

As Descrições e os Exemplos que ss segue® ilustram a preparação de compostas de fórmula (I). As abreviaturas "IMS”, MTES“ e "Fmoc” são utilizadas para representar grupos trimstilsi-lilo, trieiilsilílo e 9—fluorenilmetQxicarbGnilo, respsetivamen-te

Descrição 1 M—Ç9-Í-iuorenilflietoKicarbonilΐanfotericína B CDi)

(Dl)

A Méto A uma solução de anfoterieina B (5 = Θ4 g» 5 = 4 mmol > em dimetilsulfóxido seco (5Θ ml) s metanol seco *;5@ ml) adicionou-se piridína seca (θ = 53 mlg è»5 mmol>= Sob uma atmosfera de azoto adie ionou.-ss? N- í v-f Xuoreni1meto xicarbon i1ox i)succ inimid a sé1i da ii!5b9 y g 7:i6 mmol) = Após agitação durante i hora* adicionou-se uma outra porção de M-í9-fluorenilmetoKicarboniloMi)succinii?iida <0;i28 gP 0 = 8 mmol) = Após mais ®,,25 horas adicionou-se ácido acético glacial Í0S5 ml 5 8,7 oimo 1) :i a solução foi diluida com metanol \35 ml) s vertida sobre éter distílico C5 1)= 0 precipi tado foi filtrados lavado com éter distilico a saco para dar

origem ao cempasto em epígrafe <01) que fei utilizado sem purificação ulterior^ Método fcj A uma solução de snfotericina B <@ = 5Θ gr, ©s54 mmol) s carbonata de potássio anidro <®517 g3 1?2 mmol) em dimefciIsulfó-Kido seco <10 ml) e metanol seco (2 ml) sob uma atmosfera de azo ta a θ~ϋ3 adicionou—se cloroformato de 9—f luorenilnistilo sólido <0?21 g5 0581 mnial}» Após agitação durante i hora? adicionou-se outra porção de clcrcformata de 9-fluoreniimetila <0504 g== 05I7 iiíííío 1) * Após ®,s25 horas,, a mistura de reacção foi vertida sobre água destilada (2Θ© ml) = 0 precipitado foi recolhido por meio de centrifugação? dissolvido em metanol e evaporado no vácuo» 0 resíduo foi dissolvido no volume mínimo de uma mistura de tetrahidrofurano e metanol (lsi> e vertido sobre água destilada (2ΦΘ ml3 valor de pH ajustado para 3.2 por adiçlo de ácido acético glacial)» 0 precipitada foi centrifugados lavado com água e seco no vácuo para dar origem ao composta em epígrafe (01) que foi utilizado sem purificação ulterior» 2®

Descrição 2 éster mstilico de M-(9-flosreoiloetoKicarbonilíanfotsricina B i D2)

tá-t 9-FluoreniimstoKÍcarbonil )anf otsricina is Cif 1 > em bruto (053ò g5 ®53i mool) foi dissolvida numa mistura Isl de dimstilsul foKido e metanol <2® mi > = à temperatura cie ®°C e com agitação5 adicionou—ss uma solução de diacometamo em éter dieti— lico (25 ml) ao longo de ® = 3 horas» 0 diacometano foi producido a partir de Dia2ald = ' (®s39 gs i,B oimol) ρ hidróxido de potássio C@3iS g5 3 = 2 mmol)p água (1 ml) s 2-(2-etoKÍstoKi)etanal (2 ml)„ A reacçio foi agitada durante mais 1=5 horas s depois interrompida com âcxtio acético glacial» G produto foi precipitado vertendo—a sobre éter dieillico* Foi recolhido por centrifugação, lavado com êter dietilica, dissolvida -sm metanol e evaporado no vácuo= r?

ο - 21 Ο material em bruta fai purificado por meio de cromata-grafia ris coluna de pressão média sobre gel de sílica e sluiçlD com misturas de acetato de etilo/metanol= 0 campaste sm epígrafe ÍD2> foi obtido sob a forma de um sólido amarelo.· δΗ (270MHz) (dgTHF/d^-MeOH) 7.78 (2H,d, J 6.9Hz), 7.70 (2H,d,J 7.4Hz) , 7.35 (2H,dd,J 7.4 e 6.3Hz), 7.28 (2H,t, 7.4Hz), 6.63-5.93 (13H, complexo) 5.50 (XH,m), 5.32 (lH,dd,J 10.2 e 14.8Hz), 4.75-4.04 (10H, complexa) 3.90-3.00 (8H, complexg, 3.74 (3H,s), 2.50-1.15 (19H, complexo, 1.28 (3H,d,J 6.2Hz) , 1.20 (3H, d, J 6.3Hz) , 1.10 (3H,d,J 6.3Hz) e; 0.99 (3H,d,J 7.2Hz) ppm.

DescricSo 5 N- C Fluoreni Imeipxicarboni 1 ? -ló-u-aietil-anf otaricina......q.......IM)

N-(9-FIuorenilmeio>íicarhonil )anf otsricins B (Dl) (158S g5 3. ?ál mmol > s ácido d;~l@~canforsulfónico (Í56 mg5 0?67 mmol > foram agitados em ietrahidrofurano seco í 1® ml)/metanol (ò® ml) â temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto» Passados 15 minutos» adicionou-se tristilamina <©5Í4 mi., 1ΘΞ mgs Í=®1 mmol),, a mistura foi filtrada3 concentrada para um volume de cerca de I© ffil e vertida sobre éter dietilico/n-hsKana <8%?θ ml 1=1)» 0 produto que precipitou foi recolhido por meio de centrifugação, lavado com éter dietilico/acetato de etilo Clsl) e seco para dar origem ao composto em epígrafe (D3) sob a forma de um pó amarelo» CLEPs coluna 0D8 de fase invertida 5μ 25β κ 4 = a mm= eluents \ 8Θ% metanol - 2Θ% tampão fosfato pH 3 - 1 ssi.min ^ comprimento de onda de detecçlo 35® n®| tempo de retençãos 7r, é> minutos.

PescriçeÍQ 4 M-C9-FluoreniIíiietoKÍcarbonll )-5.5,Bs9,11,15.55,2' ;4‘ -nsoa-O-trie-tilsilil-i5.14-anidroanfotsrigina B.(D4i

'N

OTES

(D4) 0 produto da Descrição 3 (1,52 g> foi suspenso em dicloromeiano seca ía® ml) a ©°C sob uma atmosfera de azoto s com uma seringa adicionaram-se 236~luticlina (2.55 gg 2g7ò ml „ 23^8© t aunai) seguida de trifluorometanossulfonato de trietilsililo (4,88 g;; 4::18 ml 5 18..5Θ md! ) = Após agitação a ®°C durante 3® minutos,, o solvente foi evaporado e o resíduo dissolvido em n-henanOf filtrado s o filtrado reconcentrado para dar origsm a um óleo castanho, A purificação por meio tis cromatagrafia de coluna

X •si-iui-«; ytíi uíí Su. íi_a com siuiçSo ·_ο*§ι írnsturas de n“hs;;ano/acst;gtci as staio deu origem ao composto em spiqraíe CD4)„ hs tracçoss contendo o produto Í3s14-anidro foram lavadas com gslo/soiuçSo ds hidrogenossulfato de sódio Φ,Ξ H para reiiii_iij.au ua iuciama5 secas sobre sulfato de macjnésio snidro. riitraoss e evaporadas»

Rf @540 (Sílica) “ acetato ds stilo a 25% em n-henano»

δΗ (400MHz) ((CD3)2CO) : 7.88(2H, d, J 7.5Hz), 7.70(2H, d, J 7.5Hz), 7.43(2H, t, J 7.4Hz), 7.34(2H, t, J 7.4Hz), 6.56-6.11(12H, series de m) , 5.99(1H, dd, J 6.0, 15.4Hz), 5.55 (1H, dd, J 9.4, 14.9Hz), 5.34(1H, d, J 9.9Hz), 4.80(1H, d, J 8.7Hz), 4.73-4.60(2H, m), 4.63(1H, s), 4.59(1H, s), 4.50(1H, dd, J 6.5, 10.4Hz), 4.35(1H, dd, J 6.5, 10.4Hz), 4.32-4.17(3H, m), 4.12(1H, m), 4.01(1H, m), 3.90(1H, d, J 2.7Hz) 3.85(1H, dd, J 2.8, 8.1Hz), 3.80-3.66(2H, m), 3.6M1H, dt, J 2.7, 9.7Hz), 3.45(1H, t, J 9.1Hz), 3.34(1H, m), 2.64(1H, dd, J 8.7, 10.8Hz), 2.61-2.50 (2H, m), 2.43(1H, m), 2.40-2.28 (1H, m), 2.24-2.15(1H, m), 2.08-1.88(5H, series of m), 1.83-1.47 (6H, series of m), 1.25(3H, d, J 6.1Hz), 1.18(3H, d, J 6.0Hz), 1.10-0.88(87H, series of m), 0.77-0.56(54H, series of m)ppm. o protão do ácido carboxilico não foi observado. IV Vmax película finà : 3445, 3500-2500 (amplo, fraco ) / 1737 (shoulder. at 1720), 1680, 1510, 1461, 1416, 1380, 1310, 1240, 1192, 1169, 1080, 1007, 977, 740, 672CITI-1. hspeciru de massas KAb (matriz 3-NOBA) Massa observada ff 2155,5» Calculada para C, , 2155 =

Descrição a éster metilico de W-(v-f luorenilaetoxicarbonil)r3,5,8sv. li ^,15, J5,-2',4*-nona-O—trietilsilil—13,14-anidrQanfqtericina B (05)

OTES

(D5)

Método A éster metilico de Í9~f luorenilmsiopíicarbonil lanfcte-ricina B CD2) Cí5à q5 1?4 fnmol) foi transformado numa pasta sm cloreto de metileno seco C12 ml > = Bofa ima atmosfera de azoto? adicionou-ss 2sò~Iutidina <2S9 ml 5 25u0 mmol) seguida de triflua-rometanossulfonato de tricnetilsililo C35o ml ? 18=1 mmol) = Deu~ss a ebulição de algum solvente.. Passados 2© minutosr, as materiais voláteis foram evaporados no vácuo s o res-tiduo recolhido em rv-heMano (8Θ® ml)= 0 precipitado foi removido por meia de filtração e o filtrado foi evaporado. 0 resíduo trimetilsililado nSo purificado foi dissolvi-da em tetrahidrofurano seco íi® ml) numa garrafa de plástico·: Set? ufisa atmosfera de azotos uma solução de fluoreto ds hidrogé-nio.piridina <56 ml de uma soluçSo obtida a partir ds 14s3 g de reagente fluorsto de hidrogénio.piridina a 7®% s 9® ml de piridi— na com tetrahidrofurano para perfazer 25Θ ml - equivalente a HF 2M -· 112 Jiífsol) foi adicionada por meio ds uma seringa ds plástico. Após agitaçlo durante quatro norasP a rearçao foi vertida sobra atar dieiilieo/n-hsKano <1s1s 4ô® ml). 0 precipitado foi filtrado s lavado com éter dietílico. soluçSo de hidrogenofosfato dissódico a 7% s água e seco. 0 composto anidro não purificado foi transformado numa pasta em cloreto da metileno seco <12 ml). Sob uma atmosfera de acoto? 2.6-lutidina (2P9 ml5 255® mmol) foi adicionada seguida por trifluorometanossulfonato da triatilsililo Í4?l ml, 18?i ml). Passados 2® minutos3 os materiais voláteis foram evaporados no vácuo e o resíduo recolhido em n-heKsno <8#© ml). 0 precipitado foi removido por meio ds filtraçSo e o filtrado evaporado. 0 produto em bruto foi purificado por meio de croraatografia "flash” sobre gel de sílica com eluição com misturas ds n-hexano/aestato ds etxlo/trietilamina para dar origem ao composto em epígrafe <D5).

UV λιηάχ (hexano) 407, 383, 364, 345, 265 and 206nm I vmax fcelicula fièa 2960, 2915, 2880, 1735, 1675, 1505, 1460, 1415, 1380, 1310, 1240, 1195, 1170, 1080, 1010 e 7 4 Ocm—1. ÔC (67.80MHz) [(CD3)2CO] 173.55, 170.48, 156.35, 154.50, 145.01, 142.17, 138.98, 135.22, 135.12, 135.02, 134.77, 134.18, 133.29, 132.83, 132.70, 132.48, 131.47, 130.63, 128.46, 127.84, 125.82, 125.71, 120.78, 102.04, 99.23, 76.69, 76.37, 76.28, 74.45, 73.78, 73.62, 73.44, 73.19, 71.15, 70.44, 68.63, 67.24, 67.18, 58.13, 53.82, 52.37, 48.12, 47.98, 45.74, 43.63, 41.24, 40.69, 40.13, 36.62, 35.16, 27.58, 19.85, 19.20, 18.89 and 11.27ppm.

Espectro ds massas í-í4B (matriz -i-NOBA) massa observada MH' 2iòv,= Massa calculada para C1 sBia r. 2iòB?3 =

Método B M“-(9--FluorenilmetDKicarbonil )~-3;s558s95Íiís15=i35ii2' *4'' --nona“0--tristilsilil~13514-anidroanfotericins B <D4> <Θ?έ>7 mmol > foi dissolvida em éter distilieo (1Θ iíií). k temperatura de e com agitaçlo? urna solução ds diassrastano em éter distilico (15 ml) foi adicionada ao longo de ©„3 horas* 0 diazDmetano foi produzido a partir tíe N-metil-N-nitroso-gf-tolueno sulfonamida (DIAZALD) (Θ529 gs 0?14 ikíuqDu hidróxido de potássio (0511 g? 0*2 minai) ρ água ml) e 2~C2-etaxistoxi) etanol <Θ56 ml)* Após agitação durante maís 0?75 horas* fez-se borbulhar azoto através da rsacção para remover o excesso ds tíiazometano* 28

us materiais voláteis foram depois evaporados para deitar coma resíduo o composto em epígrafe CDSí.

Descrição., 6 Éster @etilico de N-C 9-f1uoren ileetox icarhoo í1)-15-Q-C 3-c1oroben-zoil ?—14—(SI»—hidroKÍ—5,5»8a?«11« 15^55,2' ,4J -nona-Q-trietilsilil anfotericina B CDfe)

ft uma solução de éster metílico de N— Cv—í1uorsni1meto-xicarbonil )“3?5S8S9511, 15,35,2' ,4' -nona-O-tristilsilil-iS, 14-ani--· droanfotericina B ÍD5) (2 g„ 0V9 mmol) em haxano seco (2Φ ml) foi adicionado hidrogenofosfato dissódico sólido (&?2é- g, 1,8 mmol). Com arrefecimento com gelo·, adicionou-se ácido m-clDroperbencóico sólido í©,21 g, 1,2 mmol) e a reacção foi agitada durante durante 0so horas* A reacçao foi diluída com rv-hexano e lavada com solução de sulfito as sódio í8%> e água até se atingir a

neutral idade» Os materiais orgânicos foram secos s evaporados= 0 produto em bruto foi purificado pior meia de cromatografia ’tlash" sabre gel cie sílica com eluiçSo com misturas de n-hexano/-· acetato oe etx i. o/triste lamina para dar origem ao composta sni epígrafe CD6) c UV Xmax (hexan0) 405, 382 e 362.5nm. IV Vmax (pelicula fiijia 3460-3300 (br) , 2960, 2910, 2880, 1735, 1505, 1460, 1415, 1375, 1240, 1110, 1080, 1005 e 740CÍH-1. ôc (67. 80MHz) [ <cd3)2co] 172 .06 , 171.23, 163 .64, 156 • 30 145 .07, 144.99 , 142. 15, 138. 55, 135 .66, 135. 12, 134. 82, 134 .50, 134.19 , 133. 82, 133. 63, 133 • 44, 133. 23, 133. 06, 132 .88, 132.68 , 131. 85, 131. 55, 131 .35, 131. 12, 130. 71, 129 .15, 128.86 , 128. 46, 127. 85, 125 .85, 125. 74, 120. 78, 107 .76, 98.16, 77.38 / 76 :.34, 75 .73, 74.51, 7 3.85 / 73 . 67 73. 49, 73.26, 72.77, 72. 06, 70. 83, 69.64 , 68 .70, 67 . 60, 67. 21, 58.10, 56.29, 52. 44, 47. 98, 47.39 , 47 .04, 43. 72, 42. 07, 41.12, 37.13, 36. 16, 27. 35, 19.53 , 18 .91, 18 . 31 11.74 ppm.

Espectro de massas FAB (matriz 3~N0BA> massa observada MH* 2343= nassa calculada para C1.NCU,ClSio3 234®s3„

•V

Descrição 7 éster metilico de H~C9-f 1 usrsniImstosícsr boniI)-14-(S)-hidroi-15-0—ffigtil-5,,5.,8,9, 11«15,35,2* ,4*-nona-Q-trietilsilil_anfoteri- ciraa B CD7)

(D7) Método ft éstsr metilico de N~(V-f 1 uoreni 1 mstox i carboni 1)--13---0--í3--olorobsnsoil }~!4“CS>~hidroMÍ~3,5,8,9,11,15535?2r 54! -nona-G-tristilsí1il antotsricina B CD6) Cl g, 0,43 mmol) foi dissolvido em cloreto de emtilsno (12 ml) s metanol (12 ml). Sob uma atmosfera de asoto, hidrogenofosfato dissódico sólido (13® mg, ¢,92 ííííiiol) foi adicionado e a mistura agitada durante 22 horas» 1

A solucSo foi filtrada e os JRê& X.QY "1.5.Í.B Qí^Cfân .1CO5ΟV3.ρOi~3. produto ei íii bruto foi purificado por meio de cromatografia sobre gel de sílica com eluiçao com misturas de n·—hexano. de etilo/ tristilamina. dos. 0 flash" /-3. C S *C S‘CCí

UV Xmax (hexano) 408, 384, 364 e 346nm. IV vmax (película fiàa 3450, 2960, 2915, 2880, 1740, 1505, 1460, 1415, 1380, 1310, 1240, 1195, 1165, 1080, 1010, 900, 865, 820 e 740ΟΠΙ-1. δΗ (400 MHz) [dg acetona' 7.86 (2H, d, J 7.5 Hz), 7.70 (2H, d, J 7.2 Hz), 7.42 (2H, t, J 7.4 Hz), 7.35 (1H, t), 7.34 (1H, t) , 6.73-6.58 (3H, complexo, 6.48-6.09 (9H, complexo, 5.93 (1H, dd, J 15.8 e

3.8 Hz), 5.46 (1H, dd, J 14.9 and 9.6 Hz), 5.30 (1H, d, J 9.9 Hz), 4.66 (1H, complexo, 4.55-4.48 (2H, complexo incluin do ura a dd a 4.50, J 10.4 e .. 6.4 Hz), 4.46 (1H, s), 4.34 (1H, dd, J 10.4 e . 6.4 Hz), 4.26-4.17 (4H, complex*, 4.09-4.02 (2H, complexo, 3.93-3.90 (2H, complexo , 3.72-3.61 (6H, complexo incluindo um singleto a 3.72), 3.47 (1H, t, J 9.2 Hz), 3.40 (1H, multipleto , 3.33 (1H, multipleto, 3.15 (3H, s), 2.90 (1H, d, J 11.1 Hz), 2.69-2.40 (4H, e um multipleto’ a 2.52, J 10.5 Hz and a multiplet a 2.43Hz), 2.18 (1H, multipleto, 2.01-1.75 (10H, complexo, 1.64 (1H, multipleto, 1.51 (1H, multipleto, 1.25 (3H, d, J 6.1 Hz), 1.17 (3H, d, J 6.1 Hz), 1.11-0.89 (87H, complexo e 0.83-0.55 (54H, complexo ppm. uspect.ro de massas FAB (matriz 3~M0BA/Na> massa observada MNa" 2239* Hs5sa calculada para C, ^H^^NO^Sir», 2216.4. i l i Z.J.O ití1 ·

Método B Éster metílico de N-<9-fluoreniimstOKicarbonil)-355»B5-9511 ? 1553552' 54' --nona-O-trietilsili 1-13, Í4-"snidroanfatericlns B (D5) (197 mg5 Θ5Θ91 mffiol) foi dissolvido em cloreto de meiileno/-mstanol <Í2 ml5 is1) * Hidrogenofosfato dissódico sólido <26 mg? Θ5Ι8 mmol) foi adicionado, Adicionou—ss ácido m—cloroperbensóico sólido <2®53 mg5 0*12 orno 15 com arrefscimento com gelo* Após agitação em gelo durante i hora? a reacçSo foi agitada à temperatura durante 21 horas» A rsscçSo foi diluída com n-hexano & lavada com solução de sulfito de sédio a 7%? solução de bicarbonato ds sódio e água* Os materiais orgânicos foram secos s evaporados* 0 produto em bruto foi purificado por meio ds cromatografia "flash" sobre gel de sílica com eluiçlo com misturas ds rv-hexano/acetaio de etilo para dar origem ao composto em epígrafe <D7>. yescriggg » éster mstilics ds W-Ç¥-fluorsnilfpetgKÍçarbonlI)-14-Çs)-hidroKÍ--5,5,8,9,11,15,35,2' ,4'-ncma-Q-trigtilsililanfatsricina B CD8i

A uíhs solução de éster metilico de N-C9-fluoreniImeto·-· zicarfaonxl }~i3~0-<3-clorabsn;soil )~Í4“(S)"“hídraxi“-3553Q39s 1 í 5 i5s“ 35,,Ξ' =,4' -nona-O-tríeiiIsí lil anfotericina B <D6) (ΙΘΘ mg5 mínol) sm n-hSKano <2 mi) sdicxonou-ss a resina de permuta iénica Amberlyst 15« A solução foi agitada no escuro sob uma atmosfera ds azoto durante 185S horas. A solução foi filtrada s os materiais orgânicos lavados com água,, Os materiais orgSnicos foram secos e evaporados. O produto em bruto foi purificado por meio de cromatografia ,s flash” sobre gsl de silica usando misturas QphsKano/acstato de etilo/trislilamina.

Espectro ds massas FAB (matriz 3~N0BA/Wa) massa observada MMa* 2225« nassa calculada para ϋ1tTH?12201?3« 34

PeseriçSo V jstgr aistilicu. de N-f9-fluorenilmetoxicarbonil)3,5,0,9,il, 15,35,-g-l_,41r^opa-p-triiiietiIsi 1 il-15,14-anidroanfotericina B CD9) •;v.

OTHS

(D9) -v H uma pasta de éster mstllieo de M~ (9—fluareni Imetoxi-· carbonil)anfatarieina B CD2> (0Λ7 g? Θ„15 mmoi) em clarete ds metileno seco (1*5 ml) sob uma atmosfera ds azoto adieionou—se v;iá-iutidzna ^05v9 ml5 255 míiiol) seguida par trif 1 uarometanossu 1 -Tonav.o os "ri®=íiIsiiiiD í05-3/ ml 5 l;i95 mmol>= Após aqitaçao á temperatura ambiente durante θ„25 horas, a solução foi evaporada e sdicaonou-ss nr-hexano (60 ml)s Os materiais sólidos foram tíitursaos s rsoiDviuPs par mexo de filtração, Os materiais urganiucs turam evaporados para dar origem ao composto e® epiqra— fe (09) „ __ ____ v /, ςη ΜΗ «O 4.39-4.09 (4H series de m) , 4. (1H/ S ' ‘ , ' ' 76 (3H s) 3.63 (lH,m) 3.4β (ΙΗ,Ο, (4H, series de. m) , 3.36 1 ' ' „ 2 13 (lH,d), 3.30 2.63-2.28 (5H, series de «0,

2.03-1.78 (5Η, series de m) , 1.78-1.35 (9H, series de m) , 1.21 (3H, d) , 1.17 (3H,d), 1.03 (3H,d), 0.97 (3H,d) ,de 0.13 (81H, series de m) ppm. \ fíitó •y ΛΓ5

/89

.U

5:.·5 *·. 5 .. S

Descrição.. 1Θ éster metilico de N-C9-fluQrenilffistoKÍcarbosiiI)-íõ-0-C^-clorob5n-goii)-14-(S)-hidroKÍ-5,5,8,¥, 11,15,55,2- .4'-nona-Q-triaietilsilil anfotericina B (Ρ1Θ#

(D10) Éster ©etílico de Μ-19-f luorenilmetoKicsrbonil }—355j8?~ 9?ils15g35!;2- ,4' -nona-O-trimeti lsilil-13P t4~anidroanfotericina B <D9) Cl?26 g, ®,70 «imo 1) foi dissolvido mm diclorometanQ Í3S5 ίϊί1)= A uma temperatura de ~3e°C5 adicionou-se ácido m-ela— roperbenHóico sólido <@5122 g5 θ571 mrnol) m. deÍKOu~ss a reacção atingir a temperatura ambiente= A rsacção foi diluída com hosana e lavada com soluçSCo de sulfito de sódio a 71 s água, Os materiais orgânicos foram evaporadas., 0 produto em bruto foi purificado por meio de cromato-gratia ds pressão média sobre gel de sílica usando misturas de rv-henana/acetato de etilo para dar origem ao composto em epígrafe (Di@), UV \max (hexano/ 404, 381, 361, 344 e 205nm. IV vmax (pelicula fifta 2950 , 1725, 1500, 11 05, 1070 , li DOO and 840 cm- .1 ôc (67. 80 MHz) [dg-acetona.] 172 .12, 171. 02, 163. 42, 156.42 145 .06, 144.90, 142. 03, 137 .29, 135 ,84, 135. 03, 134 .86, 134 .60, 134.33, 134. 15, 133 .96, 133 .86, 133. 58, 133 .34, 133 .29, 132.83, 132. 53, 132 • 22, 131 .23, 130. 92, 130 .71, 129 .13, 128.43, 127. 79, 126 .02, 125 .93, 120. 73, 106 .87, 97. 93, 80.57, 77 .70, 75. 90, 75. 61, 74.43 , 73 .70, 73 .44, 72. 84, 70.86, 70 .66, 69. 19, 68. 58, 68.47 , 67 .59, 67 .02, 57. 82, 56.60, 52 .44, 47. 94, 47. 48, 46.99 , 43 .81, 42 .82, 40. 51, 40.44, 37 .81, 35. 30, 27. 08, 19.68 , 18 .71, 17 .38 e 12.18 ppm.

Espectro de massas FAB (matriz: 3-NOBA) massa observada MH’ 1961 = Massa calculada para Ca^H1 01ΒχοΡ 196159„ - 38 -

Descrição li éster isetilico de N-(9.fliorenilmetQKicarbomil)-15-0-(5-cloroben-5QÍ1)—14—(S)—hidroKi anfotericina B CPU)

(Dll) éster ffistilico de iuorsniImstDKicarboni 1 )-13--0- -\3-ciorobsneail >-i4--<S>-hidrQKi“3!15s8?9j li 15„35==2' »4' -nona-O---trimstilsilil aníotsricina B (Dl®) íiéi mgs ®,,®S mmol) foi dissolvido síh tstrahirofurano seco (2 ml) numa garrafa ds? plástico. Sob uma atmosfera de a2obo„ adicionou—se por meie? de uma seringa ds plástico uma solução ds fluorsto ds hidragénio-piridi-na (5 ml ds uma solução obtida a partir ds 8==5 g ds reagente 7®% fluorsto ds hidrogénio»piridina s 45 nu eis piridina em 18® ml ds tetrahidrofurano - equivalente a iP3M ds HF -6==5 ífifliol)» Após agitação durante quatro horas5 a rescçSo foi vertida sobre éter distilico/nf-hexano (2®ô mI/2®® ml). 0 precipitado foi filtrado e lavado com éter disiílico, solução saturada ds bicarbonato^ água

V e éter» 0 produto em bruto foi soco e purificado por meio de cromatografia de média pressão sobre gel de sílica usando misturas de cloreto d© metileno/metanol para dar origem ao composto em epígrafe <Díl) e algum material puro identificado como sendo o composto da Descrição i2? éster mstílico de N-<9-fluorenilmetojíi-

carbonil}-i3-dssidroKi-13~fluoro-14-(S)"hiuroMianfotericina B (DÍ2)„ 0 composto em epígrafe δΗ (500 MHz) [d5 pyridina/d4 metanol 1:1] 7.99 (1H, t, J 1.8 Hz), 7.94 (1H, d, J 7.2 Hz), 7.74 (2H, d, J 7.2 Hz), 7.59 (2H, multipleto , 7.44 (1H, multipleto , 7.29 (3H, multipleto/ 7.17 (2H, t, J 7.4 Hz), 6.53-6.45 (2H, complex>, , 6.38-6.16 (11H, complexo, 5.35 (1H, multipleto, 5.29 (lH,obscu_ recido por · HOD) , 5.09 (1H, d, J 9.7 Hz), 4.91 (1H, multiplet , 4.75 (1H, t, J 10.1 Hz), 4.67-4.65 (2H, comple>D incluindo um singlefe de 4.67), 4.52 (1H, multipleto, 4.32 (1H, multipleto, 4.24 (2H, d, J 7.3 Hz), 4.15 (1H, d, J 2.8 Hz), 4.10 (1H, t, J 7.3 Hz), 3.98 (1H, dd, J 10.3 e 2.9 Hz), 3.81 (1H, multipleto 3.75-3.66 (5H, complexo incluindo um singleto de3.72 e . tripleto J 10.0 Hz a; 3.68), 3.50 (1H, complexo 3.28-3.22 (2H, complex.q 2.83 (1H, t, J 10.7 Hz), 2.43 (1H, complexo 2.35 (1H, dd, J 16.8 . e 9.8 Hz), 2.26-2.20 (2H, complexo 1.99 (1H, complexo· 1.88-1.80 (4H, complexo, 1.65-1.61 (2H, complexo, 1.55-1.29 (8H, complex incluindo um doubleto a 1.38, J 6.1 Hz), 1.25 (3H, d, J 6.4

Hz), 1.11 (3H, d, J 6.4 Hz) e 1.04 (3H, d, J 7.1 Hz) ppm. λ

— *1* Espectro ds massa2 rAB ímairis o-NOtíA/Na) massa observada MNs i336 = nassa calculada para ^C1 ? 1313,6 =

DesgÔ£lg^.íg. éster metllico de M-C9-fluorsoilmetoKicarbonil)-15-desidrOKÍ-Í5--fXtaorQ-14— CS>-hidroKianfotericina B CD12)

Éster metilico de M-í 9~f luorsnilmstoKlcsrhonil )-1-3-0-- < 3-claroben soi 1) -14- (S) -hidra*i-3,5,8 5 9„ 11,15,35 , 2' , 4' -nana-0-—trietilsilil snfotericina B CD6) íl5i g = ©s46 msitol) foi dissolvido em tetrahidrofura.no seco (1Θ ml) numa garrafa de plástica,. Sob uma atmosfera de azoto? adicionou-se por meio de uma seringa de plástico uma solução da fluoreto ds hidrogénio.piridina (18 ml de uma solução obtida a partir de 1556i g de reagente 7©% fluore-to da hidrogénio,piridina ε 92 ml de piridina e tstrahidrofurana para perfazer 25© ml - equivalente a 25iM HF - 36=8 mmol)= Apés agitaçSa durante 25 horas5 a reacçSo foi vertida sobre éter tíietíiico/n—hSKano CI s i ? 8©© ml)= 0 precipitado foi filtrado -;·? 41

lavãoo com ster dxsfcili*_o? soluçSo ds bidrogsnafosfato dissédico a 7% s água s* saca„ 0 produto em bruto foi purificado por meio ds cromatografis ds média pressão sobre gsl ds silica com eluicão coíii misturas tíe cloreto ds meti leno/metanol U.V. Xmax (metanol .) 404.9, 381.6, 362.5 e 344nm. ÔC (67.80MHz) [d5 Firidina ./d4 metanol 1:1] 172.56, 172.16, 158 .15, 145.10 , 144 . 96, 142. ,10, 137 .63 t 136. 36, 134 .78, 134 .22, 134.13 , 133. 88, 133. ,62, 133 .23 f 132. 78, 130 • 99, 128 .49, 127.91 , 126. 14, 126, .09, 120 .74 t 116. 88 l& 113 . (doubletoJ 227 .3Hz), 98 • 97, 78. ,95, 76. 40 , 75 • 47, 75 .36, 75. 04, 72.24, 71.72, 71 .34, 71. ,19, 70. 65 , 68 .79, 68 .58, 68. 32, 67.37, 58.46, 56 .52, 52. .55, 48. 83 , 48 .19, 44 .82, 43. 72, 43.12, 41.53, 41 .10, 37, .92, 36. 34 , 31 .25, 19 .08, 18. 55, 17.50 e 12. 61 ppm. bspst.. tro ds massas KAB ima tris 3-N0tíA/Na) massa observada nNa4" .ivaa, híMa “rih iltíO, Massa calculada para C, , 1177,* =

Descrição 15 Éster_metilico de_N~(¥ —f luorefiiltitetoxicarbonil l-14-(S)-hidro¾i- -i5-0-π^etil anfotsricina B (D15)

Éster metilico de luorenilmetoKicarbonil)-14-(8)- —hidrojíi-13-0—snetil—3?5s8s9f 11 ? 15?35?2'" ?4' — norm-0---trietilsij.il aníotericina B (D7) (314 mgs 0^14 moo1) foi dissolvido em tetra-hitírofurana seco <5 ml) numa garrafa de plástico* Sob uma atmosfera de azoto5 adicionou-se por meio de uma seringa ds plástica uma soluçSa de fluorsto de hidrogénio»piridina C5?7 ml de uma solução obtida a partir de 14,,3 g de reagente 70% fluorsto de hidrogénio»piridina s 9Θ ml de piridina e tetrahidrofurano para perfazer 25Θ ml - equivalente a 2M HF - lis4 iuaol) = Apés agitação durante 2© hcsras^ a reacção foi vertida sobre éter distilico (4®0ml)» D precipitado foi filtrado s lavado com éter dietilico e seco»

UV Xmax (metanol ) 406.2, 382.5, 364 and 346nm l IV vmax (KBr disco 3400, 2940, 1725, 1540, 1455, 1310, 1190, 1170, 1070, 1015, 765 and 745cm-1. δΗ (400 MHz) [d5 piridina/d4 metanol . 1:1] 7.84 (2H, d, J 7.5 Hz), 7.71 (2H, t, J 8.2 Hz), 7.41 (2H, t, J 7.3 Hz), 7.29 (2H, t, J 7.4 Hz), 6.55-6.32 (12H, complexo, 6.09 (1H, dd, J 14.4 e 6.2 Hz), 5.66 (1H, dd, J 14.3 and 9.3 Hz), 5.40 (1H, multipleto, 4.84 (1H, multiplet0, 4.78 (lH,s), 4.53 (1H, dd, 10.2 e 9.4 Hz), 4.46 (1H, complexo, 4.39-4.33 (4H, complexo 4.28-4.21 (2H, complexo, 4.06 (1H, dd, J 10.2 ..e 2.8 Hz), 3.98 (1H, complexo, 3.80-3.75 (4H, complexo incluindo um singleto de 3.78), 3.63 (1H, d, J 9.2 Hz), 3.58 (1H, multipleto, 3.53-3.49 (2H, complexo, 3.42 (1H, complexo, 3.33 (3H, s) , 2.85 (1H, t, J 10.7 Hz), 2.56-2.50 (2H, complexo, 2.41 (1H, dd, J 16.6 e 3.6 Hz), 2.30 (1H, multipleto, 2.19 (1H, multipleto, 2.07-1.85 (5H, complexo, 1.78-1.60 (6H, complexo, 1.49 (3H, d, J 6.1 Hz), 1.33 (3H, d, J 6.3 Hz), 1.24 (3H, d, J 6.6 Hz) e 1.14 (3H, d, J 7.1 Hz) ppm. 1 ε massas t-AB ima tris f; etano1/Na) massa observada jpsc tro MKj;:; '} v 1 -~5 ____ , , í --rá c B. X c Li 1 i

OOXS toa para C Η MH i ·. n0 , Ò4!S7

Descrição 14 éster iaetllico de luoraniliastoxicarbonil )-í5, í4-anitirean- fotericina B CD14?

OH

(D14) (h éster metílico d® Nh-Cv-f luorenilfflstoKicarbonil )~-~'3 5 5 5 8 5 9 5 1151553552' -nana—O—triíneti.lsilil~133!4—anidroanfote-

ricina B (09) (@,77 g, 0*42 imboI) em tetrahidrofurano seco í 1® ml) sob uma atmosfera de asoto numa garrafa tís plástico adicionou-se, por mexo de uma seringa de plástico, uma solução de fluo reto d® Hidrogénio* piridina <26 snl de uma solução obtida a partir de B5õ g de reagente 7®% fluoreto ds hidrogénio.piritíins e 45 ml ds piridina em 18© ml ds tetrahidrofurano ~ equivalente a l5tn HF ·'· 34 imnol) * Após agitação durante 4 horas, a rsacção foi vertida sobre uma mistura 1 s 1 éter dieta.i ico/n-hsKano (21)* D precipitado foi filtrado e lavado com éter dietilico, solução saturada ds bicarbonato ds sódio e água e seco para dar origem ao composto e® epígrafe <Di4K

ϋ compasm fox purificado por meio de cromaioqrafia tís gel ds sílica usando misturas cie cloreto de metileno/fflstanol sob prasslo média.

δΗ (400MHz) (1:1 d5 p.iridina:d4 metanol .) : 7.84 (2H,d, J 7.5Hz), 7.72 (2H,d,J 7.2Hz), 7.42 (2H,t,J 7.4Hz), 7.31 (2H,t, J 7.4Hz), 6.55-6.30 (12H, complexo, 6.07 (lH,dd, J 14.1 e 7.6Hz), 5.60 (lH,dd,Jl3.9 e 9.8Hz), 5.47 (lH,m), 4.92 (lH,m) 4.81-4.71 (3H,complexo, 4.50-4.41 (2H, complexo, 4.38 (2H, d, J 7.2Hz), 4.3-4.2 (2H, complexo, 4.21 (lH,m), 4.05 (1H, dd, J 10.2 e 2.8Hz), 3.95 (lH,t,J 9.6Hz), 3.86 (1H, d, J 9.6Hz), 3.78 (3H,s), 3.75 (lH,m), 3.56 (lH,m), 3.44 (1H,m), 3.42 (lH,m), 2.82 (lH,dd J 10.5 e 9.3Hz), 2.55 (1H,m), 2.48 (lH,dd,J17.1 e 9.7Hz), 2.33 (lH,m), 2.29 (2H,m), 2.18 (2H,m), 2.12 (lH,m), 1.98 (2H, complexo, 1.80 (1H,m), 1.7-1.5 (4H, complexo, 1.52 (lH,m), 1.47 (3H, d, J 6.1Hz), 1.34 (3H,d,J 6.4Hz), 1.25 (3H,d,J 6.5Hz)e 1.15 (3H,d,J 7.1Hz) ppm. I.V vmax (nujol) : 1720cm-^. UV Xmax (etanol ) : 407, 384, 365nm. l? u ue massas rf-us uisatrx^ -5—NUtíA/Na) massa observada calculada para Cà3Hg3N0185 114i55è„ 46 46

Descrição 15

éster íRetilico de N-C?-flyoreoilffistOKicarbortil?-14-CR)-hidrsKÍ--15-Q-metilanfqteriçina B .(D15,I

éster metilico de luorenilmatoxicarbonii }-~13P 14--snidroanfotericina B <D14) (98 mg? @?®85 snmol > foi dissolvido sm tstrahidrofurano seco Cí.5 ml) = Após arrefecimento para --60*0 sob uma atmosfera de acato adicionou—sa ácido m-clcsroperbenzáico (19 mq5 0P11 mffiol > sm tstrâhidrofarano,, A temperatura de reacçlo foi mantida entre -6®°C e -20*0= Passados trinta minutos* adicionou-se metanol (1 ml) e a mistura foi precipitada em stsr distílico í25@ ml). 0 material sólido foi filtrado s lavado com áter. 0 produto foi purificado por meio ds cromatografia ds média pressão sabrs gel dg sílica usando misturas ds clorofórmio, metanol s amónia para dar origem ao composto &m epígrafe CD15>= 47 47

δΗ (270 ΜΗζ) [dg piridina/d^ metanol , 1:1] Sinais caracteris-ticos q/ incluem 7.85 (2H,d, J 7.7 Hz), 7.71 (2H,t,J 6.6 Hz), 7.42 (2H,t/J 7.4 Hz), 7.29 (2H,t,J 7.6 Hz), 6.57-6.31 (12H, complexo , 6,11 (lH,dd,J 15.1 , e 5.5 Hz), 5.70 (lH,dd,J 14.6 e 8.8 Hz), 4.79 (lH,s), 4.62 (lH,dd,J 11.0 e 3.3 Hz), 4.38 (2H,d,J 7.2 Hz), 4.09 (lH,dd,J 10.0 e 2.9 Hz), 3.80 (3H,s), 3.27 (3H,s), 3.16 (3H,t,J 10.9 Hz), 2.41 (1H,dd,J 16.6 e- 3.7 Hz), 1.50 (3H,d,J 5.8 Hz), 1.33 (3H,d,J 6.3 Hz), 1.25 (3H,d,J 6.6 Hz) e 1.14 (3H,d,J 7.1 Hz) .

Espectro de massas Ι-'ΑΒ (matriz tiadieianol/Ns> massa observada MN a ’ 12Í2g5« risssa calculada para 5. i SE i; ò s

Éster alilico de N-(¥-fluorenilmetoxicarbonil)_anfotericina_B (Blò)

N"'í9“FIuDrenilmetoKÍcarboniI) anfotericina B CD1) Cis24 g5 í?08 mmol) em dimetilformamida (4Θ ml) foi tratada sequencial·-mente com metanol (4 ml)5 di-isopropiletilamina <θ;!8β ml 3 4,.52 mmol) s brometo de alilo <4 ml) e a mistura foi aqitada nusi recipiente selado durante 4 horas= A soluçSo foi adicionada a éter <Ξ 1) e o precipitado foi filtrado e lavado com éter» Os materiais sélidos foram depois agitados em água durante 5 minutos s filtrados de novo para dar origem a um rssiduo que foi purificado por meio de cromatograíia sobre síiica3 com eluiçao com cloreto de metileno;metanol ílôsi) para dar origem ao composto em epígrafe (Ώ1&) í®=:53 g) *

(CD3OD) . J7.15Hz), (3H,d), 4

Sinais caracteristicos 1.20 (3H,d, J6.3Hz) 33 (2H,d, Jo.3Hz),

Xmax (MeOH) 404 (£130,000), 381 (εΙΙβ,ΟΟΟ), 362 (£72, 000) nm.

Vmax (nujol) 3400, 1725, 17Q5cm-l. δ1Η (270MHz) incluem 1.12 (3H, d, , 1.31 (3H,d, J6.6Hz), 1.42 4.69 (1H,S), 5.55 (lH,m), 6.01 (lH,m), 7.30 (2H,t), 7.41 (2H,t, J7.4Hz), 7.69 (2H,m), 7.83 (2H,d, J7.4Hz). (68MHz) (cd3 0D:C5D5 N; 1 L: 1) 12. .57, 17, .33, 18. 49, 19.18, 31 .52, 36 .35, 38. 93, 40. 89, 41. 41, 42. .81, 44. 08, 44. 83, 45 .26, 47 .57, 48. 25, 58. 32, 58. 46, 67. ,58, 68. 50, 66. 79, 67 .22, 68 .87, 69. 84, 70. 64, 71. ,50, 71. .95, 72. 47, 74 . 98, 75 .42, 76 .29, 77. 45, 79. 33, 98. ,80, 99, .04, 118 . 63, , 120.83,

126. .23, 128. 03, 128. 61, 130 .61, 133 .10, 133. .39, 133, .53, 133, .71, 133. 94, 134. O O 134 .13, 134 .29, 134. .40, 134 , .95, 135, .03, 137. 35, 137. 59, 142 .26, 145 .10, 145. .20, 158, .30, 172, .52, 173. 93. Espectr rfr r -li cl SSS; g (F * ts rs tris NOB A—Ma ) . Enc onlr< sdo 1 „ r t. i? reque r M. 2 rssTT λ Qw 5 O

rtM

Descrição 1/ éster al.iliço de M-C¥-fluorenilmetosicarbonil)-3,5,8,9,11,15,5a,-2J <4' —nona—0—triinetilsilil—13,14—enidroanfotericina B CD17)

OTMS

A uma pasta de éster alilico de N—(9—fluorenilmetoKi-carbonil) anfotericina B (Dlè) <@s22 g5 0SI9 ίΒιηοΙ) sm cloreto de metileno seco <3 ml) adicionou-se 256-lutidina <θ33ò ml, 3,16 mmQl) e triflato de trimatilsililo (θ,46 ml, 2,38 íumol)» Passados 15 minutos à temperatura ambiente, a solução foi evaporada e adicionou-ss hessano <75 ml) = Os materiais sólidos foram triturados e separados por meio tíe filtração* e lavados em seguida com heKano <4@ ml)„ As soluções de heMano foram combinadas e evaporadas para dar origem ao composto em epígrafe (D17) , usado sem qualquer purificação ulterior \β,31 g).

V' Àmax (hexano) 402, 381, 362nm. vmax (hexano) 17300η-1. . δ1!! (270MHz) ((CD^^CO). Sinais caracteristicos incluem 0.96 (3H,d, J6.9Hz), 1.03 (3H,d, J6.6Hz), 1.17 (3H,d, J6.3Hz), 1.20 (3H,d, J6.05HZ), 2.59 (lH,dd, Jmax 8.8Hz), 3.46 (1H,t, J9.7Hz), 4.68 (lH,s), 4.90 (lH,m), 5.28 (lH,d, J9Hz), 5.43 (1H,d, J14Hz), 5.62 (lH,dd, J 15,9Hz), 5.86 (1H / dd, J18, 9Hz), 6 K i—1 O m) , 7 . 35 (2H,t , J7.4HZ), 7.42 (2H J7.4HZ), 7.72 (2H,m) , 7 .87 (2H / d, J7. 4Hz) . δΧ30 (68MHz) ( (CD3) 2< 20) 11. 95, 18 .48, 18. 75, 19.47, 28.07, 35. 10, 37.32, 39.12, 41.47, 43 .6, 42. 36, 43. 58, 47. 77, 48. 03, 53.83, 57.96, 66.06, 67 .13 , 67 .28, 68 .55, 69 .16, 70. 93, 72.37, 73.00, 73.15, 73 .82 , 74 .52, 75 .55, 76 .27, 78. 56, 98.99, 102.85 , 118.90, 120 .79, 126 :.05 , 127.84, 128 .49, 130-135 (m), 135.74 , i 38. 12, 142. 12, 145.01 , 145.12, 153 .48, 156.49, 170. 88, 172 .79 • Espee: φ„ p3CC;}e { FAB| ma tri T·· f4uldP, ;~ífa) Encontr ‘-sdo s íviNa -5 ry'*f!2S · .{. O·..1 .· ^ m. r-,1 ϊ C ...__jMD 4 V jí. IO/ I & Γ M ? i C> 1 *3 b S} \\-·

Pes£EÍ£.gS_i8 éster aiílico de N-(¥-f luorgnilmstoKicarbQriil)-15,i4-aniriroanfo-tericina B <D1B>

A éster alilico de rf“C9-fluarsnilfnetoKicarBonil)·--SpSjOrVj 115 Í553552J =4' -nona-Of-trimetilsilil-lSs14-anldroanfate-ricina B (D17) (2?5 q? i537 mmol) em tetrshidrofurano seco <4® ml) sota uma atmosfera ds azo to numa garrafa de plástica adie ia-nou-ssj por meio de uma seringa de plástico» uma solução de hidrofluoreto de piridínia em piridinagtetrahidrofurano Í53s4 ml solução 2s®6ti (11® mmo1)s solução padrão obtida a partir de j. 4 s 64 g de 7®% fluo reto ds hidrogénio em piridina5 piriaina < 9Θ ml) e tetrahidrofurano (de modo a perfazer um volume total de 25« ml))» Após agitação durante 4 horas â temperatura ambiente,, a solução foi vertida sobre hsKanoséter Cisl) (41)« 0 precipitado foi filtrado e lavada com étr <1 1)« A secagem sob vácuo produziu 1,,44 g de um resíduo que foi cromatografsdo sobre sílica (5®

w Γ J. L| C ao cDinpu»tu ei

ano.l ípiorsts ϊϋΐϋ) C®,V4 lma:< (MeOH) 407 (£149, 000), 383 (134, 000), 364 (83, 000) nm. vmax (nujol) 3400-3200, niOcm-1. δ^Η (400MHz) (CD^OD: C^D^N; 1:1) . Sinais caracteristicos incluem 1.16 (3H,d, J7.15HZ), 1.25 (3H,d, J6.6Hz), 1.34 (3H,d, J6.3Hz), 1.48 (3H,d, J6.05Hz), 2.49 (lH,dd, J17.0, 9.6Hz), 2.86 (lH,br t, 'J'10Hz), 3.58 (ΙΗ,ια), 3.78 (lH,t, 'J'9Hz), 3.87 (1H,m), 3.97 (lH,m), 4.07 (lH,dd, J10.2, 2.75Hz), 4.38 (2H,d, J7.15Hz), 4.94 (1H, br s) , 5.27 (lH,d, J11.8HZ), 5.47 (1H,dd, J17.2, 1.4Hz), 5.61 (lH,m), 6.06 (2H, m) , 7.30 (2H, t, J7.4Hz), 7.42 (2H, t, J7.4Hz), 7.72 (2H,m), 7.85 (2H,d, J7.4HZ).

5...; f L. LÍ j : L í CiU O ti

J "* j_ ' 1 1 Ô13C (CD3OD: C5D5N; 1:1) (68MHz) 12.58, 17.71, 18.58, 18.99, 31. 32, 36.35, 37 .76 ** O OO O 41 .87, 43 co rH 44. 48, 43 .59, 48. 05, 54.50, 58 .34 , 66.19, 67 .40, 67 .51, 68. 68, 69 .14, 70. 87, 71.40, 71 .72 , 72.50, 73 .08, 74 .93, 75. 39, 75 .50, 76. 75, 78.84, 99 .50 , 104.24 , 118.80 / 120. 74, 126. 13 , 127.91, 128 .49, r 131.68-137. 63 (m) , 142 .09, 144.94 , 145.07 f 152.69, 158 .15, , 172.07, 173 .55. X"

Descrição 19 éster alíiico de N— (9—fluoreniIsaetoxicarbonil) —14-(K)—hidroni anfotericine. B CD19)

éster alilico de N-C9~fluorenilmetoKicarbonil>-13»14--anidroanfotericina 8 <D1S) <i,12 g, 0,93 mmol> em tetrahitírofu™ rano <1Θ ml) foi tratado com água (7 ml) e depois arrefecido para -2®*C«

Adicionou-se ácido gr-cloroperhensóiCD <Θ,2Θ g, 1£i13 mmol) s deixou-se a solução aquecer até à temperatura ambiente durante 1/2 hora» Após ma is 1/2 hora» adicionou-se acetato tíe eiilo í2ô0 ml) s a fase orgânica foi lavada com solução diluída de sulfito de sódio» Adicionou-se mais tetrahidrofurano à camada de acetato de etilo para voltar a obter uma solução límpida que foi lavada com água» seca CNa^SO^) e evaporada para dar origem s.a produto em bruto, purificado por meio de cromatoqrafia sobre

Ε5Π CS

f|jg£ τ,χ j. O

íò) ϋ nistisnui l 'cs c Γ-5 n x d r* u /

Xmax (MeOH) 406 (ε 142, 000), 382 (127, 000), 363 (73,000)nm. Vmax (nujol) 3300-3400, 1720 (sh), 1705011-1. δΧΗ (400MHz) (CD^OD: C^D^N; 1:1) . Sinais caracteristicos incluem 1.18 (3H,d, J7.3Hz), 1.25 (3H,d, J6.4Hz), 1.36 (3H,d, J6.4Hz), 1.39 (3H,d, J6.1Hz), 2.35 (lH,dd, J16.9, 2.6Hz), 2.49 (1H,dd, J16.9, 9.7Hz), 3.17 (lH,t, J10.8Hz), 3.77 (1H, 't', 'J'10Hz) , 3.89 (lH,d, J2.9Hz), 4.09 (lH,dd, J10.2, 2.9Hz), 5.24 (lH,dd, J10.5, 1.2Hz),5.47 (2H,m), 5.63 (1H,m), 6.04 (1H,m), 7.30 (2H,t, J7.3Hz), 7.42 (2H,t, J7.4HZ) , 7.71 (2H,m) , 7. 84 (2H ,d, J7.5Hz). 513C (68MHz) (CD 3OD: c5d SN; 1:: 1) 12 .62, 17 .34, 18 .60 , 19.08, 31.55, 36.38, 38 .60, 41. 04, 41 .26, 42.84, 43.26, 44 . 89, 43.97, 48.19, 52 .15, 58. 38, 65 .93, 67.37, 66.68, 68 . 68, 69.39, 70.30, 70 .49, 71. 47, 71 . 91/ 72.30, 72.84, 74. 96, 75.28, 76.37, 77 .13, 79. 07, 98 .88, 100.42, 118.37 , 120.74, 126.15, 127.91 / 128. 49, 130 .52 , 133 .00-134 .88(m), 142.09, 144.99, 145.10 r 158. 17, 172 .33 , 174 .10. tra de <FAB| í ílâtr .is TDE-P te) = ! Eneontr - Syih! ~. 5 0. CAC: .Ηγπ-γΝΟλλ 'squer H* ; 1Ξ :©í 3 ò s

Descrição 2Θ Éster ffietilico de N-(9-f morenilmetoKicarbofiil i-14-(K?-hidroK±an-fotericina B (D2@>

éster íTietílico de N—<9~í luDrenilmetoKiearbonil 5-13« 14--anidrGarrfGtsricina B (D14) (1©Θ mg, ©,Θ88 mmol} foi dissolvido sm tetranidrofurano/água Osí, 5,5 ml). A -30*-'Cs adicionou-se ácido fír-c1oropsrbenc6ico <18 mg, Θ,115 mmol) era tstrahidrofurano (0,2 ml).: Dsíkou-ss a reacçlo atingir a temperatura ambiente. Após 1 hora a reacçSo foi vertida sobre éter distílico (25® ml > s 0 precipitado foi filtrado s lavado com éter. O produto em bruto foi purificado por nsio de cromatografia de média pressão sobre gel de sílica usando misturas de clorofórmio/raetânol/aménia para dar origem ao composto era epígrafe CD2®)c

V

Espectro ds massa? íFAtís matriz tiodistanoi/hfa) massa observada5 HMa',, 1198?8* Massa calculada para C^. Íi7558«

Descrição 21 N-C9-Fluorenilgietoxicarbonil )-là-dscarboKÍ-16—hidroximstil-15» 14— —anidroanfotericlna B CD23L)

OH

A uma solução de éster mstílico de N~Cv-f 1 uorsni 1 meto-Micarbonil )-~13g 14-anidroanfotericina B CD14) C©57© g3 ©5àl mmol) em metanol/tetrabidrofurano CI5 mi * 3sí> â temperatura ambiente adicionou-se gota a gota taorohidrstQ ds sódio (®P58 g5 15s3 ÍTsfflO Ϊ).

Passadas Θ53 horas a reacção foi interrompida adicionando solução de bicarbonato de sódio saturado <1 ml) e vertendo-a depois sm solução saturada ds bicarbonato de sódio ί8θ® mi>,= 0 precipitado foi filtrada e lavado com água até se obter a neutralidade,* e seco para dar origem ao composto em epígrafe CD21>=

UV Ajnax (metanol ) 406, 383, 364 and 346 nm. IV vmax (KBr disco 3411, 3013, 2932, 1725, 1641, 1539, 1440, 1321, 1305, 1195, 1151, 1112, 1067, 1011, 969, 851, 825 e 534 cm-1. ÔH {400 MHz) [d5 piridina:d4 metanol , 1:1]. 6.53-6.32 (12H, complexo, 6.10 (1H, dd, J 15.4 e 5.7 Hz), 5.69 (1H, dd, J 14.5 e 9.2 Hz), 5.37 (1H, multipleto, 4.84 (1H, multipleto, 4.71 (1H, d, J 0.8 Hz), 4.58 (1H, dd, J i 11.0 e 3.3 Hz), 4.44 (1H, complexo, 4.33 (1H, complex> , 4.24 (1H, complexo, 4.22 (1H, d, J 3.4 Hz), 4.16 (1H, dd, J 3.2 e 0.6 Hz), 3.97 (1H, complexo, 3.78 (3H, s), 3.78 (1H, complexo, 3.53-3.46 (4H, complexo, 3.26 (3H, s) , 3.14 <1H, t, J 10.8 Hz), 2.82 (1H, dd, J 9.2 e 3.1 Hz), 2.54 (2H, complexo incluindo dd J 16.8 and 8.4 Hz), 2.41 (1H, dd 16.7 e 3.9Hz), 2.18-1.97 (6H, complexo, 1.86-1.81 (2H, complexo, 1.75-1.60 (5H, complexo, 1.45 (3H, d, J 5.8 Hz), 1.33 (3H, d, J 6.3 Hz), 1.25 (3H, d, J 6.6 Hz) e 1.14 (3H, d, J 7.1 Hz) ppm.

Especara as Y\H& ií íiiâisSS 5 (FAB? matriz 3-NOBA/Na) massa afaservaua,

calculada pat a u^2^83^iUÍ7F

DescricSo 22 κι- f g-r i uo ren i i mato*' -1 c a r bsn 2. i 1)—i à-dsoarboK i—1 ò-~hi.d royuiSfc '-.êí—=4—ΪΒ- ) —h i d ro κ i an f o t g r i c i n a B—lB— 5?

OH OH HO =

(9-F1 uoren i Imetox ic srbon ilH 6-deca r bcx i - 16-i.idrox i. ~ metil-13,14-aftidroanfotericina B (D21? (rxè mg, ****** 9 dissolvida em tetrahidrofurano/água <3=1, a ml). λ z&m·^~ ~ -eh«i»nt·. adicionou-se ácido m-cloroperben2óico C23?d mg5 «ΦΟΙΪ en. tetrahidrofurano ,!)= Apés agitação durante horas, a reacçSo foi, vertida sobre éter dietilioo (8®® mw e o nrecipitado foi filtrado. Após lavagem com éter dietiiico · «ecaqemn o produto em bruto foi purificado por meio de cromatc-grafia de média pressSo sobra gel da sílica usando prxmaxro misturas de clorofArmio/metanol/amónia e depois misturas ce clorato de mefcileno/metanol para dar origem ao composta em epígrafe (022?. UV λπίάχ (metanol ) 406, 382, 363 e 345nm. I.V vmáx"(KBr disco 3422, 3013, 2924, 2854, 1716, 1693, 1617, 1570, 1509, 1450, 1382, 1298, 1250, 1184, 1072, 1011, 972 and 738cm-1. δΗ (400 MHz) [d^ piridina/d^ metanol 1:1] 7.84 (2H, d, 7.6 Hz), 7.71 (2H, t, 7.7 Hz), 7.42 (2H, t, 7.4 Hz), 7.32 (2H, t, 7.4 Hz), 6.63 (2H, multipleto , 6.48-6.31 (11H, complexo, 5.62 (1H, multipleto, 5.47 (1H, dd, J 14.8 e 10.1 Hz), 4.94 (1H, s), 4.75-4.70 (3H, complexo, 4.50-4.37 (4H, complexo, 4.26-4.20 (2H, complexo, 4.15-4.06 (3H, complexo, 3.95 (1H, multipleto, 3.89-3.86 (2H, complexo incluindo um doubleto J 7.3 Hz), 3.76 (1H, t, J 9.6 Hz), 3.57 (1H, multipleto, 3.43-3.36 (2H, complexo, 2.72 (1H, multipleto, 2.57-2.32 (5H, complexo, 2.12-1.99 (5H, complexo, 1.80-1.50 (6H, complexo, 1.46 (3H, d, J 6,1 Hz), 1.35 (3H, d, J 6.4 Hz), 1.24 (3H, d, J 6.4 Hz) e . 1.16 (3H, d, J 7.1 Hz) ppm.

Espectro ds massas (r-ABs matriz tiodietanol/Ma) massa observada, + _ _ r!Na = 11/0,6= Massa calculada para ϋ^„Ηο=-Μ0.,oS 114/,6 =

Exemplo.....1 éster aietilico de 15-desidroKÍ-í5-fIuoro-14-(S?-f-;idroxiarifoteri-cina B CE1)

A uma solução ds éster metilico ds M~(¥-“fluorsnilmsto-xicarboni )“13-"dssitíroKÍ“j.3-f luorO“í4-CS) -hidroxianfatericina B (D12) C®,!! g, ©,093 mmol) sm diffietilsulfóxido/metanQl (3=1, 4 ml) foi adicionada pipsridins <28 μΐ«, ®?28 mmol), sob uma atmosfera de acato» Após agitação durante 1 hora, areacçlo foi vertida sobre éter distilico (4ΘΘ ml)= Q precipitado foi filtrado e lavado cosi éter distilico é ssco para dar origem ao composto em epígrafe (El)=

U.V. Xmax (metanol ) 405.5, 382, 363 e 345 nm. I.R.V(KBr disc) 3380, 2920, 1725, 1635, 1600, 1550, 1440, 1380, 1305, 1275, 1180, 1160, 1060, 1010, 890, 850 e 790011-1. δΗ (400 MHz) [d5 pi ridina/d4 metanol 1:1] 6.62-6.32 (12H, complexo, 6.22 (1H, dd J 15.5 e. 8.2 Hz), 5.56-5.50 (2H, complexo, 4.78-4.73 (2H, complexo, 4.68 (lH,s), 4.54 (1H, multipleto, 4.51-4.45 (2H, complexp, 4.14 (1H, d, J 2.9 Hz), 3.98 (1H multipleto, 3.89 (1H, multipletP , 3.78 (3H,s), 3.58 (1H, dd, J 23.4 e 9.3 Hz), 3.51-3.32 (4H, complexo, 2.90 (1H, t, J 10.8 Hz), 2.82 (1H, dd, J 9.1 e 3.1 Hz), 2.59-2.46 (3H, complexoinclu indo dd e 2.50, J 16.9 e " 9.4 Hz), 2.35 (1H, dd, J 16.8 e 2.9 Hz), 2.24 (1H, multipleto, 2.11-1.92 (5H, complexp, 1.79-1.53 (6H, complex) , 1.44 (3H, d, J 5.7 Hz), 1.35 (3H, d, J 6.4 Hz), 1.24 (3H, d, J 6.5 Hz), : e 1.16 (3H, d, J 7.1 Hz) ppm.

Exemplo 2 éster metilico de 14-(Sl-hidroKÍsnfolericina 8 CE2'í

éster metílico de ÍS-desidroxi-ío-fluoro—Í4-ÍS)—hidrp--· Kianfotericina B (EI) (&Θ mg5 ®g063 mmol) foi dissolvido em tetrshidrofurano/água (2,5 ml, 3si)= Sob uma atmosfera de azoto, adicionou-se ácido canforsulfónico sólido (2Θ mg, θ,®86 mmol).. Após agitaçlo durante 0,5 horas, a d i c i on ou-ss outra porção de ácido canforsulfónico (9 mg, 0,038 oraol)» Após agitaçao durante mais :ί?5 horas, adicionou-se trietilamina (37 μΐ, 0,27 ínmol) s a rsacçao foi vertida sobre éter dietilico (4©θ ml)„ O material sólido foi filtrado e lavado com éter dietilico e ssco, 0 produto em bruto foi purificado por meio de cromatografía nfiash!! sobre gel de silica usando misturas de clorofórmio, metanol e amónia»

ÔH (400 ΜΗζ) [d5 piridina/d4 metanol 1:1] 6.67-6.26 (13H, complexo, 5.63 (1H, multipleto, 5.50 (1H, dd, J 14.6 e 10.2 Hz), 4.90 (1H, multipleto, 4.80-4.75 (2H, complexo includndo singleto a 4.74), 4.64 (1H, multipleto, 4.52-4.42 (2H, complexoincluindo dda 4.49, J 10.4 e 9.4 Hz), 4.27 (1H, d, J 3.2 Hz), 3.95 (1H, multipleto, 3.86 (1H, multipleto, 3.75 (3H,s), 3.64 (1H, t, J 9.5 Hz), 3.53-3.49 (1H, multipleto, 3.39-3.36 (3H, complex?incluindo d a 3.38, J 9.3 Hz), 3.12 (1H, dd, J 9.7 e 3.2 Hz), 2.79 (1H, t, J 10.6 Hz), 2.57-2.39 (3H, complexo, 2.35 (1H, dd, J 16.8 e 2.7 Hz), 2.25 (1H, multipletoi 2.13-1.86 (5H, complexo, 1.79-1.50 (6H, complexo, 1.45 (3H, d, J 6.1 Hz), 1.35 (3H, d, J 6.4 Hz), 1.24 (3H, d, J 6.4 Hz) e 1.16 (3H, d, J 7.2 Hz) ppm. pSCtfO ui a 9/ a =. ί-assa ã (!" Atí s ui-a í ssa calculada ps xz txadietanal/Ma) observada υ48Η75Νϋί: a* Éster metilico ds 14-(bn-hitiroxi-l3-0-ffigtilanfotericina B tfc-a)

A uma solução de éster metilico de N-Cv-fluorsnilmsto--· Hicarbonil )-i4-í3í—hidro;<i~i3—O-ssetil snfotaricina B (DÍ3) (63 mg3 ®,,Θ53 mmol) em dimstilsulféMido/metanol ίθ56 ml =0,,2 ml) sob um® atmosfera de ssotc adicionou-se piperidina Clò μΙ~ Θ,, lò nanai)» Após agitação durante @575 horas3 a reacção foi vertida sobre éter distilico (40Θ ml>= 0 precipitado foi filtrado s lavada com éter distilico s seco*

UV Amax (metanol .) 406, 382.5, 363.5 and 346nm. IV Vmax (KBr disco)3400, 2930, 1725, 1635, 1600, 1440, 1375, 1315, 1270, 1065, 1010, 890 e δδΟοη-1.

δΗ (400 MHz) [dg piridina/d4 metanol 1:1] 6.54-6.31 (12H, complexo, 6.07 (1H, dd, J 14.6 e 6.4 Hz), 5.65 (1H, dd, J 14.5 e 9.4 Hz), 5.40 (1H, multipleto, 4.83 (1H, multipleto, 4.72 (1H, d, J 0.8 Hz), 4.50 (1H, dd, J 10.5 e -9.2 Hz), 4.44 (1H, complexo, 4.32, (1H, multipleto, 4.26 (1H, multipleto, 4.15 (1H, d, J 3.0 Hz), 3.97 (1H, complexo, 3.80-3.75 (4H, complexj incluindo a singleto a 3.77), 3.61

(1H, d, J 9.2 Hz), 3.52-3.44 (4H, complexo, 3.32 (3H, s) , 2.87-2.80 (2H, -complexo incluindo dd a 2.85, J 9.2 e 3.1 Hz em tripleto a. 2.83, J 10.8 Hz), 2.57-2.49 (2H, complexo incluindo a dd a 2.52, J 16.6 e 8.6 Hz), 2.40 (1H, dd, J 16.6 e 3.7 Hz), 2.28 (1H, d J 14.7 Hz), 2.17 (1H, complexo, 2.06-1.96 (3H, complexo, 1.92-1.84 (2H, complexo, 1.76-1.59 (6H, complexo, 1.44 (3H, d, J 5.8 Hz), 1.33 (3H, d, J 6.4 Hz), 1.24 (3H, d, J 6.6 Hz) e 1.14 (3H, d, J 7.1 Hz) ppm.

ÍS.C

FAB i: o de niss-ia

par

Γ- U b ··:;·' SS éster mstilico de 14-<R)—hidroxi—iJ—U—metilanfotericina,.B.„ CE4) OH MeO =

u composta sm epígrafe fai preparado a partir do compoto da Descrição 15 usando um procedimento análogo ao que foi descrito ηα Εκαορία 3=

Espectro ds massas CFABp matri? tiodietanoí/Na) massa observada nMa = 990» Massa calculada para Ο^Η-,-,ΝΟ,9&7?5» éster alilico da 14-(H)-hidroxianfQtericiria B (E5)

Ester aiiliuu de 9~fluarenilmstoxiosrbonil>~Í4—CR)--hidroxi anfotericina B (Dí5?) (6^82 gs 0S68 mmol) Sffl dimetilsul-ToKida < Ití íni) 5metanol (3 ml? foi tratado à iempsratura ambiente com piperitíins w9134 ml9 1?3é mmol)« Passados 9Θ minutos, adicicsncu-ss metanol (7 ml) e a mistura foi vertida sobre éter <2 1), 0 precipitado foi filtrado e lavado com éter= A secagem sob vácuo deu origem ao composto em epígrafe (E5) (θ,6@ q)=

Xmax (MeOH) 405 (£147,000), 382 (129,000), 363 (82,000)nm vmax (nujol) 3400, 1720cm- . 81H (400Mz) (CD30D: C5D5N; incluem 1.16 (3H,d, J7.1Hz) (3H,d, J6.4Hz), 1.44 (3H,d, 9.65Hz), 2.82 (lH,dd, J9.3, 1:1) . Picos caracteristicos , 1.24 (3H,d, J6.4Hz), 1.35 J5.4Hz), 2.48 (1H,dd, J16.9, 3.1Hz), 3.14 (lH,t, J10.8Hz)

3.85 (1H,d / J3.0Hz), 3. 94 (1H, m), 4.17 (1H,d, J3. 1Hz), 4 .43 UH,m) , 5. 25 (1H,m), 5. 49 (2H,m) , 5.61 (lH,m), 6. 02 (lH,m) .δ13 C (68MHz) (CD 3od : C5D5N; 1:1) 12.63, 17 .35, 18. ,39 19.14, 31. 55 , 36.38, 38 .38 , 41.02, 41.24, 42.82, 43.24, 44.00, 44. 87 , 52.01, 57 .9, 65.79, 66.65 , 68.69, 69.46, 70.31, 70. 48 , 72.31, 72 .80 , 74.83, 75.07, 75.26, 76.39, 76.73, 79.07, 98.99, 100.43, 118.28, 130.49-134.89(m), 137.38, 137.56, 172.34, 174.26. ds (FAB i ίίϊ'Ξί t f" 1 i -

terQlÀfcrí'"' Π R

i4—(R)—Hidrοκianf o t eri c i na B CE&j

OH Éster alilico de 14~(R>-hidroxianfoterieina B (E5) (0511 gf mmol > foi adicionado a tetrahidrofurano Cò mi) s metanol 8©?5 ml) s as resíduas insolúveis foram separados por rfiSíio de filtração, à solução remenescente adiciQnou-~se5 no escuro e sota uma atmosfera de asoto5 pirrolidina (4® μΐ 5 Θ..47 nunol) e tetrakis <trifsnilíosfina) paládio CD) (13 mg,, θ„013 iímal) * Passada i hora5 o precipitado foi recolhido por meio de centrifugação, A lavagem deste material sólido sucessivamente em tetrahidrofurana (4Θ ml) e acetona (4Θ ml) proporcionou o composta em epígrafe CEè-> (42 ing)3 após secagem sob vácuo.

Xmax (MeOH) 406 (ε108,000) , 383 (100,000), 364 (65,000) nm.·* vmax (nujol) 3500-2400, 1710, 1570^-1. 5½ (400MHz) ((CD3)2SO). Sinais caracteristicos incluem 0.92 (3H,d, J6.9Hz), 1.04 (3H,d, J6.0Hz), l.H (3Η,οΙ, J6.0HZ); 5.22 (lH,m), 5.44 (lH,ra). hspsctro Jís massas (hAtíp mairic TDt—Na> =, fcncpniradoí 962,,5== C47HT3NOís requer 939 = 5.

Exemplo 7

CL)- Aspartato de éster metilico ds 14-(S)-hidroKÍ5infotsricina B 1121 h uma solução de ácido (L)-aspártico (5==2 mg, 0,,039 isiiiíui j eis água desciiaoa mi) ao.ici onou-s-s siri porcaes éstsr metilico de 14-CS)-hidroxianfotericina B CE2) (37 mg, 0=,639 ΐί»ηο 1 * = rtpòs agxtaçáo durante tís5 horas a água foi evaporada safa vácuo para dar origem ao sal em epígrafe CE7)...

Exemplo 8

éstsr metilico de 14-(R)-hidroxianfot:ericina B

OH · OH

Éster íiistilico ds luorenilínetoxicarbonil) —14—(R)~ -hidroKianfDtericina B \D2©> (36,4 mg, ®,Θ31 nwio! > foi dissolvido em difiiStilsulfé.KÍdo/matanol (3sl5 2 ml>= Sob uma atmosfera de S£oíq3 adicionou-se piridína (9 μ1, &ΡΦ92 mmol>» Passadas 2 horas, a reacçSo foi vertida sobre éter dietilico (25© mI)B 0 precipitado foi centrifugado s lavado com éter dietilico» A secagem proporcionou o compo-sto em epígrafe íES),

UV λη^χ (metanol ) 405, 382, 363 and 345nm. IR vmax (KBr disck 3415, 3007, 2924, 1717, 1633, 1438, 1384, 1324, 1289, 1196, 1175, 1094, 1069, 1011, 886 e 8510^.-1. ÔH (400 HHz) [d^ piridina/d^ metanol 1:1] 6.66-6.28 (13H, complexo, 5.63 (1H, multipleto, 5.50 (1H, dd, J 14.7 e 10.1 Hz), 4.86 (1H, multipleto, 4.75-4.67 (4H, complexo, 4.45 (1H, multipleto, 4.26 (1H, multipleto, 3.96 (1H, multipleto, 3.88-3.86 (2H, complexa incluindo a doubleto de 3.88, J 2.9 Hz), 3.76 (3H, s), 3.61 (1H, t, J 9.3 Hz), 3.50 (1H, multipleto, 3.42-3.36 (2H, complexo, 3.14 (1H, t, J 10.8 Hz), 3.05 (1H, amplo , 2.60-2.46 (3H, complexo, 2.40-2.33 (2H, complexo, 2.25 (1H, dd, J 4.6 e 14.9 Hz), 2.13-1.91 (5H, complexo, 1.81-1.50 (5H, complexo, 1.45 (3H, d, J 6.0 Hz), 1.36 (3H, d, J 6.4 Hz), 1.25 (3H, d, J 6.4 Hz) e 1.17 (3H, d, J 7.1 Hz) ppm. il · Isj ϋζ* cá G O «í SP V Ci si bspectro ds massas (FAB5 mai NNffi' 977. Hasss calculada çj·;

Exemplo 9 í&-Decarboxí—14-hidroxiiae t i 1—14-CH) —hidrosianfotericina B CE9)

OH HO OH

OH W“‘(9"FIuorsni Isetaxicar-banil) -íé~dscsrhaxi~íé-hidroKi-" faefcil—i4—(R)"-hidrQKianfoteric:in£ B CD 22) C10B mg, >35€>9 mmol) foi dissolvida em difflstilsulfóxido/metanol (3sis 2 mi) = Sob uma atmosfera de azoto,, adicionou-se piperidina <14 μΐ s Θ5Ι5 mmol) s a raacçao foi agitada durante 2 horas» ft solução foi precipitada em étr dietílico,, centrifugada e lavada com éter» ft secagem proporcionou α composto em epígrafe <E9>„ 1 I »

UV Àmax (metanol ) 406, 382, 363 e 345nm.

Iv vmax (KBr disco)3391, 3013, 2964, 2930, 1716, 1631, 1448 e 1363011-1. δΗ (270 MHz) [d5 píridina:d4 metanol . 1:1] 6.70-6.30 (14H, complexo, 5.65 (1H, multipleto , 4.94 (1H, s), 4.73 (3H, complexo, 4.48 (2H, complexo, 4.25 (1H, d), 4.18-3.87 (5H, complex o, 3.67 (1H, complexo, 3.59-3.35 (4H complexo, 2.96 (1H, dd), 2.80-2.30 (5H, complexo, 2.20-1.50 (11H, complexo, 1.44 (3H, d, J 5.5 Hz), 1.36 (3H, d, J 6.3 Hz), 1.25 (3H, d, J 6.3 Hz) e 1.17 (3H, d, J 7.2 Hz) ppm. nspscíra ds massas (r-Alás matriz tiodietanol/Na) massa observada niva nassa calculada para 9255*

Claims (2)

1. REIVINDICAÇÕES iâ» “ Processo para a preparação ds compostos do fórmula < ϊ > ? ou ds um ssu sal farmaceuticamante aceitáveis Me HC

   (I) em que R., é um grupo ácido carboKilico5 um ssu derivado» um resíduo cetonaP uma função aldeído ou mstilo facultativamsnts substituído? fâ hidroxi, C* „ alcoxi ou um átomo de flúor? e ,ώ. * 1 K-,. á um grupo amíno ou um seu derivado5 caracterisado par compreender a reacçlo de um composto de fórmula CID?

   em que R., ' á R1 ? tal como foi definido para a fórmula £ I) s R_' ê um grupo assino protegidos e cada ' é hidrogénio ou um grupo protsctor de sililoj com um perácido,, seguida de substituição seleciiva na posição anomérica 13 do intermediário assim formado na presença da um composto e/ιι que R„ é tal camo foi definido para a fórmula CI> p a por, seguidaraent©, de modo facultativo ou sendo necessário s na ordem que for apropriada;, se converter R_/ num grupo amino R^.s se remover RA' quanda se tratar de um grupo protector de sililo5 ss intsrconverter R1„ se interconverter R„5 ss farmar u® derivada da grupo assine 9 e se farmar um sal farma--ceuticsmsnte aceitável„
2. 21, - Processo de acordo com a reivindicação 1P caracterisada par ser hidroxicarbonilo,, C1_^ alcoMicarbonilo, alqueniloxicarbonilo ou hidroximetilo* 3S:?! - Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caractsrisada por R* ser metoxicarbonilo ou prap-2--eniloxicsrba— n i I a „ • < *

   4ã = -· Processo de acordo cora qualquer uma das reivindicações i a 3? caractsrizado por ser hidroxi, Cr _ „ alcoxi ou ·£ λ ‘ "r flúor» dicaçõss i 51r. - Processo de acordo com qualquer uma das a 4? caractsrizsda por R._ ser metoxi» rsivin- ôs = --· Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5S caracterizado por R-, ser an>ino = 71= - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a é= caracterisado por se preparar um composto que sKists na forma estereoiiiérica 14(S)„ 81 = ~ Processo ds acordo coisi qualquer uma das reivindicações la éj caracterizado por se preparar um composto que existe na forma sstereomérica 14íR> = 91= - Processo de acordo com a reivindicação 1= caracterisado por se prspararn éster meti 1íco de 13-desidroxi-13-fluoro~Í4-CS>-hidroxianfoteri-cina éster metilico de 14-(S)-hidroxianfotericina B;i éster metilico ds 14— (S)~hidroxi-13-G-metilarrfotericina B,, éster metilico de 14-CR>-hidroxi-13~0~matilaníotericina BP éster alilico ds 14---íR>-hidroxianfotericina? 14— íR)—hidroxianfotericina B5 χΓ <L>~-aspartato de éster metílico de i4--C3>~hidroxianfotsricina Bs éster metílico tíe 14~íRJ-hiaYoxianfotericina B ou lò--decarbaxi"-ió"-hidro>iiiiisfcil“14“<R)--hidroxianfotericina B = 10§= Processo para a preparação de uma composição farmacêutica, caractsrisado por compreender a mistura de um composto de fórmula < I.),, tal como foi definido na reivindicação i5 ou de um seu sal farmaceuticamente aceitáveíg com um dilusnte ou suporte farmaceuticamente aceitáveis» líi= - Método para o tratamento de infecçSes fúngicas em animais, incluindo seres humanos, earacterisado por compreender a administração de um composta de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticsmente aceitável, sendo a gama de dosagem diária de composto aciivo de a 1 mg por quilograma de peso corporal» Lisboa, 6 de Dezembro de lw@

   J. PEREIRA DA CRUZ Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 10-A 3“ 1200 USBOA