EA003856B1 - Антипикорнавирусные композиции, их получение и применение - Google Patents
Антипикорнавирусные композиции, их получение и применение Download PDFInfo
- Publication number
- EA003856B1 EA003856B1 EA200001133A EA200001133A EA003856B1 EA 003856 B1 EA003856 B1 EA 003856B1 EA 200001133 A EA200001133 A EA 200001133A EA 200001133 A EA200001133 A EA 200001133A EA 003856 B1 EA003856 B1 EA 003856B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- compound
- acceptable salt
- prodrug
- pharmaceutically acceptable
- active metabolite
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
- C07D207/26—2-Pyrrolidones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D261/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings
- C07D261/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings
- C07D261/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings having two or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D261/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings having two or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D261/18—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
- C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/0205—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)3-C(=0)-, e.g. statine or derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pyridine Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Hydrogenated Pyridines (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Pyrrole Compounds (AREA)
Abstract
Пептидоподобные и пептидомимические соединения формулыгде переменные формулы являются такими, как определено в раскрытии, оказывают благоприятное ингибирующее или блокирующее действие на биологическую активность 3C протеаз пикорнавирусов. Эти соединения, так же как и фармацевтические композиции, содержащие эти соединения, являются полезными для лечения пациентов или организмов-хозяев, инфицированных одним или несколькими пикорнавирусами, такими как RVP. Также предоставляются промежуточные соединения и синтетические способы получения таких соединений.
Description
Перекрестная ссылка на родственную заявку
Эта заявка относится к предварительной заявке США № 60/083828, поданной 30 апреля 1998 г. от имени Пга§0У1сй е! а1., раскрытие которой включено в данный документ в качестве ссылки.
Область и промышленное применение данного изобретения
Данное изобретение относится к пептидоподобным и пептидомиметическим соединениям, которые преимущественно ингибируют ферментативную активность 3С протеаз пикорнавирусов, особенно 3С протеаз риновирусов (КУРз), и которые замедляют рост вирусов в клеточной культуре. Данное изобретение также относится к применению таких соединений в фармацевтических композициях и в терапевтическом лечении риновирусных инфекций. Данное изобретение далее относится к способам синтеза таких соединений и соединений, использующихся в таких синтезах.
Пикорнавирусы представляют семейство мелких РНК-содержащих вирусов без оболочки, с положительной цепью, которые инфицируют человека и других животных. Эти вирусы включают человеческие риновирусы, человеческие полиовирусы, человеческие вирусы Коксаки, человеческие ЕСНО-вирусы, человеческие и бычьи энтеровирусы, вирусы энцефаломиокардита, вирус менингита, вирусы ног и рта, вирус гепатита А и другие. Человеческие риновирусы являются основной причиной обычной человеческой простуды. В настоящее время на рынке не существует эффективной терапии, которая вылечивает обычную простуду, только лечение, облегчающее симптомы.
Лечение пикорнавирусных инфекций может проводиться путем ингибирования протеолитических 3С ферментов. Эти ферменты необходимы для естественного созревания пикорнавирусов. Они отвечают за автокаталитическое расщепление геномного, большого полипротеина на эссенциальные вирусные белки. Членами семейства 3С протеаз являются цистеиновые протеазы, в которых сульфгидрильная группа наиболее часто расщепляет глутаминглициновую амидную связь. Считается, что ингибирование 3С протеаз блокирует протеолитическое расщепление полипротеина, что, в свою очередь, может замедлять созревание и репликацию вирусов путем препятствования продукции вирусной частицы. Следовательно, ингибирование активности этой цистеиновой протеазы селективными небольшими молекулами, способными к специфичному распознаванию, будет представлять важный и полезный подход к обработке и лечению вирусных инфекций этой природы, в особенности, обычной простуды.
Недавно были открыты некоторые низкомолекулярные ингибиторы ферментативной активности 3С протеаз пикорнавирусов (т.е. антипикорнавирусные соединения). См., напри мер, патентную заявку США № 08/850398, поданную 2 мая 1997 г. ^еЬЬег е! а1.; патентную заявку США № 08/991282, поданную 16 декабря 1997 г., Пга§0У1сй е! а1.; и патентную заявку США № 08/991739, поданную 16 декабря 1997 г., АеЬЬег е! а1. Эти патентные заявки США, раскрытие которых включено в данный документ в качестве ссылок, описывают некоторые антипикорнавирусные соединения. Однако существует потребность в открытии низкомолекулярных соединений, которые являются особенно эффективными антипикорнавирусными агентами.
Таким образом, аспектом данного изобретения является открытие низкомолекулярных соединений, которые являются особенно эффективными антипикорнавирусными агентами. Дальнейшим аспектом данного изобретения является предоставление промежуточных соединений, пригодных для синтеза упомянутых соединений, ингибирующих протеазы, и синтетических методов, применяющихся для таких синтезов. Следующим аспектом данного изобретения является получение высокоэффективных фармацевтических композиций для опосредованного ингибированием 3С протеаз пикорнавирусов лечения заболеваний, таких как обычная простуда.
Эти аспекты осуществляются посредством открытия соединений данного изобретения, которые являются ингибиторами 3С протеаз пикорнавирусов, проявляющими особенно сильную антивирусную активность. Неожиданно было обнаружено, что пептидо и пептидомиметические соединения, содержащие пятичленную гетероциклическую группу, обладают высокой ингибирующей активностью по отношению к протеазам риновирусов. Далее было неожиданно обнаружено, что ингибирующая активность по отношению к протеазам риновирусов пептидо и пептидомиметических соединений может быть значительно увеличена путем замещения глутаминподобного фрагмента в некоторых известных соединениях, ингибирующих риновирусы, имеющих боковую цепь, включающую гамма- или дельта-лактам.
Ингибиторы настоящего изобретения имеют следующую общую формулу (I)
где Υ представляет -Ы(Еу)-, -С(Ку)(Ку)- или -О-, где каждый Ку независимо представляет -Н или низший алкил;
И, представляет -Н, -Е, -алкил, -ОН, -8Н или О-алкильную группу;
К2 и К3, каждый независимо, представляют Н;
или где η является целым числом от 0 до 5,
Л1 представляет СН или Ν, А2 и каждый А3 независимо выбраны из С(К41)(К41), Ν(Κ41), 8, 8(0), 8(О)2 и О, и А4 представляет ΝΗ или ΝΚ41, где каждый К41 независимо представляет Н или низший алкил, при условии, что не более двух гетероатомов встречается последовательно в изображенном выше цикле, образованном А1, А2, (А3)п, А4 и С=О, и, по меньшей мере, один из
В2 и К3 представляет о
или
К5 и В6, каждый независимо, представляют Н, Г, алкильную группу, циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу или гетероарильную группу;
К7 и В8, каждый независимо, представляют
Н, алкильную группу, циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу, гетероарильную группу, -ОВ17, -8В17,
-ΝΚ.17Κ.18, -ΝΚ.19ΝΚ.17Κ.18 или -ΝΚ.17ΟΚ.18, где К-17, В18 и К19, каждый независимо, представляет Н, алкильную группу, циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную груп пу, гетероарильную группу или ацильную группу, при условии, что, по меньшей мере, один из В7 и В8 независимо представляет алкильную группу, циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу, гетероарильную группу, -ОВ17, -8В17, -ΝΚ17Κ18,
-ΝΚ.19ΝΚ.17Κ.18 или -ΝΚ.17ΟΚ.18;
В9 представляет подходящий органический фрагмент и
Ζ и Ζ1, каждый независимо, представляют Н, Г, алкильную группу, циклоалкильную груп пу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу, гетероарильную группу, -С(О)В21, -СО2В21, -0Ν, -С(О)НК.21К22, -С(О)НВ21ОК22, -С(8)К21, -С(8)№21К22, -№2, -8ОК21, -8О2К21, -8()ΛΊ<··[<·, ^(НК^НОК^), -ЗОЯВп, -8О3К21, -РО(ОК21)2, -РО(К21)(К22), -РО(Ж21К22) (ОВ23), -РО(НВ.21К.22)(НВ.23В24), -С(О)НК.21НК.22 К23 или -С(8)НК.21НК.22К23, где К21, К22, К23 и К24, каждый независимо, представляет Н, алкильную группу, циклоалкильную группу, гетероцикло алкильную группу, арильную группу, гетероарильную группу, ацильную группу или тиоацильную группу, или где любые два из К21, К22, В23 и К24 вместе с атомом (атомами), к которому они присоединены, образуют гетероциклоалкильную группу, при условии, что Ζ и Ζ1 не являются оба Н;
или Ζ1 и К1 вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют циклоалкильную или гетероциклоалкильную группу, где Ζ1 и К1 такие, как определены выше, с исключением фрагментов, которые не могут образовывать циклоалкильную или гетероциклоалкильную группу;
или Ζ и Ζ1 вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют циклоалкильную или гетероциклоалкильную группу, где Ζ и Ζ1 такие, как определены выше, с исключением фрагментов, которые не могут образовывать циклоалкильную или гетероциклоалкильную группу. Данное изобретение также относится к пролекарственным препаратам, фармацевтически приемлемым солям, фармацевтически активным метаболитам и фармацевтически приемлемым сольватам соединений формулы (I).
В предпочтительных воплощениях соединений формулы (I) и В3, каждый независимо, представляют Н;
или где η является целым числом от 0 до 5, каждый В41 независимо представляет Н или низший алкил и стереохимия атома углерода, отмеченного звездочкой (*), может быть В или 8; при условии, что, по меньшей мере, один из В2 и В3 представляет
или
Предпочтительно В9 представляет пятичленный гетероцикл, имеющий от одного до трех гетероатомов, выбранных из О, Ν и 8.
В других предпочтительных воплощениях варианты формулы (I) являются следующими. Каждый Ζ и Ζ1 независимо выбран из Н, Г, низшего алкила, -СО2В21 и -С(О)НК21В22, при условии, что Ζ и Ζ1 оба не являются Н, где В21 и В22, каждый независимо, представляет Н, алкильную группу, циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу, гетеро арильную группу, ацильную группу или тиоацильную группу, или В21 и В22 вместе с атомом (атомами), к которому они присоединены, образуют гетероциклоалкильную группу. По меньшей мере, один из В2 или В3 представляет
или
а другой представляет Н. Каждый В5 и В6 независимо выбран из Н, Г, алкильной группы, циклоалкильной группы, гетероциклоалкильной группы, арильной группы и гетероарильной группы, более предпочтительно один из В5 и В6 представляет Н, а другой представляет алкил или арил (например, незамещенный или замещенный фенилметил). В7 и В8, каждый незави5 симо, представляют Н, алкильную группу, циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу, гетероарильную группу и более предпочтительно один из К- и К8 представляет Н, а другой представляет алкил (например, 2-пропил, 2-метил-2-пропил или 2метил-1-пропил) или арилметил (например, незамещенный или замещенный фенилметил или нафтилметил). К9 представляет пятичленный гетероцикл, имеющий от одного до трех гетероатомов, выбранных из О, N и 8, более предпочтительно пятичленный гетероцикл, имеющий, по меньшей мере, один гетероатом азота и, по меньшей мере, один гетероатом кислорода (например, незамещенный или замещенный 1,2оксазолил (т.е. изоксазолил), 1,3-оксазолил (т.е. оксазолил) или оксадиазолил (1,2,3-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил или 1,2,5-оксадиазолил). Если К9 представляет оксадиазолил, то предпочтительным является незамещенный и монометилзамещенный 1,2,4-оксадиазолил. В особенно предпочтительных воплощениях К9 представляет 3-изоксазолил или 5-изоксазолил, или незамещенный, или замещенный одной или двумя метильными группами и/или атомами галогена, причем наиболее предпочтительными галогеновыми заместителями являются хлор и фтор.
В предпочтительном воплощении соединения пролекарственные препараты, фармацевтически приемлемые соли, фармацевтически активные метаболиты и сольваты обладают антипикорнавирусной активностью со значением ЕС5о меньшим или равным 100 мкМ в Н1-НеЬа клеточном культуральном анализе и более предпочтительно антириновирусной активностью со значением ЕС50 меньшим или равным 10 мкМ в Н1-НеЬа клеточной культуре.
В другом аспекте данное изобретение раскрывает промежуточные соединения формулы II, предпочтительно формулы II', которые применяются в синтезе некоторых соединений
где р является целым числом от 0 до 5;
Ап представляет СН или Ν, А12 и каждый А13 независимо выбраны из С(К61)(К61), Ν(Κ61), 8, 8(0), 8(О)2 и О, и А14 представляет N4 или ΝΚ61, где каждый К61 независимо представляет Н, алкил, ацил или арил, при условии, что не более двух гетероатомов встречается последовательно в изображенном выше цикле в формуле II, образованном Ап, А12, (А13)п, А14 и С=О;
каждый К141 независимо представляет Н или низший алкил;
К51 представляет Н, алкил, ацил или арил;
К52, К53 и К54, каждый независимо, выбран из Н, гидроксила, алкила, ацила и арила; или любые два из К52, К53 и К54 вместе образуют =0 или =С(К5-)(К58), где каждый К5- и К58 независимо выбран из Н, алкила, СО2(С1-С6)алкила, С(О^(С1-С6)алкила и СО2арила и
К55 и К56, каждый независимо, представляет Н или подходящую защитную группу для азота.
Данное изобретение также направлено на фармацевтически приемлемые соли соединений формул II и II'.
Данное изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим терапевтически эффективное количество, по меньшей мере, одного соединения формулы I, или его пролекарственной формы, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтически активного метаболита или сольвата. Кроме того, данное изобретение относится к способам ингибирования 3С протеаз пикорнавирусов путем введения терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения формулы I, или его пролекарственной формы, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтически активного метаболита или сольвата.
Настоящее изобретение относится к соединениям формулы I
где Υ, К1, К2, К3, К5, Кб, К-, К8, К9, Ζ и Ζ1 такие, как определены выше, и к их фармацевтически приемлемым солям, пролекарственным формам, активным метаболитам и сольватам. Предпочтительно, такие соединения, фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные формы, активные метаболиты и сольваты обладают антипикорнавирусной активностью, более предпочтительно антириновирусной активностью, соответствующей значению ЕС50, меньшему или равному 100 мкМ, в Н1-НеЬа клеточном культуральном анализе, более предпочтительно соответствующей значению ЕС50, меньшему или равному 10 мкМ, в Н1-НеЬа клеточном культу ральном анализе.
Кроме того, настоящее изобретение относится к предпочтительным соединениям формул КА, КВ и КС
где Ку (в формуле КА) представляет Н или низший алкил, и К1, К2, К3, К5, К6, К-, К8, К9, Ζ и Ζ1 такие, как определены выше, и к их фармацев7 тически приемлемым солям, пролекарственным формам, активным метаболитам и сольватам.
Соединения данного изобретения формул Ι-А, которые упоминаются в данном документе как пептидоподобные соединения, Ι-В, которые упоминаются в данном документе как соединения кетометиленового типа, и Ι-С, которые упоминаются в данном документе как депсипептидные соединения, различаются в своих основах, что может влиять на специфическое биораспределение или другие физические свойства; тем не менее, каждое из них обладает сильной ингибирующей активностью по отношению к протеазам риновирусов.
В предпочтительных воплощениях соединений формул Ι-А, Ι-В и Ι-С, приведенных выше,
К представляет Н, Г или алкильную группу;
Ку (в формуле Ι-А) представляет Н или метил;
К3, К5 и К8 каждый представляет Н;
К2 выбран из одного из следующих фрагментов:
°ν'Ν'Ί °
К6 представляет алкильную группу, которая имеет в качестве предпочтительного необязательного заместителя арильную группу;
К7 представляет алкильную группу, циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу или гетероарильную группу;
К9 представляет пятичленный гетероцикл, имеющий от одного до трех гетероатомов, выбранных из О, N и 8, предпочтительно, где, по меньшей мере, одним из гетероатомов является азот, который является незамещенным или замещенным, где необязательные заместители предпочтительно представляют галоген или низший алкил, и более предпочтительно монохлор или -фтор или метильную группу и
Ζ и Ζ], каждый независимо, представляют Н, Г, алкильную группу, циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу, гетероарильную группу, -С(О)К21, -СО2К21, <Ν, -С(ОЖ21В22, -С(ОЖ21ОК22, -С(8)К21, -С(8Ж21В22, -8ОК21, -8О2К21,
-8О2ЯК21К22, -8О(Ж21)(ОК22), -8ОNК.21,
-8О3К21, -РО(ОК21)2, -РО(К21)(К22),
-РО(№21К22)(ОК23), -РО№1К22)(№2зК24),
-С(ОЖЖ22К2з или -С(8)МК21ЯК22К23, где Ζ и Ζ1 не являются оба Н, и где К21, К22, К23 и К24, каждый независимо, представляет Н, алкильную группу, циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу, гетероарильную группу, ацильную группу или тиоацильную группу или где любые два из К21, К22, К23 и К24 вместе с атомом (атомами), к которому они присоединены, образуют гетероциклоалкильную группу, или Ζ и Ζ1 (оба как определены выше) вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют гетероциклоалкильную группу.
В предпочтительных воплощениях соединения данного изобретения имеют формулы ΙА', Ι-В' и Ι-С'
где К.1, Ζ и Ζ1 такие, как определены выше;
η равно 1 или 2;
Ку (в формуле Ι-А') представляет Н или низший алкил;
Кб представляет алкил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил или гетероарил;
К7 представляет алкил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, -ОК17, -8К17, -ΝΚ17Κ18, -ΝΚ19ΝΚ17Β48 или -МК17ОК18, где К17, К18 и К19, каждый независимо, представляет Н, алкил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил или ацил;
К9 представляет пятичленный гетероцикл, имеющий от одного до трех гетероатомов, выбранных из О, N и 8, который является незамещенным или замещенным, где необязательными заместителями предпочтительно являются одна или две низшие алкильные группы и/или галогены.
Данное изобретение также относится к пролекарственным формам, фармацевтически приемлемым солям, фармацевтически активным метаболитам и сольватам таких соединений.
В предпочтительных воплощениях агентами, ингибирующими КУР, являются соединения любой из стереоспецифических формул Ι-А, ΙВ и Ι-С
О К7 Ку О Р2ζ
Н О КбΗ
О К7 О К2Ζ
И О Кб нЯ, о к7 О К2Ζ
Н О Йб Η Κι где Ку, К!, К2, Кб, К7, К9, Ζ и Ζ1 такие, как определены выше, и их фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные формы, активные метаболиты и сольваты.
В предпочтительных воплощениях соединений формул Ι-Α, Ι-В или Ι-С
К! представляет Н, Р или метил;
Ку (в формуле Ι-Α') представляет Н или метил;
К2 выбран из одного из следующих фрагментов:
Кб представляет арилметил или арилтиометил, где арил предпочтительно является необязательно замещенной фенильной группой;
К7 представляет алкильную группу, более предпочтительно он выбран из 2-пропила, 2метил-2-пропила, 2-метил-!-пропила и арилметил, где арильная группа предпочтительно представляет фенил или нафтил;
К9 представляет изоксазолил, оксазолил или оксадиазолил, необязательно замещенный одной или двумя низшими алкильными группами и/или галогенами и
Ζ представляет Н, и Ζ1 представляет -СО2К21, -СК или -С(О)КК21К22, где К21 и К22 такие, как определены выше, или Ζ и Ζι вместе образуют циклический сложный эфир или амид.
Еще более предпочтительно, если агентами, ингибирующими КУР, данного изобретения являются соединения любой из формул Ι-Α' , ΙВ' и Ι-С'
где п, Ку, К!, К20, Кб, К7, К9, Ζ и Ζι такие, как определены выше, и их фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные формы, активные метаболиты и сольваты.
В предпочтительных воплощениях соединений формул Ι-Α', Ι-В' или Ι-С'
К! представляет Н, Р или метил;
Ку (в формуле 1-А') представляет Н или метил;
К20 представляет водород;
Кб представляет арилметил или арилтиометил, где арил предпочтительно представляет фенил, незамещенный или замещенный галогеном, низшим алкилом и/или низшим алкокси;
К7 представляет алкильную группу и более предпочтительно выбран из 2-пропила, 2-метил2-пропила, 2-метил-1-пропила, и арилметил, где арильная группа предпочтительно представляет фенил или нафтил;
К9 представляет изоксазолил, оксазолил или оксадиазолил, каждый необязательно замещен одной или двумя низшими алкильными группами и/или галогенами и
Ζ представляет Н, и Ζ1 представляет -СО2К21, -СК или -С(О)КК21К22, где К21 и К22 такие, как определены выше, или Ζ и Ζ1 вместе образуют циклический сложный эфир или амид.
В особенно предпочтительных соединениях данного изобретения общей формулы Ι (и ее подразделов) К1 представляет Н или Р.
В другом аспекте данное изобретение направлено на промежуточные соединения формул ΙΙ и ΙΙ'
где переменные (р, А11, Α12, Α13, Α14, К51, К52, К53, К54, К55, К5б и К141) такие, как определены выше. Эти соединения используются для синтеза фармацевтически применяемых соединений формулы Ι.
Предпочтительные группы К55 и К5б представляют Н и подходящие защитные группы для азота, например, ВОС (т-бутилоксикарбонил), СВΖ (бензилоксикарбонил), РМОС (флюорен-9метилоксикарбонил), другие алкилоксикарбонилы (например, метилоксикарбонил) и тритил (трифенилметил). Другие подходящие азотзащитные группы могут быть легко подобраны специалистом (см., например, Сгееп апб \\'Ш/, Рго1есйпд Сгоирз ίη Сйеш1са1 8упШе81з (2пб еб.), ,ΙοΙιιι \\'Пеу & 8опз, ΚΥ (1991)). Предпочтительными группами для К52, К53 и К54 являются Н, алкокси, гидрокси и карбонил.
Предпочтительные соединения формулы ΙΙ включают следующие соединения, в которых РК является подходящей защитной группой для азота, и д равно 1 или 2
Другие предпочтительные промежуточные соединения включают следующие соединения, в которых ВОС представляет т-бутилоксикарбонил
Из них предпочтительными стереоизомерами являются
Особенно предпочтительные промежуточные соединения включают следующие соединения:
ВОС
МеО
ВОС
В соответствии с соглашением, которое используется в данной области, %· применяется в данном документе в структурных формулах для изображения связи, которая является точкой присоединения фрагмента или заместителя к ядру или основному скелету структуры.
Если в химические структуры включены хиральные атомы углерода, и не изображена конкретная ориентация, то подразумевается, что охватываются обе стереоизомерные формы.
Подразумевается, что в данном документе термин алкильная группа обозначает моновалентный радикал с линейной или разветвленной цепью насыщенных или ненасыщенных атомов углерода и атомов водорода, такой как метил (Ме), этил (Е1), пропил, изопропил, бутил, изобутил, т-бутил, этенил, пентенил, бутенил, пропенил, этинил, бутинил, пропинил, пентинил, гексинил и т.п., который может быть незамещенным (т. е. содержать только углерод и водород) или замещенным одним или несколькими подходящими заместителями, как определено ниже (например, одним или несколькими галогенами, такими как Е, С1, Вг или I, причем Е и С1 являются предпочтительными). Подразумевается, что низшая алкильная группа обозначает алкильную группу, имеющую в цепи от 1 до 4 атомов углерода.
Подразумевается, что циклоалкильная группа обозначает неароматический моновалентный моноциклический, бициклический или трициклический радикал, содержащий 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 или 14 циклических атомов углерода, каждый из которых может быть насыщенным или ненасыщенным и который может быть незамещенным или замещенным одним или несколькими подходящими заместителями, как определено ниже, и который может быть сопряжен с одной или несколькими гетероциклоалкильными группами, арильными группами или гетероарильными группами, которые, в свою очередь, могут быть незамещенными или замещенными одним или несколькими заместителями. Иллюстративные примеры циклоалкильных групп включают следующие фрагменты:
<. □. О. о. о. со. ^0.0 и 2с.
Подразумевается, что гетероциклоалкильная группа обозначает неароматический моновалентный моноциклический, бициклический или трициклический радикал, который является насыщенным или ненасыщенным, содержащий 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 циклических атомов, включающих 1, 2, 3, 4 или 5 гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы, где радикал является незамещенным или замещенным одним или несколькими подходящими заместителями, как определено ниже, и который может быть сопряжен с одной или несколькими циклоалкильными группами, арильными группами или гетероарильными группами, которые в свою очередь могут быть незамещенными или замещенными одним или несколькими заместителями. Иллюстративные примеры гетероциклоалкильных групп включают следующие фрагменты:
Подразумевается, что арильная группа обозначает ароматический моновалентный моноциклический, бициклический или трициклический радикал, содержащий 6, 10, 14 или 18 циклических атомов углерода в кольце, который может быть незамещенным или замещенным одним или несколькими подходящими заместителями, как определено ниже, и который может быть сопряжен с одной или несколькими циклоалкильными группами, гетероциклоалкильными группами или гетероарильными группами, которые, в свою очередь, могут быть незамещенными или замещенными одним или несколькими подходящими заместителями. Иллюстративные примеры арильных групп вклю-
группа обозначает ароматический моновалентный моноциклический, бициклический или трициклический радикал, содержащий 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 циклических атомов в кольце, включающих 1, 2, 3, 4 или 5 гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы, который может быть незамещенным или замещенным одним или несколькими подходя щими заместителями, как определено ниже, и который может быть сопряжен с одной или несколькими циклоалкильными группами, гетероциклоалкильными группами или арильными группами, которые, в свою очередь, могут быть незамещенными или замещенными одним или несколькими подходящими заместителями. Иллюстративные примеры гетероарильных групп включают следующие фрагменты:
о N К | О. Ό. 0. | о N К. | О о· |
О· к | О О, О. | О | о о |
Ν^Ν м | о со | СП о? |
Подразумевается, что гетероцикл обозначает гетероарильную или гетероциклоалкильную группу (каждая из которых, как определено выше, является необязательно замещенной).
Подразумевается, что ацильная группа обозначает -С(О)-В радикал, где В является заместителем, как определено ниже.
Подразумевается, что тиоацильная группа обозначает
-С(8)-В радикал, где В является заместителем, как определено ниже.
Подразумевается, что сульфонильная группа обозначает -8О2-В радикал, где В является заместителем, как определено ниже.
Подразумевается, что гидроксильная группа обозначает радикал -ОН.
Подразумевается, что аминогруппа обозначает радикал -ΝΗ2.
Подразумевается, что алкиламиногруппа обозначает радикал -NΗВа, где Ва представляет алкильную группу.
Подразумевается, что диалкиламиногруппа обозначает радикал -NВаВь, где Ва и Вь, каждый независимо, представляют алкильную группу.
Подразумевается, что алкоксильная группа обозначает радикал -ОВа, где Ва представляет алкильную группу. Примеры алкоксильных групп включают метокси, этокси, пропокси и т. п.
Подразумевается, что алкоксикарбонильная группа обозначает радикал -С(О)ОВа, где Ва представляет алкильную группу.
Подразумевается, что алкилсульфонильная группа обозначает радикал -8О2Ва, где Ва представляет алкильную группу.
Подразумевается, что алкиламинокарбонильная группа обозначает радикал -С(О^НВ.,. где В., представляет алкильную группу.
Подразумевается, что диалкиламинокарбонильная группа обозначает радикал -С(О)NВаВь, где Ва и ВЕ, каждый независимо, представляют алкильную группу.
Подразумевается, что меркаптогруппа обозначает радикал -8Η.
Подразумевается, что алкилтиогруппа обозначает радикал -8Ва, где Ва представляет алкильную группу.
Подразумевается, что карбоксильная группа обозначает радикал -С(О)ОН.
Подразумевается, что карбамоильная группа обозначает радикал -ί’(Ο)ΝΗ2.
Подразумевается, что арилоксигруппа обозначает радикал -ОВС, где Вс представляет арильную группу.
Подразумевается, что гетероарилоксигруппа обозначает радикал -ОВЙ, где Κ,ι представляет гетероарильную группу.
Подразумевается, что арилтиогруппа обозначает радикал -§ПС. где Вс представляет арильную группу.
Подразумевается, что гетероарилтиогруппа обозначает радикал -8ВЛ где Вй представляет гетероарильную группу.
Подразумевается, что термин подходящий органический фрагмент обозначает любой органический фрагмент, который, как определяется специалистами в данной области с помощью, например, рутинных анализов, не оказывает неблагоприятного воздействия на ингибиторную активность соединений данного изобретения. Иллюстративные примеры подходящих органических фрагментов включают, не ограничиваясь ими, гидроксильные группы, алкильные группы, оксогруппы, циклоалкильные группы, гетероциклоалкильные группы, арильные группы, гетероарильные группы, ацильные группы, сульфонильные группы, меркаптогруппы, алкилтиогруппы, алкоксигруппы, карбоксильные группы, аминогруппы, алкиламиногруппы, диалкиламиногруппы, карбамоильные группы, арилтиогруппы, гетероарилтиогруппы и т. п.
Подразумевается, что термин заместитель или подходящий заместитель обозначает любой подходящий заместитель, который может быть подобран или выбран, например, с помощью рутинных анализов, специалистами в данной области. Иллюстративные примеры подходящих заместителей включают гидроксильные группы, галогены, оксогруппы, алкильные группы, ацильные группы, сульфонильные группы, меркаптогруппы, алкилтиогруппы, алкоксигруппы, циклоалкильные группы, гетероциклоалкильные группы, арильные группы, гетероарильные группы, карбоксильные группы, аминогруппы, алкиламиногруппы, диалкиламиногруппы, карбамоильные группы, арилоксигруппы, гетероарилоксигруппы, арилтиогруппы, гетероарилтиогруппы и т. п.
Подразумевается, что термин необязательно замещенный специально определяет, что конкретная группа является незамещенной или замещенной одним или несколькими подходящими заместителями, в случае, если необязательные заместители конкретно определены, этот термин обозначает, что группа является незамещенной или замещенной конкретными заместителями. Как определено выше, различные группы могут быть незамещенными или замещенными (т.е. они являются необязательно замещенными), если здесь не определено иначе (например, путем определения, что конкретная группа является незамещенной).
Подразумевается, что пролекарственная форма обозначает соединение, которое превращается в физиологических условиях, в результате или сольволиза, или метаболизма, в конкретное соединение, которое является фармацевтически активным.
Подразумевается, что фармацевтически активный метаболит обозначает фармацевтически активный продукт, который продуцируется в организме в результате метаболизма конкретного соединения.
Подразумевается, что сольват обозначает фармацевтически приемлемую сольватную форму конкретного соединения, которая сохраняет биологическую активность такого соединения. Примеры сольватов включают соединения данного изобретения в сочетании с водой, изопропанолом, этанолом, метанолом, ДМСО, этилацетатом, уксусной кислотой или этаноламином.
Подразумевается, что фармацевтически приемлемая соль обозначает соль, которая сохраняет биологическую активность свободной кислоты или основания конкретного соединения, и которая не является биологически или иначе нежелательной. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают сульфаты, пиросульфаты, бисульфаты, сульфиты, бисульфиты, фосфаты, моногидрофосфаты, дигидрофосфаты, метафосфаты, пирофосфаты, хлориды, бромиды, йодиды, ацетаты, пропионаты, деканоаты, каприлаты, акрилаты, формиаты, изобутираты, капроаты, гептаноаты, пропиолаты, оксалаты, малонаты, сукцинаты, субераты, себакаты, фумараты, малеаты, бутин-1,4-диоаты, гексин-1,6-диоаты, бензоаты, хлорбензоаты, метилбензоаты, динитробензоаты, гидроксибензоаты, метоксибензоаты, фталаты, сульфонаты, ксилолсульфонаты, фенилацетаты, фенилпропионаты, фенилбутираты, цитраты, лактаты, γгидроксибутираты, гликоллаты, тартраты, метансульфонаты, пропансульфонаты, нафталин1-сульфонаты, нафталин-2-сульфонаты и манделаты.
Если соединение данного изобретения является основанием, то целевая соль может быть получена с помощью любого подходящего метода, известного в данной области, включая обработку свободного основания неорганической кислотой, такой как хлористо-водородная кислота; бромисто-водородная кислота; серная кислота; азотная кислота; фосфорная кислота и т. п., или органической кислотой, такой как уксусная кислота; малеиновая кислота; янтарная кислота; миндальная кислота; фумаровая кислота; малоновая кислота; виноградная кислота; щавелевая кислота; гликолевая кислота; салициловая кислота; пиранозидильная кислота, такая как глюкуроновая кислота или галактуроновая кислота; альфа-гидроксикислота, такая как лимонная кислота или винная кислота; аминокислота, такая как аспарагиновая кислота или глутаминовая кислота; ароматическая кислота, такая как бензойная кислота или коричная кислота; сульфоновая кислота, такая как птолуолсульфоновая кислота или этансульфоновая кислота; или т. п.
Если соединение данного изобретения является кислотой, то целевая соль может быть получена с помощью любого подходящего метода, известного в данной области, включая обработку свободной кислоты неорганическим или органическим основанием, таким как амин (первичный, вторичный или третичный); гидроксид щелочного или щелочно-земельного металла или т.п. Иллюстративные примеры подходящих солей включают органические соли, полученные с помощью аминокислот, таких как глицин или аргинин; аммиака; первичных, вторичных или третичных аминов; и циклических аминов, таких как пиперидин, морфолин и пиперазин; а также неорганические соли, полученные с помощью натрия, кальция, калия, магния, марганца, железа, меди, цинка, алюминия и лития.
В том случае, если соединения, соли или сольваты являются твердыми веществами, специалистам в данной области понятно, что соединения данного изобретения, соли и сольваты могут существовать в разных кристаллических формах, и все они включены в сферу настоящего изобретения и конкретные формулы.
Соединения данного изобретения могут существовать в виде индивидуальных стереоизомеров, рацематов и/или смесей энантиомеров и/или диастереомеров. Все такие индивидуальные стереоизомеры, рацематы и их смеси широко включены в сферу настоящего изобретения. Однако предпочтительно, если соединения данного изобретения используются в оптически чистой форме.
Специалисты в данной области обычно понимают под оптически чистым соединением такое соединение, которое является энантиомерно чистым. В данной заявке подразумевается, что термин оптически чистый обозначает соединение, включающее, по меньшей мере, достаточную (оптическую) активность. Предпочтительно оптически активное количество индивидуального энантиомера для получения требующейся фармакологической чистоты соединения данного изобретения составляет, по меньшей мере, 90% индивидуального изомера (80% энантиомерный избыток), более предпочтительно, по меньшей мере, 95% (90% э.и.), еще более предпочтительно, по меньшей мере, 97,5% (95% э.и.) и наиболее предпочтительно, по меньшей мере, 99% (98% э.и.).
Предпочтительно в соединениях формулы I (или любого подраздела формулы) К! представляет Н или Е.
В соединениях формулы I предпочтительно К9 является незамещенной или замещенной изоксазолильной группой, где необязательными заместителями являются предпочтительно одна или две метальные группы и/или галогены.
Особенно предпочтительные воплощения данного изобретения описаны ниже в соответствии со следующей формулой I-А:
О Ηγ Яу О Я2 Ζ
Н О Кд Η Κι (Ι-Α”)
Предпочтительные соединения настоящего изобретения включают пептидо (пептидоподобные) соединения (А-1) - (А-8) формулы Ι-А, приведенной выше, где К1 представляет Н, Ζ представляет Н, Ку представляет Н, и К2, К6, К7, Ζ1 и К9 являются такими, как соответственно определено ниже:
(А-1) К2 представляет ^^Η^(Ο)ΝΗ2, К6 представляет С112ΡΙι, К7 представляет СН2СН(СН3)2, Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и К9
представляет (А-2) К2 представляет ΟΗ2ΟΗ2Ο(Ο)ΝΗ2, К6 представляет С112ΡΙι, К7 представляет СН2СН(СН3)2, Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и К9
представляет (А-3) К2 представляет ΟΗ2ΟΗ2Ο(Ο)ΝΗ2, К6
представляет К7 представляет
С(СН3)3, Ζ1 представляет СО2С112С113, и К9
представляет (А-4) К2 представляет ^^Η^(Ο)ΝΗ2, К6 Хую представляет > К7 представляет С(СН3)3,
Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и К9 представляет
.М>
(А-5) К2 представляет ν > К6 представшую ляет > К7 представляет СН(СН3)2, Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и К9 представляет Лт (А-6) К2 представляет ^^Η^(Ο)ΝΗ2, К6 представляет >
СН(СН3)2, Ζ1 представляет представляет ·
К7 представляет ^С^СЩ и К9 оз _ х , К6 представ(А-7) К2 представляет гую ляет г К7 представляет С(СН3)3, Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и К9 представляет (А-8) К2 представляет К6 представГС* ляет р / К7 представляет СН(СН3)2, Ζ1 представляет СΟ2СН2СН3, и К9 представляет
Предпочтительные пептидоподобные соединения формулы Ι-А далее включают соединения (А-9) - (А-13), приведенные ниже, где К1 представляет Н; Ζ представляет Н; Ζ1 представляет СΟ2СН2СН3; Ку представляет СН3; и
К2. К6. К7 и К9 являются такими, как соответственно определено ниже:
(А-9) К2 представляет СЩСЩС^ЫЩ, К представляет г ' К7 представляет > и В9
представляет (А-10) К2 представляет СЩСВДО)^, К6 представляет СН2Р11. К7 представляет
СН2СН(СН3)2, и К9 представляет (А-11) К2 представляет СЩСЩС^ЫЩ, ' К7 представляет
К6 представляет > и К9 представляет (А-12) К2 представляет СЩСЩС^ЫЩ, гр1
К6 представляет · К7 представляет
СН2СН(СН3)2, и К9 представляет ** (А-13) К2 представляет СН2СН2С(О^Н2,
К6 представляет г · К7 представляет , и К9 представляет ** ·
Другие предпочтительные пептидоподоб-
ные соединения включают следующие:
(А-18) (А-19) (А-20) (А-21) (А-22) (А-23) (А-24) (А-25) (А-26) (А-27) (А-28)
Предпочтительные соединения кетометиленового типа (В-1) - (В-4) данного изобретения описаны ниже в соответствии со следующей формулой Ι-Β:
о к7 о к2 Ζ н О Йе Н К, п.Внх (В-1) К2 представляет СН2СН2С(О)ПН2, К6 представляет р * К7 представляет
СН(СН3)2, Ζ представляет Н, Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и К9 представляет ·*₽ .
Κ6 представ(В-2) К2 представляет ляет · К7 представляет СН(СН3)2, Ζ представляет Н, Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и
К9 представляет ·* ·
Κ6 представ(В-3) К2 представляет ляет р · К7 представляет СН(СН3)2, Ζ и Ζ1
вместе представляют г где карбонильная группа находится в цис-положении по отношению к водороду, соответствующему Κι в фор муле I, и К9 представляет
' К6 представ(В-4) К2 представляет ляет ' К7 представляет СН(СН3)2, Ζ представляет Н, Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и
К9 представляет
Предпочтительные соединения депсипептидного типа (С-1) и (С-2) данного изобретения описаны ниже в соответствии со следующей формулой Ι-С, где Κ1 представляет Н:
(С-1) Ζ представляет Н, К2 представляет
СН2СН2С(О)ПН2, К6 представляет ₽ ’ К7 представляет СН(СН3)2, Ζ1 представляет
СО2СН2СН3, и К9 представляет (С-2) Ζ представляет Н, К2 представляет к к
К6 представляет р г К7 представ ляет СН(СН3)2, Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и
К9 представляет
Дополнительные соединения могут быть получены в соответствии со ссылкой на формулу I путем выбора вариантов из следующих заместителей:
Ку = Н или СН3; Κ1 = Н или СН3;
или фенилметил (т.е. бензил), где арильная группа необязательно замещена одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогенов, метокси и метила;
К7 = 2-метил-1-пропил, 2-пропил, 2-метил2-пропил, бензил или и ΐΧ & Ζ ‘ΰ
- * · » 1 > > , .
Д. су- ГА „х ’χν
Настоящее изобретение также направлено на способ ингибирования активности 3С протеаз пикорнавирусов, включающий приведение в контакт протеазы с эффективным количеством соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарственной формы, фармацевтически активного метаболита или сольвата. Например, активность 3С протеаз пикорнавирусов может ингибироваться в ткани млекопитающего путем введения соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарственной формы, фармацевтически активного метаболита или сольвата. Более предпочтительно настоящий способ направлен на ингибирование активности протеазы риновирусов.
Подразумевается, что лечение или обработка обозначает, по меньшей мере, облегчение болезненного состояния у млекопитающего, такого как человек, путем ингибирования активности одной или нескольких 3С протеаз пикорнавирусов, таких как риновирусы человека, полиовирусы человека, вирусы Коксаки человека, вирусы энцефаломиокардита, вирус менингита и вирус гепатита А, и включает: (а) профилактическую обработку млекопитающего, особенно, если обнаружено, что млекопитающее предрасположено к болезненному состоянию, но это состояние еще не диагностировано; (Ь) ингибирование болезненного состояния; и/или (с) облегчение, полное или частичное, болезненного состояния.
Активность соединений данного изобретения, как ингибиторов активности 3С протеаз пикорнавирусов, может быть измерена с помощью любого из подходящих методов, известных специалистам в данной области, включая ίη νίνο и ίη νΐΐΓο анализы. Примером подходящего анализа для измерения активности является антивирусный клеточный культуральный Н1-НеБа тест, описанный в данном документе.
Введение соединений формулы I и их фармацевтически приемлемых пролекарственных форм, солей, активных метаболитов и сольватов может быть осуществлено в соответствии с любым из принятых способов введения, доступных специалистам в данной области. Иллюстративные примеры подходящих способов введения включают пероральный, назальный, наружный, парентеральный, чрезкожный и ректальный. Интраназальная доставка особенно предпочтительна.
Соединение формулы I данного изобретения или его фармацевтически приемлемые соль, пролекарственная форма, активный метаболит или сольват, может быть введено в виде фармацевтической композиции в любой подходящей по мнению специалистов фармацевтической форме. Подходящие фармацевтические формы включают твердые, полутвердые, жидкие или лиофилизированные составы, такие как таблетки, порошки, капсулы, свечи, суспензии, липосомы и аэрозоли. Фармацевтические композиции данного изобретения могут также включать подходящие эксципиенты, разбавители, среды для лекарств и носители, а также другие фармацевтически активные агенты, в зависимости от предполагаемого применения. В предпочтительных воплощениях фармацевтические композиции данного изобретения доставляются интраназально в виде суспензий.
Приемлемые методы получения подходящих фармацевтических форм фармацевтических композиций являются известными или могут быть определены обычным способом специалистами в данной области. Например, фармацевтические препараты могут быть получены с помощью традиционных методик фармацевтической химии, включающих такие стадии, как смешивание, гранулирование и компрессование, при необходимости, для таблеточных форм, или смешивание, заполнение и растворение ингредиентов соответственно с получением целевых продуктов для перорального, парентерального, наружного, внутривагинального, интраназального, внутрибронхиального, внутриглазного, внутриушного и/или ректального введения.
В фармацевтических композициях могут применяться твердые или жидкие фармацевтически приемлемые носители, разбавители, среды для лекарств или эксципиенты. Иллюстративные твердые носители включают крахмал, лактозу, дигидрат сульфата кальция, каолин, сахарозу, тальк, желатин, пектин, гуммиарабик, стеарат магния и стеариновую кислоту. Иллюстративные примеры носителей включают сироп, кокосовое масло, оливковое масло, солевой раствор и воду. Носитель или разбавитель может включать подходящее для пролонгированного высвобождения вещество, такое как моностеарат глицерина или дистеарат глицерина, одно или с воском. Если используется жидкий носитель, композиция может иметь вид сиропа, эликсира, эмульсии, мягкой желатиновой капсулы, стерильной жидкости для инъекции (например, раствора) или неводной или водной жидкой суспензии.
Доза фармацевтической композиции содержит, по меньшей мере, фармацевтически эффективное количество активного соединения (т.е. соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарственной формы, активного метаболита или сольвата) и предпочтительно составлена из одной или нескольких фармацевтических дозировочных единиц. Выбранная доза может быть введена млекопитающему, например, человеку, нуждающемуся в лечении, опосредованном ингибированием активности 3С протеаз пикорнавирусов, с помощью любого известного или подходящего способа введения дозы, включающего наружный, например, в виде мази или крема; пероральный; ректальный, например, в виде свечей; парентеральный путем инъекции; или непрерывно путем внутривагинальной, интраназальной, внутрибронхиальной, внутриушной или внутриглазной инфузии.
Подразумевается, что терапевтически эффективное количество обозначает количество соединения данного изобретения, которое при введении млекопитающему, нуждающемуся в нем, является достаточным для того, чтобы оказать лечебное действие на болезненные состояния, которые облегчаются в результате ингибирования активности одной или нескольких 3С протеаз пикорнавирусов, таких как риновирусы человека, полиовирусы человека, вирусы Коксаки человека, вирусы энцефаломиокардита, вирус менингита и вирус гепатита А. Количество данного соединения этого изобретения, которое является терапевтически эффективным, варьирует в зависимости от таких факторов, как конкретное соединение, болезненное состояние и степень его тяжести, вид млекопитающего, нуждающегося в нем, это количество может быть установлено специалистом традиционным способом.
В качестве иллюстрации, композиция для назальной доставки соединений данного изобретения для лечения риновирусных инфекций может быть получена следующим образом, где все проценты представляют массовые соотношения и суспензию получают в очищенной воде. Соединение формулы I измельчают до получения частиц с уменьшенным размером, так, чтобы Ό90 <10 мкм. Суспензию готовят так, чтобы конечная концентрация содержащегося в ней активного вещества составляла приблизительно от 0,01 до 2%, предпочтительно приблизительно от 0,2 до 2%. Соответствующие консерванты, выбранные из известных в данной области, могут включать, например, хлорид бензалкония/ ΕΌΤΑ в соответствующих интервалах конечных концентраций, например, приблизительно 0,02/0,01%. Может быть включен суспендирующий агент, такой как смесь микрокристаллической целлюлозы (конечная концентрация составляет приблизительно 1-1,5%, предпочтительно приблизительно 1,2%) и натрий карбок симетилцеллюлозы (конечная концентрация составляет приблизительно 0,1-0,2%, предпочтительно приблизительно 0,13%). Поверхностно-активное вещество, такое как полисорбат 80, может быть включено с конечной концентрацией, составляющей приблизительно от 0,05 до 0,2%, предпочтительно приблизительно 0,1%. Может быть включен модификатор тонуса с конечной концентрацией, составляющей приблизительно от 4 до 6%, предпочтительно приблизительно 5%. рН конечного раствора доводят соответственно до физиологического интервала, например, 4-6, используя нетоксичные кислоту и/или основание, такие как НС1 и/или ΝαΟΗ.
Пример композиции для назальной доставки соединения данного изобретения примера 17 имеет следующий состав, где проценты представляют массовые соотношения, и суспензию готовят в очищенной воде
Активное соединение | (В-2) | 0,2-2% |
Консервант | Хлорид бензалкония/ ЕБТА | 0,02/0,01% |
Суспендирующий агент | Микрокристаллическая целлюлоза/№-карбоксиметилцеллюлоза | 1,2/0,13% |
Поверхностно-актив- ное вещество | Полисорбат 80 | 0,1% |
Модификатор тонуса | Декстроза | 5% |
Вещество, использующееся для доведения рН | ШО11/11С1 | рН 4-6 |
Соединения данного изобретения формулы (I) могут быть успешно получены с помощью способов настоящего изобретения, включая общие способы, описанные ниже. В каждом из этих общих способов Κι, Κ2, Κ3, Κ5, К6, Κ7, Κ8, Κ9, Ку, Ζ и Ζ1 такие, как определены выше, и Κ4 используется (как стенографическое изображение) для обозначения
где Κ7, Κ8 и Κ9 такие, как определены выше.
В общем способе I, который используют для синтеза пептидоподобных соединений формулы Ι-А, аминокислота А, в которой Р1 является соответствующей защитной группой для азота, подвергается амидобразующей реакции с аминоспиртом (или его солью) В с получением амида С. Затем с соединения С удаляют защитные группы, получая свободный амин (или его соль) Ώ. Амин Ώ и аминокислоту Е, которая может включать или группу Κ4, или защитную группу для азота (Р2), подвергают связьобразующему взаимодействию, приводящему к образованию соединения Е. Соединение Е окисляют до промежуточного соединения С, который затем превращают в ненасыщенный продукт Н. Если в аминокислоте Е или любой группе Κ (Κ1-Κ9), и/или Ку, и/или Ζ, и/или Ζ1, использовались защитные группы, продукт Н подвергают удалению защитных групп и/или дополнительной модификации, получая не содержащий защитных групп, или модифицированный Н.
несодержащий защитных групп .......... или модифицированный
Аг О ί2 ?
— •'й'Хт’АвтЛ1'
О Αβ ι О К* Κι
С н
Далее описан альтернативный способ получения промежуточного соединения Е. Аминокислоту Е и аминокислоту (или ее соль) I, в которой Р3 является соответствующей защитной группой для кислорода, подвергают связьобразующему взаимодействию с получением промежуточного соединения 1. С молекулы 1 удаляют защитные группы, получая свободную карбоновую кислоту К, которую затем подвергают амидобразующему взаимодействию с аминоспиртом (или его солью) В с образованием промежуточного соединения Е.
о Я» *9а О Ат Аув О . —* — г
О А* О А.
л к
В общем способе II, который также используют для синтеза пептидоподобных соединений формулы РА, аминокислоту Ь, в которой Р1 является соответствующей защитной группой для азота, превращают в карбонильное производное М, в котором Ьу является уходящей группой. Соединение М подвергают взаимодействию, в котором Ьу заменяют на Κ1, получая производное Ν. Затем производное Ν превращают в ненасыщенный продукт О. С ненасыщенного соединения О удаляют защитные группы, получая свободный амин (или его соль) Р, или модифицируют по Ζ или Ζ1, вначале получая О' и затем после удаления защитных групп Р. Затем промежуточное соединение Р подвергают амидобразующему взаимодействию с карбоновой кислотой К, получая конечный продукт Н. Если в любой группе Κ (Κ1-Κ9), и/или Ку, и/или Ζ, и/или Ζ1 использовались защитные группы, продукт Н подвергают удалению защитных групп и/или дополнительной модификации, получая не содержащий защитных групп, или модифицированный Н.
Далее описан альтернативный способ получения промежуточного соединения Ν. Соединение М подвергают взаимодействию, где Ьу восстанавливают до защищенного аминоспирта О. Промежуточное соединение О затем окисляют с получением производного М.
В общем способе III, который используют для синтеза пептидоподобных соединений формулы Ι-А, аминокислоту Ь, в которой Р1 является соответствующей защитной группой для азота, превращают в карбонильное производное М, в котором Ьу является уходящей группой. С соединения М удаляют защитные группы, получая свободный амин (или его соль) В, который затем подвергают амидобразующему взаимодействию с карбоновой кислотой К, получая промежуточное соединение 8. Затем соединение 8 непосредственно превращают в карбонильное промежуточное соединение С, или последовательно восстанавливают вначале до спирта Р, который окисляется до С. Соединение С подвергают взаимодействию, получая ненасыщенный конечный продукт Н. Если в любой группе В(В|-В9). и/или Ву, и/или Ζ, и/или Ζμ использовались защитные группы, продукт Н подвергают удалению защитных групп и/или дополнительной модификации, получая не содержащий защитных групп, или модифицированный Н.
В общем способе IV, который используют для синтеза пептидоподобных соединений формулы ЕА, свободный амин (или его соль) Р, получают из промежуточного соединения О, как описано в общем способе II, превращают в амид Т путем взаимодействия с аминокислотой А, в которой Ρι является соответствующей защитной группой для азота. Затем с соединения Т удаляют защитные группы, получая свободный амин (или его соль) и, который затем превращают в Н с помощью аминокислоты Е. Если в любой группе В (В£-В9), и/или Ву, и/или Ζ, и/или Ζμ использовались защитные группы, продукт Н подвергают удалению защитных групп и/или дополнительной модификации, получая не содержащий защитных групп, или модифицированный Н.
В общем способе V, который используют для синтеза кетометиленовых соединений формулы ЕВ, оптически активный лактон АА, в котором Р4 является соответствующей защитной группой для азота, а В5 и В8 представляют Н (который может быть получен по способу, описанному ниже, или по различным способам, описанным в литературе, включая: (а) Него1й е1 а1., I. Отд. Сйет. 1989, 54, 1178; (Ь) ВтайЬиту е1 а1., ТейаНейгоп ЬеВ 1989, 30, 3845; (с) ВтайЬиту е1 а1., 1. Мей. Сйет. 1990, 33, 2335; (й) АиЕ е1 а1., 1. Огд. Сйет. 1992, 57, 6696; (е) 1опе§ е1 а1., 1. Огд. Сйет. 1993, 58, 2286; (ί) Редопег е1 а1., ТеЕ гайейгоп Ьей. 1995, 36, 2753; и (д) Эопйош е1 а1.,
1. Огд. Сйет. 1995, 60, 7927) превращают посредством двухстадийного процесса (основной гидролиз с последующим окислением) в карбоновую кислоту ВВ. Это вещество не выделяют, а подвергают амидобразующему взаимодействию с амином (или его солью) Р, получая конечный продукт СС. Затем проводят удаление защитной группы Р4 наряду с любой из дополнительных защитных групп, которые используются в любой из групп В (В1, В2, В3, В6 и/или В7), и/или Ζ, и/или Ζ1, и/или дополнительную модификацию, получая СС, не содержащий защитных групп, или модифицированный.
СС
Лактон АА может быть получен в оптически активной форме с помощью следующего общего способа VI (см. Него1й е1 а1., 1. Огд. Сйет. 1989, 54, 1178; ВтайЬиту е1 а1., Тейайейтоп ЬеВ 1989, 30, 3845; и ВтайЬиту е1 а1., 1. Мей. Сйет. 1990, 33, 2335). γ,δ-ненасыщенную карбоновую кислоту ΌΌ, которая включает В7, превращают в соответствующий хлорангидрид (не показано). Хлорангидрид подвергают амидобразующему взаимодействию с хиральным амином или хиральным оксазолидоном, получая производное ЕЕ (в котором Х1 является хиральным амином или хиральным оксазолидоном). Затем соединение ЕЕ подвергают депротонированию и полученный енолат диастереоселективно алкилируют электрофилом, соответствующим В6, получая соединение РР, в котором В5 представляет Н. Это вещество затем подвергают реакции галолактонизации с получением галогенлактона СС, в котором В5 и В8 представляют Н, и йа1 представляет Вг или I. После чего галогенлактон СС превращают в азид НН, и это вещество затем превращают в лактон АА, в котором Р4 является соответствующей защитной группой для азота.
γ,δ-ненасыщенная карбоновая кислота ΌΌ может быть получена с помощью общего способа VII (см.: Негой е! а1., 1. Огд. СЬет. 1989, 54, 1178). Альдегид II, который включает К7, взаимодействует с винилмагнийбромидом, давая спирт Л. Спирт Л затем превращают в γ,δненасыщенную карбоновую кислоту ΌΌ посредством трехстадийного процесса следующим образом: (ί) обработка диэтилмалонатом в присутствии катализатора Τί(ΟΕΐ)4 при 160°С в течение 1 ч, (ΐΐ) нагревание при 190°С в течение 4 ч и (ίίί) гидролиз в этанольном растворе КОН при нагревании с обратным холодильником.
II ΛΙ ЦО
Карбоновая кислота ВВ может быть также получена с помощью общего способа VIII (см. Нойтап е! а1., Те1гаЬебгоп, 1997, 53, 7119). Аминокислоту КК, которая включает К7 и в которой Р4 является соответствующей защитной группой для азота, превращают в β-кетоэфир ЬЬ. С соединения ЬЬ удаляют защитные группы и полученный анион конденсируют с трифлатом ММ, который включает К6. Полученный таким образом продукт конденсации обрабатывают трифторуксусной кислотой, получая кетоэфир ΝΝ, и это вещество затем гидролизуют, получая карбоновую кислоту ВВ. Если основной гидролиз приводит к эпимеризации, кетоэфир ΝΝ может быть подвергнут переэтерификации (аллильный спирт, Т1(О1-Рг)4) и затем удалению защитных групп в нейтральных условиях (Рб(РРЬ3)4, морфолин) с получением карбоновой кислоты ВВ. Трифлат ММ, в свою очередь, может быть получен из соответствующего спирта путем обработки ангидридом трифторметансульфоновой кислоты и 2,6-лутидином.
'’ήΑτΥ™ ♦ но н о о . вт· кк и. ’ мм
ВВ NN
Лактон АА может быть также получен с помощью общего способа IX (см.: Аккш е! а1., 1. Огд. СЬет. 1992, 57, 2771; и Мс^ййатк е! а1., 1. Ат. СЬет. 8ос. 1996, 118, 11970). Аминокислоту КК, которая включает К7 и в которой Р4 является соответствующей защитной группой для азота, превращают в эпоксид ОО (индивидуальный диастереомер) с помощью способа, описанного Ьи1у е! а1., 1. Огд. СЬет. 1987, 52, 1487.
Эпоксид ОО подвергают конденсации с анионом, полученным из соединения РР, которое включает К<5, и в котором Х2 является хиральным фрагментом (включая (18,2К)-1-аминоиндан-2-ол ацетонид), получая продукт конденсации 00. Затем это вещество подвергают циклизации в кислых условиях, получая лактон АА. Соединение РР может быть получено из соответствующей карбоновой кислоты (не показано) с помощью способа, описанного Азкш е! а1., 1.
Огд. СЬет. 1992, 57, 2771.
Общий метод X, использующийся при получении депсипептидных соединений формулы ЕС, иллюстрирует способ получения промежуточного соединения ТТ. Аминокислота Е и спирт КК, где Р5 является соответствующей защитной группой для кислорода, подвергают взаимодействию, приводящему к образованию сложноэфирной связи, получая промежуточное соединение 88. С молекулы 88 удаляют защитные группы, получая свободную карбоновую кислоту ТТ, которая может использоваться вместо карбоновой кислоты К в любом из общих способов, описанных выше.
НК 85 ТТ
Следующие конкретные способы могут быть также использованы для получения различных соединений в соответствии с данным изобретением.
Конкретный способ I описывает получение конкретного промежуточного соединения О1, которое может быть использовано как промежуточное соединение О в общих способах, описанных выше. Так, сложный эфир А1 (полученный как описано СЬйа е! а1., 1. СЬет. 8ос., СЬет. Соттип. 1992, 1064) подвергают гидролизу, получая кислоту В1, которую, в свою очередь, превращают в оксазолидинон С1. Соединение С1 затем подвергают депротонированию, и полученный енолат диастереоселективно алкилируют, получая аллильное промежуточное соединение Ό1. Это соединение окисляют посредством озонолиза, и полученный альдегид (не показано) подвергают реакции восстановительного аминирования с получением лактама Е1. Затем катализируемый кислотой метанолиз Е1 дает спирт Е1. Это промежуточное соединение окисляют с помощью способа 8\\'егп (или в других подходящих окисляющих условиях) до альдегида (не показано), который затем подвергают олефинобразующему взаимодействию с получением конкретного промежуточного соединения 01.
Конкретный способ II описывает получение конкретного промежуточного соединения 02, которое может быть использовано как промежуточное соединение О в общих способах, описанных выше. Промежуточное соединение Ό1 подвергают последовательно обработке боргидридом/окислению, получая первичный спирт (не показано). Это соединение окисляют с помощью способа Бетеги (или в других подходящих окисляющих условиях), и полученный альдегид (не показано) подвергают реакции восстановительного аминирования, получая лактам 01. Затем катализируемый кислотой метанолиз 01 дает спирт Н1. Это промежуточное соединение окисляют с помощью способа 8\\'егп (или в других подходящих окисляющих условиях) до альдегида (не показано), который затем подвергают олефинобразующему взаимодействию с получением конкретного промежуточного соединения 02.
Приведенные ниже промежуточные соединения Р1, Р2 и Р3 могут использоваться в описанных выше общих способах вместо промежуточного соединения О для обеспечения вариантов групп заместителей в положении В2.
Синтез промежуточного соединения Р1 описан ниже. Промежуточное соединение С1 (описано ниже) подвергают депротонированию, и полученный енолат улавливают соответствующим дисульфидом (симметричным или смешанным), получая сульфид р1 (Р является подходящей защитной группой для кислорода). Затем защитную группу для кислорода удаляют, получая спирт р2. Это промежуточное соединение окисляют с помощью способа 8\\'егп (или в других подходящих окисляющих условиях), и полученный альдегид (не показано) подвергают реакции восстановительного аминирования, получая лактам р3. Затем катализируемый кислотой метанолиз р3 дает спирт р4. Это промежуточное соединение окисляют с помощью способа 8\\'егп (или в других подходящих окисляющих условиях) до альдегида (не показано), который затем подвергают олефинобразующему взаимодействию с получением промежуточного соединения р5. Это соединение может быть использовано вместо промежуточного соединения О в описанных выше общих синтетических способах; альтернативно, лактамзащитная группа может быть удалена с получением промежуточного соединения Р1.
Для того чтобы синтезировать промежуточное соединение Р2, промежуточное соединение С1 подвергают депротонированию, полученный енолят улавливают с помощью соответствующего источника электрофильного кислорода (например, оксазиридина), получая спирт р6. Это промежуточное соединение алкилируют с помощью алкилгалогенида, несущего подходящие функциональные группы, или трифлата, получая эфир р7 (Р является подходящей защитной группой для азота). Затем защитную группу для азота удаляют и полученный амин (не показано) подвергают условиям циклизации с получением лактама р8. После чего катализируемый кислотой метанолиз р8 дает спирт р9. Это промежуточное соединение окисляют с помощью способа 8\\'егп (или в других подходя33 щих окисляющих условиях) до альдегида (также не показано), который затем подвергают олефинобразующему взаимодействию с получением промежуточного соединения Р2.
ΟΙ ρβ рТ
ΡΖ р»
Теперь будет описан способ синтеза конкретного промежуточного соединения Р3. Промежуточное соединение Ό1 (описано выше) озонируют и полученный альдегид (не показано) восстанавливают до соответствующего спирта (также не показано). Затем с этого промежуточного соединения удаляют защитные группы, получая соединение р10 (Р1 является подходящей защитной группой для кислорода). Имидную функциональную группу, присутствующую в р10 подвергают гидролизу с получением карбоновой кислоты р11, и это промежуточное соединение подвергают конденсации с соответствующим образом защищенным гидроксиламиновым производным, получая амид р12 (Р2 является подходящей защитной группой для кислорода, которая является стабильной в условиях удаления Р1). Затем удаляют защитную группу Р1 и полученный спирт (р13) превращают в соответствующую подходящую группу (галогенид или трифлат, не показано). После чего удаляют защитную группу Р2 и полученную гидроксамовую кислоту подвергают циклизации с получением промежуточного соединения р14. Затем катализируемый кислотой метанолиз р14 дает спирт р15. Это промежуточное соединение окисляют с помощью способа Бетеги (или в других подходящих окисляющих условиях) до альдегида (не показано), который затем подвергают олефинобразующему взаимодействию с получением промежуточного соединения Р3.
Конкретный способ III описывает получение промежуточных соединений р1, 02 и 03, которые могут быть использованы в общих способах, описанных выше. Известное соединение 11 превращают в молекулу Л, известную из литературы, с помощью модифицированной опубликованной методики (1ки1а е1 а1., I. Меб. Сйет. 1987, νοί. 30, р. 1995). Независимо сложный эфир аминокислоты К1 защищают, получая силиловый эфир Ь1. Этот эфир восстанавливают с помощью ЭГБЛЬ (или используя другие подходящие восстанавливающие условия), и полученный альдегид (не показано) подвергают олефинобразующему взаимодействию с промежуточным соединением Л, получая М1. Удаление силильной защитной группы с М1 дает затем спирт Ν1. Это промежуточное соединение подвергают ряду гидрирующих условий, получая промежуточные соединения р1, 02 и 03. Эти промежуточные соединения могут быть превращены в промежуточные соединения, аналогичные промежуточному соединению О1 (см. конкретный способ I, приведенный выше), с помощью окисления и последующего олефинирования.
/-ΝΗ, ______
И л
оз
Специалистам известно, что различные соединения данного изобретения могут быть получены с помощью вышеописанных общих и конкретных способов, а также путем изучения данной области, включая ссылки, расположенные в данном документе, раскрытие которых включено таким образом в качестве ссылки. Кроме того, специалист может получить различные соединения данного изобретения, руководствуясь примером, описанным ниже, или посредством рутинных модификаций синтезов, описанных в данном документе.
Примеры
Примеры различных предпочтительных соединений формулы I приведены ниже. Структуры соединений следующих примеров подтверждены одним или несколькими из следую щих методов анализа: спектроскопии протонного магнитного резонанса, инфракрасной спектроскопии, элементного микроанализа, массспектрометрии, тонкослойной хроматографии, определении температуры плавления и определении температуры кипения. Если существует какое-либо несоответствие между данной структурной формулой для соединения и его химическим названием, прилагается структурная формула.
Спектры протонного магнитного резонанса (1Н ЯМР) регистрировали с помощью спектрометра Уапаи υΝΙΤΥ/ρΙιΐδ 300 при напряженности поля (рабочей частоте), равной 300 мегагерц (МГц). Значения химических сдвигов приведены в миллионных долях (мд, δ) в область понижения поля от сигнала внутреннего стандарта тетраметилсилана. Альтернативно, спектры 1Н ЯМР были соотнесены к остаточным сигналам протонного растворителя следующим образом: СНС13 = 7,26 м.д.; ДМСО = 2,49 м.д.; СбНИ5 = 7,15 м.д. Множественность пиков обозначают следующим образом: с = синглет; д = дублет; дд = дублет дублетов; т = триплет; кв = квартет; шир. = широкий резонанс; им = мультиплет. Константы взаимодействия приведены в герцах. Спектры инфракрасного поглощения (ИК) получали с помощью спектрометра Регкт-Е1тег 1600 серии ΡΤΙΡ. Элементные микроанализы проводили с помощью Л11ап11с М1сго1аЬ Шс. (Когсгозз, 6Α) и получали результаты для установленных элементов в пределах ±0,4% от теоретически рассчитанных значений. Колоночную флэш-хроматографию проводили с использованием 8Шса де1 60 (Мегск Αγ! 9385). Аналитическую тонкослойную хроматографию (ТЬС) проводили с использованием предварительно покрытых пластинок 8Шса 60 Р254 (Мегск ΑγΙ 5719). Температуры плавления (обозначаемые как т.пл.) определяли на приборе Ме1-Тетр аррага!из, они являются нескорректированными. Все реакции проводили в герметично закрытых колбах при слегка положительном давлении азота, если не оговорено иначе. Все коммерческие реагенты использовали в том виде, в котором они были получены от соответственных поставщиков, со следующими исключениями: тетрагидрофуран (ТГФ) перед использованием перегоняли над натрийбензофенонкетилом; дихлорметан (СН2С12) перед использованием перегоняли над гидридом кальция; безводный хлорид лития получали путем нагревания при 110°С под вакуумом в течение ночи.
В данном документе используются следующие аббревиатуры:
Е12О относится к диэтиловому эфиру; ДМФ относится к К,К-диметилформамиду; ДМСО относится к диметилсульфоксиду и МТВЕ относится к трет-бутилметиловому эфиру. Другие аббревиатуры включают СН3ОН (метанол), Е1ОН (этанол), ЕΐОΑс (этилацетат), ЭМЕ (диметиловый эфир этиленгликоля), Ас (ацетил), Ме (метил), РЬ (фенил), Тг (трифенилметил), СЬх (бензилоксикарбонил), Вос (третбутоксикарбонил), ΤΡΑ (трифторуксусная кислота), ΌΕΑ (Ν,Ν-диизопропилэтиламин), ИВИ (1,8-диазабицикло [5,4,0]ундец-7-ен), НОВ! (гидрат 1-гидроксибензотриазола), РуВОР (гексафторфосфат бензотриазол-1-илокси-триспирролидинофосфония), НΑΤυ (гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1-ил)-К,К,К',К'-тетраметилурония), ЕЭС (гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида), ЭСС (дициклогексилкарбодиимид), ЭЭР (2,3-дихлор5,6-дициано-1,4-бензохинон), ^МЛР (4диметиламинопиридин), С1п (глутамин), Ьеи (лейцин), РЬе (фенилаланин), Уа1 (валин), Н1з (гистидин), 1-Нафт (1-нафтилаланин), 2-Нафт (2-нафтилаланин), а-т-Вн1у1-С1у (трет-бутилглицин), (8)^πό1-Α1η ((28,3'8)-2-амино-3-(2'оксопирролидин-3'-ил)пропионовая кислота) и (8)-Р^ре^-Α1а ((28,3'8)-2-амино-3-(2'-оксопиперидин-3'-ил)пропионовая кислота). Кроме того, Ь обозначает встречающиеся в природе аминокислоты.
Для идентификации некоторых промежуточных соединении и конечных продуктов использовали упрощенную систему наименований с использованием аббревиатуры аминокислот. При наименовании соединений, выделенные курсивом аббревиатуры аминокислот представляют модификации по С-концу остатка, а именно:
(1) сложные эфиры акриловой кислоты обозначаются как Е (транс) пропеноаты; (2) замещенные 3 -метилендигидрофуран-2-оны обозначаются как Е (транс) 2-(а-винил-убутиролактоны); и (3) 5-винилизоксазолы обозначаются как Е (транс) пропенизоксазолы. Кроме того, терминология ΑΑ1Ψ[СОСН2]-АА2 определяет, что для любой пептидной последовательности две аминокислоты (ΑΑ1 и АА2), обычно связанные амидной связью, заменены на кетометиленовый дипептидный изостерический фрагмент. Терминология ΑΑ^Ν^^ΑΑ/ определяет, что для любой пептидной последовательности амидная связь, которая обычно связывает две аминокислоты (ΑΑ1 и ΑΑ2), заменена на Ν-метиламидную связь. Терминология ΑΑιО-ΑΑ/ определяет, что для любой пептидной последовательности амидная связь, которая обычно связывает две аминокислоты (ΑΑ1 и АА2), заменена на эфирную связь.
Примеры воплощений в соответствии с данным изобретением описаны ниже.
(Примечание: далее в тексте под термином гексан подразумевается смесь изомеров гексана).
Пример 1. Получение соединения сравнения #1: 5-(3'-(СЬ/-Е-Ееи-Е-Р11е-Е-С1п)-Е-пропен) изоксазол.
Соединение сравнения #1
Получение промежуточного соединения: СЬ7-Ь-(Тг-С1п)-ОМе.
СЬ7-Ь-(Тг-С1п) (0,26 г, 0,50 ммоль, 1 экв.) добавляют к раствору ацетилхлорида (0,25 мл, 3,52 ммоль, 7,0 экв.) в СН3ОН (5 мл) и перемешивание продолжают при 23 °С в течение 1 ч (часа). Растворитель удаляют при пониженном давлении, остаток растворяют в СН2С12 (100 мл) и промывают водой (100 мл), насыщенным №НСО3 (100 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл). Органический слой сушат над №28О4 и концентрируют. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (20% Е1ОАс в гексане), получая СЬх-Ι .-(Тг-СИп)ОМе (0,23 г, 84% выход) в виде твердого вещества белого цвета: т. пл.= 139-140°С; ИК (см-1) 1742, 1207; 1Н ЯМР (Д\1СО-с1„) δ 1,16 (т, 1Н, 1 = 7,0), 1,77 (м, 1Н), 1,97 (м, 1Н), 3,61 (с, 3Н), 4,99 (м, 1Н), 5,03 (с, 2Н), 7,02-7,55 (м, 20Н), 7,69 (д, 1Н, 1 = 7,7), 8,59 (с, 1Н). Аналитически определено (С..Н. Ν О.: С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: СЖ-ЬДТ г-глутаминол).
Хлорид лития (0,24 г, 5,66 ммоль, 2,0 экв.) добавляют к раствору СЬ7-Ь-(Тг-С1п)-ОМе (1,50 г, 2,79 ммоль, 1 экв.) в смеси 2:1 ТГФ:Е1ОН (30 мл) и смесь перемешивают при 23°С до тех пор, пока все твердое вещество не растворится (10 мин). Добавляют боргидрид натрия (0,21 г, 5,55 ммоль, 2,0 экв.) и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при 23°С. Растворитель удаляют при пониженном давлении, остаток вносят в воду (50 мл) и рН доводят до 2-3 с помощью 10% НС1. Продукт экстрагируют ЕЮ Ас (50 мл) и органический слой промывают водой (50 мл) и насыщенным солевым раствором (50 мл), после чего сушат над Мд8О4. Органический слой концентрируют и остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (градиентное элюирование, 20 >50% ЕЮ Ас в бензоле), получая СЖ-ЬДТг-глутаминол) (1,02 г, 72% выход) в виде белого стекловидного твердого вещества: т.пл. = 66-70°С; ИК (см-1) 3318, 1699, 1510, 1240; 1Н ЯМР (ДМСО-б6) δ
1,40 (м, 1Н), 1,72 (м, 1Н), 2,26 (м, 2Н), 3,17-3,50 (м, 3Н), 4,64 (т, 1Н, 1 = 5,0), 5,00 (с, 2Н), 7,00-
7,40 (м, 20Н), 6,96 (д, 1Н, 1 = 8,5), 8,54 (с, 1Н); Аналитически определено (С32Н32№2О4) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: Ь-(Тг-глутаминол).
Суспензию СЬ7-Ь-(Тг-глутаминол) (1,93 г, 3,79 ммоль) в СН3ОН (25 мл) и Рб/С (10%, 0,19 г) перемешивают в атмосфере водорода (баллон) в течение 4 ч, затем фильтруют через слой целита. Фильтрат концентрируют при понижен ном давлении, получая Ь-(Тг-глутаминол) в виде белого аморфного твердого вещества (1,38 г, 98% выход): т.пл. = 191-193°С; ИК (ст-1) 3255 (шир), 1642, 1527; 1Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 1,29 (м, 1Н), 1,53 (м, 1Н), 2,29 (м, 2Н), 3,08 (м, 1Н), 3,18 (м, 2Н), 3,38 (с, шир, 2Н), 4,43 (с, шир, 1Н), 7,14-
7,28 (м, 15Н), 8,62 (с, 1Н).
Получение промежуточного соединения: СЬ2-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-(Тг-глутаминол).
Карбонилдиимидазол (0,17 г, 1,05 ммоль, 1,0 экв.) добавляют к раствору С^-Е-Ееи-Ь-РйеОН (0,41 г, 1,0 ммоль, 0,95 экв.) в ТГФ (10 мл) и реакционную смесь перемешивают при 23°С в течение 1 ч. Затем добавляют Ь-(Тг-глутаминол) (0,39 г, 1,05 ммоль, 1 экв.) и полученный раствор перемешивают в течение ночи. Летучие вещества удаляют при пониженном давлении и остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (градиентное элюирование, 2>4% СН3ОН в СНС13), получая С^-Ь-Ееи-ЕРйе-Е-(Тг-глутаминол) (0,47 г, 62% выход) в виде белого аморфного твердого вещества: т.пл. = 92-95°С; ИК (см-1) 3302, 1657, 1520, 1238; 1Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 0,79 (т, 6Н, I = 7,0), 1,30 (м, 2Н), 1,44 (м, 2Н), 1,75 (м, 1Н), 2,22 (м, 2Н), 2,82 (м, 1Н), 2,97 (м, 1Н), 3,14 (м, 1Н), 3,25 (м, 1Н),
3,63 (м, 1Н), 3,95 (м, 1Н), 4,48 (м, 1Н), 4,65 (т, 1Н, 3 = 5,0), 4,96 (д, 1Н, 3 = 13,0), 5,02 (д, 1Н, 3 = 13,0), 7,07-7,33 (м, 25Н), 7,42 (д, 1Н, 3 = 8,0),
7,66 (д, 1Н, 3 = 8,5), 7,86 (д, 1Н, 3 = 8,0), 8,52 (с, 1Н). Аналитически определено (С47Н52НЮб· 0,5Н2О) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: СЬ7-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-(Тг-С1п)-Н.
о-Иодоксибензойную кислоту (0,63 г, 2,25 ммоль, 3,0 экв.) добавляют к раствору С^-ЬЕеи-Е-Рйе-Е-(Тг-глутаминол) (0,58 г, 0,75 ммоль, 1 экв.) в ДМСО (7,5 мл) при 23°С. После перемешивания в течение 2 ч ДМСО удаляют при пониженном давлении. Остаток в два раза разбавляют СН2С12 и растворитель упаривают для удаления какого-либо остатка ДМСО. Остаток разбавляют ЕЮ Ас (30 мл) и фильтруют, фильтрат промывают раствором 5% №282О3/5% №НСО3 (30 мл), водой (30 мл) и насыщенным солевым раствором (30 мл) и затем сушат над №28О4. Растворитель удаляют при пониженном давлении, получая СЬ2-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-(Тг-С1п)Н (0,53 г, 92% выход) в виде белого стекловидного твердого вещества, которое сразу используют без дополнительной очистки: 1Н ЯМР (ДМСО-Д) δ 0,79 (м, 6Н), 1,00-1,98 (м, 5Н), 2,27 (м, 2Н), 2,84 (м, 1Н), 3,02 (м, 1Н), 3,98 (м, 2Н),
4,58 (м, 1Н), 4,99 (с, 2Н), 7,14-7,32 (м, 25Н), 7,39 (д, 1Н, 3 = 8,1), 7,97 (д, 1Н, 3 = 8,5), 8,38 (д, 1Н, 3 = 8,0), 8,60 (с, 1Н), 9,20 (с, 1Н).
Получение промежуточного соединения: 5-[3'-(СЬ2-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-(Тг-С1п))-Е-пропен} изоксазол.
Раствор ΚΝ((Ο43)38ί)2 (0,95 мл 0,5М раствора в ТГФ, 0,477 ммоль, 1,0 экв.) добавляют к суспензии бромида изоксазол-5-илметилтрифенилфосфония (0,222 г, 0,525 ммоль, 1,1 экв.) в ТГФ (20 мл) при 0°С, и реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 30 мин. Добавляют раствор С’Ь/-1 ,-1 ,еи-1 ,-РЬе-1 ,-(Тг-С1п)Н (0,366 г, 0,477 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (10 мл) и реакционную смесь затем перемешивают в течение ночи при 23°С. Растворитель удаляют в вакууме и остаток разбавляют ЕЮАс (30 мл), промывают водой (30 мл) и затем сушат над Мд804. Растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток очищают с помощью флэшхроматографии на силикагеле (градиентное элюирование, 0^1% СН3ОН в СНС13), получая 5-{ 3'-(СЬ7-Е-Ееи-Е-РЕе-Е-(Тг-С1п))-Е-пропен} изоксазол (0,307 г, 70% выход) в виде аморфного твердого вещества: ИК (см-1) 3423, 1678, 1568, 1265, 1043, 711; 1Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 0,77-0,81 (м, 6Н), 1,21-1,36 (м, 2Н), 1,40-1,55 (м, 1 Н), 1,60-1,80 (м, 2Н), 2,34-2,45 (м, 2Н), 2,82-
2,87 (м, 1Н), 2,91-3,04 (м, 1Н), 3,95-4,00 (м, 1Н),
4,41-4,50 (м, 1Н), 4,53-4,60 (м, 1Н), 4,99 (кв, 2Н, I = 6,0), 6,19 (д, 1Н, I = 15,0), 6,36 (дд, 1Н, I =15,0, 6,0), 6,46 (с, 1Н), 7,15-7,33 (м, 20Н), 7,42 (д, 1Н, I = 9,0), 7,56-7,63 (м, 5Н), 7,96 (д, 1Н, I = 9,0), 8,08 (д, 1Н, I = 9,0), 8,51 (с, 1Н), 8,58 (с, 1Н); НКМ8 (масс-спектрометрия высокого разрешения) рассчитано для С51Н53К50б+С8 964,3050 (М+Сз), обнаружено 964,3018.
Получение продукта: 5-(3'-(СЬ7-Е-Ееи-ЕРЕе-Е-С1п)-Е-пропен)изоксазол.
Трифторуксусную кислоту (1 мл) добавляют к раствору 5-{3'-(СЬ7-Е-Ееи-Е-РЕе-Е-(ТгС1п))-Е-пропен}изоксазола (0,214 г, 0,257 ммоль) в СН2С12 (10 мл) и реакционную смесь перемешивают при 23°С в течение ночи. Растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (градиентное элюирование, 0^1% СН3ОН в СНС13), получая 5-(3'-(СЬ7-Е-Ееи-Е-РЕе-ЕС1п)-Е-пропен)изоксазол в виде твердого вещества белого цвета (0,054 г, 36% выход): 1Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 0,77-0,83 (м, 6Н), 1,26-1,46 (м, 2Н), 1,47-1,62 (м, 1Н), 1,69-1,79 (м, 2Н), 2,04-2,29 (м, 2Н), 2,83-2,88 (м, 1Н), 2,97-3,10 (м, 1Н), 3,99-
4,12 (м, 1Н), 4,37-4,43 (м, 1Н), 4,48-4,57 (м, 1Н), 5,01 (кв, 2Н, I = 6,0), 6,20 (д, 1Н, I = 15,0), 6,36 (дд, 1Н, I = 15,0, 6,0), 6,45 (д, 1Н, I = 3,0), 6,75 (с, 1Н), 7,14-7,29 (м, 6Н), 7,31-7,40 (м, 5Н), 7,45 (д, 1Н, I = 9,0), 8,04 (д, 1Н, I = 9,0), 8,07 (д, 1Н, I = 9,0), 8,51 (д, 1Н, I =3,0). Аналитически определено (С32Н39К50в) С, Н, N.
Пример 2. Получение соединения А-1: этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-ЕеиЕ-РЕе-Е-С1п)-Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: Вос-Ь-(Тг-С1п)^(0Ме)Ме.
Изобутилхлорформиат (4,77 мл, 36,8 ммоль, 1,0 экв.) добавляют к раствору Вос-Ь(Тг-С1п)-ОН (18,7 г, 36,7 ммоль, 1 экв.) и 4метилморфолина (8,08 мл, 73,5 ммоль, 2,0 экв.) в СН2С12 (250 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 20 мин (минут), затем добавляют гидрохлорид N,0диметилгидроксиламина (3,60 г, 36,7 ммоль, 1,0 экв.). Полученный раствор перемешивают при 0°С в течение 20 мин и при 23°С в течение 2 ч и затем распределяют между водой (150 мл) и СН2С12 (2x150 мл). Объединенные органические слои сушат над Να2804 и концентрируют. Остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (градиентное элюирование, 40^20% гексана в ЕЮАс), получая Вос-Ь-(ТгС1п)-№(0Ме)Ме (16,1 г, 82% выход) в виде белой пены: ИК (см-1) 3411, 3329, 3062, 1701, 1659; 1Н ЯМР (СПС13) δ 1,42 (с, 9Н), 1,63-1,77 (м, 1Н), 2,06-2,17 (м, 1Н), 2,29-2,43 (м, 2Н), 3,17 (с, 3Н), 3,64 (с, 3Н), 4,73 (с, шир, 1Н), 5,38-5,41 (м, 1Н), 7,20-7,31 (м, 15Н). Аналитически определено ^3^37^05) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: Вос-Ь-(Тг-С1п)-Н.
Гидрид диизобутилалюминия (50,5 мл 1,5М раствора в толуоле, 75,8 ммоль, 2,5 экв.) добавляют к раствору Вос-Ь-(Тг-С1п)^0Ме)Ме (16,1 г, 30,3 ммоль, 1 экв.) в ТГФ при -78°С и реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 4 ч. Последовательно добавляют метанол (4 мл) и 1,0М НС1 (10 мл) и смесь нагревают до 23°С. Полученную суспензию разбавляют Е120 (150 мл) и промывают 1,0 М НС1 (3x100 мл), наполовину насыщенным раствором \а11СО3 (100 мл), и водой (100 мл). Органический слой сушат над Мд804, фильтруют и концентрируют, получая неочищенный Вос-Ь-(Тг-С1п)-Н (13,8 г, 97% выход) в виде белого твердого вещества: т.пл .= 114-116°С; ИК (см-1) 3313, 1697, 1494; 1Н ЯМР (СПС13) δ 1,44 (с, 9Н), 1,65-1,75 (м, 1Н), 2,17-2,23 (м, 1Н), 2,31-
2,54 (м, 2Н), 4,11 (с, шир, 1Н), 5,38-5,40 (м, 1Н),
7,11 (с, 1Н), 7,16-7,36 (м, 15Н), 9,45 (с, 1Н).
Получение промежуточного соединения: этил-3-(Вос-Ь-(Тг-С1п))-Е-пропеноат.
Натрий бис(триметилсилил)амид (22,9 мл 1,0М раствора в ТГФ, 22,9 ммоль, 1,0 экв.) добавляют к раствору триэтилфосфоноацетата (5,59 г, 22,9 ммоль, 1,0 экв.) в ТГФ (200 мл) при -78°С и полученный раствор перемешивают в течение 20 мин при этой температуре. Неочищенный Вос-Ь-(Тг-С1п)-Н (10,8 г, 22,9 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (50 мл) добавляют через трубочку и реакционную смесь перемешивают 2 ч при -78°С, нагревают до 0°С в течение 10 мин и затем распределяют между 0,5М НС1 (150 мл) и смесью ЕЮАс и гексана 1:1 (2x150 мл). Объединенные органические слои сушат над Να2804 и концентрируют. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (40% ЕЮАс в гексане), получая этил-3-[Вос-Е-(Тг-О1и)]-Епропеноат (10,9 г, 88% выход) в виде белой пены: ИК (см-1) 3321, 1710; 1Н ЯМР (СОС13) δ 1,27 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,42 (с, 9Н), 1,70-1,78, (м, 1Н), 1,80-1,96 (м, 1Н), 2,35 (т, 2Н, 1 = 7,0), 4,18 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,29 (с, шир, 1Н), 4,82-4,84 (м, 1Н),
5,88 (дд, 1Н, 1 = 15,7, 1,6), 6,79 (дд, 1Н, 1 = 15,7,
5,3), 6,92 (с, 1Н), 7,19-7,34 (м, 15Н). Аналитически определено (С33Н38Н3О3) С, Н, N.
Получение промежуточного соединения: этил-3-(Вос-Е-Рйе-Е-(Тг-61и))-Е-пропеноат.
Раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0 М, 15 мл) добавляют к раствору этил-3-(Вос-Е-(Тг-О1и))Е-пропеноата (3,26 г, 6,01 ммоль, 1 экв.) в том же растворителе (15 мл) при 23°С. Через 2 ч летучие вещества удаляют при пониженном давлении, получая этил-3-(Н2№Е-(Тг-О1и))-Епропеонат-НС1. Это вещество растворяют в СН2С12 (60 мл) и последовательно добавляют Вос-Ь-Рйе-ОН (1,59 г, 6,01 ммоль, 1,0 экв.), НОВ1 (1,22 г, 9,02 ммоль, 1,5 экв.), 4метилморфолин (1,98 мл, 18,03 ммоль, 3 экв.) и ЕЭС (1,73 г, 9,02 ммоль, 1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивают при 23° С в течение ночи и затем распределяют между водой (100 мл) и СН2С12 (2x100 мл). Объединенные органические слои сушат над №28О4, концентрируют и остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (40% ЕЮАс в гексане), получая этил-3-(Вос-Е-Рйе-Е-(Тг-61и))-Е-пропеноат (3,55 г, 85%) в виде белой пены: ИК (см-1) 3306, 1706, 1661; 1Н ЯМР (СВС13) δ 1,29 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,38 (с, 9Н), 1,65-1,76 (м, 1Н), 1,87-1,99 (м, 1Н), 2,25-
2,27 (м, 2Н), 2,94-3,01 (м, 2Н), 4,14-4,26 (м, 3Н), 4,48-4,53 (м, 1Н), 4,95 (с, шир, 1Н), 5,64 (д, 1Н, 1 = 15,8), 6,29 (д, 1Н, 1 = 8,1), 6,64 (дд, 1Н, 1 =
15,8, 5,4), 6,80 (с, шир, 1Н), 7,14-7,32 (м, 20Н). Аналитически определено (С42Н47^О6) С, Н, N.
Получение промежуточного соединения: этил-3-(Вос-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-(Тг-61и))-Е-пропеноат.
Раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0М, 15 мл) добавляют к раствору этил-3-(Вос-Е-Рйе-Е-[ТгО1и])-Е-пропеноата (6,40 г, 9,28 ммоль, 1 экв.) в том же растворителе (15 мл) при 23°С. Через 2 ч летучие вещества удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в СН2С12 (100 мл) и последовательно добавляют Вос-Ь-Ьеи-ОН (2,58 г, 11,1 ммоль, 1,2 экв.), НОВ1 (1,88 г, 13,9 ммоль, 1,5 экв.), 4-метилморфолин (3,06 мл, 27,8 ммоль, 3 экв.) и ЕЭС (2,67 г, 13,92 ммоль, 1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивают при 23°С в течение ночи и затем распределяют между водой (100 мл) и СН2С12 (2x100 мл). Объединенные органические слои сушат над №138О4. концентрируют и остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (2% СН3ОН в СН2С12), получая этил-3-(Вос-Е-Ееи-Е-Рйе-Е(Тг-О1и))-Е-пропеноат (6,46 г, 87% выход) в виде белой пены: ИК (см-1) 3284, 1651, 1515; 1Н ЯМР ^С13) δ 0,86 (д, 3Н, 1 = 6,0), 0,89 (д, 3Н, 1 = 6,0), 1,29 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,34 (с, 9Н), 1,38-1,60 (м, 3Н), 1,62-1,89 (м, 1Н), 1,95-1,97 (м, 1Н), 2,28-
2,30 (м, 2Н), 3,06-3,08 (м, 2Н), 3,92-3,94 (м, 1Н),
4,17 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,48-4,51 (м, 2Н), 4,67 (м, 1Н), 5,66 (д, 1Н, 1 = 15,9), 6,51-6,57 (м, 2Н), 6,69 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 5,1), 7,10-7,33 (м, 21Н). Аналитически определено (С48Н5^4О7-0,33Н2О) С, Н, N.
Получение промежуточного соединения: этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-ЬеиЕ-Рйе-Е-(Тг-61и))-Е-пропеноат.
Раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0М, 3 мл) добавляют к раствору этил-3-(Вос-Е-Ееи-Е-РйеЕ-(Тг-О1и))-Е-пропеноата (0,216 г, 0,27 ммоль, 1 экв.) в том же растворителе (3 мл) при 23 °С. Через 2 ч летучие вещества удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в СН2С12 (15 мл), охлаждают до 0°С и последовательно добавляют триэтиламин (0,112 мл, 0,81 ммоль, 3,0 экв.) и 5-метилизоксазол-3-карбонилхлорид (0,058 г, 0,40 ммоль, 1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 30 мин и затем распределяют между водой (50 мл) и СН2С12 (2x50 мл). Объединенные органические слои сушат над №138О+ концентрируют и остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (2% СН3ОН в СН2С12), получая этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-ЬеиЕ-Рйе-Е-(Тг-61и))-Е-пропеноат (0,199 г, 91% выход) в виде белой пены: ИК (см-1) 3286, 1650, 1541; 1Н ЯМР ^С13) δ 0,86 (д, 3Н, 1 = 5,4), 0,89 (д, 3Н, 1 = 5,7), 1,28 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,43-1,59 (м, 2Н), 1,67-1,75 (м, 1Н), 1,95-1,99 (м, 2Н), 2,28 (т, 2Н, 1 = 7,2), 2,41 (с, 3Н), 2,97-3,04 (м, 1Н), 3,06-
3,13 (м, 1Н), 4,17 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,31-4,33 (м, 1Н), 4,48-4,52 (м, 2Н), 5,72 (д, 1Н, 1 = 15,9), 6,19 (С, 1Н), 6,41 (д, 1Н, 1 = 7,5), 6,59 (д, 1Н, 7= 8,1),
6,71 (дд, 1Н, 1 = 15,3, 6,0), 6,95 (д, 1Н, 1 = 6,6), 7,09-7,21 (м, 21Н). Аналитически определено (С48Н53^О7-Н2О) С, Н, N.
Получение продукта: этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-61п-Епропеноат.
Триизопропилсилан (0,077 мл, 0,376 ммоль, 1,8 экв.) и трифторуксусную кислоту (3 мл) добавляют последовательно к раствору этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-ЬеиЕ-Рйе-Е-(Тг-61и))-Е-пропеноат (0,185 г, 0,21 ммоль, 1 экв.) в СН2С12 (3 мл) при 23°С, получая ярко-желтый раствор. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при 23°С, в течение этого времени смесь становится бесцветной. Летучие вещества удаляют при пониженном давлении и полученное белое твердое вещество перетирают с Е12О (10 мл), фильтруют, и сушат на воздухе, получая этил-3-((5'-метилизоксазол3'-карбонил)-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-61и)-Е-пропеноат (0,87 г, 81% выход) в виде белого твердого ве43 щества: т.пл. = 223-225°С; ИК (см-1) 3298, 1662, 1544, 1457, 1278; 1Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 0,81 (д, 3Н, I = 6,0), 0,85 (д, 3Н, I = 6,3), 1,23 (т, 3Н, I =
6,9), 1,38-1,42 (м, 1Н), 1,48-1,77 (м, 4Н), 2,04 (т, 2Н, I = 7,2), 2,46 (с, 3Н), 2,78-2,86 (м, 1Н), 2,933,00 (м, 1Н), 4,11 (кв, 2Н, I =7,2), 4,36-4,54 (м, 3Н), 5,63 (д, 1Н, I = 15,6), 6,56 (с, 1Н), 6,68 (дд, 1Н,. I = 15,9, 5,4), 6,76 (с, шир, 1Н), 7,19 (м, 6Н), 8,09 (д, 1Н, I = 8,1), 8,14 (д, 1Н, I = 7,8), 8,58 (д, 1Н, I = 7,5). Аналитически определено (С29Н39К5О7) с, Н, N.
Пример 3. Получение соединения А-2: этил-3-((изоксазол-5'-карбонил)-Ь-Ьеи-Ь-РЬе-Ь-
Получение промежуточного соединения: этил-3-((изоксазол-5'-карбонил)-Ь-Ьеи-Ь-РЬе-Ь(Тг-О1п)-Е-пропеноат.
Это соединение получают из этил-3-(ВосЬ-Ьеи-Ь-РЬе-Ь-(Тг-О1п))-Е-пропеноата и изоксазол-5-карбонилхлорида, используя методику, описанную выше (пример 2) для получения этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-ЬеиЬ-РЬе-Ь-[Тг-О1п))-Е-пропеноата, ИК (см-1) 3282, 1643, 1530; 1Н ЯМР (СЭС12) δ 0,87 (т, 6Н, I =
6,6), 1,29 (т, 3Н, I = 7,2), 1,49-1,64 (м, 3Н), 1,691,80(м, 1Н), 1,90-1,96 (м, 1Н), 2,30 (т, 2Н, I =
7,2), 2,92-2,96 (м, 1Н), 3,02-3,09 (м, 1Н), 4,17 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,42-4,48 (м, 3Н), 5,69 (д, 1Н, I =
15,3), 6,65 (с, шир, 1Н), 6,66 (дд, 1Н, I = 15,9,
5,4), 6,76-6,79 (м, 2Н), 7,00-7,31 (м, 22Н), 8,24 (с, 1Н). Аналитически определено (С47Н5^5О7· 0,75Н2О) С, Н, N.
Получение этил-3-((изоксазол-5'-карбонил)-Ь-Ьеи-Ь-РЬе-Ь-О1п)-Е-пропеноата.
Указанное в заголовке соединение получают из этил-3-((изоксазол-5'-карбонил)-Ь-ЬеиЬ-РЬе-Ь-(Тг-О1п))-Е-пропеноата, используя методику, аналогичную описанной выше (пример 2) для получения этил-3-((5'-метилизоксазол-3'карбонил)-Ь-Ьеи-Ь-РЬе-Ь-О1п)-Е-пропеноата, т.пл. = 217-220°С; ИК (см-1) 3302, 1655, 1541; 1Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 0,81 (д, 3Н, I = 6,0), 0,86 (д, 3Н, I = 6,0), 1,21 (т, 3Н, I = 7,2), 1,42-1,75 (м, 5Н), 2,04 (т, 2Н, I = 7,2), 2,78-2,87 (м, 1Н), 2,943,01 (м, 1Н), 4,11 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,37 (м, 1Н),
4,41-4,52 (м, 2Н), 5,64 (д, 1Н, I = 15,6), 6,68 (дд, 1Н, I = 15,9, 5,4), 6,76 (с, шир, 1Н), 7,12-7,19 (м, 7Н), 8,02 (д, 1Н, I = 8,1), 8,20 (д, 1Н, I = 8,1),
8,74 (д, 1Н, I = 1,8), 8,94 (д, 1Н, I = 7,8). Аналитически определено (ί^Ι ЮШУ) С, Н, N.
Пример 4. Получение соединения А-3: этил-3-((5'-метилизоксааол-3'-карбонил)-Ь-а-(тбутил-О1у)-Ь-(4-Ме-РЬе)-Ь-О1п)-Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: этил-3-(Вос-Ь-(4-Ме-РЬе)-Ь-(Тг-01п))-Е-пропеноат.
Этил-3-(Н2№Ь-(Тг-О1п))-Е-пропеноат-НС1 (полученный как описано в примере 2, приведенном выше, 1,37 г, 3,10 ммоль) растворяют в ДМФ (10 мл) при 23°С. Добавляют диизопропилэтиламин (1,08 мл, 6,20 ммоль), затем Вос-Ь(4-Ме-РЬе)-ОН (0,87 г, 3,10 ммоль). Реакционную смесь охлаждают до 0°С, добавляют НАТи (1,18 г, 3,10 ммоль) и реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры. ДМФ удаляют в вакууме. Остаток растворяют в ЕЮАс (30 мл) и органическую фазу промывают последовательно 10% раствором НС1 (25 мл), насыщенным раствором NаНСОз (25 мл), Н2О (25 мл) и насыщенным солевым раствором (25 мл). Растворитель сушат (М§8О4), фильтруют и остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (градиентное элюирование, 0^0,75% СН3ОН в СНС13), получая этил-3(Вос-Ь-(4-Ме-РЬе)-Ь-(Тг-01п))-Е-пропеноат (1,48 г, 68% выход) в виде белого аморфного твердого вещества: ИК (см-1) 1713, 1655, 1491, 1175; 1Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 1,20 (т, 3Н, I = 7,0),
1,30 (с, 9Н), 1,62-1,66 (м, 2Н), 2,23 (с, 3Н), 2,32 (м, 2Н), 2,72 (м, 1Н), 2,84 (м, 1Н), 4,07-4,09 (м, 1Н), 4,10 (кв, 2Н, I = 7,0), 4,38 (м, 1Н), 5,64 (д, 1Н, I = 15,5), 6,72 (дд, 1Н, I = 15,5, 5,5), 6,88 (д, 1Н, I = 8,0), 7,04 (д, 2Н, I = 7,7), 7,10 (д, 2Н, I =
1,1), 7,14-7,28 (м, 15Н), 8,02 (д, 1Н, I = 8,0), 8,53 (с, 1Н). Аналитически определено (С43Н49^О6) С, Н, N.
Получение промежуточного соединения: этил-3-(Вос-Ь-а-(т-бутил-О1у)-Ь-(4-Ме-РЬе)-Ь(Тг-О1п))-Е-пропеноат.
Этил-3-(Вос-Ь-(4-Ме-РЬе)-Ь-(Тг-О1п))-Епропеноат (1,45 г, 2,06 ммоль) растворяют в 1,4диоксане (27 мл) и добавляют раствор НС1 в 1,4диоксане (4,0М, 14 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель удаляют путем упаривания и остаток помещают в ЕЮАс (50 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором NаНСОз (50 мл) и затем насыщенным солевым раствором (50 мл), сушат (М§8О4) и растворитель удаляют при пониженном давлении, получая 1,23 г не совсем белого аморфного твердого вещества. Это вещество подвергают взаимодействию с Вос-Ь-а-(т-бутил-О1у)-ОН, используя методику, описанную выше для синтеза этил-3-(Вос-Ь-(4-Ме-РЬе)-Ь-(Тг-О1п))-Епропеноата, получая этил-3-(Вос-Ь-а-(т-бутилО1у)-Ь-(4-Ме-РЬе)-Ь-(Тг-О1п)-Е-пропеноат (49% выход) в виде белого аморфного твердого вещества: ИК (см-1) 1655, 1507, 1248, 1171; 1Н ЯМР (ДМСО-06) δ 0,81 (с, 9Н), 1,21 (т, 3Н, I = 7,0),
1,37 (с, 9Н), 1,52-1,70 (м, 2Н), 2,22 (с, 3Н), 2,26-
2,28 (м, 2Н), 2,73-2,91 (м, 2Н), 3,86 (д, 1Н, I =
9,6), 4,05-4,14 (м, 2Н), 4,31-4,36 (м, 1Н), 4,47-
4,55 (м, 1Н), 5,54 (д, 1Н, I = 15,4), 6,37 (д, 1Н, I =
9,6), 6,65 (дд, 1Н, I = 15,8, 5,5), 7,01 (д, 2Н, I =
8,1), 7,07 (д, 2Н, I = 7,7), 7,11-7,32 (м, 15Н), 8,03 (д, 1Н, I = 8,1), 8,10 (д, 1Н, I = 7,7), 8,49 (с, 1Н). Аналитически определено (С49Н60Н|О7-0,4Н2О) С, Н, N.
Получение промежуточного соединения: этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Г-а-(тбутил-01у)-Г-(4-Ме-Рйе)-Г-(Тг-01п)-Е-пропеноат.
С этил-3-(Вос-Ь-а-(т-бутил-О1у)-Ь-(4-МеРйе)-Г-(Тг-О1п))-Е-пропеноата удаляют защитные группы, используя методику, описанную выше для удаления защитных групп с этил-3(Вос-Г-(4-Ме-Рйе)-Г-(Тг-О1п))-Е-пропеноата, и полученный амин (0,22 г, 0,30 ммоль) растворяют в СН2С12 (3 мл). Добавляют пиридин (0,025 мл, 0,32 ммоль) и реакционную смесь охлаждают до 0°С. Добавляют 5-метилизоксазол-3-карбонилхлорид (0,046 г, 0,32 ммоль). Реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение одного часа. Растворитель удаляют в вакууме и остаток подвергают колоночной флэш-хроматографии (градиентное элюирование, 0^1% СН3ОН в СН2С12), получая этил-3((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Г-а-(т-бутил01у)-Г-(4-Ме-Рйе)-Г-(Тг-01п))-Е-пропеноат (0,19 г, 77% выход) в виде белого аморфного твердого вещества: ИК (см-1) 1651, 1518; 1Н ЯМР (ДМСО-Й6) δ 0,88 (с, 9Н), 1,20 (т, 3Н, I = 7,0), 1,55-1,67 (м, 2Н), 2,14 (с, 3Н), 2,18-2,28 (м, 2Н),
2,45 (с, 3Н), 2,70-2,77 (м, 1Н), 2,86-2,93 (м, 1Н), 4,07-4,14(м, 2Н), 4,46 (д, 1Н, I = 9,6), 4,50-4,55 (м, 1Н), 5,54 (д, 1Н, I = 15,8), 6,59 (с, 1Н), 6,65 (дд, 1Н, I = 15,8, 5,5, 15,8), 6,95 (д, 2Н, I = 8,1), 7,05 (д, 2Н, I = 8,1), 7,13-7,28 (м, 15Н), 7,60 (д, 1Н, I = 9,6), 8,13 (д, 1Н, I = 8,1), 8,41 (д, 1Н, I = 8,1), 8,51 (с, 1Н). Аналитически определено (С49Н55^О7) С, Н, N.
Получение продукта: этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-а-(т-бутил-О1у)-Ь-(4Ме-Рйе)-Ь-О1п)-Е-пропеноат.
Этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)Е-а-(т-бутил-01у)-Е-(4-Ме-Рйе)-Ь-(Тг-01п))-Епропеноат (0,17 г, 0,20 ммоль) растворяют в СН2С12 (4 мл) при 23°С. Добавляют трифторуксусную кислоту (0,4 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 ч. Растворитель удаляют в вакууме и остаток подвергают колоночной флэшхроматографии (градиентное элюирование,
0^2% СН3ОН в СН2С12), получая этил-3-((5'метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-а-(т-бутил-О1у)Г-(4-Ме-Рйе)-Г-О1п)-Е-пропеноат (0,085 г, 73% выход) в виде белого аморфного твердого вещества: ИК (см-1) 1661, 1541, 1206; 1Н ЯМР (ДМСО-Й6) δ 0,88 (с, 9Н), 1,21 (т, 3Н, I = 7,0), 1,60-1,73 (м, 2Н), 2,01-2,06 (м, 2Н), 2,14 (с, 3Н),
2,50 (с, 3Н), 2,70-2,77 (м, 1Н), 2,86-2,93 (м, 1н), 4,07-4,14 (м, 2Н), 4,34-4,37 (м, 1Н), 4,45 (д, 1Н, I = 9,6), 4,50-4,55 (м, 1Н), 5,57 (д, 1Н, I = 15,8), 6,60 (с, 1Н), 6,66 (дд, 1Н, I = 15,8, 5,5), 6,75 (с, шир, 1Н), 6,96 (д, 2Н, I = 8,1), 7,06 (д, 2Н, I =
7,7), 7,17 (с, шир, 1Н), 7,65 (д, 1Н, I = 9,6), 8,14 (д, 1Н, I = 8,1), 8,40 (д, 1Н, I = 7,7). Аналитически определено (С30Н4^5О7-0,5ТГА-0,5Н2О) С, Н, N.
Пример 5. Получение соединения А-4: этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-а-(тбутил-01у)-Г-(4-Г-Рйе)-Г-01п)-Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: этил-3-(Вос-Г-(4-Г-Рйе)-Г-(Тг-О1п))-Е-пропеноат.
Вос-Ь-(4-Е-Рйе)-ОН (1,41 г, 5,0 ммоль) растворяют в ТГФ (50 мл). Добавляют этил-3(IΓΝ -Г-(Тг-О1п))-Е-пропеноат-НС1 (полученный, как описано выше, в примере 2, 1,0 г, 5,0 ммоль), затем Εΐ3Ν (0,70 мл, 5,0 ммоль). Добавляют карбонилдиимидазол (0,81 г, 5,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч. Растворитель удаляют в вакууме и остаток подвергают колоночной флэш-хроматографии (градиентное элюирование, 0^1% СН3ОН в СН2С12), получая этил-3-(Вос-Г-(4-Г-Рйе)-Г-(Тг-О1п))-Е-пропеноат (1,13 г, 32% выход) в виде белого аморфного твердого вещества: ИК (см-1) 1712, 1666, 1510, 1169; 1Н ЯМР (ДМСО-Й6) δ 1,20 (т, 3Н, I = 7,0),
1,29 (с, 9Н), 1,61-1,70 (м, 2Н), 2,27-2,34 (м, 2н),
2,74-2,78 (м, 1Н), 2,86-2,90 (м, 1Н), 4,06-4,13 (м, 3Н), 4,36-4,40 (м, 1Н), 5,58 (д, 1Н, I = 15,6), 6,71 (дд, 1Н, I = 15,6, 5,5), 6,98 (д, 1Н, I = 8,1), 7,037,09 (м, 2Н), 7,14-7,28 (м, 17Н), 8,06 (д, 1Н, I = 8,1), 8,53 (с, 1Н); ЬВМ8 (масс-спектрометрия низкого разрешения) (М+Να) 730.
Получение промежуточного соединения: этил-3-(Вос-Г-а-(т-бутил-О1у)-Г-(4-Г-Рйе)-Г(Тг-О1п))-Е-пропеноат.
С этил-3-(Вос-Г-(4-Г-Рйе)-Г-(Тг-О1п))-Епропеноата удаляют защитные группы и подвергают взаимодействию с Вос-Ь-а-(т-бутил01у)-ОН, используя методики, описанные выше для получения этил-3-(Вос-Г-а-(т-бутил-О1у)-Ь(4-Ме-Рйе)-Г-(Тг-О1п))-Е-пропеноата, получая этил-3-(Вос-Г-а-(т-бутил-О1у)-Г-(4-Г-Рйе)-Г(Тг-О1п))-Е-пропеноат (54% выход) в виде белого аморфного твердого вещества: ИК (см-1) 1720, 1651, 1506, 1168; 1Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 0,80 (с, 9Н), 1,20 (т, 3Н, I = 7,0), 1,36 (с, 9Н), 1,53-1,67 (м, 2Н), 2,23-2,28 (м, 2Н), 2,79-2,94 (м, 2Н), 3,85 (д, 1Н, I = 9,9), 4,09 (кв, 2Н, I = 7,0),
4,31-4,35 (м, 1Н), 4,53-4,55 (м, 1Н), 5,46 (д, 1Н, 1 = 15,8), 6,36 (д, 1Н, 1 = 9,2), 6,64 (дд, 1Н, 1 =
15,8, 5,5), 6,97-7,03 (м, 2Н), 7,13-7,28 (м, 17Н), 8,08 (д, 1Н, 1 = 8,1), 8,14 (д, 1Н, 1 = 8,1), 8,49 (с, 1Н). Аналитически определено (С48Н57Х4О7Р) С,
H, N.
Получение промежуточного соединения: этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-а-(тбутил-О1у)-Р-(4-Р-Рйе)-Р-(Тг-О1п))-Е-пропеноат.
С этил-3-(Вос-Р-а-(т-бутил-О1у)-Р-(4-РРйе)-Р-(Тг-О1п))-Е-пропеноата удаляют защитные группы и подвергают его взаимодействию с 5-метилизоксазол-3-карбонилхлоридом, используя методики, описанные выше для получения этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Р-а-(тбутил-О1у)-Р-(4-Ме-Рйе)-Р-(Тг-О1п))-Е-пропеноата, получая этил-3-((5'-метилизоксазол-3'карбонил)-Р-а-(т-бутил-О1у)-Р-(4-Р-Рйе)-Р-(ТгО1п))-Е-пропеноат (74% выход) в виде белого аморфного твердого вещества: ИК (см'1) 1659, 1535, 1510; 1Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 0,88 (с, 9Н),
I, 20 (т, 3Н, 1 = 7,4), 1,52-1,67 (м, 2Н), 2,23-2,28 (м, 2Н), 2,45 (с, 3Н), 2,75-2,82 (м, 1Н), 2,89-2,96 (м, 1Н), 4,09 (кв, 2Н, 1 = 7,0), 4,32-4,36 (м, 1Н),
4,45 (д, 1Н, 1 = 9,6), 4,50-4,55 (м, 1Н), 5,44 (д, 1Н, 1 = 15,6), 6,58 (с, 1Н), 6,63 (дд, 1Н, 1 = 15,6,
5,5, 15,6), 6,93-6,99 (м, 2Н), 7,13-7,28 (м, 17Н),
7,64 (д, 1Н, 1 = 9,6), 8,16 (д, 1Н, 1 = 8,5), 8,46 (д, 1Н, 1 = 8,1), 8,51 (с, 1Н). Аналитически определено (С48Н52^О7Р) С, Н, N.
Получение этил-3-((5'-метилизоксазол-3'карбонил)-Р-а-(т-бутил-О1у)-Р-(4-Р-Рйе)-РО1п)-Е-пропеноата.
С этил-3-[(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)Р-а-(т-бутил-О1у)-Р-(4-Р-Рйе)-Р-(Тг-О1п)]-Епропеноата удаляют защитные группы, используя методику, аналогичную описанной выше для получения этил-3-((5'-метилизоксазол-3'карбонил)-Р-а-(т-бутил-О1у)-Р-(4-Ме-Рйе)-РО1п)-Е-пропеноата, получая этил-3-((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Р-а-(т-бутил-О1у)-Р(4-Р-Рйе)-Р-О1п)-Е-пропеноат (80% выход) в виде белого аморфного твердого вещества: ИК (см-1) 1653, 1543, 1223; 1Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 0,88 (с, 9Н), 1,21 (т, 3Н, 1 = 7,0), 1,59-1,75 (м, 2Н), 2,01-2,06 (м, 2Н), 2,46 (с, 3Н), 2,75-2,82 (м, 1Н), 2,89-2,96 (м, 1Н), 4,09 (кв, 2Н, 1 = 7,0), 4,33-
4,36 (м, 1Н), 4,44 (д, 1Н, 1 = 9,6), 4,50-4,58 (м, 1Н), 5,47 (д, 1Н, 1 = 15,8), 6,59 (с, 1Н), 6,64 (дд, 1Н, 1= 15,8, 5,5), 6,75 (с, шир, 1Н), 6,94-7,00 (м, 2Н), 7,16 (с, шир, 1Н), 7,18-7,23 (м, 2Н), 7,69 (д, 1Н, 1 = 9,6), 8,16 (д, 1Н, 1 = 8,1), 8,44 (д, 1Н, 1 = 8,1); Аналитически определено (С29Н3^5О7Р) С, Н, N.
Пример 6. Получение соединения А-5: этил-3-[(5'-метилизокс-азол-3'-карбонил)-Р-Уа1Р-(4-Р-Рйе)-Р-((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: трет-бутилового эфира (48)-4-(2-карбоксиэтил)-
2,2-диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты.
Гидроксид натрия (27 мл 4,0М раствора в Н2О, 108 ммоль, 3,0 экв.) добавляют к раствору трет-бутилового эфира (48)-4-(2-метоксикарбонилэтил)-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты (полученного, как описано в СЫйа е! а1., 1. Сйет. 8ос., Сйет. Соттип. 1992, 1064) (10,5 г, 36,5 ммоль, 1 экв.) в СН3ОН (150 мл) и полученную мутную реакционную смесь перемешивают при 23°С в течение 3,5 ч. Смесь концентрируют при пониженном давлении до объема ~30 мл и затем распределяют между 0,5М НС1 (150 мл) и Е!ОАс (2x150 мл). Объединенные органические слои сушат над Мд8О4 и фильтруют под действием силы тяжести. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток сушат под вакуумом, получая трет-бутиловый эфир (48)-4-(2'-карбоксиэтил)-
2,2-диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты (10,0 г, 100% выход неочищенного вещества). Это вещество используют без дополнительной очистки: 1Н ЯМР (СЭС13, смесь ротамеров) δ 1,49 (с), 1,57 (с), 1,60 (с), 1,84-2,05 (м), 2,39-2,41 (м), 3,71-3,74 (м), 3,91-4,05 (м).
Получение промежуточного соединения: трет-бутилового эфира (48,48)-4-{3'-(4-бензил-2-оксооксазолидин-3-ил)-3'-оксопропил}-
2,2-диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты.
Триэтиламин (8,87 мл, 63,6 ммоль, 3,0 экв.) и пивалоилхлорид (2,61 мл, 21,2 ммоль, 1,0 экв.) добавляют последовательно к раствору третбутилового эфира (48)-4-(2'-карбоксиэтил)-2,2диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты (5,80 г, 21,2 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (450 мл) при 0°С. Мутную реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 3,5 ч, затем последовательно добавляют хлорид лития (0,988 г, 23,3 ммоль, 1,1 экв.) и (8)-(-)-4-бензил-2-оксазолидинон (3,57 г, 20,1 ммоль, 0,95 экв.). После нагревания до 23°С и перемешивания в течение 19 ч реакционную смесь распределяют между 0,5 М НС1 (150 мл) и Е!ОАс (2x150 мл). Объединенные органические слои промывают полунасыщенным Nа2СО3 (150 мл), сушат над Мд8О4 и фильтруют под действием силы тяжести. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (30% Е!ОАс в гексане), получая трет-бутиловый эфир (48,4 8)-4{3'-(4-бензил-2-оксооксазолидин-3-ил)-3'оксопропил}-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты (7,17 г, 83%) в виде бесцветного масла: ИК (см-1) 2978, 1783, 1694; 1Н ЯМР (СЭС13, смесь ротамеров) δ 1,49 (с), 1,59 (с), 1,63 (с), 2,01-2,10 (м), 2,76 (дд, 1 = 13,5, 9,8), 2,82-
3,13 (м), 3,30-3,41 (м), 3,76-3,82 (м), 3,90 (с, шир), 3,97 (дд, 1 = 9,0, 5,6), 4,10-4,19 (м), 4,634,71 (м), 7,22-7,36 (м). Аналитически определено (С;;1 ЕЛО..) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: трет-бутилового эфира (2'8,48,48)-4-{2'-(4бензил-2-оксооксазолидин-3-карбонил)пент4'-енил}-2,2-диметилосазолидин-3-карбоновой кислоты.
Раствор трет-бутилового эфира (48,48)-4{3'-(4-бензил-2 -оксооксазолидин-3 -ил)-3'оксопропил}-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты (7,17 г, 16,6 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (50 мл) добавляют к раствору натрий бис (триметилсилил)амида (16,6 мл 1,0М раствора в ТГФ, 16,6 ммоль, 1,0 экв.) в том же растворителе (150 мл) при -78°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 20 мин при -78°С и затем добавляют аллилйодид (4,55 мл, 49,8 ммоль, 3,0 экв.). После перемешивания в течение дополнительных 3 ч при -78°С реакционную смесь держат при -45°С в течение 2 ч и затем распределяют между смесью полунасыщенного ΝΗ4Ο и 5% №282О3 2:1 (300 мл) и смесью ЕЮАс и гексана 1:1 (2x200 мл). Объединенные органические слои промывают Н2О (200 мл), сушат над Мд8О4 и фильтруют под действием силы тяжести. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (15% ЕЮАс в гексане), получая трет-бутиловый эфир (2'8,48,48)-4-{2'-(4-бензил-2-оксооксазолидин-3-карбонил)пент-4'-енил}-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты (4,29 г, 55%) в виде бесцветного масла: ИК (см-1) 2978, 1780, 1695; 1Н ЯМР (СОС13, смесь ротамеров) δ 1,45 (с), 1,49 (с), 1,68-1,80 (м), 2,13-2,47 (м), 2,49-2,67 (м), 3,32 (дд, 1 = 13,4, 3,1), 3,69-3,97 (м), 4,11-
4,21 (м), 4,66-4,74 (м), 5,06-5,13 (м), 5,74-5,88 (м), 7,20-7,36 (м). Аналитически определено (С26Н36Н2О6) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: трет-бутилового эфира (18',38)-{3-(1'-(2,4диметоксибензил)-2'-оксопирролидин-3'-ил)-1 гидроксиметилпропил}карбамовой кислоты.
Озон барботируют через раствор третбутилового эфира (2'8,48,48)-4-{2'-(4-бензил2-оксооксазолидин-3 -карбонил)пент-4'-енил }-
2,2-диметилоксазолидин-3 -карбоновой кислоты (4,29 г, 9,08 ммоль, 1 экв.) в СН2С12 (200 мл) и СН3ОН (0,735 мл, 18,1 ммоль, 2,0 экв.) при -78°С, пока сохраняется синее окрашивание. Реакционную смесь затем очищают аргоном, пока она не станет бесцветной. Добавляют метилсульфид (6,67 мл, 90,8 ммоль, 10 экв.), смесь перемешивают при -78°С в течение 3,5 ч и держат при 0°С в течение еще 1 ч. После распределения реакционной смеси между Н2О (200 мл) и смесью ЕЮАс и гексана 1:1 (2x200 мл), объединенные органические слои сушат над Мд8О4 и фильтруют под действием силы тяжести. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток немедленно используют без дополнительной очистки.
Полученный выше остаток растворяют в смеси ТГФ и ЕЮН 2:1 (240 мл) при 23°С и последовательно добавляют гидрохлорид 2,4диметоксибензиламина (7,40 г, 36,3 ммоль, 4,0 экв.), ацетат натрия (2,98 г, 36,2 ммоль, 4,0 экв.) и цианоборгидрид натрия (1,14 г, 18,1 ммоль, 2,0 экв.). Полученную суспензию перемешивают в течение 18 ч при 23°С и затем распределяют между 0,5М НС1 (400 мл) и ЕЮАс (2x200 мл). Объединенные органические слои промывают полунасыщенным NаНСО3 (300 мл), сушат над №ь8О4 и концентрируют при пониженном давлении. Остаток пропускают через короткую колонку с силикагелем (элюируя 50% ЕЮАс в гексане), получая трет-бутиловый эфир (3'8,48)4-{1'-(2,4-диметоксибензил)-2'-оксопирролидин-3'-илметил)-2,2-диметилоксазолидин-3'карбоновой кислоты, содержащий примесь (8)(-)-4-бензил-2-оксазолидинона.
Это вещество растворяют в СН3ОН (100 мл) и добавляют Т§ОН-Н2О (0,345 г, 1,81 ммоль, 0,20 экв.). Реакционную смесь нагревают до 50°С и держат при этой температуре в течение 2,5 ч. После охлаждения до 23°С реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении до объема ~20 мл и распределяют между полунасыщенным NаНСО3 (150 мл) и смесью СН2С12 и СН3ОН 9:1 (2x150 мл). Объединенные органические слои сушат над №ь8О4 и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (3% СН3ОН в СН2С12), получая трет-бутиловый эфир (18,3'8)-{2-(1'-(2,4диметоксибензил)-2'-оксопирролидин-3'-ил)-1 гидроксиметилэтил}карбамовой кислоты (1,62 г, 44%) в виде пены: ИК (см-1) 3328, 1669; 1Н ЯМР (СОС13) δ 1,44 (с, 9Н), 1,50-1,75 (м, 2Н), 1,90-2,00 (м, 1Н), 2,17-2,27 (м, 1Н), 2,52-2,62 (м, 1Н), 3,14-3,24 (м, 2Н), 3,51-3,65 (м, 3Н), 3,70-
3,78 (м, 1Н), 3,80 (с, 6Н), 4,35 (д, 1Н, 1 = 14,3),
4,48 (д, 1Н, 1 = 14,3), 5,51-5,54 (м, 1Н), 6,42-6,46 (м, 2Н), 7,09-7,12 (м, 1Н). Аналитически определено (С1 ЕЛО..) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{Вос-Ь-((№2,4-диметоксибензил)-(8)пиррол-А1а)} -Е-пропеноат.
ДМСО (0,270 мл, 3,80 ммоль, 3 экв.) добавляют по каплям к -78°С раствору оксалилхлорида (0,166 мл, 1,90 ммоль, 1,5 экв.) в СН2С12 (14 мл). Реакционную смесь перемешивают 20 мин, затем раствор трет-бутилового эфира (18,3'8)-{-(1'(2,4-диметоксибензил)-2'-оксопирролидин-3'-ил)-1 -гидроксиметилпропил} карбамовой кислоты (0,518 г, 1,27 ммоль, 1 экв.) в СН2С12 (13 мл) добавляют через трубочку вдоль стенки реакционного сосуда. После перемешивания в течение 20 мин добавляют по кап лям триэтиламин (1,06 мл. 7.60 ммоль. 6 экв.) и реакционную смесь перемешивают в течение 1,5 ч. Добавляют уксусную кислоту (0,479 мл, 8,37 ммоль, 6,6 экв.) и реакционную смесь нагревают до 0°С в течение 5 мин, затем разбавляют МТВЕ (200 мл) и промывают водой, насыщенным ЫаНСО3 и насыщенным солевым раствором (25 мл каждого). Органическую фазу сушат над Ыа28О4 и концентрируют, получая неочищенный альдегид в виде пены (0,516 г, колич. выход), который используют без дополнительной очистки.
Натрий бис(триметилсилил)амид (1,23 мл 1,0М раствора в ТГФ, 1,23 ммоль, 1 экв.) добавляют к раствору триэтилфосфоноацетата (0,244 мл, 1,23 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (15 мл) при -78°С и полученный раствор перемешивают в течение 20 мин при этой температуре. Неочищенный альдегид (полученный выше, 0,500 г, 1,23 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (13 мл) добавляют через трубочку вдоль стенки реакционного сосуда и реакционную смесь перемешивают в течение 45 мин при -78°С, нагревают до 0°С в течение 7 мин и распределяют между 0,5М НС1 (20 мл) и МТВЕ (2x50 мл). Объединенные органические слои сушат над Мд8О4 и концентрируют. Остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (60% ЕЮАс в гексане), получая этил-3-{Вос-Е-((Х-2,4-диметоксибензил)-(8)пиррол-А1а)}-Е-пропеноат (0,356 г, 61%) в виде белой пены: Κί = 0,43 (60% ЕЮАс в гексане); ИК (см-1) 3307, 1708, 1678; 1Н ЯМР (СБС13) δ
1,28 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,43 (с, 9Н), 1,52-1,70 (м, 2Н), 1,98-2,09 (м, 1Н), 2,21-2,34 (м, 1Н), 2,48-
2,59 (м, 1Н), 3,16-3,24 (м, 2Н), 3,80 (с, 6Н), 4,18 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,27-4,40 (м, 1Н), 4,41 (с, 2Н),
5,40 (д, 1Н, 1 = 8,1), 5,95 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 1,6),
6,41-6,48 (м, 2Н), 6,86 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 5,3), 7,08-7,13 (м, 1Н). Аналитически определено (С25Н36И2О7-0,25Н2О) С, Н, N.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{Вос-Е-(4-Е-Рйе)-Е-((№2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)} -Е-пропеноат.
Это вещество получают из этил-3-{Вос-Ь(^-2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Епропеноата и Вос-Е-(4-Г-Рйе)-ОН, используя методику, подобную описанной выше для получения этил-3-(Вос-Е-(4-Ме-Рйе)-Е-(Тг-61и))-Епропеноата (пример 4), Κί = 0,34 (60% ЕЮАс в гексане); ИК (см-1) 3258, 1705, 1666; 1Н ЯМР (СБС13) δ 1,28 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,45 (с, 9Н), 1,51-
1,66 (м, 2Н), 1,78-1,90 (м, 1Н), 2,06-2,23 (м, 2Н),
2,99 (дд, 1Н, 1 = 13,7, 6,2), 3,11 (дд, 1Н, 1 = 13,7,
5,3), 3,17-3,23 (м, 2Н), 3,80 (с, 3Н), 3,81 (с, 3Н),
4,18 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,35 (с, 2Н), 4,38-4,51 (м, 2Н), 5,29-5,37 (м, 1Н), 5,76 (д, 1Н, 1 = 15,8), 6,43-
6,47 (м, 2Н), 6,72 (дд, 1Н, 1 = 15,8, 5,3), 6,83-6,91 (м, 2Н), 7,09-7,17 (м, 3Н), 7,92 (шир, 1Н). Аналитически определено (С34Н44ЕЫ3О8) С, Н, N.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{Вос-Е-Уа1-Е-(4-Г-Рйе)-Е-[(№2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а]}-Е-пропеноат.
Это соединение получают из этил-3-{ВосЕ-(4-Г-Рйе)-Е-(^-2,4-диметоксибензил)-(8)пиррол-А1а)}-Е-пропеноата и Вос-Ь-УаГОН, используя методику, подобную описанной выше для получения этил-3-(Вос-Е-Рйе-Е-(Тг-61и))-Епропеноата (пример 2), Κί = 0,24 (60% ЕЮАс в гексане); ИК (см-1) 3284, 1713, 1678 шир, 1643; 1Н ЯМР (СБС13) δ 0,91 (д, 3Н, 1 = 6,8), 0,97 (д, 3Н, 1 = 6,8), 1,28 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,45 (с, 9Н), 1,50-1,62 (м, 2Н), 1,66-1,82 (м, 1Н), 1,90-2,02 (м, 1Н), 2,08-2,21 (м, 2Н), 2,94 (дд, 1Н, 1 = 13,5, 5,8), 3,17-3,27 (м,3Н), 3,80 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,974,05 (м, 1Н), 4,17 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,27 (д, 1Н, 1 =
14,3), 4,29-4,38 (м, 1Н), 4,40 (д, 1Н, 1 = 14,3),
4,86-4,93 (м, 1Н), 5,10 (д, 1Н, 1 = 8,7), 5,76 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 1,2), 6,45-6,52 (м, 2Н), 6,70 (дд, 1Н, 1= 15,6, 5,4), 6,79-6,88 (м, 3Н), 7,12-7,22 (м, 3Н), 8,30 (д, 1Н, 1 = 5,9). Аналитически определено (С39Н53Е^О9) С, Н, N.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Уа1Е-(4-Р-Рйе)-Е-((№2,4-диметоксибензил)-(8)пиррол-А1а)} -Е-пропеноат.
Это соединение получают из этил-3-{ВосЕ-Уа1-Е-(4-Г-Рйе)-Е-[(№2,4-диметоксибензил)(8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноата и изоксазол-5карбонилхлорида, используя методику, описанную выше (пример 2), для получения этил-3((5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Ееи-Е-РйеЕ-(Тг-61и))-Е-пропеноата: Κί = 0,36 (5% СН3ОН в СН2С12); ИК (см-1) 3284, 1717, 1650; 1Н ЯМР (СБС13) δ 0,97 (д, 3Н, 1 = 6,8), 1,01 (д, 3Н, 1 =
6,8), 1,28 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,51-1,64 (м, 2Н), 1,72-
1,84 (м, 1Н), 1,95-2,05 (м, 1Н), 2,11-2,33 (м, 2Н),
2,48 (с, 3Н), 2,98 (дд, 1Н, 1 = 13,7, 5,6), 3,16-3,24 (м, 3Н), 3,80 (с, 3Н), 3,81 (с, 3Н), 4,17 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,23 (д, 1Н, 1 = 14,3), 4,31-4,42 (м, 1Н),
4,40 (д, 1Н, 1 = 14,3), 4,44-4,50 (м, 1Н), 4,88-4,96 (м, 1Н), 5,79 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 1,4), 6,43-6,49 (м, 3Н), 6,71 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 5,3), 6,80-6,88 (м, 2Н),
6,94 (д, 1Н, 1 = 9,3), 7,11-7,17 (м, 3Н), 7,29 (д, 1Н, 1 = 8,7), 8,33 (д, 1Н, 1 = 6,2). Аналитически определено (С39Н48ЕН5О9-0,5Н2О) С, Н, N.
Получение продукта: этил-3-{(5'метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Уа1-Е-(4-Г-Рйе)Ь-((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат.
Суспензию этил-3-{(5 '-метилизоксазол-3'карбонил)-Е-Уа1-Е-(4-Г-Рйе)-Е-((№2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноата (0,263 г, 0,351 ммоль, 1 экв.), воду (2 капли) и ББО (0,104 г, 0,458 ммоль, 1,3 экв.) нагревают с обратным холодильником 9 ч и затем оставляют охлаждаться до комнатной температуры в течение 8 ч. Реакционную смесь разбавляют СН2С12 (200 мл) и промывают смесью насыщенного NаНСО3 и Ш №ЮН 2:1 (20 мл). Органическую фазу сушат над Мд8О4 и упаривают. Остаток очищают с помощью колоночной флэш хроматографии (градиентное элюирование 2^З% СН3ОН в СН2С12), получают этил-З-{(5'метилизоксазол-З'-карбонил)-Е-Уа1-Е-(4-Г-РЕе)Е-((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат (0,117 г, 56%) в виде твердого вещества белого цвета: т.пл.= 219-220°С; К£ = 0,23 (5% СН3ОН в СН2С12); ИК (см-1) 3401 шир, 3295, 1655 шир; 1Н ЯМР (сИС13) δ 0,94 (д, ЗН, Д = 6,8), 0,97 (д, ЗН, Д =
6,5), 1,29 (т, ЗН, Д = 7,2), 1,54-1,65 (м, 1Н), 1,72-
1,91 (м, 2Н), 2,07-2,26 (м, 2Н), 2,28-2,39 (м, 1Н),
2,49 (д, ЗН, Д = 0,9), З,01 (дд, 1Н, Д = 1З,8, 6,1),
З,12 (дд, 1Н, Д = 13,8, 6,4), З,26-З,З8 (м, 2Н), 4,18 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,З4 (дд, 1Н, I = 8,7, 7,2), 4,4З-
4,54 (м, 1Н), 4,90 (дт, 1Н, I = 9,0, 6,2), 5,76 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 1,6), 6,00 (с, 1Н), 6,42 (кв, 1Н, 1 = 0,9), 6,72 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 5,4), 6,86-6,94 (м, 2Н), 7,01 (д, 1Н, 1 = 9,0), 7,11-7,18 (м, 2Н), 7,21 (д, 1Н, 1 = 8,7), 7,76 (д, 1Н, 1 = 7,2). Аналитически определено (С^Н^Г^О-у) С, Н, Ν.
Пример 7. Получение соединения А-6: этил-З-[(5'-метилизоксазол-З'-карбонил)-Е-Уа1Е-(4-Г-РЕе)-Е-О1п]-Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: этил-З-{Вос-Е-(4-Г)-РЕе-Е-(Тг-О1п)}-Е-пропеноат.
Это соединение получают из этил-З-(ВосЕ-(Тг-О1п))-Е-пропеноата и Вос-Е-(4-Г)-РЕе-ОН, используя методику, подобную описанной выше (пример 2), для получения этил-З-(Вос-Е-РЕе-Е(Тг-О1п))-Е-пропеноата: ИК (см-1) ЗЗ28, 1707, 1506, 1168; 1Н ЯМР (СВС1З) δ 1,29 (т, ЗН, 1 =
7,2), 1,З7 (с, 9Н), 1,66-1,78 (м, 1Н), 1,88-1,98 (м, 1Н), 2,З2 (т, 2Н, 1 = 6,6), 2,85-2,92 (м, 1Н), 2,97З,04 (м, 1Н), 4,18 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,52 (м, 1Н),
4,96 (м, 1Н), 5,60 (д, 1Н, I = 15,6), 6,56 (д, 1Н, I =
8,1), 6,66 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 5,1), 6,80 (с, шир, 1Н),
6,92-6,98 (м, 2Н), 7,08-7,12 (м, 2Н), 7,17-7,23 (м, 6Н), 7,24-7,ЗЗ (м, 10Н). Аналитически определено (С42Н46™ЗО6) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: этил-З-{Вос-Е-Уа1-Е-(4-Г)-РЕе-Е-(Тг-О1п)}-Епропеноат.
Это соединение получают из этил-З-{ВосЕ-(4-Г)-РЕе-Е-(Тг-О1п)}-Е-пропеноата и Вос-ЕУа1-ОН по способу, описанному выше (пример 2), для получения этил-З-{Вос-Е-Ееи-Е-РЕе-Е(Тг-О1п)}-Е-пропеноата: ИК (см-1) ЗЗ19, 1657, 1511, 1172; 1Н ЯМР (СВС1З) δ 0,78 (д, ЗН, 1 =
6,9), 0,87 (д, ЗН, 1 = 6,9), 1,29 (т, ЗН, 1 = 7,2),
1,З7 (с, 9Н), 1,69-1,79 (м, 1Н), 1,93-2,06 (м, 2Н),
2,ЗЗ (т, 2Н, I = 7,2), 2,97-3,04 (м, 1Н), З,7З-З,77 (м, 1Н), 4,18 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,42-4,54 (м, 2Н),
4,80 (д, 1Н, I = 6,9), 5,61 (дд, 1Н, I = 15,6, 1,5),
6,44 (д, 1Н, I = 7,8), 6,69 (дд, 1Н, I = 15,9, 5,4),
6,71 (с, шир, 1Н), 6,92-6,98 (м, 2Н), 7,07-7,13 (м,
2Н), 7,18-7,З1 (м, 16Н), 8,02 (с, 1Н). Аналитически определено (Сл^Г^О-Д С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: этил-З-{(5'-метилизоксазол-З'-карбонил)-Е-Уа1Е-(4-Г)-РЕе-Е-(Тг-О1п)}-Е-пропеноат.
Это соединение получают из этил-З-{ВосЕ-Уа1-Е-(4-Г)-РЕе-Е-(Тг-О1п)}-Е-пропеноата и 5метилизоксазол-З-карбонилхлорида по способу, подобному описанному выше (пример 2), для получения этил-З-{ [5'-метилизоксазол-З'-карбонил)-Е-Ееи-Е-РЕе-Е-(Тг-О^п)}-Е-пропеноата: ИК (см-1) ЗЗ19, 1657, 1511, 1172; 1Н ЯМР (СВС1З) δ 0,84 (д, ЗН, 1 = 6,9), 0,89 (д, ЗН, 1 =
6,9), 1,З0 (т, ЗН, 1 = 7,2), 1,68-1,80 (м, 1Н), 1,952,06 (м, 1Н), 2,08-2,17 (м, 1Н), 2,З4 (т, 2Н, 1 =
7,2), 2,44 (с, ЗН), 2,87-2,94 (м, 1Н), З,01-З,08 (м, 1Н), 4,18 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,48-4,56 (м, 2Н), 5,68 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 1,8), 6,2З (с, 1Н), 6,З9 (д, 1Н, 1 = 7,8), 6,70 (дд, 1Н, I = 15,9, 5,4), 6,84-6,90 (м, ЗН), 7,04-7,08 (м, 4Н), 7,17-7,30 (м, 16Н); Аналитически определено (Сл^^О-у) С, Н, Ν.
Получение продукта: этил-З-{(5'метилизоксазол-З'-карбонил)-Е-Уа1-Е-(4-Г)-РЕеЕ-О1п}-Е-пропеноат.
С этил-З-{(5'-метилизоксазол-З'-карбонил)Е-Уа1-Е-(4-Г)-РЕе-Е-(Тг-О1п)}-Е-пропеноата удаляют защитные группы, используя методику, описанную выше (пример 2), для получения этил-З-{(5-метилизоксазол-З'-карбонил)-Е-ЕеиЕ-РЕе-Е-О1п}-Е-пропеноата: ИК (см-1) З284, 1652, 1542; 1Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 0,76 (д, ЗН, I =
6,9), 0,79 (д, ЗН, 1 = 6,9), 1,20 (т, ЗН, 1 = 7,2), 1,57-1,76 (м, 2Н), 1,96-2,06 (ЗН), 2,46 (с, ЗН),
2,75-2,83 (м, 1Н), 2,89-2,96 (м, 1Н), 4,09 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,13-4,25 (м, 1Н), 4,З5 (м, 1Н), 4,49-4,56 (м, 1Н), 5,5З (д, 1Н, I = 15,6), 6,57 (с, 1Н), 6,66 (дд, 1Н, I = 15,6, 5,4), 6,75 (с, шир, 1Н), 6,97-7,03 (м, 2Н), 7,17-7,24 (м, ЗН), 8,15 (д, 1Н, I = 7,8),
8,24 (д, 1Н, I = 8,7), 8,З2 (д, 1Н, I = 8,1). Аналитически определено (С28НЗ6Н5О7) С, Н, Ν.
Пример 8. Получение соединения А-7: этил-З-{(5'-метилизоксазол-З'-карбонил)-Е-а-(тбутил-О1у)-Е-(4-Г-РЕе)-Е-((8)-пиррол-А1а)}-Е-
Получение промежуточного соединения: Вос-Е-(4-Г-РЕе)-ОВп.
ЭСС (0,765 г, З,71 ммоль, 1,05 экв.), бензиловый спирт (0,З47 мл, З,З5 ммоль, 0,95 экв.) и ОМАР (0,022 г, 0,18 ммоль, 0,05 экв.) последовательно добавляют к раствору Вос-Е-(4-ГРЕе)-ОН (1,0 г, З,5З ммоль, 1 экв.) в СН2С12 (15 мл). После перемешивания в течение 18 ч осадок удаляют путем фильтрации и фильтрат разбавляют МТВЕ (75 мл), промывают 10% КН8О4 и насыщенным солевым раствором (10 мл каждого), сушат над №28О4 и упаривают. Очистка остатка с помощью колоночной флэшхроматографии (12% Е!ОАс в гексане) дает ВосЬ-(4-Е-РЬе)-ОВп (0,992 г, 79%) в виде твердого вещества белого цвета. Спектральные данные 1Н ЯМР совпадают с приведенными в литературе (см. 1аск§оп е! а1, 1. Огд. СЬет. 1992, уо1. 57, 3397).
Получение промежуточного соединения: Вос-Ь-а-(т-бутил-61у)-Ь-(4-Е-РЬе)-ОВп.
Вос-Ь-(4-Е-РЬе)-ОВп (2,0 г, 5,36 ммоль, 1 экв.) перемешивают 1 ч в смеси СН2С12 (20 мл) и ТЕА (10 мл), затем добавляют еще ТЕА (10 мл) и реакционный раствор перемешивают дополнительно еще час. Летучие вещества упаривают и остаток растворяют в ОМЕ (30 мл), добавляют Вос-Ь-а-(т-бутил-61у)-ОН (1,24 г, 5,36 ммоль, 1 экв.) и раствор охлаждают до 0°С.
Последовательно добавляют Ν,Νдиизопропилэтиламин (2,80 мл, 16,1 ммоль, 3 экв.) и НАТи (2,04 г, 5,37 ммоль, 1 экв.). После перемешивания в течение 20 мин реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры в течение 1 ч, затем разбавляют МТВЕ (500 мл) и промывают 5% КН8О4 (100 мл), насыщенным NаНСОз (50 мл) и насыщенным солевым раствором (50 мл). Органическую фазу сушат и упаривают. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (20% Е!ОАс в гексане), получая Вос-Ь-а-(т-бутил61у)-Ь-(4-Е-РЬе)-ОВп (2,04 г, 78%) в виде белой пены: ВГ = 0,49 (25% Е!ОАс в гексане); ИК (см-1) 3307, 1737, 1655 шир; 1Н ЯМР (СВС13) δ 0,94 (с, 9Н), 1,45 (с, 9Н), 3,04 (дд, 1Н, 1 = 14,2,
5,8), 3,11 (дд, 1Н, 1 = 14,2, 6,1), 3,79 (д, 1Н, 1 =
9,3), 4,88 (дт, 1Н, 1 = 7,8, 5,8), 5,08 (д, 1Н, 1 = 12,0), 5,16-5,23 (м, 1Н), 5,19 (д, 1Н, 1 = 12,0), 6,08 (д, 1Н, 1 = 7,8), 6,83-6,97 (м, 4Н), 7,28-7,40 (м, 5Н). Аналитически определено С27Н35Е№О5) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{Вос-Ь-а-(т-бутил-61у)-Ь-(4-Е-РЬе)-Ь(Щ-2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Епропеноат.
Раствор НС1 в 1,4-диоксан (4,0М, 8 мл) добавляют к раствору этил-3-{Вос-Ь-Щ-2,4диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноата (0,309 г, 0,648 ммоль, 1 экв.) в 1,4-диоксан (8 мл). После перемешивания в течение 1,5 ч летучие вещества упаривают, получая неочищенную соль амина в виде пены.
Палладий на угле (10%, 200 мг) добавляют к раствору Вос-Ь-а-(т-бутил-61у)-Ь-(4-Е-РЬе)ОВп (2,04 г, 4,19 ммоль) в Е!ОАс (200 мл). Атмосферу заменяют на водород через баллон. После перемешивания в течение 3 ч атмосферу заменяют на аргон и реакционную смесь фильтруют через фильтровальную бумагу ^Ьа!тап #3 и #5. Фильтрат упаривают, получая белую пену.
Эту пену объединяют с неочищенной солью амина (полученной выше) в ОМЕ (5 мл) и охлаждают до 0°С. Последовательно добавляют
Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,339 мл, 1,95 ммоль, 3 экв.) и НАТИ (0,247 г, 0,650 ммоль, 1 экв.). После перемешивания в течение 20 мин реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры в течение 1 ч, затем разбавляют МТВЕ (100 мл) и промывают 5% КН8О4, насыщенным NаНСО3 и насыщенным солевым раствором (15 мл каждого). Органическую фазу сушат и упаривают. Остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (60% Е!ОАс в гексане), получая этил-3-{Вос-Е-а-(т-бутил-61у)-Ь-(4-Е-РЬе)-Ь(Щ-2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Епропеноат (0,364 г, 74%) в виде белой пены: КГ = 0,34 (60% Е!ОАс в гексане); ИК (см-1) 3284, 1713, 1655; 1Н ЯМР (СПС13) δ 1,01 (с, 9Н), 1,28 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,46 (с, 9Н), 1,50-1,63 (м, 2Н), 1,68-1,81 (м, 1Н), 1,85-1,99 (м, 1Н), 2,09-2,20 (м, 1Н), 2,94 (дд, 1Н, 1= 13,5, 5,4), 3,15-3,26 (м, 3Н),
3,80 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,97 (д, 1Н, 1 = 9,3),
4,17 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,27-4,38 (м, 1Н), 4,29 (д, 1Н, 1 = 14,3), 4,42 (д, 1Н, 1 = 14,3), 4,84-4,92 (м, 1Н), 5,22 (д, 1Н, 1 = 9,6), 5,74 (дд, 1Н, 1 = 15,6,
1,6), 6,45-6,53 (м, 2Н), 6,69 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 5,4),
6,76-6,87 (м, 3Н), 7,10-7,28 (м, 3Н), 8,26 (д, 1Н, 1 = 5,9). Аналитически определено (С40Н55Е№О9) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-а-(тбутил-61у)-Ь-(4-Е-РЬе)-Ь-(Щ-2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат.
Это соединение получают из этил-3-{ВосЬ-а-(т-бутил-61у)-Ь-(4-Е-РЬе)-Ь-(Щ-2,4диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а]}-Е-пропеноата и изоксазол-5-карбонилхлорида, используя методику, описанную выше (пример 2), для получения этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'карбонил)-Ь-Ьеи-Ь-РЬе-Ь-(Тг-61п)}-Е-пропеноата; КГ = 0,60 (10% СН3ОН в СНС13); ИК (см-1) 3295, 1713, 1666, 1643; 1Н ЯМР (СОС13) δ 1,07 (с, 9Н), 1,29 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,51-1,64 (м, 2Н), 1,71-1,83 (м, 1Н), 1,96-2,07 (м, 1Н), 2,11-2,21 (м, 1Н), 2,49 (с, 3Н), 2,99 (дд, 1Н, 1 = 13,7, 5,9), 3,133,26 (м, 3Н), 3,80 (с, 3Н), 3,81 (с, 3Н), 4,18 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,23-4,48 (м, 4Н), 4,85-4,93 (м, 1Н),
5,76 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 1,4), 6,40-6,52 (м, 3Н), 6,71 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 5,3), 6,79-6,88 (м, 2Н), 6,92 (д, 1Н, 1 = 9,0), 7,09-7,22 (м, 3Н), 7,37 (д, 1Н, 1 = 9,0), 8,27 (д, 1Н, 1 = 6,2). Аналитически определено (С40Н50Е^О9-0,25Н2О) С, Н, Ν.
Получение продукта: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-а-(т-бутил-61у)-Ь-(4-ЕРЬе)-Ь-((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат.
Это соединение получают из этил-3-{(5'метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-а-(т-бутил-С1у)Ь-(4-Е-РЬе)-Ь-(Щ-2,4-диметоксибензил)-(8)пиррол-А1а)}-Е-пропеноата, используя методику, описанную выше (пример 6), для получения этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-Уа1Ь-(4-Е-РЬе)-Ь-((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноата: КГ = 0,30 (5% СН3ОН в СН2С12); ИК (см-1) 3307 шир, 1684, 1660; 1Н ЯМР (СПС13) δ 1,02 (с, 9Н),
1,29 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,51-1,61 (м, 1Н), 1,75-1,97 (м, 2Н), 2,14-2,25 (м, 1Н), 2,28-2,40 (м, 1Н), 2,50 (с, 3Н), 3,03 (д, 2Н, 1 = 6,5), 3,27-3,42 (м, 2Н),
4,18 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,36 (д, 1Н, 1 = 9,8), 4,524,63 (м, 1Н), 4,86-4,95 (м, 1Н), 5,71 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 1,4), 6,44 (с, 1Н), 6,57-6,64 (м, 1Н), 6,73 (дд, 1Н, 1 = 15,6, 5,3), 6,83-6,91 (м, 2Н), 7,09-7,15 (м, 2Н), 7,28-7,36 (м, 2Н), 7,59 (д, 1Н, 1 = 8,1). Аналитически определено (С31Н40РХ5О7) С, Н, N.
Пример 9. Получение соединения А-8: этил-3 -{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Уа1Е-(4-Е-Рйе)-Е-((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: трет-бутиловый эфир (2'8,48,48)-4-{2'-(4бензил-2-оксооксазолидин-3-карбонил)-5'гидроксипентил)-2,2-диметилоксазолидин-3карбоновой кислоты.
Раствор борантетрагидрофуранового комплекса (0,96 мл 1,0М раствора в ТГФ, 0,96 ммоль, 1 экв.) добавляют к 0°С раствору третбутилового эфира (2'8,48,48)-4-{2'-(4-бензил2-оксооксазолидин-3-карбонил)пент-4'-енил}-
2,2-диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты (полученного, как описано в примере 6, 0,455 г, 0,963 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (3 мл). После перемешивания в течение 30 мин, добавляют воду (3 мл) и тетрагидрат пербората натрия (0,148 г, 0,962 ммоль, 1 экв.) и баню со льдом удаляют. После дополнительного часа реакционную смесь разбавляют МТВЕ (125 мл), промывают водой (15 мл) и насыщенным солевым раствором (2x15 мл), сушат над МьУО.| и концентрируют. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (50% ЕЮ Ас в гексане), получая трет-бутиловый эфир (2'8,48,48)-4-{2'(4-бензил-2-оксооксазолидин-3-карбонил)-5'гидроксипентил }-2,2-диметилоксазолидин-3карбоновой кислоты (0,339 г, 72%) в виде бесцветного стекловидного вещества: ΚΤ = 0,41 (50% ЕЮАс в гексане); ИК (см-1) 3486, 1780, 1693; 1Н ЯМР (СЭС13) δ 1,42-1,85 (м, 21Н), 2,13-
2,24 (м, 1Н), 2,70 (дд, 1Н, 1 = 13,1, 10,0), 3,29-
3,38 (м, 1Н), 3,61-4,22 (м, 8Н), 4,63-4,76 (м, 1Н), 7,19-7,38 (м, 5Н). Аналитически определено (С26Нэ8^О7-0,5Н2О) С, Н, N.
Получение промежуточного соединения: трет-бутиловый эфир (18',3'8)-{2-(1'-(2,4диметоксибензил)-2'-оксопиперидин-3'-ил)-1гидроксиметилэтил}карбамовой кислоты.
Трет-бутиловый эфир (2'8,48,48)-4-{2'(4-бензил-2-оксооксазолидин-3-карбонил)-5'гидроксипентил }-2,2-диметилоксазолидин-3карбоновой кислоты (3,88 г, 7,92 ммоль, 1 экв.) растворяют в Εΐ3Ν (3,97 мл, 28,51 ммоль, 3,6 экв.). Смесь охлаждают до -12°С и добавляют раствор комплекса триоксид серы-пиридин (5,04 г, 31,67 ммоль, 4 экв.) в ДМСО (150 мл) с такой скоростью, чтобы поддерживать температуру в интервале 8-17°С. Раствор перемешивают при 23°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждают в бане с водой со льдом и гасят путем добавления Н2О (150 мл). Полученный раствор экстрагируют ЕЮАс (2хх150 мл). Объединенные органические слои промывают 5% лимонной кислотой (100 мл), насыщенным солевым раствором (100 мл), сушат над №28О4 и фильтруют. Растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток сушат под вакуумом, получая белую пену (3,53 г).
К раствору этого вещества (3,53 г, 7,22 ммоль, 1 экв.) в смеси ТГФ и ЕЮН 2:1 (120 мл) добавляют гидрохлорид 2,4-диметоксибензиламина (5,88 г, 28,89 ммоль, 4 экв.), №ОАс (2,37 г, 28,89 ммоль, 4 экв.) и NаВНзСN (0,908 г, 14,45 ммоль, 2 экв.). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи (20 ч) и затем разбавляют МТВЕ (200 мл). Органический слой промывают 10% КН8О4 (100 мл), насыщенным №НСО3 (100 мл), насыщенным солевым раствором (100 мл), сушат над Ж28О4 и концентрируют, получая бледно-желтую пену.
К раствору этой пены (3,34 г, 7,22 ммоль, 1 экв.) в СН3ОН (50 мл) добавляют птолуолсульфоновую кислоту (0,275 г, 1,44 ммоль, 0,2 экв.). Реакционную смесь перемешивают при 50°С в течение 2,5 ч и затем разбавляют СН2С12 (100 мл). Органический слой промывают насыщенным Ν;·ιΙ 1СО3 (100 мл), сушат над №28О4 и концентрируют. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (3% СН3ОН в СН2С12), получая трет-бутиловый эфир (18',3'8)-{2-(1'-(2,4-диметоксибензил)-2'оксопиперидин-3'-ил)-1 -гидроксиметилэтил } карбамовой кислоты в виде белой пены (1,33 г, 44% с трех стадий): 1Н ЯМР (СИС13): δ 1,44 (с, 9Н), 1,71-1,85 (м, 2Н), 1,92-1,98 (м, 2Н), 2,40-
2,48 (м, 1Н), 2,71-2,78 (м, 1Н), 3,19-3,32 (м, 2Н), 3,45-3,69 (м, 4Н), 4,11-4,20 (м, 2Н), 4,68 (м, 1Н), 5,47 (м, 1Н), 6,44 (с, 1Н), 7,20-7,33 (м, 2Н).
Получение продукта: этил-3-{(5'метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Уа1-Е-(4-Е-Рйе)Е-((8)-пипер-А1а)}-Е-пропеноат.
трет-Бутиловый эфир (18',3'8)-{2-(1'-(2,4диметоксибензил)-2'-оксопиперидин-3'-ил)-1гидроксиметилэтил}карбамовой кислоты превращают в продукт этил-3-{(5'-метилизоксазол3'-карбонил)-Е-Уа1-Е-(4-Е-Рйе)-Е-((8)-пиперА1а)}-Е-пропеноат по способу, аналогичному использующемуся для превращения третбутилового эфира (18,3'8)-{2-(1'-(2,4диметоксибензил)-2'-оксопиперидин-3'-ил]-1гидроксиметилэтил)карбамовой кислоты в продукт этил-3 -{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-ЕУа1-Е-(4-Е-Рйе)-Е-((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат, описанный выше в примере 6: ΚΓ = 0,24 (5% СН3ОН в СН2С12); ИК (см-1) 3284 шир, 1713,
1655, 1637 шир; 1Η ЯМР (СПС13): δ 0,94 (д, 3Η, I = 6,8), 0,98 (д, 3Η, I = 6,8), 1,29 (т, 3Η, I = 7,2),
1,43-1,56 (м, 2Н), 1,66-1,78 (м, 1Н), 1,83-2,05 (м, 4Н), 2,16-2,28 (м, 1Н), 2,49 (с, 3Η), 3,00 (дд, 1Н, I = 13,7, 6,2), 3,13 (дд, 1Н, I = 13,7, 5,9), 3,21-
3,37 (м, 2Н), 4,18 (кв, 2Η, I = 7,2), 4,36-4,45 (м, 2Н), 4,80-4,88 (м, 1Н), 5,76 (дд, 1Н, I = 15,6, 1,6),
5,96 (с, 1Н), 6,43 (с, 1Η), 6,70 (дд, 1Н, I = 15,6,
5,3), 6,81 (д, 1Н, I = 8,7), 6,86-6,98 (м, 2Η), 7,09-
7,19 (м, 2Η), 7,22-7,29 (м, 1Η), 8,07 (д, 1Η, I =
6,5).
Пример 10. Получение соединения В-1: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-ЬУа№(СОСН2)-Е-(4-Р-РЬе)-Ь-О1п}-Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: транс-6-метил-гепт-4-еноевая кислота.
Раствор изобутиральдегида (9,59 г, 133 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (50 мл) добавляют по каплям через дополнительную воронку к раствору винилмагний бромида (133 мл 1,0М раствора в ТГФ, 133 ммоль, 1,0 экв.) в ТГФ (300 мл) при 0°С. После завершения добавления реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при 0°С и затем добавляют этилмалонилхлорид (17,0 мл, 133 ммоль, 1,0 экв.). После перемешивания в течение 1 ч при 0°С реакционную смесь распределяют между насыщенным ΝΗ4Ε1 (150 мл) и смесью ЕЮАс и гексана 1:1 (2x200 мл). Объединенные органические слои сушат над Να28Ο4 и концентрируют. Остаток очищают путем фильтрации через силикагель (элюируя 5% ЕЮАс в гексане), получая промежуточный малоновый эфир (11,5 г, 40% выход). Это вещество не характеризуют, но объединяют (неразбавленное) с Τί(ΟΕΐ)4 (1,13 мл, 5,39 ммоль, 0,10 экв.) и нагревают до 190°С в течение 4 ч, затем охлаждают до 60°С, последовательно добавляют ΕΐΟΗ (50 мл) и 6,0М КОН (50 мл) и коричневую реакционную смесь нагревают с обратным холодильником 4 ч. После охлаждения до 23 °С, реакционную смесь фильтруют через стекловату и фильтрат распределяют между водой (150 мл) и Εΐ2Ο (2x150 мл). Водный слой затем подкисляют до рН 2 (определяют по индикаторной бумаге) концентрированной НС1 и экстрагируют смесью ЕЮАс и гексана 1:1 (2x150 мл). Объединенные органические слои сушат над Να28Ο4, концентрируют и остаток перегоняют при пониженном давлении, получая транс-6-метилгепт-4-еновую кислоту (3,58 г, 47%) в виде бесцветной жидкости: т. кип. 107-112°С (давление 1 Торр); ИК (см’1) 2960, 1711; 'ΐ I ЯМР (СПС13) δ 0,96 (д, 6Н, I = 6,5), 2,18-2,45 (м, 5Н), 5,31-5,50 (м, 2Н). Аналитически определено (^Ηί4Ο2) С, Н.
Получение промежуточного соединения: транс-6-метил-гепт-4-еноевой кислоты (2Кгидрокси-1К-метил-2-фенилэтил)метиламида.
Оксалилхлорид (2,25 мл, 25,8 ммоль, 1,05 экв.) добавляют к раствору транс-6-метил-гепт4-еноевой кислоты (3,50 г, 24,6 ммоль, 1 экв.) и Ν,Ν-диметилформамид (0,03 мл, 0,39 ммоль, 0,016 экв.) в бензоле (60 мл) при 23°С. Реакционную смесь перемешивают при 23°С в течение 2 ч и затем концентрируют при пониженном давлении. Полученное масло растворяют в ТГФ (20 мл) и добавляют через трубочку к раствору (1К,2К)-(-)-псевдоэфедрина (3,87 г, 23,4 ммоль, 1 экв.) и триэтиламина (3,92 мл, 28,1 ммоль, 1,2 экв.) в ТГФ (150 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 30 мин, затем распределяют между полунасыщенным \11.|С1 (150 мл) и ЕЮАс (2x150 мл). Объединенные органические слои сушат над Να28Ο4, концентрируют и остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (градиентное элюирование 40 >50% ЕЮАс в гексане), получая транс-6-метил-гепт-4-еноевой кислоты (2Кгидрокси-1К-метил-2-фенилэтил)метиламид (6,31 г, 93%) в виде вязкого масла: К£ = 0,35 (50% ЕЮАс в гексане); ИК (см’1) 3382, 1622; 'ΐ I ЯМР (СЭС13, смесь ротамеров) δ 0,96 (д, I =
6,8), 0,97 (д, I = 6,5), 1,11 (д, I = 6,9), 2,18-2,59 (м), 2,82 (с), 2,92 (с), 3,99-4,04 (м), 4,32-4,42 (м),
4,44-4,49 (м), 4,55-4,62 (м), 5,32-5,49 (м), 7,247,42 (м). Аналитически определено (^8Η27ΝΟ2) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: транс-6-метил-28-(4-фторбензил)-гепт-4-еноевой кислоты (2К-гидрокси-1К-метил-2-фенилэтил)метиламид.
н-Бутиллитий (32,5 мл 1,6М раствор в гексане, 52,0 ммоль, 3,1 экв.) добавляют к суспензии безводного хлорида лития (7,18 г, 169 ммоль, 10 экв.) и диизопропиламина (7,80 мл, 55,7 ммоль, 3,3 экв.) в ТГФ (250 мл) при -78°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при -78°С, держат при 0°С в течение 5 мин и затем снова охлаждают до -78°С. Через трубочку добавляют транс-6-метил-гепт-4-еноевой кислоты (2К-гидрокси-1К-метил-2-фенилэтил) метиламид (4,91 г, 17,0 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (50 мл) и полученный раствор перемешивают при -78°С в течение 1,75 ч, держат при 0°С в течение 20 мин, перемешивают при 23°С в течение 5 мин и затем снова охлаждают до 0°С. Добавляют раствор 4-фторбензилбромида (6,34 мл, 50,9 ммоль, 3 экв.) в ТГФ (15 мл) и реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 30 мин, затем ее распределяют между полунасыщенным ΧΙΙ.ιΟΊ (230 мл) и смесью ЕЮАс и гексана 1:1 (200 мл, 2x150 мл). Объединенные органические слои сушат над Να28Ο4 и концентрируют. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (градиентное элюирование 20>40% ЕЮАс в гексане), получая транс-661 метил-28-(4-фторбензил)гепт-4-еноевой кислоты (2К-гидрокси-1К-метил-2-фенилэтил)метиламид (6,33 г, 94%) в виде вязкого масла: КТ = 0,38 (40% ЕЮАс в гексане); ИК (см-1) 3378, 1614; 1Н ЯМР (СИС13, смесь ротамеров) δ 0,850,95 (м), 0,96 (д, 1 = 6,8), 2,10-2,32 (м), 2,34-2,46 (м), 2,58 (с), 2,67-2,79 (м), 2,82-2,94 (м), 3,00-
3,18 (м), 3,94 (шир), 4,37-4,52 (м), 5,24-5,42 (м),
5,44-5,56 (м), 6,89-7,01 (м), 7,08-7,14 (м), 7,197,38 (м). Аналитически определено (С25Н32Р^2) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: 58-(1К-бром-2-метилпропил)-3К-(4-фторбензил) дигидрофуран-2-он.
Ν-бромсукцинимид (2,93 г, 16,5 ммоль,
I, 05 экв.) добавляют маленькими порциями в течение 10 мин к раствору транс-6-метил-28-(4фторбензил)гепт-4-еноевой кислоты (2Кгидрокси-1К-метил-2-фенилэтил)метиламида (6,24 г, 15,7 ммоль, 1 экв.) и ледяную уксусную кислоту (4,49 мл, 78,4 ммоль, 5 экв.) в смеси ТГФ и Н2О 4:1 (165 мл) при 0°С. Полученный желтый раствор перемешивают в течение 15 мин при 0°С, затем нагревают до 23°С и затем нагревают с обратным холодильником в течение 45 мин. После охлаждения до 23 °С реакционную смесь распределяют между полунасыщенным №1НСО3 (200 мл) и смесью ЕЮАс и гексана 1:1 (2x200 мл, 100 мл). Объединенные органические слои сушат над №ь8О4 и концентрируют. Флэш-хроматографическая очистка остатка (градиентное элюирование 4^ 10% ЕЮАс в гексане) дает 58-(1К-бром-2-метилпропил)3К-(4-фторбензил)дигидрофуран-2-он (4,14 г, 80%) в виде бледно-желтого масла (содержащего приблизительно 5-10% неидентифицированных 1Н ЯМР примесей): КТ = 0,56 (25% ЕЮАс в гексане); ИК (см-1) 1772; 1Н ЯМР (СИС13), главный изомер) δ 0,94 (д, 3Н, 1 = 6,5), 1,00 (д, 3Н, 1 = 6,8), 2,05-2,35 (м, 3Н), 2,83 (дд, 1Н, 1 = 13,6,
8,4), 2,92-3,03 (м, 1Н), 3,11 (дд, 1Н, 1 = 13,6, 4,7),
3,90 (дд, 1Н, 1 = 9,0, 3,7), 4,33-4,40 (м, 1Н), 6,987,06 (м, 2Н), 7,14-7,20 (м, 2Н). Аналитически определено (С15Н18ВгЕО2) С, Н.
Получение промежуточного соединения: 58-(18-азидо-2-метилпропил)-3К-(4-фторбензил)дигидрофуран-2-он.
Суспензию азида натрия (1,90 г, 29,2 ммоль, 2,5 экв.) и 58-(1К-бром-2-метилпропил)3К-(4-фторбензил)дигидрофуран-2-она (3,85 г,
II, 7 ммоль, 1 экв.) в Ν,Ν-диметилформамиде (40 мл) нагревают при 50°С в течение 67 ч. Реакционную смесь охлаждают до 23°С и распределяют между полунасыщенным №1С1 (200 мл) и смесью ЕЮАс, гексана и ацетона 1:1:1 (2x200 мл, 100 мл). Объединенные органические слои сушат над №ь8О+ концентрируют и остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (градиентное элюирование 9^ 17% ЕЮАс в гексане), получая 58-(18-азидо2-метилпропил)-3К-(4-фторбензил)дигидро фуран-2-он (2,10 г, 62%) в виде твердого вещества белого цвета (содержащего приблизительно 5-10% неидентифицированных 1Н ЯМР примесей): т.пл. 91-96°С; КТ = 0,44 (25% ЕЮАс в гексане); ИК (см-1) 2097, 1772; 1Н ЯМР (СИС13, основной изомер) δ 0,99 (д, 3Н, 1 = 6,5), 1,02 (д, 3Н, 1 = 6,8), 1,95-2,20 (м, 3Н), 2,78-2,88 (м, 1Н),
2,94 (дд, 1Н, 1 = 7,0, 4,2), 3,03-3,17 (м, 2Н), 4,374,43 (м, 1Н), 6,97-7,09 (м, 2Н), 7,14-7,21 (м, 2Н).
Получение промежуточного соединения: трет-бутиловый эфир {2-метил-18-(4К-(4фторбензил)-5-оксотетрагидрофуран-28-ил) пропил}карбамовой кислоты.
Суспензию 58-(18-азидо-2-метилпропил)3К-(4-фторбензил)дигидрофуран-2-он (2,02 г, 6,93 ммоль, 1 экв.), ди-трет-бутилдикарбонат (2,12 г, 9,71 ммоль, 1,4 экв.) и Рб/С (10%, 0,20 г) в СН3ОН (100 мл) перемешивают в атмосфере водорода (баллон) в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтруют под вакуумом через бумагу \νΐι;·ιΙιη;·ιη #3 и концентрируют. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (15% ЕЮАс в гексане), получая третбутиловый эфир {2-метил-18-(4К-(4-фторбензил)-5-оксотетрагидрофуран-28-ил)пропил} карбамовой кислоты (1,58 г, 62%) в виде белой пены: КТ = 0,80 (5% МеОН в СН2С12); ИК (см-1) 3331, 1766, 1702; 1Н ЯМР (СИС13) δ 0,93 (д, 3Н, 1 = 6,8), 0,95 (д, 3Н, 1 = 6,5), 1,41 (с, 9Н), 1,711,83 (м, 1Н), 1,95-2,06 (м, 1Н), 2,16-2,27 (м, 1Н),
2,80 (дд, 1Н, 1 = 13,5, 8,6), 2,88-2,99 (м, 1Н), 3,09 (дд, 1Н, 1 = 13,5, 4,4), 3,32-3,40 (м, 1Н), 4,42-4,48 (м, 2Н), 6,95-7,03 (м, 2Н), 7,11-7,18 (м, 2Н). Аналитически определено (С2οН28ΕNО4) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{Вос-Ь-Уа1Т(СОСН2)-Ь-(4-Е-Рйе)-Ь-(Тг61п)}-Е-пропеноат.
Гидроксид лития (9,62 мл 1М водного раствора, 9,62 ммоль, 5 экв.) добавляют к раствору трет-бутилового эфира {2-метил-18-(4К-(4фторбензил)-5-оксотетрагидрофуран-28-ил) пропил}карбамовой кислоты (0,703 г, 1,92 ммоль, 1 экв.) в ΌΜΕ (25 мл) при 23 °С. Полученную суспензию перемешивают при 23°С в течение 30 мин и затем распределяют между 10% КН8О4 (50 мл) и СН2С12 (3x100 мл). Объединенные органические слои сушат над №ь8О4. концентрируют и остаток растворяют в СН2С12 (30 мл). Последовательно добавляют порошковидные молекулярные сита 4А (0,70 г), 4метилморфолин Ν-оксид (0,451 г, 3,85 ммоль, 2 экв.) и тетрапропиламмоний перрутенат (0,068 г, 0,19 ммоль, 0,10 экв.). Полученную темную реакционную смесь перемешивают в течение 1,33 ч при 23°С, затем фильтруют под вакуумом через фильтровальную бумагу ΧνΐιηΙιηηη #3 и затем через \νΐι;·ιΙιη;·ιη #5. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении, получая темный остаток, который растворяют в СН2С12 (30 мл). Неочищенный этил-3-(Н2№Ь-(Тг-61п))-Епропеноат-НС1 (2,30 ммоль, 1,2 экв., получен63 ный, как описано в примере 2, для получения этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-ЬеиЕ-РЬе-Ь-О1п}-Е-пропеноат), 4-метилморфолин (0,846 мл, 7,69 ммоль, 4 экв.), ΗΟΒΐ (0,390 г,
2,89 ммоль, 1,5 экв.) и Е1)С (0,553 г, 2,88 ммоль, 1,5 экв.) добавляют последовательно, реакционную смесь перемешивают в течение 19 ч при 23° С и затем распределяют между насыщенным солевым раствором (100 мл) и СН2С12 (3x100 мл). Объединенные органические слои сушат над \а38О.| и концентрируют. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (градиентное элюирование 35^40% ЕЮАс в гексане), получая этил-3-{Вос-Ь-Уа1Т(СОСН2)Е-(4-Г-РЬе)-Ь-(Тг-О1п)}-Е-пропеноат (0,820 г, 53%) в виде рыжевато-коричневой пены: Κί = 0,50 (50% ЕЮАс в гексане); ИК (см-1) 3307, 1708, 1666; 1Н ЯМР (СПС13) δ 0,67 (д, 3Н, I =
6,8), 0,92 (д, 3Н, I = 6,8), 1,28 (т, 3Н, I = 7,2),
1,40 (с, 9Н), 1,53-1,67 (м, 1Н), 1,91-2,04 (м, 2Н),
2,32-2,41 (м, 2Н), 2,46-2,55 (м, 1Н), 2,63 (дд, 1Н, I = 12,1, 5,9), 2,69-2,80 (м, 1Н), 2,83 (дд, 1Н, I =
12,1, 8,2), 3,03 (дд, 1Н, I = 17,7, 10,0), 4,05-4,11 (м, 1Н), 4,17 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,40-4,50 (м, 1Н),
4,84 (д, 1Н, I = 8,4), 5,38 (д, 1Н, I = 15,7), 6,01 (д, 1Н, I = 8,4), 6,60 (дд, 1Н, I = 15,7, 5,0), 6,92-6,99 (м, 2Н), 7,03-7,12 (м, 3Н), 7,17-7,30 (м, 15Н). Аналитически определено (С48Н56№3О7) С, Н, Ν.
Получение продукта: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-Уа1Т(СОСН2)-Е-(4-ГРЬе)-Ь-О1п}-Е-пропеноат.
Этил-3-{Вос-Ь-Уа1Т(СОСН2)-Ь-(4-Г-РЬе)Ь-(Тг-О1п)}-Е-пропеноат превращают в продукт этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-ЬУа1Т(СОСН2)-Е-(4-Г-РЬе)-Ь-О1п}-Е-пропеноат по способу, аналогичному описанному выше в примере 2, для превращения этил-3-{Вос-Ь-ЬеиЕ-РЬе-Ь-(Тг-О1п)}-Е-пропеноата в продукт этил3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Ьеи-ЬРЬе-Ь-О1п}-Е-пропеноат: т.пл .= 220°С (разл.); Κί = 0,35 (10% СН3ОН в СН2С12); ИК (см-1) 3277, 1715, 1643; 1Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 0,81 (д, 3Н, I =
6,2), 0,87 (д, 3Н, I = 6,9), 1,21 (т, 3Н, I = 6,5), 1,59-1,67 (м, 2Η), 2,03 (с, шир, 2Η), 2,21-2,24 (м, 1Н), 2,46 (с, 3Н), 2,57-2,68 (м, 3Н), 2,80-2,95 (м, 2Н), 4,09 (кв, 2Н, I = 6,5), 4,30-4,34 (м, 2Н), 5,41 (д, 1Н, I = 15,5), 6,55 (с, 1Н), 6,61 (дд, 1Н, I =
15,5, 5,5), 6,73 (с, 1Н), 6,99-7,16 (м, 5Н), 8,01 (д, 1Н, I = 7,8), 8,69 (д, 1Н, I = 8,7). Аналитически определено (С29Н37Г^О7) С, Н, Ν.
Пример 11. Получение соединения А-10: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-ЬеиNСΗ3-^-Рке-^-Ο1η}-Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: Вос-Ь-Ьеи^СН3-Ь-РЬе-ОСН3.
NСΗ3-^-Рке-ΟСΗ3·ΗС1 (1,4 г) растворяют в СН2С12 (50 мл) и выливают в смесь водного раствора (водн.) 1н. \аОН (7 мл) и насыщенного водного раствора ХаНСО3 (25 мл). После смешивания органическую фазу отделяют и водную фазу промывают СН2С12 (3x50 мл). Объединенные органические фазы сушат над Ха28О4 и упаривают, получая свободный амин в виде прозрачного бесцветного масла (1,14 г, 5,90 ммоль). Раствор этого амина и (1Рг)2Х^ (1,13 мл, 6,49 ммоль) в ОМЕ (10 мл) добавляют по каплям к 0°С раствору Вос-Ь-Ьеи-ОН (1,50 г,
6,49 ммоль) и ΗΟΒΐ (0,877 г, 6,49 ммоль) в ΏΜΓ (10 мл). Добавляют ОСС (1,47 г, 7,12 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч и затем перемешивают при 23°С в течение 48 ч. Смесь фильтруют для удаления осадка (ρρΐ) и фильтрат упаривают. Остаток растворяют в СН2С12 (200 мл), промывают насыщенным водным раствором \а11СО3 (40 мл), сушат над Ха28О4 и упаривают. Остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (25% ЕЮАс в гексане), получая Вос-Е-Ьеи-ХСН3-Е-РЬе-ОСН3 в виде твердого вещества белого цвета (2,04 г, 85%): т. пл. = 126-127°С; ИК (см-1) 3401, 3319, 1743, 1708, 1649; 1Н ЯМР (СЭС13) (основной изомер) δ 0,92 (д, 3Н, I = 6,8), 0,95 (д, 3Н, I = 6,5), 1,32-1,48 (м, 2Н), 1,41 (с, 9Н), 1,61-1,77 (м, 1Н), 2,90 (с, 3Н), 3,04 (дд, 1Н, I = 14,5, 10,5), 3,37 (дд, 1Н, I = 14,5,
5,5), 3,72 (с, 3Н), 4,48-4,57 (м, 1Н), 4,98-5,04 (м, 1Н), 5,20 (дд, 1Н, I = 10,5, 5,5), 7,16-7,32 (м, 5Н). Аналитически определено (С22Н34Х2О5) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: Вос-Ь-Ьеи-ХСНз-Ь-РЬе-ОН.
Вос-Ь-Ьеи-ХСНз-Ь-РЬе-ОСНз (0,625 г, 1,54 ммоль) растворяют в СН3ОН (20 мл) и охлаждают до 0°С. Добавляют по каплям водный раствор ХаОН (6,15 мл 2н. раствора, 12,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 3 ч при 23°С и затем выливают в 10% водный раствор КН8О4 (150 мл). Эту смесь экстрагируют СН2С12 (3x100 мл) и объединенные органические фазы сушат над Ха28О4 и упаривают, получая Вос-Ь-Ееи-ХСН3-Е-РИе-ОН в виде белой пены (0,617 г, колич. выход), который используют без очистки.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{ Вос-Ь-Ьеи-Ν СН3-Е-Рке-Ь-(Тг-О1п) }-Епропеноат.
Это промежуточное соединение получают из Вос-1 ,-1 .ен-\С113-1 ,-Рке-О11 и этил-3-{Η2N-^(Тг-О1п)}-Е-пропеноата-НС1 (полученного как описано в примере 2) по способу, аналогичному описанному выше, для получения этил-3-{ВосЕ-Ееи-Е-РЬе-Е-(Тг-О1п)}-Е-пропеноата в примере 2: ИК (см-1) 3295, 1713, 1672, 1649; 1Н ЯМР (СЭС13) (смесь изомеров) δ 0,65 (д, I = 6,2), 0,66 (д, I = 6,5), 0,84 (д, I = 6,5), 0,88 (д, I = 6,5), 1,0265
1,22 (м), 1,23-1,38 (м), 1,33 (с), 1,41 (с), 1,55-1,82 (м), 1,89-2,07 (м), 2,23-2,30 (м), 2,90 (с), 2,94 (с), 3,01 (дд, I = 14,6, 10,9), 3,03-3,13 (м), 3,26-3,37 (м), 3,27 (дд, I = 14,6, 3,4), 3,42-3,54 (м), 4,00-
4,22 (м), 4,37-4,73 (м), 4,82-4,89 (м), 5,63-5,70 (м), 5,95 (дд, I = 15,9, 1,2), 6,23-6,28 (м), 6,66-
6,75 (м), 6,79-6,89 (м), 7,09-7,34 (м), 8,14 (д, I = 8,7). Аналитически определено (С49Н60Н4О7) С,
H, Ν.
Получение продукта: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Ееи-КСН3-Е-Рйе-ЬО1п }-Е-пропеноата.
Этил-3-{Вос-Е-Ееи-КСН3-Е-Рйе-Ь-(ТгО1п)}-Е-пропеноат превращают в продукт этил3-{[5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-ЬеиКСН3-Е-Рйе-Е-О1п}-Е-пропеноат по способу, аналогичному описанному выше в примере 2, для превращения этил-3-{Вос-Е-Ееи-Е-Рйе-Ь(Тг-О1п)}-Е-пропеноата в продукт этил-3-{(5'метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Ееи-Е-Рйе-ЕО1п}-Е-пропеноат: КГ = 0,23 (5% СН3ОН в СН2С12); ИК (см-1) 3295, 1713, 1666, 1637; 1Н ЯМР (СЭС13) (смесь изомеров) δ 0,65 (д, I = 6,5), 0,71 (д, I = 6,5), 0,93 (д, I = 6,5), 0,94 (д, I = 6,5),
I, 30 (т, I = 7,2), 1,24-1,73 (м), 1,81-2,22 (м), 2,45 (с), 2,48 (с), 2,86-2,93 (м), 2,96 (с), 2,97 (с), 3,03-
3,14 (м), 3,21-3,31 (м), 3,48 (дд, I = 14,0, 5,9),
4,19 (кв, I = 7,2), 4,20 (кв, I = 7,2), 4,38-4,45 (м), 4,52-4,70 (м), 4,74-4,81 (м), 5,62-5,67 (м), 5,73-
5,79 (м), 5,81 (дд, I = 15,6, 1,6), 5,99 (дд, I = 15,6,
1,6), 6,03-6,09 (м), 6,35 (с), 6,39 (с), 6,40-6,45 (м),
6,77-6,94 (м), 7,42 (д, I = 7,2), 8,13 (д, I = 7,8).
Пример 12. Получение соединения С-1: этил-3-{(5 '-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-Уа1О-Е-(4-Р-Рйе)-Ь-О1п } -Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: аллил (8)-1-гидрокси-3-(4-фторфенил)пропионат.
В колбе, закрытой пробкой с термометром и обратным холодильником, растворяют метил (8)-1-гидрокси-3-(4-фторфенил)пропионат (полученный из Ь-Н2К-(4-Р-Рйе)-ОСН3 по способу, описанному в НоГГтап е! а1., Тейайебгоп 1992, уо1. 48, 3007), (0,99 г, 5,0 ммоль) в аллильном спирте (50 мл). Добавляют тетраизопропоксид титана (1,53 мл, 5,0 ммоль) и реакционную смесь доводят до 90°С в течение 3,5 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и выливают в 250 мл раствора ЕΐОΑс/насыщенный КН4С1 1:1. Органическую фазу отделяют и промывают водой (100 мл), насыщенным солевым раствором (100 мл), сушат (М§8О4) и растворитель удаляют. Остаток подвергают колоночной флэш-хроматографии, элюируя градиентом 5-10% ЕΐОΑс/гексан, полу чая 0,77 г (68%) аллил (8)-1-гидрокси-3-(4фторфенил)пропионат в виде прозрачной жидкости: КГ = 0,21 (15% ЕΐОΑс/гексан); ИК (неразбавленный) 3470 (широкий), 1734, 1510, 1221 см-1; 1Н ЯМР (ДМСО-06) δ 1,24-1,27 (м, 1Н),
2,92-2,99 (м, 1Н), 3,09-3,15 (м, 1Н), 4,43-4,47 (м, 1Н), 4,65 (д, 2Н, I = 5,9), 5,28-5,37 (м, 2Н), 5,86-
5,95 (м, 1Н), 6,95-7,01 (м, 2Н), 7,16-7,21 (м, 2Н).
Получение промежуточного соединения: Вос-Е-Уа1-О-Ь-(4-Р-Рйе)-ОСН2СН=СН2.
Аллил (8)-1-гидрокси-3-(4-фторфенил) пропионат (0,070 г, 0,31 ммоль) растворяют в СН2С12 (20 мл). Добавляют Вос-Ь-Уа1-ОН (0,068 г, 0,31 ммоль), затем ОМ ΑΗ (0,004 г, 0,03 ммоль) и ОСС (0,067 г, 0,33 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи и растворитель удаляют в вакууме. Остаток подвергают колоночной флэш-хроматографии, элюируя градиентом 35% ЕΐОΑс/гексан. Продукт Вос-Ь-Уа1-О-Ь-(4-РРЬе)-ОСН2СН=СН2 получают в виде 0,12 г (90%) прозрачного масла: КГ = 0,18 (10% ЕΐОΑс/гексан); ИК (неразбавленный) 1752,
1717, 1510 см-1; 1Н ЯМР (ДМСО-бД δ 0,80-0,85 (м, 6Н), 1,36 (с, 9Н), 1,97-2,04 (м, 1Н), 3,07-3,15 (м, 2Н), 3,89-3,94 (м, 1Н), 4,51-4,55 (м, 2Н), 5,17-
5,30 (м, 3Н), 5,75-5,84 (м, 1Н), 7,06-7,17 (м, 3Н), 7,27-7,32 (м, 2Н). Аналитически определено (С22Н30Ш6Р) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{Вос-Е-Уа1-О-Е-(4-Р-Рйе)-Ь-(Тг-(О1п)}Е-пропеноат.
Вос-Е-Уа1-О-Ь-(4-Р-Рйе)-ОСН2СН=СН2 (0,65 г, 1,52 ммоль) растворяют в ТГФ (15 мл). Добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (0,035 г, 0,03 ммоль) и реакционную смесь перемешивают 5 мин при 23°С. Добавляют по каплям морфолин (0,16 мл, 1,83 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляют в вакууме и остаток помещают в 50 мл смеси 4:1 гексан/Е12О. Продукт экстрагируют в нас. раствор КаНСО3 (50 мл) и органическую фазу отбрасывают. Водную фазу подкисляют до рН = 1-2 твердым КН8О4 и продукт повторно экстрагируют в ЕΐОΑс (50 мл). Органическую фазу промывают насыщенным солевым раствором (50 мл), сушат (М§8О4) и концентрируют, получая 0,50 г (86%) свободной кислоты в виде прозрачного масла. Это вещество растворяют в □МП’ (6 мл). Добавляют диизопропилэтиламин (0,43 мл, 2,50 ммоль), затем этил-3-{Н2К-Ь-(ТгО1п)}-Е-пропеноат-НС1 (полученный, как описано выше в примере 2, 0,55 г, 1,25 ммоль). Реакционную смесь охлаждают до 0°С, добавляют НΑΤυ (0,48 г, 1,25 ммоль) и реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры. ОМ1’ удаляют в вакууме. Остаток растворяют в ЕΐОΑс (30 мл) и органическую фазу промывают последовательно 10% раствором НС1 (25 мл), насыщенным раствором КаНСО3 (25 мл), Н2О (25 мл) и насыщенным солевым раствором (25 мл). Органический слой сушат (Мд804), фильтруют, концентрируют и остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (0^1,0% Ме0Н/СН2С12), получая 0,40 г (39%) этил-3-{Вос-Р-Уа1-0-Ь-(4-РРЕе)-Р-(Тг-(С1п)}-Е-пропеноата в виде белого аморфного твердого вещества: КТ = 0,25 (3% МеОН/СНС13); ИК (КВг) 1691, 1512, 1159 см-1; 1Н ЯМР (ДМСО-д6) δ 0,78-0,83 (м, 6Н), 1,20 (т, 3Н, I = 7,0), 1,35 (с, 9Н), 1,58-1,66 (м, 2Н), 1,962,02 (м, 1Н), 2,19-2,33 (м, 2Н), 2,99-3,02 (м, 2Н), 3,82-3,87 (м, 1Н), 4,09 (кв, 2Н, I = 7,0), 4,33-4,37 (м, 1Н), 5,03-5,08 (м, 1Н), 5,60 (д, 1Н, I = 15,8),
6,67 (дд, 1Н, I = 15,8, 5,5), 7,02-7,08 (м, 2Н),
7,14-7,28 (м, 18Н), 8,12 (д, 1Н, I = 8,1), 8,59 (с, 1Н). Аналитически определено (С47Н54^08Е) С, Н, Ν.
Получение продукта: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Р-Уа1-0-Р-(4-Р-РЕе)-РС1п}-Е-пропеноата.
Этил-3-{Вос-Е-Уа1-0-Е-(4-Е-РЪе)-Ь-(Тг(С1п)}-Е-пропеноат превращают в продукт этил3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Р-Уа1-0-Р(4-Р-РРе)-Ь-С1п}-Е-пропеноат по способу, аналогичному описанному выше в примере 2, для превращения этил-3-{Вос-Е-Ееи-Е-РЪе-Ь-(ТгС1п)}-Е-пропеноата в продукт этил-3-{(5'метилизоксазол-3'-карбонил)-Р-Реи-Р-РЕе-РС1п}-Е-пропеноат: КТ = 0,05 (3% Ме0Н/СНС13); ИК (КВг) 1746, 1719, 1661, 1549 см-1; 1Н ЯМР (ДМСОЧ) δ 0,87 (д, 3Н, I = 6,6), 0,92 (д, 3Н, I =
6.6) , 1,20 (т, 3Н, I = 7,0), 1,61-1,74 (м, 2Н), 1,962,01 (м, 2Н), 2,15-2,22 (м, 1Н), 2,46 (с, 3Н), 3,003,03 (м, 2Н), 4,10 (кв, 2Н, I = 7,0), 4,27-4,32 (м, 1Н), 4,33-4,38 (м, 1Н), 5,06-5,11 (м, 1Н), 5,63 (д, 1Н, I = 15,6), 6,54 (с, 1Н), 6,68 (дд, 1Н, I = 15,6,
5,5), 6,78 (с, шир, 1Н), 6,95-7,00 (м, 2Н), 7,20-
7,24 (м, 3Н), 8,06 (д, 1Н, I = 8,1), 8,87 (д, 1Н, I =
7.7) . Аналитически определено (С28Н35^08Р) С, Н, Ν.
Пример 13. Получение соединения А-11: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил-Р-(2нафт)^СН3-Р-(4-Р-РЕе)-Р-С1п}-Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{Вос^СН3-Е-(4-Е-Рйе)-Ь-(Тг-С1п)}-Епропеноат.
Вос-(4-Р-РЕе)-0Н (4,46 г, 15,75 ммоль, 1 экв.) и СН31 (7,84 мл, 126 ммоль, 8 экв.) растворяют в сухом ТГФ (100 мл) и охлаждают до 0°С. К этому раствору добавляют \а11 (1,89 г, 47,25 ммоль, 3 экв.) при энергичном перемешивании. После перемешивания при 23 °С в течение 24 ч к смеси осторожно добавляют ЕЮАс (3 мл) и Н20 (3 мл) и полученную суспензию упаривают досуха. После растворения в Н2О (100 мл) реакционную смесь промывают Е120 (2x100 мл). Водный слой подкисляют до рН = 3 раствором 10% лимонной кислоты и затем экстрагируют ЕЮАс (2x100 мл). Объединенные ЕЮАс экстракты промывают последовательно полунасыщенным №НС03 (150 мл), 5% Ж28203 (150 мл) и Н20 (150 мл), сушат над Ж2804 и концентрируют, получая Вос-\С113-(4-Р-Р11е')-011 в виде бледно-желтой пены (4,37 г, 80%), которую используют без дополнительной очистки: 1Н ЯМР (СОС13, смесь изомеров) δ 1,35 (с), 1,40 (с), 2,69 (с), 2,75 (с), 2,96-3,13 (м), 3,23-3,33 (м), 4,54-4,58 (м), 4,76-4,81 (м), 6,96-7,01 (м), 7,15-7,17 (м).
Раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0М, 15 мл) добавляют к раствору этил-3-(Вос-Ь-(Тг-С1п))Е-пропеноата (полученного, как описано выше в примере 2, 3,57 г, 6,73 ммоль, 1 экв.) в том же растворителе (15 мл) при 23°С. Через 2 ч летучие вещества удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в СН2С12 (50 мл) и последовательно добавляют Вос-\С113-(4-Р-Р11е')ОН (полученный, как в предшествующем параграфе, 2,0 г, 6,73 ммоль, 1,0 экв.), Н0В1 (1,23 г, 9,09 ммоль, 1,5 экв.), 4-метилморфолин (2,0 мл,
18,19 ммоль, 3 экв.), и ЕЭС (1,74 г, 9,09 ммоль, 1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивают при 23°С в течение ночи и затем распределяют между водой (100 мл) и СН2С12 (2x100 мл). Объединенные органические слои сушат над \а280.|. концентрируют и остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (30% ЕЮАс в гексане), получая этил-3-{ВосНСН3-Р-(4-Р-РЕе)-Р-(Тг-С1п)}-Е-пропеноат (4,07 г, 84%) в виде белой пены: ИК (см-1) 1666, 1510, 1167; 1Н ЯМР (СОС13, смесь изомеров) δ 1,29 (т, I = 7,2), 1,37 (с), 1,65-1,75 (м), 1,95-2,06 (м), 2,29-2,33 (м), 2,66 (с), 2,91-2,99 (м), 3,22-3,29 (м), 4,18 (кв, I = 7,2), 4,52-4,58 (м), 5,68 (д, I =
15,9), 6,45 (д, I = 8,4), 6,74 (дд, I = 15,6, 5,4), 6,91-6,99 (м), 7,11-7,33 (м). Аналитически определено (С43Н48Р\306) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{Вос-^-(2-нафт)-NСН3-^-(4-Р-РЪе)-^-(Т^С1п)}-Е-пропеноат.
Раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0 М, 3 мл) добавляют к раствору этил^-фос^СНз-Р-^-РРЕе)-Р-(Тг-С1п)}-Е-пропеноата (0,388 г, 0,54 ммоль, 1 экв.) в том же растворителе (3 мл) при 23°С. Через 2 ч летучие вещества удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в ЭМР (10 мл), охлаждают при 0°С и последовательно добавляют 1ЛРА (0,188 мл, 1,08 ммоль, 2 экв.), Вос-Ь-(2-нафт)-ОН (0,170 г, 0,54 ммоль, 1,0 экв.) и НАТи (0,205 г, 0,54 ммоль, 1 экв.). Реакционную смесь перемешивают при 23° С в течение 1 ч. Летучие вещества удаляют при пониженном давлении, полученный остаток помещают в ЕЮАс (50 мл) и промывают 0,5н. НС1 (50 мл), насыщенным №НСО3 (50 мл) и насыщенным солевым раствором (50 мл). Органиче69 ский слой сушат над №28О4, концентрируют и остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (40% ЕЮАс в гексане), получая этил-3-{Вос-Ь-(2-нафт)^СН3-Ь-(4-Г-Рйе)-Ь-(ТгС1п)}-Е-пропеноат (0,437 г, 88%) в виде белой пены: ИК (см-1) 1656, 1509, 1162; 1Н ЯМР (СОС13, смесь изомеров) δ 0,88 (т, 3 = 7,2), 1,27 (с), 1,30 (с), 1,48-1,58 (м), 1,64-1,67 (м), 1,97-2,11 (м), 2,23-2,28 (м), 2,42-2,50 (м), 2,62-2,69 (м),
2,80 (с), 2,90 (с), 3,00-3,07 (м), 3,15-3,20 (м), 3,25-3,32 (м), 4,18 (кв, Д = 7,2), 4,42-4,46 (м), 4,53-4,56 (м), 4,61-4,66 (м), 4,72-4,82 (м), 5,945,00 (м), 5,63 (д, Д = 15,6), 6,12 (д, Д = 15,6), 6,60 (дд, Д = 15,6, 5,4), 6,75-6,89 (м), 6,70-7,08 (м), 7,19-7,30 (м), 7,41-7,50 (м), 7,70-7,82 (м), 8,80 (д, 3 = 8,4). Аналитически определено
С, Н, Ν.
Получение продукта: этил-3-{(5'-метилизоксазо.л-3'-карбо11и.:1)-1,-(2-11афт)-\СН3-1.-(4-1;Рйе)-Е-С1п}-Е-пропеноат.
Этил-3-{ВОС-Е-(2-нафт)^СН3-Ь-(4-ГРйе)-Е-(Тг-С1п)}-Е-пропеноат превращают в продукт этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-(2-нафт)^СН3-Е-(4-Г-Рйе)-Ь-С1п}-Епропеноат по способу, аналогичному описанному выше в примере 2, превращения этил-3{Вос-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-(Тг-С1п)}-Е-пропеноата в продукт этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-С1п}-Е-пропеноат. ИК (см-1) 3296, 1654, 1510; 1Н ЯМР (ДМСО-б6, смесь изомеров) δ 1,17-1,24 (м), 1,62-1,78 (м), 2,04-2,15 (м), 2,38 (с), 2,42 (с), 2,71-2,79 (м), 2,84 (с), 2,87-
2,92 (м), 3,03 (с), 3,15 (д, > 7,5), 3,98-4,06 (м), 4,08-4,12 (м), 4,38-4,42 (м), 4,94 (м), 5,03-5,07 (м), 5,09-5,18 (м), 5,66-5,82 (м), 6,42 (с), 6,43 (с),
6,66-6,81 (м), 6,88-6,94 (м), 7,01-7,06 (м), 7,137,17 (м), 7,24-7,34 (м), 7,43-7,46 (м), 7,56 (с), 7,76-7,84 (м), 8,08 (д, Д = 7,8), 8,60 (д, Д = 8,4), 9,01 (д, 3 = 7,2). Аналитически определено (С37Н4о^5ОтО,75Н2О) С, Н, Ν.
Пример 14. Получение соединения А-9: этил-3-{(5'-метилнзоксазол-3'-карбонил)-Ь-Н18№Н3-Ь-(4-Г-РЬе>Ь-О1п}-Е-пропеноат.
Э'ги.з-3-!Вос-\СН3-1.-(4-1;-Р11е)-1.-(ТгС1п)}-Е-пропеноат (описанный выше в примере 13) превращают в продукт этил-3-{(5'метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Н18^СН3-Ь-(4Р-Рйе)-Е-С1п}-Е-пропеноат по способу, аналогичному способу получения продукта этил-3{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-(2-Нафт)NСН3-^-(4-Ρ-Рйе)-^-С1η}-Е-пропеноата, описанного выше в примере 13 (используя Вос-Ь(Тг-Н18)-ОН вместо Вос-Ь-(2-Нафт)-ОН): ИК (см-1) 3302, 1665, 1202; 1Н ЯМР (ДМСО-Й6, смесь изомеров) δ 1,21 (т, 3 = 7,2), 1,70-1,78 (м),
2,05-2,09 (м), 2,41 (с), 2,44 (с), 2,69-3,26 (м), 4,11 (кв, Д = 7,2), 4,38-4,53 (м), 5,07-5,19 (м), 6,51-
5,84 (м), 6,44 (с), 6,48 (с), 6,63-6,86 (м), 6,89-7,01 (м), 7,09-7,19 (м), 7,23-7,42 (м), 8,02 (д, Д = 8,7),
8,15 (д, Д = 8,1), 8,59 (д, Д = 8,7), 8,94 (с), 9,04 (с), 9,14 (д, 3 = 6,9). Аналитически определено (С3оН36™7О7^ТГА^Н2О) С, Н, Ν.
Пример 15. Получение соединения А-12: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-ЬеиNСН3-^-(4-Ρ-Рйе)-^-С1η}-Е-пропеноат.
Э'ги.з-3-!Вос-\СН3-1.-(4-1;-Р11е)-Р-(ТгС1п)}-Е-пропеноат (описанный выше в примере 13) превращают в продукт этил-3-{(5'метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Ьеи^СН3-Е-(4Р-Рйе)-Р-С1п}-Е-пропеноат по способу, аналогичному способу получения продукта этил-3{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-(2-нафт)NСН3-^-(4-Ρ-Рйе)-^-С1η}-Е-пропеноата, описанного выше в примере 13 (используя Вос-ЬЬеи-ОН вместо Вос-Ь-(2-нафт)-ОН): ИК (см-1) 3325, 1663, 1171; 1Н ЯМР (ДМСО-б6, смесь изомеров) δ 0,64-0,67 (м), 0,86-0,88 (м), 1,17-1,23 (м), 1,32-1,40 (м), 1,59-1,75 (м), 1,98-2,07 (м),
2,42 (с), 2,45 (с), 2,08 (с), 2,86-2,93 (м), 2,99 (с),
3,12-3,20 (м), 4,05-4,15 (м), 4,41-4,50 (м), 4,825,07 (м), 5,62 (д, Д = 15,9), 5,86 (д, Д = 15,9), 6,51 (с), 6,53 (с), 6,68-6,73 (м), 6,93-6,99 (м), 7,09-7,21 (м), 7,26-7,31 (м), 8,03 (д, Д = 7,8), 8,08 (д, Д =
7,8), 8,41 (д, 3 = 8,1), 8,94 (д, 3 = 7,2). Аналитически определено (С30Н40Ж5О7Ч,25СН2С12) С, Н, Ν.
Пример 16. Получение соединения А-13: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Р-(1нафт)^СН3-Р-(4-Р-Рйе)-Р-С1п}-Е-пропеноат.
Эти.з-3-!Вос-\СН3-Р-(4-к-Р11е)-Р-|ТгС1п)}-Е-пропеноат (описанный выше в примере 13) превращают в продукт этил-3-{(5'метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-(1 -нафт)-\СН3Ь-(4-р-Рйе)-Е-С1п}-Е-пропеноат по способу, аналогичному способу получения продукта этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-(2нафт)^СН3-Р-(4-Р-Рйе)-Р-С1п}-Е-пропеноата, описанному выше в примере 13, но используя Вос-Ь-(1-нафт)-ОН вместо Вос-Ь-(2-нафт)-ОН: ИК (см-1) 3308, 1659, 1169; 1Н ЯМР (ДМСО-б6, смесь изомеров) δ 1,16-1,23 (м), 1,61-1,78 (м), 1,98-2,02 (м), 2,07-2,12 (м), 2,41 (с), 2,43 (с), 2,77 (с), 2,78 (с), 2,84-2,87 (м), 2,93-3,03 (м), 3,08-3,14 (м), 3,31-3,38 (м), 4,00-4,15 (м), 4,27-4,32 (м),
4,40-4,46 (м), 4,58-4,64 (м), 5,07-5,17 (м), 5,575,73 (м), 6,45 (с), 6,57-6,61 (м), 6,71-6,88 (м), 6,89-6,91 (м), 7,11-7,19 (м), 7,31-7,38 (м), 7,507,58 (м), 7,73-7,78 (м), 7,83-7,94 (м), 8,08 (д, I =
8.1) , 8,13 (д, I = 8,7), 8,62 (д, I = 8,1), 9,14 (д, I =
8.1) . Аналитически определено (С37Н40Г^О7) С, Н, N.
Пример 17. Получение соединения В-2: этил-3 -{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-ЬУа1Т(СОСН2)-Ь-(4-Г-РЬе)-Ь-((8)-пиррол-А1а)}Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: этил-3 -{Вос-Ь-Уа1Т(СОСН2)-Ь-(4-Г-Рйе)-Ь-{(К2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а}-Епропеноат.
Это промежуточное соединение получают из трет-бутилового эфира {2-метил-18-(4К-(4фторбензил)-5-оксотетрагидрофуран-28-ил) пропил} карбамовой кислоты (описанного в примере 10) и этил-3-{Вос-Г-((Ы-2,4диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноата (описанного в примере 6) по способу, аналогичному способу получения этил-3-{Вос-Ь-(4Ме-РЬе)-Ь-(Тг-О1п)}-Е-пропеноата (пример 4), приведенному выше: КТ = 0,24 (60% ЕЮАс в гексане); ИК (см-1) 3293, 1717, 1668; 1Н ЯМР (С1)С1:) δ 0,82 (д, 3Н, I = 6,8), 1,01 (д, 3Н, I =
6,8), 1,30 (т, 3Н, I = 7,2), 1,51-1,65 (м, 2Н), 1,84-
1,96 (м, 1Н), 2,16-2,37 (м, 2Н), 2,47 (с, 3Н), 2,49-
2,55 (м, 3Н), 2,85-3,01 (м, 2Н), 3,12-3,25 (м,3Н),
3,77 (с, 3Н), 3,78 (с, 3Н), 4,18 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,31-4,49 (м, 3Н), 4,65-4,70 (м, 1Н), 5,53 (дд, 1Н, I = 15,7, 1,4), 6,39-6,44 (м, 3Н), 6,63 (дд, 1Н, I =
15,7, 5,4), 6,93-7,01 (м, 2Н), 7,05-7,10 (м, 1Н),
7,12-7,18 (м, 2Н), 7,24 (д, 1Н, I = 8,7), 7,47 (д, 1Н, ά = 6,5). Аналитически определено (С4сН49Г^О9-0,5Н2О) С, Н, N.
Получение продукта: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-Уа^(СОСН2)-Е-(4-ЕРЬе)-Ь-((8)-пиррол-А1а)]-Е-пропеноат.
Эгил-3-{Вос-Ь-Уа1Т(СОСН2)-Ь-(4-Г-РЬе)Ь-((№2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Епропеноат превращают в продукт этил-3-{(5'метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-Уа^(СОСН2)Е-(4-Г-РЬе)-Ь-((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат по способу, аналогичному способу превращения этил-3 -{Вос-Ь-У а1-Ь-(4-Г -РЬе)-Ь-((Ы-2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноата в продукт этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Уа1-Е-(4-Г-РЬе)-Ь-((8)-пиррол-А1а)}-Епропеноат, описанный выше в примере 6: т.пл. = 178-181°С; КТ = 0,49 (10% СН3ОН в СНС13); ИК (см-1) 3295, 1678 шир; 1Н ЯМР (С1)С1;) δ 0,85 (д, 3Н, I = 6,8), 1,03 (д, 3Н, I = 6,5), 1,30 (т, 3Н, I =
7,2), 1,51-1,62 (м, 1Н), 1,71-1,93 (м, 2Н), 2,27-
2,40 (м, 2Н), 2,47 (с, 3Н), 2,51-2,75 (м, 3Н), 2,82-
2,98 (м, 2Н), 3,11-3,24 (м, 1Н), 3,26-3,42 (м, 2Н),
4,18 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,41-4,53 (м, 1Н), 4,63-4,72 (м, 1Н), 5,50 (д, 1Н, I = 15,4), 5,88 (с, 1Н), 6,39 (с, 1Н), 6,63 (дд, 1Н, I = 15,4, 5,3), 6,92-7,03 (м, 2Н), 7,08-7,31 (м, 4Н). Аналитически определено (С31Н39тО7) С, Н, N.
Пример 18. Получение соединения С-2: этил-3 -{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-Уа1О-Е-(4-Г-РЬе)-Ь-((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: (5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Уа1-О-Ь-(4-ГРйе)-ОСН2СН=СН2.
Вос-Е-Уа1-О-Ь-(4-Г-РЬе)-ОСН2СН=СН2 (полученный, как описано выше в примере 12, 0,91 г, 2,15 ммоль) растворяют в 1,4-диоксане (28 мл) и добавляют раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0М, 14 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 14 ч. Растворитель удаляют путем упаривания и остаток помещают в ЕЮАс (50 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором №НСО3 (50 мл) и затем насыщенным солевым раствором (50 мл), сушат (Мд8О4) и растворитель удаляют, получая 0,66 г (колич. выход) прозрачного масла.
Это вещество растворяют в СН2С12 (20 мл). Добавляют пиридин (0,17 мл, 2,08 ммоль) и реакционную смесь охлаждают до 0°С. Добавляют 5-метилизоксазол-3-карбонилхлорид (0,33 г, 2,27 ммоль), растворенный в 2 мл СН2С12, и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение 1 ч. Растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя градиентом 5^-10% ЕЮАс/гексан. Получают продукт (5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Уа1-О-Ь-(4-ГРйе)-ОСН2СН=СН2 в виде 0,70 г (82%) белого кристаллического твердого вещества: КТ = 0,20 (30% ЕЮАс/гексан); ИК (КВг) 1745, 1661, 1553, 1186 см-1; 1Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 0,85-0,92 (м, 6Н), 2,14-2,21 (м, 1Н), 2,46 (с, 3Н), 3,05-3,19 (м, 2Н), 4,32-4,37 (м, 1Н), 4,53-4,60 (м, 2Н), 5,16-
5,28 (м, 3Н), 5,74-5,85 (м, 1Н), 6,56 (с, 1Н), 7,017,07 (м, 2Н), 7,26-7,29 (м, 2Н), 8,76 (д, 1Н, I = 8,1). Аналитически определено (С22Н25^О6Г) С, Н, N.
Получение промежуточного соединения: этил-3 -{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-Уа1О-Г-(4-Е-РЬе)-Г-((№2,4-диметоксибензил)-(8)пиррол-А1а)}-Е-пропеноат.
(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-Уа1-ОЬ-(4-Е-РЬе)-ОСН2СН=СН2 (0,67 г, 1,55 ммоль) растворяют в ТГФ (15 мл). Добавляют тетра кис(трифенилфосфин)палладий(0) (0,036 г, 0,03 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 5 мин. Добавляют по каплям морфолин (0,16 мл, 1,86 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 ч. Растворитель удаляют в вакууме и остаток помещают в 50 мл Εΐ2Θ. Продукт экстрагируют дважды в насыщенный раствор №НСО3 (50 мл) и органическую фазу отбрасывают. Водную фазу подкисляют до рН = 1-2 10% НС1 и продукт экстрагируют дважды ЕЮАс (40 мл). Органическую фазу промывают насыщенным солевым раствором (50 мл), сушат (Мд8О4) и концентрируют, получая 0,57 г (95%) масла, которое кристаллизуется при стоянии.
Порцию этого вещества (0,19 г, 0,50 ммоль) растворяют в ЭМЕ (3 мл). Добавляют диизопропилэтиламин (0,34 мл, 1,0 ммоль), затем этил-3-{Н2№Е-((№2,4-диметоксибензил)(8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат^НС1 (полученный, как описано выше в примерах 4 и 6, 0,19 г, 0,50 ммоль). Реакционную смесь охлаждают до 0°С, добавляют НАТО (0,19 г, 0,50 ммоль) и реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры. ЭМЕ удаляют в вакууме. Остаток растворяют в ЕЮАс (30 мл) и органическую фазу промывают последовательно 10% раствором НС1 (25 мл), насыщенным раствором \а11СО3 (25 мл), Н2О (25 мл) и насыщенным солевым раствором (25 мл). Растворитель сушат (Мд8О4), фильтруют и остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (0>1,0% МеОН/СН2С12), получая этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-ЕУа1-О-Е-(4-Е-Рйе)-Е-((№2,4-диметоксибензил)(8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат (0,27 г, 72%) в виде белого аморфного твердого вещества: КТ = 0,18 (3% МеОН/СНС13); ИК (КВт) 1671, 1547, 1510, 1209 см-1; 1Н ЯМР (ДМСО-б6) δ 0,88 (д, 3Н, I = 7,0), 0,93 (д, 3Н, I = 7,0), 1,20 (т, 3Н, I = 7,0), 1,41-1,58 (м, 2Н), 1,79-1,98 (м, 2Н), 2,07-
2,24 (м, 2Н), 2,44 (с, 3Н), 3,01-3,13 (м, 4Н), 3,73 (с, 3Н), 3,76 (с, 3Н), 4,09 (кв, 2Н, I = 7,0), 4,24 (с, 2Н), 4,30 (т, 1Н, I = 7,4), 4,45-4,48 (м, 1Н), 5,12 (т, 1Н, I = 6,3), 5,59 (д, 1Н, I = 15,8), 6,45 (дд, 1Н, I = 8,5, 2,2), 6,54-6,56 (м, 2Н), 6,73 (дд, 1Н, I = 15,5, 4,8), 6,89-6,95 (м, 3Н), 7,20 (д, 1Н, I =
8,5), 7,22 (д, 1Н, I = 8,5), 8,08 (д, 1Н, I = 8,8),
8,89 (д, 1НД = 7,4).
Получение продукта: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Уа1-О-Е-(4-Е-Рйе)-Е-((8)пиррол-А1а)}-Е-пропеноат.
Этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)Е-Уа1-О-Е-(4-Е-Рйе)-Е-((№2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат (0,25 г, 0,33 ммоль) растворяют в СНС13 (6 мл). Добавляют две капли воды, затем ΩΩΟ (0,10 г, 0,43 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 50-55°С в течение 8 ч. После охлаждения реакционную смесь выливают в ЕЮАс (30 мл). Органическую фазу промывают 30 мл раствора 2:1 \а! 1СО31 н.
№ОН и затем насыщенным солевым раствором (30 мл), сушат (Мд8О4) и концентрируют. Остаток подвергают колоночной флэшхроматографии, элюируя 0 >2% МеОН/СН2С12. Продукт этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Е-Уа1-О-Е-(4-Е-Рйе)-Е-((8)-пиррол-А1а)}Е-пропеноат получают в виде 0,18 г (90%) белого аморфного твердого вещества: КТ = 0,09 (3% МеОН/СНС13); ИК (КВг) 1680, 1549 см-1; 1Н ЯМР (ДМСО-бб) δ 0,91 (д, 3Н, I = 6,6), 0,95 (д, 3Н, I = 6,6), 1,20 (т, 3Н, I = 7,0), 1,36-1,44 (м, 1Н), 1,56-1,61 (м, 1Н), 1,74-1,82 (м, 1Н), 1,94-
1,99 (м, 2Н), 2,18-2,25 (м, 1Н), 2,45 (с, 3Н), 2,98-
3,18 (м, 4Н), 4,09 (кв, 2Н, 1= 7,0), 4,28-4,32 (м, 1Н), 4,43-4,46 (м, 1Н), 5,12 (м, 1Н), 5,58 (д, 1Н, 1 = 15,8), 6,56 (с, 1Н), 6,72 (дд, 1Н, 1= 15,8, 4,8), 6,91-6,97 (м, 2Н), 7,21 (д, 1Н, 1 = 5,9), 7,23 (д, 1Н, 1 = 5,9), 7,59 (с, 1Н), 8,06 (д, 1Н, 1 = 8,8), 8,92 (д, 1Н, 1 = 7,4). Аналитически определено (С3сН37^О8Е) С, Н, N.
Пример 19. Получение соединения В-3: 2{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-ЬУа1Т(СОСН2)-Е-(4-Е-Рйе)-Е-((8)-пиррол-А1а)}Е-(а-винил-у-бутиролактон).
> (В-3)
Получение промежуточного соединения: Вос-Ι .-{(\-2.4-димето1<сибензил )-(8)-пирролА1а)-Е-(а-винил-у-бутиролактон).
трет-Бутиловый эфир (18,3'8)-{2-(1'-(2,4диметоксибензил)-2'-оксопирролидин-3'-ил)-1гидроксиметилэтил}карбамовой кислоты (0,360 г, 0,881 ммоль, 1 экв.) окисляют до соответствующего альдегида по способу, описанному в получении этил-3-{Вос-Е-((№2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а}-Е-пропеноата (пример 6). Этот альдегид объединяют с 3-(трифенил-Х5фосфанилиден)дигидрофуран-2-оном (полученным по способу, аналогичному описанному в ВаШ^т е! а1., 1. Огд. Сйеш. 1971, уо1. 36, 1441) (0,320 г, 0,924 ммоль, 1,05 экв.) в смеси диметилового эфира этилгликоля (10 мл) и ЭМЕ (2 мл). Реакционную смесь нагревают в масляной бане при 100°С в течение 1,5 ч, оставляют охлаждаться до 23 °С в течение ночи и затем разбавляют МТВЕ (200 мл), промывают водой (20 мл) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушат над №28О4 и упаривают. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (2,5% СН3ОН в СН2С12, затем 67% ЕЮАс в СН2С12), получая Вос-Е-{(№2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а}-Е-(а-винил-у-бутиролактон) в виде масла (0,250 г, 60%): КТ = 0,50 (67% ЕЮАс в СН2С12); ИК (см-1) 3307, 1754, 1678; 1Н ЯМР (СОС13) δ 1,42 (с, 9Н), 1,46-1,68 (м, 2Н), 2,02-2,13 (м, 1Н), 2,18-2,30 (м, 1Н), 2,4475
2,56 (м, 1Н), 2,91-3,04 (м, 1Η), 3,15-3,27 (м, 3Η),
3,80 (с, 6Н), 4,34-4,43 (м, 5Н), 5,63-5,69 (м, 1Η),
6,42-6,47 (м, 2Н), 6,48-6,53 (м, 1Η), 7,09-7,13 (м, 1Η).
Получение продукта: 2-{(5'метилизоксазол-3'-карбонил)-^-Vа1Ψ(СΟСΗ2)Ь-(4-Е-РЬе)-Ь-((8)-пиррол-А1а)}-Е-(а-винил-убутиролактон).
Вос-Ь-{(№2,4-диметоксибензил)-(8)пиррол-А1а}-Е-(а-винил-у-бутиролактон) превращают в продукт 2-{(5'-метилизоксазол-3'карбонил)-^-Vа1Ψ(СΟСΗ2)-^-(4-Е-РЬе)-^-((8)пиррол-А1а)}-Е-(а-винил-у-бутиролактон) по способу, аналогичному описанному выше, для получения продукта этил-3-{(5'-метилизоксазол3'-карбонил)-^-Vа1Ψ(СΟСΗ2)-^-(4-Е-РЬе)-^((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноата (пример 17): КГ = 0,28 (5% СН3ОН в ОДСГ); ИК (см-1) 3378 шир, 1749, 1678 шир; 1Η ЯМР (СЭС13) δ 0,84 (д, 3Η, I = 6,8), 1,03 (д, 3Η, I = 6,8), 1,45-1,55 (м, 1Η), 1,75-2,00 (м, 2Н), 2,25-2,43 (м, 2Н), 2,46-
2,59 (м, 2Н), 2,48 (с, 3Η), 2,63-2,72 (м, 1Η), 2,77-
2,90 (м, 3Η), 3,06-3,26 (м, 2Н), 3,29-3,44 (м, 2Н),
4,32-4,46 (м, 3Η), 4,65-4,71 (м, 1Η), 5,72 (с, 1Η),
6,14-6,20 (м, 1Η), 6,40 (с, 1Η), 6,94-7,02 (м, 2Н), 7,03-7,11 (м, 2Н), 7,24 (д, 1Η, I = 9,0), 7,60 (д, 1Η, I = 6,2). Аналитически определено (ί^γΕΝΟγ) С, Н, Ν.
Пример 20. Получение соединения В-4: этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-ЬУа1Т(СОСН2)-Ь-(4-Г-Рйе)-Ь-((8)’пипер’А1а)}-Евыше для
способов, аналогичных описанным соединений формулы Ι-А
Этот продукт получают по аналогии с продуктом этил-3-{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-Ь-Уа1-Ь-(4-Г-Рйе)-Ь-((8)-пипер’А1а)}-Епропеноатом (пример 9) и продуктом этил-3{(5'-метилизоксазол-3'-карбонил)-ЬVа1Ψ(СΟСΗ2)-^-(4-Е-РЬе)-^-Θ1η}-Ε-пропеноатом (пример 10), описанным выше: т.пл .= 161162°С; КГ = 0,30 (5% СН3ОН в СН2С12); ИК (см-1) 3295, 1713, 1649; 1Η ЯМР (СВС13) δ 0,84 (д, 3Η, I = 6,8), 1,03 (д, 3Η, I = 6,8), 1,30 (т, 3Η, I = 7,2), 1,43-1,55 (м, 2Н), 1,77-1,90 (м, 2Н), 1,95-
2,12 (м, 2Н), 2,27-2,38 (м, 1Н), 2,44-2,58 (м, 2Н),
2,48 (с, 3Η), 2,66-2,76 (м, 1Н), 2,80-2,93 (м, 2Н),
3,12-3,42 (м, 3Η), 4,18 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,39-4,49 (м, 1Н), 4,65-4,72 (м, 1Η), 5,50 (дд, 1Н, I = 15,9,
1,6), 5,80 (с, 1Н), 6,38-6,41 (м, 1Η), 6,62 (дд, 1Η, I = 15,9, 5,3), 6,94-7,02 (м, 2Н), 7,08-7,28 (м, 4Н).
Примеры от 21 до 30.
Для примеров 21-30 были получены следующие соединения от (А-14) до (А-23), соответственно, с использованием синтетических
Пример 31. Получение соединения сравнения #2: этил-3-(СЪ7-Ь-Ьеи-Ь-РЬе-Ь-О1п)-Епропеноат.
Соединение сравнения #2
Получение промежуточного соединения: [Вос-Ь-(Тг-О1п)]-^ОМе)Ме.
Изобутилхлорформиат (4,77 мл, 36,8 ммоль, 1,0 экв.) добавляют к раствору Ν-α-Восγ-тритил-Ь-глутамина (18,7 г, 36,7 ммоль, 1 экв.) и 4-метилморфолина (8,08 мл, 73,5 ммоль, 2,0 экв.) в СН2С12 (250 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 20 мин и затем добавляют гидрохлорид ΝΌдиметилгидроксиламина (3,60 г, 36,7 ммоль, 1,0 экв.). Полученный раствор перемешивают при 0°С в течение 20 мин и при 23°С в течение 2 ч, затем распределяют между водой (150 мл) и СН2С12 (2x150 мл). Объединенные органические слои сушат над №28О4 и концентрируют. Остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (градиентное элюирование 40^-20% гексан в ЕЮАс), получая {Вос-Ь-(ТгС1п)[-ШОМе)Ме (16,1 г, 82%) в виде белой пены: ИК (см-1) 3411, 3329, 3062, 1701, 1659; Ή ЯМР (СЭС13) δ 1,42 (с, 9Н), 1,63-1,77 (м, 1Н), 2,06-2,17 (м, 1Н), 2,29-2,43 (м, 2Н), 3,17 (с, 3Н),
3,64 (с, 3Н), 4,73 (с, шир, 1Н), 5,38-5,41 (м, 1Н), 7,20-7,31 (м, 15Н). Аналитически определено (С31Н3ХО5) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: {Вос-Ь-(Тг-О1п)}-Н.
Диизобутилалюминий гидрид (50,5 мл 1,5 М раствор в толуоле, 75,8 ммоль, 2,5 экв.) добавляют к раствору {Вос-Ь-(Тг-С1п)}^ОМе)Ме (16,1 г, 30,3 ммоль, 1 экв.) в ТГФ при -78°С и реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 4 ч. Последовательно добавляют метанол (4 мл) и 1,0 М НС1 (10 мл) и смесь нагревают до 23°С. Полученную суспензию разбавляют Е12О (150 мл) и промывают 1,0 М НС1 (3x100 мл), полунасыщенным №НСО3 (100 мл) и водой (100 мл). Органический слой сушат над Мд8О4, фильтруют и концентрируют, получая неочищенный {Вос-Ь-(Тг-С1п)}-Н (13,8 г, 97%) в виде твердого вещества белого цвета: т.пл.= 114-116°С; ИК (см-1) 3313, 1697, 1494; Ή ЯМР (СЭС13) δ 1,44 (с, 9Н), 1,65-1,75 (м, 1Н), 2,17-2,23 (м, 1Н), 2,31-2,54 (м, 2Н), 4,11 (с, шир, 1Н), 5,38-5,40 (м, 1Н), 7,11 (с, 1Н), 7,16-7,36 (м, 15Н), 9,45 (с, 1Н).
Получение промежуточного соединения: этил-3-{Вос-Ь-(Тг-С1п)}-Е-пропеноат.
Натрий бис(триметилсилил)амид (22,9 мл 1,0 М раствора в ТГФ, 22,9 ммоль, 1,0 экв.) добавляют к раствору триэтилфосфоноацетата (5,59 г, 22,9 ммоль, 1,0 экв.) в ТГФ (200 мл) при -78°С и полученный раствор перемешивают в течение 20 мин при этой температуре. Неочи щенный {Вос-Ь-(Тг-С1п)}-Н (10,8 г, 22,9 ммоль, экв.) в ТГФ (50 мл) добавляют через трубочку и реакционную смесь перемешивают в течение ч при -78°С, нагревают до 0°С в течение 10 мин и распределяют между 0,5 М НС1 (150 мл) и смесью ЕЮАс и гексана 1:1 (2x150 мл). Объединенные органические слои сушат над №28О4 и концентрируют. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (40% ЕЮАс в гексане), получая этил-3-{Вос-Ь-(Тг-С1п)}-Епропеноат (10,9 г, 88%) в виде белой пены: ИК (см-1) 3321, 1710; Ή ЯМР (СЭС13) δ 1,27 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,42 (с, 9Н), 1,70-1,78 (м, 1Н), 1,80-1,96 (м, 1Н), 2,35 (т, 2Н, 1 = 7,0), 4,18 (кв, 2Н, 1 = 7,2),
4,29 (с, шир, 1Н), 4,82-4,84 (м, 1Н), 5,88 (дд, 1Н, 1 = 15,7, 1,6), 6,79 (дд, 1Н, 1 = 15,7, 5,3), 6,92 (с, 1Н), 7,19-7,34 (м, 15Н). Аналитически определено (С33Н3!№О5) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{СЬ7-П-Пеи-П-Рйе-П-(Тг-С1п)}-Е-пропеноат.
Раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0М, 20 мл) добавляют к раствору этил-3-{Вос-Ь-(Тг-С1п)}Е-пропеноата (1,00 г, 1,84 ммоль, 1 экв.) в том же растворителе (20 мл) при 23 °С. Через 3 ч летучие вещества удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в СН2С12 (50 мл) и последовательно добавляют СЬг-Ь-Ьеи-Ь-РйеОН (0,759 г, 1,84 ммоль, 1,0 экв.), НОВ1 (0,373 г, 2,76 ммоль, 1,5 экв.), 4-метилморфолин (0,809 мл, 7,36 ммоль, 4,0 экв.), и ЕЭС (0,529 г, 2,76 ммоль, 1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивают при 23°С в течение 18 ч и затем распределяют между водой (150 мл) и ЕЮАс (2x150 мл). Объединенные органические слои сушат над №28О4 и концентрируют. Флэш-хроматографическая очистка остатка (5% СН3ОН в СН2С12) дает этил-3-{СЬ7-П-Пеи-П-Рйе-П-(ТгС1п)[-Е-пропеноат (1,25 г, 83%) в виде твердого вещества белого цвета: т. пл.= 192-194°С; ИК (см-1) 3295, 1696, 1678, 1655, 1519; 1Н ЯМР (СЭС13) δ 0,84 (д, 3Н, 1 = 6,5), 0,86 (д, 3Н, 1 =
6.5) , 1,24-1,32 (м, 1Н), 1,28 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,43-
1,75 (м, 3Н), 1,91-2,06 (м, 1Н), 2,20-2,38 (м, 2Н),
2,93-3,02 (м, 1Н), 3,07-3,18 (м, 1Н), 3,95-4,02 (м, 1Н), 4,17 (кв, 2Н, 1 = 7,2), 4,43-4,55 (м, 2Н), 4,824,95 (м, 2Н), 5,69 (д, 1Н, 1 = 15,7), 6,46 (д, 1Н, 1 =
7.5) , 6,60 (д, 1Н, 1 = 8,1), 6,69 (дд, 1Н, 1 = 15,7, 5,1), 7,09-7,38 (м, 27Н). Аналитически определено (С51Н56^О7) С, Н, Ν.
Получение продукта: этил-3-(СЬг-П-Пеи-ПРйе-Ь-О1п)-Е-пропеноат.
Трифторуксусную кислоту (20 мл) добавляют к раствору этил-3-{СЬх-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-(ТгО1п)}-Е-пропеноата (1,25 г, 1,49 ммоль, 1 экв.) и триизопропилсилана (1,53 мл, 7,47 ммоль, 5,0 экв.) в СН2С12 (20 мл) при 23°С, получая яркожелтый раствор. Реакционную смесь перемешивают в течение 20 мин при 23 °С, за это время смесь становится бесцветной. Добавляют тетрахлористый углерод (20 мл) и удаляют летучие вещества при пониженном давлении. Остаток перетирают с Е!2О (20 мл) и полученное твердое вещество белого цвета собирают с помощью вакуумной фильтрации, промывают Е!2О (3x50 мл) и сушат на воздухе, получая этил-3-(СЬ/-РЕеи-Е-Рйе-Е-О1п)-Е-пропеноат (0,717 г, 81%): т.пл .= 219-221°С; ИК (см-1) 3300, 1672, 1535; 1Н ЯМР (ДМСО-йб) δ 0,78 (д, 3Н, I = 6,8), 0,82 (д, 3Н, I = 6,5), 1,21 (т, 3Н, I = 7,0), 1,25-1,37 (м, 2Н), 1,42-1,54 (м, 1Н), 1,58-1,80 (м, 2Н), 2,022,09 (м, 2Н), 2,84 (дд, 1Н, I = 13,2, 8,9), 2,97 (дд, 1Н, I = 13,2, 5,8), 3,93-4,01 (м, 1Н), 4,11 (кв, 2Н, I = 7,0), 4,33-4,52 (м, 2Н), 4,97 (д, 1Н, I = 12,3), 5,04 (д, 1Н, I = 12,3), 5,64 (д, 1Н, I = 15,9), 6,69 (дд, 1Н, I = 15,9, 5,4), 6,76 (с, 1Н), 7,13-7,37 (м, 11Н), 7,43 (д, 1Н, 1= 7,8), 7,99 (д, 1Н, I = 8,1), 8,04 (д, 1Н, I = 8,1). Аналитически определено (С32Н42^О7) С, Н, N.
Пример 32. Получение сравнительного соединения #3: эти.л-3-(СЬ/-1 ,-\'а1-1 ,-Р11е-1 .-0111)-1:пропеноат.
Соединение сравнения #3
Получение промежуточного соединения: этил-3-{Вос-Е-Рйе-Е-(Тг-О1п)}-Е-пропеноат.
Раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0М, 10 мл) добавляют к раствору этил-3-{Вос-Ь-(Тг-О1п)}Е-пропеноата (полученный, как описано в примере 31, 3,05 г, 5,62 ммоль, 1 экв.) в том же растворителе (20 мл) при 23°С. Через 3 ч летучие вещества удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в СН2С12 (50 мл) и последовательно добавляют Вос-Ь-Рйе-ОН (1,49 г, 5,62 ммоль, 1,0 экв.), НОВ! (0,911 г, 6,74 ммоль, 1,2 экв.), 4-метилморфолин (1,85 мл, 16,8 ммоль, 3,0 экв.) и РОС (1,29 г, 6,73 ммоль, 1,2 экв.). Реакционную смесь перемешивают при 23°С в течение 18 ч и затем распределяют между водой (150 мл) и Е!ОАс (2x150 мл). Объединенные органические слои сушат над №28О4 и концентрируют. Флэш-хроматографическая очистка остатка (градиентное элюирование, 40^50% Е!ОАс в гексане) дает этил-3-{Вос-Е-Рйе-Е-(ТгС1п)}-Е-пропеноат (2,77 г, 71%) в виде белой пены: ИК (см-1) 3306, 1706, 1661; 1Н ЯМР (СВОД δ 1,29 (т, 3Н, I = 7,2), 1,38 (с, 9Н), 1,65-
1,76 (м, 1Н), 1,87-1,99 (м, 1Н), 2,25-2,27 (м, 2Н),
2,94-3,01 (м, 2Н), 4,14-4,26 (м, 3Н), 4,48-4,53 (м, 1Н), 4,95 (с, шир, 1Н), 5,64 (д, 1Н, I = 15,8), 6,29 (д, 1Н, I = 8,1), 6,64 (дд, 1Н, I = 15,8, 5,4), 6,80 (с, шир, 1Н), 7,14-7,32 (м, 20Н); Аналитически определено (С42Н47Н3О6) С, Н, N.
Получение промежуточного соединения: этил-3 -{^ζΈ-ν а1-Р-Рйе-Р-(Тг-С1п) }-Е-пропеноат.
Раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0М, 8 мл) добавляют к раствору этил-3-{Вос-Е-Рйе-Е-(ТгО1п)}-Е-пропеноата (0,296 г, 0,429 ммоль, 1 экв.) в том же растворителе (10 мл) при 23°С. Через 3 ч летучие вещества удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в СН2С12 (10 мл) и затем последовательно добавляют С%-1.-\'а1ОН (0,108 г, 0,430 ммоль, 1,0 экв.), НОВ! (0,070 г, 0,518 ммоль, 1,2 экв.), 4-метилморфолин (0,142 мл, 1,29 ммоль, 3,0 экв.) и РОС (0,099 г, 0,516 ммоль, 1,2 экв.). Реакционную смесь перемешивают при 23°С в течение 4 ч и затем распределяют между водой (100 мл) и Е!ОАс (2x100 мл). Объединенные органические слои сушат над №28О4 и концентрируют. Флэшхроматографическая очистка остатка (3% СН3ОН в СН2С12) дает этил-3-{С^-Е-\а1-Е-РйеЕ-(Тг-О1п)}-Е-пропеноат (0,220 г, 62%) в виде твердого вещества белого цвета: т.пл. = 195198°С; ИК (см-1) 3284, 1689, 1646; 1Н ЯМР (СВОД δ 0,69 (д, 3Н, I = 6,9), 0,82 (д, 3Н, I =
6,5), 1,28 (т, 3Н, I = 7,2), 1,63-1,74 (м, 1Н), 1,962,02 (м, 2Н), 2,22-2,35 (м, 2Н), 2,93 (дд, 1Н, I = 14,0, 7,6), 3,10 (дд, 1Н, I = 14,0, 6,7), 3,81-3,85 (м, 1Н), 4,17 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,48-4,58 (м, 2Н),
4,87 (д, 1Н, I = 12,0), 4,94 (д, 1Н, I = 12,0), 5,06 (д, 1Н, I = 6,9), 5,67 (д, 1Н, I = 15,6), 6,43 (д, 1Н, I = 7,5), 6,63-6,72 (м, 2Н), 7,10-7,40 (м, 26Н). Аналитически определено (С50Н54^О7) С, Н, N.
Получение продукта: ')'ги.1-3-(С%-1.-\'а1-1.Рйе-Е-О1п)-Е-пропеноат.
Трифторуксусную кислоту (5 мл) добавляют к раствору этил-3-{С^-Е-\а1-Е-Рйе-Е-(ТгО1п)}-Е-пропеноата (0,188 г, 0,229 ммоль, 1 экв.) и триизопропилсилана (0,300 мл, 1,46 ммоль, 6,4 экв.) в СН2С12 (10 мл) при 23°С, получая яркожелтый раствор. Реакционную смесь перемешивают в течение 20 мин при 23°С, в течение этого времени смесь становится бесцветной. Добавляют четыреххлористый углерод (10 мл) и удаляют летучие вещества при пониженном давлении. Остаток перетирают с Е!2О (20 мл) и полученное белое твердое вещество собирают путем вакуумной фильтрации, промывают Е!2О (3x50 мл) и сушат на воздухе, получая 3ΤΗ4-3-(ΟΡζ-Ρ\а1-Е-Рйе-Е-О1п)-Е-пропеноат (0,094 г, 71%): т.пл.= 240°С (разл.); ИК (см-1) 3263, 1686, 1640; 1Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 0,73 (д, 6Н, I = 6,9), 1,21 (т, 3Н, I = 7,2), 1,60-1,75 (м, 2Н), 1,83-1,90 (м, 1Н), 2,03-2,08 (м, 2Н), 2,83 (дд, 1Н, I = 13,6, 8,6),
2,96 (дд, 1Н, I = 13,6, 6,2), 3,79-3,84 (м, 1Н), 4,10 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,37-4,49 (м, 1Н), 4,51-4,56 (м, 1Н), 4,99 (д, 1Н, I = 12,5), 5,06 (д, 1Н, I = 12,5),
5,61 (д, 1Н, I = 15,5), 6,67 (дд, 1Н, I = 15,5, 5,5),
6,76 (с, 1Н), 7,13-7,36 (м, 12Н), 8,06 (д, 2Н, I = 8,1); Аналитически определено (С31Н4^4О7) С, Н, N.
Пример 33. Получение соединения (А-24):
этил-3-{ СЬг-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-((8)-пиррол-А1а)}-Епропеноат.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{СЪ7-Ь-Ьеи-Ь-РЬе-Ь-(№2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат.
Раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0М, 4 мл) добавляют к раствору этил-3-{Вос-Ь-((№2,4диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат (полученный, как описано в примере 6) (0,139 г, 0,292 ммоль, 1 экв.) в 1,4-диоксане (4 мл). После перемешивания в течение 1,5 ч летучие вещества упаривают, получая неочищенную соль амина, которую используют без очистки.
Эту соль амина растворяют в СН2С12 (7 мл) и затем последовательно добавляют СЪ/-Ь-ЬеиЬ-РЬе-ОН (0,156 г, 0,378 ммоль, 1,3 экв.), 4метилморфолин (0,128 мл, 1,16 ммоль, 4 экв.), 11ОВ1 (0,067 г, 0,50 ммоль, 1,7 экв.) и ЕЭС (0,095 г, 0,50 ммоль, 1,7 экв.). После перемешивания в течение 20 ч реакционную смесь выливают в насыщенный солевой раствор (15 мл) и экстрагируют 10% СН3ОН в СН2С12 (3x25 мл). Объединенные органические фазы сушат над №28О4 и упаривают. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (60% ЕЮАс в гексане), получая этил-3-{СЪ7-Ь-Ьеи-ЬРЬе-Ь-(№2,4-диметоксибензил)-(8)-пирролА1а)}-Е-пропеноат (0,158 г, 70%) в виде пены: 1Н ЯМР (СЭС13) δ 0,87-0,92 (м, 6Н), 1,28 (т, 3Н, I = 7,2), 1,46-1,68 (м, 5Н), 1,74-1,86 (м, 1Н), 1,97-
2,19 (м, 2Н), 3,02 (дд, 1Н, I = 13,7, 5,6), 3,11-3,24 (м, 3Н), 3,78 (с, 3Н), 3,79 (с, 3Н), 4,17 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,20-4,30 (м, 2Н), 4,35-4,45 (м, 2Н), 4,82-
4,90 (м, 1Н), 5,07 (д, 1Н, I = 12,3), 5,13 (д, 1Н, I = 12,3), 5,36 (д, 1Н, I = 7,8), 5,82 (дд, 1Н, I = 15,6,
1,2), 6,42-6,46 (м, 2Н), 6,72 (дд, 1Н, I = 15,6, 5,3),
6,88 (д, 1Н, I = 8,7), 7,09 (д, 1Н, I = 9,0), 7,13-
7,20 (м, 5Н), 7,29-7,37 (м, 5Н), 8,09 (д, 1Н, I =
6,5).
Получение продукта: этил-3-{СЪ/-Ь-ЬеиЬ-РЬе-Ь-((8)-пиррол-А1а))-Е-пропеноат.
Этил-3-;СЪ/-к-кеи-к-РКе-к-((А-2.4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а}]-Е-пропеноат (0,156 г, 0,202 ммоль, 1 экв.) и нитрат аммония церия(ГУ) (0,277 г, 0,505 ммоль, 2,5 экв.) объединяют в смеси ТГФ/вода 2:1 (3 мл) и перемешивают 2 ч. Реакционную смесь выливают в насыщенный солевой раствор (15 мл) и экстрагируют 10% СН3ОН в СН2С12 (3x25 мл). Объединенные органические фазы сушат над №28О4 и упаривают. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (градиентное элюирование, 2^5% СН3ОН в СН2С12), получая этил-3-{СЪ7-Ь-Ьеи-Ь-РЬе-Ь-(8)-пиррол-А1а}-Епропеноат (0,059 г, 47%) в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (СЭС13) δ 0,850,92 (м, 6Н), 1,28 (т, 3Н, I = 7,2), 1,39-1,65 (м,
4Н), 1,68-1,93 (м, 2Н), 2,08-2,20 (м, 1Н), 2,27-
2,38 (м, 1Н), 3,02-3,13 (м, 2Н), 3,24-3,32 (м, 2Н),
4,11-4,20 (м, 1Н), 4,18 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,47-4,58 (м, 1Н), 4,81-4,89 (м, 1Н), 5,05 (д, 1Н, I = 12,1),
5,12 (д, 1Н, I = 12,1), 5,26 (д, 1Н, I = 8,1), 5,78 (дд, 1Н, I = 15,7, 1,2), 6,23 (с, 1Н), 6,72 (дд, 1Н, I = 15,7, 5,3), 7,13-7,25 (м, 6Н), 7,30-7,37 (м, 5Н),
7,54 (д, 1Н, I = 7,2).
Пример 34. Получение соединения (А-25): этил-3-(СЪ7-Ь-Уа1-Ь-РЬе-Ь-(8)-пиррол-А1а)-Епропеноат.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{СЪ7-Ь-Уа1-Ь-РЬе-Ь-((№2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат.
По способу, аналогичному используемому для превращения этил-3-{Вос-Ь-(Тг-С1п)}-Епропеноата в этил-3-{СЪ7-Ь-Ьеи-Ь-РЬе-к-(ТгС1п)}-Е-пропеноат, описанному в примере 31, этил-3-{Вос-Ь-(№2,4-диметоксибензил-(8)пиррол-А1а)}-Е-пропеноат (полученный, как в примере 33) подвергают взаимодействию с СЪ/Ь-Уа1-Ь-РЬе-ОН, получая этил-3-{СЪ/-Ь-Уа1-ЬРЬе-Ь-((№2,4-диметоксибензил)-(8)-пирролА1а)}-Е-пропеноат: ИК (см-1) 3288, 1699, 1652; 1Н ЯМР (СЭС13) δ 0,87 (д, 3Н, I = 6,8), 0,95 (д, 3Н, I = 6,5), 1,28 (т, 3Н, I = 7,2), 1,48-1,60 (м, 2Н), 1,70-1,84 (м, 1Н), 1,95-2,20 (м, 3Н), 3,01 (дд, 1Н, I = 13,4, 5,6), 3,09-3,25 (м, 3Н), 3,78 (с, 3Н),
3.80 (с, 3Н), 4,03-4,10 (м, 1Н), 4,17 (кв, 2Н, I =
7.2) , 4,24 (д, 1Н, I = 14,2), 4,33-4,44 (м, 1Н), 4,38 (д, 1Н, I = 14,2), 4,85-4,94 (м, 1Н), 5,08 (д, 1Н, I = 12,1), 5,14 (д, 1Н, I = 12,1), 5,39 (д, 1Н, I = 8,1),
5.80 (дд, 1Н, I = 15,6, 1,2), 6,42-6,47 (м, 2Н), 6,70 (дд, 1Н, I = 15,6, 5,3), 6,81 (д, 1Н, I = 9,0), 7,11-
7,20 (м, 6Н), 7,31-7,39 (м, 5Н), 8,11 (д, 1Н, I =
6.2) . Аналитически определено (С42Н52^О9) С, Н, Ν.
Получение продукта этил-3-{СЪ/-Ь-Уа1-ЬРЬе-Ь-((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат.
Суспензию этил-3-{СЪ/-Ь-Уа1-Ь-РЬе-Ь((№2,4-диметоксибензил)-(8)-пиррол-А1а)}-Епропеноата (0,215 г, 0,284 ммоль, 1 экв.), ЭЭС (0,071 г, 0,31 ммоль, 1,1 экв.) и воды (3 капли) в СНС13 (4 мл) перемешивают 1 ч при 23 °С и затем нагревают с обратным холодильником в течение 6 ч. После охлаждения в течение ночи, добавляют дополнительное количество ЭЭС (0,019 г, 0,084 ммоль, 0,3 экв.) и смесь нагревают до 67°С в течение 1 ч и затем упаривают. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (градиентное элюирование, 2^5% СН3ОН в СН2С12), получая вещество с небольшим количеством примесей, которое растворяют в СН2С12 (70 мл) и промывают насыщенным №11СО3 (2x30 мл) и насыщенным солевым раствором (30 мл), затем сушат над \а38О.| и упаривают. Остаток перемешивают в Εΐ20 (10 мл) в течение 20 мин и твердое вещество собирают путем фильтрации и сушат под вакуумом, получая этил-3-{СЬ7-Е-Уа1-Е-РЬе-Ь((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат (0,060 г, 35%) в виде не совсем белого твердого вещества: т.пл.= 215-217°С; ИК (см-1) 3413, 3295, 1696, 1649; 1Н ЯМР (СПС13) δ 0,83 (д, 3Н, I = 6,5), 0,91 (д, 3Н, I = 6,8), 1,28 (т, 3Н, I = 7,2), 1,50-1,59 (м, 1Н), 1,70-1,91 (м, 2Н), 2,03-2,17 (м, 2Н), 2,26-2,38 (м, 1Н), 3,03 (дд, 1Н, I = 13,5, 6,4), 3,12 (дд, 1Н, I =
13,5, 6,4), 3,21-3,34 (м, 2Н), 3,96 (дд, 1Н, I = 8,3, 6,4), 4,17 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,45-4,56 (м, 1Н), 4,83-
4,92 (м, 1Н), 5,07 (д, 1Н, I = 12,1), 5,13 (д, 1Н, I =
12,1), 5,29 (д, 1Н, I = 8,3), 5,77 (дд, 1Н, I = 15,8,
1,2), 5,94 (с, 1Н), 6,71 (дд, 1Н, I = 15,8, 5,3), 6,95 (д, 1Н, I = 9,0), 7,14-7,27 (м, 5Н), 7,31-7,38 (м, 5Н), 7,57 (д, 1Н, б = 7,2). Аналитически определено (С33Н42^О7) С, Н, Ν.
Пример 35. Получение соединения (А-26): этил-3 -{ СЬ7-Е-Ееи-Е-РЬе-Е-((8)-пипер-А1а)}-Епропеноат.
(А-26)
Получение продукта этил-3-{СЬ7-Е-Ееи-ЬРЬе-Е-((8)-пипер-А1а)} -Е-пропеноат.
трет-Бутиловый эфир (18,3'8)-{2-(1'-(2,4диметоксибензил)-2'-оксопиперидин-3'-ил)-1гидроксиметилэтил}карбамовой кислоты (полученный, как описано в примере 8) превращают в продукт этил-3-{СЬ7-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-((8)-пиперА1а)}-Е-пропеноат по способу, аналогичному способу превращения трет-бутилового эфира (18,3'8)-{2-(Г-(2,4-диметоксибензил)-2'-оксопирролидин-3'-ил)-1 -гидроксиметилэтил } карбамовой кислоты в продукт этил-3-{СЬ7-Е-Ееи-ЬРйе-Е-((8)-пипер-А1а)}-Е-пропеноат, как описано в примере 34: ИК (см-1) 3422, 3307, 1713, 1649; 1Н ЯМР (СПС13) δ 0,86-0,92 (м, 6Н), 1,28 (т, 3Н, I = 7,2), 1,38-1,75 (м, 6Н), 1,77-1,89 (м, 1Н), 1,96-2,11 (м, 2Н), 3,07 (д, 2Н, I = 6,2), 3,203,27 (м, 2Н), 4,13-4,24 (м, 1Н), 4,18 (кв, 2Н, I =
7,2), 4,41-4,53 (м, 1Н), 4,76-4,85 (м, 1Н), 5,06 (д, 1Н, I = 12,1), 5,12 (д, 1Н, I = 12,1), 5,34 (д, 1Н, I = 7,8), 5,78 (дд, 1Н, I = 15,6, 5,4), 6,17 (с, 1Н),
6,70 (дд, 1Н, I = 15,6, 5,4), 7,00 (д, 1Н, I = 8,4),
7,13-7,27 (м, 6Н), 7,30-7,37 (м, 5Н), 7,83 (д, 1Н, I = 6,8). Аналитически определено (С35Н4^4О· 0,5Н2О) С, Н, Ν.
Пример 36. Получение соединения (А-27):
этил-3 -{ СЬ7-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-((В)-пиррол-А1а)}Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: трет-бутиловый эфир (48,4В)-4-{3'-(4-бензил2-оксооксазолидин-3-ил)-3'-оксопропил}-2,2диметилоксазолидин-3 -карбоновой кислоты.
Триэтиламин (6,43 мл, 46,1 ммоль, 3,0 экв.) и пивалоилхлорид (1,89 мл, 15,3 ммоль, 1,0 экв.) добавляют последовательно к раствору третбутилового эфира (48)-4-(2'-карбоксиэтил)-2,2диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты (4,20 г, 15,3 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (300 мл) при 0°С. Мутную реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 3,5 ч и затем последовательно добавляют хлорид лития (0,716 г, 16,9 ммоль, 1,1 экв.) и (В)-(+)-4-бензил-2-оксазолидинон (2,59 г, 14,6 ммоль, 0,95 экв.). После нагревания до 23°С и перемешивания в течение 19 ч реакционную смесь распределяют между 0,5 М НС1 (150 мл) и ЕЮАс (2x150 мл). Объединенные органические слои промывают полунасыщенным №2СО3 (150 мл), сушат над Мд8О4 и фильтруют под действием силы тяжести. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (30% ЕЮАс в гексане), получая трет-бутиловый эфир (48,4В)-4{3'-(4-бензил-2-оксооксазолидин-3-ил)-3'оксопропил}-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты (6,15 г, 97%) в виде бесцветного масла: ИК (см1) 2978, 1783, 1694; 1Н ЯМР (СЭС13, смесь изомеров) δ 1,46 (с), 1,58 (с), 1,63 (с), 2,01-2,05 (м), 2,72-3,13 (м), 3,29-3,33 (м), 3,74-3,79 (м), 3,82-4,09 (м), 4,11-4,25 (м), 4,674,70 (м), 7,20-7,37 (м). Аналитически определено (С Н \ ()..) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: трет-бутиловый эфир (2'В,48,4В)-4-{2'-(4бензил-2-оксооксазолидин-3-карбонил)пент4'-енил}-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты.
Раствор трет-бутилового эфира (48,4В)-4{3'-(4-бензил-2-оксооксазолидин-3-ил)-3'оксопропил}-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты (6,15 г, 14,2 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (25 мл) добавляют к раствору натрий бис(триметилсилил)амида (14,2 мл 1,0М раствор в ТГФ, 14,2 ммоль, 1,0 экв.) в том же растворителе (50 мл) при -78°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 15 мин при -78°С, и добавляют затем аллилйодид (3,90 мл, 42,6 ммоль, 3,0 экв.). После перемешивания в течение еще 2 ч при -78°С реакционную смесь держат при -45°С в течение 2 ч и затем распределяют между смесью полунасыщенного ЫН4С1 и 5% \а383О3 2:1 (200 мл) и смесью ЕЮАс и гексана 1:1 (2x150 мл). Объединенные органи85 ческие слои промывают Н2О (100 мл), сушат над Мд8О4 и фильтруют под действием силы тяжести. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (15% Е!ОАс в гексане), получая трет-бутиловый эфир (2'К,48,4К)-4-{2'-(4-бензил-2-оксооксазолидин-3-карбонил)пент-4'-енил}-2,2-диметилоксазолидин-3-карбоновой кислоты (3,12 г, 46%) в виде вязкой пены: ИК (см-1) 2978, 1782, 1685; 1Н ЯМР (СГОСЬ. смесь изомеров) δ 1,42 (с), 1,45 (с), 1,49 (с), 1,52 (с), 1,62-1,78 (м), 1,802,01 (м), 2,23-2,49 (м), 2,51-2,56 (м), 2,76 (дд, 1 =
13,3, 9,7), 3,26 (дд, 1 = 13,3, 3,6), 3,58-3,64 (м),
3,67 (д, 1 = 8,7), 3,90-3,98 (м), 4,02-4,15 (м), 4,16-
4,30 (м), 4,75-4,82 (м), 5,06-5,11 (м), 5,74-5,88 (м), 7,22-7,36 (м). Аналитически определено (С\.1 Ь.Х-О..) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: трет-бутиловый эфир (18,3'К)-{2-(1'-(2,4диметоксибензил)-2'-оксопирролидин-3'-ил)-1 гидроксиметилэтил}карбамовой кислоты.
Озон барботируют через раствор третбутилового эфира (2'К,48,4К)-4-{2'-(4-бензил2-оксооксазолидин-3 -карбонил)пент-4'-енил }2,2-диметилоксазолидин-3 -карбоновой кислоты (3,12 г, 6,60 ммоль, 1 экв.) в СН2С12 (200 мл) и СН3ОН (0,535 мл, 13,2 ммоль, 2,0 экв.) при -78°С, пока сохраняется синее окрашивание. Реакционную смесь затем очищают аргоном, пока она не станет бесцветной. Добавляют метилсульфид (4,85 мл, 66,0 ммоль, 10 экв.) и смесь перемешивают при -78°С в течение 3,5 ч и затем держат при 0°С в течение еще 1 ч. После распределения реакционной смеси между Н2О (150 мл) и смесью Е!ОАс и гексана 1:1 (2x150 мл) объединенные органические слои сушат над Мд8О4 и фильтруют под действием силы тяжести. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток сразу используют без дополнительной очистки.
Полученный выше остаток растворяют в смеси ТГФ и затем Е!ОН 2:1 (180 мл) при 23°С, и последовательно добавляют 2,4-диметоксибензиламин гидрохлорид (5,38 г, 26,4 ммоль, 4,0 экв.), ацетат натрия (2,17 г, 26,4 ммоль, 4,0 экв.), и цианоборгидрид натрия (0,829 г, 13,2 ммоль, 2,0 экв.). Полученную суспензию перемешивают в течение 19 ч при 23°С и затем распределяют между 0,5М НС1 (150 мл) и Е!ОАс (2x100 мл). Объединенные органические слои промывают полунасыщенным NаНСΟ3 (100 мл), сушат над №28О4 и концентрируют при пониженном давлении. Остаток пропускают через короткую колонку с силикагелем (элюируя 50% Е!ОАс в гексане), получая трет-бутиловый эфир (3'К,48)4-{1'-(2,4-диметоксибензил)-2'-оксопирролидин-3'-илметил}-2,2-диметилоксазолидин-3карбоновой кислоты, загрязненный (К)-(+)-4бензил-2-оксазолидиноном.
Это вещество растворяют в СН3ОН (80 мл) и добавляют Т§ОН-Н2О (0,251 г, 1,32 ммоль, 0,20 экв.). Реакционную смесь нагревают до 50°С и держат при этой температуре в течение 4 ч. После охлаждения до 23°С реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении до объема ~20 мл и распределяют между полунасыщенным NаНСО3 (150 мл) и смесью СН2С12 и СН3ОН 9:1 (2x150 мл). Объединенные органические слои сушат над №28О4 и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (3% СН3ОН в СН2С12), получая трет-бутиловый эфир (18,3'К)-{2-(1'-(2,4диметоксибензил)-2'-оксопирролидин-3'-ил)-1гидроксиметилэтил}карбамовой кислоты (0,92 г, 34%) в виде пены: ИК (см-1) 3347 (шир), 2937, 1669; 1Н ЯМР (СОС13) δ 1,44 (с, 9Н), 1,62-1,77 (м, 2Н), 1,94-2,04 (м, 1Н), 2,15-2,26 (м, 1Н), 2,40-
2,50 (м, 1Н), 3,13-3,24 (м, 2Н), 3,56-3,77 (м, 3Н),
3,80 (с, 6Н), 3,82-4,16 (м, 1Н), 4,37 (д, 1Н, 1 = 14,3), 4,45 (д, 1Н, 1 = 14,3), 5,49 (д, 1Н, 1 = 7,8),
6,42-6,45 (м, 2Н), 7,08-7,11 (м, 1Н); Аналитически определено (С21Н32Ы2О6-0,25Н2О) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{Вос-Ь-(Щ-2,4-диметоксибензил)-(К)пиррол-А1а)} -Е-пропеноат.
По способу, аналогичному способу превращения трет-бутилового эфира (18,3'8)-{2-(1'(2,4 -диметоксибензил)-2'-оксопирролидин-3'ил)-1 -гидроксиметилэтил}карбамовой кислоты в этил-3-{Вос-Ь-(Щ-2,4-диметоксибензил)-(8)пиррол-А1а)}-Е-пропеноат, описанный в примере 33, трет-бутиловый эфир (18,3'К)-{2-(1'(2,4-диметоксибензил)-2'-оксопирролидин-3'ил)-1 -гидроксиметилэтил}карбамовой кислоты превращают в этил-3-{Вос-Ь-(Щ-2,4-диметоксибензил)-(К)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат. ИК (см-1) 3307, 1713, 1674; 1Н ЯМР (СПС13) δ 1,28 (т, 3Н, 1 = 7,2), 1,45 (с, 9Н), 1,57-1,82 (м, 2Н), 2,02-2,19 (м, 2Н), 2,42-2,55 (м, 1Н), 3,11-3,25 (м, 2Н), 3,79 (с, 3Н), 3,80 (с, 3Н), 4,19 (кв, 2Н, 1 =
7,2), 4,32-4,50 (м, 3Н), 5,97 (дд, 1Н, 1 = 15,7, 1,4),
6,38 (д, 1Н, 1 = 7,8), 6,42-6,47 (м, 2Н), 6,86 (дд, 1Н, 1 = 15,7, 5,1), 7,08-7,13 (м, 1Н). Аналитически определено (С25Н3&Ы2О7) С, Н, Ν.
Получение промежуточного соединения: этил-3-{ СЬ7-Ь-Ьеи-Ь-РЬе-Ь-(Щ-2,4-диметоксибензил)-(К)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат.
Раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0М, 6 мл) добавляют к раствору этил-3-{Вос-Ь-(Щ-2,4диметоксибензил)-(К)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноата (0,233 г, 0,489 ммоль, 1 экв.) в 1,4-диоксане (6 мл). После перемешивания в течение 1,5 ч летучие вещества упаривают, получая неочищенную соль амина, которую используют без очистки.
Эту соль амина растворяют в ОМЕ (4 мл) и охлаждают до 0°С, последовательно добавляют СЬх-Ь-Ьеи-Ь-РНе-ОН (0,202 г, 0,490 ммоль, 1 экв.), ОША (0,255 мл, 1,46 ммоль, 3 экв.) и
НАТи (0,186 г, 0,489 ммоль, 1 экв.). После перемешивания в течение 1,5 ч реакционную смесь разбавляют МТВЕ (100 мл), промывают 5% КН8О4, насыщенным \а11СОЗ и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушат над Мд8О4 и упаривают. Остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (градиентное элюирование, 60^75% ЕЮАс в гексане), получая этил-З-{СЪζ-^-^еи-^-РЬе-^-((N-2,4диметоксибензил)-(В)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат (0,208 г, 55%) в виде твердого вещества белого цвета (после упаривания из Е!2О): т.пл. 174176°С; ИК (см-1) З287, 171З, 1649; 1Н ЯМР (СБС1з) δ 0,84-0,91 (м, 6Н), 1,29 (т, ЗН, I = 7,2),
1,42-1,66 (м, 4Н), 1,67-1,77 (м, 1Н), 1,84-1,95 (м, 1Н), 2,20-2,12 (м, 1Н), 2,ЗЗ-2,45 (м, 1Н), З,04-
З,2З (м, 4Н), З,78 (с, ЗН), З,79 (с, ЗН), 4,15-4,29 (м, 1Н), 4,17 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,З1 (д, 1Н, I =
14,5), 4,40 (д, 1Н, I = 14,5), 4,67-4,84 (м, 2Н), 5,05 (д, 1Н, I = 12,1), 5,11 (д, 1Н, I = 12,1), 5,З5 (д, 1Н, I = 8,1), 5,76 (дд, 1Н, I = 15,6, 1,6), 6,42-
6,46 (м, 2Н), 6,74-6,81 (м, 1Н), 6,75 (дд, 1Н, I =
15,6, 5,0), 7,06-7,10 (м, 1Н), 7,15-7,24 (м, 5Н), 7,29-7,36 (м, 5Н), 8,79 (д, 1Н, I = 5,9). Аналитически определено (С4ЗН54КЮ9) С, Н, Ν.
Получение продукта этил-З-{СЪ7-Е-Ееи-ЬРЬе-Г-(К)-пиррол-А1а)} -Е-пропеноат.
Этил-З-{СЪζ-^-^еи-^-РЬе-^-((N-2,4-диметоксибензил)-(В)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат превращают в продукт этил-З-{СЪζ-^-^еи-^РЬе-Г-((К)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат по способу, аналогичному способу превращения этил-З{СЪζ-^-^еи-^-РЬе-^-((N-2,4-диметоксибензил)(8)-пиррол-А1а)]-Е-пропеноат в продукт этил-З{СЪζ-^-^еи-^-РЬе-^-((8)-пиррол-А1а)}-Е-пропеноат, описанному в примере З4: ИК (см-1) З290, 1702, 1642; 1Н ЯМР (СЭС1З) δ 0,85-0,92 (м, 6Н),
1,З0 (т, ЗН, I = 7,2), 1,35-1,49 (м, 1Н), 1,52-1,71 (м, ЗН), 1,73-1,94 (м, 2Н), 2,15-2,26 (м, 1Н), 2,З22,4З (м, 1Н), З,02-З,18 (м, 2Н), З,19-З,29 (м, 2Н),
4,15-4,27 (м, 1Н), 4,18 (кв, 2Н, I = 7,2), 4,65-4,74 (м, 1Н), 4,76-4,85 (м, 1Н), 5,07 (д, 1Н, I = 12,З),
5,12 (д, 1Н, 1= 12,3), 5,18-5,25 (м, 1Н), 5,76-5,84 (м, 2Н), 6,64-6,78 (м, 2Н), 7,15-7,40 (м, 10Н), 7,91-7,98 (м, 1Н). Аналитически определено (Сз4Н44КЮ7) С, Н, Ν.
Пример З7. Получение соединения (А-28): этил-З-{ СЪζ-^-^еи-^-РЬе-^-1-(2-имидазолидон) А1а)-Е-пропеноат.
Получение промежуточного соединения: этил-З -{СЪζ-^-^еи-^-РЬе-^-Вос-аминоА1а}-Епропеноат.
(Карбэтоксиметилен)трифенилфосфоран (1,20 г, З,28 ммоль, 1,2 экв.) добавляют к раствору СЪζ-^-^еи-^-РЬе-^-N-Вос-аминоаланина (полученного, как описано в \еЪЪег е1 а1., I. Мей. Сйеш. 1998, уо1. 41, 2786) (1,60 г, 2,7З ммоль, 1 экв.) в ТГФ (55 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Летучие вещества затем удаляют в вакууме и остаток очищают путем колоночного флэш-хроматографического элюирования (градиентное элюирование, 0^1,5% СНЗОН в СН2С12), получая этил-З-{СЪζ-^-^еи-^-РЬе-^N-Вос-аминоА1а}-Е-пропеноат (0,968 г, загрязненный трифенилфосфиноксидом). Это вещество используют без дополнительной очистки.
Получение промежуточного соединения: этил-З-{СЪζ-^-^еи-^-РЬе-^-(2-Вос-2-аминоэтил) аминоА1а } -Е-пропеноат.
Раствор НС1 в 1,4-диоксане (4,0М, 10 мл) добавляют к раствору этил-З-{СЪζ-^-^еи-^-РЬеГ-Вос-аминоА1а}-Е-пропеноата (0,95 г, 1,46 ммоль, 1 экв.) в том же растворителе (20 мл) при 2З°С. Реакционную смесь перемешивают при той же температуре в течение 1,5 ч и затем добавляют дополнительное количество НС1 в 1,4диоксане (4,0М, 10 мл). После перемешивания в течение ночи летучие вещества удаляют в вакууме и остаток перетирают с Е!2О (20 мл). Полученные твердые вещества фильтруют и промывают Е!2О (3x10 мл,), получая неочищенную соль амина (0,6З г, 7З%, 1,05 ммоль) в виде твердого вещества белого цвета.
Это вещество растворяют в СНЗОН (10 мл) и затем последовательно добавляют \-Вос-2аминоэтаналь (помученный, как описано в В18сйоГЪегдег е! а1., I. Огд. Сйеш. 1988, уо1. 5З, З457) (0,19 г, 1,16 ммоль, 1,1 экв.) и NаВНЗСN (0,069 г, 1,05 ммоль, 1,0 экв.). Реакционную смесь перемешивают при 2З°С в течение ночи и затем летучие вещества удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в ЕЮАс (25 мл) и органический слой промывают водой (25 мл) и насыщенным солевым раствором (25 мл), затем сушат над М§8О4 и концентрируют. Остаток очищают с помощью колоночной флэшхроматографии (градиентное элюирование, 0^З% СНЗОН в СН2С12), получая этил-З-{СЪζГ-Геи-Г-РЬе-Г-{2-Вос-2-аминоэтил}аминоА1а}Е-пропеноат (0,З2 г, 44%) в виде белого аморфного твердого вещества: КГ = 0,20 (5% СНЗОН в СНС1З); ИК (см-1) 1712, 1649, 15З7, 1252, 1175; 1Н ЯМР (ДМСО-й6) δ 0,79 (д, ЗН, I = 6,6), 0,82 (д, ЗН, I = 6,6), 1,21 (т, ЗН, I = 7,0), 1,26-1,37 (м, 1ЗН), 1,46-1,54 (м, 1Н), 2,56-2,60 (м, 2Н), 2,82-
2,97 (м, 4Н), 3,98-4,04 (м, 1Н), 4,10 (кв, 2Н, I = 7,0), 4,42-4,49 (м, 2Н), 4,98 (д, 1Н, I = 12,5), 5,04 (д, 1Н, I = 12,9), 5,59 (д, 1Н, I = 15,8), 6,73-6,75 (м, 1Н), 6,77 (дд, 1Н, I = 15,8, 4,8), 7,20-7,34 (м, 10Н), 7,41 (д, 1Н, I = 8,1), 7,97 (д, 1Н, I = 7,0), 8,07 (д, 1Н, I = 7,0). Аналитически определено (Сз7Н5зN5Ο8·0,50Н2О) С, Н, Ν.
Получение продукта ')ί'η.ί-3-!(Έζ-Ι.-Ιχμι-Ι.РЬе-Ь-1 -(2-имидазолидон) А1а}-Е-пропеноат.
ТЕА (0,8 мл) добавляют к раствору этил-3{СЬ7-Е-Ееи-Е-Рйе-Е-(2-Вос-2-аминоэтил)амино А1а}-Е-пропеноата (0,29 г, 0,42 ммоль, 1 экв.) в СН2С12 (8 мл) и реакционную смесь перемешивают при 23°С в течение 2 ч. Летучие вещества удаляют в вакууме, остаток растворяют в ЕЮАс (25 мл) и промывают насыщенным раствором NаНСОз (25 мл), водой (25 мл) и насыщенным солевым раствором (25 мл). Органический слой сушат над Мд§О4 и концентрируют, получая неочищенный диамин (0,23 г, 92%, 0,39 ммоль) в виде рыжевато-коричневого аморфного твердого вещества.
Это вещество растворяют в ТГФ (4 мл), добавляют карбонилдиимидазол (0,06 г, 0,36 ммоль, 0,92 экв.) и реакционную смесь перемешивают при 23°С в течение 3,5 ч. Растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (градиентное элюирование, 0^2% СН3ОН в СН2С12), получая этил-3-{С.'Ьх-Г-Геи-Г-Р11е-Г-1-(2-имидазолидон)А1а}-Е-пропеноат (0,12 г, 54%) в виде белого аморфного твердого вещества: т.пл.= 161-164°С; Κί = 0,21 (5% СН3ОН в СНС13); ИК (см-1) 1701, 1647, 1535, 1277; 1Н ЯМР (ДМСОφ) δ 0,79 (д,3Н, I = 6,6), 0,82 (д, 3Н, I = 6,6), 1,21 (т, 3Н, I = 7,0), 1,27-1,35 (м, 2Н), 1,48-1,52 (м, 1Н), 2,79-2,86 (м, 1Н), 2,92-3,05 (м, 3Н), 3,14-
3,19 (м, 2Н), 3,25-3,30 (м, 2Н), 3,98-4,03 (м, 1Н), 4,10 (кв, 2Н, I = 7,0), 4,47-4,49 (м, 1Н), 4,59-4,63 (м, 1Н), 4,97-5,02 (м, 2Н), 5,72 (д, 1Н, I = 15,8),
6,37 (с, 1Н), 6,71 (дд, 1Н, I = 15,8, 5,5), 7,15-7,39 (м, 10Н), 7,42 (д, 1Н, I = 8,1), 8,00 (д, 1Н, I = 8,1), 8,18 (д, 1Н, I = 8,1). Аналитически определено (С33Н43Н5О7) С, Н, Ν.
Пример 38. Синтез промежуточных соединений р1, 02 и р3.
Получение промежуточного соединения: 1-ацетил-3-(трифенилфосфанилидин)пирролидин-2-он.
2,4-Дибромбутирид (полученный в соответствии с Пайа е! а1., 1. Мей. СПет. 1987, νο1. 30, 1995) (46,1 г, 188,2 ммоль) в ТГФ (1 л) охлаждают до 0°С и обрабатывают раствором литий бис(триметилсилиламида) (40,9 г, 244,6 ммоль) в ТГФ (200 мл). Этот раствор держат при 0°С в течение 2,5 ч и затем выливают в насыщенный солевой раствор (800 мл), экстрагируют этилацетатом (2 л) и сушат (Мд§О4). Упаривание дает 25,5 г 3-бромпирролидин-2-она в виде коричневого масла. Это вещество обрабатывают Ас2О (76 мл) и нагревают с обратным холодильником в течение 5 ч. Упаривание с последующей очисткой (фильтрация через силикагель, элюент ЕЮАс) дает 28 г 1-ацетил-3-бромпирролидин-2-он в виде темного масла. Добавляют ТГФ (272 мл) и трифенилфосфин (42,8 г,
163,3 ммоль) и полученный раствор нагревают с обратным холодильником в течение 8 ч. После охлаждения до 23 °С образуется осадок 1ацетил-3-(трифенилфосфанил)пирролидин-2-онбромида, его собирают путем фильтрации (27,1 г). Концентрированно маточного раствора с последующим охлаждением до 0°С, дает дополнительно 6,6 г. Объединенное вещество в СН2С12 (1 л) промывают 1н №ЮН (100 мл) и затем насыщенным солевым раствором (2x100 мл). Упаривание органического слоя дает 26,9 г (37% общий выход) 1-ацетил-3-(трифенилфосфанилидин)пирролидин-2-она в виде рыжеватокоричневого масла. 1Н ЯМР (СОС13) δ 7,76-7,32 (15Н, м), 3,90-3,85 (2Н, м), 2,50 (3Н, с), 2,56-2,30 (2Н, м).
Получение промежуточного соединения: метиловый эфир 2-т-бутоксикарбонил-3-(тбутилдиметилсиланокси)пропионовой кислоты.
Метиловый эфир Вос-Э-серина (20,0 г, 91,2 ммоль) в ΌΜΡ (300 мл) обрабатывают имидазолом (18,6 г, 273,7 ммоль) и затем ТВ8С1 (13,0 г, 86,7 ммоль). Раствор держат при комнатной температуре (к. т.) в течение 8 ч и затем промывают насыщенным водным раствором хлорида аммония (300 мл) и экстрагируют этилацетатом (800 мл). Органический слой промывают насыщенным солевым раствором (300 мл) и затем сушат (Мд§О4), получая 30,2 г (100%) метилового эфира 2-т-бутоксикарбонил-3-(тбутилдиметилсиланокси)пропионовой кислоты в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (СОС13) δ 5,32 (1Н, д, I = 8,3), 4,33 (1Н, дт, I = 8,8, 2,7), 4,02 (1Н, дд, I = 10,1, 2,6), 3,80 (1Н, дд, I = 9,8,
3,1), 3,72 (3Н, с), 1,43 (9Н, с), 0,85 (9Н, с), 0,0 (6Н, с).
Получение промежуточного соединения: тбутиловый эфир {1-(1-ацетил-2-оксопирролидин-3-илиденметил)-2-(т-бутилдиметилсиланилокси)этил}карбамовой кислоты.
Метиловый эфир 2-т-бутоксикарбонил-3(т-бутилдиметилсиланокси)пропионовой кислоты (12,7 г, 38,0 ммоль) в толуоле (190 мл) охлаждают до -78°С и обрабатывают раствором диизобутилалюминий гидрида (15,6 мл, 87,4 ммоль) в толуоле (175 мл). Внутреннюю температуру поддерживают ниже -70°С. Раствор держат при -78°С в течение еще 90 мин и затем добавляют метанол (7,7 мл, 190 ммоль). При -78°С добавляют 1-ацетил-3-(трифенилфосфанилидин) пирролидин-2-он (11,1 г, 28,6 ммоль) в СН2С12 (50 мл) и полученный раствор оставляют нагреваться до комнатной температуры и держат в течение 30 мин. Добавляют раствор тартрата калия, натрия (150 г) в воде (600 мл) и интенсивно перемешивают в течение 30 мин. Смесь экстрагируют этилацетатом (4x250 мл), сушат (Мд§О4) и упаривают. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле дает 7,04 г (60%) тбутиловый эфир {1-(1-ацетил-2-оксопирролидин-3-илиденметил)-2-(т-бутилдиметилсиланил окси)этил}карбамовой кислоты в виде бесцветного масла. !Н ЯМР (СБС13) δ 6,59 (1Н, дт, 1 =
8,7, 2,9), 4,98 (1Н, д, 1 = 6,8), 4,37-4,25 (1Н, м),
3,77 (2Н, т, 1 = 7,3), 3,70-3,58 (2Н, м), 2,90-2,80 (1Н, м), 2,75-2,60 (1Н, м), 5,53 (3Н, с), 1,41 (9Н, с), 0,87 (9Н, с), 0,04 (6Н, с).
Получение промежуточного соединения: тбутиловый эфир {2-гидрокси-1-(2-оксопирролидин-3-илиденметил)этил}карбамовой кислоты.
т-Бутиловый эфир {1-(1-ацетил-2-оксопирролидин-3-илиденметил)-2-(т-бутилдиметилсиланилокси)этил}карбамовой кислоты (9,18 г, 22,2 ммоль) в ТГФ (150 мл) обрабатывают ТВАБ (22,2 мл 1 М раствора в ТГФ, 22,2 ммоль) при 0°С и держат в течение 1 ч. Добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония и перемешивают в течение 10 мин и затем раствор экстрагируют этилацетатом (2x200 мл). Органический слой сушат (Мд§О4) и затем упаривают. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле дает 4,82 г (73%) бесцветного масла. Это вещество помещают в метанол (160 мл), обрабатывают карбонатом калия (223 мг, 1,62 ммоль) и держат в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем смесь обрабатывают твердой лимонной кислотой (311 мг, 1,62 ммоль) и добавляют этилацетат (800 мл). Раствор фильтруют через силикагель. Упаривание дает 4,30 г (73% общий выход) т-бутиловый эфир {2-гидрокси-1-(2оксопирролидин-3-илиденметил)этил}карбамовой кислоты в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (СБС13) δ 7,03 (1Н, шир. с), 6,35 (1Н, дт, 1 = 8,6,
2,6), 5,37 (1Н, д, 1 = 6,5), 4,40-4,20 (1Н, м), 3,66 (шир. с, ЗН), 3,4 (2Н, т, 1 = 6,7), 3,10-2,80 (1Н, м), 2,80-2,70 (1Н, м), 1,41 (9Н, с).
Получение промежуточного соединения: тбутилового эфира { 2-гидрокси-1-(2-оксипирролидин-3-илметил)этил} карбамовой кислоты (смесь диастереомеров) (01).
т-Бутиловый эфир {2-гидрокси-1-(2-оксопирролидин-3-илиденметил)этил}карбамовой кислоты (4,30 г, 16,8 ммоль) в этилацетате (168 мл) обрабатывают 5% палладием на угле (1,78 г) и гидрируют при атмосферном давлении в течении 1 ч. Смесь фильтруют и затем упаривают, получая 3,92 г (91%) т-бутилового эфира {2гидрокси-1-(2-оксипирролидин-3-илметил) этил}карбамовой кислоты в виде бесцветного масла (1,5:1 смесь диастереомеров): 'Н ЯМР (СБС13) δ 6,99 (1Н, с), 5,49 (1Н, д, 1 = 8,4), 3,70-
3,50 (3Н, м), 3,38-3,20 (2Н, м), 2,60-2,20 (2Н, м), 2,00-1,70 (2Н, м), 1,65-1,45 (1Н, м), 1,37 (9Н, с).
Получение промежуточного соединения: тбутиловый эфир {2-гидрокси-1-(К-2-оксипирролидин-3-илметил)этил}карбамовой кислоты (02).
т-Бутиловый эфир {2-гидрокси-1-(2-оксопирролидин-3-илиденметил)этил} карбамовой кислоты (98 мг, 0,39 ммоль) в метаноле (5 мл) обрабатывают (К)-В1ЫАР-КиС1 (19 мг, 0,02 ммоль), и затем помещают в атмосферу водорода (1200 ρδΐ (фунтов/кв. дюйм), 84,48 кг/см2) при 50°С в течение 48 ч. Раствор упаривают и затем фильтруют через силикагель (элюент: 10%
МеОН-ЕЮАс). Упаривание дает 75 мг (75%) тбутиловый эфир {2-гидрокси-1-(К-2-оксипирролидин-3-илметил)этил}карбамовой кислоты в виде бесцветного масла (9:1 смесь диастереомеров): 1Н ЯМР (СБС13) δ 6,32 (1Н, шир. с),
5,40 (1Н, д, 1 = 7,5), 3,82 (1Н, шир. с), 3,71-3,63 (2Н, м), 3,34-3,31 (2Н, м), 2,45-2,30 (2Н, м), 2,091,86 (2Н, м), 1,70-1,63 (1Н, м), 1,42 (9Н, с).
Получение промежуточного соединения: тбутиловый эфир {2-гидрокси-1-(8-2-оксипирролидин-3-илметил)этил}карбамовой кислоты (03).
т-Бутиловый эфир {2-гидрокси-1-(2-оксопирролидин-3-илиденметил)этил}карбамовой кислоты (0,10 г, 0,39 ммоль) в метаноле (5 мл) обрабатывают (§)-В1ЫАР-КиС1 (19 мг, 0,02 ммоль) и затем помещают в атмосферу водорода (1200 рз1, 84,48 кг/см2) при 50°С в течение 48
ч. Раствор упаривают и затем фильтруют через силикагель (элюент: 10% МеОН-ЕЮАс). Упаривание дает 74 мг (74%) т-бутиловый эфир {2гидрокси-1-(8-2-оксипирролидин-3-илметил) этил}карбамовой кислоты в виде бесцветного масла (смесь диастереомеров 9:1): 1Н ЯМР (СБС13) δ 6,66 (1Н, шир. с), 5,51 (1Н, д, 1 = 8,2), 3,72-3,57 (3Н, м), 3,34-3,31 (2Н, м), 2,52-2,33 (2Н, м), 2,20-1,86 (1Н, м), 1,86-1,70 (1Н, м), 1,62-
1,50 (1Н, м), 1,40 (9Н, с).
Результаты биохимических и биологических тестов, проведенных с использованием различных соединений данного изобретения, описаны ниже.
Биохимические и биологические тесты Ингибирование 3С протеаз риновирусов.
Готовят базовые растворы (50 мМ, в ДМСО) различных соединений; разведения делают в том же растворителе. Протеазы ЗС рекомбинантных риновирусов (см. В1тсй е1 а1., РнпПсабоп оί тесотЫпаи! Питан гЫиоу1ги8 14 ЗС рго1еазе ехргеззеб ίη ЕзсйетюЫа сой, Рго1ет Ехрг. Риг. 1995, 6(5), 609-618) из серотипов 14, 16 и 2 получали с помощью следующих стандартных хроматографических методик: (1) ионно-обменной с использованием О Берйагозе Раз! Е1о\т от Рйаттааа; (2) аффинной хроматографии с использованием АГП-6е1 В1ие от Вюгаб; и (3) разделения по размеру с использованием Берйабех 6-100 от Рйаттааа. Каждый анализируемый образец содержит 2% ДМСО, 50 мМ ίτίδ рН 7,6, 1 мМ ЕБТА, тестируемое соединение в определенной концентрации, субстрат с концентрацией приблизительно 1 мкМ и протеазу с концентрацией 50-100 нМ. 3начения коьД получают из реакций, инициируемых путем добавления фермента в большей степени, чем субстрата. Активность КУР измеряют в анализе переноса флюоресцентной резонансной энергии. Субстратом является ^-концевой)
ПАВСУЬ-(С1у-Агд-А1а-Уа1-Рйе-С1п-С1у-РгоУаЮ^-ЕЭА^. В нерасщепленном пептиде, флюоресценция ΗΟΛΝ8 гасится проксимальным фрагментом ПАВСУЬ. Если пептид расщеплен, гашение уменьшается, и активность измеряют как увеличение флюоресцентного сигнала. Данные анализируют, используя стандартные программы нелинейной аппроксимации (ΈπζΓίΙ). они показаны в табл. 1 и 2, приведенных ниже. В табл. 1 все данные приведены для 3С протеаз риновирусов из НЕУ серотипа-14 (полученных из инфекционного кДНК клона, конструированного Όγ. ЕоЬеП ЕнескеП, Iп8111и1е Гог Мо1еси1аг У1го1о§у, Ишуегайу оГ ^18соп8ш, МаФзоп, XV18сопзт). Табл. 2 демонстрирует протеазаингибирующую активность соединений против протеаз из некоторых риновирусов серотипов, отличающихся от ЕУР серотипа-14. Данные в колонке, обозначенной к^/Ш рассчитывают из роста кривых в ферментативных начальных экспериментах.
Антириновирусный клеточный культуральный анализ Н1-НеЬа.
В этом клеточном защитном анализе способность соединений защищать клетки от НЕУ инфекции измеряют с помощью ХТТ метода уменьшения окрашивания, который описан в Vе^81о^ еΐ а1., 1. №111. Сапсег Ш8к 1989, уо1. 81, 577-586.
Н1-НеЬа клетки инфицируют ΗΚУ-14 с величиной инфекции (т.о.1.) 0,13 (вирусных частиц/клетку), или ложно инфицируют только средой. Инфицированные или ложно инфицированные клетки ресуспендируют при 8х105 клеток на мл и инкубируют с соответствующими концентрациями тестируемых соединений. Через два дня к тестируемым плашкам добавляют ХТТ/РМ8 и количество образующегося формазана определяют спектрофотометрически при 450/650 нм. 3начение ЕС50 рассчитывают как концентрацию соединения, которая увеличивает процент продукции формазана в обработанных соединением и инфицированных вирусом клетках до 50% от продуцируемого ложно инфицированными клетками, не обработанными соединением. 50% цитотоксичную дозу (СС50) рассчитывают как концентрацию соединения, которая уменьшает процент продукции формазана в обработанных соединением и ложно инфицированных вирусом клетках до 50% от продуцируемого ложно инфицированными клетками, не обработанными соединением. Терапевтический индекс (Т) рассчитывают путем деления значения СС50 на значение ЕС50.
Все штаммы риновирусов человека (НЕУ) для использования в этом анализе были получены от Атепсап Туре СТ111иге С’о11ес1юп (американская коллекция культур микроорганизмов) (АТСС), за исключением ΗΚУ серотипа-14 (полученным из инфекционного кДНК клона, конструированного Όγ. ЕоЬеП ЕиескегК ЕъШШе Гог Мо1еси1аг У1го1о§у, Ишуегайу оГ V^8соπ8^π.
Ма618оп, V^8соπ8^π). Образцы НЕУ размножали и проводили вирусные анализы на клетках Н1НеЬа (АТСС). Клетки выращивали в минимальной эссенциальной среде, содержащей 10% фетальную бычью сыворотку, полученной от ЫГе Тес11по1още8 (СаййегаЬигд, МО).
Соединения анализировали по сравнению с контрольными соединениями νΓΝ 51711, νΓΝ 52084 и νΓΝ 54954 (полученными от 81ег11пдΧνΗΚίπΌρ Ркагтасеи11са18), пиродавир (полученный от 1ап88еп Ркагтасен11са18) и плеконарил (полученный в соответствии со способом, описанным в Э|апа еΐ а1., 1. Меб. Скет. 1995, уо1. 38, 1355). Антивирусные данные, полученные для тестируемых соединений показаны в табл. 1 и 3, где все данные приведены для НЕУ серотипа-14, если в круглых скобках не указано иначе. Обозначение ΝΏ определяет, что значение не было определено для этого соединения.
Таблица 1
Активность против НЕУ серотип-14
Соединение | Ингибирование протеаз коь/Р], М'1 с'1 | 3ащита клетки ЕС50, мкМ |
Пример 31 (Соединение сравнения #2) | 25,000 | 0,610 |
Пример 35 (А-26) | 239,000 | 0,030 |
Пример 33 (А-24) | 257,000 | 0,100 |
Пример 36 (А-27) | 18,000 | 1,600 |
Пример 32 (Соединение сравнения #3) | 62,500 | 0,380 |
Пример 34 (А-25) | 500,000 | 0,030 |
Пример 5 (А-4) | 270,000 | 0,100 |
Пример 8 (А-7) | 980,000 | 0,004 |
Пример 7 (А-6) | 248,000 | 0,420 |
Пример 9 (А-8) | 900,000 | ΝΏ |
Пример 6 (А-5) | 1,500,000 | 0,005 |
Пример 12 (С-1) | 68,400 | 0,100 |
Пример 18 (С-2) | 270,000 | 0,002 |
Пример 10 (В-1) | 240,000 | 0,100 |
Пример 20 (В-4) | 500,000 | 0,030 |
Пример 17 (В-2) | 1,090,000 | 0,005 |
Пример 1 (Соединение сравнения #1) | 573 | >320,000 |
Пример 2 (А-1) | 260,000 | 0,250 |
Пример 3 (А-2) | 46,900 | 1,600 |
Пример 4 (А-3) | 310,000 | 0,050 |
Пример 11 (А-10) | 108,000 | 0,14 |
Пример 13 (А-11) | 108,000 | 0,03 |
Пример 14 (А-9) | 66,000 | 1,80 |
Пример 15 (А-12) | 59,300 | 0,40 |
Пример 16 (А-13) | 95,800 | 0,20 |
Пример 19 (В-3) | 465,000 | 0,18 |
Пример 21 (А-14) | 54,500 | 0,48 |
Пример 22 (А-15) | 237,100 | 0,22 |
Пример 23 (А-16) | 172,800 | 0,45 |
Пример 24 (А-17) | 167,000 | 0,06 |
Пример 25 (А-18) | 292,000 | 1,50 |
Пример 26 (А-19) | 27,750 | 25,10 |
Пример 27 (А-20) | 1,020 | 12,60 |
Пример 28 (А-21) | 17,800 | 2,50 |
Пример 29 (А-22) | 2,400 | ΝΏ |
Пример 30 (А-23) | 26,000 | ΝΏ |
Таблица 2 Активность против других серотипов НКУ
Соединение | Серотип риновируса | коьД М-1с-1 |
Соединение сравнения #2 | (16) | 6,500 |
II | (89) | 3,400 |
II | (2) | 2,000 |
Соединение сравнения #3 | (2) | 8,000 |
II | (16) | 16,900 |
(А-24) | (2) | 31,000 |
Таблица 3
Антириновирусная активность
Номер | НКУ | ЕС50, мкМ | СС50, мкМ | Ή |
Соединение сравнения #1 | >320,000 | >320 | - | |
(А-1) | 0,250 | >100 | >400 | |
(2) | 0,410 | ΝΏ | >243 | |
(1Α) | 1,000 | ΝΏ | >100 | |
(89) | 0,220 | ΝΏ | >450 | |
(А-2) | 1,600 | >100 | >63 | |
(А-3) | 0,050 | >10 | >200 | |
(А-4) | 0,100 | >100 | >1000 | |
(А-5) | 0,005 | >10 | >2000 | |
(2) | 0,010 | ΝΏ | >1000 | |
(16) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(39) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(89) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(10) | 0,050 | ΝΏ | >200 | |
(1А) | 0,030 | ΝΏ | >333 | |
(3) | 0,050 | ΝΏ | >200 | |
(9) | 0,040 | ΝΏ | >250 | |
(12) | 0,060 | ΝΏ | >166 | |
(13) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(17) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(25) | 0,180 | ΝΏ | >55 | |
(30) | 0,060 | ΝΏ | >166 | |
(38) | 0,130 | ΝΏ | >76 | |
(87) | 0,210 | ΝΏ | >47 | |
(А-6) | 0,420 | >100 | >237 | |
(А-7) | 0,004 | >10 | >2500 | |
(2) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(16) | 0,040 | ΝΏ | >250 | |
(39) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(89) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(10) | 0,060 | ΝΏ | >166 | |
(1А) | 0,030 | ΝΏ | >333 | |
(3) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(9) | 0,040 | ΝΏ | >250 | |
(12) | 0,070 | ΝΏ | >143 | |
(13) | 0,030 | ΝΏ | >333 | |
(17) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(25) | 0,200 | ΝΏ | >50 | |
(30) | 0,090 | ΝΏ | >111 | |
(38) | 0,170 | ΝΏ | >58 | |
(87) | 0,590 | ΝΏ | >16 | |
(А-8) | ΝΏ | ΝΏ | ΝΏ | |
(В-1) | 0,100 | >100 | >1000 | |
(1А) | 0,300 | ΝΏ | >333 | |
(10) | 0,400 | ΝΏ | >250 | |
(А-10) | 0,140 | >100 | >714 | |
(С-1) | 0,100 | >10 | >100 | |
(А-11) | 0,030 | 50 | 1667 | |
(А-9) | 1,800 | >100 | >55 | |
(А-12) | 0,400 | >100 | >250 | |
(А-13) | 0,200 | >10 | >50 | |
(В-2) | 0,005 | >100 | >20000 | |
(2) | 0,020 | ΝΏ | >5000 |
(16) | 0,010 | ΝΏ | >10000 | |
(39) | 0,050 | ΝΏ | >2000 | |
(89) | 0,009 | ΝΏ | >11111 | |
(10) | 0,020 | ΝΏ | >5000 | |
(1А) | 0,020 | ΝΏ | >5000 | |
(3) | 0,020 | ΝΏ | >5000 | |
(9) | 0,006 | ΝΏ | >16666 | |
(12) | 0,050 | ΝΏ | >2000 | |
(13) | 0,010 | ΝΏ | >10000 | |
(17) | 0,010 | ΝΏ | >10000 | |
(25) | 0,030 | ΝΏ | >3333 | |
(30) | 0,040 | ΝΏ | >2500 | |
(38) | 0,070 | ΝΏ | >1428 | |
(87) | 0,060 | ΝΏ | >1666 | |
(С-2) | 0,002 | >10 | >5000 | |
(2) | 0,004 | ΝΏ | >2500 | |
(16) | 0,010 | ΝΏ | >1000 | |
(39) | 0,010 | ΝΏ | >1000 | |
(89) | 0,004 | ΝΏ | >2500 | |
(10) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(1А) | 0,010 | ΝΏ | >1000 | |
(3) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(9) | 0,010 | ΝΏ | >1000 | |
(12) | 0,040 | ΝΏ | >250 | |
(13) | 0,007 | ΝΏ | >1428 | |
(17) | 0,007 | ΝΏ | >1428 | |
(25) | 0,070 | ΝΏ | >142 | |
(30) | 0,030 | ΝΏ | >333 | |
(38) | 0,050 | ΝΏ | >200 | |
(87) | 0,020 | ΝΏ | >500 | |
(В-3) | 0,180 | >100 | >543 | |
(В-4) | <0,030 | >100 | >3333 | |
(А-14) | 0,480 | >100 | >208 | |
(А-15) | 0,220 | >100 | >454 | |
(1А) | 7,100 | ΝΏ | >14 | |
(10) | 2,700 | ΝΏ | >37 | |
(А-16) | 0,45 | >100 | >222 | |
(1А) | 4,80 | ΝΏ | >21 | |
(10) | 4,50 | ΝΏ | >22 | |
(А-17) | 0,06 | >100 | >1786 | |
(1А) | 1,80 | ΝΏ | >56 | |
(10) | 3,30 | ΝΏ | >30 | |
(А-18) | 1,50 | >100 | >67 | |
(А-19) | 25,10 | >100 | >4 | |
(А-20) | 12,60 | >100 | >8 | |
(А-21) | 2,50 | >100 | >40 | |
(А-22) | ΝΏ | ΝΏ | ΝΏ | |
(А-23) | ΝΏ | ΝΏ | ΝΏ | |
Соединение сравнения #2 | 0,61 | >320 | >524 | |
(16) | 2,30 | >320 | >139 | |
(89) | 6,30 | >320 | >50 | |
(10) | 0,60 | >320 | >533 | |
Соединение сравнения #3 | 0,38 | >320 | >842 | |
(А-24) | 0,10 | >100 | >1000 | |
(А-25) | 0,03 | >100 | >3333 | |
(А-26) | 0,03 | >100 | >3333 | |
(А-27) | 1,60 | >100 | >62 | |
№ΙΝ51711 | 0,78 | >60 | >77 | |
^ΙΝ 52084 | 0,07 | >10 | >143 | |
№ΙΝ 54954 | 2,13 | >63 | >30 | |
Пиродавир | 0,03 | >10 | >300 | |
Плеконарил | 0,01 | >10 | >1000 |
Антикоксакивирусный клеточный культуральный анализ.
Типы вирусов Коксаки А-21 (СΑУ-21) и В3 (СУВ-3) были получены от Αте^^сап Туре СиНиге СоПесНоп (АТСС. КоскуШе, МО). Образцы вирусов размножали и антивирусные анализы проводили на клетках Н1-НеЬа АТСС).
Клетки выращивали в минимальной эссенциальной среде, содержащей 10% фетальную бычью сыворотку (ЫГе Тесйио1од1е8, ОаййегаЬшд, ΜΌ).
Способность соединений защищать клетки от САУ-21 и от СУВ-3 инфекции измеряли с помощью ХТТ метода уменьшения окрашивания. Этот метод описан в \Уе151о\у е1 а1., 1. №11. Сапсег 1и§1. 1989, уо1. 81, 577-586. Клетки Η1Иейа инфицировали САУ-21 или СУВ-3 с величиной инфекции (т.о.1.), составляющей 0,025 или 0,075, соответственно, или проводили ложное инфицирование одной средой. Клетки Η1Чейа вносили в количестве 4x104 клеток на лунку в 96-луночный планшет и инкубировали с соответствующими концентрациями тестируемого соединения. Через один (СУВ-3) или два (САУ-21) дня к тестируемым плашкам добавляют ХТТ/РМ8 и спектрофотометрически определяют количество образовавшегося формазана при 450/650 нм. 3начение ЕС50 рассчитывают как концентрацию соединения, которая увеличивает продукцию формазана в обработанных соединением и инфицированных вирусом клетках до 50% от продуцируемого неинфицированными клетками, не обработанными соединением. 50% цитотоксичную дозу (СС50) рассчитывают как концентрацию соединения, которая уменьшает продукцию формазана в обработанных соединением и неинфицированных вирусом клетках до 50% от продуцируемого неинфицированными клетками, не обработанными соединением. Терапевтический индекс (ΤΙ) рассчитывают путем деления значения СС50 на значение ЕС50.
Соединения анализировали по сравнению с контрольными соединениями νΐΝ 54954 (полученными от 81егйид-’№т1йгор Рйагтасеийсак), пиродавир (полученный от 1аи88еи Рйагтасеийсак) и плеконарил (полученный в соответствии со способом, описанным в П1аиа е1 а1., 1. Меб. Сйет. 1995, уо1. 38,1355). Антивирусные данные, полученные для тестируемых соединений, против САУ-21 и СУВ-3 показаны в табл. 4.
Таблица 4
Антикоксакивирусная активность
Соединение | Штамм | ЕС50, мкМ | СС50, мкМ | Т1 |
(А-5) | САУ-21 | 0,23 | >10 | >43 |
СУВ-3 | 1,00 | ΝΏ | >10 | |
(В-2) | САУ-21 | 0,16 | >100 | >625 |
СУВ-3 | 0,18 | ΝΏ | >555 | |
νΐΝ 54954 | САУ-21 | > 100,00 | >100 | ΝΏ |
СУВ-3 | > 100,00 | ΝΏ | ΝΏ | |
Пиродавир | САУ-21 | > 100,00 | >100 | ΝΏ |
СУВ-3 | > 100,00 | ΝΏ | ΝΏ | |
Плеконарил | САУ-21 | 0,09 | >10 | >107 |
СУВ-3 | > 10,00 | ΝΏ | ΝΏ |
Анти-Есйо-вирусный и -энтеровирусный клеточный культуральный анализ.
Есйо-вирус типа 11 (ЕУ 11) и энтеровирус типа 70 (ЕУ 70) были получены от АТСС (КоскуШе, ΜΌ). Образцы вирусов размножали и антивирусные анализы проводили на клетках МКС-5 (АТСС). Клетки выращивали в минимальной эссенциальной среде, содержащей 10% фетальную бычью сыворотку (й!Ге ТесйпоЕщех ОаййегаЬигд, ΜΌ).
Способность соединений защищать клетки от ЕУ 11 или ЕУ 70 инфекции измеряли с помощью ХТТ метода уменьшения окрашивания ^ей1о\\' е1 а1., 1. №111. Саисег 1и§1. 1989, уо1. 81, 577-586). Клетки МКС-5 инфицировали ЕУ 11 или ЕУ 70 при значении т.о.1., составляющем 0,003 или 0,004, соответственно, или проводили ложное инфицирование одной средой. Инфицированные или неинфицированные клетки добавляли в количестве 4x104 клеток на лунку и инкубировали с соответствующими концентрациями соединения. Через четыре дня к тестируемым плашкам добавляют ХТТ/РМ8 и спектрофотометрически определяют количество образовавшегося формазана при 450/650 нм. 3 начение ЕС50 рассчитывают как концентрацию соединения, которая увеличивает продукцию формазана в обработанных соединением и инфицированных вирусом клетках до 50% от продуцируемого неинфицированными клетками, не обработанными соединением. 50% цитотоксичную дозу (СС50) рассчитывают как концентрацию соединения, которая уменьшает продукцию формазана в обработанных соединением и неинфицированных вирусом клетках до 50% от продуцируемого неинфицированными клетками, не обработанными соединением. Терапевтический индекс (Т1) рассчитывают путем деления значения СС50 на значение ЕС50.
Соединения анализировали по сравнению с контрольными соединениями пиродавир (полученный от 1аи88еи Рйагтасеийсак) и плеконарил (полученный в соответствии с П1аиа е1 а1., 1. Меб. Сйет. 1995, уо1. 38, 1355). Антивирусные данные, полученные для тестируемых соединений, против ЕУ 11 и ЕУ 70, показаны в табл. 5.
Таблица 5
Анти-Есйо-вирусная и антиэнтеровирусная активность
Соединение | Штамм | ЕС50, мкМ | СС50, мкМ | Т1 |
(А-5) | ЕУ-11 | 0,080 | >10 | >125 |
ЕУ-70 | 0,040 | ΝΏ | >250 | |
(В-2) | ЕУ-11 | 0,010 | >100 | >10000 |
ЕУ-70 | 0,003 | ΝΏ | >33333 | |
Пиродавир | ЕУ-11 | 3,700 | >10 | >3 |
ЕУ-70 | 0,060 | ΝΏ | >167 | |
Плеконарил | ЕУ-11 | 0,160 | >10 | >62 |
ЕУ-70 | ΝΏ | ΝΏ | ΝΏ |
Хотя данное изобретение описано в выражениях предпочтительных воплощений и конкретных примеров, специалистам в данной области известно, что различные изменения и модификации могут быть сделаны без отклонения от духа и сферы притязаний данного изобретения. Таким образом, следует понимать, что данное изобретение не ограничивается вышепри99
100 веденным подробным описанием, но определяется прилагаемыми пунктами формулы изобретения и их эквивалентами.
Claims (78)
1,2,4-оксадиазолила.
1,2,4-оксадиазолил.
1. Соединение формулы I (I) где Υ представляет -Ν(Κγ)-, -С(Ку)2- или -О-, где каждый Ку независимо представляет Н или линейный или разветвленный С1-4алкил;
К1 представляет -Н, -Р, С1-6алкил с линейной или разветвленной, насыщенной или ненасыщенной цепью, возможно, замещенный галогеном; -ОН, -8Н или 0-алкильную группу;
К2 и К3, каждый независимо, представляют Н;
или где п является целым числом от 0 до 5, А1 представляет СН или Ν, А2 и каждый А3 независимо выбраны из С(К41)(К41), Ν(Κ41), 8, 8(О), 8(0)2 и О и А4 представляет НН или ΝΚ41, где каждый К41 независимо представляет Н или С1-4алкил с линейной или разветвленной цепью при условии, что не более двух гетероатомов встречается последовательно в изображенном выше цикле, образованном А1, А2, (А3)п, А4 и С=0, и, по меньшей мере, один из К2 и К3 представляет ух 0 4 1 -‘сЮ-нн, .
К5 и К6, каждый независимо, представляют Н, или С1-6арилалкильную группу, арильная часть которой, возможно, замещена галогеном или С1-4алкилом;
К7 и К8, каждый независимо, представляют Н, С1-6алкильную группу, возможно, замещенную нафтилом или имидазолом;
К9 представляет пятичленный гетероцикл, имеющий от одного до трех гетероатомов, выбранных из О, Ν и 8; и
Ζ и Ζ1, каждый независимо, представляют Н или группу С02К21, где К21 представляет Н, С1-6алкильную группу, возможно, замещенную пиридилом;
при условии, что Ζ и Ζ1 не являются оба Н;
или Ζ и Ζ1 вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют фуранон;
или его пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват.
2. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.1, где К2 и К3, каждый независимо, представляют
Н;
где п является целым числом от 0 до 5, каждый
К41 независимо представляет Н или С1-4алкил с линейной или разветвленной цепью и стереохимия атома углерода, отмеченного звездочкой (*), может быть К или 8; при условии, что, по меньшей мере, один из К2 и К3 представляет или
3. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.1, где Υ представляет -Ν(Κ^-, где Ку является Н или линейным или разветвленным С1-4алкилом.
4. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.3, где Ζ и Ζ1, каждый независимо, выбраны из Н, -С02К21, где К21 представляет Н, С1-6алкильную группу, возможно, замещенную пиридилом;
при условии, что Ζ и Ζ1 не являются оба Н; или Ζ и Ζ1 вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют фуранон.
5. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.3, где К1 представляет Н, Р или метил.
6. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.3, где, по меньшей мере, один из К2 и К3 представ ляет
7. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.6, где один из К5 и К5 представляет Н, а другой представляет арилалкильную группу, возможно, замещенную галогеном или С1-4алкилом.
8. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.3, где один из К5 и К5 представляет Н, а другой представляет арилалкильную группу, возможно, замещенную галогеном или С1-4алкилом.
9. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.3,
101
102 где один из В5 и В6 представляет Н, а другой представляет незамещенный или замещенный фенилметил.
10. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.3, где В7 и В8, каждый независимо, представляют Н, С1-6алкильную группу, возможно, замещенную нафтилом или имидазолом.
11. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.3, где один из В7 и В8 представляет Н, а другой представляет 2-пропил, 2-метил-2-пропил, 2метил-1-пропил, нафтилметил.
12. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.3, где В9 представляет пятичленный гетероцикл, имеющий, по меньшей мере, один гетероатом азота и один гетероатом кислорода.
13. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.3, где В9 выбран из замещенных или незамещенных 1,2-оксазолила, 1,3-оксазолила и 1,2,4оксадиазолила.
14. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.3, где В9 представляет 3-изоксазолил или 5изоксазолил, незамещенный или замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из метила и галогенов.
15. Соединение по п.3 формулы БА
О Яу О Я2 Ζ
Н О 1¾ Н Я, (1-А’Э где В1, В2, В6, В7, В9, Ву, Ζ и Ζ1 такие, как определены в п.3, или его пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват.
16. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.15, где В2 представляет или Ζ и Ζ1 вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют фуранон;
В2 представляет
В6 представляет незамещенный или замещенный фенилметил;
В7 представляет Сц6алкильную группу, возможно, замещенную нафтилом или имидазолом; и
В9 представляет 3-изоксазолил или 5изоксазолил, незамещенный или замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из метила и галогенов.
17. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.15, где Ву представляет Н или метил;
В1 представляет Н, Е или метил;
Ζ и Ζι, каждый независимо, выбран из Н, -СО2В21, где В21 представляет Н, Сц6алкильную группу, возможно, замещенную пиридилом;
при условии, что Ζ и Ζ1 не являются оба Н;
В7 представляет С(СН3)3, Ζ1 представляет СО2СН2СН3 и В9 представляет
В2 представляет
В6 представляет
103
104
К7 представляет СН(СН3)2, Ζ1 представляет СО2СН2СН3 и К9 представляет
К2 представляет СН2СН2С(О)ХН2 К6 представляет
К7 представляет СН(СН3)2, Ζ1 представляет СО2СН2СН3 и К9 представляет
К2 представляет
К6 представляет
К7 представляет С(СН3)3, Ζ1 представляет СО2СН2СН3 и К9 представляет
К2 представляет
К6 представляет
К7 представляет СН(СН3)2, Ζ1 представляет СО2СН2СН3 и К9 представляет или
К2 представляет
К6 представляет
К7 представляет С(СН3)3, Ζ1 представляет СО2СН2СН3 и К9 представляет
18. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.17, где В7 выбирают из 2-пропила, 2-метил-2пропила, 2-метил-1-пропила и нафтилметила.
19. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.15, где Ву, В1 и Ζ каждый представляет Н, и
В2 представляет СН2СН2С(О^Н2, В6 представляет СН2РЬ, В7 представляет СН2СН(СН3)2, Ζ1 представляет СО2СН2СН3 и В9 представляет
В2 представляет СН2СН2С(О)МН2, В6 представляет СН2РЬ, В7 представляет СН2СН(СН3)2, Ζ1 представляет СО2СН2СН3 и В9 представляет
В2 представляет СН2СН2С(О^Н2, В6 представляет
В7 представляет С(СН3)3, Ζ1 представляет СО2СН2СН3 и В9 представляет
В2 представляет СН2СН2С(О)ИН2 В6 представляет
20. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фарма цевтически приемлемая соль или сольват по
п.15, где Ку представляет СН3, К1 и Ζ каждый представляет Н, и
К2 представляет СН2СН2С(О)ХН2, К6 представляет
К7 представляет й г
Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и К9 представляет
К2 представляет СН2СН2С(О)ХН2, Кб представляет СН2Рй, К7 представляет СН2СН(СН3)2, и К9 представляет
К2 представляет СН2СН2С(О)ХН2, К6 представляет
К7 представляет ссг и К9 представляет
К2 представляет СН2СН2С(О^Н2, К6 представляет
К7 представляет СН2СН(СН3)2, и К9 представляет или
К2 представляет СН2СН2С(О)ХН2, К6 представляет
К7 представляет и К9 представляет
105
106
21. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фарма- цевтически приемлемая соль или сольват по
п.15, выбранные из группы, состоящей из
22. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.1, где Υ представляет -СН2-.
23. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фарма цевтически приемлемая соль или сольват по п.22, где Ζ и Ζ1, каждый независимо, выбран из Н, -СО2К21, где Κ2ι представляет Н, С1-6 алкильную группу, возможно, замещенную пи ридилом;
при условии, что Ζ и Ζ1 не являются оба Н; или Ζ и Ζ1 вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют фуранон.
24. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фарма цевтически приемлемая соль или сольват по п.22, где Κ1 представляет Н, Е или метил.
25. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.22, где, по меньшей мере, один из К2 и К3 представляет
26. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.25, где один из Κ5 и Κ6 представляет Н, а другой представляет арилалкильную группу, возможно, замещенную галогеном или С1-4алкилом.
27. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фарма цевтически приемлемая соль или сольват по п.22, где один из Κ5 и Κ6 представляет Н, а другой представляет арилалкильную группу, возможно, замещенную галогеном или С1-4алкилом.
28. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.22, где один из Κ5 и Κ6 представляет Н, а другой представляет незамещенный или замещенный фенилметил.
29. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.22, где Κ7 и Κ8, каждый независимо, представляют Н или С1-6алкильную группу, возможно, замещенную нафтилом или имидазолом.
30. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.22, где один из Κ7 и Κ8 представляет Н, а другой представляет С1-6алкильную группу, возможно, замещенную нафтилом или имидазолом.
31. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.22, где один из Κ7 и Κ8 представляет Н, а другой представляет 2-пропил, 2-метил-2-пропил, 2-метил-1-пропил и нафтилметил.
32. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.22, где К9 представляет пятичленный гетероцикл, имеющий, по меньшей мере, один гетероатом азота и один гетероатом кислорода.
33. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.32, где К9 представляет незамещенный или замещенный 1,2-оксазолил, 1,3-оксазолил и
34. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.32, где К9 представляет 3-изоксазолил или 5изоксазолил, незамещенный или замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из метила и галогенов.
35. Соединение по п.22 формулы ГВ
О Н7 о ίΥ/ί н о н где Κ1, Κ2, Κ6, Κ7, Κ9, Ζ и Ζ1 такие, как определены в п.22, или его пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват.
36. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.35, где Κ2 представляет
107
108
В7 представляет СН(СН3)2, Ζ представляет
Н, Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и В9 представляет или
37. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.35, где
В1 представляет Н, Р или метил;
где Ζ и Ζ1, каждый независимо, выбраны из Н или группы -СО2В21, где В21 представляет Н, С16алкильную группу, возможно, замещенную пиридилом;
при условии, что Ζ и Ζ1 не являются оба Н; или Ζ и Ζ1 вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют фуранон;
В2 выбирают из
В6 представляет незамещенный или замещенный фенилметил;
В7 представляет С1-6алкильную группу, возможно, замещенную нафтилом или имидазолом; и
В9 представляет 3-изоксазолил или 5изоксазолил, незамещенный или замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из метила и галогенов.
38. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.37, где В7 выбирают из 2-пропила, 2-метил-2пропила, 2-метил-1-пропила и нафтилметила.
39. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.35, где В1 представляет Н и
В2 представляет СН2СН2С(О^Н2, Кб представляет
В7 представляет СН(СН3)3, Ζ представляет
Н, Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и В9 представляет
В2 представляет
В6 представляет
В2 представляет
В6 представляет
В7 представляет СН(СН3)2, Ζ и Ζ1 вместе представляют где карбонильная группа находится в цисположении по отношению к водороду В1, и В9 представляет или
В2 представляет
В6 представляет
В7 представляет СН(СН3)2, Ζ представляет
Н, Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и В9 представ ляет
40. Соединение по п.1 формулы или его пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват.
41. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.1, где Υ представляет -О-.
42. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.41, где Ζ и Ζ1, каждый независимо, выбраны из Н, -СО2В21, где В21 представляет Н, С1-6 алкильную группу, возможно, замещенную пиридилом;
109
110 при условии, что Ζ и Ζ1 не являются оба Н; или Ζ и Ζ1 вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют фуранон.
43. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.41, где К1 представляет Н, Р или метил.
44. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.41, где, по меньшей мере, один из К2 и К3 представляет
Т-А® или
45. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.44, где один из К5 и К6 представляет Н, а другой представляет арилалкильную группу, возможно, замещенную галогеном или С1-4алкилом.
46. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.41, где один из К5 и К6 представляет Н, а другой представляет арилалкильную группу, возможно, замещенную галогеном или С1-4алкилом.
47. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.41, где один из К5 и К6 представляет Н, а другой представляет незамещенный или замещенный фенилметил.
48. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.41, где К7 и К8, каждый независимо, представляют Н, С1-6алкильную группу, возможно, замещенную нафтилом или имидазолом.
49. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.41, где один из К7 и К8 представляет Н, а другой представляет С1-6алкильную группу, возможно, замещенную нафтилом или имидазолом.
50. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.41, где один из К7 и К8 представляет Н, а другой представляет 2-пропил, 2-метил-2-пропил, 2-метил-1-пропил или нафтилметил.
51. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.41, где К9 представляет пятичленный гетероцикл, имеющий, по меньшей мере, один гетероатом азота и один гетероатом кислорода.
52. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.41, где К9 выбирают из замещенных или неза- мещенных 1,2-оксазолила, 1,3-оксазолила и
53. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.41, где К9 представляет 3-изоксазолил или 5изоксазолил, незамещенный или замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из метила и галогенов.
54. Соединение по п.41 формулы 1-С
О к? О Ζ н О ГЦ Η Βί П-С”) где К1, К2, К6, К7, К9, Ζ и Ζ1 такие, как определены в п.42, или его пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват.
55. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.54, где К2 представляет или
56. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.54, где К1 представляет Н, Р или метил;
где Ζ и Ζ1, каждый независимо, выбраны из Н, -СО2К21, где К21 представляет Н, С1-6алкильную группу, возможно, замещенную пиридилом; при условии, что Ζ и Ζ1 не являются оба Н;
или Ζ и Ζ1 вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют фуранон;
К2 выбирают из
7x5
О , или
К6 представляет незамещенный или замещенный фенилметил;
К7 представляет С1-6алкильную группу, возможно, замещенную нафтилом или имидазо лом; и
К9 представляет 3-изоксазолил или 5изоксазолил, незамещенный или замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из метила и галогенов.
57. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемая соль или сольват по
п.56, где К7 выбирают из 2-пропила, 2-метил-2пропила, 2-метил-1-пропила и нафтилметила.
58. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически активный метаболит, фарма111
112 цевтически приемлемая соль или сольват по п.54, где В1 представляет Н, Ζ представляет Н, и
В2 представляет СН2СН2С(О^Н2, Кб пред ставляет
В7 представляет СН(СН3)2, Ζ1 представляет СО2СН2СН3, и В9 представляет
В2 представляет
В6 представляет
В7 представляет СН(СН3)2, Ζ1 представляют СО2СН2СН3, и В9 представляет
59. Соединение, выбранное из группы, со- или его пролекарственная форма, фармацевтически приемлемая соль, фармацевтически активный метаболит или сольват.
60. Применение соединения, фармацевтически приемлемой соли, пролекарственной формы, фармацевтически активного метаболита или сольвата по п.1 или 59, в качестве антипикорнавирусного агента, антипикорнавирусная активность которого соответствует значению ЕС50, меньшему или равному 100 мкМ по клеточному культуральному анализу Н1-НеЬа.
61. Применение соединения, пролекарственной формы, фармацевтически активного метаболита, фармацевтически приемлемой соли или сольвата по п.1 или 59 в качестве антипикорнавирусного агента, антириновирусная активность которого соответствует значению ЕС50, меньшему или равному 10 мкМ по клеточному культуральному анализу Н1-НеЬа.
62. Соединение, имеющее формулу, выбранную из группы, состоящей из где В1, В2, Ζ и Ζ1 являются такими, как определены в п.1, η равно 1 или 2;
Ву представляет Н или линейный или разветвленный С1-4алкил;
В6 представляет арилалкильную группу, возможно, замещенную галогеном или С1-4 алкилом;
В7 представляет С1-6алкильную группу, возможно, замещенную нафтилом или имидазо лом;
В9 представляет пятичленный гетероцикл, имеющий от одного до трех гетероатомов, выбранных из О, Ν и 8, или его пролекарственная форма, фармацевтически приемлемая соль, фармацевтически активный метаболит или сольват.
63. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически приемлемая соль, фармацевтически активный метаболит или сольват по п.61, где В1 представляет Н, Г или С1-6алкильную группу с линейной или разветвленной, насыщенной или ненасыщенной цепью, возможно, замещенной галогеном;
Ву представляет Н или метил;
В6 представляет арилалкильную группу, возможно, замещенную галогеном или С1-4 алкилом;
В7 представляет С1-6алкильную группу, возможно, замещенную нафтилом или имидазо лом;
В9 представляет пятичленный гетероцикл, имеющий от одного до трех гетероатомов, выбранных из О, Ν и 8, где, по меньшей мере, один из гетероатомов представляет азот, и являющийся незамещенным или замещенным одним или двумя заместителями, выбранными из линейных или разветвленных С1-4алкильных групп и галогенов;
или его пролекарственная форма, фармацевтически приемлемая соль, фармацевтически активный метаболит или сольват.
64. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически приемлемая соль, фармацев113
114 тически активный метаболит или сольват по п.62, где К6 представляет арилметил;
К7 представляет С1-6алкильную группу, возможно, замещенную нафтилом или имидазолом;
К9 представляет 3-изоксазолил или 5изоксазолил, незамещенный или замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из метила и галогенов, и где Ζ представляет Н, и Ζ1 каждый представляет -СООК21, где К21 представляет Н, С1-6алкильную группу, возможно, замещенную пиридилом.
65. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически приемлемая соль, фармацевтически активный метаболит или сольват по п.64, где Κι представляет Н или Г;
К6 представляет арилметил, и
К7 выбирают из 2-пропила, 2-метил-2пропила, 2-метил-1-пропила и арилметила.
66. Соединение, пролекарственная форма, фармацевтически приемлемая соль, фармацевтически активный метаболит или сольват по п.65, где К6 представляет фенилметил, где фенильный фрагмент необязательно имеет от одного до трех заместителей, выбранных из галогена, линейного или разветвленного С1-4алкила.
67. Соединение по п.62, выбранное из группы, состоящей из или его пролекарственная форма, фармацевтически приемлемая соль, фармацевтически активный метаболит или сольват.
68. Фармацевтическая композиция, включающая:
(a) терапевтически эффективное количество, по меньшей мере, одного антипикорнавирусного агента, который представляет соединение, пролекарственную форму, фармацевтически активный метаболит, фармацевтически приемлемую соль или сольват, как определено в п.1 или 59; и (b) фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, среду для лекарства или эксципиент.
69. Способ лечения болезненного состояния млекопитающего, опосредованного протеазной активностью пикорнавирусов, включаю щий введение млекопитающему, нуждающемуся в нем, терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения, пролекарственной формы, фармацевтически активного метаболита, фармацевтически приемлемой соли или сольвата, как определено в п.1 или 59.
70. Способ ингибирования активности 3С протеаз пикорнавирусов, включающий приведение в контакт 3С протеазы пикорнавирусов с эффективным количеством, по меньшей мере, одного соединения, пролекарственной формы, фармацевтически активного метаболита, фармацевтически приемлемой соли или сольвата, как определено в п.1 или 59.
71. Способ по п.70, где 3С протеазой пикорнавирусов является риновирусная протеаза.
72. Соединение формулы где р является целым числом от 0 до 5;
А11 представляет СН или N А12 и каждый А13 независимо выбирают из С(К61)(К61), N(^1), 8, 8(О), 8(О)2 и О и А14 представляет ИН или ИК61, где каждый К61 независимо представляет Н, С1-6алкильную группу с линейной или разветвленной, насыщенной или ненасыщенной цепью, замещенной галогеном, или арильную группу, представляющую моно- или бициклический радикал, содержащий 6-10 атомов углерода в кольце, возможно, замещенную галогеном или С1-4алкилом; ацил, при условии, что не более двух гетероатомов встречается последовательно в цикле, образованном Ап, А12, (А13)р, А14 и С=О;
каждый К141 независимо представляет Н или линейный или разветвленный С1-4алкил;
К52, К53 и К54, каждый независимо, выбирают из Н, гидроксила, С1-6алкильной группы с линейной или разветвленной, насыщенной или ненасыщенной цепью, возможно замещенной галогеном, или арильной группы, представляющей моно- или бициклический радикал, содержащий 6-10 атомов углерода в кольце, возможно, замещенной галогеном или С1-4алкилом; ацила; или любые два из К52, К53 и К54 вместе образуют Н, С1-6алкильной группы с линейной или разветвленной, насыщенной или ненасыщенной цепью, возможно, замещенной галогеном, СО2(С1-С6)алкила, С^^С^СДалкила и СО2(арила); и
К55 и К56, каждый независимо, представляют Н или подходящую защитную группу для азота;
или фармацевтически приемлемая соль упомянутого соединения.
73. Соединение формулы
115
116 где р является целым числом от 0 до 5;
К51 представляет Н, С1-6алкильную группу с линейной или разветвленной, насыщенной или ненасыщенной цепью, возможно, замещенной галогеном, ацил;
К52, К5З и К54, каждый независимо, выбирают из Н, гидроксила, С1-6алкильной группы с линейной или разветвленной, насыщенной или ненасыщенной цепью, замещенной галогеном, или арильной группы, представляющей моноили бициклический радикал, содержащий 6-10 атомов углерода в кольце, возможно, замещенной галогеном или С1-4алкилом, ацила;
или любые два из К52, К5З и К54 вместе образуют =О или =С(К57)(К58), где К57 и К58, каждый независимо, выбирают из Н, С1-6алкильной группы с линейной или разветвленной, насыщенной или ненасыщенной цепью, возможно, замещенной галогеном; СО2(С1-С6)алкила, СЩ^Щ-СД алкила и СО2(арила); и
К55 и К56, каждый независимо, представляют Н или подходящую защитную группу для азота;
или фармацевтически приемлемая соль упомянутого соединения.
74. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п.7З, где р равно 1 или 2.
75. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п.74, где К52, К5З и К54, каждый независимо, выбирают из Н, алкокси, гидрокси и карбонила.
76. Соединение по п.7З, выбранное из группы, состоящей из где ₽Ν является подходящей защитной группой для азота, и с.| равно 1 или 2;
или фармацевтически приемлемая соль упомянутого соединения.
77. Соединение по п.7З, выбранное из группы, состоящей из где ВОС представляет т-бутоксикарбонил или фармацевтически приемлемую соль упомянутого соединения.
78. Соединение формулы где ВОС представляет т-бутоксикарбонил.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US8382898P | 1998-04-30 | 1998-04-30 | |
US9835898P | 1998-08-28 | 1998-08-28 | |
PCT/US1999/000260 WO1999057135A1 (en) | 1998-04-30 | 1999-01-05 | Antipicornaviral compounds, their preparation and use |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA200001133A1 EA200001133A1 (ru) | 2001-08-27 |
EA003856B1 true EA003856B1 (ru) | 2003-10-30 |
Family
ID=26769788
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA200001133A EA003856B1 (ru) | 1998-04-30 | 1999-01-05 | Антипикорнавирусные композиции, их получение и применение |
Country Status (34)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US6531452B1 (ru) |
EP (1) | EP1073672B1 (ru) |
JP (1) | JP2003526600A (ru) |
KR (1) | KR20010043004A (ru) |
CN (1) | CN1198838C (ru) |
AP (1) | AP2000001934A0 (ru) |
AT (2) | ATE308557T1 (ru) |
AU (1) | AU768539B2 (ru) |
BG (1) | BG104899A (ru) |
BR (1) | BR9910573A (ru) |
CA (1) | CA2326763A1 (ru) |
DE (2) | DE69910762T2 (ru) |
DK (1) | DK1073672T3 (ru) |
EA (1) | EA003856B1 (ru) |
EE (1) | EE200000621A (ru) |
ES (1) | ES2205760T3 (ru) |
GE (1) | GEP20022824B (ru) |
HK (1) | HK1034722A1 (ru) |
HR (1) | HRP20000623A2 (ru) |
HU (1) | HUP0400624A2 (ru) |
IL (1) | IL138609A0 (ru) |
IS (1) | IS5633A (ru) |
LT (1) | LT4846B (ru) |
LV (1) | LV12666B (ru) |
NO (1) | NO20005411L (ru) |
NZ (1) | NZ507633A (ru) |
OA (1) | OA11503A (ru) |
PL (1) | PL351250A1 (ru) |
PT (1) | PT1073672E (ru) |
SI (1) | SI20428A (ru) |
SK (1) | SK284714B6 (ru) |
TR (1) | TR200003159T2 (ru) |
WO (1) | WO1999057135A1 (ru) |
YU (1) | YU66000A (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014035297A1 (ru) * | 2012-08-30 | 2014-03-06 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Фарминтерпрайсез" | Способ и средство для лечения и профилактики заболеваний, вызываемых (+) рнк-содержащими вирусами |
Families Citing this family (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EA003856B1 (ru) | 1998-04-30 | 2003-10-30 | Агурон Фармасьютикалз, Инк. | Антипикорнавирусные композиции, их получение и применение |
PE20010517A1 (es) * | 1999-08-24 | 2001-05-16 | Agouron Pharma | Las rutas sinteticas eficientes para la preparacion de los inhibidores de la proteasa del rinovirus y los intermedios claves |
US6774243B2 (en) | 1999-08-24 | 2004-08-10 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Efficient synthetic routes for the preparation of rhinovirus protease inhibitors and key intermediates |
US6355807B1 (en) | 1999-08-24 | 2002-03-12 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Efficient synthetic routes for the preparation of rhinovirus protease inhibitors and key intermediates |
PE20020157A1 (es) * | 1999-12-03 | 2002-02-22 | Agouron Pharma | Compuestos derivados de piridona como inhibidores de proteasas de picornaviral 3c, composiciones, sus usos farmaceuticos y materiales para su sintesis |
PE20011277A1 (es) | 2000-04-14 | 2002-01-07 | Agouron Pharma | Compuestos y composiciones antipicornavirales, sus usos farmaceuticos y los materiales para su sintesis |
CA2412618A1 (en) * | 2000-06-14 | 2001-12-20 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Antipicornaviral compounds and compositions, their pharmaceutical uses, and materials for their synthesis |
WO2004093860A1 (en) * | 2003-04-21 | 2004-11-04 | Pfizer Inc. | Inhibitors of sars related coronavirus proteinase |
US20040235952A1 (en) * | 2003-05-05 | 2004-11-25 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Inhibitors of severe acute respiratory syndrome (SARS) 3C-like proteinase |
AU2004312547A1 (en) * | 2003-12-31 | 2005-07-21 | Taigen Biotechnology | Protease inhibitors |
US7462594B2 (en) | 2003-12-31 | 2008-12-09 | Taigen Biotechnology Co., Ltd. | Peptide-like compounds that inhibit coronaviral 3CL and flaviviridae viral proteases |
CN100363346C (zh) * | 2004-10-22 | 2008-01-23 | 清华大学 | 冠状病毒主蛋白酶的小分子抑制剂、制备方法及其应用 |
US7893657B2 (en) * | 2006-12-19 | 2011-02-22 | Anand Kumar Chavakula | Multi-power charger and battery backup system |
KR100891699B1 (ko) | 2007-04-10 | 2009-04-03 | 광주과학기술원 | 7-아미노-4-((s)-3-(4-플루오로페닐)-2-((r)-3-메틸-2-(5-메틸이소옥사졸-3-카복사미도)부탄아미도)프로판아미도)-7-옥소-2-헵테노에이트 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 바이러스성 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물 |
US7741327B2 (en) | 2008-04-16 | 2010-06-22 | Hoffmann-La Roche Inc. | Pyrrolidinone glucokinase activators |
EP2288615B1 (en) | 2008-05-21 | 2017-06-21 | Genesis Technologies Limited | Selective caspase inhibitors and uses thereof |
US9045524B2 (en) | 2009-05-21 | 2015-06-02 | Novagenesis Foundation | Selective caspase inhibitors and uses thereof |
US8178689B2 (en) | 2010-06-17 | 2012-05-15 | Hoffman-La Roche Inc. | Tricyclic compounds |
CA2833082C (en) | 2011-04-15 | 2019-12-31 | New World Laboratories, Inc. | Selective cysteine protease inhibitors and uses thereof |
CN102838523A (zh) * | 2011-06-23 | 2012-12-26 | 南开大学 | 抗肠病毒71(ev71)戊内酰胺类化合物及其制备方法和用途 |
CN103145608B (zh) * | 2011-12-07 | 2015-09-02 | 南开大学 | 抗肠病毒71(ev71)己内酰胺类化合物及其制备方法和用途 |
CN110105348A (zh) * | 2019-03-08 | 2019-08-09 | 南开大学 | 新型迈克尔受体类肠病毒71型抑制剂的制备及用途 |
BR112021024310A2 (pt) | 2019-06-05 | 2022-02-15 | Univ Emory | Peptidomiméticos para o tratamento de infecções por coronavírus e picornavírus |
US20230157998A1 (en) | 2020-03-06 | 2023-05-25 | Pfizer Inc. | Methods of Inhibiting SARS-CoV-2 Replication and Treating Corona Virus Disease 2019 |
WO2022156692A1 (zh) * | 2021-01-22 | 2022-07-28 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 一种环肽类病毒蛋白酶抑制剂,其制备方法,及其在抗病毒药物中的应用 |
Family Cites Families (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4652676A (en) | 1985-05-06 | 1987-03-24 | General Foods Corporation | L-aminodicarboxylic acid alkenes |
AU2251892A (en) | 1991-06-14 | 1993-01-12 | Chiron Corporation | Inhibitors of picornavirus proteases |
US5374623A (en) | 1992-08-20 | 1994-12-20 | Prototek, Inc. | Cysteine protease inhibitors effective for in vivo use |
US5514778A (en) | 1993-07-01 | 1996-05-07 | Eli Lilly And Company | Anti-picornaviral agents |
US5486623A (en) | 1993-12-08 | 1996-01-23 | Prototek, Inc. | Cysteine protease inhibitors containing heterocyclic leaving groups |
IL112759A0 (en) | 1994-02-25 | 1995-05-26 | Khepri Pharmaceuticals Inc | Novel cysteine protease inhibitors |
IT1269511B (it) | 1994-05-17 | 1997-04-01 | Univ Degli Studi Milano | Derivati di acidi ammino-solfonici , loro impiego nella sintesi di pseudopeptidi e procedimento per la loro preparazione |
US5498616A (en) | 1994-11-04 | 1996-03-12 | Cephalon, Inc. | Cysteine protease and serine protease inhibitors |
IT1281031B1 (it) | 1995-11-17 | 1998-02-11 | Carlo Chiaves | Struttura prefabbricata per la realizzazione di opere costruite a cielo aperto, particolarmente per cavalcavia autostradali, |
IL120310A (en) | 1996-03-01 | 2002-02-10 | Akzo Nobel Nv | Serine protease inhibitors and pharmaceuticals containing them |
DE69733137T2 (de) * | 1996-05-14 | 2006-03-02 | Agouron Pharmaceuticals, Inc., San Diego | Inhibitoren von picornavirus 3c protease und verfahren zur herstellung und verwendung |
US5856530A (en) | 1996-05-14 | 1999-01-05 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Antipicornaviral compounds and methods for their use and preparation |
WO1997049668A1 (en) | 1996-06-13 | 1997-12-31 | Smithkline Beecham Corporation | Inhibitiors of cysteine protease |
US6331554B1 (en) | 1997-03-28 | 2001-12-18 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Antipicornaviral compounds, compositions containing them, and methods for their use |
US6020371A (en) | 1997-03-28 | 2000-02-01 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Antipicornaviral compounds compositions containing them and methods for their use |
AU736550B2 (en) * | 1997-03-28 | 2001-08-02 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Antipicornaviral compounds, compositions containing them, and methods for their use |
US5962487A (en) | 1997-12-16 | 1999-10-05 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Antipicornaviral compounds and methods for their use and preparation |
EA003856B1 (ru) | 1998-04-30 | 2003-10-30 | Агурон Фармасьютикалз, Инк. | Антипикорнавирусные композиции, их получение и применение |
US6369226B1 (en) | 1999-06-21 | 2002-04-09 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Substituted benzamide inhibitors of rhinovirus 3C protease |
DE60014670T2 (de) | 1999-08-04 | 2006-03-09 | Agouron Pharmaceuticals, Inc., San Diego | Antipicornavirale verbindungen und zusammensetzungen, ihre pharmazeutische verwendung, und materialien für ihre synthese |
CN1157391C (zh) | 1999-08-24 | 2004-07-14 | 阿古龙制药有限公司 | 制备异噁唑甲酰胺及其类似物的方法和中间体 |
PE20010517A1 (es) | 1999-08-24 | 2001-05-16 | Agouron Pharma | Las rutas sinteticas eficientes para la preparacion de los inhibidores de la proteasa del rinovirus y los intermedios claves |
PE20020157A1 (es) | 1999-12-03 | 2002-02-22 | Agouron Pharma | Compuestos derivados de piridona como inhibidores de proteasas de picornaviral 3c, composiciones, sus usos farmaceuticos y materiales para su sintesis |
-
1999
- 1999-01-05 EA EA200001133A patent/EA003856B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-01-05 BR BR9910573-0A patent/BR9910573A/pt not_active IP Right Cessation
- 1999-01-05 DE DE69910762T patent/DE69910762T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1999-01-05 CA CA002326763A patent/CA2326763A1/en not_active Abandoned
- 1999-01-05 AT AT03009409T patent/ATE308557T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-01-05 AU AU20287/99A patent/AU768539B2/en not_active Ceased
- 1999-01-05 HU HU0400624A patent/HUP0400624A2/hu unknown
- 1999-01-05 NZ NZ507633A patent/NZ507633A/en unknown
- 1999-01-05 SK SK1604-2000A patent/SK284714B6/sk unknown
- 1999-01-05 AP APAP/P/2000/001934A patent/AP2000001934A0/en unknown
- 1999-01-05 KR KR1020007011851A patent/KR20010043004A/ko not_active Application Discontinuation
- 1999-01-05 GE GEAP19995606A patent/GEP20022824B/en unknown
- 1999-01-05 WO PCT/US1999/000260 patent/WO1999057135A1/en not_active Application Discontinuation
- 1999-01-05 DE DE69928140T patent/DE69928140D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-01-05 PL PL99351250A patent/PL351250A1/xx not_active Application Discontinuation
- 1999-01-05 EE EEP200000621A patent/EE200000621A/xx unknown
- 1999-01-05 LT LT2000109A patent/LT4846B/lt not_active IP Right Cessation
- 1999-01-05 EP EP99900780A patent/EP1073672B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-01-05 ES ES99900780T patent/ES2205760T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-01-05 DK DK99900780T patent/DK1073672T3/da active
- 1999-01-05 YU YU66000A patent/YU66000A/sh unknown
- 1999-01-05 JP JP2000547104A patent/JP2003526600A/ja not_active Withdrawn
- 1999-01-05 TR TR2000/03159T patent/TR200003159T2/xx unknown
- 1999-01-05 IL IL13860999A patent/IL138609A0/xx unknown
- 1999-01-05 AT AT99900780T patent/ATE248186T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-01-05 CN CNB998056278A patent/CN1198838C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1999-01-05 SI SI9920041A patent/SI20428A/sl not_active IP Right Cessation
- 1999-01-05 PT PT99900780T patent/PT1073672E/pt unknown
- 1999-04-29 US US09/301,977 patent/US6531452B1/en not_active Expired - Fee Related
-
2000
- 2000-09-20 HR HR20000623A patent/HRP20000623A2/hr not_active Application Discontinuation
- 2000-09-22 IS IS5633A patent/IS5633A/is unknown
- 2000-10-20 OA OA1200000288A patent/OA11503A/en unknown
- 2000-10-27 NO NO20005411A patent/NO20005411L/no not_active Application Discontinuation
- 2000-11-01 BG BG104899A patent/BG104899A/xx unknown
- 2000-12-19 LV LV000162A patent/LV12666B/xx unknown
-
2001
- 2001-08-06 HK HK01105452A patent/HK1034722A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-11-06 US US10/289,982 patent/US6995142B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-08-24 US US11/210,717 patent/US20060046966A1/en not_active Abandoned
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014035297A1 (ru) * | 2012-08-30 | 2014-03-06 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Фарминтерпрайсез" | Способ и средство для лечения и профилактики заболеваний, вызываемых (+) рнк-содержащими вирусами |
US9820970B2 (en) | 2012-08-30 | 2017-11-21 | Obschestvo S Ogranichennoi Otvetstvennostiyu “Pharmenterprises” | Method and agent for the treatment and prophylaxis of diseases caused by (+)RNA-containing viruses |
EA028541B1 (ru) * | 2012-08-30 | 2017-11-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Фарминтерпрайсез" | Способ лечения и профилактики заболеваний, вызываемых (+)рнк-содержащими вирусами |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EA003856B1 (ru) | Антипикорнавирусные композиции, их получение и применение | |
Evans et al. | A stereocontrolled synthesis of hydroxyethylene dipeptide isosteres using novel, chiral aminoalkyl epoxides and. gamma.-(aminoalkyl)-. gamma.-lactones | |
AU779321B2 (en) | Antipicornaviral compounds and compositions, their pharmaceutical uses, and materials for their synthesis | |
US8415378B2 (en) | Isoxazol-3(2H)-one analogs as therapeutic agents | |
US5962487A (en) | Antipicornaviral compounds and methods for their use and preparation | |
US6514997B2 (en) | Antipicornaviral compounds and compositions, their pharmaceutical uses, and materials for their synthesis | |
WO1997043305A1 (en) | Inhibitors of picornavirus 3c proteases and methods for their use and preparation | |
TW200524578A (en) | Protease inhibitors | |
AU736550B2 (en) | Antipicornaviral compounds, compositions containing them, and methods for their use | |
US6906198B1 (en) | Antipicornaviral compounds, their preparation and use | |
US5021439A (en) | Cerebral function ameliorating agents related to Tan-950 A | |
EP1329457B1 (en) | Antipicornaviral compounds, their preparation and use | |
MXPA00010406A (en) | Antipicornaviral compounds, their preparation and use | |
CZ20003986A3 (cs) | Antipicornavirální součeniny a kompozice, jejich farmaceutické použití a materiály pro jejich syntézu |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU |