PT92823A

PT92823A - Processo para a preparacao de eteres 7-arilicos e hetero-arilicos de desacetil--forscolina e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT92823A
Application number: PT92823A
Authority: PT
Inventors: Raymond Walter Koeley Jr; Bettina Spahl; Gerard J O'malley
Original assignee: Hoechst Roussel Pharma
Priority date: 1989-01-11
Filing date: 1990-01-10
Publication date: 1990-07-31
Also published as: NO900119D0; HUT53631A; FI900102A0; NO900119L; EP0378159A1; IL93019A0; FI900102A; JPH02221271A; NZ232057A; ZA90167B; AU4783790A; PH26783A; US4999351A; HU900099D0; CA2007513A1; AU621448B2

Description

£-¾ I c

J

Descrição referente I patente de invenção de HOECHST-ROUSSEL PHAR MACEUTICALS IMCORPOIATSD, norte--americana, industrial e comercial, estabelecida em Route 202--206 Morth, Somerville, New Jersey 08876, Estados Unidos da America, (inventores: llaymond Walter Koeley, Jr. Gerará 3. 0'Malley e Bettina Spahl, residentes nos E.U.A.), para "PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE ÉTERES 7-ARÍLICOS 1 HETSRO-ARÍLICQS DE DESAGEITL-IOESCOLIMA E DE GQM POSIÇÕES farmagSuticas QUE OS CONTÊM”.

DESCRIÇÃO A presente invenção refere-se a iteres 7· -arílicos e 7-heteroarílicos de desacetil-forseolina a seus derivados de

OL

1 (I)

em que Εχ representa hidrogénio, alquilo inferior, aril-alqui

de fórmula RgCO ou um grupo de fórmula %0%i^CHR-12)nC0 eo que n representa o Inteiro 0 ou X,

Rg representa hidrogénio, um grupo de fórmula Κχ^ΟΟ ou um grupo de fórmula Rj^R-, ^NCO*

Ry representa fenilo, naffcilo, furanilo, oxasolilo, tiazolilo, piridinilo, pirimidinilo, purinilo, qui-noLminoou isoquinolinilo, sendo cada um destes grupos insubstituido ou mono- ou poli-substituído por alquilo inferior, halogéneo ou nitroj

Ry representa hidrogénio; ou Εχ e Ry considerados em conjunto formam um grupo de fórmula CO, um grupo de fórmula SO ou um grupo de fórmula CHKRxyRxg*

deles individualmente representa alquilo inferiorj Rg representa hidrogénio ou alquilo inferior}

representa individualmente hidrogénio, alquilo inferior ou aril-alquiio inferior* ou

ao qual estão ligados formam um grupo de fórmula

em que X representa CO, 0, S, um grupo da fórmula ΟΗΙίχ^, ou um grupo da fórmula KR20* Εχ^ representa hidrogénio ou alquilo inferior*

Rx^ representa hidrogénio, alquilo inferior, hidroxi-al-quilo inferior, (alcoxi inferior)-alquilo inferior, — 2 **

I

ou um grupo de formula HGGj^CíUOH) Ci^ $ K-J5 representa hidrogénio, alquilo inferior, hidroxi--alquilo inferior, (alcoxi inferior)-alquilo inferior, um grupo de fórmula

em que s representa o inteiro 1 ou 2, um grupo de fórmula

O ou um grupo de fórmula HOGÍ^CHCOHJCí^, ou um grupo de fórmula (Ct^) t®&21%2» eia que t representa um inteiro compreendido entre 2 a 6* %7 e %.g s^° diferentes e cada um deles re presenta individualmente alquilo inferior; ou

RjL7 e considerados em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados formam um grupo de fórmula /“Λ V_/ em que y representa 0 ou Sj representa hidrogénio, alquilo inferior ou 0^3l %0 representa alquilo inferiorj &2ΐ © K-22 sao Iguais ou diferentes e cada um deles representa individualmente alquilo inferiorj ou R21 e ®22 s®° consfderados em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados formam um grupo de fórmula - 3 -

/Λ \_/£ em que x possui as significações anteriormenfce definidas; R23 representa hidrogénio ou CQB^t

R 24 representa alquilo inferior; e os seus os isómeros opticos e geométricos, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

A presente invenção refere-se também a compostos de fórmula XX CIMjjR-y,

(II) em que

Rg, Ry, R^y e R^g possuem as significações anteriormen te definidas, os quais são úteis como intermediários para a preparação de derivados de forscolina, de acordo com a presente invenção.

De preferência R-jj e R|g representam me tilo. - 4 -

J k

Como subconjunto dos derivados de forscoli na da presente invenção temos a referir os compostos de formu mm la Ϊ em que: a) e Rg considerados em conjunto formam um grupo de fórmula CHHR^ylUg em que R^y e R^g são iguais ou diferentese cada um deles individualmente representa alquilo inferior, de preferencia metilo; (b) R^ representa hidrogénio; (c) Rg representa hidrogénio; (d) Rp Rg e Rg representam hidrogénio; (e> Rg representa CGNR^g (CHoJ^NRo^Ro^ em que R^g representa hidrogénio ou alquilo inferior, de preferencia hidrogénio, e R25 e R2g são iguais ou diferentes e cada um deles representa individualmente hidrogénio ou alquilo inferior, de preferência metilo e u representa um inteiro compreendido entre 2 e 5, de preferencia 2 ou 3; (£) Rj. e R9 representa» hidrogénio e R6 representa COtiRlfi-(CH2 em ^ue rePresenta hidrogénio ou alquilo inferior, de preferência hidrogénio, e R2,-e R2g são iguais ou diferentes e cada um deles representa individualmente hidrogénio ou alquilo inferior, de preferência metilo e u representa um intei ro compreendido entre 2 ou 5,de preferência 2 ou 3; (g) Ry representa fenilo o qual é mono- ou poli-substitui- do por nitro, indicando-se a título de exemplo para-nitrofenilo; (h) Ry representa piridinilo, indicando-se a título de exemplo 2-piri.dinilo ou piridinilo, o qual é mono-ou poli-substituido por halogéneo, indicando-se a título de exemplo 2-(6-fluoro-piridin-2-ilo); (i) Ry representa pirimidinilo, indicando-se a título de referencia pirimidin-2-ilo, ou pirimidinilo, 0 qual ê mono- ou poli-substituido por halogéneo, indican-do-se a título de referência 2-cloro-pirimidin-4- - 5 -

-iloí e (j) R-j representa purinilo ou eventualmente purinllo mono-* ou poli-substituido por alquilo inferior, de preferencia por metilo, indicando-se a titulo de referên cia l-metil-purin-6-ilo.

Ha presente memória descritiva e reivindicações anexas o termo "alquilo” refere-se a radicais hidrocar bonetos de cadeia linear ou ramificada os quais não contêm qualquer insaturação e possuem entre 1 e 8 átomos de carbono tais como metilo, etilo, 1-propilo, 2-propilo, 2-metil-propi-lo, I-pentiio,2-pentilo,3-hexiIo,4-hq)tilo, 2-octilo e semelhantes, 0 temo ”alquenilo" refere-sa a radicais hidrocarbonetos de cadeia linear ou ramificada os quais contêm uma ou várias ligações duplas e possuem entre 1 a 8 átomos de carbono tais como propenilo,pentenilo „ hexanilo, e semelhantes, 0 termo "aleanol" refere-se a um composto formado pela combinação de um grupo alquilo com um radical hidroxi englobando por exemplo o metanol, o etanol, 1- e 2-propanol, 1,2-dimetil-etanol, hexanol, octanol e semelhantes. 0 termo "alcoxi” refere-se a um composto formado por toma combinação de um grupo alquilo com um grupo hidroxi e engloba por exemplo o metoxi, o etoxi, o propoxi, o butoxi, e semelhantes. 0 termo "alcóxido” refere-se a um composto formado pela combinação de um grupo alcoxi com um metal e engloba por exemplo o t-butóxido de potássio, 0 termo "ácido alcanóico" refere-se a um composto formado pela combinação de um grupo carboxilo com um átomo de hidrogénio ou com um grupo alquilo. Os exemplos de ácidos alcanõicos sao o ácido fóraico, o ácido acético, o ácido pro-panóico, o ácido 2,2-dimetiI-acetíco, o ácido hexanõico e semelhantes, 0 termo "halogeneo" refere-se a um membro da família constituída pelos átomos de fluor, cloro, bromo ou iodo. 0 termo "inferior" aplicado a qualquer dos grupos anteriormen te referidos significa um grupo que possui uma estrutura de carbono contendo até 6 átomos de carbono inclusive, 0 termo "arilo" refere-se a um radical orgânico derivado de um hiárocarboneto aromático por remoção de um átomo de hidrogénio, tal como por exemplo o fenilo, o tolilo, o salieilo, - 6 - ^ ?5» çawewtú^-X:;.'·.: -£$-i

o naftilo, etc»

Mas fórmulas apresentadas, os diversos substituintes são ilustrados por ligações ao núcleo da fors-colina, segundo uma de duas notações: uma linha continua (-------) indicando um substituinte que se encontra na orienta ção f> (isto é, sobre o plano da molécula) e uma linha a traço interrompido ¢---) indicando um substituinte que se encontra na orientação ^ (isto é , sob o plano da molécula). As fórmu foram desenhadas de modo a mostrarem os compostos na sua configuração estereoquimica absoluta. Atendendo a que os materi ais de partida que possuantm núcleo de forscolina ocorrem natural mente ou são derivados de materiais que ocorrem naturalmente, tanto eles como os produtos finais possuem um núcleo de forscolina cuja existência estã de acordo com a configuração abso luta simples agora apresentada. Contudo, os processos da pre sente invenção aplicam-se igualmente â síntese de derivados de forscolina das séries racêmicas*

Para alem dos centros õpticos do núcleo da forscolina, os substituintes possíveis podem conter também centro quiral que contribuem para as propriedades õpticas dos compostos da presente invenção e que proporcionam um meio para a sua resolução utilizando métodos convencionais, por exem pio, recorrendo I utilização de ácidos opticamente activos. À presente invenção engloba todos os isõmeros õpticos e formas racêmicas dos compostos da presente invenção, sempre que esses compostos possuem centros quiral para além dos correspondentes ao núcleo do labdano. A síntese dos novos derivados de forscolina da presente invenção realiza-se por processo representativos ilustrados nos Esquemas de Reacçao A e B que antecedem imedia tamente as reivindicações anexas.

Tomando como referência o esquema A, efec-tua-se a preparação dos compostos de fórmula 3 fazendo reagir um composto de fórmula 1 (por exemplo 7-desacetil-forscolina 1,9-dimetil-formamida acetal) com um composto de fórmula R7--Hal, 7 em que K.7 possui as significações anteriormente definidas, e - 7 -

Hal representa halogêneo, para proporcionar um éter arílico 2 o qual I depois hidrolisa do por tratamento com uma mistura de um alcanol e de égua ou com uma mistura de um alcanol, de água e de ácido acético para proporcionar um composto de fórmula 3. A arilação do composto de fórmula 1 efec-tua-se facilmente tratando o composto de fórmula 1 com um halogeneto de arilo ou de heteroarilo na presença de um alcó xido metálico. Os halogenetos de arilo ou de heteroarilo utilizados de acordo com a presente invenção possuem a fõrmu la geral R^-Hal em que

Rj possui as significações anteriormente definidas, e Hal representa halogêneo, englobando por exemplo 2-fluoro-piridina, 2-cloro-pirimidina, 2,6-difluoro-piridina, 1-fluoro-4-nitro-benzeno, 2,4-dinitro--fluoro-benzeno, 2,4-dicloro-pirimidina e 6-cloro~l~metil-pu-rina. A arilação efectua-se em diversos solventes bem conhecidos na especialidade. De entre esses solventes é preferível o tetra-hidrofurano. Os alcóxidos de metal utilizados de acordo com a presente invenção englobam diversas substancias bem conhecidas na especialidade sendo preferível o t-butóxido de potássio. Embora a temperatura ã qual se efectua a arilação não seja crítica, é preferível efectuar a reacção a uma temperatura compreendida aproximadamente entre -2GSC e 1Q0J2C. Ê mais preferencial efectuar a arilação a uma temperatura compreendida aproximadamente entre G2C e 5GSC.

Efectua-se a desacetalação hidrolisando o composto de fórmula 2 com uma mistura de um alcanol e de água ou com uma mistura, de um alcanol, de água e de acido e de acido acético. Entre os alcanóis i possível referir, por exemplo, o metanol, o etanol e o propanol, 0 metanol ê o alcanol preferido. Embora a proporção entre o alcanol e a água não seja critica ê preferível utilizar-se uma proporção de 3 : 1, - 8 -

A desacetalaçao efectua-se a uma temperatura compreendida aproximadamente entre Ô2C e 10O2C, sendo preferível trabalhar a uma temperatura aproximadamente compreendida entre 609C e 702C,

Tomando como referencia o Exemplo B, faz--se a preparação dos compostos de fórmula 6 por um processo idêntico ao utilizado para a preparação dos compostos de fórmula 3 com a excepção de se utilizar um composto de fórmu la 4, em vez de se utilizar um composto de fórmula 1, em que

Rg possui as significações anteriormente definidas.

Os materiais de partida para os processos da presente invenção, conforme representado pelo Esquema A, isto ê, para a preparação de derivados de forscolina de fórmula 1, encontram-se descritos na Patente Norte Americana N2. 4 639 443 publicada em 27 de Janeiro de 1987, a qual aqui se indica a título de referência. Os materiais de partida para os processos da presente invenção, conforme se mostra no Esquema B, para a preparação de derivados de forscolina de fórmula 4, encontram-se descritos na obra publicada sob a designação “PCT-application N2. WO 88/05047”, a qual aqui se indica a título de referência.

As patentes Norte Americanas N2. 4 639 446, publicada a 27 de Janeiro de 1987, N2 4 666 9Θ4 publicada a 19 de Maio de 1987, N2. 4 672 115 publicada a 9 de Junho de 1987, N2. 4 673 752 publicada a 16 de Junho de 1987 e N2. 4 677 103 publicada a 30 de Junho de 1987, as quais aqui se indicam a título de referência, descrevem uma diversidade de métodos que podem ser utilizados para modificar os compostos de forscolina de fórmulas 3 e 6 da presente invenção, na posi ção 1, A Patente cuja referência ê WO 88/05047 descreve mêto dos que podem ser utilizados para modificar na posição 1, os compostos de fórmulas 3 e 6 da presente invenção. Em particu lar, estes métodos podem ser utilizados para a preparação de compostos da presente invenção em que

Rj representa RgR^RgSi, RgCG e R10RuN(CHR12)nCO - 9 - em que

Rj» R^, R^, Rg, R^q, e n possuem as significações anteriormente definidas. S.V. Bhat e et . al, na obra "The Antihypertensive and Positi-velnotropie Diterpene Forskolin: Sffects of Structural Modificai ions on Its Activity", J. Med. Ghem. 26, 487-493 <1983) and S.V. Bhat et al., "Reactioas of Forskolin, A Biologically Active Biterpenoid from Coleus forskolii”, J. Ghem. Soc., Perkin I, 767-771 (1982)” descreve métodos para a modificação de compostos de fórmula 3e 6 da presente invenção, na po sição 1, em que

Rj representa alquilo inferior ou aril-alquilo inferior.

Os ésteres de arilo e de heteroarilo da desacetil-forscolina da presente invenção são úteis para o tratamento do colapso cardíaco devido â sua capacidade para proporcionarem um efeito inotrópico positivo conforme se de-montra pelo acréscimo da força contrãctil num ensaio de aurícula isolada de porco-da-India, o qual se efectua do modo seguinte:

Utiliza-se porcos-da-India macho pesando entre 200 e 300 gramas, os quais são atordoados com uma pancada na parte posterior da cabeça. Remove-se o coração rapidamente e coloca-se num prato de Petri contendo uma solução de Kreb. Procede-se â separação entre os ventriculos e as aurículas, secciona-se as aurículas de modo a individualizar--se a aurícula direita e a aurícula esquerda e prende-se ao vertice da aurícula esquerda ligaduras de seda em O duplo. Fixa-se a aurícula a um par de electrodos de platina e coloca -se em suspensão em 20 ml de um banho tecidual contendo a solução de Kreb, sendo a ventilação feita com uma mistura de 95% de oxigénio e de 5% de dioxido de carbono ã temperatura de 372C. Uma extermidade da aurícula é fixada a um gancho no electrodo e a outra extremidade é ligada a um transdutor de deslocamento de força "Grass FT03”. A tensão de repouso e o tempo de estabilização são idênticos aos descritos nas 1Θ

referencias anteriores. Procedeu-se â estimulação da aurícula a 3 Hz, durante 0,5 mseg. Para o valor máximo de tensão (corrente constante) utilizando-se um estimulador ”Grass S88” e uma unidade de corrente constante. 0 fãrmaco ensaiado é preparado conforme descrito na secção A e ê adicionado ao banho tecidual do mesmo modo. Determina-se para cada contraç ção a alteração na força contráctil relativamente ao sistema de referência e estabeleçe-se um gráfico da alteração da força contráctil (g) em função da concentração de fãrmaco acumulado (jug/ml). A actividade do fármaco ensaiado, isto é, o acréscimo da força contráctil (g) a partir da força estabilizada expressa como variação percentual para uma dada concentração ê determinada graficamente, o mesmo sendo válido para os valores ED^q, isto é, a dose extrapolada (jig/ml) que proporciona um acréscimo da força contráctil de 50% acima da proporção estabilizada.

Os resultados obtidos neste ensaio para os compostos representativos da presente invenção e para um composto de referência encontram-se no quadro que se segue.

QUADRO COMPOSTO CONCENTRAÇÃO ACTIVIDADE INOTRÕPICA ψg/ml) (variação em % da força con tráctil) A1 0,0091 2 50 g3 0,011 50 g4,5 0,0731 50 Motas D hidrato de cloridrato de 7-desaeetil-6-(2-dimetil- -amino-etil-amino-carbonil) -7- (pírimidin-2-il) -forscolina - 11 1

Valor ED^q extrapolado 2 7-desacetil-7-(pirimidin-2-il)forscolina

4) 5) forscolina composto de referência

Consegue-se o tratamento do colapso cardíaco quando os derivados de forscolina da presente invenção são administrados a um paciente que necessite desse tratamen to utilizando-se uma dose eficaz oral, parenteral ou intrave nosa aproximadamente compreendida entre 0«Q1 e 100 mg/kg de peso do corpo, por dia. Considera-se particularmente eficaz a quantidade de 25 mg/kg de peso do Corpo, por dia. Contudo, faz-se observar que para um paciente particular os regimens de dosagem específicos deverão ser ajustados de acordo com as necessidades individuais e de acordo com a opinião profis sional da pessoa que administra ou que supervisiona a administração do composto referido antes. Faz-se observar também que as dosagens agora indicadas são apenas exemplificati vas e não se pretende com isso limitar de qualquer forma o âmbito da pratica da presente invenção. Os compostos da pre sente invenção também são úteis para o tratamento de percla de memória, hipertensão, asma bronquiea, glaucoma e psoriase.

Os compostos da presente invenção englobam: 7-desaeetii-6-(3-dimefcil-amino-propil-amino-carbonil-7-(piri-midin-il)forscolina; 7-desaeetii-6-(4-dimetil-araino-butii-amino~earbonil-7-(pirimi din-2-il)forscolina ; 7-desaeetil-7- (2 ( 3-diraetil-amino-propil-amino ) pirimidin-4-il) forscolina; 7-desacetil-7-(2 (2-dimetil-amino-etil) amino)piriiQÍdin-4-il>-forscolina; 6- acetil-7-desacetii-7-(pirimidin-2-il)forscolina; 7- desacetil-7~(2-eloro-pirimidin-4-il)forscolina; eter 7-desacetil-7-(pirimidin-2-il)£orscolina-6-metílieo; 7-desacetil~6- (metil-amino-carbomil) -7- <pirimidin-2-iI) -forscolina; — 12 - 7-desacetil-7-(pirimdiri-4“Il)£orscoiinaj 7-desaeetil-7-(2-hidr©xi-pirimidia~4-il)-£orsC0linaí 7*desaeetil-7-{4-amino- fenil)forscolinaj 7-desacetil-6,7-bis< 4-amino-fenil)forscolinaj 7 -desacetil-y- ( 4 - dime til-amino-fenii )f o r ô‘ colina f 7 ** desacetil- 6- ( 3-amino-pr opil-amino- earbonil) - 7-pir imidin--2-il)forscolina j 7-desacetil-6- (2-amino-etil-amino-carbonil) -7- (pirimidin-2--il)forscolinaj 7-desacetil-7~(2-amino-fenii)forscolinaj e 7-desaeetil-6-(3~dimetil-amino-propil-amino-carbonil)-7-(piridin- 2-il) forscolina j

As quantidades eficazes dos compostos da presente invenção podem ser administradas a uma paciente por qualquer um dos diversos métodos habituais, por exemplo oralmente em cápsulas ou pastilhas, parenteralmente na forma de soluções ou suspensões esterilizadas, e em alguns casos intravenosamente na forma de soluções esterilizadas.

Os produtos finais de base livre, embora sejam eficazes por si próprios, podem ser formulados e administrados na forma dos seus sais de adição de acido farmaeeuticamente aceitáveis para satisfazer objectivos de estabilidade, conveniência de cristalização, solubilidade acrescida e outros· Os ácidos úteis para a preparação dos sais de adição de ácido farmaceu ticamente aceitáveis de acordo com a presente invenção engio bam os ácidos inorgânicos tais como os ácidos clorídrico, bromídrieo, sulfúrico, nítrico, fosfórico e perclôrico, e tam bem os ácidos orgânicos tais como os ácidos tartárico, cítrico, acético, suceínico, maleico, . fumãrico e oxálico*

Os compostos activos da presente invenção podem ser administrados oralmente, por exemplo, com um dilu-ente inerte ou com um veículo comestível, ou podem ser encerrados em cápsulas de gelatina, ou podem ainda ser comprimidos em pastilhas· Para efeitos de administração terapêutica oral, os compostos activos da presente invenção podem ser incorpora - 13 - X\ (a dos com excipientes e utilizados na forma de pastilhas, comprimidos, cápsulas, elixires, suspensões, xaropes, bolachas, goma de mascar e semelhantes· Essas preparações deverão con ter pelo menos 0,5% de compostos aetivos, mas essa quantidade pode variar consoante a forma particular utilizada e convenientemente pode situar-se entre 4% e 70% do peso da unidade· A quantidade de composto activo nessas composições deve ser tal que se obtenha uma dosagem adequada. As composições e preparações preferenciais de acordo com a presente invenção são preparadas de tal modo que uma forma unitária de dosagem contenha entre 1,0 e 300 mg de composto activo.

As pastilhas, as pílulas, as cápsulas, os comprimidos e outras formas habituais podem conter também os ingredientes seguintes: um ligante tal como a celulose micro-cristalina, goma alcantira ou gelatina: um excipiente tal como o amido ou a lactose, um agente desintegrador tal como o ácido algínico, Primogel, amido de milho e semelhantes; um lubrificante tal como o estearato de magnésio ou "Sterotex"; um deslizante tal como o diõxido de silicio coloidal; e ainda se pode adicionar um agente eduleorante tal como a sacarose ou a sacarina ou um agente aromatizante tal como a hortelã-pimenta, salieilato de metilo ou aro ma de laranja.

Quando a forma unitária de dosagem for uma cápsula esta pode conter, para além do material do tipo anterior, um veículo líquido tal como um óleo gordo. As outras formas unitárias de dosagem podem conter materiais di versos que modifiquem a forma física da unidade de dosagem tais como, por exemplo, os revestimentos. Deste modo, as pastilhas ou as pílulas podem ser revestidas com açúcar, com goma-laca ou com outros agentes de revestimento entérico.

Um xarope pode conter, para além dos compostos aetivos, saca rose como agente eduleorante e ainda diversos conservantes, - 14 -

tintas, corante e aromas. Os materiais utilizados para a preparação das diversas composições deverão ser farmaceuti-camente puros e não tóxicos nas quantidades utilizadas.

Para efeitos de administração terapêutica parenteral os compostos activos da presente invenção podem ser incorporados numa solução ou numa suspensão. Estas preparações deverão conter pelo menos 0,1% de composto activo, mas essa quantidade pode variar entre 0,5 e 5% do seu peso. A quantidade de composto activo nessas composições ê tal que se obtenha uma dosagem adequada. As composições e as preparações preferidas de acordo com a presente invenção são preparadas de modo que uma unidade de dosagem parenteral, contenha entre 0,001 e 10 mg de composto activo.

As soluções ou suspensões podem incorporar também os componentes seguintes: um diluente esterilizado tal como a água para injecções, uma solução salina, óleos estáveis, polietileno-glicois, glicerina, prepileno-glicol ou ainda outros solventes sintáticos ϊ agentes anti-bacterianos tais como o álcool benzílico ou o metil-parabenoj ant i-oxidantes tais como o ácido ascõrbico ou o bi-sul-fito de sódioi agentes queliferos tais como o ácido etileno-diamina--tetra-acêtico j tampões tais como os acetatos, os citratos ou os fosfatas e agentes para ajustar a tonicidade tais como o cio reto de sõdio ou a dextrose.

As preparações parenterais podem ser encerradas em seringas descartáveis ou em frascos de doses múltiplas feitos de vidro ou de plástico.

Os exemplos a seguir apresentados têm apenas objectivos ilustrativos e não constituem qualquer limitação da presente invenção. Todas a$ temperaturas estão em Graus Celcius. - 15 -

Exemplo 1

Preparado de 7-desacetil-7~(plridin'-2~il)£orscolina 1»9-dimetil-f omamida acetal Â uma solução agitada de 1,00 g (2,36 mraol) de 7-desaeetil-forscolina 1,9-dimetil-formamida acetal em 10 ml de tetra-hidrofurano seco adicionou-se 250 mg (2,23 mmol) de t-butoxido de potássio. Adicionou-se â suspensão mais 20 mi de tetra-hidrofurano seguindo-se a adição de 0,20 ml (0,23 gj 2,33 mmol) de 2-fluoro-piridina e depois agitou--se â suspensão â temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto durante 0,5 horas e a uma temperatura compreendida entre 60 e 652G durante 2,5 horas* Arrefeceu-se a solução até ã temperatura ambiente, adicionou-se-lhes 25 mg (0,22nmol) de t-butoxido de potássio seguindo-se depois a adição de 0,05 ml (0,057 gi 0,57 mmol) de 2-fluoro-piridina e agitou-se a solu ção resultante a uma temperatura compreendida entre 60 e 63§C durante 0,5 horas e depois deixou-se arrefecer para a tempera tura ambiente. Verteu-se a solução em água fria/êter, extraiu-se duas vezes com éter, lavou-se com água e com uma solução saturada de cloreto de sódio,secou-se sobre sulfato de sódio e filtrou-se. A evaporação do solvente proporcionou um óleo que se dissolveu um volume mínimo de acetato de etilo e depois submeteu-se a cromatografia intermitente sobre gel de silica, eluindo com 25% de acetato de etilo/hexano. Procedeu-se â combinação das fracções que continham o produto e concentrou-se de modo a proporcionar um sólido branco o qual recristalizou a partir de eiclo-hexano para proporcionar 0,536 (1,07 mmol? 45,3%) de agulhas incolores de 7-desaeetil -7-(pirid-2-il)-forscolina 1,9-dimetil-formamida acetal, p.f, 151-1642C, Verificou-se que o material era puro através de cromatografia de camada fina sobre o gel de silica? 25% de acetato de etilo/hexano, R.^ * 0,15? 30% de acetona/hexano, - 0,4.

Os espectros de IV(CHClg), de BMM(CBGlg) e de massa (MH+=501) foram consistentes com a estrutura atribuída* ANALISES: - 16 -

Calculado para ^28^40^2^6: &Ί ,Π%0 8.05%li 5.6Q2N

Encontrado 67.612C 8.112K 5.6021Ί

Exemplo 2

Preparação de 7-desaeetil-7-(pirldin-2-iÍ")forscolina

Durante 40 horas agitou-se a uma temperatu ra compreendida entre 60 e 702C uma suspensão de 1,0 g (2,0 •i&tiol) de 7-desacetil-7( piridin-2-il)forscolina 1.9-dímetil--formanida acetal (preparada conforme descrito no Exemplo 1) em 50 ml de metanol/água na proporção de 3tl. Deixou-s® a solução arrefecer ati â temperatura ambiente e concentrou-se para proporcionar um óleo. Dissolveu-se o oleo em acetato de etilo e submeteu-se a cromatografia intermitente sobre gel de sílica, eluindo com 252 de acetato de etilo/hexenos. Procedeu-se a combinação das fraceões que continham o produto e concentrou-se para proporcionar ma óleo o qual reerístuli-cou a partir de acetato de etilo/hexanos proporcionando 0,372 g (0,632 rnmolí 41,6%) de 7-desacetíl-£orscolina-7-(piridin--2-il)forscolina, p.f. 148-151SC. Verificou-se que o material era puro por cromatografia de camada fina sobre gel de silicaj 25% do acetato de etilo/hexano, ^ = 0,14; 2% áe metanol/diclorQ-aetano, il^ = 0,27.

Ge espectros de IV(CHC13), de KMKCDGI3) e de massa (ΙΐΓ-446) apresentaram-se consistentes com a estrutura atribuída.

Calculado para 67.392C 7.92%H 3.142Π

Encontrado J 67.52%C 7.902H' 3.11213

Exemplo 3

Preparação de 7-desacetil-7-(6-£luoro-piridin-2-il)--forscolina 1,9-dimetil-f ormamida acetal A uma solução agitada de 5,0 g (11,3 íamol) de 7-desacetiI-forscolina 1,9-diaetil-formamida acetal em 100 mi de tetra-hidrofurano seco, sob uma atmosfera de azoto, adicionou-se 1,33 g (11,9 mmol) de t-butõsido de potássio. Agitou-se a suspensão durante 1 minuto, sob uma atmosfera de azoto, e adicionou-se-lhe 1,28 ml (14,1 mmol) de 2,6-difluoro .piridina. - 17 - + ft.

& A suspensão dissolveu-se gradualmente durante 45 minutos e depois agitou-se a solução durante mais 15 minutos e a seguir verteu-se em gelo/ãgua/acetato de etilo. Depois adicio nou-se ã mistura uma solução saturada de cloreto de sódio e separou-se a camada orgânica, secou-se sobre sulfato de sódio, riitrou-se e concentrou-se para proporcionar um óleo. Purificou-se esse óleo por cromatogra£ia intermitente sobre gel de silica, eluinéo com SOE de acetato de etilo/hexancs. Procedeu-se â combinação das fracções que continham o produto e concentrou-se para proporcionar, após reeristalização a partir de ciclo-hexano/acetato de etilo, 2,19 g (4,22 ismol? 35,SE) de 7-desacetil-7-(6-fluoro-piridin-2-il)-forscoliaa 1,9-dimetil-formamida acetal. p.f. 178-1812C.

Verificou-se que o material era puro por eromatografis de ca mada fina sobre gel de sílica? 20% de acetato de etilo/hexanos, P.£ *» 0,11? 1% de metanol/dieloro-metano, E- - 0,12. . 319)

Os espectros de IV(CHC1«), de IMKCBCl*) e de massa (M!Í*: apresentaram-se consistentes com a estrutura atribuída.

AlafLISES;

Calculada para G28fl39^2®6s 7.58EE 5.40EK

Encontrado 65.07EC 7.55EE 5.41EK

Exemplo 4

Preparação de 7-desacetil-7-(6-fiucrG-Piridin-2--iDforscolina

Durante 72 horas agitou-se a uma temperatura compreendida entre 60 e 702C uma solução de l,2g(2,31 mmol) de 7-desacetil-forscolina-7-(6-fluoro-pirid-2-il)eter 1,9--dimetil-fomamida acetal (preparada conforme descrito no Exemplo 3) em 60 ml de metanol a em 20 ml de água. Deixou-se a solução arrefecer ate â temperatura ambiente e concentrou-se ató se obter um óleo. Dissolveu-se esse óleo em acetato de etilo, secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e coriC.an-trou-se de novo até se obter um óleo. Dissolveu-se esse ma depois subme-de sílica, terial num volume mínimo de acetato de etilo e teu-se a eromatografia intermitente sobre gel - 18 - aluindo com 20% de acetato de etilo/hexanos» seguindo-se o mesmo procedimento com 50¾ de acetato de etilo/hexanos. Procedeu-se à combinação das fracções que continham o produto e concentrou-se até se obter um Óleo © qual cristalizou a partir de ciclo-hesaao/acetato de etilo para proporcionar, em dua3 colheitas, 0,59 g (1,49 mmclj 64,5%) de 7-desacetil-7--(6-fluoro-piridin~2-il)£orscolina, p.f. 166-168SC.

Verificou-se que o material era puro por cromatografia de camada fina sobre gel de sílica; 30% de acetato de etílo/hexanos, R,« - 0,17? «I* 2% de metanol/dicloro-metano, It.c - 0,2.

Os espectros de IV(CHCl^), de SMNíCDCl^) e de massa (0H =464) apresentaram-se consistentes com a estrutura atribuída, MAL1SES;

Calculado para ^25®34^K06Í 64.78%C 7.39%H 3,02£h

Encontrado 64.56%C 7»30%E 3*05aH

Exemplo 5

Preparação de 7-desacetil-7-(pirimidin-2-il)forscolina 1,9-dimetil-£ormamida acetal A uma solução agitada de 5,0 g (11,8 mmol) de 7-desacetil-forscolina 1,9-dimetil-formamiáa acetal em 100 ml de tetra-hidrofur ano seco adisionou-se 1,33 g (11,6 mmol) de t-butóxido de potássio. Agitou-se a suspensão a temperatura ambiente durante alguns minutos e depois adicio-nou-se-lhe 1,6 g (14,0 mmol) de 2-cloro-pirimidina. Agitou--se a mistura durante 3 horas â temperatura ambiente, verteu--se em gelo/água/dicloro-metano e depois separou-se a camada orgânica, lavou-se com uma solução de cloreto de sódio e concentrou-se no vácuo. Dissolveu-se o resíduo num volume mínimo de acetato de etilo e submeteu-se a cromatografia intermitente sobre gel de sílica, eluindo com 30% de acetato de eti-lo/hezano. Procedeu-se â combinação das fracções que continham o produto e concentrou-se no vácuo proporcionando um sólido o qual recristalizou a partir de ciclo-hexano/acetato de etilo para originar 2,00 g (3,99 mmol, 33,6%) de 7-desace-til-7-(pirimidin-2-il)forscolina, p,£. 200-208SC* - 19

Verificou-sa que o material ara puro por cromatografia de camada f5.ua sobre gel de sílica : 30% de acetato de atilo/iLexa-uos. &£ «0,14 j 57 de Qetaaol-dicloro-aataao B.,. = 0,2.

£ JL

Qa espectros de IV(GEClg), de Fdíi(GI)Clg) o de massa (1·ΔΓ«302) apresentaraa-se consistentes coai a estrutura atribuída. álijiLISIiS i

Calculado para ^27^39¾¾: 64.6570 7.842H 3.387$ uiicouCíTâCio i 64.67IC 7.oõ7íí d. 31.'.a

Exemplo t

Preparação de 7-desacetil-7- (pir±midin-2-il) forseolina

Durante 72 koras agitou-se a uma temperatura entre 50 e 602G um solução de 1,0 g (1,99 snaol) de 7-de-sacetil-7-(pirimidin-2-il)forseolina 1,9-dimetil-formamida ace tal (preparada conforme descrito no Sremplo 5) dissolvida numa solução de metanol/agua (3:1). Beirou-se a solução arrefecer ate a temperatura ambiente e concentrou-se até se obter ura óleo viscoso. Dissolveu-se esse óleo em acetato de etilo e submeteu-se a cromatografia intermitente sobre gel de sílica, eluindo com 30% de acetato de etilo/hemanos. Procedeu-se à combinação das fraeções que continham o produto e concentrou-se para proporcionar um sólido branco. Secou-se o sólido no vácuo para se obter 0,69 g (1,55 eol; 77,9%) de 7-desaceti3L -7-pirimiáin-2-il)forscolina, p.f. 194-19820.

Verificou-se que o material era puro por cromatografia de camada fina sobre gel áe sílica: acetato de etilo/keranos 1:1, ÍU = 0,29; 5% de metanol/dicloro-metano, E- « 0,18.

Os espectros de XVCCHCl^), de SMMCGDCl^) e de massa (Mjí+=447) apresentaram-se consistentes com a estrutura atribuída. ai.sÃliX bn o :

Calculado para 0η/Η.,ΑΜ90~» 64,5520 7.67%H 6.282$

Encontrado 64,30%C 7.647K 6.182$

Cnemp lo 7

Preparação de 7-(2-cloro-piriaidin-4-il)-7-áesaeetil--forseolina 1,9-dimetil-formamida acetal - 20 -

Â uma solução de lOg. agitada(23,6 maiol) da 7-de-sacetil-íorscolina 1,9-dímetil-formamida acatai e de 10 g (67,1 iaaiol) de 2,4-dieioro-pirimiáin& em 200 mi de tetra-Iii-drofurano seco, em banho de gelo, adicionou-se progressivamen te, durante 10 minutos, 2,65 g (23,7 mmol) de t-butoicido de potássio. Agitou-se a mistura durante 0,5 horas, verteu-se era gelo/bicarbcnato de sódio e depois extraiu-se com áter. Procedeu-se ã combinação dos extractos etéreos, lavou-se com água e com uma solução salina, secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se até se obter um óleo, Procedeu-se a secagem azeotrópica do óleo com fcolueno num evaporado r rotativo. Dissolveu-se o óleo residual em 2GG ml de tetra-uidrofurano seco e depois arrefeceu-se a solução resultan te em banho de gelo & adicionou-ee-lhe 2,5 g (22,3 mmoi) 4¾ t-bucónido de potássio seguindo-se a adição de 3,5 g (23,5 mrnol) de 2,4-dicloro-pirimiáina» Agitou-se a solução a uma temperatura compreendida entre 0 e 5aC durante 15 minutos e arectuou-ae o processamento tal como anteriormente para se obter um óleo. Purificou-se esse óleo por crornatografia intermitente sobre gel de sílica, aluindo com 10¾ de acetona/ /henanos e depois coai 152 de acetona/íiexanos de modo a cbter -se 5,66 g (10,6 asnolj 44,92) de um sólido o qual recrieta-lizou a partir de ciclo-hexauopara proporcionar 7-(2-dicloro--pirimidin-4-il)-7-desacefcil-forscolina 1,9-dimetil-fcrmamida acetal, p.£. 155-16420. Verificou-se que o material era puro por cromatografia de camada fina sobre gel de sílica: 302 de acetona/hexauos» P-£ - 0,22j acetato de etilo/hexanos 1:1, E^ = 0,50.

Os espectros de IV(CHCl^), de BM(Í<CDC1^> e de massa (mH‘*=536) apresentaram-se consistentes com a estrutura atribuída. ANALISES:

Calculado para C27E33GIH3Ô8! 60.60IG 7.15XH 7.342K 60.56%G 7.262H 7.33¾¾

Exemplo o

Preparação de 7-desacetil-7-(l-metil-purín-6-il)forscolina A uma solução agitada de 7-desacetil-fors - 21 -

colina 1,9-dimetiÍ-formamida acetal (1,3 gj 3,5 mmoi) em 30 ml de tetra-hidrofurano adieionou-se t-butoxido de potássio (0,47 gt 4,2 mmol). Depois de se ter agitado durante 15 minutos adicionou-se uma sõ porção de ó-eloro-l-metíl-purixiu (0,705 g; 4,2 mmol). Temperou-se a o com água decorridas 2 horas e depois extraiu-se com cloreto de metileno (2 κ 50 ml). Procedeu-se â secagem dos exfcracfcos sobre sulfato de sódio e concentrou-se· Purifícou-se o resíduo por cromatogra fia sobre gel de sílica, eluixido com hexano/acetona (1:1), Efectuou-se a combinação das fracçoes que continham o produto e depois concentrou-se e a seguir fex-se a cristalização do resíduo resultante a partir de ciclc-hexano/acetato de atilo para se obter (0,9 gramasj 40%) de 7-desaeetil-7-(l-metii--purin-6-il)£orscolina 1,9-diaetii-formaaida acetal. Aqueceu-se o 1,9-dimetil-f ormamida acetal (550 mg; 0,99 mmol) â temperatura de 602C numa mistura de metanol/igua na proporção de 10:3, durante 48 horas. Deixou-se a mistura arrefecer e extraiu-se com cloreto de metileno (2 x 50 ml), Efectuou--se a secagem dos extracíos sobre sulfato de sódio e concentrou- se para proporcionar um solido branco sujo. Purifíeou--se o sólido por cromatografia intermitente, eiuindo com 5% de metanol/cloreto de metileno e procedeu-se ã recolha das fracçoes que continham o produto, fes-se a sua combinação, concentrou-se e cristalizou-se o resíduo a partir de /acetato de etilo para proporcionar 250 mg (50,3¾) de 7-de-sacetii-7-(l-metil-purin-6-íl)rorscoiína p.r. 1839C. Verificou-se que o material era puro por cromatografia de camada fina dobre gel de sílica: 5Ϊ de metanol/eioreto de metileno, R- * 0,22; hexano/acetona (1:1), R^ = 0,27.

Os espectros de IV(CHClg), de RM(BMSG), e de massa (i*2í+-551) apresentaram-se consistentes com a estrutura atribuída* ANALISES:

Calculado para ^26^36^4^6* 52.3©%G 7.25%H 11.19XN

Encontrado : 61.75%G 7.31%H 11.11XK

Exemplo 9 22 -

Preparação de 7-desacetil-7-(4-nitro-£enil)forscolina 1,9--dimetil-formaaida acetal A uma solução agitada de 7-desaeetil-£ors-colina 1,9-dimetil-£ormamida acetal <5,0 g? 11,5 asaol) e de I-£luoro-4~nitro-banaeno <1,4 g? 13,5 iamol) em 20 mi de tetra -hidrofurano adicionou-se t-butõnido de potássio <1,5 gi 13,5 urmol) em pequenas quantidades. Efeetuou-se a adição da base durante um período de 3 horas tendo-se feito o rigoroso controlo da reacção, por cromatografia de camada fina. Temperou-se a mistura de reacção com água fria e extraiu-se com cloreto de metileno <3 x 100 ml). Efectuou-se a secagem dos extraetos de cloreto de metileno sobre sulfato de sódio e concentrou-se para proporcionar um óleo que se purificou por cromatografia intermitente sobre gel de sílica, eiuindo com hexano/acetato de etilo (2;1). Procedeu-se â concentração das fracções que continham o produto de modo a obter-se 1,7 g de 7-desacetil-7-<4-nitro-fenil)forscoliaa 1,9-dimetil -formaaida acetal com caracteriaticas de um material amorfo. Verificou-se que o material era puro por cromatografia de camada fina sobre gel de sílica: hexano/acetato de etilo <2:1), R^ - 0,42? 1% de metanol/cloreto de metileno, = 0,17.

Os espectros de M#I(CDClg), de IV(CHeig) e de massa <MH*=%>45) apresentaram-se consistentes com a estrutura atribuída. AMLISES:

Calculado para ^29^40^2^3: 63.95/ÓC 7.40%H 5.14%E

Preparada : 64.292C 7.35%H 4.95%R

Exemplo 10

Preparação de 7-desacetil-7-(2.4-dinitro-feniI)-forscolina 1,9-dimetil-xormamida acetal A uma solução agitada de 7-desacetil-fors-colina 1,9-dimetil-formamida acetal (5,0 g? 11,5 mmol) e de 2,4-dinitro-fluoro-benzeno <2,5 g? 13,5 mmol) em 20 ml de tetra-hidrofurano adicionou-se pequenas quantidades de t--butoxido de potássio (1,5 g? 13,5 mmol). 20

Efectuou-se a adição da base durante um período de 4 horas tendo-se efectuado o controlo rigoroso de reacção, por croma tografia de camada fina. Temperou-se a mistura de reacção com agua fria e extraiu-se com cloreto de metileno (3 x 100 ml). Efectuou-se a secagem dos extraetos de cloreto de meti leno sobre sulfato de sódio e concentrou-se de modo a obter--se um óleo que se purificou por eromatografia intermitente sobre gel de sílica, eluindo com hexano/acetato de etilo (3: IX Efectuou-se a concentração das fracções que continham o produ to para proporcionar 2,9 g de 7-desacetil-7-(2,4-dinitro-£e-nil)forscolina 1,9-dimetil-formamida acetal. Verificou-se que o material amorfo era puro por eromatografia de camada fina sobre gel de sílica: hexano/acetato de etilo (2:1), - 0,38j 1 % de metanol/cloreto de metileno, E^ -· 0,25.

Os espectros de KM(CBC13), de IV(CHC13) e de massa (MH^SOO) apresentaram-se consistentes com a estrutura atribuída. MALISEb:

Calculado para C2§H39H30í0í 59.07%C 6.67ZH 7.I3%N

Encontrado : 59.072C 6.76%H 6.96

Exemplo 11

Preparação de 7-desacetil-forscolina-7-(l-metil-purin-6--il)forscolina 1,9-dimetil-formamida acetal A uma solução agitada de 1,5 g (3,5 mmol) de 7-desacetil-forscolina 1,9-dimetiI-formamida acetal em 30 ml de tetra-hidrofurano seco adicionou-se 0,47 g (4,2 mmol) de t-butóxido de potássio. Deixou-se a mistura em agitação durante 15 minutos e depois adicionou-se-lhe 0,71 g (4,2 mmol) de 6-cloro-l-metil-purina e manteve-se a agitação durante 2 horas. Temperou-se com agua a mistura de reacção e depois extraiu-se com cloreto de metileno. Efectuou-se a combinação dos extraetos, secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se no vácuo. Purificou-se o resíduo por cromato-grafia intermitente sobre gel de sílica, eluindo com aeetõna/ /hexano 1:1. Efectuou-se a combinação das fracções que continham o produto e concentrou-se para proporcionar 1,5 g - 24 -

ANALISES:

Calculado para ^29®41^5®6: Encontrado : 62.67%C 7.45%H 12.60XN 60.37XC 6.91XK 14.44%M

Exempio 12

Preparação de 7-desacetil-6-((2-dimetil-amino-atil)amino- -carbonil) -7- (piridin-2-il) - forscolina_1,9-dimetil -formamida acetal A uma solução agitada de 1,50 g (2,79 mmol) de 7-desacetil-6-(2~dimetll-amino-etil-amino-carboníl)forsco-lina 1,9-dimetil-formamida acetal em 25 ml de tetra-hidrofu-rano adicionou*se 0,313 g (2,79 mmol) de t-butóxido de potássio. Agitou-se a suspensão I temperatura ambiente durante um período de 2 a 3 minutos e depois adicionou-se-lhe 0,36 ml (4,19 mmol) de 2-fluoro-piridina. Aqueceu-se a mistura até a temperatura de 7Q2G sob uma atmosfera de asoto e depois agitou- ce durante 20 minutos. Adicionou-se â mistura mais 0,25 ml (2,91 mmol) de 2-£luoro-piridina e a seguir agitou-se a mistura durante mais 10 minutos. Deixou-se a solução arrefecer até á temperatura ambiente, verteu-se em gelo/água/biear-bonato de sódio/acetato de etilo e separou-se a camada orgânica, lavou-se com uma solução saturada de cloreto de sôáio, secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e coneentrou- -se até se obter um óleo. Dissolveu-se esse óleo num volume mínimo de acetona/hexano na proporção de 1:1 e submeteu-se a cromatografia intermitente sobre gel de sílica, eluináo com acetato de etilo/hexano 1:1, e depois com 60% de acetato de etilo/hexano. Efectuou-se a combinação das fracções que continham o produto puro e concentrou-se para proporcionar 25 -

apôs secagem durante 2 horas ã temperatura de 11GQC, 481 mg (0,782 mmolf 28%)de 7-áesacetil-6-(2-(dimetil-amino)etil--amino-carbonil)-7- (piridin-2-il) forscolina 1,9-dimetil-for-mamida acetal, na forma de um óleo, Verificou-se que o material era puro por eromatografia. de camada fina sobre gel de sílica: aeetona/hexano 1:1, R- = 0,lj 10% de metanol/dicloro-metano, R^ - 0,1.

Os espectros de IV(CHG13), de RMH(CBC13) e de massa (ΜΗ*-615) apresentaram-se consistentes com a estrutura atribuída, AMLISKS;

Calculado para C33H50H407; 64.47%C 8.20%H 9.1ΠΗ

Encontrado : 63.99%C 8.11%H 7.912N

Exemplo 13

Preparação de hidrato de cloridrato de 7-desacetil-6-((2--dimetil-amino)etil-amíno-carbonil)-7-(piridin-2--11)forscolina

Dissolveu-se 7-desacetil-6-((2-dimetil-ami-no)etil-amino-carbonil)-7-(piridin-2-il)forscolina 1,9-dime-til-formamida acetal (preparado conforme descrito no Exemplo 12) (450 mgi 0,804 mmol) num volume mínimo de metanol e diluiu-se a solução com 50 ml de metanol/água na proporção de 3:1. Agitou-se a solução durante 18 horas sob uma atmosfera de azoto a uma temperatura compreendida entre 60 e 652C e depois a uma temperatura compreendida entre 75 e 802C durante 6 horas. Deixou-se a solução arrefecer até ã temperatura ambiente e concentrou-se para se obter um solido branco (0,395 g). Reeristalizou-se o solido a partir de etanol a 95% (duas colheitas), lavou-se com água quente e secou-se sob vácuo intenso ã temperatura de 8Q2C. Dissolveu-se em metanol o sólido branco seco e depois tratou-se com ácido clorídrico etéreo até ficar ligeiramente ácido. Evaporou-se o solvente sob vá cuo intenso e depois triturou-se o resíduo com éter. Secou--se o sólido branco resultante ã temperatura de 1102C durante 2 horas para proporcionar 143 g (0,233 moli 29%) de hidrato de cloridrato de 7-desacetil-6-(2-dimetil-amino-etil~amino- - 26 - C-:"

X

Ji3Í*

-carbonil)-7-(piridin-2-il)£orseoliim, p.£. 175-1952C.

Verificou-se que o material era puro por cromatografia de ca mada fina sobre gel de sílicas 10¾ de metanol/dieloro-metano, = 0,1; ace tona/hexano 2:1, = 0,11.

Os espectros de IV(KBr), de Bl#T(DMSO-dg) e de massa (121^=560) apresentaram-sa consistentes com a estrutura atribuída. ANÁLISES:

Calculado para C^qH^oCIN^Ooí 58,66%C 7.S8ZH 6.84ZN Encontrado 58.59%C 7.57ZH 6.65ZN

Exemplo 14

Preparação de 7-desacetil-6-(3-dímetil~amino-propil)aiíiino--carbonil-7"- (pirimidin-2-il) f orscolina 1.9-dimetil-foraami da acetal A uma solução agitada de 1,0 g (1,8 mmol) de 7-desacetil-6- (3-dimatil-aminG-prGpil)amino-earbonil-£ors colina 1,9-dimetil-formamida acetal em 10 ml de tetra-hidro furano adicionou-se 244 mg (2,1 mmol) de t-butóxido de potãs sio. Agitou-se a suspensão durante 20 minutos antes da adição de 250 mg (2,1 mmol) de 2-cloro-pirimidina. Agitou-se a mistura durante a noite, temperou-se com agua (50 ml) e ex traiu-se cloreto de metileno (3 x 50 ml). Efectuou-se a secagem dos extractos sobre sulfato de sódio e concentrou-se até se obter um óleo que se purificou por cromatografia sobre gel de sílica, aluindo com 30% de metanol/cloreto de metileno. Fes-se a recolha das fraeções que continham o produto e removeu-se o solvente para proporcionar 370 mg (33%) de 7-desaee-til-6- (3-dimetil-amino-propil) amino-carbonil-7- (pirimidin-2--il)-forscolina 1,9-dimetil-formamida acetal.

Verificou-se que o material era puro por cromatografia de camada fina sobre gel de sílica: 10% de metanol/cloreto de metileno, R^ = 0,08j 20% de metanol/cloreto de metileno, = 0,2.

Os espectros de IV(GHClg), de KMN(CDGlg) e de massa (M+s=630) apresentaram-se consistentes com a estrutura atribuída. ANALISES: - 27 -

Calculado para ^33**53^5^7: 62.94%C 8.16%K 11.12%$

Encontrado : 62.42ZC 8.20ZH 10.80%$

Exemplo 15

Preparação de hidrato de cloridrato de 7-desaeetil-6-l(2--dimetil-amino) etil-amino-carbonil)-7-(pirimiàin-2--iDforscolina

Durante 48 horas aqueceu-se â temperatura de 602C uma solução agitada de 2.0 g (3,2 mmol) de 7-desaee-til-6- (2-dimetil-araino-etil) amino-earbonil- 7~pirimidin-2-il)i -rorseolina 1,9-dimetil-formamida acefcal em 30 ml de metanol e em 10 ml de agua. Deixou-se a mistura arrefecer até â temperatura ambiente e depois adicionou-se-lhe 100 ml de cloreto de metileno e 50 ml de água. Separou-se a camada orgânica, secou-se sobre sulfato de sódio e removeu-se o cloreto de meti lano no vácuo. 0 produto bruto cristalizou a partir de me-tanol/eter para proporcionar 1,35 g (742) de 7-desacetil-6-(2 -dimetil ramino-etil-amino-carbonil >7- (pirimidin-2-il) £ orsco-lina. Dissolveu-se uma porção (350 mg) em etanol quente e adicionou-se-lhe ácido clorídrico etéreo até a solução se tomar ácida. A concentração e a recristalisação proporciona iam o sal eloridrato, p.£. 180SC (decomposição).

Verificou-se que a base livre do material era puro por croma-to grafia de camada fina sobre gel de sílica: 30% de metanol/cloreto de metileno, ** 0,44j 10% de metancl/cloreto de metileno, R^ - 0,14.

Os espectros de BM(DMSO), de IV(KBr) â de massa (MH*»561) apresentaram-se consistentes cora a estrutura atribuída.

AbÃLISES:

Calculado para C29H44H407.HC1.H20: 56.61%C 7.71ZH 9.10%N

Encontrado 56.74%G 7.63%H 9.00%$

Exemplo 16

Preparação de 7-desacetil-6-(2-dimetil-amino-etil)-amino_- -carbonil-_-7-(pirlmidin-2-±l)forscolina lT9-dimetil- -formamida acetal A uma solução agitada de 7-desacetiI-ó-(2- - 28 - i *

-diraetii-amino-etil)aBino-earboail-£Grscolina 1,9-dimetil-ilida acetal (3,0 g ; 5,3 ssaol) cm tetra-hidrofur. seco (30 ml) adicionou-s·?. usas só porção de t-butoxido de po tássio (750 mg; 6,7 laaol), seguindo-se a adição da 2-eloro--pirimidina (760 g; 6,7 mmol) decorridos 15 minutos.

Depois de se ter agitado durante 2 horas adicionou-sa-lhe mais t-butóxido de potássio (300 mg) e deixou-se a reacçio em agita ção durante a noite. Adicionou-se gelo e água â mistura de reacção seguindo-se a adição áe cloreto de metileno ( 100 ml), procedeu-se á separação das camadas e extraiu-se a parte aquo_ sa com inais cloreto de metileno. 3ie ctuou- se a combinação das camadas orgânicas, secou-se sobre sulfato de sódio, coneentrou-se e depois purificou-se por cromatograxia intermitente sobre gel de sílica, eluindo com 10% de metanol/cloreto de metileno.

Recolheu-se as xracçóes que continham o produto e removeu-se o solvente para proporcionar 7-desaeetil-6-(2-dimetii-amino--etil)amino-carboníl-7-(pirimidin-2-il)£orscolina 1,9-dimetil--íormamida acetal (1,2 g ; 35%).

Verificou-se que o material ara puro por cromatograxia de cama da fina sobre gel de sílica ; 10% de metanol/cloreto de metileno, 0,16;

X 30% de metanol/cloreto de metileno, R~= 0,47.

Os espectros de XV(CHClj) de iM$(GDCIg) e áe massa (Μ*-ί>15) apresentaram-se consistentes com a estrutura atribuída.

AiiÃLXkiES; 8.03%'íl 11.37% õ.02%H 11.27%

Calculado para ^32¾9^5^7* 62.40IC

Encontrado : 62.09%C

Exemplo 17

Preparação de 7-desacetil-6-(3-diiaetil-am:Lno-propil)-aaino--carponil-/-(pirimidln-2-il)forscolina

Dissolveu-se 7-dssacetil-6-(3-áimetil--aíaiao-propil) -amino-carbonil-7- (pirimiàin-2-il) forscolina 1,9-dimetil-formamida acetal (l,0g; 1,58 maol) em metanol (100 ml) e era água (30 ml). Aqueceu-se a solução resultante \ â temperatura de 602G sob uma atmosfera de asoto durante 3 * dias. - 29 -

Deixou-se a mistura de reaeção arrefecer até à temperatura ambiente e extraiu-se com cloreto de metileno (100 ml$ 50 tal). Efectuou-se a secagem dos extractos sobre sulfato de sódio e removeu-se o solvente para proporcionar um sólido branco o qual cristalizou a partir de metanol originando 7-dasacetil--6-(3-dimetil-amino-propil)amino-carbonil-7-(pirimidin-2-il)-foracolina (450 mgj 491). Verificou-se que o material era puro por cromatografia da camada fina sobre gel de sílica: R~ » 0,04, 10% de metanol/cloreto de metilenos E.£ * 0,12, 30% da metanol/cloreto de metileno.

Os espectros de BM(CDClg, DMSO) e de massa (MH+*575) apresen taram-se consistentes com a estrutura atribuída. MáLISES:

Calculado para C^qH^N^Ojí 62.68X0 8.Q8XE 9.742D Encontrado : 62.06%G S.Q1%H 9.07%» - 30 -

f X ESQUEMA ΐ)Ε KKACÇÃO ί

Claims

i \ te****· ViBS&* rbivihpicacOes - lã - Processo para a preparação de um composto da formula Σ

(D em que Vi Ui n ê hidrogénio, alquilo inferior, aril-alquilo inferior, um grupo de fórmula E^E^R^Si, um grupo de fórmula RgGO, ou um grupo de fórmula ^χο^^ΚΟΙΠΙ^), CO em que n é 0 ou Ij Rg é hidrogénio, um grupo de fórmula R^gCO ou um grupo de fórmula Ry i fenilo, naftilo, furanilo, oxazolilo, tiazolilo, tiazolilo, piridinilo, pirimidinilo, purinilo, quino iifiilo' ou isoquinolinilo, cada um dos quais é in-substituido ou mono- ou poli-substituído por alquilo inferior, halogineo ou nitroj R^ é hidrogénio} ou Rj e Rg considerados em conjunto formam um grupo de fórmula CO, um grupo de fórmula SQ ou um grupo de fórmula CHyR-jjRqgí Rg, e R^ são iguais ou não são todos iguais e cada um é hidrogénio ou alquilo inferiorj Rg hidrogénio ou alquilo inferior* - 32 -

*10* e %2 s^° diferentes e cada um ê hidrogénio» alquilo inferior ou aril-alquilo inferior j ou *4.0 e &n considerados em conjunto com o atomo de azoto ao qual estão ligados formam um grupo de formula / \ E X \_/ em que X é CO, 0, S, um grupo da fórmula CBR^ ou um grupo de formula j R-^2 é hidrogénio ou alquilo inferior» hidroxi-alquilo inferior, alcoxi-inferior-alquilo inferior, ou um grupo de fórmula HGC^CH(OH) } ® hidrogénio, alquilo inferior, hidroxi-alquilo inferior, alcoxi inferior-alquilo inferior, um grupo da fórmula

em que 8 é 1 ou 2, um grupo de

um grupo de fórmula ΗΟΟ^ΟΕζΟΕ) Cí^, ou um grupo de fórmula (GH2) t^2XP-22 em ^ue t ê um inteiro entre 2 a 6} &!? e R^g são iguais ou diferentes e cada é alquilo inferior{ ou ®17 e r18 considerados em conjunto com o átomo de - 33 - asoto ao qual estão ligados formam um grupo da fórmula /~\ Y_/ em que I e 0 ou S; R-^g é hidrogénio, alquilo inferior ou OS^g» R20 i alquilo inferior; S21 e ^22 s^° ou diferentes e cada ê alquilo inferiorj ou R21 e R22 considerados em conjunto com 0 ãtomo de azoto ao qual estão ligados formam um grupo de fórmula /“\ N X v_/

era que X I como anteriorsiente definido R23 ® hidrogénio ou R24 ® alquilo inferior? e dos seus isómeros ópticos e geométricos, ou de um seu sal farmacêuticamente aceitável, caracterizado por a) se fazer contactar um composto de formula 4 chhr17r18 IV, / em que V a 17 e Rie sao como definido anteriormente, com um composto de fórmula Ry-Hal em que Ry é como definido anteriormente e Hal é halogéneo, na presença de um alcoxido, para proporcionar um composto de fórmula I, em que Rj e Rg considerados em conjunto formam um grupo de fórmula -CHKR^yRjg em que Rjy e %g são como definido anteriormente, e e Ry são como definido anteriormente, b) se íiidrolisar eventuaimente um composto da fórmula I como obtido no passo a) para proporcionar um composto de fórmula X, em que Kj e Kg são hidrogénio e Rg e Ry são como definido anteriormente, e) se faser reagir eventualmente um composto de formula I, em que Eg e ily são como definido anteriormente e Rj e Kg são hidrogénio, com um composto da fórmula r3r4r5síkír25cocf3 em que Kg, K3 são iguais ou todos iguais e representam hidrogénio, alquilo inferior e é alquilo inferior, para proporcionar tua composto de fórmula I, em que Rj i o grupo RjR^R^Si, e R^t Ey e Rg são como anteriormente definido, d) se fazer reagir eventualmente um composto da fórmula I em que Rg e Ry são como definido anteriormente e 35 - k í\ cr: ilj e Rg são hidrogénio, com na composto da formula HalCHR12COHal em que Hl é hidrogénio, alquilo inferior ou aril-alquilo inferior, para proporcionar um composto da formula

em que Jfci 6’ Ry e Ry são como anteriormente definido, s se fazer reagir o composto obtido com um composto da formula EH R10E11 em que Ri0 e sao iguais ou diferentes e sao hidrogénio, alquilo inferior ou aril-alquilo inferior, para pro porcionar um composto da fórmula I, em que H ® R10Rll^GHR125aG0, em que R10 k6’ , R-q* R12 IL7 e R9 e n. slo como definido anteriormente, são como definido anterionneiite, e e) se faaer reagir usa composto da fórmula 1, en que

e Rj slo corno definido auteriormente e e Rg são hidrogénio, com 1,1-carbonil-di-imidazol para proporcionar um composto da fórmula la - 3β - á

e se fazer reagir este produto com um composto da fórmula R10R11IÍK em que %0 e s*° w diferentes e cada um é âiárogê- uio, alquilo inferior ou aril-alquilo inferior para proporcionar vm composto da formula I, em que ivjl w u j e são coso anteriormante definido, Rg ã nidrogónio, e Rg e Ry são como definido anteriormente, f) se faser reagir eveatuslmsnte um composto da fórmula I, em que Eg e Ej são como definidos anteriormente e Rj e R^ são hidrogénio, com um anidrido de ácido alca-noico inferior da fórmula R„C-0-CRo o a li II e o em que Rg é alquilo inferior, para proporcionar um composto 37 - da formula I, em que Rg, Ry e Rg são como definido anteriormente e Rx é RgCO, g) se alquilar eventualmente im composto da formula I, em que Eg e Ry são como definido anteriormente, e c Rg são hidrogénio, por um procedimento conhe eido na especialidade para proporcionar um composto da fórmula I, em que Rg, Ry e Rg são como definido anteriormente e e alquilo inferior ou aril-alquilo inferior. - 2ê - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se efectuar a hidrólise com uma mistura de um alcanol e água ou uma mistura de um alcanol, água e ácido acético. - 3§ - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterisado por se obter um composto da fórmula I am que R^ é hidrogénio ou alquilo inferior j Rg é hidrogénio ou um grupo da fórmula CQNR^ÍG!^)^- ^21¾J Ry ê fenilo, piridinilo, pirimidinilo ou purinilo, cada um dos quais é insubstituído ou mono- ou poli-substi tuído por alquilo inferior, lialogéneo ou nitro; Rg ê hidrogénioj ou R·^ e Rg considerados em conjunto formam um grupo de fórmula CHMR^yR^gf é hidrogénio ou alquilo inferior, e r17, R^g, R21 e ^22 sao ^gua^s ou diferentes e cada um é hidrogénio ou alquilo inferior. - 4§ - - 3S -

Processo de acordo com a reivindicação 1, caraeterizado por se obter um composto da formula I em que ilj e Rg considerados eia conjunto formam um grupo da fórmula cn<0,>2. «i 5¾ ** Processo de acordo com a reivindicação 1, caraeterizado por se obter um composto de formula I em que e Rg são hidrogénio. - 6§. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caraeterizado por se obter um composto de formula I em que Rg é hidrogénio, ou um grupo da fórmula -COKH(CH£)t-1(0¾) £ em que t ê 2 ou 3. - 7§ - Processo de acordo com a reivindicação 2, caraeterizado por se obter um composto de formula I em que Ry é fenilo, piridinilo, pirimidinilo, ou purinilo, cada um dos quais é insubstituido ou substituído por metilo, halogêneo ou nitro. - 8a — Processo de acordo com a reivindicação 2, caraeterizado por se obter 7-desacetil-6-(2-dimetil~amino--etil-amino-carbonil)-7-(piridin-2-il)forscolina ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. - 9ã - | Processo de acordo com a reivindicação 1, • caraeterizado por se obter 7-desacetil-7-(pirimidin-2-iI)- - 39 - t ** I -forseolina. - 10- - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica com actividade inotrópiea ou. intensifieadora da memória, caracterisaco por se incorporar como ingrediente activo, um composto de fórmula I quando preparado de acordo com a reivindicação 1* A requerente reivindica a prioridade do pedido norte-americano apresentado em 11 de Janeiro de 1989, sob o número de série 293,840. Lisboa, 10 de Janeiro de 1990 © AW®m OJ?JKH£I. ©A Ε2*ΜΒ>ΑΒΘ fflMgBSEfJ.

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