PT92275A

PT92275A - Processo para a preparacao de hidratos de um antibiotico beta-lactamico

Info

Publication number: PT92275A
Application number: PT92275A
Authority: PT
Inventors: Thomas Michael Eckrich; Carol Elaine Pasini
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1988-11-14
Filing date: 1989-11-10
Publication date: 1990-05-31
Also published as: JPH02178281A; DK563789D0; NZ231368A; DK563789A; CN1042712A; ZA898611B; HU205113B; HUT52508A; KR900007840A; AU4457089A; AU620659B2; CA2002596A1; SU1757468A3; IL92271A0; EP0369686A1

Description

Este invento relae4ona-se com novas formas hidrato de um antibiótico β-lactâmico, mais particular mente a novas formas di-hidrato e tri-hldrato cristalinas de uma 1-carbo-cefalosporina. 0 antibiótico β-lactâmico de fórrau la (I) NHa

I

aa/VA \ / * J~K s™

.00H

• . I é um antibiótico oralmente activo, potente. 0 antibiótico es tá descrito, por exemplo, por J.Hashimoto eli ajL, na Patente dos E.U.A. No.4.335.211, datado de Junho 15, de 1982.Para abreviar, o composto de fórmula (X) será referido pelo náraero LY163892. 0 presente invento é dirigido a tri-hidratos e a di-hidratos cristalinos de LY163892, Estes dois hidratos são hidratos farmaceuticamente elegantes do composto em causa.

Em adição, 0 di-hidrato e 0 tri-hjL drato de LY163892 são intermediários convenientes para a sín tese do mono-hidrato de LY163892. 0 mono-hidrato de LY163892 4 uma forma farmaceuticamente elegante do composto em causa, que possui estabilidade, 6 qualidades de manuseamento da massa excelentes, numa larga gama de humidade e em outras condições

V

de manufactura. 0 mono-hidrato de LY163892 está ainda descri^ to, por C.Pasini, na Patente dos E.U.A. com No. de serie 07/105.766, datada de Outubro 6, de 1987, intitulada por MONOHYDRATE OF NEW BETA-LACTAM ANTIBIOTIC.

Um aspecto do presente invento é dirigido ao di-hidrato cristalino do LYI63892, cuja forma ê dada abaixo, como a Fdrmula (X). Mals especificamente, o in vento á dirigido ao di-hidrato de LY163892, tendo um modelo de difracção com um poder do raio X listado abaixo no Quadro I. Outros aspectos do invento são formulações farmacêuticas do di-hidrato de LY163892, cristalino.

Ainda outro aspecto do presente invento é o tri -hidrato cristalino do LY163892. Um modo de realização preferido deste segundo aspecto é um tri-hidrato cristalino, que possui 0 modelo de difracção com um poder do raio X do Quadro II abaixo. 0 invento tambám incluí formula ções farmacêuticas do tri-hidrato cristalino. 0 presente invento está dirigido ao di-hidrato e ao tri-hidrato cristalino do antibiótico do composto de fármula (I)

loOH

I

0 carbono na posição 2' do antibió tico de fórmula (I) existe na configuração absoluta "R". Além disso, o composto de Fórmula (I) pode também estar na fórmula de um zwitteriãO, uma forma que «stá também incluída nos vá rios aspectos do presente invento. Para abreviar, o composto de Fórmula (I) será referido como ”LY163892'’, e os compostos do presente invento são ou por "di-hidrato de 11163892" tou por "tri-hidrato de L.¥163892", ou mais simplesmente, o "di--hidrato" ou o "tri-hidrato", respectivamente. 0 di-hidrato é um sólido micro-eris talino. Um modo de realização deste aspecto do invento é o di-hidrato cristalino caracterizado por o modelo de difracção com um poder do raio X do Quadro (I) QUADRO 1

Modelo cristalino do di-hidrato

D I/I, 1,00 0,05 0,05 0,90 0,01 0,04 0,02 0,11 0,04 0,19 0,02 0,07 0,08 0,04 0,01 P ,O5 0,02 0,05 0,05 16,35 9,82 9,50 8,18 6,46 6,32 5,40 4,72 4,48 4,07 3,88 3,78 3,60 3,45 3,31 3,24 3,10 2,99 2,92 -6-

0 modelo de diTrãcção no Quadro I foi obtido com uma radiação de cobre filtrado por níquel (CurMi) de comprimento de ondaA= 1,5418A. Os espaços dos interplanos estão na coluna marcada por "d" e são em Angstroms e as intensidades relativas estão na coluna marcada por "I/I1"

Outros aspectos do present® invento são formulações farmacêuticas do di-hidrato de LY163892. Modos de realização preferidos do invento incluem formulações farma cêuticas na forma cristalina do di-hidrato de LY163892 caracte rizado pelo modelo cristalino do Quadro (I). 0 tri-hidrato de LY163892 ê também um sólido microcristalino branco. Um modo de realização preferido deste aspecto do invento ê o tri-hidrato cristalino caracterizado por 0 modelo de difracção com um poder de Raio X do Quadro (II):

QUADRO II

Modelo cristalino do tri-hidrato d I/I, 11,94 1,00 7,94 0,15 5,94 0 0 UI 5,27 0,03 4,67 0,02 3,95 0,18 3,63 0,03 3,34 0,03 3,07 0,03 -7-

0 modelo de difracção no Quâdro (II) foi obtido usando os mesmos parâmetros daqueles que foram empregues para obter o modelo indicado no Quadro I, anterior.

Um outro aspecto do invento inclui formulações farmacêuticas do tri-hidrato de LY163892. Modos de realização preferidos deste aspecto do invento incluem formulações farmacêuticas que contêm a forma cristalina do tri-hidrato de LY163892, caracterizado pelo modelo cristalino do Quadro II. 0 di-hidrato e o tri-hidrato podem ser feitos a partir de várias formas de LY163892 como o anl-drato, os solvatos,DMF, ou as várias combinações de solvato de DMF-hidrato. A síntese de alguns destes materiais de partida está discutido abaixo, na Secção Experimental. 0 material de partida preferido, para o di-hidrato, e o solvato mono (DMF), enquan to que o material de partida preferido para o tri-hidrato é o solvato bis (DMF), anidrato ou o solvato de etanol de LY163892.

Na preparação do di-hidrato, o material de partida o solvato DMF (por exemplo) é suspenso em á-gua. A solução é efectuada por acidificação da suspensão, por exemplo através da adição de ácido clorídrico concentrado até que a solução resulte. A solução acidificada pode ser ea tabillzada atavés da adição de um ou mais equivalentes (ver-sus o material de partida) de EDTA de sédlo. A solução é ain da acidificada, para dar um pH aproximado de 0,5 a 1,5, a uaa temperatura de cerca de 5°C a 50°C, preferenciálmente de 10°-15°c, opcionalmente semeada com o di-hidrato de LYI63892 agitada, para induzir a cristalização (normalmente durante trinta minutos), depois o pH á ajustado a cerca de 3,5 a 4,0 através da adição de base (como a trietilamina), para completar a cristalização. Os cristais de di-hidrato são recolhi^ dos através de técnicas de filtração convencionais e são -8-

deixados secar em aberto, à temperatura ambiente. Em alterna tiva, o bolo do filtro pode ser agitado com água, re-filtra-do, e recolhido e lavado com acetonitrilo. Depois de secagem em aberto, o di-hidrato cristalino é obtido. 0 tri-hidrato 4 feito através de um procedimento idêntico ao do di-hidrato. Um solvato DMF de LY163892 (por exemplo), preferencialraente o solvato de bis (DMF), 4 suspenso em água, a suspensão é aquecida a cerca dos 50°C, e a suspensão á acidificada (por exemplo, a um pH de 1,57) com ácido clorídrico concentrado e agitada para efeetu-ar a solução (tipicamente a cerca dos trinta minutos). Um estabilizador como o EDTA de sódio pode ser adicionado. A solu ção á filtrada, e o filtrado 4, em primeiro lugar, semeado com mono-hidrato de LY163892 cristalino, e acidificado (por exemplo a pH 2,1 com ácido clorídrico concentrado) para indu zir a cristalização. A suspensão resultante é agitada com uma base como a tri-etilamina, para trazer 0 pH ao ponto isóele<s trico (aproximadamente 0 pH 4,8-4,9) do mono-hidrato, deste modo, aumentando o rendimento em mono-hidrato cristalino. Depois de filtração para recolher o mono-hidrato em bruto, formado desta forma,oofiltrado 4 misturado com um volume igu al de acetonitrilo. A ( 0 desenvolvimento da) suspensão 4 agitada, durante uma hora e filtrada. 0 bolo do filtro 4 la vado com acetonitrilo e seco ao ar, para dar 0 tri-hidrato cristalino. Em alternativa (preferencialmente) 0 solvato de bis (DMF) 4 suspenso em água, estabilizadoicom EDTA de sódio e a solução e aquecida a aproximadamente 50°C. 0 pH da suspensão 4 aumentado com, poe exemplo, uma solução de bicarbo nato de sódio saturada, aquosa, ( a aproximadamente 8,6) para efectuar a solução. A solução á agitada e neutralizada (a apro ximadamente pH 7,6), para induzir a cristalização. A suspensão 4 acidificada ao ponto ísoeleotrico (cerca de pH 4,6) tipicamente com ácido clorídrico concentrado, para completar a cristalização. Os cristais são recolhidos por filtração e secos ar ar, para dar tri-hidrato cristalino. -9-

Como notado acima, o di-hidrato de LY163892 e o tri-hidrato de LY163892 são também úteis como intermediários para 0 mono-hidrato de LY163892. 0 mono-hidra to é preparado por, em primeiro lugar, suspensão de ambos os materiais de partida acima mencionados, em água. 0 procedimento mais comum é efectuar uma solução do material de parti da através da adição de uma quantidade mínima de ácido, geral mente ácido clorídrico 6N (ou mais diluído). Em alternativa, uma solução do material de partida é efectuada através da adi. ção de uma quantidade mínima de base (por exemplo, a quant.i dade mínima de hidréxido de sodio 2H, resultando um pH de cerca de 7*6). Não tendo em consideração de como a solução é efectuada, a cristalização é induzida por lentamente ajustar o pH da solução do material de partida a apro-ximadamente 4, e preferencíalmente a 4,8. Por exemplo, se a solução for efectuada através da adição de ácido, é preferido aumentar a temperatura da solução, a cerca dos 50°C, e lenta mente adicionar tri-etilamlna (em alternativa, hidréxido de sédlo) à solução até que um pH de 4,8 seja obtido. 0 gradual desenvolvimento da suspensão é agitado e mantido a cerca de 50°C, durante a adição de base. Semear a solução com uma pequena quantidade de mono-hidrato cristalino antes do período de adição da base, é preferido. Por exemplo, 0 semear é nor malmente feito, quando 0 pH da solução é aproximadamente de 1,8. Se a solução do material de partida for efectuada atra vés da adição de base, 0 pH é lentamente levado a aproximada mente a 4, através da adição de um ácido (preferencialmente ácido clorídrico 2N). 0 efectuar da solução do material de partida com ácido clorídrico e 0 induzir a cristalização a aproximadamente 4,8 com tri-etilamina, é preferido. A suspensão resultante do ajuste do pH da solução do material de partida a aproximadamente 4, é isolada através das técnicas de filtração convencionais, como filtração sob vácuo num funil de Buchner. Os cristais "•10

ambiente. Em alternativa, as suspensões de pH ajustado, aqu£ cldas (50°C) são arrefecidos a aproximadamente 20°C, agitadas filtradas (como num funil de Buchner) e são o sólido recolhi^ do, seco aos 30°C, durante 24 a 48 horas, por meios convencionais (como num forno de ar limpo).

Como referido acima, um outro aspecto deste invento são as composições farmacêuticas dos com postos antibióticos do di-hidrato e do tri-hidrato de Fórmula (I). Em particular, estas composições farmacêuticas são líteis para o controle de infecções bacterianas gram-positivas e gram-negativas, em animais de sangue quente, e compreendem um véfeulo adequado e uma quantidade terapeuticamente eficaz de compostos antibióticos do hi-hidrato e do tri-hidrato de Fórmula (I).

Em relação às composições para a administração oral como, comprimidos e cápsulas, o termo "veí culo adequado" significa exclpientes comuns, como agentes de aglutinação, por exemplo, xarope, acácia, gelatina, sorbitol, tragacanta, polivinilpirrolidina (Povidona), metil-celulose, etil-celulose, carboximetil-celulose de sódio, hidroxipropi^L metil-celulose, sacarose e amido; agentes de enchimento e suportes, por exemplo, amido de milho, gelatina, lactose, sa carose, celulose micro-cristalina, caolino, manltol, fosfato de dicálcio, cloreto de sódio, e ácido algfnico; agentes de desintegração como, eros-carmelose de sódio, celulose micro-cristalina, amido de milho, glicolato de amido de sódio, á-cido algfnico e agentes de humidificação mutáveis, como lau ril-sulfato de sódio e lubrificantes como, estearato de magnésio e outros estearatos metálicos, ácido esteárico, fluído de silicone, talco, ceras, óleos e sílica coloidol. Agentes de gosto como hortelã e pimenta, óleo de verdura de inverno, gosto a cereja ou semelhante, podem também ser usados. Pode também ser desejado adicionar um agente de coloração, para -11-

tornar a forma de dosagem mais agradável;do ponto de vista estático ou ajudar a identificar o produto. Os comprimidos podem também ser revestidos através de métodos bem conhecidos no ramo.

As composições farmacêuticas do pre sente invento podem também estar na forma de preparações líquidas orais, que.podem ser tanto em a) suspensões, soluções, emulsões ou xaropes, ou b) um pó seco para ser reconstituído com água ou outro veículo adequado, antes de ser usado. Quan do usado em conjunto com essas preparações líquidas orais, o termo "veículo adequado" significa aditivos convencionais como, agentes de suspensão como acácia, metil-celulose, hidro xi-etilcelulose, carboximetil-celulose. celulose com carboxi © ~ metil-celulose de sódio (Avicel), goma de xantano ou amido; adoçantes como sacarose, xarope, glucose,sacarina, sorbitol ou aspartamo; agentes de humidificação como lauril-sulfato de sé <dio, éleo de silicone, os vários surfactantes Pluronies®, ou glicina; conservantes como metilo, propilo, ou p-hidroxiben- zoatos de butilo ou ácido sórbico; colorantes, agentes de gos tos e sais como cloreto de sódio, ácido cítrico, óleo de ver dura de inverno ou citrato de sódio; e águas, óleos e ésteres como óleos de amêndoa, de coco fraccionado, óleo de rícino hidrogenado, lecitina, estearato de alumínio e o semelhante. 0 di-hidrato e o tri-hidrato cristalinos de LY163892 podem também ser formulados em forma de dosagem unitária em frascos estéreis, em bolsas de plástico estéreis, que contêm um orifício com um septo, ou ampolas hermeticamente seladas, estéreis. A quantidade do composto de hidrato cristalino do invento por dosagem unitária, pode variar desde cerca de 100 miligramas a cerca de 10 gramas.

Uma quantidade preferida do composto será na gama desde de cerca de 200 a 500 miligramas por dosagem unitária.

Composições tópicas podem ser for muladas com "veículos adequados" como bases hidrofóbicas ou 12

hidrofílicas. Essas bases incluem unguentos, cremes ou loções-

Composições farmacêuticas veteriná rias dos compostos antibióticos podem ser administrados no alimento ou na água de beber, dos animais da quinta. Era alter nativa, os compostos podem ser formulados como preparações intramamárias com "veículos adequados',' como bases de liberta ção rápida ou retardada.

Uma "quantidade terapeuticamente eficaz" dos presentes hidratos do composto antibiótico de Fórmula (I) é desde de aproximadamente 2,5 mg a cerca de 70mg de composto por Kiiograma do peso corporal, por dose. Esta quantidade geralmente totaliza desde cerca de 200 mg a cerca de 7 gramas por dia, para um humano adulto.

Durante um curso de tratamento, com os presentes hidratos, o hidrato de escolha pode ser adminis trado numa ónica dose diária ou em móltiplas doses, por dia. 0 regime de tratamento pode requerer administração durante períodos extensos de tempo, por exemplo, durante vários dias ou durante duas a três semanas, A quantidade administrada por dose ou a quantidade total administrada dependerá de factores tais como a natureza e a gravidade da infecção, da idade e da saiíde geral do paciente e a tolerância de ambos o paciente e o microorganismo ou microorganismos envolvidos na infecção, relativamente aos hidratos de Fórmula (I).

Como um outro aspecto do presente invento, fornece-se um processo para a preparação de uma for ma de di-hidrato, cristalino de Fórmula (I): -13-

\

ΝΗ2 Η/V*\A >\ I r I Π Γ V 1 «/Ά / I

•—CI

OQH

I que compreende a dissolução de um solvato de mono ou bis N,N-dimetilformamida de um composto de Fórmula (I) em água, e o ajuste do pH a cerca de 3,6 seguido por filtração e secagem ao ar, à temperatura ambiente.

Como um outro aspecto do presente invento, fornece-se ura processo para a preparação de uma for ma de tri-hidrato cristalina do composto de Fórmula (I): NHa a/naa KJ * A/L|

COOH que compreende a dissolução de um solvato de mono ou bis N,N-dimetilformamida de um composfco de Fórmula (I) em água, o ajuste do pH de cerca de 4,8 a cerca de 4,9, a remoção de mono-hidrato assim formado, e a adição de acetonitrilo, seguido por filtração e secagem ao ar, para fornecer o tri-hi-drato referido. -14-

·\'.

Nos Exemplos seguintes os termos dime-tilformamida, o espectro de ressonância magnética nuclear, o espectro de massa, a espectroscopia de infra-vermelhos estão abreviados por DMF. RMN, EM e IV, respectivamente. 0 espectro de RMN foi obtido num instrumento de 300 MHz da General Electric QE-300, se não for dito caso contrário. Os desvios químicos estão expressos em valores de ppm (partes por milhão, tendo como referência o tetraraetil-silano).

Secção Experimental

Procedimento 1 Síntese do Mono (DMF) do LY163892 A uma solução de 30 g (0,126 mol) de ácido 7 -amino-3-cloro-3-(1-carbo-1-detiacefem)-4-carboxí lico em 500 ml de DMF, que contém 0,03% de água, foi adicionado aproximadamente 10 gotas de cloreto de trimetil-sililo seguido por 32.85 g de N,N!-bis(trimetil-silil)ureia„ A mis tura reaccional foi agitada durante 90 minutos, à temperatura ambiente e arrefecida a aproximadamente os 50°C. A raistu ra foi adicionado 10,8 ml de piridina seguido por 2?.07 g (0,1315 mol) .de hidrocloreto do cloreto de 2-(R)-2-fenil~2- o amino-acetilo„ A mistura foi agitada a cerca dos 35 C, duran te aproximadamente uma hora. e arrefecida aos 50°C. À mistura foi adicionado 7de metanol em 30 ml de DMF. A mistura reaccional foi agitada aos 0°C, durante um período de 40 minutos e 54ml de água foram adicionados. A mistura reaccional foi deixada aquecer a cerca dos 15*^C, durante os próximos 30 minutos, e trãetilamina foi lentamente adicionada até que o pH da mistura fosse cerca de 3,2. 0 filtrado foi aquecido a cerca dos 50°C. A mistura foi, adicionado trietilamina até que o BH atingiu os 4,6 e a mistura foi deixada repousar à temperatura ambiente, durante uma hora. A mistura foi depois -15-

agitada a cerca dos 40 C, e uma mistura de DMF: Trietilamina (1:1, v:v) foi adicionada até que o pH foi cerca de 5,9. A mistura foi arrefecida aos 25°C e agitada, durante 20 minutos. Â mistura foi adicionada 500 ml de acetonitrilo e a mis tura resultante foi agitada durante 30 minutos. A mistura foi filtrada e o sólido precipitado foi seco num forno de ar, aos 30°C, até que o peso do sólido fosse constante para for necer o mono(DMF) de LY163892. RMN-H (300 MHz, DgO/DCl): 8,18 ppm (s,1H); 7,79 (s,1H); 5,65 (d, J = 4,8 Hz; 1H); 5,51 (s,1H); 4,21 (d de t, 1H); 3,28 (s, 3H); 3,12 (s, 3H); 2,84 (m, 2H); 1,95 (m, 1H); 1,58 (m, 1H). RMN-13c (75,48 MHz D2Q/DC1): 21,99; 31,85; 32,27; 37,77; 53,47; 57,37; 58,57; 123,5; 128,9; 130,6; 131,4 132,5; 133,8; 164,4; 165,7; 166,3; 169,9 ppm. IV (disco de KBr): 2-950-3620 cm“1 (m e largo) 1772,7; 1691,7; 1658,9; 1598; 1566; 1409; 1389; 1378; 1349; 1325 (todos médios a fortes) C* -7p° = + 17,85°, C a 1,02 em HC1 0,1N EM a 350. 352

Procedimento 2 Síntese do Bis (DMF) de LY163892 2-(R)-2-fenil-2-£( (Z)-metil-but-2-en-3-iloato)-aminojacetato de sódio em pó (4,59g;l6,92 mool) foi metido num frasco de fundo redondo de 250 ml, que contém 75ml de DMF agitado, sob uma atmosfera de azoto. A seguir, 22/έίάβ ácido metano-sulfónico foi adicionado à mistura reac cional, que foi arrefecida a cerca dos 45 C. -16-

Ã mistura foi adicionado 47,6 fll de dimetil-benzilamina seguido por 1,53 g (1,25 ml; 16,15 mol) de cloroformato de me tilo, A mistura reaccional foi agitada a cerca dos 45°C duran te aproximadamente 50 minutos. Â mistura foi adicionada uma solução de 25 ml de DMF e 5,41 g (15,38 mraol) de éster de (4-nitrofenil)metilo do ácido 70 -amino-3-cloro-3“(1-carbo-1-detiacefem)-4-carboxflico, gota a gota, à mistura reaccional. A mistura foi agitada, durante duas horas e aquecida a cerca dos 0°C, durante aproximadamente 45 minutos. Enquanto que a temperatura da mistura reaccional· é mantida entre cerca de 5°0 e 10°c, 6,89 ml de água, 12,32 ml de ácido clorídrico concentrado, 3,55 g de pá de zinco,e 8,93 ml do ácido clorf drico concentrado foram adicionados à mistura reaccional. A mistura foi agitada à temperatura ambiente, durante cinco ho ras e o pH foi ajustado a 2,35 com trietilamina. A mistura foi filtrada e o pH foi novamente ajustado a 4,6 cora trietilamina. A mistura foi agitada durante 45 minutos e o pH foi aumentado a 5,75 oom trietilamina. A mistura foi agitada durante uns 15 minutos adicionais. 0 sólido precipitado foi re colhido por filtração em vácuo e lavado com 30 ml de DMF: água (9:1, V:VK 0 sólido foi seco sob vácuo, durante aproxi madamente 10 horas, para fornecer 4,8 g do solvato de bis (DMF) do LY163892.

Este material foi ainda purificado através da suspensão do material, em 40 ml de DMF: água (9:1, V:V). A solução foi arrefecida aos 10°C, e o pH foi ajustado a 1,7 com ácido clorídrico concentrado. A mistura foi filtrada e o pH foi aumentado a 5,6 com trietilamina. 0 sólido precipitado foi recolhido por vácuo. RMN-H (300 MHz, DgO/DCl): 8,18 ppm (3, 2H); 7,79 (s, 1H); 5,65 (d, 1H)5 5,51 (a, 1H); 4,21 (d, de t, 1H); 3,28 (s, 6H); 3,12 (s, 6H); 2,84 (m, 2H); 1,95 (mt 1H); 1,58 (m, 1H). ''χ ·-

-17- IV (disco de KBr): 1772,7 cm”1; 1691,7;'Ίι659,9; 1599,1 ; 15 66,; 1407,2; 1389,8; 1378,2 ; 1349,3; 1325,2; (todos me'dios a fortes ) = + 12,68°, c a 0,35 em HC1 0,01 N EM s 350. 352 EXEMPLO 1

Di-hldrato de LY163892

Solvato mono (DMF) de LY163892 (79,83 g) foi suspenso em água (435 ml). A suspensão foi adi cionado ácido clorídrico concentrado (54,5 ml) e EDTA de so dio (2,18 g). A suspensão foi agitada, durante quinze minutos à temperatura ambiente, para dar uma solução carvão de lenha (g) (Darco , 2,18 g) foi adicionado à solução e a suspensão resul (0 tante foi filtrada com a ajuda de um filtro Hyflo ajudaícelite 0 bolo do filtro foi lavado com água destilada (200ml). 0 pH do filtrado combinado e lavado foi ajustado a 2,4 através da adição de trietilamina, e a solução foi semeada com cristais de di-hldrato de LY163892. A suspensão resultante foi agitada durante trinta minutos. 0 pH da suspensão foi depois levado a 3,6 durante um período de quarenta e cinco minutos, através da adição de tri-etilamina. A suspensão foi agitada durante cinco horas, arrefecida a 10°C, depois filtrada.. 0 bolo do filtro foi deixado secar em aberto, à temperatura ambiente. 0 bolo do filtro seco foi agitado com água (300 ml) e filtra do. 0 bolo do filtro foi lavado com acetonitrilo (400 ml). 0 bolo do filtro foi deixado secar à temperatura ambiente, originando 26,63 g de di-hidrato de LYI63892 cristalino: NMR (300 MHz, DC1/D20): ppm 7,42 (5H,s); 5,25 (1H,d); 4,74 (1H,s); 3,81 (1H,d de t); 2,44 (2H, m); 1,57 (1H,m); 1,22 (1H, d de d); raio X: (oa parâmetros e o modelo de difracção com um poder de Raio X para o composto produzido neste Exera pio são dad:os no Quadro (I) acima). — 18 —

EXEMPLO 2

Tri-hidrato de LY163892 Procedimento A 0 solvafco bis (DMP) de LY163892 (4,0 g) foi suspenso em água (30,8 ml) e a suspensão foi aque oida aos 50°C. 0 pH da suspensão foi ajustado a 1,57 através da adição de ácido clorídrico concentrado, ã suspensão foi adicionado EDTA de sódio (0,05 g). A suspensão foi agitada durante trinta minutos, e carvão de lenha (Darc^ foi adlcio nado e a suspensão foi filtrada. 0 filtrado foi semeado com cristais de mono-hidrato de LY163892 e o pH da suspensão foi ajustado a 2,08 através da adição de ácido clorídrico concen trado, para induzir a cristalização. A suspensão foi agitada, durante 30 minutos, ao fim de cujo tempo o pH pH foi ajustado desde 1,9 a 4,8 através da adição de trietilamina. A suspensão foi arrefecida à temperatura ambiente, filtrada, e o sólido recolhido (mono-hidrato em bruto) foi lavado com água (6 ml). 0 filtrado foi misturado com um volume igual de ace-tonitrilo. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente, durante uma hora e filtrada. 0 bolo do filtro foi lavado com acetonitrilo e deixado secar em aberto, à tempera tura ambiente para originar 0,48 g de tri-hidrato de LYI63892 cristalino. Análise de Karl Fischer: 14,4% de humidade.

Procedimento B 0 solvato bis (DMF) de Lyl63892 (1,30 g) foi suspenso em -água (10 ml). A suspensão foi aque cida aos 50°C. EDTA de sódio (0,01 g) foi adicionado à suspensão aquecida. 0 pH da suspensão foi ajustado a 8,6 através da adição 'da solução de bi-carbonato de sódio aquosa, saturada, resultante numa solução. A solução foi agitada . durante vinte minutos, 0 pH da solução foi baixado lentamen te a 7,6 através da adição de ácido clorídrico (2N). A solu 19-

\ çâo foi semeada com cristais de mono-hidráfco de LY163892. 0 pH da solução foi novamente ajustado, através da adição do ácido clorídrico aquoso, a 70 para induzir a precipitação. Λ suspensão foi agitada durante trinta minutos. 0 pH da sus-pensão foi novamente ajustado a cerca de 7,0 (de 7,7), atra vés da adição de ácido clorídrico aquoso. Depois o pH da su£ pensão ter estabelizado a 7,2, o pH foi baixado a aproximada mente 4,6 através da adição de ácido clorídrico concentrado. A solução foi agitada durante trinta minutos, para assegurar que o pH da solução fosse estável, e arrefecida à temperatu ra ambiente e agitada durante duas horas. A suspensão foi fijL trada e os cristais recolhidos lavados com água (aproximada mente 4 ml). Os cristais foram deixados secar ao ar, à tempe ratura ambiente para dar 0,59 g, 56,7% de rendimento em tri-hidrato de LY163892 cristalino. Análise de Karl Fisher: 11,3% de teor em humidade. EXEMPLO 3

Mono-hldrato de LY163892 a partir do Trl-hidrato de LY163892 0 procedimento seguinte foi reali zado de acordo com os padrões de "Foods and Drug Administra tions Good Manufacturing Practices". Agua (1,621) e ácido clorídrico (12 molar; 43,0 ml) foram combinados e agitados aos 20°c. 0 tri-hidrato do ácido 7 -C2.5-(R}~2*-fenil-2'-arni no-acetamidoJ'-3-cloro-3- (1 -carbo-1 -detiacef em)-4-carboxílico, (200,0 g) foi adicionado à solução e a suspensão resultante agitada durante 30 minutos. Acido clorídrico adicional (10ml) foi adicionado e a suspensão foi agitada durante 20 minutos, para efeetuar a solução. Carvão de lenha (8,0 g) foi adicionado à solução e a suspensão resultante foi agitada durante 30 minutos. A suspensão foi filtrada através de um filtro HIFL(^ajuda apoiado num filtro de fibra de vidro (o filtro foi depois lavado com 100 ml de água). 0 filtrado foi aqueci- -20-

do aos 45°C, durante um período de 25 minutos. Tri-etilamiaa foi lentamente adicionada ao filtrado para aumentar o pH da solução a 1,3 (a temperatura do. filtrado foi mantida entre os 45° e os 50°C, durante a adição). A solução foi semeada com 100 mg de mono-hidrato de LY163892, resultando numa sus pensão. A suspensão foi agitada durante uma hora, aos 50°C. 0 pH da suspensão foi aumentado a 4,3 lentaraente através da adição de trietilamina. A suspensão foi agitada, durante uns 15 minutos adicionais, aos 50°C, depois arrefecida aos 25°C e agitada durante uma hora. A suspensão foi filtrada num funil de Buchner de 24 om que encaixa numa placa de polipropi^ leno. 0 bolo de filtro foi lavado com água (2x250 ml), depois o funil foi coberto e vácuo foi aplicado ao bolo do filtro, durante a noite. 0 bolo do filtro foi colocado num secador de ar limpo, aos 30°C, durante 24 horas, para dar 119,90 g, 65,9? de rendimento de mono-hidrato de LY163892 cristalino.

EXEMPLO 4J

Mono-hidrato de LY163892 a partir de Di-hidrato de LY163.892 0 di- hidrato de LY163892 (1,1 g) foi suspenso em 9,5 ml de água a uma temperatura de cerca dos 45°C. A seguir, hidróxido de sódio 2N foi adicionado ate que a solução resultasse (a cerca de pH 7.6). A solução foi filtrada e ácido clorídrico 2N foi adicionado até que 0 pH fosse aproximadamente de 4. A mistura foi filtrada e 0 sóljL do recolhido foi lavado com água quente. 0a cristais foram secoe ao ar, para fornecer mono-hidrato de LY163892, quando comparado por cristalografia de raio X em relação a um padrão de referência autêntico. Análise de Karl Fisher=5,78% de humidade.

Nos Exemplos 5 até o 9 seguintes, o termo "ingrediente activo de LY163392" é o di-hidrato ou o tri-hidrato, ou uma mistura de um ou maia desses hidratos. * -21

V Ο termo preferencialmente indica o hidrato microcristalino, com os modelos de difracção com um poder de raio X dos Quadros I e IX acima e especialmente o di-hidrato com o modelo do Quadro I. EXEMPLO 5 Cápsulas de gelatina dura são pre paradas usando os ingredientes seguintes:

Quantidade (mg/oápsulaJ

Ingrediente activo de LY163892 200 pó fluxável de amido 186 pó fluxável de amido com 5% de silicone 50 estearato de magnésio 2,5

Os ingredientes anteriores são misturados e vão encher cápsulas de gelatina dura em quanti dades de 438 ,5 mg. EXEMPLO 6

Uma fórmula de comprimido e prepa rada usando os ingredientes indicados a seguir:

Quantidade (mg/comprimido) ingrediente aetivo de LY163892 celulose microcristalina dioxido de silicone, fumado ácido esteárico 200 200 10 5 03 componentes são misturados e pren sados em forma de comprimidos, cada um pesando *415 mg. EXEMPLO 7

Supositórios cada um contendo 200 mg de ingrediente aetivo, são feitos da forma seguinte: 200 mg 200 mg

Ingrediente aetivo de LY163892 gliceretos de ácido gordo saturado até 0 ingrediente aetivo é passado atra vás de uma peneira dos E.U.A. de malha No.60 e suspenso em gliceratos de ácido gordo saturado previamente fundidos, usan do o calor mínimo necessário. A mistura foi depois vazada num molde de supositório de capacidade nominal de 2g e deixa do arrefecer. 23-

EXEMPLO 6 ''··

Suspensão Aquosa pronta a ser usada ingrediente âctivo celulose com carboxi-metilcelulose 210 mg de sodio 95 mg sacarose 1,85g parafenos 3 mg silicone em emulsão 2,5mg pluronico 5 mg agente de gosto 2 mg agente dê cor 0,5 mg água purificada q.b.p. 5 ml

Os ingredientes são peneirados.

Os parafenos são dissolvidos em água purificada quente e, depois de arrefecimento, os outros ingredientes são adicio nados, água purificada suficiente é adicionada para produzir o volume necessário. A suspensão pode ser depois passada atra vás de um moinho de suspensões coloidais ou ura homogenizador para produzir uma dispersão raais elegante. EXEMPLO 9 § Hf paflgão para Heconstitu i ç ã o ingrediente activo de LY163892 210 mg sacarose 3 g goma de xantano 5 mg amido modificado 10 mg silioone em emulsão 5 mg lauril-sulfato de sódio 0,5 mg metil-celulose 2mg agente de gosto 0,5 mg colorante

Os ingredientes são peneirados e misturados num misturador adequado, como um de pás gémeas, do tipo Nauta ée centro gémeo ou um misturador de faixa. Para constituir a suspensão um volume suficiente de água purificada é adicionado, para produzir o volume necessário.

Claims

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HEIVINDICAgOBS

13, - Processo para a preparação de uma forma di-hidrato cristalino do composto de fórmula (I):

I earacterizado por compreender a dissolução de um solvato mono ou bis (N,N'-dimetilformamida) de um composto de fórmula (I) em água, e o ajustamento do pH a cerca de 3?6 seguido por fil_ tração e secagem ao ar, à temperfetura ambiente.
2&„ - Processo de acordo com a rei^ vindicação 1, earacterizado por sa preparar uma forma di-hl drato cristalino de um composto de fó>mula (I) de acordo com o modelo de difraeção aos raios X seguinte, obtido por uma radiação de cobre filtrada por níquel, de em que d representa o espaço interplanar e 1/I.j a intensidade rela tiva: /d

I/I1 16,35 9,82 9,50 8,18 6,46 6,32 5,40 4,72 4,48 4,07 3,88 3,78 3,60 3,45 3,31 3,24 3,10 2,99 2,92 1 ,00 0,05 0,05 0,90 0,01 0,04 0,02 0,11 0,04 0,19 0,02 0,07 0,08 0,04 0.01 0,05 0,02 0,05 0,05
3 -·. - Processo para a preparação de uma forma tri-hidrato cristalino de um composto de fdrrau ia (I):

I caracterizado por compreender a dissolução de um solvato mono ou bis (H ,N' -dimetilformamida) de um compoeto de fórmu la (I) em água, o ajustamento do pH a cerca de 4,8 a cerca de 4,9, a remoção do mono-hidrato formado desta forma, e a adição do acetonitrilo seguido, por filtração e secagem ao ar, para originar o referido tri-hidrato. 4ã„ - Processo de acordo com a rei vindicação 3, caracterizado por a preparação uma forma tri--hidrato cristalino de um composto de formula (X) que apresenta o modelo de difracção aos raios X seguinte, obtido com uma radiação de cobre filtrada por níquel, de/s1,54l8A, em que d representa o espaço de interplanar e I/I1 a intensida de relativas t

..d I/I1 11 ,94 1 ,00 7,49 0,15 5,94 0,05 5,27 0,03 4,67 0,02 3 s 95 0,18 3,63 0,03 3,34 0,03 3,07 0,03 Lisboa, 10 de Novembro de 1989

RUA VICTCH COF®®N. 10-A, 1/ 1200 LISBOA