PT90656B

PT90656B - Processo de preparacao de esteroides aromaticos, inibidores da 5-alfa-redutase, e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT90656B
Application number: PT90656A
Authority: PT
Inventors: Dennis Alan Holt; Mark Alan Levy; Brian Walter Metcalf
Original assignee: Smithkline Beckman Corp
Priority date: 1988-05-25
Filing date: 1989-05-24
Publication date: 1994-10-31
Also published as: HK1006461A1; ES2065378T3; EP0343954A3; ZA893971B; CA1331457C; DK279790A; WO1989011282A1; AU3748789A; DK130393D0; EP0343954A2; IE891732L; DK130393A; AU627466B2; GR3015135T3; DE68919537T2; ATE114665T1; NO174964C; DK169787B1; IE68858B1; JPH03504498A

Description

DESCRIÇÃO

DA

PATENTE DE INVENÇÃO

N.° 90 656

REQUERENTE: SMITHKLINE BECKMAN CORPORATION, norte-america na (Estado de Pennsylvania)industrial,com se de em One Franklin Plaza,Philadelphia, PA 19103,Estados Unidos da América.

EPÍGRAFE: » PROCESSO DE PREPARAÇÃO DE ESTEROlDES AROMA

TICOS,INIBIDORES DA 5-REDUTASE,E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTEM

INVENTORES: Dennis Alan Holt,Mark Alan Levy e Brian Walter Metcalf.

Reivindicação do direito de prioridade ao abrigo do artigo 4.° da Convenção de Paris de 20 de Março de 1883.

Estados Unidos da América em 25 de Maio de 1988 sob o n®. 198 534.

-NP1 MOO 113 RF 16732

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PATENTE NS. 90 656

Processo de preparação de esteróides aromáticos, inibidores da 5-°(-reduta se, e de composições farmacêuticas que os contêm para que

SMITHKLINE BECKMAN CORPORATION, pretende obter privilégio de invenção em Portugal.

RESUMO presente invento refere-se ao processo de preparação de análogos acrilato substituídos de compostos esteróides sintéticos de fórmula (I)

o qual compreende

a) quando n é 0, a reacção de um composto de fórmula (V)

(V)

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-2com monóxido de carbono e um catalisador de paládio na presença de um alcanol, para dar um composto 3-alcoxicarbonilo de Fórmula I, o qual é hidrolisado para dar o ácido carboxílico livre ou

b) quando n é 1, a reacçSo de um composto de fórmula (VI)

com um agente oxidante;

e em seguida a formação opcional de um sal farmaceuticamente aceitável.

presente invento refere-se ainda ao processo de prepara ção de intermediários dos compostos e de composições farmacêuticas .

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-3HEMORIA DESCRITIVA

Campo do invento presente invento refere-se ao processo de preparação de certos análogos de anel A aromático substituido dos compostos sintéticos esteréidais, composições farmacêuticas contendo estes compostos e processos (para a utilização destes compostos) para a inibição do esteróide 5-** -redutase de mamíferos.

Descrição da Técnica Relacionada

A classe de hormonas esteróides conhecida como androgénios é responsável pelas características físicas que diferenciam os machos das fêmeas. Dos vários orgãos que produzem androgénios, os testículos produzem estas hormonas nas quantidades mais elevadas. Os centros do cérebro exercem controlo principal sobre o nível de produção de androgénio. Numerosas manifestações físicas e estados de doença resultam quando o controlo de produção é ineficaz e resulta numa produção excessiva da hormona de androgénio. Por exemplo, o acne vulgaris, a seborreia, o hirsutismo femenino, e a hipertrofia prostática benigna estão relacionados com elevados níveis de androgénio. Adicionalmente, a incidência da calvíce típica nos machos tem sido associada com altos níveis de androgénio.

A testosterona é o principal androgénio segregado pelos testículos e é o esteróide androgénico principal no plasma dos machos. É agora conhecido que os androgénios 5-<*-reduzidos são as hormonas activas em alguns tecidos tais como a próstata e a glândula sebácea. A testosterona circulante serve assim como uma pró-hormona para a di-hidrotestosterona (DHT), seu aná logo 5-*-reduzido, nestes tecidos mas não noutros tais como músculo e testículo. 0 esteróide 5-<*-redutase é uma enzima NADPH-dependente que converte a testosterona para DHT. A impor tância desta enzima no desenvolvimento de machos foi dramática69 389

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-4mente sublinhada pela descoberta de uma deficiência genética em esteróide 5-<*·-redutase em machos pseudo-hermafroditas. Imperato-Mcginley, J., et al., (1979), J. Steroid Biochem. 11: 637-648.

reconhecimento da importância dos elevados niveis de DHT em muitos estados de doença têm estimulado muitos esforços para sintetizar inibidores desta enzima. Tem sido descritos vários inibidores conhecidos do esteróide 5--redutase.

primeiro inibidor descrito foi o esteróide de ácido 17- 0 -carboxílico por Hsia e Voight em 1973. J. Invest. Dermat. .62:224-227. Foi descrito um secosteróide e verificou-se também a utilidade como um marcador de afinidade para a 5- λ -redu tase. Robaire, B. et al., (1977), J. Steroid Biochem. 8:307310. Tem sido descrito um esteróide de diazocetona como um po tente inibidor dependente do tempo do esteróide 5-⁰¹ -redutase. Blohm, T. R., et al., (1980), Biochem. Biophys. Res. Comm. 95:273-280; Batente dos Estados Unidos 4 317 817, 2 de Março de 1982. Boi descrito um grupo de inibidores de esteróide 4-aza do esteróide 5- <*-redutase, na Batente dos Estados Unidos, 4 377 584 que foi publicada a 22 de Março de 1983, e em liang,

T. ^e~fc nl· (1983) J. Steroid Biochem. 19, 385-390. Verificou-se que era também um inactivador dependente do tempo do esteróide 5--redutase, o esteróide 6-metileno. Betrow, V., et al., (1981), Steroids 38:121-140.

Tem sido também descritos outros inibidores do esteróide 5_ol-redutase. A Batente dos Estados Unidos 4 361 578 que foi publicada a 2 de Junho de 1986, descreve uma classe de inibido, res da enzima homosteróide. A Batente dos Estados Unidos 4 191 759 descreve amidas da 17$-carboxi-4-androsteno-3-ona que sâo activas como inibidores do esteróide 5-<*>-redutase. As Batentes Japonesas J60146855-A e J6O116657-A descrevem vários de rivados da anilina tendo numerosas actividades incluindo a acti vidade de inibição d 5- ·* -redutase. A Batente Japonesa

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-5J60142941-A descreve cetonas substituídas por fenilo tendo uma actividade de inibição d 5-<*-redutase e a Batente Europeia EP175516-A descreve várias amidas substituídas por fenilo tendo actividade similar. Shiseido referenciou os derivados do terpeno que são inibidores activos do esteróide 5--redutase, Batente Japonesa J59053417-Á.

Tem sido descrita a carbonilação catalizada por Paládio de derivados de androsteno substituidos. Caacbi, S. et al., (1986) Tet. lett. 27:5951-5934, e Dolle, R. et al., (1987) J.C.S.Chem. Comm. 904-905. Contudo não é descrita qualquer acti vidade biológica para os compostos sintetizados.

Sumário do invento presente invento baseia-se na descoberta de que o esteróide 5- -redutase é inibido por certos análogos de anel A aro mático substituído dos compostos sintéticos esteróidais. Os compostos são inibidores potentes da enzima.

Bresentemente os compostos preferidos do invento e compos tos utilizados nas composições farmacêuticas inventadas e nos processos inventados incluem:

Ácido 17$-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxílico,

Ácido 174-(N-butilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxílico,

Ácido 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10), l6-tetraeno-3-carboxílico,

Ácido 17(3-(N-butilcarboxamida)-estra-l, 3,5(10), 16-tetra eno-3-carboxilico,

Ácido 17/3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l, 3,5(10)-6,8-pentaeno-3-carboxílico,

Acido 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-metil-estra-l,3, 5(10)-trieno-3-carboxílico,

Acido 170-(Ν,Ν-diisopropilearboxamida)-4-metil-estra-l,3,

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5(10)-trieno-3-carboxílico,

Ácido Ylfi-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10),

6-tetraeno-3-carboxílico,

Ácido 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-cloroestra-l, 3, (10 )-trieno-3-carboxilico,

Ácido 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-4-cloroestra-l,3, 5(10)-trieno-3-carboxílico,

Ácido 17^-(N,N-diisopropilcarboxami.da)-estra-l, 3,5-(10)-trieno-3-acético,

Ácido 17^-(N-t-butilcarboxamida)-estra-l ,3,5 (10 )-trieno-3-acético.

Num outro aspecto do presente invento são proporcionados intermediários novos e processos novos úteis na preparaçSo de compostos de inibiçSo da 5-^ -redutase do presente invento.

invento é também um processo para a inibição da actividade da 5-°¹ -redutase em mamíferos incluindo humanos, que compreende a administração interna a um sujeito de uma quantidade efectiva de um composto de inibição da 5-<*·-redutase do presen te invento.

Incluídas no presente invento estão as composições farmacêuticas compreendendo um veículo farmacêutico e compostos úteis nos processos do invento.

Descrição detalhada do invento

Os compostos presentemente inventados que inibem a 5-<* -redutase tem a seguinte Fórmula (I):

^AOCCCHg

(I) •3

X

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-7em que:

Os anéis B, C e B tem ligações duplas opcionais onde indi cado pelas linhas a tracejado desde que o anel C não tenha uma ligação dupla quando o anel B tem uma ligação dupla C_Q-C_n e o χ θ y anel B não tenha uma ligação dupla θ]_6”^17 9^uan^° representa dois substituintes ou um substituinte divalente;

X

Br, I,

3 , X e X são qualquer combinação acessível de H, Cl, E, CE^ ou alquilo Cj.g» OH, alcoxi, 0^_^, CN, N0₂, N(R¹)2, CHO, ou CO₂R⁵¹;

A é 0 ou S; n é o ou 1;

rI é independentemente de cada H ou alquilo (l) cx -hidrogénio, o<-hidroxilo, ou -acetoxi e/ou e R⁵ é (a) /5 _w-tí-R⁴onde W é (i) (ii) (iii) (iV) (V) (Vi) uma ligação ou alquilo C^^ hidrogénio hidroxilo alquilo 0^-8 hidroxialquilo alcoxi C-, e R^ é

NR⁵R⁶, '1-8 '1-8 ,6 onde R e R são independentemente de cada um seleccionados a partir de hidro génio alquilo C^_q, cicloalquiloC^g, feni lo; ou R^ e R^ tomados conjuntamente com o azoto ao qual estão ligados representam um anel saturado de 5 a 6 membros, compreendendo até um outro heteroátomo seleccionado a partir do oxigénio e azoto ou (Vii) OR , onde R é metal alcalino, alquilo ^{69 389} __

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-8ou benzilo ou (b) /^-Alk-OR⁸, onde Alk é alquilo e R⁸ é (i) fenilalquil C-j__g carbonilo, (ii) cicloalquil Cç^O ^car^^onil°’ (iii) benzoílo, (iV) alcoxi G-^_g carbonilo, (V) amino, ou amino substituído por alquilo carbonilo, ou (Vi) alquilo C^_g, (2) =CH-W-C0-r4 ou =CH-W-0R⁸, onde W é uma ligaçSo ou alquilo

C-^_i2> e R^ e R têm o significado definido acima e R é também alquilC^_2Q carbonilo;

(5) onde a ligação a tracejado substitui o 17-«* -hidrogénio, (4) -hidrogénio e Í^-NHCOR⁹ onde R⁹ alquilo C-^_-^2 °^u NR^R^ onde R⁹ e R^ têm o significado definido acima;

(5) ⁰⁴ -hidrogénio e P-ciano (6) ot -hidrogénio e (3_-tetrazolilo, ou (7) ceto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Como aqui utilizado, a menos que de outra forma especificado, alquilo CL e alk C, _ significam uma cadeia de hidro1—η 1—n carboneto linear ou ramificada tendo de 1 a n carbonos, Alk si. gnifica uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificado tendo 1 a 12 carbonos, e combinação acessível significa qualquer combinação de substituintes que está disponível por síntese quf mica e é estável.

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TC

-9Entre os compostos da Fórmula (i) são preferidos aqueles em que x\ X^ e X^ sâo H.

Também entre os compostos presentemente inventados são preferidos aqueles tendo a Fórmula (II).

(II) em que;

5 6

X , X e X sâo independentemente H, halo ou alquilo C^g;

r! independentemente de cada um é H ou alquilo C-. _p; e 1 3 ^1-0 é

(a) CHCCH^CÍ^OR¹ ou (b) CONR^-R¹ ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Particularmente preferidos sâo os compostos da Fórmula (II) substituídos na posição 3 por CC^H.

Entre os compostos presentemente inventados são também preferidos aqueles tendo a Fórmula (III):

(III)

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SKB CASE 14409 r_ . v-T* ·

-10em que R¹, R¹^, x\ χ5 θ χθ _{s&0 como} definidos na Fórmula (II).

Adicionalmente, entre os compostos presentemente inventados são preferidos aqueles tendo a Fórmula (IV);

2 Π em que R^x, R e R^^ são como definidos na Fórmula (II).

São também preferidos os compostos da Fórmula (I) em que o substituinte da posição 3 é Cí^COOH, x\ X^ e X^ é hidrogénio e R^ é 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida) ou Ίΐβ-(N-t-butilcarboxamida) .

Os compostos de Fórmula (i) são incluídos nas composições farmacêuticas do invento e utilizados nos processos do invento.

Gomo acima utilizado e durante o resto da especificação e reivindicações, os carbonos do núcleo esteróide são numerados e os anéis são marcados com letras pela nomenclatura padrão co mo se segue:

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-11Os esquemas I e II mostram a formação de compostos da Fór mula (la) que são compostos d Fórmula (i) em que Iv é substi14 3 tuído por R que é R ou metades que podem ser convertidas nas de R por reacçSes químicas conhecidas tal como descrito em 2

J. Fried e J. Edwards, Organic Reactions em Steroid Chemistry,

Pub: Van Nostrand Reinhold Company (1972). Como demonstrado 14 3 nos exemplos seguintes, as reacções para converter R em R são executadas em produtos do caminho sintético dos esquemas I e II ou, onde apropriado ou de preferencia em certos intermediários, neste caminho sintético.

Esquema I

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-120 esquema I descreve a formação de compostos da Fórmula (la) em que as linhas a tracejado indicam ligações duplas opcionais; e X¹, X², e X^ são X¹, X² e X^ como na Fórmula (I) ou metades que podem ser convertidas em x\ X² e X^ pelos conheci, dos processos tal como descrito em Carey e Sundherg, Advanced Organic Chemistry 2nd Ed. (1983), e exemplificados nos exemplos

20-29, abaixo. Os materiais de partida de fórmula (a) são conh ecidos e rapidamente disponíveis ou são sintetizados a partir de precursores conhecidos utilizando os processos conhecidos.

De acordo com o Esquema I, um composto (a) e 2,6-di-terc-butil-4-metilpiridina num solvente orgânico apropriado, de preferên cia diclorometano, é arrefecido de -20°C a 20°C, de preferência 0°C, e feito reagir com um anidrido trihaloalquilo sulfónico de preferência anidrido trifluorometanosulfónico para formar compostos (b).

Os compostos (b) são então misturados com um composto de paládio (II), tal como acetato de bis(trifenilfosfina) paládio (II), ou, de preferência, acetato de paládio (ll) e uma fosfina tal como bis(difenilfosfina)propano, uma base orgânica tal como uma trialquilamina de preferência trietilamina, um alcóol de alquilo C-^_q, de preferência metanol num solvente orgânico adequado tal como dicloroetano e dimetilsulfóxido e aquecido de 30°C a 100°C, de preferência 70°C, para render os compostos (c), que são compostos da Fórmula (Ia) em que R^ é alquilo C^__atal como metilo. Os compostos (c) são feitos reagir em seguida com uma base adequada de preferência carbonato de potássio e depois acidificados para render os compostos (d).

Os compostos da Fórmula (la) insaturados em são preparados utilizando modificações do processo do Esquema I tal como exemplificado no Exemplo 3 abaixo.

Os compostos da Fórmula (la) em que A é S são preparados a partir de compostos da Fórmula (la) em que A é 0 utilizando processos padrão conhecidos para os peritos na arte tal como

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-13descrito no Exemplo 18.

Esquema II

O Esquema II sublinha a formação de compostos da Fórmula (la) em que 2?, X^, e X^ são como na Fórmula (I) e a ligação Cg-C^ é insaturada. Os materiais de partida para o Esquema II são compostos (a) do Esquema I. Como sublinhado no Esquema II, os compostos (a) são tratados num solvente orgânico adequado tal como piridina com um anidrido de alquilo 0-^__θ ^{como an}^-drido acético para render compostos da fórmula (g). Os compos69 389 /

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-14tos da fórmula (g) são então tratados com um agente oxidante tal como clorocromato de piridlnio de preferencia trióxido de crómio (CrO^) para formar compostos (h).

Os compostos (i) são preparados por tratamento dos compo_s tos (h) com um agente redutor tal como hidreto de alumínio lítio, hidreto de diisobutilalumínio, ou de preferência borohidre to de sódio (NaBH^). Os compostos (j), compostos da Fórmula (I) em que a ligação é insaturada, são então preparados como mostrado no Esquema I.

Os compostos da Fórmula (Ia) insaturados em são pre parados utilizando modificaçães dos processos do Esquema I e II que serão facilmente evidentes para os peritos na arte que conhecem estes esquemas. Um exemplo de uma tal modificação é mos trada no exemplo 19.

Os compostos da Fórmula (I) em que n é 1 são preparados por reacção de intermediários de trifluorometilsulfonato (Fórmula V) com trihutilvinilestanano e um catalizador de paládio (II) para o correspondente derivado de 3-etenilo. 0 tratamento com 9-horobiciclononano ou um reagente similar seguido por peróxido de hidrogénio dá o derivado de 3-hidroxietilo que é adicionalmente oxidado para os compostos de ácido 3-acético.

Sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis dos compostos do invento contendo um grupo básico são formados quan do apropriados com ácidos inorgânicos ou orgânicos fortes ou moderadamente fortes na presença de uma amina básica por processos conhecidos na arte. For exemplo, a base é feita reagir com um ácido inorgânico ou orgânico num solvente aquoso miscível tal como etanol com isolamento do sal por remoção do solvente ou num solvente aquoso imiscível quando o ácido é soluvél nele tal como éter etílico ou clorofórmio, com separação do sal desejado directamente ou isolado por remoção do solvente. Exemplos de sais de adição de ácido que são incluidos nes te invento são os sais de maleato, fumarato, lactato, oxalato,

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-15metanosulfonato, etano-sulfonato, benzeno-sulfonato, tartarato, citrato, hidrocloreto, hi dro brome to, sulfato, fosfato e nitrato.

Sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis de com postos do invento contendo um grupo acídico, são preparados pelos processos conhecidos a partir de bases orgânicas e inorgânicas incluindo bases de metal alcalino e alcalinoterroso não tóxicas, por exemplo hidróxido de cálcio, sódio e potássio, hi dróxido de amónia e bases orgânicas não tóxicas tal como trietilamina, butilamina, piperazina e (tri-hidroximetil)metilamina.

Na preparação dos compostos da Fórmula (I) do presente invento são sintetizados intermediários novos da Fórmula (V) seguinte;

em que:

As ligações duplas do anel B, C e L, x\ X² e x\ são como definidos na Fórmula (I), R é como definido na Fórmula (i) excepto que R^ não é ceto quando x\ X^ e X^ são hidrogénio.

Forque os compostos da Fórmula (I) inibem a actividade do esteróide 5- <*-redutase, eles tem uma utilidade terapêutica no tratamento das doenças e estados em que decréscimos na actividade de DHT produzem o efeito terapêutico desejado. Tais doen ças e estados incluem acne vulgaris, seborreia, hirsutismo feminino, doenças da próstata, tal como hipertrofia prostática benigna, calvicie padrão do macho.

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-16A potência dos vários compostos do invento foi testada pa ra a potência na inibição do esteróide 5-«* -redutase humano utilizando tecido de próstatas humanas hiper-plásticas. Na de terminação da potência na inibição da enzima humana, foi empre gue o seguinte procedimento.

As próstatas humanas congeladas foram descongeladas e cor •Z tadas em pedaços pequenos (5 mnr). 0 tecido foi homogeneizado em 3 a 5 volumes de fosfato de potássio a 20 mM, pH 6,5, tampão contendo sacarose a 0,33 M, ditiotreitol, a 1 mM e NADPH a 50 /iM com um Brinkmann Polytron (Sybron Corporation, West bury, New York). A solução foi submetida à acção do som durante 3 a 5 minutos com um Sonifier (Branson Sonic Power Co.) seguido por homogeneização à mão num homogeneizador de Dounce vidro-a-vidro (Kontes Glass Company, Vineland, New Jersey).

As particulas próstaticas foram obtidas por centrifugação diferencial a 600 ou 1000 x g durante 20 minutos e 140 000 x g durante 60 minutos a 4°C. A pelota obtida a partir da centrifugação a 140 000 x g foi lavada com 5 a 10 volumes de tecido do tampão descrito acima e recentrifugada a 140 000 x g. A pelota resultante foi suspendida em tampão de fosfato de potássio a 20 mM, pH 6,5, contendo glicerol a 20%, ditiotreitol a 1 mM, e NADPH a 50 /tM. A solução particulada suspendida foi armazenada a -80°C.

Uma quantidade constante de r¹⁴c_7 -testosterona (52 a 55 mCi/mmol, New England Nuclear, Boston, MA) em etanol e quantidades variadas do inibidor potencial em etanol foram depositadas em tubos de teste e concentradas à secura num Savant Speed Vac. A cada tubo foi adicionado tampão 20 /*1 de NADPH a 10 mM e uma aliquota de solução particulada prostática a um volume final de 0,5 ml de citrato de sódio a 50 mM, pH 5,0. Depois da incubação da solução a 37°0 durante 20 a 30 minutos a reacção foi extinguida pela adição de 4 ml de acetato de etilo e 0,25 μπιοί cada de testosterona, di-hidrotestosterona, androstanodi-

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-17ol, e andrastanodiona como veículos. A camada orgânica foi re movida para um segundo tubo de teste e evaporada à secura in vacuo. 0 resíduo foi dissolvido em 20 a 30 de clorofórmio, marcado numa faixa individual de uma chapa de TLC de silica gel pré-canelada com 20 x 20 cm (Si 25OF-PA, Baker Chemical) e desenvolvido duas vezes com acetona:clorofórmio (1:9). 0 conteúdo radioquímico nas bandas do substrato e dos produtos foi determinado com um explorador de imagem BIOSCAN (Bioscan, Inc., Washington, D.C.). Foi calculada a percentagem de marcaçSo rá dio recuperado convertida em produto, a partir da qual foi determinada a actividade da enzima. Todas as incubações foram conduzidas de forma a que não foi consumido mais do que 12% do substrato (testosterona).

Os dados obtidos experimentalmente foram ajustados por com putador a uma função linear por representação gráfica do recíproco da actividade da enzima (1/velocidade) contra a variável concentração do inibidor (Dixon, M. (1953), Biochem. J., 55, 170). Supondo que o inibidor esteróidal é um inibidor competitivo contra a testosterona, pode ser calculado um valor para a constante de inibição (K^) a partir da equação .1:

K_± = (B/A)/(S/K + 1) Equação 1 onde B é a intercepção no eixo 1/velocidade, A é o declive da linha, S é a concentração do substrato (testosterona) utilizado na experiência, e K é a constante de Michaelis-Menton do substrato (testosterona) determinado numa experiência separada para ser 4,5 /aM.

A tabela II exibe os resultados dos testes acima e mostra que os compostos testados do invento são inibidores potentes do esteróide 5-«^-redutase humano.

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-18-
Tabela II
Constantes de Inibição do Esteróide 5-**	-redutase
Brostático Humano
Composto	Κ_±(ηΜ)
Ácido 17/?-(Ν,Ν-Diisopropil carboxamida)estra-1,5,5(10)-trieno-3-carboxílico	19
Acido 17^-(N-terc-Butilcarboxamida)-estra1,5,5(10)-trieno-3-carboxílico	43
Acido 17^-(N-N-Diisopropilcarboxamida)-estra1,5,5(10),6,8-pentaeno-3-carboxílico	40
Ácido 17/3-(N, N-Diisopropilcarboxamida )-estra1,5,5(10),6-tetraeno-5-carboxílico	30
Acido 17^-(N-N-Diisopropilcarboxamida)-estra1,5,5(10),l6-tetraeno-5-carboxílico	70
Acido 17^-(N-terc-Butilcarboxamida)-estra1,5,5(10),l6-tetraeno-3-carboxílico	60
Acido 17(0 - (lí, N-Diisopropilcarboxamida)-2metil-estra-1,5,5(10)-trieno-3-carboxílico	57
Aci do nf-(N,N-Diis opropilcarboxamida) - 4metil-estra-1,5,5(10)-trieno-3-carboxílico	270
Acido 17@-(N-N-diisopropilcarboxamida)-estra1,5,5(10)-trieno-3-acético	20

Um dos compostos do invento o ácido 17^-(N-terc-butilcarboxamina)-estra-l,3,5(lO)-trieno-3-carboxílico, foi também tes tado para a sua potência in vivo na inibição da actividade do esteróide 5-<* -redutase. Foi administrado este composto dissol vido em propileno-glicol e diluído em solução salina normal a ratos CD Charles River machos, de 48 dias de idade pesando apro ximadamente 200 gm. A seguir à administração do composto os

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-19animais foram sacrificados, as próstatas ventrais foram extirpadas e os níveis de DHT foram medidos pelo processo seguinte.

tecido da próstata foi extirpado, regulado, pesado, cor tado e lavado com tampão de fosfato. 0 tecido foi então homogeneizado em tampão de fosfato e extraído por adição de acetato de etilo e misturado no misturador orbital durante quarenta e cinco minutos. 0 acetato de etilo foi evaporado, o resíduo foi reconstituído em etanol e foi filtrado por centrifugação utilizando papel de filtro 0,45 /iM. Os componentes foram então separados utilizando HP1C de fase reversa recolhendo a frac ção de DHT. A fracção foi reduzida à secura e reconstituída em tampão de ensaio de DHT padrão disponível de Amersham. Os níveis de DHT foram então medidos utilizando as técnicas padrão tal como rádioimunoensaio.

Nos ratos tratados com o composto os níveis de DHT prostáticos foram diminuídos em quarenta por cento relativamente aos controlos tratados com veiculo (p<C^15) quatro horas depois da administração do composto a uma dose de 20 mg/kg.

Os compostos da Fórmula (I) são incorporados em formas de dosagem convenientes, tais como, cápsulas, comprimidos, ou pre parações injectáveis. São empregues veículos farmacêuticos só lidos ou líquidos. Os veículos sólidos incluem, amido, lactose, sulfato de cálcio di-hidratado, terra alba, sacarose, talco, gelatina, agar, pectina, acácia, estearato de magnésio e ácido esteárico. Os veículos líquidos incluem xarope, óleo de amendoim, azeite, solução salina e água. Similarmente, o veículo ou diluente pode incluir qualquer material de desprendimen to prolongado, tal como monostearato de glicerilo ou distearato de glicerilo, simples ou com uma cera. A quantidade de veículo sólido varia amplamente mas, será de preferência de cerca de 25 mg a cerca de 1 g por unidade de dosagem. Quando é utilizado um veículo liquido a preparação deve estar na forma de um xarope, elixir, emulsão, cápsula de gelatina mole, líquido in69 389

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-20jectável estéril tal como uma ampola, ou uma suspensão líquida aquosa ou não aquosa.

As preparações farmacêuticas são feitas seguindo as técni cas convencionais de um guími co farmacêutico envolvendo misturação, granulação, e compressão quando necessário para as formas de comprimido ou misturaçâo enchimento e dissolução de ingredientes como apropriado para dar os produtos orais ou paren téricos desejados.

As doses dos presentes compostos da Fórmula (I) numa unidade de dosagem farmacêutica como descritas acima serão uma quantidade eficaz não tóxica seleccionada a partir da gama 0,1 -1000 mg/kg de composto activo de preferência 1-100 mg/kg.

A dose seleccionada é administrada a um paciente humano em necessidade de inibição do esteróide 5- -redutase de 1-6 vezes ao dia, topicamente, oralmente, rectalmente, por injecção, ou continuamente por infusão. As unidades de dosagem oral para administração a humanos contêm de preferência de 1 a 500 mg do composto activo. E preferida a administração parentérica, que utiliza dosagens baixas, contudo, pode também ser utilizada a administração oral em dosagens elevadas quando segura e conveniente para o paciente.

Os processos inventados de inibição da actividade do este róide 5-oc-redutase em mamíferos incluindo humanos compreende a administração interaamente a um sujeito de uma quantidade de inibição do esteróide 5-«*· -redutase efectiva de um composto da Fórmula (I). Os processos inventados de redução do tamanho da próstata que incluem os processos de redução da velocidade à qual aumenta o tamanho da próstata compreendem a administração intemamente a um sujeito de uma quantidade efectiva de um com posto da Fórmula (i).

Os equivalentes contemplados dos compostos da Fórmula (I) incluem os compostos que após administração a mamíferos, inclu indo humanos, são metabolizados para os compostos da Fórmula

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-21(I) ou metabolizados para os metabolitos activos de composto da Fórmula (I) a uma velocidade suficiente e em quantidades su ficientes para produzirem a actividade fisiológica dos compostos da Fórmula I. Tais compostos serão também incluídos nas composições farmacêuticas inventadas e utilizados nos processos inventados.

Os exemplos seguintes ilustram a preparaç&o de compostos da Fórmula (I) e composições farmaceuticas contendo estes compostos . Os exemplos não se destinam a limitar o âmbito do invento como definido acima e como reivindicado abaixo.

Exemplo I

Acido 17^-(N,N-Diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)trieno-3-carboxillco (i) 3,17-Di-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10),16tetraeno.

Estrona (16,2 g, 60 mmol) e

2,6-di-terc-butil-4-metilpiridina (27 g, 130 mmol) foram dissolvidas em 500 ml de diclorometano e a solução foi arrefecida a 0°C. Foi então adicionado lentamente à solução anidrido tri fluorornetano-sulfónico (45,3 g 160 mmol). A solução resultante foi agitada a 0°C durante 2 horas e depois a 25°G durante 4 horas. A solução foi então lavada com ácido clorídrico (HCl) aquosa a 10%, bicarbonato de sódio (NaECO^) aquoso saturado, água salgada e depois seco e concentrado. A cromatografia (si lica gel, acetato de etilo (EtOAc) a 5% em hexano) proporcionou

25,3 g (79%) de 3,17-di(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(lO), 16-tetraeno.

(ii) 17-(N,N-Diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10),16-tetraeno.

Uma mistura de 3,17-di-(trifluorometilsulfonato)-estra-1,3,5(10),16-tetraeno (14 g, 26 mmol), acetato de palá dio (II) (500 mg), trifenilfosfina (l,lg), trietilamina (9 mi)

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-22diisopropilamina (50 ml), e dimetilformamida (100 ml) foi aque cida a 60°G sob uma atmosfera de monóxido de carbono durante 5 horas. A mistura foi concentrada, diluida com água, e cuidado samente lavada com diclorometano. Os estratos orgânicos combi nados foram então lavados com HC1 aquoso a 10%, NaHCO^ aquoso saturado, secos e concentrados a um óleo escuro. A cromatogra fia do óleo em silica gel (EtOAc a 15% em hexano) proporcionou 8 g (59%) de 17-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometil sulfonato)-estra-l,3,5(10), 16-tetraeno como um pó branco.

(iii) 3-Carbometoxi-17-(N,N-dilsopropllcarboxamlda)-estra 1,3,5(10), 16-tetraeno.

Uma mistura de 17-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10), 16-tetraeno (8,3 g, 16 mmol), acetato de paládio (II) (224 mg), l,3-bis(difenilfos fina)propano (410 mg), trietilamina (4,5 ml), metanol (32 ml),

1,2-dicloroetano (17 ml), e dimetilsulfóxido (50 ml) foi aquecida a 70°C durante 5 horas sob uma atmosfera de monóxido de carbono. A mistura reaccional arrefecida foi então diluida com clorofórmio e lavada com água, HC1 aquoso a 10%, NaHCO^ aquoso saturado, e água saágada e depois concentrada. 0 resíduo foi cromatografado (silica gel, EtOAc a 20% em hexano) para render 5 g (75%) de

3-carbometoxi-17-(N,N-diisopropilcarboxamida )-estra-l,3,5(10), 16-tetraeno.

(iV) 5-Garbometoxi-17ê-(N,N-dilsopropilcarboxamida)-estra -l,3,5(l0)-trieno.

3-Carbometoxi-17-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-1,3,5(10), 16-tetraeno (7,4 g 17,5 mmol) dissolvido em 125 ml EtOAc e 45 ml de etanol foi hidrogenado sobre óxido de platina (800 mg) a 1 atm. durante 3 horas. 0 catalizador foi removido por filtração e o filtrado concentrado para render 6 g (81% de

3-carbometoxi-17- β> -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno.

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SKB CASE 14409 .·' /\......

-23(V) Acido 17-β-(N,N-Liisopropilcarboxamida)-estra-l,3, 5(l0)-trieno-3-carboxilico.

3-Garbometoxi-17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-1,3,5(10)- trieno (93 mg, 0,2 mmol) e 100 mg de carbonato de potássio suspendido em 3 ml de metanol-água a 10:1 foram aquecidos a refluxo durante 18 horas. A mistura foi então acidifi cada com HCl a 10%, diluida com água, e extraida cuidadosamente com clorofórmio. A concentração dos extractos de clorofórmio seguida por recristalização a partir da acetona rendeu 81 mg (90%) de ácido 17/3-(N,N diisopropilcarboxamida)-estra-l,3, 5(lO)-trieno-3-carboxilico como um sólido branco, p.f. 233-234°G.

Exemplo 2

Ãcido 17i^-(N-terc-Butilcarboxamida)-estra1,5,5(lO)-trieno-3-carboxllico.

composto do título (p.f. 235-240°C a partir da acetona) foi preparado de acordo com o exemplo 1 (ii até v) por substituição da terc-butilimina por diisopropilamina.

Exemplo 3

Ácido 17/3-(N,N-Dllsopropilcarboxamida)-estra1,3,5(10), l6-tetraeno-3-carboxilico composto do título (p.f. 225-234°C) foi preparado de acordo com o Exemplo 1 (v) por substituíç&o do 3-carbometoxi-17-(K,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10), 16-tetraeno por 3-carbometoxi-17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3, 5(10) trieno.

Exemplo 4

Acido 17^-(N-terc-Butllcarboxamida)-estra1,3,5(10),-16-tetraeno-3-carboxilico composto do título (p.f. 212-215°C a partir do acetonitrilo) foi preparado de acordo com o Exemplo 1 (v) por substi69 389

SKB CASE 14409 ff

Sá

-24tuíçâo do 3-carbometoxi-17-(N-terc-butilcarboxamida)-estra-l,

3,5(10),-l6-tetraeno(preparado como no Exemplo 2) por 3-carbometoxi-17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(lO)-trieno.

Exemplo 5

Ácido 17/2-(N,N-Diisopropilcarboxamida)-estra1,3,5(10),-6,8-pentaeno-3-carboxílico composto do título (p.f. 257-260°C a partir do acetonitrilo) foi preparado de acordo com o exemplo 1 por substituiç&o da equilenina (l,3,5(l0)6,8-estrapentaeno-3-ol-17-ona) por estrona.

Exemplo 6

Acido 17/3-(Ν,Ν-Dlisopropll carboxamida )-2-metile stra-1,3,5(10)-tri eno-3-carboxíli co.

composto do título (p.f. 272-273°C) foi preparado de acordo com o Exemplo 1 por substituição da 2-metilestrona por estrona. A 2-Metilestrona foi preparada de acordo com o processo descrito por Kaneko, Hashimoto, e Kobayashi, Chem. Pharm. Buli.. 12, 196(1964) e por Patton, J. Org. Chem. 25, 2148(1960).

Exemplo 7

Ácido 17ft-(N,N-Diisopropllcarboxamida)-4-metilestra-l,3,5(lO)-trieno-5-carboxllico.

(i) 4-metil-4-estreno-3,17-dlona.

Uma solução de 4-metil-4-estreno-3-ona-173-ol (4-metil-19-nor-testosterona preparada de acordo com o processo des crito por Atwater, J. Amer. Chem Soc. 82 2847 (196c).; 12 g,

43,8 mmol) em 400 mli de diclorometano foi adicionada a uma solução agitada de clorocromato de piridínio (ccp, 14,2 g, 66 mmol) em 400 ml· de diclorometano. Passadas duas horas a mistura foi filtrada e o filtrado foi tratado com silica gel e carvão, fil69 389

SKB CASE 14409

-25trado e concentrado. A trituração do resíduo com acetona fria proporcionou 6,5 g (54%) de 4-metil-4-estreno-3,17-diona.

(ii) 4-Metil-estrona.

Uma mistura de 4-metil-4-estreno-3,17-diona (2 g, mmol) e 2 g de paládio em carbono a 10% em 100 ml de p-cimeno foi aquecida a refluxo durante 4 horas. A mistura quente foi entSo filtrada e o filtrado foi concentrado para render 900 mg da 4-metil-estrona bruta que foi utilizada no passo seguinte sem posterior purificação.

(iii) Ácido 17#-(N,N-Diisopropilcarboxamlda)-4-metilestra-l,5,5(l0)-trieno-3-carboxílico.

composto do título (p.f. 271-273°C depois da tri turaçSo com metanol) foi preparado de acordo com o Exemplo 1 por substituiçSo da 4-metil-estrona por estrona.

Exemplo 8

Ácido 17/*-(N,N-DiÍ3opropilcarboxamida)-estra1,3,5(10),6-tetraeno-3-carboxilico.

(i) Ν,Ν-Dilsonropil 3-Ketoxi-estra-l,3,5(lO)-trieno-17ft carboxamida.

composto do titulo foi preparado de acordo com o Exemplo 1 (i, ii, e iV) por substituiçSo da 3-metil-estrona por estrona.

(ii) Ν,Ν-Diisopropll Estra-l,3,5(lO)-trieno-5-ol-173-carboxamida.

A uma soluçSo a 0°C de N,N-diisopropil-3-metoxi-estra-l,3,5(lO)-trieno-17/-carboxamida (4,8 g, 12 mmol) em diclo rometano (150 ml) foi adicionada uma soluçSo de tribrometo de boro em diclorometano (45 ml, 1M, 45 mmol). A soluçSo resultante foi agitada a 0°C durante 2 horas e depois a 25°C durante 30 minutos. Depois de arrefecida até 0°C foi cuidadosamente adicionado metanol (50 ml) e os voláteis foram entSo removi

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-26dos in vacuo. 0 resíduo foi redissolvido em diclorometano e lavado com água, seco, tratado com silica gel e carvão, filtra do e concentrado. A trituração do resíduo com acetona proporcionou 4,7 g (98%) de N,N-diisopropil-estra-l,3,5(10)-trieno-3-ol-17ê-carboxamida como um sólido branco.

(iii) Ν,Ν-DiisopropiI Estra-1,3,5(lO)-trieno-3-acetoxi-174-carboxamida.

Uma solução de N,N-diisopropil-estra-l,3,5(io)-tri£ no-3-ol-17'^â-carboxamida (4,7 g, 12,3 mmol) em 100 ml de piridina foi tratada com 70 ml de anidrido acético durante 18 horas.

A mistura reaccional foi deitada em gelo e extraída com acetato de etilo. 0 extracto orgânico foi lavado com HCl aquoso a 10%, água água salgada e concentrado para proporcionar 5,2 g (100%) de Ν,Ν-diisopropil estra-l,3,5(10)-trieno-3-acetoxi-174-carboxamida.

(iV) Ν,Ν-diisopropil 6-oxo-estra-l,3,5(l0)-trieno-3-acetoxi-17z5-carboxamida.

A uma solução de Ν,Ν-diisopropil estra-l,3,5(10)-trieno-3-acetoxi-174-carboxamida (5 g, 12 mmol) em 17 ml de ácido acético glacial foi adicionada uma solução de trióxido de crómio (3,5 g) em 23 ml de ácido acético e 4 ml de água. Depois de agitada durante 18 horas, foi adicionado etanol (20 ml) e a mistura resultante foi extraída com éter etílico. 0 extracto etérico foi lavado com água, NaHCO^ aquoso saturado, seco sobre sulfato de sódio e concentrado. A cromatografia (sílica gel, KtOAc a 25% em hexano) proporcionou 400 mg (8%) de Ν,Ν-diisopropil 6-oxo-estra-l,3,5(10)-trieno-3-acetoxi-17d-carboxamida, p.f. 223-224°C (recristalizado a partir de metanol).

(V) Ν,Ν-Diisopropll Estra-l,3,5(10), 6-tetraeno-3-ol-17/^- carboxamida.

Uma suspensão de N,N-diisopropil-6-oxo-estra-l,3,5 (10)-trieno-3-acetoxi-17^-carboxamida (400 mg, 0,9 mmol) em

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-2740 wL de metanol a 15°C foi tratada com 800 mg de NaBH^ durante 1 hora. Foi adicionado HCl (3,5 mL) e água (3,5 mL) e a mis tura resultante foi aquecida a refluxo durante 1 hora. A mistura foi arrefecida, diluida com água e extraída com acetato de etilo. 0 extracto orgânico foi lavado com água, água salgada, seco e concentrado para um sólido. A cromatografia (sílica gel, EtOAc a 5% em cloreto de metileno) proporcionou 200 mg (58%) de Ν,Ν-diisopropil estra-l,3,5(10), 6-tetraeno-3-ol-17/^-carboxamida, p.f. 276-279°C.

( Vi ) 17i^-(N,N-Diisopropilcarboxajnida)-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10), 6-tetraeno.

composto do título foi preparado de acordo com o

Exemplo 1 (i) por substituição do Ν,Ν-diisopropil estra-1,3,5(10), 6-tetraeno-3-ol-17^-carboxamida por estrona.

(Vii) 3-^arbometoxi-17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10), 6-tetraeno.

composto do titulo (p.f. 183-185°C, triturado com metanol) foi preparado de acordo com o Exemplo 1 (iii) por subs tituiçâo do 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(lO), 6-tetraeno por 17^-(N,N-diisopropil carboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10), 16-te traeno.

(Viii) Acido 17^-(N,N-Diieopropilcarboxamida)-estra-l,3, 5(10), 6-tetraeno-3-carboxilico.

composto do título (p.f. 209-210°0, recristalizado a partir de EtOAc-hexano) foi preparado de acordo com o Exemplo 1 (V) por substituição da 3-carbometoxi-17/^-(N,N-diiso propilcarboxamida)-estra-l,3,5(10), 6-tetraeno por 3-carbometoxi-17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno.

Exemplo 9

Ácido 17l-(N,N-Diisopropilcarboxamida)-2-cloro-estra-l,3,5(lO)·

-trieno-3-carboxilico e ácido 17/^-(N,N-Liisopropilcarboxamida)·

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-28-4-cloro-estra-l ,3,5 (10)-tri eno-3*-carboxí lico.

(i ) 17/?-(N,N-Diisopropilcarboxamida)-3-(4,4-dlmetll-2-oxazolinil)-estra-l,3,6(10)-trieno.

Uma solução de ácido 17/^-(N,N-diisopropilcarboxamida) -estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxílico (2,07 g, 5,04 mmol), cloreto de tionilo (0,73 mL, 10,0 mmol) e diclorometano (104 mL) foi agitada á temperatura ambiente durante 2 horas. A solução foi depois concentrada a 50°C num evaporador rotatório e o cio reto de ácido resultante dissolvido em 30 mL de diclorometano.

A solução de cloreto de ácido foi adicionada vagarosamente a 0 C a uma solução de 2-amino-2-metil-l-propanol (0,897 g, 10,1 mmol) em 20 mL de diclorometano. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante várias horas depois lavada duas vezes com água seca e concentrada a 2,26 g de uma benzamida. Poi adi cionado vagarosamente cloreto de tionilo (5,0 mL, 69 mmol) à benzamida e a solução amarela resultante foi agitada à tempera tura ambiente durante 10 minutos, depois diluída com 100 mL de éter de petróleo. 0 solvente foi decantado a partir do precipitado gumoso e o precipitado foi lavado com éter de petróleo adicional. 0 precipitado foi suspendido em água que foi torna da básica com hidróxido de sódio a 10% e extraído com diclorometano. 0 extracto foi lavado com água, seco e concentrado a 1,85 g (79%) de 17/â-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(4,4-dimetil-2-oxazolinil)-estra-l,3,5(l0)-trieno como uma espuma casta nho amarelada.

(ii) 17^-(N,N-UiisopropllcarDoxamida)-3-(4,4-dimetil-2-oxazolinil)-2-cloro-estra-l,3,5(lO)-trieno e 17/?-(N,N-Liisopropilcarboxamlda)-3-(4,4-dimetil-2-oxazolinil)-4-cloro-estra-l,3,5(10)-tri eno.

Uma solução de 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(4,4-dimetil-2-oxazolinil)-estra-l,3,5(l0)-trieno (1,18 g,

2,54 mmol) em tetra hidrofurano seco (THF) (59 mL) foi arrefe cida num banho de gelo sob uma atmosfera de árgon e tratada

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A, té? (

-29sucessivamente com Ν,Ν,Ν*,N’-tetrametiletilenodiamina (0,84 ml,

5,6 mmol) e n-butilltio em hexano a 2,5 M (2,23 ml, 5,59 mmol). A solução eastanho-avermelhada foi agitada no frio durante 5 minutos, depois foi adicionada rapidamente uma solução de hexa cloroetano (1,32 g, 5,55 mmol) em 24 ml de THF. Depois de agi tada durante 5 minutos o banho de arrefecimento foi removido e a agitação foi continuada durante 30 minutos. A mistura foi então diluída com água e extraída duas vezes com éter etílico. Os extractos de éter combinados foram lavados três vezes com água, secos e concentrados para 1,95 g do produto bruto. A cromatografia (sílica gel, EtOAc a 25% em hexano) rendeu 1,16 g de uma mistura de 17/³-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(4,4-di metil-2-oxazolinil)-estra-l,3,5(10)-trieno (ca. 49%), 17/-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(4,4-dimetil-2-oxazolinil)-2-cloro-estra-l,3,5(10)-trieno (ca. 31%), e 17^-(N,N-diisopropilcarbo_ xamida)-3-( 4,4-dimetil-2-oxazolinil-4-cloro-estra-l ,3,5(10)-trieno (ca. 15%) que foi utilizado no passo seguinte sem posterior purificação.

(iii) Ácido 17^-(N,N-Diisopropilcarboxamida)-2-cloro-estra-1,3,5(10)-trieno-3-carboxilico e ácido 17/3-(N,

N-Diisopropilcarboxamida)-4-cloro-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxílico.

Uma solução de 0,58 g de mistura de 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(4,4-dimetil-2-oxazolinil)-estra-l,3,5(10) -trieno (ca. 49%), 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(4,4-dimetil-2-oxazolinil)-2-cloro-estra-l,3,5(10)-trieno (ca. 31%), e 17(^- (N, N-diisopropil carboxamida) - 3-( 4,4-dimetil-2-oxazolinil) -4-cloro-estra-l,3,5(10)-trieno (ca. 15%) em 227 ml de THF e 227 ml de HC1 a 10% foi aquecida a refluxo durante 4 horas e depois concentrada para remover a maioria do THF. Foi adicionado um adicional de 76 ml de HC1 a lo% e o refluxo continuou durante a noite. A mistura escura resultante foi arrefecida e extraída duas vezes com diclorometano. Os extractos combinados foram lavados com água, secos e concentrados para 1,03 g do

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-30óleo gumoso escuro. A cromatografia líquida de alta pressão preparativa (sílica gel, EtOAc a 12,5%, ácido fórmico a 0,5% em hexano) proporcionou 60,6 mg de ácido 17/³-(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-cloro-estra-l,3,5(lO)-trieno-3-carboxílico (p. f. 3O1-3O5°C, dec) e 29 mg de ácido 17^-(11,N-diisopropilcarbo xamida)-4-cloro-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxílico (p.f. 262-265°C, dec).

Exemplo 10

Ácido Bstra-l,5,5(10)-trieno-17-ona-3-carboxílico (i) 3-(Trifluorornetilsulfonato)-estra-1,3,5(10)-trieno-17-ona.

A estrona é dissolvida em diclorometano, arrefecida a 0°C, e tratada com 2,6-lutidina e anidrido trifluorometanosulfónico durante duas horas. 0 procedimento aquoso rendeu

3-trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(lO)-trieno-17-ona.

(ii) Estra-l,5,5(l0)-trieno-17-ona-3-carboxilato de metilo 0 composto do título é preparado de acordo com o

Exemplo 1 (iii) por substituição da 3-(trifluoro-metilsulfonato)-estra-l,3,5(10)-trieno-17-ona por 17-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10), 16-tetraeno.

(iii) Ácido Estra-l,3,5(lO)-trieno-17-ona-3-carboxilico.

composto do título é preparado de acordo com o

Exemplo 1 (V) por substituição do estra-1,3,5(10)-trieno-17-ona-3-carboxilato de metilo por 3-carbometoxi-17/^s-(N,N, diiso. propilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno.

Exemplo 11

19-Hor-pregne-l,3,5(10), 17(20)-tetraeno3-carboxi-21-oato-de etilo

Uma solução de etóxido de sódio (680 mg, 10 mmol) em 5 mL de etanol é adicionada a uma mistura de ácido de estra-1,3(5)69 389

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-3110-trieno-17-ona-3-carboxílico (894 mg, 3 mmol) e dietilfosfonoacetato de metilo (2,12 g, 10 minol) e a mistura resultante aquecida a refluxo durante quatro horas. A mistura é arrefecida, concentrada, diluída com ácido acético diluído e lavada com éter. Os extractos etéricos combinados são lavados com água e água salgada, e concentrados para render 19-nor-pregne-1,3,5(10), 17(20)-tetraeno-3-carboxi-21-oato de etilo.

Exemplo 12

19-Nor-pregne-l,3,5(10)-trieno-3-carboxi-21-oato.

composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 1 (iV,V) por substituição do 19-nor-pregne-l,3,5(10),17(20)-tetraeno-3-carboxi-21-oato de etilo por 3-carbometoxi-17-(N, N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10),16-tetraeno.

Exemplo 13

Ácido Estra-l,5,5(lO)-trieno-5,17A-dl-carboxilico.

(i) 3-Carbometoxi-estra-l,3,5(10),l6-tetraeno-17-(trlfluorometilsulfonato).

composto do título é preparado de acordo com o Exem pio 1 (i) por substituição do estra-l,3,5(10)-trieno-17-ona-3-carboxilato de metilo por estrona.

(ii) Acido 5-0arbometoxi-estra-l,3,5(10),l6-tetraeno-17-carboxílico.

composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 1 (ii) por substituição do 3-carbometoxi-estra-l,3,5(10),l6-tetraeno-17-(trifluorometilsulfonato) por 3,17-di-(tri fluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10),16-tetraeno e substituição do ácido fórmico por diisopropilamina.

(iii) Ácido 3-Carbometoxi-estra-l,3,5(10)-trieno-17<^<:?-carboxílico.

composto do título é preparado de acordo com o

389

SKB CASE 14-409

-32Exemplo 1 (iV) por substituição do ácido 3-carbometoxi-estra-l,3,5(10),l6-tetraeno-17-carboxílico por 3-carbometoxi-17-(N, N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10),16-tetraeno.

(iV) Ácido Estra-l,3,5(l0)-trieno-3,17^-di-carboxilico.

composto do título é preparado de acordo com Exem pio 1 (V) por substituição do ácido 3-carbometoxi-estra-l,3,5(l0)-trieno-17^-carboxílico por 3-carbometoxi-17^-(N,N-diisopro pilcarboxamida)-estra-l,3,5-(10)-trieno.

Exemplo 14

Ácido Estra-1,3,5 (10 )-trieno-17/?-carboxialdeido

5-carboxíllco.

(i) 3-Carbometoxi-estra-l,3,5,(I0)-trieno-17^-carboxicloreto.

Uma solução de ácido 3-carbometoxi-estra-l,3,5(lO)-trieno-17/?-carboxi lico (1 mmol) é suspendida em 10 mL de tolueno e tratada com 0,5 mL de cloreto de oxalilo durante duas horas. Os materiais voláteis são então removidos in vacuo deixando um resíduo de 3-carbometoxi-estra-l,3,5(lO)-trieno17/2-carboxí cloreto.

( ii ) 3-Carbometoxi-estra-l ,3,5 (10 )-trieno-17i^-carboxaldeído.

Uma solução de 3-carbometoxi-estra-l,3,5(10)-trieno-17^-carboxicloreto (l mmol) em 10 mL de tetrahidrofurano é tratada com hidreto de tri-t-butoxi alumínio lítio (l mmol) a 0°C durante uma hora para render, depois dos procedimentos aquosos, 3-carbometoxi-estra-l ,3,5(10 )-trieno-17(^<?-carboxaldeido.

Exemplo 15

Acido Estra-1,3,5(10)-trieno-17/?-(l-oxobutil)3-carboxílico.

(i) 3-carbometoxi-estra-l,3,5(10)-trieno-17/-(l-oxobutilo)

389

SKB CASE 14409

-33Uma solução de 3-carbometoxi-estra-l,3,5(10)-trieno-17^-carboxicloreto (1 mmol) em 10 wL de tetrahidrofurano é tra tada com 1,0 mmol de di-n-butil-cobre-lítio a -78°C. A reacção é extinguida com cloreto de amónia aquoso. A extracçâo com diclorometano seguida por concentração dos extractos orgânicos e cromatografia do resíduo rende 3-carbometoxi-estra-l,3,5(10)-trieno-17i^-(l-oxobutilo ).

(ii) Ácido Estra-l,3,5(10)-trieno-17^-(l-oxobutll)-3-carboxíllco.

composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 1 (v) por substituição do 3-carbometoxi-estra-l,3,5(10) -trieno-17^-(l-oxobutilo) por 3-carbometoxi-17A-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno.

Exemplo 16

Ácido Estra-l,3,5(10)-trieno-17o< -01-5,17/3di-carboxílico (i) 17/*-οΐ3ηο-17 a -acetoxl-estra-l,3,5(10)-trieno-3-(carboxilato de metilo).

estra-l,3,5(10)-trieno-17-ona-3-carboxilato de metilo (10 g) é dissolvido por aquecimento em 15 ml de acetona-cianohidrina. Os cristais que se formam são filtrados, lavados com pentano, e depois dissolvidos numa mistura de piridina (25 ml) e anidrido acético (25 ml). Passadas 48 horas os volá teis são removidos sob pressão reduzida. 0 resíduo é então dis. solvido em acetato de etilo e lavado sucessivamente com HC1 a 5% e NaHCO^ aquoso. A solução orgânica é seca e concentrada para proporcionar uma mistura de epímeros em C-17.

A cromatografia rende o 17/^-ciano-17 <* -acetoxi-estra-1,3,

5(10)-trieno-3-(carboxilato de metilo).

(ii) Ácido Estra-l,3,5(lO)-trieno-17c< -ol-3,17A-di-carboxílico.

389

SKB CASE 14409

'c

-34Uma solução de 17^-ciano-17s\-acetoxi-estra-l,3,5(lO)-trieno-3-(carboxilato de metilo) em metanol é arrefecida a 15°C. 0 HC1 seco é borbulhado na solução e a mistura deixada ficar â temperatura ambiente durante duas horas. 0 solvente é então re movido sob pressão reduzida. Uma mistura de tetrahidrofurano: água a 1:1 é adicionada seguida por excesso de hidróxido de só dio e a mistura é agitada a 40°C durante 24 horas, e depois aci difiçada e extraída com cloróformio. A concentração da solução orgânica e a recristalização a partir do metanol proporciona o ácido estra-1,3,5(10 )-trieno-17<*-ol-3,17^-di-carboxí li co.

Exemplo 17

Ácido 2 *,3 *-Tetrahidrofurano-2¹-spiro-17(1,3,5(10)-estratrieno-3-carboxílico).

composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 1 (i, iii, v) por substituição do Z^^-tetrahidrofurano^’-spiro-17-(3-metoxi-l,3,5-estratrieno), preparado de acordo com Arth (J. Med. Chem. 6 617-618 (1963)), por estrona.

Exemplo 18

Ácido 17/3-(N,N-Dilsopropilcarboxamlda)-estral,3,5(10)-trieno-5-tiocarboxilico.

Uma solução de ácido 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-1,3,5(10)-trieno-3-carboxílico (1 mmol) é suspendida em 10 mL de tolueno e tratada com 0,5 mL de cloreto de oxalilo duran te duas horas. A solução resultante é então lentamente adici£ nada a uma solução de THE e sulfureto de hidrogénio através da qual o sulfureto de hidrogénio está a ser borbulhado. A mistura é então diluída com acetato de etilo, lavada com água, se ca e concentrada. 0 resíduo é recristalizado a partir de acetonitrilo para render o composto do título.

389

SKB CASE 14409

4,

-35Exemplo 19

Ácido 17ff-(N>N-Diisopropilcarboxamida)-estra1,3,5(10) ,9(11)-tetraeno-3-carboxílico.

(i) Ν,Ν-Dlisopropil estra-l,3,5(10),9(ll)-tetraeno-3-ol-17/3-car boxamida.

Uma solução de N,N-diisopropil-estra-l,3,5(10)-trieno-3-ol-17^-carboxamida (380 mg, 1 mmol) em 10 mL de dioxano é tratada com 2,3-dicloro-5,6-diciano-l,4-benzoquinona (250 mg,

1,1 mmol) durante duas horas. A mistura reaccional é diluida com acetato de etilo, lavada com NaHCO^ aquoso saturado, seca e concentrada. A cromatografia do resíduo rende a N,N-diisopropil-estra-1,3,5(10),9(11)-tetraeno-3-ol-17^-carboxamida.

(ii) Ácido 17l-(N,N-Dilsopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10),9(ll)-tetraeno-3-carboxílico.

composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 1 (i, iii, v) por substituição da N,N-diisopropil-estra-1,3,5(lO),9(ll)-tetraeno-3-ol-17^-carboxamida por estrona.

Exemplo 20

Ácido 17/³-(N,N-Diisopropilcarboxaniida)-2-bromoestra-1,3,5(10)-trieno-3-carboxílico e ácido

17/^?-(N,N-Diisopropllcarboxamida)-4-bromoestra-1,3,5(10)-trieno-3-carboxili co.

(i) N,N-diisopropil-2-bromo-estra-l,3,5(l0)-trieno-3-ol-17/3-carboxamida e N,N-Díisopropil-4-bromo-estra-l,3, 5(10)-trieno-3-ol-17j^-carboxamida.

Uma solução de Ν,Ν-diisopropil estra-l,3,5(l0)-trieno-3-ol-17/³-carboxamida (1,85 g, 4,82 mmol) em 185 ml de ácido acético quente foi arrefecida a 20°C e foi adicionada lentamen te 4,48 ml (4,82 mmol) de uma solução de bromo em ácido acético a 1,08 M. Depois de agitada á temperatura ambiente durante

389

SKB CASE 14409 ,2

-365 min. a mistura reaccional foi deitada em gelo e extraída duas vezes com diclorometano. Os extractos de diclorometano combinados foram lavados duas vezes com água, secos sob MgSO^ anidro e concentrados. A cromatografia (sílica gel, éter a 2% seguido por éter a 5% em diclorometano) proporcionou 0,39 g de N,N-diisopropil-2-bromo-estra-l,3,5(lO)-trieno-3-ol-17$-car boxamida e 0,75 g de N,N-diisopropil-4-bromo-estra-l,3,5(10)-trieno-3-ol-17/²’-carboxamida.

( i i ) 17i^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-bromo-3-(trifluorometllsulfonato)-estra-l,5,5(lO)-trieno e 17/3-(N, N-dilsopropilcarboxamida)-4-bromo-3-(trifluorometllsulfonato)-estra-l,3,5(lO)-trieno.

Uma solução de N,N-diisopropil-2-bromo-estra-l,3, 5(10)-trieno-3-ol-17^-carboxamida (0,393 g, 0,850 mmol) em diclorometano (20 ml) foi arrefecida com um banho de gelo e tratada sucessivamente com lutidina 0,149 mL, 1,275 mmol), 4-dime tilaminopiridina (20,8 mg, 0,17 mmol) e anidrido trifluorometa nosulfónico (0,214 mL, 1,275 mmol). A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante duas horas, depois concentrada à temperatura ambiente. 0 resíduo foi tratado com éter e HCI a 10%, depois a camada orgânica foi lavada com água seguida por NaHCO^ a 5%, seca e concentrada para render 0,481 g (95%) de 17/3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-bromo-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10)-trieno.

A substituição de (N,N-diisopropil-4-bromo-estra-l,3,5(10) -trieno-3-ol-17^-carboxamida por (N,N-diisopropil-2-bromo-estra -l,3,5(lO)-trieno-3-ol-17^-carboxamida proporcionou um rendimen to de 99% de 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-4-brorao-3-(triflu orome tilsulfonato)-estra-1,3,5(10)-trieno.

(iii) 2-Bromo-3-carbometoxi-170-(Ν,N-diiso pro pilc arboxamida)-estra-l,3,5(lO)-trieno e 4-Bromo-3-carbometoxl-17ft-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno.

389

SKB CASE 14409

-37Os compostos do título foram preparados de acordo com o Exemplo 1 (iii) por substituição de 17/3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-bromo-3-(tri fluorometilsulfonato)-e stra-1,3, 5(10)-trieno e 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-4-broino-3-(tri fluorometilsulf onato )-estra-l, 3,5 (10 )-tri eno por 17$-(N,N-diiso propilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-1,3,5(10), 16-tetraeno.

( i v) Ácido 17/6-(N,N-Diisopropilcarboxamida)-2-bromo-es tra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxilico e Acido 17/3-(N, N-Diisopropilo ar boxami da)-4-bromo-e stra-1,3,5(10)-trieno-3-carboxilico.

A substituição de 2-bromo-3-carbometoxi-17/^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno por 3-carbometoxi-17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno como no Exemplo 1 (v) rendeu o ácido lV^-ÍN^-diisopropilcarboxamida)-2-bromo-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxílico, p.f. 294-300°C.

A substituição de 4-bromo-3-carbometoxi-17^-(N,N_diisopro pilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno por 3-carbometoxi-17/?-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(lO)-trieno como no Exemplo 1 (v) rendeu o ácido 17í^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-4-bromo-estra-l,3,5(l0)-trieno-3-carboxílico, p.f. 276-280°C.

Exemplo 21

Acido 17/3 -(N,N-Diisopropilcarboxamida)-2,4dibromo-estra-1,3,5(10)-tri eno-3-carboxili co (i) N,N-Diisopropil-2,4-dibromo-estra-l,3,5(lO)-trieno-3-01-17/3 -carboxamida.

composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 20 (i) por reacção da N,N-diisopropil-estra-1,3,5(10)-trieno-3-ol-17β -carboxamida com 2,0 equivalentes de bromo.

(ii ) Acido 17 /3>-(N,N-Diisopropilcarboxamida)-2,4-dibromo69 389

SKB CASE 14409

-38-estra-1,3,5 (10 )-trieno-3-carboxillco.

composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 20 (ii, iii e iv) por substituição da N,N-diisopropil-2,4-dibromo-estra-l,3»5(10)-trieno-3-ol-17 £ -carboxamida por N,N-diisopropil-2-bromo-estra-l,3,5(lO)-trieno-3-ol-17 fi -carboxamida.

Exemplo 22

Ácido 17/8 -(N,N-Diisopropilcarboxamida)-2-cianoestra-l,3,5(10)-trieno-5-carboxillco e Acido

170-(N,N-Diisopropilcarboxamida-4-claiio-estral_y5,5(10)-trieno-3-carboxilico.

(i) 3-Carbometoxi-2-ciano-17 fi-(Ν,Ν-diisopropil-carboxamida )-estra-l, 5,5(10 )-tri eno.

Uma mistura de 2-bromo-3-carhometoxi-17^ -(N,N-diiso propilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno (33,2 mg, 0,0658 mmol), cianeto de cobre (I) (10,6 mg, 0,118 mmol) e N-metilpirrolidinona (1,0 mL) foi aquecida num banho de óleo a 180°C sob uma atmosfera de árgon durante uma hora. A mistura reaccional foi arrefecida à temperatura ambiente e tratada com uma solução aquosa de etileno-diamina, depois extraída duas vezes com acetato de etilo. Os extractos de acetato de etilo foram lavados uma vez com uma solução aquosa de cianeto de sódio a 10% e duas vezes com água. A concentração rendeu 25,7 mg (87%) de 5-carbometoxi-2-ciano-17 fi -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3, 5(10)-trieno.

(ii) 3-carbometoxi-4-ciano-17fi -(N,N-diisopropilcarhoxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno.

Uma mistura de 4-bromo-3-carbometoxi-17fi -(Ν,Ν-diisopro pilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno (137 mg, 0,272 mmol), cianeto de cobre (i) (43,8 mg, 0,489 mmol) e N-metilpirrolidinona (1,5 mL) foi aquecida num banho de óleo a 180°C sob uma atmosfera de árgon durante uma hora. A mistura reaccional foi

389

SKB CASE 14409

-39arrefecida à temperatura ambiente e tratada com uma solução aquosa de etileno-diamina, depois extraída duas vezes com ace tato de etilo. Os extractos de acetato de etilo foram lavados uma vez com uma solução aquosa de cianeto de sódio a 10% e duas vezes com água. A concentração seguida por cromatografia (silica gel, éter a 10% em diclorometano) rendeu 85 mg (70%) de

3-carbometoxi-4-ciano-17/3 -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-1,3,5(10)-trieno.

(iii) Ácido 17 £ -(N,N-Diisopropilearboxamida)-2-ciano-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxilico e Acido 17l-(K,N-Diisopropilcarboxamida-4-ciano-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxilico.

A substituição de 3-carbometoxi-2-ciano-17/^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno por 3-carbometoxi-17-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(lO)-trieno como no Exemplo 1 (v) rendeu o ácido 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-ciano-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxilico, p.f. 270-273°C.;

A substituição de 3-carbometoxi-4-ciano-17i^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno por 3-carbometoxi-17 /3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno como no Exemplo 1 (v) rendeu o ácido 17^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-4-ciano-estra-l,3,5(l0)-trieno-3-carboxílico, p.f. 240-242°C.

Exemplo 23

Ácido 17£ -(N,N-Diisopropllcarboxamida-2-formilestra-1,3,5(10)-trieno-3-carboxilico.

(i) 3-Carbometoxi-2-formil-17/^ -(Ν,Ν-diisopropilcarboxamida)-estra-1,3,5(10)-tri eno.

composto do título é preparado por reacção de 3-carbometoxi-2-ciano-17 β -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-1,3,5(10)-trieno com liga de níquel de Raney e ácido fórmico

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SKB CASE 14409

-40de acordo com o procedimento de Staskun (J. Chem. Soc. 5880 (1964)).

(ii) Acido 17 /3-(N,N-Diisopropilcarboxaniida)-2-formil-estra-l,3,5(10)-trleno-3-carboxílico.

A substituição de 3-carbometoxi-2-formil-17β -(N,

N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(lO)-trieno por 3-carbometoxi-17β -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno como no Exemplo 1 (v) rende o composto do título.

Exemplo 24

Ácido 17-(N,N-Diisopropilcarboxamida)-2-fluoroestra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxílico e Ácido β -(N,N-Dlisopropilcarboxamida-4-fluoro-estra1,3,5(10)-trieno-3-carboxílico.

Os compostos do título são preparados de acordo com o Exemplo 8 (i e ii) por substituição da 2-fluoro-3-metil-estr£ na e 4-íluoro-3-metil-estrona (preparadas de acordo com os pro cedimentos descritos por Neeman, J. Chem. Soc. Perkln I 2297 (1972) e J. Chem. Soc. Perkin I 2300 (1972)) por 3-metil-estrona.

Exemplo 25

Ácido 17/3 -N,N-Diisopropllcarboxamida-estral,3,5(10)-trieno-2,3-di-carboxílico.

(i) Ν,Ν-Dlisopropil 2-bromo-3-metoxi-estra-l,3,5(10)-trieno-17/3 -carboxamida.

Uma mistura de N,N-diisopropil-2-bromo-estra-l,3,5 (10)-trieno-3-01-17/3 -carboxamida (188 mg, 0,407 mmol), sulfato de dimetilo (76,9 ml, 0,814 mmol), carbonato de potássio anidro pulverizado (112 mg, 0,814 mmol) e acetona (10 ml) foi refluxada sob uma atmosfera de árgon durante 1,25 horas. A mistura reaccional arrefecida foi diluída com água e extraída

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SKB CASE 14409

-41com diclorometano. 0 extracto de diclorometano foi lavado com água, seco e concentrado para 162 mg (84%) do composto do titu lo.

(ii) Ácido 17/^ -(N,N-Diisopropilcarboxamida-5-metoxi-estra-1,5,5(10)-trieno-2-carboxílico.

Uma solução de Ν,Ν-diisopropil 2-bromo-3-metoxi-estra-1,3,5(10)-trieno-17£ -carboxamida (151 mg, 0,317 mmol) em tetrahidrofurano (5 ml) foi adicionada gota a gota a -78°C a uma solução preparada a partir de 0,285 ml (0,715 mmol) de n-Buli a 2,5 M em hexano e tetrahidrofurano (5 ml). Após com pletada a adição a reacção foi agitada a -78° C durante 5 min., depois foi adicionado gelo seco pulverizado (C0₂). Depois de deixada arrefecer lentamente à temperatura ambiente, a mistura foi deitada em água, acidificada com HC1 diluído e extraída duas vezes com diclorometano. Os extractos de diclorometano foram lavados com água, secos e concentrados para 125 mg (89%) do composto do título.

(iii) 2-Carbometoxi-5-metoxi-l7/3 -(Ν,Ν-diisopropilcarboxamida)-estra-l,5,5(lO)-trieno.

composto do título foi preparado por tratamento do ácido 17 A-(N,N-diisopropilcarboxamida)-5-metoxi-estra-l,5, 5(lO)-trieno-2-carboxílico com metanol e HC1.

(iv) N,N-Diisopropil-2-carbometoxi-estra-l,5,5(10)-trleno-5-ol-l7|ó -carboxamida.

Uma solução de 2-carbometoxi-5-metoxi-17^ -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,5,5(lO)-trieno (158 mg, 0,505 mmol) em diclorometano (5 ml) foi arrefecida num banho de gelo e foram adicionadas lentamente 0,555 ml (0,555 mmol) de uma so lução a 1,0 M de tribrometo de boro em diclorometano. Depois de agitada no frio durante 2,5 horas, foi adicionado lentamente metanol em excesso e a mistura concentrada à secura. 0 resíduo foi redissolvido em metanol concentrado e purificado por cromatografia (sílica gel, éter a 5% em diclorometano) para

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SKB CASE 14409

-42render 38,4 mg (29%) do composto do título.

(v) 17/3 -(N,N-Diisopropilcarboxamida)-2-carbometoxi-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10)-trieno.

Uma solução de N,N-diisopropil-2-carbometoxi-estra-1,3,5(10)-trieno-3-ol-17£ -carboxamida (24,5 mg, 0,0550 mmol) em tetrahidrofurano (2 ml) foi adicionada a uma mistura fria de hidreto de sódio em excesso em tetrahidrofurano (2 ml) e a mistura resultante agitada à temperatura ambiente durante 0,5 horas. Uma solução de N-feniltrifluorometanosulfonimida (51,6) mg, 0,0885 mmol) em tetrahidrofurano (2 ml) foi adicionada e a mistura foi aquecida num banho de óleo a 40°C durante 4 horas.

A mistura foi diluída com diclorometano, lavada duas vezes com NaHCO^ a 5%, seca e concentrada para 26,1 mg (83%) do composto do título.

(vi) 2,3-Bis(carbome toxi )-17/3 -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno.

composto do título foi preparado como no Exemplo 1 (iii) por substituição do 17/3-(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-carbometoxi-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(l0)-trie no por 17 β-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-1,3,5(10),16-tetraeno.

(vii) Ácido 17@ -N,N-Diisopropilcarboxamida-estra-l,5,5 (10)-trieno-2,3-di-carboxíli co.

A substituição de 2,3-bis(carbometoxi)-17/^-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno por 3-carbometoxi-17P -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno como no Exemplo 1 (v) rende o composto do título.

Exemplo 26

Ácido 17-(N,N-DiÍBopropilcarboxamida)-2-aminoestra-l,3,5(10)-trieno-5-carboxílico e Ácido 17/3(N,N-Diisopropilcarboxamida-4-amino-estra1,3,5(10)-trieno-3-carboxilico

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SKB CASE 14409

-43(i) N,N Biisopropil-2-nitro-estra-l,5,5(l0)-trleno-3-ol-17β-carboxamida e N,N-Diisopropil-4-nitro-estra-l,

3,5(10)-trleno-3-ol-17^ -carboxamida.

Uma soluç&o de N,N-diisopropil-estra-l,3,5(10)-trieno-3-ol-17-carboxamida (141 mg, 0,368 mmol) em ácido acético em ebuliç&o (7 mL) foi lentamente arrefecido a 75°C e tratada com uma soluç&o de ácido nítrico concentrado (24,8 /xL) em água (1,4 mL) contendo uma quantidade catalítica de nitrito de sódio A mistura reaccional foi deixada arrefecer lentamente à temperatura ambiente, depois foi diluída com água e extraída com ace tato de etilo. 0 extracto foi lavado cuidadosamente com água, seco, concentrado e purificado por cromatografia (sílica gel, diclorometano contendo éter a 5 a 10%) proporcionando 55,2 mg (35%, p.f. 143,5-144,5°C) de N,N-diisopropil-2-nitro-estra-l,

3,5(10)-trieno-3-ol-17-carboxamida e 32,2 mg (20%, p.f. 239-241°C) de N,N-diisopropil-4-nitro-estra-l,3,5(10)-trieno-3-01-17£ -carboxamida.

(ii) 17 ^-(N,N-I)iÍBopropilcarboxamida)-2-nitro-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,5,5(10)-trieno e 17/?- (N, U-Dii sopropll carboxamida-4-nitro-3- (tri fluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10)-trieno.

Os compostos do título s&o preparados de acordo com o Exemplo 1 (i) por substituiç&o da N,N-diisopropil-2-nitro-es tra-1,3,5(lO)-trieno-3-ol-17β -carboxamida e da N,N-diisopropil -4-nitro-estra-1,3,5(10)-trieno-3-ol-17-carboxamida por estrona.

(iii) 17 β -(N,N-Diisopropilcarboxamida)-2-trifluoroacetamida-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10)-trieno e 17/^-(N,N-Dlisopropilcarboxamlda)-4-triijLuoroacetamida-3-( trifluorometilsulf onato )-estra-l,3,5(10)-trieno.

Os compostos do título s&o preparados por reduç&o com hidrogénio catalizado por níquel de Raney seguida por rea£ çSo com anidrido trifluoroacético.

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-44( i v ) 3-Garbometoxi-2-trliluoroacetamido-17,^ -(N,N-dilsopropilcarboxamida)-estra-l,3_>5(lO)-trieno e 3-carbometoxl-4-trifluoroacetamida-17& -(N,N-diisopropil carboxamida)-estra-l,3 ,5(10)-trieno.

Os compostos do título são preparados de acordo com o Exemplo 1 (iii) por substituição do 17β -(N,N-diisopropilcar boxamida)-2-(trifluoroacetamida-3-(trifluorometilsulfonato)-es tra-l,3,5(10)-trieno e 17β-(N,N-diisopropilcarboxamida)-4-tri fluoroacétamida-3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10)-trieno por 17 β-(N,N-diisopropilcarboxamida)-3-(trifluorometilsulfonato )-estra-l,3,5(10),16-tetraeno.

(v) Ácido 17/3-(N,N-Dlisopropilcarboxamida)-2-amino-estra-l,3,5(lO)-trieno-3-carboxílico e Ãcido 17/3-(N,

N-DiiBopropilcarboxamida)-4-amino-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxillco,

Os compostos do título são preparados de acordo com o Exemplo 1 (v) por substituição do 3-carbometoxi-2-trifluoroacetamida-17 β -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno e 3-carbometoxi-4-trifluoroacetamido-17i^ -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno por 3-carbometoxi-17β -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno.

Exemplo 27

Ãcido 17/3 -(N,N-Diisopropilcarboxamida)-2-hidroxiestra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxillco.

composto do título é preparado a partir do ácido 17/?-(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-amino-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxílico pelo processo de Ungnade (Org. Syn. Coli. Vol. 3, 130).

Exemplo 28

Ácido 11β -(N,N-Diisopropilcarboxamida)-2-nitroestra-1,3,5(10)-trieno-3-carboxíllco.

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-450 composto do título é preparado a partir do ácido 17/^ -(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-amino-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxílico pelo processo de Pagano (Org. Syn. Coll. Vol. 5, 567).

Exemplo 29

Acido 17/3 -(N,N-Diisopropilcarboxamlda)-l-bromoestra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxilico.

(i) N,N-Dilsopropil-3-metoxl-4-nitro-estra-l,3,5(lO)-trieno-17 β -carboxamida.

composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 25 (i) por substituição da N,N-diisopropil-4-nitro-e£ tra-1,3,5(10)-trieno-3-ol-17β -carboxamida por N,N-diisopropil -2-bromo-estra-l,3,5(10)-trieno-3-ol-17β -carboxamida.

(ii) Ν,Ν-Diisopropil-l-bromo-estra-l,3,5(10)-trieno-3-qI-17/3 -carboxamida.

composto do título é preparado de acordo com o processo de Hylarides (J. Org. Chem. 49, 2744 (1984)) por subs tituiçSo da N,N-diisopropil-3-metoxi-4-nitro-estra-l,3,5(10)-trieno-17/3-carboxamida por 3-metil-4-nitro estrona.

(iii) Ácido 17 /3-(N,N-DiÍ6opropilcarboxamida)-l-bpomo-e3tra-l,3,5(l0)-trieno-3-carboxilico.

composto do título é preparado de acordo com o Exemplo 1 (i, iii, e v) por substituição da N,N-diisopropil-l-bromo-estra-l,3,5(10)-trieno-3-ol-17^ -carboxamida por estrona.

Exemplo 30

3-Etenil-estra-1,3,5(10)-trieno-17β (N-t-butilcarboxamida)

Uma mistura de 3-(trifluorometilsulfonato)-estra-l,3,5(10)

-trieno-17^ -(N-t-butilcarboxamida) (1,0 g), tributilvinilesta69 389

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í..

-46nano (0,63 mL), cloreto de lítio (260 mg), cloreto de bis(trifenilfosfina) paládio (II) (80 mg), 2,6-di-t-butil-4-metilpiri dina (20 mg), e DMP (15 mL) foi lavada com água e água salgada, seca sobre sulfato de magnésio, e concentrada a um resíduo castanho. A cromatografia proporcionou o composto do título (485 mg, 65%) como um sólido branco, p.f. 66-69°C.

3-(2^,-Hidroxietil)-estra-l,3,5(10)-trienoIJ_^J2ÍHΣiZLÉHÍÉi£θΞ52Ξ^iÉS^

Uma solução de 3-etenil-estra-l,3,5(lO)-trieno-17$-(N-t-butilcarboxamida) (100 mg) em ΤΗΈ* (2 ml>) foi tratada com uma solução de 9-borobiciclononano (1,0 mL, 0,5 M em THF). A solu ção resultante foi aquecida a refluxo durante 1,5 horas, arrefecida à temperatura ambiente, e tratada com etanol absoluto (4 mL), KOH a 6M (2 gotas), e peróxido de hidrogénio a 30% (0,4 mL). A mistura reaccional foi então aquecida a 50° C durante 1,5 horas, arrefecida, e partilhada entre o acetato de etilo e a água. A camada aquosa foi extraída com acetato de etilo e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água salgada secas sobre sulfato de magnésio, e concentradas para proporcionar 105 mg do composto do título como uma espuma bran ca.

Acido 17$ -(N-t-butilcarboxamida)-estra1,3,5(10)-trieno-3-acético

Uma solução de 3-(2’-hidroxietil)-estra-l,3,5(10)-trieno-17$ -(N-t-butilcarboxamida) (105 mg) em acetona (15 mL) foi arrefecida a -5°C e tratada com reagente de Jones (0,6 mL,

1,5M) durante 2 horas. A reacção foi então extinguida por adição de 2-propanol (10 mL) e água (15 mL). A mistura foi então extraída com diclorometano e os extractos lavados com água salgada, secos sobre sulfato de magnésio, e concentrados para um óleo amarelo viscoso. A cromatografia em coluna proporcionou o composto do título puro (60 mg) como um sólido branco, p.f. 119-123°C.

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Exemplo 51

Ácido 17(3 -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra1,5,5(10)-trieno-5-acético

A substituição de 3-(trifluorometilsulf onato)-estra-1,3, 5(10)-trieno-17β-(Ν,Ν-diisopropilcarboxamida) por 3-(trifluor£ metilsulfonato)-estra-l,3,5(10)-trieno-17 -(N-t-butilcarboxamida) no Exemplo 30 proporciona o composto do título, p.f. 125-127°C.

Exemplo 52

Utilizando o derivado do 3-trifTuorometilsulfonato de par tida apropriado no procedimento do Exemplo 30 são obtidos os seguintes compostos:

Acido 17-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10),

6-tetraeno-3-acético

Ácido 17 Λ-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10),

6,8-pentaeno-3-acético

Ácido 17 β -(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-metil-estra-l,

3,5(10)-trieno-3-acético

Exemplo 53

Uma forma de dosagem oral para administração dos compostos da Fórmula (I) é produzida por crivagem, misturaçâo, e enchimento em cápsulas de gelatina dura dos ingredientes nas prç> porçães mostradas na tabela III, abaixo.

Tabela III

Ingredientes

Acido 17/3 -(N,N-Liisopropilcarboxamida)estra-1,3,5(10)-trieno-3-carboxilico Estearato de magnésio

Lactose

Quantidades mg mg 75 mg

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-48Exemplo 34

A sacarose, o sulfato de cálcio di-hidratado e o composto da Fórmula (I) mostrados na Tahela IV abaixo, são misturados e granulados nas proporções mostradas com uma solução de gelatina a 10%. Os grânulos secos são crivados, secos, misturados com amido, talco e ácido esteárico, crivados e comprimidos num comprimido.

Tabela IV

Ingredientes Quantidades

17 β -(N-terc-Butilcarboxamida)-estra	100	mg
1,3,5(10)-trieno-3-carboxílico
Sulfato de cálcio di-hidratado	150	mg
Sacarose	20	mg
Amido	10	mg
Talco	5	mg
Ácido esteárico	3	mg

Exemplo 35 sal de sódio do ácido 17/^-(N,N-Diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10),l6-tetraeno-3-carboxilico, 75 mg, é dispersado em 25 ml de solução salina normal para preparar uma prepara ção injectável.

Embora as concretizações preferidas do invento sejam ilus tradas acima, deve ser entendido que o invento não está limita do às instruções precisas aqui descritas e que é reservado o direito a todas as modificações que venham dentro do âmbito das reivindicações seguintes.

Claims

REIVINDIOAgÕES ia. - Processo de preparação de um composto de fórmula na qual:

os anéis B, C e D têm ligações duplas opcionais indicadas pelas linhas a tracejado desde que o anel C não tenha uma ligação dupla quando o anel B tem uma ligação dupla em C_Q-C_Q e o

Ο ’ζ-/ anel D não tenha uma ligação dupla em quando Ir repre senta dois substituintes ou um substituinte divalente;

X¹, X² e X³ são qualquer combinação acessível de H, Cl,

P, Br, I, CP^ ou alquil alcoxi C^_g, CN, N(r1)
2,

CHO ou COgR¹;

A é 0 ou S; n é 0 ou 1;

Cada r! é, independentemente dos outros H ou alquilo 0^_θ; e

R³ é (1) <x-hidrogénio, (X-hidroxi ou w.-acetoxi e/ou (a) 0 β-W-tí-R⁴ onde W é uma ligação ou alquilo θ1-12 ^e 6

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-50(i) hidrogénio, (ii) hidroxilo, (iii) alquilo C^_g, (iv) hidroxi alquilo ^G1_g, (v) alcoxi °l-8»

5 6 5 6 (vi) NR R , onde R e R são seleccionados, independentemente um do outro, de entre hidrogénio, alquilo cicloalquilo C- _c, fenilo; ou 5 6 ^“^b

R e R tomados em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados representam um anel saturado de 5 ou 6 membros compreendendo até um outro heteroátomo seleccionado de entre oxigénio e azoto, ou

7 7 (vii) OR onde R é metal alcalino, alquilo ou benzilo, ou p p (b) (3-alq-OR , onde alq é alquilo 0^_^₂ ^{e R} é (i) fenil (alquil C-^g) carbonilo, (ii) cicloalquil C^__1Q carbonilo, (iii) benzoilo, (iv) alcoxi ^G-|__g carbonilo, (v) amino ou amino substituido por alquilo ^G2.-8’ ^car^^onil°» ^ou (vi) alquilo C^-S’ (2) =CH-W-CO-R⁴ ou =CH-W-0R⁸ onde W é uma ligação ou 4 8 alquilo ^G © R © R são definidos como acima e R⁸ também é alquil C^_₂q carbonilo;

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-51(5) (4) onde a ligação a tracejado substitui o 17-«*-hidrogénio ,

Q Q ot-hidrogénio e p-NHCOR onde R é alquilo C, ,₉ (5) (6) (7) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, caracterizado por compreender;

a) quando n é 0, a reacção de um composto de fórmula (V) ³ ii

CE,-S-0 (V) na qual os substituintes são definidos como anteriormente, com monóxido de carbono e um catalisador de paládio na presença de um alcanol, para dar um composto 3-alcoxicarbonilo de Fórmula I, o qual é hidrolisado para dar o ácido carboxílico livre ou

b) quando n é 1, a reacção de um composto de fórmula (VI)

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-52CH_X R'

H0CH₂CH₂ x² (VI)

X na qual os substituintes são definidos como anterior mente, com um agente oxidante;

e em seguida a formação opcional de um sal farmaceuticamente aceitável.

23, - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o catalisador de paládio ser acetato de paládio II e o alcanol ser metanol ou etanol.
3^a. - Processo de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por o composto preparado ser .6

X na qual:

ou alquilo

R¹ é H ou alquilo C₁_₈; e

69 389

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-53(a) CHCCHpCHgOR¹, ou (b) CONlp-R¹;

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
4^â. - Processo de acordo com a reivindicação 1, 2 ou 3, caracterizado por o substituinte R^ na posição 3, X¹, X², X⁵, X^, _e tf _serem todos hidrogénio e A ser oxigénio.
5^Ô. - Processo de acordo com a reivindicação 1, 2 ou 3, caracterizado por se preparar o ácido 17β -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxílico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
6s. - Processo de acordo com a reivindicação 1, 2 ou 3, caracterizado por se preparar o ácido 17(3 -(N-t-butilcarboxamida)-estra-l,3,5(10)-trieno-3-carboxílico ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
7^Ô. - Processo de acordo com a reivindicaçSo 1, 2 ou 3, caracterizado por se preparar ácido 17/2 -(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-metil-estra-l, 3,5(10)-trieno-3-carboxílico ou um seu sal.

Ácido 17 β-(N,N-diisopropilcarboxamida)-4-metil-estra-l, 3,5(10)-trieno-3-carboxílico ou um seu sal.

Ácido 17 β-(N,N-diisopropilcarboxamida)-2-cloro-estra-l, 3,5(10)-trieno-3-carboxílico ou um seu sal.

Acido 17β -(N,N-diisopropilcarboxamida)-4-cloro-estra-l, 3,5(10)-trieno-3-carboxilico ou um seu sal.

Acido 17 β-(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10), 16-tetraeno-3-carboxilico ou um seu sal.

Ácido 17/3 -(N-terc-butilcarboxamida)-estra-l,3,5(10),16-tetraeno-3-carboxilico ou um seu sal.

Ácido 17/5 -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10), 6,8,-pentaeno-3-carboxílico ou um seu sal.

Ácido 17(3 -(N,N-diisopropilcarboxamida)-estra-l,3,5(10), 6-tetraeno-3-carboxilico ou um seu sal.
8â. - Processo de acordo com a reivindicaçSo 1, caracte69 389

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-54rizado por no composto de fórmula I,n ser 1, A ser oxigénio, X¹, X² e X^ serem hidrogénio e o substituinte R² na posição 3 ser hidrogénio.

92. - Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterí zado por o agente oxidante ser reagente de Jones.
10^a. - Processo de acordo com a reivindicação 8 ou 9, caracterizado por se preparar o ácido 17 β -(N,N-diisopropilcarbo xamida)-estra-l,3,5(10)-trieno-3-acético ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
11^a. - Processo de acordo com a reivindicação 9, caracterizado por se preparar o ácido 17 β -(N-t-butilcarboxamida)-estra-l,3,5(l0)-trieno-3-acético ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.