PT862563E - Derivadosde 10-desacetil-14-beta-hidroxibacatina e formulacoes que os contem - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO

“DERIVADOS DE 10-DESACETIL-14-BETA-HIDROXIBACATINA ΙΠ, PROCESSO PARA A SUA PREPARAÇÃO E FORMULAÇÕES QUE OS CONTÊM” A presente invenção diz respeito a 10-desacetil-hidroxibacatina III de fórmula geral 1 :

o símbolo X representa um grupo > C = S, >C = NH ou >S = O; o símbolo ORi, que pode ter uma orientação α ou β, representa um grupo hidroxi, alquilsililoxi (de preferência trietilsililoxi, O-TES), diclorometoxicarbonilo, o símbolo R2 representa um grupo hidroxi α ou β orientado, ou um grupo Troe (Troe = CI3CCH2COO-) ou, com o átomo de carbono a que se encontra ligado, forma um grupo ceto; 2 o símbolo R3 representa um resto de isoserina de fórmula geral 2 :

2R Λ 5

(2)

F

4

ΛOH na qual o símbolo R4 representa um grupo alquilo ou alcenilo de cadeia linear ou ramificada, com 1 - 5 átomos de carbono, ou um grupo arilo; o símbolo R5 representa ou um grupo alquilo ou alcenilo, com 1 - 5 átomos de carbono, ou um grupo arilo ou um grupo butoxi terciário. O paclitaxel (taxol), como é já bem conhecido, constitui um diterpenoide extraído a partir de plantas do género Taxus tendo actividade anticancerogénica sobre diferentes formas de tumores humanos. A sua utilização clínica envolve ainda alguns inconvenientes tais como cardiotoxicidade e uma reduzida solubilidade em água, o que toma a sua administração complexa. Além disso, o paclitaxel induz rapidamente resistência. Por estas razões, encontram-se em progresso pesquisas desde há alguns anos com o objectivo de sintetizar novos análogos do paclitaxel que provoquem menos efeitos adversos quando comparados com a molécula original. A patente de invenção WO 94/22856 descreve genericamente compostos análogos aos presentes compostos em que os substituintes de C] e C)4 podem ser ligados para formar uma estrutura cíclica. J. Med. Chem. 1994, 37 : 1408 - 1410 descreve 14p-OH-desacetilbacatma-1,14-carbonato-Biorgamc & Medicinal 3

Chemistry Letters, Vol. 4 N° 13 : 1571 - 1576, refere a preparação de MP-hidroxi--docetaxel-l,14-acetoneto, enquanto que o mesmo jornal a pág. 1565 - 1570, descreve a síntese de intermediários, que comportam uma ligação ortoformato nos grupos hidroxilo Ct e C14.

Tetrahedron Letters Vol. 5 N° 13 pág. 3063 - 3064 e Tetrahedron Letters Vol. 35 N° 15 pág. 2349 - 2352 descrevem dois processos para a síntese do Docetaxel. A patente de invenção EP-A-559019 descreve derivados de 14-β--hidroxi-10-desacetilbacatina III.

Descobriu-se agora que os compostos que têm a fórmula geral (1) referida anteriormente, além de apresentarem uma citotoxicidade assinalável e uma actividade antitumor, encontram-se isentos dos inconvenientes do paclitaxel mencionados antes.

De acordo com a invenção, os compostos de fórmula geral (1) são obtidos por semi-síntese, a partir de 10-desacetil-14P-hidroxibacatma III, de fórmula

que, após protecçao dos grupos hidroxilos em 7- e 10-, se faz reagir a) com tiofosgénio em piridina, pelo que se obtém o 1,14-tiocarbonato correspondente, Q, com X = >C = S) ou b) com cloreto de tionilo na presença de bases terciárias (caso em que se obtém um 1,14-sulfito), (J_, com X = >S = O) ou c) com brometo de cianogénio (após conversão dos grupos hidroxilos em 1- e 14- nos alcóxidos de lítio correspondentes), a fim de se obter o iminocarbonato (I, com X->C= NH). Os pormenores operativos serão referidos nos exemplos e, como é evidente, os especialistas na matéria recorrerão a variações bem conhecidas quando da realização do processo, sem no entanto se verificar um afastamento do âmbito inventivo original.

Os tiocarbonatos, sulfitos e iminocarbonatos resultantes são esterificados no grupo hidroxilo em C13 com cadeias de isoserina apropriadamente activadas de fórmula geral 2, de acordo com o que é referido na literatura para a semi-síntese de paclitaxel e os seus análogos (ver, por ex. EP-A-400 971; Fr. Dem. 86, 10400; E. Didier et al. Tetrahedron Letters 35, 2349 (1994); E. Didier et al., ibid. 35, 3063 (1994)). De preferência utilizam-se as cadeias de isoserina na forma de ácido oxazolinadicarboxílico activado que corresponde à fórmula geral 3 :

R R 5

O na qual os símbolos R4 e R5 têm os significados definidos antes. (3) 5

Como alternativa a este sintão, pode utilizar-se o composto análogo em que a acetona de cetalização pode ser substituída por 1,3-bromoacetona, hexacloroacetona, cloral ou por um aldeído aromático, de preferência p-metoxi--benzaldeído ou o,p-dimetoxi-benzaldeído. Pode realizar-se a esterificação dos ácidos oxazolidinacarboxílicos com sintões taxano e a eliminação subsequente dos grupos protectores conforme descrito na literatura para a síntese do paclitaxel e dos seus análogos.

Os compostos de fórmula geral \ na qual o símbolo R2 forma um grupo ceto com Qo podem ser obtidos de maneira análoga, a partir de 14P-hidroxi-10--desidrobacatina III.

De entre os compostos de fórmula geral i, provaram ser particularmente activos o 1,14-tiocarbonato de 13-[(2R, 3S)-3-terc-butoxicarbonil-amino-2-hidroxi--3-isobutil-propanoíl]-14p-hidroxibacatinaIII (5), 1,14-tiocarbonato de 13-[(2R,3S)--3 -terc-butoxicarbonilammo-2-hidroxi-3 -i sobuteml-prop anoí 1] -14p-hidroxibacatina Hl (6), 1,14-tiocarbonato de 13-[(2R,3S)-3-caproílamino-2-hidroxi-3-isobutenil--propanoíl]-14P-hidroxibacatina III (7); provaram ser activos e com uma solubilidade diferente em água os derivados análogos tendo como substituintes nos grupos 1,14-hidroxilos o grupo >C = NH ou o grupo >S = O. Os compostos 1,14-iminocarbonato de 13-[(2R, 3S)-3-caproílamino-2-hidroxi-3-isobutenil--propanoíl]-14p-hidroxibacatina III (8) e 1,14-sulfíto de 13-[(2R, 3S)-3-caproíl-amino-2-hidroxi-3-isobutenil-propanoil]-14p-hidroxibacatina III (9) mostraram vantagens quando comparados com os compostos da técnica anterior em termos tanto da actividade como da tolerabilidade. 6

Os valores da citotoxicidade dos compostos 5, 8 e 9 quando comparados com os dos paclitaxel encontram-se referidos no quadro seguinte, a título de exemplo.

Quadro - CI50 dos compostos 5, 8 e do paclitaxel sobre seis linhas de células de tumor.

Lmha de células Tempo de exposição (h) Paclitaxel 5 CI50 (nM) 8 9 L1210 (leucemia murina) 72 7,5 ±2,0 0,5 ±0,1 2,4 ±0,1 1,8 ±0,1 AI 21 (ovariano humano) 72 4,7 ± 0,3 0,8 ± 0,3 1,9 ±0,2 1,1+0,1 A549 (NSCLC humano) 72 5,7 ±0,5 2,3 ± 0,3 2,1 ±0,3 1,8 ±0,2 HT-29 (cólon humano) 72 6,9 ± 0,4 0,3 ±0,1 0,5 ±0,1 0,5 ±0,1 MCF7 (mama humana) 72 4,8 ± 0,1 1,2 ±0,2 0,8 ± 0,2 1,0 ±0,3 MCF7-ADR (resistente) 72 395 ±8,7 18 ±2,2 21 ±6,2 16 ±4,9

Condições padrão : meio basal = RPMÍ 164Ò + HEPÉS 20 mM + L-glutamina 2 mM O compostos de fórmula geral i mostram vantagens surpreendentes quando comparados com o paclitaxel sobre linhas de células que resistem a outras substâncias antitumor, tais como adriamicina ou cis-platina. As diferenças entre o paclitaxel e estes produtos são ainda mais evidentes em modelos in vivo, tais como o murganho nu atímico com implante de tumor humano. Os produtos da invenção podem ser incorporados em formulações farmacêuticas apropriadas para a administração dos produtos tanto por via parentérica como por via oral. Para a administração intravenosa, utilizam-se principalmente misturas de Chremoform L e 7 etanol, polisorbatos ou preparações liposómicas preparadas com fosfatidilcolina natural ou sintética, ou misturas de fosfolípidos naturais na presença de colesterol, e, além disso, utilizam-se formulações com compostos micronizados com tamanho da partícula inferior a 300 nm. Administraram-se os compostos ao homem em concentrações que variam entre 30 e 500 mg/m2

Os exemplos referidos a seguir ilustram ainda a invenção.

Exemplo 1 - Preparação de 1.14-iminocarbonato de 7.10-diTroc-14B-hidroxi-10--desacetilbacatina III A uma solução de 205 mg de 7,10-diTroc-14P-hidroxi-10-desacetil-bacatina III (preparada de acordo com a patente de invenção US 5 254 591) em 5 ml de tetra-hidrofiirano adicionam-se 336 μΐ de uma solução 1,6M de butil-lítio em n-hexano à temperatura de 0°C, seguido por adição de 45,6 mg de brometo de cianogénio. Após agitação durante 10 minutos à temperatura de 0°C deixa-se a mistura reaccional sob agitação à temperatura ambiente durante 20 minutos, tempo esse durante o qual os produtos da reacção desaparecem; trata-se a mistura reaccional com uma solução saturada de NaHC03 na presença de cloreto de metileno. Lava-se a fase orgânica com água fria e concentra-se após secagem sobre Na2S04. Purifica-se o resíduo através de uma coluna de gel de sílica, eluindo o composto desejado com uma mistura de clorofórmio/acetona a 3:1. Obtêm-se 140 mg de iminocarbonato.

Exemplo 2 - Preparação de 1,14-sulfito de 7.10-diTroc-l 4B-hidroxi-l 0-desacetil-bacatina III A uma solução de 100 mg de 7,10-diTroc-14P-hidroxidesacetilbacatina 8 8

III em 1,5 ml de cloreto de metileno adicionam-se 63 μΐ (46 mg) de trietilamina e subsequentemente 12 μΐ (19,6 mg) de SOCl2 diluído em 200 μΐ de cloreto de metileno; agita-se a mistura reaccional à temperatura de 0°C durante 10 minutos, depois dilui-se com 10 vol. de cloreto de metileno e agita-se com água na presença de gelo, lavando completamente até à neutralidade.

Concentra-se a fase orgânica até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo o produto da reacção com uma mistura de hexano/acetato de etilo a 1:1. Obtêm-se 74 mg de sulfito cíclico, o qual é uma mistura de diastereómeros no átomo de enxofre.

Exemplo 3 - Preparação de 1,14-sulfito de 7-Q-Tes-14B-hidroxibacatina III A uma solução de 100 mg de 7-O-Tes-l 4P-hidroxi-10-desacetilbacatma III (U.S. 5 264 591) em 1,5 ml de cloreto de metileno adicionam-se 63 μΐ (46 mg) de trietilamina e subsequentemente 12 μΐ (19,6 mg) de SOCl2 diluído em 200 μΐ de cloreto de metileno; agita-se a mistura reaccional à temperatura de 0°C durante 10 minutos, dilui-se então com 10 vol. de cloreto de metileno e agita-se com água na presença de gelo, lavando completamente até à neutralidade.

Concentra-se a fase orgânica até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo o produto da reacção com uma mistura de cloreto de metileno / metanol a 95 : 5. Obtêm-se 81 mg do sulfito cíclico de 7-0-Tes-14p* hidroxi-10-desacetilbacatina III, o qual é uma mistura de diastereómeros no átomo de enxofre.

Dissolvem-se 50 mg do produto da reacção em 1 ml de piridina anidra e adicionam-se 30 μΐ de cloreto de acetilo à temperatura de 0°C sob agitação vigorosa.

Decorridas 5 horas à temperatura de 0°C despeja-se a mistura reaccional em 10 ml de água e extrai-se imediatamente 3 vezes com 10 ml de acetato de etilo de cada vez. Lava-se a fase orgânica com HC1 diluído para eliminar a piridina e finalmente com uma solução saturada de NaCl até à neutralidade; seca-se a fase orgânica e concentra-se até à secura. Obtêm-se 46 mg de 7-0-Tes-l,14-sulfito de 14p-hidroxi--bacatina ΠΙ.

Exemplo 4 - Preparação de 7-0-Tes-1.14-tiocarbonato de 14B-hidroxi-10-desacetil-bacatina III a) A uma suspensão de 2,8 g de 14P-hidroxi-10-desacetilbacatma III em 25 ml de cloreto de metileno adicionam-se 8,3 ml de piridina anidra; arrefece-se a solução resultante até à temperatura de -15°C e adicionam-se gota a gota 26,6 ml de uma solução de tiofosgénio 1,9M, sob atmosfera de azoto e com agitação, durante 10 minutos. Forma-se uma precipitado; trata-se a mistura reaccional, após verificação mediante CCF (hexano/acetato de etilo a 7:3), com uma solução de NaHCC>3 para destruir completamente o fosgénio. Após diluição com água, extrai-se a mistura com cloreto de metileno. Lava-se a fase orgânica amarelada com HC1 diluído e em seguida com água até à neutralidade. Concentra-se a fase orgânica até à secura, após secagem sobre Na2S04. Obtêm-se 2,7 g de 1,14-tiocarbonato de 14p-hidroxi-10-desacetil-bacatina III. b) Dissolvem-se 500 mg de 1,14-tiocarbonato de 14P-hidroxi-10--desacetilbacatina III em 5 ml de DMF e tratam-se com 287 μΐ de Tes-cloreto e 116 mg de imidazol, adicionando o agente de sililação gota a gota sob agitação. Decorridas duas horas, à mistura reaccional adiciona-se celite e despeja-se sobre 10 10

gelo. Lava-se o precipitado, após lavagem completa com água, com hexano para eliminar silanol e extrai-se em seguida com cloreto de metileno. Mediante concentração da fase orgânica, obtém-se o 7-0-Tes-l,14-tiocarbonato de 14p-hidroxi-l O-desacetilbacatina III, que tem uma pureza suficiente para as reacções subsequentes. Como alternativa, cromatografa-se o resíduo sobre 10 g de gel de sílica, eluindo com uma mistura de hexano / acetato de etilo a 1:1. Obtêm-se 490 mg de produto, a m/z 602.

Exemplo 5 - Preparação de 7-0-Tes-1.14-tiocarbonato de 143-hidroxibacatina III

Dissolvem-se 500 mg de 0-Tes-l,14-tiocarbonato de 14P-hidroxi-10--desacetil-bacatina III em 10 ml de piridina anidra e adicionam-se 200 μΐ de cloreto de acetilo à temperatura de 0°C sob agitação vigorosa. Decorridas 5 horas à temperatura de 0°C, despeja-se a mistura reaccional em 100 ml de água e extrai-se imediatamente 3 vezes com 50 ml de acetato de etilo de cada vez. Lava-se a fase orgânica com HC1 diluído para eliminar a piridina e finalmente com uma solução saturada de NaCl até à neutralidade; seca-se a fase orgânica e concentra-se até à secura. Obtém-se 501 mg de 7-0-Tes-l,14-tiocarbonato de 14P-hidroxibacatina III. Exemplo 6 - Preparação de 1.14-tiocarbonato de 13-IY2R. 3S)-3-terc-butoxicarbonil-amino-2-hidroxi-3-isobutil-propanoíl1-14B-hidroxibacatina III

Dissolve-se 0,5g de 1,14-tiocarbonato de 7-O-trietilsilil-14p-hidroxi-bacatina III em 60 ml de tolueno. A solução adicionam-se 800 mg de ácido (4S. 5R)-N-(terc.-butoxicarbonil)-2,2-dimetil-4-isobutil-5-oxazolidina-carboxílico, 400 mg de ciclo-hexilcarbodiimida e 40 mg de Ν,Ν-dimetilaminopiridina. Mantém-se a mistura reaccional à temperatura de 80°C durante 2 horas, filtra-se então e lava-se 11 11

com água; concentra-se então a fase orgânica até à secura. Trata-se o resíduo com metanol que contém 0,1 % de H2S04 à temperatura de 10°C. Dilui-se a solução metanólica com água e extrai-se o produto com acetato de etilo; concentra-se a fase orgânica até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo com acetona / hexano a 4:6. Obtêm-se 580 mg de 5, IVTa m/z 887.

Exemplo 7 - Preparação de 1,14-iminocarbonato de 13-IY2R. 3S)-3-terc-butoxi-carbonil-amino-2-hidroxi-3-isobutil-propanoíll-14B-hidroxibacatina III

Dissolve-se 0,7 g de 1,14-iminocarbonato de 7,10-of-Troc-14P-hidroxi-bacatina III em 80 ml de tolueno. A solução adicionam-se 750 mg de ácido (4S, 5R)-N-(terc.-butoxicarbonil)-2,2-dimetil-4-isobutil-5-oxazolidina-carboxílico, 400 mg de ciclo-hexilcarbodiimida e 40 mg de Ν,Ν-dimetilaminopiridina. Mantém-se a mistura reaccional à temperatura de 80°C durante 2 horas. Filtra-se a mistura reaccional, lava-se com água e concentra-se então a fase orgânica até à secura. Trata-se o resíduo com metanol que contém 0,1 % de H2S04 à temperatura de 10°C; após diluição parcial com água e acidificação ulterior com ácido acético, trata-se a solução com Zn para remover o Troe. Dilui-se a solução hidrometanólica com água e extrai-se o produto com acetato de etilo; concentra-se a fase orgânica até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo com acetona/hexano a 4:6. Obtêm-se 480 mg de produto, íVEa m/z 841.

Exemplo 8 - Preparação de L14-tiocarbonato de 13-IY2R. 3S)-3-caproíl-amino-2--hidroxi-3-isobutil-propanoilI- 14B-hidroxibacatina III

Dissolve-se 0,5 g de 1,14-tiocarbonato de 7-O-trietilsilil-14P-hidroxi-bacatina III em 60 ml de tolueno. A solução de adicionam-se 750 mg de ácido 12 (4S, 5R)-N-(caproíl)-2,2-dimetil-4-isobutil-5-oxazolidina-carboxílico, 400 mg de ciclo-hexilcarbodiimida e 40 mg de Ν,Ν-dimetilaminopiridina. Mantém-se a mistura reaccional à temperatura de 80°C durante duas horas, filtra-se e lava-se com água, e concentra-se então a fase orgânica até à secura. Trata-se o resíduo com metanol contendo 0,1 % de H2S04 à temperatura de 10°C. Dilui-se a solução metanólica com água e extrai-se o produto com acetato de etilo; concentra-se a fase orgânica até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo com acetona / hexano a 4:6. Obtêm-se 502 mg de produto desejado.

Exemplo 9 - Preparação de 1.14-sulfito de 13-K2R. 3Sj-3-caproíl-amino-2-hidroxi--3-isobutil-propanoíll-14B-hidroxibacatina III

Dissolve-se 0,5 g de 1,14-sulfito de 7-O-trietilsilil-14p-hidroxibacatina III em 60 ml de tolueno. À solução adicionam-se 750 mg de ácido (4S, 5R)-N--(caproíl)-2,2-dimetil-4-isobutil-5-oxazolidina-carboxílico, 400 mg de ciclo-hexilcarbodiimida e 40 mg de Ν,Ν-dimetilaminopiridina. Mantém-se a mistura reaccional à temperatura de 80°C durante duas horas, filtra-se e lava-se com água, e concentra-se então a fase orgânica até à secura. Trata-se o resíduo com metanol contendo 0,1 % de H2S04 à temperatura de 10°C. Dilui-se a solução metanólica com água e extrai-se o produto com acetato de etilo; concentra-se a fase orgânica até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo com acetona/hexano a 4:6. Obtêm-se 502 mg do produto desejado.

Exemplo 10- Preparação de 1.14-tiocarbonato de 13-IY2R. 3S)-3-caproíl-amino-2--hidroxi-3-isobutenil-propanoill- 14B-hidroxibacatina III

Dissolve-se 0,5 g de 1,14-tiocarbonato de 7-0-trietilsilil-14p-hidroxi- bacatina ΠΙ em 60 ml de tolueno. À solução adicionam-se 750 mg de ácido (4S, 5R)-N-(caproíl)-2,2-dimetil-4-isobutenil-5-oxazolidina-carboxílico, 400 mg de ciclo-hexilcarbodiimida e 40 mg de Ν,Ν-dimetilaminopiridina. Mantém-se a mistura reaccional à temperatura de 80°C durante duas horas. Filtra-se a mistura reaccional, lava-se com água, e concentra-se a fase orgânica até à secura. Trata-se o resíduo com metanol contendo 0,1 % de H2S04 à temperatura de 10°C. Dilui-se a solução metanólica com água e extrai-se o produto com acetato de etilo; concentra-se a fase orgânica até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo com acetona/hexano a 3:7. Obtêm-se 445 mg do produto desejado.

Exemplo 11 - Preparação de 1.14-sulfito de 13-IY2R, 3S')-3-caproíl-amino-2--hidroxi-3-isobutenil-propanoíIl- 14B-hidroxibacatina III

Dissolve-se 0,5 g de 1,14-sulfito de 7-O-trietilsilil-14p-hidroxibacatina III em 60 ml de tolueno. À solução adicionam-se 750 mg de ácido (4S, 5R)-N--(caproíl)-2,2-dimetil-4-isobutenil-5-oxazolidma-carboxílico, 400 mg de ciclo-hexilcarbodiimida e 40 mg de Ν,Ν-dimetilaminopiridina. Mantém-se a mistura reaccional à temperatura de 80°C durante duas horas. Filtra-se a mistura reaccional, lava-se com água e concentra-se a fase orgânica até à secura. Trata-se o resíduo com metanol contendo 0,1 % de H2S04 à temperatura de 10°C. Dilui-se a solução metanólica com água e extrai-se o produto com acetato de etilo; concentra-se a fase orgânica até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo com acetona/hexano a 7:3. Obtêm-se 495 mg do produto desejado.

Exemplo 12- Preparação de 1.14-tiocarbonato de 13-K2R. 3S)-3-caproíl-amino-2--hidroxi-3-crotonil-propanoill-14B-hidroxibacatina III

Dissolve-se 0,5 g de 1,14-tiocarbonato de 7-0-trietilsilil-14p-hidroxi-bacatina III em 60 ml de tolueno. A solução adicionam-se 760 mg de ácido (4S, 5R)-N-(caproíl)-2,2-dimetil-4-crotonil-5-oxazolidina-carboxílico, 400 mg de ciclo-hexilcarbodiimida e 40 mg de Ν,Ν-dimetilaminopiridina. Mantém-se a mistura reaccional à temperatura de 80°C durante duas horas. Filtra-se a mistura reaccional, lava-se com água e concentra-se a fase orgânica até à secura. Trata-se o resíduo com metanol contendo 0,1 % de H2S04 à temperatura de 10°C. Dilui-se a solução metanólica com água e extrai-se o produto com acetato de etilo; concentra-se a fase orgânica até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo com acetona/hexano a 2:8. Obtêm-se 430 mg do produto desejado.

Exemplo 13 - Preparação de 1,14-tiocarbonato de 7-O-Tes-10-desidro-14B-hidroxi-bacatina III

a) I4B-Hidroxi-10-desidrobacatina III

Suspendem-se 10 g de 10-desacetil-14P-hidroxibacatina III em 350 ml de metanol e adicionam-se 65 g de Cu(OAc)2. Agita-se a suspensão à temperatura ambiente durante 120 horas. Eliminam-se os sais mediante filtração, evapora-se a solução até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre 100 g de gel de sílica, eluindo com uma mistura de hexano / acetato de etilo a 6:4. Após cristalização a partir de ligroína, obtêm-se 9,3 g de 6, M+a m/z 558. b) Composto do titulo

Trata-se 0,5 g de 14p-hidroxi-10-desidrobacatina de acordo com o processo do Exemplo 4 a). Obtêm-se 350 mg do produto desejado.

Exemplo 14 - Preparação de 1 J4-tiocarbonato de 13-IY2R. 3SV3-caproíl-amino-2- 15

-hidroxi-3 -crotonil-propanoíll-10-desidro-14B-hidroxibacatina III

Dissolve-se 0,5 g de 1,14-tiocarbonato de 7-O-trietilsilil-10-desidro-14p--hidroxibacatina III em 60 ml de tolueno. A solução adicionam-se 760 mg de ácido (4S, 5R)-N-(caproíl)-2,2-dimetil-4-crotonil-5-oxazolidina-carboxílico, 400 mg de ciclo-hexilcarbodiimida e 40 mg de Ν,Ν-dimetilaminopiridina. Mantém-se a mistura reaccional à temperatura de 80°C durante duas horas. Filtra-se a mistura reaccional, lava-se com água e concentra-se a fase orgânica até à secura. Trata-se o resíduo com metanol contendo 0,1 % de H2S04 à temperatura de 10°C. Dilui-se a solução metanólica com água e extrai-se o produto com acetato de etilo; concentra-se a fase orgânica até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica, eluindo com acetona/hexano a 2:8. Obtêm-se 430 mg do produto desejado.

Lisboa, 16 de Agosto de 2000

OAgônt© Oficia! tíc Propriedade Industrial

125© LISBOA

Claims (6)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Compostos de fórmula geral I:

na qual o símbolo X representa um grupo > C = S, >C = NH ou >S = O; o símbolo ORi, que pode ter uma orientação <x ou β, representa um grupo hidroxi, alquilsililoxi (de preferência trietilsililoxi, O-TES), diclorometoxicarbonilo, o símbolo R2 representa um grupo hidroxi a ou β orientado, ou um grupo Troe (Troe = CI3CCH2COO-) ou, com o átomo de carbono a que se encontra ligado, forma um grupo ceto; o símbolo R3 representa um resto de isoserina de fórmula geral 2 :

na qual 2 o símbolo R4 representa um grupo alquilo ou alcenilo de cadeia linear ou ramificada, com 1 - 5 átomos de carbono, ou um grupo arilo; o símbolo R5 representa ou um grupo alquilo ou alcenilo, com 1 - 5 átomos de carbono, ou um grupo arilo ou um grupo butoxi terciário.

2. Composto de fórmula geral 1, escolhido de entre o grupo que consiste em: 1.14- iminocarbonato de 7,10-DiTroc-14P-hidroxi-l O-desacetilbacatina ΠΙ; 1.14- sulfito de 7,10-DiTroc- 14p-hidroxi-1 O-desacetilbacatina III, 1.14- sulfito de 7-O-Tes-143-hidroxibacatina III; - 7-0-Tes-l,14-tiocarbonato de 14p-hidroxi-l O-desacetilbacatina ΠΙ; 7-O-T es-1,14-tiocarbonato de 14P-hidroxibacatina, 1.14- tiocarbonato de 13-[(2R, 3S)-3-terc.-butoxi-carbonil-arnino-2-hidroxi-3-iso-butilpropanoíl]-14P-hidroxibacatina III; - 1,14-iminocarbonato de 13-[(2R, 3S)-3-terc.-butoxi-carbonil-amino-2-hidroxi-3--isobutilpropanoíl]- 14P-hidroxibacatina III; 1.14- tiocarbonato de 13-[(2R, 3S)-3-caproíl-amino-2-hidroxi-3-isobutil-propanoíl]-14P-hidroxibacatina III; 1.14- sulfito de 13-[(2R, 3S)-3-caproíl-amino-2-hidΓoxi-3-isobutilpropanoíl]-14β--hidroxibacatina III; 1.14- tiocarbonato de 13-[(2R, 3S)-3-caproíl-amino-2-hidroxi-3-isobutenil-propanoil]-14P-hidroxibacatina III; 1.14- sulfito de 13-[(2R, 3S)-3-caproíl-amino-2-hidroxi-3-isobutenil-propanoíI]--14P-hidroxibacatina III;

1.14- tiocarbonato de 13-[(2R, 3S)-3-caproíl-amino-2-hidroxi-3-crotonil- propanoíl]-143-hidroxibacatina III; 1.14- tiocarbonato de 7-O-Tes-10-desidro-14P-hidroxibacatina III, - 1,14-tiocarbonato de 13-[(2R, 3S)-3-caproíl-amino-2-hidroxi-3-crotonil- propanoí 1]-10-desidro-14p-hidroxibacatina III; 1.14- tiocarbonato de 13-[(2R, 3S)-3-terc.-butoxicarbonilamino-2-hidroxi-3-iso-butenil-propanoíl]-14p-hidroxibacatina III; 1.14- iminocarbonato de 13-[(2R, 3S)-3-caproílamino-2-hidroxi-3-isobutenil- propanoíl]-14p-hidroxibacatina III.

3. Processo para a preparação de compostos de fórmula geral I, caracterizado pelo facto de compreender as etapas seguintes : i) reacção de 10-desacetil-14P-hidroxibacatina ΙΠ (respectivamente 10-desidro--14p-hidroxibacatina III), após protecção dos grupos hidroxilos em 7- e 10-(respectivamente do grupo hidroxilo em 7-): a) com tiofosgénio em piridina, para formar o 1,14-tiocarbonato correspondente, ou b) com cloreto de tionilo na presença de bases terciárias, para formar o 1,14-sulfito correspondente, ou c) com butil-lítio e brometo de cianogénio, para formar o 1,14-iminocarbonato correspondente; ii) esterificação dos intermediários resultantes em 13 com isoserinas activadas; e iii) fínalmente desprotecção dos grupos hidroxi.

4. Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo facto de se realizar a esterificação em 13 com isoserinas activadas de fórmula geral 3 : 4 R R s

l*C02H o na qual os símbolos R4 e R5 têm os significados definidos antes ou com os cetais correspondentes com 1,3-bromoacetona, hexacloroacetona, cloral, p-metoxi- ou o,p-dimetoxibenzaldeído.

5. Composições farmacêuticas com actividade antitumor, tendo uma cardiotoxicidade reduzida, que contêm um ou mais compostos de fórmula geral 1.

6. Utilização dos compostos de fórmula geral \ para a preparação de composições farmacêuticas com actividade antitumor, tendo uma cardiotoxicidade reduzida. Lisboa, 16 de Agosto de 2000 OScká tíc Propriedade Industriai

m SAMPAÍO A.O.P.L Esa ώο SaSStre, 195, r/c-Urt. 1250 LISBOA 1 RESUMO “DERIVADOS DE 10-DESACETIL-14-BETA-HIDROXIBACATINAΙΠ, PROCESSO PARA A SUA PREPARAÇÃO E FORMULAÇÕES QUE OS CONTÊM” A presente invenção refere-se a novos derivados de 10-desacetil-14β--hidroxibacatina III. Preparam-se os novos derivados, tendo actividade citotóxica e antitumor, a partir deste sintão após funcionalização dos grupos hidroxilo nas posições 1-, 14- como tiocarbonato, iminocarbonato e sulfito e oxidação eventual dos grupos hidroxilo em Cio. Estes derivados são submetidos a uma esterificação subsequente na posição 13 com uma cadeia de isoserina substituída variavelmente. Os produtos da invenção podem ser administrados pela via de injecção ou oral, quando formulados apropriadamente Lisboa, 16 de Agosto de 2000

JíOSÉ ©E SAMPAIO A.O.P.L ftaa do Salitre, 195, r/c-Birt. 1250 LISBOA