PT670839E

PT670839E - Processo para a preparacao de 9-amino-camptotecina

Info

Publication number: PT670839E
Application number: PT94927618T
Authority: PT
Inventors: Franco Zarini; Angelo Bedeschi; Walter Cabri; Ilaria Candiani; Sergio Penco
Original assignee: Pharmacia & Upjohn Spa
Priority date: 1993-09-28
Filing date: 1994-09-15
Publication date: 2000-05-31
Also published as: AU676089B2; FI952549A0; GR3033197T3; JP3754068B2; HUT71267A; DE69431856D1; DK0982307T3; EP0670839B1; RU95112485A; CN1046283C; ATE229022T1; ATE189221T1; PT982307E; EP0982307B1; CA2150382A1; JPH08506834A; HU9501898D0; WO1995009169A1; JP2005036003A; IL111066A

Description

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DESCRIÇÃO “PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE 9-AMEVO-CAMPTOTECINA”

Campo da Invenção A presente invenção diz respeito a um novo processo para a preparação de 9-amino-20(S)-camptotecina de fórmula (I) n:

a qual constitui um agente antitumor conhecido : Wani et al, J. Med. Chem. 1987, 30, 1774 - 1779; Hsiang et al., Câncer Res. 49, 4385 - 4389, 15 de Agosto de 1989; Câncer Res. 49, 1465 - 1469, 15 de Março de 1989.

Antecedentes da Invenção Têm sido largamente descritas aproximações totalmente sintéticas à 9-amino-camptotecina (US-A-4 894 456 e US-A-5 053 512). A síntese total do produto, contudo, não é nem desejável nem apropriada para uma produção em grande escala uma vez que envolve demasiadas fases do processo o que toma a síntese demasiadamente demorada, especialmente, demasiadamente cara.

Uma aproximação semi-sintética à 9-amino-camptotecina encontra-se descrita, por exemplo, nas patentes de invenção japonesas JP-A-59-51288 e 70 JP-A-59-51289, ambas publicadas em 1984, a partir do produto natural conhecido camptotecma : Câncer Chemotherapy Reports, parte I, vol. 54, N° 6, Dezembro de 1970, 461 - 470; J. Med. Chem., 1980, 23, 554 - 560; Science, vol. 246, Novembro de 1989,1046-1048. A 20(S)-camptotecina natural tem a seguinte fórmula (II)

A aproximação semi-sintética referida envolve a nitração da camptotecina de ocorrência natural, seguida pela redução do derivado de 9-nitro. Essa nitração, contudo, produz inicialmente uma mistura a 70/30 do derivado indesejado 12-nitro-camptotecina (70 %) e do derivado desejado 9-nitro-campto-tecina (30 %). O derivado 9-nitro é portanto formado apenas em uma pequena quantidade.

Após a preparação dos dois produtos de nitração, o derivado 12-nitro, que por sua vez é biologicamente inactivo (ver, por exemplo, Wani C., Nicholas A. W., Wall M.E., J. Med. Chem., 1986, 29, 2358), tem de ser então eliminado, dando origem a problemas de tratamento de resíduos. O inconveniente considerável relacionado com a eliminação do subproduto derivado de 12-nitro indesejado é particularmente importante para a produção em grande escala, uma vez que se recolhem grandes quantidades do derivado 12-nitro não utilizável e é necessário proceder à sua eliminação.

Além disso, seguindo esta aproximação semi-sintética, tomam-se 3 necessárias grandes quantidades de camptotecina natural a qual é muito dispendiosa, para produzir pequenas quantidades do agente antitumor desejado 9-amino-camptotecina. A produtividade e os rendimentos globais baixos desta aproximação tomam a produção de quantidades substanciais do composto desejado difíciil. Existe, por consequência, uma necessidade de um processo que permita produtividade e rendimentos aumentados quando comparados com a aproximação semi-sintética delineada anteriormente à 9-amino-camptotecina.

Sumário da Invenção

De acordo com a presente invenção, proporciona-se um novo processo para a preparação de 9-amino-camptotecina de fórmula (I) a partir de 10-hidroxi--20(S)-camptotecina de fórmula(ΙΠ), deacondocanas fases ilustradas no Esquema I a seguir :

Esquema I

NO,

i I

T

em que o símbolo X representa um grupo de fórmula geral R-S02- de modo que o grupo de fórmula geral XO pode ser eliminado em condições redutoras. A remoção em condições redutoras significa que o grupo de fórmula geral XO pode ser eliminado mediante redução com um catalisador homogéneo ou heterogéneo. O grupo de fórmula geral XO é assim substituído por um átomo de hidrogénio.

Este processo permite a síntese de 9-amino-20(S)-camptotecina com alto rendimento e produtividade. O processo é caracterizado pelas condições reaccionais fáceis e suaves que garantem rendimentos elevados e produtos reaccionais limpos. Especialmente na última fase, os oxigénios benzílicos e o radical lactona (os quais são essenciais para a actividade biológica) sobrevivem à eliminação redutora do grupo de fórmula geral OX intacto. Além disso, a reacção de nitração, devido à presença do resto hidroxi, prossegue com uma regiosselectividade elevada e sob condições fáceis e suaves que são também muito mais seguras do que as condições habituais da reacção de nitração. Veja-se, para uma referência à nitração da 10-hidroxi-camptotecina, o documente J. Med. Chem., 1986, 29, 2358, citado anteriormente. A configuração 20(S) correcta é mantida durante o processo.

Descrição pormenorizada da Invenção A presente invenção proporciona um processo para a preparação de 9-amino-camptotecina de fórmula (I):

o qual compreende . (1) a reacção de um composto de fórmula (III) 5

em que o grupo hidroxi no anel A se encontra na posição 10 com um agente de nitração, de modo a obter-se um composto correspondente de fórmula (IV)

sendo o processo caracterizado por (2) se converter o composto de fórmula (IV) num composto correspondente de fórmula geral (V) NO,

na qual o símbolo X representa um grupo de fórmula geral R-SO?- de tal modo que o grupo de fórmula geral XO pode ser eliminado em condições redutoras; em que o símbolo R representa: (i) um anel fenilo ou nafiilo o qual é insubstituído ou é substituído por um ou 6 mais substituintes, por exemplo 1, 2 ou 3 substituintes, escolhidos de entre grupos alquilo C1-C5 de cadeia linear ou ramificada, grupos alcoxi C1-C5 de cadeia linear ou ramificada, átomos de halogéneo ou grupos hidroxi, amino e nitro; ou (ii) um grupo alquilo CrC9 de cadeia linear ou ramificada o qual é insubstituído ou é substituído por um ou mais, por exemplo 1, 2 ou 3 átomos de halogéneo; e (3) se eliminar em condições redutoras o referido grupo de fórmula geral XO e se reduzir o grupo nitro do composto de fórmula geral (V), de modo a obter-se a 9-amino-camptotecina de fórmula (I).

Este processo nunca foi explorado anteriormente, e especialmente não se conhece a fase de redução dupla com desoxigenação simultânea e redução do grupo nitro. Em J. Med. Chem. 34, 98, 1991, descreve-se a desoxigenação de um derivado de 10-triflato-9-N,N-dimetilaminometilo de camptotecina na presença de tetraquistrifenilfosfina Pd(0).

Contudo, a reacção tinha rendimentos muito baixos (20 %). Além disso, a preparação deste triflato pode constituir um problema principal em termos de selectividade e de estabilidade, limitando drasticamente a sua utilidade (veja-se por exemplo Subramanian, L.R., et al, Synthesis 293, 1973).

Muito embora a desoxigenação redutora na presença de tetraquistrifenilfosfina Pd(0) seja bem conhecida em química orgânica (veja-se por exemplo Cacchi, S., et al., Tetrahedron Letters 27, 5541, 1986), mostrou-se que outros sulfonatos mais apropriados não são reactivos nestas condições (veja-se por 7 exemplo Cabri, W. et al., J. Org. Chem. 55, 350, 1990). O uso de diferentes fosfinas ou sulfonatos nunca foi referido numa camptotecina e a sua utilidade era imprevisível com base na literatura corrente. Além disso, sabe-se que a presença de um grupo nitro em posição o ou p para o éster sulfonato pode dar origem a rendimentos inferiores aos habituais em reacções de tipo Heck (veja-se por exemplo J. Org. Chem. 57, 1481, 1992 e Echavarren, A. M.; Stille, J. K.; J. Am. Chem. Soc. 109. 5478. 1987).

Surpreendentemente, a redução desoxigenativa no presente processo pode ter lugar utilizando os sulfonatos menos reactivos, não descritos anteriormente, em condições mais suaves e proporcionando um bom rendimento do produto desejado a despeito da presença do grupo nitro. Surpreendentemente, o grupo nitro propriamente dito pode sofrer redução no meio reaccional. Numa única fase, pode obter-se o derivado 9-amino desejado sem a necessidade de reacções ulteriores. Esta redução concomitante do grupo nitro era previamente desconhecida e, à luz da literatura corrente, imprevisível (veja-se por exemplo Cacchi, S., et al., Tetrahedron Letters 27, 5541, 1986). O composto inicial do presente processo é o composto de fórmula (III). Este tem uma configuração 20(S) que se mantém durante o processo. O composto de fórmula (III) encontra-se tipicamente isento do correspondente isómero 20(R). Contudo, a presente invenção pode ser aplicada a uma mistura racémica do composto de fórmula (III) e o correspondente isómero 20(R). Nesse caso, obtém-se uma mistura racémica de 9-ammo-20(S)-camptotecina de fórmula (I) e 9-amino-20(FL)—camptotecina. Pode obter-se o composto de fórmula (III) recorrendo a

8 metodologias conhecidas a partir de 20(S)-camptotecina (veja-se por exemplo JP-A-59-51288; JP-A-59-51299; J. Med. Chem. 34, 98, 1991; e Chem. Pharm. Buli. 1991, 39* 3183, 1991).

Pode fazer-se reagir o composto de fórmula (III) com agentes de nitração correntes apropriados para se obter o composto de fórmula (IV). Pode realizar-se a nitração de um composto de fórmula (III) com um agente de nitração, tal como ácido nítrico, misturas de ácido nítrico e ácido sulfúrico, ou outros agentes de nitração, tais como nitrato de potássio ou ácido nítrico ou trifluoreto de boro tal como mono-hidrato do trifluoreto de boro (veja-se por exemplo Olah, G. A., et al. Synthesis 1085, 1992) ou ácido nítrico / anidrido trifluorometano-sulfónico (ilib., 1087, 1992), a uma temperatura compreendida entre -20°C e 100°C, durante um intervalo de tempo compreendido entre alguns minutos e vários dias tais como entre 5 minutos e 3 dias, por exemplo entre 4 horas e 24 horas. O composto de fórmula (IV) é convertido por sua vez num composto correspondente de fórmula geral (V). Isto pode conseguir-se fazendo reagir o composto de fórmula (IV) com um agente de sulfonilação de fórmula geral (VI) X - R” (VI) na qual o símbolo X representa um grupo de fórmula geral R-S02- na qual o símbolo R representa : (i) um anel fenilo ou naftilo o qual é insubstituído ou é substituído por um ou mais substituintes, por exemplo 1, 2 ou 3 substituintes, escolhidos de entre grupos alquilo CpCs de cadeia linear ou ramificada, grupos alcoxi CpC? de cadeia linear ou ramificada, átomos de halogéneo ou grupos hidroxi, amino e nitro, ou (ii) um grupo alquilo C1-C9 de cadeia linear ou ramificada o qual é insubstituído ou é substituído por um ou mais, por exemplo 1, 2 ou 3 átomos de halogéneo; o símbolo R” representa um átomo de halogéneo, um grupo imidazolilo, um grupo de fórmula geral -0S02R ou -N(C6H5)(RS02) em que os símbolos R têm os significados definidos antes ou um outro grupo susceptível de reagir com um fenol para se obter um sulfonato.

Um grupo alquilo C1-C9 pode ser de preferência um grupo alquilo C1-C5 tal como, por exemplo, um grupo metilo, etilo, n-propilo ou iso-propilo. Um grupo alcoxi Q-Cs pode ser um grupo alcoxi C1-C4 tal como, por exemplo, um grupo metoxi, etoxi, n-propoxi ou iso-propoxi.

Um átomo de halogéneo pode ser um átomo de flúor, cloro ou bromo. Um grupo alquilo CrC5 substituído por um ou mais átomos de halogéneo pode ser um grupo per-halo-alquilo C1-C5 tal como um grupo percloroalquilo CpC5 ou um grupo perfluoroalquilo CrC5, por exemplo, trifluorometilo. Os significados preferidos que o símbolo X pode assumir quando presente nos compostos de acordo com a presente invenção são escolhidos a partir de ésteres sulfonato eventualmente substituídos com a fórmula geral R-S02- anterior na qual o símbolo R representa : (i) um anel fenilo ou naftilo o qual é insubstituído ou é substituído por um ou mais substituintes escolhidos de entre um grupo alquilo CrC5 de cadeia linear ou ramificada, um grupo alcoxi CpC? de cadeia linear ou ramificada, um átomo de halogéneo ou um grupo hidroxi, amino e nitro; ou 10 (ii) um grupo alquilo C|-C5 de cadeia linear ou ramificada o qual é insubstituído ou é substituído por um ou mais, por exemplo 1, 2 ou 3 átomos de halogéneo que são de preferência átomos de flúor ou de cloro;

Mais preferivelmente, o símbolo X representa um grupo de fórmula geral R-S02- na qual o símbolo R representa : (i) um anel fenilo ou naftilo, o qual é insubstituído ou é substituído por um substituinte escolhido de entre um grupo alquilo C1-C5 de cadeia linear ou ramificada, um grupo alcoxi C1-C5 de cadeia linear ou ramificada, ou um átomo de flúor ou de cloro; ou (ii) um grupo alquilo Q-C5 de cadeia linear ou ramificada o qual é insubstituído ou é substituído por um ou de preferência mais, por exemplo 1, 2 ou 3, átomos de flúor.

Significados particularmente preferidos que o símbolo X pode assumir nos compostos da presente invenção são escolhidos de entre o grupo que compreende : p-metoxibenzeno-sulfonilo, p-tolueno-sulfonilo, p-fluorobenzeno--sulfonilo, metano-sulfonilo, trifluorometano-sulfonilo, benzeno-sulfomlo, p-nitro-benzeno-sulfonilo e 1 - ou 2-nafteleno-sulfonilo.

Os significados preferidos de um composto de fórmula geral (VI) incluem cloreto de p-metoxibenzeno-sulfonilo, cloreto de p-tolueno-sulfonilo, cloreto de p-fluorobenzeno-sulfonilo, cloreto de metano-sulfonilo, anidrido trifluorometano-sulfónico, cloreto de benzeno-sulfomlo, cloreto de p-mtrobenzeno--sulfonilo, N-feniltrifluorometano-sulfonimida ou cloreto de 1- ou 2-naftaleno- -sulfonilo. 11

Pode realizar-se a reacção de um composto de fórmula (IV) com um composto de fórmula geral (VI) para se obter um composto de fórmula geral (V) a uma temperatura compreendida entre -50 e 100°C, por exemplo entre 0 e 50°C. A reacção pode ocorrer durante um intervalo de tempo compreendido entre 5 minutos e 3 dias, por exemplo entre 4 horas e 24 horas. A reacção tem lugar tipicamente no seio de um solvente orgânico anidro tal como CHC13, CH2C12, tetra-hidrofurano (THF), dioxano, dimetilformamida (DMF), dimetilacetamida (DMA), etc. Pode encontrar-se presente eventualmente uma base orgânica tal como piridina, trietilamina ou uma base estericamente impedida tal como, por exemplo, diisopropilamina, 2,6-dimetilpiridina, etc. A eliminação em condições redutoras da funcionalidade XO e a redução do grupo nitro transforma o composto de fórmula geral (V) no composto de fórmula (I). Isto pode conseguir-se utilizando agcnte(s) de redução apropriado(s) na presença de catalisador(es) apropriado(s). A eliminação do grupo de fórmula geral XO e a redução do grupo nitro para formar um grupo amino podem ter lugar numa fase única ou em duas fases.

Pode realizar-se a redução em duas fases desoxigenando em primeiro lugar um composto de fórmula geral (V) para se obter um composto de fórmula (VIII) NO.. I -

Pode então, por sua vez, reduzir-se o composto de fórmula (VIII), por exemplo com um agente redutor apropriado, no composto desejado de fórmula (I).

Os agentes redutores apropriados incluem hidrogénio molecular, formato de amónio, formato de trietilamónio, ácido fórmico, hidreto de tributil-estanho, ciclo-hexadieno, um polimetil-hidroxi-silano, etc., na presença de um catalisador apropriado tal como paládio, óxido de platina, platina, ródio ou ruténio, como tais ou suportados sobre um meio apropriado, tal como sobre carvão, sobre CaC03, sobre BaS04, sobre alumina, etc. Como alternativa, pode realizar-se a redução em condições homogéneas. Consegue-se então a redução com um agente redutor tal como formato de amónio, formato de trietilamónio, ácido fórmico, hidreto de tributil-estanho, ciclo-hexadieno ou um polimetil-hidroxi-silano na presença de um composto de fórmula geral (IX) : MUL’m (IX) na qual o símbolo M representa um átomo de metal de transição; os símbolos L e L’, iguais ou diferentes, representam, cada um, um anião tal como Cl' ou CH3COO' ou uma molécula neutra tal como umà molécula de solvente, uma mono ou uma di-fosfma, um fosfíto ou uma diamina, e os símbolos nem podem variar entre 0 e 4. Tipicamente a soma m + n é igual a pelo menos 1, por exemplo, 1, 2, 3 ou 4.

Os átomos de metais de transição preferidos que o símbolo M pode representar são paládio, níquel e platina. Os grupos preferidos que os símbolos L e/ou L’ podem representar são difosfinas quelantes tais como bis-(difenilfosfino)--metano, 1,2- e l,3-bis-(difenil-fosfino)-propano, l,4-bis-(difenilfosfíno)-butano, l,l’-bis-(difenilfosfino)-ferroceno ou trifenilfosfina. A razão molar do átomo de 13

metal de transição : difosfina quelante encontra-se de uma maneira geral compreendida entre 1 : 1 e 1 : 4. Os solventes apropriados para as reduções são solventes orgânicos, tais como DMF, MeOH, ácido acético, CHC13, dioxano, THF, ou as suas misturas, a uma temperatura compreendida entre cerca de 0°C e 200°C, durante um intervalo de tempo compreendido entre 1 hora e 3 dias tal como entre 4 horas e 24 horas.

Quando se realiza a redução em duas fases separadas, pode realizar-se a primeira fase durante um curto intervalo de tempo tal como por vezes entre alguns minutos e várias horas por exemplo entre 5 minutos e 12 horas. Se desejado, isola-se o derivado intermediário. Realiza-se então a segunda fase de redução durante um intervalo de tempo compreendido entre alguns minutos e várias horas, por exemplo entre 5 minutos e 12 horas. Os solventes apropriados para ambas as fases são benzeno, tolueno, CHC13, acetonitnlo, DMF, dioxano, etc. ou as suas misturas. As temperaturas apropriadas encontram-se compreendidas entre a temperatura ambiente e a temperatura de refluxo do solvente.

Os reagentes preferidos para a conversão de um composto de fórmula (III) num composto de fórmula (IV) são ácido nítrico, misturas de ácido nítrico e ácido sulfurico, ou nitrato de potássio ou ácido nítrico e mono-hidrato do trifluoreto de boro ou ácido nítrico/anidrido trifluorometano-sulfónico a uma temperatura compreendida entre -20°C e 60°C e durante um intervalo de tempo compreendido entre alguns minutos e várias horas tal como entre 5 minutos e 12 horas.

Os reagentes preferidos para a conversão de um composto de fórmula (IV) num composto de fórmula geral (V) são agentes de sulfonilação tais como

cloreto de p-tolueno-sulfonilo, cloreto de p-fluorobenzeno-sulfonilo, cloreto de metano-sulfonilo, anidrido trifluorometano-sulfónico, cloreto de benzeno-sulfonilo, p-nitrobenzeno-sulfonilo, N-feniltrifluorometano-sulfonimida ou cloreto de 1- ou 2-neiftaleno-sulfonilo, no seio de um solvente orgânico anidro tal como CHCI3, CH2;C12, THF, dioxano, DMF, DMA, etc., a uma temperatura compreendida entre -20 e 80°C, durante um intervalo de tempo de alguns minutos, tal como 5 minutos a 2 dias. Opcionalmente, encontra-se presente uma base orgânica tal como piridina, trietilamina ou uma base estericamente impedida tal como diisopropiletilamina, ou 2,6-dimetil-piridina, etc.

Os reagentes mais preferidos são agentes de sulfonilação tais como cloreto de p-tolueno-sulfonilo, cloreto de p-fluorobenzeno-sulfonilo ou cloreto de metano-sul foni lo, no seio de um solvente orgânico anidro tal como CHC13, CH2C12, THF, dioxano, DMF, DMA, a uma temperatura compreendida entre -20 e 60°C, durante um intervalo de tempo de alguns minutos, por exemplo 5 minutos até 1 dia. A base orgânica opcional é muito preferivelmente a piridina, a trietilamina ou uma base estericamente impedida tal como a diisopropiletilamina.

Os agentes redutores preferidos para a conversão do composto de fórmula geral (V) nos compostos de fórmulas (VIII) e (I) são : - hidrogénio molecular: - formato de amónio, formato de trietilamónio, ácido fórmico, hidreto de tributil-estanho, ciclo-hexadieno, um polimetil-hidroxi-silano, etc., na presença de um catalisador apropriado tal como paládio, óxido de platina ou platina, como tais ou suportados sobre um meio apropriado

15 A

tal como sobre carvão, sobre CaC03, sobre BaS04, sobre alumina, etc.; ou - formato de amónio, formato de trietilamónio, ácido fórmico, um polimetil-hidroxi-silano ou hidreto de tributil-estanho na presença de um catalisador de fórmula geral (IX) anterior na qual os símbolos M, L,L’,men têm os significados definidos antes. Os significados mais preferidos para os ligandos de fósforo L e/ou L’ são l,3-bis-(di-fenilfosfino)~propano, l,4-bis-(difenilfosfino)-butano, l,l’-bis-(di-fenilfosftno)-ferroceno ou trifenilfosfina.

Os solventes apropriados para as fases de redução são solventes orgânicos tais como DMF, CHCI3, dioxano, THF, DMSO, DMA, ou as suas misturas. De preferência a temperatura encontra-se compreendida entre cerca de 20°C e 120°C. De preferência, o tempo de reacção encontra-se compreendido entre 1 hora e dois dias.

Os agentes redutores mais vantajosos são hidrogénio molecular, formato de trietilamónio, ácido fórmico, hidreto de tributil-estanho. Os solventes mais preferidos para as fases de redução são DMF, dioxano, THF, DMSO, DMA ou as suas misturas.

Os exemplos seguintes ilustram a preparação dos intermediários e dos compostos da presente invenção.

Exemplo 1 9-nitro-10-hidroxi-20(S)-camptotecina (Método A) 16

Adiciona-se gota a gota 50 ml de H202 a 35 % a uma suspensão de 2,8 g de 20(S)-camptotecina em ácido acético. Eleva-se a temperatura da solução para 80°C e mantém-se durante 3 horas e 30 minutos. Após arrefecimento evapora-se o solvente até restar cerca de 20 ml. Despeja-se a mistura em 200 ml de água e gelo. Filtra-se o precipitado, lava-se com água e com éter e seca-se. Cristaliza-se o produto (CHClj/hexano) para se obter 1,9 g de 20(S)-camptotecina 1-óxido.

Dissolve-se 0,65 g de 20(S)-camptotecina 1-óxido em 600 ml de dioxano, adicionam-se 8,8 ml de H2S04 1M e irradia-se a solução durante 50 minutos (lâmpada de Hg de alta pressão com filtro pirex). Evapora-se o solvente e utiliza-se a 10-hidroxi-camptotecina assim obtida para a fase seguinte (nitração) sem qualquer outra purificação.

Dissolve-se a 10-hidroxi-20(S)-camptotecina em 40 ml de HNO3 (30 %); decorrida 1 hora adicionam-se 4 ml de HNO3 (65 %). Deixa-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 18 horas e extrai-se então com CH2C12. Lava-se a fase orgânica com água até à neutralidade, seca-se com Na2S04 e evapora-se para se obter 0,250 g do composto do título. RMN 'H (DMSO-cU), δ ppm : 0,86 (3H, t, J = 7,3 Hz), 1,84 (2H, m), 5,23 (2H, s); 5,40 (2H, s); 6,51 (1H, s); 7,26 (1H, s); 7,6-8,2 (2H, m); 8,42 (1H, s).

Método B

Hidrogena-se uma suspensão de 20(S)-camptotecina (1 g) e Pt02 (0,2 g) previamente reduzido em uma mistura a l : 1 de ácido acético - dioxano (200 ml) à temperatura ambiente e à pressão normal até que a mistura tenha adsorvido 2 equivalentes de H2. Filtra-se a suspensão e evapora-se a solução obtida sob vazio 17 para se obter 0,6 g de uma mistura de derivados tetra-hidro.

Adicionam-se 2,1 g de tetra-acetato de chumbo à mistura do derivado tetra-hidro bruto (0,5 g) em 15 ml de ácido trifluoroacético. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 15 minutos e evapora-se em seguida sob vazio. Utiliza-se a 10-hidroxi-20(S)-camptotecina bruta obtida na fase subsequente sem purificação ulterior.

Dissolve-se a 10-hidroxi-20(S)-camptotecina em 40 ml de HNO3 (30 %); decorrida 1 hora adicionam-se 4 ml de HN03 (65 %). Lava-se a reacção com água até à neutralidade, seca-se com Na2S04 e evapora-se para se obter 0,250 g do composto do título, que era idêntico ao composto obtido com 0 método A.

Exemplo 2 9-mtro-10-(p-fluorobenzeno-sulfoniloxi)-20(S)-camptotecina A uma solução de 0,3 g dc 9-nitro-10-hidroxi-20(S)-camptotecina em 20 ml de CH2C12, adiciona-se 0,17 g de cloreto de p-fluorobenzeno-sulfonilo e 0,12 ml de Et3N. Após 1 hora trata-se a mistura reaccional com HC1 a 10%, lava-se então a fase orgânica com água até à neutralidade e seca-se com Na2S04. Evapora-se o solvente e purifica-se o produto mediante cromatografia de coluna para se obter 0,24 g do composto do título. RMN 'H (DMSO-dé), δ ppm : 0,86 (3H, t, J = 7,3 Hz); 1,85 (2H, m); 5,26 (2H, s); 5,42 (2H, ABq); 7,37 (1H, s); 7,5 - 8,1 (5H, m); 8,53 (1H, d, J = 9,9 Hz); 8,60 (1H, s)

Exemplo 3 9-nitro-10-trifluorometano-sulfoniloxi-20(S)-camptotecina 18

Arrefece-se até à temperatura de 0°C uma solução de 0,2 g de 9-nitro-10--hidroxi-20(S)-camptotecina e 0,08 ml de Et3N em 10 ml de CH2CI2, sob atmosfera de árgon. Adiciona-se gota a gota no decurso de 5 minutos à solução 0,1 ml de anidrido trifluorometano-sulfónico, dissolvido em 1 ml de CH2CI2- Decorrida meia hora processa-se a mistura reaccional tal como no exemplo 2. Obtém-se 0,18 g de 9-nitro-10-(trifluorometano-sulfoniloxi)-20(S)-camptotecina após cromatografia de coluna. RMN Ή (DMSO-dé), δ ppm : 0,86 (3H, t, J - 7,3 Hz); 1,86 (2H, m); 5,31 (2H, s); 5,44 (2H, ABq); 6,58 (1H, s); 7,41 (1H, s); (,2 - 8,7 (2H, m); 8,82 (1H, s).

Exemplo 4 9-nitro-10-(metano-sulfoniloxi)-20( SVcamptotecina

Adiciona-se gota a gota no decurso de 5 minutos 0,07 ml de cloreto de metano-sulfonilo dissolvido em 1 ml de CH2CI2 a uma soiução de 0,3 g de 9-nitro--10-hidroxi-20(S)-camptotecina em 15 ml de CH2CI2 contendo 0,122 ml de Et3N, em atmosfera de árgon, arrefecida à temperatura de 0 - 5°C. Decorrida meia hora processa-se a mistura reaccional tal como no exemplo 2. Obtém-se 0,3 g de 9-nitro--10-(metano-sulfoniloxi)-20(S)-camptotecina após cromatografia de coluna. RMN-‘H (DMSO-dé), δ ppm : 0,86 (3H, t, J - 7,7 Hz); 1,85 (2H, m); 3,70 (3H, s); 5,29 (2H, s); 5,43 (2H, s); 7,39 (1H, s), 8,1 - 8,6 (2H, m); 8,69 (1H, s).

Exemplo 5 9-amino-20(S)-camptotecina A uma solução de 0,1 g de 9-nitro-10-(p-fluorobenzeno-sulfoniloxi)--20(S)-camptotecina em 2 ml de DMF, adiciona-se 0,1 ml de trietilamina, 0,028 ml

19 de ácido fórmico, 0,005 g de l,l’-bis-(difenilfosfino)-feiToceno e 0,002 g de Pd(OAc)2. Aquece-se então a mistura à temperatura de 80°C durante 4 horas. Evapora-se o solvente sob vazio e purifica-se a mistura reaccional bruta mediante cromatografia de coluna. Obtém-se o composto do título sob a forma de um sólido amarelo (0,03 g). RMN-lH (DMSO-dé), δ ppm : 0,87 (3H, t, J = 7,3 Hz); 1,85 (2H, m); 5,26 (2H, s); 5.41 (2H, s); 6,11 (2H, s); 6,50 (1H, s); 6,79 (IH, m); 7,28 (1H, s); 7,3 - 7,5 (2H, m); 8,83 (1H, s).

Exemplo 6 9-amino-20( S )-camptotecina A uma solução/suspensão de 0,1 g de 9-nitro-10-metano-sulfoniloxi--20(S)-camptotecina em 3 ml de dioxano, adiciona-se 0,04 ml de trietilamma, 0,011 ml de ácido fórmico, 0,007 g de l,r-bis-(difenilfosfmo)-ferroceno e 0,003 g de Pd(OAc)2. Trata-se então a mistura à temperatura de 90°C durante l hora. Decorrida 1 hora adiciona-se mais 0,35 ml de uma solução 1,8M de formato de trietilamónio. Decorrida 1 hora evapora-se o solvente sob vazio e purifica-se a mistura reaccional bruta mediante cromatografia de coluna. Obtém-se o composto do título sob a forma de um sólido amarelo. RMN-'H (DMSO-dé), δ ppm : 0,87 (3H, t, J = 7,3 Hz); 1,85 (2H, m); 5,26 (2H, s); 5.41 (2H, s); 6,11 (2H, s); 6,50 (1H, s); 6,79 (1H, m); 7,28 (1H, s); 7,3 - 7,5 (2H, m); 8,83 (1H, s).

Exemplo 7 9-amino-20(S)-camptotecina A uma solução de 0,1 g de 9-nitro-10-trifluorometano-sulfoniloxi-20(S)--camptotecina em 4 ml de dioxano, adiciona-se 0,25 ml de polimetil-hidroxi-silano, 0,004 g de l,r-bis-(difemlfosfino)-ferroceno e 0,002 g de Pd(OAc)2. Aquece-se então a mistura à temperatura de 40°C durante 3 horas. Evapora-se o solvente sob vazio e purifica-se a mistura reaccional bruta mediante cromatografia de coluna. Obté:m-se o composto do título sob a forma de um sólido amarelo (0,036 g). RMN-'H (DMSO-dé), δ ppm : 0,87 (3H, t, J = 7,3 Hz); 1,85 (2H, m); 5,26 (2H, s); 5,41 (2H, s); 6,11 (2H, s); 6,50 (1H, s); 6,79 (1H, m); 7,28 (1H, s); 7,3 - 7,5 (2H, m); 8,83 (1H, s).

Exemplo 8 9-nitro-12-hidroxi-20(SVcamptotecina A uma solução/suspensão agitada de 12-nitro-20(S)-camptotecina (20 g) em HC1 conc. (200 ml), adiciona-se SnCl2 anidro (41,9 g) à temperatura de 0-5°C e agita-se continuamente a mistura resultante à temperatura ambiente durante a noite. Filtra-se o sólido e lava-se com pequenas quantidades de HC1 concentrado. Suspende-se então o sólido amarelo em água e ajusta-se o pH até cerca de 2 com bicarbonato de sódio sólido adicionado gradualmente. Isola-se o sólido mediante filtração, lava-se com água até à neutralidade, em seguida com etanol e com éter dietílico. Após secagem obtêm-se 10,5 g de 12-amino-20(S)-camptotecina.

Adicionam-se 2 g de mtrito de sódio, em 30 ml de água, a uma solução de 12-amino-20(S)-camptotecina (1 g) em H2S04 a 35 % (100 ml) a 0 - 5°C com agitação. Decorridos 10 minutos, adiciona-se 1 g de ureia e agita-se a mistura reaccional durante mais 10 minutos. Despeja-se a mistura gota a gota num balão que 21 contém uma solução aquosa de CuN03 (20 g), e em seguida adicionam-se 3 g de CU2O à solução. Agita-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 30 minutos. Extrai-se então a mistura reaccional com cloreto de metileno. Elimina-se o solvente sob vazio e purifica-se o resíduo mediante cromatografia de coluna, para se obter 0,65 g de 12-hidroxi-camptotecina.

Nitra-se o produto obtido a partir da preparação descrita anteriormente tal como descrito no Exemplo 1, método A e B. Obtém-se 0,5 g do composto do título.

Exemplo 9 9-nntro-12-(p-fluorobenzeno-sulfoniloxi)-20(S)-camptotecma

Realiza-se a reacção tal como descrito anteriormente no exemplo 2, com a excepção de se utilizar 9-nitro-12-hidroxi-20(S)-camptotecina como material inicial, para se obter o composto do título.

Exemplo 10 9-nitro-12-trifluorometano-sulfoniloxi-20(S')-camptotecma

Realiza-se a reacção tal como descrito anteriormente no exemplo 3, com a excepção de se utilizar 9-nitro-12-hidroxi-20(S)-camptotecina como material inicial, para se obter o composto do título.

Exemplo 11 9-nitro-12-(metano-sulfomloxri-20(Sí-camptotecma

Realiza-se a reacção tal como descrito anteriormente no exemplo 4, com a excepção de se utilizar 9-nitro-12-hidroxi-20(S)-camptotecina como material inicial, para se obter o composto do título.

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Exemplo 12 9-amino-20(SVcamptotecina

Realiza-se a reacção tal como descrito anteriormente no exemplo 5, com a excepção de se utilizar 9-nitro-12-(p-fluorobenzeno-sulfoniloxi)-20(S)-camptotecina comio material inicial, para se obter o composto do título, que era idêntico a uma amostra autêntica.

Exemplo 13 9-amino-20( S Vcamptotecina

Realiza-se a reacção tal como descrito anteriormente no exemplo 6, com a excepção de se utilizar 9-nitro-12-metano-sulfoniloxi-20(S)-camptotecina como material inicial, para se obter o composto do título, que era idêntico a uma amostra autêntica.

Exemplo 14 9-amino-20(S Vcamptotecina

Realiza-se a reacção tal como descrito anteriormente no exemplo 7, com a excepção de se utilizar 9-nitro-12-trifluorometano-sulfoniloxi-20(S)-camptotecina como material inicial, para se obter o composto do título, que era idêntico a uma amostra autêntica.

Exemplo 15 9-amino-10-(p-fluorobenzeno-sulfoniloxi)-20(S)-camptotecina

Hidrogena-se 0,25 g de 9-nitro-10-(p-fluorobenzeno-sulfoniloxi)-20(S)--camptotecina dissolvida em 10 ml de dioxano à temperatura ambiente e à pressão atmosférica durante 4 horas na presença de 0,02 g de Pd/C a 10 %. Elimina-se o

23 catalisador mediante filtração e elimina-se o solvente sob vazio. Purifica-se o produto bruto mediante cromatografía para se obter 0,2 g do composto do título. RMN-*H (DMSO-dé), δ ppm . 0,86 (3H, t, J = 7,3 Hz); 1,84 (2H, m); 5,23 (2H, s), 5,40 (2H, s); 6,00 (2H, s); 6,52 (1H, s); 7,28 (1H, s); 7,3 - 7,8 (6H, m); 8,83 (1H, s). Exemplo 16 9-nitro-20( S )-camptotecina A uma solução de 0,1 g de 9-nitro-10-(p-fluorobenzeno-sulfoniloxi)--20(S)-camptotecina em 2 ml de dioxano, adiciona-se 0,1 ml de trietílamina, 0,028 ml de ácido fórmico, 0,0055 g de l,r-bis-(difenilfosfino)-ferroceno e 0,002 g de Pd(OAc)2. Aquece-se então a mistura à temperatura de 80°C durante 30 minutos. Eveipora-se o solvente sob vazio, e purifica-se a mistura reaccional bruta mediante cromatografía de coluna. Obtém-se o composto do título sob a forma de um sólido amarelo. RMN-‘H (DMSO-d*), δ ppm . 0,87 (3H, t, J = 7,3 Hz); 1,86 (2H, m); 5,33 (2H, s); 5,43 (2H, s); 6,56 (1H, s); 7,38 (1H, s); 8,0 - 8,6 (3H, m); 9,15 (1H, s).

Exemplo 17 9-ammo-20(S)-camptotecina

Hidrogena-se uma solução de 0,6 g de 9-nitro-20(S)-camptotecina em 7,5 ml de DMF à temperatura ambiente e à pressão atmosférica na presença de 0,02 g de Pd/C a 10 % durante 4 horas. Elimma-se o catalisador mediante filtração e lava-se repetidamente com DMF quente. Evapora-se a solução sob vazio e purifica-se a mistura reaccional bruta mediante cromatografía de coluna, para se obter o composto do título. 24

Exemplo 18 9-nitro-10-( p-tolueno-sulfoniloxi V20( SV camptotecina

Procedendo conforme descrito no exemplo 2, mas utilizando cloreto de p-tolueno-sulfonilo (0,16 g), obtém-se 0,36 g do composto do título. RMN-'Η (DMSO-dé), 6 ppm : 0,86 (3H, t, J = 7,3 Hz); 1,86 (2H, m); 2,44 (3H, s), 5,26 (2H, s); 5,42 (2H, ABq); 6,56 (1H, s); 7,37 (1H, s); 7,5 - 8,0 (5H, m); 8,51 (1H, d, J = 9,8 Hz); 8,59 (1H, s).

Exemplo 19 9-amino-20(S)-camptotecina

Realiza-se a reacção tal como descrito anteriormente no exemplo 5, com a excepção de se utilizar 9-nitro- 10-(p-tolueno-sulfoniloxi)-20(S)-camptotecina como material inicial para se obter o composto do título, que era idêntico à amostra obtida no exemplo 5.

Exemplo 20 9-ni tro-20( S )-camptotecina

Realiza-se a reacção tal como descrito anteriormente no exemplo 16, com a excepção de se utilizar 9-nitro-10-(p-tolueno-sulfoniloxi)-20(S)-camptotecina como material inicial para se obter o composto do título, que era idêntico à amostra obtida no exemplo 16.

Exemplo 21 9-am.ino-10-(p-tolueno-sulfoniloxi)-20(S)-camptotecina

Hidrogena-se uma solução de 0,1 g de 9-nitro-10-(p-tolueno-sulfoniloxi)--20(S)-camptotecina em 5 ml de DMF à temperatura ambiente e à pressão 25 atmosférica na presença de 0,025 g de Pt02 previamente reduzido durante 24 horas. Elimina-se o catalisador mediante filtração e concentra-se a solução sob vazio. Purifica-se a mistura reaccional bruta mediante cromatografia de coluna para se obter 0,05 g do composto do título. RMN 'H (DMSO-de), 6 ppm : 0,87 (3H, t, J = 7,3 Hz); 1,84 (2H, m); 2,37 (3H, s); 5,23 (2H, s); 5,40 (2H, s); 5,98 (2H, s); 6,50 (1H, s); 7,2 - 7,5 (5H, m); 7,83 (2H, m); 8,85 (1H, s).

Lisboa, 3 de Março de 2000

Claims

1 REIVINDICAÇÕES 1. Processo para a preparação de 9-amino-camptotecina de fórmula (I):

o qual compreende : (1) a reacção de um composto de fórmula (III)

sendo o processo caracterizado por (2) se converter o composto de fórmula (IV) num composto correspondente de fórmula geral (V) 2 NO. I

na qual o símbolo X representa um grupo de fórmula geral R-SOr de tal modo que o grupo de fórmula geral XO pode ser eliminado em condições redutoras; em que o símbolo R representa: (i) um anel fenilo ou naftilo o qual é insubstituído ou é substituído por um ou mais substituintes, por exemplo 1, 2 ou 3 substituintes, escolhidos de entre grupos alquilo CrC5 de cadeia linear ou ramificada, grupos alcoxi C1-C5 de cadeia linear ou ramificada, átomos de halogéneo ou grupos hidroxi, amino e nitro; ou (ii) um grupo alquilo C1-C9 de cadeia linear ou ramificada o qual é insubstituído ou é substituído por um ou mais, por exemplo 1, 2 ou 3 átomos de halogéneo; e (3) se eliminar em condições redutoras o referido grupo de fórmula geral XO e se reduzir o grupo nitro do composto de fórmula geral (V), de modo a obter-se a 9-amino-camptotecina de fórmula (I).

2. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se realizar a fase (2) mediante reacção do composto de fórmula (IV) com um agente de sulfonilação de fórmula geral (VI) : (VI) X-R”

3 na qual o símbolo X tem os significados definidos na reivindicação 1; e o símbolo R” representa um átomo de halogéneo, um grupo imidazolilo, um grupo de fórmula geral -OS02R ou -NH(C6H5)(RS02) em que o símbolo R tem os significados definidos na reivindicação 1 ou um outro grupo susceptível de reagir com um fenol para se obter um sulfonato.

3. Processo de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo facto de se reduzir o composto de fórmula geral (V) numa fase única na fase (3) no composto de fórmula (I), na presença de hidrogénio molecular, formato de amónio, formato de trietilamónio, ácido fórmico, hidreto de tributil-estanho, ciclo-hexadieno ou polimetil-hidroxi-silano.

4. Processo de acordo com a reivindicação 1 ou 2 em que se efectua a fase (3) mediante redução do composto de fórmula geral (V) para se obter um composto correspondente de fórmula (VIII) NO.

e de se reduzir o composto de fórmula (VIII) para se obter o composto de fórmula (I), caracterizado pelo facto de se realizar cada redução na presença de hidrogénio molecular, formato de amónio, formato de trietilamónio, ácido fórmico, hidreto de tributil-estanho, ciclo-hexadieno ou polimetil-hidroxi-silano. 4

5. Processo para a preparação de um composto de fórmula (I), de acordo com a reivindicação 1, processo esse que compreende a eliminação em condições redutoras do referido grupo de fórmula geral XO e a redução do grupo nitro de um composto de fórmula geral (V)

(V) na qual o símbolo X tem os significados definidos na reivindicação 1.

6. Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo facto de se reduzir o composto de fórmula geral (V) numa fase única no composto de fórmula (I) na presença de hidrogénio molecular, formato de amónio, formato de trietilarnónio, ácido fórmico, hidreto de tributil-estanho, ciclo-hexadieno ou polimetil-hidroxi-silano.

7. Processo de acordo com a reivindicação 5, em que se reduz o composto de fórmula geral (V) em condições tais que se obtém um composto correspondente de fórmula (VIII) tal como definido na reivindicação 4 e se reduz o composto de fórmula (VIII) no composto de fórmula (I), caracterizado pelo facto de se realizar cada redução na presença de hidrogénio molecular, formato de amónio, formato de trietilarnónio, ácido fórmico, hidreto de tributil-estanho, ciclo-hexadieno ou polimetil-hidroxi-silano.

8. Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 5 a 7, 5 caracterizado pelo facto de se preparar o composto de fórmula geral (V) mediante conversão de um composto de fórmula (IV) tal como definido na reivindicação (I).

9. Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo facto de se preparar o composto de fórmula (IV) mediante reacção de um composto de fórmula (ΠΙ) tal como definido na reivindicação (I) com um agente de nitração. Lisboa, 3 de Março de 2000 ( o Aosnte Oficial da Propriedade Industriai