JP2005036003A - ９−アミノカンプトテシン誘導体 - Google Patents

Abstract

【課題】癌、特に白血病並びに結腸及び直腸の腫瘍の治療に有用な薬剤を提供する。
【解決手段】１０−又は１２−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンを出発材料として、式１の９−アミノカンプトテシン化合物を製造する新規の方法である。

即ち、１０位又は１２位にあるヒドロキシ基をニトロ基に変換し、更に、パラジウム、酸化白金等の触媒の存在下で、ギ酸アンモニウム等の還元剤で還元を行なって、式１を得る。
【選択図】なし

Description

本発明は、公知の抗腫瘍剤である下記の式（Ｉ）

で示される９−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシン（Ｗａｎｉら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８７，３０，１７７４−１７７９；Ｈｓｉａｎｇら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４９，４３８５−４３８９，１９８９年８月１５日；Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４９，１４６５−１４６９，１９８９年３月１５日）の新規の製造方法及びその誘導体に関する。

９−アミノカンプトテシンの全合成法は広く記述されている（ＵＳ−Ａ−４，８９４，４５６号及びＵＳ−Ａ−５，０５３，５１２号）。しかしながら該生成物の全合成は、大規模製造には適さないしまた望ましくもない。なぜなら、工程が多すぎて合成時間が過度に長くなり、特にコストも高くなりすぎるからである。

例えば１９８４年に公開されたＪＰ−Ａ−５９−５１２８８号及びＪＰ−Ａ−５９−５１２８９号には、公知の天然物であるカンプトテシン（Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ Ｒｅｐｏｒｔｓ，ｐａｒｔ Ｉ，ｖｏｌ．５４，Ｎｏ．６，１９７０年１２月；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９８０，２３，５５４−５６０；Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｖｏｌ．２４６，１９８９年１２月，１０４６−１０４８）を出発材料とする９−アミノカンプトテシンの半合成法が開示されている。天然の２０（Ｓ）−カンプトテシンは下記の式（ＩＩ）

で示される。

前記半合成法は、天然のカンプトテシンをニトロ化し、次いで９−ニトロ誘導体を還元する操作を含む。しかしながら、前記ニトロ化では最初に、望ましくない１２−ニトロカンプトテシン誘導体（７０％）と所望の９−ニトロカンプトテシン誘導体（３０％）との７０／３０混合物が生成される。従って、９−ニトロ誘導体は少量しか形成されない。

前記２種類のニトロ化生成物の分離後、それ自体は生物学的に不活性である１２−ニトロ誘導体（例えばＷａｎｉ Ｃ．，Ｎｉｃｈｏｌａｓ Ａ．Ｗ．，Ｗａｌｌ Ｍ．Ｅ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９８６，２９，２３５８参照）を廃棄しなければならないため、廃棄物処理の問題が生じる。望ましくない１２−ニトロ誘導体副産物の除去に関する大きな欠点は、大規模製造の場合には特に問題となる。なぜなら、大量の無用な１２−ニトロ誘導体を回収し廃棄しなければならないからである。

また、この半合成法は、所望の抗腫瘍剤９−アミノカンプトテシンを少量製造するのに極めて高価な天然カンプトテシンを大量に必要とする。この方法は総生産性及び収率が低いため、所望の化合物を実質的な量で製造することが難しい。そのため、前述の半合成的９−アミノカンプトテシン製造方法より高い生産性及び収率が可能な方法が必要とされている。

本発明では、下記の反応式Ｉに示すステップに従い、式（ＩＩＩ）の１０−又は１２−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンを出発材料として、式（Ｉ）の９−アミノカンプトテシンを製造する新規の方法を提供する：

前記式中、ＸＯは還元的に除去できる基を表す。還元的除去とは、ＸＯ基を均一系又は不均一系触媒での還元によって除去し得ることを意味する。ＸＯ基はこのようにして水素原子で置換される。

この方法では、９−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシンが高収率及び高生産性で合成される。この方法の特徴は、高収率と非汚染性反応生成物とをもたらす簡単で穏やかな反応条件にある。特に最終ステップでは、ベンジル性酸素（ｂｅｎｚｙｌｉｃ ｏｘｙｇｅｎ）及びラクトン部分（これらは生物学的活性にとって必須）が、ＯＸ基の還元的除去後も完全に残る。また、ニトロ化反応が、ヒドロキシ部分の存在のために、高い位置選択性（ｒｅｇｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ）をもって、通常のニトロ化反応条件よりはるかに安全でもある簡単で穏やかな条件下で生起する。この方法全体を通して、正確な２０（Ｓ）立体配置（ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ）が保持される。

本発明は、下記の式（Ｉ）

で示される９−アミノカンプトテシンの製造方法を提供する。該方法は、
（１） 下記の式（ＩＩＩ）

［式中、環Ａ上のヒドロキシ基は１０位又は１２位にある］で示される化合物をニトロ化剤と反応させて、下記の式（ＩＶ）

で示される対応する化合物を製造し、
（２） 式（ＩＶ）の化合物を、下記の式（Ｖ）

［式中、ＸＯは還元的に除去できる基である］で示される対応する化合物に変換し、
（３） 前記ＸＯ基を還元的に除去し且つ式（Ｖ）の化合物のニトロ基を還元して、式（Ｉ）の９−アミノカンプトテシンを得ることからなる。

この方法は以前に使用されたことはなく、特に脱酸素反応とニトロ基還元とを同時に行う二重還元ステップは公知ではない。Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３４，９８，１９９１には、カンプトテシンの１０−トリフレート−９−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチル誘導体をテトラキストリフェニルホスフィン Ｐｄ（Ｏ）の存在下で脱酸素反応にかける方法が記述されている。しかしながら、該反応は収率が極めて低い（２０％）。また、このトリフレートの製造は選択性及び安定性に大きな問題を有し得、そのため該トリフレートの有用性が大幅に制限される（例えばＳｕｂｒａｍａｎｉａｎ，Ｌ．Ｒ．ら，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ２９３，１９７３）。

テトラキストリフェニルホスフィン Ｐｄ（Ｏ）の存在下での還元的脱酸素反応は有機化学ではよく知られているが（例えばＣａｃｃｈｉ，Ｓ．ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ２７，５５４１，１９８６参照）、本出願人は、別のより適当なスルホネートがこれらの条件下で反応しないことを明らかにした（例えばＣａｂｒｉ，Ｗ．ら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５５，３５０，１９９０参照）。種々のホスフィン又はスルホネートの使用はカンプトテシンに関しては報告されたことがなく、これらの物質の有用性を既存の文献に基づいて予知することは不可能であった。また、スルホネートエステルに対してｏ位又はｐ位にあるニトロ基の存在が、Ｈｅｃｋ型反応で収率を通常より低くし得ることは周知である（例えば、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５７，１４８１，１９９２及びＥｃｈａｖａｒｒｅｎ，Ａ．Ｍ．；Ｓｔｉｌｌｅ，Ｊ．Ｋ．；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１０９，５４７８，１９８７参照）。

驚くべきことに、本発明の方法の脱酸素的還元は、以前に開示されたことのない、反応性のより低いスルホネートを用いて、より穏やかな条件下で生起し得、ニトロ基の存在にも拘わらず所望の生成物を高収率で生成する。驚いたことに、ニトロ基自体が反応媒質中で還元作用を受け得る。所望の９−アミノ誘導体を、別の反応を必要とせずに、単一ステップで生成することができるのである。ニトロ基のこのような随伴性還元はこれまで知られておらず、既存の文献に基づいて予知することも不可能であった（例えばＣａｃｃｈｉ，Ｓ．ら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ２７，５５４１，１９８６参照）。

本発明の方法の出発化合物は式（ＩＩＩ）の化合物である。該化合物は、本発明の方法全体を通して保持される２０（Ｓ）立体配置を有する。式（ＩＩＩ）の化合物は通常、対応する２０（Ｒ）異性体を含まない。しかしながら、本発明は、式（ＩＩＩ）の化合物と対応する２０（Ｒ）異性体とのラセミ混合物に適用し得る。その場合は、式（Ｉ）の９−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシンと９−アミノ−２０（Ｒ）−カンプトテシンとのラセミ混合物が得られる。式（ＩＩＩ）の化合物は、公知の方法で、２０（Ｓ）−カンプトテシンから製造し得る（例えば、ＪＰ−Ａ−５９−５１２８８号；ＪＰ−Ａ−５９−５１２９９号；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３４，９８，１９９１；及びＣｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９１．３９，３１８３，１９９１参照）。

１２−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンはまた、公知の１２−ニトロ−２０（Ｓ）−カンプトテシンから製造できる。まず、１２−ニトロ−２０（Ｓ）−カンプトテシンを１２−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシンに還元する。この還元は、例えば適当な還元剤を用いて実施し得、又は適当な還元剤の存在下で適当な触媒での接触還元によって実施し得る。例えば、Ｊ．Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，第３版，１１０３に記載のように実施し得る。

例えば、前記還元は、ＳｎＣｌ_２のような還元剤、又は他の金属もしくは金属塩、例えばＺｎもしくはＦｅ及びその塩を用いて、適当な溶媒、例えば希塩酸、希プロトン酸、水、エタノール、メタノール又はこれらの混合物中で、−２０℃〜６０℃の温度で、５分〜３日間のように数分〜数日、例えば４時間〜２４時間にわたって実施し得る。

あるいは、前記還元は、ニトロ基還元を実施する金属、例えばパラジウム、酸化白金、白金、ロジウム又はルテニウムを触媒量用いて、分子状水素又は水素源、例えばギ酸トリエチルアンモニウム、ギ酸、水素化トリブチルスズ、シクロヘキサジエン等の存在下で、適当な溶媒、例えばジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ＭｅＯＨ、酢酸、ＣＨＣｌ_３、ジオキサン又はこれらの混合物の中で、約０℃〜１００℃の温度で、１時間〜３日間にわたり、１ａｔｍ〜１００ａｔｍの圧力下で実施し得る。

１２−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシンは、適当な試薬、例えば酸化銅（Ｉ）を用いて、反応混合物から分離する必要のないジアゾ誘導体の生成を介して、１２−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンに変換し得る。

ジアゾ化反応は、プロトン酸希釈水溶液、例えばＨＣｌもしくはＨ_２ＳＯ_４の希釈水溶液中、又は有機溶媒中で、適当なジアゾ化剤、例えばＮａＮＯ_２、有機亜硝酸塩を用いて、−２０℃〜１００℃の温度で、数分〜数時間、例えば５分〜２４時間にわたり実施し得る。得られた溶液は次いで、任意に硝酸銅（Ｉ）水溶液の存在下で、０℃〜１００℃の温度で、数分〜１日、例えば５分〜１日にわたり、化学量論的量から大幅に過剰な量、例えば１０倍モル過剰量の酸化銅（Ｉ）と反応させ得る。

式（ＩＩＩ）の化合物は、式（ＩＶ）の化合物を得るために、適当な一般的ニトロ化剤と反応させ得る。式（ＩＩＩ）の化合物のニトロ化は、ニトロ化剤、例えば硝酸、硝酸と硫酸との混合物、又は他のニトロ化剤、例えば硝酸カリウムもしくは硝酸と三フッ化ホウ素（例えば三フッ化ホウ素一水和物）との混合物（例えばＯｌａｈ，Ｇ．Ａ．ら、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １０８５，１９９２参照）、又は硝酸／無水トリフルオロメタンスルホン酸混合物（前出文献，１０８７，１９９２）を用いて、−２０℃〜１００℃の温度で、５分〜３日のように数分〜数日間、例えば４時間〜２４時間にわたり実施し得る。

次いで、式（ＩＶ）の化合物を式（Ｖ）で示される対応する化合物に変換する。この操作は、式（ＩＶ）の化合物を、下記の式（ＶＩ）
Ｘ−Ｒ” （ＶＩ）
［式中、Ｘは基Ｒ−ＳＯ_２−であって、Ｒが（ｉ）未置換の、あるいはＣ_１〜Ｃ_５直鎖もしくは分枝鎖アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_５直鎖もしくは分枝鎖アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ及びニトロの中から選択した１個以上の置換基、例えば１、２もしくは３個の置換基で置換したフェニルもしくはナフチル環を表すか、又は（ｉｉ）未置換の、あるいは１個以上、例えば１、２もしくは３個のハロゲン原子で置換した直鎖もしくは分枝鎖Ｃ_１〜Ｃ_９アルキル基を表し、Ｒ”はハロゲン原子、イミダゾリル基、−ＯＳＯ_２Ｒ又は−Ｎ（Ｃ_６Ｈ_５）（ＲＳＯ_２）基であって、Ｒが前述の意味を表すか、又はフェノールと反応してスルホネートを生成できる別の基を表す］
で示されるスルホニル化剤と反応させることにより実施し得る。

Ｃ_１〜Ｃ_９アルキル基は好ましくは、Ｃ_１〜Ｃ_５アルキル基、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル又はイソ−プロピルであり得る。Ｃ_１〜Ｃ_５アルコキシ基はＣ_１〜Ｃ_４アルコキシ基、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ又はイソ−プロポキシであってよい。

ハロゲン原子は、フルオロ、クロロ又はブロモであってよい。１個以上のハロゲン原子で置換したＣ_１〜Ｃ_５アルキル基は、Ｃ_１〜Ｃ_５ペルクロロアルキル又はペルフルオロアルキル基のようなＣ_１〜Ｃ_５ペルハロアルキル基、例えばトリフルオロメチルであってよい。基Ｘが本発明の化合物中に存在する時に表し得る好ましい意味は、Ｒが（ｉ）未置換の、あるいはＣ_１〜Ｃ_５直鎖もしくは分枝鎖アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_５直鎖もしくは分枝鎖アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ及びニトロの中から選択した１個の置換基で置換したフェニルもしくはナフチル環を表すか、又は（ｉｉ）未置換の、あるいは１個以上、例えば１、２もしくは３個のハロゲン原子、好ましくはフッ素もしくは塩素で置換した直鎖Ｃ_１〜Ｃ_５アルキル基を表す前記式Ｒ−ＳＯ_２−で示される任意に置換したスルホネートエステルの中から選択される。より好ましくは、基Ｘは、Ｒが（ｉ）未置換の、あるいはＣ_１〜Ｃ_５直鎖アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_５直鎖アルコキシ、フッ素もしくは塩素の中から選択した１個の置換基で置換したフェニルもしくはナフチル環を表すか、又は（ｉｉ）未置換の、あるいは１個、好ましくは１個以上、例えば２もしくは３個のフッ素原子で置換した直鎖Ｃ_１〜Ｃ_５アルキル基を表すＲ−ＳＯ_２−である。

本発明の化合物中で基Ｘが表し得る特に好ましい意味は、ｐ−メトキシベンゼンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニル、ｐ−フルオロベンゼンスルホニル、メタンスルホニル、トリフルオロメタンスルホニル、ベンゼンスルホニル、ｐ−ニトロベンゼンスルホニル及び１−もしくは２−ナフタレンスルホニルの中から選択される。

式（ＶＩ）の化合物の好ましい意味としては、ｐ−メトキシベンゼンスルホニルクロリド、ｐ−トルエンスルホニルクロリド、ｐ−フルオロベンゼンスルホニルクロリド、メタンスルホニルクロリド、無水トリフルオロメタンスルホン酸、ベンゼンスルホニルクロリド、ｐ−ニトロベンゼンスルホニルクロリド、Ｎ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド又は１−もしくは２−ナフタレンスルホニルクロリドが挙げられる。

式（Ｖ）の化合物を得るための式（ＩＶ）の化合物と式（ＶＩ）の化合物との反応は、−５０〜１００℃、例えば０〜５０℃の温度で実施し得る。反応は５分〜３日間、例えば４時間〜２４時間にわたって生起させ得る。該反応は通常、無水有機溶媒、例えばＣＨＣｌ_３、ＣＨ_２Ｃｌ_２、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジオキサン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）等の中で生起する。任意に、有機塩基、例えばピリジン、トリエチルアミン、又は立体障害をもつ塩基、例えばジイソプロピルアミン、２，６−ジメチルピリジン等を存在させてもよい。

ＸＯ官能基の還元的除去及びニトロ基の還元は、式（Ｖ）の化合物を式（Ｉ）の化合物に変換させる。これは、適当な触媒の存在下で適当な還元剤を用いて達成し得る。アミノ基を形成するためのＸＯ基の除去及びニトロ基の還元は、単一ステップ又は二つのステップで実施し得る。後者の場合は、ＸＯ基の除去及びニトロ基の還元を任意の順序で実施し得る。

従って還元は、二つのステップで、まずＸが基Ｒ−ＳＯ_２−でありＲが前述の意味を表す式（Ｖ）の化合物中のニトロ官能基を適当な還元剤で還元することにより実施し得る。

その結果、下記の式（ＶＩＩ）

［式中、Ｘは前述の意味を表す］
で示される化合物が得られる。次いで、例えば適当な還元剤での式（ＶＩＩ）の化合物の脱酸素的還元を別個に実施して、所望の９−アミノ誘導体（Ｉ）を製造し得る。

所望であれば、二つのステップでの還元を、まず式（Ｖ）の化合物を脱酸素反応にかけて下記の式（ＶＩＩＩ）

の化合物を生成することにより実施してもよい。

次いで式（ＶＩＩＩ）の化合物を、例えば適当な還元剤で還元して、所望の式（Ｉ）化合物を生成し得る。

適当な還元剤としては、そのままの状態又は適当な媒体上に担持された状態、例えば炭素上、ＣａＣＯ_３上、ＢａＳＯ_４上、アルミナ上等に担持された状態の適当な触媒、例えばパラジウム、酸化白金、白金、ロジウム又はルテニウムの存在下の分子状水素、ギ酸アンモニウム、ギ酸トリエチルアンモニウム、ギ酸、水素化トリブチルスズ、シクロヘキサジエン、ポリメチルヒドロキシシラン等が挙げられる。あるいは、均一条件下で還元を実施してもよい。その場合は還元を、下記の一般式（ＩＸ）
ＭＬ_ｎＬ’_ｍ （ＩＸ）
で示される化合物の存在下で、ギ酸アンモニウム、ギ酸トリエチルアンモニウム、ギ酸、水素化トリブチルスズ、シクロヘキサジエン又はポリメチルヒドロキシシランのような還元剤によって実施する。前記式中、Ｍは遷移金属原子を表し、Ｌ及びＬ’は互いに同じか又は異なっていてよく、Ｃｌ^−１もしくはＣＨ_３ＣＯＯ⁻のような陰イオンか、又は溶媒分子、モノホスフィン、ジホスフィン、亜リン酸塩（ｐｈｏｓｐｈｉｔｅ）もしくはジアミンのような中性分子であり得、ｎ及びｍは０〜４であり得る。通常はｍ＋ｎが１以上、例えば１、２、３又は４である。

Ｍが表し得る好ましい遷移金属原子は、パラジウム、ニッケル及び白金である。Ｌ及び／又はＬ’が表し得る好ましい基は、キレートジホスフィン、例えばビス（ジフェニルホスフィノ）メタン、１，２−及び１，３−ビス（ジフェニル−ホスフィノ）プロパン、１，４−ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタン、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン又はトリフェニルホスフィンである。遷移金属原子：キレートジホスフィンのモル比は通常１：１〜１：４である。還元に使用する適当な溶媒は有機溶媒、例えばＤＭＦ、ＭｅＯＨ、酢酸、ＣＨＣｌ_３、ジオキサン、ＴＨＦ又はこれらの混合物であり、約０℃〜２００℃の温度で、１時間〜３日間、例えば４時間〜２４時間にわたり操作を行う。

還元を二つの別個のステップで実施する場合は、最初のステップを数分〜数時間の短時間、例えば５分〜１２時間にわたって実施し得る。所望であれば中間誘導体を分離する。次いで第２の還元ステップを数分〜数時間、例えば５分〜１２時間実施する。両方のステップの適当な溶媒は、ベンゼン、トルエン、ＣＨＣｌ_３、アセトニトリル、ＤＭＦ、ジオキサン又はこれらの混合物である。適当な温度は室温〜溶媒還流温度である。

式（ＩＩＩ）の化合物を式（ＩＶ）の化合物に変換するための好ましい試薬は、硝酸、硝酸と硫酸の混合物、又は硝酸カリウムもしくは硝酸と三フッ化ホウ素一水和物との混合物、又は硝酸／無水トリフルオロメタンスルホン酸混合物であり、−２０℃〜６０℃の温度で、数分〜数時間、例えば５分〜１２時間にわたって操作を行う。

式（ＩＶ）の化合物を式（Ｖ）の化合物に変換するための好ましい試薬は、スルホニル化剤、例えばｐ−トルエンスルホニルクロリド、ｐ−フルオロベンゼンスルホニルクロリド、メタンスルホニルクロリド、無水トリフルオロメタンスルホン酸、ベンゼンスルホニルクロリド、ｐ−ニトロベンゼンスルホニルクロリド、Ｎ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド又は１−もしくは２−ナフタレンスルホニルクロリドであり、無水有機溶媒、例えばＣＨＣｌ_３、ＣＨ_２Ｃｌ_２、ＴＨＦ、ジオキサン、ＤＭＦ、ＤＭＡ等の中で、−２０〜８０℃の温度で、数分、例えば５分から２日間にわたって操作を行う。任意に、ピリジン、トリエチルアミン、又は立体障害をもつ塩基、例えばジイソプロピルエチルアミンもしくは２，６−ジメチル−ピリジンのような有機塩基を存在させる。

最も好ましい試薬は、ｐ−トルエンスルホニルクロリド、ｐ−フルオロベンゼンスルホニルクロリド又はメタンスルホニルクロリドのようなスルホニル化剤であり、ＣＨＣｌ_３、ＣＨ_２Ｃｌ_２、ＴＨＦ、ジオキサン、ＤＭＦ又はＤＭＡのような無水有機溶媒中で、−２０〜６０℃の温度で、数分例えば５分から１日にわたって操作を行う。任意的な有機塩基は、ピリジン、トリエチルアミン、又はジイソプロピルエチルアミンのような立体障害をもつ塩基が最も好ましい。

式（Ｖ）の化合物を式（ＶＩＩ）、式（ＶＩＩＩ）及び式（Ｉ）の化合物に変換するための好ましい還元剤は、
− 分子状水素、
− そのままの状態もしくは適当な媒体上に担持された状態、例えば炭素上、ＣａＣＯ_３上、ＢａＳＯ_４上、アルミナ上等に担持された状態の適当な触媒、例えばパラジウム、酸化白金もしくは白金の存在下の、ギ酸アンモニウム、ギ酸トリエチルアンモニウム、ギ酸、水素化トリブチルスズ、シクロヘキサジエン、ポリメチルヒドロキシシラン等、又は
− 前記一般式（ＩＸ）［式中Ｍ、Ｌ、Ｌ’、ｍ及びｎは前述の意味を表す］で示される触媒の存在下の、ギ酸アンモニウム、ギ酸トリエチルアンモニウム、ギ酸、ポリメチルヒドロキシシランもしくは水素化トリブチルスズである。リンリガンドＬ及び／又はＬ’の最も好ましい意味は、１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパン、１，４−ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタン、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン又はトリフェニルホスフィンである。

還元ステップの適当な溶媒は有機溶媒、例えばＤＭＦ、ＣＨＣｌ_３、ジオキサン、ＴＨＦ、ＤＭＳＯ、ＤＭＡ又はこれらの混合物である。好ましい温度は約２０℃〜１２０℃である。反応時間は１時間〜２日が好ましい。

最も好ましい還元剤は、分子状水素、ギ酸トリエチルアンモニウム、ギ酸及び水素化トリブチルスズである。還元ステップの最も好ましい溶媒は、ＤＭＦ、ジオキサン、ＴＨＦ、ＤＭＳＯ、ＤＭＡ又はこれらの混合物である。

式（Ｉ）の９−アミノカンプトテシンは有用なトポイソメラーゼＩ阻害物質である。該物質は、癌、特に白血病並びに結腸及び直腸の腫瘍の治療に有用である。従って該化合物は、前述のような癌にかかった患者の症状を改善するために使用し得る。該化合物はこの種の癌の症状を緩和するために使用できる。

従って、前述のような治療を必要とする患者、典型的にはヒトに、有効量の９−アミノカンプトテシンを投与し得る。該活性化合物は任意の適当な経路、例えば経口投与又は静脈内のような非経口投与によって投与し得る。ヒト患者には前述の経路によって、体重１ｋｇ当たり０．１〜６０ｍｇの活性化合物を投与し得る。好ましい用量範囲は１〜４０ｍｇ／ｋｇ体重である。

式（Ｉ）の９−アミノカンプトテシンは、投与のために、医薬的に許容し得る担体又は希釈剤と共に医薬組成物に配合し得る。投与経路に応じて、任意の適当な担体又は希釈剤を使用し得る。適当な種類の処方物は、ＵＳ−Ａ−５１０６７４２号及びＷＯ ９１／０５５５６号に記述されている。

本発明はその範囲内に、Ｘが前述の意味を表す前記式（Ｖ）及び（ＶＩＩ）の化合物及びその医薬的に許容し得る塩も包含する。

式（Ｖ）及び（ＶＩＩ）の化合物は抗腫瘍活性を有する。例えば、これらの化合物は白血病及び固形腫瘍、例えば結腸及び直腸の腫瘍に対して効果がある。

本発明の化合物の抗腫瘍活性は、例えば、漸増濃度の各分子で４８４回連続して処理した後Ｌ１２１０マウス白血病細胞についてｉｎ ｖｉｔｒｏ検査を行った時に、これらの化合物が細胞毒性活性（細胞増殖を５０％抑制する濃度、ＩＣ_５０として表す）を有することが判明したという事実によって証明される。ＩＣ_５０は各分子毎に、Ｃｏｕｌｔｅｒ計数器で細胞総数を計数して用量応答曲線から算出した。

例えば、本発明の化合物９−アミノ−１０−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシン（内部コードＦＣＥ２８９４８）及び９−ニトロ−１０−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシン（内部コードＦＣＥ２８８９９）について得られたＩＣ_５０値は、それぞれ１０．６及び４３．０ｎｇ／ｍｌであった。

ヒト及び動物の身体は、医薬的に有効な量の式（Ｖ）もしくは（ＶＩＩ）の化合物又はその塩を投与することからなる方法によって治療し得る。その結果、ヒト又は動物の症状が改善され得る。

本発明の化合物は種々の投与形態で投与し得、例えば、錠剤、カプセル、薬用ドロップ、溶液又は懸濁液の形態で経口投与するか、座薬の形態で直腸投与するか、例えば筋内注射、静脈内注射、皮内注射もしくは皮下注射のように非経口的に投与し得る。

用量は患者の年齢、体重及び症状と、投与経路とに応じて決定する。例えば、ヒト成人に投与する場合の適当な用量は約０．１〜６０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であり得、特に好ましい範囲は約１〜約４０ｍｇ／ｋｇ体重であり得る。

本発明の医薬組成物は、活性物質としての式（Ｖ）又は（ＶＩＩ）の化合物を、１種類以上の医薬的に許容し得る賦形剤と組み合わせて含む。

本発明の医薬組成物は通常一般的な方法で調製され、医薬的に適当な形態で投与される。例えば、静脈注射又は点滴用の溶液は、担体として例えば無菌水を含み得、又は好ましくは無菌等張食塩水の形態を有し得る。筋内注射用の懸濁液又は溶液は、活性化合物と共に、医薬的に許容し得る担体、例えば無菌水、オリーブ油、オレイン酸エチル、グリコール、例えばプロピレングリコールを含み得、所望であれば適量の塩酸リドカインも含み得る。固体経口投与形態、例えば錠剤及びカプセルは、活性化合物と共に、希釈剤、例えばラクトース、デキストロース、サッカロース、セルロース、コーンスターチ及びジャガイモ澱粉；滑沢剤、例えばシリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムもしくはカルシウム、及び／又はポリエチレングリコール；結合剤、例えば澱粉、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン；分解剤（ｄｉｓａｇｇｒｅｇａｔｉｎｇ ａｇｅｎｔ）、例えば澱粉、アルギン酸、アルギネート、ナトリウム澱粉グリコレート；発泡性混合物；染料；甘味料；湿潤剤、例えばレシチン、ポリソルベート、ラウリルスルフェート、並びに、一般的には、医薬配合物で使用される非毒性且つ薬理学的不活性の物質を含み得る。前記医薬製剤は、公知の方法、例えば混合、造粒、錠剤形成、糖衣又はフィルムコーティングプロセスによって製造し得る。

以下の実施例は本発明の中間体及び化合物の製造を明らかにするものであり、本発明の範囲を限定するものではない。

９−ニトロ−１０−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
（方法Ａ）
５０ｍｌの３５％Ｈ_２Ｏ_２を、酢酸中２．８ｇの２０（Ｓ）−カンプトテシンの懸濁液中に滴下した。該溶液の温度を８０℃に上げ、３．５時間維持した。冷却後、溶媒を残量約２０ｍｌまで蒸発させた。該混合物を２００ｍｌの水及び氷中に注いだ。沈殿物を濾過し、水及びエーテルで洗浄し、乾燥した。生成物を結晶化（ＣＨＣｌ_３／ヘキサン）して、１．９ｇの２０（Ｓ）−カンプトテシン １−オキシドを得た。

０．６５ｇの２０（Ｓ）−カンプトテシン １−オキシドを６００ｍｌのジオキサンに溶解し、８．８ｍｌの１Ｍ Ｈ_２ＳＯ_４を加え、該溶液を５０分間照射した（パイレックスフィルター付き高圧Ｈｇ灯）。溶媒を蒸発させ、得られた１０−ヒドロキシカンプトテシンをそれ以上精製せずに次のステップ（ニトロ化）に使用した。

１０−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンを４０ｍｌのＨＮＯ_３（３０％）に溶解した。１時間後、４ｍｌのＨＮＯ_３（６５％）を加えた。該反応混合物を室温で１８時間放置し、次いでＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機相を中性になるまで水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、蒸発させると、表題の生成物が０．２５０ｇ得られた。

方法Ｂ
酢酸−ジオキサンの１：１混合物（２００ｍｌ）中の２０（Ｓ）−カンプトテシン（１ｇ）及び予還元されたＰｔＯ_２（０．２ｇ）の懸濁液を、混合物が２当量のＨ_２を吸収するまで室温、圧力下で水素化した。該懸濁液を濾過し、得られた溶液を真空下で蒸発させて０．６ｇのテトラヒドロ誘導体混合物を得た。

トリフルオロ酢酸（１５ｍｌ）中の未精製テトラヒドロ誘導体混合物（０．５ｇ）に四酢酸鉛（２．１ｇ）を加えた。該混合物を室温で１５分間撹拌し、次いで真空下で蒸発させた。得られた粗生成物１０−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンをそれ以上精製せずに次のステップに使用した。

１０−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンを４０ｍｌのＨＮＯ_３（３０％）に溶解した。１時間後、４ｍｌのＨＮＯ_３（６５％）を加えた。該反応物を中性になるまで水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、蒸発させると、表題の生成物が０．２５０ｇ得られた。該生成物は方法Ａで得た化合物と同じものであった。

９−ニトロ−１０−（ｐ−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシン
２０ｍｌのＣＨ_２Ｃｌ_２中０．３ｇの９−ニトロ−１０−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンの溶液に、０．１７ｇのｐ−フルオロベンゼンスルホニルクロリドと０．１２ｍｌのＥｔ_３Ｎとを加えた。１時間後、該反応混合物を１０％ＨＣｌで処理し、次いで有機相を中性になるまで水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥した。溶媒を蒸発させ、生成物をカラムクロマトグラフィーで精製すると、表題の生成物が０．２４ｇ得られた。

９−ニトロ−１０−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
１０ｍｌのＣＨ_２Ｃｌ_２中０．２ｇの９−ニトロ−１０−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン及び０．０８ｍｌのＥｔ_３Ｎの溶液をアルゴン雰囲気下で０℃に冷却した。１ｍｌのＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解した０．１ｍｌの無水トリフルオロメタンスルホン酸を前記溶液中に５分間で滴下した。０．５時間後、該反応混合物を実施例２と同様に処理した。カラムクロマトグラフィー後、０．１８ｇの９−ニトロ−１０−（トリフルオロメタンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシンが得られた。

９−ニトロ−１０−（メタンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシン
１ｍｌのＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解した０．０７ｍｌのメタンスルホニルクロリドを、アルゴン雰囲気下の０〜５℃に冷却した０．１２２ｍｌのＥｔ_３Ｎを含む１５ｍｌのＣＨ_２Ｃｌ_２中０．３ｇの９−ニトロ−１０−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンの溶液に５分間で滴下した。０．５時間後、該反応混合物を実施例２と同様に処理した。カラムクロマトグラフィー後、０．３ｇの９−ニトロ−１０−（メタンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシンが得られた。

９−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
２ｍｌのＤＭＦ中０．１ｇの９−ニトロ−１０−（ｐ−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシンの溶液に、０．１ｍｌのトリエチルアミンと、０．０２８ｍｌのギ酸と、０．００５ｇの１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンと、０．００２ｇのＰｄ（ＯＡｃ）_２とを加えた。該混合物を４時間８０℃に加熱した。溶媒を真空蒸発させ、粗反応混合物をカラムクロマトグラフィーで精製した。表題の生成物が黄色固体物質として得られた（０．０３ｇ）。

９−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
３ｍｌのジオキサン中０．１ｇの９−ニトロ−１０−メタンスルホニルオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンの溶液／懸濁液に、０．０４ｍｌのトリエチルアミンと、０．０１１ｍｌのギ酸と、０．００７ｇの１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンと、０．００３ｇのＰｄ（ＯＡｃ）_２とを加えた。該混合物を１時間９０℃に加熱した。１時間後、更に０．３５ｍｌのギ酸トリエチルアンモニウム１．８Ｍ溶液を加えた。１時間後、溶媒を真空蒸発させ、粗反応混合物をカラムクロマトグラフィーで精製した。表題の生成物が黄色固体物質として得られた（０．０６ｇ）。

９−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
４ｍｌのジオキサン中０．１ｇの９−ニトロ−１０−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンの溶液に、０．２５ｍｌのポリメチルヒドロキシシロキサンと、０．００４ｇの１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンと、０．００２ｇのＰｄ（ＯＡｃ）_２とを加えた。該混合物を３時間４０℃に加熱した。溶媒を真空蒸発させ、粗反応混合物をカラムクロマトグラフィーで精製した。表題の生成物が黄色固体物質として得られた（０．０３６ｇ）。

９−ニトロ−１２−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
濃塩酸（２００ｍｌ）中１２−ニトロ−２０（Ｓ）−カンプトテシン（２０ｇ）溶液／懸濁液を撹拌し、これに無水ＳｎＣｌ２（４１．９ｇ）を０〜５℃で加え、得られた混合物を室温で一晩継続的に撹拌した。固体を濾過し、少量の濃塩酸で洗浄した。次いで、黄色固体物質を水に懸濁し、固体重炭酸ナトリウムを少しずつ加えてｐＨを約２に調整した。固体を濾過によって回収し、中性になるまで水で洗浄し、次いでエタノール及びジエチルエーテルで洗浄した。乾燥後、１０．５ｇの１２−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシンが得られた。

３５％Ｈ_２ＳＯ_４（１００ｍｌ）中１２−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシン（１ｇ）溶液に、水３０ｍｌ中の硝酸ナトリウム（２ｇ）を撹拌下０〜５℃で加えた。１０分後、尿素（１ｇ）を加え、該反応混合物を更に１０分間撹拌した。該混合物をＣｕＮＯ_３（２０ｇ）水溶液が入っているフラスコ内に滴下し、次いで該溶液にＣｕ_２Ｏ（３ｇ）を加えた。該反応混合物を室温で３０分間撹拌した。次いで該反応混合物を塩化メチレンで抽出した。溶媒を真空下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィーで精製すると、１２−ヒドロキシカンプトテシンが０．６５ｇ得られた。

前述の製造方法で得た生成物を実施例１の方法Ａ及びＢでニトロ化した。表題の生成物が０．５ｇ得られた。

９−ニトロ−１２−（ｐ−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシン
実施例２と同様に、但し出発材料として９−ニトロ−１２−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンを用いて反応を実施し、表題の生成物を得た。

９−ニトロ−１２−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
実施例３と同様に、但し出発材料として９−ニトロ−１２−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンを用いて反応を実施し、表題の生成物を得た。

９−ニトロ−１２−（メタンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシン
実施例４と同様に、但し出発材料として９−ニトロ−１２−ヒドロキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンを用いて反応を実施し、表題の生成物を得た。

９−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
実施例５と同様に、但し出発材料として９−ニトロ−１２−（ｐ−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシンを用いて反応を実施し、表題の生成物を得た。該生成物は基準試料と同じものであった。

９−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
実施例６と同様に、但し出発材料として９−ニトロ−１２−メタンスルホニルオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンを用いて反応を実施し、表題の生成物を得た。該生成物は基準試料と同じものであった。

９−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
実施例７と同様に、但し出発材料として９−ニトロ−１２−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシンを用いて反応を実施し、表題の生成物を得た。該生成物は基準試料と同じものであった。

９−アミノ−１０−（ｐ−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシン
１０ｍｌのジオキサンに溶解した０．２５ｇの９−ニトロ−１０−（ｐ−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシンを、０．０２ｇの１０％Ｐｄ／Ｃの存在下で、室温、大気圧下で４時間水素化した。触媒を濾過によって除去し、溶媒を真空下で除去した。粗生成物をクロマトグラフィーで精製すると、表題の生成物が０．２ｇ得られた。

９−ニトロ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
２ｍｌのジオキサン中０．１ｇの９−ニトロ−１０−（ｐ−フルオロベンゼンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシンの溶液に、０．１ｍｌのトリエチルアミンと、０．０２８ｍｌのギ酸と、０．００５５ｇの１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンと、０．００２ｇのＰｄ（ＯＡｃ）_２とを加えた。該混合物を３０分間８０℃に加熱した。溶媒を真空蒸発させ、粗反応混合物をカラムクロマトグラフィーで精製した。表題の生成物が黄色固体物質として得られた。

９−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
７．５ｍｌのＤＭＦ中０．６ｇの９−ニトロ−２０（Ｓ）−カンプトテシンの溶液を、０．０２ｇの１０％Ｐｄ／Ｃの存在下で、室温、大気圧下で４時間水素化した。触媒を濾過によって除去し、温ＤＭＦで繰り返し洗浄した。溶媒を真空下で除去し、粗反応混合物をカラムクロマトグラフィーで精製すると、表題の生成物が得られた。

９−ニトロ−１０−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシン
実施例２と同様に、但しｐ−トルエンスルホニルクロリド（０．１６ｇ）を用いて操作して、表題の化合物を得た（０．３６ｇ）。

９−アミノ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
実施例５と同様に、但し出発材料として９−ニトロ−１０−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシンを用いて反応を実施し、表題の生成物を得た。該生成物は実施例５で得た試料と同じものであった。

９−ニトロ−２０（Ｓ）−カンプトテシン
実施例１６と同様に、但し出発材料として９−ニトロ−１０−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシンを用いて反応を実施し、表題の生成物を得た。該生成物は実施例１６で得た試料と同じものであった。

９−アミノ−１０−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシン
５ｍｌのＤＭＦ中０．１ｇの９−ニトロ−１０−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）−２０（Ｓ）−カンプトテシンの溶液を、０．０２５ｇの予還元したＰｔＯ_２の存在下で、室温、大気圧下で２４時間水素化した。触媒を濾過によって除去し、溶媒を真空下で濃縮した。該粗反応混合物をカラムクロマトグラフィーで精製すると、表題の生成物が０．０５ｇ得られた。

Claims (6)

1. 下記式（Ｖ）
   

   

   ［式中、ＸＯは還元的に除去できる基である］の化合物又はその医薬的に許容し得る塩。
2. 下記式（Ｖ）
   

   

   ［式中、ＸＯは還元的に除去できる基である］の化合物の製造方法であって、式（ＩＶ）
   

   

   の化合物を前記式（Ｖ）の化合物に変換することを含む方法。
3. 式（ＩＩＩ）
   

   

   ［式中、環Ａ上のヒドロキシ基は１０位又は１２位にある］の化合物をニトロ化剤と反応させることにより式（ＩＶ）の化合物を製造する請求項２に記載の方法。
4. 請求項１で定義した式（Ｖ）の化合物又は該化合物の医薬的に許容し得る塩を有効成分として、医薬的に許容し得る担体及び／又は希釈剤と共に含む医薬組成物。
5. ヒト又は動物の身体の治療で使用するための、請求項１で定義した式（Ｖ）の化合物又は該化合物の医薬的に許容し得る塩。
6. 抗腫瘍剤として使用するための請求項５に記載の化合物。