PT2509950E - Amidas de 5-amino-4-hidroxipentoílo - Google Patents

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Genadiy Kalayanov
Kevin Parkes
Bengt Bertil Samuelsson
Wim Bert Griet Schepens
Johannes Wilhelmus J Thuring
Hans Kristian Wallberg
Jörg Kurt Wegner
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Description

DESCRigÁO "AMIDAS DE 5-AMINO-4-HIDROXIPENTOÍLO"
Esta invengáo diz respeito a amidas de 5-amino-4-hidroxi-pentoílo tendo propriedades de inibigáo da replicagao do VIH (Virus da Imunodeficiéncia Humana), ä sua preparagáo e composigoes farmacéuticas compreendendo estes compostos.
Inicialmente, o tratamento da infecgáo pelo VIH consistía em monoterapia com derivados de nucleosídeo e, embora bem-sucedida na supressäo da replicagao viral, estes fármacos perdem rápidamente a sua eficácia devido á emergencia de estirpes resistentes a fármacos. Tornou-se claro que urna elevada taxa de mutagáo combinada com rápida replicagao tornaram o VIH um alvo particularmente desafiante para terapia antiviral. A introdugáo de terapia de combinagáo de vários agentes anti-VIH melhorou o resultado terapéutico. 0 padráo de cuidado corrente é a assim chamada HAART (Terapia Antirretroviral Altamente Ativa), que oferece urna supressäo viral poderosa e sustentada. A HAART envolve típicamente combinagoes de inibidores da transcriptase reversa de nucleosídeos ou nucleótidos (NRTIs ou NtRTIs, respetivamente) com um inibidor da transcriptase reversa de náo nucleosídeos (NNRTI) ou um inibidor da protease (PI) . As diretrizes correntes para terapia antirretroviral recomendam tal regime de terapia de combinagáo tripla mesmo para tratamento inicial. Embora a HAART seja capaz de supressäo do VIH até níveis indetetáveis pode emergía resisténcia devido a problemas de cumprimento. Foi também mostrado que o virus resistente é transportado para animáis recém-infectados, resultando em opgöes de terapia gravemente limitadas para estes pacientes ingénuos quanto a fármacos.
Portanto existe urna necessidade continua de novos e eficazes compostos que possam ser usados como fármacos anti-VIH. Em particular existe necessidade de inibidores da protease do VIH adicionáis que sejam mais eficazes em termos de atividade contra virus de tipo selvagem, mas também contra estirpes mutadas, em particular na diregáo de estirpes mutadas selecionadas pelos inibidores da protease correntemente aprovados. Existe urna necessidade de inibidores da protease que sejam benéficos em termos do seu perfil farmacocinético, em particular que exibam ligagáo a proteina no plasma reduzida.
Inibidores da protease do VIH sao descritos inter alia em Holloway et al. J. Med. Chem. 1995, 38, 305-317; Becker Expert Rev. Anti-Infect. Ther. 2003, 1, 403-413; Miller et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2006, 16, 1788-1794; WO 2007/147884 Al, e Wensin et al. Antiviral Research 2010, 85, 59-74 (Epub 22 de out de 2009). A presente invengáo está dirigida ao proporcionar de novas séries particulares de amidas de 5-amino-4-hidroxi-pentoílo tendo propriedades de inibigáo da replicagáo do VIH.
Os compostos da invengáo diferem de compostos da técnica prévia na estrutura, atividade farmacológica e/ou potencia farmacológica. Descobriu-se que náo só sáo muito ativos contra virus do tipo selvagem, mas também contra estirpes mutantes, em particular contra estirpes que se tornaram resistentes a um ou mais inibidores da protease conhecidos, cujas estirpes sáo referidas como estirpes do VIH resistentes a fármacos ou multifármacos.
Assim sendo, num aspeto, a presente invengáo diz respeito a compostos das fórmulas I, incluindo as suas formas estereoquimicamente isoméricas, que podem ser representados pela fórmula I:
em que R1 é halo, alcoxi C1-4, trifluorometoxi; R2 é um grupo da fórmula:
R3 é um grupo da fórmula:
R4 é um grupo da fórmula:
n é O ou 1; cada A é independentemente CH ou N; R5 e R6 sao independentemente hidrogénio, alquilo C1-4, ou halo; R7 é alquilo Ci_4 ou alcoxi Ci_4alquilo Ci_4; R8 é alquilo Ci_4 ou alcoxi Ci_4alquilo Ci_4; cada R9 é independentemente alquilo Ci-4, ciclopropilo, trifluorometilo, alcoxi Ci_4, ou dimetilamino; R10 é hidrogénio, alquilo Ci-4, ciclopropilo, trif luorometilo, alcoxi Ci-4, ou dimetilamino; R11 é hidrogénio ou alquilo Ci_4; os seus sais de adigáo farmacéuticamente aceitáveis e os seus solvatos farmacéuticamente aceitáveis.
Sempre que usada num fragmento molecular ou grupo, urna ligagao com um asterisco (-*) representa a ligagao ligando esse fragmento ou grupo ao restante da molécula.
Como usado aqui, alquilo Ci-4 como um grupo ou parte de um grupo define radicáis de hidrocarbonetos saturados de cadeia linear ou ramificada tendo de 1 a 4 átomos de carbono tais como metilo, etilo, 1-propilo, 2-propilo, 1-butilo, 2-butilo, 2-metil-propilo, t-butilo. De interesse entre alquilo Ci_4 é alquilo C1-3 ou alquilo C1-2; alquilo C1-3 define radicáis de hidrocarbonetos saturados de cadeia linear ou ramificada tendo de 1 a 3 átomos de carbono; alquilo Ci_2 define metilo ou etilo. 0 termo "halo" é genérico para flúor, cloro, bromo ou iodo, em particular para flúor ou cloro.
Sempre que ocorre um radical na definigáo dos compostos da fórmula I ou em qualquer um dos subgrupos de compostos da fórmula I especificados aqui, o referido radical é independentemente como especificado acima na definigäo dos compostos da fórmula I ou ñas definigóes mais restritas como especificado doravante.
Deve ser também notado que as posigoes dos radicáis em qualquer fragäo molecular usada ñas definigóes podem ser em qualquer lugar em tal fragäo desde que seja químicamente estável. Por exemplo, o radical R1 pode estar em qualquer posigäo do fenilo ao qual está anexado.
Quando qualquer variável (p.ex., halogénio, alquilo Ci_4) ocorre mais do que urna vez em qualquer fragäo, cada definigäo é independente. Quaisquer definigóes limitadas dos radicáis especificados aqui destinam-se a ser aplicáveis ao grupo de compostos da fórmula I bem como a qualquer subgrupo definido ou mencionado aqui. As linhas desenhadas a partir dos substituintes até aos sistemas em anel indicam que a ligagäo pode estar anexada a qualquer um dos átomos no anel adequados.
As formas de sal de adigäo farmacéuticamente aceitáveis, que os compostos da presente invengäo säo capazes de formar, podem ser convenientemente preparadas usando os ácidos apropriados, tais como, por exemplo, ácidos inorgánicos tais como ácidos hidrohálicos, p.ex., ácido clorídrico ou bromídrico, ácidos sulfúrico, hemissulfúrico, nítrico, fosfórico, e similares; ou ácidos orgánicos tais como, por exemplo, ácidos acético, aspártico, dodecil-sulfúrico, heptanoico, hexanoico, nicotínico, propanoico, hidroxiacético, láctico, pirúvico, oxálico, malónico, succínico, maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, metanossulfónico, etanossulfónico, benzenossulfónico, p-toluenossulfónico, ciclámico, salicílico, p-amino-salicílico, pamoico, e similares. Reciprocamente, as referidas formas de sal de adigäo ácida podem ser convertidas na forma de base livre por tratamento com urna base apropriada.
Os compostos da fórmula I contendo protoes ácidos podem ser convertidos ñas suas formas de sal de adigäo de metal ou amina farmacéuticamente aceitáveis por tratamento com bases orgánicas e inorgánicas apropriadas. Formas de sal de base apropriadas compreendem, por exemplo, os sais de amonio, os sais de metáis alcalinos e alcalinoterrosos, p.ex., os sais de litio, sodio, potássio, magnésio, cálcio e similares, sais com bases orgánicas, p.ex., aminas alifáticas e aromáticas primárias, secundárias, e terciárias tais como metilamina, etilamina, propilamina, isopropilamina, os quatro isómeros de butilamina, dimetilamina, dietilamina, dietanolamina, dipropilamina, diisopropilamina, di-n-butilamina, pirrolidina, piperidina, morfolina, trimetilamina, trietilamina, tripropilamina, quinuclidina, piridina, quinolina e isoquinolina, a benzatina, N-metil-D-glucamina, 2-amino-2-(hidroximetil)-1,3-propanodiol, sais de hidrabamina, e sais com aminoácidos tais como, por exemplo, arginina, Usina e similares. Reciprocamente, a forma de sal pode ser convertida por tratamento com ácido na forma de ácido livre. 0 termo "solvato farmacéuticamente aceitável" destina-se a compreender hidratos e formas de adigäo de solvente que os compostos da fórmula I, incluindo suas formas estereoisoméricas, podem formar. Exemplos de tais solvatos säo, p.ex., hidratos, alcoolatos, tais como etanolatos, i-propanolatos, n-propanolatos, e similares.
Os compostos da sua fórmula I podem conter um ou mais centros de quiralidade e podem existir como formas estereoquimicamente isoméricas. De especial interesse sao aqueles compostos da fórmula I que sao estereoquimicamente puros. 0 termo "formas estereoquimicamente isoméricas" como usado aquí define todas as possíveis formas estereoisoméricas dos compostos da fórmula I, os seus sais de adigáo farmacéuticamente aceitáveis, e os seus solvatos farmacéuticamente aceitáveis. A nao ser que de outro modo mencionado ou indicado, a designagáo química de compostos denota a mistura de todos as possíveis formas estereoquimicamente isoméricas, contendo as referidas misturas todos os diastereómeros e enantiómeros da estrutura molecular básica bem como cada urna das formas isoméricas individuáis da fórmula I, os seus sais de adigáo farmacéuticamente aceitáveis, e os seus solvatos farmacéuticamente aceitáveis substancialmente isentos, i.e., associados a menos do que 10%, preferencialmente menos do que 5%, em particular menos do que 2% e o mais preferencialmente menos do que 1% dos outros isómeros. Os centros estereogénicos podem ter a configuragäo R ou S; os substituintes em radicáis (parcialmente) saturados cíclicos bivalentes podem ter a configuragäo cis ou trans; as ligagóes duplas podem ter urna estereoquímica E (entgegen) ou Z (zusammen).
Alguns dos compostos da fórmula I podem também existir na sua forma tautomérica. Tais formas, embora náo explícitamente indicadas na fórmula acima, destinam-se a estar incluidas dentro do ámbito da presente invengáo. A presente invengäo destina-se também a incluir quaisquer isótopos de átomos presentes nos compostos da invengäo. Por exemplo, isótopos de hidrogénio incluem tritio e deutério e isótopos de carbono incluem 13C e 14C.
Sempre que usados anteriormente ou doravante, os termos "compostos da fórmula I", "os presentes compostos", "os compostos da presente invengäo", ou quaisquer termos equivalentes, e, similarmente, os termos "subgrupos de compostos da fórmula I", "subgrupos dos presentes compostos", "subgrupos dos compostos da presente invengäo" ou quaisquer termos equivalentes, destinam-se a incluir os compostos da fórmula geral I, ou subgrupos dos compostos da fórmula geral I, bem como seus sais, solvatos, e estereoisómeros.
Sempre que é feita mengäo anteriormente ou doravante que substituintes podem ser selecionados cada um independentemente de urna lista de definigóes, tal como por exemplo para R1 ou R2, destinam-se a ser incluidas quaisquer possiveis combinagoes que sejam químicamente possíveis ou que levem a moléculas de tal estabilidade química que possam ser processadas em procedimentos farmacéuticos padräo.
Subgrupos particulares dos compostos da fórmula I ou qualquer subgrupo de compostos da fórmula I especificados aquí em que (a) R1 é halo; ou R1 é flúor ou cloro; cujo halo (ou flúor ou cloro) em particular está substituido na posigáo orto; ou (b) R1 é metoxi; cujo metoxi em particular está substituido na posigáo meta.
Subgrupos particulares dos compostos da fórmula I ou qualquer subgrupo de compostos da fórmula I especificados aquí em que (a) R2 é um grupo da fórmula
(b) ou em que R2 é um grupo da fórmula:
Formas de realizagao adicionáis da presente invengao sao aqueles compostos da fórmula I ou qualquer um dos subgrupos de compostos da fórmula I em que R5 é hidrogénio, e R6 é halo ou alquilo Ci-4; R5 é halo e R6 é hidrogénio; R5 é halo ou alquilo C1-4, e R6 é hidrogénio; ou R5 e R6 sao ambos hidrogénio, ou sao ambos halo.
Formas de realizagao adicionáis da presente invengao sao aqueles compostos da fórmula I ou qualquer um dos subgrupos de compostos da fórmula I em que nas definigöes de R5 e R6 halo é flúor ou cloro, e alquilo C1-4 é metilo.
Formas de realizagäo particulares da presente invengäo sao aqueles compostos da fórmula I ou qualquer um dos subgrupos de compostos da fórmula I, incluindo os compostos em que R2 é como definido acima sob (a) ou (b), em que R5 é hidrogénio e R6 é flúor ou cloro; R5 é flúor ou cloro e R6 é hidrogénio; R5 é hidrogénio e R6 é metilo; R5 e R6 sao ambos hidrogénio, ou R5 é cloro e R6 é flúor; mais em particular em que R5 é hidrogénio e R6 é flúor; R5 é cloro e R6 é hidrogénio; R5 é hidrogénio e R6 é metilo; R5 e R6 sao ambos hidrogénio, R5 é cloro e R6 é flúor, R5 é metilo e R6 é flúor, ou R5 é flúor e R6 é metilo.
Formas de realizagäo da presente invengäo säo aqueles compostos da fórmula I ou qualquer um dos subgrupos de compostos da fórmula I em que R3 é um grupo da fórmula
Urna forma de realizagäo adicional diz respeito áqueles compostos da invengäo em que R3 é um grupo da fórmula
Formas de realizagäo da presente invengäo säo aqueles compostos da fórmula I ou qualquer um dos subgrupos de compostos da fórmula I em que R8 é metilo ou 2-metoxietilo; ou em que R8 é metilo.
Formas de realizagäo da presente invengäo sao aqueles compostos da fórmula I ou qualquer um dos subgrupos de compostos da fórmula I em que R9 é alcoxi C1-2 ou dimetilamino; ou R9 é metoxi ou dimetilamino; ou R9 é metoxi.
Formas de realizagäo da presente invengäo säo aqueles compostos da fórmula I ou qualquer um dos subgrupos de compostos da fórmula I em que R4 é um grupo tendo a estrutura química especificada acima, mas em que, no primeiro grupo, R9 é R9a, no segundo grupo, R e R , no terceiro grupo, R e R , no quarto grupo R e R , no quinto e no sexto grupo, R e R ; cu]OS grupos podem ser portanto representados como se segue:
em que cada A é independentemente CH ou N; ou em que cada A é CH; R9a é alcoxi Ci_4 ou dimetilamino; R9b é alcoxi C1-4 ou dimetilamino; R9c é alcoxi C1-4 ou dimetilamino; R9d é alquilo Ci_4, ciclopropilo, trifluorometilo; R10 é hidrogénio, alquilo Ci_4, ciclopropilo, ou trifluorometilo; ou R10 é hidrogénio, metilo, ciclopropilo, ou trifluorometilo; cada R9e é independentemente alquilo C1-4, ciclopropilo, alcoxi C1-4, ou dimetilamino.
De interesse particular sao aqueles compostos em que, em R9a, R9b, R9c, R9d, ou R9e, alcoxi C1-4 é metoxi e alquilo C1-4 é metilo.
Em forma de realizaqao adicional, R4 é um grupo tendo a estrutura química:
em que A é CH e R9a é metoxi ou dimetilamino.
Forma de realizaqao da presente invengao sao aqueles compostos da fórmula I ou qualquer um dos subgrupos de compostos da fórmula I em que R11 é alquilo Ci_4; ou em que R11 é metilo.
Urna forma de realizaqao diz respeito aos compostos 1 - 102 listados na Tabela I no final da parte experimental, incluindo os seus sais e solvatos farmacéuticamente aceitáveis. Urna forma de realizaqao particular diz respeito á forma livre (sais e solvatos nao farmacéuticamente aceitáveis) dos compostos 1 - 102 listados na Tabela I.
De particular interesse sao os compostos com números 7, 8, 52, 67, 91, 93, 96, 101 e 102 listados na tabela no final dos exemplos incluindo os seus sais e solvatos farmacéuticamente aceitáveis.
Os compostos da fórmula I em que R3 é um grupo da fórmula:
sendo os referidos compostos representados pela fórmula I-a, podem ser preparados por acoplamento de um intermediário da fórmula II com um derivado de ácido carboxilico da fórmula III numa reagáo de formagáo de amida. As condigoes de reagáo para esta reagáo de formagáo de amida sáo aquelas usadas para acoplar aminoácidos em sintese de péptidos. Agentes de acoplamento que podem ser usados podem ser selecionados de AT-etoxicarbonil-2-etoxi-l, 2-diidroquinolina (EEDQ) , 2\T-iso-butoxicarbonil-2-isobutoxi-l, 2-diidroquinolina (IIDQ), hexafluorofosfato de N, N, N, N-tetrametil-O-(7-azabenzotriazol-l-il)urónio (HATU), hexafluorofosfato de benzotriazol-l-il-oxi-tris-(dimetilamino)-fosfónio (BOP), hexafluorofosfato de benzotriazol-l-il-oxi-tris-pirrolidino-fosfónio (PyBOP®) , diciclohexilcarbodiimida (DCC), 3-etil-l(N,N-dimetil)aminopropilcarbodiimida (EDCI), ou 1,3-diisopropilcarbodiimida. Pode ser adicionado um catalisador, por exemplo 1-hidroxi-benzotriazol (HOBt) ou 4-dimetilaminopiridina (DMAP). A reagáo é usualmente conduzida na presenga de urna base, em particular urna base de amina tal como urna amina terciária, p.ex., trietilamina, IV-metilmorfolina, N, N-diisopropiletilamina (sendo esta última também referida como ou base de Hunig, DIPEA, ou DIEA) . Solventes que podem ser usados incluem solventes apróticos bipolares tais como DMA, DMF ou acetonitrilo, hidrocarbonetos halogenados tais como CH2CI2 ou CHCI3, solventes de éter tais como THF. Numa forma de realizagäo, a reagäo de acoplamento é conduzida com HATU usando trietilamina como base em DMF.
Compostos da fórmula I em que R3 é
sendo aqui representado pela fórmula I-b, podem ser preparados por urna reagäo de formagäo de uretano de um intermediário da fórmula II com um composto de carbonilo eletrofílico apropriado da fórmula IV tal como um cloroformato, ou um 2,5-dioxopirrolidin-l-olato, para- nitrofenolato ou carbonato de 2-piridilo ativado.
Lg no esquema acima é um grupo abandonante tal como cloro, bromo, 2,5-dioxopirrolidin-l-olato, para-nitrofenolato.
Os intermediários da fórmula II podem por seu turno preparados como delineado no seguinte esquema de reagäo:
No esquema acima, M representa um grupo -B(0Ra)2 ou um grupo -Sn (Rb) 3, em que Ra representa um hidrogénio ou um grupo alquilo ou alcanodiilo, p.ex., 2,3-dimetil-2,3- butanodiilo e Rb representa um grupo alquilo tal como metilo ou butilo. PG representa um grupo de protegáo de hidroxi que pode ser seletivamente olivado na presenga do grupo Boc. Y representa bromo, iodo ou um grupo trifluorometanossulfonilo (triflato ou TfO-). X representa cloro, bromo, ou iodo. 0 grupo triflato pode ser introduzido por reagäo de um intermediário da fórmula X transportando um grupo hidroxi na posigäo do bromo com urna trifluorometanossulfonimida, na presenga de urna base num solvente tal como diclorometano. 0 intermediário da fórmula X transportando um grupo hidroxi pode por seu turno ser preparado a partir de um intermediário XI transportando um grupo hidroxi protegido na posigäo do grupo Y, seguindo os procedimentos descritos doravante para a conversäo de XI em X, seguidos por urna passo de desprotegäo. Um grupo de protegáo que pode ser usado neste procedimento é um grupo benzilo, que pode ser removido com hidrogénio na presenga de um catalisador.
Num primeiro passo, a lactona XI é alquilada com um haleto de benzilo até á lactona benzilada X. Esta reagäo é conduzida num solvente aprótico tal como THF, com urna base, p.ex., bis(trimetilsilil)amida de litio, bis(trimetilsilil)amida de sodio, ou diisopropilamida de litio a baixa temperatura, p.ex., a -78°C, seguida pela adigáo do haleto de benzilo. 0 anel da lactona nos intermediários X é aberto por hidrólise usando urna base tal como LiOH, NaOH, ou KOH num solvente aquoso tal como DMF, DMA, dioxano, THF e água. Esta hidrólise resulta nos intermediários IX em que subsequentemente a fungäo álcool está protegida com um grupo de protegäo PG adequado, por exemplo com um grupo sililo tal como triisopropilsililo, t-butildimetilsililo ou similares, sob condigöes conhecidas na técnica, para gerar intermediários da fórmula VIII. A fungäo carboxilo é convertida na correspondente amida em VII, por reagáo de acoplamento do intermediário VIII com urna amina primária da fórmula R2-NH2. As condigöes para esta reagáo sao como descrito acima. Opcionalmente, R2-NH2 pode ser usado em forma racémica e a mistura diastereoisomérica resultante de intermediários VII pode ser separada, p.ex., por cromatografía.
Num próximo passo, o grupo de protegäo de 0 em VII é removido originando os intermediários VI. Por exemplo, no caso de um grupo t-butildimetilsililo pode ser feito uso de fluoreto de tetrabutilamónio (TBAF) ou HF em acetonitrilo. Os intermediários VI, que podem ser derivados de bromo, iodo ou triflato (-OTf), sáo depois sujeitos a urna reagáo de acoplamento cruzado carbono-carbono tal como urna reagáo de Suzuki, Stille, Heck, ou Negishi que é catalisada por metal (usualmente com catalisadores de Pd, Ni ou Cu) . Um exemplo de tal reagáo de acoplamento cruzado é a reagáo de Suzuki, em cujo caso VI é reagido com um ácido ou éster borónico de heteroarilo substituido (p.ex., pinacolatoboronato) na presenga de um catalisador de paládio a temperatura elevada. A reagáo é levada a cabo na presenga de urna base tal como bicarbonato de sodio, carbonato de sodio, hidróxido de sodio, carbonato de potássio, carbonato de césio, fosfato de potássio, etc. Quando urna base inorgánica é difícil de dissolver num solvente orgánico é usada como urna solugáo aquosa. Outra tal reagáo de acoplamento cruzado é a reagáo de Stille em cujo caso VI é reagido comum estanano de heteroarilo substituido a temperatura elevada na presenga de um catalisador de paládio. Um sal de metal como cloreto de litio, brometo de litio ou iodeto de litio pode ser usado como um aditivo. Catalisadores de paládio adequados para as reagoes de Suzuki ou Stille compreendem Pd(PPh3)4 (Ph = fenilo), Pd2(dba)3 (dba = dibenzilidenoacetona) , Pd(OAc)2, Pd(dppf)Cl2 (dppf = 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno). Em alguns casos podem ser adicionados ligandos adicionáis (p.ex., tri-t-butilfosfina, 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno, tri-o-tolil-fosfina ou similares) para facilitar a reagáo de acoplamento. Aínda urna outra tal reagáo é a reagáo de Heck que é a reagáo de um haleto (ou triflato) insaturado com um alqueno e urna base e catalisador de paládio para formar um alqueno substituido. No presente caso envolve um acoplamento cruzado catalisado por paládio entre um haleto ou triflato de arilo e um tiazol. Um catalisador adequado para esta reagáo é Pd(PPh3)4. Solventes orgánicos adequados para este tipo de reagoes incluem tetraidrofurano, 1,4-dioxano e 1,2-dimetoxietano, solventes aromáticos tais como benzeno ou tolueno, solventes de álcool tais como metanol ou etanol, acetonitrilo, dimetilformamida, ou urna mistura destes solventes. Urna base que pode ser usada é um acetato de metal alcalino tal como acetato de potássio. A remogáo do grupo de protegäo de N Boc em V, por exemplo por tratamento ácido usando ácido trifluoroacético num solvente halogenado tal como CH2C12, ou ácido clorídrico em isopropanol, leva finalmente ao intermediário II. A desprotegáo de Boc pode ser também alcangada por tratamento do intermediário V com iodeto de trimetilsililo ou urna mistura de cloreto de trimetilsililo e Nal num solvente apropriado, p.ex., acetonitrilo, CHCI3 ou CH2CI2. As reagöes de desprotegäo de Boc säo preferencialmente conduzidas ä temperatura ambiente.
Os intermediários da fórmula XI podem ser preparados como no seguinte esquema de reagäo em que Y é como especificado acima e PG é um grupo de protegäo de N tal como um grupo BOC.
Num primeiro passo, a fungäo álcool no álcool de 2-fenetilo XVII é oxidada até ao correspondente acetaldeido XVI usando um oxidante fraco tal como hipoclorito de sodio na presenga de 2,2,6,6-tetrametilpiperidina-l-oxil (ou TEMPO), que é um oxidante seletivo gerando aldeidos a partir de álcoois primários. Num próximo passo, o acetaldeido XVI é reagido com urna amina protegida e com um benzenossulfinato. A reagäo da sulfona XV assim obtida com lactona XIV origina o derivado de lactona XIII, que é separado com cromatografía quiral em XII puro enantiomérico, em que a ligagao dupla é reduzida, por exemplo com hidrogénio na presenga de Ni de Raney.
Onde apropriado, os passos sintéticos na preparagäo de compostos de acordo com a fórmula II podem ser realizados em outra ordern. Por exemplo, a reagäo de acoplamento cruzado pode ser levada a cabo a várias etapas na sequéncia sintética no esquema acima, tal como nos intermediários VI, VII, VIII, IX e XI. 0 acoplamento cruzado pode mesmo ser realizado a urna etapa tardía da síntese, por exemplo no final da síntese como ilustrado no seguinte esquema de reagäo. Neste esquema, M é como especificado acima e as condigóes da reagäo de acoplamento cruzado säo também como descrito acima. Os intermediários XVIII podem ser preparados seguindo os procedimentos para a preparagäo de intermediários II, mas sem reagäo de acoplamento cruzado, seguidos por urna reagäo de acoplamento para introduzir o grupo R3-CO.
Os compostos da fórmula I em que R3 é um grupo da fórmula:
sendo os referidos compostos representados pela fórmula I-c podem ser preparados por urna reagäo de formagáo de amida entre um intermediário da fórmula XIX e ácido carboxílico de cianociclopropilo XX como ilustrado no seguinte esquema de reagäo. As condigöes para esta reagäo sao como descrito acima, p.ex., na transíormagäo de II em I-a.
Os intermediários da fórmula XIX podem ser preparados como delineado no seguinte esquema:
Num primeiro passo, um intermediário II é acoplado com t-butilglicina protegida por N XXI, tal como Boc-t-butilglicina, numa reagäo de formagao de amida, seguindo condigöes de reagäo como descrito acima na transformagäo de II em I-a, originando um intermediário XXII. 0 grupo de protegäo Boc XXII pode ser removido sob condigöes conhecidas na técnica, como descrito anteriormente para obter o intermediário de amino livre XIX.
Os compostos da fórmula I em que R3 é um grupo da fórmula:
sendo os referidos compostos representados pela fórmula I-d, podem ser preparados por urna reagäo de formagäo de uretano no final da sintese como ilustrado no seguinte esquema de reagäo, por condensagäo de um intermediário da fórmula XIX com um composto de carbonilo eletrofilico apropriado tal como um cloroformato, ou um succinimidilo, para-nitrofenilo, ou carbonato de piridilo ativado. Esta reagäo é particularmente adequada para preparagäo de compostos em que R8 é alcoxi Ci-4alquilo C1-4.
Os compostos da fórmula I em que R3 é um grupo da fórmula:
sendo os referidos compostos representados pela fórmula I-e, podem ser preparados por urna reagäo de acoplamento com ácido acético de pirrolidinilo numa reagäo de formagáo de amida, seguindo condigöes de reagäo como descrito acima. Como ilustrado no esquema de reagäo em baixo, os compostos I-e podem ser também preparados por um procedimento em dois passos envolvendo primeiramente a reagäo de um intermediário XIX com cloreto de cloroacetilo na presenga de urna base, p.ex., urna amina terciária tal como trietilamina, num solvente tal como diclorometano, resultando nos intermediários XXIII. Esta reagäo pode, p.ex., ser conduzida inicialmente a temperatura mais baixa tal como a OC, seguida por agitagäo á temperatura ambiente. Os intermediários XXIII säo depois reagidos com pirrolidina na presenga de um catalisador nucleofilico tal como iodeto de tetrabutilamónio ou similares, preferencialmente num solvente aprótico bipolar (p.ex., DMA, DMF, N-metilpirrolidinona). Esta reagäo é preferencialmente conduzida á temperatura ambiente.
Os compostos da fórmula I em que R2 é 3-hidroxicromanilo podem ser também preparados por primeiramente acoplamento de urna 3-hidroxi-4-cromanamina XXIV com um ácido 3-arilpropiónico XXV resultando num intermediário XXVI, usando condigóes como descrito anteriormente para a formagáo de urna ligagáo de amida. Subsequentemente, as fungöes NH e OH sao protegidas com 2-metoxipropeno resultando nos intermediários XXVII. Esta transformagáo pode ser efetuada usando um solvente halogenado, tal como diclorometano, na presenga de um catalisador ácido, tal como p-toluenossulfonato de piridínio, entre 0°C e temperatura ambiente. As amidas XXVII e oxirano XXVIII resultantes sao tratadas com urna base forte, tal como litio de n-butilo, a urna gama de temperaturas entre -78°C e -25°C para originar o intermediário XXIX. Este último é sujeito a urna reagáo de acoplamento cruzado com um boronato ou derivado de estanho XXX, como descrito anteriormente, originando XXXI, que é em seu turno desprotegido até XXXII sob condigóes ácidas. Este último corresponde a um intermediário da fórmula II, e pode ser adicionalmente processado como descrito acima até compostos da fórmula I.
Os compostos da fórmula I podem ser também convertidos uns nos outros por reagöes de transformagäo de grupos funcionáis. Os compostos da fórmula I em que R2 é
em que um ou ambos de R5 e R6 sao cloro, bromo, ou iodo podem ser convertidos nos correspondentes compostos em que um ou ambos de R5 e R6 sao hidrogénio usando hidrogénio na presenga de um catalisador, tal como paládio em carbono. Vice-versa, onde um ou ambos de R5 e R6 sao hidrogénio, estes compostos podem ser halogenados na posigäo 6 ou 8 usando um agente de halogenagäo tal como N-bromossuccinimida (NBS) ou N-clorossuccinimida (NCS). Esta conversäo pode ser também realizada em intermediários tendo o grupo R2 acima.
Alguns dos intermediários e materials de inicio sao compostos conhecidos e podem estar comercialmente disponíveis ou podem ser preparados de acordo com procedimentos conhecidos na técnica.
Os intermediários da fórmula R2-NH2 em que R2 é um grupo cromanol podem ser preparados a partir de um fenol XXXIII em 5 passos sintéticos. Num primeiro passo, o fenol XXXIII é tratado com ácido 3-bromopropiónico, em água na presenga de urna base tal como NaOH, a temperatura elevada, tal como temperatura de refluxo. Num segundo passo, o ácido 3-fenoxipropiónico XXXIV resultante sofre urna acilagáo de Friedel-Crafts, usando cloreto de oxalilo e AICI3 num solvente tal como diclorometano para originar a cromanona XXXV, que é por seu turno brominada (com bromo ou CuBr2) num solvente halogenado, tal como diclorometano para originar a cromanona de bromo XXXVI. A reagäo com um reagente de hidreto de metal, tal como NaBH4 num solvente prótico, tal como metanol entre 0°C e temperatura ambiente, origina o álcool de bromo XXXVII. 0 álcool de bromo XXXVII sofre urna reagäo de Ritter, usando acetonitrilo e urna solugäo aquosa de um ácido forte, tal como ácido sulfúrico, para originar o intermediário oxazolina XXXVIII, que é hidrolisado em ácido diluido a urna temperatura entre 80°C e 120°C para originar o cromanol de 4-amino racémico da fórmula XXXIX. O referido cromanol de 4-amino pode ser separado nos correspondentes enantiómeros usando condigóes conhecidas na técnica, tais como cromatografía usando urna fase estacionária quiral, ou por formagáo de sal diastereomérico usando um ácido orgánico óticamente puro como o agente de resolugáo, tal como ácido mandélico, ou similares.
0 4-amino-cromanol XXXIX pode ser halogenado na posigáo 6 ou 8, p.ex., com ΛΓ-clorossuccinimida, para originar os correspondentes 4-amino-cromanóis substituidos na posigáo 6 ou 8 .
Os intermediários da fórmula R2-NH2 que sáo
podem ser preparados a partir de 6,7-diidro-5H- benzo[b]tiofen-4-ona por introdugäo de um grupo hidroxilo com (+)-(8,8-dicloro-canforilsulfonil)oxaziridina na presenga de urna base tal como bis (trimetilsilil) amida de sodio num solvente polar, tal como THF, a baixa temperatura, tal como -78°C. 0 grupo ceto é depois convertido na correspondente benziloxima XLII usando 0-benzilhidroxilamina em piridina, e a oxima é reduzida na correspondente amina XLIII usando, p.ex., borano num solvente polar, tal como THF, numa gama de temperaturas entre 0°C e 70°C.
A amina de ciclohexanol da fórmula XLIVIII pode ser preparada em 4 passos a partir de ciclohexanona de 3-(R)-metilo. Num primeiro passo, o acetato XLVa é obtido por tratamento em acetato de isopropenilo a 100°C na presenga de um catalisador ácido, tal como ácido p-toluenossulfónico. A correspondente cetona de nitro XLVI é obtida por reagáo numa mistura de anidrido acético e ácido nítrico concentrado a urna temperatura entre temperatura ambiente e 50°C. A fungáo ceto é reduzida por um reagente de hidreto de metal, tal como boroidreto de sodio, num solvente alcoólico, tal como metanol á temperatura ambiente, para originar o álcool de nitro XLVII. A redugáo no álcool de nitro XLVIII é alcangada por hidrogenólise na presenga de níquel de Raney em acetato de etilo.
Os compostos da fórmula lea maioria dos intermediários na presente invengäo contera um átomo de carbono assimétrico. Formas isoméricas estereoquimicamente puras dos referidos compostos e os referidos intermediários podem ser obtidas pela aplicagáo de procedimentos conhecidos na técnica. Por exemplo, os diastereoisómeros podem ser separados por métodos físicos tais como cristalizagáo seletiva ou técnicas cromatográficas, p.ex., distribuigáo em contracorrente, cromatografía líquida e métodos similares. Os enantiómeros podem ser obtidos destas misturas racémicas por primeiramente conversáo das referidas misturas racémicas com agentes de resolugáo adequados tais como, por exemplo, ácidos quirais, em misturas de sais ou compostos diastereoisoméricos; depois separagáo física das referidas misturas de sais ou compostos diastereoméricos por, por exemplo, cristalizagáo seletiva ou técnicas cromatográficas, p.ex., cromatografía líquida e métodos similares; e finalmente conversáo dos referidos sais ou compostos diastereoméricos separados nos correspondentes enantiómeros. As formas isoméricas estereoquimicamente puras podem ser também obtidas a partir das formas isoméricas estereoquimicamente puras dos intermediários e materials de inicio apropriados, contanto que as reagóes intervenientes ocorram com retengáo de integridade estereoquímica. Urna maneira alternativa de separagáo das formas enantioméricas dos compostos da fórmula I e intermediários envolve cromatografía líquida, em particular cromatografía líquida usando urna fase estacionária quiral, tal como cromatografía líquida de elevado desempenho ou cromatografía usando dióxido de carbono supercrítico.
Os compostos da fórmula I mostram propriedades anti-VIH, em particular comportam-se como inibidores da protease do VIH-0 VIH é um agente etiológico da Síndrome de
Imunodeficiéncia Adquirida (SIDA) em humanos e infecta preferencialmente células T-4 humanas e destrói-as ou muda a sua fungäo normal, particularmente a coordenagao do sistema imune. Como um resultado, um paciente infectado tem um número sempre decrescente de células T-4, que além do mais se comportara anormalmente. Consequentemente, o sistema de defesa imunológico é incapaz de combater infecgoes e neoplasmas e o sujeito infectado pelo VIH morre usualmente por infecgoes oportunistas tais como pneumonia, ou por cancros.
Os compostos da invengäo mostram também atividade contra estirpes do VIH resistentes a fármacos e multifármacos, em particular contra estirpes do VIH que tém resistencia adquirida a um ou mais dos inibidores da protease aprovados, em particular a atazanavir, lopinavir, e ritonavir.
Devido ás suas propriedades anti-VIH, os compostos da fórmula I, os seus sais de adigáo e solvatos farmacéuticamente aceitáveis, incluindo quaisquer suas formas estereoisoméricas, sao úteis no tratamento de individuos infectados por VIH e para a profilaxia destas infecgoes. Condigoes que podem ser prevenidas ou tratadas com os compostos da presente invengäo, especialmente condigoes associados ao VIH, incluem SIDA, complexo relacionado com SIDA (ARC), linfadenopatia generalizada progressiva (PGL) , bem como doengas crónicas do Sistema Nervoso Central causadas por retrovirus, tais como, por exemplo, demencia e esclerose múltipla mediadas pelo VIH.
Os compostos da presente invengäo podem ser portanto usados como um medicamento contra qualquer urna das condigoes acima mencionadas. Em particular, os compostos da fórmula I podem ser usados no fabrico de um medicamento para o tratamento ou a prevengäo da infecgäo pelo VIH.
Num aspeto adicional, esta invengäo proporciona um método de tratamento de um humano, sofrendo de, ou um método de prevengäo que humanos sofram de, infecgoes viráis, especialmente infecgoes pelo VIH. 0 referido método compreende a administragäo de urna quantidade eficaz de um composto da fórmula I, um sal de adigäo farmacéuticamente aceitável, um seu solvato farmacéuticamente aceitável, ou urna sua possível forma estereosisomérica, a humanos. 0 referido uso como um medicamento ou método de tratamento compreende a administragao a sujeitos infectados pelo VIH de urna quantidade eficaz para combater as condigóes associadas ao VIH e outros retrovirus patogénicos, especialmente VIH-1. A presente invengäo proporciona também composigóes para tratamento de infecgäo pelo VIH compreendendo urna quantidade terapéuticamente eficaz de um composto da fórmula I e um transportador ou diluente farmacéuticamente aceitável.
Os compostos da presente invengäo ou qualquer seu subgrupo podem ser formulados em várias formas farmacéuticas para propósitos de administragäo. Como composigóes apropriadas podem ser citadas todas as composigóes usualmente empregues para administragäo sistémica de fármacos. Para preparar as composigóes farmacéuticas desta invengäo, urna quantidade eficaz do composto particular, opcionalmente em forma de sal de adigäo, como o ingrediente ativo é combinada em mistura intima com um transportador farmacéuticamente aceitável, cujo transportador pode tomar urna ampia variedade de formas dependendo na forma de preparagäo desejada para administragäo. Estas composigoes farmacéuticas estäo desejavelmente em forma de dosagem unitária adequada, por exemplo, para administragao oral, retal, ou percutánea. Por exemplo, na preparagäo das composigoes em forma de dosagem unitária, qualquer um dos meios farmacéuticos usuais pode ser empregue tal como, por exemplo, água, glicóis, óleos, álcoois e similares no caso de preparagóes líquidas oráis tais como suspensóes, xaropes, elixires, emulsóes, e solugóes; ou transportadores sólidos tais como amidos, agúcares, caulino, diluentes, lubrificantes, ligantes, agentes de desintegragao e similares no caso de pós, pílulas, cápsulas, e comprimidos. Devido á sua facilidade na administragao, os comprimidos e cápsulas representam as formas unitárias de dosagem oral o mais vantajosas, em cujo caso sao obviamente empregues transportadores farmacéuticos sólidos. Sao também incluidas preparagóes de forma sólida que podem ser convertidas, imediatamente antes do uso, em formas líquidas. Ñas composigoes adequadas para administragao percutánea, o transportador compreende opcionalmente um agente de intensificagäo da penetragäo e/ou um agente de molhagem adequado, opcionalmente combinado com aditivos adequados de qualquer natureza em proporgóes mínimas, cujos aditivos nao introduzem um efeito deletério significativo na pele. Os referidos aditivos podem facilitar a administragao á pele e/ou podem ser úteis para preparagäo das composigoes desejadas. Estas composigoes podem ser administradas de vários modos, p.ex., como um pensó transdérmico, como um adesivo, como urna pomada. Os compostos da presente invengäo podem ser também administrados através deste modo. Assim sendo, em geral, os compostos da presente invengäo podem ser administrados aos pulmóes na forma de urna solugáo, urna suspensäo ou um pó seco. É especialmente vantajoso formular as composigóes farmacéuticas acima mencionadas em forma de dosagem unitária para facilidade de administragao e uniformidade de dosagem. A forma de dosagem unitária como usada aquí refere-se a unidades físicamente discretas adequadas como dosagens unitárias, contendo cada unidade urna quantidade pré-determinada de ingrediente ativo calculada para produzir o efeito terapéutico desejado em associagáo ao transportador farmacéutico requerido. Exemplos de tais formas de dosagem unitária sao comprimidos (incluindo comprimidos sulcados ou revestidos), cápsulas, pílulas, pacotes de pó, bolachas, supositorios, solugóes injetáveis ou suspensoes e similares, e seus múltiplos segregados.
Aqueles com pericia no tratamento de infecgáo pelo VIH seráo capazes de determinar a quantidade eficaz a partir dos resultados de teste apresentados doravante. Em geral é contemplado que urna quantidade diária eficaz seria de 0,01 mg/kg a 50 mg/kg de peso corporal, mais preferencialmente de 0,1 mg/kg a 10 mg/kg de peso corporal. Pode ser apropriado administrar a dose requerida como duas, trés, quatro ou mais subdoses a intervalos apropriados ao longo do día. As referidas subdoses podem ser formuladas como formas de dosagem unitária, por exemplo, contendo 1 a 1000 mg, e em particular 5 a 200 mg de ingrediente ativo por forma de dosagem unitária. A dosagem e frequéncia de administragao exatas dependem do composto particular da fórmula I usado, da condigáo particular sendo tratada, da gravidade da condigáo sendo tratada, da idade, peso, e condigáo física geral do paciente particular bem como outra medicagáo que o individuo possa estar a tomar, como é bem conhecido daqueles peritos na técnica. Além do mais é evidente que a quantidade eficaz pode ser diminuida ou aumentada dependendo da resposta do sujeito tratado e/ou dependendo da avaliagáo do médico prescrevendo os compostos da presente invengäo. As gamas de quantidades eficazes mencionadas acima sao portanto apenas diretrizes e nao se destinam a limitar o ámbito ou uso da invengäo em qualquer medida.
Igualmente, a combinagäo de um ou mais compostos antirretrovirais adicionáis e um composto da fórmula (II) pode ser usada como um medicamento. Assim sendo, a presente invengäo relaciona-se também com um produto contendo (a) um composto da fórmula (I), e (b) um ou mais compostos antirretrovirais adicionáis, como urna preparagäo combinada para uso simultáneo, separado ou sequencial no tratamento anti-VIH. Os diferentes fármacos podem ser combinados em preparagóes separadas ou numa preparagäo única, em conjunto com transportadores farmacéuticamente aceitáveis. Os referidos outros compostos antirretrovirais podem ser quaisquer outros compostos antirretrovirais tais como inibidores da transcriptase reversa de nucleosídeos (NRTIs), p.ex., zidovudina (AZT), didanosina (ddl), zalcitabina (ddC), lamivudina (3TC), estavudina (d4T), emtricitabina (FTC) , abacavir (ABC), amdoxovir (DAPD), elvucitabina (ACH-126,443), apricitabina (AVX 754, (-)-dOTC), fozalvudina tidoxil (FZT, HDP-990003), fosfazida, KP-1461, racivir (PSI-5004), MIV-210, e GS-9131; inibidores da transcriptase reversa nao de nucleosídeos (NNRTIs) tais como delavirdina (DLV), efavirenz (EFV), nevirapina (NVP), dapivirina (TMC120), etravirina (ETR, TMC125), rilpivirina (TMC278), IDX899, RDEA-806, UK-453601, RDEA-427, e UC-781; inibidores da transcriptase reversa de nucleótidos (NtRTIs), p.ex., tenofovir e seu pró-fármaco fumarato de disoproxil de tenofovir (TDF); inibidores da protease, p.ex., ritonavir (RTV), saquinavir (SQV), lopinavir (ABT-378, LPV), indinavir (IDV), amprenavir (VX-478), nelfinavir (AG-1343), atazanavir (BMS 232,632), darunavir (TMC114), fosamprenavir (GW433908 ou VX-175), brecanavir (GW-640385, VX-385), tipranavir (PNU-140690), DG-17, SPI256, PPL-100 (MK 8122), e TMC310911; inibidores da entrada, que compreendem inibidores da fusäo (p.ex., enfuvirtida (T-20) sifuvirtida, HRG-214, albuvirtida, SUC-HAS, e maC46/M87o) , inibidores da anexagáo, moduladores da biossintese de colesterol e corticosteroides intracelulares (p.ex., SP-01A), e inibidores do correcetor, estes últimos compreendem os antagonistas de CCR5 (p.ex., CCR5mAb004, maraviroc (UK-427,857), PRO-14 0, TAK-220, TAK-652, PF232798, vicriviroc (SCH-D, SCH-417,690), GSK-706769, nifeviroc, e SCH-532706) e antagonistas de CXR4 (e.g. AMD-070), exemplos adicionáis de inibidores da entrada säo TNX-355, INCB 9471, BMS-488043, nonacina, e VGV-1; inibidores da maturagáo, p.ex., bevirimat (PA-457) e vivecon; e inibidores da integrase viral, p.ex., raltegravir (MK-0518), elvitegravir (JTK-303, GS-9137), BMS-53 815 8, S-349572, JTK-656 S-247303, e GS- 265744 .
Os seguintes exemplos destinam-se a ilustrar a presente invengäo e nao limitam o seu ámbito a eles.
Exemplos
Cromatografía em camada fina (TLC) analítica foi realizada em placas 60 F254 de silica gel (Merck) com visualizagáo por ultravioleta, permanganato de potássio ou ácido fosfomolíbdico. A cromatografía em coluna de silica gel foi realizada em cartuchos de silica gel SuperFlash® (50 ym) ou GraceResolv® (35 - 45 ym) . Os espetros de ressonancia magnética nuclear (NMR) 1H foram registados a 400 ou 500
MHz. Os desvíos químicos δ sao dados em ppm com referencia ao tetrametilsilano (TMS) e os valores J em Hz. A multiplicidade é indicada usando as seguintes abreviaturas: s para singleto, s br, para singleto ampio, d para dobleto, t para tripleto, q para quarteto, spt para septeto e m para multipleto. As rotagóes óticas [a]20D sao relatadas em deg/dm e a concentragáo c é dada em g/100 mL no solvente especificado. Os espetros de infravermelho (IR) e dicroísmo circular vibracional (VCD) foram registados numa célula de 0,09 mm com janela de CaF2, num instrumento Bruker Equinox-55® com um módulo PMA-37 a resolugáo de 4 cm-1 (as amostras foram dissolvidas em DMSO-de) . Os VCDs foram recolhidos tres vezes com um tempo de recolha de hora cada um. A nao ser que de outro modo indicado, o excesso enantiomérico (ee) foi determinado por cromatografía com fluido supercrítico (SFC) numa coluna Chiralpak Daicel® AD-H. Os nomes dos compostos foram gerados usando ChemDraw Ultra®, versáo 9.0 (CambridgeSoft®) .
Exemplo 1: Síntese de tert-but(S)-2-(4-bromofenil)-1-((S)- 5-oxotetraidrofuran-2-il)etil-carbamato ((-)-Precursor 1) Método Ά:
Passo 1: 2,2,6,6-Tetrametilpiperidina-l-oxil (TEMPO; 1,6 g, 1,0 mmol, 0,002 eq.) e NaBr (6 g, 500 mmol, 1,0 eq.) foram sucessivamente adicionados sob agitagäo vigorosa a urna solugäo de álcool 1-1 ([No. CAS: 4654-39-1]; 100 g, 500 mmol, 1,0 eq.) em diclorometano (2300 mL) a 0°C. Uma solugäo aquosa saturada de NaHC03 e NaOCl a 10% (400 mL) foram adicionados. A mistura foi agitada durante aproximadamente dez minutos até a cromatografía de camada fina (TLC) ter indicado que o material de inicio tinha desaparecido. A camada de diclorometano foi separada. A camada aquosa foi rápidamente extraída com éter de dietilo. As fases orgánicas combinadas foram lavadas com uma solugäo aquosa de NaHS03 (10%) e KI (4%), salmoura, e secas com sulfato de sodio anidro. Após remogäo da maioria dos voláteis sob vácuo (manter temperatura abaixo de 25°C), a solugäo resultante de aldeído 1-2 em diclorometano (50 mL) foi usada como tal diretamente no próximo passo.
Passo 2: Urna mistura da solugäo em diclorometano de aldeído 1-2 (460 mmol, 1,0 eq.), carbamato de tert-butilo (107,8 g, 920 mmol, 2,0 eq.), benzenossulfinato de sodio (151,0 g, 920 mmol, 2,0 eq.) e ácido fórmico (42,3 g, 920 mmol, 2,0 eq.) numa mistura de metanol (250 mL) e água (500 mL) foi agitada a 40°C durante 24 horas (a reagao foi monitorizada por TLC). A mistura reacional foi arrefecida até á temperatura ambiente. O precipitado resultante foi filtrado, lavado com água e éter de dietilo, e seco sob pressáo reduzida para originar 150 g (72% comegando a partir do Intermediário 1-1) de Intermediário (rae)-1-3.
Passo 3: A urna mistura de diisopropilamina (26 g, 250 mmol, 1,1 eq.) em tetraidrofurano seco (THF; 100 mL) foi adicionado gota a gota n-butillí tio (100 mL de solugäo a 2,5 M, 250 mmol, 1,1 eq.) a -78°C sob nitrogénio. Permitiu-se que a mistura arrefecesse até á temperatura ambiente e foi agitada á temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura foi rearrefecida até -78°C e urna solugäo de 2(5H)-furanona (21 g, 250 mmol, 1,1 eq.) em THF seco (100 mL) foi adicionada gota a gota. Após agitagáo durante outros 20 minutos a -78°C, a mistura reacional foi transferida para urna solugäo de Intermediário (rae)-1-3 (100 g, 227 mmol, 1,0 eq.) em THF seco (800 mL) a -78°C. A mistura resultante foi agitada durante outros 20 minutos a -78°C. Urna solugäo aquosa saturada de NaHCCh foi adicionada gota a gota á mistura reacional a -40°C, a extragáo foi feita com acetato de etilo. As fases orgánicas combinadas foram lavadas com urna solugäo aquosa saturada de Na2CÜ3 e salmoura, secas com
MgSCh e concentradas sob vácuo. 0 residuo resultante foi lavado com urna mistura de éter de dietilo / metanol (10:1) e seco para originar 40 g de (rae)-1-4. O liquido rnae foi evaporado até á secura, o residuo resultante foi purificado por cromatografía líquida de elevado desempenho (HPLC) preparativa para originar 10 g de (rae)-1-4. No total foram obtidos 50 g (58%) do produto racémico.
Passo 4: A mistura racémica {rae)-1-4 foi separada através de cromatografía com fluido supercrítico (SFC) preparativa numa coluna Chiralpak Daicel® AD-20 pm (50 χ 300 mm, fase móvel: propan-2-ol a 30% isocrático, caudal: 130 mL/min). O (1S,25)-enantómero 1-4 desejado foi isolado como a segunda fragäo com um rendimento de 42%.
Passo 5: Urna solugäo de Intermediário 1-4 (10 g, 26,2 mmol, 1,0 eq.) em THF (200 mL) foi hidrogenada (1,0 atm de hidrogénio) a 25°C durante tres horas com Ni de Raney (2 g, razäo de massas de 20%) como catalisador. Após captagäo de hidrogénio (1,0 eq.), o catalisador foi filtrado e o filtrado foi evaporado. O residuo foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel para dar 7,0 g (70%, ee > 95%) de (-)-Precursor 1 como cristais brancos. 1H NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,39 (s, 9 H) 2,05 - 2,23 (m, 2 H) 2,45 - 2,61 (m, 2 H) 2,85 (dd, J = 13,5, 8,6 Hz, 1 H) 2,91 (dd, J = 13,7, 7,4 Hz, 1 H) 3,98 (q, J = 8,5 Hz, 1 H) 4,46 (t, J = 7,6 Hz, 1 H) 4,62 (d, J = 9,8 Hz, 1 H) 7,12 (d, J = 7,8 Hz, 2 H) 7,43 (d, J = 8,0 Hz, 2 H) ; [a]20D = -23,4° (c 0,99, CH3CN) . Método B:
Passo 1: Iodo (2,2 g, 8,0 mmol, 0,03 eq.) foi adicionado a um frasco de reagäo carregado com magnésio (79,8 g, 3282 mmol, 12,3 eq.) e THF (2,7 L) sob nitrogénio. A mistura reacional foi aquecida até 30-35°C e mantida a esta temperatura. 4-Bromo-buteno (361,4 g, 2677 mmol, 10,0 eq.) foi lentamente adicionado ao longo de um periodo de duas horas, a temperatura da reagäo foi mantida abaixo de 65°C. Após a adigäo estar completa, a mistura reacional foi agitada durante um mínimo de 2 horas a 60-65°C e depois arrefecida num banho de gelo. Urna solugao de amida 1-5 ([No. CAS: 949885-93-2]; 103,7 g, 267 mmol, 1,0 eq.) em THF (560 mL) foi adicionada gota a gota á mistura reacional ao longo de um período de pelo menos urna hora, a temperatura foi mantida abaixo de 3°C. Permitiu-se que a mistura reacional aquecesse até á temperatura ambiente e foi agitada durante um mínimo de quatro horas a esta temperatura. Após arrefecimento até -5°C, a reagäo foi extinta pela adigäo lenta de urna solugäo aquosa de cloreto de amonio. A camada orgánica foi separada, lavada com salmoura e parcialmente concentrada sob pressao reduzida. Heptano foi adicionado, a mistura foi novamente parcialmente concentrada sob pressäo reduzida e arrefecida até 15°C. 0 precipitado foi filtrado e lavado com heptano. Após secagem a 45°C durante 16 horas foram obtidos 112,2 g (72% por peso, rendimento de 80%) de Intermediário 1-6 em bruto.
Passo 2: Uma solugäo de RUCI3-H20 (2,04 g, 7 mmol, 0,03 eq.) em água (77 mL) foi adicionada a uma solugäo de NaI04 (236 g, 1105 mmol, 5,5 eq.) em água (1,9 L). Esta mistura reacional foi adicionada ao longo de 30 minutos a uma solugäo de Intermediário 1-6 (107,7 g (71% por peso), 201 mmol, 1,0 eq.) em acetona (1,9 L) ä temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada ä temperatura ambiente até a conversäo estar completa (aproximadamente uma hora) . Uma solugäo aquosa de Na2S203 foi adicionada á mistura reacional ao longo de 30 minutos. A mistura reacional foi concentrada sob pressäo reduzida até náo sair mais acetona. Água (1,9 L) foi adicionada ao residuo, a suspensáo foi agitada durante 30 minutos á temperatura ambiente. O precipitado foi filtrado e o bolo húmido foi re-empastado em água. O bolo húmido obtido após filtragáo e lavagem com água foi seco a 45°C para dar 80,6 g (90% por peso, rendimento de 90%) de Intermediário 1-7 em bruto.
Passo 3: Uma mistura de Intermediário 1-7 (67,0 g (90% por peso), 150 mmol, 1,0 eq.) e KHCO3 (75,1 g, 750 mmol, 5,0 eq.) em dimetilf ormamida (DMF; 1200 mL) foi agitada á temperatura ambiente durante 20 minutos. Iodometano (42,6 g, 300 mmol, 2,0 eq.) foi adicionado ao longo de um periodo de 20 minutos á mistura reacional, a mistura reacional foi agitada á temperatura ambiente durante sete horas. Após a mistura reacional ser filtrada sobre Celite, uma solugäo aquosa de cloreto de amonio foi adicionada a uma tal taxa que a temperatura permaneceu abaixo de 25°C. De seguida, éter de tert-butilo e metilo foi adicionado e a mistura foi filtrada sobre Celite. A camada orgánica foi separada, lavada com salmoura e concentrada sob pressáo reduzida. Heptano foi adicionado ao residuo, após a suspensáo ter sido agitada durante seis horas á temperatura ambiente, o precipitado foi filtrado, lavado com heptano e seco num forno de vácuo a 40°C durante 16 horas. Foram obtidos 50,0 g (91% por peso, rendimento de 73%) de Intermediário 1-8.
Passo 4: N-Selectrida (135 mL de urna solugáo a 1 M em THF, 135 mmol, 1,24 eq.) foi adicionada gota a gota ao longo de um mínimo de 1,5 horas a urna solugáo de éster 1-8 (45 g, 109 mmol, 1,0 eq.) em THF seco (900 mL) a -65°C sob nitrogénio. Após a mistura reacional ter sido agitada durante urna hora extra a -65°C, a temperatura foi aumentada até -35°C e a agitagáo foi continuada durante 30 minutos a esta temperatura. Subsequentemente, urna solugáo aquosa de ácido crítico a 10% foi adicionada gota a gota a 0 a 10°C, seguida pela adigáo de éter de tert-butilo e metilo. Após a mistura ter sido agitada durante 30 minutos, a camada orgánica foi separada, lavada com urna solugáo aquosa saturada de NaHCCh e salmoura, e concentrada sob pressáo reduzida. O residuo foi redissolvido em éter de tert-butilo e metilo e concentrado novamente sob pressáo reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografía flash em coluna de silica gel (eluente: heptano / éter de tert-butilo e metilo 2:1) para dar 37,0 g (94%, ee > 95%) de (-)-Precursor 1 como um sólido esbranquigado. [a]20D = -20,9° (c 1,0, MeOH)
As aminas primárias mencionadas em baixo foram usadas como Precursores representando exemplos da fórmula R2-NH2 como definida anteriormente. Aquelas para as quais nao está disponivel nenhum fornecimento comercial podem ser sintetizadas de acordo com procedimentos da literatura (Precursores 2, 14a, 15 e 17) ou através de procedimentos descritos nos Exemplos 2-13 (Precursores 3 - 14b).
Exemplo_2j_(3S, 4S) -4-amino-8-clorocroman-3-ol_( ( + ) -
Precursor 3)
Passo 1: Uma solugäo arrefecida em gelo de ácido 3-bromopropiónico (298 g, 1,95 mol, 1,25 eq.) e NaOH (156 g de uma solugäo aquosa a 50%, 1,95 mol, 1,25 eq.) em ägua (500 mL) foi adicionada ao longo de um periodo de 90 minutos a uma mistura de 2-clorofenol ([No. CAS: 95-57-8]; 200 g, 1,56 mol, 1,0 eq.) e NaOH (124 g de uma solugäo aquosa a 50%, 1,56 mol, 1,0 eq.) em ägua (1 L) ä temperatura de refluxo. A mistura reacional foi agitada ä temperatura de refluxo durante tres horas. Após arrefecimento até á temperatura ambiente, a mistura reacional foi acidificada com uma solugäo aquosa concentrada de ácido cloridrico. O precipitado foi filtrado e lavado com ägua para dar uma primeira colheita de ácido 2-2. O filtrado foi extraído com diclorometano, as fases orgánicas combinadas foram subsequentemente extraídas com NaHCCb saturado. A camada aquosa foi acidificada com urna solugáo aquosa concentrada de ácido clorídrico; o precipitado foi filtrado e lavado com água para dar urna segunda colheita 2-2. Após secagem num forno de vácuo ao longo do fim de semana foram obtidos 112 g (36%) e Intermediário 2-2 como um sólido branco.
Passo 2: Urna solugáo de ácido 2-2 (112 g, 558 mmol, 1,0 eq.) e algumas gotas de DMF em diclorometano (1,5 L) foi arrefecida num banho de gelo. Cloreto de oxalilo (142 g, 1,12 mol, 2,0 eq.) foi adicionado gota a gota, permitiu-se que a mistura reacional aquecesse até á temperatura ambiente e foi agitada durante a noite. O solvente foi concentrado sob pressáo reduzida. O residuo foi reconstituido em diclorometano (1,5 L). Tricloreto de aluminio (89 g, 670 mmol, 1,2 eq.) foi adicionado porgáo a porgáo e a mistura reacional foi agitada durante a noite á temperatura ambiente. A mistura reacional foi lentamente vertida numa solugáo arrefecida de ácido clorídrico a 1 M. As camadas foram separadas e a fase de água foi extraída com diclorometano. As camadas orgánicas combinadas foram lavadas com urna solugáo aquosa saturada de Na2CÜ3 e salmoura, secas com MgS04 anidro e concentradas sob pressáo reduzida, para obter 104 g (102%) de Intermediário 2-3 em bruto.
Passo 3: Bromo (30,7 mL, 598 mmol, 1,05 eq.) foi lentamente adicionado a urna solugáo de Intermediário 2-3 em bruto (104 g) em diclorometano á temperatura de refluxo. Após a adigáo estar completa, a mistura resultante foi agitada á temperatura de refluxo durante 30 minutos. A mistura reacional foi arrefecida até á temperatura ambiente, lavada com uma solugäo aquosa saturada de metabissulfito de sodio e salmoura, seca com MgSCq anidro, e concentrada sob vácuo para dar uma mistura de dibromo 2-4 e monobromo 2-5. 0 residuo foi dissolvido em ácido acético (750 mL), e sulfito de sodio (93 g, 740 mmol) foi adicionado. A mistura reacional foi agitada a 70°C durante tres horas. A mistura reacional foi arrefecida até á temperatura ambiente e parcialmente evaporada, água e diclorometano foram adicionados. A camada orgánica foi separada e concentrada sob pressáo reduzida. O Intermediário 2-5 em bruto foi usado como tal no próximo passo (nao foi determinado nenhum rendimento).
Passo 4: NaBH4 (21,7 g, 574 mmol) foi adicionado em porgoes a uma solugäo de Intermediário 2-5 em bruto em metanol (1,5 L) a 0°C e a mistura foi agitada á temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura reacional foi parcialmente concentrada sob pressáo reduzida, e o residuo foi diluido com acetato de etilo. A fase orgánica foi lavada com salmoura, seca com sulfato de magnésio anidro e concentrada sob pressáo reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano -► diclorometano / metanol 96:4) para proporcionar 105,5 g (67% comegando a partir do Intermediário 2-3) de Intermediário 2-6.
Passo 5: Ácido sulfúrico concentrado (16 mL, 300 mmol, 2,0 eq.) foi adicionado gota a gota a uma solugäo de Intermediário 2-6 (39,5 g, 150 mmol, 1,0 eq.) em acetonitrilo (800 mL) . A reagáo foi agitada a 45-50°C até náo estar presente mais material de inicio (cerca de cinco horas) e depois concentrada sob pressáo reduzida. Água (800 mL) e acetonitrilo (200 mL) foram adicionados, a mistura reacional foi agitada á temperatura de refluxo durante dois dias. A mistura reacional foi depois arrefecida até á temperatura ambiente, lavada com diclorometano e basificada com urna solugäo aquosa de NaOH a 50% NaOH até pH ~ 12-13. O precipitado foi filtrado, lavado com água e seco num forno de vácuo para dar 25,2 g (84 %) de Precursor 3 racémico. A mistura racémica foi separada através de HPLC preparativa numa coluna Chiralpak Daicel® AD (fase móvel: acetonitrilo), o (3S,4S)-enantiómero desejado ((+)-Precursor 3) foi isolado como a primeira fragäo (ee > 95%). 2Η NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,92 (s. la., 2 H) 3,84 -3,92 (m, 2 H) 4,14 (dd, J = 10,9, 2,5 Hz, 1 H) 4,17 (dd, J = 11,1, 5,5 Hz, 1 H) 5,17 (s. la., 1 H) 6,85 (t, J = 7,8 Hz, 1 H) 7,23 (d, J = 7,6 Hz, 1 H) 7,41 (d, J = 7,8 Hz, 1 H) ; [a]20D = +59,2° (c 0,37, MeOH) . A configuragäo absoluta de ( + ) -Precursor 3 foi estabelecida por comparagäo da rotagäo ótica ([a]20D = +45,8° (c 0,27, MeOH)) após remogäo redutora do cloro (gás de hidrogénio (1 atm), paládio em carbono como catalisador) com aquela do (+)-Precursor 2.
Exemplo 3: Sintese de (rae)-cis-4-amino-7-clorocroman-3-ol ((rae)-Precursor 4) O (rae)-Precursor 4 foi preparado a partir de 3-clorofenol usando os procedimentos como exemplificado para a preparagäo de (rae)-Precursor 3. 2Η NMR (400 MHz, DMSO-dö) δ ppm 1,83 (s. la., 2 H) 3,79 - 3,89 (m, 2 H) 4,03 - 4,12 (m, 2 H) 5,12 (s. la., 1 H) 6,76 (d, J = 2,0 Hz, 1 H) 6,90 (dd, J = 8,2, 2,0 Hz, 1 H) 7,44 (d, J = 8,4 Hz, 1 H) .
Exemplo 4: Síntese de (35,45)-4-amino-6-clorocroman-3-ol ( (-)-Precursor 5)
Passo 1: Dicarbonato de di-tert-butilo (14,5 g, 66,6 mmol, 1,1 eq.) foi dissolvido em THF (100 mL) , a solugäo foi arrefecida até 0°C e agitada. (3S,4S)-4-Amino-croman-3-ol ((+)-Precursor 2) (10 g, 60,5 mmol, 1,0 eq.) e NaHC03 (5,1 g, 60,5 mmol, 1,0 eq.) foram simultáneamente adicionados enquanto se mantinha boa agitaqäo. A mistura reacional foi agitada ä temperatura ambiente durante quatro horas. O solvente foi parcialmente evaporado, foi adicionada água e a mistura resultante foi extraída com dietiléter. Os extratos orgánicos combinados foram lavados com urna solugäo de ácido cítrico a 10% e salmoura, secos com MgS04, filtrados e evaporados até á secura para dar 21 g de carbamato 4-1 em bruto.
Passo 2: O carbamato 4-1 em bruto foi dissolvido em DMF (100 mL) e N-clorossuccinimida (NCS; 8,9 g, 66,6 mmol, 1,1 eq.) foi adicionada. A mistura reacional foi agitada a 80°C durante urna hora. A mistura reacional foi arrefecida até á temperatura ambiente, diluida com dietiléter, lavada com uma solugäo aquosa saturada de Na2CÜ3 e salmoura, seca com MgSCh anidro e concentrada sob pressäo reduzida para dar 16,3 g (82% ao longo de dois passos) de Intermediário 4-2 em bruto.
Passo 3: Uma solugäo de 4-2 (16,3 g, 54,2 mmol, 1,0 eq.) e ácido trifluoroacético (TFA; 124 g, 1084 mmol, 20,0 eq.) em diclorometano (100 mL) foi agitada á temperatura ambiente durante uma hora. A mistura reacional foi basificada com uma solugäo saturada de Na2CÜ3 e extraida com diclorometano. As fases orgánicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, e secas com MgSCp. O produto em bruto foi recristalizado a partir de acetato de etilo para dar 6,8 g (61%) de (-)-Precursor 5 (ee > 95%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-dö) δ ppm 1,88 (s. la., 2 H) 3,79 - 3, 90 (m, 2 H) 4,05 (dd, J = 11,5, 2,5 Hz, 1 H) 4,08 (dd, J = 11,0, 4,8 Hz, 1 H) 5,12 (s. la., 1 H) 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) 7,10 (dd, J = 8,7, 2,6 Hz, 1 H) 7,47 (d, J = 2,3 Hz, 1 H) ; [a]20D = - 20,7° (c 0,36, MeOH).
Exemplo 5: Sintese de (35,45)-4-amino-8-fluorocroman-3-ol ( ( + )-Precursor 6) O (rae)-cis-4-amino-8-fluorocroman-3-ol foi preparado a partir de 8-fluorocroman-4-ona comercialmente disponivel [No. CAS: 11141-00-5] usando os procedimentos como exemplificado para a preparagäo de (rae)-Precursor 3. A mistura racémica foi separada através de SFC preparativa numa coluna Chiralpak Daicel® AD-H (30 χ 250 mm, fase móvel: metanol a 32% isocrático (contendo isopropilamina a 0,2 %) / C02 a 68%, caudal: 50 mL/min) , o (35, 45)- enantiómero desejado (( + )-Precursor 6) foi isolado como a primeira fragäo (ee > 95%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-dö) δ ppm 1,90 (s. la., 2 Η) 3, 84 - 3, 92 (m, 2 Η) 4,09 (dd, J = 11,1, 2,7 Hz, 1 Η) 4,14 (dd, J = 10,9, 5,5 Hz, 1 Η) 5,15 (s. la., 1 Η) 6,82 (td, J = 7,9, 5,1 Hz, 1 Η) 7,01 (ddd, J = 11,3, 8,2, 1,4 Hz, 1 Η) 7,24 (d, J = 7,8 Hz, 1 Η) ; [α]20ο = +24,6° (c 0,43, MeOH). A configuragäo estereoquímica absoluta foi determinada usando VCD.
Exemplo 6: Síntese de (35,45)-4-amino-7-fluorocroman-3-ol ( ( + ) - (Precursor 7) O (rae)-cís-4-Amino-7-fluorocroman-3-ol foi preparado usando os procedimentos como exemplificado para a preparagáo de (rae)-Precursor 3. Urna mistura de (rac)-cis-4-amino-7-fluorocroman-3-ol (31,8 g, 174 mmol, 1,0 eq.) e ácido ( + ) - (S)-mandélico (26,4 g, 174 mmol, 1,0 eq.) foi submetida a refluxo em metanol (600 mL) até ser obtida urna solugáo límpida. O sal de ácido mandélico, obtido após cristalizagáo durante a noite, foi recolhido por filtragáo e dissolvido numa solugáo aquosa de NaOH a 3 M. A camada de água foi extraída com acetato de etilo, as fases orgánicas combinadas foram secas com MgS04 anidro e concentradas sob pressáo reduzida para dar 6,5 g (21%) de ( + )-Precursor 7 enantiomericamente enriquecido (ee > 95%) . 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,03 (s. la., 2 H) 3,81 - 3,86 (m, 2 H) 4,01 - 4,10 (m, 2 H) 5,09 (s. la., 1 H) 6,53 (dd, J = 10,6, 2,6
Hz, 1 H) 6,68 (td, J = 8,5, 2,6 Hz, 1 H) 7,43 (dd, J = 8,4, 7,2 Hz, 1 H) ; [a] 20D = +36,0° (c 0,42, MeOH). A configuragäo estereoquímica absoluta foi determinada usando VCD.
Exemplo 7: Síntese de (35,45)-4-amino-6-fluorocroman-3-ol (( + )-(Precursor 8) 0 (rac)-cis-4-Amino-6-fluorocroman-3-ol foi preparado comegando a partir de 6-fluorocroman-4-ona comercialmente disponivel [No. CAS: 66892-34-0] usando os procedimentos como exemplificado para a preparagäo de (rac)-Precursor 3. (rac)-cis-4-amino-6-fluorocroman-3-ol (7,63 g, 41,7 mmol, 1,0 eq.) foi dissolvido em etanol (30 mL) enquanto se aquecia, ácido (-) -(R)-mandélico (6,68 g, 45,8 mmol, 1,1 eq.) foi adicionado porgäo a porgäo e a solugäo foi aquecida até ä temperatura de refluxo. Depois, heptano (6 mL) foi adicionado gota a gota. Permitiu-se que a suspensáo formada arrefecesse até á temperatura ambiente e foi deixada a repousar durante 1 hora. A filtragáo deu o sal de ácido mandélico como um sólido branco que foi recristalizado a partir de etanol. O sal obtido foi dissolvido numa solugáo aquosa de NaOH a 2 M. A fase de água foi extraída com acetato de etilo, as fases orgánicas combinadas foram secas com MgSCh anidro e concentradas sob pressáo reduzida para dar 2,0 g (26%) de (+)-Precursor 8 enantiomericamente enriquecido (ee = 82%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,88 (s. la., 2 H) 3,79 - 3,89 (m, 2 H) 4,01 (ddd, J = 11,1, 2,6, 1,0 Hz, 1 H) 4,06 (dd, J = 11,1, 5,1
Hz, 1 H) 5,08 (d, J = 3,5 Hz, 1 H) 6,69 (dd, J = 9,0, 4,9 Hz, 1 H) 6,90 (td, J = 8,6, 3,3 Hz, 1 H) 7,24 (dd, J = 9,7, 3,2 Hz, 1 H) ; [a]20D = +25,8° (c 0,50, MeOH) . A configuragáo estereoquímica absoluta foi determinada usando VCD.
Exemplo 8: Síntese de (35,45)-4-amino-6,8-difluorocroman-3-ol ( ( + )- (Precursor 9) 0 (rac)-cis-4-Amino-6,8-difluorocroman-3-ol foi preparado comegando a partir de 2,4-difluorofenol [No. CAS: 367-27-1] usando os procedimentos como exemplificado para a preparagäo de (rac)-Precursor 3. A mistura racémica foi separada através de SFC preparativa numa coluna Chiralpak Daicel® AD-H (30 χ 250 mm, fase móvel: metanol a 50% isocrático (contendo isopropilamina a 0,2%) / C02 a 50%, caudal: 50 mL/min), o (35,45)-enantiómero desejado ( ( + ) -
Precursor 9) foi isolado como a primeira fragäo (ee > 95%). ΧΗ NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,92 (s. la., 2 H) 3,84 -
3,90 (m, 2 H) 4,11 (ddd, J = 11,2, 2,2, 0,8 Hz, 1 H) 4,16 (dd, J = 11,1, 4,6 Hz, 1 H) 5,19 (s. la., 1 H) 7,06 (ddd, J = 11,3, 8,5, 3,1 Hz, 1 H) 7,14 (dm, J = 9,7 Hz, 1 H) ; [oc] 20D = +9,7° (c 0,41, MeOH). A configuragäo estereoquímica absoluta foi determinada usando VCD.
Exemplo_9a :_Sintese_de_(35, 45) -4-amino-8-cloro-6- fluorocroman-3-ol ( ( + )-Precursor 10a) 0 (rac)-cis-4-Amino-8-cloro-6-fluorocroman-3-ol foi preparado comegando a partir de 2-cloro-4-fluorofenol [No. CAS: 1996-41-4] usando os procedimentos como exemplificado para a preparagäo de (rac)-Precursor 3. 0 (35, 45)- enantiómero desejado (( + )-Precursor 10a) foi isolado através de SFC preparativa em coluna Chiralpak Daicel® AD-H (30 χ 250 mm, fase móvel: metanol a 40% isocrático (contendo isopropilamina a 0,6%) / C02 a 60%, caudal: 50 mL/min), o (35,45)-enantiómero desejado ((+)-Precursor 10a) foi isolado como a primeira fragäo (ee > 95%) . 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,03 (s. la., 2 H) 3,84 - 3,91 (m, 2 H) 4,15 (ddd, J = 11,3, 2,5, 0,8 Hz, 1 H) 4,20 (dd, J = 11,3, 4,4 Hz, 1 H) 5,21 (s. la., 1 H) 7,20 (dd, J = 8,2, 3,1 Hz, 1 H) 7,30 (ddd, J = 9,5, 3,1, 0,9 Hz, 1 H) ; [a]20D = +39,7° (c 1,0, MeOH). A configuragäo estereoquímica absoluta foi determinada usando VCD.
Exemplo 9b: Síntese de_(35,45)-4-amino-6-fluoro-8- metilcroman-3-ol ( ( + )-Precursor 10b)
O (rac)-cis-4-amino-6-fluoro-8-metilcroman-3-ol foi preparado comegando a partir de 2-metil-4-fluorofenol comercialmente disponível [No. CAS: 452-72-2] (9b-l) usando um procedimento de síntese ligeiramente modificado como exemplificado para a preparagäo de (rac)-Precursor 3.
Passo 1: A urna solugäo de NaH (9,1 g de uma dispersäo a 60% em óleo, 238 mmol, 1,2 eq.) em DMF (300 mL) a 0°C foi adicionada gota a gota uma solugäo de 2-metil-4-fluorofenol [No. CAS: 452-72-2]; 25,0 g, 198 mmol, 1,0 eq.) em DMF (40 mL). A suspensäo foi agitada a temperatura ambiente durante 30 minutos e arrefecida novamente até 0°C, uma solugäo de l-cloro-3-hidroxipropano (22,5 g, 238 mmol, 1,2 eq.) em DMF (40 mL) foi adicionada gota a gota. A reagäo foi aquecida durante duas horas a 60°C (uma quantidade adicional de NaH e l-cloro-3-hidroxipropana pode ser necessária para completar a reagäo). A mistura reacional foi arrefecida até á temperatura ambiente e água foi adicionada, a camada de água foi extraída com éter de dietilo, as fases orgánicas combinadas foram lavadas com urna solugáo aquosa de NaOH e salmoura, secas com MgS04 anidro e concentradas sob pressáo reduzida. 0 produto em bruto foi usado como tal no próximo passo.
Passo 2: 0 Intermediário 9b-2 (12,9 g, 70 mmol) foi dissolvido numa mistura 1:1 de CH3CN / H20 (425 mL). TEMPO (1094 mg, 7 mmol., 0,1 eq.) e bis (acetoxi)-iodobenzeno (BAIB; 56,4 g, 175 mmol, 2,5 eq.) foram adicionados porgäo a porgäo e a mistura reacional foi agitada á temperatura ambiente durante a noite (TEMPO e BAIB adicionáis podem ser requeridos para completar a oxidagáo). A reagáo foi extinta pela adigáo de urna solugáo aquosa de Na2S20, a fase aquosa foi extraída com DCM e as camadas orgánicas combinadas foram subsequentemente extraídas com urna solugáo aquosa de Na2C03. Após acidificagäo com um ácido clorídrico aquoso a 1 M, a fase de água foi extraída com DCM. As camadas orgánicas combinadas foram secas com MgS04 anidro e concentradas sob pressáo reduzida para originar 13,2 g (96%) de Intermediário 9b-3. Este último foi adicionalmente convertido em (rae)-cis-4-amino-6-fluoro-8-metilcroman-3-ol usando os procedimentos como exemplificado no Exemplo 2. O (3S,4S)-enantiómero desejado ((+)-Precursor 10b) foi isolado como a primeira fragáo através de HPLC preparativa numa coluna Chiralpak Daicel® AD (fase móvel: acetonitrilo) . 1H NMR (400 MHz, DMSO-dö) δ ppm 1,89 (s. la., 2 H) 2,08 (s, 3 H) 3,83 (s. la., 2 H) 4,04 (d, J = 10,9 Hz, 1 H) 4,09 (dd, J = 11,5, 4,9 Hz, 1 H) 5,07 (s. la., 1 H) 6,82 (d, J = 9,6 Hz, 1 H) 7,07 (d, J = 9,6 Hz, 1 H) ; [o¿] 20d = +50,3° (c 0,38, MeOH) . A configuragáo estereoquímica absoluta foi determinada usando VCD.
Exemplo 10a:_Sintese de_(35, 45) -4-amino-6-cloro-8- fluorocroman-3-ol ((-)-Precursor 11a) O (rac)-cis-4-Amino-6-cloro-8-fluorocroman-3-ol foi preparado comegando a partir de 4-cloro-2-fluorofenol [No. CAS: 348-62-9] usando os procedimentos como exemplificado para a preparagäo de (rac)-Precursor 3. A mistura racémica foi separada através de SFC preparativa em coluna Chiralpak Daicel® AD-H (20 χ 250 mm, fase móvel: metanol a 40% isocrático (contendo isopropilamina a 0,2%) / C02 a 60%, caudal: 50 mL/min), o (35,45)-enantiómero desejado ((-)-Precursor lia) foi isolado como a primeira fragäo (ee > 95%). ΧΗ NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,93 (s. la., 2 H) 3,88 (s. la., 2 H) 4,11 - 4,16 (m, 1 H) 4,18 (dd, J = 11,3, 4,3 Hz, 1 H) 5,22 (d, J = 3,1 Hz, 1 H) 7,22 (dd, J = 10,7, 2,5 Hz, 1 H) 7,35 (s, 1 H) ; [oc] 20D = -32,0° (c 0,42, MeOH) . A configuragäo estereoquímica absoluta foi determinada usando VCD.
Exemplo 10b: Sintese de (3S,4S)-4-amino-8-fluoro-6- metilcroman-3-ol ( ( + )-Precursor lib) 0 (rac)-cis-4-amino-8-fluoro-6-metilcroman-3-ol foi preparado comegando a partir de 4 metil-2-fluorofenol [No. CAS: 452-81-3] usando os procedimentos como exemplificado para a preparagäo de (rac)-Precursor 10b. A mistura racémica foi separada através de SFC preparativa em coluna Chiralpak Daicel® AD-H (30 χ 250 mm, fase móvel: metanol a 20% isocrático (com isopropilamina a 0,6%) / C02 a 20%, caudal: 50 mL/min), o (35,45)-enantiómero desejado ((+)-
Precursor lib) foi isolado como a primeira fragäo (ee > 95%). ΧΗ NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,82 (s. la., 2 H) 2,20 (s, 3 H) 3,84 (s la., 2 H) 4,04 - 4,12 (m, 2 H) 5,10 (s. la., 1 Η) 6,84 (dd, J = 12,1, 2,0 Hz, 1 Η) 7,05 (s. la., 1 Η) ; [oí] 20d = +88,8° (c 0,18, MeOH) . A configuragäo estereoquímica absoluta foi determinada usando VCD.
Exemplo 11: Síntese de (35,45)-4-amino-6-metilcroman-3-ol ((-)-Precursor 12) O (rae)-cis-4-Amino-6-metilcroman-3-ol foi preparado comegando a partir de 6-metil-4-cromanona [No. CAS: 39513- 75-2] usando os procedimentos como exemplificado para a preparagäo de (rae)-Precursor 3. A mistura racémica foi separada através de SFC preparativa em coluna Chiralpak Daicel® AD-H (30 χ 250 mm, fase móvel: metanol a 17% isocrático (com isopropilamina a 0,5%) / C02 a 83%, caudal: 50 mL/min), o (35,45)-enantiómero desejado ((-)-Precursor 12) foi isolado como segunda fragäo (ee > 95%) . 1H NMR (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 1,78 (s. la., 2 H) 2,20 (s, 3 H) 3,77 - 3,84 (m, 2 H) 3,94 (ddd, J = 10,7, 2,4, 1,3 Hz, 1 H) 3,96 - 4,03 (m, 1 H) 5,00 (s. la., 1 H) 6,58 (d, J = 8,2 Hz, 1 H) 6,88 (dd, J = 8,2, 2,0 Hz, 1 H) 7,19 (d, J = 2,0 Hz, 1 H) ; [a]20D = -18,7° (c 0,43, MeOH). A configuragäo estereoquímica absoluta foi determinada usando VCD.
Exemplo_12 :_Síntese_de_(4 5, 5 A) -4-amino-4,5,6,7- tetraidrobenzo[b]tiofen-5-ol ( ( + )-Precursor 13)
Passo 1: Uma solugäo de 6,7-diidro-5H-benzo[b]tiofen-4-ona (material de inicio 12-1, [No. CAS: 13414-95-4]; 39 g, 256 mmol, 1,0 eq.) em THF (150 mL) foi adicionada gota a gota a urna mistura de bis(trimetilsilil)amida de sodio (NHMDS; 307 mL de uma solugäo a 1 M em THF, 307 mmol, 1,2 eq.) e THF (200 mL) a -78°C sob atmosfera de árgon, a mistura reacional foi agitada durante 30 minutos adicionáis a -78°C. Uma solugäo de ( + ) - (8,8-dicloro- canforilsulfonil)oxaziridina (94 g, 307 mmol, 1,2 eq.) em THF (300 mL) foi adicionada gota a gota. Após ser agitada durante duas horas a -78°C, a mistura reacional foi extinta pela adigäo de um excesso de ácido acético e permitiu-se que aquecesse até á temperatura ambiente. Água e acetato de etilo foram adicionados, e a fase de água foi separada e extraída com acetato de etilo. As fases orgánicas combinadas foram secas com MgS04 anidro e concentradas sob pressáo reduzida. O residuo foi redissolvido em diclorometano (300 mL) e triturado com heptano (500 mL), o precipitado foi removido por filtragáo e lavado com éter de diisopropilo. 0 filtrado foi concentrado sob pressäo reduzida, o residuo foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: heptano -► heptano / acetato de etilo 4:6) para proporcionar 50 g (116%) de Intermediário 12-2 impuro. O produto em bruto foi usado como tal no próximo passo.
Passo 2: Hidrocloreto de O-benzilhidroxilamina (41 g, 256 mmol, 1,0 eq.) foi adicionado a urna solugáo de Intermediário 12-2 em bruto (50 g) em piridina (500 mL). A mistura reacional foi agitada á temperatura ambiente ao longo do fim de semana. A mistura foi evaporada e coevaporada duas vezes com tolueno. O residuo foi redissolvido em acetato de etilo, a fase orgánica foi lavada com urna solugao aquosa de ácido cítrico a 5% e salmoura, seca com MgSCp anidro e concentrada sob pressäo reduzida para dar 72 g de Intermediário 12-3 em bruto.
Passo 3: Complexo de borano e sulfeto de metilo (198 mL de urna solugáo a 1 M em THF, 395 mmol, 1,54 eq.) foi adicionado gota a gota a urna solugáo de Intermediário 12-3 em bruto (72 g) em THF (1 L) a 0°C. A mistura reacional foi agitada á temperatura de refluxo durante a noite. Após o solvente ter sido parcialmente removido por destilagáo (o frasco de reagáo estava equipado com um condensador de destilagáo), a reagáo foi adicionalmente agitada á temperatura de refluxo até conversáo completa. A mistura reacional foi arrefecida num banho de gelo e extinta pela adigáo cuidadosa de água. A fase de água foi saturada com NaCl e extraída várias vezes com metiltetraidrofurano. As fases orgánicas combinadas foram secas com MgS04 anidro e concentradas sob pressäo reduzida para dar urna mistura cis/trans-isomérica 8:2. O cis-isómero desejado foi isolado através de cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano -► diclorometano / amónia a 7 M em metanol 96:4), foram obtidos 17,8 g (40% ao longo de 3 passos, ee de 60% (o ee foi determinado por cromatografía líquida (LC) após formagáo de amida com ácido ( + )- (S)-mandélico)) . O ( + )-precursor 13 (17,7 g, 105 mmol, 1,0 eq.) foi recristalizado com ácido (+)-(S)-mandélico (16 g, 105 mmol, 1,0 eq.) em metanol durante a noite. O sólido branco foi filtrado. O filtrado foi concentrado e o residuo obtido foi recristalizado novamente. Ambos os lotes foram combinados e dissolvidos numa solugáo aquosa de NaOH a 3 M. A fase de água foi extraída com diclorometano, as camadas orgánicas combinadas foram secas com MgS04 anidro e concentradas sob pressáo reduzida para dar 11,5 g (65%) de (+)-Precursor 13 enantiomericamente puro (ee > 95%) . 1H NMR (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,78 - 2,03 (m, 2 H) 2,20 (s. la., 3 H) 2,76 (ddd, J = 16,6, 9,4, 6,2 Hz, 1 H) 2,93 (dd, J = 16,6, 5,3 Hz, 1 H) 3,80 - 4, 00 (m, 2 H) 6,94 (d, J = 5,0
Hz, 1 H) 7,13 (d, J = 5,3 Hz, 1 H) ; [a]20D = +59,6° (c 0,49,
MeOH). A configuragáo estereoquímica absoluta foi determinada usando VCD.
Exemplo 13: Sintese de hidrocloreto de (IS,2R,6R)-2-hidroxi-6-metilciclohexanamina ((-)-Precursor 14b)
Passo 1: A cetona 13-1 ([No. CAS: 13368-65-5]; 430 g, 3,83 mol, 1,0 eq.) e ácido para-toluenossulfónico monoidratado (pTSA-H20; 72,9 g, 0,38 mol, 0,1 eq.) em acetato de isopropenilo (2,5 L) foram submetidos a refluxo durante 6 horas a 100°C. Após a mistura reacional ter arrefecido até á temperatura ambiente foi adicionada água. A camada orgánica foi separada e lavada com urna solugáo aquosa saturada de NaHCCh e salmoura, seca com NaS04 anidro e concentrada sob vácuo para originar 530 g (90%) de urna mistura 7:10 mistura do isómero desejado 13-2A e do isómero indesejado 13-2B (a razáo isomérica foi determinada por 1H NMR). Esta mistura foi usada como tal no próximo passo.
Passo 2: A mistura isomérica 13-2A e 13-2B (106,2 g, 0,95 mol, 1,0 eq.) foi dissolvida em anidrido de ácido acético (400 mL). Ácido nítrico concentrado (61 mL, 0,95 mol, 1,0 eq.) foi adicionado gota a gota a urna tal taxa que a temperatura de reaqáo fosse mantida entre 30°C e 40°C. Após a adiqáo estar completa, a reaqáo foi agitada á temperatura ambiente durante duas horas. A TLC mostrou completaqáo da reagäo (eluente: éter de petróleo / acetato de etilo 5:1,
Rf = 0,4, dois pontos, próximos) . A mistura reacional foi adicionada gota a gota a urna solugáo saturada aquosa de NaHC03 (79, 8 g de NaHC03 em água, 0,95 mol, 1,0 eq.)· A mistura foi extraída com acetato de etilo, as camadas orgánicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com Na2S04 anidro e concentradas sob vácuo. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: éter de petróleo / acetato de etilo 97:3 -► 91:9) para originar 12,5 g (11%) de Intermediário 13-3 (o segundo ponto).
Passo 3: NaBH4 (40 g, 1,03 mol, 1,3 eq.) foi adicionado em porgoes a urna solugao de Intermediário 13-3 (125 g, 795 mmol, 1,0 eq.) em metanol seco (3,0 L) á temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada durante 30 minutos a temperatura ambiente. A mistura foi neutralizada com urna solugao aquosa de KHS04 a 10% até pH 7 e concentrada sob pressáo reduzida. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com acetato de etilo. As fases orgánicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com MgS04 anidro e concentradas sob pressáo reduzida para dar urna mistura 1:1 de Intermediário 13-4 e seu álcool epimérico. Ambos os epímeros foram separados através de SFC preparativa numa coluna Chiralpak Daicel® AD-5 pm (30 χ 250 mm, fase móvel: isopropanol a 20% isocrático / CO2 a 80%, caudal 60 mL/min), 29 g (22%) do isómero desejado 13-4 foram obtidos como a primeira fragáo. 1H NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 0,99 (d, J = 6,8 Hz, 3 H) , 1,10 (m, 1 H) , 1,50 (m, 2 H) , 1,75 - 1,91 (m, 2 H) , 2,01 (m, 1 H) , 2,50 (m, 1 H) , 2,85 (s la., 1 H) , 4,20 (dd, J = 11,6, 2,0 Hz, 1 H) , 4,51 (s, 1 H) .
Passo 4: Uma solugäo de 13-4 (29 g, 169,6 mmol, 1,0 eq.) em acetato de etilo (1,25 L) foi hidrogenada ä pressäo atmosférica durante cinco horas a 5°C com Ni de Raney (32 g) como catalisador. Após captagäo de gás de hidrogénio (3,0 eq.), o catalisador foi filtrado. Uma solugäo de ácido cloridrico em dioxano foi adicionada ao filtrado a 0°C, a mistura resultante foi agitada durante 30 minutos. O solvente foi parcialmente removido sob pressäo reduzida, o precipitado foi recolhido por filtragäo e lavado com éter de petróleo e éter de dietilo para dar 20,9 g (74%) de (-)-Precursor 14b (ee > 95%, a ee foi determinada por LC após formagäo de amida com cloreto de (S)-(+)-a-metoxi-a-trifluorometil-fenilacetilo). 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.01 (d, J = 6,5 Hz, 3 H) 1,04 - 1,19 (m, 1 H) 1,42 - 1,60 (m, 2 H) 1,70 - 1,81 (m, 1 H) 1,81 - 2,01 (m, 1 H) 1,81 - 2.01 (m, 1 H) 2,79 (dd, J = 10,8, 3,0 Hz, 1 H) 4,02 - 4,06 (m, 1 H) ; [a] 20d = -0,53° (c 1,01, MeOH) . Säo mencionados em baixo os Precursores de ácido carboxilico e carbonato requeridos como blocos de construgáo levando ä introdugäo de R3 como definido anteriormente. Aqueles para os quais náo está disponivel nenhum fornecimento comercial podem ser sintetizados de acordo com procedimentos da literatura (Precursor 23 e 24) ou através do procedimento descrito no Exemplo 14 (Precursor 22).
Exemplo_14 :_Síntese_de_ácido_(S) -2- (1- cianociclopropanocarboxamido)-3,3-dimetil-butanoico (Precursor 22)
A amina 14-1 foi sintetizada de acordo com procedimentos da literatura comegando a partir do Precursor 19.
Passo 1: HATU (3,56 g, 9,35 mmol, 1,15 eq.) foi adicionado a urna solugäo de amina 14-1 (1,8 g, 8,13 mmol, 1,0 eq.), ácido 1-cianociclopropanocarboxilico (0,90 g, 8,13 mmol, 1,0 eq.) e I\/-etil-I\/-isopropilpropan-2-amina (DIPEA; 3,15 g, 8,13 mmol, 1,0 eq.) em DMF (80 mL) a -20°C. A mistura reacional foi agitada á temperatura ambiente durante urna hora. Foi adicionado acetato de etilo, a fase orgánica foi lavada com urna solugäo saturada de NaHCCh, seca com MgS04 anidro e concentrada sob pressáo reduzida para dar 1,83 g (72%) de Intermediário 14-2 em bruto. Isto foi usado como tal no próximo passo.
Passo 2: Uma solugäo de Intermediário 14-2 (1,83 g, 5,81 mmol, 1,0 eq.) em metanol foi hidrogenada ä pressäo atmosférica a 25°C durante 3 horas com Pd (10% de Pd/C) como catalisador. A mistura reacional foi filtrada sobre Celite e o filtrado concentrado sob pressäo reduzida. 0 residuo foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano / metanol / ácido
acético 97:2:1) para dar 0,75 g (58%) de Precursor 22. (Foi observado que, durante a execugáo da sequéncia de síntese acima mencionada, tinha tido lugar racemizagáo extensa!) 1H NMR (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,07 (s, 9 H) 1,56 (d, J = 3,7 Hz, 2 H) 1, 63 - 1,79 (m, 2 H) 4,41 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) 6,87 (d, J = 8,8 Hz, 1 H) 11,12 (s. la., 1 H)
Sao mencionados em baixo Precursores representando exemplos da fórmula R4-M como definida anteriormente que foram usados para reagoes de acoplamento cruzado de Suzuki ou Stille. Aqueles para os quais nao está disponível nenhum fornecimento comercial podem ser sintetizados de acordo com procedimentos da literatura (Precursor 25 e 26) ou por procedimentos descritos nos Exemplos 15 e 16 (Precursores 27, 28, 36 e 37).
Exemplo_15 :_Síntese_de_2-isopropil-5- (tributilestanil)tiazol (Precursor 27)
Diisopropilamida de litio (LDA; 245 mL de uma solugäo a 2,5 M, 613,2 mmol, 1,2 eq.) foi adicionada ao longo de um periodo de duas horas a uma solugäo de 2-isopropiltiazol ([No. CAS: 15679-10-4]; 65 g, 511 mmol, 1,0 eg.) em THF seco (1,3 L) a -78°C. Após agitagáo durante urna hora a esta temperatura, cloreto de tributilestanho (111 mL, 408,8 mmol, 0,8 eq.) foi adicionado gota a gota. Permitiu-se que a mistura reacional arrefecesse gradualmente até á temperatura ambiente ao longo de cerca de tres horas, após o que a mistura foi extinta com um solugao aquosa saturada de NH4C1 e diluida com éter de dietilo. A camada orgánica foi separada e a camada de água foi extraída com éter de dietilo. As camadas orgánicas combinadas foram secas com MgS04 e concentradas sob pressáo reduzida para originar 51 g (24%) de Precursor 27. ΧΗ NMR (300 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 0,90 (t, J = 7,3 Hz, 9 H) 1,06 - 1,16 (m, 6 H) 1,25 -1,39 (m, 6 H) 1,42 (d, J = 7,0 Hz, 6 H) 1,48 - 1,61 (m, 6 H) 3,38 (spt, J = 6,9 Hz, 1 H) 7,60 (s, 1 H) . 0 Precursor 28 foi sintetizado análogamente ao Precursor 27 comegando a partir de 2-ciclopropiltiazol [No. CAS: 1159821-56-3], mas usando n-butillítio como urna base.
Exemplo 16: Síntese de 2-ciclopropil-6-metil-4-(4,4,5,5, - tetrametil-1,3,2-dioxa-borolan-2-il)-piridina_(Precursor 36)
Urna mistura de 2-ciclopropil-6-metilpiridina ([No. CAS: 41765-00-8]; 1,99 g, 14,9 mmol, 1,0 eg.), bis (pinacolato) diboro (Pin2B2; 3,79 g, 14,9 mmol, 1,0 eq.) e 4,4'-di-tert-butil-2,2'-bipiridina (dtbpy; 0,08 g, 0,30 mmol, 0,02 eq.) em octano (25 mL) foi purgada com nitrogénio. Dimero de cloro-1,5-ciclooctadieno e iridio (I) ( [IrCl (COD)]2; 0,10 g, 0,149 mmol, 0,01 eq.) foi adicionado e a mistura reacional foi agitada a 80°C durante 6 horas. A mistura reacional foi arrefecida até á temperatura ambiente e diluida com diclorometano. Foi adicionada água e a mistura foi agitada durante 15 minutos. A fase de água foi extraída com diclorometano (6 vezes), as fases orgánicas combinadas foram secas com MgSCh anidro e concentradas sob pressáo reduzida para dar 3,7 g (95%) de Precursor 36 em bruto. Este último foi usado sem purificagáo adicional. O Precursor 37 foi sintetizado análogamente ao Precursor 36 comegando a partir de 2,6-dimetilpiridina [No. CAS: 108-48-5] .
Os seguintes exemplos ilustram sinteses típicas dos compostos da fórmula I. Os correspondentes dados de NMR e/ou pontos de fusáo estáo listados na tabela 2.
Exemplo 17: Síntese de Composto 7
Passo 1: Uma solugäo de (-)-Precursor 1 (12,5 g, 32,5 mmol, 1,0 eq.) em THF seco (100 mL) foi arrefecida até -78°C sob nitrogénio. Bis(trimetilsilil)amida de litio (LHMDS; 68,3 mL de uma solugäo a 1 M em THF, 68,3 mmol, 2,1 eq.) foi lentamente adicionada. Após 30 minutos a -78°C, brometo de 2-f luorobenzilo (4,19 mL, 34,2 mmol, 1,05 eq.) foi adicionado numa porgäo á mistura reacional. A agitagäo foi continuada durante 90 minutos a -78°C. Ácido acético (1 mL) e água foram adicionados, permitiu-se que a mistura aquecesse até á temperatura ambiente. Foi adicionado acetato de etilo, a fase orgánica foi separada e sucessivamente lavada com uma solugäo de ácido cítrico a 10%, uma solugäo aquosa saturada de NaHCCb e salmoura, seca com MgSCq anidro e concentrada sob pressáo reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: heptano heptano / acetato de etilo 7:3) para proporcionar 10,7 g (67%) de Intermediário 17-1.
Passo 2: NaOH (33,5 mL de uma solugäo aquosa a 1 M, 33,5 mmol, 5,0 eq.) foi adicionado a uma solugäo de Intermediário 17-1 (3,3 g, 6,7 mmol, 1,0 eq.) em metanol (20 mL) . A mistura reacional foi agitada á temperatura ambiente durante tres horas. A mistura reacional foi parcialmente concentrada sob pressäo reduzida e depois acidificada até pH ~ 2-3 com uma solugäo de ácido cítrico a 10%. O precipitado branco foi filtrado, lavado com água e seco sob elevado vácuo. O Intermediário 17-2 em bruto (3,33 g, 96%) foi usado como tal no próximo passo.
Passo 3: Imidazol (3,08 g, 45,2 mmol, 7,0 eq.) e cloreto de tert-butildimetilsililo (4,87 g, 32,4 mmol, 5,0 eq.) foram adicionados a uma solugäo de Intermediário 17-2 (3,33 g, 6,47 mmol, 1,0 eq) em DMF (650 mL). A reagáo foi agitada á temperatura ambiente durante a noite. Metanol (30 mL) foi adicionado e a agitagáo foi continuada até a cromatografía líquida-espetrometria de massa (LCMS) mostrar desprotegáo completa de TBDMS do ácido carboxílico. Acetato de etilo e uma solugäo de ácido cítrico a 10% foram adicionados á mistura reacional. A fase orgánica foi separada, lavada com salmoura, seca com MgS04 anidro e concentrada sob pressäo reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: heptano -► heptano / acetato de etilo 7:4) para proporcionar 3,7 g (91%) de Intermediário 17-3 puro.
Passo 4: Trietilamina (0,89 g, 8,83 mmol, 1,2 eq.), HATU (2,94 g, 7,73 mmol, 1,05 eq.) e ( + )-Precursor 2 (1,54 g, 7,73 mmol, 1,05 eq.) foram sucessivamente adicionados a uma solugäo de Intermediário 17-3 (4,60 g, 7,36 mmol, 1,0 eq.) em DMF (70 mL). A mistura reacional foi agitada durante uma hora á temperatura ambiente. Fluoreto de tetrabutilamónio (TBAF, 73, 64 mL de urna solugäo a 1 M em THF, 73, 64 mmol, 10,0 eq.) foi adicionado e a mistura reacional foi agitada a 50°C até desprotegáo completa de TBDMS. O Intermediário 17-4 foi precipitado pela adigäo de urna solugäo aquosa saturada de Na2CÜ3 á mistura reacional. O precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob elevado vácuo. O produto em bruto foi usado como tal no próximo passo.
Passo 5: Urna mistura de Intermediário 17-4 (400 mg, 0,61 mmol, 1,0 eq.), Precursor 34 (303 mg, 1,83 mmol, 3,0 eq.), tetraquis(trifenilfosfina)paládio (Pd(PPh))4; 141 mg, 0,12 mmol, 0,2 eq.) e Na2CÜ3 (2,74 mL de urna solugäo aquosa a 2 M, 5,47 mmol, 9,0 eq.) em dioxano (3 mL) foi agitada a 110°C durante 30 minutos (para prevenir a formagäo de produtos secundários foram aplicados tempos de reagäo curtos) sob árgon. A mistura reacional foi depois rápidamente arrefecida num banho de gelo e urna solugäo aquosa saturada de Na2CÜ3 foi adicionada. A camada de água foi extraída com acetato de etilo, as fases orgánicas combinadas foram secas com MgS04 anidro e concentradas sob pressäo reduzida. 0 Intermediário 17-5 em bruto foi usado como tal no próximo passo.
Passo 6: 0 Intermediário 17-5 em bruto foi dissolvido numa solugáo de HC1 a 5 a 6 M em isopropanol e agitado á temperatura ambiente até desprotegáo completa (~ 30 minutos, para prevenir a formagáo de produtos secundários, o tempo de reagáo tem de ser mantido táo curto quanto possivel). A mistura reacional foi basificada com urna solugáo aquosa saturada de Na2CÜ3 e extraída com acetato de etilo. As fases orgánicas combinadas foram lavadas com água, secas com MgS04 anidro e concentradas sob pressäo reduzida para dar o Intermediário 17-6 em bruto que foi usado como tal no próximo passo sem purificagáo.
Passo 7: Trietilamina (246 mg, 2,43 mmol, 4.0 eq.) e HATU (266 mg, 0,69 mmol, 1,15 eq.) foram sucessivamente adicionados a urna mistura de Intermediário 17-6 em bruto e Precursor 18 (132 mg, 0,69 mmol, 1,15 eq.) em DMF (8 mL). A mistura reacional foi agitada durante duas horas á temperatura ambiente. Foi adicionado acetato de etilo, a fase orgánica foi lavada com urna solugáo saturada de Na2CÜ3 e água, seca com MgS04 anidro e concentrada sob pressäo reduzida. O residuo foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano -► diclorometano / metanol 97:3) para dar 144 mg (31% comegando a partir do Intermediário 17-4) de Composto 7.
Os Compostos 99 e 100 foram preparados análogamente ao Composto 7. Os Compostos 8, 10, 13, 16, 26, e 27 foram
preparados análogamente ao Composto 7 mas com o Passo 6 envolvendo um passo de desprotegáo de Boc mediada por TFA usando o procedimento como descrito para o Passo 2 no Exemplo 27. 0 Composto 11 foi preparado análogamente ao
Composto 7, mas usando urna reagáo de acoplamento cruzado de Stille como descrito no Exemplo 23 e um passo de desprotegáo de Boc mediada por TFA como descrito para o Passo 2 no Exemplo 27.
Exemplo 18: Sintese de Composto 33
Passo 1: HATU (2,36 g, 6,22 mmol, 1,1 eq.) foi adicionado a urna solugao de Intermediário 17-3 (3,53 g, 5,65 mmol, 1,0 eq.), ( + )-Precursor 8 (1,04 g, 5,65 mmol, 1,0 eq.) e trietilamina (1,72 g, 16,95 mmol, 3,0 eq.) em DMF (25 mL). A mistura reacional foi agitada durante urna hora a temperatura ambiente. A mistura reacional foi diluida com acetato de etilo e lavada urna solugao de ácido cítrico a 10%, urna solugao saturada de Na2CÜ3 e salmoura, seca com MgSCh e concentrada sob pressáo reduzida para dar 4,48 g (96%) de Intermediário 18-1 em bruto. 0 produto em bruto foi usado como tal no próximo passo.
Passo 2: Urna mistura de Intermediário 18-1 (4,33 g, 5,48 mmol, 1,0 eq.), Precursor 34 (1,82 g, 10,96 mmol, 2,0 eq.), Pd(PPh3)4 (0,63 g, 0,55 mmol, 0,1 eq.) e Na2C03 (30 mL de urna solugáo aquosa a 2 M, 60,3 mmol, 11,0 eq.) em dioxano (100 mL) foi agitada a 100°C durante 50 minutos (para prevenir a formagáo de produtos secundários, o tempo de reagáo tem de ser mantido táo curto quanto possível) sob nitrogénio. A mistura reacional foi depois rápidamente arrefecida num banho de gelo e urna solugáo aquosa saturada de Na3C03 foi adicionada. A camada de água foi extraída com acetato de etilo, as fases orgánicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com MgS04 anidro e concentradas sob pressáo reduzida. O residuo foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano diclorometano / metanol 95:5) para dar 4,95 g (92%) de Intermediário 18-2.
Passo 3: TBAF (10,9 mL de urna solugáo a 1 M em THF, 10,97 mmol, 2,0 eq.) foi adicionado a urna solugáo de
Intermediário 18-2 (4,56 g, 5,49 mmol, 1,0 eq.) em THF (30 mL). A mistura reacional foi agitada a 50°C até desprotegáo completa. Foi adicionada água, o precipitado foi filtrado, extensivamente lavado com água e seco sob elevado vácuo para dar 3,77 g (86%) de Intermediário 18-3. O Intermediário 18-3 foi adicionalmente convertido no Composto 33 de acordo com os procedimentos como descrito para o Passo 6 e Passo 7 no Exemplo 17. O Composto 35 foi preparado análogamente ao Composto 33.
Exemplo 19: Síntese de Composto 66
0 Intermediário 19-1 foi preparado usando os procedimentos como exemplificado para a preparagáo do Intermediário 17-5.
Nal (984 mg, 6,56 mmol, 5,5 eq.) e clorotrimetilsilano (TMSC1; 584 mg, 5,37 mmol, 4,5 eq.) foram adicionados a urna solugáo de Intermediário 19-1 em acetonitrilo (10 mL) . A mistura reacional foi agitada a temperatura ambiente durante duas horas. Metanol e urna solugáo aquosa de NaOH (12 mL de solugáo de NaOH a 1 M, 11,9 mmol, 10,0 eq.) foram adicionados, a agitagao foi continuada durante 30 minutos adicionáis. A mistura reacional foi parcialmente concentrada sob pressáo reduzida, foram adicionados acetato de etilo e água. A camada de água foi separada e extraída com acetato de etilo, as fases orgánicas combinadas foram secas com MgS04 e concentradas sob pressáo reduzida. O residuo foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano diclorometano / metanol 93:7) para dar 360 mg (50%) de Intermediário 19-2. O Intermediário 19-2 foi convertido no Composto 66 de acordo com o procedimento como descrito para o Passo 7 no Exemplo 17.
Os Compostos 36, 40, 85 e 92 foram preparados análogamente ao Composto 66.
Exemplo 20: Síntese de Composto 96
Passo 1: Uma solugäo de (-)-Precursor 1 (54,0 g, 131 mmol, 1.0 eq.) em THF seco (1000 mL) foi arrefecida até -70°C sob nitrogénio. Bis (trimetilsilil)amida de litio (306, 8 mL de uma solugäo a 1 M em THF, 307 mmol, 2,35 eq.) foi adicionada gota a gota ao longo de um periodo de uma hora, após o que a mistura reacional foi agitada durante quatro horas extra. Uma solugäo de iodeto de 2-fluorobenzilo (34,0 g, 144 mmol, 1,1 eq.) em THF (100 mL) foi adicionada á mistura reacional ao longo de uma hora. A agitagäo foi continuada durante 60 minutos a -70°C. Foram adicionados ácido propiónico e água, permitiu-se que a mistura aquecesse até á temperatura ambiente. A mistura foi extraída com acetato de etilo, a fase orgánica foi lavada com água, seca com Na2S04 anidro e concentrada sob pressáo reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: éter de petróleo / acetato de etilo 40:1) para proporcionar 46,3 g (72%) de Intermediário 20-1.
Passo 2: LiOH (1,4 L de uma solugäo aquosa a 1 M, 1,4 mol, 5.0 eq.) foi adicionado gota a gota a uma solugäo de
Intermediário 20-1 (140 g, 284 mmol, 1,0 eq.) em metanol (3,5 L) á temperatura ambiente. A mistura reacional foia agitada ä temperatura ambiente até náo restar mais nenhum material de inicio. A mistura reacional foi concentrada sob pressáo reduzida e filtrada. O precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo a 50 °C para dar 12 0 g (82%) de Intermediário 20-2.
Passo 3: Um frasco de reagáo de 3 L foi carregado e agitado á temperatura de refluxo durante 30 minutos sob N2. Após a água ter arrefecido até 40°C, metanol (300 mL),
Intermediário 20-2 (100 g, 194 mmol, 1,0 eq.), Na2C03 (83 g, 7 83 mmol, 4,0 eq.), Pd(OAc)2 (6 61 mg, 2,9 mmol, 0,015 eq.) e Precursor 30 (60 g, 392 mmol, 2,0 eq.) foram sucessivamente adicionados. A mistura reacional foi desgaseificada com N2 e aquecida até 75°C ao longo de 10 minutos. A mistura reacional foi agitada a 75°C durante 30 minutos e depois arrefecida até á temperatura ambiente. O precipitado foi filtrado, lavado com urna mistura de água / metanol (3:1, 100 mL) e seca sob vácuo a 50°C para dar 108 g (99 %) de Intermediário 20-3.
Passo 4: O Intermediário 20-3 foi convertido no
Intermediário 20-4 com rendimento de 70% usando o procedimento como descrito para o Passo 3 no Exemplo 17.
Passo 5: Trietilamina (2,67 g, 38,7 mmol, 3,0 eq.) foi adicionada gota a gota a mistura de Intermediário 20-4 (8,45 g, 12,9 mmol, 1,0 eq.), HATU (5,15 g, 13,6 mmol, 1,05 eq.) e (-)-Precursor 14 (2,25 g, 13,6 mmol, 1,05 eq.) em acetonitrilo (20 mL) . Após a mistura reacional ter sido agitada á temperatura ambiente durante urna hora, o pH da solugáo de reagáo foi ajustado para 8~9 pela adigáo de urna solugáo aquosa de Na2C03 / NaHCCh. A extragáo foi levada a cabo com acetato de etilo, as fases orgánicas combinadas foram lavadas com água, secas com Na2S04 e concentradas sob pressáo reduzida para originar 12,4 g (86%) de Intermediário 20-5.
Passo 6: Urna mistura de Intermediário 20-5 (12,44 g, 16,3 mmol, 1,0 eq.) e Nal (15,86 g, 105,8 mmol, 6,5 eq.) em acetonitrilo (130 mL) foi agitada a 0~5°C. Urna solugáo de TMSC1 (9,76 g, 89,5 mmol, 5,5 eq.) em acetonitrilo (20 mL) foi adicionada gota a gota ao longo de um período de urna hora. A agitagáo foi continuada até desprotegáo completa de
Boc (~90 minutos) . TBAF (163 mL de uma solugäo a 2 M em THF, 326 mmol, 20,0 eq.) foi adicionado gota a gota ao longo de cinco horas a mistura reacional a 0~5°C. A mistura reacional foi agitada durante a noite a 30°C. O pH foi ajustado para 8~9 pela adigäo de uma solugäo aquosa de Na2CÜ3 / NaHCCp. A extragao foi levada a cabo com diclorometano, as fases orgánicas combinadas foram lavadas com água, secas com Na2S04 e concentradas sob pressao reduzida. O residuo foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano / metanol 50:1) para dar 8,0 g (90%) de Intermediário 20-6.
Passo 7: o Intermediário 20-6 foi convertido no Composto 96 de acordo com o procedimento como descrito para o Passo 7 no Exemplo 17.
Os Compostos 45, 52, 93 e 67 foram preparados análogamente ao Composto 96.
Para o Composto 52, a estrutura é:
Para o Composto 93, a sua síntese é a mesma como acima mencionado até ao Passo 4, mas, no que respeito ao Passo 5, comegando a partir do Intermediário 20-4, a sintese é como se segue:
Passo 5: Trietilamina (31 g, 306 mmol, 2,0 eq.) foi adicionada gota a gota á mistura de Intermediário 20-4 (27,2 g, 153 mmol, 1,0 eq.), HATU (61,2 g, 161 mmol, 1,05 eq.) e ( + )-Precursor 13 (2,25 g, 13,6 mmol, 1,05 eq.) em acetonitrilo (700 mL) . Após a mistura reacional ter sido agitada á temperatura ambiente durante urna hora, o pH da solugáo de reagáo foi ajustado para 8~9 pela adigáo de urna solugáo aquosa de Na2CÜ3 / NaHCCh. A extragao foi levada a cabo com éter de etilo, metilo e tert-butilo, as fases orgánicas combinadas foram lavadas com água, secas com Na2S04 e concentradas sob pressáo reduzida para originar 122 g (99%) de Intermediário 20-7.
Passo 6: A mistura de Intermediário 20-7 (122 g, 152 mmol, 1,0 eq.) e Nal (149 g, 996 mmol, 6,5 eq.) em acetonitrilo (1200 mL) foi agitada a 0~5°C. Uma solugäo de TMSC1 (91,5 g, 842 mmol, 5,5 eq.) em acetonitrilo (200 mL) foi adicionada gota a gota ao longo de urn periodo de uma hora. A agitagäo foi continuada até desprotegäo completa de Boc (~ 30 minutos). TBAF (1600 mL de uma solugäo a 2 M em THF, 3,04 mol, 20,0 eq.) foi adicionado gota a gota ao longo de cinco horas á mistura reacional a 0~5°C. A mistura reacional foi agitada durante a noite a 25-30°C. O pH foi ajustado para 8~9 pela adigäo de uma solugäo aquosa de Na2CÜ3 / NaHCCh. A extragäo foi levada a cabo com diclorometano, as fases orgánicas combinadas foram lavadas com água, secas com Na2SÜ4 e concentradas sob pressäo reduzida. O residuo foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano / metanol 50:1) para dar 77 g (86%) de Intermediário 20-8.
Passo 7: Trietilamina (26,4 g, 264 mmol, 2,0 eq.) foi adicionada a uma mistura de HATU (52,2 g, 137 mmol, 1,05 eq.), Intermediário 20-8 (77 g, 131 mmol, 1,0 eq.) e Precursor 18 (25,9 g, 137 mmol, 1,05 eq.) em DMF (770 mL). A mistura reacional foi agitada durante uma hora á temperatura ambiente. Uma solugäo aquosa de Na2CÜ3 e água foram adicionadas, a mistura foi agitada durante 30 minutos. O precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo a 50 °C para dar 83 g de Composto 93 em bruto. Após recristalizagáo numa mistura de água / etanol foram obtidos 78 g (79%) de Composto 93.
Exemplo 21 Síntese de Composto 64
0 Intermediário 21-1 foi preparado usando os procedimentos como exemplificado para a preparagáo do Intermediário 17-3.
Passo 1: Trietilamina (119 mg, 1,18 mmol, 1,2 eq.), HATU (412 mg, 1,09 mmol, 1,1 eq.) e ( + )-Precursor 8 (199 mg, 1,18 mmol, 1,1 eq.) foram sucessivamente adicionados a urna solugáo de Intermediário 21-1 (681 mg, 0,99 mmol, 1,0 eq.) em acetonitrilo (10 mL). A mistura reacional foi agitada durante urna hora á temperatura ambiente. Nal (961 mg, 6,41 mmol, 6,5 eq.) e TMSC1 (589 mg, 5,42 mmol, 5,5 eq.) foram sucessivamente adicionados a mistura reacional, a agitagáo foi continuada até desprotegáo completa de Boc (~ 2 horas). TBAF (11,8 mmol, 11,8 mL de urna solugáo a 1 M em THF, 12,0 eq.) foi depois adicionado e a mistura reacional foi agitada durante a noite a 60°C. Urna solugao aquosa saturada de Na2CÜ3 foi adicionada, o precipitado foi filtrado e extensivamente lavado com água. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano diclorometano / metanol 90:10) para dar 288 mg (46%) de Intermediário 21-2.
Passo 2: Trietilamina (91 mg, 0,90 mmol, 2,0 eq.) e HATU (179 mg, 0,47 mmol, 1,05 eq.) foram sucessivamente adicionados a urna mistura de Intermediário 21-2 (288 mg, 0,45 mmol, 1,0 eq.) e Precursor 18 (89 mg, 0,47 mmol, 1,05 eq.) em DMF (4 mL). A mistura reacional foi agitada durante duas horas á temperatura ambiente. O Intermediário 21-3 foi precipitado pela adigáo de urna solugáo aquosa saturada de Na2C03. O precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob elevado vácuo para dar 330 mg (90%) de Intermediário 21-3 em bruto.
Passo 3: Urna mistura de Intermediário 21-3 (165 mg, 0,203 mmol, 1,0 eq.), Precursor 30 (62 mg, 0,406 mmol, 2,0 eq.), Pd(PPh3)4 (23 mg, 0,020 mmol, 0,1 eq.) e Na2C03 (0,91 mL de urna solugáo aquosa a 2 M, 1,83 mmol, 9,0 eq.) em dioxano (2 mL) foi agitada a 110°C durante 15 minutos sob árgon. A mistura reacional foi depois rápidamente arrefecida num banho de gelo e foi adicionada urna solugáo aquosa saturada de Na2CÜ3. O precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob pressáo reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano -► diclorometano / metanol 95:5) para dar 115 mg (67%) de Composto 64.
Os Compostos 41, 54, 62, 63, 65 e 94 foram preparados análogamente ao Composto 64.
Exemplo 22 Síntese de Composto 44
0 Intermediário 22-1 foi preparado usando os procedimentos como exemplificado para a preparagáo do Intermediário 17-4. 0 Intermediário 22-1 foi convertido no Intermediário 22-2 usando o procedimento de desprotegáo de Boc como descrito no Exemplo 19. Este último foi convertido no Composto 44 através do intermediário 22-3 usando respetivamente os procedimentos do Passo 2 e Passo 3 como descrito no Exemplo 21.
Os Compostos 12, 18, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 29, 30, 31, 39, 42, 43, 46, 48, 49 e 91 fo ram preparados análogamente ao Composto 44.
Exemplo 23: Síntese de Composto 32
Urna mistura de Intermediário 22-3 (230 mg, 0,301 mmol, 4,0 eq.), Precursor 27 (501 mg, 1,21 mmol, 4,0 eq.), Pd(PPh3)4 (35 mg, 0,030 mmol, 0,1 eq.) e LiCl (26 mg, 0,603 mmol, 2,0 eq.) em dioxano (3 mL) foi agitada a 85°C durante 40 minutos sob árgon. A mistura reacional foi arrefecida num banho de gelo e foi adicionado um excesso de água. O precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob pressáo reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano -► diclorometano / metanol 96:4) para dar 137 mg (56%) de Composto 32.
Os Compostos 14, 28, e 29 foram preparados análogamente ao Composto 32.
Exemplo 24: Síntese de Composto 38
Uma solugäo de Composto 32 (50 mg, 0,06 mmol, 1,0 eq.) em metanol (6 mL) foi hidrogenada (1,0 atm de hidrogénio) a 25°C durante 90 minutos com Pd (10% de Pd/C, 50 mg) como catalisador. A mistura reacional foi filtrada sobre Celite, o filtrado foi concentrado sob pressao reduzida para dar 31 mg (61%) de Composto 38.
Exemplo 25: Síntese de Composto 17
O Intermediário 25-1 foi preparado usando os procedimentos como exemplificado para a preparagáo de Intermediário 17-3.
Passo 1: HATU (1,25 g, 3,30 mmol, 1,05 eq.) foi adicionado a urna mistura de trietilamina (954 mg, 9,42 mmol, 3,0 eq.), (+)-Precursor 2 (519 mg, 3,14 mmol, 1,0 eq.) e
Intermediário 25-1 (2,0 g, 3,14 mmol, 1,0 eq.) em DMF (10 mL) . A mistura reacional foi agitada durante 30 minutos á temperatura ambiente. Foi adicionado acetato de etilo, a fase orgánica foi lavada com urna solugáo aquosa saturada de Na2CÜ3 e salmoura, seca com MgSCb e concentrada sob pressáo reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano -► diclorometano / metanol 99:3) para dar 1,67 g (68%) de Intermediário 25-2.
Passo 2: Urna mistura de Intermediário 25-2 (1, 67 g, 2,13 mmol, 1,0 eq.) e TBAF (32,0 mL de urna solugáo a 1 M em THF, 32,0 mmol, 15,0 eq.) em THF (40 mL) foi agitada á temperatura ambiente durante a noite. Acetato de etilo e salmoura foram adicionados á mistura reacional. A camada orgánica foi separada, extensivamente lavada com água e seca para dar 1,47 g (100%) de Intermediário 25-3 em bruto. O produto em bruto foi usado como tal no próximo passo.
Passo 3: O Intermediário 25-3 foi convertido no
Intermediário 25-4 envolvendo um passo de desprotegáo de Boc mediada por TFS usando o procedimento como descrito para o Passo 2 no Exemplo 27. Este último foi convertido no Composto 17 usando respetivamente os procedimentos para o Passo 2 e Passo 3 como descrito no Exemplo 21.
Os Compostos 15 e 87 foram preparados análogamente ao
Composto 17. 0 Composto 37 foi preparado análogamente ao Composto 17, mas envolvendo um passo de desprotegáo de Boc mediada por TFA como descrito para o Passo 6 no Exemplo 17.
Exemplo 26: Síntese de Composto 51
Passo 1: Urna mistura de (-)-Precursor 1 (10,0 g, 26,0 mmol, 1,0 eq.), Precursor 34 (6,5 g, 3 9,0 mmol, 1,5 eq.) e urna solugäo aquosa de NaHC03 (21,9 g em 50 mL de água, 260,2 mmol, 10 eq.) em dioxano (200 mL) foi agitada á temperatura ambiente sob árgon. Pd(PPh3)4 (1,5 g, 1,3 mmol, 0,05 eq.) foi adicionado e a mistura reacional foi agitada a 80°C durante urna hora e depois arrefecida até á temperatura ambiente. Foi adicionado acetato de etilo, seguido pela adigáo de urna solugäo aquosa saturada de Na2C03. A orgánica e a camada de água foram separadas, a camada orgánica foi lavada com salmoura e seca com MgS04 anidro para dar um primeiro lote de Intermediário 26-2 em bruto. A camada de água foi acidificada com urna solugäo de HC1 a 2 M até pH ~ 2 e lavada com acetato de etilo. Subsequentemente, o pH foi ajustado para pH ~ 6 com pó de Na2C03 e foi levada a cabo urna extragäo com acetato de etilo. As fases orgánicas combinadas foram secas com MgS04 anidro e concentradas sob pressäo reduzida para dar um produto secundário hidrolisado de lactona em bruto (Intermediário 26-1). Isto foi submetido a refluxo em tolueno sob condigöes de Dean-Stark até a relactonizagäo estar completa. Após remogäo do solvente sob pressäo reduzida foi obtido urn segundo lote de Intermediário 26-2 em bruto. Ambos os lotes foram combinados e purificados por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: heptano / acetato de etilo 90:10 -► 30:70) para dar 7,9 g (71%) de Intermediário 26-2 puro.
Passo 2: A lactona 26-2 foi convertida no Intermediário 26-3 de acordo com o procedimento como descrito para o Passo 1 no Exemplo 17. A purificagäo por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: heptano -► heptano / acetato de etilo 5:5) deu o Intermediário 26-3 com rendimento de 73%.
Passo 3: NaOH (124,5 mL de urna solugáo aquosa a 1 M, 124,5 mmol, 9,3 eq.) foi adicionado a urna solugáo de Intermediário 26-3 (7,18 g, 13,5 mmol, 1,0 eq.) em THF (120 mL). A mistura reacional foi agitada á temperatura ambiente durante urna hora. A mistura reacional foi parcialmente concentrada sob pressáo reduzida e depois acidificada com urna solugáo aquosa de ácido cítrico a 10% até pH ~ 6. A fase de água foi extraída com diclorometano, as fases orgánicas combinadas foram secas com MgSCh anidro e concentradas sob pressáo reduzida para dar 7,40 g (99%) de Intermediário 26-4.
Passo 4: O Intermediário 26-4 foi convertido no Intermediário 26-5 de acordo com o procedimento como descrito para o Passo 3 no Exemplo 17. A purificagäo por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano -► diclorometano / metanol 96:4) deu o Intermediário 26-5 com rendimento de 84%.
Passo 5: O Intermediário 26-5 foi convertido no Intermediário 26-6 usando o procedimento como descrito para o Passo 1 no Exemplo 21. Este último foi convertido no Composto 51 usando o procedimento como descrito para o Passo 7 no Exemplo 17.
Os Compostos 50, 58, 59, 80, 89 e 95 foram preparados análogamente ao Composto 51. A clorinagáo do Composto 51 de acordo com o procedimento como descrito no Exemplo 33 deu o Composto 60.
Exemplo 27: Síntese de Composto 86
Passo 1: 0 Intermediário 26-5 foi reagido com (rae)-
Precursor 4 racémico usando o procedimento como descrito para o Passo 4 no Exemplo 17. 0 produto de reagáo em bruto foi suspenso numa mistura de acetonitrilo e metanol (1:1) a temperatura de refluxo. Após arrefecimento até 0°C, o precipitado foi filtrado para dar urna mistura 1:1 de Intermediário 27-1A e Intermediário 27-1B como um pó branco (71%). Esta mistura foi usada como tal no próximo passo.
Passo 2: TFA (10 mL, 135 mmol, 129 eq.) foi adicionado a urna mistura 1:1 de Intermediário 27-lA e Intermediário 27-1B (765 mg, 1,04 mmol, 1,0 eq.) em diclorometano (200 mL). A mistura reacional foi agitada á temperatura ambiente até a LCMS mostrar conversáo completa (~30 minutos, para prevenir a formagáo de produtos secundários, o tempo de reagáo tem de ser mantido táo curto quanto possivel). Foi adicionada urna solugáo aquosa saturada de Na2CÜ3, as camadas foram separadas, a camada de água foi extraída com diclorometano. As fases orgánicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com MgSCq anidro e concentradas sob pressáo reduzida. Ambos os isómeros foram separados por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano -► diclorometano / metanol 93:7) para proporcionar 320 mg (48%) de Intermediário 27-2A (primeira fragáo) e 298 mg (45%) de Intermediário 27-2B (segunda fragáo). O Intermediário 27-2A foi convertido no Composto 86 usando o procedimento como descrito para o Passo 7 no Exemplo 17.
Exemplo 28: Síntese de Composto 61
O Intermediário 28-1, preparado análogamente ao
Intermediário 26-5, foi reagido com (-)-Precursor lia de acordo com o procedimento como descrito para o Passo 4 no Exemplo 17, para dar o Intermediário 28-2. A desprotegáo de Boc subsequente foi alcangada aplicando-se o procedimento como descrito no Exemplo 19. 0 Intermediário 28-3 foi adicionalmente convertido no Composto 61 usando o procedimento como descrito para o Passo 7 no Exemplo 17.
Os Compos tos 56, 98, 101 e 102 foram preparados análogamente ao Composto 61.
Exemplo 29: Síntese de Composto 90
Passo 1: A lactona 29-1 [No. CAS: 165453-05-4] foi convertida no Intermediário 29-2 com rendimento de 62% usando o procedimento como descrito para o Passo 1 no Exemplo 17.
Passo 2: O Intermediário 29-2 (290 mg, 558 mmol, 1,0 eq.) foi dissolvido em MeOH (15 mL) e hidrogenado num Cubo H com Pd/C a 10% como um cartucho de catalisador. A hidrogenagáo foi realizada por bombeamento da solugáo de reagáo através do cubo H com um fluxo de 1 mL/min a pressáo atmosférica. Após evaporagáo de solventes foram obtidos 230 mg (96%) de Intermediário 29-3.
Passo 3: O Intermediário 29-3 (1,38 g, 3,36 mmol, 1,0 eq.) foi dissolvido em diclorometano seco. N-Fenil-bis-(trifluorometanossulfonimida) (1,44 g, 4,03 mmol, 1,2 eq.) e Cs2C03 (1,31 g, 4,03 mmol, 1,2 eq.) foram adicionados e a suspensáo resultante foi agitada á temperatura ambiente durante 16 horas até conversáo completa de acordo com análise de LCMS. A mistura foi diluida com diclorometano e lavada com urna solugáo aquosa de NaHC03 e salmoura. A fase orgánica foi seca com Na2SÜ4 e concentrada sob pressáo reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: isohexano / acetato de etilo) para dar 1,74 g (92%) de Intermediário 29-4.
Passo 4: O Intermediário 29-4 (1,55 g, 2,78 mmol, 1,0 eq.) foi dissolvido em THF (25 mL) seguido pela adigáo de LiOH (5 mL de urna solugáo aquosa a 1 M, 5,0 mmol, 1,8 eq.) e MeOH (10 mL) . A reagáo foi deixada a agitar á temperatura ambiente durante 1 hora. Os solventes foram coevaporados com tolueno e secos in vacuo. O residuo e imidazol (3,79 g, 55,6 mmol, 20,0 eq.) foram dissolvidos em DMF seco (10 mL). Foi adicionado TBDMSC1 (4,19 g, 27,8 mmol, 10,0 eq.) e a mistura reacional foi agitada a temperatura ambiente durante 16 horas. Foi adicionado MeOH e a agitagáo foi continuada durante duas horas até a LCMS mostrar desprotegáo completa de TBMS do ácido carboxílico. A mistura foi diluida com acetato de etilo e lavada com salmoura. A fase orgánica foi concentrada sob pressáo reduzida e o produto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano / metanol) para dar 1,68 g (87%) de Intermediário 29-5.
Passo 5: DIPEA (1,5 mL, 8,65 mmol, 4,0 eq.) foi adicionado a uma solugáo de Intermediário 29-5 (1,5 g, 2,16 mmol, 1,0 eq.), (-)-Precursor 16 (437 mg, 3,03 mmol, 1,4 eq.) e hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tripirrolidinofosfónio (PyBOP, 1,35 g, 2,59 mmol) em DMF seco (15 mL) . Após duas horas, a mistura foi diluida com diclorometano (50 mL) e lavada com NaHCCq aquoso, seca e concentrada até á secura para dar o Intermediário 29-6 em bruto que foi usado como tal no próximo passo.
Passo 6: Uma suspensáo de Intermediário 29-6 em bruto, o sal de HC1 do Precursor 34 (109 mg, 0,55 mmol), Pd(PPh3)2Cl2 (35 mg, 0,055 mmol) e DIPEA (288 mg, 2,23 mmol) numa mistura 7:3:1 de dimetoxietano / água / etanol foi agitada a 70°C durante 16 horas. A mistura reacional foi concentrada sob pressáo reduzida, o residuo foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: hexano / acetato de etilo 93:7 -► 40:60) para dar 360 mg (21% ao longo de dois passos) de Intermediário 29-7.
Passo 7: HC1 (1,25 mL de uma solugao a 4 M em dioxano) foi adicionado a uma solugáo de Intermediário 29-7 (180 mg, 0,23 mmol, 1,0 eq.) em dioxano (5 mL) e metanol (1 mL) .
Após agitagäo de 40 minutos ä temperatura ambiente, a mistura foi concentrada até á secura e o residuo seco sob vácuo. O residuo foi redissolvido em DMF (10 mL), Precursor 18 (51 mg, 0,27 mmol, 1,2 eq.), PyBOP (142 mg, 0,27 mmol, 1,2 eq.) e DIPEA (121 mg, 0,94 mmol, 4,0 eq.) foram adicionados. A mistura reacional foi agitada durante quatro horas a temperatura ambiente. Foi adicionado diclorometano, a camada orgánica foi lavada com NaHCCb aquoso, seca com MgS04 e concentrada sob pressáo reduzida. A purificagáo por HPLC de fase reversa preparativa deu 79 mg (46%) de Composto 90.
Exemplo 30: Sintese de Composto 84
Passo 1: O Intermediário 29-4 (430 mg, 0,765 mmol) dissolvido em N, N-dimetilacetamida (DMA; 11 mL) foi carregado num frasco de micro-ondas em conjunto com 2-etiltiazol ([No. CAS: 15679-09-1]; 433 mg, 3,83 mmol, 5,0 eq.), KOAc (113 mg, 1,17 mmol, 1,5 eq.) e Pd(PPh3)4 (44 mg, 38,3 ymol, 0,05 eq.). A mistura reacional foi desgaseificada com N2 e depois aquecida num micro-ondas a 150°C durante urna hora. A mistura reacional foi diluida com diclorometano e lavada com HC1 a 1 M, urna solugäo saturada de NaHC03 e salmoura. A fase orgánica foi seca com Na2S04 e concentrada sob pressáo reduzida. O residuo foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: heptano / acetato de etilo) para dar 169 mg (42%) de Intermediário 30-1.
Passo 2: HCl (10 mL de uma solugäo a 4 M em dioxano) foi adicionado ao Intermediário 30-1 (169 mg, 0,323 mmol, 1,0 eq.), a mistura foi agitada ä temperatura ambiente durante uma hora. A mistura reacional foi liofilizada durante a noite. O residuo foi redissolvido em diclorometano (10 mL), seguido pela adigáo de Precursor 18 (67 mg, 0,355 mmol, 1,1 eq.) e DIPEA (281 yL, 1,62 mmol, 5,0 eq.). A mistura reacional foi arrefecida até 0°C, HATU (129 mg, 0,339 mmol, 1,05 eq.) foi adicionado e a agitagáo foi continuada á temperatura ambiente durante tres horas. A mistura reacional foi lavada com HCl a 1 M, uma solugäo aquosa saturada de NaHC03 e salmoura. A fase orgánica foi seca com Na2S04 e concentrada sob pressáo reduzida para dar 185 mg (96%) de Intermediário 30-2.
Passo 3: O Intermediário 30-2 foi convertido no Intermediário 30-3 de acordo com o procedimento como descrito para o Passo 4 no Exemplo 29 (rendimento de 49%).
Passo 4: HATU (74 mg, 194 ymol, 1,1 eq.) foi adicionado a uma solugäo de Intermediário 30-3 (128 mg, 176 ymol, 1,0 eq.), (-)-Precursor 16 (38 mg, 264 ymol, 1,5 eq.) e DIPEA (153 yL, 880 ymol, 5,0 eq.) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura reacional foi agitada á temperatura ambiente durante duas horas. A mistura reacional foi diluida com DCM e lavada com uma solugäo de HC1 a 1 M, NaHCCh aquoso saturado e salmoura. A fase orgánica foi seca com Na2S04 e concentrada sob pressáo reduzida. O residuo foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: heptano / acetato de etilo) para dar 35 mg (23%) de Intermediário 30- 4.
Passo 5: A solugäo de Intermediário 30-4 (35 mg, 41 ymol, 1,0 eq.) em CH3CN (3 mL) foi arrefecida até 0°C. HF (170 yL) foi adicionado gota a gota e a agitagäo foi continuada á temperatura ambiente durante duas horas. A reagao foi extinta por adigäo cuidadosa de uma solugäo aquosa saturada de NaHCCh, seguida por acetato de etilo. Ambas as fases foram separadas, a fase orgánica foi lavada com NaHCCb aquoso saturado, seca com Na2S04 anidro e evaporada sob pressáo reduzida. O residuo foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa originando 10 mg (31%) de Composto 84.
Exemplo 31: Síntese de Composto 87
Passo 1: 0 Intermediário 29-4 foi reagido com o Precursor 34 de acordo com o procedimento como descrito para o Passo 6 no Exemplo 29.
Passo 2: 0 Intermediário 31-1 foi convertido no Intermediário 31-2 usando o procedimento como exemplificado para o Passo 4 no Exemplo 29.
Passo 3: 0 Intermediário 31-2 foi reagido com o (-)-Precursor 15 para dar o Intermediário 31-3 usando o procedimento como descrito para o Passo 5 no Exemplo 29. Este último foi convertido no Composto 87 de acordo com o procedimento do Passo 7 no Exemplo 29. O Composto 83 foi preparado análogamente ao Composto 87, mas usando reagáo de acoplamento cruzado de Heck como descrito no Exemplo 30, Passo 1.
Exemplo 32: Síntese de Composto 4
Passo 1: O (+)-Precursor 2 (10,0 g, 60,5 mmol, 1,0 eq.) foi adicionado a urna mistura de ácido 3- (3- clorofenil)propanoico (11,2 g, 60,5 mmol, 1,0 eq.), trietilamina (12,3 g, 121 mmol, 2,0 eq.) e HATU (10,0 g, 60,5 mmol, 1,0 eq.) em DMF (120 mL) a -10°C. A mistura reacional foi agitada a 0°C durante duas horas. Foram adicionados acetato de etilo e água. A camada orgánica foi separada e lavada com água, um solugáo de HC1 a 1 M e urna solugáo aquosa saturada de Na2C03, seca com MgS04 e concentrada sob pressáo reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano --> diclorometano / metanol 96:4) para dar 15,8 g (79%) de Intermediário 32-1.
Passo 2: 2-Metoxipropeno (34,3 g, 476 mmol, 10,0 eq.) foi adicionado gota a gota ao longo de um período de 30 minutos a urna solugáo de intermediário 32-1 (15,8 g, 47,6 mmol, 1,0 eq.) e p-toluenossulfonato de piridínio (PPTS, 1,2 g, 4,8 mmol, 0,1 eq.) em diclorometano a 0°C. A mistura reacional foi agitada á temperatura ambiente durante 24 horas. Foram adicionados acetato de etilo e água. A camada orgánica foi separada, lavada com água, urna solugáo de HC1 a 1 M e urna solugáo aquosa saturada de Na2C03, seca com MgS04 e concentrada sob pressáo reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: heptano / acetato de etilo 80:20 --> 40:60) para dar 10,1 g (57%) de Intermediário 32-2.
Passo 3: n-Butillítio (17,4 mL de urna solugáo a 2,5 M em hexano, 43,6 mmol, 2,05 eq.) foi adicionado gota a gota a urna solugáo de Intermediário 32-2 (7,9 g, 21,2 mmol, 1,0 eq.) e epóxido 32-3 ([No. CAS: 1003871-37-1]; 7,2 g, 21,2 mmol, 1,0 eq.) em THF (200 mL) a -78°C. A mistura reacional foi agitada a -25°C durante duas horas. Água foi adicionada gota a gota, seguida pela adigáo de acetato de etilo. A camada orgánica foi separada, seca com MgSCp e concentrada sob pressáo reduzida. 0 produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: heptano / acetato de etilo 12:88 --> 40:60) para dar 5,0 g (33%) de Intermediário 32-4.
Este último foi convertido no Composto 4 usando os procedimentos do Passo 5, Passo 6 e Passo 7 como descrito no Exemplo 17.
Exemplo 33: Síntese de Composto 5
Urna solugáo de Intermediário 32-4 (3,6 g, 5,0 mmol, 1,0 eq.) e N-clorossuccinimida (NCS; 806 mg, 6,0 mmol, 1,2 eq.) em DMF foi agitada a 80 °C até náo restar mais nenhum material de inicio. Após se ter permitido que a mistura reacional arrefecesse até á temperatura ambiente foi adicionada água. A fase de água foi extraída com acetato de etilo, as fases orgánicas combinadas foram lavadas com urna solugáo de NaOH a 1 M, secas com MgS04 e concentradas sob pressáo reduzida. O residuo foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano --> diclorometano / metanol 97,5:2,5) para dar 3,1 g (82%) de Intermediário 33-1. Este último foi convertido no Composto 5 usando respetivamente os procedimentos como descrito no Passo 4, Passo 5 e Passo 6 no Exemplo 32. 0 Composto 6 foi preparado similarmente ao Composto 5, mas usando urna reagäo de acoplamento cruzado de Stille como descrito no Exemplo 23 e um passo de desprotegäo mediada por TFA como descrito no Exemplo 27, Passo 2.
Exemplo 34: Sintese de Composto 1
0 Intermediário 32-4 foi tratado com HCl usando o procedimento como descrito para o Passo 6 no Exemplo 17. 0 produto de reagäo em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano --> diclorometano / metanol 93:7) para dar o Intermediário 34-1 (42%) . Este último foi convertido no Composto 1 usando os procedimentos do Passo 2 e Passo 3 como descrito no Exemplo 21.
Os Compostos 2 e 3 foram preparados análogamente ao Composto 1.
Exemplo 35: Síntese de Composto 79
A Amina 35-1 foi preparada usando os procedimentos como exemplificado para a preparagäo do Intermediário 28-3. Uma solugäo de Intermediário 35-1 (250 mg, 0,39 mmol, 1,0 eq.) e Precursor 24 (150 mg, 0,55 mmol, 1,4 eq.) em DMF (4 mL) foi agitada durante urna hora a temperatura ambiente. Agua e uma solugäo aquosa saturada de Na2CÜ3 foram adicionados á mistura reacional, o precipitado foi filtrado e lavado com água. O produto em bruto foi suspenso em acetonitrilo e permitiu-se subsequentemente que arrefecesse até á temperatura ambiente, 236 mg (73%) de Composto 79 foram obtidos como um pó branco. O Composto 81 foi preparado análogamente ao Composto 79. O Composto 68 foi preparado análogamente ao Composto 79, mas comegando a partir da amina 18-4. No caso dos Compostos 70, 71, 72, 73 e 76, a amina apropriada foi preparada de acordo com a sintese do Intermediário 19-2 como descrito no Exemplo 19. No caso dos Compostos 74, 74, 76, 77 e 81, a amina apropriada foi preparada de acordo com a sintese do Intermediário 26-6 como descrito no Exemplo 26. No caso do Composto 69, a amina apropriada (sal de hidrocloreto) foi preparada como descrito no Exemplo 29.
Exemplo 36: Síntese de Composto 57
A Amina 36-1 foi preparada usando os procedimientos como exemplificado para a preparagäo do Intermediário 26-6.
Passo 1: A Amina 36-1 (164 mg, 0,26 mmol, 1,0 eq.) e o
Precursor 19 (67 mg, 0,29 mmol, 1,1 eq.) foram dissolvidos em acetonitrilo (15 mL) . Trietilamina (55 yL, 0,40 mmol, 1,5 eq.) e HATU (111 mg, 0,29 mmol, 1,1 eq.) foram sucessivamente adicionados. A mistura reacional foi agitada durante 30 minutos á temperatura ambiente. Nal (436 mg, 2,91 mmol, 11,0 eq.) e TMSC1 (287 mg, 2,65 mmol, 10,0 eq.) foram adicionados e a agitagäo foi continuada durante urna hora. Metanol (10 mL) e urna solugao aquosa de NaOH (10 mL de solugao de NaOH a 1 M, 10,0 mmol, 38,0 eq.) foram adicionados, a mistura reacional foi agitada durante 30 minutos adicionáis. Foi adicionado um excesso de água, o precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob elevado vácuo para dar 149 mg (69%) de Intermediário 36-2 em bruto.
Passo 2: Urna solugäo de Intermediário 36-2 (149 mg, 0,20 mmol, 1,0 eq.), Precursor 23 (66 mg, 0,31 mmol, 1,5 eq.) e trietilamina (41 mg, 0,41 mmol, 2,0 eq.) em DMF (15 mL) foi agitada á temperatura ambiente durante urna hora. Foram adicionados água e urna solugäo aquosa saturada de Na2CÜ3 á mistura reacional, o precipitado foi filtrado e lavado com água. Após purificagáo por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano --> diclorometano / metanol 96:4) foram obtidos 62 mg (36%) de Composto 57. O Composto 55 foi preparado análogamente ao Composto 57. O Composto 34 foi preparado análogamente ao Composto 57 mas comegando a partir da amina 18-4.
Exemplo 37: Síntese de Composto 97
0 Intermediário 37-1 foi preparado análogamente ao Intermediário 26-5 como exemplificado no Exemplo 26.
Passo 1: 0 Intermediário 37-1 foi convertido no
Intermediário 37-2 usando o procedimento como descrito para o Passo 1 no Exemplo 36.
Passo 2: Urna solugáo de Intermediário 37-2 (287 mg, 0,43 mmol, 1,0 eq.) em diclorometano (4 mL) foi lentamente adicionada a urna mistura de cloreto de cloroacetilo (73 mg, 0,65 mmol, 1,5 eq.) e trietilamina (0,18 mL, 1,30 mmol, 3,0 eq.) em diclorometano (4 mL) a 0°C. A mistura reacional foi agitada á temperatura ambiente até conversáo completa e depois lavada com urna solugáo aquosa saturada de NH4C1, seca com MgSCb anidro e concentrada sob pressáo reduzida para dar 240 mg (77%) de Intermediário 37-3 em bruto.
Passo 3: Urna mistura de Intermediário 37-3 (240 mg, 0,33 mmol, 1,0 eq.), pirrolidina (0,286 mL, 3,25 mmol, 10 eq.) e iodeto de tetrabutilamónio (TBAI; 12 mg, 0,03 mmol, 0,1 eq.) em N-metilpirrolidinona (NMP; 3 mL) foi agitada ä temperatura ambiente até conversäo completa. Foi adicionada água ä mistura reacional, o precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob elevado vácuo. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano diclorometano / metanol 95:5) para dar 216 mg (85%) de Composto 97.
Exemplo 38: Síntese de Composto 9
O Intermediário 38-1 foi preparado análogamente ao Intermediário 17-6 com o Passo 6 envolvendo um passo de desprotegäo de Boc mediada por TFA como descrito para o Passo 2 no Exemplo 27.
Passo 1: 0 Intermediário 38-1 (610 mg, 0,96 mmol, 1,0 eq.) e o Precursor 19 (223 mg, 0,96 mmol, 1,0 eq.) foram dissolvidos em DMF (4 mL) . DIPEA (374 mg, 2,89 mmol, 3,0 eq.) e HATU (385 mg, 1,01 mmol, 1,05 eq.) foram sucessivamente adicionados. A mistura reacional foi agitada durante 30 minutos á temperatura ambiente. Foi adicionada urna solugáo aquosa saturada de Na2CÜ3, a fase de água foi extraída com acetato de etilo. As fases orgánicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com MgSCp e concentradas sob pressáo reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano --> diclorometano / metanol 93:7) para dar 207 mg (25%) de Intermediário 38-2.
Passo 2: O Intermediário 38-2 foi convertido no
Intermediário 38-3 de acordo com o procedimento de desprotegäo de Boc mediada por TFA como descrito para o Passo 2 no Exemplo 27.
Passo 3: DIPEA (74 mg, 0,57 mmol, 3,0 eq.) e HATU (76 mg, 0,20 mmol, 1,05 eq.) foram sucessivamente adicionados a urna solugáo de Intermediário 38-3 (142 mg, 0,19 mmol, 1,0 eq.) e Precursor 20 (25 mg, 0,19 mmol, 1,0 eq.) in DMF (3 mL). A mistura reacional foi agitada durante 30 minutos á temperatura ambiente. Foi adicionada urna solugáo aquosa saturada de Na2CÜ3, a fase de água foi extraída com acetato de etilo. As fases orgánicas combinadas foram lavadas com salmoura e concentradas sob pressáo reduzida. O produto em bruto foi purificado por HPLC preparativa para dar 45 mg (26% ao longo de dois passos) de Composto 9. O Composto 19 foi sintetizado comegando a partir do
Intermediário 35-1 usando a sequéncia de reagäo como exemplificado para o Exemplo 38, mas envolvendo o Passo 2 um passo de desprotegáo de Boc mediada por HC1 como descrito no Exemplo 17, Passo 6.
Exemplo 39: Síntese de Composto 53
A Amina 39-1 foi preparada comegando a partir de
Intermediário 18-4 usando o procedimento como descrito para o Passo 1 no Exemplo 36. 0 Intermediário 39-1 (210 mg, 0,29 mmol, 1,0 eq.) e o Precursor 21 (32 mg, 0,29 mmol, 1,0 eq.) foram dissolvidos em DMF (10 mL). Trietilamina (58 mg, 0,58 mmol, 2,0 eq.) e HATU (115 mg, 0,30 mmol, 1,05 eq.) foram sucessivamente adicionados. A mistura reacional foi agitada durante urna hora á temperatura ambiente. Foi adicionada urna solugáo aquosa saturada de Na2C03, o precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob elevado vácuo. O produto em bruto foi purificado por cromatografía em coluna de silica gel (eluente: diclorometano --> diclorometano / metanol 97:3) para dar 143 mg (59%) de Composto 53.
No caso do Composto 47, a amina usada para acoplamento de amida foi preparada através de urna sequéncia de síntese análogamente áquela como descrito para a preparagäo do Intermediário 38-3, mas na quäl a desprotegäo de Boc foi levada a cabo de acordo com o procedimento como descrito no Exemplo 19.
Tabela 1
Tabela 2 ÍOs tempos de retengäo (Rt) säo dados em minutos e forami ideterminados através de UPLC (Cromatografía Líquida del jUltra Desempenho) de Fase reversa numa coluna BEH C18! :(1,7 ym, 2,1 x 50 mm, Waters Acquity) com um caudal del ί0,7 mL/min e temperatura da coluna de 70°C. Duas fases: ímóveis (fase móvel A: MeOH; fase móvel B: NH4OAc a 10 mMÍ iem H20 a 90% e CH3CN a 10%) foram usadas para operar urna i icondigao de gradiente comegando de A a 5% e B a 95% a A ai i 95% e B a 5% em 1,3 minutos, manutengao durante 0,2 i iminutos, depois de volta a A a 5% e B a 95% em 0,2 1 iminutos e finalmente manutengao destas condigöes durante i 10,3 minutos. Foi usado urn volume de injegäo de 0,75 yL. ! ÍOs pontos de fusäo (p.f.) foram determinados com um DSC1 i iSTAR6 (Mettler-Toledo). Os pontos de fusäo foram medidosi icom um gradiente de temperaturas de 10°C/min. AI i temperatura de inicio foi 30°C, a temperatura máxima i Í300°C. Os valores sao valores de pico. i
iOs tempos de retengäo (Rt) säo dados em minutos e foramj ideterminados através de UPLC (Cromatografía Líquida de! ÍUltra Desempenho) de Fase reversa numa coluna BEH C18! i (1,7 ym, 2,1 x 50 mm, Waters Acquity) com um caudal de i jO, 7 mL/min e temperatura da coluna de 70°C. Duas fases! imóveis (fase móvel A: MeOH; fase móvel B: NH4OAc a 10 mMj jem H2O a 90% e CH3CN a 10%) foram usadas para operar urna i icondigäo de gradiente comegando de A a 5% e B a 95% a A aj i 95% e B a 5% em 1,3 minutos, manutengäo durante 0,2 i iminutos, depois de volta a A a 5% e B a 95% em 0,2 1 iminutos e finalmente manutengao destas condigöes durante i ÍO,3 minutos. Foi usado urn volume de injegäo de 0,75 yL. I jOs pontos de fusäo (p.f.) foram determinados com um DSC1 j ;STARe (Mettler-Toledo). Os pontos de fusäo foram medidosj jcom um gradiente de temperaturas de 10°C/min. Aj i temperatura de inicio foi 30°C, a temperatura máximaj !300°C. Os valores säo valores de pico. !
iOs tempos de retengäo (Rt) säo dados em minutos e foramj ideterminados através de UPLC (Cromatografía Líquida de! ÍUltra Desempenho) de Fase reversa numa coluna BEH C18! i (1,7 ym, 2,1 x 50 mm, Waters Acquity) com um caudal de i jO, 7 mL/min e temperatura da coluna de 70°C. Duas fases! imóveis (fase móvel A: MeOH; fase móvel B: NH4OAc a 10 mMj jem H2O a 90% e CH3CN a 10%) foram usadas para operar urna i icondigäo de gradiente comegando de A a 5% e B a 95% a A aj i 95% e B a 5% em 1,3 minutos, manutengäo durante 0,2 i iminutos, depois de volta a A a 5% e B a 95% em 0,2 1 iminutos e finalmente manutengao destas condigöes durante i ÍO,3 minutos. Foi usado urn volume de injegäo de 0,75 yL. I jOs pontos de fusäo (p.f.) foram determinados com um DSC1 j ;STARe (Mettler-Toledo). Os pontos de fusäo foram medidosj jcom um gradiente de temperaturas de 10°C/min. Aj i temperatura de inicio foi 30°C, a temperatura máximaj !300°C. Os valores säo valores de pico. !
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iOs tempos de retengäo (Rt) säo dados em minutos e foramj ideterminados através de UPLC (Cromatografía Líquida de! ÍUltra Desempenho) de Fase reversa numa coluna BEH C18! i (1,7 ym, 2,1 x 50 mm, Waters Acquity) com um caudal de i jO, 7 mL/min e temperatura da coluna de 70°C. Duas fases! imóveis (fase móvel A: MeOH; fase móvel B: NH4OAc a 10 mMj jem H2O a 90% e CH3CN a 10%) foram usadas para operar urna i icondigäo de gradiente comegando de A a 5% e B a 95% a A aj i 95% e B a 5% em 1,3 minutos, manutengäo durante 0,2 i iminutos, depois de volta a A a 5% e B a 95% em 0,2 1 iminutos e finalmente manutengao destas condigöes durante i ÍO,3 minutos. Foi usado urn volume de injegäo de 0,75 yL. I jOs pontos de fusäo (p.f.) foram determinados com um DSC1 j ;STARe (Mettler-Toledo). Os pontos de fusäo foram medidosj jcom um gradiente de temperaturas de 10°C/min. Aj i temperatura de inicio foi 30°C, a temperatura máximaj !300°C. Os valores säo valores de pico. !
iOs tempos de retengäo (Rt) säo dados em minutos e foramj ideterminados através de UPLC (Cromatografía Líquida de! ÍUltra Desempenho) de Fase reversa numa coluna BEH C18! i (1,7 ym, 2,1 x 50 mm, Waters Acquity) com um caudal de i jO, 7 mL/min e temperatura da coluna de 70°C. Duas fases! imóveis (fase móvel A: MeOH; fase móvel B: NH4OAc a 10 mMj jem H2O a 90% e CH3CN a 10%) foram usadas para operar urna i icondigäo de gradiente comegando de A a 5% e B a 95% a A aj i 95% e B a 5% em 1,3 minutos, manutengäo durante 0,2 i iminutos, depois de volta a A a 5% e B a 95% em 0,2 1 iminutos e finalmente manutengao destas condigöes durante i ÍO,3 minutos. Foi usado urn volume de injegäo de 0,75 yL. I jOs pontos de fusäo (p.f.) foram determinados com um DSC1 j ;STARe (Mettler-Toledo). Os pontos de fusäo foram medidosj jcom um gradiente de temperaturas de 10°C/min. Aj i temperatura de inicio foi 30°C, a temperatura máximaj !300°C. Os valores säo valores de pico. !
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iOs tempos de retengäo (Rt) säo dados em minutos e foramj ideterminados através de UPLC (Cromatografía Líquida de! ÍUltra Desempenho) de Fase reversa numa coluna BEH C18! i (1,7 ym, 2,1 x 50 mm, Waters Acquity) com um caudal de i jO, 7 mL/min e temperatura da coluna de 70°C. Duas fases! imóveis (fase móvel A: MeOH; fase móvel B: NH4OAc a 10 mMj jem H2O a 90% e CH3CN a 10%) foram usadas para operar urna i icondigäo de gradiente comegando de A a 5% e B a 95% a A aj i 95% e B a 5% em 1,3 minutos, manutengäo durante 0,2 i iminutos, depois de volta a A a 5% e B a 95% em 0,2 1 iminutos e finalmente manutengao destas condigöes durante i ÍO,3 minutos. Foi usado urn volume de injegäo de 0,75 yL. I jOs pontos de fusäo (p.f.) foram determinados com um DSC1 j ;STARe (Mettler-Toledo). Os pontos de fusäo foram medidosj jcom um gradiente de temperaturas de 10°C/min. Aj i temperatura de inicio foi 30°C, a temperatura máximaj !300°C. Os valores säo valores de pico. !
j(n.d. significa näo determinado) j
Tabela 3
Exemplos Biológicos Ensaio Antiviral Geral Células MT4-LTR-EGFP foram obtidas por transfecgao de células MT4 com um constructo selecionável englobando as sequéncias codificando a repetigäo terminal longa (LTR) do VIH como um promotor para a expressäo de proteína fluorescente verde intensificada (EGFP) e selegäo subsequente de células permanentemente transíectadas. A atividade antiviral em diferentes estirpes de VIH-1 foi determinada num ensaio de replicagäo de virus baseado em células. Aqui, células MT4-LTR-EGFP (150.000 células/mL) sao infectadas (multiplicidade de infecgao [MOI] de 0,0025) na presenga ou ausencia de diferentes concentragöes de inibidor. Duas metodologías para leitura foram usadas, ou quantificagäo de fluorescencia de GFP ao dia 3 pós-infecgäo, ou quantificagäo da viabilidade celular usando resazurina (como descrito por Fields, R. D., e Μ. V. Lancaster (1993) Am. Biotechnol. Lab. 11:48-50) ao dia 5 pós-infecgäo. Ambos os métodos mostraram curvas de resposta á dose similares a partir das quais poderiam ser determinadas EC5oS.
Ensaio de Toxicidade Geral A toxicidade dos inibidores é determinada em paralelo em células MT4 falsamente infectadas (150.000 células/mL) estavelmente transformadas com um gene repórter de CMV-EGFP e cultivadas na presenga ou ausencia de concentragoes de composto de teste. Duas metodologías para leitura foram usadas, ou quantificagäo de fluorescencia de GFP ao dia 3, ou quantificagäo da viabilidade celular usando rezazurina ao dia 4. Ambos os métodos mostraram curvas de resposta á dose similares a partir das quais poderiam ser determinadas CC50S. HS-Rezazurina a 50%
Para o Ensaio antiviral na presenga de soro humano a 50%, células MT-4 foram infectadas com VIH-1 IIIB a urna MOI de 0,001 a 0,01 CCID5o/célula em meio RPMI1640. Após 1 h de incubagäo, as células foram lavadas e plaqueadas numa placa de 96 pogos contendo diluigóes em série de composto na presenga de soro fetal de vitelo (FCS) a 10%, ou soro humano a 50%. Após incubagäo de 4 dias, a EC50 na presenga de soro humano a 50% foi determinada por um ensaio da viabilidade celular usando resazurina.
Tabela 4
Na seguinte Tabela, as Estirpes A, B, e C säo isolados clínicos que incluem as seguintes mutagoes de resistencia a inibidores da protease no dominio da protease (as mutagöes de fundo nao sao mencionadas).
B M046I 10 5 0V
A M046I I084V
C G048G/V V082A A última coluna lista os resultados para a estirpe de tipo selvagem IIB na presenga de células MT-4 soro humano a 50%.
Lisboa, 12 de Maio de 2015

Claims (19)

  1. REIVINDICALES 1. Um composto da fórmula I:
    em que R1 é halo, alcoxi Ci_4, trifluorometoxi; R2 é um grupo da fórmula:
    R3 é um grupo da fórmula:
    R4 é um grupo da fórmula:
    n é 0 ou 1; cada A é independentemente CH ou N; R5 e R6 sao independentemente hidrogénio, alquilo Ci_4, ou halo; R7 é alquilo Ci_4 ou alcoxi Ci_4alquilo Ci_4; R8 é alquilo Ci_4 ou alcoxi Ci_4alquilo Ci_4; cada R9 é independentemente alquilo Ci_4, ciclopropilo, trifluorometilo, alcoxi Ci_4, ou dimetilamino; R10 é hidrogénio, alquilo Ci-4, ciclopropilo, trif luorometilo, alcoxi Ci_4, ou dimetilamino; R11 é hidrogénio ou alquilo Ci-4; os seus sais de adigáo farmacéuticamente aceitáveis e os seus solvatos farmacéuticamente aceitáveis.
  2. 2. 0 compoto da reivindicagäo 1 em que R1 é halo ou metoxi.
  3. 3. 0 compoto da reivindicagäo 1 em que R1 é flúor ou cloro; cujo flúor ou cloro está substituido na posigáo orto; ou R1 é metoxi; cujo metoxi está substituido na posigáo meta.
  4. 4. 0 composto de qualquer urna das reivindicagöes 1 a 3, em que R2 é um grupo da fórmula
  5. 5. 0 composto de qualquer urna das reivindicagöes 1 a 3, em que R2 é um grupo da fórmula
  6. 6. Um composto de qualquer urna das reivindicagöes 1 a 5, em que R5 é hidrogénio, e R6 é halo ou alquilo Ci_4; R5 é halo e R6 é hidrogénio; R5 é halo ou alquilo Ci_4, e R6 é hidrogénio; ou R5 e R6 säo ambos hidrogénio, ou säo ambos halo; R11 é alquilo Ci_4.
  7. 7. Um composto de qualquer urna das reivindicagöes 1 a 5, em que R5 é hidrogénio e R6 é flúor ou cloro; R5 é flúor ou cloro e R6 é hidrogénio; R5 é hidrogénio e R6 é metilo; R5 e R6 sao ambos hidrogénio, ou R5 é cloro e R6 é flúor; mais em particular em que R5 é hidrogénio e R6 é flúor; R5 é cloro e R6 é hidrogénio; R5 é hidrogénio e R6 é metilo; R5 e R6 sao ambos hidrogénio, ou R5 é cloro e R6 é flúor; e R11 é metilo.
  8. 8. 0 composto de qualquer urna das reivindicagöes 1 a 7, em que R3 é um grupo da fórmula
  9. 9. O composto de qualquer urna das reivindicagöes 1 a 7, em que R3 é um grupo da fórmula
  10. 10. 0 composto da reivindicagäo 9 em que R8 é metilo ou 2-metoxietilo.
  11. 11. 0 composto das reivindicagöes 1-10 em que R9 é alcoxi Ci-2 ou dimetilamino.
  12. 12. 0 composto de qualquer urna das reivindicagöes 1 a 11, em que R4 é um grupo tendo a estrutura química especificada na reivindicagäo 1, mas em que, no primeiro grupo, R e R , no segundo grupo, R e R , no terceiro grupo, R e R , no quarto grupo R e R , no quinto e no sexto grupo, R9 é R9e; cujos grupos podem ser representados como se segue:
    em que cada A é independentemente CH ou N; ou em que cada A é CH; R9a é alcoxi C1-4 ou dimetilamino; R9b é alcoxi C1-4 ou dimetilamino; R9c é alcoxi C1-4 ou dimetilamino; R9d é alquilo C1-4, ciclopropilo, trifluorometilo; R10 é hidrogénio, alquilo Ci_4, ciclopropilo, ou trifluorometilo; ou R10 é hidrogénio, metilo, ciclopropilo, ou trifluorometilo; cada R9e é independentemente alquilo C1-4, ciclopropilo, alcoxi C1-4, ou dimetilamino.
  13. 13. 0 composto da reivindicagäo 12 em que em R9a, R9b, R9c, R9d, ou R9e alcoxi C1-4 é metoxi e alquilo C1-4 é metilo.
  14. 14. 0 composto de qualquer urna das reivindicagóes 1 a 7 em que R4 é:
    em que A é CH e R9a é metoxi ou dimetilamino.
  15. 15. 0 composto da reivindicagäo 1 tendo a fórmula
  16. 16. 0 composto da reivindicagäo 1 tendo a fórmula
  17. 17. O composto da reivindicagäo 1 tendo a fórmula
  18. 18. 0 composto como reivindicado em qualquer urna das reivindicagoes 1-17 para uso como um medicamento.
  19. 19. Urna composigao farmacéutica compreendendo urna quantidade eficaz de um composto da fórmula I como definido em qualquer urna das reivindicagoes 1-17 e um transportador. Lisboa, 12 de Maio de 2015 European Patent Office 80298 MUNICH GERMANY
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    Communication concerning the registration of amendments relating to O' a transfer (R. 22 and 85 EPC) □ entries pertaining to the applicant / the proprietor (R. 143(1 )(f) EPC) As requested, the entries pertaining to the applicant of the above-mentioned European patent application / to the proprietor of the above-mentioned European patent have been amended to the following: AL AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES Fl FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MK MT NL NO PL PT RO RS SE Sl SK SM TR Janssen Sciences Ireland UC Eastgate Village, Eastgate Little Island, County Cork/IE AL AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES Fl FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MK MT NL NO PL PT RO RS SE Sl SK SM TR Medivir AB P.O. Box 1086 141 22 Huddinge/SE The registration of the changes has taken effect on 05.02.15. In the case of a published application / a patent, the change will be recorded in the Register of European Patents and published in the European Patent Bulletin (Section 1.12 /11.12). Your attention is drawn to the fact that, in the case of the registration of a transfer, any automatic debit order only ceases to be effective from the date of its express revocation (cf. point 14(c) of the Arrangements for the automatic debiting procedure, Supplementary publication 4 - OJ EPO 2014).
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