PT1940465E

PT1940465E - Nova utilização para compostos de il-1 beta

Info

Publication number: PT1940465E
Application number: PT06826560T
Authority: PT
Inventors: Hermann Gram; Phil Lowe; Thomas Jung; Timothy Wright; Trevor Mundel
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2005-10-26
Filing date: 2006-10-24
Publication date: 2012-10-03
Also published as: IL245387A0; US8409576B2; CY2018018I2; BRPI0617830B1; US20080286266A1; PH12013501287B1; PH12020500559A1; WO2007050607A2; BRPI0617830B8; US8105587B2; HUS1800025I1; KR20150013834A; CA2898369A1; AU2006306280A1; SI1940465T1; RU2008120625A; NO20200810A1; PH12013501287A1; LU92326I2; US20180201674A1

Description

ΡΕ1940465 1 DESCRIÇÃO " NOVA UTILIZAÇÃO PARA COMPOSTOS DE IL-1 BETA "

Este invento está relacionado com uma nova utilização de compostos que destroem ligando IL-ip/receptor de IL-1 (aqui referidos como "compostos de IL-1 beta"); tais como compostos de pequenas moléculas que destroem a interacção ligando IL-1β-receptor de IL-1, anticorpos contra IL-Ιβ ou anticorpos contra o receptor de IL-1, e.g. moléculas de ligação a IL-Ιβ aqui descritas, e.g. anticorpos aqui descritos, e.g. compostos de ligação a IL-Ιβ ou compostos de ligação ao receptor de IL-1, e/ou compostos de RNA que baixam o nivel de proteína dos ligandos IL-Ιβ ou do receptor de IL-1, no tratamento e/ou prevenção de síndromes auto-inflamatórias, e.g. síndrome da artrite reumatóide juvenil ou da artrite reumatóide do adulto, e com métodos de tratamento e/ou prevenção de síndromes auto-infla-matórias, e.g. síndrome da artrite reumatóide juvenil ou síndrome da artrite reumatóide do adulto, em mamíferos, particularmente seres humanos. A interleucina-ΐβ (IL-1 beta ou IL-Ιβ ou inter-leucina-ΐβ possuem aqui o mesmo significado) é um forte imunomodulador que medeia uma larga gama de respostas imunes e inflamatórias. A produção inapropriada ou excessiva de IL-Ιβ está associada à patologia de várias doenças 2 ΡΕ1940465 e distúrbios, tais como septicemia, choque séptico ou endotóxico, alergias, asma, perda de osso, isquemia, choque, artrite reumatóide e outros distúrbios inflamatórios. Os anticorpos contra IL-Ιβ têm sido propostos para usar no tratamento de doenças e distúrbios mediados por IL-1; ver por exemplo, WO 95/01997 e a discussão na sua introdução e WO 02/16436 e o seu conteúdo.

De acordo com o presente invento, foi agora surpreendentemente encontrado que os compostos de IL-1 beta são úteis na prevenção e tratamento de sindromes auto-inflamatórios em doentes tais como mamíferos, particularmente seres humanos. As sindromes auto-inflamatórias de acordo com o presente invento são e.g., mas não lhes estando limitados, um grupo de distúrbios hereditários caracterizados por episódios recorrentes de inflamação que, ao contrário das doenças auto-imunes, não possuem títulos elevados de auto-anticorpos ou de células T específicas de antigénio. Ainda, as sindromes auto-inflamatórias de acordo com o invento mostram aumento da secreção de IL-1 beta (perda do papel regulador negativo da pirina que parece estar mutada nas referidas doenças), activação de NFkB e incapacidade de apoptose dos leucócitos). As sindromes auto-inflamatórias de acordo com o presente invento são as sindromes de Muckle-Wells (MWS), a síndrome auto-infla-matória familiar induzida pelo frio (FCAS), a síndrome inflamatória multi-sistema do recém-nascido (NOMID), sindrome articular, cutâneo, neurológico crónico infantil (CINCA), febre familiar do Mediterrâneo (FMF) e/ou determinadas 3 ΡΕ1940465 formas de artrite juvenil tais como artrite juvenil sistémica (SOIJA), determinadas formas de artrite reumatóide juvenil tais como artrite reumatóide sistémica idiopática juvenil e/ou certas formas de artrite reumatóide do adulto. De preferência, os compostos de IL-1 beta são úteis na prevenção e tratamento de artrite reumatóide juvenil e de artrite reumatóide do adulto e/ou sindrome de Muckle Wells. A artrite idiopática sistémica juvenil era ante-riormente tratada com um inibidor anti-ILIRa, anaquinra (Pascual et al., 2005, vol. 201, páginas 1479-1486).

De acordo com os resultados particulares do presente invento, são proporcionadas as seguintes realizações: O presente invento diz respeito a composições e métodos para a prevenção e tratamento de sindromes auto-inflamatórias em mamíferos, incluindo seres humanos. Assim, os compostos de IL-1 beta são igualmente úteis para preparar fármacos e medicamentos para o tratamento de sindromes auto-inflamatórias. Num aspecto específico, tais fármacos e medicamentos compreendem uma quantidade tera-peuticamente eficaz dos compostos IL-1 beta com um veículo aceitável em termos farmacêuticos.

Numa outra realização, o presente invento proporciona a utilização de um anticorpo que se liga especifica-mente a qualquer um dos polipéptidos acima ou abaixo descritos, e.g. ligando IL-Ιβ ou receptor de IL-Ιβ, de 4 ΡΕ1940465 preferência ligando IL-Ιβ, na prevenção e/ou tratamento de artrite reumatóide juvenil ou do sindrome da artrite reumatóide do adulto e/ou outras sindromes auto-inflamatórias e/ou sindrome de Muckle Wells. Facultativamente, o anticorpo é um anticorpo monoclonal, anticorpo humanizado, fragmento de anticorpo ou anticorpo de cadeia simples. Num aspecto, o presente invento diz respeito a um anticorpo isolado que se liga a um ligando IL-Ιβ. Num outro aspecto, o anticorpo inibe ou neutraliza a actividade de um ligando IL-Ιβ (um anticorpo antagonista) . Num outro aspecto, o anticorpo é um anticorpo monoclonal, o qual possui resíduos de uma região determinante de complementaridade (CDR) humana ou não humana e resíduos de uma região estrutural (FR) humana. 0 anticorpo pode ser marcado e pode ser imobilizado num suporte sólido. Num outro aspecto, o anticorpo é um fragmento de anticorpo, anticorpo monoclonal, anticorpo de cadeia simples ou anticorpo anti-idiotípico. Ainda numa outra realização, o presente invento proporciona uma composição compreendendo um anticorpo anti-ligando IL-Ιβ ou anti-receptor de IL-Ιβ, numa mistura com um veículo farmaceuti-camente aceitável. Num aspecto, a composição compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do anticorpo. De preferência, a composição é estéril. A composição pode ser administrada na forma de uma formulação farmacêutica típica, a qual pode ser preservada para se conseguir uma maior estabilidade no armazenamento. Como alternativa, o anticorpo é um anticorpo monoclonal, um fragmento de anticorpo, um anticorpo humanizado ou um anticorpo de cadeia simples. 5 ΡΕ1940465

Numa outra realização, o invento proporciona a utilização de compostos de IL-Ιβ, e.g., anticorpo anti-IL-1β, o qual é capaz de interromper a ansa de retroacção positiva de IL-Ιβ in vivo; na prevenção e/ou tratamento de artrite reumatóide juvenil ou de artrite reumatóide do adulto e/ou de outros sindromes auto-inflamatórias e/ou sindrome de Muckle Wells. Esta retroacção positiva in vivo conduz à produção excessiva auto-sustentada de IL-lb nestes doentes.

Numa outra realização, o presente invento proporciona a utilização de compostos de IL-1 beta, e.g. anticorpo anti-IL-1 beta, em doenças com uma mutação no gene MEFV, localizado no cromossoma 16pl3 e que codifica a proteína pirina (também conhecida como marenostrina). A pirina é expressa em granulócitos, monócitos e fibroblastos sinoviais. A pirina está envolvida no processamento de IL-1 beta.

Numa outra realização, o invento está relacionado com um artigo de produção, compreendendo: (a) uma composição de matéria compreendendo um anticorpo anti-ligando de IL-1 beta ou anti-receptor de IL-1 beta, de preferência um anticorpo anti-ligando IL-Ιβ; (b) um recipiente contendo a referida composição; e (c) um rótulo colocado no referido contentor ou uma bula no referido recipiente referindo a utilização do referido anticorpo anti-ligando IL-Ιβ ou anti-receptor de IL-Ιβ, de preferência um anticorpo anti-IL-Ιβ, no tratamento de artrite reumatóide juvenil ou de artrite reumatóide do adulto e/ou de sindromes auto- 6 ΡΕ1940465 inflamatórias e/ou sindrome de Muckle Wells. A composição pode compreender uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo anti-ligando IL-Ιβ ou anti-receptor de IL-Ιβ, de preferência um ligando anti-IL-Ιβ.

Ainda numa outra realização, o presente invento proporciona um método ou utilização como definido atrás, compreendendo a co-administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de compostos IL-1 beta na forma livre ou na forma de sal, de preferência numa forma de administração farmaceuticamente aceitável, como seja intravenosamente ou subcutaneamente, e de uma segunda substância fármaco, a referida segunda substância fármaco sendo um composto anti-inflamatório na forma livre ou na forma de sal.

Ainda numa outra realização, um composto de IL-1 beta usado de acordo com o presente invento é uma molécula de ligação a IL-Ιβ que compreende um local de ligação ao antigénio compreendendo pelo menos um dominio variável da cadeia pesada de imunoglobulina (VH) que compreende sucessivamente as regiões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3, a referida CDR1 tendo a sequência de aminoácidos Val-Tyr-Gly-Met-Asn, a referida CDR2 tendo a sequência de aminoácidos Ile-Ile-Trp-Tyr-Asp-Gly-Asp-Asn-Gln-Tyr-Tyr-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Gly e a referida CDR3 tendo a sequência de aminoácidos Asp-Leu-Arg-Thr-Gly-Pro; e os seus equivalentes directos.

Ainda numa outra realização, um composto de IL-1 7 ΡΕ1940465 beta usado de acordo com o invento é uma molécula de ligação a IL-Ιβ que compreende pelo menos um domínio variável da cadeia leve de imunoglobulina (VL) a qual compreende sucessivamente as regiões hipervariáveis CDR1'; CDR2' e CDR3'; a referida CDR1' possui a sequência de aminoácidos Arg-Ala-Ser-Gln-Ser-Ile-Gly-Ser-Ser-Leu-His, a referida CDR2' tendo a sequência de aminoácidos Ala-Ser-Gln-Ser-Phe-Ser e a referida CDR3' possui a sequência de aminoácidos His-Gln-Ser-Ser-Ser-Leu-Pro e seus equivalentes directos.

Ainda numa outra realização, um composto de IL-1 beta usado de acordo com o invento é uma molécula de ligação a IL-1 beta de domínio simples compreendendo uma cadeia pesada de imunoglobulina isolada compreendendo um domínio variável da cadeia pesada (VH) como definido atrás, e.g. para a preparação de um medicamento para o tratamento de artrite reumatóide juvenil e de artrite reumatóide do adulto e/ou síndrome de Muckle Wells.

Ainda numa outra realização, um composto de IL-1 beta usado de acordo com o presente invento é uma molécula de ligação a IL-Ιβ compreendendo os domínios variáveis da cadeia pesada (VH) e da cadeia leve (VL) em que a referida molécula de ligação a IL-Ιβ compreende pelo menos um local de ligação ao antigénio compreendendo: a) um domínio variável da cadeia pesada de imunoglobulina (VH) que compreende sucessivamente regiões 8 ΡΕ1940465 hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3, a referida CDR1 tendo a sequência de aminoácidos Val-Tyr-Gly-Met-Asn, a referida CDR2 tendo a sequência de aminoácidos Ile-Ile-Trp-Tyr-Asp-Gly-Asp-Asn-Gln-Tyr-Tyr-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Gly e a referida CDR3 tendo a sequência de aminoácidos Asp-Leu-Arq-Thr-Gly-Pro, e b) um dominio variável da cadeia leve de imuno-globulina (VL) o qual compreende sucessivamente as regiões hipervariáveis CDR1'; CDR2' e CDR3'; a referida CDR1' possui a sequência de aminoácidos Arg-Ala-Ser-Gln-Ser-Ile-Gly-Ser-Ser-Leu-His, a referida CDR2' tendo a sequência de aminoácidos Ala-Ser-Gln-Ser-Phe-Ser e a referida CDR3' possui a sequência de aminoácidos His-Gln-Ser-Ser-Ser-Leu-Pro; e seus equivalentes directos. A menos que de outra forma seja especificado, qualquer cadeia polipeptídica é aqui descrita como tendo uma sequência de aminoácidos começando na extremidade N-terminal e terminando na extremidade C-terminal.

Quando o local de ligação ao antigénio compreende os dominios VH e VL, estes podem estar situados na mesma molécula de polipéptido ou, de preferência, cada um dos domínios pode estar numa cadeia diferente, o dominio VH sendo parte de uma cadeia pesada de imunoglobulina ou fragmento da mesma e o VL sendo parte de uma cadeia leve de imunoglobulina ou seu fragmento. 9 ΡΕ1940465

Por "molécula de ligação a IL-Ιβ" pretende-se significar qualquer molécula capaz de se ligar ao ligando IL-Ιβ sozinha ou associada a outras moléculas. A reacção de ligação pode ser mostrada por métodos convencionais (ensaios qualitativos) incluindo, por exemplo, um bioensaio para determinar a inibição da ligação de IL-Ιβ ao seu receptor ou qualquer tipo de ensaios de ligação, com referência a um teste com controlo negativo em que é usado um anticorpo de especificidade não relacionada mas do mesmo isotipo, e.g., um anticorpo anti-CD25. Vantajosamente, a ligação a IL-Ιβ das moléculas de ligação a IL-Ιβ do invento pode ser mostrada num ensaio de ligação competitiva.

Exemplos de moléculas de ligação ao antigénio incluem anticorpos como os produzidos pelas células B ou hibridomas e quiméricos, anticorpos com enxertos de CDR ou humanos ou qualquer fragmento dos mesmos, e.g. fragmentos F(ab')2 e Fab, assim como anticorpos de cadeia simples ou anticorpos de dominio simples.

Um anticorpo de cadeia simples consiste em domínios variáveis das cadeias pesada e leve de um anticorpo ligado covalentemente a um elemento de ligação peptídico geralmente consistindo em 10 a 30 aminoácidos, de preferência entre 15 e 25 aminoácidos. Assim, tal estrutura não inclui a parte constante das cadeias pesada e leve e espera-se que o pequeno péptido espaçador seja menos antigénico que a globalidade da parte constante. Por 10 ΡΕ1940465 "anticorpo quimérico" pretende-se significar um anticorpo em que as regiões constantes das cadeias pesadas ou leves ou de ambas são de origem humana enquanto os domínios variáveis de ambas as cadeias pesada e leve não são humanos (e.g., murinos) ou são de origem humana mas derivados de um anticorpo humano diferente. Por "anticorpo com CDR enxertada" pretende-se significar um anticorpo em que as regiões hipervariáveis (CDRs) derivam de um anticorpo dador, como seja um anticorpo não humano (e.g. murino) ou de um anticorpo humano diferente, enquanto a totalidade ou substancialmente todas as partes da imunoglobulina, e.g. as regiões constantes e as partes altamente conservadas dos domínios variáveis, i.e. as regiões estruturais, são derivadas de um anticorpo aceitador, e.g. um anticorpo de origem humana. Um anticorpo com CDR enxertada pode, no entanto, conter alguns aminoácidos da sequência dadora nas regiões estruturais, por exemplo nas partes das regiões estruturais adjacentes às regiões hipervariáveis. Por "anticorpo humano" pretende-se significar um anticorpo em que as regiões constantes e variáveis de ambas as cadeias pesada e leve são todas de origem humana ou substancialmente idênticas a sequências de origem humana, não necessariamente do mesmo anticorpo e inclui anticorpos produzidos por murganhos em que os genes das partes variáveis e constantes da imunoglobulina murina foram substituídos pelas suas contrapartes humanas, e.g. como descrito em termos gerais em EP 0546073 Bl, USP 5545806, USP 5569825, USP 5625126, USP 5633425, USP 5661016, USP 5770429, EP 0 438474 Bl e EP 0 463151 Bl. 11 ΡΕ1940465

Anticorpos humanos são as moléculas particularmente preferidas do invento que se ligam a IL-Ιβ, especialmente o anticorpo ACZ 885 como daqui em diante descrito nos Exemplos e em WO 02/16436.

Assim nos anticorpos preferidos do invento, os dominios variáveis das cadeias pesadas e leves são de origem humana, por exemplo os do anticorpo ACZ 8 85 que estão apresentados em SEQ ID NO:1 e SEQ ID NO:2. Os dominios da região constante, de preferência, também compreendem dominios adequados da região constante humana, por exemplo como descrito em "Sequences of Proteins of Immunological Interest", Kabat E.A. et al., US Department of Health and Human Services, Public Health Service, National Institute of Health. FR3 ' e FR4 ' .

As regiões hipervariáveis podem estar associadas a qualquer tipo de regiões estruturais, ainda que preferencialmente sejam de origem humana. Regiões estruturais adequadas estão descritas em Kabat E.A. et al., ibid. A região estrutural da cadeia pesada preferida é uma região estrutural da cadeia pesada humana, por exemplo a do anticorpo ACZ 885 que está apresentada em SEQ ID NO:l. Consiste na sequência das regiões FR1, FR2, FR3 e FR4. De modo semelhante, SEQ ID NO:12 mostra a região estrutural preferida da cadeia leve ACZ 885 que consiste, sucessivamente, nas regiões FR1', FR2', 12 ΡΕ1940465

Assim, o invento também proporciona uma molécula de ligação a IL-Ιβ que compreende pelo menos um local de ligação ao antigénio compreendendo um primeiro dominio tendo uma sequência de aminoácidos substancialmente idêntica à apresentada em SEQ ID N0:1 começando com o ami-noácido na posição 1 e terminando com o aminoácido na posição 118 ou um primeiro dominio como atrás descrito e um segundo domínio tendo uma sequência de aminoácidos substancialmente idêntica à mostrada em SEQ ID NO:2, começando com o aminoácido na posição 1 e terminando com o aminoácido na posição 107.

Os anticorpos monoclonais induzidos contra uma proteína natural encontrada em todos os seres humanos são tipicamente desenvolvidos num sistema não humano, e.g. em murganhos, e como tal são tipicamente proteínas não humanas. Como consequência directa disto, um anticorpo xenogé-nico conforme produzido por um hibridoma, quando administrado a seres humanos, induz uma resposta imune indesejável que é predominantemente mediada pela parte constante da imunoglobulina xenogénica. Isto claramente limita a utilização de tais anticorpos uma vez que não podem ser administrados ao longo de um período de tempo prolongado. Assim, é particularmente preferido usar anticorpos de cadeia simples, de domínios simples, quiméricos, com enxertos de CDRs ou, especialmente, anticorpos humanos que com grande probabilidade não induzem uma resposta alogénica substancial quando administrados aos seres humanos. 13 ΡΕ1940465

Face ao que foi dito, uma molécula de ligação a IL-Ιβ do invento é seleccionada a partir de um anticorpo anti-IL-Ιβ que compreende pelo menos a) uma cadeia pesada de imunoglobulina ou seu fragmento que compreende (i) um domínio variável compreendendo sucessivamente as regiões hipervariáveis CDRl, CDR2 e CDR3 e (ii) a parte constante ou seu fragmento de uma cadeia pesada humana: a referida CDRl tendo a sequência de aminoácidos Val-Tyr-Gly-Met-Asn, a referida CDR2 tendo a sequência de aminoácidos Ile-Ile-Trp-Tyr-Asp-Gly-Asp-Asn-Gln-Tyr-Tyr-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Gly, e a referida CDR3 tendo a sequência de aminoácidos Asp-Leu-Arg,Thr-Gly-Pro e b) uma cadeia leve de imunoglobulina ou fragmento da mesma, a qual compreende (i) um domínio variável compreendendo sucessivamente as regiões hipervariáveis e facultativamente também as regiões hipervariáveis CDRl', CDR2' e CDR3' e (ii) a parte constante ou seu fragmento de uma cadeia leve humana, a referida CDRl' tendo a sequência de aminoácidos Arg-Ala-Ser-Gln-Ser-Ile-Gly-Ser-Ser-Leu-His, a referida CDR2' tendo a sequência de aminoácidos Ala-Ser-Gln-Ser-Phe-Ser e a referida CDR3' possuindo a sequência de aminoácidos His-Gln-Ser-Ser-Ser-Leu-Pro; e seus equivalentes directos.

Como alternativa, uma molécula de ligação a IL-Ιβ 14 ΡΕ1940465 do invento pode ser seleccionada a partir de uma molécula de ligação de cadeia simples, a qual compreende um local de ligação ao antigénio compreendendo a) um primeiro domínio compreendendo sucessivamente as regiões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3, a referida CDR1 tendo a sequência de aminoácidos Val-Tyr-Gly-Met-Asn, a referida CDR2 tendo a sequência de aminoácidos Ile-Ile-Trp-Tyr-Asp-Gly-Asp-Asn-Gln-Tyr-Tyr-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Gly e a referida CDR3 tendo a sequência de aminoácidos Asp-Leu-Arg-Thr-Gly-Pro, b) um segundo domínio compreendendo as regiões hipervariáveis CDR1', CDR2' e CDR3', a referida CDR1' tendo a sequência de aminoácidos Arg-Ala-Ser-Gln-Ser-Ile-Gly-Ser-Ser-Leu-His, a referida CDR2' tendo a sequência de aminoácidos Ala-Ser-Gln-Ser-Phe-Ser e a referida CDR3' tendo a sequência de aminoácidos His-Gln-Ser-Ser-Ser-Leu-Pro e c) um elemento de ligação peptídico que está ligado à extremidade N-terminal do primeiro domínio e à extremidade C-terminal do segundo domínio ou à extremidade C-terminal do primeiro domínio e à extremidade N-terminal do segundo domínio; e seus equivalentes directos.

Como é conhecido, pequenas alterações numa sequência de aminoácidos, como sejam deleção, adição ou substituição de um, alguns ou mesmos vários aminoácidos 15 ΡΕ1940465 podem conduzir a uma forma alélica da proteína original que possui propriedades substancialmente idênticas.

Assim, pelo termo "seus equivalentes directos" pretende-se significar qualquer molécula de ligação a IL-Ιβ de domínio simples (molécula X) (i) em que as regiões hipervariáveis CDRl, CDR2 e CDR3, consideradas na totalidade, são pelo menos 80% homólogas, de preferência pelo menos 90% homólogas, mais de preferência pelo menos 95% homólogas das regiões hipervariáveis como demonstrado atrás e (ii) que é capaz de inibir a ligação de IL-Ιβ ao seu receptor substancialmente no mesmo grau que uma molécula de referência tendo as regiões estruturais idênticas às da molécula X mas tendo as regiões hipervariáveis CDRl, CDR2 e CDR3 idênticas às mostradas atrás, ou qualquer molécula de ligação a IL-Ιβ tendo pelo menos dois domínios por local de ligação (molécula X') (i) em que as regiões hipervariáveis CDRl, CDR2, CDR3, CDRl', CDR2' e CDR3' consideradas na totalidade são pelo menos 80% homólogas, de preferência pelo menos 90% homólogas, mais de preferência pelo menos 95% homólogas das regiões hipervariáveis como demonstrado atrás e (ii) que é capaz de inibir a ligação de IL-Ιβ ao seu 16 ΡΕ1940465 receptor substancialmente no mesmo grau que uma molécula de referência tendo as regiões estruturais idênticas às da molécula X', mas tendo as regiões hipervariáveis CDR1, CDR2, CDR3, CDR1', CDR2' e CDR3', idênticas às mostradas atrás.

Num outro aspecto a divulgação também proporciona uma molécula de ligação a IL-1 beta compreendendo ambos os domínios variáveis da cadeia pesada (VH) e da cadeia leve (VL) em que a referida molécula de ligação a IL-1 beta compreende pelo menos um local de ligação ao antigénio compreendendo: a) um domínio variável da cadeia pesada de imunoglobulina (VH) que compreende sucessivamente as regiões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3, a referida CDR1 tendo a sequência de aminoácidos Ser-Tyr-Trp-Ile-Gly, a referida CDR2 tendo a sequência de aminoácidos Ile-Ile-Tyr-Pro-Ser-Asp-Ser-Asp-Thr-Arg-Tyr-Ser-Pro-Ser-Phe-Gln-Gly e a referida CDR3 tendo a sequência de aminoácidos Tyr-Thr-Asn-Trp-Asp-Ala-Phe-Asp-Ile e b) um domínio variável da cadeia leve de imunoglobulina (VL) que compreende uma região hipervariável CDR3' tendo a sequência de aminoácidos Gln-Gln-Arg-Ser-Asn-Trp-Met-Phe-Pro; e seus equivalentes directos. 17 ΡΕ1940465

Num outro aspecto o invento proporciona uma molécula de ligação a IL-1 beta compreendendo os domínios variáveis da cadeia pesada (VH) e leve (VL) em que a referida molécula de ligação a IL-1 beta compreende pelo menos um local de ligação ao antigénio compreendendo: a) um domínio variável da cadeia pesada de imuno-globulina (VH) que compreende sucessivamente as regiões hipervariáveis CDR1, CDR2 e CDR3, a referida CDR1 tendo a sequência de aminoácidos Ser-Tyr-Trp-Ile-Gly, a referida CDR2 tendo a sequência de aminoácidos Ile-Ile-Tyr-Pro-Ser-Asp-Ser-Asp-Thr-Arg-Tyr-Ser-Pro-Ser-Phe-Gln-Gly e a referida CDR3 tendo a sequência de aminoácidos Tyr-Thr-Asn-Trp-Asp-Ala-Phe-Asp-Ile e b) um domínio variável da cadeia leve de imunoglo-bulina (VL) que compreende sucessivamente as regiões hipervariáveis CDR1', CDR2' e CDR3', a referida CDR1' tendo a sequência de aminoácidos Arg-Ala-Ser-Gln-Ser-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu Ala, a referida CDR2' tendo a sequência de aminoácidos Asp-Ala-Ser-Asn-Arg-Ala-Thr e a referida CDR3' tendo a sequência de aminoácidos Gln-Gln-Arg-Ser-Asn-Trp-Met-Phe-Pro; e seus equivalentes directos.

Na presente descrição, as sequências de aminoácidos são pelo menos 80% homólogas umas das outras se tiverem pelo menos 80% de resíduos de aminoácidos idênticos 18 ΡΕ1940465 nas posições correspondentes quando as sequências estão alinhadas de forma óptima, os hiatos ou inserções nas sequências de aminoácidos sendo contados como residuos não idênticos. A inibição da ligação de IL-Ιβ ao seu receptor pode ser convenientemente testada em vários ensaios incluindo os ensaios descritos em WO 02/16436. Pelo termo "no mesmo grau" pretende-se significar que a referência e as moléculas equivalentes apresentam numa base estatística, curvas de inibição da ligação a IL-Ιβ essencialmente idênticas num dos ensaios atrás referidos. Por exemplo, as moléculas de ligação a IL-Ιβ do invento tipicamente terão IC5os para a inibição da ligação de IL-Ιβ ao seu receptor que estão dentro +/-x5 do IC50, de preferência sendo substancialmente o mesmo, da molécula de referência correspondente quando testado como descrito atrás.

Por exemplo, o ensaio usado pode ser um ensaio de inibição competitiva da ligação de IL-Ιβ a receptores de IL-Ιβ solúveis e às moléculas de ligação a IL-Ιβ do invento.

Mais de preferência, a molécula de ligação a IL-Ιβ para usar de acordo com o invento é um anticorpo anti-IL-1 humana que compreende pelo menos a) uma cadeia pesada que compreende um domínio variável tendo uma sequência de aminoácidos substan- 19 ΡΕ1940465 cialmente idêntica à mostrada em SEQ ID N0:1 começando com o aminoácido na posição 1 e terminando com o aminoácido na posição 118 e a parte constante de uma cadeia pesada humana; e b) uma cadeia leve que compreende um dominio variável tendo uma sequência de aminoácidos substancialmente idêntica à mostrada em SEQ ID NO:2 começando com o aminoácido na posição 1 e terminando com o aminoácido na posição 107 e a parte constante de uma cadeia leve humana.

Mais de preferência, a molécula de ligação a IL-1β para usar de acordo com a descrição é ACZ885 (ver Exemplo). A parte constante de uma cadeia pesada humana pode ser do tipo γι, γ2, Y3, Ya, μ, oí, oí2, δ ou ε, de preferência do tipo γ, mais de preferência do tipo γι, enquanto a parte constante de uma cadeia leve humana pode ser do tipo κ ou λ (que inclui os subtipos λχ, À2 e X3) mas é de preferência do tipo κ. As sequências de aminoácidos de todas estas partes constantes estão apresentadas em Kabat et al. ibid.

Uma molécula de ligação a IL-Ιβ da descrição pode ser produzida por técnicas de DNA recombinantes como e.g. descrito em WO 02/16436.

Numa outra realização do invento, os compostos de 20 ΡΕ1940465 IL-1 beta podem ser anticorpos que possuem especificidade de ligação para o epitopo antigénico de IL-Ιβ humana que inclui a ansa compreendendo o resíduo Glu 64 de IL-Ιβ humana madura (o resíduo Glu 64 de IL-Ιβ humana madura corresponde ao resíduo 180 do precursor 11-1 beta humano). Este epitopo está fora do local de reconhecimento do receptor de IL-1 beta e é assim mais surpreendente que os anticorpos contra este epitopo, e.g. o anticorpo ACZ 885, sejam capazes de inibir a ligação de IL-Ιβ ao seu receptor. Assim a utilização de tais anticorpos para o tratamento de artrite reumatóide juvenil e de artrite reumatóide do adulto e/ou síndromes auto-inflamatórias e/ou síndrome de Muckle Wells é nova e está incluída no âmbito do presente invento.

Assim num outro aspecto o invento inclui a utilização de um anticorpo contra IL-Ιβ que possui especificidade de ligação a antigénio para um epitopo antigénico de IL-Ιβ humana, que inclui a ansa compreendendo o resíduo Glu 64 de IL-Ιβ humana madura e que é capaz de inibir a ligação de IL-Ιβ a este receptor, para o tratamento de artrite reumatóide juvenil ou de artrite reumatóide do adulto e/ou síndromes auto-inflamatórias e/ou síndrome de Muckle Wells.

Ainda noutros aspectos o invento inclui: i) utilização de um anticorpo contra IL-Ιβ que possui especificidade de ligação a antigénio para um 21 ΡΕ1940465 epitopo antigénico de IL-Ιβ humana madura, o qual inclui a ansa compreendendo Glu 64, e que é capaz de inibir a ligação de IL-Ιβ ao seu receptor, para a prevenção e/ou tratamento de artrite reumatóide juvenil ou de artrite reumatóide do adulto e/ou sindromes auto-inflamatórias e/ou sindrome de Muckle Wells, ii) um método para a prevenção e/ou tratamento de artrite reumatóide juvenil ou artrite reumatóide do adulto e/ou sindromes auto-inflamatórios e/ou sindrome de Muckle Wells num doente, o qual compreende a administração ao doente de uma quantidade eficaz de um anticorpo contra IL-Ιβ que possui especificidade de ligação ao antigénio para um epitopo antigénico de IL-Ιβ humana madura que inclui a ansa compreendendo Glu 64 e que é capaz de inibir a ligação de IL-Ιβ ao seu receptor; iii) uma composição farmacêutica compreendendo um anticorpo contra IL-Ιβ que possui especificidade de ligação a antigénio para um epitopo antigénico de IL-Ιβ humana madura que inclui a ansa compreendendo Glu 64 e que é capaz de inibir a ligação de IL-Ιβ ao seu receptor, em combinação com um excipiente, diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável; para o tratamento de artrite reumatóide juvenil ou artrite reumatóide do adulto e/ou sindromes auto-inflamatórias e/ou sindrome de Muckle Wells. iv) utilização de um anticorpo contra IL-Ιβ que possui especificidade de ligação ao antigénio para um epitopo antigénico de IL-Ιβ humana madura, o qual 22 ΡΕ1940465 inclui a ansa compreendendo Glu 64, e que é capaz de inibir a ligação de IL-Ιβ ao seu receptor, para a preparação de um medicamento para o tratamento de artrite reumatóide juvenil ou de artrite reumatóide do adulto e/ou sindromes auto-inflamatórias e/ou sindrome de Muckle Wells.

Para os fins da presente descrição um anticorpo é "capaz de inibir a ligação de IL-Ιβ" se o anticorpo for capaz de inibir a ligação de IL-Ιβ ao seu receptor substancialmente no mesmo grau que o anticorpo ACZ 885, i.e. possui uma constante de equilíbrio de dissociação (KD), medida, e.g., numa análise convencional BIAcore conforme descrito no Exemplo, de 10 nM ou inferior, e.g. 1 nM ou inferior, de preferência 100 pM ou inferior, mais de preferência 50 μΜ ou inferior.

Assim, num outro aspecto, o invento proporciona a utilização de um anticorpo contra IL-Ιβ que possui um KD para a ligação a IL-Ιβ de aproximadamente 10 nM, 1 nM, de preferência 100 pM, mais de preferência 50 pM ou menos para o tratamento de artrite reumatóide juvenil ou artrite reumatóide do adulto e/ou sindromes auto-inflamatórias. Este aspecto do invento também inclui métodos e composições para tais anticorpos de elevada afinidade, como descrito atrás para os anticorpos contra IL-Ιβ, tendo especificidade de ligação para um determinante antigénico de IL-Ιβ humana madura que inclui a ansa compreendendo Glu 64. 23 ΡΕ1940465

Na presente descrição a frase "artrite reumatóide juvenil ou artrite reumatóide do adulto e/ou sindromes auto-inflamatórias" engloba todas as doenças e condições médicas que sejam parte de artrite reumatóide juvenil ou da artrite reumatóide do adulto e/ou sindromes auto-inflama-tórioas, directa ou indirectamente, incluindo a causa, o desenvolvimento, o progresso, a persistência ou a patologia da doença ou condição.

Na presente descrição a frase "sindrome de Muckle Wells" (também "MWS") inclui todas as doenças e condições médicas que são partes do "sindrome de Muckle Wells", directa ou indirectamente, na doença ou condição médica, incluindo a causa, o desenvolvimento, o progresso, a persistência ou a patologia da doença ou condição. ABT578, AP23464, AP23573,

Os compostos da fórmula I podem ser administrados como o único ingrediente activo ou conjuntamente com, e.g. como um adjuvante, outros fármacos, e.g. agentes imuno-supressores ou imunomoduladores ou outros agentes anti-inflamatórios, e.g., para o tratamento ou prevenção da rejeição aguda ou crónica de alo-enxertos ou de xeno-enxertos ou de distúrbios inflamatórios ou auto-imunes, ou um agente quimioterapêutico, e.g. um agente anti-pro-liferativo de células malignas. Por exemplo, os anticorpos de acordo com o invento podem ser usados em combinação com um inibidor de calcineurina, e.g. ciclosporina A ou FK506; um inibidor de mTOR, e.g., rapamicina, 40-0-(2-hidroxi-etil)-rapamicina, CC1779, 24 ΡΕ1940465 ΑΡ23675, ΑΡ23841, TAFA-93, biolimus-7 ou biolimus-9; uma ascomicina tendo propriedades imuno-supressoras, e.g. ABT-281, ASM981, etc.; corticosteróides; ciclofosfamida; azati-opreno; metotrexato; leflunomida; mizoribina; ácido ou sal micofenólico; micofenolato mofetilo; 15-desoxispergualina ou um homólogo imuno-supressor, análogo ou derivado do mesmo; um inibidor de PKC, e.g. como descrito em WO 02/38561 ou WO 03/82859, e.g. o composto do Exemplo 56 ou 70; um inibidor da cinase JAK3, e.g. N-benzil-3,4-di-hidroxibenzilideno-cianoacetamida-ciano-(3,4-di-hidroxi)-]N-benzilcinamamida /Tyrphostin AG 490), prodigiosina 25C (PNU15 68 04); [4 -(4-'-hidroxifenil)-amino-6,7-dimetoxiqui- nazolina] (WHI-P131), [4-(3'-bromo-4'-hidroxifenil)-amino- 6,7-dimetoxiquinazolina] (WHI-P154), [4-(3',5'-dibromo-4'- hidroxifenil)-amino-6,7-dimetoxiquinazolina] WHI-P97, KRX-211, 3-{ (3R,4R)-4-metil-3-[metil-(7H-pirrolo[2,3-d]piri- midin-4-il)-amino]-piperidin-l-il}-3-oxopropionitrilo, na forma livre ou na forma de sal farmaceuticamente aceitável, e.g. mono-citrato (também designado CP-690,550) ou um composto como descrito em WO 04/052359 ou WO 05/066156; anticorpos monoclonais imuno-supressores, e.g., anticorpos monoclonais contra receptores de leucócitos, e.g., MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD8, CD25, CD28, CD40, CD45, CD52, CD58, CD80, CD86 ou seus ligandos; outros compostos imunomoduladores, e.g. uma molécula de ligação recombinante tendo pelo menos uma porção do domínio extracelular de CTLA4 ou um seu mutante, e.g., pelo menos uma porção extracelular de CTLA4 ou um seu mutante ligado a uma sequência proteica não CTLA4, e.g. CTLA4Ig (por ex. 25 ΡΕ1940465 designada ATCC 68629) ou um seu mutante, e.g. LEA29Y; inibidores das moléculas de adesão, e.g. antagonistas de LFA-1, ICAM-1 ou ICAM-3, antagonistas de VCAM-4 ou antagonistas de VLA-4; ou um agente quimioterapêutico, e.g. paclitaxel, gemcitabina, cisplatina, doxorrubicina ou 5-fluorouracilo; ou um agente anti-infeccioso. Os fármacos imunomoduladores que poderão ser úteis em combinação com um composto do presente invento incluem e.g. mediadores, e.g. inibidores, da actividade de mTOR, incluindo rapamicina da fórmula 41

e derivados da rapamicina, e.g. incluindo derivados 40-0-alquil-rapamicina, tais como derivados 40-O-hidroxialquil-rapamicina, tais como 40-0-(2-hidroxi)-etil-rapamicina (everolimus), derivados 32-desoxo-rapamicina e derivados 32-hidroxi-rapamicina, tais como 32-desoxo-rapamicina, derivados da rapamicina 16-0-substituidos tais como 16- 26 ΡΕ1940465 pent-2-iniloxi-32-desoxo-rapamicina, 16-pent-2-iniloxi-32 (S ou R)-di-hidro-rapamicina, 16-pent-2-iniiloxi-32 (S ou R)-di-hidro-40-0-(2-hidroxietil)-rapamicina, derivados de rapamicina que são acilados no grupo oxigénio na posição 40, e.g. derivados de rapamicina 40[3-hidroxi-2-(hidroxi-2-(hidroxi-metil)-2-metilpropanoato]-rapamicina (também conhecido como CC1779) que são substituídos na posição 40 com heterociclilo, e.g. 40-epi-(tetrazolil)-rapamicina (também conhecido como ABT578), os chamados rapalogos, e.g. como descrito em WO9802441, WO0114387 e WO0364383, como seja AP23573 e compostos descritos com o nome TAFA-93 e biolimus (biolimus A9).

Na presente descrição os termos "tratamento" ou "tratar" refere-se ao tratamento profiláctico ou preventivo assim como ao tratamento curativo ou modificador da doença, incluindo o tratamento de um doente em risco de contrair a doença ou suspeito de ter contraído a doença, assim como todos os doentes que estejam doentes ou que lhes tenha sido diagnosticado como sofrendo de uma doença ou condição médica, e inclui a supressão do relapso clínico. Um tratamento com êxito de acordo com o invento também inclui remissões de todos os sintomas reparáveis mas não remissões de sintomas irreparáveis. E.g. um dos sintomas de Muckle-Wells é a surdez neurossensorial progressiva que é normalmente irreparável e assim não existem expectativas que este sintoma possa ser tratado. No entanto, outros sintomas reparáveis de Muckle-Wells, tais como urticária, dores musculares, fadiga e conjuntivite podem desaparecer 27 ΡΕ1940465 completamente num tratamento com êxito de acordo com o invento. Uma outra medida de um tratamento com êxito é o decréscimo de biomarcadores relevantes para sindromes auto-inflamatórias, e.g. Muckle-Wells, i.e. o decréscimo da proteina amilóide do soro (SAA) e da proteina C reactiva (CRP) para a gama normal, i.e. <10 mg por litro de soro nos doentes.

Na presente descrição, a doença "Muckle-Wells" é entre outras (patologias moleculares) determinada de acordo com os seus sintomas clinicos que são os episódios inflamatórios febris agudos da artrite e urticária, surdez neurssensorial progressiva e facultativamente amiloidose de múltiplos órgãos a longo prazo (cerca de 25% dos casos). A patologia molecular é causada por uma ou várias mutações no gene MEFV, situado no cromossoma 16pl3, que codifica a proteina designada pirina.

As moléculas de ligação a IL-Ιβ como atrás definidas, em particular as moléculas de ligação a IL-Ιβ de acordo com o primeiro e o segundo aspectos dos anticorpos do invento, os quais possuem especificidade de ligação para o epitopo antigénico de IL-Ιβ humana madura que inclui a ansa compreendendo Glu 64, em particular anticorpos que são capazes de inibir a ligação de IL-Ιβ ao seu receptor; e anticorpos contra IL-Ιβ que possuem um KD para a ligação a IL-Ιβ de aproximadamente 10 nM, 1 nM, de preferência 100 pM, mais de preferência 50 pM ou inferior são aqui referidos como anticorpos do invento. 28 ΡΕ1940465

Ainda numa outra realização do invento, as outras utilizações dos compostos de IL-Ιβ, e.g. os anticorpos do invento são como se segue: A prevenção e o tratamento de doença inflamatória intestinal (IBD), artrite juvenil, artrite reactiva, espondilite anquilosante, sindrome coronária, restenose arterial, fibrose quística, doença de Alzheimer, mieloma múltiplo, arteriosclerose, fibrose pulmonar, Muckle-Wells e doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD).

Para todas as indicações descritas neste invento (indicações do invento), a dosagem adequada certamente variará de acordo, por exemplo, com o composto de Ι1-1β particular, e.g. o anticorpo do invento a ser empregue, do hospedeiro, do modo de administração e da natureza e gravidade da condição a ser tratada. No entanto, na utilização profiláctica, são geralmente indicados resultados satisfatórios obtidos entre cerca de 0,05 mg e cerca de 10 mg por quilograma de peso do corpo, mais geralmente entre cerca de 0,1 mg e cerca de 5 mg por quilograma de peso de corpo. O anticorpo do invento é convenientemente administrado por via parental, intravenosa, e.g. na veia antecubital ou noutra veia periférica, intramuscularmente ou subcutaneamente.

Aida noutra realização, a descrição diz respeito a uma surpreendente frequência de dosagem para usos terapêuticos, i.e. o protocolo de tratamento com compostos de IL-Ιβ, de preferência anticorpos contra IL-Ιβ, mais de 29 ΡΕ1940465 preferência ACZ885 (numa dose típica, e.g., entre cerca de 0,1 mg e cerca de 50 mg, mais de preferência entre 0,5 mg e 2 0 mg, mesmo mais de preferência entre 1 mg e 10 mg, de ACZ885 por Kg de peso de corpo do doente) pode ser administrado uma vez por semana ou menos frequentemente, mais de preferência uma vez cada duas semanas ou menos frequentemente, mais de preferência uma vez cada 3 semanas ou menos frequentemente, mais de preferência uma vez por mês ou menos frequentemente, mais de preferência uma vez cada 2 meses ou menos frequentemente, mais de preferência uma vez cada 3 meses ou menos frequentemente, mesmo mais de preferência uma vez cada 4 meses ou menos frequentemente, mesmo mais de preferência uma vez cada 5 meses ou menos frequentemente ou ainda mais de preferência uma vez cada 6 meses ou menos frequentemente. Prefere-se uma vez por mês.

As composições farmacêuticas do invento podem ser produzidas de forma convencional. Uma composição de acordo com o invento é, de preferência, proporcionada na forma liofilizada. Para administração imediata é dissolvida num veículo aquoso adequado, por exemplo água estéril para injecção ou soro fisiológico tamponado estéril. Considera-se desejável preparar uma solução de maior volume para administração por infusão em vez de uma injecção de bolus, é vantajoso incorporar albumina sérica humana ou sangue heparinizado do próprio doente no soro fisiológico na altura da formulação. A presença de um excesso de tal proteína fisiologicamente inerte evita a perda de anticorpo por adsorção às paredes do contentor e tubagem usados com a solução de infusão. Caso se use albumina, uma concentração 30 ΡΕ1940465 adequada situa-se entre 0,5 e 4,5% por peso da solução de soro fisiológico. O invento é ainda descrito a titulo ilustrativo nos exemplos que se seguem.

EXEMPLOS

Exemplo 1: ACZ885 A estrutura e a preparação de ACZ885 estão descritas, e.g., em WO 02/16436. Resumidamente, as sequências terminais aminicas dos domínios variáveis das cadeias leve e pesada e das correspondentes sequências de DNA estão apresentadas em SEQ ID NO:l e SEQ ID NO:2 abaixo, em que as CDRs estão apresentadas em itálico e sublinhadas.

Região variável da cadeia pesada de ACZ885 SEQ ID NO:l TCÃG Q ~ 1 . GTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGA.GGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCC VQLVESG-GGVVQPGRSLRLS -21 TGTGCAGCGTÇTGGATTCACCTTCASTGTTTATGGCATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCA CAASGPTPS V Y Ú M N WVRQAP -41 ggcaaggggctggagtgggtggcaattatttggtatgatggagataatcaatactatgca GKGLEWVR IXWYDGDNQYY A - 61 gactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaattccaagaacacgctgtatctg. D S V K G RFTISRDN.SKNTLVI* - 81

CAAATGAACGGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTATTGTGCGAGAGATCTTACG Q M S G . L R A B D T A V Y t C A R D L R - 101 3.18

ACTGGGCCTTTTGACTÃCTGGGGCCÃGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTC T g P F D Y « G Q G T L V T V S S 31 ΡΕ1940465

Região variável da cadeia leve de ACZ885 SEQ ID N0:2 TGAÃ E ~ 1 ATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCT6TGACTCCAAÃ<3GAGÃAASTCACCATC ' I V L T 0 S P D F Q S V T F K E K V T X - 21 acctgccgggccagtcacagcattggtagtagcttacactggtaccagcagaaaccagat Ϊ . C RASQSIGSSLH W Ϊ Q Q K P D - 42 CAGTCTCCMAGCTCCTCATCAAGTÂTGCXTCCCAGTCCrrCTCAGGGGTCCCCTCGAGG QSPKL L1K Y Ά. 8 Q S F S G V, F S R - 61 TTCAGTGGCAGT GGATCTG GGACAGÃT TTC ACCCTCACCAT CFvATAGCCT GGAAGC T GAA FSGS-GSG.TDFTLTINSLEAE - 81 GATGCTGCAGCGTATTACXGTCATC.a.GAGTAGTAGTTTACCAfTCACTTTCGGCCCTGGG D A A A Y Ϋ C H Q 8 8 S L J> F T F G P G ~ 101 ACCAAAGTGGATATCAAA - 107

X K V D I K

Exemplo 2: Dados bioquímicos e biológicos de ACZ885

Encontrou-se que o anticorpo monoclonal ACZ885 neutraliza a actividade de interleucina-ΐβ in vitro. O anticorpo monoclonal é ainda caracterizado pela sua ligação a IL-Ιβ humana recombinante através da análise por ressonância de plasmões de superfície. O modo de neutralização é avaliado por estudos de ligação competitiva com receptores de IL-1 solúveis. A actividade biológica do anticorpo ACZ885 contra a IL-Ιβ recombinante e natural foi determinada em células primárias humanas que respondem à estimulação por IL-Ιβ.

Determinação da constante de equilíbrio de dissociação

As constantes de velocidade de associação e de 32 ΡΕ1940465 dissociação para a ligação de IL-1 beta humana recombinante a ACZ885 foram determinados por análise de ressonância de plasmões de superfície. ACZ885 foi imobilizada e a ligação de IL-1 beta recombinante numa gama de concentrações de 1 a 4 nM foi medida por ressonância de plasmões de superfície. 0 formato escolhido representa uma interacção monovalente e assim permite o tratamento da ligação de IL-1 beta a ACZ885 de acordo com uma estequiometria de 1:1. A análise dos dados foi realizada usando o programa BIAevaluation.

Kon K0ff KD [105/MS] [ítrVs] [pM] ACZ885 11,0+7-0,23 3,3+7-0,27 30,5+7-2,6 n=22

Conclusão: ACZ885 liga-se a IL-1 beta humana recombinante com afinidade muito elevada.

Exemplo 3: Ensaio clínico com ACZ885

De forma a avaliar a adequabilidade de um composto IL-1 beta, e.g. ACZ885, foi realizado um estudo aberto de titulação de dose, num único centro, de ACZ885 (anticorpo monoclonal humano anti-IL-1 beta) para avaliar a eficácia clínica, segurança, farmacocinética e farmacodi-nâmica em doentes com síndrome MW, caracterizada por mutações NALP3.

Os doentes foram tratados através de uma infusão de dose única de ACZ885 (10 mg/kg i.v.). A resposta clínica foi medida pela melhoria dos sintomas (e.g., urticária, dor 33 ΡΕ1940465 muscular, febre, fadiga) e pelo abaixamento das proteínas da fase aguda proteína amilóide sérica (SAA) e proteína c-reactiva (CRP). Ainda, a resposta ao tratamento foi avaliada através da análise do mRNA obtido a partir de células do sangue periférico. Um segundo tratamento (1 mg/kg i.v.) foi dado após re-aparecimento dos sintomas clínicos. Resultados: remissão clínica dos sintomas (febre, urticária, conjuntivite) dentro de 3 dias e decréscimo de CRP e SAA para a gama normal (< 10 mg/1) nos doentes. A remissão clínica dos sintomas com a primeira infusão dura pelo menos 134 dias, tipicamente entre 160 e 200 dias. Quando do segundo tratamento com uma dose inferior, os doentes respondem com melhoria dos sintomas e normalização das proteínas da fase aguda. A análise do mRNA obtido a partir das células de sague periférico demonstra regulação negativa da transcrição de IL-lb e dos genes induzidos por IL-lb dentro de 24 h quando do tratamento com ACZ885. Isto sugere que ACZ885 é capaz de interromper uma ansa de retroacção positiva in vivo que conduz a excesso de produção auto-susten-tada de IL-lb nestes doentes. Esta contenção é igualmente suportada pela caracterização inicial dos efeitos PK/PD de ACZ885 que demonstra o bloqueio da produção de IL-lb quando do tratamento com ACZ885 nestes doentes. Esta capacidade particular de ACZ885 pode contribuir (ser causal) para o seu efeito clínico a longo prazo.

Lisboa, 26 de Setembro de 2012

Claims

ΡΕ1940465 1 REIVINDICAÇÕES 1. Utilização de um anticorpo de ligação a IL-1 beta humana para a produção de um medicamento para o tratamento de artrite reumatóide juvenil num doente, compreendendo: pelo menos um local de ligação ao antigénio compreendendo um primeiro dominio tendo uma sequência de aminoácidos como mostrado em SEQ ID N0:1 e um segundo dominio tendo uma sequência de aminoácidos como se mostra em SEQ ID N0:2.
2. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o referido anticorpo é administrado parentericamente numa dose entre 0,05-10 mg do referido anticorpo por kg de peso de corpo do doente.
3. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que a artrite reumatóide juvenil é artrite juvenil idiopática de estabelecimento sistémico.
4. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, em que o referido anticorpo é ACZ8 85. 2 ΡΕ1940465
5. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, em que o referido anticorpo é administrado uma vez semanalmente ou menos frequentemente.
6. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, em que o referido anticorpo é administrado uma vez mensalmente ou menos frequentemente.
7. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, em que a referida molécula de anticorpo é administrada ao doente subcutaneamente.
8. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, em que o referido anticorpo é administrado ao doente intravenosamente.
9. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, em que o referido anticorpo é administrado numa dose entre 1-10 mg do referido anticorpo por kg de peso de corpo do doente.
10. Uma composição farmacêutica compreendendo anticorpo humano de ligação a IL-1 beta compreendendo pelo menos um local de ligação ao antigénio compreendendo um primeiro domínio tendo uma sequência de aminoácidos como mostrada em SEQ ID NO:l, e um segundo domínio tendo uma sequência de aminoácidos como se mostra em SEQ ID NO: 2 ou 3 ΡΕ1940465 ACZ885 para usar no tratamento de artrite idiopática juvenil de estabelecimento sistémico, numa combinação com um excipiente, diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável, em que o referido anticorpo é administrado parentericamente. Lisboa, 26 de Setembro de 2012 1 ΡΕ1940465 REFERENCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO Esta lista de referências citadas pelo requerente é apenas para conveniência do leitor. A mesma não faz parte do documento da patente Europeia. Ainda que tenha sido tomado o devido cuidado ao compilar as referências, podem não estar excluídos erros ou omissões e o IEP declina quaisquer responsabilidades a esse respeito. Documentos de patentes citadas na Descrição WO 9501337 A • B* 0483151 81 WO 0216436 A * WO 0238561 A EP 0546073 81 * WOÕ3S2S58A US PS54SS0S: A * WD 04052350 A USP556982SA * WO 050865SS A USPSS2512SA * WO 3802441 Â USFS63342SÂ * WO 0114337 A uspsseseiSÂ * WO 8384383 A USF577042SA EP 0438474 SI ♦ AP 23573 Literatura que não é de patentes citada na Descrição KABATSJL etal. Ssqueí®es of Prateias offcroraí-Ristogisai Saferesi US OeprateíersitotBeíjJJh aná Hts-mea Services,. Ph&Sc Heafifc Service