PT1533304E

PT1533304E - Derivado de amida

Info

Publication number: PT1533304E
Application number: PT03738555T
Authority: PT
Inventors: Tetsuo Asaki; Taisuke Hamamoto; Yukiteru Sugiyama
Original assignee: Nippon Shinyaku Co Ltd
Priority date: 2002-06-28
Filing date: 2003-06-27
Publication date: 2010-02-08
Also published as: CA2490907C; AU2003246100A1; CN100343237C; US7494997B2; EP1533304A4; ES2337995T3; EP1533304B1; CN1678590A; JP4552650B2; BRPI0312288B8; WO2004002963A1; EP1533304A1; DK1533304T3; RU2315043C2; RU2005102098A; CA2490907A1; DE60329918D1; US20060014742A1; JPWO2004002963A1; BR0312288A

Description

DESCRIÇÃO

DERIVADO DE AMIDA

DOMÍNIO TÉCNICO A presente invenção tem por objecto um derivado de amida ou um seu sal e uma composição farmacêutica que compreende, como ingrediente activo, um derivado de amida ou um seu sal.

Embora a tirosina-cinase de BCR-ABL (ver, por exemplo, o primeiro documento que não é uma patente) cause um crescimento aberrante das células, um composto que inibe a sua actividade é útil para a prevenção ou o tratamento de doenças causadas pela actividade da tirosina-cinase de BCR-ABL, por exemplo, leucemia mielogénica crónica, leucemia linfoblástica aguda e leucemia mielogénica aguda (ver, por exemplo, o documento 2 fora das patentes).

TÉCNICA ANTERIOR bcr é um gene que existe no cromossoma humano vinte e dois e abl é o gene que existe no nono cromossoma humano e o cromossoma Filadélfia é formado por meio da transferência do vigésimo segundo e do nono cromossomas humanos. Sabe-se que um produto do gene do cromossoma, BCR-ABL, é uma proteína com actividade de tirosina-cinase e gera constantemente o sinal de crescimento que causa o crescimento aberrante das células (ver, por exemplo, o documento 2 fora das patentes).

Por isso, a inibição da actividade de tirosina-cinase de BCR-ABL torna possível suprimir o crescimento das 1 células causado pela cinase e um composto que inibe a actividade é apropriado para ser utilizado como agente terapêutico para doenças tais como leucemia mielogénica crónica, leucemia linfoblástica aguda e leucemia mielogénica aguda. Embora o Glivec ® (ver, por exemplo, o documento 1 das patentes) já tenha sido posto no mercado como um fármaco que tem a mesma acção, outros fármacos com a mesma acção nunca foram postos no mercado e assim é necessário desenvolver medicamentos mais excelentes.

Foi recentemente relatado que a recorrência é muitas vezes reconhecida em paciente que atingem a remissão por administração de Glivec ® em leucemia linfoblástica aguda positiva para BCR-ABL, para além dos exemplos de crise blástica da leucemia mielogénica crónica (ver, por exemplo, o documento 3 fora das patentes) . Como resultado do exame de células de leucemia de pacientes que sofrem de recorrência da doença, reconhece-se o aparecimento de uma variante tal como E255K (ver, por exemplo, os documentos fora das patentes 4 a 7) . Também nos exemplos de administração de Glivec® a pacientes com leucemia linfoblástica aguda positiva para BCR-ABL, reconhece-se o aparecimento de células resistentes que exibem principalmente a variante de E255K (ver, por exemplo, o documento 8 fora das patentes) . Com o aumento da utilização de Glivec®, aumentam ainda mais os pacientes resistentes e assim é necessário desenvolver uma terapia.

Documento de patente 1:

Patente japonesa não examinada No. 6-87834

Documento de patente 2: 2

Panfleto da publicação internacional WO 02/22597

Documento 1 fora das patentes:

Shtivelman E, et al.: Nature, 1985, 315, 550-554

Documento 2 fora das patentes:

Daley G Q, et al.: Science, 1990, 247, 824-830

Documento 3 fora das patentes:

Druker B J, et al.: N Engl J Med, 2001, 344, 1038-1042

Documento 4 fora das patentes:

Shtivelman E, et al.: Drug Resist Updat, 2001, 4, 22-28

Documento 5 fora das patentes:

Shtivelman E, et al.: Science, 2001, 293, 876-880 Documento 6 fora das patentes:

Blagosklonny Μ V: Leukemia, 2002, 16, 570-572 Documento 7 fora das patentes:

Hochhaus A, et al.: Leukemia, 2002, 16, 2190-2196 Documento 8 fora das patentes:

Hofmann W -K, et al.: blood, 2002, 99, 1860-1862 Documento 9 fora das patentes: 3

Hofmann W -K, et al.: blood, 2000, 96, 3343-3356

Documento 10 fora das patentes: J.Org.Chem., 1996, 61, 1133-1135 Documento 11 fora das patentes: J.Org.Chem., 2000, 65, 1144-1157 Documento 12 fora das patentes: Recl.Trav.Chim.Pays-Bas., 1950, 69, 673-699 Documento 13 fora das patentes: J.Org.Chem., 2000, 43, 1508-1518 Documento 14 fora das patentes: J.Org.Chem., 1975, 18, 1077-1088 Documento 15 fora das patentes:

Bioorg.Med.Chem.Lett., 2001, 11, 2235-2239 Documento 16 fora das patentes: J.Heterocyclic Chem., 2000, 37, 1457-1462 Documento 17 fora das patentes: J.Med.Chem., 2000, 43 (8), 1508-1518 4

Documento 18 fora das patentes:

Khim.Geterotsikl.Soedim., 1981, (7), 958-962

Documento 19 fora das patentes: J.Heterocyclic Chem., 1990, 27, 579-582 Documento 20 fora das patentes:

Arzneim.-Forsch./Drug Res., 1989, 39(2), 1196-1201 Documento 21 fora das patentes:

J.Org.Chem., 1996, 61, 7240-7241 DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

Um dos objectos da presente invenção consiste em providenciar um derivado de amida com uma excelente actividade inibidora da tirosina-cinase de BCR-ABL ou de um seu sal.

Os requerentes estudaram intensamente acerca de vários compostos e verificaram que o objecto anterior é alcançado através do derivado de amida da presente invenção e assim se completou a presente invenção.

Isto é, a presente invenção tem por objecto um derivado de amida, que é um composto representado pela fórmula [1] que se segue em qualquer um dos casos (A) e (B) que se seguem ou de um seu sal (referido daqui para a frente como um "composto da presente invenção "). 5

m (A) R1 representa um grupo amino cíclico, saturado (o grupo amino cíclico, saturado pode estar substituído com 1 a 3 elementos iguais ou diferentes seleccionados no grupo que consiste em alquilo, alcoxicarbonilo, halogéneo, halogenoalquilo, hidroxialquilo, amino, monoalquil-amino, dialquilamino, carbamoilo, monoalquilcarbamoilo ou dialquilcarbamoilo. R2 representa alquilo, halogéneo, halogenoalquilo, hidroxialquilo, alcoxi, alcoxialquilo, alcoxicarbonilo, acilo, amino, monoalquilamino, dialquilamino, nitro, carbamoilo, monoalquilcarbamoilo, dialquilcarbamoilo ou ciano. R3 representa hidrogénio, halogéneo ou alcoxi.

Hetl representa qualquer um dos grupos com as fórmulas [2] a [8] que se seguem.

6 {6] {6]

T

(Het2) 181

LJ

Het2 representa pirdilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo ou 1,2-di-hidropiridazinilo (o grupo Het2 pode estar substituído por 1 a 3 elementos iguais ou diferentes seleccionados no grupo que consiste em alquilo, halogéneo e amino). A excepção é feita para um composto em que R1 representa (i) pirrolidinilo, piperidinilo, piperazi-nilo ou morfolinilo, sendo que todos podem estar substituídos por 1 a 3 elementos iguais ou diferentes seleccionados no grupo que consiste em alquilo, alcoxicarbonilo, halogéneo, halogenoalquilo, hidroxi-alquilo, amino, monoalquilamino, dialquilamino, carbamoilo, monoalquilcarbamoilo e dialquilcarbamoilo, (ii) monoalquilamino ou (iii) dialquilamino, Hetl representa um grupo de fórmula [6] e Het2 representa pirazinilo ou piridilo que podem estar substituídos por alquilo. (B) R1 representa 4-metilpiperazin-l-ilo, 1-pirrolidinilo, piperidino, 4-etilopiperazin-l-ilo, 4-n-propil-pi-perazin-l-ilo, cis-3,5-dimetilpiperazin-l-ilo, morfo-lino, dimetilamino ou dietilamino. 7 R2 representa metilo, halogéneo, trifluorometilo, metoxi, metoxicarbonilo, nitro, dimetilcarbamoilo ou ciano. R3 representa hidrogénio, bromo ou metoxi.

Hetl representa um grupo de fórmula [6].

Het2 representa 3-piridilo. A presente invenção também tem por objecto uma composição farmacêutica que compreende, como ingrediente activo, os derivados de amida anteriores ou os seus sais, e, mais particularmente, um inibidor de tirosina-cinase de BCR-ABL compreendendo, como ingrediente activo, o derivado de amida anterior ou os seus sais. O agente terapêutico específico para as doenças inclui um agente terapêutico para leucemia mielogénica crónica, um agente terapêutico para leucemia linfoblástica aguda e um agente terapêutico para leucemia mielogénica aguda.

Exemplos dos derivados preferidos entre os derivados de amida anteriores ou os seus sais, incluem o derivado de amida que se segue ou os seus sais.

Um derivado de amida de fórmula geral [1] em que R1 representa um grupo amino cíclico, saturado (podendo o grupo amino ciclico, saturado estar substituído com 1 a 3 elementos iguais ou diferentes seleccionados no grupo que consiste em alquilo, alcoxicarbonilo), monoalquilamino ou dialquilamino, R2 representa alquilo, halogéneo, haloalquilo, alcoxi, alcoxicarbonilo, nitro, dialquilcarbamoilo ou ciano, R3 representa hidrogénio, halogéneo ou alcoxi, 8

Hetl representa qualquer um dos qrupos com as fórmulas [2] a [8] e

Het2 representa piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo ou 1,2-di-hidropiridazinilo (o Het2 pode estar substituído por 1 a 3 haloqéneos iguais ou diferentes) ou um seu sal.

Exemplos dos derivados de amida anteriores que são particularmente preferidos incluem os derivados de amida (1) a (40) ou os seus sais: (1) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida (2) 3-iodo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3- piridil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida, (3) 3-cloro-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida, (4) 3-fluoro-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida, (5) 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluorometil-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenilj-benzamida, (6) 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluorometil-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]-fenil}-benzamida, (7) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4 - (2-pirazinil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida, (8) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)—N—{3—[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilfenil}-benzamida, (9) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{3-[4-(5-bromopiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilfenil}-benzamida, 9 (10) 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluorometil- N-{3-[4-(5-bromopiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilfenil}benzamida, (11) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{3-[4-(1,2-di-hidropiridazin-4-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-fenil}-benzamid e, (12) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4- (3-piridazinil)pirimidin-2-ilamino]fenilj-benzamida, (13) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]fenilj-benzamida, (14) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3 -piridil)piridin-2-ilamino]fenil}benzamida, (15) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)piridin-2-ilamino]feniljbenzamida, (16) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[2- (3-piridil)piridin-6-ilamino]feniljbenzamida, (17) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[3 - (3-piridil)piridin-5-ilamino]feniljbenzamida, (18) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[3-(3 -piridil)fenilamino]feniljbenzamida, (19) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[2 - (3-piridil)pirazin-6-ilamino]feniljbenzamida, (20) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[5- (3-piridil)-1,2,4-triazin-3-ilamino]fenilj-benzamida, (21) 3-metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida, (22) 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-nitro-N-{4-metil-3-[4 - (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida, (23) 3-metoxi-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-me-til-3-[4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenilj-benzamida, 10 (24) 3,5-dibromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (25) 3,5-dimetoxi-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) -N-{4-metil-3-[4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (26) 3-(N,N-dimetilcarbamoil)-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) -N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]-fenil}-benzamida, (27) 3-bromo-4-(4-etilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil- 3-[4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida, (28) 3-bromo-4-[4-(n-propil)piperazin-l-ilmetil]-N-{4-metil-3-[4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (29) 3-bromo-4-(Ν,Ν-dimetilaminometil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida, (30) 3-bromo-4-(N,N-dietilaminometil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida, (31) 3-bromo-4-(1-pirrolidinilmetil)-N-{4-meti1-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida, (32) 3-bromo-4-(piperidinometil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)-pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida, (33) 3-bromo-4-(morfolinometil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)-pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida, (34) 3-bromo-4-(cis-3,5-dimetilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (35) 3-bromo-4-(4-metil-hexahidro-lH-l, 4-diazepin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (36) 3-bromo-4-(1-piperazinilmetil)-N-{4-metil-3-[4 —(5— pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida, 11 (37) 4-[4 - (t-butoxicarbonil)piperazin-l-ilmetil]-3-tri-fluorometil-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida, (38) 4-(1-piperazinilmetil)-3-trifluorometil-N-{4-me-til-3- [4- (5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (39) 3-metoxicarbonil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida e (40) 3-ciano-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida. O composto da presente invenção tem actividade inibidora da tirosina-cinase de BCR-ABL e é útil como agente terapêutico para doenças tais como leucemia mielogénica crónica, leucemia linfoblástica aguda e leucemia mielogénica aguda (ver, por exemplo, o documento 9 fora das patentes) . O composto de fórmula [1] anterior, no caso (B) , parece ter sido descrito em documentos da técnica anterior (ver, por exemplo, os documentos de patentes 1 ou 2), mas não está especificamente descrito na publicação. Também o composto de fórmula [1] anterior no caso (A) não está descrito em nenhum documento. A presente invenção será agora descrita em detalhe.

Exemplos do "grupo amino ciclico, saturado" incluem o grupo de anéis com 4 a 8 elementos no núcleo que têm um grupo de anel saturado com pelo menos um átomo de azoto como um dos átomos que compõem o anel e também pode ter 1 a 3 elementos iguais ou diferentes seleccionados no grupo que consiste em átomos de azoto, átomos de oxigénio e átomos de 12 enxofre. Quando o átomo que compõe o anel do grupo amino cíclico é um átomo de azoto ou um átomo de enxofre, pode o átomo de azoto ou o átomo de enxofre formar um óxido. Exemplos desses grupos incluem pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo e hexa-hidro-lH-1,4-diazepinilo. Estes substituintes podem ter uma função de ligação em qualquer posição. Especificamente, significa que "pirrolidinilo" inclui todos os grupos 1-pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo e 3-pirrolidinilo. "Alquilo" inclui grupos alquilo de cadeia linear ou ramificada com 1 a 10 carbonos, por exemplo, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, n-pentilo, isopentilo, n-hexilo, iso-hexilo, n-heptilo, iso-heptilo, n-octilo, n-nonilo e n-decilo. São particularmente preferidos os grupos alquilo de cadeia linear com 1 a 3 átomos de carbono. A parte alquilo de "haloalquilo", "alcoxicarbonilo", "hidroxialquilo", "monoalquilamino", "dialquilamino", "monoalquilcarbamoilo", "dialquilcarbamoilo", "alcoxi", "alcoxialquilo" e "hidroxialquilo" inclui o alquilo mencionado antes. "Halogéneo" inclui, por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo. "Halogenoalquilo" inclui mono-halogenoalquilo, di-halogenoalquilo e tri-halogenoalquilo e a parte halogéneo de "halogenoalquilo" inclui os halogéneos mencionados antes. "Halogenoalquilo" inclui, por exemplo, trifluoro-metilo e 2,2,2-trifluoroetilo. 13 "Acilo" inclui grupos acilo com 1 a 11 carbonos, por exemplo, formilo, acetilo, propionilo, butirilo, isobutirilo, benzoilo, 1-naftoilo e 2-naftoilo. "Piridilo" inclui, por exemplo, 2-piridilo, 3-piridilo e 4-piridilo. "Pirimidinilo" inclui, por exemplo, 2-pirimidinilo, 4-pirimidinilo e 5-pirimidinilo. "Pirazinilo" inclui, por exemplo, 2-pirazinilo. "Piridazinilo" inclui, por exemplo, 3-piridazinilo, e 4-piridazinilo. "1,2-di-hidropiridazinilo" inclui, por exemplo, 1,2-di-hidropiridazin-3-ilo e 1,2-di-hidropiridazin-4-ilo. 0 composto da presente invenção pode ser produzido a partir de um composto conhecido per se ou de um produto intermédio que pode ser produzido facilmente, por exemplo, pelo processo que se segue. Na produção do composto da presente invenção, é comum que as matérias-primas sejam utilizadas na reacção depois de serem protegidas com grupos de protecção apropriados por meio de processos conhecidos per se quando as matérias-primas têm substituintes que se supõe que não irão reagir. Depois da reacção, os grupos de protecção podem ser eliminados por processos conhecidos per se. 14

Processo 1

Mc H —Het2

NH2

Ολ^ΟΗ R

Sletí-HeíZ R

Cl) em que R1, R2, R3, Hetl e Het2 têm o significado definido antes.

Esta reacção é uma reacção de condensação de um composto [9] e um composto [10] e é conduzida por meio de processos conhecidos per se utilizados na reacção de condensação. Pode-se produzir um composto [1] por reacção de um ácido carboxílico, como composto [10] ou um seu derivado reactivo com uma amina como composto [9]. Exemplos do derivado reactive do composto [10] incluem os que são normalmente utilizados da reacção de formação da condensação da amida, por exemplo, halogeneto de ácido (por exemplo, cloreto de ácido, brometo de ácido, etc.), anidrido de ácido misto, imidazolida e amida activa. Quando se utiliza o ácido carboxílico [10], utiliza-se um agente de condensação (por exemplo 1,1'-oxalildi-imidazole, 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodi-imida, diciclo-hexil-carbodi-imida, cianofosfonato de dietilo, difenilfosforil-azida, iodeto de 2-cloro-l-metilpiridínio, etc.) e a reacção realiza-se a -20 até 100 °C na presença ou na ausência de uma base (por exemplo, uma base orgânica tal como trietilamina, N,N-di-isopropil-N-etilamina, N,N-dimetilanilina, piridina, 4-dimetilaminopiridina, 1,8-diazabiciclo [5.4.0]undec-7-eno, etc.). O dissolvente não está especificamente limitado dado que não está envolvido 15 na reacção e exemplos dos dissolventes incluem éteres tais como tetra-hidrofurano e éter de dietilo; amidas tais como Ν,Ν-dimetilformamida e N,N-dimetilacetamida; nitrilos tais como acetonitrilo e propionitrilo; hidrocarbonetos tais como benzeno e tolueno; hidrocarbonetos halogenados tais como clorofórmio e diclorometano; e misturas desses dissolventes. Nesse caso, também se podem adicionar aditivos (por exemplo, 1-hidroxibenzotriazole, N-hidroxi-succinimida, etc.). 0 tempo de reacção varia consoante os tipos de matérias-primas e o agente de condensação e a temperatura de reacção, mas preferencialmente varia entre 30 minutos e 24 horas. A quantidade do composto [10] e do agente de condensação é preferencialmente de 1 a 3 mole por mole do composto [9] . Quando se utilize um halogeneto de ácido como derivado reactivo do composto [10], a reacção realiza-se a -20 até 100 °C utilizando um dissolvente de piridina tal como piridina ou 4-metilpiridina ou a mesma base e o mesmo dissolvente que foram descritos antes. Também se pode adicionar, como aditivo, 4-dimetilamino-piridina. O tempo de reacção varia consoante o tipo de halogeneto de ácido e a temperatura de reacção, mas preferencialmente varia entre 30 minutos e 24 horas. O composto [9], como composto inicial em que Hetl representa um grupo de fórmula [6], pode ser preparado da mesma maneira que está descrita no documento 1 das patentes. O composto [9] como composto inicial em que Hetl representa um grupo de fórmula [4], [5] ou [7] pode ser preparado da seguinte maneira: 16 {12} or fu {33} Γ1 X* „ fth 'Meti— H „ Redução .............. »- ¥c « Hetí " ........“** m NHj m m m em que Hetl e Het2 têm os significados definidos antes, R4 e R5 representam alquilo ou hidroxi, R6, R7 e R8 representam alquilo e X1 representa halogéneo.

Etapa 1

Esta reacção é uma reacção de acoplamento cruzado utilizando um composto [11] e um composto de organoboro [12] ou um composto de organo-estanho [13] e pode ser realizada por processos conhecidos per se. Por exemplo, esta reacção realize-se desde 20 até 200 °C num dissolvente apropriado, na presença de um catalisador de paládio. Como catalisador de paládio, normalmente utiliza-se tetraquis-(trifenilfosfino)-paládio, diclorobis(trifenilfosfino)-paládio e diclorobis(tri-tolilfosfino)paládio. O dissolvente não está especificamente limitado dado que não está envolvido na reacção e exemplos dos dissolventes incluem éteres tais como tetra-hidrofurano, 1,4-dioxano e 1,2-dimetoxietano; álcoois tal como metanol e etanol; amidas tais como Ν,Ν-dimetilformamida e N,N-dimetil-acetamida; hidrocarbonetos tais como benzeno, tolueno e xileno; aminas orgânicas tais como piridina e trietilamina; e as misturas destes dissolventes. Quando se utiliza o composto [12], é essencial a adição de uma base (por exemplo, hidróxido de sódio, carbonato de potássio, fosfato tri-potássico, etc.). O tempo de reacção varia consoante o tipo de matéria-prima e a temperatura de reacção, mas preferencialmente varia entre 1 a 48 horas. 17

Etapa 2

Esta reacção é uma reacção de redução de um grupo nitro aromático de um composto [14] para um grupo amino e é por isso realizada por meio de processos conhecidos per se na reacção de redução. 0 processo inclui, por exemplo, um processo de tratamento com zinco ou estanho em condições ácidas. De acordo com o processo da redução catalítica, por exemplo, a hidrogenação pode ser realizada utilizando como catalisador platina, níquel de Raney, platina-carbono (Pt-C), paládio-carbono (Pd-C) ou um complexo de ruténio. Além disso, exemplifica-se um processo de utilização de um sulfureto tal como ditionito de sódio e um processo de redução com formato de amónio ou hidrazina na presença de um catalisador metálico. 0 composto [11] , como o composto inicial em que Hetl representa um grupo de formula [4], pode ser preparado por meio da reacção de 2,4-dicloropiridina (preparada, por exemplo, por meio de uma versão do processo descrito no documento 12 fora das patentes) com 2-metil-5-nitroanilina utilizando o processo de J. P. Wolfe et al., utilizando um catalisador de paládio (ver documentos 10 e 11 fora das patentes). Quando Hetl representa um grupo de fórmula [5], por exemplo, o composto pode ser preparado fazendo reagir l-bromo-3-iodobenzeno com 2-metil-5-nitroanilina. Quando Hetl representa um grupo de fórmula [7], por exemplo, o composto pode ser preparado fazendo reagir 2,6-dicloropirazina com 2-metil-5-nitroanilina. O dissolvente da reacção não está especificamente limitado dado que não está envolvido na reacção e exemplos desses dissolventes incluem éteres tais como tetra-hidrofurano, 1,4-dioxano e 1,2-dimetoxietano; hidrocarbo- 18 netos tais como benzeno, tolueno e xileno; e as misturas desses dissolventes. A reacção realiza-se desde 70 a 100 °C na presença de uma base. Exemplos do catalisador de paládio incluem tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0), acetato de paládio (II) e tri (o-tolilfosfina)paládio (0). A quantidade de paládio está preferencialmente entre 0,5 e 4 mole % com base no arilo halogenado. Como ligando do catalisador de paládio, pode-se utilizar, por exemplo, 1,3-bis(difenil-fosfino)-propano, 1,1' -bis (difenilfosfino)ferroceno e ( + )-2,2'-bis (difenilfosfino)-1,1'-binaftil[(±)-BINAP]. Exemplos da base incluem t-butóxido de sódio, t-butóxido de potássio, carbonato de césio, carbonato de potássio e carbonato de sódio. O tempo de reacção varia consoante o tipo de matéria-prima e a temperatura de reacção, mas preferencialmente varia entre 1 a 36 horas. O composto [11] em que Hetl representa um grupo de [4] pode também ser preparado por reacção de 2,4-dicloropiridina com 2-metil-5-nitroanilina a 20 até 200 °C num dissolvente apropriado na presença ou na ausência de uma base. Exemplos da base incluem piridina, trietilamina, N,N-di-isopropil-N-etilamina, carbonato de potássio, hidrogeno-carbonato de sódio e hidróxido de potássio. O dissolvente não está especificamente limitado dado que não está envolvido na reacção e exemplos dos dissolventes incluem éteres tais como tetra-hidrofurano e éter de dibutilo e 1,4-dioxano; amidas tais como N,N-dimetilformamida e N,N-dimetilacetamida; hidrocarbonetos tais como benzeno e tolueno; álcoois tais como etileno-glicol e 2-metoxietanol; hidrocarbonetos halogenados tais como clorofórmio e diclorometano; dimetil-sulfóxido; e as misturas destes dissolventes. O tempo de reacção varia consoante o tipo de matéria-prima e a temperatura de reacção, mas preferencialmente varia entre 1 a 24 horas. 19 0 composto [14a], como composto inicial (composto [14] em que Hetl representa um grupo de fórmula [4]), pode ser preparado da seguinte maneira:

WetaafRW) fl2l Me

em que R4, R5, R6, R7, R8, Het2 e X1 têm os significados definidos antes e X2 representa halogéneo.

Etapa 1

Esta reacção é uma reacção de acoplamento cruzado utilizando um composto [15] e um composto de organo-boro [12] ou um composto de organo-estanho [13] e pode ser realizada da mesma maneira que se descreveu antes.

Etapa 2

Prepara-se um composto [17] por halogenação de um composto [16] . Por isso, a reacção é realizada por meio de processos conhecidos per se. A reacção realiza-se utilizando oxicloreto fosforoso, oxibrometo fosforoso, pentacloreto fosforoso ou pentabrometo fosforoso com ou sem dissolvente. 0 dissolvente da reacção não está especificamente limitado dado que não está envolvido na reacção e exemplos dos dissolventes incluem éteres tais como tetra-hidrofurano, éter de dibutilo e 1,4-dioxano; amidas tais como N,N-dimetilformamida e N,N-dimetil-acetamida; hidrocarbonetos halogenados tais como clorofórmio e diclorometano; e misturas destes 20 dissolventes. A reacção realiza-se normalmente à temperatura ambiente até 130 °C e o tempo de reacção é preferencialmente de 20 minutos até 24 horas.

Etapa 3

Pode-se preparar um composto [14a] fazendo reagir o composto [17] com um composto [18] utilizando o processo anterior, usando um catalisador de paládio (ver, por exemplo, os documentos 10 e 11 fora das patentes).

Pode-se preparar um composto [9a] (composto [9] em que o grupo Hetl é um grupo de fórmula [4]) fazendo reagir o composto [17] com um composto [19] utilizando o processo anterior usando um catalisador de paládio (ver, por exemplo, os documentos 10 e 11 fora das patentes) para se obter um composto [20] e desprotegendo o composto [20]

em que Het2 e X2 têm os significados definidos antes e R9 representa um grupo de protecção.

Etapa 1 O composto inicial [19] pode-se preparar por meio da protecção de 2,4-diaminotolueno com um grupo de protecção apropriado utilizando processos conhecidos per se. Exemplos do grupo de protecção incluem derivados de acilo tais como benzoilo, acetilo e formilo; e derivados do tipo uretano 21 tal como benziloxicarbonilo, t-butoxicarbonilo e 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo. Um composto [20] pode ser preparado por reacção do composto [17] com o composto [19] utilizando o catalisador de paládio anterior.

Etapa 2

Na reacção de desprotecção do composto [20], elimina-se um grupo de protecção do tipo de acilo por meio de hidrólise utilizando ácido ou um produto alcalino ou é eliminado com amónia água ou hidrazina. Exemplos do ácidos utilizados na hidrólise incluem ácidos inorgânicos tais como ácido clorídrico e ácido sulfúrico e exemplos das bases incluem bases inorgânicas tais como hidróxido de sódio e hidróxido de potássio. Exemplos do dissolvente da reacção incluem álcoois tais como metanol e etanol; éteres tais como tetra-hidrofurano e 1,4-dioxano; água e misturas destes dissolventes. A temperatura de reacção varia de 0 a 100 °C e o tempo de reacção varia normalmente desde vários minutos até 24 horas. Quando o grupo de protecção é um derivado do tipo uretano, o grupo de protecção pode ser eliminado por hidrogenação utilizando um catalisador de paládio ou eliminado com ácido clorídrico, ácido trifluoroacético, iodeto de trimetilsililo ou trifluoreto de boro, embora dependendo do tipo do grupo de protecção. O composto inicial [9], em que Hetl representa um grupo de fórmula [8] , pode ser preparado por meio de uma versão do processo descrito no exemplo de referência 18 descrito aqui a seguir. O composto [10], como composto inicial, pode ser preparado da maneira que se segue: 22

em que R1, R2 e R3, têm o significado definido antes, R10 representa alquilo e X3 representa um grupo eliminável tal como Cl, Br, I, OTs ou OMs.

Etapa 1

Pode-se preparar um composto [23] por condensação de um composto [21] (que pode ser preparado, por exemplo, por meio de uma versão do processo descrito no documento 13 fora das patentes) com uma amina [22] (em que o grupo eliminável X3 representa um grupo eliminável tal como halogéneo, mesilato ou tosilato). Esta reacção é uma reacção de substituição nucleofilica de um halogeneto de alquilo e aminas e realiza-se por processo conhecidos per se. Esta reacção realiza-se num dissolvente apropriado utilizando um excesso de amina ou na presença de uma base. Exemplos de bases preferidas incluem piridina, trietilamina, N,N-di-isopropil-N-etilamina, carbonato de potássio e hidrogeno-carbonato de sódio. 0 dissolvente não está especificamente limitado dado que não está envolvido na reacção e exemplos de dissolventes incluem éteres tais como tetra-hidrofurano e éter de dietilo; amidas tais como N,N-dimetilformamida e N,N-dimetilacetamida; nitrilos tais como acetonitrilo e propionitrilo; hidrocarbonetos tais como benzeno e tolueno; álcoois tais como metanol e etanol; e as suas misturas de dissolventes. A temperatura de reacção está usualmente entre 0 °C e 100 °C. O tempo de reacção varia consoante o tipo de material inicial e a 23 temperatura de reacção, mas preferencialmente varia entre 30 minutos e 24 horas.

Etapa 2

Prepara-se um composto [10] por hidrolisação de um composto [23]. A reacção realiza-se normalmente num dissolvente apropriado na presença de um ácido ou de uma base. Exemplos do ácido utilizado na hidrólise incluem ácidos inorgânicos tais como ácido clorídrico e ácido sulfúrico e exemplos da base incluem bases inorgânicas tais como hidróxido de sódio e hidróxido de potássio. Exemplos do dissolvente da reacção incluem álcoois tais como metanol e etanol; éteres tais como tetra-hidrofurano e 1,4-dioxano; água; e misturas destes dissolventes. A temperatura da reacção varia normalmente de 0 a 100 °C e o tempo de reacção varia normalmente entre 30 minutos até 24 horas.

Processo 2

em que R1, R2, R3, Hetl e Het2 têm o significado definido antes, X4 representa Cl, Br, I ou SR11, e R11 representa alquilo.

Prepara-se um composto [1] por reacção de um composto [24] com um composto [25] . A reacção realize-se desde 20 até 200 °C num dissolvente apropriado, na presença ou na 24 ausência de uma base. Exemplos da base incluem piridina, trietilamina, N, N-di-isopropil-N-etilamina, carbonato de potássio, hidrogeno-carbonato de sódio e hidróxido de potássio. 0 dissolvente não está especificamente limitado dado que não está envolvido na reacção e exemplos dos dissolventes incluem éteres tais como tetra-hidrofurano e éter de dibutilo e 1,4-dioxano; amidas tais como N,N-dimetilformamida e Ν,Ν-dimetilacetamida; hidrocarbonetos tais como benzeno e tolueno; álcoois tais como etileno-glicol e 2-metoxietanol; hidrocarbonetos halogenados tais como clorofórmio e diclorometano; dimetil-sulfóxido; e misturas destes dissolventes. 0 tempo de reacção varia consoante o tipo de matéria-prima e a temperatura de reacção, mas preferencialmente varia entre 1 a 24 horas. 0 composto [24], como composto inicial, pode ser preparado por condensação de 2,4-diaminotolueno com o composto [10], por meio de uma versão do processo 1. O composto [25], como composto inicial, pode ser preparado utilizando 2,6-dibromopiridina quando Hetl representa um grupo de fórmula [2], 3,5-dibromopiridina quando Hetl representa um grupo de fórmula [3] ou 2,4-dicloropirimidina quando Hetl representa um grupo de fórmula [6], de acordo com o processo 4 descrito aqui a seguir. Quando Hetl representa um grupo de fórmula [4], o composto [25] pode ser preparado pelo processo descrito no processo 1 mencionado antes. 25

Processo 3

em que R1, R2, R3, e Het2 têm os significados definidos antes.

Um composto [lb] (composto [1] no qual Hetl representa um grupo de fórmula [6]) pode ser preparado por reacção de um composto [26] ou de um seu sal de adição de ácido com um composto [27] . A reacção realiza-se a 20 até 200 °C num dissolvente apropriado. O dissolvente não está especificamente limitado dado que não está envolvido na reacção e exemplos de dissolventes incluem álcoois tais como metanol, etanol, 2-propanol e 2-metoxietanol . A quantidade do composto [27] varia de 1 a 2 mole e é preferencialmente de 1 a 1,2 mole por mole do composto [26]. O tempo de reacção varia consoante o tipo de matéria-prima e a temperatura de reacção, mas preferencialmente varia entre 30 minutos e 30 horas. Quando se utilize um sal de adição de ácido do composto [26], a reacção pode ser realizada por adição de uma base apropriada (por exemplo, carbonato de potássio, hidrogeno-carbonato de sódio, hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, etc.). O composto [26], como composto inicial, pode ser preparado sob a forma de um sal livre ou um sal de adição de ácido por meio da reacção do composto [24] com 26 cianamida, pelo processo descrito no documento (ver, por exemplo, documento 14 fora das patentes). 0 composto [27], como o composto inicial, pode ser preparado, por exemplo, por meio de uma versão do processo descrito no documento 1 das patentes.

Processo 4

em que R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, Hetl e Het2 têm os m significados definidos antes e X5 representa halogéneo.

Esta reacção é uma reacção de acoplamento cruzado utilizando um composto [28] e um composto de organo-boro [12] ou um composto de organo-estanho [13] e pode ser realizada por processos conhecidos per se. Por exemplo, esta reacção realiza-se desde 20 até 200 °C num dissolvente apropriado, na presença de um catalisador de paládio. Como catalisador de paládio, utiliza-se tetraquis(trifenil-fosfino)-paládio, diclorobis(trifenilfosfino)paládio e diclorobis(trio-tolilfosfino)paládio. O dissolvente não está especificamente limitado dado que não está envolvido na reacção e exemplos de dissolventes incluem éteres tais como tetra-hidrofurano, 1,4-dioxano e 1,2-dimetoxietano; álcoois tal como metanol e etanol; amidas tais como N,N-dimetilformamida e N,N-dimetilacetamida; hidrocarbonetos tais como benzeno, tolueno e xileno; aminas orgânicas tais como piridina e trietilamina; e misturas destes dissolventes. Quando se utiliza o composto [12], é 27 essencial a adição de uma base (por exemplo hidróxido de sódio, carbonato de potássio, fosfato tri-potássico, etc.). 0 tempo de reacção varia consoante o tipo de matéria-prima e a temperatura de reacção, mas preferencialmente varia entre 1 a 48 horas. 0 composto [28], como o composto inicial, pode ser preparado fazendo reagir um composto [24] com 4-hidroxi-2-(metiltio)piridina quando Hetl representa um grupo de fórmula [4] ou fazendo reagir um composto [24] com 4-hidroxi-2-(metiltio)pimiridina e tratando o produto da reacção com oxicloreto fosforoso (ver, por exemplo, o documento 15 fora das patentes) quando Hetl representa um grupo de fórmula [6] ou fazendo reagir, por meio do processo descrito no documento (ver, por exemplo, o documento 16 fora das patentes) utilizando um composto [24] e 2,4-dicloropirimidina quando Hetl representa um grupo de fórmula [6]. 0 composto da presente invenção pode ser utilizado sob a forma de uma base livre como um medicamento, contudo, pode também ser utilizado como um sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico por meio de processos conhecidos per se. Estes sais incluem sais de ácidos inorgânicos como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico e ácido fosfórico e sais de ácidos orgânicos tais como ácido acético, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido maleico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido p-tolueno-sulfónico e ácido metano-sulfónico. 0 cloridrato do derivado de amida, de acordo com a presente invenção, pode obter-se, por exemplo, dissolvendo o derivado de amida numa solução de álcool, uma solução de 28 acetato de etilo ou uma solução de éter do ácido clorídrico.

Como se mostra nos exemplos de ensaio descritos aqui a seguir, o composto da presente invenção tem uma actividade inibidora elevada da tirosina-cinase de BCR-ABL quando comparada com um derivado de pirimidina descrito especificamente no documento 1 das patentes. Por isso, o medicamento da presente invenção é útil como agente preventivo ou terapêutico para doenças envolvidas na tirosina-cinase de BCR-ABL, por exemplo, leucemia mielogénica crónica, leucemia linfoblástica aguda e leucemia mielogénica aguda.

Quando o composto da presente invenção é administrado como um medicamento, pode ser administrado a mamíferos, incluindo seres humanos, quer directamente ou como uma composição farmacêutica em que o composto está contido num veículo inerte, não tóxico, aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, por exemplo, de 0,1 a 99,5 % ou, preferencialmente 0,5 a 90 %.

Utiliza-se um ou mais agentes auxiliares para formulação tal como cargas ou diluentes sólidos, semi-sólidos ou líquidos. É desejável administrar a composição farmacêutica numa forma de dosagem unitária. A composição farmacêutica da presente invenção pode ser administrada intravenosamente, oralmente, directamente no tecido alvo, topicamente (por exemplo, transdermicamente) ou rectalmente. É matéria de facto, obviamente, que se utiliza uma forma de dosagem apropriada para qualquer modo de administração descrito antes. É desejável administrar oralmente. 29 É desejável fixar a dosagem do composto como inibidor da tirosina-cinase de BCR-ABL ou como agente terapêutico para leucemia mielogénica crónica tendo em conta as condições do paciente, tal como idade, peso do corpo e caracteristicas e severidade da doença e outros factores tais como a via de administração; mas normalmente, para adultos, uma quantidade no intervalo de 0,1 a 1000 mg/pessoa por dia e, preferencialmente, 1 a 500 mg/pessoa por dia é geralmente a dose do composto da presente invenção.

Nalguns casos, são suficientes quantidades abaixo deste intervalo e, inversamente, noutros casos são necessárias quantidades maiores. Pode ser administrada dividindo a dose total em duas ou três doses por dia.

MELHOR PRÁTICA DA PRESENTE INVENÇÃO A presente invenção será agora descrita com mais detalhe por meio dos exemplos de referência, exemplos, exemplos de ensaio e exemplos de formulações do composto da presente invenção, aos quais, contudo, a presente invenção não está limitada.

Exemplo de referência 1

Dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoilo

Etapa 1 3-Bromo-4-metilbenzoato de etilo 30

Fez-se uma suspensão de 10,00 g de ácido 3-bromo-4-metilbenzóico em 100 ml de etanol e adicionou-se 2,7 ml de ácido sulfúrico concentrado e depois aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo durante 22 horas. Depois do dissolvente ter sido destilado a pressão reduzida, misturou-se o resíduo em água gelada, neutralizou-se com uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio (pH 8) e depois extraiu-se com acetato de etilo. Lavou-se o extracto com água e depois secou-se sobre sulfato de magnésio anidro. Destilou-se o dissolvente a pressão reduzida para se obter 10,99 g do composto objectivo sob a forma de um produto oleoso castanho RMN do 1H-NMR (CDC13)5: 1,39 (3H, t) , 2,45 (3H, s) , 4,37 (2H, q), 7,29 (1H, dd), 7,87 (1H, dd), 8,20 (1H, d)

Etapa 2 3-Bromo-4-(bromometil)benzoato de etilo

Este composto foi preparado por meio de uma versão do processo descrito no documento (J. Med. Chem., 2000, 43 (8), 1508-1518). Dissolveu-se 10,00 g do 3-bromo-4- metilbenzoato de etilo obtido na etapa 1 em 125 ml de tetracloreto de carbono e, depois de se adicionar 6,83 g de N-bromosuccinimida e 80 g de peróxido de benzoílo, aqueceu-se a solução à temperatura de refluxo com exposição à luz proveniente de uma lâmpada incandescente (1500 W) durante 8 horas. Depois da eliminação dos insolúveis por filtração, diluiu-se o filtrado com 500 ml de diclorometano. Lavou-se a solução, por sua vez, com água e uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio e depois secou-se sobre sulfato de magnésio anidro. Destilou-se o dissolvente a pressão reduzida para se obter 13,2 g de um produto impuro sob a forma de um produto oleoso castanho. 31 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 1,40 (3H, t) , 2,45 (3H, s) , 4,37 (2H, q), 4,60 (2H, s) , 7,52 (1H, d), 7,96 (1H, dd) , 8,24 (1H, d)

Etapa 3 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoato de etilo

Dissolveu-se 11,40 g do 3-bromo-4-metilbenzoato de etilo obtido na etapa 2 em 114 ml de tetra-hidrofurano anidro e, depois de se adicionar 5,3 g de carbonato de potássio, adicionou-se, gota a gota, uma solução de 2.86 g de N-metilpiperazina em 10 ml de uma solução de tetra- hidrofurano ao longo de 10 minutos enquanto se agitava em atmosfera de árgon à temperatura ambiente. Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 4 horas, eliminaram-se os insolúveis por filtração e destilou-se o dissolvente do filtrado a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 7,53 g do composto objectivo sob a forma de um produto oleoso castanho. RMN do 1H-NMR (CDCI3) δ: 1,39 (3H, t) , 2,30 (3H, s) , 2,48 (4H, largo), 2,57 (4H, largo), 3,63 (2H, s), 4,38 (2H, q), 7,57 (1H, d), 7,94 (1H, dd), 8,20 (1H, d)

Etapa 4

Dicloridrato do ácido 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-il-metil) benzóico

Dissolveu-se 2,00 g do 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) benzoato de etilo obtido na etapa 3 em 40 ml de metanol e, depois de se adicionar 8,8 ml de uma solução aquosa de hidróxido de sódio IN, aqueceu-se a mistura à 32 temperatura de refluxo durante uma hora. Depois de se destilar o dissolvente, dissolveu-se o resíduo em 40 ml de água. Lavou-se a solução com 40 ml de éter e acidificou-se a camada aquosa (pH2) com ácido clorídrico IN e sob arrefecimento com gelo. Depois de se ter destilado a água, repetiu-se três vezes a operação de adição de 50 ml de tolueno ao resíduo seguido da eliminação azeotrópica de água para se obter 2,56 g de um produto impuro sob a forma de um cristal incolor. RMN do XH (D20) δ: 3,04 (3H, s) , 3,72 (8H, largo), 4,66 (2H, s), 7,74 (1H, d), 8,05 (1H, d), 8,33 (1H, s)

Etapa 5

Dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoilo

Fez-se uma suspensão de 1,50 g de dicloridrato de ácido 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzóico obtido na etapa 4 em 6,3 ml de cloreto de tionilo, seguida de agitação com aquecimento durante 24 horas. A solução reaccional foi arrefecida com ar e recolheram-se os cristais que se depositaram por filtração e depois lavaram-se com éter de dietilo para se obter 1,34 g de um produto impuro sob a forma de cristais incolores.

Ponto de fusão: 229-231°C (com decomposição) RMN do (D20) δ: 3,05 (3H, s) , 3,83 (8H, largo), 4,71 (2H, s), 7,76 (1H, d), 8,07 (1H, dd), 8,37 (1H, s)

Exemplo de referência 2

Dicloridrato de cloreto de 3-iodo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoilo 33

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1, excepto no facto de se ter utilizado o ácido 3-iodo-4-metilbenzóico em lugar do ácido 3-bromo-4-metilbenzóico na etapa 1, preparou-se um cristal amarelo claro.

Ponto de fusão: 218-220 (com decomposição) RMN do (D20) δ: 3,09 (3H, s) , 3,86 (8H, largo), 4,71 (2H, s), 7,77 (1H, d), 8,13 (1H, dd), 8,66 (1H, d)

Exemplo de referência 3

Dicloridrato de cloreto de 3-cloro-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1, excepto no facto de se ter utilizado o ácido 3-cloro-4- metilbenzóico em lugar do ácido 3-bromo-4-metilbenzóico na etapa 1, preparou-se um cristal incolor.

Ponto de fusão: 245-247 (com decomposição) RMN do (D20) δ: 3,07 (3H, s) , 3,84 (8H, largo), 4,71 (2H, s), 7,79 (1H, d), 8,06 (1H, dd), 8,21 (1H, s)

Exemplo de referência 4

Dicloridrato de cloreto de 3-fluoro-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1, excepto no facto de se ter utilizado o ácido 3-fluoro-4- metilbenzóico em lugar do ácido 3-bromo-4-metilbenzóico na etapa 1, preparou-se um cristal incolor.

Ponto de fusão: 242-244 (com decomposição) RMN do (D20) δ: 3,01 (3H, s) , 3,63 (4H, largo), 3,84 (4H, largo), 4,63 (2H, s), 7,68 (1H, t), 7,89 (2H, t) 34

Exemplo de referência 5

Dicloridrato de cloreto de 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)- 3- trifluorometilbenzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1, excepto no facto de se ter utilizado o ácido 4-metil-3-trifluorobenzóico em lugar do ácido 3-bromo-4-metilbenzóico na etapa 1, preparou-se um cristal castanho claro.

Ponto de fusão: 214-216 (com decomposição) RMN do (D20) δ: 3,02 (3H, s) , 3,81 (8H, largo), 4,70 (2H, s), 7,91 (1H, d), 8,32 (1H, d), 8,44 (1H, s)

Exemplo de referência 6 4- Metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]anilina

Etapa 1 3-(Dimetilamino)-1-(5-pirimidinil)-2-propen-l-ona

Preparou-se este composto por meio de uma versão do processo descrita no documento (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834). Adicionou-se 6,01 g de dimetilacetal de N,N-dimetilformamida a 1,54 g de 5- acetilpirimidina (Khim. Geterotsikl. Soedim., 1981, (7), 958-962 ) e aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo 15 horas. Depois arrefeceu-se a solução reaccional com ar, adicionou-se uma pequena quantidade de éter de di-isopropilo e recolheu-se o cristal depositado por filtração para se obter 1,52 g do composto objecto, sob a forma de um cristal castanho avermelhado.

Ponto de fusão: 133-135 °C 35 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,98 (3H, s) , 3,22 (3H, s) , 5,62 (1H, d), 7,89 (1H, d), 9,17 (2H, s), 9,27 (1H, s)

Etapa 2 1-(2-Metil-5-nitrofenil)guanidina A 135 g de nitrato de 1-(2-metil-5-nitrofenil)-guanidina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834), adicionou-se directamente 21 g de hidróxido de sódio em 1,0 L de uma solução aquosa fria, seguida de agitação à temperatura ambiente durante 10 minutos. Filtrou-se o cristal, lavou-se suficientemente com água e depois secou-se com ar forçado a 60 °C para se obter 102 g do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro. Ponto de fusão: 135-142 RMN do (DMSO-d6) δ: 2,16 (3H, s) , 5,31 (4H, largo), 7,31 (1H, d), 7,48 (1H, d), 7,59 (1H, dd)

Etapa 3 l-Metil-4-nitro-2-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]-benzeno A 1,51 g de 3-(dimetilamino)-1-(5-pirimidinil)-2-propen-l-ona obtida na etapa 1, adicionou-se 1,66 g de 1-(2-metil-5-nitrofenil)guanidina obtida na etapa 2, seguida de agitação a 120 °C durante 2 horas. À solução reaccional solidificada, adicionou-se 2-propanol e recolheu-se o cristal por filtração e depois lavou-se à vez com 2-propanol e éter de dietilo para se obter 1,95 g do composto objectivo sob a forma de um cristal castanho claro.

Ponto de fusão: 200-203 36 RMN do (DMSO-d6) δ: 2,43 (3H, s), 7,53 (1H, d), 7, 65 (1H, d) , 7,91 (1H, dd), 8,68 (1H, d), 8,77 (1H, d), 9,33 (2Η, s), 9,47 (2H, s)

Etapa 4 4-Meti1-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]anilina

Preparou-se este composto por meio de uma versão do processo descrita no documento (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834). Fez-se uma suspensão de 1,95 g do l-metil-4-nitro-2-[4-(5-pirimidinil) -pirimidin-2-ilamino]benzeno obtido na etapa 3 em 300 ml de metanol e, depois de se adicionar 0,50 g de paládio em carvão a 10 %, hidrogenou-se a mistura a 30 °C a 4 atm durante 18 horas. Eliminou-se o catalisado por filtração e destilou-se o dissolvente do filtrado, a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 0,60 g do composto objectivo sob a forma de um produto amorfo amarelo. RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,25 (3H, s), 3,64 (2H, largo), 6,43 (1H, d), 6,99 (1H, s) , 7,01 (1H, d), 7,14 (1H, dd) , 7,52 (1H, s), 8,54 (1H, dd) , 9,32 (1H, s), 9,35 (2H, s)

Exemplo de referência 7 4-Meti1-3-[4-(2-pirazinil)pirimidin-2-ilamino]anilina Etapa 1 3-(Dimetilamino)-1-(2-pirazinil)-2-propen-l-ona

Preparou-se este composto por meio de uma versão do processo descrita no documento (publicação da patente 37 japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834). A 5,00 g de 2-acetilpirazina, adicionou-se 5,37 g de acetal de dimetilo e N,N-dimetilformamida e aqueceu-se a mistura reaccional à temperatura de refluxo durante 19 horas. A mistura reaccional foi arrefecida com ar e dissolveu-se o cristal depositado em acetato de etilo e depois concentrou-se a pressão reduzida. Depois de se adicionar uma pequena quantidade de éter de dietilo, recolheu-se o cristal depositado por filtração e depois lavou-se, à vez, com éter de dietilo e éter de di-isopropilo para se obter 5,20 g do composto objectivo sob a forma de um cristal castanho. RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 3,01 (3H, s) , 3,21 (3H, s) , 6,36 (1H, d), 7,95 (1H, d), 8,61 (2H, m), 9,33 (1H, s)

Etapa 2 l-Metil-4-nitro-2-[4-(2-pirazinil)pirimidin-2-ilamino]-benzeno

Preparou-se este composto por meio de uma versão do processo descrita no documento (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834). Fez-se uma suspensão de 2,00 g da 3-(dimetilamino)-1-(2-pirazinil)-2-propen-l-ona obtida na etapa 1 e 2,90 g de nitrato de 1—(2— metil-5-nitrofenil)guanidina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em 23 ml de 2-propanol e, depois de se adicionar 0,50 g de hidróxido de sódio, aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo durante 20 horas. Depois de se arrefecer a mistura reaccional com ar, recolheu-se por filtração 0 cristal depositado para se obter 3,25 g de um cristal impuro.

Dissolveu-se o cristal impuro em clorofórmio-metanol (2:1) e eliminaram-se os insolúveis por filtração e depois concentrou-se o filtrado a pressão reduzida para se obter 38 1,93 g do composto objectivo sob a forma de um cristal de cor ocre.

Ponto de fusão: 207-210 RMN do XH (DMSO-de) δ: 2,44 (3H, s), 7,53 (1H, d), 7,74 (1H, d) , 7,91 (1H, dd), 8,71 (1H, d), 8,81 (3H, m), 9,34 (1H, s), 9,47 (1H, s)

Etapa 3 4-Meti1-3-[4-(2-pirazinil)pirimidin-2-ilamino]anilina ~

Preparou-se este composto por meio de uma versão do processo descrita no documento (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834). Fez-se uma suspensão de 1,00 g do l-metil-4-nitro-2-[4-(2-pirazinil)-pirimidin-2-ilamino]benzeno obtido na etapa 2 em 50 ml de metanol e, depois de se adicionar 100 mg de paládio em carvão a 10 %, hidrogenou-se a mistura à temperatura ambiente a 3 atm durante 14 horas e depois hidrogenou-se a 3,4 atm durante 4 horas. Eliminou-se o catalisador por filtração e destilou-se o dissolvente do filtrado, a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 0,49 g do composto objectivo sob a forma de um produto amorfo amarelo. RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,27 (3H, s) , 3,69 (2H, largo), 6,43 (1H, dd), 7,00 (1H, s) , 7,02 (1H, d), 7,60 (1H, d), 7,70 (1H, d), 8,58 (1H, d), 8,67 (2H, m) , 9,60 (1H, s)

Exemplo de referência 8 3-[4-(6-Cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina 39

Etapa 1 5-Acetil-2-cloropiridina

Fez-se uma suspensão de 1,84 g de cloreto de magnésio moído em 20 ml de tolueno e 9,4 ml de trietilamina e adicionou-se, à vez, 4,46 g de malonato de dietilo. Depois de se agita à temperatura ambiente durante 1,5 horas, adicionou-se, gota a gota, 4,84 g de cloreto de 6-cloronicotinoílo em 10 ml de uma suspensão de tolueno ao longo de 20 minutos, seguida de agitação à temperatura ambiente durante 2 horas. Após neutralização com 60 ml de ácido clorídrico IN, separou-se a camada aquosa. A camada aquosa foi ainda extraída com éter de dietilo e combinaram-se as camadas orgânicas e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Adicionou-se sulfóxido de dimetilo -água (25 ml-1 ml) ao cristal resultante, seguida se agitação com aquecimento a 150 até 160 °C durante 2 horas. Arrefeceu-se com ar a solução reaccional e adicionou-se água e depois recolheu-se por filtração o cristal depositado. Lavou-se o cristal impuro resultante dissolvido em acetato de etilo, à vez, com água e uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio e depois secou-se sobre sulfato de magnésio anidro. Lavou-se o cristal impuro resultante com éter de di-isopropilo e depois recolheu-se por filtração para se obter 2,74 g do composto objectivo sob a forma de um cristal semitranslúcido.

Ponto de fusão: 101-102 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,64 (3H, d), 7,45 (1H, d), 8,20 (1H, dt), 8,94 (1H, d)

Etapa 2 1-(6-Cloropiridin-3-il)-3-(dimetilamino)-2-propen-l-ona 40

Preparou-se este composto por meio de uma versão do processo descrita no documento (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834). A 2,68 g de 5-acetil-2-cloropiridina, obtida na etapa 1, adicionou-se 2,26 g de acetal de dimetilo e N,N-dimetilformamida e aqueceu-se a mistura reaccional a temperatura de refluxo durante 12 horas. Depois de se arrefecer com ar, purificou-se directamente a solução reaccional por meio de cromatografia em coluna de gel de silica. Lavou-se o cristal impuro resultante com éter de dietilo e depois recolheu-se por filtração para se obter 1,87 g do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo.

Ponto de fusão: 122-123 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,96 (3H, s) , 3,19 (1H, d), 5,62 (1H, d), 7,37 (1H, d), 7,85 (1H, d), 8,16 (1H, dd), 8,85 (1H, d)

Etapa 3 2-[4-(6-Cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-l-metil-4-nitrobenzeno A 1,83 g de 1-(6-cloropiridin-3-il)-3-(dimetilamino)-2-propen-l-ona obtida na etapa 2 e a 1,69 g de l-(2-metil-5-nitrofenil)guanidina obtida na etapa 2 do exemplo de referência 6, adicionou-se 18 ml de 2-propanol e aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo durante 16 horas. Depois da solução reaccional ter sido arrefecida com ar, recolheu-se o cristal depositado por filtração e lavou-se com éter de dietilo. Purificou-se o cristal puro resultante por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 0,91 g do composto objectivo sob a forma de um cristal amareloclaro.

Ponto de fusão: 210-212 41 RMN do 1R (DMSO-d6) δ: : 2,42 (3H, s) , 7, , 52 (1H, d) , 7,59 (1H, d) , 7,70 (1H, d), . 7,90 (1H, d) , 8, 53 ( 1H, dd), 8, 64 (1H, d) , 8,75 (1H, d), 9,15 (1H, d) , 9, 29 (1H, , s)

Etapa 4 3-[4-(6-Cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina A 842 mg do 2-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-l-metil-4-nitrobenzeno obtido na etapa 3, adicionou-se 6 ml de ácido clorídrico concentrado e adicionou-se uma solução de 2,78 g de di-hidrato de cloreto de estanho (II) em 4 ml de ácido clorídrico concentrado enquanto se agitava com aquecimento a 55 °C. Aqueceu-se gradualmente a mistura até 100 °C e agitou-se mais enquanto se aquecia a 100 °C durante 15 minutos. Arrefeceu-se a solução reaccional com ar e adicionou-se água e depois alcalinizou-se com uma solução aquosa de hidróxido de sódio a 10 %. Depois da adição de clorofórmio e agitação durante algum tempo, eliminaram-se os insolúveis por filtração e separou-se a camada aquosa. A camada aquosa foi ainda extraída com clorofórmio e combinaram-se as camadas orgânicas e depois de se secar sobre sulfato de magnésio anidro, destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica para se obter um produto impuro. O produto impuro cristalizou por adição de éter de dietilo e depois recolheu-se o cristal por filtração para se obter 680 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro. Ponto de fusão: 117-118 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,25 (3H, s) , 3,63 (2H, largo), 6,42 (1H, dd), 6,95 (1H, s) , 7,00 (1H, d), 7,10 (1H, d), 42 7,45 (1Η, d), 7,54 (1H, s) , 8,31 (1H, dd) , 8,50 (1H, s) 9,03 (lH,d)

Exemplo de referência 9 3-[4-(5-Bromopiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina

Etapa 1

Cloreto de 5-bromonicotinoílo A 5,00 g de ácido 5-bromonicotínico, adicionou-se 74 ml de cloreto de tionilo e aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo durante 6 horas. Depois de se destilar o dissolvente a pressão reduzida, lavou-se o cristal com éter de di-isopropilo e recolheu-se por filtração para se obter 4,09 g do composto objectivo sob a forma de um cristal incolor.

Ponto de fusão: 72-74 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 8,51 (1H, t) , 8,96 (1H, d), 9,21 (1H, d)

Etapa 2 3-Acetil-5-bromopiridina

Fez-se uma suspensão de 1,24 g de cloreto de magnésio moldo em 13 ml de tolueno e 6,2 ml de trietilamina e adicionou-se, à vez, 2,93 g de malonato de dietilo. Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 1,5 horas, adicionou-se, gota a gota, uma suspensão de 4,08 g de cloreto de 5-bromonicotinoílo, obtido na etapa 1, em 10 ml de tolueno ao longo de 15 minutos, seguida de agitação à 43 temperatura ambiente durante 2 horas. Após neutralização com 40 ml de ácido clorídrico IN, separou-se a camada aquosa. A camada aquosa foi extraída com éter de dietilo e combinaram-se as camadas orgânicas e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Adicionou-se sulfóxido de dimetilo-água (17 ml-0,7 ml) ao produto oleoso resultante, seguida se agitação com aquecimento a 150 até 160 °C durante 2 horas. Arrefeceu-se com ar a solução reaccional e adicionou-se água e depois recolheu-se por filtração o cristal depositado. Dissolveu-se o cristal depositado em acetato de etilo, à vez, com água e uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio e depois secou-se sobre sulfato de magnésio anidro. Adicionou-se 0,60 g de carvão activado (Kyoryoku Shirasagi MOIWY433) e depois de se deixar em repouso durante 10 minutos, eliminou-se o carvão activado por filtração e concentrou-se o filtrado a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 0,89 g do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro. Ponto de fusão: 87-89,5 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,65 (3H, d), 8,37 (1H, d), 8,86 (1H, d), 9,07 (1H, d)

Etapa 3 1-(5-Bromopiridin-3-il)-3-(dimetilamino)-2-propen-l-ona

Preparou-se este composto por meio de uma versão do processo descrita no documento (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834). A 859 mg da 3-acetil-5-cloropiridina, obtida na etapa 2, adicionou-se 563 mg de acetal de dimetilo e N,N-dimetilformamida e aqueceu-se a mistura reaccional à temperatura de refluxo durante uma hora. Depois de se arrefecer com ar, purificou-se 44 directamente a solução reaccional por meio de cromatografia em coluna de gel de sílica. Lavou-se o cristal impuro resultante com éter de dietilo e depois recolheu-se por filtração para se obter 860 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo.

Ponto de fusão: 131-131,5 RMN do 1H-NMR (CDCls) δ: 2,98 (3H, S) , 3,21 (1H, d) , 5, 63 (1H, d), 7,87 (1H, d), 8,33 (1H, d), 8,73 (1H, d) , 8, 98 (1H, d)

Etapa 4 2-[4-(5-Bromopiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-l-metil-4-nitrobenzeno A 833 mg de 1-(5-bromopiridin-3-il)-3-(dimetilamino)- 2- propen-l-ona obtida na etapa 3 e a 634 mg de l-(2-metil-5-nitrofenil)guanidina obtida na etapa 2 do exemplo de referência 6, adicionou-se 7 ml de 2-propanol e aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo durante 17 horas. Depois de se arrefecer a solução reaccional com ar, recolheram-se os cristais que se depositaram por filtração e depois lavaram-se com éter de dietilo para se obter 823 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro. Ponto de fusão: 206-108 RMN do (DMSO-de) δ: 2,43 (3H, s) , 7,52 (1H, d), 7,66 (1H, d), 7,90 (1H, dd) , 8,66 (1H, d), 8,74 (1H, d), 8,80 (1H, d), 8,86 (1H, s), 9,31 (2H, s)

Etapa 5 3- [4-(5-Bromopiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina 45 A 807 mg do 2-[4-(5-bromopiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-l-metil-4-nitrobenzeno obtido na etapa 4, adicionou-se 5 ml de ácido clorídrico concentrado e adicionou-se uma solução de 2,36 g de di-hidrato de cloreto de estanho (II) em 3,5 ml de ácido clorídrico concentrado enquanto se agitava com aquecimento a 55 °C. Aqueceu-se gradualmente a mistura até 100 °C e agitou-se mais enquanto se aquecia a 100 °C durante 15 minutos. Arrefeceu-se a solução reaccional com ar e adicionou-se água e depois alcalinizou-se com uma solução aquosa de hidróxido de sódio a 10 %. Depois da adição de clorofórmio e agitação durante algum tempo, eliminaram-se os insolúveis por filtração e separou-se a camada aquosa. A camada aquosa foi ainda extraída com clorofórmio e combinaram-se as camadas orgânicas e depois de se secar sobre sulfato de magnésio anidro, destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica para se obter um produto impuro. O produto impuro cristalizou por adição de éter de dietilo - acetato de etilo e depois recolheu-se o cristal por filtração para se obter 528 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo.

Ponto de fusão: 129,5-130 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,26 (3H, s) , 3,64 (2H, largo), 6,44 (1H, dd), 6,99 (1H, s) , 7,01 (1H, d), 7,13 (1H, d), 7,59 (1H, d), 8,53 (2H, m), 8,78 (1H, s), 9,15 (1H, s)

Exemplo de referência 10 3-[4-(1,2-Di-hidropiridazin-e-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina

Etapa 1 46 4-Acetilpiridazina A 3,55 g de sal potássico do éster monoetílico do ácido malónico e 2,21 g de cloreto de magnésio, adicionou-se 12 ml de N,N-dimetilformamida e agitou-se a mistura com aquecimento a 60 °C durante 4 horas (solução reaccional 1). Separadamente, preparou-se uma solução reaccional (solução reaccional 2) por agitação de 2,07 g de ácido 4-piridazinocarboxílico (J. Heterocyclic Chem., 1990, 27, 579-582.) e 2,95 g de 1,1'-carbonilbis-lH-imidazole em 12 ml de N,N-dimetilformamida à temperatura ambiente durante 4 horas e adicionou-se a solução reaccional à solução reaccional 1, seguida de agitação, à temperatura ambiente durante 26 horas. À solução reaccional, adicionou-se éter de dietilo e neutralizou-se a mistura com 50 ml de ácido clorídrico IN. Separou-se a camada aquosa e a camada aquosa voltou a ser extraída quatro vezes com éter de dietilo. Combinaram-se as camadas orgânicas e, depois de se secar sobre sulfato de magnésio anidro, destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Adicionou-se sulfóxido de dimetilo -água (5 ml-0,4 ml) ao produto oleoso resultante, seguida se agitação com aquecimento a 150 até 160 °C durante 2 horas. Destilou-se o dissolvente a pressão reduzida e purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica. Lavou-se o cristal impuro resultante com éter de di-isopropilo e depois recolheu-se por filtração para se obter 429 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro.

Ponto de fusão: 66,5-67,5 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,70 (3H, d), 7,87 (1H, d), 9,49 (1H, dd), 9,62 (1H, t)

Etapa 2 47 3-(Dimetilamino)-1-(4-piridazinil)-2-propen-l-ona

Preparou-se este composto por meio de uma versão do processo descrita no documento (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834). A 410 mg da 4-acetil-5-cloropiridina, obtida na etapa 1, adicionou-se 440 mg de acetal de dimetilo e N,N-dimetilformamida e aqueceu-se a mistura reaccional à temperatura de refluxo durante uma hora. Depois de se arrefecer com ar, purificou-se directamente a solução reaccional por meio de cromatografia em coluna de gel de sílica. Lavou-se o cristal impuro resultante com éter de dietilo e depois recolheu-se por filtração para se obter 341 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal cor de laranja.

Ponto de fusão: 136-138 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 3,01 (3H, s) , 3,24 (1H, s), 5,66 (1H, d), 7,85 (1H, dd), 7, 92 (1H, d), 9,32 (1H, dd), 9,55 (1H, t)

Etapa 3 l-Metil-4-nitro-2-[4-(4-piridazinil)pirimidin-2-ilamino]-benzeno A 327 mg de 3-(dimetilamino)-)-1-(4-piridazinil)-2-propen-l-ona obtida na etapa 2 e a 359 mg de 1-(2-metil-5-nitrofenil)guanidina obtida na etapa 2 do exemplo de referência 6, adicionou-se 6,4 ml de 2-propanol e aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo durante 22 horas. A solução reaccional foi arrefecida com água e recolheu-se o cristal depositado por filtração e depois lavou-se à vez, com 2-propanol e éter de dietilo para se obter 437 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro. Ponto de fusão: 243-245 48 RMN do (DMSO-d6) δ: 2.43 (3H, s) , 7,53 (1H, d), 7,73 (1H, d), 7,93 (1H, dd), 8,29 (1H, d), 8,73 (2H, d), 9,44 (2H, m), 9,88 (1H, s)

Etapa 4 3-[4-(1,2-Di-hidropiridazin-e-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina A 413 mg do l-metil-4-nitro-2-[4-(piridazinoil)- pirimidin-2-ilamino]-benzeno obtido na etapa 3, adicionou-se 3,3 ml de ácido clorídrico concentrado e adicionou-se uma solução de 1,51 g de di-hidrato de cloreto de estanho (II) em 2 ml de ácido clorídrico concentrado enquanto se agitava com aquecimento a 55 °C. Aqueceu-se gradualmente a mistura até 100 °C e agitou-se mais enquanto se aquecia a 100 °C durante 25 minutos. Arrefeceu-se a solução reaccional com ar e, depois da adição de água, alcalinizou-se a solução com uma solução aquosa de hidróxido de sódio a 10 %. Depois da adição de clorofórmio e agitação durante algum tempo, eliminaram-se os insolúveis por filtração e separou-se a camada aquosa. A camada aquosa foi ainda extraída com clorofórmio e combinaram-se as camadas orgânicas e depois de se secar sobre sulfato de magnésio anidro, destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 38 mg do composto objectivo sob a forma de um produto amorfo amarelo claro. do 1H-NMR (CDCla) δ: 2,24 (3H, s), 4,96 (2 H, d), 6,37 dd) , 6,58 (1H, dd), 6,73 (1H, d), 6,79 (1H, s), 6,80 d), 6,97 (1H, d), 7,41 (1H, t), 7,70 (1H, d), 8,27 (1H, d) 49

Exemplo de referência 11 4-Meti1-3-[4-(3-piridazinil)pirimidin-2-ilamino]anilina Etapa 1 3-(Dimetilamino)-1-(3-piridazinil)-2-propen-l-ona

Preparou-se este composto por meio de uma versão do processo descrita no documento (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834). A 762 mg de 3-acetilpiridazina (Arzneim.-Forsch./Drug Res., 1989, 39 (2), 1196-1201 ), adicionou-se 818 mg de acetal de dimetilo e N,N-dimetilformamida e aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo durante 1,5 horas. Depois de se arrefecer com ar, purificou-se directamente a solução reaccional por meio de cromatografia em coluna de gel de silica. Lavou-se o cristal impuro resultante com éter de di-isopropilo e depois recolheu-se por filtração para se obter 945 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal castanho amarelado.

Ponto de fusão: 102-105 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 3,04 (3H, s) , 3,22 (1H, s) , 6,69 (1H, d), 7,61 (1H, dd), 7,99 (1H, d), 8,27 (1H, dd) , 9,24 (1H, dd)

Etapa 2 l-Metil-4-nitro-2-[4-(3-piridazinil)pirimidin-2-ilamino]-benzeno

Agitou-se, com aquecimento a 120 °C, durante 3 horas, 800 mg da 3-(dimetilamino)-1-(3-piriazinil)-2-propen-l-ona obtida na etapa 1, adicionou-se 876 mg de 1-(2-metil-5- 50 nitrofenil)guanidina obtida na etapa 2 do exemplo de referência 6. A solução reaccional solidificada cristalizou por meio da adição de 2-propanol e depois lavou-se, à vez, com 2-propanol e éter de dietilo para se obter 1,21 g do composto objectivo sob a forma de um cristal castanho-escuro. Ponto de fusão: 275-277 RMN do λΕ (CF3COOD) δ: 2,45 (3H, s), 7,56 (1H, largo), 8,18 (1H, largo), 8,57 (1H, largo), 8,75 (2H, largo), 9,18 (1H, largo), 9,79 (1H, largo)

Etapa 3 4-Metil-3-[4-(3-piridazinil)pirimidin-2-ilamino]anilina

Fez-se uma suspensão de 754 ml do l-metil-4-nitro-2-[4-(3-piriazinil)pirimidin-2-ilamino]benzeno obtido na etapa 2 em 40 ml de metanol e 4,21 g de ditionito de sódio e adicionou-se 3,05 g carbonato de hidrogénio e sódio e depois aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo durante 5 horas. Depois de se arrefecer a solução reaccional com ar, eliminaram-se os insolúveis por filtração e destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Adicionou-se ao resíduo água e clorofórmio para separar a camada aquosa e depois extraiu-se a camada aquosa, três vezes com clorofórmio. Combinaram-se as camadas orgânicas, lavaram-se com água e uma solução salina saturada e depois secaram-se sobre sulfato de magnésio anidro. Destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 247 mg do composto objectivo sob a forma de um produto oleoso amarelo. RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,26 (3H, s) , 3,65 (2H, largo), 6,44 (1H, dd), 6,95 (1H, largo), 7,02 (1H, d), 7,54 (1H, 51 d), 7,63 (1H, dd), 8,02 (1H, d), 8,50 (1H, dd) , 8,62 (1H, d), 9,27 (1H, dd)

Exemplo de referência 12 4-Metil-3-[4-(3-piridl)pirimidin-2-ilamino]anilina Etapa 1 2-[(4-Cloro)piridin-2-ilamino]-l-metil-4-nitrobenzeno

Este composto foi preparado por meio de uma versão do processo descrito no documento (J. Med. Chem., 1996, 61 (7240), 7241-1518). A 2,00 g de 2,4-dicloropiridina ( Recl. Trav. Chim. Pays-Bas., 1950, 69, 673-699 .), adicionou-se 2,26 g de 2-metil-5-nitroanilina, 121 mg de acetato de paládio (II), 336 mg de (±)-2,2'-bis(difenulfosfino)-1,1'-binaftil [(±)-BINAP] e 6,16 g de carbonato de césio, 120 ml de tolueno e depois agitou-se a mistura com aquecimento a 70 °C durante 23 horas em atmosfera de árgon. Depois dos insolúveis terem sido eliminados por filtração, destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica para se obter 2,11 g de um produto impuro. Lavou-se o produto impuro com éter de dietilo para se obter 1,22 g do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo.

Ponto de fusão: 130-133 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,38 (3H, s) , 6,40 (1H, largo), 6,74 (1H, d), 6,85 (1H, dd), 7,38 (1H, d), 7,90 (1H, dd) , 8,15 (1H, d), 8,57 (1H, d)

Etapa 2 l-Metil-4-nitro-2-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]benzeno 52 A 20 ml de tetra-hidrofurano - água (1:1) desaerada, adicionou-se, 264 mg de 2-[(4-cloro)piridin-2-ilamino]-1-metil-4-nitrobenzeno obtido na etapa 1, 162 mg de dietil(3-piridil)borano, 470 mg de carbonato de potássio e 173 mg de tetraquis(trifenilfosfino)paládio (0) e agitou-se a mistura com aquecimento a 80 °C durante 44 horas sob atmosfera de árgon. Diluiu-se a solução reaccional com acetato de etilo para separar a camada aquosa e depois voltou a extrair-se a camada aquosa, três vezes, com acetato de etilo. Combinaram-se as camadas orgânicas, lavaram-se com água e uma solução salina saturada e secaram-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica para se obter 247 mg de um produto impuro. O produto impuro cristalizou por meio da adição de clorofórmio-metanol e depois recolheu-se por filtração para se obter 143 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal cor de laranja.

Ponto de fusão: 170-173 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,43 (3H, s) , 6,49 (1H, largo), 6,99 (1H, s), 7,07 (1H, dd) , 7,41 (2H, m) , 7,87 (2H, m) , 8,37 (1H, d), 8,68 (1H, dd), 8,69 (1H, m), 8,86 (1H, d)

Etapa 3 4-Meti1-3-[4-(3-piridl)pirimidin-2-ilamino]anilina A 126 mg do l-metil-4-nitro-2-[4-(3-piridil)piridin-2-ilamino]-benzeno obtido na etapa 2, adicionou-se 1 ml de ácido clorídrico concentrado e adicionou-se uma solução de 465 mg de di-hidrato de cloreto de estanho (II) em 1 ml de ácido clorídrico concentrado enquanto se agitava com aquecimento a 60 . Aqueceu-se gradualmente a mistura até

100 °C e agitou-se mais enquanto se aquecia a 100 °C 53 durante 40 minutos. Arrefeceu-se a solução reaccional com ar e, depois adicionou-se água, alcalinizou-se a solução com uma solução aquosa de hidróxido de sódio a 10 %. Extraiu-se a solução, três vezes com acetato de etilo e secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Lavou-se o cristal impuro resultante com uma pequena quantidade de clorofórmio e depois recolheu-se por filtração para se obter 93 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro.

Ponto de fusão: 183-186 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,19 (3H, s) , 3,60 (2H, largo), 6,37 (1H, largo), 6,47 (1H, dd) , 6,82 (1H, s), 6,88 (1H, d), 6,91 (1H, dd), 7,04 (1H, d), 7,37 (1H, dd) , 7,83 (1H, dt), 8,26 (1H, dd), 64 (1H, dd), 8,81 (1H, d)

Exemplo de referência 13 4-Metil-3-[4-(5-pirimidinil)piridin-2-ilamino]anilina

Etapa 1 l-Metil-4-nitro-2-[4-(5-pirimidinil)piridin-2-ilamino]-benzeno

Da mesma maneira que no exemplo de referência 12 (etapa 2), excepto no facto de se ter utilizado di- hidroxi(5-pirimidinil)borano em lugar de dietil(3-piridil)-borano, preparou-se o composto objectivo. Lavou-se com éter de dietilo o cristal impuro obtido por purificação com cromatografia em coluna de gel sílica.

Cristal amarelo Ponto de fusão: 230-232 54 RMN do ΧΗ (DMSO-d6) δ: 2,42 (3H, s) , 7,31 (1H, dd) , 7,47 (1H, m), 7,80 (1H, dd), 8,33 (1H, d), 8,61 (1H, s), 8,94 (1H, d), 9,19 (2H, s), 9,30 (lH,s)

Etapa 2 4-Metil-3-[4-(5-pirimidinil)piridin-2-ilamino]anilina

Dissolveu-se 163 mg do l-metil-4-nitro-2-[4-(5-pirimidinil)piridin-2-ilamino]benzeno obtido na etapa 1 em 32 ml de tetra-hidrofurano-metanol (1:1) e adicionou-se 98 mg de paládio em carvão a 10 %. Além disso, adicionou-se 284 mg de formato de amónio e aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo com uma temperatura do banho de 90 °C durante 40 minutos. Eliminou-se o catalisador por filtração e destilou-se o dissolvente do filtrado, a pressão reduzida. Adicionou-se ao resíduo água e acetato de etilo para separar a camada aquosa.

Extraiu-se mais uma vez a camada aquosa com acetato de etilo.

Combinaram-se as camadas orgânicas e secaram-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 149 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro.

Ponto de fusão: 179-180 RMN do ΧΗ (DMSO-d6) δ: 2,19 (3H, s) , 3,62 (2H, largo), 6,39 (1H, largo), 6,49 (1H, dd) , 6,76 (1H, s), 6,83 (1H, d), 6,90 (1H, dd), 7,06 (1H, d), 8,31 (1H, d), 8,90 (1H, s) , 9,25 (1H, s) 55

Exemplo de referência 14 4-Meti1-3-[2-(3-piridil)pirimidin-6-ilamino]anilina Etapa 1 2-Bromo-6- (3-piridil)piridina

Este composto foi preparado por meio de uma versão do processo descrito no documento (Chem. Pharm. Buli., 1985, 33 (11), 4755-4763) A 40 ml de tetra-hidrofurano, adicionou-se 1,76 g de dietil(3-piridil)borano, 5,92 g de 2,6-dibromopiridina, 1,99 g de brometo de tetra-n- butilamónio, 692 mg de tetraquis(trifenilfosfino)paládio (0) e 1,87 g de hidróxido de potássio moído e aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo durante três horas em atmosfera de árgon. Depois de se arrefecer com ar, diluiu-se a solução reaccional com acetato de etilo e eliminaram-se os insolúveis por filtração. Destilou-se o dissolvente do filtrado a pressão reduzida e adicionou-se acetato de etilo e uma solução salina saturada ao resíduo para separar a camada aquosa. Secou-se a camada orgânicas sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 1,26 g do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro. RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 7,34-7,51 (2H, m) , 7, 62-7, 75 (2H, m) , 8,34 (1H, dt) , 8,67 (1H, dd) , 9,17 (1H, d)

Etapa 2 l-Metil-4-nitro-2-[2-(3-piridil)pirimidin-6-ilamino]benzeno 56

Este composto foi preparado por meio de uma versão do processo descrito no documento (J. Org. Chem., 2000, 65, 1144-1157). A 940 mg de 2-bromo-6-(3-piridil)piridina obtida na etapa 1, adicionou-se 730 mg de 2-metil-5-nitroanilina, 37 mg de tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0), 75 mg de (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftil- [(±)-BINAP] e 1,82 mg de carbonato de césio, 12 ml de tolueno e depois agitou-se a mistura com aquecimento a 110 durante 24 horas em atmosfera de árgon . Depois de se arrefecer com ar, diluiu-se a solução reaccional com acetato de etilo e eliminaram- -se os insolúveis por filtração. Destilou-se o dissolvente do filtrado a pressão reduzida e o residuo cristalizou por adição de éter de dietilo. Recolheu-se o cristal resultante por filtração e depois lavou-se com acetato de etilo - éter de dietilo para se obter 64 6 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo.

Ponto de fusão: 148-150 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,42 (3H, s) , 6,53 (2H, largo), 6,80 (1H, d), 7,35 (2H, d), 7,44 (1H, dd) , 7,69 (1H, m) , 7,83 (1H, dd), 8,44 (1H, dt), 8,65 (1H, dd), 9,09 (1H, d), 9,20 (1H, d)

Etapa 3 4-Meti1-3-[2-(3-piridil)piridin-6-ilamino]anilina

Dissolveu-se 500 mg de l-metil-4-nitro-2-[2-(3-piridil)-piridin-6-ilamino] benzeno na etapa 2 em 10 ml de etanol e adicionou-se 1,05 g de zinco (pó), 430 mg de cloreto de amónio e 0,46 ml de ácido acético e depois agitou-se a mistura com aquecimento a 80 °C durante 30 minutos. Eliminou-se o catalisador por filtração e destilou-se o dissolvente do filtrado, a pressão reduzida. 57

Adicionou-se ao resíduo acetato de etilo e uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio para separar a camada aquosa. Extraiu-se ainda a camada aquosa, três vezes, com acetato de etilo. Combinaram-se as camadas orgânicas e secaram-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida para se obter 114 mg do composto objectivo sob a forma de um produto amorfo amarelo claro. RMN do ΧΗ (CDC13) δ: 2,19 (3H, s) , 3,40 (2H, largo), 6,37 (1H, largo), 6,45 (1H, dd) , 6, ,68 (1H, d) , 6, 91 (1H, d) , 7,03 (1H, d) , 7,16 (1H, d), 7, 38 (1H, dd) , 7,56 (1H, t), 8,29 (1H, dt), 8, 62 (1H, dt), 9, ,19 (1H, d)

Exemplo de referência 15 4-Meti1-3-[4-(3-piridl)piridin-5-ilamino]anilina Etapa 1 3-Bromo-5-(3-piridil)piridina

Da mesma maneira que no exemplo de referência 14 (etapa 1), excepto no facto de se ter utilizado 3,5-dibromopiridina em lugar de 2,β-dibromopiridina, preparou-se o composto objectivo. Cristal incolor RMN do (CDC13) δ: 7,44 (1H, m) , 7,88 (1H, m) , 8,04 (1H, t), 8,68-8,77 (3H, m), 8,84 (1H, dd)

Etapa 2 l-Metil-4-nitro-2-[3'-(3-piridil)piridin-5-ilamino]benzeno

Este composto foi preparado por meio de uma versão do processo descrito no documento (J. Org. Chem., 1996, 61, 58 7240-7241). A 25 mg de (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1' -binaftil[(±)-BINAP], adicionou-se 2 ml de tolueno e dissolveu-se (±)-BINAP por agitação com aquecimento a 80 °C em atmosfera de árgon. Arrefeceu-se a solução com ar até à temperatura ambiente e adicionou-se 6 mg de acetato de paládio (II) e agitou-se durante um minuto, 620 mg de 3-bromo-5-(3-piridil)piridina obtida na etapa 1, 482 mg de 2-metil-5-nitroanilina, 1,20 g de carbonato de césio e 2 ml (total de 4 ml) de tolueno, seguido de agitação com aquecimento a 80 °C durante 18 horas e depois aqueceu-se a 100 °C durante 24 horas em atmosfera de árgon. Depois de se arrefecer com ar, diluiu-se a solução reaccional com acetato de etilo e eliminaram-se os insolúveis por filtração. Destilou-se o dissolvente do filtrado, a pressão reduzida e purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica para se obter 108 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo. Ponto de fusão: 195-198 RMN do ΧΗ (CDC13) δ: 2,41 (3H, s), 5,76 (1H, largo), 7,39 (1H, largo), 7,42 (1H, ddd), 7,54 (1H, dd), 7,83 (1H, dd), 7,88 (1H, m) , 8,09 (1H, d), 8,43 (1H, d), 8,50 (1H, d) 8,67 (1H, dd), 8,83 (1H, d)

Etapa 3 4-Meti1-3-[3-(3-piridil)piridin-5-ilamino]anilina

Da mesma maneira que no exemplo de referência 12 (etapa 3), excepto no facto de se ter utilizado l-metil-4-nitro-2-[3-(3-piridil)piridin-5-ilamino]benzeno, obtido na etapa 2 em lugar de l-metil-4-nitro-2-[4-(3-piridil)-piridin-2-ilamino]benzeno, preparou-se o composto objectivo. O resíduo obtido por concentração a pressão reduzida não foi mais purificado. 59

Produto oleoso castanho claro RMN do 1H-NMR (CDCl3) δ: 2,16 (3H, s), 3,34 (2H, largo), 5,78 (1H, largo), 6,40 (1H, dd) , 6,61 (1H, d), 7,01 (1H, d), 7,33-7,40 (2H, m) , 7,81 (1H, dt) , 8,28 (1H, d), 8,30 (1H, d), 8,61 (1H, dd), 8,78 (1H, d)

Exemplo de referência 16 4-Metil-3-[3-(3-piridl)fenilamino]anilina

Etapa 1 2-(3-Bromofenilamino)-l-metil-4-nitrobenzeno

Este composto foi preparado por meio de uma versão do processo descrito no documento (J. Org. Chem., 2000, 65, 1144-1157). A 1,00 g de l-bromo-3-iodobenzeno, adicionou-se 591 mg de 2-metil-5-nitroanilina, 32 mg de tris-(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0), 66 mg de (±)—2,2'— bis (difenilfosfino)-1,1'-binaftil[(±)-BINAP] e 1,61 g de carbonato de césio, 14 ml de tolueno e depois agitou-se a mistura com aquecimento a 110 durante 36 horas em atmosfera de árgon. Depois de se arrefecer com ar, eliminaram-se os insolúveis por filtração e destilou-se o dissolvente do filtrado, a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 256 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal cor de laranja.

Ponto de fusão: 114-116 RMN do 1H-NMR (CDC13) δ: 2,34 (3H, s) , 5,52 (1H, largo), 6,99 (1H, m) , 7,14-7,21 (3H, m) , 7,33 (1H, d), 7,77 (1H, dd), 8,02 (1H, d)

Etapa 2 60 l-Metil-4-nitro-2-[3-(3-piridil)fenilamino]benzeno

Da mesma maneira que no exemplo de referência 12 (etapa 2), excepto no facto de se ter utilizado 2— (3— bromofenilamino)-l-metil-4-nitrobenzeno, obtido na etapa 1 em lugar de 2-[(4-cloro)piridin-2-ilamino]-l-metil-4-nitrobenzeno, preparou-se o composto objectivo. Purificou-se o produto impuro obtido por cromatografia em coluna de gel de silica por adição de acetato de etilo.

Cristal amarelo Ponto de fusão: 162-165 RMN do (DMSO-de) δ: 2,36 (3H, s) , 7,17 (1H, d), 7,30 (1H, d), 7,40-7,70 (5H, m) , 7, 93-7, 95 (2H, m) , 8,02 (1H, d), 8,57 (1H, d), 8,85 (1H, s)

Etapa 3 4-Metil-3-[3-(3-piridl)fenilamino]anilina

Da mesma maneira que no exemplo de referência 12 (etapa 3) , excepto no facto de se ter utilizado l-metil-4-nitro-2-[3-(3-piridil)fenilamino]benzeno, obtido na etapa 2 em lugar de l-metil-4-nitro-2-[4-(3-piridil)piridin-2-ilamino]benzeno, preparou-se o composto objectivo. O residuo obtido por concentração a pressão reduzida não foi mais purificado.

Produto oleoso amarelo claro RMN do (CDC13) i 5: 2, 17 (3H, s) , 3,50 (2 H, largo), CO 'vt1 LO (1H, largo), 6,33 (1H, dd), 6,64 (1H, d), 6,97- -7,15 (4H, m) , 7,31-7,39 (2H, m), 7,85 (1H, dt), 8,57 (1H, dd) , 8,82 (1H, d) 61

Exemplo de referência 17 4-Meti1-3-[2-(3-piridl)pirazin-6-ilamino]anilina Etapa 1 2-[(2-Cloro)pirazin-6-ilamino]-l-metil-4-nitrobenzeno

Da mesma maneira que no exemplo de referência 12 (etapa 1), excepto no facto de se ter utilizado 2,6-dicloropirazina em lugar de 2,6-dicloropiridina, preparou-se o composto objectivo.

Cristal amarelo RMN do 1E (CDC13) δ: 2,42 (3H, s) , 6,44 (3H, s) , 7,43 (1H, d), 7,97 (1H, d), 8,09 (2H, s), 8,58 (1H, s)

Etapa 2 l-Metil-4-nitro-2-[2-(3-piridil)pirazin-6-ilamino]benzeno A 64 ml de tetra-hidrofurano-água (1:1) desaerada, adicionou-se 790 mg de 2-[(2-cloro)pirazin-6-ilamino]-1-metil-4-nitrobenzeno obtido na etapa 1, 406 mg de di- hidroxi(3-piridil)borano, 1,41 g de carbonato de potássio e 520 mg de tetraquis(trifenilfosfino)paládio (0) e agitou-se a mistura com aquecimento à temperatura de refluxo com um banho com uma temperatura de 100 °C durante 3 horas sob atmosfera de árgon. Adicionou-se 32 ml de tetra-hidro-furano - água (1:1) e voltou a acontecer-se a mistura à temperatura de refluxo durante 3 horas e depois deixa-se em repouso à temperatura ambiente durante a noite. Recolheram-se os produtos insolúveis depositados por filtração e extrairam-se e lavaram-se com metanol e depois destilou-se o dissolvente do filtrado a pressão reduzida. Adicionou-se 62 ao resíduo éter de dietilo e, depois de agitação, recolheu-se o cristal por filtração e depois lavou-se com metanol para se obter 27 0 mg do composto objectivo sob a forma de um produto amorfo. do ^ (DMSO-de) δ: 2,45 (3H, s) , 7,51 (1H, d), 7,55 d), 7,85 (1H, d), 8,45 (1H, d), 8,50 (1H, s) , 8, 65 d), 8,74 (1H, s), 9,04 (1H, s) , 9,20 (1H, d), 9,29 (1H, s)

Etapa 3 4-Meti1-3-[2-(3-piridl)pirazin-6-ilamino]anilina

Dissolveu-se 107 mg do l-metil-4-nitro-2-[2-(3-piridil)pirazin-6-ilamino]benzeno obtido na etapa 2 em 10 ml de metanol (porção hão dissolvida e suspensa) e adicionou-se 16 mg de paládio em carvão a 10 %. Além disso, adicionou-se 221 mg de formato de amónio, seguido de agitação com aquecimento com uma temperatura de banho de 50 °C durante 15 horas. Eliminou-se o catalisador por filtração e destilou-se o dissolvente do filtrado, a pressão reduzida. Adicionou-se ao resíduo água e acetato de etilo para separar a camada aquosa. Extraiu-se mais uma vez a camada aquosa com acetato de etilo. Combinaram-se as camadas orgânicas e secaram-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida para se obter 95 mg do composto objectivo. RMN do (CDC13) δ: 2,22 (3H, s) , 6,39 (1H, s) , 6,48 (1H, dd), 6,99 (1H, d), 7,06 (1H, d), 7,43 (1H, ddd), 8,10 (1H, s), 8,28 (1H, ddd), 8,43 (1H, s) , 8,68 (1H, d), 9,23 (1H, s) 63

Exemplo de referência 18 4-Metil-3-[5-(3-piridil)-1,2,4-triazin-3-ilamino]anilina Etapa 1 3-Metiltio-5-(3-piridil)-1,2,4-triazina

Primeiro, preparou-se bromidreto de (3-piridil)glioxal por meio de uma versão do processo descrito no documento (Heterocycles, 1990, 31 (12), 2163-2172.). Fez-se uma suspensão de 5,00 g de bromidrato de 3-(bromoacetil)-piridina (J. Heterocyclic. Chem., 1969, 6 (6), 891-900.) em 30 ml de metanol e adicionou-se 3,40 g de N-óxido de piridina sob agitação e arrefecimento com gelo, seguido de agitação à temperatura ambiente durante 26 horas depois de se retirar o banho de gelo. Utilizou-se este composto para a reacção subsequente sem ser isolado. Depois, preparou-se 3-metiltio-5-(3-piridil)-1,2,4-triazina por meio de uma versão do processo descrito no documento ( J. Med. Chem., 1979, 22 (6), 671-677 .). À solução anterior, adicionou-se 4,18 g de iodato de S-metiltio-semicarbazida (Heterocycles, 1979, 12 (6), 745-749.) e 1,51 g de carbonato de hidrogénio e sódio sob agitação e arrefecimento com gelo e adicionou-se 6 ml de água e, depois de voltar lentamente para a temperatura ambiente, agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 57 horas. Alcalinizou-se a solução reaccional adicionando uma solução aquosa saturada, arrefecida de carbonato de hidrogénio e sódio, extraiu-se duas vezes com acetato de etilo e secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica para se obter 1,37 g de um produto impuro. Lavou-se o produto impuro com éter de di- 64 isopropilo aquecido para se obter 1,13 g do composto objectivo sob a forma de um cristal verde amarelado.

Ponto de fusão: 98-102 RMN do XH (CDC13) δ: 2,75 (3H, s), 7,52 (3H, ddd), 8,48 (1H, dddd), 8,84 (1H, dd), 9,37 (1H, t), 9,43 (1H, s)

Etapa 2 3-Metilsulfinil-5-(3-piridil)-1,2,4-triazina

Dissolveu-se 3,00 g de 3-metiltio-5-(3-piridil)-1,2,4-triazina obtida na etapa 1 em 50 ml de diclorometano e adicionou-se 5,76 g de ácido m-cloroperbenzóico a 70 % sob agitação com arrefecimento com gelo. Depois de se agitar, sob arrefecimento com gelo, durante 20 minutos, a temperatura voltou para a temperatura ambiente e adicionou-se 1,5 g de sulfato de magnésio e 10 g de NH-gel de sílica (Chromatorex NH-DM1020, fabricado por Fuji Silysia Chemical Co., Ltd.). Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 10 minutos, eliminaram-se os insolúveis por filtração e destilou-se o dissolvente do filtrado a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica para se obter 1,65 g de um produto impuro. Lavou-se o produto impuro com éter de 2-propanoldietilo para se obter 1,07 g do composto objectivo sob a forma de um cristal castanho claro.

Ponto de fusão: 150-152 RMN do (CDC13) δ: 3,17 (3H, s) , 7,58 (3H, dd), 8,67 (1H, dd), 8,97 (1H, dd), 9,47 (2H, d), 9,85 (1H, s)

Etapa 3 N-(5-amino-2-metilfenil)acetamida 65

Fez-se uma suspensão de 3,00 g de N-(2-metil-5-nitrofenil)acetamida ( Can. J. Chem., 1984, 62, 1292-1296) em 100 ml de etanol e adicionou-se 600 mg de paládio em carvão a 10 % e depois hidrogenou-se a mistura à temperatura ambiente a 4 atm durante 3 horas. Eliminou-se o catalisador por filtração e destilou-se o dissolvente do filtrado, a pressão reduzida para se obter 2,50 g de um produto impuro. Lavou-se o produto impuro com éter de di-isopropilo aquecido para se obter 2,37 g do composto objectivo sob a forma de um cristal verde-claro. Ponto de fusão: 136-139 s), 4,84 (1H, (1H, d), 9,01 RMN do (D20) δ: 2,00 (3H, s) , 3,38 (1H, largo), 6,29 (1H, dd) , 6,67 (1H, d), 6,80 (1H, largo)

Etapa 4 4-Metil-3-[5-(3-piridil)-1,2,4-triazin-3-ilamino]anilina

Dissolveu-se 671 mg de N-(5-amino-2-metilfenil)-acetamida obtido na etapa 3 em 40 ml de tetra-hidrofurano e 180 mg de hidreto de sódio a 60 % sob agitação e arrefecimento com gelo. Depois da agitação sob arrefecimento com gelo durante 5 minutos, a temperatura voltou para a temperatura ambiente, seguida de agitação durante 30 minutos e adicionou-se 900 mg de 3-metilsulfinil-5-(3-piridil)-1,2,4-triazina obtida na etapa 2. Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 3,5 horas, misturou-se a solução reaccional com água gelada, extraiu-se com diclorometano e secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica para se obter 733 mg de 4-metil-3-{N-acetil-N-[5-(3-piridil)-1,2,4-triazin-3-il]amino}- 66 anilina como produto intermédio. Dissolveu-se o composto anterior em 10 ml de metanol e adicionou-se 2,0 ml de uma solução aquosa IN de hidróxido de sódio, seguida de agitação à temperatura ambiente durante 45 minutos. Misturou-se a solução reaccional com água, extraiu-se duas vezes com acetato de etilo e secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 478 mg do composto objectivo sob a forma de um produto castanho amarelado. RMN do 1R (CDC13) δ: 2,27 (3H, s) , 3,5-3,9 (2H, largo), 6,46 (1H, dd), 7,02 (1H, d), 7,38 (1H, largo), 7,44-7,15 (2H, m) , 8,38 (1H, dt), 8,79 (1H, dd), 9,19 (1H, s), 9,32 (1H, d)

Exemplo de referência 19

Dicloridrato de cloreto de 3-metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoilo

Etapa 1 1-(4-metoxi-2-metilbenzoil)-4-metilpiperazina A 3,32 g de ácido 4-metoxi-2-metilbenzóico, adicionou-se 5,75 g de cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodi-imida e 4,05 g de 1-hidroxibenzotriazole, 10 ml de Ν,Ν-dimetilformamida. Sob agitação, à temperatura ambiente, adicionou-se, gota a gota, sucessivamente uma solução de 2,00 g de N-metilpiperazina em 10 ml de Ν,Ν-dimetilformamida e uma solução de 1,52 g de trietilamina em 10 ml de Ν,Ν-dimetilformamida seguido de agitação à 67 temperatura ambiente durante 15 horas. Depois de se destilar o dissolvente a pressão reduzida, adicionou-se uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio ao residuo e extraiu-se a solução, duas vezes, com acetato de etilo. Depois da secagem sobre sulfato de magnésio anidro, destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o residuo por cromatografia numa coluna de gel de silica para se obter 4,25 g do composto objectivo sob a forma de um produto oleoso amarelo claro. RMN do 2Η (CDCls) δ: 2,30 (3H, s), 2,30 (2H, largo), 2,31 (1H, s), 2,47 (2H, largo), 3,27 (2H, largo), 3,80 (2H, largo), 6,73 (1H, d), 6,75 (1H, s), 7,09 (1H, dd)

Etapa 2 1-(4-hidroxi-2-metilbenzoil)-4-metilpiperazina

Dissolveu-se 4,89 g de 1-(4-metoxi-2-metilbenzoil)-4-metilpiperazina obtida na etapa 1 em 150 ml de dicloro-metano adicionou-se, gota a gota, uma solução de 9,87 g de tribrometo de boro em 100 ml de diclorometano sob agitação e arrefecimento com gelo. Depois de se agitar sob arrefecimento com gelo, durante uma hora, a temperatura voltou para a temperatura ambiente e a mistura foi ainda agitada durante 15 horas. A solução da reacção foi arrefecida com gelo e alcalinizou-se por meio da adição de 50 ml de água e 150 ml de uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio e depois eliminaram-se os insolúveis por filtração. Extraiu-se o filtrado com clorofórmio e secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o residuo por cromatografia numa coluna de gel de silica para se obter 2,20 g do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro. 68

Ponto de fusão: 167-168 RMN do (CDCls) δ: 2,18 (3H, s) , 2,32 (3H, s) , 2,32 (1H, largo), 2,50 (2H, largo), 3,30 (2H, largo), 3,83 (2H, largo), 4,17 (1H, largo), 6,52 (1H, s) , 6,54 (1H, d), 6,94 (1H, d)

Etapa 3 3-Metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)fenol

Dissolveu-se 1,96 g de 1-(4-hidroxi-2-metilbenzoil)-4-metilpiperazina obtido na etapa 2 em 35 ml de tetra-hidrofurano e adicionou-se, em porções, 0,317 g de hidreto de alumínio e lítio sob agitação e arrefecimento com gelo. Depois de se agita à temperatura ambiente durante 4 horas, arrefeceu-se novamente a mistura com gelo e adicionou-se, em várias porções, 0,317 g de hidreto de alumínio e lítio, sob agitação e arrefecimento com gelo, seguido de agitação à temperatura ambiente durante 15 horas. Arrefeceu-se, com gelo, a solução reaccional e adicionou-se tetra-hidrofurano anidro e, depois da decomposição do hidreto de alumínio e lítio, eliminaram-se os insolúveis por filtração. Destilou-se o dissolvente do filtrado e o resíduo cristalizou por meio da adição de acetona para se obter 1,10 g do composto objectivo sob a forma de um cristal incolor.

Ponto de fusão: 174-176 RMN do (CDCls) δ: 2,28 (3H, s) , 2,29 (3H, s), 2,51 (8H, largo), 3,39 (2H, s), 6,50 (1H, dd) , 6,54 (1H, d), 7,03 (1H, d) Etapa 4

Trifluorometano-sulfonato de 3-metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) fenol 69

Dissolveu-se 660 mg de 3-metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) fenol, obtido na etapa 3 em 6,6 ml de piridina e adicionou-se 1.86 g de ácido trifluorometano-sulfónico anidro sob agitação e arrefecimento com gelo, seguido de agitação à temperatura ambiente durante 12 horas. Misturou-se a solução reaccional com água gelada, extraíu-se três vezes com acetato de etilo e depois lavaram-se com água. Depois da secagem sobre sulfato de magnésio anidro, destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 535 mg do composto objectivo sob a forma de um produto oleoso amarelo claro. RMN do ΧΗ (CDC13) δ: 2,31 (3H, s) , 2,38 (3H, s) , 2,47 (8H, largo), 3,45 (2H, s), 7,04 (1H, d), 7,06 (1H, s), 7,35 (1H, d)

Etapa 5 3-Metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoato de metilo

Dissolveu-se 705 mg de triflurometano-sulfonato de 3-metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)fenilo, obtido na etapa 4, numa mistura de dissolventes de 8,40 ml de dimetil-sulfóxido, 4,96 ml de metanol, 2,68 ml de 1,2-dicloroetano e 0,76 ml de trietilamina e depois adicionou-se 62,8 mg de 1,3-bis(difenilfosfino)propano e 34,2 mg de acetato de paládio (II). À temperatura ambiente, sob agitação, fez-se borbulhar monóxido de carbono gasoso na solução reaccional durante 5 minutos e aqueceu-se a solução à temperatura de refluxo durante uma hora enquanto borbulhava o monóxido de carbono gasoso. Depois de se arrefecer com ar, adicionou-se água e acetato de etilo à solução reaccional e eliminaram-se os insolúvel por filtração e depois extraíu-se o filtrado com acetato de etilo. Lavou-se o extracto com água 70 e secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 392 mg do composto objectivo sob a forma de um produto oleoso amarelo claro. RMN do ΧΗ (CDC13) δ: 2,29 (3H, s), 2,39 (3H, s) , 2,46 (8H, largo), 3,49 (2H, s), 3,90 (3H, s), 7,36 (1H, d), 7,81 (1H, d), 7,83 (1H, s)

Etapa 6

Dicloridrato do ácido 3-metil-4-(4-metilpiperazin-l-il-metil) benzóico

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapa 4) , excepto no facto de se ter utilizado 3-metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoato de metilo obtido na etapa 5 em lugar de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-benzoato de etilo, preparou-se o composto objectivo.

Cristal incolor

Etapa 7

Dicloridrato de cloreto de 3-metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) benzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapa 5) , excepto no facto de se ter utilizado dicloridrato do ácido 3-metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzóico, obtido na etapa 6 em lugar de dicloridrato do ácido 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzóico, preparou-se o composto objectivo. Cristal incolor 71

Exemplo de referência 20

Dicloridrato de cloreto de 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)- 3- nitrobenzoilo

Etapa 1 4- (Bromometil)-3-nitrobenzoato de etilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapa 1), excepto no facto de se ter utilizado ácido 4-(bromometil)-3-nitrobenzóico em lugar de ácido 3-bromo-4-metilbenzóico, preparou-se o composto objectivo.

Produto oleoso amarelo RMN do (CDCls) δ: 1,43 (3H, t) , 4,48 (2H, q) , 4,85 (2H, s), 7,67 (1H, d), 8,26 (1H, dd), 8,67 (1H, d)

Etapa 2 4-(4-Metilpiperazin-l-ilmetil)-3-nitrobenzoato de etilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapa 3), excepto no facto de se ter utilizado 4-(bromometil)-3-nitrobenzoato de etilo, obtido na etapa 1, em lugar de 3-bromo-4-(bromometil)benzoato de etilo, preparou-se o composto objectivo. Cristal amarelo Ponto de fusão: 92-94 RMN do (CDC13) δ: 1,42 (3H, t), 2,28 (3H, s), 2,33-2,54 (8H, largo), 3,83 (2H, s), 4,42 (2H, q) , 7,71 (1H, d), 8,19 (1H, dd), 8,45 (1H, d)

Etapa 3 72

Dicloridrato de ácido 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-nitrobenzóico

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapa 4) , excepto no facto de se ter utilizado 4 — (4 — metilpiperazin-l-ilmetil)-3-nitrobenzoato de etilo, obtido na etapa 2, em lugar de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) benzoato de etilo, preparou-se o composto objectivo.

Cristal castanho claro

Ponto de fusão: 180 (com decomposição) RMN do (D20) δ: 2,88 (3H, s) , 3,30 (8H, largo), 4,58 (2H, s), 7,72 (1H, d), 8,24 (1H, dd), 8,66 (1H, d)

Etapa 4

Dicloridrato de cloreto de 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-nitrobenzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapa 5) , excepto no facto de se ter utilizado dicloridrato do ácido 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-nitrobenzóico, obtido na etapa 3, em lugar de dicloridrato do ácido 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzóico, preparou-se o composto objectivo.

Cristal castanho claro

Ponto de fusão: 190 (com decomposição) RMN do :H (D20) δ: 2,99 (3H, s) , 3, 25-4, 00 (8H, largo), 4,66 (2H, s), 7,75 (1H, d), 8,28 (1H, d), 8,72 (1H, largo)

Exemplo de referência 21

Dicloridrato de cloreto de 3-metoxi-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) benzoilo 73

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapas 2 a 5), excepto no facto de se ter utilizado 3- metoxi-4-metilbenzoato de metilo em lugar de 3-bromo-4-metilbenzoato de etilo na etapa 2, preparou-se o composto objectivo.

Cristal incolor RMN do (D20) δ: 2,88 (3H, s) , 3,54 (8H, largo), 3,80 (3H, s), 4,41 (2H, s), 7,39 (1H, d), 7,52 (2H, m)

Exemplo de referência 22

Dicloridrato de cloreto de 3,5-dibromo-4-(4-metilpiperazin-1-ilmetil)benzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapas 2 a 5) , excepto no facto de se ter utilizado 3,5-metoxi-4-metilbenzoato de metilo em lugar de 3-bromo-4-metilbenzoato de etilo na etapa 2, preparou-se o composto objectivo.

Cristal cor de laranja claro RMN do (D20) δ: 2,89 (3H, s) , 3,73 (8H, largo), 4,73 (2H, s), 8,19 (2H, s)

Exemplo de referência 23

Dicloridrato de cloreto de 3,5-metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1, excepto no facto de se ter utilizado o ácido 3,5-dimetoxi-4-metilbenzóico em lugar do ácido 3-bromo-4-metilbenzóico na etapa 1, preparou-se o composto objectivo.

Cristal amarelo claro 74 RMN do 1R (D20) δ: 2,92 (3H, s) , 3,58 (8H, largo), 3,82 (6H, s), 4,44 (2 H, s), 7,20 (2H, s)

Exemplo de referência 24

Dicloridrato de cloreto de 3-(N,N-dimetilcarbamoil)-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoilo

Etapa 1 3-(Ν,Ν-Dimetilcarbamoil)-4-metilbenzoato de etilo

Preparou-se este composto por meio da versão do processo descrito no documento ( Org. Lett., 2002, 4, 2849— 2851.). Dissolveu-se 1,00 g de 3-iodo-4-metilbenzoato de etilo (produto intermédio do exemplo de referência 2) em 30 ml de N,N-dimetilformamida e adicionou-se 23 mg de

tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0). Adicionou-se, sob agitação, à temperatura ambiente, 643 μΐ de oxicloreto fosforoso, seguido de agitação com aquecimento a 120 °C durante 12 horas em atmosfera de árgon. Misturou-se a solução reaccional com uma solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio, extraiu-se duas vezes com acetato de etilo, lavou-se com uma solução salina saturada e secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica para se obter 338 mg do composto objectivo sob a forma de um produto oleoso castanho. RMN do (CDCls) δ: 1,38 (3H, t) , 2,35 (3H, s) , 2,84 (3H, s), 3,15 (3H, s), 4,36 (2H, q), 7,29 (1H, d), 7,87 (1H, d), 7,95 (1H, dd) 75

Etapa 2 4-(Bromometil)-3-(N,N-dimetilcarbamoil)benzoato de etilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapa 2) , excepto no facto de se ter utilizado 3-(N,N-dimetilcarbamoil)4-metilbenzoato de etilo, obtido na etapa 1, em lugar de 3-bromo-4-metilbenzoato de etilo, preparou-se o composto objectivo.

Produto oleoso amarelo RMN do (CDCls) δ: 1,38 (3H, t) , 2,91 (3H, s) , 3,18 (3H, s), 4,36 (2H, q), 4,60 (2H, s), 7,51 (1H, d), 7,88 (1H, d), 7,98 (1H, dd)

Etapa 3 3-(N, N-dimetilcarbamoil)-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-benzoato de etilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapa 3) , excepto no facto de se ter utilizado 4-(bromometil)-3- (N,N-dimetilcarbamoil)benzoato de etilo, obtido na etapa 2, em lugar de 3-bromo-4-(bromometil)benzoato de etilo, preparou-se o composto objectivo.

Produto oleoso castanho RMN do XH (CDC13) δ: 1,39 (3H, t) , 2,28 (3H, s) , 2,46 (8H, largo), 2,86 (3H, s), 3,13 (3H, s), 3,58 (2H, largo), 4,37 (2H, q), 7,45 (1H, d), 7,86 (1H, d), 7,97 (1H, dd)

Etapa 4

Dicloridrato de ácido 3-(N,N-dimetilcarbamoil)-4-(4-metil-piperazin-l-ilmetil)benzóico 76

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapa 4) , excepto no facto de se ter utilizado 3-(N,N-dimetilcarbamoil)-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoato de etilo obtido na etapa 3 em lugar de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoato de etilo, preparou-se o composto objectivo.

Produto amorfo amarelo claro RMN do (D20) δ: 2,83 (3H, s) , 2,87 (3H, s) , 3,02 (3H, s), 3,44 (8H, largo), 4,28 (2H, s), 7,63 (1H, d), 7,97 (1H, d), 8,05 (1H, dd)

Etapa 5

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapa 5) , excepto no facto de se ter utilizado dicloridrato do ácido 3-(N,N-dimetilcarbamoil)-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) -benzóico, obtido na etapa 4 em lugar de dicloridrato do ácido 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzóico, preparou-se o composto objectivo.

Cristal cor de laranja claro RMN do (D20) δ: 2,83 (3H, s) , 2,87 (3H, s) , 3,03 (3H, s), 3,47 (8H, largo), 4,29 (2H, s), 7,64 (1H, d), 7,99 (1H, d), 8,06 (1H, dd)

Exemplo de referência 25

Dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-etilpiperazin-l-ilmetil)benzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1, excepto no facto de se ter utilizado N-etilpiperazina em 77 lugar de N-metilpiperazina, na etapa 3, preparou-se o composto objectivo.

Cristal castanho claro RMN do ^ (D20) δ: 1,33 (3H, t) , 3,34 (2H, q) , 3,67 (8H, largo), 4,73 (2H, s) , 7,73 (1H, d), 8,03 (1H, dd) , 8,32 (1H, d)

Exemplo de referência 26

Dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-[4-(n-propil)-piperazin-l-ilmetil)benzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1, excepto no facto de se ter utilizado N-(n-propil)piperazina em lugar de N-metilpiperazina, na etapa 3, preparou-se o composto objectivo.

Cristal incolor RMN do (D20) δ: 0,95 (3H, t), 1,75 (2H, m) , 3,23 (2H, m) , 3,79 (8H, largo), 4,73 (2H, s), 7,73 (1H, d), 8,05 (1H, dd), 8,35 (1H, d)

Exemplo de referência 27

Dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(N,N-dimetilamino-metil)benzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1, excepto no facto de se ter utilizado dimetilamina em lugar de N-metilpiperazina, na etapa 3, preparou-se o composto objectivo.

Cristal incolor RMN do ΧΗ (D20) δ: 2,80 (6H, d), 4,41 (2H, s) , 7,53 (1H, d), 7,88 (1H, dd), 8,16 (1H, d) 78

Exemplo de referência 28

Dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(N,N-dietilamino-metil)-benzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1, excepto no facto de se ter utilizado dietilamina em lugar de N-metilpiperazina, na etapa 3, preparou-se o composto objectivo.

Cristal incolor RMN do (D20) δ: 1,34 (6H, t) , 3,29 (4H, q) , 4,52 (2H, s), 7,65 (1H, d), 7,99 (1H, dd), 8,26 (1H, d)

Exemplo de referência 29

Dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(1-pirrolidinilmetil)- benzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1, excepto no facto de se ter utilizado pirrolidina em lugar de N-metilpiperazina, na etapa 3, preparou-se o composto objectivo. Cristal castanho claro RMN do (D20) δ: 1,95 (4H, m) , 3,16 (2H, m) , 3,46 (2H, m), 4,47 (2H, s), 7,54 (1H, d), 7,88 (1H, d), 8,17 (1H, s)

Exemplo de referência 30

Dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(piperidinometil)-benzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1, excepto no facto de se ter utilizado piperidina em lugar de N-metilpiperazina, na etapa 3, preparou-se o composto objectivo. 79

Cristal incolor RMN do (D20) δ: 1.69 (6H, m) , 3,14 (2H, t) , 3,53 (2H, d), 4,50 (2H, s), 7,66 (1H, d), 8,00 (1H, d), 8,29 (1H, s)

Exemplo de referência 31

Dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(morfolinometil)-benzoilo

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1, excepto no facto de se ter utilizado morfolino em lugar de N-metilpiperazina, na etapa 3, preparou-se o composto objectivo.

Cristal cor-de-rosa RMN do ΧΗ (D20) δ: 3,39 (4H, m) , 3,69 (2H, m) , 3,99 (2H, m), 4,51 (2H, s) , 7,60 (1H, d), 7,92 (1H, dd), 8,22 (1H, s)

Exemplo de referência 32

Dicloridrato do ácido 3-bromo-4-(cis-3,5-dimetilpiperazin-1-ilmetil)benzóico

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapas 1 a 4), excepto no facto de se ter utilizado 2,6-dimetilpiperazina em lugar de N-metilpiperazina, na etapa 3, preparou-se o composto objectivo.

Cristal incolor RMN do (D20) δ: 1,25 (6H, d), 3,11 (2H, t) , 3,62 (4H, m) , 4,53 (2 H, s), 4,73 (2H, s), 7,59 (1H, d), 7,90 (1H, dd), 8,20 (1H, d) 80

Exemplo de referência 33

Dicloridrato do ácido 3-bromo-4-(4-metil-hexa-hidro-lH-l, 4-diazepin-l-ilmetil)benzóico

Da mesma maneira que no exemplo de referência 1 (etapas 1 a 4), excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-hexa-hidro-lH-1,4-diazepina em lugar de N-metil-piperazina, na etapa 3, preparou-se o composto objectivo. Cristal amarelo RMN do (D20) δ: 2,23 (2H, largo), 2,88 (3H, s) , 3,57 (4H, largo), 3,74 (4H, s), 4,58 (2H, s), 7,61 (1H, d), 7,90 (1H, dd), 8,17 (1H, d)

Exemplo de referência 34 Ácido 3-bromo-4-[4-(t-butoxicarbonil)piperazin-l-ilmetil]-benzóico

Etapa 1 3-Bromo-4-[4-(t-butoxicarbonil)piperazin-l-ilmetil]benzoato de etilo

Dissolveu-se 1,00 g de 3-bromo-4-(bromometil)benzoato de etilo (produto intermédio do exemplo de referência 1) em 10 ml de tetra-hidrofurano anidro e, depois de se adicionar 473 mg de carbonato de potássio, adicionou-se, gota a gota, 467 mg de N-(t-butoxicarbonil)piperazina enquanto se agitava à temperatura ambiente em atmosfera de árgon. Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 20 horas, eliminaram-se os insolúveis por filtração e destilou-se o dissolvente do filtrado a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel 81 de sílica para se obter 918 mg do composto objectivo sob a forma de um produto oleoso amarelo claro. RMN do XH (CDC13) δ: 1,40 (3H, t) , 1,46 (9H, s) , 2,47 (4H, t), 3,45 (4H, m), 3,63 (2H, s), 4,38 (2H, q), 7,58 (1H, d), 7,96 (1H, dd), 8,21 (1H, d)

Etapa 2 Ácido 3-bromo-4-[4-(t-butoxicarbonilil)piperazin-l-il-me-til]-benzóico

Dissolveu-se 898 mg do 3-bromo-4-[4-(t-butoxi-car-bonil)-piperazin-l-ilmetil]benzoato de etilo obtido na etapa 1 em 5 ml de metanol e adicionou-se 3,2 ml de uma solução aquosa de hidróxido de sódio IN. Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 3 horas, neutralizou-se a mistura por meio da adição lenta de 3,2 ml de ácido clorídrico IN. Recolheu-se o cristal resultante por filtração e depois lavou-se com água e depois secou-se a pressão reduzida para se obter 796 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal incolor. Ponto de fusão: 204-205 (com decomposição) RMN do (DMSO-de) δ: 1,40 (9H, s) , 2,40 (4 H, t) , 3,36 (4H, m) , 3,61 (2 H, s), 7,63 (1H, d) , 7, 92 (1H, dd), 8,07 (1H, d)

Exemplo de referência 35 Ácido 4-[4-(t-butoxicarbonil)piperazin-l-ilmetil]-3-tri-fluoro-metil-benzóico

Da mesma maneira que no exemplo de referência 34, excepto no facto de se ter utilizado 4-(bromometil)-3-trifluorometilbenzoato de etilo (produto intermédio do 82 exemplo de referência 5) , em lugar de 3-bromo-4-(bromometil)benzoato de etilo, na etapa 1, preparou-se o composto objectivo.

Cristal incolor

Ponto de fusão: 126-134 RMN do ^ (CDC13) δ: 1,47 (9H, s) , 2,55 (4H, largo), 3,54 (4H, largo), 3,84 (2H, s), 8,05 (1H, d), 8,25 (1H, d), 8,37 (1H, s)

Exemplo 1 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenilJbenzamida

Dissolveu-se 0,74 g de 4-metil-3-[4-(3-piridil)-piri-midin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em 27 ml de piridina anidra e adicionou-se 920 mg de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoilo (exemplo de referência 1) , seguido de agitação à temperatura ambiente durante 14 horas. Misturou-se a solução reaccional com água gelada e uma solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e depois extraiu-se com acetato de etilo. Lavou-se o extracto com água e secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica para se obter 1,48 g de um produto impuro. O produto impuro cristalizou por adição de clorofórmio - éter de dietilo (1:1) e depois recolheu-se o cristal por filtração para se obter 1,05 g do composto objectivo sob a forma de um cristal incolor.

Ponto de fusão: 202-203 (com decomposição)

Análise elementar (para C29H3oBrN70*0,9H20)

Calcd.(%): C, 59,17; H, 5,44; N, 16,65 83

Encontrado (%): C, 59,16; H, 5,44; N, 16,65

Exemplo 2 3-Iodo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 1, excepto no facto de se ter utilizado dicloridrato do cloreto de 3-iodo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) benzoilo (exemplo de referência 2) em lugar de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) benzoilo e pelo facto de a reacçâo se ter realizado à temperatura ambiente durante 24 horas e o cristal resultante recristalizou no seio de metanol.

Cristal incolor

Ponto de fusão: 199-200 (com decomposição)

Análise elementar (para C29H30IN7O·0, 9H20)

Calcd. (%): C, 56,23; H, 4,88; N, 15,83 Encontrado (%): C, 56,13; H, 5,44; N, 16,65

Exemplo 3 3-Cloro-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 1, excepto no facto de se ter utilizado dicloridrato do cloreto de 3-cloro-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) benzoilo (exemplo de referência 3) em lugar de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) benzoilo e pelo facto de a reacção se ter realizado à temperatura ambiente durante 24 horas. Cristal incolor Ponto de fusão: 193-194 (com decomposição) 84

Análise elementar (para C29H30CIN7OO, 6H20)

Calcd.(%): C, 64,64; H, 5,84; N, 18,20 Encontrado (%): C, 64,62; H, 5,60; N, 18,23

Exemplo 4 3- Fluoro-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 1, excepto no facto de se ter utilizado dicloridrato do cloreto de 3-fluoro-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) benzoilo (exemplo de referência 4) em lugar de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) benzoilo e pelo facto de a reacção se ter realizado à temperatura ambiente durante 22 horas e o cristal impuro obtido por purificação com cromatografia em coluna de gel de silica cuja coluna foi lavada com clorofórmio - éter de dietilo (1:1).

Cristal incolor

Ponto de fusão: 197-199 (com decomposição)

Análise elementar (para C29H30FN7O 0,3H20)

Calcd.(%): C, 67,37; H, 5,97; N, 18,96 Encontrado (%): C, 67,36; H, 5,96; N, 18,93

Exemplo 5 4- (4-Metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluorometil-N-{4-meti1-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenilJbenzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 1, excepto no facto de se ter utilizado dicloridrato do cloreto de 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluorometilbenzoílo (exemplo de referência 5) em lugar 85 de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) benzoílo e pelo facto de a reacção se ter realizado à temperatura ambiente durante 22 horas e lavou-se o cristal resultante com éter de dietilo.

Cristal incolor

Ponto de fusão: 182-183 (com decomposição)

Análise elementar (para C30H30F3N7OO, 3H20)

Calcd.(%): C, 63,55; H, 5,44; N, 17,29 Encontrado (%): C, 63,43; H, 5,37; N, 17,29

Exemplo 6 4-(4-Metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluorometil-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 1, excepto no facto de se ter utilizado dicloridrato de cloreto de 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluorometilbenzoílo (exemplo de referência 5) em lugar de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) benzoílo e de ser utilizado 4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]anilina (exemplo de referência 6) em lugar de 4-metil-3-[4-(3-piridinil)-pirimidin-2-ilamino]anilina e pelo facto de a reacção se ter realizado à temperatura ambiente durante 20 horas e o cristal impuro obtido por purificação por cromatografia em coluna de gel de sílica cuja coluna foi lavada com éter de dietilo.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 231-233 (com decomposição)

Análise elementar (para C29H29F3N8O*0,2H20)

Calcd.(%): C, 61,52; H, 5,23; N, 19,79 Encontrado (%): C, 61,37; H, 5,24; N, 19,81 86

Exemplo 7 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(2-pirazinil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 1, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(2-pirazinil)pirimidin-2-ilamino]anilina (exemplo de referência 7) em lugar de 4-metil-3-[4-piridinil)pirimidin- 2- ilamino]anilina e pelo facto de a reacção se ter realizado à temperatura ambiente durante 18 horas.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 213-214 (com decomposição)

Análise elementar (para C28H29BrNgO)

Calcd.(%): C, 58,64; H, 5,10; N, 19,54 Encontrado (%): C, 58,41; H, 5,11; N, 19,24

Exemplo 8 3- Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{3-[4-(6-cloro-piridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilfenilJbenzamida

Fez-se uma suspensão de 629 mg de 3-[4-(6-cloro-piridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina (exemplo de referência 8) em7 ml de acetonitrilo e depois adicionou-se, sucessivamente 24 mg de 4-dimetilaminopiridina e 1,15 ml de N,N-di-isopropil-N-etilamina. Sob agitação e arrefecimento com gelo, adicionou-se 979 mg de cloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-benzoílo (exemplo de referência 1), em cinco porções, seguido de agitação à temperatura ambiente durante uma hora depois de se retirar o banho de gelo. Misturou-se a solução reaccional com água, extraiu-se com clorofórmio e depois secou-se sobre sulfato de magnésio anidro. Destilou-se o 87 dissolvente a pressão reduzida e purificou-se o residuo por cromatografia em coluna de gel de silica. Lavou-se o cristal impuro resultante, sucessivamente, com acetato de etilo e éter de dietilo e recolheu-se o cristal por filtração para se obter 939 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro. Ponto de fusão: 219-222 (com decomposição)

Análise elementar (para C29H29BrClN70)

Calcd.(%): C, 57,39; H, 4,82; N, 16,15 Encontrado (%): C, 57,07; H, 4,75; N, 16,09

Exemplo 9 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{3-[4-(5-bromo-piridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilfenil}benzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 3—[4— (5— bromopiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina (exemplo de referência 9) no lugar de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina e pelo facto de o cristal obtido por purificação por meio de cromatografia em coluna de gel de silica cuja coluna, ter recristalizado em acetato de etilo/éter de dietilo.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 194-195 (com decomposição)

Análise elementar (para C29H29Br2N7O*0,3H20)

Calcd.(%): C, 53,03; H, 4,44; N, 14,93 Encontrado (%): C, 53,07; H, 4,53; N, 14,70 88

Exemplo 10 4-(4-Metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluorometil-N-{3-[4-(5-bromopiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilfenil}-benza- mida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 3—[4—(5— bromopiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina (exemplo de referência 9) em vez de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina e dicloridrato de cloreto de 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluorometil-benzoilo (exemplo de referência 5) em vez de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-benzoílo e por o produto oleoso purificado por meio de cromatografia em coluna de gel de silica ter cristalizado por meio da adição de éter de di-isopropilo/acetato de etilo.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 171-173 (com decomposição)

Análise elementar (para C3oH29BrF3N70 0,7H2O)

Calcd.(%): C, 55,17; H, 4,69; N, 15,01 Encontrado (%) : C, 55,16; H, 4,57; N, 14,94

Exemplo 11 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{3-[4-(1,2-di-hidro-piridazin-4-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilfenil}-benzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 3-[4-(1,2-di-hidropiridazin-4-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina (exemplo de referência 10) no lugar de 3-[4-(6-cloro- 89 piridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina e pelo facto de a extracção ter sido realizada com acetato de etilo e o resíduo obtido por purificação por meio de cromatografia em coluna de gel de sílica ter sido lavado com éter de di-isopropilo.

Produto amorfo amarelo claro

Análise elementar (para C28H3iBrNsO*0, 8{ (CH3) 2CH}20) }

Calcd.(%): C, 59,94; H, 6,47; N, 17,05 Encontrado (%): C, 59,51; H, 6,30; N, 16,80

Exemplo 12 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3- [4- (3-piridazini1)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridazinil)pirimidin-2-ilamino]-4-anilina (exemplo de referência 11) no lugar de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina e pelo facto de o cristal obtido por purificação por meio de cromatografia em coluna de gel de sílica cuja coluna foi lavada com acetato de etilo/clorofórmio.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 185-187 (com decomposição)

Análise elementar (para C28H29BrN8O0,1H20)

Calcd.(%): C, 58,28; H, 5,13; N, 19,42 Encontrado (%): C, 58,24; H, 5,00; N, 19,48

Exemplo 13 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3- [4- (5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida 90

Dissolveu-se 150 mg de 4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)-pirimidin-2-ilamino]anilina (exemplo de referência 6) em 4 ml de N,N-dimetilformamida e depois adicionou-se, um de cada vez, 255 mg de dicloridrato do ácido 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzóico (exemplo de referência 1) e 109 mg de trietilamina. Enquanto se agitava a suspensão à temperatura ambiente, adicionou-se, um de cada vez, 106 mg de cianofosfonato de dietilo e 55 mg de trietilamina, seguido de agitação à temperatura ambiente durante 3 horas. Depois de o dissolvente ter sido destilado a pressão reduzida, misturou-se o resíduo em água e uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio e depois extraiu-se com clorofórmio. Lavou-se o extracto com água e secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica para se obter 240 mg de um produto impuro. Dissolveu-se o produto impuro em clorofórmio-metanol e adicionou-se 2-propanol, seguido de concentração a pressão reduzida. Recolheu-se o cristal depositado por filtração e depois lavou-se com 2-propanol e éter de dietilo, um de cada vez, para se obter 14 7 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro.

Ponto de fusão: 238-240 (com decomposição)

Análise elementar (para C28H29BrN8O0,1H20)

Calcd.(%): C, 58,46; H, 5,12; N, 19,48 Encontrado (%): C, 58,21; H, 5,02; N, 19,30

Exemplo 14 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4- (3-piridil)piridin-2-ilamino]fenil}benzamida 91

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridinil)piridin-2-ilamino]-4-anilina (exemplo de referência 12) no lugar de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)-pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina e pelo facto de o cristal obtido por purificação por meio de cromatografia em coluna de gel de sílica cuja coluna foi lavada com acetato de etilo/clorofórmio/metanol.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 244-245 (com decomposição)

Análise elementar (para C3oH3iBrN60*0, 6h20)

Calcd.(%): C, 61,88; H, 5,57; N, 12,43 Encontrado (%): C, 61,71; H, 5,49; N, 14,13

Exemplo 15 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)piridin-2-ilamino]feniljbenzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)piridin-2-ilamino]-4-anilina (exemplo de referência 13) no lugar de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)-pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina e pelo facto de o cristal obtido por purificação por meio de cromatografia em coluna de gel de sílica cuja coluna foi lavada com acetato de etilo/éter de dietilo.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 244-246 (com decomposição)

Análise elementar (para C29H3oBrN700,2H2OO, 2CH3COOC2H5) Calcd.(%): C, 60,28; H, 5,43; N, 16,51 Encontrado (%): C, 60,12; H, 5,40; N, 16,28 92

Exemplo 16 3-Bromo-4- (4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[2-(3-piridil)piridin-6-ilamino]fenil}benzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[2-(3-piridil)piridin-6-ilamino]-4-anilina (exemplo de referência 14) no lugar de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)-pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina e pelo facto de o produto impuro ter sido purificado por cromatografia em coluna de gel de silica cuja coluna não foi mais lavada. Produto amorfo amarelo claro Análise elementar (para C3oH3iBrN60· 1, 5H2O)

Calcd.(%): C, 60,20; H, 5,73; N, 14,04 Encontrado (%): C, 60,39; H, 5,55; N, 13,00 FAB-EM (Pos.) m/z 571, (Neg.) m/z 569

Exemplo 17 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[3-(3-piridil)piridin-5-ilamino]feniljbenzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[3-(3-piridil)piridin-5-ilamino]-4-anilina (exemplo de referência 15) no lugar de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina e pelo facto de a extracção ter sido realizada com acetato de etilo e de o produto oleoso, purificado por cromatografia em coluna de gel de silica ter cristalizado por meio da adição de acetato de etilo - éter de dietilo.

Cristal amarelo claro Ponto de fusão: 139-141 93

Análise elementar (para C3oH3iBrN60*l, 2H20)

Calcd.(%): C, 60,75; H, 5,68; N, 14,17 Encontrado (%): C, 60,96; H, 5,62; N, 13,98

Exemplo 18 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[3-(3-piridil)fenilamino]feniljbenzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[3-(3-piridil)fenilamino]-anilina (exemplo de referência 16) no lugar de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina e pelo facto de a extracção ter sido realizada com acetato de etilo e de o produto oleoso, purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica ter cristalizado por meio da adição de acetato de etilo -hexano.

Cristal castanho claro

Ponto de fusão: 174-175

Análise elementar (para C3iH32BrN50)

Calcd.(%): C, 65,26; H, 5,65; N, 12,28 Encontrado (%): C, 65,12; H, 5,73; N, 12,19

Exemplo 19 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3- [2- (3-piridil)pirazin-6-ilamino]feniljbenzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[2-(3-piridil)pirazin-6-ilamino]-4-anilina (exemplo de referência 17) no lugar de 3-[4-(6-cloropiridin-3- il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina e pelo facto de a 94 extracção ter sido realizada com acetato de etilo e de o produto amorfo, purificado por cromatografia em coluna de gel de silica ter cristalizado por meio da adição de acetato de etilo.

Cristal amarelo Ponto de fusão: 192-193

Análise elementar (para C29H30BrN7O*0,25H20)

Calcd.(%): C, 60,37; H, 5,33; N, 16,99 Encontrado (%): C, 60,58; H, 5,35; N, 16,76

Exemplo 20 3-Bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[5- (3-piridil)-1,2,4-triazin-3-ilamino]feniljbenzamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[5- (3-piridil)-1,2,4-triazin-3-ilamino]-4-anilina (exemplo de referência 18) no lugar de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metilanilina e pelo facto de o produto amorfo purificado por cromatografia em coluna de gel de silica ter cristalizado pela adição de 2-propanol. Cristal amarelo Ponto de fusão: 219-221

Análise elementar (para C28H29BrN80*l, 2H2O*0,1CH3CH (OH) CH3) Calcd.(%): C, 56,55; H, 5,40; N, 18,64 Encontrado (%): C, 56,58; H, 5,00; N, 18,27

Exemplo 21 3-Metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenilJbenzamida 95

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em vez de 3-[4 - (6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina e de se ter utilizado cloridrato de cloreto de 3-metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo (exemplo de referência 19) em vez de cloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo e pelo facto de o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica ter cristalizado pela adição de acetato de etilo.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 192-193

Análise elementar (para C30H33N7O)

Calcd.(%): C, 70,98; H, 6,55; N, 19,31 Encontrado (%): C, 70,79; H, 6,67; N, 19,39

Exemplo 22 4-(4-Metilpiperazin-l-ilmetil)-3-nitro-N-{4-metil-3-[4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenilJbenzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em vez de 3-[4- (6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina e de se ter utilizado cloridrato de cloreto de 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-nitrobenzoílo (exemplo de referência 20) em vez de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo e pelo facto de a extracção ter sido realizada com acetato de etilo e o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de 96 gel de sílica ter cristalizado pela adição de acetato de etilo - éter de dietilo.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 184-186

Análise elementar (para C29H30N8O3·0,7H20)

Calcd.(%): C, 63,19; H, 5,74; N, 20,33 Encontrado (%): C, 63,38; H, 5,57; N, 20,00

Exemplo 23 3- Metoxi-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em vez de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina e de se ter utilizado dicloridrato de cloreto de 3-metoxi-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo (exemplo de referência 21) em vez de cloridrato de cloreto de 3-bromo- 4- (4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo e pelo facto de o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica ter cristalizado pela adição de acetato de etilo e depois de se ter lavado com éter de dietilo.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 171-172 (com decomposição)

Análise elementar (para C30H33N7O2·0,6Η20)

Calcd.(%): C, 67,42; H, 6,45; N, 18,35 Encontrado (%): C, 67,23; H, 6,36; N, 18,19 97

Exemplo 24 3.5- Dibromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em vez de 3-[4- (6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4- metilanilina e de se ter utilizado dicloridrato de cloreto de 3,5-dibromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-benzoilo (exemplo de referência 22) em vez de cloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoilo e pelo facto de o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica ter cristalizado pela adição de acetato de etilo e depois de se ter lavado com éter de dietilo.

Cristal amarelo claro Ponto de fusão: 227-229

Análise elementar (para θ29Η29Β^Ν7Ο·0, IH2OO, 35CH3CO2C2H5) Calcd.(%): C, 53,38; H, 4,72; N, 14,33 Encontrado (%): C, 53,02; H, 4,74; N, 14,09

Exemplo 25 3.5- Dimetoxi-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em vez de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina e de se ter utilizado dicloridrato de cloreto de 98 3,5-dimetoxi-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo (exemplo de referência 23) em vez de cloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo e pelo facto de o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica ter cristalizado pela adição de acetato de etilo.

Cristal amarelo

Ponto de fusão: 201-214 (com decomposição)

Análise elementar (para C31H35N7O3·0,5H2O)

Calcd.(%): C, 66,17; H, 6,45; N, 17,43 Encontrado (%): C, 65,91; H, 6,42; N, 17,42

Exemplo 26 3-(N, N-dimetilcarbamoil)-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-beN- zamida

Este composto foi preparado da mesma maneira que no exemplo 1, excepto no facto de se ter utilizado dicloridrato do cloreto de 3-(N,N-dimetilcarbamoil)-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo (exemplo de referência 24) em lugar de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo e pelo facto de o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica ter cristalizado por adição de acetato de etilo. Cristal cor de laranja

Ponto de fusão: 210-214 (com decomposição)

Análise elementar (para C32H36N8O2·0, 6H20)

Calcd.(%): C, 66,79; H, 6,52; N, 19,47 Encontrado (%): C, 66,41; H, 6,17; N, 19,36 99

Exemplo 27 3-Bromo-4-(4-etilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4—(3— piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em vez de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina e de se ter utilizado dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-etilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo (exemplo de referência 25) em vez de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo e pelo facto de o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica ter cristalizado pela adição de acetato de etilo.

Cristal amarelo claro Ponto de fusão: 202-203

Análise elementar (para C3oH32BrN70*0,25H20)

Calcd.(%): C, 60,97; H, 5,54; N, 16,59 Encontrado (%): C, 60,96; H, 5,54; N, 16,32

Exemplo 28 3-Bromo-4-(4-(n-propil)-piperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em vez de 3-[4- (6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina e de se ter utilizado dicloridrato de cloreto de 3- 100 bromo-4-[4-(n-propil)piperazin-l-ilmetil)benzoílo (exemplo de referência 26) em vez de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo e pelo facto de o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica ter cristalizado pela adição de acetato de etilo.

Cristal amarelo claro Ponto de fusão: 204-205

Análise elementar (para C3iH34BrN7O*0,4H2O)

Calcd. (%): C, 61,26; H, 5,77; N, 16,13 Encontrado (%): C, 61,48; H, 5,66; N, 15,79

Exemplo 29 3-Bromo-4-(N,N-dimetilaminometil)-N-{4-metil-3-[4- (3-piri-dil)-pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em vez de 3-[4- (6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina e de se ter utilizado dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(N,N-dimetilaminometil)benzoílo (exemplo de referência 27) em vez de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo e pelo facto de o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica ter cristalizado pela adição de acetato de etilo.

Cristal incolor

Ponto de fusão: 154-155

Análise elementar (para C26H2sBrN60)

Calcd.(%): C, 60,35; H, 4,87; N, 16,24 Encontrado (%): C, 60,20; H, 4,972; N, 16,13 101

Exemplo 30 3-Bromo-4-(N,N-dimetilaminometil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piri-dil)-pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em vez de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina e de se ter utilizado dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(Ν,Ν-dietilaminometil)benzoílo (exemplo de referência 28) em vez de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo e pelo facto de o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica ter cristalizado pela adição de acetato de etilo. Cristal amarelo claro Ponto de fusão: 172-173 Análise elementar (para C2sH29BrN60)

Calcd.(%): C, 61,65; H, 5,36; N, 15,41 Encontrado (%): C, 61,35; H, 5,36; N, 15,35

Exemplo 31 3-Bromo-4-(1-pirrolidinilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil) -pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em vez de 3-[4- (6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina e de se ter utilizado dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(1-pirrolidinilmetil)benzoílo (exemplo de referên- 102 cia 29) em vez de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4- metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo e pelo facto de o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de gel de silica ter cristalizado pela adição de acetato de etilo.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 195-196

Análise elementar (para C28H27BrN60)

Calcd.(%): C, 61,88; H, 5,01; N, 15,46 Encontrado (%): C, 61,68; H, 5,12; N, 15,11

Exemplo 32 3-Bromo-4-(piperidinometil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)-pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em vez de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina e de se ter utilizado dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(piperidinometil)benzoílo (exemplo de referência 30) em vez de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo e pelo facto de o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica ter cristalizado pela adição de acetato de etilo. Cristal amarelo claro Ponto de fusão: 158-159 Análise elementar (para C29H29BrN60)

Calcd.(%): C, 62,48; H, 5,24; N, 15,07 Encontrado (%): C, 62,23; H, 5,25; N, 14,83 103

Exemplo 33 3-Bromo-4-(morfolinometil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)-pi-rimidin-2-ilamino]fenil}benzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 8, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) em vez de 3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metil-anilina e de se ter utilizado dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(morfolinometil)benzoílo (exemplo de referência 31) em vez de dicloridrato de cloreto de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)benzoílo e pelo facto de o produto oleoso purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica ter cristalizado pela adição de acetato de etilo. Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 179-180

Análise elementar (para C28H29BrN602)

Calcd.(%): C, 60,11; H, 4,89; N, 15,02 Encontrado (%): C, 59,94; H, 4,93; N, 14,96

Exemplo 34 3-Bromo-4-(cis-3,5-dimetilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenilJbenzamida

Preparou-se este composto por meio da versão do processo descrito no documento (Synthesis, 1982, 288-291 A 356 mg de 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]-anilina (publicação da patente japonesa não examinada (Kokai) No. 6-87834 ) e 770 mg de dicloridrato de ácido 3-bromo-4-(cis-3,5-dimetilpiperazin-l-ilmetil)benzóico (exemplo de referência 32) adicionou-se 7 ml de diclorometano e 104 715 μΐ de trietilamina, um de cada vez. Sob agitação, à temperatura ambiente, adicionou-se 446 mg de cloridrato de fenilo e N-fenilfosforamido (Synthesis, 1982, 288-291 .), seguido de agitação à temperatura ambiente durante 2 horas. Misturou-se a solução reaccional com água e depois extraiu-se, duas vezes, com clorofórmio. Lavou-se o extracto com uma solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o residuo, por sua vez, por cromatografia em coluna de gel de sílica e cromatografia em coluna de NH-gel de sílica e o produto oleoso resultante cristalizou em acetato de etilo. Lavou-se o produto cristalino com éter de dietilo para se obter 259 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro.

Ponto de fusão: 204-205

Análise elementar (para C3oH32BrN70)

Calcd. (%): C, 61,43; H, 5,50; N, 16,72 Encontrado (%): C, 61,19; H, 5,48; N, 16,49

Exemplo 35 3-Bromo-4-(4-metil-hexa-hidro-lH-l,4-diazepin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 34, excepto no facto de se ter utilizado dicloridrato do ácido 3-bromo-4-(4-metil-hexa-hidro-lH-l,4-diazepin-l-ilmetil)benzóico (exemplo de referência 33) em vez de dicloridrato do ácido 3-bromo-4-(cis-3,5-dimetil-piperazin-l-ilmetil)benzóico. Cristal amarelo claro Ponto de fusão: 156-157 Análise elementar (para C3oH32BrN70) 105

Calcd. (%): C, 61,43; H, 5,50; N, 16,72 Encontrado (%): C, 61,13; H, 5,43; N, 16,39

Exemplo 36 3-Bromo-4-(1-piperazinilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(5-piri-midinil)-pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida

Primeiro, preparou-se 3-bromo-4-[4-(t-butoxicarbonil)-piperazin-l-ilmetil]-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)-piri-midin-2-ilamino]fenil}benzamida por meio da versão do processo descrita no documento ( Synthesis, 1982, 288— 291.). Da mesma maneira que no exemplo 34, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin- 2- ilamino] anilina (exemplo de referência 6) em vez de 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]anilina e ácido 3- bromo-4-[4-(t-butoxicarbonil)piperazin-l-ilmetil]benzóico (exemplo de referência 34) em vez de dicloridrato de ácido 3-bromo-4-(cis-3,5-dimetilpiperazin-l-ilmetil)benzóico e pelo facto de a extracção ter sido realizada com acetato de etilo e purificou-se o extracto por meio de cromatografia em coluna de gel de sílica e depois utilizou-se na reacção subsequente sem mais purificação. Depois, preparou-se 3-bromo-4-(1-piperazinilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidi-il)-pirimidin-2-ilamino]fenilJbenzamida A 187 mg do produto da reacção impuro anterior, adicionou-se 1,5 ml de ácido trifluoroacético seguido de agitação à temperatura ambiente durante 2 horas. Alcalinizou-se a solução reaccional por adição de uma solução aquosa de hidróxido de sódio a 10 % e secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o produto por cromatografia em coluna de NH-gel de sílica e cristalizou por adição de acetato de etilo. Lavou-se o produto cristalino com acetato de etilo aquecido para se 106 obter 49 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 225-228 (com decomposição)

Análise elementar (para C27H27BrNsO*0,3H2O)

Calcd.(%): C, 57,41; H, 4,92; N, 19,84 Encontrado (%): C, 57,53; H, 5,11; N, 18,92 FAB-EM (Pos.) m/z 559

Exemplo 37 4-(4-(t-butoxicarbonil)piperazin-l-ilmetil]-3-trifluoro-metil-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]-fenil}-benzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 34, excepto no facto de se ter utilizado 4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]anilina (exemplo de referência 6) em vez de 4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin- 2-ilamino]anilina e ácido 4-[4-(t-butoxicarbonil)piperazin-l-ilmetil] -3-trifluorometilbenzóico (exemplo de referência 35) em vez de dicloridrato do ácido 3-bromo-4-(cis-3,5-dimetilpiperazin-l-ilmetil)benzóico e pelo facto de a extracção ter sido realizada com acetato de etilo e o produto oleoso purificado por meio de cromatografia em coluna de gel de silica cristalizou por adição de etanol e depois lavou-se com etanol e éter de dietilo, um de cada vez.

Cristal amarelo claro Ponto de fusão: 188-191 RMN do (CDC13) δ: 1,47 (9H, s) , 2,36 (3H, s) , 2,43 (4H, t) , 3,45 (4 H, t) , 3,71 (2 H, s), 7,09 (1H, largo), 7 ,18 (1H, d) , 7,23 (2 H, s) , 7,95 (1H, d), 8,05 (2H, d), 8,14 (1H, s), 8, 56 (1H, d) , 8, 65 (1H, largo), 9,30 (1H, s), 9,42 (2H, s) 107

Exemplo 38 4-(1-Piperazinilmetil)-3-trifluorometil-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida A 1,00 g de 4-[4-(t-butoxicarbonil)piperazin-l-il-metil]-3-trifluorometil-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)-pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida (exemplo 37), adicionou-se 8 ml de ácido trifluoroacético, seguido da agitação, à temperatura ambiente durante 2 horas. Alcalinizou-se a solução reaccional por meio da adição de uma solução aquosa de hidróxido de sódio a 10 % e adicionou-se diclorometano. Recolheu-se o cristal depositado por filtração para se obter 530 mg de cristal impuro. Extraiu-se o filtrado, duas vezes, com diclorometano, secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida para se obter 370 mg de um cristal impuro. Combinou-se 900 mg de ambos os cristais impuros, purificaram-se por cromatografia em coluna de NH-gel de silica e depois cristalizaram por adição de isopropanol. Lavou-se o produto cristalino com acetato de etilo e éter de dietilo, um de cada vez, para se obter 258 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro. Cristal amarelo claro Ponto de fusão: 208-211 Análise elementar (para C28H27F3N80)

Calcd.(%): C, 61,31; H, 4,96; N, 20,43 Encontrado (%): C, 61,03; H, 5,01; N, 20,33

Exemplo 39 3-Metoxicarbonil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenilJbenzamida 108

Fez-se uma suspensão de 100 mg de 3-iodo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)-piri-midin-2-ilamino]feniljbenzamida (exemplo 2), 1 mg de diclorobis(trifenilfosfino)paládio (II) e 20 mg de hidrogeno-carbonato de sódio em 5 ml de metanol anidro e aqueceu-se a suspensão à temperatura de refluxo a uma temperatura do banho de 80 °C durante 2 horas enquanto se borbulhava gás de monóxido de carbono na solução reaccional. Depois de se arrefecer com ar, adicionou-se água e acetato de etilo à solução reaccional e eliminaram-se os insolúvel por filtração e depois extraiu-se o filtrado com acetato de etilo. Lavou-se o extracto com água e secou-se sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica e o resíduo cristalizou por adição de acetato de etilo - éter de dietilo para se obter 64 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal incolor.

Ponto de fusão: 159-161 (com decomposição)

Análise elementar (para C31H33N7O3· 0,2H2O)

Calcd.(%): C, 67,06; H, 6,06; N, 17,66 Encontrado (%): C, 66,77; H, 6,03; N, 17,68

Exemplo 40 3-Ciano-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3- [4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida

Fez-se uma suspensão de 200 mg de 3-iodo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)-piri-midin-2-ilamino]fenil}benzamida (exemplo 2), 35 mg de tetraquis(trifenilfosfino)paládio (0) e 45 mg de cianeto de zinco a 60 % em 2 ml de Ν,Ν-dimetilformamida anidra, seguido de agitação com aquecimento a 80 °C durante 24 109 horas. Depois da secagem ao ar, misturou-se a solução reaccional com uma solução aquosa saturada de hidrogeno-carbonato de sódio e extraiu-se, duas vezes, com clorofórmio. Secou-se a o extracto sobre sulfato de magnésio anidro e depois destilou-se o dissolvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia numa coluna de gel de sílica por adição de etanol para se obter 34 mg do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro.

Ponto de fusão: 191-193 (com decomposição)

Análise elementar (para C3oH3oN80*0,5H20)

Calcd. (%): C, 68,29; H, 5,92; N, 21,24 Encontrado (%): C, 68,05; H, 5,99; N, 21,12

Exemplo 41

Cloridrato de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benza-mida

Fez-se uma suspensão de 5,00 g de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)-pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida (exemplo 13) em 250 ml de uma solução aquosa de etanol a 50 % e adicionou-se 9,24 ml de ácido clorídrico IN, seguido de agitação com aquecimento num banho quente a 80 °C para se obter uma solução homogénea. Filtrou-se a solução reaccional com aquecimento e destilou-se o dissolvente do filtrado, a pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo com aquecimento em 30 ml de etanol e depois deixou-se em repouso à temperatura ambiente durante um dia. Recolheu-se o cristal depositado por filtração e lavou-se com etanol para se obter 5,13 g do composto objectivo sob a forma de cristais amarelos claros. Ponto de fusão: 184-186 (com decomposição) 110

Análise elementar (para C^H^BrNsOl, 0HC1*2,0H2O)

Calcd.(%): C, 52,06; H, 5,31; N, 17,35 Encontrado (%): C, 51,72; H, 5,17; N, 17,21

Exemplo 42

Cloridrato de 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluoro-metil-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]-fenil}-benzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 41, excepto no facto de se ter utilizado 4 — (4 — metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluorometil-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida (exemplo 6) em vez de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]fenilj-benza-mida.

Cristal amarelo claro

Ponto de fusão: 244-246 (com decomposição)

Análise elementar (para C^íbgFsNsO · 1,0HC1 · 0,8H20)

Calcd.(%): C, 56,78; H, 5,19; N, 18,27 Encontrado (%): C, 56,80; H, 4,96; N, 18,49

Exemplo 43

Cloridrato de 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluoro-metil-N-{3-[4-(5-bromopiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4- metilfeniljbenzamida

Preparou-se este composto da mesma maneira que no exemplo 41, excepto no facto de se ter utilizado 4 — (4 — metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluorometil-N-{3-[4-(5-bro-mo-piridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-metoxifenil}-benzamida (exemplo 10) em vez de 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l- 111 ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-il-ami-no]-fenil}benzamida.

Cristal amarelo claro Ponto de fusão: 184-187

Análise elementar (para C3oH29BrFN70*l, 0HC1*1, OH2O)

Calcd.(%): C, 51,85; H, 4,64; N, 14,11 Encontrado (%): C, 51,78; H, 4,74; N, 13,92

Exemplo 44

Metano-sulfonato de 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-tri-fluoro-metil-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-il- amino]fenil}benzamida

Fez-se uma suspensão de 7,00 g de 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) -3-trifluorometil-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidi-nil)-pirimidin-2-ilamino]fenilJbenzamida (exemplo 6) em 70 ml de metanol e adicionou-se, gota a gota, uma solução de 1,20 g de ácido metano-sulfónico em 3 ml de metanol, seguida de agitação com aquecimento num banho de óleo a 50 °C durante 10 minutos. Misturou-se a solução reaccional com 700 mg de carvão activado (Kyoryoku Shirasagi MOIWY433) e depois aqueceu-se à temperatura de refluxo durante 30 minutos. Filtrou-se a solução reaccional com aquecimento e destilou-se o dissolvente do filtrado, a pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo com aquecimento em 10 ml de metanol e depois deixou-se em repouso à temperatura ambiente durante 10 minutos. Como resultado, toda a solução reaccional solidificou. A solução cristalizou por adição de isopropanol para se obter 7,20 g do composto objectivo sob a forma de um cristal amarelo claro.

Ponto de fusão: 171-173

Análise elementar (para C29H29F3N8OI, OCHsSCbH·!, OH2O)

Calcd.(%): C, 53,25; H, 5,21; N, 16,56 112

Encontrado (%): C, 53,04; H, 5,39; N, 16,74

Exemplo de ensaio 1

Efeito inibidor do crescimento das células

Fez-se culturas de células K562 e células U937 (compradas à American Type Culture Collection) num meio RPMI-1640 (fabricado pela Sigma) contendo soro bovino fetal (SBF) a 10 % (v/v) (fabricado pela Sigma) (RPMI-1640/SBF) . Semearam-se as células K562 e as células U937 a uma densidade de 5000 células/100 μΐ/poço, respectivamente. Incubou-se a placa, durante a noite, numa incubadora de CO2. Preparou-se um fármaco de ensaio com dimetilsulfóxido (DMSO) (fabricado pela Nacalai Tesque) numa concentração 100 vezes superior à concentração de ensaio (0, 0,00001 a 1 μΜ) . Diluiu-se a solução resultante 500 vezes num meio de RPMI-1640/SBF e depois adicionou-se 100 μΐ do diluente num poço. Incubou-se a placa numa incubadora de CO2. Passadas 72 horas, adicionou-se a cada poço 20 μΐ do Kit-8 de contagem de células (5 mmole/1 de WST-8, 0,2 mmole/1 de 1-Metoxi PMS, 150 mmole/1 de NaCl) (fabricado pela Dojindo). Depois da reacção para o desenvolvimento da cor, numa incubadora de CO2, durante 3 horas, determinou-se a absorvência de formazano, gerada pela redução de WST-8 a 450 nm utilizando um contador de níveis múltiplos ARVOsx (fabricado pela Wallac).

Calculou-se o valor de Cl5o (em μΜ) a partir da fórmula que se segue:

Taxa de inibição do crescimento das células = 100 - (absorvência dos poços com o fármaco/absorvência dos poços com DMSO a 0,1 %) * 100 113

Depois da transformação log-logit, calculou-se a concentração que deu uma taxa de inibição do crescimento das células de 50 %, como definido na CI50, pelo método dos mínimos quadrados. Os resultados estão ilustrados no quadro 1.

Como fármaco de controlo, utilizou-se 4 — (4 — metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)-piri-midin-2-ilamino]feniljbenzamida (ver documento 1 das patentes).

Quadro 1: Efeito inibidor do crescimento das células Fármacos do ensaio Células K562 (Valor de CI50: μΜ) Células U937 (Valor de CI50: μΜ) Relação (células U937/células K562 ) Exemplo 1 0,0022 4, 80 2181,8 Exemplo 2 0,0023 3,34 1452,2 Exemplo 3 0,0046 5, 01 1089,1 Exemplo 4 0,033 12,40 375, 8 Exemplo 5 0,0008 3, 99 4987,5 Exemplo 6 0,0005 5,39 10780,0 Exemplo 7 0,0054 6,51 1205,6 Exemplo 9 0,0017 1,86 1094,1 Exemplo 10 0,0014 3,27 2335,7 Exemplo 13 0,0012 6,20 5166,7 Exemplo 14 0,003 >10 >3333,3 Exemplo 15 0,0048 9,1 1895,8 Exemplo 19 0,060 2,40 40,0 Exemplo 20 0,015 1,82 121,3 Exemplo 21 0,0053 >10 >1886,8 Exemplo 22 0,0032 6,56 2050,0 Exemplo 23 0,0094 >10 >1063,8 Exemplo 24 0,0015 7,29 4860,0 Exemplo 25 0,03 17 566,7 Exemplo 27 0,00049 7,16 14612,2 Exemplo 28 0,00065 6, 97 10723,1 114 Fármacos do ensaio Células K562 (Valor de CI5o: μΜ) Células U937 (Valor de CI5o: μΜ) Relação (células U937/células K562 ) Exemplo 29 0,017 > 10 > 588,2 Exemplo 30 0,022 > 10 > 454,5 Exemplo 35 0,0075 5,22 595,0 Exemplo 35 0,0041 - - Exemplo 38 0,00093 - - Exemplo 39 0,035 > 10 > 285,7 Exemplo 40 0,0054 4,2 777,8 Produto químico de controlo 0,13 17,8 135, 9

Como é evidente dos resultados mostrados no quadro 1, os compostos da presente invenção têm um excelente efeito inibidor para a tirosina-cinase de BCR-ABL. As células K562 utilizadas no exemplo de ensaio 1 foram células positivas para BCR-ABL, que tinham sido recolhidas da efusão pleural num paciente num estado evoluído de leucemia mieolgénica crónica, que tinha sido submetido a uma transformação aguda. As células U937 eram células malignas negativas para BCR-ABL que tinham sido recolhidas de um paciente com linfoma histiocítico. Como é evidente a partir da taxa inibidora do crescimento das células (células U937/células K562), os compostos da presente invenção são fármacos com uma segurança maior do que o fármaco de controlo.

Além disso, os compostos da presente invenção têm efeito inibidor do crescimento das células várias centenas de vezes mais forte quando comparados com um fármaco de controlo e por isso pode-se esperar que exibam um efeito inibidor adequado do crescimento das células não só nas cinases mutantes conhecidas previamente, mas também nas cinases mutantes que seriam encontradas no futuro. De acordo com isto, os compostos da presente invenção são muito úteis como agentes terapêuticos para doenças tais 115 como leucemia mielogénica crónica, leucemia linfoblástica aguda e leucemia mielogénica aguda.

Exemplo de ensaio 2

Efeito inibidor da auto-fosforilação no BCR-ABL mutante (E255K)

Fez-se uma cultura de células 293T (compradas na ATCC) em meio de Eagle modificado por Dulbecco (fabricado pela Sigma) contendo SBF a 10 % (MEMD/SBF). Semearam-se as células numa quantidade de 5 ml num prato de 6 cm revestido com poli-L-lisina de modo a dar 1,2 x 106 células/poço. Incubou-se o prato, durante a noite, numa incubadora de CO2. Utilizando um reagente de lipofectamina (fabricado pela Invitrogen), transfectou-se 2 yg do vector de expressão do gene mutante de bcr-abl, E255K, numa célula. 16 horas depois da transfecção, adicionou-se a cada poço 5 μΐ de um fármaco de ensaio preparado com DMSO (fabricada pela Nacalai tesque) de modo a obter-se uma concentração 1000 vezes superior. Incubou-se o prato numa incubadora de CO2. Depois do tratamento com tripsina, recolheram-se as células num tubo de centrifugação de 15 ml. Centrifugou-se o tubo a 1000 rpm à temperatura ambiente durante um minuto. Depois de se retirar o meio, adicionou-se 50 μΐ de uma solução de lise de células. Submeteram-se as células a citólise com um misturador. Deixou-se o tubo em repouso a 4°C durante 15 minutos e transferiu-se para um tubo de 1,5 ml. Centrifugou-se o tubo a 12.000 rpm à temperatura ambiente durante um minuto. Recolheu-se o produto da lise das células noutro tubo de 1,5 ml. Mediu-se a concentração da proteína de acordo com o processo BCA. Analisaram-se as amostras do produto da lise das células contendo 5 μΐ de proteína por meio de poliacrilamida de EGPA-SDS. Depois da 116 electroforese, transferiu-se a proteína para um filtro de nylon (Hybond-P) com um processo em atmosfera húmida a 4 °C durante a noite. Fez-se reagir o filtro de nylon em 10 ml de PBS/Tween-20 a 0,1 % contendo 0,2 pg/ml de anticorpo de tirosina-cinade anti-fosforilação (PY99) (fabricado pela Toyobo) à temperatura ambiente durante uma hora. Lavou-se o filtro de nylon, três vezes, com PBS e depois fez-se reagir com 10 ml de PBS/Tween-20 a 0,1 % contendo 0,4 yg/ml de conjugado de IgG AP anti-murganho (fabricado pela Cell Signaling) à temperatura ambiente durante uma hora. Depois do filtro de nylon ter sido lavado quatro vezes com PBS, detectou-se a auto-fosforilação de p210 BCR-ABL com um reagente de desenvolvimento da cor de fosfatase alcalina.

Os resultados são mostrados como se segue: +++: Inibição quase perfeita da fosforilação; ++: cerca de metade da inibição; +: inibição semanal; e -: sem inibição.

Como fármaco de controlo, utilizou-se 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)-piri-midin-2-ilamino]fenil}benzamida (ver documento 1 das patentes).

Quadro 2: Efeito inibidor da auto-fosforilação no BCR-ABL mutante (E255K) Fármacos de ensaio 0,1 μΜ 0,3 μΜ 1 μΜ 3 μΜ 10 μΜ Exemplo 1 - - + ++ +++ Exemplo 2 + ++ +++ Exemplo 3 - + +++ Exemplo 4 - - + Exemplo 5 +++ +++ +++ Exemplo 6 - + +++ +++ +++ 117

Exemplo 7 - +++ +++ Exemplo 9 + ++ +++ Exemplo 10 - - ++ +++ +++ Exemplo 13 - + ++ +++ +++ Produto químico de - - - - - controlo

Como é evidente dos resultados mostrados no quadro 2, os compostos da presente invenção têm um efeito inibidor de auto-fosforilação na tirosina-cinase do mutante de BCR-ABL E255K. Assim, é possível inibir o crescimento de células causado pela cinase mutante. Particularmente, o fármaco de controlo não tem efeito inibidor e por isso é evidente que este efeito é característico para os compostos da presente invenção.

Além disso, os compostos da presente invenção têm também um forte efeito inibidor de auto-fosforilação na tirosina-cinase de BCR-ABL mutante, E225K, nos quais não há um efeito inibidor de auto-fosforilação com alguns fármacos de controlo e por isso deve esperar-se que exibam um adequado efeito inibidor da auto-fosforilação em cinases mutantes que serão encontradas no futuro. De acordo com isto, os compostos da presente invenção são muito úteis como agentes terapêuticos para doenças tais como leucemia mielogénica crónica, leucemia linfoblástica aguda e leucemia mielogénica aguda. 118

Exemplo de formulação 1

Comprimido (comprimido oral) Formulação/comprimido (em 80 mg)

Composto do exemplo 1 5,0 mg

Amido de milho 46,6 mg

Celulose cristalina 24,0 mg

Celulose metilica 4,0 mg

Estearato de magnésio 0,4 mg

Comprime-se a mistura de pós desta composição por um processo convencional e molda-se para se fazerem comprimidos orais.

Exemplo de formulação 2

Comprimido (comprimido oral)

Formulação/comprimido (em 80 mg) Composto do exemplo 2 5, 0 mg Amido de milho 46,6 mg Celulose cristalina 24,0 mg Celulose metilica 4,0 mg Estearato de magnésio 0,4 mg Comprime-se a mistura de pós desta composição por um processo convencional e molda-se para se fazerem comprimidos orais.

APLICABILIDADE INDUSTRIAL o composto da uma excelente

Tal como descrito antes, dado que presente invenção é um composto com 119 actividade inibidora da tirosina-cinase de BCR-ABL, uma composição farmacêutica que compreende o composto da presente invenção como ingrediente activo é útil como inibidor de tirosina-cinase de BCR-ABL, um agente terapêutico para leucemia mielogénica crónica, um agente terapêutico para leucemia mielogénica aguda e um agente terapêutico para leucemia linfoblástica aguda, para mamíferos, incluindo seres humanos.

Lisboa, 1 de Fevereiro de 2010. 120

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Derivado de amida, caracterizado pelo facto de ser um composto representado pela fórmula [1] que se segue, em qualquer um dos casos (A) e (B) ou um seu sal.

(A) R1 representar um grupo amino cíclico, saturado, em que o grupo amino cíclico, saturado pode estar substituído com 1 a 3 elementos iguais ou diferentes seleccionados no grupo que consiste em alquilo, alcoxicarbonilo, halogéneo, halogenoalquilo, hidroxi-alquilo, amino, monoalquilamino, dialquilamino, carbamoílo, monoalquilcarbamoílo e dialquil-carbamoílo; monoalquilamino ou dialquilamino. R2 representar alquilo, halogéneo, halogenoalquilo, hidroxialquilo, alcoxi, alcoxialquilo, alcoxicarbonilo, acilo, amino, monoalquilamino, dialquilamino, nitro, carbamoílo, monoalquilcarbamoílo, dialquilcarbamoílo ou ciano. R 3 representar hidrogénio, halogéneo ou alcoxi. 1 Hetl representar qualquer um dos grupos fórmulas [2] a [8] que se seguem. (-NHK wyv U V PI |3| [4] -(Het2)
2. Derivado de amida, de acordo com a reivindicação 1 ou um seu sal, caracterizado pelo facto de R1 representar um grupo amino ciclico, saturado em que o grupo amino cíclico saturado pode estar substituído com 1 a 3 elementos iguais ou diferentes seleccionados no grupo que consiste em alquilo e alcoxicarbonilo; monoalquil-amino ou dialquilamino, R2 representar alquilo, halogéneo, halogenoalquilo, alcoxi, alcoxicarbonil, nitro, dialquilcarbamoílo ou ciano, R1 representar hidrogénio, halogéneo ou alcoxi, Hetl representar qualquer um dos grupos com as fórmulas [2] a [8] e Het2 representar piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo ou 1,2-di-hidropiridazinilo em que Het2 pode estar substituído com 1 a 3 halogéneos iguais ou diferentes.
3 1 Derivado de amida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o composto se seleccionar no grupo dos compostos (1) a (40) que se seguem ou de um seu sal: (1) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida (2) 3-iodo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (3) 3-cloro-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (4) 3-fluoro-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (5) 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluoro- metil-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-il-amino]-fenil}benzamida, (6) 4-(4-metilpiperazin-l- ilmetil) -3-trifluorometil-N-{4-metil-3-[4-(5-piri-midinil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida, (7) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-me-til-3- [4- (2-pirazinil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (8) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{3-[4-(6-cloropiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-meti1-fenil}-benzamida, (9) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{3-[4-(5-bromopiridin-3-il)pirimidin-2-ilamino]-4-meti1-fenil}-benzamida, (10) 4- (4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-trifluoro-metil-N-{3-[4-(5-bromopiridin-3-il)pirimidin-2-il-amino]-4-metilfenil}benzamida, 4 (11) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{3-[4 - (1,2-di-hidropiridazin-4-il)pirimidin-2-il-amino]-4-metilfenil}benzamida, (12) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridazinil)pirimidin-2-ilamino]-fenil}-benzamida, (13) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]-fenil}-benzamida, (14) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4 - (3-piridil)piridin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (15) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)piridin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (16) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[2-(3-piridil)piridin-6-ilamino]fenil}-benzamida, (17) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[3-(3-piridil)piridin-5-ilamino]fenil}-benzamida, (18) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[3- (3-piridil)fenilamino]fenil}benzamida, (19) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[2-(3-piridil)pirazin-6-ilamino]fenil}-benzamida, (20) 3-bromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[5- (3-piridil)-1,2,4-triazin-3-ilamino]-fenil}-benzamida, (21) 3-metil-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4 - (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, 5 (22) 4- (4-metilpiperazin-l-ilmetil)-3-nitro-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (23) 3-metoxi-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) -N-{4-metil-3-[4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (24) 3,5-dibromo-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]-fenil}-benzamida, (25) 3,5-dimetoxi-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]-fenil}-benzamida, (26) 3-(N,N-dimetilcarbamoil)-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil) -N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida, (27) 3-bromo-4-(4-etilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (28) 3-bromo-4-[4-(n-propil)piperazin-l-ilmetil]-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]-fenil}-benzamida, (29) 3-bromo-4-(N,N-dimetilaminometil)-N-{4-metil-3- [4 - (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (30) 3-bromo-4-(N,N-dietilaminometil)-N-{4-metil-3-[4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]feniljbenzamida, (31) 3-bromo-4-(1-pirrolidinilmetil)-N-{4-metil-3-[4- (3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida, (32) 3-bromo-4-(piperidinometil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida, (33) 3-bromo-4-(morfolinometil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida, 6 (34) 3-bromo-4-(cis-3,5-dimetilpiperazin-l-il-metil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-il-amino]-feniljbenzamida, (35) 3-bromo-4-(4-metil-hexahidro-lH-l,4-diazepin-1-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida, (36) 3-bromo-4-(1-piperazinilmetil)-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]fenil}-benzamida, (37) 4- [4- (t-butoxicarbonil)piperazin-l-ilmetil]-3-trifluorometil-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)-pirimidin-2-ilamino]fenil}benzamida, (38) 4-(1-piperazinilmetil)-3-trifluorometil-N-{4-metil-3-[4-(5-pirimidinil)pirimidin-2-ilamino]-fenil}-benzamida, (39) 3-metoxicarbonil-4-(4-metilpiperazin-l-il-metil)-N-{4-metil-3-[4-(3-piridil)pirimidin-2-il-amino]-fenil}benzamida, e (40) 3-ciano-4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-{4-metil-3-[4- (3-piridil)pirimidin-2- ilamino]fenil}benzamida.
4. Composição farmacêutica caracterizada pelo facto de compreender, como ingrediente activo, o derivado de amida de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 3 ou um seu sal.
5. Inibidor de tirosina-cinase de BCR-ABL caracterizado pelo facto de compreender, como ingrediente activo, o derivado de amida de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 3 ou um seu sal.
6. Agente terapêutico, para leucemia mielogénica crónica, caracterizado pelo facto de compreender, como 7 ingrediente activo, o derivado de amida de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 3 ou um seu sal.
7. Agente terapêutico, para leucemia linfoblástica aguda, caracterizado pelo facto de compreender, como ingrediente activo, o derivado de amida de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 3 ou um seu sal.

[7] [6] (-NH)N^5Nv.(Het2) NV [8] Het2 representar pirdilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo ou 1,2-di-hidropiridazinilo em que o grupo Het2 pode estar substituído por 1 a 3 elementos iguais ou diferentes seleccionados no grupo que consiste em alquilo, halogéneo e amino com a excepção de um composto em que R1 representa (i) pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo ou morfo-linilo, sendo que todos podem estar substituídos por 1 a 3 elementos iguais ou diferentes seleccionados no grupo que consiste em alquilo, alcoxicarbonilo, halogéneo, halogenoalquilo, hidroxialquilo, amino, monoalquilamino, dialquilamino, carbamoílo, mono-alquilcarbamoílo, dialquilcarbamoílo, (ii) monoalquilamino ou (iii) dialquilamino, Hetl representa um grupo de fórmula [6] e Het2 representa pirazinilo ou piridilo que podem estar substituídos por alquilo. 2 (Β) R1 representar 4-metilpiperazin-l-ilo, 1-pirrolidi-nilo, piperidino, 4-etilpiperazin-l-ilo, 4-n-propil-piperazin-l-ilo, cis-3,5-dimetilpiperazin-l-ilo, mor-folino, dimetilamino ou dietilamino. R2 representar metilo, halogéneo, trifluorometilo, metoxi, metoxicarbonilo, nitro, dimetilcarbamoílo ou ciano. R1 representar hidrogénio, bromo ou metoxi. Hetl representar um grupo de fórmula [6]. Het2 representar 3-piridilo.
8. Agente terapêutico, para leucemia mielogénica aguda, caracterizado pelo facto de compreender, como ingrediente activo, o derivado de amida de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 3 ou um seu sal. Lisboa, 1 de Fevereiro de 2010. 8