PT1062223E

PT1062223E - Composição contendo um precursor hidrolisável pela glucocerebrosidade

Info

Publication number: PT1062223E
Application number: PT99908998T
Authority: PT
Inventors: Daniel Redoules; Jean-Jacques Perie; Roger Tarroux
Original assignee: Fabre Pierre Dermo Cosmetique
Priority date: 1998-03-10
Filing date: 1999-03-09
Publication date: 2007-10-19
Also published as: DE69936710D1; WO1999046273A1; ATE368681T1; FR2775976A1; CA2367548A1; ES2288315T3; CA2367548C; EP1062223B1; DE69936710T2; CY1106917T1; US6569906B1; FR2775976B1; EP1062223A1; DK1062223T3

Description

DESCRIÇÃO

COMPOSIÇÃO CONTENDO UM PRECURSOR HIDROLISÁVEL PELA GLUCOCEREBROSIDASE A presente invenção refere-se a uma composição cosmética ou farmacêutica para aplicação cutânea, contendo um composto capaz de libertar uma substância biologicamente activa ao entrar em contacto com a pele, por meio da acção de uma enzima da superfície cutânea: a glucocerebrosidase. 0 termo "precursor de uma substância activa" pretende designar um composto conjugado de uma molécula inactiva com uma substância biologicamente activa. Um precursor de uma substância activa não apresenta nenhuma actividade biológica própria (ou apresenta uma actividade fraca) e liberta, uma vez metabolizado, a referida substância activa no estrato córneo. Um "derivado de uma substância activa" distingue-se de um "precursor de uma substância activa" pelo facto de ser dotado de uma actividade biológica própria. A utilização de precursores de substâncias activas em cosmetologia é prática corrente, em particular para melhorar a estabilidade das substâncias activas nas composições e/ou para facilitar a penetração das substâncias activas na epiderme.

Os precursores de vitaminas são, a este respeito, amplamente utilizados.

Com efeito, as vitaminas são difíceis de formular devido à sua grande instabilidade ao ar e ao calor. 1

Inicialmente, propuseram-se derivados de vitaminas que apresentavam uma estrutura próxima da molécula activa e cuja estabilidade seria melhorada. No entanto, estes derivados revelaram-se insuficientemente activos.

Os precursores de vitaminas, como os ésteres de ácidos gordos, os ésteres de glicéridos, os fosfatos ou os sulfatos de vitaminas, são preferidos.

Os ésteres de ácidos gordos de uma substância activa, como o palmitato de vitamina E (ou palmitato de alfa-tocoferol), possuem a vantagem não só de estabilizar a substância activa, como também de melhorar a penetração cutânea de uma substância activa hidrossolúvel, ao aumentarem a sua afinidade para o estrato córneo lipofílico. 0 pedido de patente FR-2 715 565 descreve uma composição contendo dois precursores que libertam uma mesma substância activa segundo duas cinéticas diferentes, por meio de um mecanismo sinérgico. Os precursores são seleccionados entre os fosfatos, os sulfatos, os palmitatos, os propionatos, os acetatos, os ferulatos, os éteres, as amidas e os derivados osidicos das substâncias activas.

As composições apresentadas como exemplo contêm dois precursores da vitamina C: a vitamina C fosfatada e a vitamina C glicosilada. Estes dois precursores interagem com duas enzimas diferentes - uma fosfatase e uma glucosidase -para libertar a vitamina C de forma sinérgica. 0 pedido de patente EP 487 404 descreve a utilização de um precursor glicosilado da vitamina C (ou ácido ascórbico) para preparar uma composição dermatológica que exerce uma 2 actividade de vitamina C no organismo. Este pedido descreve, em particular, os ácidos alfa-glucosil-L-ascórbicos, que não possuem qualquer actividade própria e que são hidrolisados em glucose e em ácido L-ascórbico por uma enzima cutânea.

Determinados derivados osidicos de substâncias activas, que apresentam eles próprios uma actividade biológica, já foram descritos.

No âmbito de um estudo sobre os tocoferóis (EP 169 716), foi demonstrado que os derivados glicosilados do delta-tocoferol apresentam uma actividade antialérgica. A patente JP 60 56 994 descreve a actividade antioxidante da DL-alfa-tocoferil-glucose, da DL-alfa-tocoferil-galactose e da D-delta-tocoferil-galactose. A actividade destes derivados glicosilados do tocoferol revelou-se, no entanto, insuficiente, pelo que a sua utilização como substância biologicamente activa apresenta pouco interesse. FR 2 577 805 descreve uma composição de despigmentação da pele compreendendo um glucósido da hidroquinona, em particular a albertina. A presente invenção tem como objectivo disponibilizar uma composição para aplicação cutânea, que liberta uma substância activa segundo uma cinética suficiente para que a concentração da substância activa na epiderme permaneça superior à concentração biologicamente activa, mas inferior à concentração pró-inflamatória.

Com efeito, a requerente demonstrou que as composições cosméticas clássicas contendo uma substância activa como a vitamina E geram um efeito pró-inflamatório. Este efeito pró- 3 inflamatório é consequência de uma superactividade da substância activa à concentração praticada. Este facto é tanto mais problemático, uma vez que a concentração praticada é necessária para observar os efeitos biológicos pretendidos.

Com o objectivo de evitar qualquer sobreconcentração da substância activa nas horas que se seguem à aplicação cutânea da composição, a requerente propõe-se utilizar um precursor da substância activa susceptivel de ser hidrolisado por uma enzima, cuja cinética satisfaz os dois critérios expostos acima. A requerente demonstrou que a glucocerebrosidase permite resolver o problema colocado. É conhecido o facto de a inibição da glucocerebrosidase por tratamento tópico com bromocondutirol-B-epóxido conduzir a perturbações agudas da função de barreira (Holleran W.M., Elias P.M., Permeability barrier requirements regulate epidermal β-glucocerebrosidase, J. Lipid. Res., 1994, 35, 905-912) .

Estes resultados demonstram que, por um lado, esta enzima é acessível por via tópica e, por outro lado, ela desempenha um papel essencial no equilíbrio do sistema cutâneo.

Além disso, a glucocerebrosidase apresenta uma actividade importante no estrato córneo: os substratos naturais desta enzima - os glicocerebrósidos - são hidrolisados em ceramidas, as quais representam 40% em peso dos lipidos do estrato córneo (Lampe M.A., Williams M.L. & Elias P.M., Human epidermal lipids: characterization and modulation during differentiation, J. Lipid. Res., 24, 131-140). 4

Através de estudos clínicos realizados em vinte e dois doentes, a requerente demonstrou que a actividade da glucocerebrosidase varia pouco em função da profundidade da camada córnea e varia pouco em função dos indivíduos e da estação. A glucocerebrosidase é, assim, uma hidrolase com uma actividade importante e constante.

Além disso, a requerente demonstrou que a cinética de hidrólise da glucocerebrosidase permite considerar a utilização de um precursor de uma substância activa, que liberta a substância activa com uma velocidade suficiente para garantir a sua actividade e, ao mesmo tempo, uma velocidade moderada para evitar qualquer intolerância devido a uma sobreconcentração da substância activa. É por isso que a presente invenção descreve uma composição cosmética ou farmacêutica para aplicação cutânea, contendo um composto capaz de libertar uma substância biologicamente activa ao entrar em contacto com a pele, por meio da acção de uma enzima cutânea, caracterizada pela enzima ser a glucocerebrosidase. A expressão "composto capaz de libertar uma substância biologicamente activa" designa um composto dotado de uma estrutura próxima de um substrato natural da referida enzima. 0 composto capaz de libertar a substância biologicamente activa é um composto conjugado da referida substância com um glúcido, em que: a referida substância biologicamente activa possui um resíduo de fenol, no qual os dois carbonos em posição alfa do grupo funcional fenol são não substituídos e 5 a ligação química entre a referida substância biologicamente activa e o referido glúcido é uma função éter entre o glúcido e a função fenol da substância biologicamente activa.

De forma a facilitar a penetração do precursor de uma substância activa no estrato córneo, a substância biologicamente activa possui vantajosamente um certo carácter lipofílico. 0 glúcido é uma ose em C3-C6, como a glucose, a manose ou a galactose, de preferência o glucopiranósido ou um dos seus derivados. A substância biologicamente activa pode ser uma substância terapeuticamente activa seleccionada entre a tioxolona, o paracetamol, a oxifenilbutazona, a isoxsuprina, a etilefrina, o p-pentiloxifenol, o delta-tocoferol, o tocol e os flavonóides. A fórmula dos compostos enunciados é fornecida abaixo.

Paracétamol MH€QCH3.

HO

Oxifenbutazona 6

HO 0*Pefft

O paracetamol corresponde ao p-acetamidofenol. Nas fórmulas do tocol e do delta-tocoferol, o grupo Ci6H33 na posição 2 do ciclo 3,4-dihidrobenzopirano é um substituinte 4,8,12-trimetiltridecilo. A substância biologicamente activa pode ter uma acção estritamente ao nível da epiderme, especialmente quando ela é seleccionada entre o tocol, o delta-tocoferol, os flavonóides 7 (que são antioxidantes) e a tioxolona (que é um anti-seborreico) . A substância biologicamente activa também pode ter uma acção mais global ao nivel da epiderme ou a um outro nivel do organismo: o paracetamol é um analgésico, a oxifenbutazona é um anti-inflamatório, a isoxsuprina é um vasodilatador, a etilefrina é um hipotensor e o p-pentiloxifenol é um bactericida. A presente invenção descreve igualmente as composições conjugadas de uma substância biologicamente activa com um glúcido, em que: - a referida substância biologicamente activa, diferente do delta-tocoferol, possui um resíduo de fenol, no qual os dois carbonos em posição alfa do grupo funcional fenol são não substituídos e a ligação química entre a referida substância biologicamente activa e o referido glúcido é uma função éter entre o glúcido e a função fenol da substância biologicamente activa.

Os compostos preferidos no âmbito da presente invenção são aqueles em que o glúcido é uma ose em C3-C6, especialmente a glucose.

Os compostos descritos são seleccionados entre o tioxonil-glucopiranósido, o oxifenbutazonil-glucopiranósido, o p-acetamidofenil-glucopiranósido, o isosuprinil-glucopiranósido, o etilefrinil-glucopiranósido, o p-pentiloxifenil-glucopiranósido e o tocol-glucopiranósido. A presente invenção tem como objecto um composto conjugado, definido de acordo com a reivindicação 4, bem como uma composição cosmética ou farmacêutica contendo este composto, definida de acordo com a reivindicação 6.

As composições descritas na presente invenção, que contêm um composto capaz de libertar o tocol, o delta-tocoferol ou um flavonóide, são eficazes contra o envelhecimento cutâneo, contra a secura da pele ou para apaziguar os efeitos originados pela exposição solar e a exposição a poluentes, ou contra a produção dos radicais livres responsáveis pelo stress oxidativo cutâneo. 0 stress oxidativo cutâneo traduz-se pela produção de diversas moléculas como os dienos conjugados, produzidos a partir de ácidos gordos polinsaturados, o malonaldeído e a timidina-glicol, que são obtidos a partir do ataque oxidativo do genoma. Os antioxidantes naturais, como o tocoferol, ou sintéticos, como o tocol, permitem combater os efeitos prejudiciais dos radicais livres e dos peróxidos nas organizações supramoleculares cutâneas. A requerente demonstrou no entanto que, em condições suaves de oxidação, a aplicação directa destes antioxidantes na pele provoca efeitos pró-inflamatórios, que são consequência de uma superactividade às concentrações habitualmente utilizadas.

As composições da invenção permitem evitar este efeito pró-inflamatório, através do fornecimento de um precursor de uma substância activa cuja actividade biológica é muito fraca ou mesmo nula, que é lentamente hidrolisado pela glucocerebrosidase para gerar o antioxidante activo, após 9 aplicação da composição na pele. A libertação lenta da substância activa assegura uma melhor biodisponibilidade da substância activa no meio cutâneo e uma protecção mais eficaz. A presente invenção descreve também a utilização de composições contendo um composto capaz de libertar o delta-tocoferol, o tocol ou um flavonóide, no fabrico de um medicamento destinado ao tratamento de determinadas doenças da pele, particularmente a dermite atópica, a acne ou a psoríase. A presente invenção tem como objecto a utilização cosmética definida de acordo com a reivindicação 2, ou a preparação de um medicamento para aplicação cutânea destinado a tratar uma doença da pele definida de acordo com a reivindicação 1, de um composto conjugado do tocol ou do delta-tocoferol com um glúcido.

Os precursores de uma substância activa ou compostos conjugados de acordo com a invenção podem ser obtidos por um processo bioquimico ou por sintese orgânica. De acordo com um processo de sintese orgânica, a substância activa é acoplada ao glúcido, previamente tetra-acilado e activado na posição 1 (carbono epimérico) por um imidato. Os grupos acetilo são depois hidrolisados por iões metanolato.

As composições de acordo com a invenção contêm entre 0,001% e 10% em peso, de preferência 0,01% em peso de um precursor de uma substância activa, em relação ao peso total da composição. 10 A composição de acordo com a invenção pode apresentar-se sob a forma de uma emulsão óleo em água (0/A) ou água em óleo (A/0). Ela pode ainda apresentar-se sob a forma de esférulas como sejam os liposomas, as nanocápsulas ou as nanosferas.

Quando a composição é uma emulsão, a proporção da fase gorda está compreendida entre 5 e 80% em peso, de preferência entre 5 e 50% em peso, em relação ao peso total da composição. Os óleos, os emulsionantes e os co-emulsionantes utilizados na composição sob a forma de emulsão são seleccionados entre aqueles classicamente utilizados em cosmética. O emulsionante e o co-emulsionante estão presentes na composição numa proporção compreendida entre 0,3 e 10% em peso, em relação ao peso total da composição. A composição de acordo com a invenção pode igualmente conter aditivos cosméticos ou dermatológicos aceitáveis. Estes aditivos podem ser, em particular, tensioactivos, matérias gordas, agentes hidratantes, conservantes, perfumes, gelificantes, quelantes, pigmentos como o TÍO2, filtros e vitaminas livres como o ácido ascórbico. A presente invenção será ilustrada, de forma não restritiva, pelos exemplos que se seguem. EXEMPLO 1 COMPARATIVO: Demonstração do efeito pró-inflamatório de uma substância activa não conjugada, num creme da técnica anterior rico em um ácido gordo polinsaturado. A concentração de malonaldeido (MDA) libertado num creme contendo quantidades crescentes de um agente antioxidante, a vitamina E (ou alfa-tocoferol), que foi submetido a um stress 11 oxidativo, foi medida. Relembra-se que a quantidade de MDA libertado, um bom indicador da actividade dos radicais livres, é inversamente proporcional à eficácia de uma substância activa antioxidante. 0 creme contendo a vitamina E contém igualmente óleo de borragem, que é naturalmente rico em ácido linoleico. 0 stress oxidativo consistiu em uma exposição solar de duas horas. A concentração de MDA libertado foi medida por complexação com ácido tiobarbitúrico em meio ácido. 0 complexo cromogénico formado absorveu a 532 nm. A sua quantificação foi seguida por fluorometria. A tabela seguinte mostra que quanto mais aumenta a concentração de vitamina E, mais elevada é a quantidade de MDA libertado. Claramente, a vitamina E produz um efeito pró-inflamatório num creme rico em ácido gordo polinsaturado.

Concentração de vitamina E Concentração de MDA libertado no creme (% mássica) ^g MDA/100 mg creme) 0 0,7 ± 0,06 0,05 1,2 ± 0,15 0,1 1,9 ± 0,20 0,15 2,0 ± 0,20 EXEMPLO 2: Demonstração da actividade muito baixa dos glucoconjugados da invenção em comparação com a actividade das substâncias activas livres. 12 A actividade antioxidante de diversos compostos contra a peroxidação de um lípido insaturado, o esqualeno, foi medida. 0 indicador de actividade escolhido foi o MDA, tal como no exemplo 1. A tabela abaixo resume os resultados obtidos.

Composto Concentração MDA (μρ MDA) Tocol 6 + 1,9 Delta-tocoferol 7,2 ± 1,7 Palmitato de vitamina E 182,7 ± 39 Delta-tocoferil-glucopiranósido 128 ± 38 Tocol-glucopiranósido 142 ± 28

Os precursores das substâncias activas, como o delta-tocoferil-glucopiranósido ou o tocol-glucopiranósido, possuem um poder antioxidante fraco e comparável ao dos ésteres de vitamina E, como o palmitato de vitamina E. Pelo contrário, uma vez hidrolisados em delta-tocoferol e tocol, respectivamente, a actividade antioxidante é revelada. EXEMPLO 3: Estabilidade dos precursores de substâncias activas de acordo com a invenção.

Comparou-se a fotoestabilidade do delta-tocoferil- glucopiranósido e do delta-tocoferol.

Amostras de um creme contendo 0,4% de delta-tocoferil-glucopiranósido ou de delta-tocoferol foram irradiadas com uma luz incidente de 28 J/cm2, de 290 a 800 nm (5 DEM). 13 A tabela seguinte mostra que os precursores glicosilados da substância activa são pelo menos duas vezes mais estáveis que as substâncias activas que podem libertar.

Composto Micromoles Delta-tocoferol Irradiado 88 ± 15 Não irradiado 310 ± 14 Delta-tocoferil-glucopiranósido Irradiado 208 ± 4 Não irradiado 311 ± 7 EXEMPLO 4: Cinética da hidrólise de precursores glicosilados pela glucocerebrosidase. 0 precursor e a amostra do estrato córneo sob a forma de pó foram introduzidos num meio liquido tamponado com um tampão ftalato a pH 5,6. A mistura foi incubada durante 24 horas, e a quantidade de substância activa libertada foi doseada por densitometria numa placa de cromatografia em camada fina. A tabela seguinte fornece, para diferentes precursores glicosilados, a quantidade de molécula libertada após a sua hidrólise pela glucocerebrosidase ao longo de 24 horas, por um extracto cutâneo liofilizado obtido após recolha de uma amostra por três "strippings" sucessivos de 15 cm2.

Precursores glicosilados Molécula libertada Quantidade de molécula libertada (n moles/hora) 4-Metilumbeliferil- 4—Metilumbeliferona 100 ± 7 glucopiranósido (subs. de referência) a-Tocoferil- α-Tocoferol 0 glucopiranósido 14 γ-Tocoferil- γ-Tocoferol 0 glucopiranósido δ-Tocoferil- δ-Tocoferol 14,3 ± 1 glucopiranósido Tocol-glucose Tocol 14,8 ± 1,2 Fenilglucopiranósido Fenol 0,2 ± 0,5

No que diz respeito às cinéticas de libertação dos derivados δ-tocoferol e tocol, elas são 7 vezes mais fracas que as do derivado de referência (4-metilumbeliferil-glucopiranósido) utilizado para efectuar a dosagem da actividade da β-glucocerebrosidase e, desta forma, permite obter alguns efeitos ao longo do tempo.

Observou-se que o α-tocoferol e o γ-tocoferol não são libertados e permanecem no estado de precursor, devido ao seu impedimento na vizinhança da ligação C-l.

Nos exemplos seguintes, as proporções são em percentagem mássica. EXEMPLO 5:

Delta-tocoferil-beta-dl-glucopiranósido ou tocol-beta-dl-glucopiranósido 0,01 Óleo de vaselina 20

Esqualano 5

Palmitato de octilo 20 2 0,2 0,15

Estearato de PEG-40 Conservante

Perfume 15 5

Glicerina Água QSP 100 EXEMPLO 6:

Delta-tocoferil-beta-dl-glucopiranósido ou tocol-beta-dl-glucopiranósido 0,01 Óleo natural de borragem 20 Óleo de vaselina 10

Estearato de PEG-40 4

Conservante 0,2

Perfume 0,15

Glicerina 10 Água QSP 100 09-10-2007 16

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Utilização de um composto conjugado de uma substância biologicamente activa com um glúcido, em que: - a referida substância biologicamente activa é seleccionada entre o tocol ou o delta-tocoferol e a ligação quimica entre a referida substância biologicamente activa e o referido glúcido é uma função éter entre o glúcido e a função fenol da substância biologicamente activa, para a preparação de um medicamento para aplicação cutânea destinado a tratar uma doença da pele.
2. Utilização de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pela doença de pele ser uma dermite atópica, a acne ou a psoríase.
3. Utilização de uma composição cosmética para aplicação cutânea, compreendendo um composto conjugado de uma substância biologicamente activa com um glúcido em que: - a referida substância biologicamente activa é seleccionada entre o tocol ou o delta-tocoferol e a ligação quimica entre a referida substância biologicamente activa e o referido glúcido é uma função éter entre o glúcido e a função fenol da substância biologicamente activa, 1 contra o envelhecimento cutâneo, contra a secura da pele, para apaziguar os efeitos originados pela exposição solar e a exposição a poluentes ou contra a produção de radicais livres.
4. Composto conjugado do tocol com um glúcido, em que a ligação química entre o tocol e o referido glúcido é uma função éter entre o glúcido e a função fenol do tocol.
5. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo glúcido ser uma ose em C3-C6, especialmente a glucose.
6. Composição cosmética ou farmacêutica para aplicação cutânea, contendo o composto conjugado de acordo com as reivindicações 4 ou 5.
7. Composição de acordo com a reivindicação 6, caracterizada por conter 0,001% a 10% em peso do composto conjugado, em relação ao peso total da composição. 09-10-2007 2