KR101460900B1

KR101460900B1 - 에피프리델라놀을 포함하는 피부 미백, 재생 또는 보습용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR101460900B1
Application number: KR20130074892A
Authority: KR
Inventors: 송혜진; 김미선; 이상화
Original assignee: 주식회사 엘지생활건강
Priority date: 2013-06-27
Filing date: 2013-06-27
Publication date: 2014-11-13

Abstract

본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 피부의 미백, 재생 또는 보습용 화장료 조성물에 관한 것이다. 이에 따른, 상기 화장료 조성물은 멜라닌 합성 억제 및 색소 침착 저해 활성을 가짐으로써 피부의 미백에 탁월한 효과가 있으며, 자유라디칼 소거 및 세포증식 촉진에 효과적인 활성을 나타냄으로써 피부의 재생에 우수한 효과가 있다.
또한, 상기 조성물은 우수한 수분 보유력(수분 증발 억제력)을 가짐으로써 피부 보습 효과가 있어, 피부의 미백, 재생 또는 보습을 위한 화장료 조성물 또는 피부외용제로 유용하게 적용할 수 있다.
[화학식 1]

Description

에피프리델라놀을 포함하는 피부 미백, 재생 또는 보습용 화장료 조성물{Cosmetic composition for skin whitening, regeneration or moisturizing comprising epifriedelanol}

본 발명은 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 피부의 미백, 재생 또는 보습용 화장료 조성물에 관한 것으로, 멜라닌 합성 억제, 자유라디칼 소거, 세포증식 촉진 및 수분 보유 활성을 갖는 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 피부의 미백, 재생 또는 보습을 위한 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 신체조직 중 직접적으로 외부환경에 노출되어 있으며, 인체의 내부와 외부환경 사이의 방어벽 역할을 하여 화학물질이나 자외선을 포함한 외부 환경오염 물질 및 미생물의 침입을 방어함으로써 주위환경으로부터 생체를 보호한다.

또한 피부는 멜라닌, 헤모글로빈, 카로틴 등에 의해 색이 결정되는데 이 중에서도 멜라닌이 가장 중요한 역할을 한다. 멜라닌은 사람의 피부색을 결정하는 것 이외에도 자외선 흡수 작용, 자유라디칼 소거제(free radical scavenger) 등과 같은 피부 보호작용을 수행한다. 그러나, 자외선의 과다 노출, 대기 오염, 스트레스 등과 같은 외부의 환경 변화에 의하여 멜라닌이 과다하게 생성되면 피부 내에서 색소 침착 현상을 일으켜 피부의 흑화 또는 기미, 주근깨 등의 원인이 된다. 피부의 흑화는 내적 및 외적 요인에 대한 피부 세포의 반응에 의하여 발생하는 것으로, 대표적인 요인은 자외선 노출로 인한 것이다.

즉, 피부가 자외선에 노출되면 티로시나아제(tyrosinase)가 활성화되는데, 상기 티로시나아제가 피부조직에 존재하는 티로신에 작용하여 도파(DOPA) 및 도파퀴논을 생성시키는 산화 과정에 의하여, 피부 색소 세포인 멜라노사이트 내의 멜라노좀에서 멜라닌이라는 중합체가 합성되며, 이러한 멜라닌이 피부의 각질 형성 세포인 케라티노사이트로 전달되고 각질화 과정에 의해 피부 표면에 도달하여 자외선으로부터 피부를 보호하게 된다.

따라서, 멜라닌은 우리 인체에 없어서는 안 되는 자외선 방어제이며, 또한 단백질, 지질, 핵산 등과 같은 생체 성분을 변형시키는 다양한 라디칼을 제거하는 효과적인 자유라디칼 소거제의 역할을 담당하고 있다.

그러나, 멜라닌이 국소적으로 과도하게 합성되거나, 피부 병변 및 노화에 따른 피부의 생리 기능이 떨어지게 되면, 멜라닌이 피부 표면에 침착되어 기미, 주근깨 및 다양한 색소 침착을 유발하게 된다.

상기에 기재한 바와 같이 피부 흑화의 원인과 기작이 밝혀지면서, 미백 화장료의 제조에 있어 피부 흑화 과정에 관여하는 효소인 티로시나아제의 활성 저해 효과를 갖는 물질들을 화장료에 배합하거나, 또는 멜라닌 생성 과정 중에서 일부 반응을 저해함으로써 멜라닌의 생성을 감소시키는 방법이 일반적으로 사용되고 있다. 이러한 목적을 위해 사용되고 있는 대표적인 물질로는 아스코르빈산, 코직산, 하이드로퀴논 등의 화학 물질과 상백피 추출물, 감초 추출물 등의 식물 추출물이 있다.

그러나, 아스코르빈산은 티로시나아제 활성 저해 효과가 부족할 뿐만 아니라 분자 자체의 안정성이 낮아서 멜라닌 생성 억제제로 적합하지 않으며, 코직산은 티로시나아제 활성 저해 작용이 우수한 반면 화장료에 배합할 때 변색되고 경시 변화에 따라서 역가가 저하되는 등의 안정성에 문제점을 지닐 뿐만 아니라, 피부 자극이 커서 사용상 한계가 있다. 또한 하이드로퀴논은 피부 자극 및 안전성 문제로 인하여 화장료에서의 사용이 제한되고 있다. 그리고, 상기 기술된 각 식물 추출물들은 비교적 높은 농도에서만 티로시나아제 활성 저해 효과가 나타날 뿐만 아니라, 식물 추출물의 안정성이 낮아 효과가 오래 지속되지 못하므로 제품의 적용 범위가 매우 좁다는 문제점이 있다.

한편, 피부 장벽은 외부로부터의 다양한 자극(화학물질, 대기오염물질, 건조한 환경, 자외선 등)에 대한 방어뿐만 아니라 피부를 통한 체내 수분의 과도한 발산을 방지하는 보호기능을 하는데, 이러한 보호기능은 각질형성세포로 구성된 각질층이 정상적으로 형성되어 있을 경우에만 유지될 수 있다. 표피의 각질층은 10% 내지 20%의 수분을 함유하고 인체의 최외각에 존재하여 체내로부터의 수분 증발을 억제하는 한편 외부로부터 과잉의 수분이 침투하는 것을 막아주는 역할을 한다. 이와 같이 수분손실을 적절한 수준으로 유지시켜 주는 것은 각질세포층의 지질막 성분인 피지성분과 표피지질로 알려져 있다. 각질세포층에는 천연보습인자(NMF: Natural Moisturizing Factor)라고 하는 친수성의 수분 보유능을 가진 물질이 존재하여 피부가 유연성을 나타내도록 작용함은 물론 적절한 수분을 유지할 수 있도록 돕는다.

그러나 각질층의 수분함량이 10% 미만이 되면 피부는 거칠어지고 신체의 보호기능을 잃게 된다.

최근에는 환경이나 생활 패턴의 변화, 사회생활에서 발생되는 각종 스트레스와 환경오염, 화장 습관에 따른 잦은 세안 등의 원인으로 각질층의 수분이 감소하여 피부가 건조해지고 표면이 거칠게 되며, 피부가 윤기를 잃어 칙칙하게 보이는 등의 현상이 발생하여 피부 보습에 관한 문제는 그 중요성이 점점 더 커지고 있다.

따라서, 피부 보습을 위한 물질들에 대한 연구가 많이 진행되어 왔으며 지금까지 알려진 피부 보습제로는 수분을 흡수하는 성질이 있는 휴멕턴트나 NMF 성분 또는 이들 성분들이 함유되어 있는 천연 수용성 성분들을 사용하였는데, 보습력은 뛰어나지만 끈적이는 사용감과 화장료의 안정성 등의 문제로 인해 사용에 한계가 있다.

상기와 같은 배경 하에, 본 발명자들은 멜라닌 합성 억제 활성 및 수분 보유능 뿐만 아니라 자유라디칼 소거능과 세포증식 촉진 활성을 가짐으로써 피부의 미백, 재생 및 보습용 화장료 조성물로 사용할 수 있는 물질을 연구하던 중, 식물로부터 수득하거나 공지된 통상적인 방법으로 합성하여 비교적 쉽게 얻을 수 있는 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀(epifriedelanol)이 세포독성 및 알러지 반응 없이 효과적으로 멜라닌 합성을 억제할 뿐 아니라 자유라디칼 소거, 세포증식 촉진 및 수분 보유에 우수한 효과가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 멜라닌 합성 억제, 자유라디칼 소거, 세포증식 촉진 및 수분 보유에 우수한 활성을 가짐으로써 피부의 미백, 재생 또는 보습의 개선에 우수한 효과를 갖는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기의 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백, 재생 또는 보습용 화장료 조성물을 제공한다.

[화학식 1]

본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 명칭은 에피프리델라놀(epifriedelanol)이며, 소수성(hydrophobic) 분자로써 이소프렌(isoprene) 단위에서 유래된 테르펜(terpene) 구조를 가지고 있다. 상기 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀은 순비기나무, 팽나무, 개미취를 비롯한 다양한 식물에 유효성분으로 함유되어 있으며, 약리 작용으로는 항암 작용과 항염 작용이 있다고 알려져 있다. 그러나, 피부의 미백, 재생 또는 보습과 관련된 효과는 아직까지 알려진 바가 없다.

본 발명에서 사용되는 용어 "미백"은, 피부를 하얗게 하는 것을 의미하며, 멜라닌의 과도한 합성이나, 멜라닌 침착으로 인한 기미, 주근깨 및 다양한 색소 침착을 완화 또는 개선하는 것을 의미한다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 세포 수준에서의 멜라닌 생성 억제 활성 및 상기 화합물을 포함하는 피부외용제 또는 에센스의 색소 침착 저해 효과(관능 평가)를 확인하였으며, 그 결과 종래에 사용되고 있는 미백제(알부틴)보다 월등히 우수한 멜라닌 생성 억제능(50%~64%, 표 5)를 나타내었다. 또한, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 피부외용제 또는 에센스를 도포하여 확인한 관능 평가에서도 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하지 않은 피부외용제 또는 에센스에 비하여 우수한 기미 또는 주근깨 등의 색소 침착 개선에 효과(표 8)가 있었다. 따라서, 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 우수한 멜라닌 합성 억제 활성 및 색소 침착 저해(개선) 효과가 있는 바, 피부 미백에 유의적인 효과가 있어, 피부 미백용 화장료 조성물 또는 피부외용제로 유용하게 사용할 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "재생"은, 피부 외부 및 내부 원인에 의해 발생된 피부(세포) 손상에 대한 피부 조직의 회복 과정을 의미한다. 상기 외부 원인에 의한 손상은 자외선, 외부 오염 물질, 창상, 외상 등을 들 수 있으며, 상기 내부 원인에 의한 손상은 스트레스 등을 들 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 피부 재생 효과를 확인하기 위하여, 자유라디칼 소거능 및 세포증식 촉진 활성을 분석하였으며, 그 결과 자유라디칼 제거제로 사용되고 있는 아스코르브산보다 현저히 우수하게 자유라디칼을 제거하였으며(표 6), 농도 의존적으로 탁월한 세포증식 촉진 활성(표 7)을 나타내었다. 따라서, 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 자유라디칼 소거능 및 세포증식 촉진 활성에 탁월한 효과를 가짐으로써 외부 또는 내부 원인에 의해 발생된 손상 피부(세포)의 개선 또는 치료를 위한 피부 재생용 화장료 조성물 또는 피부외용제로 유용하게 적용할 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "보습"은, 수분손실(수분 증발) 등을 적절히 조절하여 생체의 항상성을 유지하는 것을 의미한다. 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 수분 보유능을 가짐으로써 피부 보습용 화장료 조성물 또는 피부외용제로 사용할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 피부외용제 또는 에센스를 도포하고 수분 보유능을 확인한 결과, 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하지 않은 피부외용제 또는 에센스와 비교하여 수분 보유율이 훨씬 높은 것을 확인하였다(표 9).

또한, 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 식물로부터 당업계에 알려진 통상적인 방법으로 추출하여 수득하거나, 또는 당업계에 공지된 통상적인 방법을 통하여 화학적으로 합성하여 수득할 수 있다.

본 발명의 화장품 조성물은 총 조성물의 중량 대비 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 0.01 중량% 내지 10 중량%로 포함하는 것이 바람직하다. 만약, 0.01 중량% 미만으로 포함되면, 피부의 미백, 재생 및 보습 효과를 실질적으로 기대할 수 없다. 반면, 10 중량%을 초과하며 포함할 경우에는 용제로의 용해성 등 조성물의 전체적인 가공성이 떨어져 후술하는 제형 등 각종 용도로의 사용이 제한될 수 있다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 상기 유효성분 이외에 통상적으로 허용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수(스킨), 영양 화장수(밀크로션), 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성 오일, 식물성 오일, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있으며, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시테이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 오일, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 화장료 조성물은, 멜라닌 합성 억제 및 색소 침착 저해 활성을 가짐으로써 피부의 미백에 탁월한 효과가 있으며, 자유라디칼 소거 및 세포증식 촉진에 효과적인 활성을 나타냄으로써 피부의 재생에 우수한 효과가 있다.

또한, 상기 조성물은 우수한 수분 보유력(수분 증발 억제력)을 가짐으로써 피부 보습 효과가 있다.

따라서, 상기 화장료 조성물은 피부의 미백, 재생 또는 보습을 위한 화장료 조성물 또는 피부외용제로 유용하게 적용할 수 있다.

이하, 하기 실시예 및 실험예에 의하여 본 발명을 보다 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로 이들 만으로 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.

하기 실시예 및 실험예에 사용된 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀(epifriedelanol)은 중국 Yuanshi Biothechnology Co. Ltd.에서 구입하여 실험에 사용하였다.

실시예 1: 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 피부외용제의 제조

하기 표 1에 나타낸 조성으로 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀(epifriedelanol)을 함유하는 피부외용제를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

조성(중량%)	실시예 1
에피프리델라놀(epifriedelanol)	0.2
디에틸세바케이트	8
경납	5
폴리옥시에틸렌올레일에테르 포스페이트	6
벤조산 나트륨	1
바셀린	to 100

실시예 2: 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 에센스의 제조

하기 표 2에 나타낸 조성으로 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀(epifriedelanol)을 함유하는 에센스를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

조성(중량%)	실시예 2
에피프리델라놀(epifriedelanol)	0.5
글리세린	10.0
히알루론산나트륨 수용액(1%)	5.0
폴리옥시에틸렌경화피마자유	1.0
파라옥시안식향산메틸	0.1
향료	0.05
정제수	to 100

비교예 1: 피부외용제의 제조

상기 실시예 1에서 제조한 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀을 함유하는 피부외용제와의 효능 비교를 위하여, 하기 표 3에 나타낸 조성으로 비교예 1의 피부외용제를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

조성(중량%)	비교예 1
디에틸세바케이트	8
경납	5
폴리옥시에틸렌올레일에테르 포스페이트	6
벤조산 나트륨	1
바셀린	to 100

비교예 2: 에센스의 제조

상기 실시예 2에서 제조한 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀을 함유하는 에센스와의 효능 비교를 위하여, 하기 표 4에 나타낸 조성으로 비교예 2의 에센스를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

조성(중량%)	비교예 2
글리세린	10.0
히알루론산나트륨 수용액(1%)	5.0
폴리옥시에틸렌경화피마자유	1.0
파라옥시안식향산메틸	0.1
향료	0.05
정제수	to 100

실험예 1: 멜라닌 생성 억제 시험

본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀의 세포 수준에서의 미백 효과를 확인하기 위하여, 상기 에피프리델라놀을 쥐의 멜라노마 세포(B-16 mouse melanoma cell)의 배양액에 첨가하여 멜라닌 생성 억제 효과를 확인하였다(Lotan R., Lotan D. Cancer Res. 40: 3345-3350, 1980).

에피프리델라놀은 최종농도가 0.1 ㎍/㎖, 1 ㎍/㎖ 또는 10 ㎍/㎖가 되도록 배양 배지에 첨가하여 준비하였으며, 알부틴 수용액과 함께 각각 B-16 멜라노마 세포의 배양배지에 첨가하여 3일간 배양하였다. 이 후, 세포들을 트립신(trypsin) 처리하여 배양용기로부터 떼어내 원심분리하고 멜라닌을 추출하였다. 추출한 멜라닌에 수산화나트륨 용액(1N 농도) 1 ㎖를 가하여 10분간 끓여 멜라닌을 녹이고 분광광도계를 이용하여, 400 nm에서 흡광도를 측정하여 생성된 멜라닌의 양을 측정하였다. 대조군에 대한 상대적인 멜라닌 생성량을 저해율(%)로 계산하였으며, 상기 대조군은 음성대조군(일반적인 배양배지, 무첨가)과 양성대조군(음성대조군+200 mg/㎖ 알부틴) 2군을 사용하였다. 결과를 하기 표 5에 나타내었으며, 실험은 3번 반복하였다.

시료	멜라닌 생성량(ng/㎖)	저해율(%)
음성대조군(무첨가)	0.007±0.002	-
양성대조군(음성대조군+알부틴(200 mg/㎖))	0.041±0.001	41%
에피프리델라놀(0.1 ㎍/㎖)	0.032±0.001	54%
에피프리델라놀(1 ㎍/㎖)	0.025±0.001	64%
에피프리델라놀(10 ㎍/㎖)	0.020±0.001	50%

상기 표 5에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀은 기존에 알려진 미백 물질인 알부틴(Arbutin)과 비교하여 배양된 쥐의 멜라노마 세포에 대하여 월등히 우수한 멜라닌 생성 억제 효과가 있음을 확인하였다.

실험예 2: 피부 재생 효과 분석

1) 자유라디칼 소거능 분석

본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀이 피부 손상(피부 세포 재생 저하)을 유발하는 활성산소(자유라디칼) 생성에 미치는 영향을 확인하기 위하여, 1,1-diphenyl-2-pycrylhydrazyl(DPPH) 방법으로 자유라디칼 소거능을 측정하였다(Blois, Nature 181, 1190, 1958). DPPH는 비교적 안정한 자유라디칼로서 라디칼 상태로 존재시 517 nm에서 최대 흡광을 보이며, 라디칼이 소거되면 흡광성을 잃는 특성이 있다. 실험에 사용된 DPPH는 시그마(Sigma)사에서 구입하여 0.15 mM의 농도로 메틸 알코올에 녹여 사용하였다.

우선, 본 발명의 에피프리델라놀과 아스코르브산(대조군 1)을 96-well 플레이트 각 well에 100 ㎕씩 넣고 DPPH 용액 100 ㎕를 각각 첨가한 후 상온에서 30분간 방치하였다. 이 후, Micro plate reader(BiotTek EL-340)을 이용하여 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때, 대조군 2으로는 자유라디칼 소거능을 갖는 메틸 알코올을 사용하였다. 시료를 처리한 것의 흡광도가 대조군의 흡광도의 절반이 될 때의 에피프로에델라놀의 농도를 IC₅₀(Inhibitory Concentration 50)으로 표시하였으며, 결과를 하기 표 6에 나타내었다.

구분	에피프리델라놀	아스코르브산	메틸 알코올
IC₅₀	0.0006%	0.005%	0.0025%

상기 표 6에 나타난 바와 같이, 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀은 자유라디칼 제거제로 알려진 아스코르브산(대조군 1) 보다 현저히 우수한 자유라디칼 소거능을 보였으며, 메틸 알코올(대조군 2)에 비하여도 매우 강력하게 자유라디칼을 소거할 수 있음을 확인하였다.

2) 세포증식 활성능 측정

본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀이 피부세포 증식 활성화에 미치는 영향을 확인하기 위하여, 사람의 섬유아세포를 사용하여 세포증식 활성능을 측정하였다.

에피프리델라놀을 다양한 농도(0.1 ㎍/㎖, 1 ㎍/㎖, 10 ㎍/㎖ 또는 100 ㎍/㎖)로 세포 배양 배지에 첨가한 후 처리하여 사람의 섬유아세포를 배양하여 MTT 환원법(4.5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide reduction method)을 수행하고, 포르마잔 생성물(formazan product)을 이소프로필 알코올로 추출하여 570 nm에서의 흡광도를 측정하여 상대비교하였다. 이때, 양성대조군으로는 10% FBS(fetal bovine serum)을 넣은 배지를 사용하였고, 음성대조군으로는 FBS를 넣지 않은 배지를 사용하였으며, 실험 대조군으로서 시료를 처리하지 않은 배양액을 사용하였다. 측정 결과를 하기 수학식 1을 이용하여 세포의 생존능력을 수치로 계산하여 하기 표 7에 나타내었다. 세포증식 활성능(%)은 5회 반복 시험하여 계산하였다.

[수학식 1]

시료	농도(㎍/㎖)	세포증식 활성능(%)
에피프리델라놀	0.1	115.1
	1	119.6
	10	136.2
	100	155.7

상기 표 7에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀은 최소 실험 처리 농도에서부터 아무 처리를 하지 않은 대조군(100%)에 비하여 세포증식 촉진 활성을 나타내었다. 따라서, 본 발명의 에피프리델라놀은 세포증식을 통한 세포활성 효과가 탁월하여 손상된 피부의 재생을 위한 약학적 조성물, 예컨대 피부외용제 뿐 아니라 화장료 조성물로도 유용하게 사용될 수 있다.

실험예 3: 관능실험

1) 색소침착 저해 효과 분석

상기 실시예 1과 2에서 제조한 피부외용제 및 에센스의 피부 색소침착 저해 효과를 확인하기 위하여, 상기 비교예 1과 2에서 제조한 피부외용제 및 에센스를 사용하여 비교 관능실험을 실시하였다.

건강한 남·여 20명을 선정하여 양팔의 하박부에 직경 7 mm 크기의 구멍이 6개씩 2줄로 파인 알루미늄 호일을 붙이고, 팔에서 10 cm 떨어진 거리에서 ORIEL solar simulator 1000W를 사용하여 60 mJ/cm²의 광량을 조사하였다. 조사 전에 70% 에탄올 수용액으로 조사 부위를 잘 세척하고 실험을 진행하였다. 조사하기 3일 전부터 조사 후 3주째까지 1일 2회씩 상기 실시예 1과 2 및 비교예 1과 2에서 제조한 각 피부외용제 및 에센스를 각 한 줄에 도포하였다. 각각에 대하여 색소침착도를 육안으로 판정하고, 상기 실시예에서 제조한 피부외용제 또는 에센스가 비교예에서 제조한 피부외용제 또는 에센스보다 색소침착을 억제한 정도를 효과 있음 또는 효과 없음의 2 단계로 평가하였으며, 결과를 하기 표 8에 나타내었다.

구분	효과 있음(명)	효과 없음(명)
실시예 1	13	7
실시예 2	16	4

상기 표 8에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 및 2에서 제조한 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀을 함유하는 피부외용제 및 에센스가 상기 에피프리델라놀을 함유하지 않은 비교예의 피부외용제 및 에센스에 비하여 미백 효과를 나타내었으며, 피부 내에서 어떤 부작용도 나타나지 않았다. 따라서, 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀 또는 이를 포함하는 조성물은 피부에 안전할 뿐 아니라 기미나 주근깨 개선 또는 피부 미백용 피부외용제 또는 화장료로 유용하게 사용할 수 있다.

2) 수분 보유능 평가

상기 실시예 2에서 제조한 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀을 함유하는 에센스와 상기 비교예 2에서 제조한 에센스의 피부 보습력을 비교 평가하기 위하여, 상기 각 에센스를 각각 피부에 정량 도포한 후 각질층의 수분 보유량을 측정하고 평가하였다. 수분 보습력은 피부 수분함량 측정기(skin surface hygrometer, 모델명: SKICON-200, 일본 IBS사 제품)을 이용하여 측정하였다. 구체적으로, 25℃ 온도, 상대습도 45의 항온 항습실에서 상기 실시예 2의 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀을 함유하는에센스 및 비교예 2의 에센스를 각각 20명의 피시험자의 팔의 안쪽에 일정량(2 mg/cm²)을 도포한 후 잘 문지르고, 평가 전의 수분 보유능을 기준으로 1시간과 3시간 후의 수분 증가율(%)을 측정하여 보습 효과를 평가하였다. 결과를 하기 표 9에 나타내었다.

구분	수분 증가율(%)
구분	실시예 2	비교예 2
도포전	0	0
도포 1시간 후	235	163
도포 3시간 후	192	150

상기 표 9에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 상기 실시예 2에서 제조한 화학식 1로 표시되는 화합물인 에피프리델라놀을 함유하는 에센스는 비교예 2의 에센스에 비하여 도포 1시간 후 및 도포 3시간 후의 수분 보유 증가율이 훨씬 높은 것을 확인하였다. 이는, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이를 포함하는 조성물이 뛰어난 보습효과가 있음을 의미한다.

Claims

하기 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백 또는 보습용 화장료 조성물.
[화학식 1]
제1항에 있어서, 상기 조성물은 총 조성물의 중량 대비 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 0.01 중량% 내지 10 중량%로 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 멜라닌 합성 억제 활성 또는 수분 보유능을 가지는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 유연 화장수(스킨), 영양 화장수(밀크로션), 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.