KR101786606B1

KR101786606B1 - 테트란드린을 함유하는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR101786606B1
Application number: KR1020100023103A
Authority: KR
Inventors: 김청택
Original assignee: 주식회사 알엔에스
Priority date: 2010-03-16
Filing date: 2010-03-16
Publication date: 2017-10-17
Also published as: KR20110104149A

Abstract

본 발명은 테트란드린(tetrandrine) 및/또는 테트란드린 함유 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 및/또는 주름개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 피부 미백 효과 및 주름개선 효과가 매우 우수하며, 부작용도 발생하지 않아 안전성이 뛰어나다.

Description

테트란드린을 함유하는 화장료 조성물{cosmetics containing tetrandrine}

본 발명은 테트란드린(tetrandrine) 또는 테트란드린 함유 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 및/또는 주름개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 인체에서 가장 큰 조직이며 일차 방어막으로서 외부의 자극으로부터 피부 내부를 보호해주는 중요한 역할을 한다. 이러한 피부는 사람에 따라 또는 나이가 들어감에 따라 색이 상이하게 나타나는데, 이는 피부 내부의 멜라닌(melanin)농도와 분포에 따라 결정되어진다. 피부흑화(melanogenesis)는 멜라닌 색소생성세포(melanocyte)에서 자외선 등의 자극에 대한 방어기작으로 멜라닌 생성활동이 증가되고 이로 말미암아 만들어진 다량의 멜라닌이 각질형성세포(keratinocyte)로 전이되어 피부표피층에 축척된 결과이다. 비록 멜라닌이 피부보호작용을 하나 피부의 과색소침착은 기미, 주근깨, 피부염증 후의 피부흑화, 노인성 색소반점 등을 일으키며 이로 인해 당사자에게 미용상의 불편뿐만 아니라 정신적으로 부정적인 영향을 미쳐 사회활동에 불편을 초래하기도 한다. 멜라닌 생성 과정은 아미노산의 일종인 티로신(tyrosine)에 티로시나제(tyrosinase)라는 효소가 작용하여 도파(DOPA), 도파퀴논(dopaquinone)으로 바뀐 후 비효소적인 산화 반응을 거쳐 만들어 지며, 이것이 피부 내에 이상침착하여 기미, 검버섯 등이 생기는 것이라고 알려져 있다.

한편, 사람의 피부는 외부의 화학적, 물리적 자극으로 인해 피부의 정상기능이 저하되고 문제가 생겨 피부의 노화현상이 촉진되어 피부 손상이 유발된다. 그러한 피부의 노화 중의 하나로서 피부주름이 있는데, 일반적으로 피부 주름은 피부의 수분 함유량, 콜라겐 함유량 및 외부 환경에 대한 면역 작용 능력 등 여러 가지 요인들의 복합적인 작용에 의해 생성되는 것으로 알려져 있다. 이러한 요인들 중 주름의 형성에 가장 큰 영향을 미치는 것은 콜라겐의 생성량과 콜라겐의 함량을 감소시키는 콜라겐 분해 효소인 콜라게네이즈의 발현량과 활성이다.

상기한 바와 같은 피부의 미백 및 주름 형성을 억제하기 위하여 다양한 조성물들이 종래부터 사용되어 왔다. 예를 들면 L-아스코르브산(L-ascorbic acid) 및 이의 유도체, 하이드로퀴논(hydroquinone), 알부틴 및 감초, 상백피 등에서 추출한 다양한 추출물들이 피부 미백제 및 주름개선제 등으로 이용되고 있다. 그러나 L-아스코르브산은 쉽게 산화되어 피부에 자극을 유발하며, 이를 배합한 화장료는 변색, 변취되는 문제를 야기하고, 식물추출물 유래의 물질들은 식물의 산지에 따라 효능의 차이가 심하여 제품의 균질성이 유지되기 어렵고, 알부틴은 효과가 낮은 단점이 있다.

상기한 목적을 위하여 본 발명은 피부 미백효과 및 주름개선 효과가 우수하고 인체에 안전한 테트란드린을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 멜라닌 생성 억제 및 주름개선 효과가 뛰어난 테트란드린은 하기 일반식 (I)로 표시된다.

(I)

테트란드린은 새모래덩굴과의 낙엽 덩굴나무 분방기(Stephania tetrandria S. Moore) 또는 함바기 (Stephania japonica Miers)의 뿌리 추출물의 알카로이드 종류의 한 성분이다. 테트란드린을 포함한 분방기나 함바기 추출물의 약리작용은 민간에서 진통 및 진경작용이 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 대한민국특허공개번호 제10-2003-0100181호에 따르면 테트란드린이 가려움증을 억제하는 효과가 있다고 보고된 바 있으나 본 발명과 명백한 차이가 있다.

본 발명에서 사용되는 테트란드린은 해당 분야에 잘 알려진 방법에 의하여 분방기 등의 다양한 스테파니아 속(Stephania sp.) 식물에 함유되어 있으며, 이것에 한정되지는 않는다.

본 발명에서는 분방기에서 분리된 테트란드린을 중국(Chengdu Biopurify Phytochemicals Ltd.)에서 구입하여 사용하였으며, 질량 분석 스펙트럼으로 상기 화합물이 테트란드린임을 확인하였다.

상기 정제물의 분자량은 질량 분석 스펙트럼(Mass spectrum)에서 623의 [분자량 + H]⁺ 피크로부터 분자량이 622.7(C₃₈H₄₂N₂O₆)임을 확인하였다.

본 발명의 테트란드린(tetrandrine)을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물은 우수한 미백 효과 및 주름개선 효과를 가지고 있으며, 인체에 대한 피부 자극도 거의 없어 제품의 안전성이 우수하므로, 피부 미백용 화장료 조성물 및/또는 주름개선용 화장료 조성물로 유용하게 사용할 수 있다.

이하 본 발명을 보다 상세히 설명한다.

본 발명의 테트란드린은 멜라닌 생성을 억제함으로써 미백 효과가 우수하며, 콜라게네이즈 활성 억제 및 콜라겐 합성 촉진을 통하여 주름 개선 효과가 우수하다. 따라서 상기 테트란드린은 피부 미백 및 주름개선용 화장료 조성물로서 유용하다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물은 피부누적 자극 시험에서 뚜렷한 양상을 나타내지 않아 인체 피부에 안전하다.

상기 테트란드린을 포함하는 피부 외용 연고 또는 화장료 제조시에 함유되는 테트란드린의 함량은 조성물 총량에 대하여 건조 중량으로 0.00001 내지 10.0 중량%, 바람직하게는 0.001 내지 1.0 중량%이다. 테트란드린의 함량이 조성물 총량에 대하여 건조 중량으로 0.00001 중량% 미만이면 피부 미백 등의 뚜렷한 효과를 기대할 수 없었고, 10.0 중량%를 초과하면 함유량의 증가에 따라 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않았다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 테트란드린 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 수렴 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

실험예 1

테트란드린의 세포 수준에서의 멜라닌 생성 저해 효과 시험

테트란드린(tetrandrine)을 쥐의 멜라노마 세포(B-16 mouse melanoma cell)의 배양액에 첨가하여 세포 수준에서의 미백 효과를 다음과 같이 실험하였다(Lotan R., Lotan D. Cancer Res. 40:3345-3350, 1980).

테트란드린을 최종 농도가 1 ㎍/ml, 5 ㎍/ml, 50 ㎍/ml가 되도록 하여 B-16 멜라노마 세포의 배양시 배양액에 첨가하고, 3일간 배양한 후 세포들을 트립신(Trypsin)으로 처리하고, 배양 용기로부터 떼어내 원심 분리한 후, 멜라닌을 추출하였다. 추출된 멜라닌에 수산화 나트륨용액(1N 농도) 1 ml를 가하여 약 10 분 동안 끓여 멜라닌을 녹이고, 분광 광도계로 400 나노미터(nm)에서 흡광도를 측정하여 생성된 멜라닌의 양을 단위 세포 수당(10⁶cell)의 흡광도를 나타내는 방법으로 실험을 수행하였다. 이와 같은 실험을 3회 반복하고 그 평균값을 사용하여 대조군에 대한 상대적인 멜라닌 생성량을 저해율(%)로 계산하고, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

시료	멜라닌 생성량	저해율(%)
대조군(무첨가)	0.044 ± 0.004	-
테트란드린(최종농도 1 ㎍/ml)	0.032 ± 0.001	28
테트란드린(최종농도 5 ㎍/ml)	0.019 ± 0.003	57
테트란드린(최종농도 50 ㎍/ml)	0.007 ± 0.001	85
하이드로퀴논(최종농도 1 ㎍/ml)	0.025 ± 0.002	43
하이드로퀴논(최종농도 10 ㎍/ml)	세포 사멸

반복수 = 3

상기 표 1에서 보는 바와 같이, 테트란드린은 종래에 알려진 미백 물질인 하이드로퀴논과 비교할 때 배양된 쥐의 멜라노마 세포에 대하여 대등한 멜라닌 생성 억제능이 있음을 알 수 있다. 또한 하이드로퀴논은 저농도에서 강력한 멜라닌 생성 억제능을 가지지만 세포 독성이 심해 10 ㎍/ml 이상에서는 실험을 할 수 없으나, 테트란드린은 50 ㎍/ml농도에서도 세포 독성을 나타내지 않으면서도 하이드로퀴논보다 높은 멜라닌 생성 억제 효과를 갖고 있으므로 이는 본 발명이 기미나 주근깨 개선 및 피부 미백에 매우 유용하게 사용될 수 있다는 것을 나타냈다.

실험예 2

테트란드린의 세포수준에서의 주름개선 효과 시험

주름개선효과는 통상 콜라겐 생합성능과 콜라게네이즈 분해 억제능 및 사람에 대한 임상시험으로서 효과를 측정할 수 있다.

사람의 정상 섬유아세포(human normal fibroblast)를 DMEM배지가 들어있는 6-웰 마이크로플레이트에 접종시키고(2X10⁵세포/웰) 5%농도의 CO₂ 배양기에 37℃로 24시간 배양하였다. 24시간 후, 각 웰에서 배지를 제거하고 농도별로 시료를 처리한 다음 24시간 동안 다시 배양하였다. 24시간 후, 세포배지를 수집하여 샘플을 제조하였다.

콜라겐 합성량은 콜라겐 측정 키트(Procollagen type I C-peptide EIA kit(MK101), 다카라, 교토, 일본)를 이용하여 세포배지 내에서의 프로콜라겐(procollagen)타입 I C-펩타이드(type I C-peptide : PICP)의 양을 측정하고 분석하였다.

콜라겐을 분해하는 콜라게네이즈의 활성정도를 측정하는 방법으로 콜라게네이즈에 대한 항체를 이용하였다. 콜라게네이즈 활성은 타입 I 콜라게네이즈 어세이 키트(Amersham Biosciences, RPN2629)를 이용하였으며, ELISA 판독기로 흡광도를 측정하였다. 측정된 표준치는 평균 ± 표준편차의 형태로 표시하였고 SPSS/PC+프로그램을 이용하여 t-test로 유의성을 검정하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

시료	콜라겐 합성증가율(%)	콜라게네이즈 억제율(%)
테트란드린(최종농도 1 ㎍/ml)	22	21
테트란드린(최종농도 5 ㎍/ml)	45	34
테트란드린(최종농도 10 ㎍/ml)	77	52

표 2에 나타난 바와 같이, 테트란드린은 농도 의존적으로 콜라겐합성을 증가시켰으며, 또한 농도의존적으로 콜라게네이즈 활성을 억제하였다. 따라서 테트란드린은 주름개선 효능을 가지고 있음을 알 수 있었다.

제조예 1 및 비교예 1

하기 표 32에 나타낸 각각의 성분을 하기 표 3에 나타난 비율과 같이 혼합하여 피부 외용 연고를 제조하였다.

조성물	중량%
조성물	제조예 1	비교예 1
테트란드린 디에틸 세바케이트 경납 폴리옥시에틸렌올레일에테르포스페이트 벤조산 나트륨 바셀린	0.01 8 5 6 적량 잔량*	- 8 5 6 적량 잔량*

*: 전체가 100 중량%가 되도록 하는 양

제조예 2 및 비교예 2

하기 표 4에 나타낸 각각의 성분을 하기 표 4에 나타난 비율과 같이 혼합하여 영양 크림을 제조하였다.

조성물	중량%
조성물	제조예 2	비교예 2
테트란드린 스테아린산 세탄올 피이지-20 소비탄 모노스테아레이트 소비탄 모노스테아레이트 미네랄 오일 트리옥타노에이트 트리에탄올아민 카보머 글리세린 프로필렌글리콜 방부제 향 정제수	0.01 1.0 2.0 1.0 1.0 10.0 5.0 0.5 0.2 5.0 3.0 적량 적량 잔량*	- 1.0 2.0 1.0 1.0 10.0 5.0 0.5 0.2 5.0 3.0 적량 적량 잔량*

*: 전체가 100 중량%가 되도록 하는 양

제조예 3 및 비교예 3

하기 표 5에 나타낸 각각의 성분을 하기 표 5에 나타난 비율과 같이 혼합하여 유연 화장수를 제조하였다.

조성물	중량%
조성물	제조예 3	비교예 3
테트란드린 에탄올 폴리옥시에틸렌경화피마자유 파라옥시안식향산메칠 글리세린 1,3-부틸렌글리콜 향 색소 정제수	0.01 10.0 1.0 2 5.0 6.0 적량 적량 잔량*	- 10.0 1.0 2 5.0 6.0 적량 적량 잔량*

*: 전체가 100 중량%가 되도록 하는 양

제조예 4 및 비교예 4

하기 표 6에 나타낸 각각의 성분을 하기 표 6에 나타난 비율과 같이 혼합하여 엣센스를 제조하였다.

조성물	중량%
조성물	제조예 6	비교예 6
테트란드린 프로필렌글리콜 글리세린 히아루론산나트륨수용액(1%) 에탄올 폴리옥시에틸렌경화피마자유 파라옥시안식향산메칠 카보머 트리에탄올아민 향 정제수	0.01 10.0 10.0 5.0 5.0 1.0 0.1 0.3 0.4 적량 잔량*	- 10.0 10.0 15.0 5.0 1.0 0.1 0.3 0.4 적량 잔량*

*: 전체가 100 중량%가 되도록 하는 양

제조예 5 및 비교예 5

하기 표 7에 나타낸 각각의 성분을 하기 표 7에 나타난 비율과 같이 혼합하여 팩을 제조하였다.

조성물	중량%
조성물	제조예 5	비교예 5
테트란드린 글리세린 프로필렌글리콜 폴리비닐알코올 에탄올 폴리옥시에틸렌경화피마자유 폴리옥시에틸렌올레일에칠 파라옥시안식향산메칠 향 색소 정제수	0.01 5.0 4.0 15.0 8.0 1.0 1.0 0.2 적량 적량 잔량*	- 5.0 4.0 15.0 8.0 1.0 1.0 0.2 적량 적량 잔량*

*: 전체가 100 중량%가 되도록 하는 양

제조예 6 및 비교예 6

하기 표 8에 나타낸 각각의 성분을 하기 표 8에 나타난 비율과 같이 혼합하여 영양 화장수를 제조하였다.

조성물	중량%
조성물	제조예 4	비교예 4
테트란드린 폴리옥시에틸렌경화피마자유 파라옥시안식향산메칠 글리세린 1,3-부틸렌글리콜 카보머 트리에탄올아민 프로필렌글리콜 에탄올 카르복시비닐폴리머 색소 향 정제수	0.01 1.0 적량 6.0 5.0 0.2 0.3 5.0 2 1 적량 적량 잔량*	- 1.0 적량 6.0 5.0 0.2 0.3 5.0 3.2 0.1 적량 적량 잔량*

*: 전체가 100 중량%가 되도록 하는 양

실험예 3

테트란드린의 임상에서의 미백 효과 시험

피시험자로 건강한 남녀 20명씩을 선정하여 양팔의 하박부에 직경 7 mm 크기의 구멍이 6 개씩 2 줄로 파인 알루미늄 호일을 덮은 후, 팔에서 10 cm 거리에서 일광 조사기(ORIEL Solar Simulator 1000W)로 60 mJ/㎠의 광량을 조사하였다. 조사하기 3일 전부터 조사 후 3주 째까지 1일 2회씩 제조예 1-6 및 비교예 1-6에 따라 제조된 테트란드린을 함유한 시료와 테트란드린이 함유되지 않은 기제를 한 쌍으로 같은 줄에 도포 하였다. 여기서 제조예 5 및 비교예 5의 팩 처방의 경우 도포한 다음 15분 후에 떼어내었다. 상기 각각에 대하여 제조예와 비교예의 색소 침착도를 육안으로 판정하였으며 그 결과는 하기 표 9에 나타내었다.

실험물질	뚜렷한 효과(명)	효과있음(명)	차이없음(명)
제조예 1	7	7	6
제조예 2	2	10	8
제조예 3	1	9	10
제조예 4	2	9	9
제조예 5	3	8	9
제조예 6	3	9	8

상기 표 9에서 보는 바와 같이 제조에 1-6에 따라 제조된 테트란드린을 함유한 미백 연고 및 화장료는 피시험자 20 명중에서 최소 10명 이상에 대해 미백 효과를 나타냈고, 특히 많은 양의 테트란드린이 적용된 제조예 1과 비교예 1의 비교실험에서는 35%가 뚜렷한 색소 침착 저해 효과를 나타내었다. 또한 피부 내에서 어떤 부작용도 나타내지 않아 테트란드린은 안전하고 기미나 주근깨 개선에 우수한 효과가 있는 피부 미백제임을 알 수 있다.

실험예 4

테트란드린의 임상에서의 주름개선 효과 시험

주름 개선 효과의 평가는 다음과 같이 실시하였다. 20명의 30~40세 여성을 무작위로 2개군으로 나누어 제조예 2와 비교예 2의 크림을 매일 아침 저녁 2회씩 세안 후 크림 적당량을 눈가를 중심으로 2개월간 연속적으로 바르게 하였다. 각 피검자의 주름 개선 효과를 육안 관찰을 통하여 평가하였다. 실험 결과는 하기의 표 10에 나타낸 바와 같다.

실험물질	뚜렷한 효과(명)	효과있음(명)	차이없음(명)
제조예 2	9	7	4
비교예 2	-	5	15

상기 표 10에서 보는 바와 같이 제조에 2에 따라 제조된 테트란드린을 함유한 크림은 피시험자 20 명중에서 16명에 대해 주름개선 효과를 나타내었으며, 또한 피부 내에서 어떤 부작용도 나타내지 않아 테트란드린은 안전하고 우수한 효과가 있는 피부 주름개선제임을 알 수 있다.

Claims

하기 화학식 1의 테트란드린(tetrandrine) 또는 테트란드린 함유 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물

(I)
상기 화학식 1의 테트란드린(tetrandrine) 또는 테트란드린 함유 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름개선용 조성물
제 1항에 있어서,
상기 테트란드린 함유 추출물은 테트란드린(tetrandrine) 스테파니아 속(Stephania sp.)으로부터 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 헥산, 시클로헥산 및 석유에테르로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 용매를 사용하여 추출된 것을 특징으로 하는 피부 미백용 조성물.
제 2항에 있어서,
상기 테트란드린 함유 추출물은 테트란드린(tetrandrine) 스테파니아 속(Stephania sp.)으로부터 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 헥산, 시클로헥산 및 석유에테르로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 용매를 사용하여 추출된 것을 특징으로 하는 주름개선용 조성물.