PT1037627E

PT1037627E - Utilizacao do acido 11-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz¬b,e|oxepin-2-acetico e seus sais derivados farmaceuticamente aceitaveis para a producao de um medicamento para o tratamento de doencas inflamatorias oftalmicas nao-alergicas e para a prebencao da neovascularizacao ocular

Info

Publication number: PT1037627E
Application number: PT81300632T
Authority: PT
Inventors: John M Yanni; Daniel A Gamache; Lori K Weimer
Original assignee: Alcon Lab Inc
Priority date: 1998-07-14
Filing date: 1999-06-15
Publication date: 2001-11-30
Also published as: CN1275078A; AU742237B2; AR019916A1; DE69900207T2; AU4563499A; JP2002520355A; HK1030362A1; EP1037627A1; GR3036422T3; ATE203668T1; WO2000003705A1; KR100598723B1; ZA200001593B; EP1037627B1; ES2159209T3; DK1037627T3; CA2306393A1; CA2306393C; TW561046B; KR20010024508A

Description

DESCRIÇÃO "UTILIZAÇÃO DO ÁCIDO ll-(3-DIMETILAMINOPROPILIDENO)-6,11-DIHIDRODIBENZ[ B, E ]OXEPIN-2-ACÉTICO E SEUS SAIS DERIVADOS FARMACEUTICAMENTE ACEITÁVEIS, PARA A PRODUÇÃO DE UM MEDICAMENTO PARA O TRATAMENTO DE DOENÇAS INFLAMATÓRIAS OFTÁLMICAS NÃO-ALÉRGICAS E PARA A PREVENÇÃO DA NEOVASCULARIZAÇÃO OCULAR"

DOMÍNIO DA TÉCNICA Área da invenção A presente invenção refere-se à utilização terapêutica e profilática do ácido ll-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético para a produção de um medicamento para administração no olho para o tratamento e/ou prevenção da libertação de citoquina das células do globo ocular humano e a neovascularização ocular resultante ou condições inflamatórias não-alérgicas.

Descrição do estado da técnica

Tal como se encontra descrito nas patentes E.U. Nos 4 871 865 e 4 923 892, ambas atribuídas a Burroughs Wellcome Co. ("Patentes de Burroughs Wellcome"), alguns derivados de ácidos carboxílicos de doxepina, incluindo o ácido 11-(3- dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-carboxílico e o ácido 1l-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz [b,e]oxepin-2 -acético, têm actividade antihistamínica e antiasmática. Estas duas patentes classificam os derivados de ácidos carboxílicos de doxepina como 1 f u estabilizantes das células "mast" com acção antihistamínica porque se crê que inibam a libertação de autacóides (i.e., histamina, serotonina e semelhantes) das células "mast" e que inibam directamente os efeitos da histamina nos tecidos alvo. As Patentes de Burroughs Wellcome descrevem várias formulações farmacêuticas que contêm derivados de ácidos carboxílicos de doxepina; o Exemplo 8(1) em ambas as patentes descrevem uma formulação em solução oftálmica. A patente E.U. 5 116 863, atribuída a Kyowa Hakko Kogyo Co.f Ltd, ("Patente de Kyowa"), descreve que o derivado de ácido acético de doxepina, incluindo o ácido Z-ll-{3-dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético, têm actividade anti-alérgica e anti-inflamatória. A actividade anti-inflamatória é atribuida à actividade de inibição da biosíntese de prostaglandina (ver Col. 28, linhas 51-57). Os derivados de doxepina descritos na patente de Kyowa são representados pelo Composto (I):

X" (CH2 )n-Z

Compostos onde X representa =N-, =CH- ou =CH2- são descritos como tendo uma forte actividade anti-alérgica, enquanto que compostos em que X representa =N-, são descritos como tendo uma forte actividade anti-inflamatória (ver Col. 24, linhas 20-57). Desta forma, para aplicações anti-inflamatórias a patente de Kyowa sugere os derivados de doxepina do Composto (I) em que X é =N-. 2

A patente de Kyowa apresenta actividade anti-alérgica e anti-inflamatória em ratos Wistar machos. As formas medicamentosas descritas pela patente de Kyowa para derivados de ácido acético de doxepina incluem uma vasta gama de suportes aceitáveis; contudo, apenas as formas de administração oral e injectável são mencionadas. No tratamento da doença alérgica do olho, tal como a conjuntivite alérgica, tais métodos de administração exigem grandes doses de medicamento. A patente E.U. 5 641 805 descreve formulações oftálmicas tópicas contendo ácido 1l-(3-dimetilamino-propilideno)-6,ll-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético para o tratamento de doenças alérgicas do olho.

Sumário da invenção A presente invenção descreve utilização do ácido 11-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético (referido em seguida como "Composto A") ou um sal seu derivado farmaceuticamente aceitável para a produção de um medicamento para administração no olho para o tratamento ou prevenção da neovascularização ocular e doenças inflamatórias não alérgicas envolvendo a libertação de citoquina das células do globo ocular humano. A formulação pode conter o isómero cis do Composto A (ácido Z-ll-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11- dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético), o isómero trans do Composto A (ácido E-ll-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11- dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético), ou uma combinação de ambos os isómeros cis e trans do Composto A. A menos que seja especificado de outra forma, "ácido 11-(3- dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético" ou "Composto A" significa o isómero cis, o isómero trans ou uma mistura dos dois. O "isómero cis" significa o isómero cis 3 VΓ u

substancialmente livre do isómero trans, o "isómero trans" significa o isómero trans substancialmente livre do isómero cis. Um isómero está "substancialmente livre" de outro isómero se menos que cerca de dois por cento do isómero indesejado se encontra presente.

Descrição detalhada da invenção 0 Composto A é um composto conhecido e tanto o isómero cis como o isómero trans do Composto A podem ser obtidos por métodos descritos na Patente E.U. No. 5 116 863.

Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis do Composto A incluem sais de ácidos inorgânicos tais como cloridrato, hidrobrometo, sulfato e fosfato; sais de ácidos orgânicos tais como acetato, maleato, fumarato, tartarato e citrato; sais de metais alcalinos tais como sal de sódio e sal de potássio; sais de metais alcalino-ferrosos tais como sal de magnésio e sal de cálcio; sais metálicos tal como sal de alumínio e sal de zinco; e sais de adição de aminas orgânicas tal como sal de adição de trimetilamina (também conhecida como trometamina), sal de adição de morfolina e sal de adição de piperidina. 0 Composto A pode ser administrado no olho sob uma variedade de formas. A forma mais preferida é através de formulações oftálmicas tópicas convencionais, tais como soluções, suspensões ou géis. Alternativamente, o Composto A pode ser administrado no olho por via injectável ou implante. Dependendo do tipo de formulação, ingredientes convencionais podem ser combinados com o Composto A. A formulação preferida para administração oftálmica tópica do Composto A é uma solução administrada sob a forma de colírio. A forma preferida do Composto A nas formulações oftálmicas de acordo com a presente 4 V f u

invenção é o isómero cis. Um método geral para a preparação da formulação de colírios de acordo com a presente invenção é descrito abaixo sob a forma de um exemplo não limitativo.

Adicionam-se o Composto A e um agente isotónico a água esterilizada purificada, e se necessário, um conservante, um agente tampão, um estabelizante, um veículo viscoso e semelhantes, são adicionados e dissolvidos na solução. A concentração do Composto A é 0,0001 a 5 m/v %, preferencialmente 0,0001 a 0,001 m/v %, e mais preferencialmente 0,0005 m/v %, baseado na água esterilizada purificada. Após dissolução, o pH é ajustado com um controlador de pH para se situar na gama adequada para utilização como um medicamento oftálmico, preferencialmente na gama de 4,5 a 8.

Cloreto de sódio, glicerina, manitol ou semelhantes podem ser utilizados como o agente isotónico; o éster do ácido p—hidroxibenzóico, cloreto de benzalcónio ou semelhantes como o conservante; hidrogenofosfato de sódio, dihidrogenofosfato de sódio, ácido bórico ou semelhantes como o agente tampão; edetato de sódio ou semelhantes como o estabilizante; álcool polivinílico, polivinilpirrolidona, ácido poliacrílico ou semelhantes como o veículo viscoso; e hidróxido de sódio, ácido clorídrico ou semelhantes como o controlador de pH.

Se necessário, podem ser adicionadas outras drogas oftálmicas tais como epinefrina, cloridrato de nafazolina, cloreto de berberina, azulenosulfonato de sódio, cloreto de lisozima, glicirrizato e semelhantes.

Os colírios produzidos pelo método acima, necessitam tipicamente apenas de ser aplicados nos olhos algumas vezes por dia numa quantidade de uma a várias gotas de cada vez, embora em 5 Γ u

casos mais graves as gotas possam ser aplicadas várias vezes por dia. Uma gota tipica é cerca de 30 μΐ.

De acordo com a utilização da presente invenção, as formulações oftálmicas contendo o Composto A são utilizadas para inibir a secreção de citoquina pró-inflamatória das células oculares humanas, tais como as células epiteliais conjuntivas humanas. Este tipo de secreção de citoquina (e.g., IL-6 e IL-8) pode estimular a neovascularização ocular (ver, por exemplo, Yoshida et al., IOVS, 39:1097 (1998)) e outras condições inflamatórias não alérgicas, tais como, por exemplo, o olho seco, queratite, blefarite, uveite e inflamação relacionada com infecção.

Algumas formas de realização da presente invenção são ilustradas nos exemplos seguintes.

Exemplo 1: Formulação da Solução Oftálmica Tópica preferida

Concentração (m/v %) 0,111* 0»5 0,65 0,01 q.s. pH = 7,0 q.s. pH = 7,0

Ingrediente Composto A*HC1

Fosfato de sódio dibásico (Anidro), USP

Cloreto de sódio, USP

Cloreto de benzalcónio

Hidróxido de sódio, NF

Ácido clorídrico, NF 6

V Água purificada q.s. 100 *0,111 do composto A*HC1 é equivalente a 0,1% do composto A Exemplo 2: Formulação do Gel Oftálmico Tópico

Ingrediente Concentração (m/v %) Composto A*HC1 0,11* Carbopol 974 P o 00 EDTA disódico 0,01 Polisorbato 80 0,05

Cloreto de benzalcónio, solução 0,01 + 5 xs

Hidróxido de sódio q.s. pH = 7,2 Ácido clorídrico q.s. pH = 7,2 Água para injectáveis q.s. 100

*0,11 do composto A#HC1 é equivalente a 0,1% do composto A

Exemplo 3: Inibição da libertação de Citoquina A. Culturas de Células Epiteliais Conjuntivas Humanas (ECH)

Foram descritos métodos detalhando a preparação de culturas de células epiteliais primárias e estudos de libertação de citoquina utilizando estas células. Ver Gamache et al., "Secretion of proinflamatory cytokines by human conjunctival epithelial cells", Ocul Immunol Inflamm., 5:117-128 (1997). Em resumo, culturas de células epiteliais conjuntivas humanas foram iniciadas a partir de tecidos de dadores obtidos num período de 7 oito horas post mortem em vários bancos de olhos. Os tecidos foram digeridos enzimaticamente de um dia para o outro. As células epiteliais foram raspadas suavemente da superfície do tecido, dissociadas numa suspensão de células isoladas, e cultivadas num meio de crescimento de queratinocitos (Clonetics®, San Diego, CA). As células foram utilizadas apenas após a passagem 6. As culturas foram mantidas num estado pré—confluente para impedir a diferenciação. As células foram identificadas como epiteliais através da coloração de queratina. B. Ensaios de citoquina Vários compostos com actividade antagonista à histamina Hx foram avaliados quanto à sua capacidade de inibir a secreção de citoquinas (IL-6 e IL-8) a partir de células epiteliais conjuntivas humanas cultivadas em resposta à estimulação com histamina. As células foram plaqueadas a 2 x 104 células/poço e cultivadas de um dia para o outro a 5% C02/37°C. No dia seguinte, adicionou-se meio fresco contendo o composto de ensaio directamente aos poços e as células foram incubadas durante 30 minutos antes da estimulação de 24 horas com histamina (30μΜ). Três poços de cultura separados foram utilizados para cada grupo de tratamento. Na amostragem, os sobrenadantes foram recolhidos, centrifugados a 200 x g, e armazenados a -20°C. As amostras foram analizadas para pesquisa de IL-6 e IL-8 por ELISA (R&D Systems, Minneapolis, MN) de acordo com as instruções do fabricante. As sensibilidades de cada ELISA são as seguintes: IL-6 0,7 pg/ml e IL-8 3,0 pg/ml. 8

C. Análise dos dados A potência do antagonista (IC50) foi definida como a concentração da droga necessária para produzir 50% de inibição da resposta funcional do agonista estimulado. Os dados derivados dos ensaios de citoquina foram calculados através dos valores de erro padrão médio (EPM) que representa a variabilidade entre poços de cultura tratados de igual forma. O efeito dependente da dose dos agentes farmacológicos e da IC50 foram determinados por regressão linear. Os dados são expressos como média ± EPM de 3 - 5 experiências independentes. D. Resultados A exposição de ECH a 30 μΜ de histamina aumentou a secreção de IL-6 e IL8 1,59 ± 0,19 e 1,80± 0,28 vezes acima dos níveis basais, respectivamente (os níveis basais das citoquinas eram 153 ± 42 pg/ml, n = 4, para IL-6 e 197 ± 48 pg/ml, n = 6 para IL-8). 0 tratamento de ECH com drogas que possuam actividade anti-histamínica e disponíveis para administração tópica ocular antes da exposição à histamina resultou em inibição dependente da concentração da secreção de IL-6 e secreção de IL-8. Os resultados são apresentados abaixo no Quadro 1. A potência da emedastina em células intactas é consistente com a sua actividade determinada em ensaios de ligação ao receptor utilizando homogenizados de tecido. A levocabastina também inibiu a secreção de IL-6 e IL-8 a um nível consistente com a sua afinidade de ligação com o receptor-Hj. A antazolina e feniramina, dois compostos anti-histamínicos oculares tópicos de primeira geração, foram inibidores 9 (- U, ^—¢. \l ' dramaticamente menos potentes da secreção de IL-6 e IL-8 que o previsto das suas afinidades de ligação ao receptor-Hj da histamina (20 - 140 vezes). A olopatadina, contudo, foi mais potente que o previsto publicado da sua afinidade de ligação ao receptor-Hjda histamina (36 nM). A olopatadina, a antazolina e a feniramina exibem afinidades de ligação Hx semelhantes (32 - 39 nM). No entanto, a olopatadina foi aproximadamente 10 vezes mais potente como inibidor da secreção de citoquina (IC50 de 5,5 nM e 1,7 nM para a secreção de IL-6 e IL-8, respectivamente) que o previsto para os dados de ligação. Estes resultados indicam que, ao contrário dos outros compostos testados, a capacidade da olopatadina para inibir a secreção da citoquina é atribuída a algo mais que a afinidade de ligação com o receptor-H!·

Quadro 1: Antagonistas da Histamina H: : Inibição da secreção de IL-6 e IL-8 em células epiteliais conjuntivas humanas e afinidades de ligação ao receptor Hx

Antagonistas Η: IL-6 IL-8 Ligação Hx IC50 (nM) IC50 (nM) K± (nM) Emedastina a 2,5 4,0 1,22 * Olopatadina b 5,5 1,7 36,0 $ Levocabastina 0 25,1 11,9 52,6 * Antazolina d 1014 652 38,4 * Feniramina e 4826 1216 33,9 * 10 a ÍH-Benzimidazolo, 1-(2-etoxietil)-2-(hexahidro-4-metil-lH-l,4-diazepin-l-il), (E)-2-butenodioato (1:). b ácido Z—11—(3-dimetilaminopropilideno)-6,11- dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético. c monohidrocloridrato do ácido (-)-trans-l-[cis-4-ciano-4-(p-fluorofenil)ciclohexil]-3-metil-4-fenilisonipecótico. d 4,5-Dihidro-N-fenil-N-(fenilmetil)-lH-imidazolo-2-metanamina. e N, N- (Dimetil) -γ-fenil-2-piridina-propanamina.

Sharif et al., J Ocul Pharmacol., 10:653-654 (1994). S Yanni et al., Ann. Allergy Asthma Iimunol., 79:541-545 (1997).

Lisboa, 30 de Agosto de 2001 O AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

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Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Utilização do ácido 11-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético ou um sal seu derivado farmaceuticamente aceitável para a produção de um medicamento para administração no olho para o tratamento ou prevenção da neovascularização ocular e doenças inflamatórias oftálmicas não alérgicas envolvendo a libertação de citoquina das células oculares humanas. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o medicamento é uma solução administrável topicamente e a quantidade do ácido 11- (3-dimetilaminopropilideno)-6,11- dihidrodibenz[b, e]oxepin- -2-acético é de 0,0001 m/v % a 5% (m/v). Utilização de acordo com a reivindicação 2, em que a quantidade do ácido 11- (3-dimetilaminopropilideno)-6,11- dihidrodibenz[b, e]oxepin- •2-acético é de 0,0001 a 0,001% (m/v). Utilização de acordo com a reivindicação 3, em que a quantidade do ácido 11- (3-dimetilaminopropilideno)-6,11- dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético é 0,0005% (m/v).
5. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o ácido 11-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético é o ácido (Z)-ll-(3-dimetilaminopropilideno)-6,ll-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético substancialmente livre do ácido (E)-11-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11- dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético. 1 \
6. Utilização de acordo com a reivindicação 5, em que a composição é uma solução administrável topicamente e a quantidade do ácido (Z)-ll-(3-dimetilaminopropilideno)-6,ll-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético é cerca de 0,0001 a 5% (m/v).
7. Utilização de acordo com a reivindicação 6, em que a quantidade do ácido (Z)-ll-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético é de 0,0001 a 0,001% (m/v).
8. Utilização de acordo com a reivindicação 7, em que a quantidade do ácido (Z)-ll-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético é 0,0005% (m/v).
9. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o ácido 11- (3-dimetilaminopropilideno)-6,ll-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético é o ácido (E)-ll-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético substancialmente livre do ácido (Z)-ll-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11- dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético.
10. Utilização de acordo com a reivindicação 9, em que a composição é uma solução administrável topicamente e a quantidade do ácido (E)-ll-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético é cerca de 0,0001 a 5% (m/v).
11. Utilização de acordo com a reivindicação 10, em que a quantidade do ácido (E)-ll-(3-dimetilaminopropilideno)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético é de 0,0001 a 0,001% (m/v). 2
12. Utilização de acordo com a reivindicação 11 em que a quantidade do ácido (E)-ll-(3-dimetilaminopropilideno)-6,ll-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético é 0,0005% (m/v).
13. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que a doença inflamatória oftálmica não-alérgica é seleccionada a partir de um grupo consistindo de olho seco, queratite, blefarite, uveite e inflamação relacionada com infecção.
14. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que a neovascularização ocular e doenças inflamatórias oftálmicas não-alérgicas envolvem a libertação de citoquina das células epiteliais conjuntivas humanas. Lisboa, 30 de Agosto de 2001 O AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

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